Автореферат и диссертация по медицине (14.00.45) на тему:Иммунологическая характеристика и иммунодиагностика опийной наркомании

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ 11АУЧШ ЦЕНТ? НАРКОЛОГИ! МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

На правах рукописи

ГАМАЛЕЯ НАТАЛИЯ БОРИСОВНА

УДК: 616. 89-008. 441.13-07: 33-092: С 612. 01?. 1: 615. 212. 7: 616.153.1: 616.154. 95: 616.155. 32] -078. 33-074

ЮШУНОЛОГЙЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА' И ШШ0ДИАГН0СТ{1КА - , ОГО0Ш0Й НАРКОМАНИИ

14.00.45 - Наркология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва - 1992

Работа выполнена в лаборатории Иммунохимии (руководитель -кандидат медицинских наук Н. Б. Гамалея)V Государственного научного центра наркологии Минздрава РФ (директор - доктор медицинских наук А. Г. Врублевский).

Официальные оппоненты :

1. Доктор медицинских наук,

профессор -. Е А. Евсеев

2. Доктор биологических наук Б. М. Коган

3. Доктор медицинских наук А. Л. Игонин

Ведудае учреждение: Научный центр психического вдоровья РАМН

Защита диссертации состоится " "_;_1992 г.

в _часов на васедании Специализированного Совета

Д. 074. 50.01 при Государственном научном центре наркологии Минздрава РФ (г. Москва, 121021, пер. М. Могильцевский д. 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГВД наркологии.

Автореферат разослан "__"_1992 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета кандидат биологических наук

О.Ф. ЛЬВОВА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность upoöjteuis. Б нашей с$ране отмечено резкое увеличение потребления наркотиков в немедицинских целях, которое,, по данным прогнозов на ближайшие годы, Судет расти (И.Г. Ураков и соавт. ,1989; Е. А. Лужников и соавт. ,1989). Употребление наркотических и других психоактивных веществ имеет выраженные медицинские последствия - сомато-неврологические и психические осложнения, высокую летальность. Особо следует отметить у лиц, употребляющих наркотики, более высокие показатели инфекционной заболеваемости и злокачественных новообразований.

За прошедшие 15-20 лет в литературе наблюдается возросший интерес к влитию наркотических препаратов на иммунную систему у животных и людей. Во многих работах выявлено иммуносупрессор-ное действие морфина и марихуаны (особенно его активного компонента тетрагидроканнабинола) на клеточное звено иммунитета (Faith et al., 1984; Yahya, Y'atson, 1987; Fischer, 1Q88). Нарушения клеточных реакций иммунной системы были принципиально схож у лиц,, употребляющих различные виды наркотических средств, включая алкоголь (.К.Д. Плецитый.Т.В. Давыдова, 1989).

Помимо изменений клеточных реакций, наркотические препараты влияют и на гуморальные факторы иммунитета, преяде всего, на выработку иммуноглобулинов. В результате парентерального введения наркотиков отмечено частое повышение уровней сывороточных иммуноглобулинов, что интерпретируется как следствие . хронической антигенной стимуляции (Matsuyama et al. , 1980; Heathcote, Taylor, 1981). Данные о характере гуморальных иммунных реакций у потребителей наркогиков разрознены и не систематизированы. Практически не изучен механизм специфического гуморального ответа на введение наркотиков в форме образования: антител у человека, -хотя появление подобных антител было продемонстрировано в экспериментах на животных (Ringle, Herndon, 1972,1973, 1976; Spector et al. , 1973; Herndon et al. ,1976; Beraneck et al., 1974, 1976).

Расшифровка механизмов иммунитета к наркотическим веществам имеет важное практическое значение. Появляющиеся в сыворотке крови антитела к наркотическим препаратам способны связываться с поступающим в кровь наркотиком и существенно изме-

нягь его фзрмаксискнетику, удлиняя время нахождения в цирку/ ции (Hill et al.„ 1975; Schmidt et al.) и препятствуя быстр поступлению в мозг (Berkowitz et al.', 1974). Наличие антите наркотикам может препятствовать- определению уровней свобода препаратов посредством иммунометрических и аналитических ые дов, что Еатао для судебно-медицинских замючений. На выяв; нии специфических антител основана лабораторная диагностике многих инфекционных и неинфекционных заболеваний (аллергии, аутоиммунные расстройства, некоторые злокачественные новооС вования и пр.). Антитела к наркотическим препаратам в кров! людей, употребляющих наркотики, могли бы послужить важным ; агностическим признаком.

Актуальность проблемы определяется преимущественно iua ческим подходом к диагностике интоксикации наркоткь^ш,»! с п{ лечением данных токсикологической экспертизы. Однако реэулг ты клинического обследования во многом субъективны, вероятность заключения об употреблении наркотиков снижается по м£ стихания проявлений абстинентного синдрома. Возможности toj («логического анализа ограничены сроком мезду последним поступлением наркотика в орг&низм и аабором пробы на анали; Из-за быстрого метаболизма л выведения большинства наркотических препаратов из организма их не удается выявить в био. гических жидкостях умэ через 24-48 часов (Baselt, Chang, 1! Chauvin et al., 1987; Hayes et al., 1987; Mitchell et al. , 1991; Cone et al. , 1391).

Повысить возмодаости обнаружения наркотиков в отдален! периоды после последнего их попадания в организм удается п; исследования тканей, депонирующих наркотики (волосы, жиров; клетчатка). Высокочувствительные аналитические методы опре, ления морфина в волосах основаны на применении высокоэффек ной жидкостной хроматографии, радиоиммунологического анали газовой хроматографии-масс-спектрометрии (Marigo et al. ,19 1988; Tagliaro, Trabetti, 1988; Cone,1990). С помощью этих тодов выявляли морфин в волосах в.отдаленные сроки не толь после длительного, но и однократного его употребления. Про дение подобных исследований нуждается в дорогостоящем обор вании и реагентах, не выпускаемых отечественной промышленностью, а такхе в высокой квалификации обслуживающего перс ла. Разработка дешевых и технически простых иммунологическ

- б -

(«толов диагностики нятоксикапни; наркотиками - ванное уилог»' повышения эффективности работы наркологической слукои в нагее:'; стране.

Анализ современной литературы позволяет признать, что изучение механизмов иммунологической защиты организма от но котиков находится на начальном этапе. Одной из объективны;; причин отставания в области изучения иммуногенева наркомашз•■> следует признать особенность наркотиков как носителей антигенной специфичности. Наркотики представляют собой низкомолекулярные соединения, существенно отличавшиеся по своим химическим и функциональным свойствам от традиционных белковых е;<~ гигенов бактериального, вирусного и др, происхождения По.чгочу цля изучения иммуногенеза наркомания понадобились новые мето цические приемы. Обнадеживающей перспективой обнаружения анть-гел к наркотикам и самих препаратов явилась разработка современных методов, в т. ч. иммуноферментного анализа.

Цель и задачи исследовании. Целью настоящего исследоваш; шилось определение общих закономерностей и особенностей им«1, -югенеза опийной наркомании,

Конкретными задачами исследования были:

1. Разработка лабораторных методов обнаружения спецнфи-¡еских антител к морфину у людей и мшотшах.

2. Оценка показателей гуморального иммунитета (уровней ммуноглоСулинов Б,А и М классов, концентрации комплемента л

комплексов, наличия антител к ттаневым антигенам) у ольных опийной наркоманией.

3. Характеристика процессов Формирования антител к морФ;г-у и определение их роли в развитии опийной зависимости у .шеей и животных.

4. Разработка лабораторных методов оценки чувствитель-эсти лимфоцитов к специфическое воздействию морфина.

5. Определение показаний к выбору и применению пмиуноло-лческих тестов для лабораторной диагностики интоксикации нар-этиками.

Научит яовтва. Впервые разработаны способы обнаружений ¡тител к наркотикам (морфину, эфедрону, 1саннабиноидам) в сы->ротке крови людей и животных с применением иммуноферментного 1ализа. Обнаруженные с помощью лабораторных тестов антитела и Ффиновому антигену 1рМ ю/асса у здоровых расценены нам;: как

естественный, вознтсагадае в организме в ответ на эндогенный морфиноподобный антиген. Впервые' установлено, что у 50-75% больных опийной наркоманией на&йвдаётся образование специфических антител в количествах, превышающих уровень, регистрируемый у здоровых людей. Несмотря на многократное введение морфина извне, у больных опийной наркоманией иммунологический ответ реализуется по типу первичного. Появляющиеся антитела обладают свойствами иммуноглобулинов класса М. Харшстерный для вторичного иммунного ответа интенсивный подъем специфичесгах отсутствует. Образующееся в ответ на введение морфина антитела не оказывали заметного влияния на клинические проявления зависимости. Однако продукция таких антител сопровождалась выраженным повышением концентрации циркулирующих иммунных комплексов и снижением уровня комплемента. Эти признаки, как правило, сопровождают патологические состоянии аутоиммунного харастера у больных. Впервые получены доказательства зависимости между чувствительностью лимфоцитов периферической крови к воздействию морфина на розеткообраэуидую способность и активность аденилатциклазы и тяжестью наркотической интоксикации и выраженностью толерантности к наркотику.

Результаты, полученные в ходе комплексного исследования иммуногенеза при наркоманиях у людей позволили сформулировать повое научное направление в пщхсологин - принципиальную возможность иммунологической диагностики интоксикации наркоти!«ши и другими психоактивными препаратами и познания механизмов иммунопатологии на основе изучения специфических реакций иммунной системы на наркотики.

Прысгтеаиш апаччаость результатов исследования.

Разработан иммуноферментный метод определения антител к морфиновому антигену в сыворотке крови людей. Он позволяет выявлять лиц, употребляющих опиаты, в отдаленные сроки после последнего поступления наркотика в организм. При регулярном применении наркотика и давности последнего приема не более 2 месяцев частота серологически положительных реакций модет достичь 75%. В группе здоровых доноров частота положительных реакций не превышает 51. У больных другими формами патологии (аутоиммунные расстройства, инфекционные, психические заболевания, токсикозы беременности) частота положительных реакций составляет 9-19%.

Метод сравнительно прост й исполнении, однако, требует !ециальной подготовки и навыка. Длительность проведения ¡следования не превышает 4-5 '^асо^. Для анализа достаточно ¡большого количества крови, взятой ив пальца. В случае приметил в качестве ферментной метки пероксидазы и соответствую-¡го индикатора (перекиси водорода и ортофенилендиамина) учет !вультата иммунологической реакции проводится на спектрофото-;тре с вертикальным лучом для планшетов. При применении в ка-¡стве ферментной метю) бета-лактамазы и другого индикатора ¡ензилпенициллйна и йод-крахмального реагента) воаможен визу-шый учет. Преимуществом последнего варианта является также »сутствие онкогенных. реагентов (ОФД) и экологическая чистота.

Метод обнаружения антител к морфиновому антигену был прн-жеи для диагностики и для оценки состояния ремиссии. Объек->м обследования служили пациенты отделения наркоманий ГНЦ »ркологии и 33 наркологического отделения 17 1Ш гор. Москвы, также доноры на станции переливания крови гор. Подольска и в (матологическом научном центре РАМН гор. Москвы. Проведено иоке тестирование закодированных сывороток, полученных из шличных медицинских учреждений. Сопоставление результатов жазало, что иммунологические и клинические диагнозы совпали 67-85Х случаев. Это позволяет рекомендовать разработанный >тод обнаружения антител к морфиновому антигену для внедрения наркологическую и общемедицинскую практику. Применение размотанных методов выявления антител к наркотикам при оцешсе ювней наркотиков в крови будет способствовать повышению ка-;ства судебно-медицинских заключений.

Полученные нами доказательства взаимозависимости между ювнями антител к морфиновому антигену у больных опийной нар-¡манией и концентрацией циркулирующих именных комплексов леют непосредственное значение для включения в комплекс тера->втических мероприятий методов снижения уровней антител и ЦИК ¡лазмаферез, гемосорбция и др.).

Разработанные способы оценки чувствительности к вов->йствию морфина лимфоцитов периферической крови наркологи-;ских больных могут быть положены в основу создания достаточ-) простых в исполнении методов объективизации тяжести нарко-1ческой интоксикации и контроля за процессом 'дезинтоксикации.

Иммунологическая лабораторная диагностика может рассмат-

риваться как один из инструментов в общей системе профилактики наркоманий.

Внедрение. По материалам, вошедшим в диссертацию,

1. получено авторское свидетельство СССР №1551087, а такие положительные решения по заявкам № 4847922 от 05. 07. 90 и

№ 4878846/14/106757 от 10.10.91, оформлено и утверждено рационализаторское предложение № 45/88 от 4.01.88, ВНИИ ОСП им. Б.П. Сербского.

2. Утвередены Акты межведомственных приемочных и медицинских испытаний экспериментальных серий набора реактивов для выявления антител к морфину в сыворотке (плааме) крови человека методом иммуноферментного анализа "Морфоскрин".

3. Утверждены "Инструкция по применению набора" и "Технические условий".

4. Получено разрешение Комитета по новой медицинской технике Минздрава РФ на промышленный выпуск набора.

5. Полученные данные использованы в педагогическом процессе на кафедре наркологии факультета усовершенствования врачей Московской медицинской аюдемии им. И.М. Сеченова

Положения, Ьыиосииыс на вацнту:

1. Разработаны методические приемы, позволяющие обнаруживать у людей специфические антитела к антигенам трех наркотиков.

2. Сочетанное использование различных иммунологических показателей позволило охарактеризовать неизвестные ранее механизмы иммуногенеза при опийной наркомании.

3. Прием опиатов у людей в 50-75% случаев вызывает иммунологическую реакцию ь виде повышения уровня антител к морфи-новому антигену 1вМ класса, сопровождающегося гипермакроглобу-линемией и высокой концентрацией циркулирующих иммунных комплексов на фоне сниженной концентрации комплемента. Подобная иммунологическая реакция рассматривается нами как нарушение естественной иммунологической толерантности в результате воздействия морфинового антигена на фоне изменения активности ре-гуляторных Т-лимфоцитов.

4. {Гектором, способствующим выявлению повышенных уровней антител к мэрфиновсму антигену, является продолжительное регулярное употребление наркотика при давности последнего поступи ления в организм не- более 2 месяцев. Нам не удалось обнаружить вь'рзлонной связи толерантности к наркотику, тяжести зависи-

лэсти, частоты сопутствующего повреждения печени с антител и их уровнем.

5. Выявленные у больных опийной наркоманией нарукеия км-фпюп системы диктумг необходимость включения в комплекс терапевтических мероприятий иымуискоррегирующих войдейесш'.й, оправленных на удаление циркулируют); иммунных комплексов, а гакже на восстановление функции Т-системы иимунитота

6. Обнаружение антител к антигенам наркотических ьеиесть лотт быть использовано и для других целей, например, при ниу-гении состояния иммунологической реактивности.

7. Комплексная оценка четырех иммунологических псказаю-аей (уровне^ иммуноглобулинов классов G, A, tí и уровней антител к морфиновому антигену) позволяет на 20-28Х повысить частоту выявления лиц,' злоупотребляющих опиатами. Аналогичный принцип ложет окааатиен эффективным для выявления хронической интоксикации другими наркотика},»!.

В. ■ Специфические реакции лимфоцитов периферической крови ia воздействие морфина (изменение реакции Е-розеткообразованин л активности аденилатциклазы) коррелируют с тялестью интоксика-дии наркотиками и алкоголем,1 вследствие чего могут, быть использованы для объективной характеристики тяяеети интоксикации и контроля эффективности терапевтических воздействий.

Основные сведении об аар-обтщи работы.

Основные положения и материалы диссертации доложены и эбсумдены на заседании Проблемной комиссии ЕНЦ наркологин от 13 мая 1991 г. По различным разделам исследования сделано 12 цокладои иа Всесоюзных и международных конференциях, симпозиумах и рабочих совещаниях, в том числе на Всесоюзной конференции "Актуальные проблемы современной психонейронммунологии" СВоронеж, 1985), на Пленуме•Научного совета по наркологии АМН DCCP (Гродно, 1989), на расширенном заседании проблемных комиссий Научного совета по наркйлогии АМН СССР (Вильнюс, 1989), яа международной конференции "La dipendenza da oppiacel (Aspett.j clmici e di laboratorio" (Vicenza, Italia, 1990), на Всесоюзной коифэренции "Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам" (Ростов-на-Дону, 1990), на V Всесоюзном симпозиуме "Взаимодействие нервной и иммунной систем" (Оренбург, 1990), на Всесоюзной научной конференции "},te дико-биологические проблемы наркологии" (Пенза,

- %р ~

1900), на международном симпозиуме "Новейшие достижения в о( ласти наркологии" (Ыоекиа, 1ООО), ца международном семинаре "Immunologic approach to thö dlagnosis^of chronic drug use" (Verona, Italia, 1991), на международном рабочем советско-шведско-финляндском совещании, посвященном новейшим достиже ям в биологических исследованиях алкоголизма и наркоманий (Москва, 1991).

Работа прошла апробацию на конференции 1Щ наркологии и заседании проблемной комиссии Щ наркологии 30 марта 1992г. Протокол № б.

Материал диссертация опубликован в 19 работах и оформл в вице 3 заявок на изобретение.

Объсы и ¿структура работы. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, главы посвященной обзору литературных данных, главы с общей харак ристикой материала и методов исследования, глав с резуль тами собственных исследований, главы с обсуждением полученн результатов и выводов. Библиографический указатель включает названий, в том числе отечественных и зарубежных авт ров. Работа иллюстрирована таблицами, рисунками и тами испытаний способов диагностики наркотической интоксика

Xa¡KvcívpucTum иатериалов к исто до а иссяодовапиа.

Обследованы лица, употреблявшие различные наркотически токсикоманические средства: больные опийной наркоманией (2< чел.), зфедроновой наркоманией (49 чел-), потребители гашив (134 чел.), седативно-сяотворных препаратов (31 чел.), а тг больные алкоголизмом (107 чел.). Дая сравнения ишунологи-ческих параметров были обследованы также больные психичесю расстройствами (31 чел.), системной красной волчанкой (26 чел.), ревматоидным артритом (16 чел.), вирусным гепатитом чел.), туберкулезом легких (20 чел.) и беременные, в том ui с токсикозами беременности (48 чел.). Контрольную группу et вили здоровые (162 чел.), главным образом доноры крови. 0б( довшшые лица были в возрасте от 20 до 50 лет.

Материалом исследования служили пробы венной крови.

Методы:

1. Определение иммуноглобулинов классов G.A и М в рад] алыюй иммунодиффуаии по Манчини.

2. Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК

- и -

'акции преципитации 4% раствор.Ьм полиэтиленгликоля (Шл. мас-л 6000) в 0,1 М боратном буфере, рН в,4 с последующим иамере-1ем оптической плотности (Oil)"растборон па спектрофотометре )и длине волны 450 им.

3. Определение концентрации комплемента (С') в реакции )Х гемолиза сенсибилизированных эритроцитов барана с учетом ¡зультата на спектрофотометре при длине волны ЕШ им.

4. Определение антител к тканевым антигенам в реакции швываиия комплемента (РСК) с учетом результата на оиектрофо->метре при длине волны 541 им. Лоточником тканевых антигенов 1ужилн водносолевые экстракты мозга (кора больших полушарий) печени интактных и «морфинизиропанннх крыс.

5. Определение поглощения комплемента сыворотошм кропи п )исутствии наркотических и других психоактивных препаратом с >мощью модифицированной нами реакции поглощения комплемента 'ПК).

6. Определение антител к антигенам морфина, эфедрина, зедрона и каннабшюидов с помощью разработанных нами совмсст-) с 0. Е Полевой и сотрудниками методик с применением тнордо-шного иммуноферментного анализа (МА).

7. Определение чувствительности лимфоцитов к воздействию ффнна и налоксона in vitro на розеткообразуюшую способность активность аденилатцшелазы мембран лимфоцитов.

Динамику образовании антител к морфиновому антигену и их ¡язь с проявлениями морфиниоП зависимости исследовали в ссперименте на крысах-самцах линии Вистар. Морфина гидрохло-ад вводили внутрнбрюшинно 2 раза в день с 12-часовым иптерш-)м в возрастающих кавдые 2-3 дня на 10 мг/кг дозах. Одна )уппа крыс (21 животное) получала инъекции морфина в течение недель, начиная с дозы 10 мг/кг веса и кончая дозой 50 '/кг. Другую группу крыс {Z2 животных) морфшшзировали в тетке 4 недель в дозах, постепенно возрастающих от 10 кг/кг до ) мг/кг. Контрольной группе крыс (13 животных) вводили внут-■:брюшинно 0,85% раствор хлорида натрия в течение 4 недель, фор крови для иммунологических исследований проводили при 'капитации животных.

Результаты экспериментов обработаны с использованием ме-здов вариационной статистики. Д«я ряда показателей вычисляли юднюм арифметическую, среди»*) квадратичсскую ошибку отдель-

него измерения, дисперсию измеряемой величины, среднюю квадра тмческую ошибку средней арифметической. Достоверность различи] между сравниваемыми величина)®"при'Условии нормальности распределений определяли с помощью ^критерия Стьюдента. При отклонении распределений от нормальных анализ идентичности распределений иммунологических показателей проводили с помощью непараметрического критерия Колмогорова-Смирнова Для оценки связи между количественными признаками вычисляли коэффициент корреляции (г). Меру связи между количественными и качественными признаками определяли по коэффициенту сопряженности приз наков (С) с применением критерияВажность того или иного ш казателя для. разделения групп наблюдений оценивали по коэффициенту информативности (КИ) по Шеннону с учетом ограниченной выборки наблюдений. Для выявления лиц, употребляющих опиаты, использовали "Решающее правило", построенное на основе многомерного статистического анализа, реализующего алгоритм Байеса

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Для выявления у людей специфических антител к морфиновом антигену (морфин, конъюгированный с белком-носителем, или мор фин-белок) нами были разработаны иммуноферментные тесты с использованием двух ферментных индикаторов: пероксидазы хрена и бета-лактамазы. Обнаружены преимущества бета-лактамазы в ка честве ферментной метки, заключающиеся в более высокой активности фермента, в безвредности субстрата, в более четкой шкал цветовых переходов от ярко синего к бесцветному и возможности визуальной оценки результата

Применение в ИФА диагностических антител к разным класса иммуноглобулинов человека, меченных ферментами, позволило установить различия в уровнях антител к морфиновому антигену между больными опийной наркоманией и здоровыми лицами лишь во фракции иммуноглобулина М. Принадлежность выявленных антител была подтверждена с помощью восстановителей (бета-меркап-тоэтанрл). Такие антитела обладали сродством к морфину и коде ину. Константы аффинности (Ка) для морфина и кодеина варьировали у разных больных в пределах от 10? до 10 ы"'. Ка по отно шению к конъюгировакному антигену морфик-белок были на 1-2 по рядка выше (109 - ю"М~У В небольших разведениях сыворотки (1:100) удалось также обнаружить низкоаффккные антитела к мор

V ' 13 "

фину (Ка 10 к1') й морфиновому антигену (Ка 106 .

Из обследованных нами 106 опийуых наркоманов лишь у половин» содержание 1вМ антител к морфиновому антигену превышало на 2 стандартных отклонения средний уровень, присущий здоровым (табл. 1). Частота выявления повышенных уровней антител к морфиновому антигену возрастала при сочетании регулярного приема опиатов в течение 3-10 лег и давности последнего введения наркотика не свыше 60 дней до анализа (74,32).

Уровни сывороточных иммуноглобулинов классов 6 и М у больных опийной наркоманией'были выше, чем у здоровых (табл. 2). Высокие уровни иммуноглобулина 6 (>20,0 г/л) отмечены в 23-26% случаев, тогда как высокие уровни 1дМ (>2,5 г/л) наблюдались чаще - .'примерно в 50Х случаев (табл.3). У больных эфед-роновой наркоманией, та!«© практиковавших внутривенное введение наркотиков, содержание в сыворотке 1гБ и 1вМ било выше, чем у здоровых. Полученные результаты позволили предположить, что повышение уровней Iи 1дМ, наблюдавшееся в группах опийных и эфедроновых наркоманов, обусловлено загрязнениями,, неизбежно сопровождавшими введение наркотиков внутривенно без соблюдения асептики. Однако гнпермакроглобулинемия.была выражена значительно сильнее и наблюдалась чаще у больных опийной наркоманией,. чем эфедроновой, что, вероятно, отличает данный вид наркомании по результату воздействия опиатов на иммунную систему. ..... : .

Проверка, этой гипотезы .выявила наличие значимой (Р<0,05) связи (коэффициенты сопряженности) мевду уровнем ¡еМ и регулярностью приема опиатов. Однократные, "срывы" чаще сочетались с низкими уровнями (<2,5'г/л), тогда как систематическое употребление наркотиков - с высокими уровнями (}. 2,5 г/л). Значимая связь обнаружена также между уровнем 1еМ и тяжестью наркотизации, которую-оценивали в условных баллах (применяемые дозы наркотиков и кратность инъекций). Наркотизации малой тяжести (1 балл) соответствовали низкие уровни , тогда как наркотизация умеренной (2 балла) и высокой (3 балла) тяжести чаще сочеталась с высокими уровнями 1еМ Установлена связь (Р<0,05) между уровнем 1еМ и видом применяемого наркотика. Употребление химически обработанных опиатов чаще сопровождалось высокими уровнями ¡еМ, чем употребление опия-сырца.

В литературе нет подтверждения роли самого героина как

антигенного стимулятора и свяви специфического иммунного ответа па наркотик с гипермакроглобулине,мией. Возможность образования антител к морфину у героиновых наркоманов была показана лишь Куап и соавт. (1972). При этом морфинсвязывающую активность находили не в а в ¡ев фракции сыворотки. Эти данные, однако, не были подтверждены.

Нами выявлена свявь повышенных уровней сывороточного ^М у больных опийной наркоманией с продукцией антител к морфино-вому антигену ^М класса. Подгруппа больных с повышенным (>/ 30 усл. ед.) уровнем таких антител (51 чел.) характеризовалась достоверно более высотами концентрациями 1&М (3,7±0,3 г/л), чем подгруппа с "нормальным" (< 30 усл. ед.) уровнем этих антител (47 чел., 2,3+0,3 г/л, Р<0,001). Высокие концентрации (>2,5 г/л) выявляли в подгруппе больных опийной наркоманией с повышенным уровнем антиг'ел в 74,5+6,1% случаев, тогда как в подгруппе с "нормальным" уровнем антител - в 30,9+6,2% случаев (Р<0,0001). И, наоборот, нивкие концентрации (< 2,5 г/л) были установлены в 67,3+6,3% случаев в подгруппе с "нормальными" уровнями антител и в 25,5+-б,1% - с повышенными (Р<0,0001). Сходная зависимость была обнаружена при сравнении встречаемости повышенных и "нормальных" уровней антиморфиновых антител в подгруппах больных опийной наркоманией с высокими (51 чел.) и низкими (47 чел.) концентрациями 1гМ. Соответствующие частоты в подгруппе с высокими концентрациями 1кМ были 69,1+6,2% и 26,016,2% (Р<0,0001). Б подгруппе больных с низкими концентрациями 1дМ высокие уровни антиморфиновых антител установлены в 23,6+5,7%, а "нормальные" - в 68,0+66,6% случаев (Р<0,0001).

Положительная корреляция уровней антител к морфиновому антигену с уровнями ^М в группе опийных наркоманов (г-0,416, п-105, Р<0,01) также подтвердила взаимосвязь выработки антител и гипермакроглобуликемии у больных. Повышенные уровни антител к морфиновому антигену, как и повышенные концентрации сывороточного 1еМ, переставали регистрироваться к концу второго месяца после последней инъекции морфина (рис. 1).

Уровни антител к морфиновому антигену у больных опийной наркоманией коррелировали, хотя и менее выраженно, также и с уровнями (г-0,200, п-105, Р<0,05) и 1еА (г-0,255, п-105, Р<0,01). Связь уровней антител с концентрациями иммуноглобулинов основных трех классов свидетельствует о поликлональной ак-

- 1Б -

тивации В-лимфоцитов в условиях''введения опиатов. Подобная активация характерна, в частности, для аутоиммунных и инфекционных процессов. Однако в синтезе иммуноглобулинов у опийных наркоманов выявлен дисбаланс: нарушена наблюдаемая в норме корреляция между уровнями IgM и IgG. Эгот дисбаланс бил сильнее вирамен у полинаркоманов, сочетавших прием опиатов с другими наркотическими и токсшсоманическими средствами.

72,больных опийной наркоманией с повышенными уровнями антител к морфиновому антигену систематически употребляли опиаты. 68,5% применяли наркотики в течение 3-10 лет. Подавляющее большинство обследованных (90,7%) последний раз принимало опиаты не ранее, чем ва 60 дней до анализа. В то же время, в 9,3% случаях выявлены ловштнные уровни антител к морфиновому антигену в более поздние сроки.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что иммушшЯ ответ на многократные инъекцни опиатов у больных опийной наркоманией в виде продукции антител к морфиновому антигену подобен первичному, когда синтезируются сравнительно небольшие количества антител IgM класса. Ш не наблюдали последующего интенсивного образования антител IgG класса, что более характерно для вторичного иммунного ответа. Механизм этого феномена не ясен. Возможно, в нем проявляется особенность морфина как антигена. Па уровне сегодняшних методических возможностей создается впечатление о невысокой иммуногенности, обусловленной сниженной чужеродностью в результате конъюгирования морфина или его метаболитов с белками организма. С другой стороны, чу-жеродность морфинового антигена невелика вследствие его структурной близости с антигеном, вырабатываемым в организме в норме. К такому антигену организм адаптирован и не нуждается в выраженной защите через антитела

■ Сложность получения информации об особенностях наркологического анамнеза у опийных наркоманов побудила к экспериментальному исследованию условий образования и "исчезновения" антител к морфиновому антигену, а также их роли в проявлениях опийной зависимости. Хроническая морфишгаашя крыс привела к появлению в енворотке крови примерно половины животных повышенных уровней антител к морфиновому антигену. Уровень антител к морфиновому антигену в сыворотках морфинизировашшх крыс но превышал такового у контрольных животных более, чем в 2 раза.

- 1.6 -

знамига повышения уровней антител к морфиновому антигену ке \'нявила зависимости от длительности,введения крысам морфина. г-?нару;<ешше антитела обладали сродство^ к морфину и кодеину К'М 1,6-10*' и 5,0-10v Несоответственно). Повышенные уровни антител переставали регистрироваться к концу 2-ого ыесяца после ::осдедией шгьекцли наркотяка. Нам не удалось выявить различий ::о?;лу криваш с повышенными н "нормальными" уровнями антител к „•орфшювому антигену, как по тяжести абстинентного синдрома в условных баллах, так и по толерантности к тест-дозе морфина (10 ыг/кг), оцененной к тесте "горячая пластина". Полученные результаты не позволили выявить саяпи противоморфияовых антител, образующихся в о-лзет на ввсдопие свободного морфина, с 'гтдссмом отм'Мш и толерантностью

Прослегкшиие на тзшотимх закономерности не противоречили у-йвультатам наблюдений на людях. Ma;., не удалось выявить связи :;е;;:ду продукцией антител к морфчновому аптигопу и особенностя-;га проявлений аштсиместп у больных спийной uapicouamiefi. Вияв-

лмпь тенденция к более часто соблюдавшейся низкой толе-гс'итносги при "нормальных" ровнях амгител к ыорфшювому антигену (я 21,6.t 6,8* случаен), чем при повыиенных (в 11,9+5,ОХ •j-.учаев, 1-Л.?,). И наоборот, высокая толерантность сочеталась с Хнюокяш уровнями антител чак (в 35»7±7,4£ случаев), чем с лизки; ш (в 27,0i7,3?. czyiov, t'-C.S-l). В группе больных с по-утогошш; шггнтел к кзрфиноьому антигеиу проявления "-яг-олоЯ" наркоткзацик шблвдали несколько чаще, чем "легкой", ""ишгкски виратланый токсический гепатит у больных в обеих группах наблюдался с одинаковой частотой (в 25-27% случаев), '"чструктивние процессы в печени у больных опийной наркоманией • ?»\пи найти отражение в повышении уровня антител к антигену печени от норфинизироЕанних крыс в сравнении со вдоровыми.

V больных опийной наркоманией с повьиеиными уровнями ан-•хнтел к морфиновому антигену были обнаружены высокие концентрации циркулирующих иммунных комплексов (8,98+1,38 усл. ед. ), "то отличало их от здоровых (1, Е9+0,26;Р<0,001) и больных с "термальными" уровням!*; антител (4,10+0,64;Р<0,02). Установлена положительная корреляция ыеаду уровнями антител к морфиновому антигену и уровнями ПИК (г~0,658,п-22,Р<0,01) в группе больных опийной наркоманией. Представленные данные свидетельствуют о связи между наличием антител к морфиновому антигену и повыше-

- 17 -

м концентрации несолюбилгаированных иммунных комп-тексоа в ви. Наряду с прочными комплексами антиген-антитело сущест-т, по всея вероятности, и менее прочные комплексы, форипру-еся за счет низкоаффинных антител. При диссоциации таких плексов высвобождается антиген, который будет стимулировать ьнейшую выработку антител дате Ене поступления морфина кзв-Это согласуется с длительным (до 2 ыес.) обнаружением в оротке больных опийной наркоманией повытшых уровней IgM и ител к морфиновому антигену IgM класса.

Повышение уровней циркулирующих иммунных комплексов на е резкого снижения свободного комплемента в сыворотке крови ьних опийной наркоманией предрасполагает.к развитию иммуно-плексной патологии. Действительно, у героиновых наркоманов саны случаи'нефротического синдрома в результате развития лиферативного гломерулонефрита, связанного с отложением в ечных клубочках иммунных комплексов (Ktlcoyne et al., 2). Характерным для данных комплексов было преобладание в составе IgM и наличие лишь следов IgG и IgA.

Исследование сывороток людей как употребляющих, так и не требляющих опиаты, на наличие антител к морфиновому аятиге-показаяо, что небольшое количество таких антител сутствует у здоровых, а также при ряде заболеваний, не свиных с приемом опиатов. Наличие антител, специфически связы-шихся с морфиновым антигеном, доказывается при параллельном тировании сывороток с двумя антигенами: морфином, конъюги-анным с белком (морфин-белок) и белком-носителем. IgM фрак-сывороток реагируют с антигенными детершшантами, присуки-именно конъюгированному антигену морфин-белок (рис. 2). перименты по торможению связывания антител с морфиновым ан-еном выявили сродство антител из сывороток здоровых и боль-другими формами патологии к морфину и морфину, конъюгиро-ному с белком, сКа сходными с таковыми у больных опийной команией.

Б сыворотках здоровых людей были обнаружены антитела к финовому антигену, как правило, в невысоких титрах, напри, до 1: 400. В разведениях 1: 800 и выще антиморфиновые анти-а практически не выявляли. Такие уровни антител к морфино-у антигену в норме можно рассматривать как естественный знак. Это мнение подтверждается их принадлежность к IgM

классу. Существование естественных антител к морфиновому антигену согласуется с мнением о наличии эндогенного антигена с близкой, возможно, не идентичной морфину специфичностью. В действительности, мы обнаружили, что антитела из сывороток здоровых, выявляемые по связыванию с морфиновым антигеном, обладали также сродством и к бета-эндорфину с Ка 109 -10/й U'i Сродство к бета-зндорфину антител из сывороток больных было на 1-2 порядка ншке. Вероятны их физиологическая роль в регуляции гомеостаза, а также участие в формировании зависимости.

Нам не удалось выявить у больных наркоманией значимых различий в сравнении со здоровыми по числу Т- и В- лимфоцитов, определенных в реакций розеткообразования., Выла исследована чувствительность лимфоцитов к воздействию морфина (10?М) la vitro по розеткообразующей способности лимфоцитов и активности аденилатциклазы мембран лимфоцитов. Примененная нами доза морфина практически не влияла на количество активных (ранних) Е-розеткообразукадих клеток среди лимфоцитов периферической крови здоровых. В этом Случае показатель действия морфина -Щл, характеризующий процентное изменение числа розеткообразу-ющих меток в присутствии морфина, по сравнению с контролем в его отсутствие, составил 7,1+11,1%. На лимфоциты больных опийной наркоманией та же доза ыорфйна оказывала угнетающее воздействие. ..Наиболее отчетливо эффект проявлялся при учете низ-коавкдных розеток, присоединивших 3-5 эритроцитов (ПДм -21,7+6,6%; Р<0,05). Сходная закономерность выявлена и при вне лизе общего (позднего) розеткообразования. Эффект воздействия морфина на розегкообразование устранялся добавлением налоксонг (10"т Ю» что свидетельствовало о вероятном вовлечении опиатныэ рецепторов.

Чувствительность лимфоцитов больных к воздействию морфин! (оцененная по реакции розеткообразования) существенно не зависела от уровня:антител к моржовому антигену... Было обнаружено, тем не менее, что больные с повышенным уровнем антител характеризовались несколько более выраженным угнетающим воздействием морфина на низкоавидные розетки (присоединившие 3-5 эритроцитов) и более значительным стимулирующим действием на высокоавидные розетки (присоединившие 6 и более эритроцитов), чем больные с "нормальным" уровнем антител. Меаду уровнем антител и активирующим воздействием морфина .на образование высо

коавидных роветок в условии общего (повднего) роветкообраэова-ния выявлена невысокой тесноты'свя&ь (г-0,406, п-24),

В целом, для больных опийной наркоманией, в отличие от больных алкоголизмом, характерно более выраженное угнетающее влияние морфина на активное Е-роветкообразование, мало изменяющееся в динамике. Сходная характеристика получена при изучении чувствительности к воздействию морфина аденилатцшславы (АЩ мембран лимфоцитов. Вобранная наш доза морфина (10"7В) не оказывала влияния на активность АЦ мембран лимфоцитов едорошк людей. V больных опийной наркоманией и алкоголизмом в абстинентном синдроме обнаружено стимулирующее влияние, свидетельствующее о повышенной чувствительности лимфоцитов (рис.. 3). Б отличие от больных алкоголизмом, у больных опийной наркоманией были слабо выражены »вменения чувствительности АЦ к морфину в динамике проведения дезинтокснкационного лечения, ¡¡алоксон (10~?М) устранял стимулирующее действие морфина на активность АЦ.

Опенка состояния неточного иммунитета у опийных наркоманов, в частности, соотношений субпопуляций лимфоцитов, в литературе не однозначна. У больных, не скомпрометированных ВИЧ-инфекцией, наблюдали как нормальное соотношение Т-хелнеров и Т-супрессоров, так и деформированное в сторону преобладании супрессорной или хелперной активности. Поскольку количества Т-лимфоцитов изучали вне связи с их регуляцией образования антител, оценить иммунный статуе опийных наркоманов не представляется возможным. Существует несомненный баланс между системами клеточного и гуморального иммунитета, который следует рассматривать в параллельных и динамически)! исследованиях. Продукция антител к морфиновому антигену у половины больных опийной наркоманией может оказаться индикатором повышенной иммунологической реактивности, в основе юторой лежит изменение активности регуляторнж Т-лимфоцитов в сторону снижения суп-рессорной и повышения хедперной функции.

В свете литературных и собственных данных механизм имму- . югенева при опийной наркомании представляется следующим обра-юм. Экзогенное поступление в кровяное руоло морфина создает условия для его соединения е эндогенными бедками и образования штигенного комплекса, по специфичности близкого естественно-|у. Совпадение этого процесса со снижением активности т-гу!

-2 О ~

рессоров или повышением активности Т-хелперов в результате воздействия морфина,'моиэт реализоваться в-зависимости от индивидуальных особенностей организма в форме отмены иммунологической толерантности с выработкой антител. По-вйдимому, таков механизм образования антител при воздействии антигенного раздражителя в дозе, превышающей супрессирующее-влияние регулятор-ных Т-клеток на продукцию антител.

Повышенные уровни антител к морфшовому антигену при патологических состояниях, не связанных с приемом опиатов (аутоиммунные, инфекционные, психические заболевания, токсикозы беременности) свидетельствуют о нарушении иммунологической толерантности. Последнее, в свою очередь, мотет.быть результатом снижения супрессорной активности Т-лимфоцитов, как при аутоиммунных и инфекционных расстройствах. Вероятно, в этом процессе участвует также антиген, близкий по иммунологической специфичности к эндогенному.

У больных опийной наркоманией специфические антитела к морфиновоыу антигену взаимодействуют с порциями антигена, образующегося в результате поступления' морфина извне. Элиминация образующихся,иммунных комплексов представляется замедленной и сопровождается дефицитом свободного комплемента Caifa проблема "болезней иммунных'комплексов", по-видимому, должна учитываться в раннем распознавании этой патологии и ее направленной терапии. В комплекс терапевтических мероприятий при опийной наркомании целесообразно включение' воздействий, направленных как на снижение концентрации ЦИК, так и.на модуляцию активности Т-клеточного звена иммунитета.

Механизм иммуногенеза при опийной наркомании представляется весьма сложным и неоднозначным. Иммунологическая реактивность у больных определяется сочетанием многих факторов, в том числе как генетически обусловленных особенностей иммунной системы, так и неблагоприятных'воздействий социальной среды.

После -1984 г. в нашей стране резко увеличилось число больных наркоманиями, состоящих на диспансерном учете (до 69,5 тыс. в 1988 г.), и потребителей наркотиков, состоящих на учете в системе МВД (до 130 тыс. в 1987 г.)(И. Г. Ураков и соавт., 1989). В задачи общества входит защита этого контингента лиц, включающая оказание адекватной терапевтической помощи и социальную адаптацию/ Осуществление этих мероприятий зависит от

эффективности выявления потребителей наркотических веществ и качества диагностики заболевания, длительности зависимости, глубины поражения различных органов и систем. Выявление наркоманов осложнено желанием сокрытия факта употребления наркотиков. Потребители наркотиков попадают в различные лечебные учреждения, помимо специализированных наркологических центров. Эти лица могут оказаться и среди доноров крови.

Перечисленные обстоятельства диктуют необходимость- выявления потребителей наркотиков среди различных групп населения. Применение для скрининга методов токсикологического анализа малоэффективно из-за продолжительности, сложности и ограниченного срока (24-48 час} после последнего приема наркотиков. Использование высокоинформативного метода анализа волос или других тканей/ депонирующих наркотики, на содержание наркотических препаратов еще более затруднено малой доступностью необходимого оборудования и реагентов.

Нами', была разработана методическая основа ИФА-скрининга на выявление лиц, употребляющих наркотики. При тестировании закодированных сывороток, предоставленных рядом лечебных учреждений, повышенный ypoвeн¿ антител к морфиновому антигену совпал с клиническим диагнозом опийной наркомании в 53,8-72,7% случаев. Общий процент совпадений клинических и иммунологических диагнзов был еще выше (66,7-85,0%) за счет большей вероятности правильного распознавания лиц, не употребляющих опиаты. Частота повышенных уровней антител к морфиновому антигену в сыворотках опийных наркоманов с различным наркологическим анамнезом (п-106) составила 48,IX. Частота "нормальных" уровней антител в группе, лиц, не употреблявших опиаты (здоровые, больные другими заболеваниями, 419 чел.) достигала 93,1%.

Процент положительных иммунологических реакций (повышенные уровни антител к морфиновому антигену) при тестировании сывороток доноров, полученных из различных источников (380 сывороток), составил от 3,8 до.6,5. При обследовании'группы здоровых лиц (20 чел), отсутствие у которых острых и хронических заболеваний и злоупотребления наркотиками и алкоголем нам было достоверно известно, повышенные уровни антител к морфиновому антигену не были выявлены ни в одном случае. В группах лиц с аутоиммунными, инфекционными, психическими заболеваниями, токсикозами беременности повышенные уровни антител к морфино-

ьому антигену были выявлены и С-ЛОХ случае». Таким обраво», наличие повышенных уровней атчдеел к юрфиновому антигену в сиворо'п«е крови людей не позволяет одиовначно диагностировать употребление опиатов, хотя ь последнем случае частота таких уровней антител самая высо!*ая.

Исследование уровней сывороточных иммуноглобулинов классов В, А и М у больнш опийной наркоманией ншшло опреде-¿■олиую диагностическую значимость как абсолютных вначений »тих уровней, так и их соотношений (табл. 4), определенные интервалы уровней иммуноглобулинов •¿•рех классов встречались в группах оолышх с ьисогаши 11 "нормальными" уровнями антител к шрфино-

антигену с различной чш-гогой. Попытка повысить надежность иымуиологичйской диагностики употребления опиатов ваюао-чма;;ь я сочоташюм опредсл-пши четырех показателей: антител к юрфшювоыу антигену и уровней сывороточных иммуноглобулинов классов О,А и ?!.

С поношу» многомерного анализа било построено "Решающее ¡фцвило" (РП), поаиодивййе подтверждать диагноз употребления или неупотребления опиатов с ьэцойянос^ыо 72-76%. Этот процент существенно ,ш»е, чем 48% распознавания потребителей опиатов, полученных на той йй выборке с помощью только одного показателя - уровня антител 1? морфиновому антигену. Ограничение задачи диагностики выявлением лиц, регулярно употребляющих опиаты с давностью последнего приема наркотика не более 60 дней, позволило повысить процент правильного распознавания до 84 на основе РП с несколькими интервалами значений иммунологических подателей (табл. 5). По таблице находят интервалы значений иммунологических показателей, в которые укладываются данные, полученные для исследованных сывороток. Каждому интервалу соответствует условный "вес". Сумму, полученную при сложении "весов" всех иммунологических показателей, следует сравнить с "порогом" РП. В случае равенства последней "порогу" или превышения его ставится диагноз употребления опиатов.

Иммунологическую диагностику потребления опиатов целесообразно проводить в двух направлениях, одно- и двухэташш. Первоначально исключают всех лиц, не употреблявших наркотические вещества, бта задача эффективно решается с помощью иммунологического скрининга по выявлению антител к морфиновому антигену. Вторым этапом диагностики является установление фак-

в

та применения опиатов у лиц с обоснованным подозрением: из числа обследованных на первом .этапе, и ютитшгеита "риска"'. Более результативна на втором этапе диагностика по четырем иммунологическим показателям. Тестирование сывороток в динамике повышает надежность заключения об употреблении опиатов. Наиболее высокие уровни антител к морфиновому антигену у одного и того же больного опийной наркоманией отмечены через 1-2 недели после последнего поступления наркотика в организм (рис. 1).

Оценена также возможность и результативность обнаружения антител к антигенам наркотиков и при других видах наркотической зависимости. При эфедроновой наркоманил частота обнару- ■. жения высоких уровней антител к антигену эфедрин-белок (эфедрин, конъюгированный с белком-носителем) класса составила .507., антитело гег к антигену эфедрон-белок (эфедрон, конъюгированный с белком-носителем) 1ёМ класса выявляли чаще - у 717. больных. Повышенный уровень антител к упомянутым антигенам класса 1е(3 наблюдали лишь в IX и 421 соответственно. Больные эфедроновой наркоманией с повышенным уровнем антител к антигену эфедрин-белок существенно отличались от группы с "нормальным" уровнем более высокими концентрациями 1еМ б сыворотке крови (2,54+- 0,35 г/л и 1.46+-0.20 г/л соответственно, Р<0,02). Эти данные позволяют заключить/ что внутривенное введение наркотических препаратов, таких как морфин и эфедрон, обусловливает сходную иммунную реакцию с преимущественной выработкой антител 1еМ класса.

Динамика продукции антител к эфедриновому антигену у больных эфедроновой наркоманией корреспондировала с динамикой выработки антител к морфиновому антигену. Однако общая длительность приема наркогиков у больных эфедроновой наркоманией с высокими уровнями антител к эфедриновому антигену (1,4+-0,5 года) была существенно ниже, чем у больных опийной наркоманией с высокими уровнями антител к морфиновому антигену (9,5+-1Д года). Надежность диагностики употребления производных эфедрина подкрепляет отсутствие повышенных уровней антител к антигену эфедрон-белок у больных опийной наркоманией и алкоголизмом.

Повышенные уровни антител к антигенам каннабиноидов (кан-набиноиды, конъгагированные с белком-носителем), наблюдали не более, чем у 32% больных гашишной наркоманией. Эти антитела обнаруживали преимущественно в Фракции иммуноглобулинов.

вольные с высоким уровнем антител к антигенам каннабшоидов отличались повияенним содержанием в сыворотке крови Igs и IgA, но не IgM, по сравнению со адоровимя и больными с "нормальными" уровнями антител. У больных Ганшиной наркоманией с повышенным содержание» антител к какнабиноидноьсу антигену (п-16) уровень антител к ыэрфшювоку антигену не превышал "нормальны»". Этот факт подтверждает специфичность результатов, полученных посредством разработанных нами тестов для выявления антител к различии.! наркотикам.

.Повыкение надежности лабораторной диагностшш других видов наркотической интоксикации (зфедроновой, гашшной) может Ctei'i /•ееткгиуто, как в случае штоксикации морфином, с по-мощьм нескольких иммунологических показателей (антител к соот-i сгстгующему наркотическое/ антигену и уровней иммуноглобулинов классов G,A и Î.Î).

Дополнительные возможности в лабораторной диагностике интоксикации наркотическими веществами открывает определение чувствительности лимфоцитов периферической крови человека к воздействию морфина, В реакции розеткообразовапия Выявили зависимость чувствительности лимфоцитов от тяжести наркотической интоксикации. У больных опийной наркоманией (п-24) установлена положительная корреляция между ^озой введенного наркотик и влиянием морфина (ПДм) на число высокоавидных розеток в случае ciKTiifcHoro розеткообразовапия (г-0,478,Р<0,05). Число таких розеток. било в обратной связи с толерантностью к наркотику, оцененной ¿'баллах (г—0,504, Р<0,01,п=28); Повышение чувствительности лимфоцитов к действию морфина в виде угнетения ро-веткообразования было выявлено также и при исследовании лимфоцитов от больных алкоголизмом. У последних (п=23) обнаружена слабая положительная связь (г-0,250) между тяжестью абстинентного синдрома при поступлении и изменением чувствительности лимфоцитов, оцененной в реакции роветкообразовашя, в течение первой недели пребывания больных в стационаре (дПДм).

При определении активности АЦ мембран лимфоцитов больных опийной наркоманией б условии воздействия морфина.была установлена корреляция (г-0,763, п-10, Р<0,05) между дозой введенного наркотик и эффектом воздействия морфина (ПДм) через 1 . нед-г'дю после поступления, а таклг существенная (Р<0,05) обратная корреляция между общей длительностью наркотизации и ПДм

- 25 -

как при поступлении, (г—0,708) так и через 1 неделю (г—0,035). Между толерантностью к.опиатам и изменением чувствительности АЦ к воздействию морфина в течение первой недели пребывания больного в стационаре связь имела отрицательное значение (г—0,678). У больных алкоголизмом удалось обнаружить значимые положительные корреляции между тяместью абстинентного синдрома и длительностью последнего алкогольного запоя, с одной стороны, и влиянием воздействия морфина на шсгив-ность АД через неделю или изменением этого влияния (дПДм) за первую неделю.

Определение чувствительности лимфоцитов периферической крови наркологических'больных к воздействию морфина по реакции Е-розеткообразования и активности ЛЦ, способствует оценке тягости наркотической интоксикации и результатов дезинтоксикаци-онпого лечения. Выявление специфических антител к наркотическим препаратам повышает результативность лабораторной диагностики состояния хронической наркотической интоксикации в отдаленные сроки после последнего приема наркотика. Дополнительное определение других факторов гуморального иммунитета, таких как уровни иммуноглобулинов основных классов и их соотношения, позволяет повысить вероятность правильной лабораторной диагностики. Оба объективных подхода хорошо дополняют друг друга при оценке состояния наркологических больных. Относительная простота и доступность предлагаемых тестов обусловливают возможность их широкого внедрения в наркологическую практику. Комплексное клинико-лабораторное обследование с учетом возмон-ных патологических состояний помогает более обоснованной диагностике наркомании, уточнению ее форм и прогноза.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мировой опыт изучения механизмов формирования наркотической зависимости как у людей, так и в эксперименте, содержит убедительные доказательства об участии иммунной системы. На введение различных наркотиков иммунная система реагирует изменением концентрации сывороточных иммуноглобулинов, появлением циркулирующих иммунных комплексов,, снижением свободного комплемента, образованием противоорганных антител, изменением числа и функционального состояния иммунокомпетентных клеток. Наряду с этими процессам? нам удалось обнаружить продукция

- 26 -

специфических антител к антигенам наркотиков не только в эксперименте, но и у людей. Обнаружение антител стало возможным в результате разработки комплекса специальных методических приемов с учетом особенностей наркотиков как антигенов. К ним относится прежде всего низкая молекулярная масса наркотических веществ, что отличает их от классических высокомолекулярных антигенов, ¡сак правило, белковой природы.

Наркотики, попавшие в организм, обретают свойства антигенов, способных вызвать продукцию специфических антител, конъ-югируясь с эндогенными белками. Одной из особенностей антигенов со специфичностью наркотиков является их меньшая чужерод-ность за счет преобладания ь структуре этого комплекса эндогенного белка. .Вероятно эти особенности наркотиков как антигенов определяют* характер иммунного ответа при наргамшшях,. от-личакмдлйся от описанных схем иммуногенеза. Резудьтьати изучения трех видов наркомания - опийной, эфедроновой и гашшиой -позволили заключить, что иммунный ответ на введение наркотиков-отличается отсутствием фазы резкого подъема уровня антител, характерного для вторичного иммунного ответа, несмотря на многократное введение наркотиков. Наиболее отчетливо это свойство проявилось при опийной наркомании, для которой присущи выраженная гипермакроглобулинемия и 'наличие сравнительно невысоких концентраций специфических 1вМ антител к морфиновому антигену.

Причины мы видим в особенностях морфинового антнгена -его сходстве по антигенной специфичности с образуемыми в организме в норме ошюидными веществами, в частности, бета-зндор-фином. к таким веществам организм адаптирован и не защищается от них как от чужеродных антигенов. В действительности, у здоровых людей ш выявили антитела, специфически реагирующие как с морфином, так и с морфиновым антигеном и бета-эндорфином. В последнем случае сродство антител было самым высоким.

В ряду различных форм зависимости опийная наркомания ва-нимает особое место по характеру и тяжести нарушений. Повышенная подверженность инфекциям н злокачественным новообразованиям, множественные повреждения внутреннних органов в известной мере обусловлены нарушениями иммунной системы. Возможность прямого воздействия морфина, попадающего в кровяное русло, на ишунокомпетентные клетки через присутствующие на их поверхности рецепторы усугубляет иммунологические нарушения при

- г? -

опийной наркомании, Выявлены раеличия между вдоровыми и больными опийной наркоманией в чувствительности лимфоцитов периферической крови к прямому воздействию морфина. Б присутствии морфина Е-роэеткооброзование и активность АД мембран лимфоцитов больных отличались от таковых у здоровых, что служит косвенным доказательством присутствия опиоидпых рецепторов на на Т-лимфоцитах периферической крови и изменения чувствительности этих рецепторов у опийных наркоманов.

Полученные нами данные о присутствии антител к морфшюво-му антигену в норме, а также о появлении таких антител в повышенных количествах при опийной наркомании м ряде других патологических состояний согласуются с существующими схемами нарушений естественной толерантности к тому или иному эндоантигену в результате сочетания сильного воздействия антигенного стимула, близкого по специфичности, но не идентичного естественному (морфинового антигена), с повышением активности Т-хелперных или снижением активности Т-супрессорных лимфоцитов. В этой схеме возможна реализация варианта, при котором чрезмерное воздействие такого антигена может, наоборот, привести к угнетению иммунного ответа вплоть до развития иммунологического паралича. В действительности, в литературе описаны случаи анергии опийных наркоманов ко многим классическим антигенам (ЬаггагШ е1 а1, ,1984).

Образующиеся у людей и животных антитела к морфиновому антигену в условиях длительного многократного введения опиатов несомненно оказывают влияние на характер формирования опийной зависимости. Связывание антителами вводимого извне морфина с образованием комплексов уменьшает скорость проникновения наркотика в мозг и является одним из элементов иммунной защиты. С другой стороны, в присутствии антител выведение наркотика почками замедлено, что приводит к пролонгировании наркотического действия. Важный механизм влияния антител на проявления зависимости обусловлен сложными конкурентными взаимоотношениями ва связывание с антителами между экзогенно поступающим морфином и эндогенными лигандами опиоидных рецепторов с вытекающей отсюда цепью последующих событий. В этом убеждают результаты проведенных нами экспериментов по изучению меры сродства антител к различным лигандам опиоидных рецепторов. Нам, однако, не удалось обнаружить статистически значимого влияния антител,

- 28 - -

специфичных к иогфину, ьа проявления вависимости и толерантности как у больных оппйно»' наркоманией, так и в эксперименте. Этот факт могет быть следствием того, что антитела вырабатывается в концентрациях, но обеспечивающих*"полную блокаду поступающего 1!эвке наркотика, при которой возможно угасание влечения. Частичное ко связывание наркотика антителами усиливает влечение н усугубляет зависимость. ■ ,

Ш наблюдали неблагоприятные последствия продукции антител к морфиновому антигену в виде высоких концентраций ЦИК с дефицитом свободного комплемента. У больных опийной наркоманит ей, особенно в условиях продукции антител к морфиновому антигену, имеется материальная 'основа для. развития "болезней иммунных комплексов". " ' . ■

Таким образом, разработаниыо нами методические'приемы. позволили вскрыть не известные ранее стороны .механизма иммуногенеза прк наркоыанпях, в частности, опийной. Обнаруженные у наркоманов нарушения иммунной системы, безусловно, оказывают влияние на течение ваболевакмя и должны быть коррегированы наряду с другими 'патологическими проявлениями. •'

Высокая со^альиая внзЛш.гасть наркоманий побудила нас, также к решению вадачи уточненной объективной диагностика! на основе оценки конкретных иммунологических показателей (специфических антител к антигенам наркотиков, структуры и соотношений сывороточных иммуноглобулинов;' специфических'реакций лимфоцитов) раздельно и в сочетаниях. Предложены разработанные нами научные реюэмендицип по использованию иммунологических методов обнаружения контингеитов риска,' повышения эффективности лабораторной диагностшси и выбора адекватных терапевтических воздействий.

ВЫВОДЫ ' .

1. Разработаны методы обнаружения специфических антител к морфиновому антигену'(морфину, конъюгированному с белком), в сыворотке крови людей и животных на основе иммуноферментиого анализа. Использование двух Ферментных индикаторов - перокси-дазы и бета-лактамазы - способствовало оценке каждого и выявило преимущества бета-лактамазы: возможность визуального учета результатов и безвредность применяемых реагентов.

2. Бри опийной наркомании обнаружены повышенные уровни

сывороточных иммуноглобулинов и*циркулирующих иямушш комплексов (ЦИК), дефицит комплемента, а также протипооргашше антитела Больные опийной наркоманией'отличались от здоровых лиц повышенным содержанием специфических 1е*М антител к морфиновому антигену, сочетавшимся с выраженной гипермакроглобулинемией и высокой концентрацией ЦИК.

3. Продукция специфических антител к морфиновому антигену в ответ на многократные инъекции растворов опиатов подобна первичному иммунному ответу: образованию IgM антител в невысоких концентрациях без интенсивного подъема IgG антител. Сходная динамика антител к морфиновому антигену обнаружена у крыс после внутрибрюшинного введения раствора морфина гидрохлорида в течение 2 и 4 недель. Повышенные уровни антител к морфиновому антигену обнаружены у 50-75% больных опийной наркоманией и у 50% морфинизированных крыс. Такие антитела чаще выявляли при длительном и регулярном введении наркотика. Частота обнаружения антител снижалась через 2 месяца после последнего введения наркотика.

4. Специфические IgM антитела к морфиновому антигену обнаружены в сыворотках здоровых в невысоких концентрациях. Повышенные уровни таких антител отмечены у 3,8-6,51 из 380 доноров крови и у 9-19% из 3fe5 обследованных с другими диагнозами.

5. Антитела к морфиновому антигену у больных опийной наркоманией и другими видами расстройств, а также у здоровых обладали близкими константами аффинности (Ка). У больных опийной наркоманией сродство антител к морфину и морфиновому антигену было наибольшим, тогда как антитела из сывороток здоровых оказались более аффинными по отношению к бета-эндорфину. Это, вероятно, отражало неполную идентичность морфинового антигена, индуцированного введением в организм морфина, и естественно присутствующего в организме эндогенного антигена - диганда опи-оидных рецепторов.

6. Лимфоциты периферической крови больных опийной наркоманией оказались чувствительнее к прямому воздействию морфина в дозе 10~т М при оценке Е-розеткообразовакиа .и активности аде-нилатциклазы (АД), чем лимфоциты здоровых. Налоксон (10~7М) устранял отмеченный у больных угнетавадай эффект морфина на образование Е-розеток и стимулирующее действие на активность АЦ, что свидетельствовало о вовлеченности опиатных рецепторов. Опецифи,,г",:ие реакции лимфоцитов на воздействие морфина к^" •

лнроволи с тяивстью иитокеикчцпи опиатами, длительностью нар-1ютизации и толерантностью к наркотику. Результаты этих определений дат- дополнительную объективную характеристику наркотической интоксикации и дезинтоксикации у ютнкретного лица.

7. У больных эфодроновой наркоманией наряду с повышением уровней сывороточных иммуноглобулинов классов О и М, повышением ЩШ и снижением свободного комплемента установлен фшст продукции небольших количеств 1кМ и антител к конъмгированно-му с белком эфедрину или эфедрону. 1рМ антитела выявлял!? значительно чаще, чем I£0: в 50% случаев при использовании в (качестве антигена эфедрина, кокъюгированного с белком, и в 71% случаев при применений коньюгированного с белком эс^дрона. Особенность эфедрона как стимулятора выработки антител ва(аю чалась в обнаружении антител после короткого периода приема наркотика.

8. Невысокие уровни антител к антигенам каннабиноидов

(каннабиноиды, коншгировашше с белками) наблюдали не Оолее, чем у 32% больных гашишной наркоманией. Антитела обнаруживали преимущественно в НгО фракции иммуноглобулинов. Продутщмя антител сочеталась с повышенным содержанием в крови и. 1еА, но не 1е№

9. Повышенные уровни антител к антигенам наркотиков, выявляемые в сыворотке крови больных опийной, эфедроновой.и гашишной наркоманией, служат дифференцирующим признаком в лабораторной диагностике хронической интоксикации соответствующим! наркотиками. Преимущество такой методики перед токсикологической экспертизой состоит в возможности обнаружения антител в отдаленные сроки после последнего введения наркотика в организм. Обнаружение специфических антител к антигенам наркотиков более целесообразно для проведения иммунологического скрининга коитингентов, предположительно не употребляюпщх наркотики.

10. Уровни сывороточных иммуноглобулинов и их соотношения поаволяки? различать интоксикацию разними видами наркотических веществ и другие болезненные состояния в осуществлении дифференциальной диагностики. Комплексная оценка четырех иммунологических подавателей (уровней иммуноглобулинов классов Б,А и К1 и уровней антктс-л к морфиновому антигену) с применением "Решающего правила" повысила вероятность выявления лиц, употребляюсь опиаты, с 48 до 72-76%. При этом вероятность выявления

лиц. регулярно употребляющих опйаты при давности последнего приема наркотика не более 2 месяцев, составила 04?.. Аналогичный принцип пригоден для эффективного выявления хронической интоксикации другими наркотиками. Диагностик по четырем иммунологическим показателям более результативна в группах повышенного "риска" употребления наркотиков.

11. Особенности иммуногенеза при опийной наркомании являются отражением своеобразия опиатов как стимуляторов иммунного ответа вследствие их низкого молекулярного веса и необходимости образования полноценного антигена в результате связывания с белками организма. Они могут бить обусловлены отличительным свойством морфинового антигена - сходством по антигенной специфичности с образуемыми в организме в норме опиоидными веществами. Важным фактором является также прямое воздействие морфина на функциональное состояние иммунокомпетентных клсюк. Чрезмерное воздействие наркотика может привести либо к снижению естественной толерантности к морфиновому или близкому ему антигену с образованием антител, либо к угнетению иммунитета вплоть до развития иммунологического паралича. В каждом конкретном случае вти возможности реализуются неоднозначно.

12. Познание механизма иммуногенеза при наркоманиях должно быть реализовано не только в лабораторной диагностике, но и в направленной профилактике и терапии аутоиммунных повреждений органов и систем.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Эндогенные вещества с морфиноподобными свойствами и их возможная роль в возникновении психических расстройств у человека. // ВШИМИ. Экспресс-информация. Новости медицины и медицинской техники, М. , 1978. Вып. 5. С. 1-24.

2. Некоторые механизмы снижения резистентности к нейролептикам у больных шизофренией после гемосорбции. // Экзотокси-ческий шок. - Ы. , 1680. -Т. XL.II, С. 143-147. (В соавт. с И. П. Анохиной, Н. А. Горбуновой).

3. Сравнительное применение двух модифишзций реакции поглощения комплемента для выявления антител к психотропным препаратам в сыворотке крови людей.// Лаборат. дело.-1986. (■'•.-С. 352-355. (В соавт. с Г. И. Штровой, С. Н. Осколковой, О. А. Гладышевым).

4. Антитела к морфину i¡ нейромедиш'орам в сыворотке крови Сольных хроничасш1м алкоголизмом. /// Бдл. экси. биол. -198?. №10. -С. 460-462, (Всоавт. с Я II. Анохиной, 'f. IL Небараковой).

5. Применение гемоеорбции для снижения уровня противоле-карственных антител в сыворотке крови больных вмэофренией, резистентных it нейролептикам. // Актуальные проблемы психонейро-иммунологии. -М. , 1938. С. 110-114.

6. Некоторые особенности противолекарственного иммунитета у больных опийной наркоманией.// Еопр. наркологии.-1988. f&2. -С. 8-13. (Всоавт. с Н.В. Стрелец).

7. Способ диагностики опиатной наркомании. // Авторское свидетельство СССР, №1551087, 15.11.89. (.Всоавт. cO.KL Полевой, HÍL Акохшшй, ЕС. Зефировым и др.).

8. Иммунологический подход к диагностика опийной наркомании. //Проблемы наркологии (клинико-патогенетические, организационные, терапевтические и судебно-психиатрические аспекты). Тез. докладов обтединецной конф.-Душанбе, 1989. С. 164-166.

9. Лабораторные методы диагностик наркоманий - новые подходы. Иммунологический подход к диагностике злоупотребления наркотиками.'// Вопр. наркологии. - 1990. №1.-0. 8-13.

10. Особенности гуморального иммунитета у больных наркоманиями. // Вопр. наркологии.-1990. №2.-С. 15-19.

31. Роль иммунной системы в формировании резистентности к психотропным препаратам. // Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам.' Тез. докладов Всесо-юзн. конф.-Ростов-на-Дону, 1990.-С. 10. (Всоавт. с А. Е Паршиным).

12. Динамика состояния опиатных структур на лимфоцитах периферической крови больных алкоголизмом. // Взаимодействие нервной и иммунной систем. Гез. докладов V Веесоюзн. симпоз. -Оренбург, 1990.

13. Immunological approach to diagnostics of drug dependence.// La dipenden2a da oppiacei (aspetti clinici e di laboratorio). Abstracts.-Vicenza, 1990.-P. 4.

14. Твердофазный иммуноферментный способ выявления антител к производным эфедрина в сыворотке крови больных эфедроно-вой наркоманией. //Заявка на изобретение № 4347922/14. Положительное решение от 05.07.90. (В соавт. с Н. С. Зефировым,

0. Ю. Полевой, А. Г. Вруб леве 1шм и др.).

15. Способ диагностики злоупотребления опиатами. // Заяв1са на изобретение № 4878846/14/106757- Положительное решение от 10.10.91. (В соавт. с И. П. Анохиной', А. Г. Врублевским, К Э. Ворониным).

16. Антитела против эфедрина у больных эфедроновой наркоманией. // Вопр. наркологии.-1991. (6 2. -С. 10-13. (В соавт. с М. А. Мягковой, М. а Лушниковой, 0. Ю. Полевой).

17. Выявление антител к морфину в сыворотках больных опийной наркоманией с помощью твердофазного иммуноферментного анализа с бета-лактамазой, // Вопр. наркологии.-1991. № 3.-

С. 10-13. (В соавт. с Э. J1 Елагиной, А. Е Парвпшнм, М. И. Лени).

18. Иммунодиагностика наркоманий.// Медицинские аспекты проблемы наркомании. Тез. докладов республ. совет, -Н. , 1991. С. 30-33. (В Соавт. с А. Н. Парпиным).

19. Влияние морфина на активность аденилатциоапы лимфоцитов здоровых, больных алкоголизмом и опийной наркоманией. // Вкл. эксп. биол. и мед.-1991. №12.-С. 610-612. (В соавт. с И. П. Анохиной, 1L Л Векшиной и др.).

20. Morphine influence on adenylate cyclase activity in peripheral blood lymphocyte^ of alcoholic patients.// Alcohol and alcoholism-1991. Vol. 26.- P.515-518. (Co-authors I. P. Ano-khlna, N. L. Vekshina et al.).

21. Влияние морфина на Е-розеткообразование лимфоцитами периферической крови больных алкоголизмом. // Вопр. наркологии. -1992. 1.-С. 53-Б8. (В соавт. с В. М. Дроновой, Т.П. НеСараковоЯ).

- З«' -

Таблица 1

Частота (%) повышенных уровней.антител к морфиновому антигену в различных группах обследованных, Х+-Бзг

Группы Число обследованных обследо-с диагнозом ванных Частота Р*

1, Здоровые 44 4.5+-3.1

2, Опийная наркомания: "чистая" 75 49,3+-5,8 <0,0001

смешанная группа 106 48.1+-4.9 <0,0001

3. Эфедроноваа наркомания < "чистая" 25 4,0+-4.0 <0,0001

смешанная группа 38 13.2+-5.5 <0,0001

4. Потребление гашиша 87 4,6+-2,2 <0,0001

Б. Потребление се-дативно-снотвор ных препаратов - 16 0,0+-20,0 <0,02

6. Алкоголизм 45 0,0-8,2 <0,0001

7. Психические рас стройства 28 10,7+-5,9 <0,0001

8. Ревматоидный артрит 16 12.5+-8,7 <0,001

9. Системная красная волчанка 26 11.5+-6.Б <0,0001

10. Вирусный гепатит 47 8.5+-4.1 <0,0001

11.Туберкулез легких 20 10,04-6,9 <0,0001

12. Беременность 48 18,8+-9,6 <0,01

Сравнение с группой здоровых Р*

с группой больных опийной наркоманией ("чистой") Р#

Таблица Я

Сопоставление показателей гуморального иммунитета у обследованных людей, больных и здоровых

Группы Число

обследованных обследо-с диагнозом ванных

Уровни иммуноглоб^ по классам , ;

'ЛИНОВ (г/л)

о

л

м

1. Здоровые

54 11,3+-0,5 1.97+-0.13 1,34+-0,0б

2. Опийная наркомания: "чистая" 75 15.3+-0.7 Р<0,0001* 2.30+-0,16 3.02+-0, ?,5 Р< 0,0001*

смешанная группа 105 * 15,7+-0.6 Р<0, 0001 А 2,36+-0,16 3,02+-0,19 Р<0,0001*

3. Зфедроновая наркомания' "чистая" 25 14,84-1,1 Р<0,01 А 2,24+-0,22 1,79+-0,13 Р< 0,001 л Р<0,01#

смешанная группа 38. 16.4+-1,0 Р<0,0001* 2,3б+-0,20 1,89+-0,11 Р< 0,0001 л Р<0,01#

. Потребление гашиша 87 14;0+-0,8 Р< 0,05л Р<0,01# 2,15+-0,18 1,27+-0,07 Р<0,001Д

. Потребление се-дативно-снотворных препаратов 15 11,7+-0,9 Р<0,05# 2,29+-0,24 1,57+-0,12 Р<0,001#

. Алкоголизм 45 12, И—0,6 р<о,ои 3,83+-0,52 Р< 0,001* Р<0,001# 1,44+-0,10 Р<0,0001#

. Психические расстройства 19 9,44-0,7 Р<0,05* Р<0,0001# 1,57+-0, 21 Р<0,01* Р<0,05#' 1,18+-0,15 Р<0,05* Р<0,001#

. Ревматоидный артрит 16 15.9+-1.4 Р< 0,001* 3,23+-0,46 Р< 0,001* Р<0,05^ 2,24+-0,31 Р< 0,001*

Системная красная волчат» 26 13.5+-0.2 Р<0,01* 2.69+-0,08 Р<0,001* 1.34+-0.03 Р<0, ОШ

). Вирусный 46 14,9+-0,7 5,69+-1,05 4,72+-0,74

гепатит Р<0,0001* Р<0,001* Р<0,001*

Р<0,0001* Р<0,01#

11. Туберкулез легких 20 10,7+-Ь,б Р< 0,001 Ж '' 8,23+-1,93 Р<0,0001а Р<0,0001# 1,631-0,27 Р<0,01#

12. Беременность 48 10,б+-0,5 Р<0,0001# 1.59+-0.19 Р<0,01# 1.53+-0,13 р<о,ооои

Сравнение с группой здоровых л

с группой больных опийной наркоманией ("чистой") #

Таблица 3

Сопоставление показателей иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови обследованных групп

Группы Число

обследованных обелэдо-с диагнозом ванных

Частота (X) повышенных уровней иммуноглобулинов по классам, Х+~оХ"

САМ (5.20,0 г/л) и4,0 г/л) (^2,5 г/л)

1. Здоровые

54

О,0+-6,9

3,7+-2,б 1,8+-1,8

2. Опийная наркомания: "чистая" 75 ч 22,7+-4,8 Р<0,01* 8,0+- 3,1 50,7+-5,8 Р<0,0001*

смешанная группа • 105 2Б,7+-4,3 Р<0,01* 8,6+- 2,7 52,4+-4,9 Р<0,0001.'.

3. Эфедроновая

наркомания: 24.0+-8,7 8,0+- •5,5 8,0+-5,5

"чистая" 25

Р<0,0001#

смешанная 38 34,2+-7,7 10,5+- •5,0 7,0+-4,4

группа Р<0,01* Р<0,0001#

4. Потребление * гашиша

8? 19.5+-4.2 6,9+-2,7 3.4+-1.9 Р<0,05* Р<0,0001#

5. Потребление се- 16 6,3+-6,3 дативно-снотвор- Р<0,-05#

них препаратов

12,5+-8,7 6,3+-6,3 Р<0,0001#

6. Алкоголизм 45 б,7+-3,8 37.8+-7.2 7,0+-3,8

Р<0,0001*

Р<0,05# Р<0,001# Р<0,0001#

7. Психические расстройства

19 О,0+-19,0 5,3+-5,3 5,3+-5,3

Р<0,0001#

,8. ревматоидный артсит

16 37,5+-12,5 37,5+-12,5 43.8+-12.8 Р<0,01* Р<0,01 * Р<0,01* Р<0,05#

9. Системная КРЧС- 25 пая волчанка

0,0+-13,3 0,0+-13,3 0,0+-13,3 Р<0,001# Р<0,001#

10. Вирусный гепатит

11. Туберкулез легиих 20 0,0+-1&„7 45,0+-11,4 Р<0,001« Р<0,01# 15,0+-В,2 Р< 0,001//

12. Беременность 48 4„1+-2.8 Р<0,001# б, 1+-3,4 16.3+-5.3 Р<0,05* Р<0,0001#

Сравнен!«? с группой здоровых * с группой больных опийной наркоманией ("чистой") #

Сопоставление Таблица 4 различных групп обследованных по структуре иммуноглобулинов

Группы обследованных с диагнозом Число обследо ванных Отношение уровней иммуноглобулином разных классов, Х+-БЯ'

1д6/1еЛ-100 1еА/1вм

3. Здоровые 54 18.0+-1Д 1.74+-0,19 9,39+-0.56

2. Опийная наркомания (общая группа) 105 15,6+-0,8 0,99+-0,07 (Р< 0,0001) б,62+-0,36 (Р<0,0001)

3. Эфедроновая наркомания ("чистая") 25 16,0+-1,3 1,41+-0,16 9.01+-0.76

4. Потребление гашиша: г. Джамбул 54 14,5+-0,9 (Р<0,05) 1,8б+-0,16 13,61+-0,72 (Р<0,0001)

г. Ташкент 32 16,4(-1,3 1,36+-0,14 8,80+-0,70

5. Потребление , седативро-снотворных препаратов 16 20,2+-2,1 1,50+-0,13 7.90+-0.59

б. Алкоголизм 45 30,9+-3,2 (Р<0,0001) 3,37+-0.74 (Р<0,05) 9,6б+-0,70

7. Психические расстройства 19 14.7+-1,8 1.57+-0.21 10,07+-!,43

'8. Ревматоидный артрит 16 22,0+-2,9 2,04+-0,40 9,40+-1,77

9. Системная крас ная волчанка 26 20,И~0,7 2,60+-0,58 10,10+-0,24

¿0. Вирусный гепатит 46 - 38 - ' 39,6+-?,2 (Р<0,01) 2,75+-0,72 6.60+-0.85 (Р<0,01)

11.Туберкулез легких 20 56,3+-12,4/ (Р< 0,0001) 5,86+-1,37 (■Р<0,0001) 8,40+-0,96

12. Беременность: патологическая 21 13,8+-2,7 0,8б+-0,16 6,85+-0,78 (Р<0,05)

нормальная 28 16,2+-2Д 1,56+-0,22 10.19+-0.84

Сравнение с группой здоровых

Таблица 5

"Решающее правило" № 4 (РП 4) для выявления лиц, системагичесю употребляющих опиаты цри давности последнего приема наркотика не свыше 2 месяцев, по 4 иммунологическим показателям

Показатель Интервал Бес показателя

показателя в РП

1. Иммуноглобулин Б 1. < 9,0 -115

(Г/л) 2. 9,0 < 13,9 -19

3. 13,9 < 14,8 -21

■ 4. 14,8 < 23,6 +80

'5. 23,6 +76

2. Иммуноглобулин А 1. <. 1,25 1,85 +37

(Г/л) • 2. 1,25 < +39

3. 1,85 < 3,25 +40

4. 3,25 < 3,85 -60

5. 3,85 -57

3. Иммуноглобулин М 1. < 0,91 -39

(г/л) 2. 0,91 < 1,22 -38

3. 1,22 < 1,55 -142

4. 1,55 < 2,55 +60

5. >/ 2,55 +159

4. Антитела к морфи-новому антигену (усл.ед.) 1. 2. 3. 4.. < 11,2 11,2 < 26,5 < ^ 38,3 26,5 38,3 -224 -24 +72 +176

Порог РП - О

Достоверность РП 84%

ДИНАМИКА f иммуиодоги^ес KMX ПОКАЗАТЕЛЕМ В ГРУППЕ БОЛЬНЫ/ ОПИЙНОМ НАРКОМЛЙиЕИ (тН)

Уровень АНТИТЕЛ к МОРЧЧШОВОМУ

AHTMrev<y

40

ДЦЛГМО-

CTW^PfKHM ПОРОГ

<j-V б-З

Модели ПЯЕ1ГЫ/ЭА-КМЯ В СТАЦНОМАре

УРОВЕНЬ I9 М

................. ........ . I ■ .......... t ■ ■ ■ —

о А-г 6-8

меделн npeiriin«.-

ния П CTAUWO WfcPtr

РИС.4

0,6' оД-о//

0,3

02'

0Д1

ОПТИЧЕСКАЯ ПЛОТНОСТЬ Б И ФД СЫВОРОТОК людей С АЙТИ Г ем А МИ МОРФ1Л Ы-БЕЛОК, 6 ЕДОК, Б-ЕЗ АНТ1ЛГ£НА

Ш1

л

РО

гЧт

' • •ЯГ?!'

# £

а

СРАВНЕНИЕ с группой ЗДОРОВЫХ

Й®

X,

А д р <: 0,00:1.

* 4 # ь р*о,ооа±

Г .

ЗД0Р01ЭЫЕ БОЛЬНЫЕ ВОЛЬНЫЕ ПОТРЕСИ- &0ДЬНЫС КОАЬМЫВ

ъг. опийной ДЛ1¿оголиз- гели гекматона- вир. ге-

М А Р а ОМ АН И Ей МОН ГАЫИЫА НЬЖ АРТРИГОЬ ПдГиТОМ

/7 = 2?

Л =

*>=г.20

ъ»

а О.

-1

■о с 3

э о

ы

о ■о о

о

9-

- ,> 3 -О ^

„ о ЗС

• I Í .__X —

? ч. оа

s > °

" £ 2 S *

> m о

э £

D D ^ Р О СХ

> X

s: >

■8 £

о -3

J= з:

s £

S

> S

и- >■ сэ

ис.Э