Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Исследование изотипических маркеров IgG2 и IgG4 человека с помощью моноклональных антител
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.36
Оглавление диссертации Крутецкая, Ирина Юрьевна :: 2001 :: Санкт-Петербург
Оглавление
Сокращения, встречающиеся в тексте
Общая характеристика работы
Глава 1. Обзор литературы.
1.1. Подклассы IgG2 и IgG4. Структура и физико-химические свойства
1.2. Эволюция и генетика иммуноглобулинов
1.3. Биологические свойства IgG2 и IgG
1.4. Клинические аспекты
1.5. Моноклональные антитела против подклассов IgG
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1.Материалы
2.2. Методы модификации антигенов
2.3. Экспериментальные животные
2.4. Методы иммунизации
2.5. Методы получения и культивирования гибридом
2.6. Методы выделения и очистки МКАТ из асцитической жидкости
2.7. Методы твердофазного ИФА
2.8. Метод гемагглютинации
2.9. Методы иммунодиффузии
2.10. Метод электрофореза
2.11. Статистическая обработка
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Коллекция миеломных белков
3.2. Оценка эффективности схем иммунизации
3.3. Тестирование клеточных культур
3.4. Подтверждение специфичности МКАТ
3.5. Изучение свойств эпитопов, связывающих МКАТ
3.6. Изучение особенностей экспрессии эпитопа ЗС
3.7. Исследование возможности применения МКАТ против IgG2 и IgG4 в различных вариантах иммуноанализа
Глава 4. Обсуждение
Выводы
Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Крутецкая, Ирина Юрьевна, автореферат
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Подклассы IgG, будучи гомологами по структуре, существенно различаются по спектру распознаваемых ими категорий антигенов, по набору опосредуемых эффекторных функций, и по ряду других биологических свойств. Однако четкого понимания связи между структурой и особенностями биологических свойств подклассов IgG до сих пор не существует. В структурном отношении молекулы подклассов IgG2 и IgG4 являются наиболее близкими друг другу представителями белков класса IgG. Гомология последовательностей аминокислотных остатков в константных участках тяжелых цепей достигает 95%. Детекция таких белков наиболее затруднительна. В тоже время, функциональные характеристики IgG2 и IgG4 различны, и до сих пор рационального объяснения этих различий не найдено.
Для практического здравоохранения подклассы IgG2 и IgG4 представляют интерес в связи с тем, что при некоторых распространенных патологических процессах наблюдаются характерные изменения их концентраций. Так, недостаточность продукции IgG2 связана с пониженной устойчивостью к ряду бактериальных инфекций. Повышенное содержание IgG4 обнаруживают при длительно текущих инфекционных, аллергических и аутоиммунных заболеваниях. Исследованиями последних лет установлено, что среди пациентов с общим вариабельным иммунодефицитом преобладают индивиды, гомозиготные по аллелю IgG2m(n-). Введение таким лицам вакцин, созданных на основе полисахаридных антигенов, как правило мало эффективно.
Появление за рубежом в середине 80-х годов моноклональных антител (МКАТ) против подклассов IgG послужило стимулом для продолжения и углубления исследований изложенных выше проблем. Однако созданные реагенты распознают лишь ограниченное количество специфичных для подклассов IgG эпитопов. Для отечественных лабораторий и клиник эти реагенты остаются недоступными. Таким образом, необходимость выявления молекул IgG2 и IgG4 подклассов и изучения их структурных и функциональных особенностей диктуется потребностями как фундаментальной, так и прикладной иммунологии.
ЦЕЛЬ настоящей работы состояла в получении моноклональных антител (МКАТ) против IgG2 и IgG4 человека, изучении их иммунохимических свойств и исследовании экспрессии распознаваемых ими изотипических маркеров.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Разработать эффективные схемы иммунизации и получить МКАТ против изотипических маркеров IgG2 и IgG4 человека.
2. Изучить иммунохимические свойства полученных МКАТ.
3. Охарактеризовать распознаваемые ими изотипические маркеры.
4. Сравнить полученные МКАТ с известными зарубежными препаратами.
5. Исследовать возможности применения полученных МКАТ в научных целях и в лабораторной диагностике.
ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
Изотипический маркер, связывающий МКАТ G4-5C7, расположен на пространственно удаленных участках молекулы IgG4.
На молекулах IgG2 аллотипа ш(п+) изотипический маркер, связывающий МКАТ G2-ЗС7, экспрессирован постоянно и не зависит от конформации молекулы.
На молекулах IgG2 аллотипа m(n-) тот же изотипический маркер скрыт и становится доступным для распознавания только после изменения конформации молекулы.
Обнаруженные различия в экспрессии изотипического маркера IgG2 позволяют выявлять индивидов, гомозиготных по аллотипу IgG2m(n-), с помощью двухдетерминантного метода ИФА.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РЕЗУЛЬТАТОВ
Впервые выявлены различия в экспрессии изотип-специфичного эпитопа на молекулах аллотипов IgG2m(n-) и IgG2m(n+).
Впервые установлена зависимость экспрессии изотипического маркера на молекулах аллотипа IgG2m(n-) от конформации молекулы.
Разработан не имеющий аналогов метод выявления гомозиготности по аллотипу IgG2m(n-) на основе двухдетерминантного метода ИФА.
Впервые установлена пространственная удаленность регионов молекулы IgG4, содержащих изотип-специфический маркер, и продемонстрирована возможность определения концентрации IgG4 с помощью двухдетерминантной системы ИФА на основе одного МКАТ.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
Апробацией на клиническом материале установлена пригодность полученных МКАТ для детекции, определения концентраций IgG2 и IgG4 человека и выявления гомозиготности по аллотипу IgG2m(n-).
АПРОБАЦИЯ МАТЕРИАЛОВ ДИССЕРТАЦИИ
Результаты работы были представлены на национальных и международных симпозиумах и конференциях: International Conference "Medical Biotechnology, Immunization and AIDS", Leningrad, 1991, XV International Congress of Allergology and Clinical Immunology, Stockholm, 1994, "Biotechnology St.Petersburg-94." International conf., 1994, "Актуальные вопросы гематологии" Научн. конф. ВМА, С-Пб., 1995, 1-ая Национальная конференция РААКИ, Москва, 1997, Fourth International Symposium on Clinical Immunology, Amsterdam, 1997, Вторая международная научная конференция "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 98", 1998, 24th Annual Meeting European Group for Blood and Marrow Transplantation., Italy, 1998, "Вирусные инфекции на пороге XXI века: эпидемиология и профилактика". Научн. конф. ВМА, С-Пб., 1999.
ПУБЛИКАЦИИ. Материалы диссертации отражены в 4 журнальных статьях и 15 тезисах докладов.
ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Препараты полученных МКАТ прошли испытания в Государственном контрольном институте им. А.Л.Тарасевича и рекомендованы к использованию в практике здравоохранения Комитетом по иммунобиологическим препаратам. Решением Президиума Фармакопейного Государственного комитета от 29 ноября 2000 года фармакопейная статья "Антитела моноклональные диагностические против легких и тяжелых полипептидных цепей иммуноглобулинов человека" (ФСП-42-0190-0593-00) рекомендована для утверждения.
СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ
Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста и состоит из: введения, обзора литературы, главы, содержащей описание материалов и методов, главы описания собственных результатов исследования, а также обсуждения и выводов. Диссертация иллюстрирована 28 рисунками и 19 таблицами. Библиографический указатель включает 111 источников. Среди них отечественных публикаций 15 и зарубежных 96.
Заключение диссертационного исследования на тему "Исследование изотипических маркеров IgG2 и IgG4 человека с помощью моноклональных антител"
ВЫВОДЫ
1. Разработаны эффективные схемы иммунизации мышей, позволившие получить гибридомы-продуценты МКАТ против изотопических маркеров IgG2 и IgG4 человека. Исследована специфичность и свойства пяти МКАТ против IgG2 и трех МКАТ против IgG4.
2. МКАТ против IgG4 (клон G4-5C7) направлено к антигенному маркеру, расположенному в pFc-учаетке молекулы и по специфичности отличается от ранее описанных МКАТ.
3. Симметричные области молекулы IgG4, содержащие эпитоп 5С7, топографически удалены друг от друга, что позволяет использовать для определения концентрации IgG4 двухдетерминантную систему ИФА на основе одного МКАТ G4-5C7.
4. Изотопический маркер, распознаваемый МКАТ против IgG2 (клон G2-3C7), экспрессирован на молекулах аллотипа IgG2m(n+) вне зависимости от их конформации. На молекулах аллотипа IgG2m(n-) он скрыт и становится доступным для распознавания только при изменении конформации вследствие сдвига рН или адсорбции на твердой фазе.
5. Двухдетерминантная система ИФА на основе МКАТ G2-3C7 позволяет определять концентрацию IgG2 аллотипа m(n+) или суммарную концентрацию двух аллотипов IgG2, а также выявлять индивидов, гомозиготных по аллотипу IgG2m(n-).
6. МКАТ G2-3C7 и G4-5C7 обладают преципитационной активностью и могут быть использованы для определения концентраций IgG2 и IgG4 методом радиальной иммунодиффузии. МКАТ G2-3C7 может применяться для выявления гомо- или гетерозиготности по аллотипам IgG2 методом встречной иммунодиффузии.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2001 года, Крутецкая, Ирина Юрьевна
1. Введение в иммуногенетику. Пер. с англ./Под общей редакцией Р.С.Незлина. М.: Мир, 1975-226с.
2. Галактионов В.Г. Очерки эволюционной иммунологии. М.: Наука, 1995,- 256с
3. Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе. Иммунология, 1994, N 3, С. 31-37.
4. Гурвич А.Е. Современные методы в биохимии. М., 1964, С. 73-86.
5. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б. Гаврилова Е.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М., Высшая школа, 1991.
6. Климович В.Б., Самойлович М.П., Грязева И.В., Сирота Н.С.,Денисова Г.Н. Штамм культивируемых клеток животных вида Musmusculus L ., ВСКК (П) И7Д- миелома мышей, используемая для получения гибридом. Автор, свидетельство N131982,1986.
7. Кульберг А. Антииммуноглобулины, 1978, М. Медицина, 170 стр.
8. Линг Р.З., Кэтти Д. Гемагглютинация и реакции антителозависимого гемолиза. В кн. Антитела. Методы. Ред. Кэтти Д., T.l, М., Мир, 1991, С. 33-115.
9. Образование антител. Пер. с англ./Под общей редакцией Л. Глинна, М. Стьюарда. -М.:Мир, 1983 -200с.
10. Последние достижения в клинической иммунологии. Пер. с англ./Под общей редакцией Р.А. Томпсона. М.:Медицина, 1983 -496с.
11. Прокоп О., Гелер В. Группы крови человека. Пер. с нем. М. Медицина, 1991, 512 с.
12. Самойлович М.П., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Профили антиген-связывающей активности моноклональных антител к IgG человека. Иммунология, 1996, N 2, С. 38-43.
13. Скоупс Р. Методы очистки белков. М., Мир, 1985.
14. Структура и функции антител. Пер. с англ./Под общей редакцией Л. Глинна, М. Стьюарда. -М.:Мир, 1983 -200с.
15. Чернохвостова Е.В. Иммунохимическая диагностика гаммапатий. Методические рекомендации. Москва, 1984, 51с.
16. Aalberse R.C., Van-der-Gaag R., Van-Leeuwen J. Serological aspects of IgG4 antibodies.I. Prolonged immunization results in and IgG4-restricted response. I.Immunol. 1983, V.130, P.722.
17. Amir J., Liang., Granoff D., Variability in the functional activity of vaccine-induced antibody to Haemophilus influenzae type b. Pediatr., 1990, R.27, P.357.
18. Appleby P., Catty D. Quantitative and spectrotypic analysis of paternal IgG2a expression in normal and allotype-suppressed mice. Immunology, 1985, V.54, P. 429-437.
19. Ballieux R.E., Bernier G.M., Tominaga R,. Putnam F.W. Gammaglobulin antigenic types defined by their heavy chains determinants. Science, 1964, V. 145, P. 168-170.
20. Black C.M., McDougal J.S., Evatt B.L., Reimer C.B. Human markers for IgG2 and IgG4 appear to be on the same molecule in the chimpanzee. Immunology, 1991, V. 72(1), P.94-98.
21. Black C.M., Plikaytis B.D., Wells T.W. et all. Two-site immunoenzymometric assays for serum IgG subclasses infant/maternal rations at full-term. J. Jmmunol. Methods, 1988, V.106, P. 7181.
22. Bradwell A.R. IgG and IgA Subclasses in Diseas. 1995, P. 152.
23. Brekke O.H., Michaelsen Т.Е., Sandlie I. The structural requirements for complement activation by IgG: does it hinge on the hinge? Immunol. Today, 1995, V. 16, P. 85-90.
24. Bruggemann M., Williams G.T., Bindon C.I. et al. Comparison of effector functions of human immunoglobulins using a matched set of chimaeric antibodies. J. Exp. Med., 1987, V. 166, P. 1351-1361.
25. Brusco A., Lange de G., Boccazzi C., Carbonara A.O. Molecular characterization of G2m(n+) and G2m(n-> allotypes. Immunogenetics, 1995, V.42(5), 414-417.
26. Bui R., Molinaro G., Eby W. Jauhar R., Mace J. Measuring human IgG4 by two-site immunoradiometric assays with monoclonal antibodies. Int. Arch. Allergy and Appl. Immunol., 1988, V. 86., №3, P. 314-318.
27. Burton D.R., Gregory L., Jefferis R. Aspects of the Molecular Structure of IgG Subclasses. Monogr.Allergy., 1986, V.19, P. 7-35
28. Canfield S.M., Morrison S.L. The binding affinity of human IgG for its high affinity Fc receptor is determined by multiple amino acids in the CH2 domain and is modulated by the hinge region. J. Exp. Med., 1991, V. 6, P. 1483-1491.
29. Cook A., Tomlinson I.M. The human immunoglobulin Vjj repertoire. Immunol. Today, 1995, Vol. 16, P. 237-242.
30. Сюсе C.M., Shander M., Martinis J. et al. Chromosomal location of the genes for human immunoglobulin heavy chains. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1979, Vol. 76, P. 3416-3419.
31. Devey M.E., Bleasdale-Barr K.M., Bird P., Amlot P.L. Antibodies of different human IgG subclasses show distinct patterns of affinity maturation after immunization with keyhole limpet haemocyanin. Immunology, 1990, V. 70(2), P. 168-174.
32. Duncan A.R. and Winter G. The binding site for Clq on IgG. Nature, 1988, V.332, P.738-740.
33. Esser C. Radbruch A. Immunoglobulin class switching: molecular and cellular analysis. Annu. Rev. Immunol., 1990, Vol. 8, P. 717-735.
34. Feinstein A., Richardson N., Taussig M.J. Immunoglobulin flexibility in complement activation. Immunol. Today, 1986, V.7, P. 169-173.
35. Ferrante A., Rowan-Kelly B. et al. An enzyme-linked immunosorbent assay for quantificatin of human IgG subclasses using monoclonal antibodies. J. Immunol. Meth.,1986, V.93, № 2, P. 207-212.
36. Franek K. Purification of IgG monoclonal antibodies from ascitic fluid based on rivanol precipitation. Meth. In Enzymol., V.121, P. 631-636.
37. Fundamental Immunology, Ed. W.Paul
38. Garty B.Z., Ludomirsky A., Danon Y.L. et al. Placental transfer of immunoglobulin G subclasses. Clin. Diagn. Lab. Immunol., 1994, V. 6, P. 667-669.
39. Gefter M.L., Margulies D.H., Scharff M.D. A simple method for polyethylene glycol-promoted hybridization of mouse myeloma cells. Somatic Cell Genet., 1977, V. 3, P. 231-236.
40. Ghetie V., E.S. Ward. FcRn: the MHC class I related receptor that is more than an IgG transporter. Immunol. Today, 1997, V.18, N. 12, P. 592-598
41. Grey H.M., Kunkel H.G. H-chain subgroups of myeloma proteins and normal 7S gammaglobulins. J. Exp. Med., 1964, V. 120 P. 253-259.
42. Hamilton R., Wilson R., Spillman Т., Roebber M. Monoclonal antibody-based immunoenzymometric assays for quantificatin of human and its four subclasses. J. Immunoassay, 1988, V. 9, № 3-4, P. 275-296.
43. Hamilton R.G. Human IgG subclass measurements in the clinical laboratory. Clin Chem, 1987, V.33, P. 1707-1725.
44. Harada S., Hata S., Kosada Y., Kondo E. Identification of epitopes recognized by a panel of six anti-human IgG2 monoclonal antibodies. Journal of Immunological Methods, 1991,V. 141, P.89-96.
45. Harada S. et all. Evaluation of Production and Characterization of Monoclonal Antibodies to Human IgG of Four Subclasses. Microbiol. Immunol., 1989, V.33, P. 579-592.
46. Harada S. et all. Hinge region of human IgG2 protein: conformational studies with monoclonal antibodies. Molecular Immunology, 1992, V. 29, N. 2, P. 145-149.
47. Hasnaoui M., Blanchard D., Willem C., Loirat M.J., Lambin P. Production and properties of monoclonal antibodies against human IgG isotypes. Hybridoma, 1996, V. 15, P. 351-358.
48. Herzenberg L.A., Jones P.P Mouse immunoglobulin allotypes: characterization and cellular immunology. Ann.Immunol., 1974, V.125, P. 71-83.
49. Hill RL, Delaney R, Fellows RE, Lebovitz HE. The evolutionary origins of the immunoglobulins. ProcNatl Acad Sci USA 1966;56:1762-1769.
50. Honjo T, Kataoka T. Organization of immunoglobulin heavy chain genes and allelic deletion model. Proc Natl Acad Sci USA 1978;75:2140-2144.
51. Honjo T. Immunoglobulin genes. Ann. Rev. Immunol. 1983, V. 1, P. 499-528.
52. Honjo Т., Nakai S., Nishida Y. et al. Rearrangements of immunoglobulin genes during differetiation and evolution. Immunol. Rev., 1981, V. 59, P. 33-67.
53. Ishizaka A., Sakiyama Y., Nakanishi M. et al. The inductive effect of interleukin-4 on IgG4 and IgE synthesis in human peripheral blood lymphocytes. Clin. Exp. Immunol., 1990, V. 3, P. 392396.
54. Jefferis R. Human IgG Subclass- Specific Epitopes Recognised by Murine Monoclonal Antibodies. Monogr.Allergy., 1986, V.20, P. 26-33.
55. Jefferis R. Polyclonal and Monoclonal Antibody Reagents Specific for IgG Subclasses. Monogr.Allergy., 1986, V.19, P. 71-85.
56. Jefferis R., Kumararatne D.S. Selective IgG subclass deficiency: quantification and clinical relevance. Clin.Ex P. Immunol. ,1990, Vol. 81, P. 357-367
57. Jefferis R., Lund J., Mizutani H. et al. A comparative study of the N-linked oligosaccharide structures of human IgG subclaas proteins. 1990, V. 268, P. 529-537
58. Jefferis R., Pound J. et all. Effector mechanisms activated by human IgG subclass antibodies: clinical and molecular aspects. Ann Biol Clin, 1994, V. 52, P. 57-65.
59. Jefferis R., Reimer C.B., Skvaril F et al. Evaluation of monoclonal antibodies having specificity for human IgG sub-classes: results of an IUIS/WHO collaborative study. Immunology Letters, 1985, Vol. 10, P. 223-252.
60. Jefferis R., Reimer C.B., Skvaril F., de Lange G.G. et.al. Evaluation of monoclonal antibodies having specificity for human IgG subclasses: results of the2nd IUIS/WHO collaborative study. Immunology Letters, 1991,V.31, P.143-168.
61. Kawano Y., Noma Т., Yata J. Regulation of human. IgG subclass production by cytokines. IFN-gamma and IL-6 act antagonistically in the induction of human IgGl but additively inthe induction of IgG2. J Immunol., 1994, V. 153(11), P. 4948-4958.
62. Kimata H., Yoshida A., Ishioka C., Jiang Y., Kusunoki Т., Mikawa H. Monomeric IgG2 enhances Ig production and proliferation in human В cells. Biotechnol.Ther., 1993, V. 4(1-2), P.l-16.
63. Kubo R.T, B.Zimmerman, H.M.Grey. Phytogeny of Immunoglobulins. In: The Antigens. Vol. 1. Ed. M.Sela, Academic Press, N-Y., London, 1973, P. 417-477
64. Kumar R.K. Animal model of human disiease. Hodgkin,s diesease. SJL/J murine lymphoma. Amer. J.Pathol., 1983, V. 110, P.505-510.
65. Lange de G. Allotypes and other epitopes of immunoglobulins. Bailiere's Clinical Immunology.V. 4, P. 903-925
66. Lange de G. Polymorphism of human immunoglobulins: Gm, Am, Em and Km. Exp. din. immunogenet, 1989, V. 6, P.7.
67. Lange M., Le Guern C., Cazenave P.A. Covalent coupling of antigens to chemically activated lipopolysaccharide: a tool for in vivo and in vitro specific B-cell stimulation. J. Immunol. Meth. 1983, V. 63, P. 123-131
68. Leibl H., Mannhalter J.W., Eibl M.M. IgG subclass determination in human sera with commercially availablereagents: comparison of different assay systems. Eur J Clin Chem Clin Biochem, 1992, V. 30(2), P. 85-93.
69. Mancini G., Nash D.R., Heremans J.F. Further studies on single radial immunodiffusion. Quantitative analisis of related and unrelated antigens. Immunochemistry, 1970, V.7, P.261-264.
70. Michaelsen Т.Е., Aase A., Sandlie I. Enchancement of complement activation and cytolysis of human IgG3 by deletion of hinge exons. Scand. J. Immunol., 1990, V. 32, P. 517-528.
71. Mongan L.C., Ockleford C.D. Behaviour of two IgG subclasses in transport of immunoglobulin across the human placenta. J. Anat.,1996, V. 1, P. 43-51.
72. Nahm MH, Маске К, Kwon OH, Madassery JV, Sherman LA, Scott MG Immunologic and clinical status of blood donors with subnormal levels of IgG2. J Allergy Clin Immunol., 1990, V. 85(4), P. 769-777
73. Nakane P.R. Kawaoi A. Peroxidase labeled antibody. A new method of conjugation. J.Histochem.Cytochem., 1974, V.22, P. 1084-1091.
74. Natvig J.B., Kunkel H.G. Human Immunoglobulins: Classes, Subclasses, Genetic Variants, and Idiotypes. Adv. Jmmunol., 1972, V.16, P. 1-59.
75. Noroski L.M., Shearer W.T. Screening for primary immunodeficienies in clinical immunology laboratory. Clin. Immunol, and Immunopath., 1998, V.86, N.3, P. 237-245.
76. Oxelius V.A. Preparation of IgG subclass allotipes from polyclonal IgG. Scand. J. Immunol, 1999, V. 49, P.395-398.
77. Oxelius V.A., Ochs H.D. Serum Gm allotype levels in common variable immunodeficiency: preponderance of homozygous G2m(",M) on IGHCG2. Exp. Clin. Immunogenet., 1996, V. 13(2), P. 70-77
78. Pandey J.P., French M.A. GM phenotypes influence the concentrations of the four subclasses of immunoglobulin G in normal human serum. Hum.Immunol., 1996, V. 51(2),P. 99-102.
79. Pandey J.P., Gunsolley J.C., Tew J.G., Schenkein H.A. GM allotypes and IgG subclass concentrations in blacks. Exp. Clin. Immunogenet., 1996, V. 13(3-4), P. 126-130.
80. Perosa F., G. Luccarelli, et al. The Fab region of IgG2 human myeloma proteins does not bear the streptococcal protein G-specific determinant. J. Immunol. Methods, 1997, V.203, P. 153155.
81. Pressac M., Allouche F., Circaud R., Aymard P. Evaluation of human IgG subclass assays on Beckman array. Ann Clin Biochem, 1995, V.32, P.281-288.
82. Pressler Т., Mansa B. et all. Methodologic problems in establishing normal values for IgG subclaas concentrations in a pediatric population; comparison of radial immunodiffusion and ELISA methods. Allergy., 1994, V. 49(9), P. 772-777.
83. Rautonen; N., I.Seppala; T. Hallberg; R. Grabb. Determination of Homozigosity or Heterozigosity for G2m(n) Allotype by a Monoclonal, Precipitating Antibody. Exp.Clin. Immunogenetics. 1989, V. 6, P.31-38.
84. Reimer C.B., Phillips D.J., Aloisio C.H., Moore D.D., Galland G.G., Wells T.W., Black C.M., McDouglas J.S. Evaluation of thirty-one monoclonal antibodies to human IgG epitopes. Hybridoma, 1984, V. 3, P. 263-275
85. Roux K.H., Strelets L., Michaelsen Т.Е. Flexibility of human IgG subclasses. J.Immunol., 1997, V. 7, P. 3372-3382
86. Sammaritano L.R., Ng S., Sobel R., Lo S.K., Simantov R. et al. Anticardiolipin IgG subclasses: association of IgG2 with arterial and/orvenous thrombosis. Arthritis Rheum, 1997, V. 40(11), P. 1998-2006.
87. Sarnesto A. Monoclonal antibodies reacting with isotypic and/or allotypic determinants of human IgG. Med.Biol., 1983, V.61, P.126-132.
88. Sarvas H., Rautonen N., Makela O. Allotype-associated differences in concentrations of human IgG subclasses. J. Clin. Immunol., 1991, V. 11(1), P. 39-45.
89. Schatz D.G., Oettinger'M.A. and Schlisser M.S. V(D)J recombination: molecular biology and regulation. Ann. Rev. Immunol. 1992, Vol. 10, P. 359-383.
90. Servet-Delprat C., Bridon J.M., Blanchard D. et al. CD40-activated human naive surface IgD+ В cells produce IgG2 in response to activated T-cell supernatant. Immunology, 1995, V. 3, P. 435-441.
91. Shakib F. The IgG4 Subclass. Monogr. Allergy, 1986, V. 19, P. 223-226.
92. Snapper С. M., Mond J.J. Towards a comprehensive view of immunoglobulin class swithing. Immunol. Today, 1993, Vol. 14, P. 15-17.
93. Terry W.D., Fahey J.L. Subclasses of human у-2-globulin based on differences in the heavy polypeptide chains. Science, 1964, V. 146, P. 400-403.
94. Tonegawa S. Somatic generation of antibody diversity. Nature, 1983, Vol. 302, P. 575-581.
95. Vaidia H.C., Dietzler D.N., Ladenson J.H. Inadequacy of traditional ELISA for screening hybridoma supernatants for murine monoclonal antibodies. Hybridoma, 1985, Vol. 4, P. 271276.
96. Van der Zee J.S., Aalberse R.C. Immunochemical characteristics of IgG4 antibodies. Engl. Reg. Allergy Proc. 1988, V. 9, P. 31-33.
97. Van der Zee J.S., Van Swieten P., Aalberse R.C Serological aspects of IgG4 antibodies II. IgG4 antibodies form, small, nonprecipitating immune complexes due to functional monovalency. I.Immunol. 1986, V.137, P.3566.
98. Van der Zee J.S., Swieten van P., Aalberse R.C. Inhibition of complement activation by IgG4 antibodies. Clin. Exp. ImmunoL, 1986, Vol. 64, P. 415.
99. Vlug A., Remortel van P. The structure and function of human IgG subclasses. J. Internat. Fed. Clin.Chem., 1989, V. 1, P. 26-35.
100. Weinberg G., Granoff D., Nahm M., Shackelford P. Functional activity of different IgG subclass antibodies against type b capsular polysaccharide of Haemophilus influenzae. J.Immunol., 1986, N 136, P. 4232.