Автореферат и диссертация по медицине (14.00.08) на тему:Изучение особенностей коррекции перекисного окисления липидов тканей глаза антиоксидантами при экспериментальном внутриглазном кровоизлиянии (Экспериментальное исследование)

МШИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МОСКФСШ НИК ГЛАЗНЫХ БСЯЕЗНЕЯ им. ГЕЛЬМГСЙЬЦА

На правах рукописи

ГАДОЕВА МИРВАРИ НАДОЕДЦИН кызи

УДК 617.747 - 003.215 - 085.27

ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ КОРРЕКЦИИ ПЕРШСНСГО ОКИСЛЕНИЯ ДИПИДСВ ТКАШ ГЛАЗА АНТИОКСИДШАМИ ПРИ ЭКСПЕРШЕН-ТАЛЬНОМ ВНУТРИГЛАЗНОМ КРОВОИЗЛИЯНИИ

( Экспериментальное исследование ) 14.00.08 « Глазные болезни

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание научной степени кандидата медицинских наук

- 1993 -

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте офтальмологии и лаборатории биофизики рецепции Института физиологии им. А.И.Караева АН Азербайджанской Республики

Научные руководители: кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник Н.Ы. 35ЕНДИЕВ

доктор биологических наук, профессор А.И. ДОйАРСВ

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор А--?-6ИНИН доктор медицинских наук, професс ор Я Ъ-ЛА&РЁНко

I

Ведущее учреждение: Центральный ордена Ленина

институт усовершенствования врачей ( ЦОЛШ)

Защита диссертации состоится " В " 1993г..

часов на заседании Специализированного Совета Д.084.40.01 при Московском научно-исследовательском институте глазных болезней им. Гельмгольца

по адресу : 107064, Москва, Садовая-Черногрязская,14/19.

Автореферат разослан

"/3" 1993 г.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской •научно-исследовательского института глазных болезней имени Гельмгольца»

Ученый секретарь Специализированного Совета

М.Б.Кодзов

ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность темы. Гемофтальм - одна из главных причин слепоты и инвалидности по зрению,Исследованиями последних лет доказано, что одним из ранних физико-хиимчвских изменений при в"утри-глазном .сровоизлиянии.кмепцеи важное значение в патогенезе гемо-фтальиа является переокисление структурных лилидов стекловидного тела (Гундоровс: м др.,1986; Зфендиев и др., 1987; МисС

Имеются единичные работы,в которых установлена интенсификация ПОЛ в стекловидном теле и сетчатке при интравитреальном кровотечении различной этиологии,установлена взаимосвязь между функциональной активностью стекловидного тела и уровнем ПСШ в нем при экспериментальном внутриглазном кровоизлиянии,сдэланы первые по-Лыткч связать кнтенсифакацию ПСШ и структурно-функциональные изменения в стекловидном теле с двйс :вием радикальных интермедиатов кислорода ;Роиащенко,1981;Лаэаренко и др.,1982;Постникова,Солома-тина, 1933;Нейиан-заде и др.,1987;Эфвндиев и др. ,1987;3аргарли, 1989; Лс Сс гс1 с£а.£, Ас ¿ Ъ* ¿¿¿и1/^),

При исследовании действий антиоксидантов на ПОД стеклов. дно-го тела установлено,что ретробульбарное введение ингибиторов свободно радикальных реакций значительно замедляет интенсификацию процессов ПОД в стекловидно« теле л приводит к стабилизации его функциональной активности СЗаргарли,1989).

Однако в цитируемых работах не выявлен конкретный механизм ннтепенфякацяк ПОД вря хи*реви*рбальнои кровоизлиянии.Кроме того, в имеющихся работах не содержится сведений о системат!, еских исс следованиях, олрвделящкх эффективность различных антиоксидантов при интрагчтреаЛьноы кровоизлиянии в зависимости от способа,дозы, срока их введения,Между тем,ответ на эти вопросы дал иы возможность лучше понять механизм повреждения стекловидного тела и сетчатки и разработать оптиыальныа способы лечения интравитра^льного кровоизлияния.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение механизмов усиления ПОЛ и установление прраметр^в оптимальной коррекции его в стекловидной теле различными антиокси-дантаыи при интрааитреальном кровоизлиянии.В соответствии с этиы ставились следующие задачи!

I. Изучить динамику изменения интенсивности ПОЗ в.стекловидной тело "ьчик) " п "м и&хс " при введении аутокрови.

- г -

2. Изучить эффективность коррекции ПОЯ различными антиокси-дантами в зависимости от дозы.способа,скорости и кратности введения при интравитреальном кровоизлиянии.

3. Провести сравнекие эффективности коррекции ПОЛ в стекловидном теле между фибркнолитическими препаратами и антиоксидан-тами при интравитраальном кровоизлиянии.

4. Исследовать изменение интенсивности ПОЯ в стекловидном теле "/и иге" и 'V* и ¿1с" в зависимости от концентрации металлов переменной валентности.

5. Изучить динамику накопления супероксиданионрадикалов и неорганических перекисея содорода в стекловидном теле при интра-витреальном кровоизлиянии.

Научная новизна. Исследован механизм усиления ПОЛ в стекловидном теле "»« мс * и "т^Ьс" при интравитреальном кровоизлиянии. Показано,что в усилении ПОЛ при интравитреальном кровоизлиянии среди различных факторов ведущая роль принадлежит ионам'дву валетного а^лвза и радикальным ингермедиатам кислорода.В основе механизма инициации ПОЛ в стекловидном теле лежит усиление генерации неорганических перекисей и супероксиданионрадикалов в боле ранние сроки изливания крови,на начальных этапах интрааитреально геморрагии.Впервые исследована эффективность коррекции ПОЛ различными антиоксидантами в зависимости от дозы,способа,срока и кратности введения препаратов к& модели экспериментального внутриглазного кровоизлияния.Впервые показана высокая эффективность внутриглазного способа введения антиоксидантов в коррекции ПСИ стекловидного тела строго в зависимости от количества,срока и кратности введения препарата при интравитреальном кровоизлиянии. Установлено.что антиоксидангы.блокихущиа радикальные интерыв— диаты О2, болев высокоэффективны в первые три дня кровоизлиянии. У антиоксидантов-ингибиторов свободнор&дикальных реакций - высох эффективность в коррекции ПОД отмечалась на 7 - 20 дли опыта.Йо-каэано.что коррекция ПОЯ разли^н^ми анги'-жекд&нтами в процессе кровоизлияния сопровождается стабилизацией вязкости к проэрачт носги стекловидного тела.

Научно-практическая ценность. Данные о механизме усиления ПСШ стекловидного тела при внутриглазном кровоизлиянии,полученные в настоящей работе,важны,с одной стороны,для понимания патогене?^ гемофтальма.с другой стэроны-для разработки новых способов лечения указанной патологии,Выявленные закономерности эффективности коррекции ПСЛ в стекловидном теле антиоксидантами в зависимости от способов.,срока,кратности введения и дозы препарата

гут служить практическими рекомендациями для включения антиок-д»нтов в лечение интравитреальных кровоизлияний различной зти-огии.

Вопроси,вь!носимь:й на защиту. Разработаны оптимальные фосми 1Гиоксидангной регуляции ПОЛ в тканях глаза s заиисимости от юка.дозы.кратчзсти и способов введения антиоксидактов при ин-)авктреальноы кровоизлиянии.

- Выявлено важное значение радикальных интермедиатов кислота в развитии ПОД а тканях глаза при интраэитреальном кровоиз-5ЯНИИ.

- Установлена взаимосвязь между интенсивность» ПОИ и стаби-«зацией функциональных нарушений в стекловидном теле и сетчатке зи интравитреальном кровоизлиянии.

..аробаиия работы. Материалы диссертации доложены к обсуждени а: Всесоюзной научной конференции.молодых ученых и специалистов Баку,1591)¡республиканской конференции аспирантов . БакуДУУ1); ченых советах НИИ офтальмологии Минздрава АэерО.ГеспуОлики и нститута физиологим АН Азврб.Республики.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 2 работы.

, Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из ведения,обзора литературы,описания методик,трех подглав.мзложе-ня полученных результатов с обсуждением,выводов,практических «комондаций и списка использованной литературы.Диссертация изло-:ен& на 136 страницах,содержит 40 рисунков.Список литературы 1ключает 201 источник,из которих 100 опубликованы в отечестшл!-|ых и 101 «* в зарубежных изданиях.

Материалы и метода исследования. Исследования проводились ¡а стекловидном тела и сетчатке глаз 237 кроликов породи Серая . Ьдалилла,обоего лола.восом 2,5» 3,5 кг.лосло шгравигреального гровоазлияння.Ддя создания интразитреального кровоизлияния 0,2 .ш аутокровв вводилось в стекловидное тело через прокол сильны яглой иЬгр-НйДдена.продзаритольно отсосаз 0,2 мл стекловидного гола.В ряда одатоа инициировангю ПШ1 в стехиовыдао тело я сетчатка производили путем впадения растворов солэй галоза н чоди (Pe£04,CnS0^>. Коррекция ПОЙ стезклови,алого тала и сетчатка при гштравнтрфаяьноы ¡фовгчзлиянпи проводилась антаоксиданта«и:токо« фарол фосфатом,ионолон,фснсзеном калия,эыоксшшноы.диыетилсуль« фок-адои и тралоноы Б. Антиоксиданты вводились внутримшечно и рэтробульбарно,одно»,двух-,трах-,четырехкратно а различные сроки опита.О состоянии ПОЛ судили по изменению содержания ИДА и

гидроперекисей.С целью изучения механизма усиления ПСЙ определяли содержание перекисей водорода и супероксиданнонрадикалов ккслс рода.Нарушение функциональной активности стекловидного тела оценивали по изменению вязкости и прозрачности,нарушение функционал! ной активности сетчатки-во изменению характера формирования "а" и"в" волн ЭРГ.

Прозрачность стекловидного тела определяли на спектофотомет-ре М~40.Вязкость стекловидного тела определяли на капил-

лярном вискозиыетрд"ВК-4".Злвктроретинограмма кроликов снималась на осциллографе "С1-^>9",использовались усилители переменного тока УБП-2-03.Полоса пропускания частот усилителя устанавливалась от I до 50 гц.Длительность световой вспыаки составляла 150 м/с. Интенсивность световой вспышки была 1,4 да.Содержа«"в гидроперекисей . и малонового ля альдегида определяли по методу ^ ахсы-^гд-Мо&и^'¿а-, 1680г. Содержание перекисей водорода в пробах определяли по модифицированному методу бъхр, Региь^&п. ,1980г. Содержание супероксиданионрадикалов кислорода в пробах определялось модифицированным методом Пескина и других,1981 р.

Результаты исследований обрабатывались статистически.достоверность гаэличий оценивали по « критерию Стьюдента (Рокицкий, 1967).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ 0БОТДЖ2 I. Характеристика функциональных и клинических показателей стекловидного тела и сетчатки при интравитревльном кровоизлиянии.

Вязкость стекловхдноге тела при интравитреальном кровоизлиянии до 30 дня опыта уменьшается от 2,0 до 0,25 относительных единицы.Однако,через 8 недель величина вязкости вновь увеличивается, лри благоприятном течении приближаясь к величине вязкости интахтного стекловидного тела.При неблагоприятном течении ¿ш-травнтреального кровоизлияния С55-65&),сопровоздаадегося огрублением витреальных тякей,происходит резкое увеличение вязкости. , Прозрачность стекловидного тела до 12-го для опыта уменьшалась в 2,2 раза но сравнению с интактным стекловидным телом.Прозрач-носг стекловидного тела при благоприятном течении интравитре-ального кровоизлияния в определенной степени восстанавливалась, при неблагоприятном хе течении на третьем месяца ошта параллельно с образованием соединительнотканных тяжей резко уменьшалас

„«личина к "в" волн ЭРГ я течение четырех недель после интравитре&дьнс.'о кровоизлияния уменьаалась.при благоприятном

течении параметры ЭРГ к концу опыта восстанавливались,а при неблагоприятном течении подавлялась величина "в" волн ЭРГ.

3 период с 3-го по 12-й день опита у кроликов по мере пропитывания стекловидного тела аутокровью,отсутствовал рефлекс с глазного дна,стекловидное тело приобретало темно-красную окраску, отмечались единичные сгустки крови.При благоприятном течении к 20-00 дням кровоизлияния прослеживался рефлекс с глазного дна, через 2 месяца.лочти у всех подопытных животных,рефлекс с глазного дна восстанавливался,а стекловидном теле обнаруживались единичные помутнения.

2. Изменение интенсивности перекисного окисления липидов в стекловидном теле и сетчатке прк кнтравитреальном кровоизлиянии.

В стекловидном теле при интравитреальном кровоизлиянии со-дер1 лние У.ДА и ГП в течение первых 7-9 дней кровоизлияния,заметно увеличиваясь,Достигает первого максимума.После указанного срока содержание МДА и ГП до 20-го дня опста непрерывно уменьшалось.Начиная с 20-25 дней опыта,зновь происходило увеличение накопления кродуктоа ПШ. При этом увеличение содержания ИДА и ГП через 8 недель достигает второго максимума. При благоприятном течени* уровень продуктов ПОЗ чзрез 2,5 месяца,постепенно уменьшаясь, приближался к контрольному.При неблагоярклтном течении же кровоизлияния содержание продуктов ЛСД во втором максимума значи' ель-но выае и через 2,5 месяца нэ подвергалось заметному уменьшению. Содержание МДА в сетчатке при интравитреальном кровоизлиянии изменялось волнообразно;в первые три дня несколько увеличивав сь, достигая иерзоро максимума,а затеи до 12-го дня умены^лось.а с 12-го до 20-го дня содержание МДА увеличиваясь,достигало небольшого втор то максимума.После 20-го дня содержание МДА до 30-го дня вновь уменьшается,& затем наступало интенсивное накопление МДА., которое достигало третьего максимума,который был заметно ни-ко первого и второго максимумов ММ (рис.1).

Вышеприведенные данные показали,что интравитреальное крови-излияние вызываот усиление интенсивности ПОД в с; .кловндном теле н сетчатке,более резко происходивиее при неблагоприят :ом течении кровоизляянид.1Сак сле^уе? из данных Накоэа А. 2! Нанова Е. (1986).содержание железа в сетчатке при интравитреальном кровоизлиянии достигает 0,2 мг/ЮОг,а мвди-0,13мг/100г;а стекловидной тела соответственно 0,014 ыг/ЮОг и 0,03 ыг/ЮОг.Согласно данным литературькукаэанные концентрации металлов переменной валентности, а также гемоглобина и геаина достаточны для активации ГКШ. а

- б -

стекловидном теле н сетчатке-(Владимиров.Арчаков, 1972; УА-Ш, 1964),что позволяет усиление интенсивности ПОД при интравитреал! ном кровоизлиянии связан, с действием гемоглобина,гемина.негеми-нового железа к меди,

Р«о I Изменоиао со задания 1Ш оепаткк вря нитраяигрзалыоы ироноязлдяиви X - при слагоприипса точении; 2 - upa ноолагопркдшоы течении

которые высвобождаются по мере разложения изливиейся аутонрувн. iÇkjjruwxé ,1968; Sxx^díM 1975; S>ûy Oo¿. ,1986).

3. Особенности коррекции ПОД стекловидного тела и сетчатки различными, анткоксидантамх в зависимости от кратности и срока и введения.

3.1. Изменения интенсивности ПОД в стекловидном теле в sai сииости от кратности и сроков введения антиоксидантов.

В этой разделе работы представлены данные по изучению влияния одно-,двух-,трех- и четырехкратного ретробульбарного введ« ния антиоксидантов в различные сроки кровоизлияния.

Установлено,что кроме эиоксипина все испытанны« антиокси-данты при однократной введении вызывают подавление интенсивное: ПОД. Это можно видеть по уменьшению высоты I и П максимумов

содержания ИДА.Полученные результаты показали,что при однократной введении антиоксидантов через день после кровоизлияния наибольяее уменьяение высоты первого максимума МДА вызывали Д.1С0,затем фено-эан калия.Характерно то,что однократное введение антиоксидантов в лоздгие сроки кровоизлияния 16-й и 15-й дни), сопровождалось уменьшением их эффективности в ингибирозании накопления МДА.Так, например,если ЩСО при введении на 2-й кровоизлияния подавлял высоту первого максимума МДА в 1,4 раза.на 4-й день кровоизлияния -1,15 раза.на б-й день - в 1,1 раза,а при однократном введении фе~ нозана калия наблюдали уменьшение высоты первого максимума МДА соответственно в 1,3; 1,25; 1,2 раза.Однократное введение антиоксидантов влияло и на высоту П-го максимума ИДА.При однократном введении антиоксидантов через 2 Дня после кровоизлияния достоверное уменьшение высоты П-го максимума содержания МДА вызывали фе-иозан калия,тоофврол фосфат,коыа!вксон Б. Введение этих антиоксидантов а поздаив сроки кровоизлияния (6,10 дни кровоизлияния) существенно увеличивало ингибирозание ими П-го максимума МДА. При двухкратном введении антиоксидантов по отноаению к накоплению МдА наблюдали такую же закономерность,как и при однократном юс падении,т.е. ДЛСО и комплексов Б более эффективны яри введении их а ранние сроки кровоизлияния ^на 2,4 дни), фенозан калия и токоферол фосфат почти одинаково эффективны при двухкратном вв^ценин как на 2,4 дни,так и на 2 к 10 дни кровоизлияния.

Результаты показывают,что при двухкратном введении антиоксидантов заметно увеличивается эффективность ингибирования ПСД фе-нозаном калия,токоферол фосфатом ч эмоксилкном. .

Если аровеста сравнение между двумя вариантами двухкратного введения »на 2 и 4 дни и на 2 и 10 дни кровоизлияния),нетрудна заметить более высокую эффективность, ингибирования накопления МДА при введении антиоксидантов на 2 и 4 даа кровоизлияния.

При изучении влияния трехкратного введения йнтиокси&итов на накопление МДА.антиоксвданты вводились в 3-х вариантах: I- на 2,4 и 6 дни опыта;' 2- на 2,4 к 10 дни опыта; 3- "г 2,4 и 20 дни опыта,

Результаты о/штоа доказали,что яри введения антиоксидантов на 2,4 и 6 дни кровоизлияния высота первого максимума^содержания МД. по сравнение с контролем бьша соответственно ниже в следующем 'порядке: Д.1С0- в 1,7 раза; комплексов Б - в 1,6 раза; фенозан

Q

калкя - 1,5 раза; токоферол фосфат -1,4 раза; эмоксипин - 1,4 раза. При трехкратном введении антиоксидантов на 2,4 к 10 дни опыта высота максимума уменьшалась соответственно в 1,5; 1,5 1,5; I,d; к 1,4 раза,высота второго максимума соответственно в 1,6; 1,8; 2,0; 1,8; л 1,4 раза по сравнению с контролем. При введении антиоксидантов на 2,4 и 20 дни кровоизлияния высота первого максимума по сравнению с контроле« уменьшалась в 1,4 1,6; 1,7; 1,5 и 1,3 раза соотнетстваственно,высота П-го максимума I/JGД при этом уменьшалась в 1,5; 2,2; 2,6; 2,3; 1,6 раза по сравнению с контролем.Из представленных данных следует,что ДСО к комплексом Б по отнесению к 1-му максимуму эффективны при введении их ь ранние сроки кровоизлияния - на 2,4 и 6 дни опыта. Эффектайность антиоксидантов по отношению ко П-му максимуму МДА. высока при сведении антиоксидантов а более поздние сроки кровоизлияния, т .е. на 2,4 и 20 дни опыта.

Четыр< скр&тное введение антиоксидантов осуществляли в следующих гариантах: антиоксидангы вводились на 2,4,6 и 15 дни; на 2,4,6 и 20 дли; на 2,4,6 и 30 дни опыта.При введении йМСО.комп-лехсона Б,фенозана калия,токоферол фосфата и эмоксипана на 2,4, 6 и 15 дни кровоизлияния уменыпен.че высоты первого максимума по сравнению с контролем было соответственно з 2,1; 2,2; 2,3; 2,2; 1,8 раза,уменькение высоты Л-го максимума - в 1,8; 2,2; 2,8; 2,5 и 1,8 раза.Результаты четырехкратного введения антиокекданте на 2,4,6 и 20 дни в отновении 1-го максимума были следующие¡происходило уменьшение в : 2Л;:2,2; 2,3; 2,2 и 1,8 раза; в отношении второго максимума были получены соответственно следуиди« j ;зультаты: происходило уменьввние в 1,5; 2,2.; 3.,0t; 2,7 и 2,8 раза.

■ Результаты опытов показывают,что при четырехкратном введении антиоксидантов на 2,4,6 и 30 дни кровоизлияния характер подавления накопления ИДА. как в первом,так и во втором максимумах бал такой же, как и при введении антиоксидантов на 2,4,6 и 20,. дни ! первый максимум уменьнался после введения вышеназванных антиоксидантов в 2,1; 2; 2,3; 2,2 и 1,8 раза,а второй - в 1,5; 2,2; 2,3; 2,7 и 1,8 раза).

Анализ представленных выяе данных ло влиянию антиоксиданто] на накопление МДА в стекловидном теле в зависимости от кратност! их введения позволяет заключить,что по мере увеличения кратност! введения антиоксидантов увеличивается эффективность подавления

- у „

накопления ?,!ДА.При рассмотрен}!/! эфйект/.гности каждого лн^нсксидак-та в отдельности нетрудно заметить: во—перз1."х, наибольшую ор ность проявил фенозан калия,наименьшую- омокскпин; во-зтсрих, ДЧСО и комплексом 5 более существенное влияние оказывали в первые недели опыта.

3.2. Изменение интенсивности ПЛ в сетчатке з зависимости от кратности и срока введения, антиоксидантоа.

В первые три чи.ч после кровоизлияния скорость накопления МДА з сетчатке заметно высока,затем происзодит непрерывное уменьшение его накопления и к 12 дню опыта содержанке МДА. доходит почти до исходного уровня.После зтого содержание МДА вновь увеличигаот-ся вплоть до 20 дня опыта.Содержание МДА после некоторого уменьшения с 30 дня опыта а течение последующих двух месяцев резко '■ возрастает.По полученным данным однократное введение антиокси-Дантов,независимо от сроков введени-* .существенного изменения в содержании МДА в сетчатке не вызывало.

При двухкратном введении антиоксидантоа ДЧСО и эмоксипин, независимо от сроков введения,такке не изменялась скорость накопления "Д при интразхтреально.у крэвеи.с&м*хх .Однако,если комплексен Б.фекозан калия и тг<сэферол фосфат при введении их на 2 и 4 дни кровоизлияния вызызали небольшое подавление накопления МДА,то введение их на 2 и 10 дни кровоизлияния приводило к заметному уменьшению высоты максимума МДА в сетчатке.Так,например,после введения комплвксона В уровни высоты лерзого и третьего максимумов содержания МДА были соответственно на 38 и .50% ниже контроля. При введении фенозана калия и токоферол фосфата высоты первого и третьего максимумов МДА были соответственно на 58, 60, 45 я 55% нгасе контроля.

При трехкратном введении антиоксидантоа подучены следующие рэзультаты:

а).при введении Д/.С0,комплексен« Б,фенозана калия,токоферол фосфата и эмохсипина на 2, 4 и 10 дни кровоизлияния .содержание МДА з сетчатке1в первом максимуме по сравнению с контролем, уменьшал ось, соответственно в 1,4; 1,6; 1,9; и 1,2 раза, а э третьем максимуме,соответственно а 1,4, 1,3; 1,6; 1,5 и 1,3 раза.

б) при введении вьшеназванных антиоксидантоа на 2, 4 и 15 дни кровоизлияния зодеркание МДА в первом максимуме уменьпалось в 1,4; 1,3; 1,9; и 1,2 раза по сравнению с контролем,а в третьем

- ю -

максимума соответственно в 1,5; 1,8; 2,0; 1,8 и 1,4 раза по сра внению с контролем.

в) ири введении тех же антиоксидантов на 2, 4 и 20 дни крс воизлияния содержание МДА в первом максимуме уыеньиалось соответственно в 1,4; I,Q; 2,0; 2,4;' 1,3 раза по сравнению с контре лем; в треуьем максимуме соответственно - в .1,4; 2, 1,9; 2,6; 2,2; 1,8 раза.Более заметное подавление накопления М.ЦА отмечалось при четырехкратном введении антиоксидантов.Из различных вариантов четырехкратного введения наибольшее подавление ММ обнаруживалось при введении антиоксидантов на 2, 4, 6 и 20 дни кровоизлияния.Четырехкратное введение ДЛСО.комплексона Б.феноз« калил ..токоферол фосфата и эмокеипина приводило к уменьшению высоты первого максимума М,ИЛ в сетчатке соответственно в 1,7; 2,< 3,0; 2,7 и 1,8 раза по сравнению с контролем,* высоты третьего максимума соответственно в 1,8; 2,0; 3,2; 3.0 и 2.2 раза.Таким образом,представленные результаты показали,что более заметную ингибируюцую активность из испытанных антиоксидантов проявляют комплексон Б.фвнозан калия и токоферол фосфат,причем при введ( нии их в более р&нние сроки кровоизлияния.

3.3. Изменение интенсивности ПОД в стекловидном теле в за] симости от способа введения антиоксидантов ври ингравитреально) кровечзлияник.

При внутримышечном введении ДЛСО вводился из расчета 18мг, комплексон Б - 16мг/кг, фенозан калия - 60 кг/кг, токоферол фо< фат - 120 ыг/кг веса животного.При ретробульбарном способе-.: ДЛСО - 3 иг/1 глаз, комплексен . В - 3 "г/I глаз, фенозан кали. 4 ыг/l глаз, токоферол фосфат - 8 ыг/l глаз, эмокекпин - 4 иг/ I глаз.

Рассмотрение гзезультатов свидетельствует о том,что ири ре. тробульбарноы способе чвтьфехкратное введение всех антиоксидан тоа заметно задерживает развитие ПСЙ в стекловидном теле при интравитреальном кровоизлиянии. Эиоксипин Не оказывал ингибирую. щего влияния на накопление МДА ггри четырехкратном внутримышечном его введении..*>!С0 при внутримышечном введении аоказывал сравнительно меньшую эффективность ио сравнению с его ретробул барным вввденкем,Эффективность внутримышечного введения компле сонь Б.фенозана кадия,токоферол фосфата в коррекции ПОП стекло видного тела заметно превышала таковую при ретробульбарном спо

собе введения.Например,если при ретробульбарном четырехкратном введении феноэана калия высота первого максимум* МДА уменьшалась в 3 раза,то после четырехкратного внутримышечного введения умень— палась в 3,6 раза яо сравнению с контролем.

3.4. Изменение интенсивности ПОЯ в сетчатке а зависимости от способ» введения антиоксидантов при интравитреальном кровоизлиянии.

Опыты показа, и,что интенсивность ПОД в сетчатке как при ретробульбарном.так и при внутримышечном четырехкратном sгедонии антиоксидантов на фоне интравитреального кровоизлияния изменялась согласно той же закономерности,какую мы наблюдали в стекловидна теле.

3.5. Йзмеямхе хнт^яахвноетх ПСШ в етвкловхддом тел» в зависимости от дозы антиоксидантов при интравитреальном кровоизлиянии.

При ретробульбарном введении ДМ СО в дозах 3, 6 и 9 мг/1 глаз наибольшее подавление ЛСЙ стекловидного тела обнаруживалось при дозе 3 мг/1 глаз.Оптимальное подавление ПОЛ стекловидного . , . тела комплексом Б оказывал яря ретробульбарном введении его * дозе 3 мг/1 глаз. При ретросульбярном введении фенозан калия в дозе 6 мг/l глаз подавлял накопление МДА в большей степени, чем в дозах 2, 4 мг/ I глаз.Токоферол фосфат оказывал оптимальную коррекцию на накопление МДА в дозе 16 мг/l глаз.При ретробульбарном введении эмокскпина наибольшее подавление МДА вызывал в дозе 4 мг/l глаз. При внутримдаечноы введении получили следующие результата; ДОСО в дозе 16 мг/кг веса оказывал наибольшее ингибирующее влияние на накопление МДА. При введении комплексона Б среди испитанньа доз - 5, 10, 20 и 30 мг/яг веса - оптимальной оказалась доза 10 мг/кг веса. Из дО, 100, 140 и 200 мг/кг веса доз фенозана калия доза 100 мг/кг веса вызвала наибольшее подавление высот манскмуио» ЫДА.Феноз&н калия в до» зе 250 мг/кг вызвал обратный эффект - увеличение содержания МДА в стекловидном толе.Аналогично,что при внутримышечном введении токоферол фосфата и эмоксипина в наиболее высоких дозах (300 и 100 мг соответственно),чрезмерно превышающих оптимальные (200 и 75 мг соответственно).наблюдалось увеличение содержания МДА в стекловидном теле по сравнению с лроб&ми СТ без введения антиоксидантов при мнтр^итреальном кровоизлиянии.Таким образом,эффективность исследуемых антиоксидантов существенно зависит от ав°-

диммх доз г.рвглparos.

3.6. ьзиененке иктенсмност* ПОЛ сетчатки в зависимости от доз киткоксяданто^ вря интравктреальном кровоизлиянии.

Пр& ретробуяьбарном вгеденх* ДйСО.комклексона Б.фенозан». калия, токоферол фосфата и эмоксксина установлено,что оптимальная дозл антмокекдактов для подавления ПОД в сетчатке заметно выые по сравнению с теия доз,ими,которые мы обнаружили но обходимыми для г.о-длялонея ПОЛ в стекловидном теле.То ест»,наиболее аффективной дозой подапленяя ПОЛ з сетчелк» ври кнтравхтреальном кровоизлкяикк для Д'-íС0 был'ь доза 6 мг/l гя&э.комплексона В - 5 мг/l глаз.фенозан* ка-л^я - б ыг/l глаз .токоферол фосфата - 20 мг/l глаз.эмоксипкиа - 6 uv/i глаз. Прг. анутркммяечнои введении литиоксидантов наиболее аффективные дозы.снижвщле е«согы максимумов МДА л сетчатке,были тела-мже,кик и для стекловкдногс тела при ингразктреальноы кровоизлия-кии:дли ^,С0 - 20 мг/кг.конплексона Б - 20 мг/кг.фоиоэана калкя ~ 100 мг/кг,токоферол фосфата - 220 мг/кг и для эмоксипинь - 75 мг/кг весь жйзотного.

4. Влияние антиоксидантоз на разаитио ПОЛ стекловидного тыи. на фона действия фибринолитических ирепвратс-j.

Ом vü проводил», нз кр/ельяоЯ екстене "т i¿¿to ".Бчлв установлено,что зваден/.е стргптодакази.как а введение проматоров ПОЯ (FoSO^, CuSO^) к путокрови i стекловидное тело вызывает существенное увеличение накопления проектов П01.уменьшение прозрачности и вязкости. Кэ огих перечисленных факторов действие стрелтодеказы наиболее суща< CTíisHiio по сравнению,с друггш.В пробах,где стекловидное тело,сов-маетно со строптодаказоЯ.взодаяся антнокекдаи. фанозан калия,рззко вставлялось наколленао ■ МДД.,прозрачности било значительно выше,чем бе>з вводемия антиокеидонта.Вязкости в указанных нробах сохранялась близкой к иитактному стекл,видному телу.Следует отмстить,что фона« -.ан калия с коындехсеноы Б в пр&бах о «угокровью и FeSO^ также корректировал увеличение ссдзриьнмя лродуктоз ПОД и умснькенко вязкое«-ти.Однако,прозрачность аод действкои антяикекдантов в пробах с ау-токровью вез же не восстанавливалась.

5.Значение коррекция ПОД в стабилизации функциональной активности тканой глаза np;s интравктрзальном ¡фовоиплияиин.

Опыты показали,что четырехкратное комбинированное введение антноксидаитов на фона нитравитрэального кровоизлияния заметно за«« деркивает уыеьшенка вязкости к прозрачности стекловидного тола.Вел:: чина вязкости я прозрачности стекловидного тола подвергались при 6*си небольшому умоньшенгх (3? - 32 %) в п:-раыэ 5-7 дней крсаопзл:;-

яния.В последующие сроки опыта,с введением антиоксидантов,прозрачность и вязкость постепенно увеличивались и через 5-7 недель достигали уровня таковых в контрольных глазах.При введении фзнозана калия в сочетании с ДМСО и комплексоном Б на фоне интравитроального кровоизлияния величина амплитуда "а" волны ЭРГ,в отличиэ от .контроля, уменьшалась в течение первых 7 дней до 26 мяв,а затем чероэ месяц амплитуда "а" волны восстанавливается до уровня интактной сетчатки.Величина "в" волны ЭРГ при комбинированном четырехкратном введении антиоксидантов на фоне интразитреального кровоизлияния в течение 7 дней снижалась до 120 мкВ,а затем интенсивно увеличиваясь,через. одну неделю доходила до значения "в" волн инта&ого глаза.По данным литературы стабилизацию функциональной активности тканая глаза при введении антиоксидантов на интравитреальное кровоизлияние можно объяснить ингибнрованием накопления продуктов ПСЯ.а также рат дккальньк интермедиагов кислорода,так как продукты ПСД - перекиси, гидроперекиси и ррчикальные интермедиагы кислорода - супероксидани-онрадкхалы,перекиси водорода а гидроксальные радикалы способны вызывать подавление формирования "а" и "в" воли ЭРГ.деполимеризацию гиалурсновой кислота (Каган,1981;КулневаЛШ2;Лай>г^е^^974;£Лм«.<, M¿yW*.,iy75} /¿t/Wb, iW,I960;¿vitíur 983;Ht <J¡Vl985;'

феноЗан калия,а также ¿MC0 и комплексон Б,с одной стороны,ин-гнбируют образование продуктов ПОЛ,с другой- генерацию радикальных интермедаатов кислорода (Биленко,¡989;Бабаев, 1990; Рглу-с^, 1978).

6* 0 механизме усиленая ПОЯ з стекловидном теле при интравитреальном кровоизлияний.•

Нами-был исследован характер накопления продуктов ПОЛ,а также 0g и HgOg в стекловидном теле пря интравитреальном кровоизлиянии или яри введении раставров Ре504 и Си$04 различными способам».При введении в стекловидное тело аутокрэви,предварительна обогащенной PeS04, количество МДА значительно увеличивается - о* 0,15 ни/иг белка доходит до 60 ни/ыг болка.Зводгнкаг в сгекловндноэ тело аутокрови,обогащенной серной медью, также» приводило к увеличению содержания МДА до 0,22 нм/ыг белка.Аутсжровь.прздварктельно обогащенная FeSO^ к Си50^, приводила к, резкому увеличению содержания Og и HgOg. Изучен;, з ккноти-пи образования радикальных ннтврмедаатов кислорода показывает,что содержание Og и Н^О^.кгк при введении в стекловидное тело чистой аутокрови,так а при введении аутокрови,предварительно обогащенной FeSO^ увеличиваясь до 7 дня,доходит до максимума а до конца опыта остается на этом уровне. Опыты показала,что аутокровь,обогащенная CnS04,таь:.е приводила к увеличению содержания 02 * Н ¡¿^.Однако", в атом случае

максимум в содержании радикальных интермедиа?ов ю :лорода устанавл» вавтсяни нкже и сроком позднее,чем при обогащении РвГО^.Параллельно определение содержания в стекловидном т«дв МДА.железа ж мед* при введени аутокроаг,предварительно обогащенной металлам* переменной валентности,показывало,что достижение максимума содержания МДА»железа и меди полностью совпадает со сроками достижения максимума содержания и Н20;,. Полученные результаты однозначно указывают на важную роль металлов переменно!* валентност : в увеличены содержания радикальных интермедиатов кислорода.По мере увеличения содержания в стекловидном геле Ре-ЭД^ и Ся-^0, в нем увеличивается также и со— делание- и

ВЫВОДЫ

1. Мнтравигреальное кровоизлияние в стекловидное тело рызыва ет усиление интенсивности перекмсного окисления лкпидов как в стекловидном теле,таи и в сетчатке,о чем свидетельствует увеличение со« держания гидроперекисей и ы&лонового диалъдегкда в исследуемых тка--нях глаза.При неблагоприятном теченмм кровоизлияния,сопровожд&щегс ся швартообразованием,интенсивность перекисного окисления липидов

в теченье всего срока сохраняется на высоком уровне.

2. Интравктреально® кровоизлияние приводят к подавлению фун< кцконалъной активности стекловидного тела и сетчатки,выражающемуся в уменьшении вязкости ы прозрачности стекловидного тела,подавлении електрической активности сетчатки.

При неблагопрадтном -течении кнтравнтреального кровоизлияния ь стекловидной теле наряду с резкий изменением вязкостс н прозрач«. посты отмечалось уменьшение ■млиагуди "а" "в" воли сетчагкв.

3. Показано,что пзракисноэ окисление лшшдов в сгокловаднои идо и сетчатке ара кнграсктреальнои кровоизлиянии.корректируется разными антиоксыдантауЕ.Из различных ангкохскдантов для ДМСО и цом. плексона Б наиболее оптшь«ьныы сроком вьэдонил являются пзрпыо 10 дней кровоизлияния.Ингибиторы свободюрадкиальних реакций » феиози калия,токоферол фосфат .зиокевпш « в гочснко есого срока введения оказываю? одинаковую Еффоктквносгь.

4. Внугркишочлос введенка антооксцДаитов при кдаравЕтрсаль !>оа кровоизлиянии тика ингибируо? развитее псрэквсного окисления липидов,как и рзтробульбарпоо.Сравнение е$фоктцвноств расянчиьк йиукоксадантов в завис1а!0с1ш от срока,кратности,способа введения

и дозы показываем,что кавбояее еффектшищу аитиоксвдаитса при ш:« трашзгря-льиои кровоизлиянии является фвиозан калия.При коабшшром важной взодзнка он с богьзоЯ с?снс,;;и ьффч5К';хвм1 в сочмаиш с ко^ >

плексонси Б и ЩСО,вводимыми на 2, 4, 6, 15 или 2, 4, б и 20 дни опыта.

5. Накопление продуктов перекисного окисления липидоэ ири интравитреальном кровоизлиянии является основной причиной нарушения функциональной активности стекловидного тела и сетчатки.При интравитреальном кровоизлиянии на фоне хоррекцин перекхсного окисления липидов уменьшение прозрачности и вязкости стекловидного тела,а также подавление электрической активности сетчатки в определенной степени предотвращается.В стекловидном теле при этом не отмечается развитие соединительнотканных шварт.

6. Показано,что при интравитреальном кровоизлиянии в основе механизма усиления перакисного окисления липидов лежит увеличение содержания таких интермедиатов кислорода,как перекиси водорода и супероксиданионрадикалы,образующихся в стекловидном теле под действием вносимых аутокровью металлов переменной валентности.

7. Анализ полученных результлтоп показывает,что для стабилизации морфологических структур и функциональной активности стекловидного тела и сетчатки при интравитреальном кровоизлиянии.необходима коррекция перекисного окисления липидов.Это указывает на целесообразность применения различных антиоксидантов в офтальмологической практике для предотвращения развития поздних осложнений и улучшения функций пострадавшего при гвмофтальме глаза.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. "Механизм усиления перекисного окисления липидов стекловидного тела при внутриглазных кровоизлияниях" - Сборник научных трудов АзНМСШ -'"Новое в диагностике и лечении главных заболеваний", Баку, 1991, с.92 - 95 .

2. "О рола структурных изменений излившейся крови в усилении перекисного окисления липидов стекловидного тела" - Тезисы докладов 2-го съезда гематологов и трансфизиологов Азербайдкана - Баку, 1991, с. 200.

^к. 142, ТГ.ЕЛООэкз. '.:шгре.рия ЦвН15! Ростоппрома