Автореферат и диссертация по медицине (14.03.09) на тему:ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ

005048271

На правах рукописи

Пёхова Ксения Александровна

ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ

14.03.09 - клиническая иммунология, аллергология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 О ЯНВ 2013

Курск - 2012

005048271

Работа выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ Конопля Александр Иванович

Официальные оппоненты:

Бровкина Инна Леонидовна - доктор медицинских наук, профессор, государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, заведующий кафедрой спортивной медицины и лечебной физкультуры

Земсков Андрей Михайлович - доктор медицинских наук, заслуженный деятель науки РФ, профессор, государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации, заведующий кафедрой микробиологии

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Защита диссертации состоится « » ¿¿¿¿£^^2/^/2013 г. в часов

на заседании диссертационного совета Д 208.039.01 при государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России.

Автореферат разослан «7 7 jfar 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор / Хмелевская И.Г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Эссенциальная артериальная гипертензия (гипертоническая болезнь) относится к числу наиболее распространенных заболеваний сердечно-сосудистой системы. Несмотря на то что во всем мире ведется активное изучение эссенциальной артериальной гипертензии, причины до сих пор не установлены и в настоящее время считается, что это заболевание многофакторное (Хлебодаров Ф.Е., 2010; Чазова И.Е., Ратова Л.Г., 2010). Проблема лечения и профилактики осложненной артериальной гипертонии является на сегодняшний день одной из ведущей в современной медицине в связи с ранней инвалидизацией, повышенным риском развития сердечно-сосудистых осложнений и преждевременной смертности (Афонасков О.В., 2011).

Важная роль в развитии сосудистых осложнений принадлежит дисфункции эндотелия. При артериальной гипертензии было доказано ее наличие для системы периферической, коронарной микро- и макроциркуляции. Развивающаяся эндотелиальная дисфункция в условиях гипертонической болезни обусловлена в первую очередь активацией свободнорадикальных процессов, приводящих к уменьшению синтеза эндогенного NO, являющегося самым мощным эндогенным вазодилататором (Глова С.Е., 2007; Лебедев П.А. и др., 2010).

При гипертонической болезни возникает «окислительный стресс», сопровождающийся дисфункцией сосудистого эндотелия, расстройствами микроциркуляции, адренергическими и вегетативными нарушениями, которые приводят, наряду с активацией нейрогуморальной системы, к дисбалансу цитокинового статуса (Бочарова К.А., Князева Л.А., 2007), развитию иммунного воспаления, нарушению фибринолиза, что усугубляет степень сердечной недостаточности. Итогом этих процессов является патологическое ремоделирование левого желудочка с дальнейшим прогрессированием его систоло-диастолической дисфункции (Yusuf S. et al., 2008). При этом особая роль отводится активизации провоспалительных цитокинов, подавляющих продукцию оксида азота (Карпов Ю.А., 2010).

Отсутствие очевидных воспалительных процессов при артериальной гипертонии делает проблему иммунологических нарушений во многом спорной. Однако было показано увеличение концентрации IgG, IgA при гипертонической болезни, особенно с кризовым течением. Увеличение концентрации IgG ассоциируется с развитием сердечно-сосудистых осложнений. Повышению концентрации IgA у больных гипертонической болезнью придают су-щественное значение в образовании иммунных комплексов, имеющих особый тропизм к сосудистой стенке. В изучении вопроса о значении иммунологических нарушений при артериальной гипертонии показано увеличение уровня аутоантител к антигенам из ткани аорты и сердца. Выявленные повышения титров аутоантител к интиме сосудов, а также нарастание иммуноглобулинов при кризах указывает на развитие ремоделирования сосудов при артериальной гипертензии (Минга-зетдинова Л.Н. и др., 2006). В полной мере вопрос состояния иммунной системы при эссенциальной артериальной гипертензии остается практически не изученным.

При этом нельзя забывать и о том, что одними из регуляторов функциональной активности иммуноцитов являются эритроциты (Конопля А.И. и др., 20И). Повышенный интерес исследователей к эритроциту при болезнях разного генеза обусловлен его участием в процессах, связанных с поддержанием го-меостаза на уровне целого организма, и, прежде всего, иммунного. Существующие данные не оставляют сомнений в том, что эритроциты являются важным звеном механизма иммунорегуляции при стрессе и в условиях патологии (Прокопенко Л.Г. и др., 2006; Долгарева С.А. и др., 2011).

Отсутствие достоверных данных об изменениях структурно-функциональных свойств эритроцитов и иммунометаболических нарушениях при гипертонической болезни предопределяет целесообразность их детального изучения для определения в дальнейшем способов коррекции при данной нозологии.

Цель работы: установление взаимосвязи между иммунометаболически-ми нарушениями и структурно-функциональными свойствами эритроцитов при гипертонической болезни.

Задачи исследования.

1. Установить характер и степень выраженности изменений показателей иммунного статуса, перекисного окисления липидов, антиоксидантной системы защиты у пациентов с гипертонической болезнью в зависимости от стадии заболевания.

2. Проанализировать иммунокорригирующую эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертонической болезнью различной стадии.

3. Определить нарушения структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов у пациентов с различной стадией гипертонической болезни.

4. Выявить корреляционные взаимосвязи между иммунометаболическими показателями и структурно-функциональными свойствами красных клеток крови у больных гипертонической болезнью.

5. Установить лабораторные показатели иммунного статуса для оценки динамики течения гипертонической болезни и прогнозирования её исхода.

Научная новизна. Впервые установлены характер и степень иммунометаболических нарушений у больных гипертонической болезнью в зависимости от стадии заболевания. Впервые у пациентов с гипертонической болезнью выявлены выраженные изменения структурно-функциональных свойств красных клеток крови в зависимости от стадии заболевания. Применение стандартной фармакотерапии в лечении больных гипертонической болезнью не полностью корригирует измененные показатели иммунного статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитарной мембраны. Динамика параметров иммунного и оксидантного статуса у больных гипертонической болезнью коррелирует с изменением показателей, отражающих состояние структурно-функциональных свойств красных клеток крови.

Практическая значимость. Обоснована необходимость включения в стандартную фармакотерапию пациентов с гипертонической болезнью II и III стадии препаратов иммуномодулирующей, антиоксидантной и мембранопро-тективной направленности. Установлены корреляционные взаимосвязи между лабораторными показателями иммунного статуса и клинической симптоматикой, позволяющие судить о течении заболевания и прогнозировании исхода гипертонической болезни. Расширены представления об участии иммунных механизмов в патогенезе гипертонической болезни в зависимости от стадии заболевания.

Результаты исследования используются в работе ОБУЗ «Курская городская клиническая больница скорой медицинской помощи» и ГБУЗ «Брянская областная больница № 1». Материалы диссертации используются в учебных рабочих программах и лекционных курсах, на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Самарской государственных медицинских университетов и академий и медицинских факультетов Белгородского и Орловского государственных университетов.

Положения, выносимые на защиту.

1. У пациентов с гипертонической болезнью имеют место выраженные изменения иммунометаболического статуса и структурно-функциональных свойств красных клеток крови, соответствующие стадии заболевания.

2. Использование стандартной фармакотерапии у больных гипертонической болезнью не оказывает выраженного корригирующего влияния на показатели иммунометаболического статуса и структурно-функциональные свойства эритроцитов.

3. Между показателями иммунного статуса и состояния структурно-функциональных свойств красных клеток крови у больных гипертонической болезнью установлены достоверные положительные и отрицательные взаимосвязи.

4. Определены лабораторные показатели иммунного статуса и состояния мембраны эритроцитов, позволяющие судить о течение и эффективности лечения гипертонической болезни.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на межрегиональной научно-практической конференции «Реальная профилактика как основа современного практического здравоохранения» (Курск, 2010), III Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине» (Курск, 2010), итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН «Университетская наука: Взгляд в будущее» (Курск, 2011), Всероссийском научно-практическом форуме «Профилактическая кардиология 2011» (Москва, 2011), 76-й и 77-й всероссийских научных конференциях студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2011, 2012), XIV Всероссийском научном форуме с международным участием им. акад. В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2011), II Всероссийской науч-

но-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2011), XVIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2011), совместном заседании кафедр клинической иммунологии и аллергологии, биологической химии, внутренних болезней № 2, микробиологии, вирусологии, иммунологии Курского государственного медицинского университета (2012 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 работ, 3 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ. В них содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации, получен патент на изобретение.

Личный вклад автора. Автором составлен план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводилось обследование пациентов с гипертонической болезнью, забор крови, анализировались лабораторные показатели адаптивного и врожденного иммунитета, процессов перекисного окисления липидов, структурно-функциональных свойств красных клеток крови. Диссертантом самостоятельно выполнялись анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в совместных публикациях составила 80-95%.

Объем н структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 5 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 132 отечественных и 86 иностранных источников.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы исследования

Характеристика клинических наблюдений. В работе представлены данные обследования и лечения на базе ОБУЗ «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи» г. Курска 62 пациентов с верифицированным, согласно рекомендациям ВОЗ/МОГ (1999), диагнозом гипертоническая болезнь I, II, III стадии, основанном на данных комплекса клинико-инструментальных методов обследования. Ведущим критерием включения в исследование больных ГБ было наличие у них стойкой ночной гипертензии и «поп-dipper» типа суточной кривой по результатам двойного суточного мониторирования артериального давления для исключения влияния случайных факторов на профиль артериального давления. Все больные находились на безнитратной диете.

Критериями включения больных в исследование были больные:

- с верифицированным диагнозом гипертоническая болезнь (эссенциаль-ная артериальная гипертензия) I, II и III стадий;

- в возрасте 20-40 лет;

- с тяжестью состояния не выше средней степени тяжести;

без или с сопутствующей соматической патологией в стадии полной ремиссии;

- получавшие стандартную терапию;

- с добровольным информированным согласие пациентов на проведение исследования.

Из исследования исключались больные с:

- вторичной (симптоматической) артериальной гипертензией;

- выраженной недостаточностью кровообращения (стадия НПБ и выше);

- сопутствующими заболеваниями, требующими постоянной медикаментозной коррекции;

- гемодинамически значимыми стенозами плечевой артерии;

- почечной недостаточностью;

- печеночной недостаточностью;

- ожирением III степени;

- клиническими проявлениями климакса;

- наличием противопоказаний к назначению или гиперчувствительностью к гипотензивным препаратам;

- отказом на проведение исследования.

Исследованию подвергалась сыворотка крови, эритроциты. Группа контроля состояла из 12 здоровых доноров-добровольцев того же возраста.

Все больные были разделены на 3 группы, рандомизированные по возрасту, полу, стадии гипертонической болезни, прогнозируемой тяжести заболевания группы (табл. 1).

Таблица 1

Распределение больных _

Больные гипертонической болезнью № группы Метод лечения Количество

1 Гипертоническая болезнь I стадии 22

2 Гипертоническая болезнь II стадии 21

3 Гипертоническая болезнь III стадии 19

Всего 62

Доноры 22

Всем пациентам проводилась стандартная терапия: больные ГБ I ст. получали монотерапию иАПФ (эналаприл), пациенты с ГБ II ст. - иАПФ и диуретик (гидрохлоротиазид), а больные с ГБ II ст. - иАПФ, диуретик и Р-блокатор (бисопролол). Оценка эффективности терапии и изменения доз осуществлялись под контролем офисного измерения АД и суточного мониторирования артериального давления. Суточные дозы определялись гипотензивным эффектом, который оценивался по снижению АД на 15-20% в течение 10 дней и достиже-

нию целевых цифр АД к 2-3 недели лечения. При отсутствии эффекта доза препаратов увеличивалась. Явная неэффективность препаратов служила основанием для исключения больного из исследования.

Все препараты вводили согласно рекомендациям, изложенным в справочниках «Лекарственные средства» (Машковский М.Д., 2002), «Регистр лекарственных средств России» (2010) и инструкциях по применению лекарственных препаратов.

Диастолическую функцию миокарда левого желудочка оценивали с помощью допплер-эхокардиографии по показателям трансмитрального потока (Шиллер Н.Б., Осипов М.А., 1993), визуализируемого на ультразвуковом сканере «SONOS-500» фирмы «Hewlett Packard» (США) с применением датчика частотой 5 МГц в импульсноволновом режиме (Ботвин И.М. и др., 1997). Определяли отношение скорости раннего диастолического наполнения к скорости позднего диастолического наполнения, фракцию выброса левого желудочка.

Иммунологические и биохимические методы исследования. Количественная оценка уровней ФНОа, ИЛ-1а, ИЛ-6, ИЛ-2, ИЛ-8, ИЛ-10, рецепторно-го антагониста ИЛ-1, неоптерина, Сз, С4, Сза Cs, Csa-компонентов системы комплемента, фактора Н и Ci-ингибитора, igM, IgG, IgA проводилась с помощью тест-систем (ООО «Цитокин», г. Санкт-Петербург) методом твердофазного им-муноферментного анализа.

Выраженность перекисного окисления липидов оценивали по содержанию малонового диальдегида и ацилгидроперекисей (Бенисевич В.И., Идель-сон Л.И., 1973; Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И., 1983). Кроме этого, определяли активность катапазы (Королюк М.А. и др., 1988), супероксиддисмутазы (Макаренко Е.В., 1988), уровень cii -антитрипсина, а2-макроглобулина, С-реактивного белка, церулоплазмина, стабильных метаболитов оксида азота и общую антиокислительную активность сыворотки крови (Клебанов Г.И. и др., 1988).

Исследование структурно-функциональных свойств эритроцитов.

Эритроциты получали из 5 мл гепаринизированной крови по методу Е. Beutler (1985) с незначительной модификацией. Цельную кровь отстаивали дважды в 10 мМ Na-фосфэтном буфере (рН=7,4), содержащем 0,9% хлорида натрия и 3% декстрана Т-500, в течение 30 минут при температуре 37°С. После этого кровь центрифугировали, удаляли надосадочную жидкость аспирацией. Эритроци-тарную массу подвергали дополнительной очистке на хроматографической колонке через HBS-целлюлозу. Определялись общая сорбционная способность эритроцитов, обусловленная наружной архитектоникой клеточной мембраны (Тогайбаев A.A. и др., 1988), сорбционная емкость гликокаликса эритроцитов для альцианового синего (Семко Г.А., 1998) и уровень малонового диальдегида в эритроцитах (Банкова В.В. и др., 1937).

Примечание. Определение иммунологических и биохимических показателей проведено в лаборатории иммуноферментного анализа НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета, за что выражаем сотрудникам соответствующего подразделения глубокую признательность.

Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge (1963), разрушая эритроциты осмотическим и механическим гемолизом в 10 мМ Na-фосфатном буфере, после чего проводили отмывку теней от гемоглобина в 10 мМ и 5 мМ Ыа-фосфатном буфере. Электрофорез проводили в присутствии додецилсуль-фата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli (1970). Белки окрашивали кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks (1971). Количественное содержание белковых фракций рассчитывали через площадь и известную концентрацию яичного альбумина. Полученные значения пересчитывали на 1 мг общего белка в исследуемом образце сухих мембран эритроцитов. Липиды выделяли методом тонкослойной хроматографии (Крылов В.И. и др., 1984).

Статистическая обработка полученных результатов. Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы, факторный анализ, кластерный анализ, критерий а также коэффициент ранговой корреляции (Гублер Е.Г., Генкин А.Р., 1973; Лакин Г.Ф., 1980). Статистически значимыми считали различия с р<0,05.

Для иммунологических показателей рассчитывали коэффициент диагностической ценности, формулу расстройств иммунной системы путем выбора из всех изученных параметров трех ведущих, наиболее отличающихся от уровня нормы, степень иммунных расстройств, рейтинговый алгоритм и степень изменения иммунологических показателей под влиянием фармакологических средств (Земсков A.M., Земсков В.М., Караулов A.B. с соавт., 2003).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Иммунные нарушения и структурно-функциональные свойства эритроцитов у пациентов с гипертонической болезнью различной степени тяжести. При обращении за медицинской помощью у больных ГБ I ст. в плазме крови выявлено повышение уровня провоспалительных цитокинов (ИЛ-1а, ФНОа, ИЛ-6, ИЛ-8), противовоспалительных (ИЛ-10, ИЛ-Ra), ИЛ-2 и неопте-рина. Кроме этого у данной категории пациентов в плазме крови выявлено снижение уровня С3 и С5а-компонентов системы комплемента (табл. 2).

У больных ГБ И ст. в плазме крови еще больше повышен уровень ИЛ-la, ИЛ-10, ИЛ-lRa, неоптерина, а в отличие от пациентов с ГБ I ст. повышен уровень С5а, С4-компонентов системы комплемента и фактора Н (табл. 2). Максимальный уровень цитокинов выявлен был у пациентов с ГБ III ст., у которых уровень ИЛ-10, ИЛ-lRa, неоптерина, фактора Н был значительно выше, чем у пациентов предыдущих групп (табл. 2).

Что касается уровня иммуноглобулинов в плазме крови, то у пациентов с гипертонической болезнью I и II стадий концентрация их не отличалась от здоровых доноров, тогда как у больных с III ст. уровень IgM, IgG и IgA оказался ниже, чем у здоровых доноров (табл. 2).

Состояние иммунного статуса у пациентов с гипертонической болезнью __ различных стадий (М±т)_

Показатели Единицы измерения Здоровые доноры Гипертоническая болезнь

I стадия II стадия III стадия

1 2 3 4

ФНО пг/мл 3,27±0,2 5,41±0,Г' 5,62±0,3"' 10,14±0,2

ИЛ-1сс пг/мл 4,71±0,3 8,18±0,2"' 14,26±0,4'1-J

ИЛ-6 пг/мл 5,81±0,08 7,33±0,Г' 8,02±0,6 1 13,7±0,2''J

ИЛ-8 пг/мл 4,71±0,3 8,18±0,2"' 8,54±0,2 1 11,62±0,3

ИЛ-10 пг/мл 0,86±0,1 2,67±0,3'' 10,1±0,5''"! 15,02±0,3*'"J

ИЛ-lRa пг/мл 519,7±49,9 616,0±37,4"' 871,38±62,3''z 1047,5±49,9''"J

Неоптерин пг/мл 1,47±0,3 2,57±0,2"' 3,84±0,2 5,44±0,3 l'J

ИЛ-2 пг/мл 0,86±0,1 2,67±0,3"' 2,78±0,2"' 3,92±0,3 '"J

С3 мг/дл 114,4±4,5 97,2±2,8"' 98,38±2,6' 100,81±2,4 '

С3а нг/мл 66,0±7,9 71,3±5,4 74,2±6,1 80,3±4,7"'

С4 мг/дл 39,3±3,5 44,7±1,6 49,75±2,8'' 50,88±1,Г'-'

С5 нг/мл 39,б±3,1 41,4±2,8 43,5±3,3 52,71±4,8

С5а нг/мл 71,2±6,1 47,8±2,4"' 94,06±2,0'1/ 95,88±8,4

Фактор Н нг/мл 223,8±16,9 248,9±10,3 267,9±9,3"' 308,5±14,8

С1-ингибитор нг/мл 29,9±2,7 31,7±1,7 27,4±2,8 37,6±2,Г'°

IgM мг/дл 88,5±3,2 91,6±3,5 48,75±3,Г'"£ 68,81±8,9 '•■'

IgG мг/дл 1020,0±79,4 922,0±35,8 907,4±40,6 835,6±25,r'"J

IgA мг/дл 125,8±11,5 112,2±5,05 111,9±5,31 64,56*2,84

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти раз-

личия.

У больных ГБ I ст. в плазме крови выявлен повышенный уровень продуктов ПОЛ (МДА и АГП), стабильных метаболитов N0, а!-антитрипсина и сниженная активность каталазы, СОД, ОАА сыворотки крови и уровень церруло-плазмина и а2-макроглобулина (табл. 3).

У пациентов с ГБ II ст. в отличие от предыдущей группы больных в меньшей степени в плазме крови повышена концентрация АГП, стабильных метаболитов N0, агантитрипсина, но еще больше снижается ОАА сыворотки и возрастает концентрация С-реактивного белка (табл. 3).

Оценивая метаболический статус у пациентов с ГБ III ст. в крови выявлены максимальный уровень а2-макроглобулина и минимальная активность СОД, тогда как остальные показатели существенно не отличались от уровня у больных ГБ II ст. (табл. 3).

Полученные результаты свидетельствуют о выраженных изменениях им-мунометаболического статуса у пациентов с гипертонической болезнью, пропорциональных тяжести заболевания, при этом динамика иммунных показателей коррелирует с изменением показателей метаболического статуса, что необходимо использовать у пациентов с данной нозологией при разработке эффективных способов терапии.

Таблица 3

Метаболический статус в плазме крови и внутри эритроцитов у пациентов _с гипертонической болезнью различных стадий (М±т)_

Показатели Единицы измерения Здоровые доноры Гипертоническая болезнь

I стадия II стадия III стадия

1 2 3 4

В плазме крови

МДА мкмоль/л 3,15±0,2 6,2±0,3"' 5,91±0,2 1 5,95±0,4''

АГП усл. ед. 0,25±0,03 1,21±0,07'' 0,51±0,04''"г 0,58±0,0б'1"!

Кат мккат/л 18,9±1,0 13,52±0,4'' 12,79±0,5"' 15,38±0,6М"3

СОД усл. ед. 16,98±0,3 13,26±0,3"' 14,20±0,5'' 12,41±0,4''°

ОАА % 40,3±0,7 35,7±0,9'' 32,88±0,б'1"' 33,19±0,7"1,2

CMno мкмоль/л 2,73±0,2 5,1±0,2"' 3,52±0,2'"i 4,64±0,2"'"'i

cti-AT г/л 1,2±0,12 1,9±0,08'' 1,5±0,1"'"£ 1,5±0,Ги

а2-МГ г/л 1,91±0,1 1,36±0,1"' 2,29±0,Г'"; 2,8±0,2"'-4

СРБ мг/дл 2,34±0,1 2,64±0,2 5,96±0,3*1'i 6,34±0,3"'-i

Церулоплазмин мг/дл 27,3±1,8 14,1±0,7"' i8,i9±o,8'u 14,39±1,2"I,J

Внутри эритроцитов

МДА мкмоль/л 0,63±0,05 1,81±0,Г' 1,62±0,Г' 2,22±0,05"'-J

АГП усл. ед. 0,16±0,03 0,27±0,03"' 0,34±0,04'' 0,48±0,f'-J

ОАА % 28,0±1,1 20,67±2,4*' 22,1±0,7"' 24,0±1,Г'

СОД усл. ед. 18,67±1,7 29,67±0,8"' 29,67±1,7"' 26,67±1,5*'

Катал аза мккат/л 24,00±2,4 14,67±1,3"' 22,00±1,1^ 26,67±0,9'AJ

CMNO мкмоль/л 6,0±0,3 7,4±0,4"' 5,13±0,4'v 4,13±0,3"'-i

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти различия.

У пациентов с ГБ I стадии внутри эритроцитов повышена концентрация не только продуктов ПОЛ, но и стабильных метаболитов оксида азота, кроме этого, выше активность СОД, но ниже ОАА и активность каталазы (табл. 3).

У больных ГБ II стадии внутри эритроцитов, в отличие от предыдущей группы, снижается уровень стабильных метаболитов оксида азота, тогда как при III стадии заболевания в большей степени повышен уровень продуктов ПОЛ и снижена концентрация стабильных метаболитов оксида азота (табл. 3).

У пациентов с гипертонической болезнью I ст. в мембране красных клеток крови снижен уровень подфракций спектрина, анкирина и повышен уровень белка полосы 4.1 и дематина, что привело к снижению у данной категории пациентов СЕГ и ССЭ (табл. 4).

У больных с гипертонической болезнью II ст. в эритроцитарной мембране, по сравнению с предыдущей группой больных, в большей степени снижена представительность ß-спектрина, дополнительно возрастает уровень анион-транспортного белка, белка полосы 4.5 и снижается представительность палли-дина и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (табл. 4).

У пациентов с III ст. гипертонической болезни резко снижен уровень в мембране эритроцитов подфракций анкирина, спектрина, белка полосы 4.5 и повышен уровень белка полосы 4.1, актина и дематина (табл. 4).

Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов у пациентов с гипертонической болезнью различных стадий (М±ш)

Показатели Единицы измерения Здоровые доноры Гипертоническая болезнь

I стадия II стадия III стадия

1 2 3 4

а-Спектрин мг% 114,3±8,8 98,2±4,7"' 101,1±5,1'' 76,2±3,9''"J

(З-Спектрин мг% 106,6±7,6 91,8±3,8"' 75,3±4,7'1"2 65,7±2,Г°

Анкирин мг% 113,3±8,2 62,6±4,5"' 70,2±5,8"' 39,5±2,8''"J

Анионтран-спортный белок мг% 189,6±6,4 188,6±9,31 239,6±17,8 226,2±10,5''-J

Белок полосы 4.1 мг% 43,3±4,1 74,2±3,3"' 53,2±3,8'v 92,1±8,4''°

Паллидин мг% 56,6±3,1 61,4±3,73 46,5±2,14"'"! 77,1±4,3"10

Белок полосы 4.5 мг% 98,2±7,5 89,2±7,7 126,6*9,0 м 78,9±6,3"'"->

Дематин мг% 20,1±2,1 36,8±2,8*' 22,1±1,8'¿ 50,1±4,8"'"J

Актин мг% 102,1±8,9 108,1±7,4 110,3±8,2 b6,2±n,7''-J

Глицеральдегид-3-фосфатдегидро-геназа мг% 37,8±2,6 39,8±2,8 21,2±l,9''-¿ 42,4±4,8'1

Тропомиозин мг% 68,8±4,6 63,7±3,1 69,5±4,2 75,l±5,l'z

Глутатион-S-трансфераза мг% 49,3±4,1 55,5±3,1 46,3±3,8'2 58,9±4,5*''3

СЕГ 10"" г/эр. 1,42±0,1 1ДЗ±0,Г' l,29±0,l'''z 1,25±0,Г'''

ССЭ % 32,8±1,2 22,1±2,4'' 21,3±1,1"' 20,2±1,7 1

Лизофосфати-дилхолин мг% 5,38±0,1 6,4±0,1*' 7,7±0,2'1-2 10,1±0,4*'"3

Сфингомиелин мг% 11,02±0,5 14,1 ±0,6"' il,2±0,4i 9,9±0,2

Фосфатидил-инозитол мг% 19,7±0,6 22,1±0,5-1 23,6±1,2-1 17,4±1,1м"3

Фосфатидилхолин мг% 23,01±0,7 19,4±0,б"' 18,8±0,9'' 17,6±0,7

Фосфатидил-этаноламин мг% 23,45±0,9 23,3±1,2 19,6±0,4-1'2 20,0±0,8*1,2

Холестерин мг% 47,79±1,3 54,2±2,Г' 54,9±2,0'J 59,7±2,3"J"J

Моно- и диглицериды мг% 9,55±0,4 10,2±0,3 11,5±0,4МД ll.SiO.S"1'2

Свободные жирные кислоты мг% 2,98±0,1 3,0±0,1 3,4±0,3 3,2±0,1

Триглицериды мг% 14,48±0,6 12,7±0,8"' 14,8±1,2'¿ 12,4±1,3"1,J

Эфиры холестерина мг% 46Д9±1,6 34,6±2,4*' 34,6±3,3*1 31,2±2,8*1

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти раз-

Нами был определен уровень нейтральных липидов и фосфолипидов в мембране красных клеток крови. Так, при I ст. гипертонической болезни возрастает уровень лизофосфатидилхолина, сфингомиелина, фосфатидилинозито-ла и холестрина и снижается представительность триглицеридов, эфиров холестерина и фосфатидилхолина, тогда как у больных с II ст. дополнительно по-

вышен уровень moho- и диглицеридов и снижена представительность фосфати-дилинозитола (табл. 4).

У больных гипертонической болезнью III ст. в эритроцитарной мембране выраженность изменений представительности липидов максимальна: в большей степени возросла представительность лизофосфатидилхолина и холестерина и снизился уровень сфингомиелина и фосфатидилхолина (табл. 4).

Таким образом, исходя из функций интегральных и периферических белков мембраны эритроцитов, можно заключить, что выявленные изменения у больных гипертонической болезнью направлены на уменьшение прочности и деформируемости эритроцитарной мембраны (снижение уровня анкирина, спектрина), снижение общей сорбционной способности эритроцитов и их гли-кокаликса и повышение их метаболической активности (повышение уровня анионтранспортного белка), что ускоряет процессы старения красных клеток крови, тогда как у пациентов с гипертонической болезнью III ст. данные изменения более выражены.

У больных гипертонической болезнью в мембране эритроцитов выявлены различные изменения в липидном спектре, что, в свою очередь, сказывается и на организации мембраны в целом. Так, повышенный уровень холестерина уменьшает подвижность жирных кислот, снижает латеральную диффузию липидов и белков, изменяя функцию последних, а уменьшение сфингомиелина при III ст. обусловливает снижение микровязкости липидной фазы мембраны, тогда как низкий уровень фосфатидилхолина снижает проницаемость мембраны.

Оценивая направленность выявленных изменений иммунометаболиче-ского статуса у пациентов с гипертонической болезнью, можно заключить, что у данной категории пациентов отмечается активация про- и противовоспалительного цитокинового звена, системы комплемента, супрессия гуморального звена иммунитета и повышение уровня неоптерина.

Что касается метаболического звена, то при ГБ повышен уровень продуктов ПОЛ, выявлена супрессия антиоксидантной системы защиты, повышен уровень стабильных метаболитов оксида азота и СРБ.

Эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертонической болезнью в коррекции иммунометаболического статуса и структурно-функциональных свойств красных клеток крови. У больных ГБ I стадии на фоне стандартной гипотензивной терапии в плазме крови нормализовались концентрация ИЛ-6, а2-макроглобулина, С3-компонента комплемента, активность СОД, О А А, корригировались уровень ФНОа и ИЛ-1а, повышалась концентрация противовоспалительных цитокинов (ИЛ-lRa и ИЛ-10) (рис. 1).

В мембране красных клеток у данной категории пациентов стандартная фармакотерапия нормализует представительность подфракции спектрина, СЕГ и корригирует ССЭ (рис. 1).

11Л-2

Неоптернн

сод

ОАА

ссэ

СЕГ ИЛ-6 Демагнн

4.1

НЛ-8

Ликирнн

р-спектрни

а-спектрнн

CM.NO

ИЛ1К«

фио

300 •

Рис. 1. Иммунокорригирующая, антиоксидантная и мембранопротектив-ная эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертонической болезнью I стадии.

Примечания:

1. Радиус окружности - показатели у здоровых доноров добровольцев (1 группа);

2. - - показатели у больных ГБ до СТ (2 группа);

3. -- — - - показатели у больных ГБ после СТ (3 группа);

4. © - р > 0,05 между показателями 2 и 3 групп;

5.0 - р < 0,05 между показателями 2 и 3 групп.

Применение стандартной фармакотерапии у больных ГБ II стадии позволило в крови нормализовать концентрацию ИЛ-6, С3- и С5-компонентов системы комплемента, активность СОД, а в мембране красных клеток крови представительность подфракций спектрина, белка полосы 4.5, дематина и СЕГ (рис. 2).

Кроме этого проводимая фармакотерапия у данной категории пациентов с ГБ позволила частично корригировать концетрацию в плазме крови ФНОа, не-оптерина, ИЛ-2, С-реактивного белка и повысить уровень ИЛ-10 и стабильных метаболитов N0 (рис. 2).

У больных ГБ III стадии проводимое стандартное лечение позволило полностью нормализовать в плазме крови концентрацию компонентов системы комплемента (С3, С3а, С4), Срингибитора, ^М, а2-макроглобулина, а в эритро-цитарной мембране - представительность р-спектрина, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, тропомиозина, СЕГ, но частично корригировать представительность АТБ, белка полосы 4.1, концентрацию АГП и повысить уровень противовоспалительных цитокинов (РАИЛ, ИЛ-10) (рис. 3).

Рис. 2. Иммунокорригирующая, антиоксидантная и мембранопротектив-ная эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертониче-

ской болезнью II стадии.

Примечания:

1. Радиус окружности - показатели у здоровых доноров добровольцев (1 группа);

2. - - показатели у больных ГБ до СТ (2 группа);

3. ----- - показатели у больных ГБ после СТ (3 группа);

4. © - р > 0,05 между показателями 2 и 3 групп;

Рис. 3. Иммунокорригирующая, антиоксидантная и мембранопротектив-ная эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертонической болезнью III стадии.

Примечания:

1. Радиус окружности - показатели у здоровых доноров добровольцев (1 группа);

2. - - показатели у больных ГБ до СТ (2 группа);

3. ----- - показатели у больных ГБ после СТ (3 группа);

4. © - р > 0,05 между показателями 2 и 3 групп; 5.0 - р < 0,05 между показателями 2 и 3 групп.

Оценивая суммарно эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с ГБ различных стадий выявлено, что до лечения у пациентов с ГБ I стадии показателей с 2-3 СР было 20, а после стандартного лечения таких показателей осталось 8, снизив количество изменённых показателей с 62,8 до 28,9% (табл. 5).

Таблица 5

Иммунокорригирующая, антиоксидантная и мембранопротективная эффективность стандартной фармакотерапии _у пациентов с гипертонической болезнью различных стадий_

Группы больных CP до лечения % измен-ненных до лечения CP после стандартной терапии % измен-ненных после лечения

I II III Z1I-III I II III III

ГБ I стадии 7 12 8 20 62,8 4 6 2 8 28,9

ГБ II стадии 8 15 11 26 79,1 4 8 6 14 43,4

ГБ III стадии 10 18 13 31 95,3 5 15 8 23 65,9

Если у пациентов с II стадией гипертонической болезни показателей с 2-3 CP было 26, то после стандартного лечения таких показателей осталось 14, а количество изменённых показателей снизилось с 79,1 до 43,4% (табл. 5).

У пациентов с III стадией гипертонической болезни показателей с 2-3 CP 31, тогда как после стандартного лечения их осталось 23, а количество изменённых показателей снизилось с 95,3 до 65,9%, что явно недостаточно (табл. 5).

Взаимосвязь между иммунометаболическими нарушениями и структурно-функциональными свойствами эритроцитов у больных гипертонической болезнью. При оценке между составляющими показателями, отражающими структурно-функциональные свойства красных клеток крови, и уровнем цитокинов, иммуноглобулинов и компонентов комплемента у пациентов с гипертонической болезнью было выявлено большое число связей, наибольшее их количество характерны для подфракций спектрина, анкирина, актина, ССЭ, и уровнем провоспапительных цитокинов, неоптерина, ИЛ-2, С4-компонента и С!-ингибитора.

Достаточно большое количество взаимосвязей получено для показателей метаболического статуса: активность СОД, ОАА, уровень стабильных метаболитов оксида азота.

Динамика показателей иммунометаболического статуса и структурно-функциональные свойства эритроцитов на фоне проводимого стандартного лечения коррилирует с показателями, отражающими морфофункциональное состояние миокарда левого желудочка у больных гипертонической болезнью, что свидетельствует о важной роли иммунного, метаболического статусов и эритроцитов в патогенезе гипертонической болезни (табл. 6).

Матрица множественной корреляции между клиническим и лабораторными показателями у пациентов с гипертонической болезнью _____ различных стадий ___ _

Показатели ФИО ИЛ-1а ИЛ-6 ИЛ-8 Неоптерин ИЛ-2 С3а С4 С^инг.

ИММЛЖ -0,82 -0,91 -0,79 -0,90 -0,95 -0,91 -0,94 -0,98 -0,35

ВИВРЛЖ -0,80 -0,88 -0,80 -0,85 -0,95 -0,84 -0.92 -0,96 -0,34

E/A 0.86 0,92 0,85 0,90 0.97 0.88 0,95 0,97 0,42

ФВ 0,76 0,79 0,81 0,70 0,87 0,64 0,81 0,78 0,42

Показатели сод ОАА CMNO а-спектрин ß-спектрин Анкирин Актин СЕ Г ссэ

ИММЛЖ 0,78 0,96 -0,42 0,80 0,99 0,84 -0,77 0,37 0,88

ВИВРЛЖ 0,67 0,90 -0,26 0,76 0,97 0,75 -0,78 0,19 0,77

E/A -0,73 -0,91 0,35 -0,82 -0.99 -0,81 0,82 -0,25 -0,81

ФВ -0,42 -0,65 -0,01 -0,67 -0,84 -0,53 0,79 0,17 -0,47

Примечание: - р<0,05.

Для большей наглядности взаимосвязей между составляющими показателями иммунометаболического статуса и показателями функций ЛЖ у больных ГБ построены графики, убедительно свидетельствующие о существовании прямо пропорциональной (неоптерин и фракция выброса; ß-спектрин и ИММЛЖ; С3а и индекса E/A) и обратно пропорциональной зависимостей (ИЛ-8 и ВИВРЛЖ) (рис. 4). ь Неоптерин, пк/мл

♦

О ...........-.......................V....................................-.....................................:.................................,

61 62 63 64 65

ФВ, %

С3„ пк/мл

00

80 т-...........-...................................................................................... .....................

............................................

4о ■;.......................................................... ..........................................................

30 (

30 г--:..........................................................-...................................................................

10

О .......................—................................................г-................-.........................

о 0,5 1 1,5

Е/А

Рис. 4. Взаимосвязь лабораторных иммунометаболических показателей и инструментальных данных у пациентов с гипертонической болезнью.

|-спектрин, мг%

ИЛ-8, пк/мл

150 155 1бо

ИММЛЖ, г/м2

ВИВРЛЖ, мс

Если говорить о сегодняшних подходах к пониманию сердечной недостаточности - это, прежде всего сохранение тех установившихся представлений о важнейшем значении нейроэндокринных механизмов, которые вызывают различные функциональные изменения в миокарде, которые через оксидативный стресс индуцируют апоптоз.

Дефицит энергии и различные электрофизиологические, сосудистые, ге-модинамические эффекты приводят к еще большей нейрогуморальной активации, активации цитокинов, развитию иммунного воспаления, нарушению фиб-ринолиза и еще большему повреждению миоцитов и межклеточного вещества. Итогом этих сложных изменений является ремоделирование левого желудочка с дальнейшим прогрессированием систолической и диастолической дисфункции. При этом особая роль отводится повышению уровня провоспалительных цитокинов, подавляющих продукцию оксида азота, являющегося самым мощным эндогенным вазодилататором, и эритроцитам, определяющим важную роль в поддержании иммунного и оксидантного гомеостаза.

ВЫВОДЫ

1. У пациентов с гипертонической болезнью I стадии в плазме крови повышена концентрация провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, неоптерина, ИЛ-2, продуктов перекисного окисления липидов, стабильных метаболитов оксида азота, альфа-1-антитрипсина, снижен уровень компонентов системы комплемента (С3 и С5а), церулоплазмина и активность каталазы, в мембране красных клеток крови снижено содержание подфракций спектрина, анкирина, повышен уровень белка полосы 4.1 и дематина, снижены сорбцион-ные свойства красных клеток крови.

2. У больных гипертонической болезнью II стадии дополнительно повышен уровень в плазме крови противовоспалительных цитокинов и С-реак-тивного белка, снижена концентрация IgM, в мембране эритроцитов снижено содержание ß-спектрина, паллидина, глицеральдегид-3-фосфат-дегидрогеназы и повышена представительность анионтранспортного белка, белка полосы 4.5.

3. У пациентов с III стадией гипертонической болезни дополнительно повышена концентрация провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, компонентов системы комплемента, снижено содержание иммуноглобулинов, а в мембране эритроцитов подфракций анкирина, спектрина, белка полосы 4.5 и повышен уровень белка полосы 4.1, актина, дематина.

4. Стандартная фармакотерапия у пациентов с I стадией гипертонической болезни снижает количество изменённых показателей иммунометаболического статуса и состояния мембраны красных клеток крови с 62,8% до 28,9%, у больных II стадией - с 79,1% до 43,4%, а у пациентов с III стадией - с 95,3% до 65,9% изученных показателей, что свидетельствует о недостаточной коррекции иммунометаболических нарушений.

5. У больных гипертонической болезнью I, II и III стадий между показателями иммунного статуса и состояния структурно-функциональных свойств красных клеток крови установлены достоверные положительные и отрицательные взаимосвязи.

6. Динамика показателей иммунометаболического статуса и структурно-функциональные свойства эритроцитов на фоне проводимого стандартного лечения коррелирует с показателями, отражающими морфофункциональное состояние миокарда левого желудочка (индекс массы миокарда левого желудочка, время изоволюмического расслабления левого желудочка, соотношение максимальных скоростей трансмитрального потока в фазы раннего и позднего наполнения левого желудочка, фракция выброса левого желудочка).

7. Наиболее диагностически ценными для оценки эффективности лечения, динамики течения заболевания, прогнозирования его исхода у больных гипертонической болезнью являются в крови концентрация ИЛ-1а, ИЛ-8, неопте-рина, С3а, С4, а в мембране эритроцитов - уровень р-спектрина.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать клиническое апробирование у пациентов с гипертонической болезнью иммуномодуляторов, антиоксидантов и мембранопротекторов с целью улучшения клинического течения заболевания.

2. Для оценки динамики течения гипертонической болезни и прогнозирования его исхода в дополнение к стандартным лабораторным и инструментальным методикам рекомендовать исследование в крови концентрации ИЛ-1а, ИЛ-8, неоптерина, С3а, С4, в мембране эритроцитов - уровень Р-спектрина.

3. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о выраженности иммунометаболических изменений и нарушениях структурно-функциональных свойств красных клеток крови у пациентов с гипертонической болезнью.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Иммунокоррекция у больных гипертонической болезнью / К.А. Пёхо-ва, А.И. Конопля, В.П. Михин, Е.В. Гаврилюк // Материалы межрегиональной науч.-практ. конф. «Реальная профилактика как основа современного практического здравоохранения». - Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2010. -С. 214-218.

2. Иммунокорригирующая эффективность цитопротекторов у больных гипертонической болезнью / К.А. Пёхова, А.И. Конопля, В.П. Михин, Е.В. Гаврилюк // Материалы Третьей международ, дистанционной науч. конф. «Инновации в медицине» / КГМУ, Центр.-Чернозем. науч. центр РАМН, Общерос. общест. организация «Рос. союз молодых ученых» / Под ред. В.А. Лазаренко, П.В. Калуцкого. - Курск, 2010. - С. 40-43.

3. Иммунные нарушения и их коррекция при эссенциальной артериальной гипертензии / А.И. Конопля, К.А. Пёхова, В.П. Михин, Е.В. Гаврилюк // Сборник материалов XVIII Рос. национального конгресса «Человек и лекарство». -М„ 2011. -С. 36.

4. Нарушения иммунного статуса на системном уровне у больных эссен-циальной артериальной гипертензией / А.И. Конопля, В.П. Михин, Е.В. Гаври-лкж, К.А. Пёхова // Материалы итог. науч. конф. сотрудников КГМУ, Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН и отд-ния РАЕН, посвящ. 76-летию КГМУ «Университетская наука: Взгляд в будущее». В 3 томах. - Т. II. - Курск: ГБОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России, 2011. - С. 69-72.

5. Иммуномодулирующая эффективность мексикора в условиях гипертонической болезни / A.B. Харченко, К.А. Пёхова, Н.В. Авдеева, Е.В. Гаврилкж // Материалы Всеросс. науч.-практ. форума «Профилактическая кардиология 2011». -М., 2011.-С. 32.

6. Пёхова, К.А. Иммунометаболические изменения у больных гипертонической болезнью / Е.В. Гаврилкж, К.А. Пёхова // Материалы 76-й Всеросс. науч. конф. студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность». В 3 частях. Часть I. - Курск: ГБОУ ВПО КГМУ, 2011. - С. 25-26.

7. Иммунный статус и коррекция его нарушений в условиях эссенци-алыюй артериальной гипертензии / Е.В. Гаврилюк, К.А. Пёхова, А.И. Конопля, В.П. Михин // Медицинская иммунология. - 2011. - Т. 13, № 4-5. -С. 497.

8. Иммунометаболические нарушения у пациентов с эссенциальной артериальной гипертензией / А.И. Конопля, В.П. Михин, К.А. Пёхова, Е.В. Гаврилюк // Материалы II Всеросс. науч.-практ. конф. с междунар. участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии». - Курск: ГБОУ ВПО КГМУ, 2011.-С. 155-156.

9. Иммунокорригирующие эффекты мексикора при эссенциальной артериальной гипертензии / А.И. Конопля, В.П. Михин, Е.В. Гаврилюк, К.А. Пёхова // Тези доповщей науково-практичного семшару «Перспективи та напрямки сучасно1 бютехнологи». - Кшв: 1нститут математики HAH Украши. - 2011. - С. 114-116.

10. Структура мембраны эритроцитов при гипертонической болезни / Е.В. Гаврилюк, Ю.И. Суслова, A.B. Харченко, К.А. Пёхова // Материалы 77-й Всеросс. науч. конф. студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность». В 3 частях. Часть I. - Курск: ГБОУ ВПО КГМУ, 2012. -С. 316-317.

11. Способ иммунокоррекции у больных эссенциальной артериальной гипертензией / Е.В. Гаврилюк, В.П. Михин, К.А. Пёхова, А.И. Конопля // Патент на изобретение № 2463050 от 10 октября 2012 г. (БИ № 28)

12. Иммунометаболические нарушения при гипертонической болезни различной степени тяжести / Е.В. Гаврилюк, К.А. Пёхова, В.П. Михин, А.И. Конопля // Вест, новых медицинских технологий. - 2012. - Т. XIX, № 1. - С. 172-174.

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

АГП - ацилгидроперекиси, усл. ед. АТБ - анионтранспортный белок, мг%

ВИВРЛЖ - время изоволюмического расслабления левого желудочка

Г-З-ФД - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, мг%

Г-Б-Т - глутатион-Б-трансфераза, мг%

ИЛ-10 - интерлейкин-10, пкг/мл

ИЛ-Жа- рецепторный антагонист ИЛ-1, пкг/мл

ИЛ-1а-интерлейкин-1 альфа, пкг/мл

ИЛ-6 - интерлейкин-6, пкг/мл

ИЛ-8 - интерлейкин-8, пкг/мл

ИММЛЖ - индекс массы миокарда левого желудочка

Кат - активность каталазы, кат/л

ЛЖ - левый желудочек

МДА - малоновый диальдегид, мкмоль/л

ОАА - общая антиокислительная активность сыворотки крови, %

ПОЛ — перекисное окисление липидов

Сринг. - ингибитор Сркомпонента комплемента, нг/мл

С3 - компонент комплемента С3, нг/мл

С3а - активный компонент комплемента С3, нг/мл

С4 — компонент комплемента С4, нг/мл

С5 - компонент комплемента С5, нг/мл

С5а - активный компонент комплемента С5, нг/мл

СЕГ - сорбционная емкость гликокаликса, 10"п г/эр.

СМмо - стабильные метаболиты оксида азота, мкмоль/л

СОД - супероксиддисмутаза, ЕД/мл

СР - степень расстройств

СРВ - С-реактивный белок, мг/дл

ССЭ - сорбционная способность эритроцитов, %

СТ - стандартная терапия

Фактор Н - компонент системы комплемента, нг/мл

ФВ - фракция выброса, %

ФНОа - фактор некроза опухоли альфа, пкг/мл

- иммуноглобулины, мкг/мл агАТ - агантитрипсин, г/л а2-МГ - а2.макроглобулин, г/л

Е/А - отношение скорости раннего диастолического наполнения к скорости позднего диастолического наполнения, усл. ед.

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 3.12.2012 г. Подписано в печать 6.12.2012 г. Формат 30х42 78. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №221"А". Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Актуальность проблемы. Эссенциальная артериальная гипертензия (гипертоническая болезнь) относится к числу наиболее распространенных заболеваний сердечно-сосудистой системы. Несмотря на то что во всем мире ведется активное изучение эссенциальной артериальной гипертензии, причины до сих пор не установлены и в настоящее время считается, что это заболевание многофакторное (Хлебодаров Ф.Е., 2010; Чазова И.Е., Ратова Л.Г., 2010). Проблема лечения и профилактики осложненной артериальной гипертонии является на сегодняшний день одной из ведущей в гсовременной медицине в связи с ранней инвалидизацией, повышенным риском развития сердечно-сосудистых осложнений и преждевременной смертности (Афонасков О.В., 2011).

Важная роль в развитии сосудистых осложнений принадлежит дисфункции эндотелия. При артериальной гипертензии было доказано ее наличие для системы периферической, коронарной микро- и макроциркуляции. Развивающаяся эндотелиальная дисфункция в условиях гипертонической болезни обусловлена в первую очередь активацией свободнорадикальных процессов, приводящих к уменьшению синтеза эндогенного NO, являющегося самым мощным эндогенным вазодилататором{Глова<С.Е.^ 2007-; Лебедев П.А. и др., 2010).

При гипертонической болезни возникает «окислительный стресс», сопровождающийся дисфункцией сосудистого эндотелия, расстройствами микроциркуляции, адренергическими и вегетативными нарушениями, которые приводят, наряду с активацией нейрогуморальной системы, к дисбалансу цитокинового статуса (Бочарова K.A:j Князева Л.А., 2007), развитию иммунного воспаления, нарушению фибринолиза, что усугубляет степень сердечной недостаточности. Итогом этих процессов является патологическое ремоделирование левого желудочка с дальнейшим прогрессированием его систоло-диастолической дисфункции (Yusuf S. et al., ,2008). При этом особая роль отводится активизации провоспалительных цитокинов, подавляющих продукцию оксида азота (Карпов Ю. А., 2010).

Отсутствие очевидных воспалительных процессов при артериальной гипертонии делает проблему иммунологических нарушений во многом спорной. Однако было показано увеличение концентрации 1§А при гипертонической болезни, особенно с кризовым течением. Увеличение концентрации ассоциируется с развитием сердечно-сосудистых осложнений. Повышению концентрации ^А у больных гипертонической болезнью придают существенное значение в образовании иммунных комплексов, имеющих особый тропизм к сосудистой стенке. В изучении вопроса о значении иммунологических нарушений при артериальной гипертонии показано увеличение уровня аутоантител к антигенам из ткани аорты и сердца. Выявленные повышения титров аутоантител к интиме сосудов, а также нарастание иммуноглобулинов при кризах указывает на развитие ремоделирования-сосудов при артерйальной гипертензии (Минга-зетдинова Л.Н. и др., 2006). В полной мере вопрос состояния иммунной системы при эссенциальной артериальной гипертензии остается практически не изученным.

При этом нельзя забывать и о том, что одними из регуляторов функциональной активности иммуноцитов являются эритроциты (Конопля А.И. и др., 2011). Повышенный интерес исследователей к эритроциту при болезнях разного генеза обусловлен его участием в процессах, связанных с поддержанием го-меостаза на уровне целого организма, и, прежде всего, иммунного. Существующие данные не оставляют ¡сомнений в1 том,-что эритроциты являются важным звеном механизма иммунорегуляции при стрессе и в условиях патологии (Прокопенко Л.Г. и др., 2006; Долгарева С.А. и др., 2011).

Отсутствие достоверных данных об изменениях структурно-функциональных свойств эритроцитов и иммунометаболических нарушениях при гипертонической болезни предопределяет целесообразность их детального изучения для определения в дальнейшем способов коррекции при данной нозологии. и . 7

Цель работы: установление взаимосвязи между иммунометаболически-ми нарушениями и структурно-функциональными свойствами эритроцитов при гипертонической болезни.

Задачи исследования.

1. Установить характер и степень выраженности изменений показателей иммунного статуса, перекисного окисления липидов, антиоксидантной системы защиты у пациентов с гипертонической болезнью в зависимости от стадии заболевания.

2. Проанализировать иммунокорригирующую эффективность стандартной фармакотерапии у пациентов с гипертонической болезнью различной стадии.

3. Определить нарушения структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов -у пациентов с различной стадией гипертонической болезни.

4. Выявить корреляционные взаимосвязи между иммунометаболическими показателями и структурно-функциональными свойствами красных клеток крови у больных гипертонической болезнью.

5. Установить лабораторные показатели иммунного статуса для оценки динамики течения гипертонической болезни и прогнозирования её исхода.

Научная новизна. Впервые установлены характер и степень иммуноме-таболических нарушений у больных гипертонической болезнью в зависимости I' > —• V нг-мюк о • < 'и»чм •<■• • > I . I м- - < I • I „ от стадии заболевания. Впервые у пациентов с гипертоническои болезнью выявлены выраженные изменения структурно-функциональных свойств красных клеток крови в зависимости от стадии заболевания. Применение стандартной фармакотерапии в лечении больных гипертонической болезнью не полностью корригирует измененные показатели иммунного статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитарной мембраны. Динамика параметров иммунного и оксидантного статуса у больных гипертонической болезнью кор. ■ ■ *!"1::ия. Ипепгн/с* у ч: ч" •":• "" релирует с изменением показателей, отражающих состояние структурно-функциональных свойствкрасцыхклеток крови.

Практическая значимость. Обоснована необходимость включения в стандартную фармакотерапию пациентов с гипертонической болезнью II и III стадии препаратов иммуномодулирующей, антиоксидантной и мембранопро-тективной направленности. Установлены корреляционные взаимосвязи между лабораторными показателями иммунного статуса и клинической симптоматикой, позволяющие судить о течении заболевания и прогнозировании исхода гипертонической болезни. Расширены представления об участии иммунных механизмов в патогенезе гипертонической болезни в зависимости от стадии заболевания.

Результаты исследования используются в работе ОБУЗ «Курская городская клиническая больница скорой медицинской помощи» и ГБУЗ «Брянская областная больница № 1». Материалы диссертации используются в учебных рабочих программах и лекционных курсах, на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Самарской государственных медицинских университетов и академий и медицинских факультетов Белгородского и Орловского государственных университетов.

• >.-.! I> .i ИНСрижнЧчЧ Ы>'| и >••!< >■»

Положения, выносимые на защиту.

1. У пациентов с гипертонической болезнью имеют место выраженные изменения иммунометаболического статуса и структурно-функциональных свойств красных клеток крови, соответствующие стадии заболевания.

2. Использование стандартной фармакотерапии у больных гипертонической болезнью не оказывает выраженного корригирующего влияния на показатели иммунометаболического статуса и структурно-функциональные свойства эритроцитов.

3. Между показателями иммунного статуса и состояния структурнофункциональных свойств красных клеток крови у больных гипертонической болезнью установлены достоверные положительные и отрицательные взаимосвязи.

4. Определены лабораторные показатели иммунного статуса и состояния мембраны эритроцитов, позволяющие судить о течение и эффективности лечения гипертонической болезни.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на межрегиональной научно-практической1 конференции «Реальная профилактика как основа современного практического здравоохранения» (Курск, 2010), III Международной дистанционной научной конференции «Инновации в медицине» (Курск, 2010), итоговой научной конференции сотрудников КГМУ, Центрально-Черноземного научного центра РАМН и отделения РАЕН «Университетская наука: Взгляд в будущее» (Курск, 2011), Всероссийском научно-практическом форуме «Профилактическая кардиология 2011» (Москва, 2011), 76-й и 77-й всероссийских научных конференций студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2011, 2012), XIV Всероссийском научном^ Форуме'о «международнымьучаотием'Им.'-акад. В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2011), II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2011), XVIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2011), совместном заседании кафедр клинической иммунологии и аллергологии, биологической химии, внутренних болезней № 2, микробиологии, вирусологии, иммунологии Курского государственного медицинского университета (2012 г.).

Публикации. По,материалам диссертации опубликовано 12 работ, 3 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ. В них содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации, получен патент на изобретение.

Личный вклад автора. Автором составлен план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводилось обследование пациентов с гипертонической болезнью, забор крови, анализировались лабораторные показатели адаптивного и врожденного иммунитета, процессов перекисного окисления липидов, структурно-функциональных свойств красных клеток крови. Диссертантом самостоятельно выполнялись анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в совместных публикациях составила 80-95%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 5 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 132 отечественных и 86 иностранных источников.

ВЫВОДЫ

1. У пациентов с гипертонической болезнью I стадии в плазме крови повышена концентрация провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, неоптерина, ИЛ-2, продуктов перекисного окисления липидов, стабильных метаболитов оксида азота, альфа-1-антитрипсина, снижен уровень компонентов системы комплемента (Сз и С5а), церулоплазмина и активность каталазы, в мембране красных клеток крови снижено содержание подфракций спектрина, анкирина, повышен уровень белка полосы 4.1 и дематина, снижены сорбцион-ные свойства красных клеток крови.

2. У больных гипертонической болезнью II стадии дополнительно повышен уровень в плазме крови противовоспалительных цитокинов и С-реак-тивного белка, снижена концентрация ^М, в мембране эритроцитов снижено содержание р-спектрина, паллидина, глицеральдегид-3-фосфат-дегидрогеназы и повышена представительность анионтранспортного белка, белка полосы 4.5.

3. У пациентов с ИГстадйей гипертонической болезни дополнительно повышена концентрация провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, компонентов системы комплемента, снижено содержание иммуноглобулинов, а в мембране эритроцитов подфракций анкирина, спектрина, белка полосы 4.5 и повышен уровень белка полосы 4.1, актина, дематина.

4. Стандартная фармакотерапия у пациентов с I стадией гипертонической болезни снижает количество изменённых показателей иммунометаболического статуса и состояния мембраны красных клеток крови с 62,8% до 28,9%, у больных II стадией - с 79,1% до 43,4%, а у пациентов с III стадией - с 95,3% до 65,9% изученных показателей^'что ¡свидетельствует о недостаточной коррекции иммунометаболических* нарушений. ^ ■ ■

5. У больных гипертонической болезнью I, II и III стадий между показателями иммунного статуса и состояния структурно-функциональных свойств красных клеток крови установлены достоверные положительные и отрицательные взаимосвязи.! ' !» ,П ' ! -Н'ЧПЧ!'. > > " * • ,

6. Динамика показателей иммунометаболичеекого статуса и структурно-функциональные свойства эритроцитов на фоне проводимого стандартного лечения коррелирует с показателями, отражающими морфофункциональное состояние миокарда левого желудочка (индекс массы миокарда левого желудочка, время изоволюмического расслабления левого желудочка, соотношение максимальных скоростей трансмитрального потока в фазы раннего и позднего наполнения левого желудочка, фракция выброса левого желудочка).

7. Наиболее диагностически ценными для оценки эффективности лечения, динамики течения заболевания, прогнозирования его исхода у больных гипертонической болезнью являются в крови концентрация ИЛ-1а, ИЛ-8, неопте-рина, Сза, С4, а в мембране эритроцитов - уровень Р-спектрина.

I СЧСпиЯ '.¿иООЛСиШИШ, 11ри1 ¡К/

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать клиническое апробирование у пациентов с гипертонической болезнью иммуномодуляторов, антиоксидантов и мембранопротекторов с целью улучшения клинического течения заболевания.

2. Для оценки динамики течения гипертонической болезни и прогнозирования его исхода в дополнение к стандартным лабораторным и инструментальным методикам рекомендовать исследование в крови концентрации ИЛ-1а, ИЛ-8, неоптерина, Сза, С4, в мембране эритроцитов - уровень р-спектрина.

3. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о выраженности иммунометаболических изменений и нарушениях структурно-функциональных свойств красных клеток крови у пациентов с гипертонической болезнью. тополчснпс к стап'пр;ммм '"Ш г'