Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Исследование антиульцерогенного действия деанола ацеглумата в условиях индуцирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином и бутадионом

На правах рукописи

КИЯЙКИНА ОКСАНА МИХАЙЛОВНА

ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИУЛЬЦЕРОГЕННОГО ДЕЙСТВИЯ ДЕАИОЛА АЦЕГЛУМАТА В УСЛОВИЯХ ИНДУЦИРОВАНИЯ ЯЗВЕННОГО ПОРАЖЕНИЯ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА ИНДОМЕТАЦИНОМ И БУТАДИОНОМ

(экспериментальное исследование)

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

3 0 ЯНВ 2069

Ст.Купавна - 2009

003460869

Работа выполнена на кафедре поликлинической терапии и функциональной диагностики ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П.Огарева»

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

профессор Зорькина Ангелина Владимировна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Радкевич Людмила Александровна

доктор медицинских наук, профессор Муляр Александр Георгиевич

Ведущая организация - Российский государственный медицинский Университет

Защита состоится «24» февраля 2009 года в Ю50 часов на заседании Диссертационного совета Д 217.004.01 во Всероссийском научном центре по безопасности биологически активных веществ (142450, Московская область, пос. Старая Купавна, ул. Кирова, 23).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научного центра по безопасности биологически активных веществ.

Автореферат разослан «__»_2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Л.В. Корольченко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) - одна из наиболее широко применяемых в клинической практике групп лекарственных средств (Насонова В.А., 1994; Brooks P.M., 1998). Несмотря на то, что их использование ассоциируется с широким спектром побочных реакций, наиболее распространенными из которых являются НПВП-индуцированные язвенные поражения желудка и кишечника (Ивашкин В.Т., 1994; Насонов E.J1., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Brooks P.M., Day R.O., 1993; Bjorkman D.J., Kimmey M.B., 1995; Griffin M.R., 1991; Henry D. et al., 1996), применение НПВП зачастую не может быть прекращено.

Препараты для терапии НПВП-индуцированных гастропатий включают в себя три основные группы лекарственных средств - синтетическими аналогами простагландинов (мизопростол), ингибиторами протонной помпы и блокаторами Н2-гистаминовых рецепторов (Hawkey C.J., Yonemans N.D., 1998; Leandro G et al., 1998; Schmassmann A., 1998). Однако антиульцерогенная эффективность омепразола зависит от инфицированное™ слизистой оболочки H.pylori (Ekstrom Р. et al., 1996, Graham D. et all, 2002). Экономические аспекты, побочные эффекты и неудобная схема применения ограничили широкое использование мизопростола (Муравьев Ю.В., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Silverstein F.E., 1995). Эффективность ингибиторов Н2-гистаминовых рецепторов при НПВП-гастропатиях невысока. Кроме того, эти препараты наиболее эффективны в профилактике развития язв двенадцатиперстной кишки (Ekstrom Р. et al., 1996). В то время как язвенное поражение желудочно-кишечного тракта при воздействии НПВП развивается чаще в верхних отделах.

Все вышесказанно обуславливает актуальность дальнейшего поиска наиболее оптимальных методов защиты желудочно-кишечного тракта на фоне приема НПВП (Насонов Е.Л., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Wallace J.L., Granfer D.N., 1992; Lain L., 1996).

Учитывая участие в патогенезе гастродуоденальных осложнений свободнорадикальных процессов и данные о противоязвенной эффективности ряда лекарственных средств и соединений с антиоксидантным типом действия (Подопригорова В.Г., 1991; Яковлев A.A., 1992; Воронина Т.А., 1997; Цибулькина В.Н., 1999; Ямашкина Е.И., 2002; Зорькин В.И., 2003; Куняева Т.А., 2005; Гришкина О.П., 2006), представляется целесообразным дальнейшее исследование антиульцерогенного эффекта нового препарата деанола ацеглумата, проявляющего антиоксидантное и цитопротекторное действие в условиях ряда патофизиологических состояний (Скоробогатова JI.H., 2002; Госткина И.П., 2003).

Работа является разделом комплексной программы исследований Мордовского государственного университета им. Н.П.Огарева «Фармакологическая коррекция повреждений, возникающих при гипоксических, токсических и радиационных воздействиях». Номер государственной регистрации темы 01200004103.

Цель работы: исследование антиульцерогенной эффективности деанола ацеглумата и его комбинированного применения с омелразолом, мизопростолом и ранитидином в условиях индуцирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина в эксперименте.

В ходе выполнения работы решались следующие задачи:

1. Изучение антиульцерогенного действия деанола ацеглумата при язвенном поражении желудочно-кишечного тракта, вызванном введением бутадиона и индометацина в эксперименте.

2. Исследование влияния деанола ацеглумата на антиульцерогенную активность омепразола, мизопростола и ранитидина в условиях моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина.

2. Изучение влияния деанола ацеглумата на некоторые биохимические показатели и процессы перекисного окисления липидов крови и тканей в условиях введения бутадиона и индометацина.

Научная новизна работы.

Впервые показана гастропротекторная активность деанола ацеглумата в условиях индуцирования язвенного повреждения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона, а также гастро- и энтеропротекторная активность - при введении индометацина.

Отмечена более высокая антиульцерогенная активность комбинированного применения омепразола и деанола ацеглумата по сравнению с омепразолом на фоне введения бутадиона. Показан рост гастропротекторной и энтеропротекторной активности омепразола при комбинированном введении с деанола ацеглуматом на фоне язвенного поражения желудочно-кишечного тракта, индуцированного индометацином.

Показан рост антиульцерогенного действия мизопростола при комбинированном введении с деанола ацеглуматом в виде уменьшения общего количества и предотвращения развития внутрижелудочного кровотечения в условиях моделирования язвенного поражения желудка введением бутадиона.

Выявлен более выраженный антиульцерогенный эффект при комбинированном применении ранитидина с деанола ацеглуматом, чем при монотерапии ранитидином, на фоне эрозивно-язвенного поражения желудочно-кишечного тракта бутадионом и индометацином.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.Деанола ацеглумат оказывает антиульцерогенное действие в условиях индуцирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта бутадионом и индометацином, и не приводит к росту маркеров цитолитического синдрома.

2.Дополнительное применение деанола ацеглумата повышает гастро- и энтеропротекторный эффект омепразола и ранитидина при моделировании

язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина.

3. Комбинированное использование мизопростола и деанола ацеглумата способствует повышению антиульцерогенной активности мизопростола на фоне введения бутадиона.

Практическая ценность:

Полученные данные являются экспериментальным обоснованием целесообразности комбинирования стандартных средств антиульцерогенной терапии язвенного поражения желудочно-кишечного тракта, индуцированного нестероидными противовоспалительными средствами, с деанола ацеглуматом.

Апробация работы

Результаты проведенного исследования и основные положения диссертации доложены на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти проф. Я.В.Костина (Саранск, 2005); на межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 40-летию медицинского факультета Мордовского государственного университета имени Н.П.Огарева (Саранск, 2007); на XIV национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007); на XVI Российском симпозиуме по хирургической эндокринологии «Современные аспекты хирургической эндокринологии» (Саранск, 2007); на Юбилейной российской научной конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения С.П.Боткина (Санкт-Петербург, 2007); на VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2007); на научно-практической конференции ГОУ ВПО «Красноярская государственная медицинская академия им. Проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого Федерального агентства но здравоохранению и социальному развитию» «Актуальные вопросы современной хирургии» (Красноярск, 2008)

Структу ра и объем работы

Диссертация изложена на 186 страницах текста компьютерного набора, включает в себя обзор литературы, материалы и методы исследования, четыре главы результатов собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы, практические рекомендации и список использованной литературы, представленный 186 источниками, в том числе 59 зарубежными. Работа иллюстрирована 40 таблицами, 52 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В качестве объектов исследования были выбраны следующие лекарственные препараты:

Бутадиои - 1,2- Дифенил - 4- бутилпиразолидиндион - 3,5. По химической структуре бутадион является производным антипирина и близок к амидопирину. Оказывает аналгезирующее, жаропонижающее и противовоспалительное действие; по противовоспалительной активности значительно превосходит антипирин и амидопирин и рассматривается как один

из основных представителей нестероидных противовоспалительных препаратов. Бутадион является относительно сильным ингибитором биосинтеза простагландинов, превосходя в этом отношении ацетилсалициловую кислоту. Препарат быстро всасывается и относительно долго находится в крови, оказывает ульцерогенное действие, противопоказан при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки (возможны желудочные кровотечения). Форма выпуска таблетки по 25 мг производства ЗОРНАИМА АО.

Индометацин - 1-(пара-Хлорбензоил)-5 -метокси-2-метилиндол-З-уксусная кислота - относится к производным индолуксусной кислоты. Является одним из наиболее активных нестероидных противовоспалительных препаратов. Сильный ингибитор биосинтеза простагландинов. Обладает выраженной аналгезирующей активностью. Индометацин является активным противовоспалительным средством. Как и другие противовоспалительные препараты, индометацин назначают обычно длительно; преждевременное прекращение приема препарата может привести к возобновлению болезненных явлений. Препарат может оказать ульцерогенное действие: в отдельных случаях могут наблюдаться изъязвления в желудке и кровотечения из желудочно -кишечного тракта, противопоказан при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки и других язвенных процессах в кишечнике и пищеводе. Форма выпуска таблетки по 25 мг производства БОРНАЯМА АЭ.

Деанола ацеглюмат - М-ацетил-Ь-глютамат 2 (диметиамино)этанола -создан специалистами Всероссийского научного центра по безопасности биологически активных веществ (ГУП ВНЦ БАВ). Препарат по своей химической структуре близок к естественным метаболитам мозга (ГАМК, глутаминовая кислота). Препарат обладает церебропротективными свойствами с отчетливым ноотропным, психостимулирующим и психогармонизирующим действием. Способствует улучшению памяти и процесса обучения; оказывает положительное влияние при астенических и адинамических расстройствах, повышая двигательную и психическую активность пациентов, улучшает способность к концентрации внимания. Деанола ацеглумат оказывает положительное влияние при невротических состояниях у лиц пожилого и старческого возраста, развившихся на фоне органической недостаточности головного мозга; при алкогольно-абстинентном синдроме, при астении (Александровский Ю.А. с соавт., 2004, Попов Ю.В., 2006). Препарат малотоксичен: 1Л)50 для мышей при внутрибрюшинном введении составляет 2900 мг/кг. В эксперименте использовался 20% раствор деанола ацеглумата.

Омепразол (5 - метокси - 2 - [[(4 - метокси - 3,5- диметил - 2 - пиридил) -метил] сульфинил] бензимидазол]), ингибитор Н+-К+-АТФ-азы, использовался в качестве препарата сравнения, как лекарственное средство, обладающее противоязвенным эффектом. Уменьшает повреждающее действие кислотно-пептического фактора - основного фактора агресси в патогенезе зрозив-

но-язвенного поражения слизистой оболочки верхних отделов ЖКТ (Дроздов В.Н., 2005). Форма выпуска: капсулы по 20 мг омепразола производства Dr. REDDY's Laboratories, Индия. Препарат вводился в дозе 2% от LD50 (37мг/кг).

М из о п р о сто л -си i ггети ч ее ки й аналог простагландина Е|. Специфический патогенетический антагонист ульцерогенного влияния НПВП на слизистую оболочку ЖКТ (Насонов E.JI., Каратеев А.Е., 2003). Обладает антисекреторной активностью, стимулирует секрецию бикарбоната и слизи, оказывает цитопротекторное действие. Форма выпуска: таблетки по 200 мкг мизопростола. Производство SEARLE, США. В работе использован внутрижелудочно в дозе 2% (0,09 мг/кг) otLD50.

Ранитидин - блокатор гистаминовых Н2-рецепторов. Подавляет базальную и стимулированную гистамином, пентагастрином и пищей продукцию соляной кислоты, снижает продукцию пепсина. Форма выпуска таблетки по 150 мг производства SOPH ARM A AD.

В работе омепразол, мизопростол и ранитидин вводились в дозах условно составляющих 2% от LD50 (37мг/кг; 0,09 мг/кг 25 мг/кг соответственно) (Куняева Т.А., 2005, Гришкина О.П.. 2006). Деанола ацеглумат вводился в дозах 50 мг/кг, 100 мг/кг, 250 мг/кг, условно принятых как 1%, 2% и 5% от LD50.

В работе использованы две модели ульцерогенного поражения желудочно-кишечного тракта.

1. В первой модели язвенное поражение слизистой оболочки желудка воспроизводилось путем однократного внутрибрюшинного введения бутадиона в дозе 200 мг/кг после 24-часового голода (Аничков С.В., Заводская И.С., 1965). Результаты оценивались через сутки после введения препарата. Эксперименты выполнены на 66 белых нелинейных крысах-самцах.

Таблица 1.

Структура эксперимента _i__^

№ п/п Условия проведения эксперимента п

1 Модель I. Бутадион 200 мг/кг в/б однократно (контроль) 12

2 Деанола ацеглумат 50 мг/кг Модель 1. 6

3 Деанола ацеглумат 100 мг/кг Модель 1. 6

4 Деанола ацеглумат 250 мг/кг Модель 1. 6

5 Омепразол 37мг/кг (2% от LD50) Модель 1. 6

6 Омепразол 37мг/кг + Деанола ацеглумат 100 мг/кг Модель 1. 6

7 Мизопростол 0,09 мг/кг (2% от LD50) Модель 1. 6

8 Мизопростол 0,09 мг/кг + Деанола ацеглумат 100 мг/кг Модель 1. 6

9 Ранитидин 25 мг/кг (2% от LD50) Модель 1. 6

10 Ранитидин 25 мг/кг + Деанола ацеглумат 100мг/кг Модель 1. 6

Проведено 10 серий опытов. Контрольную серию составили 12 животных. Летальность в контрольной группе составила 25% (4 из 16

животных) в первые 2-4 часа после введения бутадиона. Схема эксперимента представлена в таблице 1. В опытных сериях летальности животных не наблюдалось. Исследуемые препараты вводились за 60 минут до инъекции бутадиона внутрижелудочно зондовым способом однократно. При исследовании комбинированного антиульцерогенного эффекта препаратов омепразол, мизопростол и ранитидин вводились за 60 мин, деанола ацеглумат -за 30 минут до введения бутадиона

2. Во второй модели, включающей 10 серий, индукция язвенных дефектов в слизистой оболочке желудка и кишечника осуществлялась путем 5-дневного курсового введения индометацина в дозе 5 мг/кг per os после двух часов без пищи и воды (Зорькина A.B., Ямашкина Е.И., Инчина В.И., 2004). Эксперименты выполнены на 97 белых нелинейных крысах обоего пола массой

200-250 г.

Таблица 2.

_Структура эксперимента_

№ п/п Модель 2. п

1 Модель 2. Индометацин 5 мг/кг внутрижелудочно 5 суток -(контроль) 13

2 Модель 2 +Деанола ацеглумат 50 мг/кг 10

3 Модель 2 +Деанола ацеглумат 100 мг/кг 12

4 Модель 2+ Деанола ацеглумат 250 мг/кг 10

5 Модель 2+ Омепразол 37мг/кг (2% от ЬБ5о) 10

6 Модель 2 + Омепразол 37мг/кг + Деанола ацеглумат 100 мг/кг 12

7 Модель 2+ Мизопростол 0,09 мг/кг (2% от ЬО50) 10

8 Модель 2+ Мизопростол 0,09 мг/кг + Деанола ацеглумат 100 мг/кг 12

9 Модель 2+ Ранитидин 25 мг/кг (2% от ЬО50) 6

10 Модель 2+ Ранитидин 25 мг/кг + Деанола ацеглумат 100мг/кг 12

Контрольную группу составили 13 животных. Летальность в контрольной группе составила 7% (1 животное из 14). В опытных группах летальность отсутствовала. Исследуемые препараты вводились внутрижелудочно зондовым способом за 60 минут до введения индометацина один раз в день в течение 5 дней. При исследовании антиульцерогенного эффекта комбинированного введения препаратов омепразол, мизопростол и ранитидин вводились за 60 минут, а деанола ацеглумат - за 30 минут до введения индометацина.

Интактную группу составили 10 животных.

Убой животных осуществлялся гильотинным методом после предварительного введения тиопентала натрия в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно. После декапитации забиралась кровь для биохимических методов исследования. При вскрытии оценивалась картина слизистой оболочки

желудка и кишечника (количество и площадь язвенных дефектов, наличие признаков кровотечения, перфораций). При проведении оценки язвенного поражения слизистой оболочки желудка использовали клинико-эндоскопическую характеристику (Чернеховская Н.Е. с соавт., 2006).

Для гистологического исследования забирали материал из стенки желудка, тонкого и толстого кишечника. Кусочки ткани фиксировали в 10% нейтральном формалине и заливали в парафин. Окраску парафиновых срезов осуществляли гематоксилином и эозином. При микроскопическом исследовании светооптическим способом срезы подвергали микрофотосъёмке.

У интактных животных и животных опытных групп определяли следующие показатели: в плазме крови - активность аспарагиновой (ACT) и аланиновой (АЛТ) аминотрансфераз - методом Райтмана-Френкеля (Reitman S., Frankel S., 1.957), активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) оптимизированным кинетическим методом с использованием набора реактивов LDH "E-D" серии "Витал-Европа", содержание общего билирубина.

В эритроцитах и гомогенатах тканей печени, желудка, тонкого и толстого кишечника определяли уровень малонового диапьдегида (МДА) при спонтанном и железоиндуцированном окислении (Fe-МДА) (Конюхова С.Г., 1989) с последующим расчетом резерва липидов для перекисного окисления [РЛПО=(Ре-МДА-МДА)/МДА) усл. ед.] (Кузьменко Д.И., Лаптев Б.И., 1999), отражающего относительную величину антиокислительной активности среды. В плазме крови определяли активность каталазы (Королюк М.А., 1988).

Измерения биохимических показателей проводились с использованием фотоэлектрокалориметра КФК-2МП и спектрофотометра СФ-46.

Статистическую обработку результатов экспериментальных исследований проводили на персональном компьютере IBM PC / Pentium с использованием пакета прикладных программ Exel 7.0 и Biostat 4.03. Результаты представлены в виде средней арифметической и ошибки её среднеквадратичного отклонения (М±ш), или в виде процента от численности анализируемой группы. Для оценки достоверности различий независимых переменных между группами использовали парный и непарный критерий Стьюдента и критерий соответствия В случае ненормального распределения для оценки достоверности различий между независимыми переменными использовался непараметрический критерий Крускала-Уоллиса. Различия считались достоверными при уровне значимости р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Введение бутадиона в дозе 200 мг/кг приводило через 24 часа к выраженному язвенному поражению слизистой оболочки желудка у всех подопытных животных. При этом общая площадь язв составила 28,0±1,97 мм2, а количество - 20,33±1,35 на одно животное в среднем. У всех подопытных животных наблюдались признаки кровотечения. Площадь глубоких язв с признаками кровотечения и налетом гемосидерина составила 9,67±1,59 мм2, а

их количество - 5,50±0,83 на одно животное. Доля глубоких язв составила 39,80±6,63% по площади и 27,69±5,45% - по количеству.

При светооптическом исследовании обнаруживалась картина множественных эрозий в пределах 2/3 толщи слизистой оболочки. Единичные эрозии достигали собственной пластинки. Кровеносные сосуды подслизистого слоя были расширены и полнокровны. Наблюдался резкий отек подслизистой оболочки в проекции эрозий с полиморфно-клеточной инфильтрацией.

Применение деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг на фоне моделирования язвенного поражения желудка введением бутадиона не оказало значимого антиульцерогенного эффекта. Дополнительное введение деанола ацеглумата в дозе 100 мг/кг оказало достоверное антиульцерогенное действие на слизистую оболочку желудка. Так, общая площадь язвенного поражения и площадь глубоких язв не уменьшались, но общее количество язв снижалось на 35% (с 20,33±1,35 до 13,3±1,08, р<0,05), количество глубоких язв - на 46% (с 5,5±0,83до 3,0±0,45, р<0,05). При этом доля глубоких язв по площади (33,74±6,02%) и по количеству (24,10±4,33%) по сравнению с контролем не менялись (р>0,05). Язвенное поражение слизистой оболочки желудка и признаки кровотечения регистрировались у всех подопытных животных из данной серии.

Гистологически наблюдалась диффузная и очаговая крупноклеточная инфильтрация (лимфоциты, плазмоциты, моноциты) слизистой оболочки желудка, особенно в базальных отделах собственной мышечной пластинки, подслизистой оболочки. В отдельных участках серозной оболочки желудка отмечался отек и крупноклеточная инфильтрация. Мышечная оболочка была интактна.

При увеличении вводимой дозы препарата до 250 мг/кг не было отмечено дальнейшего достоверного уменьшения количества язв, но наблюдалось сокращение общей площади язвенной поверхности на 32% (с 26,3±2,67 до 17,83±1,29 мм2, р<0,05). Кроме того, в отличие от меньшей из изученных доз, достоверно сокращалась площадь глубоких язв по сравнению с показателями контрольной группы (па 31%: с 9,67±1,59 мм 2 до 6,67±0,41 мм 2, р<0,05) и площадь поверхностных язв (на 39%: с 18,30±2,07 мм2 до 11,17±1,43 мм2, р<0,05). Количество глубоких язв составило 3,83±0,48.

При моделировании язвенного поражения желудка введением бутадиона применение деанола ацеглумата в дозе 50 и 100 мг/кг не повлияло на величину изученных биохимических показателей. Однако, при использовании большей из изученных доз препарата наблюдалось снижение активности АЛТ (р<0,05) и ЛДГ (р<0,001) по сравнению с контролем. Достоверное влияние на некоторые показатели ПОЛ также регистрировалось на фоне применения в качестве средства коррекции больших из изученных доз. При этом по сравнению с контролем снижалась активность каталазы в плазме крови (р<0,05), содержание МДА и РеМДА (р<0,001). В эритроцитах также наблюдалось уменьшение

содержания вторичных продуктов ПОЛ (р<0,001). В ткани желудка по сравнению с контролем, содержание МДА возрастало и наблюдалось снижение РЛПО. А в печени, тонкой и толстой кишке содержание вторичных продуктов ПОЛ уменьшалось (р<0,05).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о гастропротекторном действии деанола ацеглумата в условиях индукции язвенного поражения желудка бутадионом, об отсутствии роста маркеров цитолитического синдрома, о некотором снижении активности ПОЛ в плазме, эритроцитах, кишечнике, печени и ее росте в тканях желудка. Причем, деанола ацеглумат проявляет антиульцерогенный эффект в меньших дозах, чем психостимулирующий (Александровский Ю.А. с соавт., 2004, Попов Ю.В., 2006).

В следующем разделе экспериментов было изучено влияние деанола ацеглумата на активность базовых антиульцерогенных препаратов.

На фоне введения мизопростола в дозе 2% от ЬЭ50 общее количество язв в слизистой оболочке желудка снижалось на 79% (с 20,33±1,35 до 4,3±0,2, р<0,001). При этом наблюдалось достоверное снижение количества глубоких язв на 64% (с 5,50±0,83 до 2,0±0,4, р<0,05) и поверхностных - на 86% (с 14,83±1,61 до 2,12±0,70, р<0,001). При этом доля глубоких язв среди общего их количества достоверно не менялась, составив 45,7±8,2% по сравнению с 27,69±5,45 в контроле (р>0,05). Следует отметить, что при введении мизопростола удалось предотвратить язвообразование полностью у 1 животного, у 2 животных не наблюдалось кровотечения.

Гистологически при этом отмечалась умеренная очаговая гиперплазия слизистой оболочки, регистрировалась слабо выраженная очаговая, преимущественно крупноклеточная (лимфоциты, моноциты) инфильтрация, отек подслизистой оболочки и внутренней мышечной оболочки.

Комбинация мизопростола с деанола ацеглуматом в изученных дозах по сравнению с введением мизопростола в виде монотерапии привела к сокращению общего количества язв на 50%. Кроме того, при этом удалось полностью предотвратить образование глубоких язв у всех животных (р<0,05) (рис.2), у 2 животных не наблюдалось и поверхностных эрозивных поражений.

Введение омепразола в дозе 2% от 1Л350 в виде монотерапии позволило достоверно сократить не только общее количество (на 57%, р<0,001) и площадь (на 79%, р<0,001) язвенного поражения желудка, но и площадь глубоких язв (на 81%, р<0,001). Гистологически выявлялась картина поверхностных эрозий, отмечались зоны некроза в пределах слизистой оболочки с сохранением базального слоя клеток, в дне эрозий выявлялся некротический детрит с наложением гемоглобинового пигмента и клеточной инфильтрацией.

100% 807. 807. 407. 207. 07.

Рис.2. Влияние деанола ацеглумата (Д), мизопростола (М), омепразола (О), ранитидина (Р) и их комбинаций на процессы язвообразования в желудке, индуцированные бутадионом (% животных с кровотечением). Примечание: * -достоверность различия р<0,05 по сравнению с данными контрольной группы.

Таблица 3.

Антиульцерогенная активность комбинированного применения омепразола, мизопростола и ранитидина с деанола ацеглуматом _в условиях введения бутадиона (М±ш)__

Условия эксперимента Глубокие язвы Общее кол-во ед. Общая площадь мм2

кол-во ед. площадь мм2

Модель 1. Контроль (бутадион 200мг/кгв/б) 5,5±0,83 9,67±1,59 20,33±1,3 28,0± 1,97

Омепразол 37 мг/кг 5,00±1,03 р>0,05 2,30±0,81 р<0,001 8,83±2,15 р<0,001 5,81±0,94 р<0,001

Омепразол 37 мг/кг +деанола ацептумат 100 мг/кг 0,50±0,22 р<0,001 р1<0,01 1,83± 0,41 р<0,05 р1>0,05 3,83±0,51 р<0,001 р 1 <0,01 9,5±2,46 р<0,05 р1>0,05

Мизопростол 0,09 мг/кг 2,0±0,4 р<0,05 3,9±1,4 р<0,05 4,3±0,2 р<0,001 4,3±1,4 р<0,001

Мизопростол 0,09 мг/кг +деанола ацеглумат 100 мг/кг 0,0±0,0 р<0,001 0,0±0,0 р<0,001 р 1 <0,05 2,17±0,61 р<0,001 р 1 <0,05 3,5±1,31 р<0,001 р1>0,05

Ранитидин 25 мг/кг 4,36±0,77 р>0,05 6,56±1,72 р>0,05 14,6±3,65 р<0,05 17,0±1,62 р<0,05

Ранитидин 25 мг/кг +деанола ацеглумат 100 мг/кг 1,33±0,45 р<0,05 р1<0,05 3,33±1,14 р<0,05 р1>0,05 11,33±1,13 р<0,05 р1>0,05 18,67±1,50 р<0,05 р1>0,05

Примечание: достоверность различия р рассчитана по сравнению с показателями контроля, р1 - с данными соответствующей группы сравнения (монотерапия).

Контроль

5 С кровотечением

□ Без кровотечения

Комбинация омепразола с деанола ацеглуматом в дозе 100 мг/кг позволила достоверно уменьшить количество глубоких язв на 90% по сравнению с монотерапией омепразолом. В среднем площадь глубоких язв не менялась, но при этом у 3 их 6 животных не наблюдалось развития глубоких язв (р<0,05).

Однократное введение ранитидина в дозе 2% от ЬО50 снижало общее количество язв на 28% (р<0,05) и общую площадь язвенного поражения желудка -на 39% (р<0,05), но не оказывает достоверного влияния на количество и площадь глубоких язв. Комбинированное применение ранитидина и деанола ацеппумата в изученных дозах привело к достоверному уменьшению количества глубоких язв как по сравнению с контролем (на 76%, р<0,001), так и с монотерапией ранитидином (на 70%, р<0,05) и площади по сравнению с контролем (на 66%, р<0,05). У 50% животных в группе не наблюдалось признаков внутрижелудочного кровотечения (р<0,05).

Гистологически отмечалась очаговая атрофия слизистой оболочки, на отдельных участках наблюдалась крупноклеточная инфильтрация слизистой, подслизистой оболочки, собственной мышечной пластинки, встречались единичные расширенные лимфатические сосуды с внутрисосудистым стазом лейкоцитов. По сравнению с контрольной серией практически на всем протяжении глубоко расположенные железы были выстланы эпителием с гиперхромным ядром (регенераторный эпителий). Отмечался небольшой отек.

Следует отметить, что при использовании препаратов в виде монотерапии и в виде комбинаций не было выявлено по сравнению с контролем роста активности аминотрансфераз и ЛДГ, расцениваемых, как маркеры цитолитического синдрома. При комбинации омепразола и деанола ацеглумата наблюдался рост содержания МДА в печени и тонкой кишке и рост МДА и РеМДА в ткани желудка. При комбинированном использовании ранитидина и деанола ацеглумата содержание МДА в печени, ткани желудка и кишечника было ниже, чем при монотерапии ранитидином. При комбинации мизопростола с деанола ацеглуматом показатели не отличались от серии с монотерапией.

Учитывая, что при введении бутадиона не воспроизводится поражение кишечника, для более адекватной оценки антиульцерогенной активности изучаемых препаратов мы использовали для моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацин.

На фоне введения индометацина через 5 суток язвообразование в желудке, в тем числе с наличием кровотечения наблюдалось у всех подопытных животных. Площадь глубоких язв составляла в среднем 92% от общей площади поражения. Гистологически в желудке наблюдалась картина язвы с пенетрацией, дно представлено детритом, неспецифической грануляционной тканью с большим количеством сосудов, отдельных тонкостенные с организованными тромбами; разрастание тромбобластов, фиброцитов; грануляционная ткань распространяется под слизистую оболочку в краях язвы; с диффузной полиморфноклеточной инфильтрацией. В проекции дна язвы,

мышечная оболочка истончена, обильно инфильтрирована сегментоядерными лейкоцитами, инфильтрация продолжается в окружающую клетчатку, жировую, здесь же отмечается разрастание грануляционной ткани, с большим количеством сосудов, в отдельных сосудах лейкоцитоз. В слизистой оболочке в краях язвы отмечается явления атрофии, гиперплазии, перестройки по кишечному типу.

Введение деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг привело к достоверному сокращению общего количества язв на 65% ( с 13,54±0,72 до 4,80±0,59, р<0,001), количества глубоких язв - на 87% (с 10,45±0,45 до 1,30±0,30, р<0,001). При этом общая площадь язвенного поражения желудка составила 13,70±2,42мм2). Площадь глубоких язв сокращалась на 70% (с 18,20±2,1 мм2 до 5,56±1,42 мм, р<0,05). Площадь поверхностных язв при этом составила 5,70±0,83 мм2. Выявленные изменения привели к сокращению доли глубоких язв по количеству по сравнению с контролем с 73,4±2,2 до 37,80±5,97% (р<0,05), и по площади - с 85,3±2,07% до 54,5±8,2% (р<0,05).

При увеличении дозы деанола ацеглумата до 100 мг/кг по сравнению с меньшей из изученных доз наблюдалось уменьшение площади глубоких язв на 51% (до 2,75±0,64мм2, р<0,05) и общей площади язвенного поражения на 52% (до 6,55±0,93 мм2). По остальным изученным показателям язвообразования в желудке достоверного отличия между группами не было зарегистрировано. У двух животных не наблюдалось развития глубоких язв (р>0,05).

Таблица 4.

Влияние деанола ацеглумата на процессы язвообразования

в желудке, индуцированные индометацином (М±т)

Показатели Контроль (индомета-цин 5 мг/кг) Деанола ацеглумат

50 мг/кг 100 мг/кг 250 мг/кг

п 13 10 12 10

Общее кол-во язв желудка 13,54±0,72 4,80±0,59* 4,42±0,79* 9,30±1,33*#

Общая площадь язв желудка, мм2 19,79±2,57 13,70±2,42 р>0,05 6,55±0,93 12,13±1,57*#

Количество глубоких язв желудка 10,10±0,45 1,30±0,30* 1,17±0,21* 1,50±0,43*

Площадь глубоких язв желудка, мм2 18,2±2,1 5,56±1,42* 2,75±0,64* 2,10±0,53*

Кол. пов.язв 3,46±0,37 3,50±0,65 3,08±0,67 7,90±1,29*#

Пл.пов.язв, мм2 2,81±0,63 5,70±0,83* 4,75±0,86 12,13±1,57*#

Примечание: *- достоверность различия р<0,05 по сравнению с данными контроля, # - по сравнению с данными меньшей из изученных доз.

Гистологически слизистая оболочка антрального отдела желудка с явлениями умеренной атрофии, поверхностных эрозий, дно их представлено воспалительно некротическим детритом. Собственная мышечная пластинка со

слабовыраженной крупноклеточной и инфильтрацией. Эпителий желез с умеренно гиперхромным ядром, кишечной метаплазией. Слизистая дна желудка без особенностей.

При увеличении дозы деанола ацеглумата до 250 мг/кг не наблюдалось дальнейшего значительного повышения антиульцерогенного эффекта. Так, общее количество язв составило 69% от данных контрольной группы (р<0,05), а общая площадь язвенного поражения - 61% (р<0,05). Количество и площадь глубоких язв составило соответственно 15% и 11,5% от показателей контрольной группы (р<0,05) и не отличалось от серии с использованием деанола ацеглумата в дозе 100 мг/кг, а площадь и количество поверхностных язв возрастало. При этом, однако, доля глубоких язв по количеству сократилась с 34,56±3,84% до 20,12±4,84%, а по площади - с 42,2±6,1% до 24,77±4,03% по сравнению с данными серии с введением деанола ацеглумата в дозе 100 мг/кг. Следует отметить, что полностью развитие язв не предотвращалось, но у 3 животных из серии не наблюдалось глубоких язв (р<0,05).

Дополнительное применение деанола ацеглумата в изученных дозах на индометациновой модели язвообразования привело к снижению активности АЛТ (на 62%, 38% и 77%) и АСТ (на 59%, 29% и 79% соответственно). Содержание билирубина при этом не менялось, а активность ЛДГ снижалась на 18% и 80% при введении препарата в дозе 100 и 250 мг/кг.

Кроме того, в плазме крови наблюдался рост содержания МДА (на 29%) и снижение 13еМДА (на 19%), что привело к уменьшению АОА и РЛПО плазмы при использовании деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг. При увеличении вводимой дозы до 250 мг/кг, напротив, содержание МДА снижалось на 44%, а РеМДА - на 55% по сравнению с контролем. Активность каталазы в плазме крови не отличалась от данных контроля при использовании дозы деанола ацеглумата 50 мг/кг и 100 мг/кг и была ниже на 29% при введении препарата в дозе 250 мг/кг. В эритроцитах при введении деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг содержание МДА и РеМДА было больше контроля на 51% и 28% соответственно (р<0,001). При увеличении дозы до 100 мг/кг - не отличалось, а при использовании 250 мг/кг вновь было ниже контроля на 47% и 39% соответственно (р<0,001), при этом наблюдалась активация каталазы в 2,3 раза (р<0,001) и рост РЛПО на 65% (р<0,05).

В тканях желудка наблюдался рост содержания вторичных продуктов ПОЛ в 2-2,3 раза, в тканях тонкой кишки содержание МДА снижалось на 41% при введении деанола ацеглумата в дозе 250 мг/кг, а в толстой - на 41% и 79% при использовании препарата в дозе 100 и 250 мг/кг..

Таким образом, в условиях моделирования язвенного поражения желудка индометацином деанола ацеглумат проявляет гастропротекторный эффект, не увеличивая активность аминотрансфераз и приводя к росту активности ПОЛ в плазме и эритроцитах при использовании меньших из изученных доз и к его снижению при введении в дозе 250 мг/кг.

На фоне применения омепразола в дозе 37 мг/кг (2% от ЬО50) в виде монотерапии наблюдалось уменьшение общего количества язв в желудке, индуцированных введением индометацина, на 61% (р<0,001). Общая площадь

язвенного поражения при этом также сократилась на 84% (р<0,001). Количество и площадь глубоких язв уменьшились соответственно на 77% (р<0,001)и 84% (р<0,001). Комбинированное применение деанола ацеглумата и омепразола привело к дальнейшему уменьшению общего количества язв -на 61% (р<0,05), количества глубоких язв - на 71% (р<0,05) и площади глубоких язв - на 54% по сравнению с данными монотерапии омепразолом. Уменьшалось и общее количество поверхностных язв на 53% (р<0,05). Общая площадь язвенного поражения желудка при этом не отличались от показателей серии с проведением монотерапии (табл.3). У 42% животных не наблюдалось внутрижелудочного кровотечения (р<0,05).

Роста содержания вторичных продуктов ПОЛ в тканях желудка при комбинированном использовании омепразола и деанола ацеглумата не наблюдалось (рис.3).

200

150 % 100

50 0

■ МДА ВРеМДА DAOA ОРЛПО

Рис. 3. Влияние деанола ацеглумата и омепразола на некоторые показатели ПОЛ в ткани желудка на фоне введения индометацина (в % к данным группы интактных животных). Примечание: *- достоверность различия р<0,05 по сравнению с данными интактных животных, # - с показателями контроля.

Введение мизопростола оказало достоверное влияние на все изученные показатели язвообразования в желудке, индуцированные индометацином. Наблюдалось значительное сокращение общей площади язв - на 70%, площади глубоких язв - на 97%, а также общего количества (на 85%) и количества глубоких язв (на 93%) от данных контроля. У 40% животных предотвращалось образование глубоких язв (р<0,05). На фоне комбинированного использования мизопростола и деанола ацеглумата наблюдалось сокращение общего количества язв на 49%. Количество глубоких язв и их площадь не отличались достоверно от серии с проведением монотерапии мизопростолом, а общая площадь язвенного поражения возрастала (р<0,05). У 50% животных не было отмечено глубоких язв (р<0,05).

Применение ранитидина в дозе 2% от ЫЭ$о не привело к достоверному ограничению процессов язвообразования, индуцированных введением индометацина. При комбинации ранитидина с деанола ацеглуматом в дозе 100 мг/кг было отмечено достоверное уменьшение общего количества язв на 32% (р<0,05), общей площади язв - на 31% (р<0,05), количества глубоких язв - на 73% (р<0,05).

Таблица 5.

Влияние деанола ацеглумата на процессы язвообразования в желудке, индуцированные индометацином (М±ш)

Показатели Контроль Омепаразо л Омепразол +деанола ацеглумат Мизо-простол Мизопростол +деанола _ ацеглумат Ранити- ДИН Ранитидин +деанола ацеглумат

п 13 10 12 10 12 6 12

Общее кол-во язв 13,54±0,72 5,23±0,40* 2,03±0,56*# 4,1±0,66* 2,08±0,3б*# 13,8±0,65 9,17±0,84*#

Общая площадь язв, мм2 19,79±2,57 3,25±0,60* 2,77±0,62* 1,06±0,31* 4,48±0,74*# 14,5±3,0 13,73±1,32*

Количество глубоких язв 10,10±0,45 2,32±0,52* 0,667±0,188*# 0,70±0,24* 0,667±0,225* 9,8±1,3 2,75±0,37*#

Площадь глубоких язв, мм2 18,2±2,1 2,85±0,61* 1,32±0,39*# 0,46±0,27* 0,482±0,215* 10,8±1,2 6,07±0,87*#

Кол-во поверхности. язв 3,46±0,37 3,04±0,45 1,42±0,42*# 3,4±0,6 l^iO^O^S 4,6±1,6 6,42±0,60*

Площадь поверхности, язв, мм2 2,81±0,63 1,53±0,25 1,48±0,44 0,60±0,16* 4,14±0,69*# 4,0±2,13 7,67±0,87*

Примечание: * - достоверность различия р<0,05 по сравнению с данными контроля, # - по сравнению с данными соответствующей серии сравнения (монотерапия).

Кроме того, по сравнению с данными монотерапии ранитидином сокращалась и площадь глубоких язв на 44% (р<0,05). У 2-х животных язвы отсутствовали. При этом гистологически в слизистой оболочке наблюдалась умеренная полиморфноклеточная воспалительная инфильтрация. Подслизистая была отечна с разрастанием сосудов и выраженной полиморфноклеточной инфильтрацией (лейкоциты, моноциты, лимфоциты, гистиоциты) с образованием аттенцированных лимфоидных фолликулов. Мышечная оболочка отечна со слабовыраженной круглоклеточной инфильтрацией.

Экспериментальная модель с введением индометацина позволила воспроизвести язвенное поражение не только желудка, но и кишечника. В тонкой кишке на фоне введения индометацина количество язв достигло 161,1±23,8, а площадь язвенного поражения составила 831,1±76,5 мм2 на одно животное. Применение деанола ацеглумата оказало значительное антиульцеро-генное действие на слизистую оболочку тонкой кишки. При введении деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг общее количество язв сократилось до 2,8±0,73, а площадь - до 5,4±1,44 мм2. Не наблюдалось язвообразования у 3 из 10 животных. При увеличении дозы препарата до 100 мг/кг общее количество язв сократилось до 1,27±0,47, а площадь-до 2,64±0,94 мм2 (р<0,001). При этом у 50% животных не наблюдалось язвенного поражения тонкой кишки. При повышении дозы деанола ацеглумата до 250 мг/кг язвообразование в тонкой кишке полностью предотвращалось.

Таблица 6.

Антиульцерогенная активность омеза, сайтотека, деанола ацеглумата и их комбинации (2% от ЬР50) в тонкой кишке при введении индометацина (М±ш)

Условия п Животных Общее Общая

эксперимента без язв кол-во язв площадь

п % язв, мм2

Контроль 13 0 0% 161,1±23,8 831,1 ±76,5

Деанола ацеглумат 100 мг/кг 12 6 50%* 1,27±0,47* 2,62±0,94*

Омепразол 37 мг/кг 10 1 10% 5,65±2,2* 14,5±3,2*

Омепразол 37 мг/кг + деанола ацеглумат 100 мг/кг 12 6 50%* # 1,75*0,60* 3,8Ш,28*#

Ранитидин 25 мг/кг 6 0 0% 145,0±13,6 330,6±62,3*

Ранитидин 25 мг/кг + деанола ацеглумат 100 мг/кг 12 4 33% 2,50±0,65*# 5,01±1,35*#

Мизопростол 0,09мг/кг 10 2 20% 3,1±0,93* 3,96±0,92*

Мизопростол 0,09 мг/кг + деанола ацеглумат 100мг/кг 12 5 41,6% 1,42±0,43* 2,42±0,73*

Примечание: * - достоверность различия р<0,05 относительно данных контрольной группы животных, # - относительно показателей соответствующей серии сравнения (монотерапия).

В толстой кишке на фоне введения индометацина общее количество язв через 5 суток наблюдения составило 28,2±2,6, а их средняя площадь достигла 92,9±9,8 мм2. При введении деанола ацеглумата в дозе 50 мг/кг общее количество язв и их площадь достоверно не менялись, составив соответственно 25,2±2,59 и 81,61 ±9,04 мм2. На фоне использования дозы препарата 100 мг/кг общее количество язв сократилось до 11,0±1,27 (р<0,05), а их совокупная площадь в среднем на одно животное - до 32,7±6,25 мм2(р<0,05).

На фоне введения большей из изученных доз (250 мг/кг) наблюдалось дальнейшее уменьшение количества язв в толстой кишке до 9,1±0,88, а их площади — до 20,72±1,96 мм2 как по сравнению с контролем, так и с показателями при использовании меньших из изученных доз (р<0,05).

Таким образом, деанола ацеглумат демонстрирует гастропротекторный и существенный энтеропротекторный эффект при моделировании язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином.

На следующем этапе эксперимента была оценено влияние деанола ацеглумата на энтеропротекторную эффективность представителей стандартных антиульцерогенных групп лекарственных средств: мизопростола, омепразола и ранитидина.

Таблица 7.

Антиульцерогенная активность омепразола, мизопростола, деанола ацеглумата и их комбинации в толстой кишке при введении индометацина

(М±ш)

Условия эксперимента п Животных без язв Общее кол-во Общая площадь

п %

Индометацин 5 мг/кг (контроль) 13 0 0% 28,2±2,6 92,9±9,8

Деанола ацеглумат 100мг/кг 12 0 0% ИДИ ,27* 32,7±6,25*

Омепразол 37мг/кг 10 1 17% 8,43±4,1* 10,2±2,8*

Омепразол 37 мг/кг + деанола ацеглумат 100мг/кг 12 6 50%*# 1,83±0,56*# 4,25±1,39*

Ранитидин 25 мг/кг 6 0 0% 28,1±4,3 85,5±15,0

Ранитидин 25 мг/кг + деанола ацеглума 100мг/кг 12 0 0% 25,7±3,3 43,29±7,59 *

Мизопростол 0,09 мг/кг 10 0 0% 3,80±0,57* 5,46±1,34*

Мизопростол 0,09мг/кг + деанола ацеглумат 1 ООмг/кг 12 2 16,7% 3,42±0,53* 8,14±1,25*

Примечание: * - достоверность различия р<0,05 относительно данных контрольной группы животных, # - относительно показателей серии сравнения (монотерапия).

Введение омепразола в дозе 2% от Ь05о предотвратило язвообразование в тонком кишечнике у 1 животного. Количество язв снижалось на 97% и составило 5,65±2,2, а их площадь - до 14,5±3,2 мм2. При комбинированном

использовании омепразола с деанола ацеглуматом в дозе 100 мг/кг количество язв в тонкой кишке сократилось на 99% (до 1,75±0,60), а площадь - на 99,5% (до 3,81±1,28 мм2). В толстой кишке на фоне введения омепразола количество язв уменьшалось на 68% по ¿равнению с контрольной группой, средняя площадь - на 89%. При комбинированном использовании омепразола с деанола ацеглуматом в слизистой оболочке толстой кишки также наблюдалась позитивная динамика: количество язв снизилось на 93%, а их площадь -на 94%. У 50% животных предотвращалось язвообразование.

Применение мизопростола в изученной дозе позволяло в значительной степени ограничить количество и площадь язв в тонкой и толстой кишке на фоне введения индометацина. Комбинированное применение мизопростола и деанола ацеглумата не внесло достоверных изменений изученных показателей по сравнению с монотерапией мизопростолом (табл.7)..

Ранитидин в изученной дозе уменьшал площадь язвенного поражения тонкой кишки в меньшей степени, чем омепразол или мизопростол. Однако при комбинации ранитидина с деанола ацеглуматом показатели уже были сравнимы с антиульцерогенным эффектом препаратов сравнения. Так, количество язв уменьшилось до 2,50±0,65 (р<0,001), а площадь-до 5,01±1,35 мм2. В толстой кишке введение ранитидина не повлияло на процессы язвообразования, но при комбинации с деанола ацеглуматом наблюдалось достоверное сокращение общей площади язв (табл.7).

На фоне комбинированного применения деанола ацеглумата и ранитидина в условиях индукции язвообразования индометацином содержание вторичных продуктов ПОЛ в крови, тканях желудка, печени, тонкой и толстой кишки не превышало показатели серии с введением ранитидина в виде монотерапии.

При комбинированном использовании омепразола, мизопростола, ранитидина и деанола ацеглумата не наблюдалось роста активности АЛТ, ACT и ЛДГ в плазме крови подопытных животных (р>0,05).

ВЫВОДЫ

1. Деанола ацеглумат в дозах 50, 100 и 250мг/кг проявляет антиульце-рогенную активность на фоне введения бутадиона, уменьшая общее количество язв желудка, количество и площадь глубоких язв, приводя к снижению активности аминотрансфераз, а в дозах 100 и 250 мг/кг - к снижению содержания малонового диальдегида в плазме крови, эритроцитах, в ткани печении увеличению в ткани желудка

2. Деанола ацеглумат проявляет гастро- и энтеропротекторную активность при индукции язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином, уменьшая количество и площадь язв желудка, тонкой и толстой кишки, снижая частоту язвообразования в тонкой кишке на фоне уменьшения активности маркеров цитолиза, снижения содержания малонового диальдегида в плазме крови, эритроцитах, в ткани печени, тонкой и толстой кишки.

3. Комбинированное применение деанола ацеглумата и мизопростола позволяет уменьшить общее количество и полностью предотвратить развитие глубоких язв и внутрижелудочного кровотечения в условиях моделирования язвенного поражения желудка введением бутадиона, в отличие от монотерапии мизопростолом, и не оказывает существенного эффекта на процессы язвообразования в желудке и кишечнике по сравнению с монотерапией мизопростолом при введении индометацина.

4. Комбинация омепразола и деанола ацеглумата в условиях индукции процессов язвообразования бутадионом и индометацином способствует повышению антиульцерогенного эффекта по сравнению с монотерапией омепразолом, что проявляется в уменьшении общего количества язв и количества глубоких язв в желудке, уменьшении количества и площади язв и частоту язвообразования в тонкой и толстой кишке.

5. Комбинированное применение деанола ацеглумата и ранитидина в условиях моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином и бутадионом оказывает более выраженное антиульцерогенное действие, чем монотерапия ранитидином в изученных дозах, приводя к снижению количества глубоких язв, уменьшению площади глубоких язв.

6. Комбинированное применение омепразола, мизопростола и ранитидина с деанола ацеглуматом в условиях язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином и бутадионом не приводит к увеличению активности маркеров цитолитического синдрома.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Выявленный гастро- и энтеропротекторный эффект деанола ацеглумата является экспериментальным обоснованием дальнейшего клинического исследования его антиульцерогенного действия в комплексной профилактике и лечении эрозивно-язвенных поражений желудочно-кишечного тракта.

Для усиления гастро- и особенно энтеропротекторного эффекта омепразола и ранитидина целесообразно их комбинированное применение с деанола ацеглуматом.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сравнительное исследование процессов язвообразования желудочно-кишечного тракта, индуцированных бутадионом и индометацином / О.М. Кияйкина, A.B. Зорькина, О.П. Гришкина, К.Г. Сурков // Материалы Всеросс. науч.-практ. конф., поев, памяти проф. Я.В.Костина.-Саранск,-2005,- С.58-59.

2. Сравнительная характеристика ульцерогенного влияния бутадиона на желудочно-кишечный тракт в различных возрастных группах в эксперименте / A.B. Зорькина, Ю.А. Захватова, О.М. Кияйкина, Е.В. Назарова // Тезисы межрегиональной научно-практической конференции,

посвященной 40-летию медицинского факультета Мордовского государственного университета имени Н.П.Огарева. - Саранск. - 2007. -С.60-61.

3. Исследование антиульцерогенного действия глютабианца / О.М. Кияйкина, Е.В. Ивянская, С.Я. Скачилова, A.B. Зорькина, Ю.А. Захватова // Тезисы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». -Москва. - 2007. - С. 114

4. Влияние некоторых нестероидных противовоспалительных средств на процессы липопероксидации в эксперименте / Ю.А. Захватова, В.В. Ведяшкина, О.М. Кияйкина, Е.В. Ивянская // Тезисы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-2007.-С.824-825.

5. Влияние глютабианца и мексидола на процессы индуцированного ульцерогенеза при аллоксановом сахарном диабете / Ивянская Е.В., Ямашкина Е.И.. Кияйкина О.М., Куняева Т.А. //Материалы XVI Российского симпозиума по хирургической эндокринологии «Современные аспекты хирургической эндокринологии».- Саранск.-2007.-С. 92-93.

6. Исследование антиульцерогенного действия глютабианца при моделировании язвенного поражения желудка бутадионом / Зорькина А.В,, Скачилова С.Я., Кияйкина О.М., Стеньшина A.B., Куняева Т.Н., Ивянская Е.В. И Материалы Российской научной конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения С.П.Боткина. - Санкт-Петербург. - 2007- С.39-40.

7. Антиульцерогенность некоторых антиоксидантов / Зорькина A.B., Захватова Ю.А., Кияйкина О.М., Назарова Е.В. // Казанский медицинский журнал. Т. 88. №4,- 2007. -С.94-95.

8. Влияние глютабианца и мексидола на процессы индуцированного ульцерогенеза при аллоксановом сахарном диабете / Ивянская Е.В.. Ямашкина Е.И., Кияйкина О.М., Куняева Т.А. // Материалы XVI Российского симпозиума по хирургической эндокринологии. - Саранск. -2007.-С. 92-93.

9. Профилактика желудочных кровотечений при язвообразовании, индуцированном индометацином в эксперименте / Ю.А. Захватова, A.B. Зорькина, О.М. Кияйкина// Материалы научно-практической конференции ГОУ ВПО «Красноярская государственная медицинская академия». -Красноярск. - 2008. - С.198-199.

Подписано в печать 20.01 2009г. Бумага офсетная. Формат 60x84 1/16. Гарнитура Тайме. Печать способом ризографии. Усл. печ. л. 1,48. Уч.- изд. л. 1,83. Тираж 100 экз. Заказ № 12.

Отпечатано с оригинала-макета заказчика в ООО «Референт» 430000, г. Саранск, пр. Ленина, 21. тел. (8342) 48-25-33

Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) - одна из наиболее широко применяемых в клинической практике групп лекарственных средств (Насонова В.А., 1994; Brooks P.M., 1998). Несмотря на то, что их использование ассоциируется с широким спектром побочных реакций, ' наиболее распространенными из которых являются НПВП-индуцированные язвенные поражения желудка и кишечника (Ивашкин В.Т., 1994; Насонов Е.Л., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Brooks P.M., Day R.O., 1993; Bjorkman D.J., Kimmey M.B., 1995; Griffin M.R., 1991; Henry D. et al., 1996), применение НПВП зачастую не может быть прекращено.

Препараты для терапии НПВП-индуцированных гастропатий включают в себя три основные группы лекарственных средств - синтетическими аналогами простагландинов (мизопростол), ингибиторами протонной помпы г и блокаторами Н2-гистаминовых рецепторов (Hawkey C.J., Yonemans N.D., 1998; Leandro G. et al., 1998; Schmassmann A., 1998). Однако антиульцерогенная эффективность омепразола зависит от инфицированности слизистой оболочки H.pylori (Ekstrom P. et al., 1996, Graham D. et all, 2002). Экономические аспекты, побочные эффекты и неудобная схема применения ограничили широкое использование мизопростола (Муравьев Ю.В., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Silverstein F.E., 1995). Эффективность ингибиторов Н2-гистаминовых рецепторов при НПВП-гастропатиях невысока. Кроме того, эти препараты наиболее эффективны в профилактике развития язв двенадцатиперстной кишки (Ekstrom P. et al., 1996). В то время как язвенное поражение желудочно-кишечного тракта при воздействии НПВП развивается чаще в верхних отделах.

Все вышесказанно обуславливает актуальность дальнейшего поиска наиболее оптимальных методов защиты желудочно-кишечного тракта на фоне приема НПВП (Насонов Е.Л., 2000; Каратеев А.Е., 2005; Wallace J.L., GranferD.N., 1992; Lain L., 1996).

Учитывая участие в патогенезе гастродуоденальных осложнений свободнорадикальных процессов и данные о противоязвенной эффективности ряда лекарственных средств и соединений с антиоксидантным типом действия (Подопригорова В.Г., 1991; Яковлев А.А., 1992; Воронина Т.А., 1997; Цибулькина В.Н., 1999; Ямашкина Е.И., 2002; Зорькин В.И., 2003; Куняева Т. А., 2005; Гришкина О.П., 2006), представляется целесообразным дальнейшее исследование антиульцерогенного эффекта нового препарата деанола ацеглумата, проявляющего антиоксидантное и цитопротекторное действие в условиях ряда патофизиологических состояний (Скоробогатова JI.H., 2002; Госткина И.П., 2003).

Работа является разделом комплексной программы исследований Мордовского государственного университета им. Н.П.Огарева «Фармакологическая коррекция повреждений, возникающих при гипоксических, токсических и радиационных воздействиях». Номер государственной регистрации темы 01200004103.

Цель работы: исследование антиульцерогенной эффективности деанола ацеглумата и его комбинированного применения с омепразолом, мизопростолом и ранитидином в условиях индуцирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина в эксперименте.

В ходе выполнения работы решались следующие задачи:

1. Изучение антиульцерогенного действия деанола ацеглумата при язвенном поражении желудочно-кишечного тракта, вызванном введением бутадиона и индометацина в эксперименте.

2. Исследование влияния деанола ацеглумата на антиульцерогенную активность омепразола, мизопростола и ранитидина в ' условиях моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина.

2. Изучение влияния деанола ацеглумата на некоторые биохимические показатели и процессы перекисного окисления липидов крови и тканей в условиях введения бутадиона и индометацина.

Научная новизна работы.

Впервые показана гастропротекторная активность деанола ацеглумата в условиях индуцирования язвенного повреждения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона, а также гастро- и энтеропротекторная активность - при введении индометацина.

Отмечена более высокая антиульцерогенная активность комбинированного применения омепразола и деанола ацеглумата по сравнению с омепразолом на фоне введения бутадиона. Показан рост гастропротекторной и энтеропротекторной активности омепразола при комбинированном введении с деанола ацеглуматом на фоне язвенного поражения желудочно-кишечного тракта, индуцированного индометацином.

Показан рост антиульцерогенного действия мизопростола при комбинированном введении с деанола ацеглуматом в виде уменьшения общего количества и предотвращения развития внутрижелудочного кровотечения в условиях моделирования язвенного поражения желудка 1 введением бутадиона.

Выявлен более выраженный антиульцерогенный эффект при комбинированном применении ранитидина с деанола ацеглуматом, чем при монотерапии ранитидином, на фоне эрозивно-язвенного поражения желудочно-кишечного тракта бутадионом и индометацином.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.Деанола ацеглумат оказывает антиульцерогенное действие в условиях индуцирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта бутадионом и индометацином, и не приводит к росту маркеров цитолитического синдрома.

2.Дополнительное применение деанола ацеглумата повышает гастро- и энтеропротекторный эффект омепразола и ранитидина при моделировании язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением бутадиона и индометацина.

3. Комбинированное использование мизопростола и деанола ацеглумата способствует повышению антиульцерогенной активности мизопростола на фоне введения бутадиона.

Практическая ценность:

Полученные данные являются экспериментальным обоснованием целесообразности комбинирования стандартных средств антиульцерогенной терапии язвенного поражения желудочно-кишечного тракта, индуцированного нестероидными противовоспалительными средствами, с деанола ацеглуматом.

Апробация работы

Результаты проведенного исследования и основные положения диссертации доложены на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти проф. Я.В.Костина (Саранск, 2005); на межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 40-летию медицинского факультета Мордовского государственного университета имени Н.П.Огарева (Саранск, 2007); на XIV национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007); на XVI Российском симпозиуме по хирургической эндокринологии «Современные аспекты хирургической эндокринологии» (Саранск, 2007); на Юбилейной российской научной конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения С.П.Боткина (Санкт-Петербург, 2007); на VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2007); на научно-практической конференции ГОУ ВПО «Красноярская государственная медицинская академия им. Проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» «Актуальные вопросы современной хирургии» (Красноярск, 2008).

По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 1 работа в издании, рекомендованном ВАК.

Структура и объем работы

ВЫВОДЫ

1. Деанола ацеглумат в дозах 50, 100 и 250мг/кг проявляет антиульце-рогенную активность на фоне введения бутадиона, уменьшая общее количество язв желудка, количество и площадь глубоких язв, приводя к снижению активности аминотрансфераз, а в дозах 100 и 250 мг/кг - к снижению содержания малонового диальдегида в плазме крови, эритроцитах, в ткани печени и увеличению в ткани желудка

2. Деанола ацеглумат проявляет гастро- и энтеропротекторную активность при индукции язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином, уменьшая количество и площадь язв желудка, тонкой и толстой кишки, снижая частоту язвообразования в тонкой кишке на фоне уменьшения активности маркеров цитолиза, снижения содержания малонового диальдегида в плазме крови, эритроцитах, в ткани печени, тонкой и толстой кишки.

3. Комбинированное применение деанола ацеглумата и мизопростола позволяет уменьшить общее количество и полностью предотвратить развитие глубоких язв и внутрижелудочного кровотечения в условиях моделирования язрзнного поражения желудка введением бутадиона, в отличие от монотерапии мизопростолом, и не оказывает существенного эффекта на процессы язвообразования в желудке и кишечнике по сравнению с монотерапией мизопростолом при введении индометацина.

4. Комбинация омепразола и деанола ацеглумата в условиях индукции процессов язвообразования бутадионом и индометацином способствует повышению антиульцерогенного эффекта по сравнению с монотерапией омепразолом, что проявляется в уменьшении общего количества язв и количества глубоких язв в желудке, уменьшении количества и площади язв и частоту язвообразования в тонкой и толстой кишке.

5. Комбинированное применение деанола ацеглумата и ранитидина в условиях моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином и бутадионом оказывает более выраженное антиульцерогенное действие, чем монотерапия ранитидином в изученных дозах, приводя к снижению количества глубоких язв, уменьшению площади глубоких язв.

6. Комбинированное применение омепразола, мизопростола и ранитидина с деанола ацеглуматом в условиях язвенного поражения желудочно-кишечного тракта индометацином и бутадионом не приводит к увеличению активности маркеров цитолитического синдрома.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Выявленный гастро- и энтеропротекторный эффект деанола ацеглумата является экспериментальным обоснованием дальнейшего клинического исследования его антиульцерогенного действия в комплексной профилактике и лечении эрозивно-язвенных поражений желудочно-кишечного тракта.

Для усиления гастро- и особенно энтеропротекторного эффекта омепразола и ранитидина целесообразно их комбинированное применение с деанола ацеглуматом.