Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Иммунофенотипические варианты острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.36
Автореферат диссертации по медицине на тему Иммунофенотипические варианты острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан
На правах рукописи
ХАМАТДИНОВА ЗЕМФИРА РОБЕРТОВНА
ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ВАРИАНТЫ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗОВ У ДЕТЕЙ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН
14.00.36.-а л л ерго л огия и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук
УФА-2005
Научный руководитель: Официальные оппоненты:
Ведущее учреждение:
Работа выполнена в Республиканской детской клинической больнице [главный врач - доктор медицинских наук, профессор Хасанов Р.Ш.].
доктор медицинских наук, профессор
Хайруллина Раиса Масгутовна доктор медицинских наук, профессор Ярилин Александр Александрович доктор биологических наук,профессор Маннапова Рамзия Тимергалеевна Санкт- Петербургский Государственный медицинский Университет им. акад. И.П.Павлова Министерства Здравоохранения и Социального развития Научно -медицинский центр по молекулярной медицине.
Защита диссертации состоится^?^2005 года в /'/'часов на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002.124.01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан по адресу: 450014, г. Уфа, ул. Новороссийская, 105.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уфимского филиала Федерального Государственного унитарного предприятия «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» Министерства Здравоохранения и Социального развития Российской Федерации «Иммунопрепарат» по адресу: 450014, г.Уфа, ул.Новороссийская, 105.
Автореферат разослан 2005 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук
КАЛукманова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Изучение особенностей патогенеза острых лейкозов у детей является одним из путей повышения эффективности терапии. Накопление новых данных позволяет выбрать наиболее обоснованную тактику лечения, целенаправленно воздействовать на ключевые этапы патогенеза. Диагностика острых лейкозов, до недавнего времени основывалась на морфологическом и цитохимическом исследовании костного мозга и периферической крови. Лечение пациентов с острыми лейкозами по современным программам проводится на основании определения линейной принадлежности и степени дифференцировки злокачественных клеток. Внедрение методов иммунофенотипирования бластных клеток костного мозга с помощью моноклональных антител позволяет идентифицировать стандартные иммунологические варианты болезни. Исследование иммунологических маркеров бластных клеток при остром лейкозе в большинстве случаев позволяет верифицировать линейное происхождение (В- или Т-линия) и стадию, на которой произошла остановка дифференцировки [Л.В.Байдун,1997].
Помимо диагностического аспекта, необходимость изучения иммунофенотипа бластных клеток при острых лейкозах заключается в том, что наличие некоторых антигенных детерминант ассоциируется с агрессивностью течения и результатами терапии [Guinot M.,1991; Kita К., 1993; Bradstock К.,1994; Casasnovas R.O.,1994; Baer M.R.,1997; Paietta E.,1998]. Тактика лечения разрабатывается с целью уничтожения патологических элементов и создания условий для восстановления нормального кроветворения. Использование одной из самых современных исследовательских технологий — метода иммунофенотипирования - позволяет характеризовать клетку по антигенным детерминантам и формируемые при этом дифференциально-диагностические критерии, определяют большой интерес к применению данного метода в гематологии [АЮ.Барышников, 1984; Jennings CD. 1997].
Одними из перспективных направлений имеющих важное прогностическое значение в изучении лейкемических клеток являются исследования направленные на выявление цитогенетических аномалий и определение ДНК-индекса. ДНК-индекс и плоидность клеток, измеряются методом проточной цитофлюориметрии. В связи с высокой информативной ценностью и относительной простотой исполнения, ДНК-индекс учитывается практически во всех современных протоколах лечения ОЛЛ. Гиперплоидия или ДНК-индекс >1, 16 (более 50 хромосом в опухолевой клетке) встречается у 20% детей старше года независимо от инициального лейкоцитоза и возраста и ассоциируется с хорошим прогнозом. Предполагают, что при этом значительно больше клеток находится в 8 фазе и они более чувствительны к цитостатическим препаратам [В.Н.Чернов, 2004].
Таким образом, основным направлением современных исследований в области онкогематологии является диагностика и верификация острых лейкозов с углубленной биологической характеристикой клеток методом проточной цитометрии. На современном этапе решены далеко не все вопросы, касающиеся прогностической ценности экспрессии тех или иных антигенов при острых лейкозах и разработки тактики лечения. В связи с этим представляется весьма актуальным всестороннее изучение особенностей лейкозов у детей в Республике Башкортостан, определение диагностических и прогностических критериев заболевания с использованием новейших технологий. Исследования проводили на базе иммунологической лаборатории с отделением клинической иммунологии и Центра онкогематологии Детской республиканской клинической больницы г. Уфы. [главный врач - доктор медицинских наук, профессор Хасанов Р.Ш.]
Цель исследования: Определение диагностических и прогностических признаков острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан, на основании иммунофенотипической характеристики бластных клеток и ДНК-цитометрии.
Задачи исследования:
1. Изучить структуру заболеваемости острыми лейкозами у детей в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2004 годы.
2. На основании данных иммунофенотипирования бластных клеток костного мозга охарактеризовать иммунологические особенности острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан.
3. По данным ДНК-цитометрии оценить пролиферативную активность клеток костного мозга и периферической крови у детей с острым лейкозом.
4. На основании иммунофенотипирования и ДНК-цитометрии бластных клеток разработать диагностические маркеры для обоснования проведения полихимиотерапии высокого риска.
Научная новизна:
Впервые на основании результатов клинико-иммунологических исследований дана характеристика острых лимфобластных и миелобластных лейкозов у детей в Республике Башкортостан.
Впервые на основании корреляционного анализа выявлены взаимосвязи между показателями иммунофенотипирования, фазами клеточного цикла и типом острого лейкоза.
Полученные данные позволяют рекомендовать разделение больных на группы риска и проводить дифференцированную адекватную терапию в зависимости от прогноза заболевания.
Практическая значимость. Результаты проведенных исследований расширяют представления об особенностях острых лейкозов у детей, проживающих в республике Башкортостан, и позволяют оптимизировать подходы к терапии.
Установлена зависимость особенностей развития и течения острого лейкоза от фаз клеточного цикла и выявления неродственных антигенов на бластных клетках костного мозга.
Результаты проведенных исследований расширяют возможности верификации острых лейкозов у детей, оптимизируют лабораторные критерии
диагностики, указывают на дополнительные факторы, влияющие на развитие и прогноз заболевания.
Внедрение результатов исследования. Материалы исследований используют в работе отделения клинической иммунологии и онкогематологического центра Детской клинической больницы Республики Башкортостан, на циклах повышения квалификации врачей Института последипломного образования, в обучении студентов, при подготовке врачей — интернов, клинических ординаторов и аспирантов Башкирского государственного медицинского университета.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. В структуре заболеваемости острыми лейкозами в Республике Башкортостан преобладают лимфобластные лейкозы
2. Неблагоприятным прогностическим признаком при остром лейкозе у детей является выявление неродственных антигенов.
3. По данным ДНК-цитометрии установлено что при остром миелобластном лейкозе подавляющее большинство бластных клеток находятся в фазе G1, при В-остром лимфобластном лейкозе в S-фазе митотического цикла.
4. Маркером, характеризующим агрессивность течения заболевания, является наличие анеуплоидии в периферической крови и костном мозге.
Апробация диссертации. Основные положения диссертации обсуждены на: II конференции иммунологов Урала 9-12 сентября 2002г.; конференции «Национальные дни лабораторной медицины России 2004(Москва, 20-22 октября 2004г.)»; на рабочих совещаниях по проточной цитометрии "BD FACS Users Meeting" (Санкт-Петербург, 2002 и 2003); межкафедральном заседании кафедр хирургических болезней и новых технологий с курсом стационарзамещающих технологий ИПО, лабораторной диагностики ИПО от
1 апреля 2005 г., (Уфа, 2005); на Региональном диссертационном совете КМ 002.124.01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан (протокол № 33 от 26.05.2005 г.).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных
работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 123 страницах компьютерного текста и состоит из обзора литературы, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка включающего 204 источника (75 отечественных и 129 иностранных авторов). Работа иллюстрирована 40 таблицами, 16 рисунками.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования,
В структуре заболеваемости острыми лейкозами в Республике Башкортостан преобладают лимфобластные лейкозы. За период с 2000-2004 годы в онкогематологическом отделении Республиканской детской клинической больницы, было выявлено 75 больных острым лейкозом. Распределение больных по полу, возрасту отражено в таблице 1.
Таблица 1.
Распределение первичных больных острым лейкозом по полу и возрасту
Возраст Количество случаев % от общего количества
0-5 лет 31 41,3
5-10 лет 24 32
10-17 лет 20 26,7
Пол: муж. 42 56
жен. 33 44
Все больные были детально обследованы для получения комплекса клинических и лабораторных показателей - гематологических, цитологических, иммунологических. Исследование популяций клеток костного мозга проведено
методом проточной цитофлюориметрии с использованием моноклональных антител и определением процента положительных клеток с помощью проточного цитофлюориметра FACSCalibur с программным обеспечением CellQuest. В качестве скрининговых применяли маркеры с тройной флюоресцентной меткой (флуоресцеин-изотиоцианат (FITC), фикоэритрин (РЕ), перитидин-хлорофилл(РегСР)) направленные к внутриклеточным компонентам клетки cyt CD3 / CD79a / МРО. Набор моноклональных антител (представляющие собой иммуноглобулины, конъюгированные с FITC или РЕ, в буферном растворе с желатином и азидом натрия) серии Acute Leukemia Phenotyping Kit, включает: HLA-DR, CD34, CD10, CDla, CD3, CD4, CD5, CD7, CDS, CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, IgM, CD13, CD14, CD15, CD33, CD45. По набору мембранных и цитоплазматических антигенов устанавливалась линейная принадлежность, стадия зрелости и функциональное состояние клетки (анализировали не менее 5000 клеточных событий).
Для характеристики пролиферативной активности клеток использован метод, основанный на связывании ДНК с флуоресцентным зондом-пропидиум иодидом, который позволяет определить долю клеток в различных фазах митотического цикла:00/в1, S и G2+M. Исследования выполняли в день постановки диагноза до начала химиотерапии. Образцы (не менее 20000 клеток) анализировали на проточном цитофлюориметре, оборудованном модулем дискриминации дуплетов в программе ModFit.
Для статистической обработки полученных результатов использовали метод вариационной статистики с вычислением средней величины (М), средней ошибки (т) и уровня значимости (р) по-Стьюденту, коэффициента корреляции(г). Для стат. анализа по малым группам использованы методы непараметрической статистики: Манна Уитни, Вилкоксона и корреляционный анализ по Спирману.
Результаты исследования и обсуждение
В процессе проведенных исследований нами изучались мембранные и цитоплазматические рецепторы бластных клеток у 75 больных острым лейкозом. Властные клетки считались антиген положительными при уровне метки 20% и более. Всего обследовано ЗЗдевочки и 42 мальчика, в возрасте от 0 до 17лет. На основании анализа полученных результатов (рис.1) в 21% случаев диагностировали острый миелобластный лейкоз (ОМЛ), в 79% - различные варианты острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). В 66 % случаев бластные клетки имели В-клеточную, в 34 % - Т-клеточную природу.
100 -, 9
80- II 80 л 66
■ 40-1 34
20- _И| ииф 20 _
| аомп аолл | В-ОЛЛ Т-ОЛЛ
Рис. 1 .Схема распределения острого лейкоза в республике Башкортостан.
Различия в распределении острых лейкозов у детей по периодам наблюдения в Республике Башкортостан отражены в таблице 2.
Таблица 2.
Распределение острых лейкозов в Республике Башкортостан по периодам
годы Кол-во пациентов в-олл Т-ОЛЛ ОМЛ
Абс. % Абс. % Абс. %
2000-2002г.г. 50 23 46 17 34 10 20
20032004г 25 16 64 3 12 6 24
В-клеточный острый лимфобластный лейкоз
Пациенты с В-ОЛЛ составили самую многочисленную группу 39 человек (52,0%). В основном, это дети от 0 до 5 лет (56.5%), чаще страдали мальчики
(59,0%). Распределение больных по полу, и возрасту отражено в табл.3.
Таблица 3.
Распределение больных В-ОЛЛ по полу и возрасту(п=3 9)
Возраст Общее число больных
Абс. %
0-5 лет 22 56,5
5-10 лет 6 15,3
10-17 лет 11 28,2
Пол: муж. 23 59
жен. 16 41
Всего больных 39 100
Согласно критериям международной FAB-классификации В-линейные ОЛЛ диагностировали по экспрессии, по крайней мере, двух из трех ранних В-клеточных маркеров: CD19, cytCD79a, CD22. Четыре подварианта В-линейного ОЛЛ, обозначенные BI - BIV, установили по степени В-клеточной дифференцировки бластных клеток (табл.4). У пациентов с острым лимфобластным лейкозом В-линии фенотипы бластных клеток распределялись следующим образом: В (common) ОЛЛ (В П) установлен у23 детей, пре-В-ОЛЛ (В III) у 8 детей, В-зрелый ОЛЛ (В IV) выявили у 2 детей, пре-пре В-ОЛЛ (В I) у 6 обследованных.
Таблица 4.
Иммунофенотипическая характеристика больных с В-острым _ лимфобластным лейкозом(п=39)_
Варианты В-ОЛЛ Иммунофенотип Количество больных
Абс. %
В1-ОЛЛ (проВ-ОЛЛ) CD 19+,cytCD79a+,CD3 4+,CD22+ 6 15
В И-ОЛЛ (commonB-ОЛЛ) CD 19\cytCD79a+,CD3 4+,CD22+, CD10+ 23 59
В ш-олл (преВ-ОЛЛ) СБ 19+,су1С079а+,СВ34+,С022+, СОЮ+ДйМсу1+. 8 20
В1У-ОЛЛ (зрелыйВ-ОЛЛ) С019+,сугС079а+,СВ22+ДвМ+ 2 6
При анализе данных иммунофенотипирования (рис.2), наиболее специфический маркер cytCD79a экспрессировался в 84% случаев. Антигены CD34+ , HLA-DR+ и CD10+ экспрессировались с одинаковой частотой в 60% случаях.
При проведении скрининга у 14 детей с В-клеточным острым лейкозом нами было установлено наличие миелоидных маркеров, что послужило основанием для более детальной характеристики больных. В 85,7% (п=12) случаев была выявлена экспрессия CD13+(42,88+8,20), в 35,7%(п=5) -CD33+(16,82+6,08) и в 14,2%(п=2) - cytMPO+(9,85±3,92). В 4 случаях (28,5%) на бластах одновременно присутствовали антигены CD33+ и CD13+. Дифференциально-диагностическим признаком, на основании которого можно говорить о принадлежности В-клеток к более агрессивным формам В-клеточного лейкоза (пре-В ОЛЛ, пре-пре-В ОЛЛ) является по нашему мнению, выявление на бластных клетках в 64% случаев маркера Т-клеточной линии CD5+ позитивных клеток, и в подтверждение этому выявленная обратная коррелятивная связь CD10-CD5(-0,410) (табл.5).
Таблица 5.
Частота экспрессии отдельных СБ-антигенов (в %) на властных клетках
у больны х В-ОЛЛ с к оэксп рессией мие лоидн ых анти генов
№ Ф.И.О. СБ 79 СБ 19 СБ 22 СБ 10 ЫЬА -ЕЕ СБ 13 СБ 33 С^ МРО С^ 1дМ СБ 5 СБ 34
1. С-ва 83 96 93 16 8 81 3 5 83 53 38
2. Г-ч 91 92 92 6 8 56 2 и 52 87 50
3. Ю-ва 67 67 44 25 15 68 4 0 70 5 92
4. М-в 31 31 17 0 21 56 0 9 63 98
5. Ис-ва 90 97 87 3 77 68 66 44 83 94
6. Г-в 97 48 43 44 53 43 0 72 1 60
7. Ис-в 95 95 65 0 13 83 29 0 68 99
8. Ав-в 88 69 77 1 2 39 23 0 0 37 83
9. Ш-в 82 92 19 0 46 6 18 36 20 30 90
10 Б-ва 94 96 87 60 26 58 23 8 59 69 99
11 К-ва 95 95 95 80 68 9 80 9 3 84
12 Б-в 99 99 96 68 36 64 8 31 60 99
13 Юс-в 0 63 82 51 11 53 3 0 44 94
14 3-в 88 77 76 75 76 75 0 0 4 70
М + 74,58 75,24 64,35 15,12 23,0 42,88 16,82 9,85 48,69 58,65 77,87
т 6,73 6,05 7,48 5,75 5,72 8,20 6,08 3,92 9,57 5,57 6Д5
Наряду с антигенами В-клеточной линии установлена связь СБ5+ с клетками миелоидного ряда - СБ13(0,569) и СБ33(0,559). Отличительной чертой иммунофенотипа бластных клеток данной группы явилось обнаружение в 100% случаев антигена стволовой клетки СБ34+ (77,87+6,25%), что в целом не было типично для пациентов с В-клеточным лимфобластным лейкозом. На основании сопоставления данных клиники (срок выхода в ремиссию и отвечаемость на проводимую терапию) и показателей иммунофенотипирования, нами сделано заключение о том, что одновременная экспрессия клеточных маркеров миелоидной линии СБ13+ или СБ33+ и маркера стволовой клетки СБ34+ сочеталась с быстрой прогрессией заболевания и является неблагоприятным прогностическим признаком.
Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз
В ходе проведенных исследований нами выявлено 20 случаев Т-линейного варианта острого лимфобластного лейкоза, что составило 26,6% от общего количества обследованных.
В 65% (п=13) случаев Т-ОЛЛ выявили в возрасте от 5 до 10 лет, в равной степени страдают мальчики и девочки (по 50%) (п=10) (табл.6).
Таблица 6.
Распределение больных Т-ОЛЛ по полу и возрасту_
Возраст Общее число больных
Абс. %
0-5 лет 4 20
5-10 лет 13 65
10-17 лет 3 15
Пол: муж. 10 50
жен. 10 50
Всего больных 20 100
Согласно критериям международной ЕЛБ-классификации Т-линейный ОЛЛ определяли по наличию цитоплазматической или мембранной экспрессии СБ3+ и по степени тимической дифференцировки клеток, (табл. 7).
Таблица 7.
Иммунофенотипическая характеристика больных с Т-острым
л Варианты Т-ОЛЛ имфобластным лейкозом Иммунофенотип (П—20 ) Количество больных
Абс. %
Т-ЮЛЛ (проТ-ОЛЛ) С03с/, СБ7+ 3 15
Т-1 ОЛЛ (преТ-ОЛЛ) С03су+,СБ7+,С02+, С05+,С08+,С04+ 7 35
Т-111 ОЛЛ (кортик.Т-ОЛЛ) СБ3су++, С07+,СБ2+,С05+, С08',СШ+,СШ+ 5 25
Т-1УОЛЛ (зрелый Т-ОЛЛ) С03+,С07+,СБ2+, С05+, С08+,С04+ 5 25
При характеристике Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза у пациентов было определено четыре варианта Т-ОЛЛ: ранний (Т1) - 15%, промежуточный (Т2) - 35%, кортикальный (ТЗ) - 25%, зрелоклеточный вариант (Т4) -25%.
Ранний Т-1-иммунологический вариант ОЛЛ в 100% случаев характеризовался экспрессией CD7+, промежуточный Т-2-вариант экспрессией CD4+ и CD8+ во всех случаях. Пан-Т-клеточные антигены CD7+ и CD2+ присутствовали в 100% и 50% случаев соответственно, экспрессия мембранного CD3+ при Т-1 и Т-2 отсутствовала. Зрелый Т-клеточный иммунологический вариант ОЛЛ характеризовался наличием мембранного антигена CD3+ в 100% случаев, пан-Т-клеточный антиген CD7+ экспрессировался в 92,3%, экспрессия CD4+ или CD8+ была обнаружена в 34,6% и 57,7% случаев соответственно.
Анализ частоты экспрессии линейно-специфических и неродственных дифференцировочных антигенов (рис.3) у детей на бластных клетках Т-линии выявлены следующие особенности: так, наиболее специфический пан-Т-клеточный антиген CD7+ экспрессировался в 90,4% случаев. Антиген CD3+ встречался в 42,8%, антигены CD4+ и CD8+ присутствовали в 52,3% и 57,1% случаев соответственно.
Острый миелобластный лейкоз
Как известно, наиболее злокачественными по течению являются острые миелоидные лейкозы (ОМЛ). Иммунофенотипирование бластных клеток проводили согласно критериям международной ЕЛВ-классификации.
Нами выявлено нелимфоидными вариантами острого лейкоза чаще болеют дети от 10 до 17 лет (37,5% случаев) (табл.8). У детей в возрасте от 0 до 5 и от 5 до 10 лет ОМЛ встречается с одинаковой частотой (по 31.25%)
Таблица 8.
_Распределение больных ОМЛ по полу и возрасту_
Возраст
Количество случаев
% от общего количества
0-5 лет
5
31,25
5-10 лет
31,25
10-17 лет
37,5
Пол: муж.
56.25
жен.
43,75
Всего больных
16
100
5
6
9
7
Иммунологически ОМЛ характеризуются экспрессией двух или более миеломоноцитарных маркеров: анти-МРО, СБ 13, СБ33. Варианты и иммунофенотипы острого миелобластного лейкоза представлены в таблице 9.
Таблица 9.
Варианты и иммунофенотипы бластных клеток щ эиОМЛ(п=16)
Варианты ОМЛ Иммунофенотип Количество больных
Абс. %
МО-ОМЛ СБ34+ СБ33+ СБ13+ СБ10+ Н1А-БЯ+ МПО+ 2 12,5
М1-ОМЛ СБ33+ СБ13+ СБ15+ СБ64+ МРО+ 6 37,5
М2-ОМЛ СБ15+ СБ16+ СБ13- СБ33- Н1А-БЯ- МРО+ 4 25
М4-ОМЛ Н1А-БЯ+ СБ33+ СБ13+ СБ14+ СБ15+СБ34+ 4 25
На мембране миелобластов выявили следующие особенности, наиболее часто присутствовал антиген Н1А-БЯ+ (62,5%), антиген СБ33+ был выявлен в
60%, экспрессия антигена cytMPO+ встречалась в 40% случаях. Антиген стволовых клеток CD34+ обнаружен в 31,2% случаев, экспрессия CD13+ отмечена у 37,5% больных (рис.4).
ДНК-анализ клеток костного мозга и периферической крови при острых лейкозах
Методом ДНК-цитометрии установлено что при В - клеточном остром лимфобластном лейкозе бластные клетки костного мозга, характеризуются высоким уровнем пролиферативной активности (табл. 10).
Таблица 10.
Распределение бластных клеток костного мозга при В-ОЛЛ по
Плоидность ^—" Фазы клет цикла В-ОЛЛ с. отсутст миел антигенов М+га(%) В-ОЛЛ с коэксп.миелоид. антигенов М+т(%) Р
Диплоид. 78,03+21,97 100,0 >0,05
GI 41,20+2,91 49,91+17,90 <0,05
GII 1.08+1,08 0,81+0,81 >0,05
S 57,72+2,25 49,28+17,72 <0,05
M+m-средние величины, р-достоверность разницы между различными группами В-ОЛЛ(наличием и отсутствием миелоидных антигенов)
В подавляющем большинстве случаев выявлен диплоидный тип гистограмм, бластные клетки находились в S-фазе клеточного цикла. Нами установлено, что В-ОЛЛ с отсутствием миелоидных антигенов характеризуется увеличением пролиферирующей S - фракции бластных клеток (М±т 57,72+2,25) (рисунок 5), с коэкспрессией миелоидных антигенов увеличивается доля клеток, находящихся в фазе G1.
60 50 40 30 20 10 0
49,9 49,3
41,2 И
■ й В-ОЛЛ ■ В-ОЛЛ с миел а.г.
■
■
61
Э2
Фазы клеточного цикла
Рис.5. Распределение клеток по фазам клеточного цикла у больных с различными иммунофенотипическими вариантами В-ОЛЛ
Наряду с исследованием костного мозга, больным с В-ОЛЛ, мы изучали плоидность клеток периферической крови. Как видно из приведенных в таблице №11 данных, как в костном мозге, так и в периферической крови, установлен диплоидный тип гистограмм.
Таблица 11.
Распределение бластных клеток костного мозга и периферической крови
Плоидность ^-""" ^ Фазы клет.цикла В-ОЛЛ Кост.мозг М±щ(%) В-ОЛЛ периф. кровь М+ш(%) Р
Диплоид 93,7+6,3 100,0+0 >0,05
ет 40,1+5,2 20,8+1,8 <0,05
вп 11,2+9,8 0 <0,05
Б 57,9+5,0 79,2+1,8 <0,05
М+m-средние величины, р-достоверность разницы между костным мозгом и перифер.кровью
Нами проведен анализ пролиферативной активности бластных клеток костного мозга и периферической крови пациентам с Т-ОЛЛ. При анализе полученных данных (табл. 12), выявили, что основная часть бластных клеток, как в костном мозге, так и в периферической крови характеризуется анеуплоидным типом гистограмм.
Таблица 12.
Распределение бластных клеток костного мозга и периферической крови
Плоидность — Фазы ■клет.цикла Т-ОЛЛ кост. мозг М+ш(%) Т-ОЛЛ периф. кровь М+т(%) Р
диплоид 37,6+16,6 11,0+2,6 <0,05
23,2+3,7 43,7+7,5 <0,05
СТ1 66,0+3,1 56,3+7,5 <0,05
8 10,8+4,9 0 <0,05
Анеуплоид. 81,8+6,8 89,0+2,6 >0,05
М+т-средние величины, р-достоверность разницы между костным мозгом и перифер.кровью
В таблице №13 представлены результаты оценки параметров клеточного цикла бластных клеток костного мозга, в группе с ОМЛ-0. При этом установили, что основная доля пролиферирующих клеток находилась в в1 фазе. Властные клетки периферической крови при ОМЛ-0 характеризовались анеуплоидным типом гистограмм.
Таблица 13.
Распределение бластных клеток костного мозга и периферической крови
при ОМЛ-0 по п Плоидность лоидности и фазам кл Кост. мозг еточного цикла периф. кровь
Фазы М+т(%) М+т(%)
клет.цикла
диплоид 100,0 31,5+23,2
и 66,2+11,1 33,0+4,7
СТ1 0,1±0,1 30,2+17,6
Б 33,7+11,0 36,8+21,3
Анеуплоид. 0 68,5+23,2
М+ш-среяние величины Как видно из приведенных в таблице данных, наиболее благоприятная в
прогностическом отношении форма лейкоза В-ОЛЛ характеризуется
диплоидными типами гистограмм периферической крови и костного мозга. Злокачественное течение Т-ОЛЛ сопровождается анеуплоидией, как в костном мозге, так и в периферической крови; для 0МЛ-0 характерна анеуплоидия в периферической крови.
Таким образом, нами установлено, что появление анеуплоидии в периферической крови, является неблагоприятным прогностическим признаком.
В ходе проведенных исследований нами разработаны и внедрены в практику следующие основные положения:
1. Выявление атипичных, неродственных антигенных детерминант на бластных клетках, является прогностическим маркером агрессивности заболевания.
2. При исследовании ДНК-цитометрии, необходимо учитывать фазы клеточного цикла.
3. Основанием для формирования групп высокого риска, является выявление анеуплоидных клеток в периферической крови и костном мозге при определении плоидности тканей, методом ДНК-цитометрии.
ВЫВОДЫ:
1. В структуре заболеваемости острыми лейкозами у детей в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2004г.г. острый миелобластный лейкоз установлен в 21% случаев, различные варианты острого лимфобластного в 79%. Общая заболеваемость составила в среднем 3,7 на 100 000 детского населения.
2. Иммунологические особенности острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан по данным иммунофенотипирования характеризуются увеличением числа случаев В-ОЛЛ с 46% в 2000-2002г.г. до 64% в 2003-2004г.г. и высоким уровнем Т-ОЛЛ (34%) в 2000-2002г.г..
3. При В-клеточном остром лимфобластном лейкозе по данным ДНК-цитометрии костного мозга и периферической крови установлен диплоидный тип гистограмм. При Т-лимфобластном лейкозе выявлена
анеуплоидия бластных клеток костного мозга и периферической крови. Острый недифференцируемый миелобластный лейкоз характеризуется диплоидным типом гистограмм бластных клеток костного мозга и анеуплоидией периферической крови. 4. Диагностическими маркерами для проведения полихимиотерапии высокого риска при В-ОЛЛ являются: выявление неродственных антигенов СБ13+ и СБ33+, высокий уровень экспрессии СБ34+ и маркера СБ5+; анеуплоидный тип гистограмм в костном мозге и периферической крови.
Практические рекомендации:
• Для прогнозирования течения В-клеточного острого лимфобластного лейкоза при иммунофенотипировании бластных клеток костного мозга, целесообразно включать в исследование определение миелоидных антигенов.
• Для верификации диагноза В1 и ВШ-ОЛЛ, можно использовать дополнительнительный маркер СБ5.
• При формировании групп стандартного и высокого риска, необходимо включать в исследование, ДЫК-цитометрию костного мозга и периферической крови.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Иммунофенотипическая характеристика острого лимфобластного лейкоза у детей в Республике Башкортостан. / Т.Н.Красавцева, З.Р.Хаматдинова, МАОсипова, Р.Н.Степанова, Л.Д.Изотова, Э.В.Якупова, О.А. Малиевскиий // Материалы научно-практической конференции, посвященная 30-летию со дня открытия РДКБ, Уфа.- 2002.-С. 87-99.
2. Клинико-иммунологическая характеристика острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан. / З.Р.Хаматдинова, Т.Н.Красавцева, Е.Л.Ефимова // Материалы II конференции иммунологов Урала - 2002г.-9-12 сентября-С. 102.
3. Возможности и перспективные направления проточной цитофлуориметрии в педиатрической практике. / Р.М.Хайруллина, З.Р.Хаматдинова, Л.Р.Кальметьева, P.P. Хасанов // Материалы III конференции иммунологов Урала 16-17 октября. Иммунология Урала.- 2003.-№1(3) - С.70.
4. Прогностические возможности проточной цитометрии в онкогематологии. / Р.М.Хайруллина, З.Р.Хаматдинова, А.Ж. Гильманов // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004.-№9 - С. 38-39.
5. Иммунофенотипическая характеристика острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан. / З.Р.Хаматдинова, РМ.Хайруллина, А.Ж. Гильманов // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004.-№9 - С. 44.
6. Иммунофенотипирование острых лейкозов. / З.Р.Хаматдинова, Р.М.Хайруллина, Т.Н.Красавцева, Е.В.Чувилина, Н.Ф. Хисамова // Нижегородский медицинский журнал «Здравоохранение ПФО». Научно-практическая конференция «Педиатрия в ПФО» - 2004.- С. 54.
7. ДНК-цитометрия в диагностике острых лейкозов. / З.Р.Хаматдинова, Р.М.Хайруллина, Т.Н.Красавцева, Е.В.Чувилина, Н.Ф.Хисамова // Нижегородский медицинский журнал «Здравоохранение ПФО». Научно-практическая конференция «Педиатрия в ПФО» - 2004,- С. 53.
Хаматдинова Земфира Робертовна
Иммунофенотипические варианты острых лейкозов у детей в республике башкортостан
14.00.3 б.-аллергология и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Лицензия № 0177 от 10.06.96 г. Подписано в печать 26.05.2005 г. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 '/16. Усл.-печ. л. 1,35. Уч.-изд. л. 1,5 Тираж 100 экз. Заказ № 301.
450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, Башкирский государственный медицинский университет
,i » О 9 ИЮЛ 2005 v~ '
1345
Оглавление диссертации Хаматдинова, Земфира Робертовна :: 2005 :: Уфа
Список сокращений.
Введение.
Глава 1. Обзор литературы.
1.1.Этиология и патогенез острых лейкозов у детей.
1.2.Иммунологическая классификация и иммунофенотипирование острых лейкозов.
1.3.Анализ ДНК и распределения клеток по фазам клеточного цикла.
Собственные исследования
Глава 2. Материалы и методы исследований.
Глава 3. Диагностика острых лейкозов.
3.1. Клинические проявления острого лейкоза.
3.2. Результаты общеклинических исследований периферической крови и морфологического исследования пунктата костного мозга.
3.3. Результаты иммунофенотипирования лейкозных клеток.
3.3.1. Острый В-клеточный лимфобластный лейкоз.
3.3.2. Острый Т-клеточный лимфобластный лейкоз.
3.3.3. Острый миелобластный лейкоз.
Глава 4. ДНК-цитометрия.
4.1. ДНК-анализ бластных клеток при В- клеточном лимфобластном лейкозе.
4.2. ДНК-анализ бластных клеток при Т- клеточном лимфобластном лейкозе.
4.3. ДНК-анализ бластных клеток при остром миелобластном лейкозе.
4.4. Сравнительный ДНК-анализ бластных клеток при В-клеточном и остром миелобластном лейкозах.
5.1. Корреляционный анализ основных клеточных параметров при Востром лимфобластном лейкозе.
5.2. Корреляционный анализ основных клеточных параметров при Т-остром лимфобластном лейкозе.
5.3. Корреляционный анализ основных клеточных параметров при остром миелобластном лейкозе.
Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Хаматдинова, Земфира Робертовна, автореферат
Актуальность проблемы. В структуре детской смертности в Российской Федерации новообразования, болезни крови и кроветворных органов занимают 6 место после несчастных случаев, отдельных состояний перинатального периода, врожденных пороков развития, болезней органов дыхания и инфекционных заболеваний. Согласно статистике Министерства здравоохранения Республики Башкортостан, заболеваемость острыми лейкозами, составляет в среднем 3,7 на 100 ООО детского населения.
Диагностика острых лейкозов, до недавнего времени основывалась на морфологическом и цитохимическом исследовании костного мозга и периферической крови. Лечение пациентов с острыми лейкозами по современным программам проводится на основании определения линейной принадлежности и степени дифференцировки злокачественных клеток. Внедрение методов иммунофенотипирования бластных клеток костного мозга с помощью моноклональных антител позволяет идентифицировать стандартные иммунологические варианты болезни. Исследование иммунологических маркеров бластных клеток при остром лейкозе в большинстве случаев позволяет верифицировать линейное происхождение (В- или Т-линия) и стадию, на которой произошла остановка дифференцировки [Л.В.Байдун,1997].
Помимо диагностического аспекта, необходимость изучения иммунофенотипа бластных клеток при острых лейкозах заключается в том, что наличие некоторых антигенных детерминант ассоциируется с агрессивностью течения и результатами проводимой химиотерапии [Guinot М.,1991; Kita К.,1993; Bradstock К.,1994; Casasnovas R.0.1994; Baer M.R.,1997; Paietta E., 1998]. Течение заболевания связано с появлением и развитием аномальных клонов клеток, которые вытесняют или подавляют нормальный гемопоез при острых лейкозах. При этом уровень поражения кроветворения достаточно высокий и дроцесс затрагивает стволовые клетки или ранние предшественники. Однако, в большинстве случаев сохраняются нормальные клетки-предшественники и тактика лечения разрабатывается с целью уничтожения патологических элементов и создания условий для восстановления нормального кроветворения[Е.Л.Семикина, 2003]. Использование одной из самых современных исследовательских технологий - метода иммунофенотипирования - позволяет характеризовать клетку по антигенным детерминантам и формируемые при этом дифференциально-диагностические критерии определяют большой интерес к применению данного метода в гематологии [А.Ю.Барышников, 1994; Jennings CD.1997],
С расширением спектра моноклональных антител при остром лейкозе у детей значительно возросла частота выявления не родственных антигенов, большая часть которых представлена маркерами миелоидной дифференцировки. Разработка критериев дифференциальной диагностики при бифенотипических вариантах заболевания весьма актуальна как для часто встречающихся случаев экспрессии миелоидных антигенов при остром лимфобластном лейкозе, так и диагностике различных вариантов острого миелобластного лейкоза [Е.А.Копыльцова, 1999; Н.Н.Тупицин, 2003]
Одним из перспективных.направлений в изучении лейкемических клеток являются цитогенетические и молекулярно-генетические исследования, основанные на определении количества хромосом и их структурных изменений (транслокации, инверсии, делеции). Обнаружение цитогенетических аномалий и определения ДНК-индекса оказались важными прогностическими факторами [В.М.Чернов,2004].
ДНК-индекс (соотношение количества ДНК в лейкемических клетках и в клетках с нормальным диплоидным кариотипом) или плоидность клеток, измеряется методом проточной цитофлюориметрии. В связи с высокой информативной ценностью и относительной простотой исполнения, ДНК-индекс учитывается практически во всех современных протоколах лечения OJIJI. Гиперплоидия или ДНК-индекс >1,16 (более 50 хромосом в опухолевой клетке) встречается у 20% детей старше года независимо от инициального лейкоцитоза и возраста и ассоциируется с хорошим прогнозом[В.М.Чернов, 2004]. Отмечено также, что при обнаружении в костном мозге анеуплоидных клеток при острых лейкозах, в период гематологической ремиссии, рецидивы наступают значительно раньше и соответственно сокращаются сроки ремиссии. [А.А.Новик, 2001].
В последние десятилетия достигнуты значительные успехи в лечении острых лейкозов: увеличилась продолжительность жизни и безрецидивная выживаемость больных. Впечатляющие результаты в терапии острых лейкозов у детей, в значительной мере, связаны с внедрением интенсивных протоколов лечения, комбинированной программной полихимиотерапии и новых методов лабораторной и инструментальной диагностики [Nesbit М.Е.,1981]. Заслуга в разработке и внедрении программной полихимиотерапии, принадлежит группам BFM (Berlin-Frankfurt-Munster) в Германии [Piter J., 1990] и CCG (Children's Cancer Group) в США [Tubergen D.G., 1993; Е.Б.Владимирская, 2004].
Уже к концу 70-х годов стало ясно, что высоко агрессивная программная полихимиотерапия дает возможность вылечить более 50% детей с острым лимфоблас,тным лейкозом [Е.Б.Владимирская, 1998]. При лечении по современным протоколам примерно 97% детей с острым лимфобластным и 75-85%о с острым миелобластным лейкозом достигают полной ремиссии; 5-летняя безрецидивная выживаемость составляет для острых лимфобластных лейкозов 70-75% и для острых миелобластных лейкозов 40-50% [Mosmann Т., 1983; Willie А.Н.,1987; Cortes J., 1995; А.В.Попа, 1996; Н.В.Мякова, 1997; Kersey J.H. 1997; О.В.Алейникова, 2000; В.Г.Савченко, 2004].
Таким образом, основным направлением современных исследований в области онкогематологии является диагностика и верификация острых лейкозов с углубленной биологической характеристикой клеток методом проточной цитометрии. На современном этапе решены далеко не все вопросы, касающиеся прогностической ценности экспрессии тех или иных антигенов при острых лейкозах и разработки тактики лечения. В связи с этим представляется весьма актуальным всестороннее изучение особенностей лейкозов у детей, определение диагностических и прогностических критериев заболевания с использованием новейших технологий.
Исследования проводили на базе иммунологической лаборатории с отделением клинической иммунологии и Центра онкогематологии Детской Республиканской клинической, больницы г. Уфы [главный врач - доктор медицинских наук, профессор Р.Ш.Хасанов].
Цель исследования: определение диагностических и прогностических признаков острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан, на основании иммунофенотипической характеристики бластных клеток и ДНК-цитометрии. I
Задачи исследования:
1. Изучить структуру заболеваемости острыми лейкозами у детей в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2004 годы.
2. На основании данных иммунофенотипирования бластных клеток костного мозга охарактеризовать иммунологические особенности острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан.
3. По данным ДНК-цитометрии оценить пролиферативную активность клеток костного мозга и периферической крови у детей с острым лейкозом.
4. На основании иммунофенотипирования и ДНК-цитометрии бластных клеток разработать диагностические маркеры для обоснования полихимиотерапии высокого риска.
Научная новизна
Впервые на основании результатов клинико-иммунологических исследований дана характеристика острых лимфобластных и миелобластных лейкозов у детей в Республике Башкортостан.
Впервые на основании корреляционного анализа выявлены взаимосвязи между показателями иммунофенотипирования, фазами клеточного цикла и типом острого лейкоза.
Полученные данные позволяют рекомендовать разделение больных на группы риска и проводить дифференцированную адекватную терапию в зависимости от прогноза заболевания. Практическая значимость
Результаты проведенных исследований расширяют представления об особенностях острых лейкозов у детей, проживающих в республике Башкортостан, и позволяют оптимизировать подходы к терапии.
Установлена зависимость особенностей развития и течения острого лейкоза от фаз клеточного цикла и выявления неродственных антигенов на бластных клетках костного мозга.
Результаты проведенных исследований расширяют возможности верификации острых лейкозов у детей, оптимизируют лабораторные критерии диагностики, указывают на дополнительные факторы, влияющие на развитие и прогноз заболевания.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. В структуре заболеваемости острыми лейкозами в Республике Башкортостан преобладают лимфобластные лейкозы
2. Неблагоприятным прогностическим признаком при остром лейкозе у детей является выявление неродственных антигенов.
3. По данным ДНК-цитометрии установлено, что при остром миелобластном лейкозе подавляющее большинство бластных клеток находятся в фазе G1, при В-остром лимфобластном лейкозе в S-фазе митотического цикла.
4. Маркером, характеризующим агрессивность течения заболевания, является наличие анеуплоидии в периферической крови и костном мозге.
Внедрение результатов исследования
Материалы исследований, используются в работе отделения клинической иммунологии и онкогематологического центра Детской клинической больницы
Республики Башкортостан, на циклах повышения квалификации врачей Института последипломного образования, в обучении студентов, при подготовке врачей - интернов, клинических ординаторов и аспирантов Башкирского государственного медицинского университета.
Апробация диссертации
Основные положения диссертации обсуждены на: II конференции иммунологов Урала 9-12 сентября 2002г.; конференции «Национальные дни лабораторной медицины России 2004(Москва, 20-22 октября 2004г.)»; на рабочих совещаниях по проточной цитометрии "BD FACS Users Meeting" (Санкт-Петербург, 2002 и 2003); межкафедральном заседании кафедр лабораторной диагностики ИПО БГМУ, хирургических болезней и новых технологий с курсом стационарзамещающих технологий ИПО БГМУ, от 1 апреля 2005 г., (Уфа, 2005); на Региональном диссертационном совете КМ 002.124.01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан (протокол № 33 от 26.05.2005 г.).
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 123 страницах компьютерного текста и состоит из обзора литературы, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического списка включающего 202 источника (73 отечественных и 129 иностранных авторов). Работа иллюстрирована 40 таблицами, 15 рисунками.
Заключение диссертационного исследования на тему "Иммунофенотипические варианты острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан"
выводы
1. В структуре заболеваемости острыми лейкозами у детей в Республике Башкортостан за период с 2000 по 2004г.г. острый миелобластный лейкоз установлен в 21% случаев, различные варианты острого лимфобластного в 79%. Общая заболеваемость составила в среднем 3,7 на 100 000 детского населения.
2. Иммунологические особенности острых лейкозов у детей в Республике Башкортостан по данным иммунофенотипирования характеризуются увеличением числа случаев .B-OJIJI с 46% в 2000-2002г.г. до 64% в 2003-2004г.г. и высоким уровнем Т-ОЛЛ (34%) в 2000-2002г.г.
3. При , В-клеточном остром лимфобластном лейкозе по данным ДНК-цитометрии костного мозга и периферической крови установлен диплоидный тип гистограмм. При Т-лимфобластном лейкозе выявлена анеуплоидия бластных клеток костного мозга и периферической крови. Острый недифференцируемый миелобластный лейкоз характеризуется диплоидным типом гистограмм бластных клеток костного мозга и анеуплоидией периферической крови.
4. Диагностическими маркерами для проведения полихимиотерапии высокого риска при В-ОЛЛ являются: выявление неродственных антигенов CD13+ и CD33+, высокий уровень экспрессии CD34+ и маркера CD5+; анеуплоидный тип гистограмм в костном мозге и периферической крови. 1
Практические рекомендации
Для прогнозирования течения В-клеточного острого лимфобластного лейкоза при иммунофенотипировании бластных клеток костного мозга, целесообразно включать в исследование определение миелоидных антигенов.
Для верификации диагноза B-I и ВШ-ОЛЛ, можно использовать дополнительнительный маркер CD5.
При формировании групп стандартного и высокого риска, необходимо включать в исследование ДНК-цитометрию костного мозга и периферической крови.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Хаматдинова, Земфира Робертовна
1. Азовская, Т.Ю. Алгоритм иммунологической диагностики острых лейкозов / Т.Ю. Азовская, Л.Г. Фечина, С.В. Сазонов // Вестн. Уральской гос. академии. 1998 - №3. - с.48-53.
2. Алейникова, О.В. Результаты лечения острого лимфобластного лейкоза у детей Беларусии / О.В. Алейникова // Гематология и трансфузиология. -1997.-№5.-С. 18-21.
3. Байдун, Л.В. Комплексный анализ инициальных бластных клеток при остром лимфобластном лейкозе у детей. М., 1996. - 38 с.
4. Байдун, Л.В. Современная диагностика и классификация острой лейкемии. 1. Острая миелобластная лейкемия / Л.В. Байдун // Гематология и трансфузиология. 1996. - Т. 41, № 4. - С. 35-41.
5. Байдун, Л.В. Современная диагностика и классификация острой лимфобластной лейкемии / Л.В. Байдун // Гематология и трансфузиология. 1997. - Т 42, № 3. -С. 37-42.
6. Балакирев, С.А. Прогноз и лечение лейкозов у детей раннего возраста: автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 1993. - 35 с.
7. Балакирев, С.А. Врожденный острый лейкоз у детей // Детская онкология. -1999. -№1.-С.29.
8. Бычкова, Н.В. Анеуплоидия и особенности пролиферации клеток рака различного происхождения (эктодермального, энтеродермального, Мюллерова) по данным проточной цитометрии ДНК: автореф. дис. .канд. биол. наук. СПб., 1997. - 22 с.
9. Владимирская, Е.Б. Биологические основы точечной терапии при онкогематологических заболеваниях / Е.Б. Владимирская // Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2004. - Т. 3, №4-5.-С. 13.
10. Владимирская, Е.Б. Острые лейкозы и гипоплазии кроветворения у детей / Е.Б. Владимирская, Н.А. Торубарова. М., 1985. - 207 с.
11. И. Владимирская, Е.Б. Причины и пути преодоления лекарственной резистентности при лейкозах и лимфомах у детей / Е.Б. Владимирская, Н.С. Кисляк, А.Г. Румянцев // Гематология и трансфузиология. 1998. -Т. 43, №6.-С. 3-7.
12. Володина, Г.В. Диагностическое и прогностическое значение стандартных и атипичных иммунологических вариантов острого лимфобластного лейкоза у детей / Г.В. Володина, А.Б. Тулебаева // I (V) Съезд детских врачей Республики Казахстан. 2001. - С.
13. Долгих, В.Т. Опухолевый рост. Избранные лекции. Учебное пособие для студентов медицинских вузов. Москва: Медицинская книга, Н.Новгород: Издательство НГМА, 2001. - 81 с.
14. Зуева, Е.Е. Иммунофенотипирование в диагностике острых лейкозов/Е.Е. Зуева //Рос. биомед. журнал. 2001. - Т. 4 -С. 471-478.
15. Иммунологический фенотип лейкозной клетки / А.Ю. Барышников, З.Г. Кадагидзе, JI.A. Махонова, Н.Н. Тупицин. М.: Медицина, 1989. -240 с.
16. Иммунологическая характеристика первых рецидивов острого лимфобластного лейкоза у детей и оценка эволюции иммунофенотипа бластных клеток в рецидиве / Борисевич Н. В., Белевцев М. В., Алейникова О. В.// Гематология и трансфузиология-2004 №6 10-13.
17. Кисляк, Н.С. Клетки крови у детей в норме и патологии / Н.С. Кисляк, Р.В. Ленская. М., 1978. - 176 с.
18. Кисляк, Н.С. Соотношение популяции лимфоидных клеток при некоторых лимфопролиферативных заболеваниях у детей / Н.С. Кисляк, Т.А. Изотова, П.П. Соколов // Педиатрия. 1975. - № 8. - С. 3-10.
19. Клиническая лабораторная аналитика: в 4 т. / под ред. В. В. Меньшикова. М., 2000. - Т. 2. - Гл. 3. - С. 161-195.
20. Клиническая онкогематология: руководство для врачей / под ред. М.А. Волковой. М.: Медицина, 2001. - 576 с.
21. Кост, Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1975. - 135 с.
22. Коэкспрессия антигена CD34 ранних гемопоэтических предшественников и антигена FAS/APO-1, опосредующего апоптоз /
23. A.Ю. Барышников, Т.Н. Заботина, Н.П. Седяхина и др. // Эксперим. онкология. 1994. - Т. 16, № 4-6. - С. 343-347.
24. Критерии оценки основных медико-статистических показателей при изучении лейкозов у детей./ Чернов
25. B.М., Бурдаева Д.Д. // Гематология и трансфузиология.-1999.-№ 4.1. C.48-50.
26. Лабораторная диагностика России 2004/2005: Ежегодный справочник. СПб.: Человек, 2004. - 340 с.27. • Лабораторные методы исследования в клинике: справочник / под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 387 с.
27. Ланг, Н.Р. Стимуляция лимфоцитов. М.: Медицина, 1976. - 288 с.
28. Лейкозы в структуре общей заболеваемости злокачественными новообразованиями у детей РФ: динамика, сопоставление с зарубежным уровнем, критический анализ./ Чернов В.М., Погорелова Э.И., Лескова С.Г. // Гематология и трансфузиология.-1997.-№5 .-С 10-14.
29. Лечение острого лимфобластного лейкоза у детей: 6-летние результаты нерандомизированного многоцентрового исследования с минимальным сроком наблюдения 2 года / А.И. Карачунский, Е.Г.
30. Кравченко, А. Штакельберг и др. // Гематология и трансфузиология. -1997:- №5. -С. 14-17.
31. Луговская, С.А. Гематологический атлас / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. М., 2004. - 227 с.
32. Луговская, С.А. Лабораторная диагностика лейкозов / С.А. Луговская, В.Т. Морозова, М.Е. Почтарь. Тверь: Губернская медицина, 1999.-80 с.
33. Маркина И.Г. Прогностическое значение иммунофенотипа злокачественных клеток (на примере острых нелимфобластных лейкозов) / И.Г. Маркина, Н.Н. Тупицин // Рус. мед. журнал. 2001. - Т. 9, № 22. http://www.rmj.ru . •
34. Методы проточной цитометрии в медицинских и биологических исследованиях / под ред. М.П. Потапнева. Минск: ГУРНМБ, 2003. - 136 с.
35. Многофакторный математический анализ иммунологических и клинико гематологических признаков для прогноза ОЛЛ у детей./ Маякова С.А., Глазкова ТТ.II Детская онкология. - 1997.-№3. - 4.- С.20.
36. Морозова, В.Т. Лабораторная диагностика лейкозов. Л., 1977. -202 с.
37. Мосягина, Е.Н. Болезни крови у детей: атлас / Е.Н. Мосягина, Н.А. Торубарова, Е.Б. Владимирская. М., 1985. - 179 с. •
38. Новик, А.А. Принципы проточной цитометрии в иммунологии и онкогематологии / А.А. Новик, В.Ю. Никитин, В.Н. Цыган // Вестн. Рос. воен.-мед. академии. 2001. - Т. 2, № 6. - С. 34-39.
39. Новое в онкологии / И.Г.Маркина, М.А.Волкова, Н.Н. Тупицын и др. //-Воронеж, 1999. С. 5-11
40. Номенклатура антигенов CD (кластеров дифференцировки лейкоцитов) на ноябрь 1994 года // Гематология и трансфузиология. -1994. -Т. 39, №6. -С. 45-48.
41. Органные дисфункции при остром лимфобластном лейкозе у детей./ Муталов А.Г., Данилов Р.А., Миронов П.И. //Гематология и трансфузиология. 1999.№4.-С.10-13
42. Оценка интенсивности экспрессии дифференцировочных антигенов бласных клеток / E.JI. Семикина, Н.А. Торубарова, Е.А. Копыльцова и др. // Гематология и трансфузиология. 1999. - Т. 44, № 6. - С. 21.I
43. Плоидность ДНК опухолевых клеток и прогноз при раке гортани / Т.Г. Николаева, Я.В. Добрынин, B.C. Алферов и др. // Вестн. Онкол. Центра им. Н.Н. Блохина. 1995. - № 1. с. 17-22.
44. Показатели апоптоза бластных клеток у детей с острыми лейкозами / Е.А. Копыльцова, Н.А. Торубарова, Е.Л. Семикина и др. // Фармакотерапия и фармокогенетика в педиатрии: матер, науч.-практич. конф. М., 2000. - С. 76-77.
45. Попа, А.В. Критерии прогноза и лечение острого нелимфобластного лейкоза у детей: автореф. дис. . канд. мед. наук. М, 1996. -30 с.
46. Пособие для врачей гематологов / Беликова Л.Ю., Карачунский А.И., Самочетова Е.В. // Москва.-2002.-С.51.
47. Предложения для иммунологической классификации острых лейкозов / М.К. Бене, Г. Кастолди, В. Напп, В.Д. Людвиг // Гематология и трансфузиология. 1996. - Т. 41, № 6. - С. 43-45.
48. Применение проточной цитометрии для оценки функциональной активности иммунной системы человека. Пособие для врачей-лаборантов / Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин, А.В. Симонова и др.. М., 2001. - 53 с.'- '
49. Пятилетний опыт применения протокола РЕСО-92 в лечении острого лимфобластного лейкозау детей / Э.Г. Бойченко, М.Б. Белогурова, Э.М. Петрова и др. // Гематология и трансфузиология. -1999.-№6.-С. 28.
50. Рак в УкраУш: захворювашсть, смертшсть, показники д1яльност1 онколопчно'1 служби / З.П. Федоренко, JI.O. Гулак, G.JI. Горох и др. // Бюлетень Нацюнального канцер-реестру Укра'ши. 2002. С. 73. http://www.health-ua.com
51. Результаты лечения острого лимфобластного лейкоза у детей по модифицированным протоколам ALLBFM90m и ALLBFM95m / Р.Ф. Тепаев, О.А. Полякова, А.А. Басистова и др. // Гематология и трансфузиология. 2002. - Т 47, № 4. - С. 11-14.
52. Руководство по гематологии: в 2 т. / под ред. А.И. Воробьева. М., 1985.
53. Руководство по гематологии: в 3 т. / под ред. А.И.Воробьева. М.: Ньюдиамед, 2002. - Т. 1. - 280 с.
54. Савченко, В.Г. Лечение острых лейкозов / В.Г. Савченко, Е.Н. Паровичникова. М.: МЕДпресс-информ, 2004. - 220 с.
55. Соболева, Т.Н. Острые лейкозы / Т.Н. Соболева, Е.Б. Владимирская. -М., 2001.-22 с.
56. Сравнительный анализ токсичности полихимиотерапии острого лимфобластного лейкоза у детей по протоколам ALL-BFM-90m и ALL
57. МВ-91 / Н.В. Мякова, Л. В. Байдун, Л.Ю. Беликова и др. // Педиатрия. -1997.-№4.-С. 29-35.
58. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека. Иммунологические методы / А.А. Тотолян, И.А. Балдуева, Л.Н. Бубнова и др. // Мед. иммунология. 1999. -Т. 1, № 5. -С. 21-43.
59. Статистические методы исследования в медицине и здравоохранении / под ред. Л.Е. Полякова. Л.: Медицина, 1971. - 102 с.
60. Тулебаева, А.В. Клинико-гематологические особенности Т-линейных иммунологических вариантов острого лимфобластного лейкоза у детей / А.В. Тулебаева, К.О. Омарова, Р.У. Кошкинбаева // Конференция, посвященная 70-летию НЦПиДХ. 2002.
61. Тупицин, Н.Н. Иммунодиагностика гемобластозов человека. М., 2003. - 243 с.64. ( Тупицин, Н.Н. Острые смешанно-линейные лейкозы / Н.Н. Тупицин // Гематология и трансфузиология. 1990. - № 9. - С. 18-20.
62. Хейфиц, Л.Б. Разделение форменных элементов крови человека в градиенте плотности верографин-фиколл / Л.Б. Хейфиц, В.А. Абалкин // Лабораторное дело. 1973. - № 10. - С. 579-581.
63. Цаур, Г.А. Влияние делекций глутатион-8-трансфераз Ml и Т1 на развитие, течение и прогноз острого лимфобластного лейкоза у детей: автореф. дис. . канд. мед. наук. Екатеринбург, 2004. - 25 с.
64. Цитометрическое определение содержания ДНК в клетках опухолей головы и шеи и его роль в прогнозе заболевания / Т.Г. Николаева, С.А. Худират, А.А. Ахундов и др. // Вестн. Онкол. Центра им. Н.Н. Блохина. 2000. - № 1. - С. 11-20.
65. Чередеев, А.Н. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий / А.Н. Чередеев, Н.А. Горлина, И.Г. Козлов // Клин, лабор. диагностика. 1999. - № 6. - С. 25-32.
66. Чернов, В.М. Острый лимфобластный лейкоз у детей: конспект врача. М., 2004. (Приложение к «Медицинской газете» от 08.09.04.) — www .kid.ru/pregnancy/index69.
67. Чучалин, А.Г. Иммунокоррекция в пульмонологии. М., 1989. - 107 с.
68. Шишкин, Ю.В. CD95 опосредованный апоптоз в лейкозных и нормальных кроветворных клетках: автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 2000. - 58 с.
69. Экспрессия антигенов CD34, CD33 и CD 13 на бластных клетках ВIлинейного лейкоза у детей / Е.А. Копыльцова, E.JI. Семикина, Е.П. Клыкова и др. // Гематология и трансфузиология. 1999. - Т. 44, № 6. — С. 21.
70. Ярилин А.А. Основы иммунологии. Учебник. М., 1999. - 607 с.
71. A new homeobox gene contributes the DNA binding domain of the t(l;19) translocation in pre-B ALL / M.P. Kamps, C. Murre, X. Sun, D. Baltimore // Cell. 1990. - Vol. 60. - P. 547-51.
72. A novel gene AFlp, fused to HRX in t(l;l I)(p32;q23) is not related to AF4, AF9, nor EML / O.A. Bernard, M. Mauchauffe, C. Mecucci et al. // Oncogene. 1994. - № 9. - P. 1039-41.
73. A novel human homeobox gene lies at the chromosome 10 breakpoint with chromosomal translocation t(10;14) / I.D. Dube, S. Kamel-Reid, C.C. Yuan et al. // Blood. 1991. - Vol. 78. - P. 2996 - 3000.
74. A single monoclonal antibody identifies T-cell lineage of childhood lymphoid malignancies / M. Link, R. Warnke, J. Finlay et al. // Blood. -1983.-№2.-P. 722-726.
75. Analysis of DNA ploidy using fresh frozen tissues of head and neck squamous cell carcinomas / Y. Arai, M. Tsukuda, K. Ito et al. // Auris Naus Larynx. 1997. - Vol. 24, № 2. - P. 193-8.
76. Andreeff, M. Flow cytometry of leukemia / M. Andreeff // Flow Cytometry and Sorting. 2nd ed. - 1990. - P. 697-725.
77. Banchereau, J. Human В lymphocytes: phenotype, proliferation, and differentiation / J. Banchereau, F. Rousset // Adv. Immunol. 1992. - Vol. 52. -P. 125-234.
78. B-cell antigens:CD 10 / B. Dorken, P. Moller, A. Pezzutto et al. // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp [et al.]. Oxford: Oxford University Press, 1989. - P. 33-34.
79. B-cell antigens:CD 19 / B. Dorken, P. Moller, A. Pezzutto et al. // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp [et al.]. Oxford: Oxford University Press, 1989. - P. 34-36.
80. B-cell antigens:CD 20 / B. Dorken, P. Moller, A. Pezzutto et al. // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp [et al.]. Oxford: Oxford University Press, 1989. - P. 46-48.
81. B-cell antigens:CD 22 / B. Dorken, P. Moller, A. Pezzutto et al. // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp [et al.]. Oxford: Oxford University Press, 1989. - P. 63-64.ill
82. Bennett, J.M. Classification of acute myeloid leukemia: A report of the French-American-British Cooperative Group / J.M. Bennett, D. Catovsky, M.T. Daniel // Ann. Intern. Med. 1985. - Vol. 103. - P. 620-624.
83. Bennett, J.M. Proposal for the recognition of minimally differentiated acute myeloid leukemia (AML-MO) / J.M. Bennett, D. Catovsky, M.T. Daniel // Br. J. Haematol. 1991. - Vol. 78. - P. 325-329.
84. Biological characteristics ofCD7 positive acute myelogenous leukaemia / T. Eto, K. Akashi, M. Harada et al. // Br. J. Heamatol. 1992. - Vol. 82. -P. 508-514.
85. Borowitz, M.J. Immunologic markers in childhood acute lymphoblastic leukemia / M.J. Borowitz // Hematol. Oncol. Clin. North Am. 1990. - Vol. 4. -P. 743-765.
86. Boyum, A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow / A. Boyum // Scand. J. Clin. Lab. Investig. 1968. - Vol. 21. - Suppl. 97. - P. 1-9.
87. Campana, D. Detection of minimal residual disease in acute leukemia: methodologic advances and clinical significance / D. Campana, C.H. Pui // Blood. 1995. - Vol. 85. - P. 1416-1434.
88. Campana, D. The expression of T cell receptor-associated proteins during T cell ontogeny in man / D. Campana, G. Janossy, E. Coustan-Smith // J. Immunol. 1989. - Vol. 142. - P. 57-64.
89. Campos L., Guyotat D., Gentilhomme O. et al. // Leucocyte typing III. Oxford: Oxford University Press, 1987. - P. 369-373.
90. Casoli, C. Phi-positive acute myelocytic leukemia with high TdT levels / C. Casoli, A. Bonati, B. Starich // Cancer. 1983. - Vol. 52. - P. 1210-1214.
91. Catovsky, D. The classification of acute leukaemia / D. Catovsky, E. Matutes // Leukemia. 1992. - Vol. 6. - P. 1 -6.
92. CD antigens antibodies // Information based upon Leukocyte Typing, Garland Publishing PRO 147. -1998.
93. Chang, L.M. Development of terminal deoxynucleotidyl transferase activity in embryonic calf thymus gland / L.M. Chang // Biochem. Biophis. Res. Commun.- 1971.-Vol. 44.-P. 124-131.
94. Characterization of a monoclonal antibody that defines an immunoregulatory T cell subset for immunoglobulin synthesis in humans / B. Haynes, D. Mann, M. Hemler et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. -Vol. 77.-P. 2914-2918.
95. Childhood leukemia: Cooperative Berlin-Frankfurt-Munster trials in the Federal Republic of Germany / J. Piter, V. Creutzig, A. Reiter et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1990. - Vol. 116. - P. 100-5.
96. Clinical and immunologic characteristics of CD 34 positive acute myeloid leukemia / M.B. Adamczyk-Cioch, A. Dmoszyncka, M. Hus et al. // Pol. Arch. Med. Wewn. 1995. - Vol. 94, № 1. - P. 40-46.
97. Clinical importance of CD7 expression in acute myelocytic leukemia. The Japan Cooperative Group of Leukemia/Lymphoma / K. Kita, H. Miwa, K. Nakase et al. // Blood. 1993. - Vol. 81, № 9. - P. 2399-2405.
98. Clinical significance of surface antigen expression in children with acute myeloid leukemia: results of study AML-BFM-87 / U. Creutzig, J. Harbott, C. Sperling et al. // Blood. 1995. - Vol. 86. - P. 3097-3108.
99. Coexpression of pi65 myeloid surface antigen and terminal ideoxynucleotidyl transferase: a comparison of acut myeloid leukemia and normal bone marrow cell / K. Bradstock, A. Kerr, A. Kabral et al. // Am. J. Haematol. 1986. - Vol. 23. - P. 43-50.
100. Consensus protokol for the flow cytometric immunophenotyping of hematopoietic malignancies / D. Adorf, S. Barlage, M. Gramatzki et al. // Leukemia. 1996. - Vol. 10. - P. 877-895.
101. Convention on nomenclature for DNA cytometry / W. Hiddemann, J. Schumann, M. Andreef et al. // Cytometry. 1984. - № 5. - P. 445-446.
102. Definision of acute biphenotypic leukemia / E. Matutes, R. Morilla, N. Farahat et al. // Haematologica. 1997. - Vol. 82. - P. 64.
103. Developmentally regulated rearrangement and expression of genes encoding the T cell receptor-T3 complex / A. Furley, S. Mizutanti, K. Weilbaecher et al. // Cell. 1986. - № 6. - P. 75-87.
104. Drexler, H. Classificatibn of acute myeloid leukemias-a comparison of FAB and immunophenotyping / H. Drexler // Leukemia. 1987. - № 1. - P. 697-705.
105. Early events in human T cell ontogeny. Phenotypic characterization and immunohistologic localization of T cell precursors in early human fetal tissues / B.F. Haynes, M.E. Martin, H.H. Kay et al. // J. Exp. Med. 1988. - Vol. 168.-P. 1061-1080.
106. Emdin, S.O. Prognostic value of DNA content in colorectal carcinoma: A flow cytometric study with some methodologic aspects / S.O. Emdin, R. Stenling, G. Roos // Cancer. 1987. - Vol. 60. - P. 1282-1287.
107. Ensley, J.F. The clinical application of DNA content and kinetic parameters in the treatment of patients with squamous cell carcinomas of the head and neck / J.F. Ensley // Cancer Metastasis Rev. 1996. - Vol. 15, № 1. -P. 133-41.
108. Expression of NK and lymphoid-associated antigens in blast cells of acute myeloblasts leukemia / M.B. Vidriales, A. Orfao, M. Gonzalez et al. // Leukemia. -1993. -Vol. 7, № 12. P. 2026-2029.
109. Expression of the neural cell adhesion molecule CD56 is associated with short remission duration and survival in acute myeloid leukemia with t(8;21)(q22;q22) / M.R. Baer, C.C. Stewart, D. Lawrence et al. // Blood. -1997.-Vol. 90. №4.-P. 1643-1648.
110. Flow cytometric analysis of human bone marrow: I. Normal erythroiddevelopment / M. Loken, V. Shah, K. Dattilio, C. Civin // Blood. 1987. 1. Vol. 69.-P. 255-263. t
111. Flow cytometric analysis of human bone marrow: II. Normal В lymphocyte development / M. Loken, V. Shah, K. Dattilio, C. Civin // Blood. -1987.-Vol. 70.-P. 1316-1324.
112. Flow cytometric characterization of acute myeloid leukemias. Part II. Phenotypic heterogeneity at diagnosis / L. Terstappen, M. Safford, S. Konemann et al. // Leukemia. 1992. - Vol. 6, № 1. - P.70-80.
113. Flow cytometric determination of atypical antigen expression in acute leukemia for the study of minimal residual disease / J. Drach, D. Drach, H. Glassl et al. // Cytometry. 1992. - Vol. 13. - P. 893-901.
114. Flow cytometry in clinical cancer research / B. Barlogie, M.N. Raber, J.
115. Schumann et al. // Cancer Res. 1983. - Vol. 43. - P. 3982-3997. i
116. Flow Cytometry: a practical approach / ed. by M.G. Ormerod. 2nd ed. -N.Y.: Oxford University Press, 1994. - 282 p.
117. Flow-cytometric detection of minimal residual disease with atypical antigen combination in patients with de novo acute myeloid leukemia / E. Plata, H. Choremi-Papadopoulou, V. Viglis, X. Yataganas // Ann. Hematol. -2000.-Vol. 79.-P. 543-546.
118. Foon, K. Immunologic classification of leukemia and lymphoma / K. Foon, R. Todd // Blood. 1986. -Vol. 68. - P. 1 -31.
119. Greaves M.F. // Cancer Surveys. 1982. - Vol. 1, № 2. - P. 189-204.
120. Hemmer, J. DNA aneuploidy by flow cytometry is an independent prognostic factor in squamous cell carcinoma of the oral cavity / J. Hemmer, E. Nagel, K. Kraft // Anticancer Res. 1999. - Vol. 19. - P. 1419-22.
121. Human lymphoma: clinical implications of the REAL classification / ed. by D.Y. Mason, N.L. Harris. London etc.: Springer-Verlag, 1999. - 554 p.
122. Hurwitz, C. Asynchronous antigen expression in В lineage acute lymphoblastic leukemia / C. Hurwitz, M. Loken, M. Graham // Blood. 1988. -Vol. 72.-P. 299-307.
123. Identification and characterization of normal human plasma cells by high resolution flow cytometry / L. Terstappen, S. Johnsen, I. Segers-Nolten, M. Loken // Blood. 1990. - Vol. 76. - P. 1739-1747.
124. Identification of breakpoints in t(8;21) acute myelogenous leukemia and isolation of a fusion transcript, AML 1/ETO with similarity to Drosphila segmentation gene, runt / P. Erikson, J. Gao, K.S. Chang et al. II Blood. -1992.-Vol. 80.-P. 1825-9.
125. Immature human thymocytes can be driven to differentiate into nonlymphoid lineages by cytokines from thymic epithelial cells / J. Kurtzberg, S.M. Denning, L.M Nycum et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. -Vol. 86.-P. 7575-7579.
126. Improved sensitivity and resolution in the flow cytometric DNA analysis of human solid tumor specimens / B.A. Bach, W.A. Knape, M.G. Edinger, R.R. Tubbs // Am. J. Clin. Pathol. 1991. - Vol. 96. - P. 615-627.
127. Janossy, G. The reliability of cytoplasmic CD3 and CD22 antigen exression in the immunodiagnosis of acute leukemia: A study of 500 cases / G. Janossy, E. Coustan-Smith,.D. Campana // Leukemia. 1989. - № 3. - P. 170181.
128. Jennings, C.D. Recent advantages in flow cytometry: application to the diagnosis of hematological malignancy / C.D. Jennings, F.A. Foon // Blood. -1997. Vol. 90, № 8. - P. 2863-2892.
129. Kersey, J.H. Fifty years of studies of the biology and therapy of childhood leukemia / J.H. Kersey // Blood. 1997. - Vol. 90. - P. 4243-51.
130. Koller, U. Cluster report: CD33 / U. Koller, C. Peschel // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp et al.. -Oxford: Oxford University Press, 1989. P. 812-813.
131. Kristensen, J.S. Monoclonal antibodies in myeloid diseases: prognostic use in acute myeloid leukaemia / J.S. Kristensen, R. Hokland // Leuk. Res. 1991. - Vol. 15, № 8. - P. 693-700.
132. Kurrle R. Cluster report: CD3 / R. Kurrle // Leucocyte Typing IV: White Cell Differentiation Antigens / ed. by W. Knapp et al.. Oxford: Oxford University Press, 1989. - P. 290-293.
133. Lanier, L. Correlation of cell surface antigen expression on human thymocytes by multi-color flow cytometric analysis: implications for117differentiation / L. Lanier, J. Allison, J. Phillips // J. Immunol. 1986. - Vol. 137.-P. 2501-2507.
134. Le Bien, T. The common acute lymphblastic leukemia antigen (CD 10)-emancipation from a functional enigma / T. Le Bien, R. McCormack // Blood. 1989. - Vol. 73. - P. 625-635.
135. Lineage ambiguity in acute leukemia / G. Roberts, S. Badawi, K. Sackey et al. // Cancer. 1986. - Vol. 58. - P. 1473-1478.
136. Morphologic, immunologic and cytogenetic studies in acute myeloid leukemia following occupational exposure to pesticides and organic solvents / A. Cuneo, F. Fagioli, I. Pazzi et al. // Leuk. Res. 1992. -Vol. 16, № 8. - P. 789-796.
137. Mosmann, T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assay / T. Mosmann // J. Immunol. Methods. 1983. - Vol. 65. - P. 55-63.
138. Neame, P. Classifying acute leukemia by immunophenotyping: A combined FAB immunologic classification of AML / P. Neame, P. Soamboonsrup, G. Browman // Blood. 1986. - Vol. 68. - P. 1355-1362.
139. Pediatric leukemia/lymphoma with t(8;14)(q24;ql 1) / B.J. Lange, S.C. Raimonda, N. Heerema et al. // Leukemia. 1992. - № 6. - P. 613-6.
140. Potter, M.N. The detection of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukaemia / M.N. Potter // Blood Rev. 1992. - Vol. 6. - P. 6882.
141. Prediction of relapse or survival in patients with node-negative. breast cancer by DNA flow cytometry / G.M. Clark, L.G. Dressier, M.A. Owens et al. // N. Engl. J. Med. 1989. - Vol. 320. - P. 627-633.
142. Predominance of functional multidrug resistance (MDR-1) phenotype in CD34+ acute myeloid leukemia cells / P.A. Boekhorst, K. de Leeuw, M. Schoester et al. // Blood. 1993. - Vol. 82, № 10. - P. 3157-3162.
143. Prognostic implications of proliferative activity and DNA aneuploidy in colonic adenocarcinomas / K.D. Bauer, S.T. Lincoln, J.M. Vera-Roman et al. // Lab. Invest. 1987. - Vol. 57. - P. 329-335.
144. Prognostic relevance of the expression of Tdt and CD7 in 335 cases of acute myeloid leukemia / A. Venditti, G. Del Poeta, F. Buccisano et al. // Leukemia. 1998. - Vol. 12. - P. 1056-1063.
145. Prognostic value of CD34 expression in de novo acute myeloblastic leukaemia / M. Guinot, G.F. Sans, A. Sempere et al. // Br. J. Haematol. -1991.-Vol. 78.-P. 533-534.
146. Prognostic value of cell marker analysis in de novo acute myeloid leukemia / G. Del Poeta, R. Stasi, A. Venditti et al. // Leukemia. 1994. -Vol. 8, №3.-P. 388-394.
147. Prognostic value of immunophenotypic characteristics of blast cells in acute myeloid leukemia / F. Lanza, G.M. Rigolin, S. Moretti et al. // Leuk. Lymphoma. 1994. - Vol. 13. - P. 81-85.
148. Prognostic value of immunophenotyping in acute myeloid leukemia. Australian Leukaemia Study Group / K. Bradstock, J. Matthews, E. Benson et al. // Blood. 1994. - Vol. 84, № 4. - P. 1220-1225.
149. Proposals for the immunological classification of acute leukemias. European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL) / M.C. Bene, G. Castoldi, W. Knapp et al. // Leukemia. 1995. - Vol. 9. - P. 1783-1786. -
150. Robertson, M.J. Biology and clinical relevance of human natural killer cells / M.J. Robertson, J. Ritz // Blood. 1990. - Vol. 76. - P. 2421-2438.
151. Rothe, G. Consensus protocol for the flow cytometric immunophenotyping of hematopoietic malignancies. Working Group on Flow Cytometry and Image Analysis / G. Rothe, G. Schmitz // Leukemia. 1996. -Vol. 10.-P. 877-895. ~ "
152. Rowley, J.D. A new consistent chromosomal abnormality in chronic myelpgenous leukaemia identified by quinacrine fluorescence and Giemsa staining / J.D. Rowley // Nature. 1973. - Vol. 243. - P. 290-3.
153. Second MIC cooperative study group: Morphologic, immunologic, and cytogenetic (MIC) working classification of the acute myeloid leukemias // Br. J. Haematol. 1988. - Vol. 68. - P. 487-494.
154. Selective expression of the common acute lymphoblastic leukemia (gplOO) antigen on immature lymphoid cells and their malignant counterparts / M. Greaves, G. Hariri, R. Newman et al. // Blood. 1983. - Vol. 61. -P. 628639.
155. Sen, L. Clinical importance of lymphoblasts with T markers in childhood acute leukemia / L. Sen, L. Borella // N. Engl. J. Med. 1975. - Vol. 292. - P. 828-32.
156. Subpopulations of common acute lymphoblastic lrukemia antigen-positive lymphoid cells in normal bone marrow identified by hematopoietic differentiation antigens / D. Ryan, S. Kossover, S. Mitchell et al. // Blood. -1986.-Vol. 68.-P. 417-425.
157. Terminal deoxynucleotidyl transferase expression in acute non lymphoid leukaemia: an analysis by immunofluresence / K. Bradstock, A. Hoffbrant, K. Ganeshaguru et al. // Br. J. Haematol. 1981. - Vol. 47. - P. 133-143.
158. Terminal deoxynucleotidyl transferase positive acute myeloid leukaemia: an association with immature myeloblasts leukaemia / A. Parreira, M. Pombo de Oliveira, E. Matutes et al. // Br. J. Haematol. 1988. - Vol. 69. -P. 219-224.
159. Terminal deoxynucleotidyl transferase positive subpopulations occur in the majority off ANLL: implications for the detection of minimal residual disease / H.J. Adriaansen, J. Van Dongen, M. Kappers-Klunne et al. // Leukemia. 1990. - № 4. - C. 404-410.
160. Terminal transferase-positive human bone marrow cells exhibit the antigenic phenotype of common acute lymphoblastic leukemia / G. Janossy, F. Bollum, K. Bradstock et al. // J. Immunol. 1979. - Vol. 123. - P. 15251529.
161. Terstappen, L. Flow cytometric analysis of human bone marrow / L. Terstappen, M. Safford, M. Loken // Leukemia. 1990. - № 4. - P. 657-663.
162. Terstappen, L. Myeloid cell differentiation in normal bone marrow and acute myeloid leukemia assessed by multi-dimensional flow cytometry / L. Terstappen, M. Loken // Anal. Cell Pathol. 1990. - № 2. - P. 229-240.
163. The role of ultrastruetural cytochemistry and monoclonal antibodies in clarifying the nature of undifferentiated cells in acute leukaemia / E. Matutes, M. Pombo de Oliveira, L. Foroni et al. // Br. J. Haematol. 1988. - Vol. 68. -P. 205-211.
164. The T(3;5)(q25.1;q34) of myelodysplastic syndrom and acute myeloid leukemia produces a novel fusion gene, NPM-MLF1 / N. Yoneda-Kato, A.T. Look, M.N. Kirstein et al. // Oncogene. 1996. - № 12. - P. 256-9.
165. The t(6;9)(p23;q34) shows consistent rearrangement of two genes and defines a myeloproliferation disorder with specific clinical features / D. Soekarman, M. von Lindern, S. Daemen et al. // Blood. 1992. - Vol. 79. -P. 2990-3.
166. The t(8;16)(pl l;pl3) of acute myeloid leukemia fuses a putative acetyltransferase to the CREB-binding protein / J. Borrow, U.P. Stanton Jr., M. Andersen et al. // Nature Genet. 1996. - № 14. - P. 33-36.
167. The value of detecting surface and cytoplasmic antigens in acute myeloid leukaemia / A. Urbano-Ispizua, R. Matutes, N. Villamor et al. // Br. J. Haematol. 1992. - Vol. 81. - P. 178-183.
168. Tsukimoto, I. Surface markers and prognostic factors in acute lymphoblastic leukemia / I. Tsukimoto, K. Wong, B.N. Lampkin // N. Engl. J. Med. 1976. - Vol. 294. - P. 245-256.
169. Vindelov, L.L. A detergent-trypsin method for the preparation of nuclei for flow cytometric DNA analysis / L.L. Vindelov, I.J. Chiristensen, N.I. Nissen // Cytometry. 1983. - № 3. - P. 323-327.
170. Wyllie, A.H. Apoptosis: cell death in tissue regulation / A.H. Wyllie // J. PathOl.- 1987.-Vol. 153, №2.-P. 313-316.