Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Исследование характера экспрессии mas-протоонкогена в процессе развития нормальных и mas-трансгенных мышей

Введение.

Обзор литературы.

Протоонкогены, их роль в процессах нормального функционирования клетки

Mas протоонкоген - представитель класса рецепторов, ассоциированных с гетеротримерными GTP-связывающими белками (G-белками)

G-белок связывающие рецепторы как протоонкогены.

Предполагаемые сигнальные пути, с которыми может быть связана трансформирующая активность GPC-рецепторов

Возможные механизмы активации онкогенных свойств Mas протоонкогена

Данные картирования в геноме человека.,.?.

Данные картирования в геноме мыши.

Импринтинг.

Исследование характера экспрессии генов на модели трансгенных мышей

Анализ экспрессии mas протоонкогена.

Роль протоонкогенов в ЦНС.

Предполагаемые пути регуляции экспрессии mas протоонкогена

Ангиотензин II - возможный лиганд mas-рецептора?.

Функции рецепторов к ангиотензину II ATI и АТ2.

Экспрессия компонентов RAS в тканях млекопитающих.

Mas протоонкоген - представитель особого подкласса рецепторов к ангиотензинам?

Материал и методы.

Получение доимплантационных зародышей мыши.

Получение партеногенетических зародышей мыши.

Получение тетраплоидных зародышей мыши методом электрослияния бластомеров

Исследование хромосомной локализации mas- протоонкогена в геноме мыши

Приготовление хромосомных препаратов из доимплантационных зародышей мыши

Приготовление препаратов хромосом и интерфазных ядер из костного мозга мыши

Приготовление препаратов хромосом и интерфазных ядер из зародышей мыши 10-го дня развития

Метод ПЦР in situ.

Исследование тканевой локализации мРНК транскриптов mas протоонкогена на гистологических препаратах

Приготовление тотальных препаратов из доимплантационных зародышей мыши для гибридизации in situ

Приготовление криостатных срезов из целых постимплантационных эмбрионов и различных органов взрослых мышей

Приготовление парафиновых срезов зародышей мыши на ранних стадиях постимплантационного развития (7,5-12 дн)

Метод флуоресцентной гибридизации in situ.

Супрессорная гибридизация in situ.

Выделение фракции Cot-1 ДНК мыши.

Процедура проведения флуоресцентной гибридизации in situ ДНК/РНК на гистологических препаратах

Результаты и обсуждение.

Исследование хромосомной локализации mas протоонкогена в геноме мыши

Хромосомная in situ супрессия (CISS).

Выделение фракции Cot-1-ДНК.

Список сокращений

Рецепторы, связанные с гетеротримерными G-белками Ренйн-ангиотензиновая система Ангиотензин II

Рецептор к ангиотензину, тип 1,2 Митоген-активирующий протеин Митоген-активирующие протеинкиназы Киназы, регулируемые внеклеточными сигналами Флуоресцентная гибридизация in situ Хромосомная in situ супрессия Полимеразная цепная реакция пара нуклеотидов Комнатная температура Стандартный фосфатный буфер Стандартный натрий - цитратный буфер 5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат нитрогетразолевый синий Флуоресцеин-изотиоцианат 4',6-диамидин-2'-фенилиндол дигидрохлорид 1,4-диазобицикло-(2,2,2)-октан