иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких

Теплова, Надежда Владимировна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Теплова, Надежда Владимировна Томск 2012 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.03

Автореферат диссертации по медицине на тему иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких

На правах рукописи

Теплова Надежда Владимировна

ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ КЛЕТОЧНОЙ АУТОТЕРАПИИ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ

14.03.03 - патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 8 НОЯ 2012

Томск-2012

005054828

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научные руководители:

доктор медицинских наук, Уразова

профессор Ольга Ивановна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор, профессор

кафедры морфологии и общей патологии Хлусов

ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России Игорь Альбертович

доктор медицинских наук, профессор,

заведующий лабораторией иммунофармакологии Шерстобоев

ФГБУ НИИ фармакологии СО РАМН, г. Томска Евгений Юрьевич

Ведущая организация: ФГБУ Новосибирский НИИ туберкулеза Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

диссертационного совета Д 208.096.01 ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России по адресу: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России

Защита состоится

часов на заседании

Автореферат разослан «_»

2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время отмечается выраженная тенденция к росту числа распространенных деструктивных форм туберкулезной инфекции, характеризующихся тяжелым течением, склонностью к формированию множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) микобактерий туберкулеза к основным противотуберкулезным препаратам (ПТП) и высоким процентом летальных исходов [Филинюк О. В., 2011; Jeon D. S. et al., 2011; Wells С. D., 2010].

Развитие и прогрессирующее течение туберкулеза во многом связывают с дефектом антигенспецифического иммунного Thl-ответа [Orme I. M., 2011; Jacobsen M. et al., 2010; Гунтупова JI. Д. и соавт., 2007]. В последние годы существенную роль в иммунопатогенезе туберкулеза легких (ТБЛ) отводят нарушению функциональной активности популяции антигенпрезентирующих клеток (АПК), основными представителями которой являются макрофаги и дендритные клетки (ДК). По современным представлениям, функция АПК заключается в распознавании и презентации антигена, а также поляризации специфического иммунного ответа и поддержании толерантности к аутоантигенам [Кетлинский С. А., Симбирцев А. С., 2008; Steiman R. M., Banchereau J., 2007; Scott К. et al., 2005]. Изменение функциональных свойств макрофагов и ДК при туберкулёзной инфекции обусловлено прямым влиянием антигенов микобактерий и нарушениями цитокинового баланса в результате гиперпродукции ТЬ2-ассоциированных и иммуносупрессорных цитокинов (IL-10, трансформирующего фактора роста (TGF) ß) [Сахно Л. В., Черных Е. Р., 2012; Remoli M. Е. et al., 2011; Горлова Е. Е„ 2010; Щебляков Д. В. и соавт., 2010; Tourret M. et al., 2010; Кетлинский С. А., Симбирцев А. С., 2008]. Следствием этого становится запуск каскада реакций, направленных на угнетение активности клеточного звена иммунного ответа, что приводит к формированию вторичной иммунологической недостаточности (ВИН) [Не X. Y. et al., 2010; Darrasse-Jèze G. et al., 2009; Verreck F. A. et al., 2004]. Признаки ВИН при ТБЛ выявляются как на ранних этапах развития заболевания, так и на фоне применения ПТП, что, несомненно, диктует необходимость включения мероприятий по иммунокоррекции в стандартную программу лечения больных ТБЛ [Васильева О. А. и соавт., 2010; Кононова Т. Е. и соавт., 2010; Пальцев М. А., 2004; Казимирский А. Н., 2003]. Однако практикуемое во фтизиатрии индивидуально необоснованное назначение иммуномодулирующих препаратов может оказывать не только позитивный иммуностимулирующий эффект, но и в ряде случаев прямо противоположное негативное действие. В связи с этим все чаще речь идет о назначении иммунотропных препаратов с учетом индивидуальной иммунореактивности пациента и курса ПТП, или, иными словами, — внедрении персонифицированных подходов к лечению [Новицкий В. В. и соавт., 2009; Vogiatzi P. et al., 2006].

иммунокомпетентных клеток путем устранения дефекта антигенпрезентирующей функции АПК и дефицита иммунорегуляторных цитокинов. Принцип этого вида иммуномодулирующей терапии заключается в переносе клеточно-опосредованного иммунного ответа на антиген при помощи живых иммунокомпетентных клеток или их субпопуляций, активированных in vitro [Guan Н. et al., 2012; Mesiano G. et al., 2012; Alenzi F. G. et al., 2011; Shin J. H. et al., 2011; Banchereau A. K. et al, 2005; Розенберг С. А., 2002]. Данный подход оказался перспективным для индукции противоопухолевого иммунного ответа [RU №2392946; RU №2309753; RU №2262941; US №2348418; US №2634625].

Показано, что разрешенная к применению в клинической практике на территории Российской Федерации [разрешение ФС №2011/346 от 28.10.2011 г.; патент RU №2372936] медицинская технология «Аутогемотерапия на основе антиген-активированных дендритных клеток в лечении больных туберкулезом легких», основанная на реинфузии собственных (аутологичных) изолированных из крови мононуклеарных лейкоцитов после их «обучения» в присутствии антиген-активированных ДК и активации рекомбинантным IL-2 in vitro, оптимизирует лечение больных ТБЛ. Однако закономерно возникает вопрос о том, каковы же конкретные механизмы иммуномодулируклцего действия клеточной аутотерапии при ТБЛ.

Цель исследования: выявить особенности и патогенетические факторы иммуномодулируклцего эффекта реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов крови у больных туберкулезом легких.

Задачи исследования:

1. Оценить CD-субпопуляционный состав, активность пролиферации и апоптоза лимфоцитов периферической крови и секреции цитокинов (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-y) in vitro у больных с впервые выявленным инфильтративным и диссеминированным лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым туберкулезом легких до и на фоне лечения.

2. Выявить общие закономерности и особенности изменений CD-субпопуляционного состава, показателей пролиферации и апоптоза лимфоцитов крови и цитокиновой секреции in vitro у больных туберкулезом легких через 1,5 месяца после базовой химиотерапии и комплексного лечения с использованием клеточной аутотерапии.

Научная новизна исследования. Впервые у больных с различными клиническими формами (инфильтративный, диссеминированный) туберкулеза легких (ТБЛ) в зависимости от лекарственной чувствительности М. tuberculosis проведена оценка CD-субпопуляционного состава (CD3+, CD4+, CD8 , CD16+/CD56+, CD19+), пролиферации и апоптоза лимфоцитов периферической крови и секреции цитокинов (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-y) через 1,5 месяца лечения противотуберкулезными препаратами (ПТП) в комплексе с клеточной терапией изолированными из крови аутологичными мононуклеарными

лейкоцитами после их «обучения» в присутствии антиген-активированных дендритных клеток (ДК) и активации рекомбинантным IL-2 in vitro.

Показано, что изменения CD-субпопуляционного состава лимфоцитов крови при диссеминированном и лекарственно-устойчивом ТБЛ сочетаются с активацией их апоптоза и проявляются дефицитом CD3+, CD4+, CD8+ Т-лимфоцитов и CD16+/CD56+ NK-клеток. Вместе с этим, при лекарственно-чувствительном ТБЛ дефицит CD8+ Т- и NK-клеток в крови формируется при сохранении равновесия апоптоза и пролиферации лимфоцитов. Выявлено, что дисбаланс секреции цитокинов in vitro у больных ТБЛ определяется спонтанной и индуцированной гиперпродукцией TL-6, IL-10, TNF-a в условиях дефицита индуцированной секреции ТЫ-ассоциированных цитокинов - IL-2 и IFN-y. На фоне базовой терапии, как без, так и в сочетании с клеточной аутотерапией, динамика показателей апоптоза лимфоцитов крови, секреции IL-6 и TNF-a in vitro у больных ТБЛ носит сходный (отрицательный) характер. Между тем, снижение показателей апоптоза лимфоцитов крови у больных ТБЛ на фоне базовой химиотерапии сопряжено с уменьшением, а на фоне комплексной терапии — с увеличением абсолютного количества клеток в состоянии пролиферации. Кроме того, применение в течение 1,5 месяцев только базовой терапии ПТП при всех вариантах течения заболевания усугубляет дефицит индуцированной секреции in vitro IFN-y при повышении спонтанной продукции противовоспалительных цитокинов с ТЫ-супрессорной активностью (IL-4 и IL-10). Применение же клеточной аутотерапии в комплексе с базовыми ПТП сопровождается восстановлением субпопуляционного состава Т-лимфоцитов крови (у больных диссеминированным и лекарственно-чувствительным ТБЛ) и показателей секреции in vitro IL-2, IL-10, IFN-y, TNF-a и IL-6. При этом у больных инфильтративным и лекарственно-устойчивым ТБЛ отмечается снижение (относительно нормальных значений) числа CD16+/CD56+ NK-клеток и (при инфильтративной и диссеминированной формах заболевания) CD19+ В-лимфоцитов.

В целом полученные данные свидетельствуют о том, что иммуномодулирующий эффект курсовой реинфузии аутологичных мононуклеарных лейкоцитов, индуцированных in vitro антиген-активированными ДК и рекомбинантным IL-2, у больных ТБЛ связан с восстановлением баланса секреции про- и противовоспалительных цитокинов, подавлением апоптоза и активацией пролиферации лимфоцитов крови, а также перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения числа основных CD-субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+).

аутологичной вакцины для лечения туберкулеза» (№2372936 от 20 ноября 2009 г.). Результаты оценки CD-популяционного состава, пролиферации и аиоптоза лимфоцитов периферической крови и секреции про- и противовоспалительных цитокинов in vitro обосновывают иммуностимулирующий эффект клеточной аутотерапии на клеточное звено иммунного ответа у больных с различными клиническими формами ТБЛ (инфильтративный и диссеминированный) с лекарственной чувствительностью и устойчивостью возбудителя к ПТП и возможность ее использования в комплексе со специфической химиотерапией для оптимизации лечения больных ТБЛ.

Положения, выносимые на защиту:

1. У больных туберкулезом легких (ТБЛ) гиперпродукция TNF-a, IL-6, IL-10 и индуцированная гипосекреция IL-2 и IFN-y мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro сочетаются с дефицитом Т-лимфоцитов (при диссеминированном и лекарственно-чувствительном ТБЛ) и NK-клеток в крови и увеличением числа лимфоцитов в состоянии апоптоза (при диссеминированном и лекарственно-резистентном ТБЛ). После 1,5 месяцев базовой химиотерапии без и в комплексе с клеточной аутотерапией у больных ТБЛ активность апоптоза лимфоцитов и секреции провоспалительного цитокина IL-6 in vitro снижается относительно исходного уровня, при этом в большей степени - при комплексном лечении.

2. Применение на фоне стандартного лечения клеточной аутотерапии у больных ТБЛ обеспечивает восстановление секреции IL-2, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-y, субпопуляционного состава Т-клеток крови и повышение активности пролиферации лимфоцитов. Напротив, через 1,5 месяца только базовой химиотерапии у больных ТБЛ вне зависимости от клинической формы и лекарственной чувствительности возбудителя дефицит индуцированной секреции IFN-y мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro усугубляется, подавляется спонтанная продукция TNF-а при повышении базальной секреции цитокинов с Thl-супрессорной активностью (IL-4, IL-10) и уменьшении абсолютного количества лимфоцитов в состоянии пролиферации.

3. В основе иммуномодулирующего эффекта реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов у больных ТБЛ лежит восстановление баланса секреции про- и противовоспалительных цитокинов с нормализацией продукции основных Thl-регуляторов - IL-2 и IFN-y, подавление апоптоза и активация пролиферации лимфоцитов крови с перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения численности Т-лимфоцитов.

Реализация и апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на конференциях молодых учёных «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2009» (Санкт-Петербург, 2009) и «И Архангельская международная медицинская научная конференция студентов и молодых учёных - 2009» (Архангельск, 2009), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии - междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине - 2009» (Курск, 2009).

Исследования проведены при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках Федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007 - 2013 годы» (ГК №16.512.11.2046 «Разработка комплекса молекулярно-генетических маркеров дизрегуляции иммунного ответа на Mycobacterium tuberculosis для оптимизации диагностики и коррекции вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких», руководитель - профессор О.И. Уразова) и РФФИ (11-04-98057-р «Разработка комплекса иммунодиагностических биомаркеров для оптимизации лечения больных туберкулезом легких», руководитель — профессор О.И. Уразова).

Внедрение. Результаты работы применяются в учебном процессе кафедр патофизиологии, фтизиатрии и пульмонологии, иммунологии и аллергологии ГЪОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России для студентов лечебного, педиатрического и медико-биологического факультетов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ, из них 3 в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ, 1 патент.

Объём н структура работы. Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырёх глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 8 рисунками и 8 таблицами. Библиографический указатель включает 267 источников, из которых 128 отечественных и 139 зарубежных авторов.

Личное участие автора. Автор принимал непосредственное участие в разработке идеи, дизайна и планировании исследования. Результаты достигнуты, проанализированы и обобщены в выводах и положениях лично автором.

ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Общая характеристика клинического материала

В основу настоящей работы положены результаты комплексного клинико-лабораторного обследования 65 больных с впервые выявленным туберкулезом легких (ТБЛ) (54 мужчин и 11 женщин в возрасте от 18 до 55 лет, средний возраст - 42 года). Пациенты находились на стационарном лечении в Томской областной клинической туберкулёзной больнице (гл. врач — канд. мед. наук Г. В. Янова) во фтизиотерапевтических отделениях №1 (зав. отд. — О. И. Новосельцева), №2 (зав. отд. — Т. 3. Малиновская).

Диагноз ТБЛ устанавливали на основании клинической картины заболевания, рентгенологического исследования легких, данных микроскопического и бактериологического исследования мокроты.

Инфильтративный туберкулез легких (ИТБЛ) был диагностирован у 53 (81,54%) пациентов и характеризовался на рентгенограмме наличием одной или нескольких неоднородных теней туберкулезного инфильтрата диаметром не более 4 см. Диссеминированный туберкулез (ДТБЛ) был выявлен у 12 (18,46%) больных, рентгенологическим признаком которого являлось наличие в легких

мелких и среднеочаговых изменений неоднородной структуры ограниченной протяженности в пределах двух верхних долей легких.

Возбудитель туберкулеза выявлялся методом прямой световой микроскопии мазка мокроты, окрашенного по Цилю-Нильсену, а также методом люминесцентной микроскопии с использованием флуорохромов (аурамина). Бактериовыделение у больных ТБЛ регистрировалось в 100% случаев. Для определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis к противотуберкулезным химиопрепаратам (методом абсолютных концентраций) производили посев мокроты на плотные питательные среды Левенштейна-Йенсена и Финн-2. Исследования проводились в бактериологических лабораториях Томской областной туберкулезной клинической больницы (гл. врач - канд. мед. наук Г.В. Янова) и Томского областного противотуберкулезного диспансера (гл. врач - С. П. Мишустин).

Лекарственно-устойчивый ТБЛ был диагностирован у 20 (30,77%) пациентов, лекарственно-чувствительный - у 45 (69,23%).

Критериями исключения пациентов из исследования являлись: возраст менее 18 или более 55 лет; выраженный интоксикационный синдром; дефицит массы тела пациента более 30%; выраженная хроническая декомпенсированная сердечно-сосудистая, дыхательная, печеночная, почечная недостаточности; терминальное состояние больного; декомпенсированный сахарный диабет; злокачественные новообразования и заболевания крови; анемический синдром; психические расстройства; беременность; системные аутоиммунные заболевания; индивидуальная непереносимость компонентов клеточной аутогемотерапии, выявленная в процессе её проведения; отсутствие информированного согласия пациента и его отказ от участия в исследовании.

Согласно целям исследования все пациенты с ТБЛ были разделены на две группы (табл. 1).

Группы сравнивали между собой с учетом клинической формы ТБЛ и варианта чувствительности возбудителя к препаратам базовой терапии. Достоверных внутригрупповых различий исследуемых параметров у пациентов мужского и женского пола выявлено не было. Кроме того, сравнение проводили с группой здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту, не имеющих в анамнезе хронических инфекционных заболеваний, аллергических реакций, с частотой заболеваемости острыми респираторными вирусными и бактериальными инфекциями не чаще 2-3 раз в год.

Все пациенты с ТБЛ были обследованы до назначения терапии при поступлении на стационарное лечение, а также через 1,5 месяца с момента начала противотуберкулезной терапии, что соответствовало 2 неделям с момента окончания курса клеточной аутотерапии.

В течение 1,5 месяцев все пациенты получали стандартный курс терапии ПТП, заключающийся в однократном ежедневном приеме изониозида (300 мг/сутки), рифампицина (600 мг/сутки), пиразинамида (2000 мг/сутки), этамбурола (1200 мг/сутки) и стрептомицина (1000 мг/сутки).

Таблица 1

Распределение больных туберкулезом легких по группам исследования

Клинические формы туберкулеза легких (ТБЛ) Больные ТБЛ, пролеченные по стандартной схеме химиотерапии Больные ТБЛ, пролеченные по стандартной схеме химиотерапии с применением клеточной аутотерапии

Инфильтративный ТБЛ 24 29

Диссеминированный ТБЛ 5 7

По чувствительности возбудителя к ПТП Лекарственно- чувствительный ТБЛ 21 24

Лекарственно-устойчивый ТБЛ 8 12

Через 1,5 месяца с момента начала лечения ПТП (группа сравнения) и сочетанного применения ПТП и клеточной аутотерапии (группа исследования) у всех обследованных пациентов с ТБЛ отмечалось уменьшение клинических проявлений болезни, более выраженное в случае комплексной терапии. Кашель сохранялся у 10 из 65 пациентов (15,38%) (у 7 в группе сравнения (24,14%) и у 3 в группе исследования (8,33%)), у 2 больных (3,08%) отмечалось выделение мокроты слизистого характера (у 1 в группе сравнения (3,44%) и у 1 в группе исследования (2,77%)). У всех пациентов наблюдалось купирование симптомов интоксикации, что проявлялось нормализацией температуры тела в 59 случаях (90,77%) (у 23 (79,31%) пациентов в группе сравнения и у 36 (100%) в группе исследования). Негативация мокроты (абациллирование) выявлялась у 25 из 65 человек (38,46%) (9 в группе сравнения (31,03%) и 16 в группе исследования (44,44%)). Умеренное бактериовыделение отмечалось в 32 случаях (49,23%) (15 в группе сравнения (51,72%) и 17 в группе исследования (47,22%)), обильное сохранялось у 8 больных (12,31%) (5 в группе сравнения (17,24%) и 3 в группе исследования (8,33%)). Данные рентгенологического обследования показали полное или почти полное закрытие полостей распада в 13 случаях (20,00%) (5 в группе сравнения (17,24%) и 8 в группе исследования (22,22%)), значительное уменьшение размеров полостных образований у 7 пациентов (10,77%) (1 в группе сравнения (3,45%) и 6 в группе исследования (16,67%)).

К осложнениям комплексной терапии можно отнести выявленное в ходе исследования повышение до фебрильных значений температуры тела в день реинфузии у 2 из 36 больных (5,56%). Прочих нежелательных эффектов на введение клеточной суспензии, которые могли бы повлечь за собой прекращение клинических испытаний, не было выявлено.

Исследования проведены в рамках договора о совместной деятельности №28 от 05.07.2008 г. между ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (на базе кафедр патофизиологии, пульмунологии и фтизиатрии и Центральной научно-исследовательской лаборатории), ЗАО «Томские клеточные технологии» и ОГУЗ «Областная туберкулезная клиническая больница» г. Томска, согласно протоколу клинического исследования (дата утверждения - 15.04.2008 г.) и

рекомендациям по проведению курса клеточной аутотерапии, изложенным в медицинской технологии «Аутогемотерапия на основе антиген-активированных дендритных клеток в лечении больных туберкулезом легких», разрешенной к практическому применению (ФС №2011/346 от 28.10.2011 г.). На проведение исследований получено положительное заключение локального комитета по этике №768 от 18.02.2008 г.

Материал исследования

Материалом исследования была периферическая венозная кровь и супернатанты культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов крови.

Забор крови для получения аутологичных мононуклеарных лейкоцитов крови, «обученных» и стимулированных в присутствии антиген-активированных дендритных клеток и рекомбинантного IL-2, а также для получения супернатантов культуры мононуклеарных лейкоцитов проводили в присутствии врача анестизиолога-реаниматолога до начала курса специфической противотуберкулезной терапии, утром натощак из локтевой вены в количестве 50 мл. Кровь стабилизировали гепарином 25 ЕД/мл. Для оценки субпопуляционного состава, пролиферации и апоптоза лимфоцитов, кровь забирали из локтевой вены в количестве 5 мл утром натощак и стабилизировали К2ЭДТА (1,5 мг/мл).

Методы исследования

1. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов периферической крови с туберкулином и рекомбинантным IL-2 [RU № 2372936].

■ Выделение мононуклеарных лейкоцитов из цельной гепаринизированной венозной крови методом градиентного центрифугирования [Натвиг Дж. и соавт., 1980].

■ Подсчет и оценка жизнеспособности клеток [Гольдберг Е.Д. и соавт., 1992].

■ Криоконсервация и хранение индуцированных аутологичных мононуклеарных лейкоцитов периферической крови [RU №2372936].

Протокол получения и хранения суспензии мононуклеарных лейкоцитов для проведения курса клеточной аутотерапии у больных ТБЛ является результатом совместной работы ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН (ГУ НИИКИ СО РАМН) г. Новосибирска и ЗАО «Томские клеточные технологии» на основании договора на создание научно-технической продукции №45 от 22.11.2007 г. (протокол утвержден на заседании ученого совета ГУ НИИКИ СО РАМН 25.12.2007 г.).

2. Подготовка и обратное введение аутологичных мононуклеарных лейкоцитов [RU №2372936].

3. Исследование количественного и субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови:

■ Определение общего количества лейкоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы.

■ Определение количества CD3+, CD4+, CD8+, CD16+/CD56+, CD19+-лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии с использованием набора меченых моноклональных антител TriTEST («Becton Dickinson (BD)», США).

4. Исследование цитокинсекреторной активности мононуклеарных лейкоцитов периферической крови in vitro:

■ Культивирование мононуклеарных лейкоцитов периферической крови in vitro для получения супернатантов [Гольдберг Е.Д. и соавт., 1992; Хаитов Р. М. и соавт., 1995]. Для стимуляции клеток в пробы вносили туберкулин в дозе 500 ТЕ и фитогемагглютинин (ФГА, РНА) в дозе 30 мкг/мл (ООО ПанЭко, Москва).

■ Определение концентрации цитокинов в культуральных супернатантах методом проточной цитометрии с использованием системы СВА Human Thl/Th2 Cytokine Kit (BD Biosciense, США).

5. Определение количества апоптотических и пролиферирующих лимфоцитов крови методом проточной цитометрии с использованием набора APO-BRDU Flow Kit (BD Biosciense, США).

Измерения производили на проточном цитометре FACSCalibur (Becton Dickinson, США), оборудованном аргоновым лазером с длиной волны 488 нм. Анализ полученных данных осуществляли при помощи программого приложения: Multiset for Mac OS® X BD, CellQuest for Mac OS® X, Excel CBA 6- Beats Facs Array for Mac OS® X (BD Biosciense).

Оценку полученных результатов проводили методами статистического описания и проверки статистических гипотез. При анализе имеющихся выборок данных проверяли гипотезу о нормальности распределения (критерий Шапиро-Уилкса). Поскольку распределение выборочных данных отличалось от нормального, рассчитывали медиану М, первый и третий квартили Qi и Q3. С целью попарного сравнения показателей в исследуемых группах применяли критерий Манна-Уитни для независимых групп. W-критерий Вилкоксона применяли для сравнения попарно связанных групп данных (например, для оценки разницы показателей одной и той же выборки в динамике). Различие двух сравниваемых величин считали достоверным при уровне значимости р<0,05 [Harris М„ Taylor G., 2004; Боровиков В. П., 2003; Лакин Г. Ф., 1990].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Показатели СР-субпопуляционного состава, апоптоза и пролиферации лимфоцитов крови, секреции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro у больных с впервые выявленным туберкулезом легких до лечения

До лечения у больных с впервые выявленным диссеминированным туберкулезом легких (ДТБЛ) имело место снижение сравнительно с группой здоровых доноров относительного содержания CD3+ и CD8+ Т-лимфоцитов, абсолютного и относительного числа CD4+ Т-клеток. У пациентов с лекарственно-чувствительным туберкулезом легких (ЛЧТБЛ), наряду со снижением относительного содержания CD8+ Т-лимфоцитов в крови, обнаруживалось также понижение (равно как и при лекарственно-устойчивом туберкулезе легких (ЛУТБЛ)) абсолютного количества CD16+/CD56+NK-itneTOK.

Одной из причин лимфоцитопении при ТБЛ является активация программы апоптоза вследствие прямого влияния М. tuberculosis на клетки иммунной системы, гиперактивации супрессорных (толерогенных) антигенпрезентирующих

клеток, регуляторных Т-клеток (Treg) и цитотоксических лимфоцитов, а также воздействия цитокииового окружения, в частности сочетанного повышения концентрации во внеклеточной среде TNF-a и IL-10 [Remolí М. Е. et al., 2011; Wu К. et al., 2009; Тюлькова Т. Е. и соавт., 2008; Воронкова О. В. и соавт., 2007; Barrera S. et al., 2004].

Согласно результатам проведенного исследования, до лечения увеличение (по сравнению с нормой) абсолютного и относительного содержания апоптотических лимфоцитов в крови обнаруживалось у больных ДТБЛ. Аналогичные изменения выявлялись у пациентов с ЛУТБЛ (табл. 2). Однако при ЛЧТБЛ дефицит CD8+ Т- и NK-клеток в крови обнаруживался в условиях сбалансированности показателей апоптоза и пролиферации лимфоцитов.

При оценке цитокинопродукции in vitro у больных ТБЛ выявлялось повышение спонтанной и индуцированной секреции иммуносупрессорного IL-10 и (за исключением группы больных с инфильтративным туберкулезом легких (ИТБЛ) и ЛЧТБЛ в случае ФГА-индукции клеток) TNF-a. Кроме того, при всех вариантах клинического течения ТБЛ независимо от чувствительности М. tuberculosis к противотуберкулезным препаратам (ПТП) значительно (в десятки раз) возрастала продукция in vitro IL-6 (табл. 3).

Таблица 2

Показатели апоптоза лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких до начала терапии, Me (Q1-Q3)

Показатели Здоровые Больные до лечения Больные до лечения

доноры ИТБЛ ДТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ

Количество апоптотических клеток, х103/л 228,00 (162,00257,00) 247,00 (109,00782,00) 680,50 (393,001056,50) РК0.05 246,00 (189,00793,00) 341,00 (189,001082,00) РК0.05

Количество апоптотических клеток, % 17,23 (14,2221,75) 21,92 (11,5032,75) 44,45 (29,31-51,19) PI <0.05 18,28 (11,50-32,75) 27,66 (18,51-53,44) РК0.05

Примечание. Здесь и далее в табл.: сравнению со здоровыми донорами; ИТБЛ - инфильтративный туберкулез легких, ДТБЛ -диссеминированный туберкулез легких, ЛЧТБЛ - лекарственно-чувствительный туберкулез легких, ЛУТБЛ - лекарственно-устойчивый туберкулез легких.

По данным литературы, негативный эффект сочетанного влияния IL-6, ILIO и TNF-a на АПК и Т-лимфоциты обусловлен их способностью ингибировать экспрессию молекул костимуляции и HLA на клетках, снижать продукцию ими IL-12, IL-2 и INF-y и, как следствие, развитие иммунного Thl-ответа [Redford Р. S. et al., 2011; Remolí М. Е. et al., 2011; Barrera S. et al., 2004]. Вероятно, это и явилось одной из причин зафиксированного у больных ТБЛ до лечения дефицита индуцированной секреции Thl-ассоциированных цитокинов - IL-2 и IFN-y -основных факторов роста и активации Т-лимфоцитов (табл. 3).

Таблица 3

Концентрация цитокинов в супернатантах культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов крови (пг/мл) ___у больных туберкулезом легких до начала терапии, Ме (ОгОз)__

Показатели Здоровые доноры ИТБЛ ДТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ

гГ ФГА 35,50 (20,10-65,60) 10,48 (6,70-15,40) РК0.05 10,10(4,15-24,91) РК0.05 8,97 (6,49-17,60) РК0.05 11,93 (5,60-22,93) РК0.05

5 РРО 14,20(10,10-18,40) 8,72 (3,00-16,85) 10,81 (3,60-21,36) 9,22 (5,10-16,83) 7,20(4,55-15,29)

Спонтанная 13,10(6,80-14,75) 10,70 (6,30-17,40) 11,18(3,70-32,30) 10,70 (4,30-18,90 10,20 (5,36-17,40)

ФГА 30,12 (19,43-43,70) 13,87 (9,60-18,20) РК0.05 13,90 (10,06-18,10) РК0.05 14,34 (10,10-20,55) РК0.05 16,30(11,30-25,21) Р1<0.05

IL-2 РРО 32,24 (18,50-45,10) 11,60(9,15-16,75) РК0.05 16,10 (13,40-19,34) РК0.05 12,65 (9,80-17,00) РК0.05 13,15(9,20-18,00) РК0.05

Спонтанная 12,02 (10,05-22,78) 15,20 (10,00-16,40) 18,50(12,70-38,97) 15,50 (10,00-27,82) 14,02 (10,40-16,40)

ФГА 93,11 (85,25-111,50) 75,50(48,70-193,02) 180,53 (119,65-670,65) РК0.05 80,80(31,96-87,88) 127,54(95,92-168,50) РК0.05

1 РРО 61,25 (53,91-69,59) 76,66(42,55-107,68) 192,75 (78,90-344,38) РК0.05 138,18(64,47-199,12) РК0.05 90,77 (63,07-126,57) РК0.05

Спонтанная 40,62 (33,50-50,34) 57,00 (21,00-77,42) 171,91 (68,15-261,92) РК0.05 88,35 (53,95-227,77) РК0.05 92,93 (54,85-234,30) РК0.05

ФГА 55,03 (32,50-120,00) 1403,70(145,90-5000) РК0.05 3727,75 (331,01-5000) Р1<0.05 1147,17(165,78-5000) РК0.05 4389,92(133,10-5000) РК0.05

IL-6 РРО 37,06 (24,50-59,03) 3330,57 (69,24-5000) РК0.05 3637,11 (105,73-5000) РК0.05 2126,65 (94,85-5000) РК0.05 1077,42 (82,91-2653,65) РК0.05

Спонтанная 27,50 (21,40-32,50) 2013,25(42,97-5000) РК0.05 521,45(130,00-5000) РК0.05 1363,70 (85,57-5000) РК0.05 1410,05 (39,39-3624,78) РК0.05

ФГА 6,35 (4,60-9,71) 9,46 (5,80-15,40) РК0.05 12,45 (7,05-17,76) РК0.05 9,20 (5,75-31,15) PK0.0S 11,38(5,30-34,64) РК0.05

IL-10 РРО 5,21 (3,03-7,51) 7,92 (5,00-16,77) 9,65 (6,48-12,75) РК0.05 9,00 (6,20-24,45) РК0.05 7,12(5,60-13,11)

Спонтанная 4,00 (2,10-5,00) 7,00 (5,94-10,70) РК0.05 7,96 (7,49-8,52) РК0.05 7,89(4,50-14,37) РК0.05 7,50 (5,60-19,55) РК0.05

Показатели CD-субпопуляционного состава, апоптоза и пролиферации лимфоцитов крови, секреции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro у больных впервые выявленным туберкулезом легких, пролеченных по стандартной схеме и с применением клеточной аутотерапии

Через 1,5 месяца лечения ПТП (группа сравнения) и ПТП в сочетании с клеточной аутотерапией (группа исследования) у больных ТБЛ обнаруживалось понижение показателей апоптоза лимфоцитов крови и секреции in vitro IL-6 и TNF-а (табл. 4,6).

Доказано, что антигены М. tuberculosis способны оказывать прямое влияние на активацию синтеза IL-6 и TNF-a, a также запускать программу гибели активированных иммунокомпетентных клеток [Сахно Л. В. и соавт., 2010; Кетлинский С. А., Симбирцев А. С., 2008; Bhatt К., Salgame Р., 2007]. Исходя из этого, вероятным фактором однонаправленных (в виде понижения) изменений этих показателей в обеих обследуемых группах могло быть уменьшение на фоне лечения антигенной нагрузки на организм.

Между тем, через 1,5 месяца комплексной терапии у больных инфильтративным и диссеминированным ТБЛ вне зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя заболевания изменение соотношения лимфоцитов в состоянии апоптоза и пролиферации в направлении уменьшения количества апоптотических и увеличения доли пролиферирующих клеток (сравнительно с исходными их показателями) было более выраженным, чем у пациентов, получавших только стандартную противотуберкулезную терапию (табл. 4).

Таблица 4

Показатели апоптоза лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких на фоне базовой терапии без и в сочетании с клеточной аутотерапией, Me (Q1-Q3)

Группа сравнения Группа исследования Группа сравнения Группа исследования

ИТБЛ ДТБЛ ИТБЛ ДТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ

хЮ'/л

108,00 440,00 51,00 60,50 181,00 292,00 143,00 112,00

(53,00- (58,00- (30,00- (40,00- (33,00- (8,00- (132,00- (60,00-

162,00) 570,00) 168,00) 201,50) 215,00) 893,00) 149,00) 217,00)

РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05

Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05

Р3<0.05 Р3<0.05

10,59 21,13 4,90 6,00 20,59 31,34 4,20 7,42

(5,83- (11,74- (1,67- (4,00- (5,83- (11,74- (1,18- (4,58-

22,00) 33,02) 10,00) 18,29) 28,13) 51,63) 16,65) 18,78)

Р2<0.05 Р2<0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05 РК0.05

Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05 Р2<0.05

Р3<0.05 Р3<0.05 Р3<0.05 Р3<0.05

Примечание. Здесь и далее в табл.: Р2 - уровень статистической значимости различий по сравнению с показателями до лечения; РЗ - по сравнению с группой больных туберкулезом легких, пролеченных по стандартной схеме химиотерапии.

При этом у больных ИТБЛ и ЛУТБЛ, пролеченных с использованием клеточной аутотерапии, абсолютное количество пролиферирующих лимфоцитов после лечения повышалось, в то время как в группах сравнения проявляло тенденцию к снижению в сравнении с периодом до начала лечения и нормой (рис. 1).

5000

я 4500

3 4000 *

| 3500 и

g 3000 % 2500

а-

4 2000

I 1000

Больные с Больные с Больные с Больные с

инфильтративным диссеминированным лекарственно- лвкарственно-тубергулезои легких туберкулезом легких чувствительным устойчивым

туберкулезом лег»« туберкулезом легких

ядо лечения «базовая терапия 0комплексная терапия

Рисунок 1. Абсолютное количество пролиферирующих (активированных) клеток у больных ТБЛ на фоне терапии ПТП без и в сочетании с клеточной аутотерапией

Кроме того, на фоне базовой противотуберкулезной терапии показатели субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови претерпевали ещё более выраженные изменения. В частности, у больных ДТБЛ отмечалось снижение абсолютного количества CD3+ Т-лимфоцитов в 1,7 раза, а у больных ЛЧТБЛ - относительного содержания CD8+ Т-лимфоцитов в 1,6 раза относительно таковых в группе здоровых доноров.

Более выраженное понижение по сравнению с периодом до начала терапии у больных инфильтративным и диссеминированным ЛЧТБЛ и ЛУТБЛ претерпевали показатели ФГА- и туберкулин (РРО)-индуцировамной секреции EFN-y. Индуцированная секреция IL-2 in vitro через 1,5 месяца терапии ПТП у

больных ТБЛ сохранялась ниже нормы, в то время как спонтанная секреция TNF- а во всех обследованных группах резко снижалась не только в сравнении с периодом до лечения, но и группой здоровых доноров.

Спонтанная секреция противовоспалительных цитокинов IL-4 и IL-10 у больных ТБЛ после курса базовой терапии ПТП по сравнению с периодом до начала лечения, наоборот, увеличивалась. При этом в случае IL-4 она становилась выше нормы. Совместное повышение секреции указанных цитокинов на фоне базовой терапии может отражать одновременную активацию гуморального иммунитета и механизмов иммуносупрессии и быть одним из проявлений потенцирования базовыми ПТП ранее сформированного дефицита продукции Thl-ассоциированных цитокинов [Redford Р. S. et al., 2011; Remoli М. Е. et al., 2011; Ярилин А. А., 2010; Кетлинский С. А., Симбирцев А. С., 2008].

При сочетании базовой химиотерапии с клеточной аутотерапией у больных ДТБЛ (в отличие от больных, пролеченных стандартным способом) содержание Т-лимфоцитов в периферической крови полностью нормализовалось при понижении абсолютного числа B-клеток. У больных ИТБЛ отмечалось понижение абсолютного и относительного содержания CD19+B- и CD16+/CD56 NK-лимфоцитов (табл. 5). При анализе данных в зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя устанавливались сходные изменения. Так, у больных ЛЧТБЛ определялась нормализация относительного количества CD8+ Т-лимфоцитов (при отсутствии таковой на фоне применения только базовых ПТП), а у больных ЛЧТБЛ и ЛУТБЛ - еще более выраженное (чем до лечения и у больных, пролеченных без применения клеточной аутотерапии) снижение по сравнению с нормой абсолютного количества CD16+/CD56+ NK-клеток (табл. 5), вероятно, за счет перераспределения популяционного состава лимфоцитов в направлении увеличения количества Т-клеток вследствие нормализации показателей секреции Т-клеточных факторов роста и активации - IL-2 и IFN- у.

Показатели секреции цитокинов in vitro при применении клеточной аутотерапии (табл. 6) у больных ТБЛ вне зависимости от чувствительности возбудителя к ПТП также (в отличие от группы больных, пролеченных только базовыми ПТП) практически полностью восстанавливались, за исключением индуцированной секреции TNF-а (которая снижалась ниже нормы у больных ЛЧТБЛ при действии ФГА и у больных ЛУТБЛ при действии обоих индукторов). Та же закономерность отмечалась и в случае анализа цитокиновой секреции в зависимости от клинической формы заболевания, а именно, восстановление на фоне клеточной аутотерапии показателей индуцированной и спонтанной секреции IFN-y, TNF-а (за исключением больных ИТБЛ, у которых она понижалась), IL-2 и IL-10 и более отчетливая, нежели в отсутствие клеточной аутотерапии, тенденция к понижению показателей индуцированной и спонтанной секреции провоспалительного цитокина IL-6 с уменьшением их ниже нормы при инфильтративной форме ТБЛ (особенно при действии ФГА).

Регистрируемое на фоне комплексной терапии при всех вариантах течения ТБЛ снижение до нормы либо ниже её секреции TNF-а и IL-6 (табл. 6), по-видимому, является фактором, препятствующим прогрессированию иммунного отклонения {immune deviation). Частным подтверждением этому является повышение после курса клеточной аутотерапии митоген (ФГА)- и антиген (PPD)-индуцированной продукции IFN-y и IL-2 in vitro, которое позволяет судить о восстановлении активности Т-клеточного звена иммунного ответа.

Таблица 5

СО-субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких на фоне терапии ПТП в сочетании с клеточной аутотерапией, Ме (01-03)_

Показатели Здоровые доноры ИТБЛ ДТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ

CD3+ хЮ'/мл 1886,00 (1370,002402,00) 1580,00 (1169,002100,00) 1743,00 (954,001920,00) 1427,50 (906,002064,00) 1314,00 (870,002077,00)

% 77,55 (64,10-85,00) 80,50 (75 ,00-85,00) Р2<0.05 Р3<0.05 73,00 (64,00-81,00) Р2<0.05 Р3<0.05 76,00 (69,00-83,00) 79,00 (75,00-83,00) Р2<0.05 Р3<0.05

CD4+ хЮ"/мл 930,00 (682,001292,00) 836,00 (660,001030,00) 873,50 (712,001118,00) Р2<0.05 Р3<0.05 831,00 (565,001126,00) 855,00 (540,00918,00)

% 47,00 (35,00-59,00) 47,00 (42,50^9,00) 51,00 (40,00-61,00) Р2<0.05 Р3<0.05 47,00 (45,00-49,00) Р2<0.05 Р3<0.05 45,00 (43,00-51,00) Р2<0.05 Р3<0.05

CD8+ х106/мл 673,00 (372,00-974,00) 468,00 (322,00570,00) 354,00 (273,00462,00) 464,50 (318,00570,00) 463,00 (320,00553,00)

% 30,00 (23,00-35,00) 30,50 (23,00-35,50) Р2<0.05 Р3<0.05 22,00 (19,00-29,00) Р2<0.05 27,00 (25,00-33,00) Р2<0.05 Р3<0.05 29,00 (27,00-35,00) Р2<0.05

Таким образом, механизм иммуномодулирующего действия комплексной терапии аутологичными мононуклеарными лейкоцитами, индуцированными в присутствии антиген-активированных дендритных клеток и рекомбинантного IL-2, связан с восстановлением баланса секреции основных про- и противовоспалительных цитокинов, подавлением апоптоза и активацией пролиферации лимфоцитов крови и перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения числа основных CD-субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8*), вследствие чего создаются условия

цитокинового и клеточного микроокружения, благоприятные и необходимые для активации антигенпрезентирующей и микробицидной функций моноцитов/макрофагов. Наблюдаемый эффект может быть обусловлен высокой IFN-у-продуцирующей и цитотоксической активностью индуцированных мононуклеарных лимфоцитов (рис. 2), установленной в исследованиях in vitro [Романов В. В. и соавт., 2008; RU №2372936].

t Ияфтшроааяяые АПК

^Перфорнн

.....................л.

Алзотоз ни фишфогжняыз

АПК

Рирупцююзае монодатов _из крова_

АПК: t секреции IL-12, IL-27, f экспрессия HLA, CD80/CD86. _|фагоаятоза_

Рисунок 2. Патогенетические факторы иммуномодулирующего эффекта реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов крови (МНК) у больных туберкулезом на основании данных литературы и результатов собственного исследования (в выделенных рамках).

ВЫВОДЫ

1. У больных диссеминированным и лекарственно-резистентным туберкулезом легких (ТБЛ) до начала противотуберкулезной терапии активация апоптоза лимфоцитов крови сочетается с изменениями их CD-субпопуляционного состава - дефицитом CD3+, CD4+, CD8+ Т-лимфоцитов (при диссеминированном ТБЛ) и абсолютного числа CD16+/CD56+ NK-клеток (при лекарственно-резистентном ТБЛ). При лекарственно-чувствительном ТБЛ дефицит CD8+ Т- и NK-клеток в крови формируется при сохранении баланса апоптоза и пролиферации лимфоцитов.

2. Дисбаланс секреции цитокинов in vitro у больных инфильтративным и диссеминированным ТБЛ до лечения определяется гиперпродукцией TNF- а (за исключением группы больных с инфильтративным ТБЛ), IL-6 и IL-10 в условиях дефицита индуцированной секреции Thl-ассоциированных цитокинов — IL-2 и IFN-y.

Таблица 6

Концентрация цитокинов в супернатантах культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов крови (пг/мл) у

Показатели Здоровые доноры ИТБЛ ДТБЛ ЛЧТБЛ ЛУТБЛ

í- ФГА 35,50(20,10-65,60) 35,10(17,40-69,30) 47,99(14,95-79,06) 41,72(17,40-100,70) 35,10(19,30-60,87)

PPD 14,20(10,10-18,40) 17,40(10,00-43,94) 21,23(15,70-50,47) 18,70(10,00-37,71) 17,39(10,00-36,40)

Спонтанная 13,10(6,80-14,75) 15,10(10,42-20,32) 6,50 (4,62-20,97) 19,20 (6,50-22,76) 13,24(10,65-19,10)

IL-2 ФГА 30,12(19,43-43,70) 29,20 (15,00-43,80) 33,03 (21,50-43,01) 20,95 (15,30-33,95) 20,30(15,43-43,80)

PPD 32,24(18,50- 10) 20,70(16,60-33,65) 30,00 (17,65-43,80) 18,25(13,60-35,20) 20,70(17,20-37,30)

Спонтанная 12,02 (10,05-22,78) 18,20(12,50-27,28) 20,00(10,50-39,10) 12,22 (9,50-25,40) 10,23(8,08-20,75)

? ФГА 93,11 (85,25-111,50) 44,72 (14,20-68,40) РК0.05 152,30(56,45-410,27) 65,93 (14,20-73,30) РК0.05 34,84(17,35-70,77) РК0.05

tí Е PPD 61,25(53,91-69,59) 27,61 (10,68-63,80) РК0.05 90,92 (29,40-157,80) 67,56 (30,20-130,30) 22,90(10,68-54,01) РК0.05

Спонтанная 40,62 (33,50-50,34) 25,61(12,80-55,47) 25,70(10,68-63,31) 55,97 (24,68-134,80) 21,92(12,80-42,50)

ФГА 55,03(32,50-120,00) 14,85(4,20-44,15) РК0.05 173,45 (66,53-579,95) РК0.05 24,80 (9,35-78,60) 46,30 (5,86-99,94)

3 PPD 37,06 (24,50-59,03) 12,50(3,60-61,90) 87,94 (32,40-206,37) 33,77 (6,60-117,45) 28,55 (7,20-66,77)

Спонтанная 27,50 (21,40-32,50) 11,60(4,50-41,40) 214,68 (31,90-509,50) РК0.05 17,25 (8,11-92,80) 47,63 (9,90-100,86)

ФГА 6,35 (4,60-8,01) 4,45 (3,40-7,80) 7,68(4,10-11,08) 4,60(3,40-8,90) 4,75(4,00-10,94)

-i PPD 5,21 (3,03-6,21) 4,30(2,80-7,10) 4,89 (2,20-7,65) 5,10(3,00-8,10) 3,80(1,55-5,20)

Спонтанная 4,00 (2,10-5,00) 4,50(3,40-6,20) 4,90(3,60-7,70) 4,95 (3,40-6,40) 4,50(3,53-5,00)

ФГА 10,20 (6,30-14,80) 8,00 (4,60-10,81) 9,43(4,45-11,98) 7,80 (4,60-10,30) 8,55 (5,42-11,98)

i PPD 8,20 (2,60-16,03) 7,30(3,50-9,30) 8,20 (3,75-13,47) 6,65(3,50-8,60) 8,30 (2,60-15,03)

Спонтанная 7,30(4,58-8,31) 7,35(4,70-9,40) 7,48 (4,60-10,77) 7,34(4,60-9,65) 7,70(4,70-9,40)

3. Динамика показателей апоптоза лимфоцитов крови, секреции IL-6 и TNF-a in vitro у больных ТБЛ на фоне базовой терапии без и в сочетании с клеточной аутотерапией является сходной и проявляется их понижением сравнительно с периодом до лечения. В то же время, на фоне аутотерапии отмечается восстановление секреции противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10), активация пролиферации лимфоцитов крови с перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения численности клеток, несущих CD-детерминанты Т-лимфоцитов.

4. Через 1,5 месяца базовой терапии у больных ТБЛ вне зависимости от клинической формы и лекарственной чувствительности возбудителя дефицит индуцированной секреции in vitro IFN-y усугубляется при повышении спонтанной продукции противовоспалительных цитокинов с ТЫ-супрессорной активностью (IL-4 и IL-10) и значительном угнетении спонтанной секреции TNF-а. Продукция IL-2 in vitro при ФГА- и PPD-индукции и количество Т-лимфоцитов (при диссеминированной форме заболевания) сохраняются ниже нормы.

5. Применение клеточной аутотерапии в комплексе с базовыми противотуберкулезными препаратами через 1,5 месяца лечения сопровождается нормализацией субпопуляционного состава Т-лимфоцитов крови (при диссеминированном и лекарственно-чувствительном ТБЛ) при понижении относительно нормы количества CD16+/CD56+ NK-клеток (при инфильтративном и лекарственно-резистентном ТБЛ) и B-лимфоцитов (при инфильтративном и диссеминированном ТБЛ).

6. Состояние цитокинопродукции у больных ТБЛ после курса клеточной аутотерапии характеризуется восстановлением показателей секреции in vitro IL-2, IL-10, IFN-y, TNF-а (спонтанной, а также индуцированной при диссеминированном ТБЛ) и IL-6 (за исключением группы больных диссеминированным ТБЛ).

7. Снижение абсолютного и относительного числа апоптотических форм лимфоцитов крови у больных инфильтративным и диссеминированным лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым ТБЛ на фоне базовой химиотерапии сопряжено с уменьшением, а на фоне базовой химиотерапии в сочетании с клеточной аутотерапией - с увеличением абсолютного количества клеток в состоянии пролиферации.

8. Иммуномодулирующий эффект комплексной терапии аутологичными мононуклеарными лейкоцитами, индуцированными in vitro антиген-активированными дендритными клетками, трансформированными из моноцитов крови, и рекомбинантным IL-2, связан с восстановлением баланса секреции основных про- и противовоспалительных цитокинов, подавлением апоптоза и активацией пролиферации лимфоцитов крови и перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения числа основных CD-субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3+, CD4+, CDB^).

ПЕРЕЧЕНЬ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Особенности субпопуляционного состава лимфоцитов у больных инфильтративным туберкулезом легких в зависимости от выраженности туберкулиновой реакции [текст] / А. Е. Колосова, Е. Г. Чурина, Н. В. Теплова, В. А. Серебрякова, Т. Е. Будкина // Актуальные вопросы инфекционной патологии — 2009: материалы научной конференции молодых ученых с международным участием, посвященной 90-летию кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии СПбГМУ им. академика И.П. Павлова. - СПб., 2009. - С. 47.

2. Модуляция противотуберкулезного иммунного ответа с помощью клеточной аутотерапии [текст] / Н. В. Теплова, Н. Л. Анкудович, Е. П. Степанова, С. А. Волгушев, И. В. Богдашин, Г. В. Янова, О. И. Уразова // Инновации в медицине — 2009: материалы Второй международной дистанционной научной конференции и конкурса проектов. - Курск, 2009. -С. 179-180.

3. Иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии у пациентов с лекарственно-устойчивым и лекарственно-чувствительным туберкулезом легких [текст] / Н. В. Теплова, Н. Л. Анкудович, Е. П. Степанова, С. А. Волгушев, И. В. Богдашин, Г. В. Янова, О. И. Уразова // Материалы II Архангельской международной научной медицинской конференции молодых ученых, аспирантов и студентов (AIMSC): Бюллетень СГМУ, Архангельск. - 2009. - С. 187-188.

4. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови у пациентов с инфильтративным и диссеминированным туберкулезом легких после курса клеточной аутотерапии [текст] / Н. В. Теплова, Е. П. Степанова., С. А. Волгушев, И. В. Богдашин, Г. В. Янова, О. И. Уразова // Российский аллергологический журнал. - 2010. - №5 ( 1). - С. 292-293.

5. Уровень сывороточного алъфа-2-макроглобулина у больных туберкулезом легких с отрицательной реакцией Манту [текст] / Е. Г. Чурина, А. Е. Колосова, О. И. Уразова, Е. Л. Никулина, Н. В. Теплова // В мире научных открытий. - 2010. - № 4 (10), Ч. 14. - С. 97-99.

6. Показатели апоптоза и пролиферативной активности лимфоцитов у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью М. tuberculosis [текст] / Е. Г. Чурина, В. В. Новицкий, О. И. Уразова, О. В. Филинюк, Н. В. Теплова, И. Е. Есимова // Медицинская иммунология.-2012.-Т. 14, №1-2.-С. 119-126.

7. Патент на изобретение №2372936 Российской Федерации, МПК 7 А61К39/00, А61Р31/06, C12N5/08. Способ получения аутологичной вакцины для лечения туберкулеза / С. А. Волгушев, И. В. Богдашин, Н. В. Теплова, Н. Л. Ванчугова, Г. В. Третьяков, С. Н. Руднева; патентообладатель ЗАО «Томские клеточные технологии». — №2008119771/13; заявл. 19.05.2008; опубл. 20.11.2009, Бюл. № 32.

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АПК - антигенпрезентирующая клетка

ВИН - вторичная иммунологическая

недостаточность

ДК - дендритные клетки

ДТБЛ - диссеминированный

туберкулез легких

ИТБЛ - инфильтративный туберкулез легких

ЛУТБЛ — лекарственно-устойчивый туберкулез легких ЛЧТБЛ - лекарственно-чувствительный туберкулез легких

ПТП - противотуберкулезные препараты

ТБЛ - туберкулез легких

ТЕ - туберкулиновая единица ФГА — фитогемагглютинин

СИ — антигены кластеров дифференцировки 1Ь — интерлейкин

РРБ - туберкулин

Тираж 100. Заказ № 924. Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники 634050, г. Томск, пр. Ленина, 40 Тел.: 533018.

Оглавление диссертации Теплова, Надежда Владимировна :: 2012 :: Томск

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Иммунный ответ при туберкулезе легких

1.2 Причины дизрегуляции иммунного ответа на Mycobacterium 20 tuberculosis

1.2.1 Влияние микобактериальной инфекции на дизрегуляцию 20 иммунного ответа

1.2.2. Роль факторов микроокружения в дизрегуляции иммунного 25 ответа при микобактериальной инфекции

1.3. Вторичная иммунологическая недостаточность при 28 микобактериальной инфекции

1.3.1 Понятие «вторичной иммунологической недостаточности» 28 (ВИН)

1.3.2. Проявления ВИН при туберкулезе легких

1.4. Иммуномодулирующие эффекты противотуберкулезных 34 препаратов

1.5. Иммунокоррекция и иммунотерапия при туберкулезе легких

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА И 49 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика групп исследования

2.2. Материал исследования

2.3. Методы исследования 54 2.3.1. Метод получения индуцированных аутологичных 55 мононуклеарных лейкоцитов для проведения курса клеточной аутотерапии

2.3.1.1. Выделение мононуклеарных лейкоцитов из цельной крови

2.3.1.2. Метод подсчета и оценки жизнеспособности мононуклеарных 58 лейкоцитов периферической крови

2.3.1.3. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов 58 периферической крови с туберкулином и рекомбинантным 1Ь

2.3.1.4. Криоконсервация и хранение аутологичных мононуклеарных 59 лейкоцитов периферической крови, «обученных» в присутствии антиген-активированных дендритных клеток и рекомбинантного 1Ь

2.3.1.5. Подготовка и обратное введение «обученных» аутологичных 60 мононуклеарных лейкоцитов

2.3.2. Исследование количественного и субпопуляционного состава 61 лимфоцитов периферической крови

2.3.2.1. Определение общего количества лейкоцитов в 61 периферической крови

2.3.2.2. Подсчёт лейкоцитарной формулы

2.3.2.3. Определение количества СЭЗ+, СВ4+, СБ8+, СБ16+/С056+, 62 СО 19+ лимфоцитов в периферической крови

2.3.3. Исследование цитокинсекреторной активности мононуклеарных лейкоцитов периферической крови in vitro

2.3.3.1. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов 66 периферической крови in vitro для получения супернатантов

2.3.3.2. Определение уровней секреции цитокинов с использованием 67 системы СВА Human Thl/Th2 Cytokine Kit (BD, США)

2.3.4. Определение количества апоптотических и пролиферирующих 70 лимфоцитов крови с использованием набора APO-BRDU Flow Kit

2.3.5. Статистический анализ результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 75 3.1. Показатели CD-субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких, пролеченных по стандартной схеме и с применением клеточной аутотерапии

3.1.1. В зависимости от клинической формы заболевания

3.1.2. В зависимости от лекарственной чувствительности 78 Mycobacterium tuberculosis

3.2. Показатели секреции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами 83 крови in vitro у больных туберкулезом легких, пролеченных по стандартной схеме и с применением клеточной аутотерапии

3.2.1. В зависимости от клинической формы заболевания

3.2.2. В зависимости от лекарственной чувствительности 91 Mycobacterium tuberculosis

3.3. Показатели апоптоза и пролиферации лимфоцитов крови у 100 больных туберкулезом легких, пролеченных по стандартной схеме и с применением клеточной аутотерапии

3.3.1. В зависимости от клинической формы заболевания

3.3.2. В зависимости от лекарственной чувствительности 102 Mycobacterium tuberculosis

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Теплова, Надежда Владимировна, автореферат

ВИН при ТБЛ выявляются как на ранних этапах развития заболевания, так и на фоне применения ПТП, что, несомненно, диктует необходимость включения мероприятий по иммунокоррекции в стандартную программу лечения больных ТБЛ [Васильева О. А. и соавт., 2010; Кононова Т. Е. и соавт., 2010; Пальцев М.

A., 2004; Казимирский А. Н., 2003]. Однако практикуемое во фтизиатрии индивидуально необоснованное назначение иммуномодулирующих препаратов может оказывать не только позитивный иммуностимулирующий эффект, но и в ряде случаев прямо противоположное негативное действие. В связи с этим все чаще речь идет о назначении иммунотропных препаратов с учетом индивидуальной иммунореактивности пациента и курса ПТП, или, иными словами, - внедрении персонифицированных подходов к лечению [Новицкий

B. В. и соавт., 2009; Vogiatzi P. et al., 2006].

Наиболее перспективным вариантом персонифицированного лечения ряда заболеваний (в том числе инфекционных) являются методы адоптивной терапии, которые основываются на стимуляции функциональных свойств иммунокомпетентных клеток путем устранения дефекта антигенпрезентирующей функции АПК и дефицита иммунорегуляторных цитокинов. Принцип этого вида иммуномодулирующей терапии заключается в переносе клеточно-опосредованного иммунного ответа на антиген при помощи живых иммунокомпетентных клеток или их субпопуляций, активированных in vitro [Guan Н. et al., 2012; Mesiano G. et al., 2012; Alenzi F. G. et al., 2011; Shin J. H. et al., 2011; Banchereau A. K. et al, 2005; Розенберг С. A., 2002]. Данный подход оказался перспективным для индукции противоопухолевого иммунного ответа [RU №2392946; RU №2309753; RU №2262941; US №2348418; US №2634625].

Показано, что разрешенная к применению в клинической практике на территории Российской Федерации [разрешение ФС №2011/346 от 28.10.2011 г.; RU №2372936] медицинская технология «Аутогемотерапия на основе антиген-активированных дендритных клеток в лечении больных туберкулезом легких», основанная на реинфузии собственных (аутологичных) изолированных из крови мононуклеарных лейкоцитов после их «обучения» в присутствии антиген-активированных ДК и активации рекомбинантным IL-2 in vitro, оптимизирует лечение больных ТБЛ. Однако, закономерно возникает вопрос о том, каковы же конкретные механизмы иммуномодулирующего действия клеточной аутотерапии при ТБЛ.

Цель исследования: выявить особенности и патогенетические факторы иммуномодулирующего эффекта реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов крови у больных туберкулезом легких.

Задачи исследования:

3. Охарактеризовать патогенетические факторы иммуномодулирующего эффекта курсовой реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов у больных туберкулезом легких. Научная новизна исследования. Впервые у больных с различными клиническими формами (инфильтративный, диссеминированный) туберкулеза легких (ТБЛ) в зависимости от лекарственной чувствительности М. tuberculosis проведена оценка CD-субпопуляционного состава (CD3+, CD44, CD8+, CD16 /CD56 , CD19 ), пролиферации и апоптоза лимфоцитов периферической крови и секреции цитокинов (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-y) через 1,5 месяца лечения противотуберкулезными препаратами (ПТП) в комплексе с клеточной терапией изолированными из крови аутологичными мононуклеарными лейкоцитами после их «обучения» в присутствии антиген-активированных дендритных клеток (ДК) и активации рекомбинантным IL-2 in vitro.

Показано, что изменения CD-субпопуляционного состава лимфоцитов крови при диссеминированном и лекарственно-устойчивом ТБЛ сочетаются с активациеи их апоптоза и проявляются дефицитом CD3 , CD4+, CD8+ Т-лимфоцитов и CD16+/CD56+ NK-клеток. Вместе с этим, при лекарственно-чувствительном ТБЛ дефицит CD8+ Т- и NK-клеток в крови формируется при сохранении равновесия апоптоза и пролиферации лимфоцитов. Выявлено, что дисбаланс секреции цитокинов in vitro у больных ТБЛ определяется спонтанной и индуцированной гиперпродукцией IL-6, IL-10, TNF-a в условиях дефицита индуцированной секреции Thl-ассоциированных цитокинов - IL-2 и IFN-y. На фоне базовой терапии, как без, так и в сочетании с клеточной аутотерапией, динамика показателей апоптоза лимфоцитов крови, секреции IL-6 и TNF-a in vitro у больных ТБЛ носит сходный (отрицательный) характер. Между тем, снижение показателей апоптоза лимфоцитов крови у больных ТБЛ на фоне базовой химиотерапии сопряжено с уменьшением, а на фоне комплексной терапии - с увеличением абсолютного количества клеток в состоянии пролиферации. Кроме того, применение в течение 1,5 месяцев только базовой терапии ПТП при всех вариантах течения заболевания усугубляет дефицит индуцированной секреции in vitro IFN-y при повышении спонтанной продукции противовоспалительных цитокинов с Thl-супрессорной активностью (IL-4 и IL-10). Применение же клеточной аутотерапии в комплексе с базовыми ПТП сопровождается восстановлением субпопуляционного состава Т-лимфоцитов крови (у больных диссеминированным и лекарственно-чувствительным ТБЛ) и показателей секреции in vitro IL-2, IL-10, IFN-y, TNF-a и IL-6. При этом у больных инфильтративным и лекарственно-устойчивым ТБЛ отмечается снижение (относительно нормальных значений) числа CD16+/CD56+ NK-клеток и (при инфильтративной и диссеминированной формах заболевания) CD 19+ В-лимфоцитов.

Практическое и теоретическое значение работы. В ходе исследования получены новые данные об особенностях и патогенетических факторах иммуномодулирующего действия реинфузий изолированных из крови больных ТБЛ аутологичных мононуклеарных лейкоцитов после их активации in vitro. Разработана схема комплексного лечения больных ТБЛ базовыми ПТП в сочетании с клеточной аутотерапией мононуклеарными лейкоцитами, индуцированными in vitro антиген-активированными ДК и рекомбинантным IL-2. Получен патент Российской Федерации на изобретение «Способ получения аутологичной вакцины для лечения туберкулеза» (№2372936 от 20 ноября 2009 г.). Результаты оценки CD-популяционного состава, пролиферации и апоптоза лимфоцитов периферической крови и секреции про- и противовоспалительных цитокинов in vitro обосновывают иммуностимулирующий эффект клеточной аутотерапии на клеточное звено иммунного ответа у больных с различными клиническими формами ТБЛ (инфильтративный и диссеминированный) с лекарственной чувствительностью и устойчивостью возбудителя к ПТП и возможность ее использования в комплексе со специфической химиотерапией для оптимизации лечения больных ТБЛ.

Положения, выносимые на защиту:

2. Применение на фоне стандартного лечения клеточной аутотерапии у больных ТБЛ обеспечивает восстановление секреции IL-2, IL-6, IL-10, TNF-а, IFN-y, субпопуляционного состава Т-клеток крови и повышение активности пролиферации лимфоцитов. Напротив, через 1,5 месяца только базовой химиотерапии у больных ТБЛ вне зависимости от клинической формы и лекарственной чувствительности возбудителя дефицит индуцированной секреции IFN-y мононуклеарными лейкоцитами крови in vitro усугубляется, подавляется спонтанная продукция TNF-a при повышении базальной секреции цитокинов с Thl-супрессорной активностью (IL-4, IL-10) и уменьшении абсолютного количества лимфоцитов в состоянии пролиферации.

3. В основе иммуномодулирующего эффекта реинфузии индуцированных in vitro аутологичных мононуклеарных лейкоцитов у больных ТБЛ лежит восстановление баланса секреции про- и противовоспалительных цитокинов с нормализацией продукции основных Thl -регуляторов - IL-2 и IFN-y, подавление апоптоза и активация пролиферации лимфоцитов крови с перераспределением их популяционного состава в направлении увеличения численности Т-лимфоцитов.

Реализация и апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на конференциях молодых учёных «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2009» (Санкт-Петербург, 2009) и «II Архангельская международная медицинская научная конференция студентов и молодых учёных - 2009» (Архангельск, 2009), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии - междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине - 2009» (Курск, 2009).

Исследования проведены при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации в рамках Федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007 - 2013 годы» (ГК №16.512.11.2046 «Разработка комплекса молекулярно-генетических маркеров дизрегуляции иммунного ответа на Mycobacterium tuberculosis для оптимизации диагностики и коррекции вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких», руководитель - профессор О.И. Уразова) и РФФИ (11 -04-98057-р «Разработка комплекса иммунодиагностических биомаркеров для оптимизации лечения больных туберкулезом легких», руководитель -профессор О.И. Уразова).

Внедрение. Результаты работы применяются в учебном процессе кафедр патофизиологии, фтизиатрии и пульмонологии, иммунологии и аллергологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России для студентов лечебного, педиатрического и медико-биологического факультетов.

Объём и структура работы. Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырёх глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 8 рисунками и 8 таблицами. Библиографический указатель включает 267 источников, из которых 128

Заключение диссертационного исследования на тему "иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких"

ВЫВОДЫ

2. Дисбаланс секреции цитокинов in vitro у больных инфильтративным и диссеминированным ТБЛ до лечения определяется гиперпродукцией TNF-a (за исключением группы больных с инфильтративным ТБЛ), IL-6 и IL-10 в условиях дефицита индуцированной секреции Thl-ассоциированных цитокинов - IL-2 и IFN-y.

4. Через 1,5 месяца базовой терапии у больных ТБЛ вне зависимости от клинической формы и лекарственной чувствительности возбудителя дефицит индуцированной секреции in vitro IFN-y усугубляется при повышении спонтанной продукции противовоспалительных цитокинов с Thl-супрессорной активностью (IL-4 и IL-10) и значительном угнетении спонтанной секреции TNF-a. Продукция IL-2 in vitro при ФГА- и PPD-индукции и количество Т-лимфоцитов (при диссеминированной форме заболевания) сохраняются ниже нормы.

6. Состояние цитокинопродукции у больных ТБЛ после курса клеточной аутотерапии характеризуется восстановлением показателей секреции in vitro IL-2, IL-10, IFN-y, TNF-a (спонтанной, а также индуцированной при диссеминированном ТБЛ) и IL-6 (за исключением группы больных диссеминированным ТБЛ).

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Теплова, Надежда Владимировна

1. Алешина, Р. М. Синдром вторичной иммунологической недостаточности: клинико-лабораторная характеристика / Р. М. Алешина // Клиническая иммунология. Аллергология. Инфектология. 2007. - № 2. - С. 6.

2. Активность ПОЛ и апоптоза при туберкулезе легких / В. В. Новицкий, А. К. Стрелис, С. Б. Ткаченко и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. - Т. 140, № 11. - С. 497-499.

3. Александрова, А. Е. Иммунотропная активность противомикробных средств, используемых во фтизиатрии / А. Е. Александрова, Т. И. Виноградова // Проблемы туберкулеза. 1996. - № 2. - С. 43—45.

4. Антонов, В. Ю. Применение ликопида в комплексном лечении туберкулеза легких / В. Ю. Антонов, А. С. Борзенко, Н. Л. Попкова // Тез. докл. VII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». -М., 2000.-С. 376.

5. Апоптоз лимфоцитов как возможный механизм нарушения антигенспецифического ответа при туберкулезе легких / Н. А. Хонина, Л. В Сахно, М. Н. Норкин и др. // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3, -№ 1.-С. 51-59.

6. Апоптозиндуцирующее действие противотуберкулёзных препаратов основного ряда in vitro / О. А. Васильева, В. В. Новицкий, О. И. Уразова и др. // Антибиотики и химиотерапия. 2010. - № 11. - С. 25-29.

7. Аршинова, С. С. Иммуномодуляторы в терапии больных активным туберкулезом легких / С. С. Аршинова // Лечащий врач. 2002. - № 10. -С. 36-37.

8. Бойчук, С. В. Fas-рецептор и его роль при атопических заболеваниях / С. В. Бойчук, И. Г. Мустафин // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 24-29.

9. Борзенко, А. С. Применение полиоксидония в комплексном лечении больных туберкулезом легких / А. С. Борзенко, Ю. В. Антонов, Н. Л. Попкова // Иммунология. 1999. - № 2. - С. 41-43.

10. Ю.Боровиков, В. П. Statistica. Искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / В. П. Боровиков. СПб.: Питер, 2003. - 344 с.

11. П.Булыгин, Г. В. Метаболические основы регуляции иммунного ответа / Г. В. Булыгин, Н. И. Камзалакова, А. В. Андрейчиков. Новосибирск: СО РАМН, 1999.-346 с.

12. Вартанян, Ф. Е. Туберкулез: проблемы и научные исследования в странах мира / Ф. Е. Вартанян, К. П. Шаховский // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 2. - С. 48-50.

13. Введение в методы культуры клеток, биоинженерии органов и тканей / под ред. В. В. Новицкого, В. П. Шахова. Томск, 2004. - 167 с.

14. Вельтищев, Ю. Е. Иммунная недостаточность у детей / Ю. Е. Вельтищев // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2004. - № 4. - С. 39.

15. Влияние глутоксима на формирование и течение туберкулезного воспаления у экспериментальных животных / Г. Н. Можокина, Н. А. Елистратова, JI. П. Михайлова и др. // Цитокины и воспаление. 2002. -№ 4. - С. 47-52.

16. Влияние противотуберкулезных препаратов резервного ряда на продукцию противовоспалительных цитокинов у больных туберкулезом легких / Т. Е. Кононова, О. И. Уразова, В. А. Серебрякова и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2010. - № 5. - С. 64-71.

17. Воронина, JI. Г. Лабораторные методы обнаружения и идентификации Haemophilus Influenzae: методические рекомендации / Л. Г. Воронина. -Екатеринбург: УГМА, 1999. 17 с.

18. Галактионов, В. Г. Иммунология: учебник / В. Н. Галактионов. М.: МГУ, 1998.-480 с.

19. Гриневич, Ю. А. Адоптивная иммунотерапия и ее влияние на эффективность лечения больных онкологического профиля / Ю. А. Гриневич // Онкология. 2003. - Т. 5, № 2. - С. 90-95.

20. Дидковский, Н. А. Принципы иммунокорригирующей терапии при инфекционно-воспалительных заболеваниях. РЛС / Н. А. Дидковский, И. К. Малашенкова // Аллергология и иммунология. 2006. - № 9. - С. 3-15.

21. Дидковский, Н. А. Принципы иммунокорригирующей терапии при инфекционно-воспалительных заболеваниях респираторного тракта / Н. А. Дидковский, И. К. Малашенкова // Врач. 2005. - № 10. - С. 17-24.

22. Дисфункции макрофагов, генерированных из моноцитов крови больных туберкулезом легких / Л. В. Сахно, М. А. Тихонова, С. Д. Никонов и др. // Бюллетень СО РАМН. 2010. - Т. 30, № 2. - С. 101-108.

23. Достижения и перспективы микробиологической диагностики туберкулеза / В. И. Голышевская, В. А. Пузанов, Э. В. Севастьянова и др. // Проблемы туберкулеза. 2001. - № 7. - С. 55-59.

24. Еремеев, В. В. Взаимодействие макрофаг-микобактерия в процессе реакции микроорганизма на туберкулезную инфекцию / В. В. Еремеев, К. Б. Майоров // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 3. - С. 54—57.

25. Ершов, Ф. И. Интерфероны и их индукторы (от молекулы до лекарства) / Ф. И. Ершов, О. И. Киселев. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 368 с.

26. Железникова, Г. Ф. Инфекция и иммунитет: стратегии обеих сторон / Г. Ф. Железникова // Медицинская иммунология. 2006. - № 5-6. - С. 597614.

27. Значение иммуномодуляторов в лечении больных туберкулезом легких / Б. В. Пинегин, В. А. Стаханов, С. С. Аршинова // Рецепт. 2003. - № 1. -С. 69-74.

28. Иммунная система и основные формы иммунопатологии /под ред. В. В. Климова. Ростов н/Д.: Феникс, 2006. - 224 с.

29. Иммунологические аспекты легочной патологии / под ред. М. М. Авербах. М.: Медицина, 1980. - 280 с.

30. Иммунология туберкулеза: современное состояние проблемы / В. И. Литвинов, В. Я. Гергерт, А. М. Морози др. // Вестник РАМН. 1999. - № 7. - С. 8-11.

31. Иммуномодулятор полиоксидоний в комплексной терапии больных туберкулезом легких / С. С. Аршинова, Б. В. Пинегин, В. А. Стаханов и др. // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 35-41.

32. Иммунопатология туберкулеза легких / О. В. Воронкова, О. И. Уразова,

33. B. В. Новицкий, А. К. Стрелис. Томск: Изд-во Том. ун-та, 2007. - 194 с.

34. Интерлейкин-2 в коррекции анергии Т-клеток у больных туберкулезом легких / Л. В. Сахно, М. А. Тихонова, А. А. Останин и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2006. - № 1. - С. 48-51.

35. Использование дендритных клеток и интерлейкина-18 для модуляции иммунного ответа против HBcAg in vitro / О. П. Хрипко, Е. В. Якушенко,

36. C. В. Сенников и др. // Бюллетень СО РАМН. 2008. - № 5. - С. 109-113.

37. К вопросу о патологии иммунитета при туберкулезе легких / В. В. Новицкий, А. К. Стрелис, О. И. Уразова и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2008. - № 1. - С. 15-18.

38. Казимирский, А. Н. Механизмы развития иммунодефицита при неспецифическом воспалении инфекционного генеза / А. Н. Казимирский, Г. В. Порядин, Ж. М. Салмаси // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2003. - № 3. - С. 23-26.

39. Карачунский, М. А. Туберкулез в наши дни / М. А. Карачунский // Русский медицинский журнал. 2001. - Т. 9, № 21. - С. 951-953.

40. B. А. Илларионов // Проблемы туберкулеза. 1998. - № 5. - С. 42-45.

41. Кашкин, К. П. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия / К. П. Кашкин, 3. О. Караев. JL: Медицина, 1984. - 212 с.

42. Кашкин, К. П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность / К. П. Кашкин // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - № 11. - С. 21-32.

43. Кетлинский, С. А. Роль гетеродимерных цитокинов семейства IL-12 в развитии и регуляции врожденного иммунитета и Th 1 иммунного ответа /

44. C. А. Кетлинский // Медицинский академический журнал. 2005. - № 3. -С. 13-27.

45. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев. -СПб.: Фолиант, 2008. 552 с.

46. Кетлинский, С. А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета / С. А. Кетлинский, Н. М. Калинина // Иммунология. 1995. - № 3. - С. 18-23.

47. Киселевский, М. В. Адоптивная иммунотерапия при злокачественных новообразованиях / М. В. Киселевский // Вестник РАМН. 2003. - № 3. -С. 40-44.

48. Клиническое значение фактора некроза опухоли / Б. М. Блохин, Е. С. Дубровина, А. Ю. Щербина и др. // Гематология и трансфузиология. -1995. Т. 40, № 5. - С. 34-35.

49. Ковалева, Р. Г. О возможности использования амиксина во фтизиатрической практике / Р. Г. Ковалева, М. Н. Кондакова, Т. И. Виноградова // Туберкулез сегодня: матер. VII Российского съезда фтизиатров. М., 2003. - С. 297.

50. Краснов, В. А. Бактерицидная терапия больных туберкулезом / В. А. Краснов, И. Г. Урсов // Проблемы туберкулеза. 2004. - № 3. - С. 21-27.

51. Крыжановский, Г. Н. Дизрегуляционная патология / Г. II. Крыжановский // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2002. - №3,-С. 2-19.

52. Кшановский, С. А. Профилактика туберкулеза у детей и подростков / С.

53. A. Кшановский. Киев: Здоров'я, 1985. - 117 с.51 .Лабораторные методы исследования в клинике: справочник / под ред. В.

54. B. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 364 с.

55. Лакин, Г. Ф. Биометрия: учебное пособие для биол. спец. вузов / Г. Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

56. Лимфоциты: выделение, фракционирование и характеристика: пер. с англ. / под ред. Дж. Б. Натвига, П. Перлманна, X. Вигзелля. М.: Медицина, 1980. - 280 с.

57. Ляшенко, В. А. Макрофаги в инфекционном процессе / В. А. Ляшенко // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 49-53.

58. C. А. Волгушев, И. В. Богдашин, Н. В. Теплова, Н. Л. Анкудович, С. М. Хлынин, Г. В. Янова, О. И. Уразова, А. Н. Байков. М., 2011. - 39 с.

59. Методы культуры ткани в гематологии / Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, В. П. Шахов; под ред. В. В. Новицкого. Томск: Изд-во Том. гос. ун-та,1992.-272 с.

60. Мишин, В. Ю. Клинические проявления и особенности лечения остро прогрессирующих форм туберкулеза легких в современных условиях / В. Ю. Мишин, В. И. Чуканов // Российский медицинский журнал. 2000. -№5.-С. 13-17.

61. Мишин, В. Ю. Контролируемая химиотерапия туберкулеза органов дыханияв современных условиях. Проблема лекарственной устойчивости / В. Ю. Мишин, И. Э. Степанян // Русский медицинский журнал. 2000. -Т. 8, № 12.-С. 496-510.

62. Мишин, В. Ю. Лечение впервые выявленных больных туберкулезом легких комбинированными таблетками с фиксированной дозировкой / В. Ю. Мишин, Ю. Г. Григорьев, А. Е. Дитятков // Инфекции и антимикробная терапия. 2001. - Т. 3, № 2. - С. 364-369.

63. Мишин, В. Ю. Побочное действие противотуберкулезных препаратов при стандартных и индивидуализированных режимах химиотерапии / В. Ю. Мишин, В. И. Чуканов, Ю. Г. Григорьев. М.,.2004. - 205 с.

64. Множественно лекарственно-устойчивый туберкулез легких: медико-социальные особенности и эффективность стационарного этапа лечения / О. В. Филинюк, Г. В. Янова, А. К. Стрелис и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. - №8. - С. 23-28;

65. Модуляция противотуберкулезного иммунного ответа in vitro с помощью антиген-активированных дендритных клеток / Ю. А. Шевченко, Е. В. Якушенко, С. В. Сенников и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. - № 2. - С. 33-35.

66. Молекулярно-генетические аспекты прогнозирования и иммунотерапии туберкулезной инфекции / В. В. Новицкий, О. В. Воронкова, О. И. Уразова и др. // Успехи физиологических наук. 2009. - Т. 40, № 2. - С. 40—46.

67. Нейроэндокринная регуляция иммунитета / П. Н. Учанкин, О. Н.

68. Учанкина, Б. В. Тобин и др. // Вестник РАМН. 2007. - № 9. - С. 26-31.

69. Оксид азота в механизмах патогенеза внутриклеточных инфекций I / С. Я. Проскуряков, С. И. Бикетов, А. И. Иванников, В. Г. Скворцов // Иммунология. 2000. - № 4. - С. 9-20.

70. Опыт применения кипферона при лечении больных туберкулезом легких / В. Я. Гергерт, Г. А. Космиади, С. С. Афанасьев и др. // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 7. - С. 6-8.

71. Особенности иммунологических показателей у больных с различными формами туберкулеза легких / Е. Э. Комогорова, Е. В. Костенко, В. А. Стаханов и др. // Иммунология. 2005. - № 1. - С. 45-49.

72. Оценка влияния противотуберкулезных препаратов на цитохимический статус лимфоцитов in vitro / О. А. Васильева, О. Н. Уразова, В. А. Серебрякова и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. -№>3.-С. 27-30.

73. Пальцев, М. А. Значение биомедицинских фундаментальных исследований для фтизиатрии / М. А. Пальцев // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 2. - С. 3-7.

74. Пичугин, А. В. Апоптоз клеток иммунной системы при туберкулезной инфекции / А. В. Пичугин, А. С. Апт // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. - № 12. - С. 3-7.

75. Повышение эффективности иммунодиагностики туберкулеза путем применения моноклональных антител против человека / В. Г. Авдиенко, С. Ю. Кондратов, Н. В. Куликовская и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 6. - С. 22-35.

76. Потапнев, М П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами / М. П. Потапнев // Иммунология. 2002. - Т. 23, № 4. - С. 237-243.

77. Потапнев, М. П. В-лимфоциты. Цитокинобразующая функция / М. П. Потапнев // Иммунология. 1994. - № 4. - С. 4-8.

78. Проблемы диагностики и классификации вторичных иммунодефицитов / В. С. Ширинский, Н. М. Старостина, Ю. А. Сенникова и др. // Аллергология и иммунология. 2000. - № 1. - С. 62-70.

79. Продукция оксида азота мононуклеарами крови у больных лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым туберкулезом легких / В. В. Новицкий, А. К. Стрелис, О. И. Уразова и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2006. - № 4. - С. 57-61.

80. Пролиферативный и секреторный ответ мононуклеарных лейкоцитов на комбинированное воздействие этамбутола и микобактериального антигена / О. А. Васильева, В. В. Новицкий, А. К. Стрелис и др. // Медицинская иммунология. 2009. - № 2/3. - С. 153-160.

81. Противотуберкулезные ^Е-антитела (I часть). Иммунодоминантные агенты / В. Г. Авдиенко, Г. А. Космидиади, А. В. Баенский и др. // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 2. - С. 30—33.

82. Реактивность лимфоцитов крови при туберкулезе легких / В. В.

83. Новицкий, А. К. Стрелис, О. И. Уразова и др. // Медицинская иммунология. 2009. - № 1. - С. 35-40.

84. Реактивность лимфоцитов крови при туберкулезе легких / Р. Р. Хасанова, О. В. Воронкова, О. И. Уразова и др. // Медицинская иммунология. -2009.-Т. 11, № 1,-С. 35-40.

85. Розенберг, С. А. Адоптивная иммунотерапия: клиническое применение // Биологические методы лечения онкологических заболеваний: пер. с англ. / под ред. Т. ДеВита, С. Хеллмана, С. Розенберга. М.: Медицина, 2002. -С. 505-522.

86. Романова, Р. Ю. Иммуногенные свойства и диагностическая ценность антигенов микобактерий БЦЖ: автореф. дис. . д-ра биол. наук / Р. Ю. Романова. М., 1991. - 43 с.

87. Рыдловская, А. В. Функциональный полиморфизм гена TNF А и патология / А. В. Рыдловская, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 3. - С. 4-10.

88. Салина, Т. Ю. Иммунопатогенетические механизмы в течении туберкулезной инфекции / Т. Ю. Салина, JI. Б. Худзик // Проблемы туберкулеза. 2001. - № 8. - С. 32-34.

89. Салина, Т. Ю. Продукция интерферона-у мононуклеарными клетками крови больных при разных типах течения туберкулезного процесса / Т. Ю. Салина, Т. И. Морозова // Проблемы туберкулеза и болезней легких. -2004. -№ 10.-С. 19-22.

90. Сахно, J1. В. Антигенпрезентирующие клетки при туберкулезе легких / J1. В. Сахно, Е. Р. Черных // Туберкулез и болезни легких. 2012. - №1. - С. 3-10.

91. Сахно, JI. В. Т-клеточная анергия в патогенезе иммунной недостаточности при туберкулезе легких / JL В. Сахно, М. А. Тихонова, Е. В. Курганова // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 11.-С. 23-28.

92. Симбирцев, А. С. Биология интерлейкина-1 человека в норме и патологии: автореф. дис. . д-ра мед. наук / А. С. Симбмрцев. СПб., 1993.-58 с.

93. Симбирцев, А. С. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета / А. С. Симбирцев // Иммунология. 1998. - № 6.-С. 3-8.

94. Симбирцев, А. С. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы / А. С. Симбирцев // Физиология и патология иммунной системы. 2004. - № 10. - С. 3-10.

95. Симбирцев, А. С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма / А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2002. -Т. 1, № 1.-С. 9-16.

96. Симбирцев, А. С. Цитокины: классификация и биологические функции /

97. A. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, № 2. - С. 1622.

98. Синдром вторичной иммунной недостаточности у больных с аллергическими заболеваниями и методы ее коррекции / Л. В. Лусс, Г. Н. Михеева, Е. Б. Тузлукова, С. В. Царев // Лечащий врач. 2000. - № 4. - С. 24-27.

99. Стефани, Д. В. Иммунология и иммунопатология детского возраста / Д.

100. B. Стефани, Ю. Е Вельтищев. М.: Медицина, 1996. - 384 с.

101. Субпопуляционная принадлежность Т-клегок, подверженных анергии и апоптозу у больных туберкулезом легких / Е. Р. Черных, Л. В. Сахно, М. Н. Хонина и др. // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 7. - С. 43-47.

102. Суханова, Г А. Апоптоз / ГА. Суханова, О. Е Акбашева. Томск: Изд-во ТПУ, 2006. - 172 с.

103. Тканевые и клеточные реакции легких при лекарственно-устойчивом туберкулезе / Ю. Р. Зюзя, JI. Н. Лепеха, Л. Е. Гедымин // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 8. - С. 53-57.

104. Тополиан, С. Л. Адоптивная клеточная терапия: преклинические исследования // Биологические методы лечения онкологических заболеваний: пер. с англ. / под ред. Т. ДеВита, С. Хеллмана, С. Розенберга. М.: Медицина, 2002. - С. 484-503.

105. Туберкулез. Патогенез, защита, контроль / под ред. Б. Р. Блума. М.: Медицина, 2002. - 696 с.

106. Тюлькова, Т. Е. Особенности функционирования иммунной системы при туберкулезной инфекции / Т. Е. Тюлькова, Ю. П. Чугаев, Э. А. Кашуба // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. - № 11. - С. 48-55.

107. Урсов, И. Г. Эпидемиология туберкулеза и диспансеризация населения / И. Г. Урсов. Новосибирск, 2003. - 182 с.

108. Филинюк, О. В. Факторы риска, ассоциированные с множественно лекарственно-устойчивым туберкулезом: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. Новисибирск, 2011. - 47 с.

109. Фрейдлин, И. С. Клетки иммунной системы / И. С. Фрейдлин, А. А. Тотолян. СПб.: Наука, 2001. - 390 с.

110. Фрейдлин, И. С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции / И. С. Фрейдлин // Иммунология. 2001. - № 5. - С. 4-7.

111. Фрейдлин, И. С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функции / И. С. Фрейдлин // Медицинская иммунология. 2005. - Т. 7, № 4. - С. 347354.

112. Фрейдлин, И. С. Современные представления о фагоцитарной теории /

113. И. С. Фрейдлин // Иммунология. 2008. - № 5. - С. 4-10.

114. Функциональные и цитохимические особенности фагоцитов у больных туберкулезом легких / О. В. Филинюк, Н. А. Земляная, О. И. Уразова и др. // Бюллетень Сибирской медицины: научно-практический журнал. -2005.-Т. 4,№ 1 .-С. 24-27.

115. Хаитов, Р. М. Иммуномодуляторы: классификация, фармакологическое действие, клиническое применение / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин ГНЦ // Фарматека. 2004. - № 7. - С. 10-15.

116. Хаитов, Р. М. Экологическая иммунология / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, X. И Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 1995. - 219 с.

117. Характеристика гуморального иммунного ответа у больных туберкулезом легких до и в динамике противотуберкулезной химиотерапии / В. В. Новицкий, А. К. Стрелис, О. И. Уразова и др. // Иммунология. 2008. - № 5. - С. 281-284.

118. Цитокиновый профиль при гранулематозных заболеваниях легких / Л.Д. Гунтупова, С.Е. Борисов, Е.А. Купавцева и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. - № 6. - С. 4-10.

119. Цитокиновый статус у больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью / О. И. Уразова, В. В. Новицкий, Е. Г. Чурина и др. // Российский иммунологический журнал. 2011. - Т. 5, № 3/4.-С. 244-253.

120. Цитохимическая и микробицидная активность фагоцитов крови у больных туберкулезом легких / А. К. Стрелис, О. И. Уразова, Н. М. Шевцова и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2007. - № 1. - С. 6266.

121. Чередеев, А. Н. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий / А. Н. Чередеев, Н. К. Горлина, И. Г. Козлов // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 6. - С. 25-32.

122. Чучалин, А. Г. Новые данные иммунных реакций при туберкулезе / А.

123. Г. Чучалин // Русский медицинский журнал. 2004. - Т. 12, № 2. - С. 8890.

124. Ярилин, А. А. Иммунология / А. А. Ярилин // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. 749 с.

125. Ярилин, А. А. Межклеточная кооперация при иммунном ответе. Выбор клеткой формы ответа / А. А. Ярилин // Иммунология. 1999. - № 1. - С. 17-24.

126. Ярилин, А. А., Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3/ А. А. Ярилин, А. Д. Донецкова // Иммунология. 2006. - № 3. - С. 176— 188.

127. A controlled clinical study on the efficacy of recombinant human interleukin-2 in the treatment of pulmonary tuberculosis / N. H. Chu, L. Z. Zhu, Z. Z. Yie et al. // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. 2003. - Vol. 26. -P. 548-551.

128. A TNF- and c-CDl-dependent FLIP(S)-degradation pathway and its function in Mycobacterium tuberculosis-induced macrophage apoptosis / M. Kundu, S.K. Pathak, K. Kumawat et al. // Nat. Immunol. 2009. - Vol. 10. -P. 918-926.

129. Activation and maturation of antigen-presenting dendritic cells during vaccine therapy in patients with chronic hepatitis due to hepatitis В virus / N. Horiike, S. Md Fazle Akbar, T. Ninomiya et al. // Hepatol. Res. 2002. - Vol. 23-P. 38-47.

130. Activation of human CD8 TCR cells by Mycobacterium tuberculosis via an alternate class I MHC antigen-processing pathway / D. H. Canaday, C. Zicbold, E. H. Noss et al. // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - P. 372-378.

131. Adoptive cellular therapy / D. M. Hoffman, B. J. Gitlitz, A. Belldegrun, R. A. Figlin // Semin. Oncol. 2000. - Vol. 27. - P. 221-233.

132. An anti-microbial activity of cytotoxic T cells mediated by granulysin / S. Stenger, D. A. Hanson, R. Teitelbaum et al. // Science. 1998. - Vol. 282. -P. 121-125.

133. Andersen, P. Host responses and antigens involved in protective immunity to Mycobacterium tuberculosis / P. Andersen // Scand. J. Immunol. -1997.-Vol. 45.-P. 115-121.

134. Antibiotic-induced apoptosis in human activated peripheral lymphocytes / J. Kadota, S. Mizunoe, K. Kishi et al. // Int. J. Antimicrob. Agents. 2005. - Vol. 25.-P. 216-220.

135. Antony, P. A. CD4+CD25+ T regulatory cells, immunotherapy of cancer, and interleukin-2 / P. F. Antony, N. P. Restifo // J. Immunol. 2005. -Vol. 28-P. 120-128.

136. Apoptosis and T cell hyporesponsiveness in pulmonary tuberculosis / C. S. Hirsch, Z. Toossi, G. Vanham et al. // J. Inf. Dis. 1999. - Vol. 179. - P. 945-953.

137. Apoptosis in mycobacterium tuberculosis infection in mice exhibiting varied immunopathology / V. E. Watson, L. L. Hill, L. B. Owen-Schaub et al. // J. Pathol. 2000. - Vol. 190. - P. 211-220.

138. Apoptosis of Thl-like cells in experimental tuberculosis / G. Das, H. Vohra, B. Saha et al. // Clin. Exp. Immunol. 1999. - Vol. 115. - P. 324-328.

139. Apoptosis, production of MMP9, VEGF, TNF-alpha and intracellular growth of M. tuberculosis for different genotypes and different pks5/l genes /

140. J. Yorsangsukkamol, A. Chaiprasert, T. Palaga et al. // Asian Pac. J. Allergy Immunol. 2011. - Vol. 29. - P. 240-251.

141. Banchereau, J. Dendritic cells as therapeutic vaccines against cancer / J. Banchereau, A. K. Palucka // Nature Rev. Immunol. 2005. - P. 296-306.

142. Barnes, P. F. Immunotherapy for Tuberculosis. Wave of the Future or Tilting at Windmills? / P. F. Barnes // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. -Vol. 168.-P. 142-143.

143. Beutler, B. Inferences, questions and possibilities in Toll-like receptor signaling / B. Beutler // Nature. 2004. - Vol. 430. - P. 257-263.

144. Bhatt, K. Host innate immune response to mycobacterium Tuberculosis / K. Bhatt, P. Salgame // J. Clin. Immunol. 2007. - Vol. 27. - P. 347-362.

145. Brombacher, F. Novel IL-12 family members shed light on the orchestration of Thl responses / F. Brombacher, R. A. Kastelein, G. Alber // Trends Immunol. 2003. - Vol. 24. - P. 207-212.

146. Bronchoalveolar lavage in children with inflammatory and non inflammatory lung disease / D. Gidaris, F. Kanakoudi-Tsakalidou, D. Papakosta et al. // Hippokratia. 2010. - Vol. 14. - P. 109-114.

147. Bystander inhibition of dendritic cell differentiation by Mycobacterium tuberculosis-induced IL-10 / M. E. Remoli, E. Giacomini, E. Petruccioli et al. // Immunol. Cell Biol. 2011. - Vol. 89. - P. 437-446.

148. Bystander macrophage apoptosis after Mycobacterium tuberculosis H37Ra infection / D.M. Kelly, A.M. ten Bokum, S. M. O'Leary et al. // J. Infect. Immun. 2008. - Vol. - P. 351-360.

149. Calcineurin/nuclear factor of activated T cells and MAPK signaling induce TNF-alpha gene expression in pancreatic islet endocrine cells / M. C.1.wrence, B. Naziruddin, M. F. Levy et al. // J. Biol. Chem. 2011. - Vol. 286.-P. 1025-1036.

150. Caligiuri, M. A. Human natural killer cells / M. A. Caligiuri // Blood. -2008. Vol. 112. - P. 461^169.

151. Cancer regression and autoimmunity in patients after clonal repopulation with antitumor lymphocytes / M. E. Dudley, J. R. Wunderlich, P. F. Robbins et al. // Science. 2002. - Vol. 298. - P. 850-854.

152. CD 1-restricted microbial lipid antigen-specific recognition found in the CD8 T cell pool / J. P. Rosat, E. P. Grant, E. M. Beckman et al. // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - P. 366-372.

153. CD8+ CTL from lungs of Mycobacterium tuberculosis-infected mice express perforin in vivo and lyse infected macrophages / N. V. Serbina, C. C. Liu, C. A. Scanga, J. L. Flynn // J. Immunol. 2000. - Vol. 165. - P. 353-363.

154. Characterization of human CD8 T cells reactive with Mycobacterium tuberculosis-infected antigen presenting cells / D. Lewinsohn, M. Alderson, A. Briden et al. // J. Exp. Med. 1998. - Vol. 187. - P. 1633-1640.

155. Chen, G. TNF-R1 signaling: a beautiful pathway / G. Chen, D. V. Goeddel // Science. 2002. - Vol. 269. - P. 1634-1635.

156. Cjlonna, M. Interferon-producing cells: on the front line in immune responses against pathogens / M. Cjlonna, A. Krug, M. Cella // Curr. Opin. Immunol. 2002. - Vol. 14. - P. 373-379.

157. Clinical efficacy of direct DNA sequencing analysis on sputum specimens for early detection of drug-resistant Mycobacterium tuberculosis in a clinical setting / J. H. Choi, K. W. Lee, H. R. Kang, et al. // Chest. 2010. -Vol. 137.-P. 393-400.

158. Clinical research on the treatment effect of autologous dendritic cell vaccine on the patients with chronic hepatitis B / Y. G. Li, M. Chen, D. Z. Zhang et al. // Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2003. - Vol. 11. - P. 206208.

159. Colino, J. Dendritic cells, new tools for vaccination / J. Colino, C. M. Snapper // Microbes and infection. 2003. - Vol. 5. - P. 311-319.

160. Condos, R. Cytokine-Based Approaches to the Treatment of Multidrug-Resistant Tuberculosis / R. Condos, N. W. Schluger // Biodrugs. 1999. - Vol. 11.-P. 165-173.

161. Cooper, A. M. The protective immune response to Mycobacterium tuberculosis / A. M. Cooper, J. L. Flynn // Curr. Opin. Immunol. 1995. - Vol. 7.-P. 512-516.

162. Crevel, R. van Innate immunity to Mycobacterium tuberculosis / R. van Crevel, T. H. M. Ottenhoff, J. W. M. van der Meer // Clin. Microbiol. Rev. -2002.-Vol. 15.-P. 294-309.

163. Culley, F. J. Natural killer cells in infection and inflammation of the lung /F. J. Culley//Immunology. 2009. - Vol. 128.-P. 151-163.

164. Cyster, J. G. Chemokines and the homing of dendritic cells to the T-cell areas of lymphoid organs / J. G. Cyster // Nature Immunol. 2000. - Vol. 203. -P. 630-638.

165. Dalod, M. Interferon a/ß and interleukin 12 responses to viral infections: pathways regulating dendritic cell cytokine expression in vivo / M. Dalod // J. Exp. Med. 2002. - Vol. 195. - P. 517-528.

166. Dendritic cell-based immunotherapy combined with antimony-based chemotherapy cures established murine visceral leishmaniasis / M. Ghosh, C. Pal, M. Ray et al. // J Immunol. 2003. - Vol. 170. - P. 5625-5629.

167. Dendritic cells acquire antigen from apoptotic cells and induce class 1 -restricted CTLs / M. L. Albert, B. Sauter, N. Bhardway et al. // Nature. 1998. -Vol. 392.-P. 86-89.

168. Dendritic cells infected with Mycobacterium bovis bacillus Calmctte Guerin activate CD8' T cells with specificity for a novel mycobacterial epitope / C. G. Feng, C. Demangel, A. T. Kamath et al. // Immunology. 2001. - Vol. 13.-P. 451—458.

169. Differential effects of three antibiotics on T helper cell cytokine expression / A. C. Williams, H. F. Galley, A. M. Watt et al. // J. Antimicrob. Chemother. 2005. - Vol. 56. - P. 502-506.

170. Diosgenin inhibits macrophage-derived inflammatory mediators through downregulation of CK2, JNK, NF-kappaB and AP-1 activation / D. H. Jung, H. J. Park, H. E. Byun // Int. Immunopharmacol. 2010. - Vol. 10. - P. 10471054.

171. Direct binding of human NK cell natural cytotoxicity receptor NKp44 to the surfaces of mycobacteria and other bacteria / S. Esin, G. Batoni, C. Counoupas et al. // Infect. Immun. 2008. - Vol. 76. - P. 1719-1727.

172. Effect of intraportal adoptive immunotherapy on liver metastases after resection of pancreatic cancer / M. Kobari, S. Egawa, K. Shibuya et al. // Br. J. Surg. 2000. - Vol. 87. - P. 43-48.

173. Effect of nitric oxide synthase inhibitors on murine infection with Mycobacterium tuberculosis / J. Chan, K. Tanaka, D. Carroll et al. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. - P. 736-740.

174. Effective migration of antigen-pulsed dendritic cells to lymth nodes in melanoma patients is determined by their maturation state / I. J. de Vries, D. J. Krooshoop, N. M. Scharenborg et al. // Cancer Res. 2003. - Vol. 63. - P. 1217.

175. Effects of lamivudine on the function of dendritic cells derived from patients with chronic hepatitis B virus infection / P. Y. Zheng, D. Y. Zhang, G. F. Lu et al. // World J. Gastroenterol. 2007. - Vol. 13. - P. 4641-4645.

176. Effects of tumor necrosis factor alpha on host immune response in chronic persistent tuberculosis: possible role for limiting pathology / V. P. Mohan, C. A. Scanga, K. Yuet al. // Infect. Immun. 2001. - Vol. 69. - P. 1847-1855.

177. Ellner, J. J. The Immune Response in Human Tuberculosis-Implications for Tuberculosis Control / J. J. Ellner // J. Infect. Dis. 1997. - Vol. 176. - P. 1351-1359.

178. Exogenous Nef is an inhibitor of Mycobacterium tuberculosis-induced tumor necrosis factor-alpha production and macrophage apoptosis / K. Kumawat, S. K. Pathak, A. L. Spetz et al. // J. Biol. Chem. 2010. - Vol. 285. -P. 12629-12637.

179. Feedback control of regulatory T cell homeostasis by dendritic cells in vivo / G. Darrasse-Jèze, S. Deroubaix, H. Mouquet et al. // J. Exp. Med. -2009. Vol. 206. - P. 741-750.

180. Flynn, J. L. Immune responses in tuberculosis / J. L. Flynn, J. D. Ernst // Curr. Opin. Immunol. 2000. - Vol. 12. - P. 432-436.

181. Flynn, J. L. Immunology of tuberculosis / J. L. Flynn, J. Chan // Annu. Rev. Immunol. 2001. - Vol. 19. - P. 93-129.

182. Forsgren, A. 4-Quinolone drugs affect cell cycle progression and function of human lymphocytes in vitro / A. Forsgren, S. F. Schlossman, T. F. Tedder // Antimicrob Agents Chemother. 1987. - Vol. 31. - P. 768-773.

183. Functional capacity of Mycobacterium tuberculosis-specific T cellresponses in humans is associated with mycobacterial load / C. L. Day, D. A. Abrahams, L. Lerumo et al. // J. Immunol. 2011. - Vol. 187. - P. 2222-2232.

184. Gilliet, M. Generation of human CD8 T regulatory cells by CD40 ligand-activated plasmacytoid dendritic cells / M. Gilliet, Y. J. Liu // J. Exp. Med. -2002. Vol. 18! - P. 695-704.

185. Harris, M. Medical Statistics Made Easy 2004 / M. Harris, G. Taylor. -Informa Healthcare, 2003. 114 p.

186. Hart, D. N. J. Dendritic Cells: Unique Leukocyte Populations Which Control the Primary Immune Response / D. N. J. Hart // Blood. 1997. - Vol. 90, № 9. - P. 3245-3287.

187. Holt, P. G. Cross-presentation, dendritic cell subsets and the generation of immunity to cellular antigens / P. G. Holt, H. Oliver // Immunology. 2002. -Vol. 75. -P. 405^13.

188. Human NK cells directly recognize Mycobacterium bo vis via TLR2 and acquire the ability to kill monocytederived DC / E. Marcenaro, B. Ferranti, M. Falco et al. // Int. Immunol. -2008. Vol. 20. - P. 1155-1167.

189. IL-27 regulates IL-12 responsiveness of na'ive CD4+ T cells through Statl-dependent and -independent mechanisms / L. Sophie, N. Ghilardi, J. Li, F. J. de Sauvage // Sauvage. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100. - P. 15047-15052.

190. Immunopathologic effects of tumor necrosis factor alpha in murine mycobacterial infection are dose-dependent / L. G. Bekker, A. L. Moreira, A. Bergtold et al. // Infect. Immun. 2000. - Vol. 68. - P. 6954-6961.

191. Immunophenotypic characterization of peripheral T lymphocytes in Mycobacterium tuberculosis infection and disease / D. S. S. Rodrigues, E. A. S. Medoiros, L. Y. Weckx et al. // Clinical & Experimental Immunology. -2002.-Vol. 128.-P. 149-154.

192. In human B cells, IL-12 triggers a cascade of molecular events similar to Thl commitment / D. Durali, M. G. de Goër de Herve, J. Giron-Michel et al. // Blood. 2003. - Vol. 102. - P. 4084-^089.

193. In vitro effects of ciprofloxacin and roxithromycin on apoptosis of jurkat T lymphocytes / Y. T. Jun, H. J. Kim, M. J. Song, et al. // Antimicrob. Agents Chemother. 2003. - Vol. 47. - P. 1161-1164.

194. Induction of in vitro human macrophage anti-Mycobacterium tuberculosis activity: requirement for IFN-gamma and primed lymphocytes / M. Bonecini-AImeida, S. Chitale, I. Boutsikakis et al. // J. Immunol. 1998. -Vol. 160.-P. 4490-4499.

195. Induction of transforming growth factor beta 1 by purified protein derivative of Mycobacterium tuberculosis / Z. Toossi, T. G. Young, L. E. Averill et al. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. - P. 224-228.

196. Inhibition of interleukin-10 signaling in lung dendritic cells by toll-like receptor 4 ligands / P. Jose, M. G. Avdiushko, S. Akira et al. // Exp. Lung. Res. -2009.-Vol. 35.-P. 128.

197. Interleukin-10 downregulates Mycobacterium tuberculosis-induced Thl responses and CTLA-4 expression / J. H. Gong, M. Zhang, R. L. Modlin et al. // Infect. Immun. 1996. - Vol. 64. - P. 913-918.

198. Interleukin-12 secretion by Mycobacterium tuberculosis-infected macrophages / C. H. Ladcl, G. Szalay, D. Reidel, S. H. Kaufmann // Infect. Immun. 1997. - Vol. 65. - P. 1936-1938.

199. Kaufmann, S. H. E. Immunity to intracellular bacteria and protozoa / S. H. E. Kaufmann // Immunologist. 1995. - Vol. 3. - P. 221-225.

200. Khan, A. A. HIV/tuberculosis co-infection: are new approaches needed / A. A. Khan, A. J. Khan // J. Coll. Physicians Surg. Pak. 2008. - Vol. 18. - P. 324.

201. Kintzel, P. E. Recombinant interleukin-2: A biological response / P. E. Kintzel, K. A. Calis // Clin. Pharmacol. 1991. - Vol. 10. - P. 110-128.

202. Lazarevic, V. CD8+T cells in tuberculosis / V. Lazarevic, J. Flynn // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002. - Vol. 166. - P. 1116-1121.

203. Leukotriene B4 receptor BLT1 mediates early effector T cell recruitment / A. M. Tager, S. K. Bromley, B. D Medoff et al. // Nat Immunol. 2003. - Vol. 4. - P. 982-990.

204. Liu, K. Origin and development of dendritic cells / K. Liu, M. C. Nussenzweig // Immunol. Rev. 2010. - Vol. 234. - P. 45-54.

205. Lucas, M. Dendritic cells prime natural killer cells by trans-presenting interleykin 15 / M. Lucas, K. Oberle // Immunity. 2007. - Vol. 26. - P. 503517.

206. McCoy, M. E. Th2-specific immunity and function of peripheral T cells is regulated by the p56Lck Src homology 3 domain / M. E. McCoy, F. D. Finkelman, D. B. Straus // Immunol. 2010. - Vol. 185. - P. 122-127.

207. Modification of immune response in mice by ciprofloxacin / M. Jimenez-Valera, A. Sampedro, E. Moreno et al. // Antimicrob Agents Chemother. -1995-Vol. 39.-P. 150-154.

208. Orme, I. M. Development of new vaccines and drugs for TB: limitations and potential strategic errors / I.M. Orme // Future Microbiol. 2011. -Vol. 6. -P. 161-177.

209. Pace, L. IL-4 modulation of CD4+CD25+ T regulatory cell-mediated suppression / L. Pace, C. Pioli, G. Doria // J. Immunol. 2005. - Vol. 174. - P. 7645-7653.

210. Paczensny, S. Expansion of melanoma-specific cytolytic CD8+ T-cell precursors in patients with metastatic melanoma / S. Paczensny // J. Exp. Med. -2004.-Vol. 199.-P. 1503-1511.

211. Pathogenic Mycobacterium tuberculosis evades apoptosis of host macrophages by release of TNF-R2, resulting in inactivation of TNF-a / M. K. Balcewicz-Sablinska, J. Keane, H. Kornfeld, H. G. Remold // J. Immunol. -1998.-Vol. 161.-P. 2636-2641.

212. Peripheral immune response in pulmonary tuberculosis / E. Aktas, F. Ciftci, S. Bilgic et al. // Scand. J. Immunol. 2009. Vol. 70. P. 300-308.

213. Persistence of Mycobacterium tuberculosis in macrophages and mice requires the glyoxylate shunt enzyme isocitrate lyase / J. D. McKinney, K. Honer zu Bentrup, E. J. Munoz-Elias et al. // Nature. 2000. - Vol. 406. - P. 735-738.

214. Personalizing gene therapy in gastric cancer / Vogiatzi P., Cassone M., Clfudio P.P. // Drug News Perspect. 2006. - Vol.19. - P.533-540.

215. Pieters, J. Hijacking the host: survival of pathogenic mycobacteria inside macrophages / J. Pieters, J. Gatfield // Trends Microbiol. 2002. - Vol. 10. -P. 142-146.

216. Porcelli, S. A. The CD1 system: antigen-presenting molecules for T cell recognition of lipids and glycolipids / S. A. Porcelli, R. L. Modlin // Ann. Rev. Immunol. 1999. - Vol. 17. - P. 297-329.

217. Qualitatively distinct patterns of cytokines are released by human dendritic cells in response to different pathogens / K. Scott, M. Manunta, C. Germain et al. // Immunology. 2005. - Vol. 116. - P. 245-254.

218. Raupach, B. S. Immune responses to intracellular bacteria / B. S. Raupach, H. Kaufmann // Curr. Opin. Immunol. 2001. - Vol. 13. - P. 417428.

219. Recognition of helical kinks by xeroderma pigmentosum group A protein triggers DNA excision repair / U. Camenisch, R. Dip, S. B. Schumacher et al. // Nat. Struct. Mol. Biol. 2006. - Vol. 13. - P. 278-284.

220. Redford, P. S. The role of IL-10 in immune regulation during M. tuberculosis infection/ P. S. Redford, P. J. Murray, A. O'Garra // Mucosal. Immunol. 2011. - Vol. 4. - P. 261-270.

221. Regulatory T cells and immune tolerance / S Sakaguchi, T. Yamaguchi, T. Nomura et al. // Cell. 2008. - Vol. 1 33.-775-787.

222. Riesbeck, K. Ciprofloxacin interferes with the immunosuppressive effects of cyclosporin A on cytokine production in vitro / K. Riesbeck, H. Ekberg, A.

223. Forsgren // Transplant Proc. 1994. - Vol. 26. - P. 1734-1735.

224. Selective addition of CXCR3(+) CCR4(-) CD4(+) Thl cells enhances generation of cytotoxic T cells by dendritic cells in vitro / S. H. Yoon, S. O. Yun, J. Y. Park et al. // Mol. Med. 2009. - Vol. 41. - P. 161-170.

225. Selective contribution of IFN-alpha/beta signaling to the maturation of dendritic cells induced by double-stranded RNA or viral infection / K. Honda, S. Sakaguchi, C. Nakajima et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100.-P. 10872-10877.

226. Signaling by IL-12 and IL-23 and the immunoregulatory roles of STAT4 / W. T. Watford, B. D. Hissong, Y. Kanno et al. // Immunological Reviews. -2004. Vol. 202. - P. 139-156.

227. Signalling to transcription: store-operated Ca2+ entry and NFAT activation in lymphocytes / Y. Gwack, S. Feske, S. Srikanth et al. // Cell Calcium. -2007.-Vol. 42.-P. 145-156.

228. Singh, B. Depletion of pulmonary intravascular macrophages inhibits acute lung inflammation / B. Singh, J. W. Pearce, L. N. Gamageet at al. // American Journal of Physiology: Lung Cellular and Molecular Physiology. 2004. -Vol. 286.-P. 363-372.

229. Singh, B. Intracellular expression of Mycobacterium tuberculosis specific 10-kDa antigen down-regulates macrophage B7.1 expression and nitric oxide release / B. Singh, G. Singh, V. Trajkovic et al. // Clin. Exp. Immunol. 2003. -Vol. 134.-P. 70-77.

230. Soares H. A subset of dendritic cells induces CD4+ T-cells to produce IFN-gamma by an IL-12 independent but CD70- dependent mechanism in vivo / H. Soares // J. Exp. Med. 2007. - Vol. 204. - P. 1095-1106.

231. STAT4 serine phosphorylation is critical for IL-12-induced IFN-y production but not for cell proliferation / A. Morinobu, M. Gadina, W. Strober et al. // Proct. Natl. Acad. Sci. 2002. - Vol. 99. - P. 1281-1286.

232. Steiman, R. M. Taking dendritic cells into medicine / R. M. Steiman, J.

233. Banchereau // Nature. 2007. - Vol. 449. - P. 419^26.

234. Steinman, R. M. Tolerogenic dendritic cells / R. M. Steinman, D. Hawiger, M. C. Nussenzweig // Immunology. 2003. - Vol. 21. - P. 685-711.

235. Stenger, S. Down-regulation of CD1 on antigen presenting cells by infection with Mycobacterium tuberculosis / S. Stenger, K. R. Niazi, R. L. Modlin II//J. Immunol. 1998.-Vol. 161.-P. 3582-3588.

236. Stenger, S. T cell mediated immunity to Mycobacterium tuberculosis / S. Stenger, R. L. Modlin // Curr. Opin. Microbiol. 1999. - Vol. 2. - P. 89-93.

237. Suppression of allergic inflammation by allergen-DNA-modified dendritic cells depends on the induction of Foxp3+ Regulatory T cells / K. Wu, Y. Bi, K. Sun et al. // Scand. J. Immunol. 2008. - Vol. 67. - P. 140-151.

238. Suppressor of cytokine signaling-3 is affected in T-cells from tuberculosisTB patients / M. Jacobsen, D. Repsilber, K. Kleinsteuber et al. // Clin. Microbiol. Infect.-2011.-Vol. 17.-P. 1323-1331.

239. T cell cytokine responses in human infection with Mycobacterium tuberculosis / M. Zhang, Y. Lin, D. V. Iyer et al. // Infect. Immun. 1995. -Vol. 63.-P. 3231-3234.

240. T cell polarity at the immunological synapse is required for CD154-dependent IL-12 secretion by dendritic cells / M. Tourret, S. Guegan, K. Chemin et al. // J. Immunol. 2010. - Vol. 185. - P. 6809-6818.

241. T regulatory cells and Thl/Th2 cytokines in peripheral blood from tuberculosis patients / X. Y. He, L. Xiao, H. B. Chen et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2010. - Vol. 29. - P. 643-650.

242. The effect of CTLA4-Ig gene modified dendritic cell on Thl/Th2 balance in vitro / L. Y. Ying, Z. Fu, J. Luo, et al. f/Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi.-2011.-Vol. 27.-P. 266-269.

243. The role of the IL-12 cytokine family in directing T-cell responses in oral candidosis / X. Q. Wei, H. Rogers, M. A. Lewis et al. // Clin. Dev. Immunol. -2011.-Vol. 2011.-P. 697340-697350.

244. The use of growth factors to modulate the activities of antigen-specific CD8+ T cells in vitro / F. Alenzi, F. Alenazi, Y. Al-Kaabi, M. Salem // J. Med. Life.-2011.-Vol. 4, N4.-P. 399-406.

245. TNF-a contributes to caspase-3 independent apoptosis in neuroblastoma cells: role of NFAT / S. Alvarez, A. Blanco, M. Fresno, M. A. Muñoz-Fernández // PLoS One. 2011. - Vol. 27. - P. 161-170.

246. Toll-like receptor-2 mediates mycobacteria-induced proinflammatory signaling in macrophages / D. M. Underhill, A. Ozinsky, K. D. Smith, A. Aderem // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - P. 14459-14463.

247. Treatment outcome and mortality among patients with multidrug-resistant tuberculosis in tuberculosis hospitals of the public sector / D. S. Jeon, D. O. Shin, S. K. Park et al. // J. Korean Med Sci. 2011. - Vol. 26. - P. 3341.

248. Tumor necrosis factor gene-engineered J558 tumor cell-released exosomes stimulate tumor antigen PlA-specific CD8+ CTL responses and antitumor immunity / Y. Xie, O. Bai, H. Zhang et al. // Cancer Biother. Radiopharm. 2010. - Vol. 25. - P. 21-28.

249. Vahlenamp, T. W. The role of CD4+CD25+ regulatory T cells in viral infections / T. W. Vahlenamp, M. B. Tompkins, W. A. Tompkins // Vet. Immunol. Immunopathol. 2005. - Vol. 108. - P. 219-225.

250. Verreck, F. A. Human IL-23-producing type 1 macrophages promote but IL-10-producing type 2 macrophages subvert immunity to (myco)bacteria / F. A. Verreck // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. Vol. 101. - P. 4560-4565.

251. Wells, C. D. Global Impact of Multidrug-Resistant Pulmonary Tuberculosis Among HIV-infected and Other Immunocompromised Hosts: Epidemiology,1.66) i

252. Diagnosis, and Strategies for Management // Curr. Infect. Dis. Rep. -2010. -Vol. 12.-P. 192-197.

253. West, A. P. Recognition and signaling by toll-like receptors / A. P. West, A. A. Koblansky, S. Ghosh // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2006. - Vol. 22. - P. 409-437.

254. Wood, K. J. Interferon gamma: a crucial role in the function of induced regulatory T cells in vivo / K. J. Wood, B. Sawitzki // Trends Immunol. -2006.-Vol. 27.-P. 183-187.

255. Xeroderma pigmentosum complementation group A protein is driven to nucleotide excision repair sites by the electrostatic potential of distorted DNA / U. Camenisch, R. Dip, M. Vitanescu, et al. // DNA Repair. 2007. - Vol. 6. -P.1819-1828.

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких

Автореферат диссертации по медицине на тему иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких

Оглавление диссертации Теплова, Надежда Владимировна :: 2012 :: Томск

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Теплова, Надежда Владимировна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "иммуномодулирующее действие клеточной аутотерапии при туберкулезе легких"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Теплова, Надежда Владимировна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций