Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Иммунологические и иммуногенетические особенности при лепроматозной лепре

о 1 9 И

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР ИНСТИТУТ ИММУНОЛОГИИ

На правах рукописи

САРОЯНЦ Людмила Валентиновна

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПРИ ЛЕПРОМАТОЗНОЙ ЛЕПРЕ

14.00.36 — аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата, медицинских наук

Москва — 1991

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте по изучению лепры Минздрава СССР.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Л. П. Алексеев, кандидат медицинских наук А. А. Ющенко.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Ж. Г. Умеров, доктор медицинских наук, профессор А. А. Ярилии.

Ведущая организация — 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н. И. Пирогова.

Защита диссертации состоится _» 199/ года

на заседании специализированного ученого совета Д.074.09.01 Института иммунологии Минздрава СССР по адресу: 115478, Москва, Каширское шоссе, дом 24, корп. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии МЗ СССР.

Автореферат разослан _» ^¿^/¡^-¿¿^_ 199^ г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор биологических наук

А. В. Колобов

I

I

"11 Г

Аюг^лоиоыъ лдтуВ .тасчсллро -глгл г.---; : '.ого с!П,./:-2Шгм ;л;.оглеолс!.:осг:1 .т.?;]рой з ССОР 11 'ллл-рлр гллл^лл

рплоштх стрлш!, прололлллг роглолргро: л,:.лл чл1'.: ел>л;г; юлезни ( Ч Л. Лй;тлроз л е.ли '.V. , Г.1 Л ' . л.лл\:

¡опрос.! прслл.ллстлл:! ч-л а лгллэ ллллл;; -I -■■'■'' лл:л\<* р~лР; Виталии оолыпл-г полр э^ь-л- оно г.кг,уллыю:л,'->, ' <"><■■ млл; ;ллля фО.у'.ласттта л усхозизх еиоргрртскл,' -лллллг - лл. г;;"'!'.;;;'-': г. соикротинаци^л групп ног:: ллнаог'о рлсюл г.оо -сгг. г.. 0: г-зрлч->:!ятнй по недлцлло'сой ]о.ллл '..:: л'л.л ¡"'л :лл";ло'ч' ¡рзрлооткл I:н:зуду^лы11.'.т слсл: .л)-'лг,:л л *!р" тлл-л> л ? гл'л':.--об боясз!М. особенно ллл'оло:: лл .;лл">: л-л.ллЛ; .лгрл.,

риск рлпвптлл рзцллл":» г* Чоснплг.ло р:л :лл?ллл7 ллл;л;л рупге 'ГИШП ЛОПрЛ ( К. Д. ¡'ЗРЛЛЦ^Г V. ,

уровень лопрлй го ьлогпм сл'"'''-"лл"л'л?:' ¡',г'"

кп-м среди лллелошп лиц с ;ю1Л.;ллпо . ои:^^щг:".-;;■>.*; :. ; ифэкции. Ралйолее пссспе^лкчг".! лолл^лл: 7'лл" ' лл.

тих л»ц, язллетея лм'лрл-'лнлл по ллпл лл \ ллпгллл":-.>лл: ур^ствукескэ лэлоалсзгз м бнугр|.ч;?:,г/'.'':'о г:1", у:':.:;. л р" :!р;рго1г.': 1Л-8нтагс!юв оиусловлллает длч лэлло:! л;: рлс л гг:г.;1?г.:г;хгч гюевяви определении.; онтагшюз глс^ееол^лслл-'ллл: с .-.гз.-'.рганс, • эдошюстьз к зайолеванлям (Л. П. Ааоуеооч, агат), ¡.¡¡ю г,с:;сис •/■»>>-гроз болезни нс-сохол*.».» учапыегь вег^/о^-юют ло

эль ко обцнх, но п коплрлхнь?:''¿лл о^ллоо^.л ••¡■•рт-лл ' л

яептшмос и>: гоеодчац1!;!. В слпал а лл'л ""л-ллл:-стуадьни у продстозц'юлйп рлзл'ллштл г/ч л ";\"лллл ¡ли/: ллЛ Гг.*.; шро средч лпп русегтой пациокальчоег/. чг.ь ■хп'-м.т лр л зл.~

1ЧНЦ И ЕШ-СШМ' ЛИ^'Ь ЛЛуЛбНЛО 0с0б<>»л;сиуг.;( •Г.П.-.-'^ "Л.ПЛ

генов HLA I касса (KXIL Баранов, R К. Логинов,- 10C8). Анализ км» iiKSiaE реализации еесоцшрованной с HLA предраспошшнностью i лэг.рэ а основном осуществлялся в направлении поиска связ Н1А~аида*енов со способностью индивида реагировать на сптигвк Я leprae (van Ecton et a], 1934; de Vnes ot al, 1385). При это чзтккх сведений о наличии такой взаимосвязи до настоашзго врею ии не получено. В то ке время комлэкс иммунологических отклопа кий при этом заболевании гораздо шире и включает в себя как кс личествелные, гак и функциональнее изменения тьмунокошетеитнь клеток. Эти отклонения, веро.шю, сохраняются и з стадии регрес са болезни. ййгадиеси в литературе свед&шш по данному вопрос не'люгсзчисд&шш (10Л11Ьрву:иш и coast. ,1978; С. IL Селезне; ,1083). Дээтоыу из сегодняшний день актуальным яв ляется нссл дованке механизмов иммунопатологии лепра не только в" актавш стадии болезни, но к на стадии ее регресса. Учитывая изложило! перспективным представхяется исследование взаимосвязи HLA-ант генов с такими показателями клеточного. именито га, как функц естественных кидлэров, несдоцкфичесгак Т-супреееоров, пролифер тквнаЯ' активность Л5»4эцктоб и соотношение основных субпопу-, ~г и;.1\1уноког/.яетентшх kj.c-toк. Результаты исследования, е нотог учитывался генетические особенности индивидов и состояние иммуиного статуса будут способствовать совершенствованию зли; шологических, профилактических и лечебных мероприятий. ОооС эиачениэ они пркобрэтшг для проведения - индивидуализирован; 1»Д1унокоррлг}!руга»;й тердпии, все оомс-е широко пришнящэйо} ¡ишнке гасрь? (IL Ki. Голощапов и соант. ,1983; А. А. Ка;енко и соас: 1989).

Цель работы: изучение особенностей распределения -антигенов ■госов>/естш.юсти у больных -с лепроматозннм типом лепры для ус-.овлония маркеров предрасположенности, комплексное исследова-иммунного статуса больных лелроматоаной лепрой в зависимости активности процесса и стабильности регресса заболевания, а же выявление возможных ассоциаций HLA-антигенов с различными ¡унологичееккми показателями.

Задачи исследования: Провести типироваше по антигенам HLA I и II класса в русской [удяции среди здоровых лиц и больных с лепроматозным типом [ры.

Определить функциональную активность неспецифических Т-супрес-юв, естественник клеток-киллеров (ЕКК), пролифэративную функ-з лимфоцитов б реакции бласттрансформации•(РБТЛ). Установить количественные характеристики популяций и субпопу-щй иммунокомпетентных клеток с помощь» моиоклональных антител щффэрэнцироЕОчним антигенам серии CD и количество HLA-DR :прессирующ1Х клеток.

Провести анализ изученного комплекса иммунологических парадов в зависимости от активности процесса и стабильности perica заболевания.

Проанализировать ассоциации HLA-антигеноз с по.'саватэляыи лунного статуса.

Изучить динамику и информативность иммунологических пярамет-з в процессе иммунотерапии.

йаучяая новизна. Впераие с помощь» есиргмешшх катодов онтологического обследования проведена комплексная клинпко-имму-

нологическвл оценка сосгошии. допросного процзсса у брлы-а рошюзной лепрой па ьеах его стадиях. ВпорБЫэ установлю аатигнш Ю-0Н2 и ОКЗ, наряду с антигенам ИЬЛ-ВУ , яг ьарк-эраш; цредоаешшшлшоети к развитии лапре.матозногс лопри в русской популяции. геэп'.'тенткоагь к развитию указ типа лопри сопрнлйиа с наличием антигенов НЬА-0К5 и 127.

Гкисазано, чао рвщщиаирук^е те-чеше хеири ассоцииро глггагеиа?.:п НЬА-МО, HQ.il, а длй болышх со ет^Оилььи

реесом процесса характерно наличие ан-гигеиоь НиА-ОГ<? и В13

Подучены повис данньй, съидетельствующие о стойка;,- н ;««1 количесшшних и Функциональных показателен иымушюно са у еэльвьа с рецидивами в анашой«".

Впервые получешг св1гд»иш об ассоциации низкого урови: •гиьпости естественных киллеров с антигеном НЬ\-В7 у больны роИаТОЗНО',! лепрой 13 русской популяции, ЧТО, ВОЗМОЙНО, ОТ] один из кехаышшв реализгшкн генетической прелрасположешк развитию заболевания.

Шерьш установлено, «гго у больных лепрокатозной лепре тигеп НЬА-ОО,-;] является юркером низкой митогеииндуциро£ пролпоеративпо11 активности ликфэцитов, а антиген НЬА-АЮ -кэром низкого уровня активности ниеийцифичееких Т-супрэссс сниженного числа ОКТ 11+ лимфоцитов.

Дня коррекции ищущих нарушении у больных с яенромзи типом лепры впервые с положительным эффектом, подтвергаде помимо клинических и гистологических критериев, динамикой чэотвешшх и функциональных параметров ишунокоыпетеитнш: ток, применен препарат тимогел.

- 5 - ■

Научно-практическая зпачиыоотъ. ПолучоиШ» а результате 7роведенного- исследования новые дзниь:е позволяют из числа контактных по лепре лиц, гмеюг^их в фэнотшю антигены ША-ОРЗ, ПР2, 17, формировать группы повкаганного риска развития зеЛолёшпшя юпроматозной лепрой; а среди больных без активных проявлений ;епрозного процесса, имеющих выраженные отклонения а Т-кл:>точпс;1 »вене иммунитета, особенно в сочетании с наличиеи в фенотипе юльиых антигенов НЬА-0С!м1, Ш2, АЮ, - группу позиаоадюго ркска ю'зликновения рецидивов лепрозного процесса.

Предложенный комплекс современных кнфорштивнш пммугологц-¡еских тестов долзэт быть применен для оценки зф][ гютюйости тера-;ии и прогнозирования течения лепрозного процесса. О и ^пользуется в практике клинического стационара НШ1 по поучения епры Минздрава СССР и при обследовании болыш'х лепрой, иеподя-дахся на диспансерном наблюдении.

Априбацт дг.ссертащт. Основные положения дисеортшгип додо-зны на XI1 научной конференции молодых ученых Цоятрпвьного иа-чно-исследовательского института эпидемиологии Минздрава СССР Астрахань, 1986), на'Всесоюзной научно-практической конференции о вопросам лепролопш (Астрахань, 1988), на VI. Всероссийском ьезде дерматологов и венерологов (Челябинск,. 1989), па облает-эй научно-практической конференции сотрудников мединститута и рачей Астраханской области (Астрахань, 1990), на ученом совете НИ по изучению лепры Мнвадова СССР (А<пргксаш>, , на яаее-

ании ученого совета секции МП Инстатуто кмнуг.ологни Минздрава ЗСР ( Москва, 1990).

11ублч;тци-1 По материалам диссертации оаубдшэтваЕО-б работ.

- б -

Cóhcu и CTpyifxyia paSotv. Диссертация ии&ллзна ua /£Pcsi шщах шлнмоняеного текста и состоят ие введения, обзора лше| тури, озйзглш натерлаюь а кэголов, 4 глав собстасшш: лаши обеуздс-.аи получепиыг: результатов и виаодог. В работе ео^зрлз: 14 ризуикоз и 17 таблиц. Список литературы включает ^"/огечеt ьеннщ н У/<5аарубе>.шгх публикаций.

СОД£1'ЖАШ££ РАБОТЫ

Штернами и w-oaíi пссазюьаниа. Работа основана на резу татах комплексного клакикэ- иьмунологического обследования больных лепроштозкой лепрой (LL и BL па классификации Ridle Jopllng, 1366), находившихся на лечении и реабшштацли в Ш01 изучении лепры Млиздрава ССОР (Астрахань). Среди обследован больны.:. •• 45 мужчин и 37 ¿днсщн в возрасте от 20 до 60-лет.

В зависимости от степени активности лепрозного проце Ctumus были разделены ка две группы: лица в активной ста лопру - 30 человек и в стадии регресса.аабодевания - 52 чело ¡*л, из них у 30 человек в анампеье болезни отыечзлись рецкдп а для 22 чэдовек характерным было беврецидиЕное течение проп са. Контрольную группу составили практически здоровые- дснс сопоставимые с сольными по полу и возрасту (23 чел.). Больнь активным процессом получали комбинированное лечение сульфонов препаратам:-. и аитибиотшгаш широкого спектра действия (бэне №Ш, протионешнд, рифамяиции). Больные с регрессом лепрозв процесса получали противорецидивное лечение солюсульфоноы дкаьчаюдифонилсульфоном (DDS).

Lo актигенаы ÜLA- А и Б локусов типировани 120 больных j

- 7 - .

тозным тппск лелри и 122 здоровых донора-русской нащюпаль-н. У 92 доноров и 23 больных опредоляг.'сз} антигены .;окусов DQ.

Забор крови осуществляли однократно, лиифоциты перифвричес-крови (ЛПК) виделяли по истоду Boyum (196S) в .-стерильных ус-ях для Есех исследований.

Для проведении типирования HLA-A, В, DR, DO' локусов исполь-ди отечественные HLA-антисывсротки (Ленинградский Н!1И гемагии и переливания крови с включением коммерческих сьшороток

/

! "Eehrins" .ч "Biotest"). HLA-A, В - типпрование осуществлял'! андартном двухступенчатом микроли!.!фоцитотоксичйЬком тесте ■as£ki,1970). йивляли 7 антигенов HLAI ¡класса: DR - 1, 2,3, 7 и DQv/l. Обогащенную суспензию В-лимфоцигрв выделили на к.о-ах с нейлоновой ватой (Lowry, 1978). - -

ПролиферативныЛ ответ Т-лимфоцитов на политональные мито-1: фитогеыагглютинин (ФГА), конканавадга А (КонА), митоген iHOca (PVM) и антиген из М leprae - лепрошга* - определяли с (таю РБТЛ в стандартной шкромодификации (.1IL Алексеев, >). Реакцию учитывали радиоизотопным методом по включению3!! -¡дина.

Для определения функциональной активности ^специфических Т

:пронин ив М lepras получен в группе иммунохимии НИИ по изу-ш лепры и предоставлен для данных исследований ст. науч. сотр. Дячиной. Представляет собой препарат типа эндотуберкулинов 1 leprae, пассированных на крысах. Рекомендован в качестве спо-гаеского диагностикума при лепре (ИНДячина и соазт, ,1984).

- 8 -

-супрессоров использовали модифицированный ..кюд Show и соав^ (1976). Применяли аутологичнуы систему (jL П. Алэксеев ii соавт. 1980). Учет реакции проводили радиоизотопныы штодом по вклз ченив Н - тимндшш.

функциональную активность естественных киллеров оценила, до их цитотоксическому действия на клетки- ыикени К-562, меченш ^Н - урндином по методу hi П. Рыковой и соавт. (1S81)

Субпопуляционный состав иммунокомпотентных клеток, определз ли с помогцью ыоноклоьальньи антител к дифференцировочкым антиг« нам серии CD: 0КТ11, 0КТ8, 0КТ4 и к мономорфным детерминантам I - клеток в кодифицированном цитотоксическом тесте (А. Г. Исхага к соавт., 1988).

Статистическая обработка материала состояла в его групп; ровке , вычислении средней арифметической (hi), ее ошибки (ц коэффициента корреляции Спирмена (г). Достоверность различий о; ределяли с помощью критерия (t) Стью,цента. Методы генетическо, анализа включали вычисление относительного (RR) (Waif, 1974 атрибутивного (с) риска (Bengtsson, Thomson,1985) превентивно фракции (PF) (Bengtsson, Thomson, 1981). Статистическую знач дасть различия в частоте регистрации конкретного HLA-антигенз больных и здоровых определяли по точному двухстороннему критер Фишера с поправкой на обцее число тестируемых антигенов. Резул таты считали достоверными при р< 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение. Результаты изуч ния функциональных показателей лимфоцитов представлены в табли 1. Сведения о распределении основных клеточных популяций и су популяций ишунокоыпегентных клеток отражены в таблице 2. К

. Таблица 1

Показатели функциональной активности шшунокомлетентнш клеток у больных лепрой к здоровых лиц

Группы обследованных лиц

Вольные лепрой : с регрессом заболевания

с активным : --------

процессом : общая

: группа

п = 30 : п = 52

----: Здоро- :

вые :

-------------------- лица :

с реци- : без ре- : ;

дивами : цидивов : :

п = 30 : п = 22 : п = 23 :

5 10 20 20

11,Ш,9** : 19,5+2, 4л**: 24,5+2,7***: 9,411,3** : 15,311,6** : 18,1¿2,3A : 6,5+1,4А* : 11,1+2,5** : 9,5+1,8* : 1,9+0,2* : 33,8+4,2* : 19,2±5,9** :

10,1+1,9 31,8.12,6** 34,8+3,7* 17,0i3,7 23,3±2,9 19,212,9* 10,7.12,4* 21,2±3,9 18,1±3,5

2,11.0,3* 54,9+2,0** Зо,6±4,0

14,512,8* : 20,4+2, 3*а : 23,0+3,1'**л: 13,0±1,8 : 19,3+2,8 : 15,7±1,7** : 8,3+1,2** : 17, 5+4,5 : 1D, 3±4,7 : 2, 3±0, 4* : 58,9+2,6* : 27,1.15,4 :

24,.9+2,7 : 49,214,7 : 51,9+6,8 : 25,0±7,2 : 29,015,2 : 23,015,7 : 13,7+4,6 : 25,5+6,5 : 20,7±5,2 : 1 ¿ 9+0,3*: 50,3±3,2 : : 44, 9±б,0 :

23,7+3,6: 46,6±4,2: 47,li4,8: 20,7.13,4: 24,9±2,1: 29,3+3,9: 20,4+3,9: 31,7+6,9: 22,5+4,8: .7,1+1,9: 45,4+2,6: 43,8+6,4:

Примечание: ИС-индекс стимуляции на указанные дозы (мет/мл) 'А, КонА, PVM, М. 1. (лепронин); ИД-иидекс цитотоксичности ЕКК; '-индекс регуляции; л- - различие с контрольными покосгтслшл! )стосерно при р<0,05; ** - при р<0,01; - при р<0,001; П -кло обследованных лиц.

- ш -

ВИДНО lío 5'абЛ1ЭДЦ 1, _1л1л0лдз..; лирглункло нчруксши КОД/ШОГО С1

туса характерна «одьаьас лэг.ро?. ь актилнай слздаш. У отих i циош'ов уровень РЯГЛ аа СТА, КонА и РУЫ достоверно низ (р<0,( по сравнения с контролем. у больных с pc-rpaccou заболевания 2 нстенке акгагноо!-« лшфоцигов в РБТЛ соярааяек

хотя л г.игео ш;раглшюе (;>< О.ОЬ). Л^дкферативныЗ ответ л; фоцктоа па хеирошт одинаково hs;jkju1 в обоих группе* болы (р<0,05) а не ааьист.1 от степени акгиикости процеесл

Ёушщшаакьная аетивноств несиеци^ичаских Т-супрзссоров больных в активной стадии енш,*гна по сравнения с группой здо; вых доноров (p<0,ül) и бсдынк о регрессом ваЗолоьалия (p'.0,0¡ 1'е.чцу пссдоднилл группами различая недостоверна

У больных с активны;.: процессом ышелуно угнетение функци ЕКК по сравнение с норной (р<0,05.) и больнши с регрессом лэ (р<0,01). У последних этот параметр достоверно вьшэ ашиогичн-в контрольной груш» (р<0,01).

При изучении популяций i; субгюпуляций ишунокомпетент клеток (табл.2) у больных в активной стадии заболевания устан лево снижение относительного содержания ОКТ 11+ лимфоцитов сравнению с донорами (р<0,01) и больными в стадий регресса (р 01). У больных лепрой независимо от активности процесса отно тельное содержание ОКГ 4+ ídistok еншмэно (р<0,05), а ОКТ 8+ л фоцитов повышено (р<0,05). Вследствие этих изменений отыочал сшшшие соотношения OK?<u/OKTS* гаэток по сравнению с нор как у больних в активной стадии процесса (р<0,001), так у больнух с регрессом зайолеьанин (p<0,0i). Различий в еодерья клеток, экспрессирующих DR-антигена, как ызмду группами болы;

• Таблица 2

Распределение? субпопуляций лимфоцитов периферической крови у больных ленроА и здоровы:: лиц-

'НО-

■ип ;тоз

;Т1Н

Т 8+

Т 4+

Г 4+ Г 8+

Примечание: а - число обследованных лиц; * - различия при гонении с группой контроля достоверны при р. < 0,05;. ** - то кэ 5 р < 0,01; *** - то ке при р < 0,001.

Относительное содержание лимфоцитов (М^п) а I у

больных с активным процессом п " 23

больных с регрессом заболевания

обиая группа п - 43

рецидивы п 24

без рецидивов п - '19

здоровых лиц П = 24

66,8+1,1**

71,8±1,2

72,2+1,6

'71,211,7

72,511,3

26,7И,1*

25,б±0,8*

25,7±1,2

27,811,1л*-

23,511,1

34,5±1, 3***

39.7x1,2*

38,511,8**

41,211,6

44, Ш, 7

22,310,9

23,2±0,9

22,811,2

23,7.41,4

20,9±0,8

1,4+0,1***: 1,6+0,1л*

1,610,1**: 1,5±0,1**:

1,010,1

- 12 -

так и по отношении .к контроля но обнаружено. '

Повышение у больных лепрой количества ОКТ 8+ клеток на ф сниженной функциональной активности неспецифических Т-супрес ров, по-видимому, является следствием комионсаторкой мобшша в циркуляцию супрессорко-цитотоксических клеток для восполне их функциональной недостаточности.

Ташш образом, у больных с лепроматозным типом лопры вь лена взаимосвязь иммунологических отклонений с ..-сгивнос лепрозного процесса. Элиминация, микроорганизмов в резудм специфического лечения ведет к частичному восстановлению соо! 12« нпл субпопуляций и'Их функций. Несмотря на улучшение показ; лей по сравнению с активной стадией, большинство изученных п; метров остаются вне пределов нормы, лишь приближаясь к ! Проведенный у больных с регрессом заболевания анализ колич!

венных и функциональных параметров пммунокомпетентных клеток • »

казан, что степень их восстановления находится в прямой зав - мости от наличия или отсутствия в анамнезе болезни рецид (табл.1).

Пролиферативная реакция лимфоцитов на ФГА у Сольных с р ■ дивами Б анамнезе по сравнению с нормой и группой безрецидI больных угнетена (р<0,05). Ответ лимфоцитов на ЕонА и РШ } .«э больных снижен по отношению к контролю (р<0,01) лишь при которых концентрациях этих мптогенов. Реакция лимфоцитов на роиин оставалась на низком уровне и не зависела от наличия ] дивов в анамнезе (р<0,05).

Для больных с рецидивирующим течением болезни харагс угнетение функциональной активности неспецифических Т-супр

- 13 - •

(р<0,05) по сравнению с группой бозр-зцодгшчк сольных. ./ лодней группы' этот показатель пракгг!?к?сга '■ по отличался ст логичного з группа здоровых л,о:;ороз.

Кроне того, для лиц, чмэващх рецидивы в я1!а1.г:оро, хапжгор-еннжэнпе по сравнению с норной (;э<0,05) колглзстза ОК? 4+ ток (табл. 2), в то время как у дни а Сезрецддпвнш течением цесса обнаружено увеличение числа ОКТ 8+- клеток (р<0,01).. данные изменения обусловили снижение соотношения 0КТ4+/0КТ8+ ток в обеих группах больных (р<0,01). Относительное содерз-з-■ ОКТ 11+ и ОК)- клеток во всех группах больных достоверно не спалось от контроля.

Таким образом, подученные результаты свидетельствуют о том, I у больных лепрой, икекгдх в анашеэе рецидивы, наблюдаются аналогические отклонения, во шюгон сходные с таковики при •шшсм процессе, хотя они и генео. выманены. Анализ корреляций еду изученными иммунологическими параметрами такте продешнс-!ровал, что у-больных с рецидивирующим течение« заболевания ¡а и направленность ешплонвых связей во многом аналогична ;людаемь!м при активной стадии лепры.

У больных с рецидивируощ'м течение?,! процесса повышение

ч

нсции ЕКК по сравнении с норкой было более вира'зио (р<0,05), 1 у больных, не имеющих рецидивов в анамнеЕе (р>0,05).

В результате проведенного «есяеяовааиз нами подучены ковш пше, свидетельствующее о заинтересованности изученных кпдуно-"ических параметров в формировании рэцидивнрукятзго течения фоаного процесса. В связи с этил представленный комплоте ин-юлогических показателей моз/лт быть рэ:г.оз,:ендован для ийдмпнду-

- J4 -

ильного прогноза заболевания. В то йе время прогнозирование диагностика различных заболеваний в настоящее время тесно свявг ни с установлением генетичешзта маркеров предрасположенности устойчивости к развитию патологии.

Сравнительный анализ распределения антигенов HLA в обслед' ванной русской популяции здоровых лиц и больных лепроматозн лепрой показал (табл. 3), что у больных лепрой с наибольшей фен типической частотой встречались антигены HLA-B7, UR2, DR3 и сн >-еяа частота выявления антигенов HLA-B27 и DR5. Величины относ тельного (RR) ч атрибутивного риска (СГ ), превентивной фракц (PF) для выявленных маркеров нредраеположниоати и устойчивое к заболеванию лепроматовной ленроД представлены в таблице 4.

Таблица 4

HLA - ассоциации у больных лепроматозной лепрой

• Частота антигенов у

: Аллели -------------- :

: HLA здоровых : больных : RR Р (У : PF

П"122(92) :n=l 20(23) :

: В ? 19,83 : 38,26 : 2,51 0,0017 : 0,23: -

: В 2? 12,40 : 3,40 : 0,25 0,0149 : - : 0,09;

: DR 2 25,00 : 52,17 : 3,27 0,0055 : 0,36: -

: DR 3 21,74 : 73,50 :10,22 0,000005: 0,67: -

: DR 5 20,65 0 : 0,08 0,012 : - ; -

Примечание: см. прим. к таблице 3.

V<: б.'лца 3

Частота 'PLл - п .шатенов-jr болышх дгяг.омагб'зной лепрой

и здоровых

'ГОДвКЬй лгпрсматозной лепрой

АНТИГО- Одорогдг> --------------- ---------------- ---------------

НЫ ^пиа ООРПД группа с рецидивам: 'без рецидивов

ill.A а акшягезе в анашюзе

Г. »122(92) п - 120(23) п - 65(13) п = 37(5)

А 1 23,3 19,1 13,9" 18,2

А 3 43, й 43,1 . 44,6 59,5

А 3 29, а 33,4 50,8 35,1

к 9 23,9 26,9 29,2 1 24,3

А 10 24,8 35,7 40,0 24,3

А 11 15,7 i 3,9 0,2 .16,2

А\;19 8,3 0,7 6,2 0,7

А 28 5,8 2.6 3,1 • 0

В 5 18,2 13,9 9,2 ■ 27,0

В 7 19,8 28,3* за,9*. 29,7

В 8 16,5 13,1 10,8 10,8

В 12 19,0 20,0 24,6 16,2

В 13 12,4 9,6 6,2 24,3

В 14 4,9 1,7 3,1 0

В 15 8,3 7,8 4,6 10,8

В IG 10,7 19,1 20,0А 21,6л

В 17 10,7 'i.ß 4,6 0

В 18 7,4 4,4 7,7 8,7

В 21 5,8 6,9 7,7 5,4

Bw22 7,4 6,9 3,1 5,4

В 27 12,4 3,5* 4,6 5,4

В 35 22,3 21,7 29,2 18,9

В 40 9,9 9,5 10,8 10,8

DR 1 17,3 13,0 18,8 0

DR 2 £5,0 52,2-л 62,5 А 0

DR 3 21,7 73,9* • 62,5* 100,0-л

DR 4 16,3 30,4 31,3 40,0

DR 5 20,7 0 * 0 0

рр 7 27,2 17,4 6,3 "60,0

ITQwl 48,9 47,8 56,3 0 а

Примечание: п - число лиц, протипиропанных по антигена» HLA класса; в скобках - число лиц, протипироваиных по антигенам ILA II класса; л - различия достоверны при сравнении с конгроль-:ой группой по точному методу Фишера.

- 16 -

Как видно из таблицы, самый высокий относительный и атриС Тивный риск развития лепроыатозной лепры связан с антигеном H -DR3 (RR = 10,22;б= 0,67). При коррекции на число тестируеь антигенов статистически значимые различия сохранялись только } антигенов HLA-B7 (рс = 0,049) и DR3 (рс= 0,00014).

Полученные данные согласуются с результатами исследован! проведенных в Японии (Matsumoto et al. , 1980), Италии (Noceга al., 1980), на Филиппинах (Pollack et al. , 1985 ), где часи антигенов HLA-B7 и DR2 также была повышена у больных лепромат ной лепрой. Б то же время имеются сообщения о связи антигена -DR3 с туберкулоиднш типом лепры (van Eden et al., 1982). Be ятно, это свидетельствует о различиях в распределении связан с лепрой HLA-антигенов не только мевду расами, но и внутри р

Таким образом, на основании проведенных исследований мс заключить, что маркерами предрасположенности к развитию лепре тозной лепры в русской популяция являются антигены HLA-B7, Е DR3. Носительсгво антигенов ESV* и DR5, наоборот, говорит об тойчивости к развитию данного типа лепры.

Анализ распределения антигенов гистосовместимости у бол] лепрой в зависимости от наличия или отсутствия в анамнезе бо. ни рецидивов (табл. 3) выявил увеличение частоты встречав?,» антигенов HLA-A10 (р= 0,034), DR2 (р=0,023), DQwl (р-0,03 больных, имеюцих рецидивы е анамнезе, в то время как у безр дивных больных достоверно чаще регистрировались антигены В13 0,039) И DR7 (р-0,027).

При изучении взаимосвязи антигенов гистосовместимости с казателями клеточного иммунитета у больных лепроматозной ле

- 17 -•

:ой нацист яыюсга обнаружен целый ряд закономерностей. й*-:а ассоциацгы низкого пролифэратиииого ответа Т-лимфоцитов Л на митогени 'Ж'А н КонА с антигеноц НЬА-ПСИ (табл. 5).

Таблица 5

Взаимосвязь антигена Ю-О0и1 и пролифератнвного ответа Т-лимфоцитов в РВТЛ у больных леяроматозной лепрой

.уктор .сто-

еза

-Р

А

Примечание: * - различия мезду группами достоверны при Р'О,05; ** - то же при р;0,01; *** - то же при р<0,001. С антигеном Ш..А-В7 установлена ассоциация низкого уровня оксичности ЕКК (р<О,05).средний показатель которой для лиц м антигеном составил 48,2 ± 3,9%. У лиц, не иыеюдщх в фено-антиген НЬА-В7, он равен 58,5 ± 2,6%. Кроме того, у больных нгоном НЬА-В7 в фенотипе обнаружено повышение (р<0;05) про-

Кснцечтрация (миг/мл)

БЕТ Л (индекс стимуляции в%) у больных с

НЬА- РО +

НЬА-ПСМ-

10 20

10,4 + 1,7* 19,3 ^ З.Заа 19,7 2,9*

•24,5 + 5,8 : ' 37,7 + 4,7 43,6 + 8,1

. &

10

20

7,1 + 1,7».-** 15,4 + 5,7 10,1 + 1,8

22,0 + 2,7 29,3 + 7,7 28,3 + 7,7

- I'd -

хкфэргливпого ответа шшфэщгсоа на лепронин по. сравнению с группой лащ, у которых данный HLA-антиген отсутствовал (2,S + 0,6Х

1,4 ± 0,соответственно).

У'бал:..-;цх е HLA-A10 антигеном в фенотипе ослаблена функци неспец5ф;песк!Х Т-супрессоров. Средний показатель их гктивноет в этой группе составил 31,0 i 5,4%, что пике (р<0,05) аналогич ного параметра в группе HLA-A10 - негативных ляц (48,1 ± 6,02) V больных с KLA-A10 антигеном отмечалось снижение (р<0,05) отко сительного содержания 0Ш1+ лимфоцитов (69,0 ± 1,8 1) по орав нэнию с группой лиц, в фенотипа которых данный HLA-антиген и выявлялся (74,5 ± 1,3%).

Такиы образом, у больных лзпрокатозной лепрой русской надо овальности выявлена ассоциация антигена HLA-B7 с нивкам уровнг ЕКК, что, бозьчкшо, отражает один из механизмов, с поыощьа коте poro реализуется связанная с системой Í1LA предрасположенность ра&витию лепро;.:атозной лепры. Ассоциация антигенов HLA-DQwl А10, достоверно чаве встречающихся у больных с рецидивируют течением процесса, с подавлением штогеншдуцироБЗННого пролиф* ратнвного ответа .лимфоцитов, ослаблением функции неспещфтесх Т-супрессоров, уменьшением числа ОКТ 11+ лимфоцитов, позеоля! ааключить, что у больных, экспрессируквд« данные антигены в ф нотипе, уровень клеточного иммунного ответа снижен.

Ведущая роль недостаточности клеточного звена иммунитета развитии иммунодефицита при лепре является.основанием для прим кения в комбинированной терапии этого заболевания' иммуномодул торов.' В связи с тем, что влияние любого препарата на иммуни систему шогопланово и его клинический эффект может не соответ

" - IQ -. •

:?i> о:~лдаеш:,у проведение) л^сгунотерзши дбдгю ссуг,-?с?агятся с5?.з£тэльн1.п контролем >515г/но.гоп1час:ск дзракатров. Исходя ?ого, иэучонний когшздгс покягателзй п}кагзпва для контроля юкорркгирую^ей терапии ' спнтотачэскнч аналогом тжазнна -'опои. л«чоииэ проведено 14 богыш!» лзпроштоаной лепрой, у, ш. нсбяодакись вираиенпиз отклонены в тдшаом статусе, штата изучения функциональных и колкчесупонпых показателей, щигоз (Зольных лепрой з процессе иммунотерапии представлены 5лще 6. '

Из таблицы видно, что поело курса лечения тш »геном улучша-иол функциональные, так и количзствзишя характеркстгаш ::.м-сошетентных клеток, однако в большинстве случаев они не •¡гали значений, полученных в группе контроля. Следует ответить, что у одной больной применение тимогена лшэло к каким-либо существенным из ¡«нениям . в П01азатедях пюго статуса. В дальнейшем у этой больной развился рэцидив много процесса.

Taiani образом, на основе рекомендованного комплекса тгмупо-j.ecraix параметров можно судить не только об эффективности

штерапии, но и о необходимости индивидуального подхода к ее

i

учению. . ~

В результате проведенного иммунологического и иммуногенэти-зго исследования при лепроматозной лепре установлено, что у lux в активной стадии лепроаного процесса имеет место выра-■jñ дефект клеточного звена иммунитета, юторый проявляется в гении функциональных и количественных параметров- niaiytnioro, уса и взаимосвязей моззду ними. Состояние ««муллой • системы

- 20 -

. . .. Таблица б

Показатели меточного иммунитета у больных лепрой в' процессе лечения тиг,:огенои

йллунологические показатели Момент обследования Контр

До лечения После лечения

РБТД (ИС%) М±ш ФГА 5 10 20 7,2+1,9*** ■ 12,1+3,1*** 15,6+3,9*** 15,312,6 24,015,5** 21,713,3*** 23,7+ 46,6+ 47,11

Нон А (г.кг/мл) 5 10 20 10,912,5* 13,6+3,7л 11,912,6** 19,316,9 25,917,5 23,1113,9 20,7+ 24,9+ 29,3+

лепронин 20 1,710,2* 2,1±0,7* 7,1+

Индекс регуляции в % . Ши 27,0+9,4 44,315,1 43,81

Содержанке : ОКТ 11+ клеток с : ОКТ 8+ фенотипами :. ОКТ 4+ Ш-т : 01?+ 72,4+1,8 27,5*1,7 37,0+1,9** 21,2+1,4 72,211,7 24,911,6 40,7.11,5 22,011,1 72,51 23,5+ 44,1+ 20,91

ОКТ 4+\ ОКТ 8+ 1,4+0,1** 1,-7±0,1* 1, 9±

Примечание: а - различия по сравнению с контролем дост! при р< 0,05; ** - то же при р<0,01; -ла* - то ке при р< О

боляюго приобретает г.г.-шоо зпач&и»"? и кг-, сл-с.?:.:! 'регресса а процессе воышк'ювення рецидивов лепрн. 3?.бо.ваг-ггость лепро».'?.-тозной лепрой и фор'.ярогагае редадпвкру'тугс процесса г.о

многом обусловило! геяоти<'.эскя»ял маркера: ••'я прсдр'лсяота.-т-нцостл, что следует учитывать при форгг.гропа'.сгл групп р;:с!:а аайолгпгшш и его реппдиза. • •

Д^ннуг, нолучешал? в рззультиммунного статуса больше лэпрокатсзной лепрой, шагел.чет врогиозировать течение заболевания, а гасе обоеноизг:ть далэсообреэиость проЕ2-< дення ш.!мунокорр»гирук:'А5й т&рзяяа, искрталепноЛ 53& достшттче длительной и стойкой рошссни, и ^цтрогдрогегь со з'Нтзктиз-иссть.

шюлы

!. Васлс-детнная пиодраспо.ро:',;енноегь к развитей теяро»»-гогиого типа лепри в русской популяции ассоциирован» с антигенами ВЬА-СШ, ПК и Ш. Родмпвируздее течение ц&при связало с ан-'игенш.'и Н1А-0Й2, А10, ОО'.д!.

2. У больных с лопроизтознш типом лепры степень ишуноло-ических отклонений коррелирует с шшгаюсгыо процесса. Наиболее нраявмныэ нарушения Т-еистекы иммункгета характерны дли аюгкв -эй стации заболевания: сшшено относительное содержите клеток

фенотипом ОКТ 1м и СКТ 4*- при увеличении количества ОКТ 8+ шф"щпч>в, подавлен ыггогениндуцироьапный ответ лимфоцитов, угрела фудалцюнальная активность неснецрфячоских Т - еупреесорон естественных клеток-киллеров.

3. Рецидивирующее течение лещюуатезной лепри ассоциировано

с; -■ 1 _ - «О*. '

с нарушениями иммунного статуса больных, у которых на фоне вы кой активности естественных клеток-киллеров выявлено уменыие числа клеток с фенотипом ОКГ 4+, снижение пролиферативного от та лимфоцитов на митогены и ослабление функции неспецифичес Т- супрессоров.

4. Один из механизмов предрасположенности к лепроматог лепре реализуется через ассоциацию НЬА-В? антигена с ние уровнем цитотоксичности естественных клеток-киллеров.

5 . У больных с лепроматозным типом лепры антиген НЬА-1 является маркером низкой мнтогениндуцированной проли^рати: активности лимфоцитов, а антиген НЬА-АЛО - маркером низ уровня активности неспецифических Т-супрессоров и снижи числа ОКТ 11 с клеток.

6. Предложен комплекс иммунологических методов, обёспеч Ю1ДИХ эффективный контроль при проведении иммунокорригирующей раЬии у больных с лепроматшинм типом лепры.

СПИСОК РАБОТ, ОПУтаЮВА№Ш ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Баранов !й Н. , Сухенкс Л. Т. , Сароянц Л. В. Роль генетт ких факторов в формировании иммунного отвела при лепре // СССР. Научный совет по дерматологии и венерологии. Пленум: Т« докладов. -Каунас, 1986. -С. 16-17.

Сароянц Л В. Функциональная активность лимфоцитов ; булаторных больных ленроматозной лепрой и рецидивы лепро. процесса.// Эпидемиология, микробиология и иммунология бак альних и вирусных инфекций: Тезисы докладов. - Ростов 1989. -С. 95-96.

Хлрнко Л. г4,. , 5гатгу?8 à, Q. , Ссцдогц Л E » и др. Иринене-tiív.oráhs ' в kc::j.s,:.'Pосенней топпшш' больных лепрой., оссийстй сьех- лтолэтоз' я , венерологов, G-й: К., ч. 2-я. -С. .-юз-<?.,;,

. сарояпц Í. В , Л. Л. Шучшгае активности естсствеи-

еток-киллеров у большг лс-прокатозной лепрой //

зная конференция "Шлекулярнкг ¡¿зхаякэм« развития икфекш-

зайовеваний": Тезисы догслалоз. -Звенигород, 1990. -С. 102-102.

. Сароянц JI. В. , Ющенко A.A., Алексеев JL IL/Кммунологичес- . -:азэуели при различном течении лепроматозкой лепры // Ih-робкол. -toso. -N9. -С. 70-72.

Васильев А. й. , Сароянц Л В. , Сухепт Я. Т. и др. Первый жшнивш ткыогеиа в комплексной „лэчелии больных лепрой // туч. -преат. коти. сотр. изд. нк-*т я врачей Астрах, обл.; докладов. - Астрахань,10SO. -Q. 194-105..