Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Иммунофенотип лимфоцитов крови больных меланомой кожи: результаты адъювантной иммунотерапии реафероном альфа 2 А.

РГ6 од

- 1 ЯНВ 1996

Богуш Илья Григорьевич

Иммунофенотип лимфоцитов крови больных меланомой кожи результаты адъювантной иммунотерапии реафероном альфа 2 А.

(14.00.14 - онкология)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва-1995

Работа выполнена в отделении опухолей опорно-двигательного аппарата НИИ клинической онкологии Онкологического Научного Центра РАМН (директор-академик РАМН Н.Н.Трапезников)

Научные руководители - доктор медицинских наук,профессор

З.Г. Кадагидае. кандидат медицинских наук Л.В. Демидов.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,профессор

Пенегин В.В. доктор медицинских наук Личиницер М.Р.

Ведущая организация Московский научно-исследовательский

онкологический институт им П.А.Герцена № МП РФ

Ж0/

Защита диссертации состоится в " " часов на ваоедании Специализированного Ученого сове та по присуждению ученой степени кандидата наук в Онкологическом Научном Центре РАМН по адресу: г. Москва, 115478, Каширское шоос«, 24

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке онкологического Научного Центра РАМН Автореферат разослан " " 1095. Ученый секретарь

Специализированного Ученого Совета

доктор медицинских наук,профессор В,С.Турусов.

Актуальность проблемы

Заболеваемость меланомой имеет тенденцию роста в многих отранах мира. В отличии от других опухолей кожи клиническое течение и прогное наиболее неблагоприятный. С увеличением уровня инвазии и толщины первичной опухоли возрастает риск развития метастазов и несмотря на радикальность проведенных оперативных вмешательств процент пятилетней выживаемости больных остается низким.

Проведение профилактической химиотерапии (препаратами Ими-дозолкарбоксамид (БТЮ), производными платины, мочевины ) после удаления первичной опухоли у больных меданомой кожи с выоокш риском метаставирования не оказало влияния на выживаемость больных;

Использование биологически активных веществ в терапии ме-ланомы дало определенные положительные результаты, что в свою очередь послужило основанием для их применения в схемах профилактического лечения.

Для проведения адекватной иммунотерапии необходимо оценить степень изменений иммунной системы больных. Изучения данных литературы показало, что использованные ранее методы оценки иммунитета такие, рак тест роэеткообразования, иммунофенотипирова-ние лимфоцитов с помощью моноклоиальных антител к дифференциро-вочным антигенам СО-3, СО-4, СО-8 оказались недостаточно информативными. В настоящее время принято считать, что наиболее информативным методом оценки иммуного статуса является иммунофе-нотипирование лимфоцитов периферической крови с помощью широкой панели моноклональных антител.

Исследований по изучению иммунного статуса больных мелано-

мой на основании использования широкой панели монокдональных антител очень мало, остаются не рассмотренными изменения иммунитета больных на ранних стадиях Оолеани, больных о лимфогенны-ми и отдаленными метастазами, не определены показатели иммунитета больных меданомой на этапах опухолевой прогрессии.

Анализ результатов иммунофенотипирования с помощью широкой панели монокдональных антител позволит оценить функциональное состояние иммунной системы на различных стадиях болезни, и при выявлении нарушений иммунитета применить адекватную иммунотерапию.

С появлением в практике рекймбинантных иммунопрепаратов расширились возможности их использования в терапии злокачественных опухолей,в последнее десятилетие многими исследователями отдается предпочтение рекомбинатныч интерферонам. Исследований по их применению в профилактическом режиме у больных меданомой немногочисленны. Их иммуномодулирующее действие,изучаемое с помощью широкой панели монокдональных антител не исследовалось,в связи о чем отсутствует информация о процессах переотройки иммунной системы в зависимости от проводимого лечения.

Исследования в этой области необходимы для.выяснения вопроса о значении иммунореактивности больных меланомой на ранних стадиях болезни,' о целесообразности иммунокорекции и ее последующем влиянии на сроки появления метастазов у больных меланомой после удаления первичной опухоли. Такой подход является актуальным для решения данной проблемы и важным как о теоретической так и о практической точек зрения.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью данного исследования явилось изучение широкого спектра популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови больных меланомой кожи, оценка результатов адъювантной иммунотерапии реафероном альфа 2 А у больных первой стадии после хирургического лечения.

ОСНОВНЫЕ РАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Сравнить исходных иммунологический статус больных меланомой и здоровых лиц.

. 2. Оценить показатели иммунитета в зависимости от клинико морфологических признаков первичной опухоли.

3. Провести анализ 'влияния реаферона на иммунный статус больных при проведении адъювантной иммунотерапии.

4. Оценить переносимость побочные реакции реаферона альфа-2 А в процессе адъювантной иммунотерапии.

: б; Оценить непосредственные результаты адъювантной иммунотерапии реафероном альфа 2-А.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

/

. Впервые, для изучения иммунитета больных меланомой кожи Использована широкая панель моноклональных антител. Выявлены общие. закономерности изменений показателей иммунной системы..

Сольных меланомой кожи на этапах опухолевой прогрессии. Отмечены особенности показателей иммунитета у больных меланомой I стадией о неблагоприятными прогностическими признаками.

Впервые' на клиническом материале проведена клиническая

оценка иммуномодулирувдего действия реаферона альфа 2 А, отме-

/

чено выраженное регуляторное действие реаферона альфа 2 А на иммунную систему больных меланомой кожи I стадии в режиме длительного применения.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Показана необходимось применения для исследования иммунн-ного статуса больных меланомой кожи широкой панели моноклональ-ньиС антител. Выявленные ивменения иммуного статуса могут предоставить возможность более точного прогноза появления регио-: нарных и отдаленных метастазов. Полученные результаты иммуноко-регирущей терапии в режиме длительного применения у больных меланомой кожи о неблагоприятными прогностическими признаками могут послужить основой для дальнейшего изучения, как один иа методов профилактики регионарных метастазов.

АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИИИ проведена 20.12.94 на совместной научной конференции отделений опухолей опорно-двигательного аппарата, амбулаторных методов исследования, лаборатории радиоиммунологии ОНЦ РАМН.

ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 110 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, главы материалы и методы, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы., Работа иллюстрирована 12 таблицами, библиография содержит ББ отечественных и 113 работ иностранных авторов.

С О Д Е Р а А Н И Е Р А Б О Т Ы'

Основу исследования составили 111 клинических наблюдений больных меланомой кожи от 29 до 60 лет. Средний возраст 46 лет; лечивщихся в отделении опухолей опорно-двигательного аппарата ОНЦ РАМН (зав отд. академик РАМН Н.Н.Трапезников). Исследования иммунного статуса проводились в лаборатории клинической радиоиммунологии (зав.-д.м.н. профессор 3.Г. Кадагидэе)

В иммунологических исследованиях контролем послужили практически здоровые доноры в возрасте от 35 до 60 лет (п-35) средний возраст 52 года. ^

Пациенты вошедшие в исследование были разделены на группы. В первую вошли больные меланомой кожи I стадией болезни 29 больных.

Во вторую 25 больных с регионарными метастазами. В третью 20 больных с отдаленными метастазами. В четвертую 27 больных, которым после хирургического лечения по поводу первичной ме&гйгомы туловища и конечностей проводилась адъювантная иммунотерапия реафероном альфа 2 А.

Исследование иммунологического отагуса всем пациентам проводили при поступления в стационар,(исходный иммунологический статуо) до проведения лечения. В лечебной группе проводились дополнительные исследования в процессе иммунотерапии еяемесяч- ■ но.

С целью иммунокорекции мы использовали реаферок - рекоиби-нантный альфа-интерферон. Вводили внутримышечно три раза в не-, делю в течении трех месяцев' в послеоперационном периоде по заживлению операционной рани, в дозе 1 млн. МЕ. курсовая дога составила 36 шш.МЕ.

Изучение иммунного отатуса включало:

1) Изучение фенотипа лимфоцитов периферической крови на основании реакции непрямой флюоресценции о использованием широкой панели моноклональных антиуел серии ККО к диференцировочным антигенам лимфоцитов.

2) определение концентрации оывороточных иммуноглобулинов. Специфичность использованных МКА представлена в (таблице 1)

У больных меланомой кожи с первичной опухолью в сравнении

о контрольной группой здоровых доноров рассмотренных при но' » . • *

пользовании широкой панели моноклональных антител, а также при определении иммуноглобулинов сыворотки крови, отмечаются следующие изменения: (таблица 2) выявлено снижение количества Т-лим-фоцитов экспрессирущих СО-З антиген, оупрерсорных/цитотокси-чёских-Т-клеток (СО-8), Т-хелперов/индукторов (СО-4), "активированных" лимфоцитов на которых представлены антигены (00-38, С0-451?А, С0-71).»' лимфоцитов акопрессирующих лкнейнонеограничен-ные антигены (Н1А-1, (ЯИйО, СО-45,) а г зк*е иммуноглобулина В

сыворотки крови; отмечено повышение количества В-лимфоцитов ( з 1М+), лимфоцитов зкспрессирующих рецептор к интерлейкину 2, сывороточного иммуноглобулина А.

ТАБЛИЦА 1

ПЕРЕЧЕНЬ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ДИФФЕРЕ1ЩИРОВОЧНЫМ АНТИ -ГЕНАМ ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ДЛЯ ФЕНОТИПИРОВАНИЯ ЛИШОЦИТОВ

Обозначение Название Молекул Специфичность в гейте

антигена МКА масса лимфоцитов

АГ(кД)

" 1 г 3

Сй-З ИК0-90 26 все Т -клетки

ССНб ИК0-80 67 все Т-клетки, субпапул.В-клеток

С1Ь7 ИК0-87 40 все Т-клетки,Ж-клетки

С1>4 ИК0-86 60 Т-хелперы/индукторы

СБ-8 ИКО-31 32 супрессорные/цитотоксичесие Т-

клетки

СИ-38 ИК0-20 45 Тимоциты,ИК-клетки,актив Т-клет

31ВМ иксьзо: В-лимфоциты

1С0-40 ИК0-40 активир,кл ^емопоэтич,предшеств

ни-1 ИКО-53 45,12 на всех леикоцитах

CD-W50 ИК0-60 95 на всех лейкоцитах

СО-4БИА . ИК0-66 40-52 В-кл,субпопуляции Т-клеток

СО-71 - ИК0-83 - рецептор к трансферту

СО-25 ИК0-105 . -- ■ рецептор к интерлеикину-2

С045 ИКО-46 200 на всех лейкоцитах

ТАБЛИЦА N 2

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ С НАЛИЧИЕМ ПЕРВИЧНОЙ ОПУХОЛИ

АНТИГЕН

¡ЛИМФОЦИТЫ* со-з

СО-б СО-7 СО-4 СО-8 ' з1ем НЦ\-1 Сй-У/БО СО-46 СО- 45ЙА СО-38 СЕЬ71 С1>25 1ЭЭ 10А 1Ш

ДОНОРЫ.П- 35

Среднее значение

X + ш 35.ОТ 1.6 67.0+ 2.4 65.0? 2.0 67.0+ 2.6 38.9Т 1.6 28.ОТ 1.8 5.4* 0.9 94.ОТ 1.3 96.ОТ 2.1 95.ОТ 3.1 56.0+ 4.9 38.0+ 3.1 6.0+ 2.0 З.ОТ 1.5

БОЛЬНЫЕ П- 39

Среднее значение

Абсол.+ ш 1920.4Т82.0 1240.0+69.0 1248.0Т65.0 1242.0+70.0 746.0Т41.0 •532.0+36.0 99.9ТЦ.0 1692.0+71.0 1721,0+62.0 171СР.0+91.0 1008.0Т98.0 840.0+42.0 115.0+17.0 ' 58.0Т10.0 150.0+11.3 110.0+23.0 150.0+10.0

Х+ Ш 25.4Т 0.9 60.2Т 1.6 67.ОТ 7.1 70.5Т 2.8 ЗЗ.ОТ 1.2 23.4Т 1.2 8.БТ 6.1 86.6Т 1.8 84.1Т 2.1 77.8+ 3.3 21.ОТ 2.9 23.9Т 1.Э 1.3+ 0.6 4.8Т 2.4

Абс. 1647. 1003. 1170. 1149. 578. 389. • 149. 1421. 1383. 1322. 356. 382. 70. 160. 104. 164. 152.

+ ш . Т72.41 +53.71 + 3.01 +71.68 +34.71 2+27.81

0 +62.21

1 Т69.71 О Т72.9 9 +85.1!

8 Т66.9! 7 T32.ll О Т 9.4В

9 Т39.1! 1+~ 3.9! 0+ 8.98 2± 9.21

* - Различия между показателями достоверны (р<0,05) о вероятностью 95,ОХ.

Оценивая иммунологические показатели больных о наличием регионарных метастазов (таблица 3)- отмечается снижение общего количества лимфоцитов , показателей Г-лимфоцитов (СО-З, СО-7) хелперов/индукторов (СО-4), при этом показатели супрессорных/ цитотоксических лимфоцитов остаются неизменными по сравнению с донорами.

Показатели лимфоцитов несущих линейнонеограниченкые антигены НЬА-1, СО-УЙО, Ср-45, активированных лимфоцитов С0-45ИА, СО-38, Сй-71 достоверно снижены и по мере увеличения размеров 'пораженных -лимфатических узлов данные показатели сни...ц»тся. Значительных изменений показателей В--лимфоцитов не происходит.

ТАБЛИЦА 3

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ КОЖИ С РЕГИОНАРНЫМИ МЕТАСТАЗАМИ

¡АНТИГЕН доноры п-35 ТхНаМо П-10 ТуИгМо П-15

X % X

«ЛИМФОЦИТЫ 35.0+ 1.6 26.6 +2.4 25.4 + 2.5

1С13-3 * 67.0+ 2.4 58.1 Т 1.8 61.9 Т 6.2

[СО-5 65.0+ 2.0 63.5 + 2.7 54.4 + 9.3

ВС0-7 * 67.0+ 2.6 52.8 + 2.0 63.4 + 2.3

8 СО-4 * 38.9+1.5 28.6 + 1.6 33.1 + 2.2

|С1>8 28.0+ 1.8 26.6 + 4.5 29.1 + 2.8

Ь^М 5.4+ 0.9 4.3 + 1.5 7.1 + 2.8

I1С0-40 23.0+ 2.5 35.5 + 8.2 28.5 + 3.9

* 94.0+ 1.3 82.9 + 3.4 78.2 + 9.8

|С0-И50 * 96.0+ 2.1 72.2 + 3.6 71.6 + 1.9

|С0-45 * 95.0+ 3.1 89.0 + 4.3 81.7 + 9.8

|С1)-451?А * 56.0+ 4.9 47.2 + 4.9 41.7 + 1.4

|С0-38 -. * 38.0+ 3.1 25.2 + 6.4 19.5 + 6.4

|С0-71 * 6.ОТ 2.0 4.1 + 1.9 1.9 + 3.4

|С0-25 "3.0+ 1,5 4;3 + 1.8 5.6 + 5.3

«и

* - Различия между показателями достоверны (р<0,05) с вероятностью 95,0%.

; Анализируя; показатели иммунитета больных с отдаленными метастазами (таблица 4) выявлено достоверное снижения показателей Т-лимфоцитов (СО-З.СЕЬб), хелперов\индукторов (СО-4)»показателей НЬА-1 СО-Ш50 СО-45 СБ-38, повышение показателей В-кле-ток,лимфоцитов экспрёссирующих рецептор к интерлейкину- 2.

ТАБЛИЦА 4.

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ МЕЛАНОМОЙ КОШ С ОТДАЛЕННЫМИ МЕТАСТАЗАМИ

|д-ры п-35 ТхИхМ! п-20

АНТИГЕН 1 X СО-З * 167.0+ 2.4 СО-5 * |б5.0+ 2.0 СО-4 * 138.9? 1.5 81кМ * I 6.4+ 0.9 Ни-1 * «94.0+ 1.3 С0-И50* |9б.0Т 2.1 013—45 * ¡95.ОТ 3.1 СО-38 * ¡38.0? 1 ССН25 * $ 3.0+XI.5 % 68.2+4.7 Б5.6Т5.7 32.0+2.4 18.6+2.6 82.6+6.2 85.1Т6.1 86.6*4.0 29.8*3.9 8.3+1.9

а - Различия между показателями достоверны (р<0,05) ' о вероятностью 95,ОХ.

При рассмотрении изменений показателей иммунного статуса в зависимости от динамики опухолевого процесса(таблица 5) выявле-V ни следующие тенденции характеризующие прегрессирование опухолевого процесса: при прогрессировании заболевания отмечается снижение Т-лимфоцитов СО-З, СБ-Б. СБ-7, С1)-4, (причем наиболее выраженные изменения отмечаются на стадии регионарного метаста-аирования) показателей лимфоцитов несущих линейнонеограниченные антигены НЬА-1, ЯИйО, СЕН45, активированных, лимфоцитов С0-4БЯА, СО-38. Показатели супрессорных/цитотокоичАСких клеток и лимфоцитов экспрессируюших рецептор к траноферину практически не изменяется в процессе метастазирования. ИЛ-2 несущие и В лимфоциты противоположно реагируют на прогрессировала опухоле-.вого процесса, отмечено их достоверное увеличение.

ТАБЛИЦА б

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ДИНАМИКИ ОПУХОЛЕВОГО

ПРОЦЕССА

{АНТИГЕН СО-З * |СО-Б ^ ¡СО-7 . ■» ¡СО-4 * ВСГ>-8'

доноры п-35

X

1С0-4

40

ки-1 *

СС-И50 * СО-46 * С0-451?А* СО-38 л СО-71 СО-¿5 *

67.0+ 2.4 65.ОТ 2.0 67.0+ 2.6 38.9+ 1.5 28.0+ 1.8 5.4Т 0.9 23.0+ 2.5 94.0+ 1.3 96.0+ 2.1 95.07 3.1 56.0+ 4.9 33.0+ 3.1 6. ОТ 2.0 _3.0Т 1.5

Т4МоМо П-60

X

60.2+ 1.0 67.ОТ 7.1 70.5+ 2.8 ЗЗ.ОТ 1.2 23.4+ 1.2 8.5+ 6.1 26.2Т 2.2 86.6+ 1.8 84.1Т 2.1 77.ВТ 3.3 21.ОТ 2.9 23.9+ 1.9 1.3Т 0.6 ; 4.8Т 2.4

Тх^1Мо п-25

%

58.1

63.5

52.8

28.6 26.6

4.3 35.5

82.9

72.2 89,0 47.2 25.2'

4.1 7.3

'1.8 2.7 2.0 1.6 5

1.5 8.2 3.4

3.6

4.3 4.9

6.4 1ч9

Т. 1.8

Тх^М! п«20|

X

58.2+4.7 55.6Т5.7 66.8+7.1 32.ОТ?,.4 28.9Т4.5 18.6+2.5 26.9Т4.5 82.6Т6.2 85.1Т6.1 86.6Т4.0 48.2Т6.3 29.8Т3.9 4.5Т2.8 8.3+1¡9

* - Различия между показателями достоверны (р<0,05) с вероятностью 95,ОХ.

Рассматривая иммунологические показатели больных меланомой кожи в зависимости от морфологических признаков первичной опухоли нами выявлены следующие различия : (.таблица 6) изменений показателей Т-лимфоцитов в обеих группах не выявлено, за исключением Т супрессоров, которые достоверно снижены у больных 2-ой группы. Процентное содержание В-лимфоцитов возрастает по мере увеличения уровня инвазии и.толщины опухоли. Характер» изменений лимфоцитов несущих рецепторы к интерлейкину имеет некоторые особенности: не отличается от нормы у больных с третьим уровнем

/

инвазии, и в 4 рааа превышает норму у больных с высоким уровнем инвазии. Показатели линейнонеограниченных антигенов достоверно снижаются по мере увеличения уровня инвазии первичной опухоли.

ТАБЛИЦА 6

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ПЕРВИЧНОЙ ОПУХОЛИ

донор п» 35 рТЗ П-23 рТ4 п=16

Антиген X ■ X %

Сй-З ■ 67.0+2.4 63.6+1.7 62.0+4.2

СО-5 65.ОТ 2.0 58.0+3.1 65.3+4.0

СГН7 67.0+ 2.6 78.0+2.6 74.2+4.3

СЭ-4 38.9+ 1.5 36,3+2.0 35.0Т4.8

СБ-8 * 28.ОТ 1.8 27.3Т2.1 21.0Т3.7

* 5.4Т 0.9 9.6+7.7 12.9+2.1

1С0-4О 23.ОТ 2.5 28.2Т4.2 33.1+4.?

ни-1 * 94.ОТ 1.3 90.8+1.4 84.8+5.5

CDW50 * 96.ОТ 2.1 87.7+2.0 75.5+0.5

СБ-45 * 95.ОТ 3.1 82.6+4.9 63.8+3.3

С0451?А * 56.ОТ 4.9 46.7+4.8 33.3+9.8

СО-38 * 38.0+ 3.1 25.9+3.1 22.3+8.2

СО-71 * 6.0+ 2.0 2.8Т0.6 1.4+0.4

СО-25 * З.ОТ 1.5 5.4+4.6 12.0+0.8

* Различия между показателями достоверны (р<0,С5) с вероятностью 95,ОХ.

Перед проведением иммунотерапии были обследованы больные получившие хирургическое .лечение по поводу первичной меланомы кожи, нами выявлено,(таблица 7) что у части больных на фоне исходно сниженных иммунологических'показателей после оперативного вмешательства происходит снижением ряда показателей. Так имеет-. ■ ся достоверное снижение Т-клеток (С0-5, СП-?) и их субпопуляций СО-4, СО-8, показателей активированных клеток ср-38, линейноне-

ограниченных клеток СО-45, НЬА-1, СО-У/БО/ Показатели В-лимфоцитов остаются увеличенными по сравнению с донорами практически вдвое.

С целью иммунокорекции нами был использован реаферон альфа 2А. Рассматривая изменения иммуного отатуса оперированных больных которые получали длительную иммунотерапию отмечена следующая картина: (таблица 7)

1) Применение реаферона вызывает повышение до нормальных показателей Т-клеток, нормализуются показатели В-лимфоцитов.

2) В результате терапии увеличиваются показатели . активированных лимфоцитов СИ-38.

3) Показатели линейнонеограниченных лимфоцитов приближаются к норме.

ТАБЛИЦА 7

. ПОКАЗАТЕЛИ ИШУНИТЕТА В'ПРОЦЕССЕ ИММУНОТЕРАПИИ'

АНТИГЕН

ССЬЗ

СЕЬБ

СО-7

Сй-4

С1>8

1С0-40

СО-Ш Сй-45 С0-451?А СО-38 СЮ-25

доноры

67.0+ 2.4 65.0+ 2.0 67.ОТ 2.6 38.9+ 1.5 28.0+ 1.8 5.4+ 0.9 23.0+ 2.5 94.07" 1.3 96.0+ 2.1 95.0+ 3.1 56.0+ 4.9 38.0+ 3.1 . 3.0+ 1.5

исход

%

61.4+1. 59.8+2. 57.8+2. 33.6+1. 24.4+3. 9.0+1. 15.1+2, 90.2*1. 86.7+2. 76.7+5. 44.3+2. 18.8+7. 5.9+4,

I Ш

X

63.0+2.4 Б8.0Т3.4 72.2*4.1 33.7*2.0 24.6*2.1 8.1*1.3 23.4+2.0 86.8+2.0 83.7+3.1 71.7+6.4 43.3+2.5 32.4+7.8 5.3+0.8

Ига.

%

64.9+4.3 49.2*4.4 67.8+8.2 28.8+2.9 28.9*6.1 ' 7.8*1.6 25.4+2.6 87.6+5.4 88.2+6.0 79.8*9.6 52.1+9.3 27.8+2.7 3.0+0.6

ППп

X

66.6+4.4 62.2+1.3 78.8+4.1 35.6+4.1 25.1+3.6 4.8*1.3 28.0+5.7 89.5+6.2 90.0+3.2 87.1*4.0 54.0+9.8 ЗЯ, 2*1.7 .. 3.3+0.6

* - Различия между показателями достоверны (р<0,05) о вероятностью 95,02.':

- 1В -

В оценке побочных реакций-мы использовали рекомендации ВОЗ и Международного противоракового союза для учета токсичности. В процессе адъювантной иммунотерапии наиболее выраженными и частыми побочными реакциями являлись (таблица 8) гипертермические реакции, которые сопровождались гриппоподобными симптомами, как вялость, лихорадка, озноб, мышечные боли, головная боль, боли в суставах и потливость, возникающие в день инъекций реаферона. Эти симптомы частично купировались с помощью жаропонижающих средств и антигистаминных препаратов. У 22 больных (81,4 %) получающих лечение отмечалась I степень побочных проявлений препарата (повышение I тела в дни инъекций < 38°С ), и у 5 (18,6%) отмечалась II степень (повышение Ь 38-40). Дадные побочные реакции сохранялись как правило в течении первого месяца лечения.

Вторым по частоте.и выраженности побочных и токсических действий реаферона в режиме"его длительного применения нами отмечено его действие на кожу. Часть 'кожных проявлений носило отчетливо аллергический характер. В 44,4% случаев (12 больных) в первый месяц наблюдения у больных отмечались высыпаний в виде эритемы на месте введения препарата, которая сопровождалась стойким зудом.

У двух пациентов (7,4%) на первые* инъекции реаферона развилась диссемшированная сыпь аллергического характера, которая исчезла после приема антигистаминных препаратов.

Гематологические побочные проявлений были следующие: у 8 (29,6%) больных наблюдалась преходящая лейкопения I степени токсичности, у 4 больных (14,8%) в первом месяце лечения отмечалась кратковременная тромбоцитопения соответствующая I степе-

ни токсичности не требующая отмены препарата.

Из 8 пациентов у которых были отмечены желудочно -кишечные побочные влияния у 3 больных (11,IX) имелись потеря аппетита и тошнота, изменения вкусовых ощущении, потеря в весе, у пяти •(18,5%) пациентов наблюдались изменения в функции печени, выражающиеся в повышении уровня АСТ, ■ ДЛТ и билирубина, которое не требовали отмены лечения и соответствовали 1-П степени токсичности.

При рассмотрении токсического действия на почки, нами выявлено, что у шести (22,2%) пациентов отмечалось незначительное повышение крёатинина мочевины сыворотки крови соответствующие I степени токсичности.

ТАБЛИЦА 8

ПОБОЧНЫЕ ПРОЯВЛЕНИЯ РЕАФЕРОНА В ПРОЦЕССЕ ИШУНОТЕРАПИИ

I степень токсичности |

1Побочны» проявления Температура Катила дерматит эритема на месте введения гематологические лейкопения тромбоцитопения желудочцокишечниа трансаминааы тошнОта Почечные креатинин.мочевина НеЯротакскчность. (сонливость- I II III IV

22 81,4% 2 7,4% 44,4% 8 29,6% 4 14,8% б 18.6* 3 29,6% 6 22,2% 7 26,9% 5 18,6%

При оценке побочных действий на центральную и периферическую нервную систему можно отметить, что у 7 больных (25,9%) в начале курса адъювантной иммунотерапии отмечались слабые • головокружения, сонливость, нервозность, нарушения сна.

Таюм образом, при проведении иммунотерапии реафероном альфа 2 А в режиме длительного использования нами отмечено, что побочные проявления носят кратковременный характер и соответствуют I степени токсичности, и наиболее частые из них связаны с токсическим действием препарата на кожу, и температурную регуляцию.

Одной из очередных задач нашего исследования было оцешиь сроки и частоту'регионарного метастазирования больных пог/чпо-щих адъювантную иммунотерапию,реафероном в течении двух дет наблюдения в сравнении с контрольной группой больных получивших хирургическое лечение, (таблица у)

" ТАБЛИЦА 9

2- ЛЕТНЯЯ БЕЗМЕТАСТАТИЧЕСКАЯ ВЫЖИВАЕМОСТЬ БОЛЬНЫХ ЛЕЧЕБНОЙ И КОНТРОЛЬНОЙ ГРУШ

лечебная РТЗ-ШоМо. . П=27 контрольная рТЗ-Т4МоМо п= 39 . ;

появились МТС регионарные 6 (22,2%) регионарные 15 (38,4,%) .

сроки появления МТС ( 9,5+1,3) (Б.1+1,2)

"Так, в лечебной группе у больных получивших иммунотерапию зреди 27 пациентов у 6 пациентов (Е2.2Х) регионарйые метастазы появились в сроки от 6 до 16 месяцев (средние 8,5 месяцев), из 39 больных получивших хирургическое лечение у 15 (38,42) паци-энтов метастазы появились в сроки, от 3 до 12 месяцев (средние 5,1 месяцев). Из 6 больных получающих иммунотерапию у 2-х боль-*ых через один год после лечения минуя стадию регионарного ме-гаотазирования были диагностированы гематогенные метастазы в висцеральные органы.

Суммируя вышеизложенное мы пришли' к следующим выводам.

ВЫВОДЫ

1. Иммунный статус больных меланомой кожи первой стадии <аракт^риауется снижением количества Т- лимфоцитов и их. субпо-чуляций. активированных клеток, лимфоцитов несущих линейнонеог-?аниченные антигены.

2. Увеличение уровня инвазии первичной опухоли сопровождался снижением количества Т супрессоров,повышением числа В-кле-гок и лимфоцитов несущих рецептор к интерлейкину 2.

3. При прогрессировании опухолевого процесса снижаются показатели Т-лимфоцитов, хелперов/ индукторов, лимфоцитов экспре-зирущих линия-неограниченные антигены, активированных клеток, увеличивается количество В-клеток, и лимфоцитов о рецепторами к интерлейкину 2 .

4.При проведении ад-ьювантной иммунотерапии реафероном в режиме длительного использования выявлено, что применение реа-

ферона вызывает повышение до норкфдоных уровня Т-клеток CD-5 CD-7 CD-4,нормализуется показателей В-лимфоцитов, увеличиваются показатели активированных лимфоцитов С0-38,показате-ш линейно-неограниченных лимфоцитов приближаются к норме.

Б. Побочные реакции реаферона альфа 2 А в режиме длительной иммунотерапии несущественны и соответствуют I степени токсичности (по классификации ВОЗ).

6. В результате адыовантной иммунотерапии реафероном проведенной после хирургического лечения у больных меланомой I стадией с высоким риском метаставирования отмечается увеличение показателей безметастатической выживаемости, по сравнению о больными получившими только хирургическое лечение.

Список работ,опубликованных ло теме диссертации:

1. Демидов Л.В.Богуш И.Г. Профилактическая иммунотерапия ые тастатической меланомы (N1-2 МО) препаратом POLY-A/POLY U после радикального хирургического лечения. Вестник ОНЦ РАМН приложение- 1994 с 80-82.

2. Демидов Л.В. Богуш И.Г.Ившина A.B. Заботина Т.Н. Кадагвдз З.Г. Профилактическая иммунотерапия рекомбинантным интерфероном альфа 2 -А у больных Меланомой кожи после хирургического лечения. / РАМН ОНЦ.- М. 1995 -8 с.Рук. деп.в ГЦНМБ N Д-24616 от 26.05.95.

3.Богуш И.Г Демидов Л.В.. Ившина A.B. Заботина Т.Н. Када-гидзе З.Г. Показатели иммунитета'больных меланомой кожи / РАМН ОНЦ.- М. 1995 -8 с.Рук. деп.в ГЦНМБ N Д-24617 от 26.05.95,