Автореферат и диссертация по медицине (14.00.01) на тему:Иммунные механизмы "созревания" шейки матки у певобеременных женщин перед родами

На правах рукописи

¡11111111111111111«

003483Э96

ДОРОФЕЕВА НАТАЛИЯ КОНСТАНТИНОВНА

ИММУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ «СОЗРЕВАНИЯ» ШЕЙКИ МАТКИ У ЖЕНЩИН ПЕРЕД РОДАМИ

14.00.01. — акушерство и гинекология

Автореферат д ^д^

диссертации на соискание ученой степени ' '

кандидата медицинских наук

Иваново - 2009

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н.Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» Научные руководители -Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук,

профессор Посиссева Любовь Валентиновна:

доктор медицинских наук,

профессор Сотннкова Наталья Юрьевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

(ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава»)

Качалина Татьяна Симоновна кандидат медицинских наук (ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Росздрава»)

Кернмкулова Надежда Вячеславовна Ведущая организация - Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет»

Защита состоится «_» декабря 2009г. в_часов на заседании диссертационного

совета Д208.028.01 при Федеральном государственном учреждении «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н.Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» по адресу: 153045, г.Иваново, ул.Победы, 20.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федеральном государственном учреждении «Ив НИИ МиД им. В.Н. Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи»

Автореферат разослан «_» ноября 2009г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

И.А.Панова

Актуальность проблемы

В современном практическом акушерстве проблема подготовки к родам остается чрезвычайно актуальной. В настоящее время отмечается выраженное снижение числа женщин, у которых беременность и роды протекают без осложнений (Айламазян Э.К., 2007). Биологическая готовность к родоразрешению- необходимое условие для нормального течения родов (Быковская JI.H., 2003). Подготовленность женского организма к родам в значительной степени определяется состоянием шейки матки (Чернуха Е.А., 2005). «Зрелость» шейки матки достигается в результате сложного комплекса изменений в организме беременной, затрагивающих нейрогуморальную, эндокринную и иммунную системы как материнского организма, так и фетоплацентарного комплекса (Посисеева Л.В., 2006, Воскресенский С.Л., 2007).

В ряде работ было продемонстрировано, что фагоциты, инфильтрирующие ткань шейки матки и продуцируемые ими цитокины, а также другие биологически активные молекулы, непосредственно участвуют в ремоделировании тканей шейки матки (Timmons B.C., 2009). Однако данные об особенностях функционирования фагоцитарных клеток на системном уровне на разных этапах подготовки организма к родам практически отсутствуют. Остаются не изученными механизмы, определяющие выход циркулирующих фагоцитов из сосудистого русла в ткань и их взаимодействие с белками внеклеточного матрикса. Белкам из семейства матриксных металлопротеиназ (ММР), а также хемокинам отводится основная роль в осуществлении процесса «созревания» шейки матки на локальном уровне (Соболева Г.М., 2007; Törnblom S.A., 2005). Известно, что фагоциты являются одними из основных продуцентов ММР и хемокинов (Просекова Е.В., 2007; Пинегин Б.В., 2007). Однако в литературе отсутствуют данные о характере продукции фагоцитами протеолитических молекул и IL-8 на разных этапах подготовки организма к родам на системном уровне.

В настоящее время доказано, что ТСРр играет чрезвычайно важную роль в регуляции иммунологических взаимоотношений матери и плода на всем протяжении гестационного процесса (ТЬеШп О., 2005). Ранее было показано, что к концу беременности происходит снижение продукции ТОрр, связанное с отсутствием необходимости на данном этапе иммуносупрессии (Сотникова

H.Ю., 2005). Однако в литературе отсутствуют данные о динамике сывороточного содержания ТОРР2 в процессе «созревания» шейки матки у женщин в конце гестации.

Таким образом, определение особенностей функционального состояния периферических фагоцитов и продукции цитокинов на разных этапах подготовки организма к родам позволит уточнить системные иммунные механизмы, определяющие «созревание» шейки матки, на основании которых можно будет разработать новые прогностические критерии готовности к родам, что имеет большое значение для практического акушерства.

Цель исследования:

Установить роль периферических фагоцитов и продуцируемых ими хе-мокинов и протеолитических ферментов, а также ТОР|32 в процессах подготовки шейки матки к родам у первобеременных женщин, на основании чего разработать новые прогностические критерии «созревания» шейки матки и характера течения родовой деятельности.

Задачи исследования:

I. Определить медико-биологические факторы риска, связанные с неэффективностью подготовки организма к родам у первобеременных женщин.

2. Установить особенности экспрессии СЭ49е и С062Ь молекул и внутриклеточной продукции 1Ь-8 нейтрофилами и моноцитами периферической крови первобеременных при различной степени «зрелости» шейки матки.

3. Определить уровень экспрессии мРНК 1Ь-8, ММР-9 и Т1МР-1 нейтрофилами периферической крови первобеременных при различной степени «зрелости» шейки матки.

4. Установить закономерности изменения сывороточного содержания TGFP2 у первобеременных женщин при различной степени «зрелости» шейки матки.

5. Разработать новые прогностические критерии «созревания» шейки матки у первобеременных женщин и характера течения родовой деятельности.

Научная новизна исследования:

Впервые установлено, что процесс «созревания» шейки матки у первобеременных женщин при доношенной беременности сопровождается выраженными изменениями функционального состояния фагоцитов периферической крови, характеризующиеся усилением экспрессии интегриновых молекул CD62L на поверхности нейтрофилов и моноцитов и рецепторов к фибронектину периферическими нейтрофилами.

Показано, что подготовка организма к родам ассоциирована с изменением баланса активности протеолитических и антипротеолитических ферментов, продуцируемых периферическими нейтрофилами. При отсутствии готовности организма к родам в периферических нейтрофилах преобладает антипротеолитическая активность за счет низкого уровня синтеза ММР-9, тогда как у женщин со «зрелой» шейкой матки - доминирует протеолитическая активность за счет выраженного повышения экспрессии мРНК ММР-9.

Установлено, что в процессе «созревания» шейки матки происходит прогрессивное снижение содержания периферических нейтрофилов, экспрес-сирующих внутриклеточно IL-8.

Выявлено, что сывороточное содержание TGFp2 снижается по мере развития готовности организма к родам и достигает минимальных значений у женщин со «зрелой» шейкой матки.

Показано, что у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки уровень экспрессии интегриновых молекул на поверхности периферических фагоцитов связан с эффективностью медикаментозной подготовки организма к родам, а уровень экспрессии мРНК ММР-9 и IL-8- с патологическим прелиминарным периодом и нарушениями сократительной деятельности матки в родах.

Практическая значимость:

Разработан и предложен в клиническую практику новый способ прогнозирования «созревания» шейки матки в процессе подготовки организма к родам па основании определения относительного содержания СЭ49е позитивных нейтрофилов в периферической крови первобеременных женщин в 38-39 недель гестации (положительное решение о выдаче патента на изобретение от 01.10.09).

Положения, выносимые на защиту:

Процесс «созревания» шейки матки у первобеременных женщин ассоциирован с изменением функционального состояния фагоцитарных клеток периферической крови, которое проявляется в прогрессивном усилении экспрессии интегриновых молекул С062Ь на поверхности периферических фагоцитов, увеличении содержания нейтрофилов с рецепторами к фибронектину, повышении уровня экспрессии мРНК ММР-9 в периферических нейтрофилах при одновременном снижении сывороточного содержания ТОРР2 и количества циркулирующих нейтрофилов, продуцирующих внутриклеточно 1Ь -8.

Эффективность медикаментозной подготовки организма к родам ассоциирована с изначально высокими уровнями С049е+ и СБ62Ь+ нейтрофилов и СОб2Ь+ моноцитов, а также низким содержанием 1Ь-8+ нейтрофилов в периферической крови первобеременных. Развитию аномалий родовой деятельности предшествуют низкие уровни экспрессии мРНК 1Ь-8 и ММР-9 периферическими нейтрофилами.

Показатель относительного содержания С049е позитивных нейтрофилов в периферической крови первобеременных женщин в 38-39 недель гестации служит прогностическим критерием «созревания» шейки матки в процессе подготовки организма к родам.

Внедрение результатов в практику:

Разработанный новый способ прогнозирования «созревания» шейки матки прошел предрегистрационное испытание в акушерской клинике

Федеральном государственном учреждении «Ивановский НИИ материнства и детства имени В.Н.Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи ».

Апробация работы: Основные результаты исследований по теме диссертации докладывались и обсуждались на научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 75-летию со дня рождения основателя института, профессора, Заслуженного деятеля науки РФ, Заслуженного врача РФ Виктора Николаевича Городкова (Иваново, 2007) и конференции молодых ученых, посвященной памяти основателя института, профессора, Заслуженного деятеля науки РФ, Заслуженного врача РФ Виктора Николаевича Городкова (Иваново, 2009).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ. Личное участие автора: Автором самостоятельно производилось обследование беременных женщин перед родами, проводилось динамическое наблюдение за ними, а также прослежены исходы беременности у обследованных, проведена систематизация и статистическая обработка полученных результатов.

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на 161 странице машинописного текста, содержит введение, обзор литературы, 3 главы собственных исследований, обсуждение результатов, выводы и практические рекомендации, список литературы, включающий 265 источников. Работа иллюстрирована 32 таблицами, 11 рисунками и 1 схемой. Содержание работы Материалы и методы исследования:

Обследовано 106 первобеременных женщин в сроке гестации 38- 40 недель, поступивших на дородовую госпитализацию в ФГУ «Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи».

В зависимости от степени «зрелости» шейки матки (по шкале Е.Н.В'^Ьор) обследованные женщины были разделены на 3 группы: первую группу

составили 30 первобеременных со «зрелой» шейкой матки (9-13 баллов), вторую- 35 первобеременных женщин с «недостаточно зрелой» (6-8 баллов) и третью - 4] первобеременная, имевшая «незрелую» шейку матки (0-5 баллов).

Для уточнения особенностей исследуемых иммунологических показателей в конце гестационного периода и до начала физиологических процессов ремоде-лирования тканей шейки матки дополнительно было обследовано 16 первобеременных женщин в сроке гестации 36 недель, не отличавшихся по анамнезу и соматическому состоянию от женщин основных клинических групп наблюдения и не имевших признаков угрожающих преждевременных родов.

Иммунологическое обследование проводилось однократно при взятии женщины в исследование. Беременным, имевшим «незрелую» и «недостаточно зрелую» шейку матки проводилась комплексная подготовка организма к родам, включающая в себя ежедневные инъекции в течение 7-10 дней 3 мл 5% раствора аскорбиновой кислоты в/в, введение спазмолитиков (но-шпа 2,0 в/м, галидор 2,0 в/м, свечи «Бускопан» 1 свеча per rectum). Динамика «созревания» шейки матки во второй и третьей группах оценивалась при влагалищном исследовании 1 раз в 7 дней.

Наряду со сбором анамнестических сведений, акушерским и общеклиническим исследованиями проводилось наблюдение за состоянием плода с использованием ультразвукового сканирования и кардиотокографии.

Материалом для исследования служила периферическая венозная

кровь.

Иммунологические методы исследования:

- Выделение обогащенных популяций моноцитов и нейтрофилов из периферической крови осуществляли стандартным методом скоростного центрифугирования в двойном градиенте плотности фиколл-верографина (d=I,078, d=l,l 14) (Boyum Л.,1968).

- Определение фенотипа и внутриклеточного синтеза цитокинов периферическими моноцитами и нейтрофилами с помощью моноклональных антител (мАТ) (CALTAG Laboratories, USA) методом проточной цитофлюори-

метрии на приборе FACScan (Becton Dickinson, USA). В работе использованы следующие антитела: коньюгированные с FITC анти-СОб2Ь, коньюгиро-ванные с РЕ анти-С049е, анти- IL-8 антитела. При оценке внутриклеточной продукции IL-8 нейтрофилами и моноцитами предварительно проводили процедуру пермеабилиазации клеточной мембраны с использованием коммерческого набора FIX & PERM cell permeabilization kit (CALTAG Laboratories, Burlingame, CA, USA).

- Определение экспрессии мРНК MMP-9, TIMP-1 и IL-8 нейтрофилами периферической крови методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в масштабе реального времени, на амплификаторе с оптической насадкой iCycler iQ (BIO-RAD, USA). В работе использовали праймеры и зонды для IL-8 и р2-микроглобулина, синтезированные в лаборатории генной инженерии гематологического научного центра РАМН (г. Москва, зав. лабораторией Мисюрин A.B.).

-Содержание TGFß2 в сыворотке крови определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) на микропланшетном ридере Multiscan EX (Labsystems, Finland) с помощью коммерческой тест-

системы (Bender MedSystems, Austria, Europe).

Статистическая обработка данных:

Статистическая обработка результатов проводилась на ПК Intel Pentium 4, функционирующем под управлением операционной системы Microsoft Windows ХР, с использование программных компонентов пакета Microsoft Office 2003.

Результаты исследования и их обсуждение.

Возраст обследованных беременных колебался от 17 до 32 лет. Группы практически не отличались по среднему возрасту, характеру менструальной функции и началу половой жизни.

При оценке данных гинекологического анамнеза первобеременных женщин была выявлена высокая частота гинекологических заболеваний (83,3%, 80,0% и 78,0% по группам соответственно, р>0,05). В структуре ги-

некологической патологии наиболее часто встречались воспалительные процессы гениталий (73,3%, 51,43% и 61,0% соответственно по группам), эктопия шейки матки (50,0%, 54,3% и 36,6% в группах соответственно) (р>0,05 во всех случаях).

Соматически здоровых женщин было соответственно в группах: 16,7%, 37,1% и 34,1% (р>0,05). В третьей группе было больше обследованных, страдавших нейроциркуляторной дистонией по смешанному типу (9,8%), а также патологией щитовидной железы (17,1%) (р<0,05 в обоих случаях).По остальным нозологическим формам экстрагенитапьной патологии клинические группы практически не различались между собой.

Анализ осложнений настоящей беременности выявил, что у 96,2% женщин всех групп беременность протекала с отклонениями. Достоверно чаще в третьей группе отмечался ранний гестоз (24,4%) и анемия третьего триместра (48,8%) по сравнению с первой группой (6,7%, р<0,05 и 2.0,0%, р<0,01). Угроза прерывания по трем триместрам беременности регистрировалась приблизительно одинаково во всех клинических группах.

С целью уточнения иммунных механизмов, участвующих в подготовке организма к родам, было проведено исследование характера экспрессии интегриновых молекул С049е и СБ62Ь на поверхности периферических моноцитов и нейтрофилов в конце гестации. Анализ полученных данных показал, что процесс «созревания» шейки матки сопровождался динамическим повышением экспрессии СБ49е и СБ62Ь молекул на поверхности нейтрофилов, а также СБ62Ь на поверхности моноцитов периферической крови беременных женщин. Так, в группе женщин со «зрелой» шейкой матки уровень С049е+ нейтрофилов в периферической крови составил 49,93±2,81%, достоверно ниже данный показатель был в группе женщин с «недостаточно зрелой» шейкой матки (41,32±2,35%, р<0,02) и с «незрелой» шейкой матки (32,48±1,91%, р<0,01 по сравнению с группой с «недостаточно зрелой» шейкой матки и р<0,001 по сравнению с женщинами со «зрелой» шейкой матки). Минимальные значения С049е+ нейтрофилов были в дополнительно обсле-

и

дованной группе беременных в 36 недель гестации:23,17±1,89 (р<0,001 по сравнению со всеми группами). Относительное содержание СБ62Ь+ нейтро-филов в трех основных клинических группах имело аналогичную тенденцию: 74,03±5,55%- в группе со «зрелой» шейкой матки, 66,92±2,43%- в группе с «недостаточно зрелой» шейкой матки, 39,94 ±7,30%- в группе с «незрелой» шейкой матки (р<0,01 по сравнению с группами со «зрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки) и 34,10± 4,05%- в 36 недель гестации (р<0,001 по сравнению с группами со «зрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки). Экспрессия СБ62Ь молекул на поверхности периферических моноцитов, также увеличивалась в процессе подготовки организма к родам и составила соответственно по группам: 69,67±2,52%, 63,50±2,81%, 48,21±4,66% (р<0,01по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки и р<0,02 по сравнению с группой с «недостаточно зрелой» шейкой матки) и 37,51 ± 5,09% (р<0,001по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки и р<0,01 по сравнению с группой с «недостаточно зрелой» шейкой матки).

Известно, что молекулы СБ62Ь определяют взаимодействие клеток с эн-дотелиоцитами, регулируя процессы выхода клеток из сосудистого русла в ткань (Ьаис1аппа С., 2006). По-видимому, увеличение экспрессии С062Ь молекул на поверхности нейтрофилов и моноцитов периферической крови у женщин в конце гестации является одним из механизмов, определяющих усиленную миграцию нейтрофилов и моноцитов в ткань шейки матки непосредственно перед развязыванием родовой деятельности.

Молекулы С049е являются рецепторами к фибронектину, одному из основных компонентов внеклеточного матрикса тканей шейки матки, деструкция которого непосредственно обуславливает «созревание» шейки матки (Воиеп ./.А., 2000). Выявленное нами увеличение экспрессии СБ49е молекул на поверхности периферических нейтрофилов, по-видимому, можно рассматривать как один из пусковых этапов тканевого ремоделирования шейки матки.

Учитывая выявленные нами значительные изменения в экспрессии функциональных молекул на поверхности периферических нейтрофилов в процессе «созревания» шейки матки, мы оценили также характер экспрессии нейтрофилами периферической крови мРНК матриксной металлопротеиназы-9 (ММР-9) и ее тканевого ингибитора-1 (Т1МР-1) у женщин с различной степенью готовности организма к родам. Было установлено, что в процессе «созревания» шейки матки перед родами происходит постепенное повышение экспрессии гена ММР-9 периферическими нейтрофилами. Так, в группе женщин со «зрелой» шейкой матки данный показатель был максимальным (35,86±9,26х104 копий пар/мкл), группе с «недостаточно зрелой» шейкой матки он был достоверно ниже (10,75±6,15х104 копий пар/мкл, р<0,05 по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки), у женщин с «незрелой» шейкой матки этот показатель составил 2,48±0,92х104 копий пар/мкл (р<0,01 по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки). Следует отметить, что у женщин в 36 недель гестации уровень экспрессии гена ММР-9 периферическими нейтрофилами был минимальным, ниже предела детектируемых значений (р<0,01 по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки).

Динамика экспрессии тканевого ингибитора ММР-9 - Т1МР-1 была иной и характеризовалась снижением уровня экспрессии этого гена на начальных этапах «созревания» шейки матки (12,83±б,22х103 копий пар/мкл- в 36 недель; 8,33±1,58х103 копий пар на мкл- у женщин с «незрелой» шейкой матки, р>0,05), достигая минимальных значений в группе женщин с «недостаточно зрелой» шейкой матки (4,20±1,30х103 копий пар/мкл р<0,02 по сравнению с группой со «зрелой» шейкой матки). Однако к моменту родоразрешения отмечалось повышение уровня экспрессии мРНК Т1МР-1 нейтрофилами периферической крови (18,72±5,25х103 копий пар/мкл). Для уточнения соотношения про- и антипротеолитической активности периферических нейтрофилов у женщин с разной степенью подготовленности к родам был рассчитан индекс соотношения активности

ММР-9 и TIMP-1. Анализ этого показателя выявил преобладание антипротеолитической активности нейтрофилов на начальных этапах процесса подготовки организма к родам, которое сменялось доминированием протеолитической активности периферических нейтрофилов при полностью «созревшей» шейке матки.

Известно, что ММР-9, или желатиназа, гидролизует коллаген и эластин базальных мембран (Соболева Г.М., 2007). Выявленное нами повышение уровня экспрессии ММР-9 нейтрофилами в процессе «созревания» шейки матки с одной стороны свидетельствует о том, что изменения в синтезе про-теолитических молекул могут способствовать непосредственному разрушению структурных компонентов межклеточного матрикса, а также опосредованно вызывать больший приток фагоцитов в ткани шейки матки, дегрануля-ция которых приводит к увеличению концентрации деструктивных веществ на локальном уровне. Выявленное нами повышение уровня экспрессии мРНК ММР-9 периферическими нейтрофилами на начальных этапах «созревания» шейки матки может быть связано с одновременным снижением уровня ее непосредственного ингибитора- TIMP-1.

Рекрутирование нейтрофилов в ткань шейки матки определяется в основном высоким локальным уровнем продукции IL-S, являющегося одним из наиболее сильных хемоаттрактантов для нейтрофилов (ТбгпЫош S.A, 2005). Однако особенности системной продукции IL-8 на разных этапах подготовки организма к родам остаются до конца не установленными.

Нами было выявлено, что процесс «созревания» шейки матки на системном уровне не сопровождался значительными изменениями экспрессии нейтрофилами мРНК IL-8. Анализ относительного содержания IL-8+ нейтрофилов в периферической крови беременных женщин с разной степенью готовности организма к родам показал, что в группе со «зрелой» шейкой матки уровень IL-8+ нейтрофилов был минимальным- 61,28±3,51%, в группе женщин с «недостаточно зрелой» шейкой матки относительное содержание IL-8+ нейтрофилов составило- 62,73±3,4%. У женщин с

«незрелой» шейкой матки уровень 1Ь-8+ периферических нейтрофилов был достоверно выше, чем в группах женщин со «зрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки- 72,75±2>07% (р<0,01, р<0,05, соответственно). В 36 недель гестации относительное содержание на системном уровне 1Ь-8+ нейтрофилов было максимальным: 82,96±1,82% (р<0,001 по сравнению со всеми группами). Изучение относительного содержания 1Ь-8+ моноцитов в периферической крови не выявило четкой динамики изменения данного показателя в клинических группах.

Более низкое содержание IЬ-8+ нейтрофилов в крови женщин со «зрелой» шейкой матки может быть связано с перераспределением из кровотока в ткань активированных нейтрофилов, продуцирующих 1Ь-8, за счет их высокой адгезионной и миграционной активности. Повышение содержания тканевых нейтрофилов, мигрировавших из сосудистого русла под действием направленного хемотаксиса, приводит, в свою очередь, к еще более выраженной выработке провоспалительных цитокинов и протеолитических ферментов, приводящих к дезорганизации соединительной ткани в структуре шейки матки при ее «созревании».

С целью выявления возможных механизмов, определяющих изменение функциональной активности нейтрофилов периферической крови в конце гестационного периода, нами было изучено сывороточное содержание ТСРР2 у женщин с различной степенью «зрелости» шейки матки. Анализ полученных результатов выявил постепенное снижение содержания ТСрр2 в сыворотке крови беременных женщин в процессе подготовки организма к родам. Так, в группах женщин со «зрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки данный показатель составил 430,76±255,07 пг/мл и 835,63±303,46 пг/мл соответственно. Достоверно выше были показатели в группах обследованных с «незрелой» шейкой матки и в 36 недель беременности: 1259,26±297,13пг/мл и 1630,09±605,20 пг/мл (р<0,05 в обоих случаях по сравнению со «зрелой» шейкой матки).

Выявленное прогрессивное снижение содержания ТСР[32 в периферической крови при подготовке организма к родам может приводить к снижению активности иммуносупрессорных реакций с одновременной активацией нейтрофилов, что проявляется в значительном повышении экспрессии интегриновых молекул на их поверхности и усилении экспрессии нейтрофилами генов протеолитических ферментов, разрушающих экстрацеллюлярный матрикс при «созревании» шейки матки. Снижение сывороточного уровня ТСРР2 может определять уменьшение активности Т1МР-1, что также можно расценивать как один из механизмов, лежащих в основе деструктивных изменений коллагенового остова шейки матки при ее ремоделировании перед родами.

Для уточнения механизмов, определяющих ответ организма на подготавливающую к родам терапию, в группах с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки был проведен анализ взаимосвязи клинических и иммунологических показателей с эффективностью проводимых медикаментозных назначений.

Анализ полученных данных показал, что количество женщин с «созревшей» шейкой матки к моменту родов на фоне проводимого лечения было достоверно выше во второй группе (94,3%), чем в третьей (70,7%) (р<0,01).

При оценке клинических факторов, влияющих на эффективность подготовки организма к родам отмечено, что среди женщин с эффективной подготовкой было больше соматически здоровых (37,1%), реже встречалась анемия (38,7%) и НЦД (19,4%), чем среди тех, у кого подготовка была без эффекта: 28,6% (р<0,02), 71,4% (р<0,02) и 57,1% (р<0,01) соответственно. Данные гинекологического анамнеза не были связаны с эффективностью проводимой подготавливающей терапии.

При анализе характера экспрессии интегриновых молекул периферическими фагоцитами у женщин, имевших при поступлении «незрелую» и «недостаточно зрелую» шейку матки установлено, что для

беременных с эффективной подготовкой организма к родам, изначально был характерен более высокий уровень СЭ62Ь+ (53,74±5,74%) и СБ49е+ (38,13±1,72%) нейтрофилов, а также С062Ь+ моноцитов (5б,54±3,37%) в периферической крови по сравнению с аналогичными показателями у женщин, у которых проводимая медикаментозная подготовка не оказала эффекта (21,75±1,35%, р<0,001; 28Д8±2,98%, р<0,01; 31,35±1,75%, р<0,001 соответственно). Относительное содержание С049е позитивных моноцитов на системном уровне у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки не было связано с последующей эффективностью подготовки организма к родам.

Вероятно, при недостаточно высоком уровне экспрессии СЭ62Ь и С049е молекул на поверхности нейтрофилов и СИ62Ь молекул на поверхности моноцитов нарушается миграция этих пулов клеток в ткани шейки матки и угнетается взаимодействие нейтрофилов с белками внеклеточного матрикса, в частности, с фибронектином, что может приводить к нарушению физиологического процесса ремоделирования тканей шейки матки у женщин в конце гестации.

На основании выявленной закономерности нами был разработан новый способ прогнозирования «созревания» шейки матки у женщин перед родами. Предлагаемый способ заключается в том, что у беременных в 38-39 недель гестации в периферической крови определяют относительное содержание С049е позитивных нейтрофилов и при значении нейтрофилов равном 24,6% или более прогнозируют «созревание» шейки матки, а при значении менее 24,6% -отсутствие «созревания» шейки матки к 40 неделям гестации. Точность заявляемого способа составила- 82%, чувствительность- 91% и специфичность- 64% (положительное решение о выдаче патента на изобретение от 01.10.09).

Так же было установлено, что группа женщин с изначально «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки и с неудавшейся подготовкой к родам характеризовалась более высоким содержанием 1Ь-8+ нейтрофилов в

периферической крови (75,90+1,30%), по сравнению с аналогичным показателем в группе женщин, где шейка матки стала «зрелой» к моменту родов (67,65±2,37%, р<0,01).

Возможно, это обусловлено нарушением своевременной миграции высокоактивных 1Ь-8+ нейтрофилов в ткани шейки матки, что приводит к замедлению процессов деструкции ее коллагенового остова в процессе «созревания».

Анализ уровня экспрессии мРНК ММР-9, Т1МР-1 и 1Ь-8 периферическими нейтрофилами, а также сывороточного содержания ТОР)32 у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки не выявил зависимости этих показателей от эффективности последующей подготовки организма к родам.

Сравнительный анализ особенностей течения родов у обследованных женщин показал, что среди всех пациенток наибольший процент родов без осложнений был представлен в группе женщин со «зрелой» шейкой матки (63,3%), достоверно ниже он был в группе с «незрелой» шейкой матки (36,6%) (р<0,02). Большая часть женщин во всех группах была родоразрешена через естественные родовые пути, однако доля этих родов в третьей группе была несколько меньше: 80,0%, 80,0% и 65,9% по группам соответственно. У 36,6% женщин в третьей группе имело место дородовое излитие околоплодных вод, что достоверно выше, чем во второй группе (14.3%, р<0,02). Аномалии родовой деятельности встретились у 36,6% рожениц третьей группы, что в 3 раза превышает аналогичный показатель женщин первой группы - 16,7% и в 1,9 раз второй группы- 22,9%.

При изучении динамики родового процесса у обследуемых женщин было отмечено, что наименьшая продолжительность родов была в первой группе- 462,47±34,25 мин. Во второй и третьей группах данный показатель составил; 579,41±27,27 мин (р<0,01 по сравнению с первой группой) и 539,74±30,98 мин соответственно. Увеличение продолжительности родов в основном отмечено за счет удлинения первого периода родов.

В группе с «незрелой» шейкой матки при ретроспективном анализе выявлена большая частота родоразрешений путем операции кесарево сечение: 20%, 20,0% и 34,1% по группам соответственно. Обращало на себя внимание, что чаще всего плановые операции выполнялись в третьей группе (14,6%) по сравнению с первой, где кесарево сечение выполнялось только в экстренном порядке (р<0,05). В структуре показаний к кесареву сечению в третьей группе значительное место занимало отсутствие готовности организма к родам (14,6%). Наиболее частым показанием к оперативному родоразрешению в первой группе была острая гипоксия плода (10,0%). Следует отметить, что в третьей группе в потужном периоде родов достоверно чаще использовалось наложение акушерских щипцов и вакуум экстракция плода (9,8%, р<0,05 по сравнению с первой группой)

При рассмотрении данных о состоянии детей при рождении и в раннем неонатальном периоде было установлено, что у 9,7% детей третьей группы отмечались при рождении признаки СЗРП (р<0,05 по сравнению с первой и второй группами). Количество здоровых детей было практически одинаковым во всех обследованных группах (63,3%, 65,7% и 56,1% соответственно по группам).

Ретроспективный анализ взаимосвязи полученных иммунологических данных и последующего характера течения родов показал, что у женщин с изначально «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки, у которых впоследствии развился патологический прелиминарный период (ППП), отмечалась сниженная экспрессия мРНК ММР-9 (4,86±1,80х104 копий пар/мкл- у женщин без ППП, 0- у женщин с ППП, р<0,01) и мРНК 1Ь-8 (9,21±3,86 копий пар/мкл и 2,01±1,14 копий пар на мкл соответственно, р<0,05) периферическими нейтрофилами и более низкие показатели индекса соотношения уровней экспрессии мРНК ММР-9 и Т1МР-1 периферическими нейтрофилами (0,88±0,28 и 0 соответственно, р<0,01). Кроме того, сниженные показатели уровня экспрессии мРНК 1Ь-8 периферическими нейтрофилами были ассоциированы с развитием аномалий родовой

деятельности у женщин с изначально «незрелой» и «созревающей» шейкой матки (11,74±4,2586 копий пар/мкл - при физиологических родах, 3,14±1,1486 копий пар/мкл - природах с АРД, р<0,05). Остальные изученные нами иммунологические показатели не были связаны с развитием аномалий родовой деятельности у обследованных женщин.

Как известно, отсутствие преобладания эстрогенов над прогестероном -одна из причин ППГ1, то есть влияние прогестерона при ППП более выражено, чем при физиологических родах (Чернуха Е.А., 2005). Можно предположить, что выявленные нами отличия в уровне экспрессии мРНК 1Ь-8 и ММР-9 у женщин с ППП, были связаны именно с увеличением активности прогестерона, приводящего непосредственно к снижению продукции провоспалительных цитокинов, таких как ЮТа, №N7, 1Ь-8 и 1Ь-1 (3, а также опосредованно за счет ингибирующего действия прогестерона на синтез индуктора 1Ь-8- 1Ь-1р.

В патогенезе аномалий родовой деятельности одну из главных ролей играет ригидность шейки матки, при которой может происходить инверсия тройного нисходящего градиента, что приводит к асинхронности и аритмичности сокращений различных отделов матки. Повышение ригидности шейки матки у рожениц, как правило, обусловлено отсутствием ее «зрелости» (Чернуха Е.А.. 2005). Более низкий уровень экспрессии мРНК 1Ь-8 может определять снижение миграции нейтрофилов в ткани шейки матки из сосудистого русла с последующим нарушением продукции в ткани шейки матки необходимых факторов, участвующих в ее «созревании», что может проявится в замедлении процессов ремоделирования соединительнотканного остова шейки матки при подготовке к родам.

Таким образом, суммируя полученные нами результаты можно сделать заключение о том, что процесс подготовки организма к родам и связанные с ним структурные изменения ткани шейки матки ассоциированы со значительными изменениями функционального состояния клеток фагоцитарного ряда, преимущественно нейтрофилов, в периферической крови беременных женщин.

В процессе «созревания» шейки матки происходит прогрессивное усиление экспрессии интегриновых молекул на поверхности периферических нейтрофилов и моноцитов, определяющих способность клеток к выходу из сосудистого русла и взаимодействию с белками внеклеточного матрикса, повышение экспрессии периферическими нейтрофилами мРНК протеолитических ферментов, сопровождается снижением циркулирующего пула нейтрофилов, экспрессирующих внутриклеточно 1Ь-8. Изменения функционального состояния периферических фагоцитов, по-видимому, могут быть взаимосвязаны с системной продукции ТОрр2, которая значительно снижается при подготовке организма к родам. Особенности функционального состояния периферических фагоцитов у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки связаны с эффективностью последующей медикаментозной подготовки организма к родам. Успех медикаментозной терапии ассоциирован с изначально более высокими показателями, характеризующими экспрессию СЭ49е и СЭ62Ь молекул нейтрофилами, повышенным уровнем С062Ь+ моноцитов и со сниженным содержанием 1Ь-8+ нейтрофилов в периферической крови женщин. Особенности экспрессии мРНК 1Ь-8 и ММР-9 периферическими нейтрофилами связаны с последующим развитием патологического прелиминарного периода, аномалий родовой деятельности. Показатель относительного содержания С049е+ нейтрофилов в периферической крови женщин с «незрелой» шейкой матки может быть использован для прогнозирования «созревания» шейки матки перед родами.

Выводы:

1. Медико-биологическими факторами риска, влияющими на отсутствие готовности шейки матки к родам, у первобеременных женщин молодого возраста при доношенной беременности являются наличие у них нейроциркуляторной дистонии и анемии.

2. Динамика экспрессии интегриновых молекул на поверхности фагоцитов периферической крови в процессе «созревания» шейки матки у

первобеременных женщин характеризуется прогрессивным повышением показателей СБ49е+ и С062Ь+ нейтрофилов и СОб2Ь+ моноцитов. В процессе подготовки организма к родам происходит снижение содержания 1Ь-8+ периферических нейтрофилов, наименьший уровень 1Ь-8+ периферических нейтрофилов отмечается у женщин со «зрелой» шейкой матки.

3. У женщин с «незрелой» шейкой матки отмечается сниженный уровень экспрессии мРНК ММР-9 периферическими нейтрофилами по сравнению с аналогичным показателем у женщин со «зрелой» шейкой матки. У женщин с «недостаточно зрелой» шейкой матки в периферической крови снижена экспрессия мРНК Т1МР-1 нейтрофилами по сравнению с таковым при «зрелой» шейке матки, что приводит к относительному преобладанию протеолитической активности нейтрофилов. Женщины со «зрелой» шейкой матки характеризуются максимальными значениями экспрессии мРНК ММР-9 и 'Г1МР-1 нейтрофилами крови при выраженном доминировании протеолитической активности периферических нейтрофилов.

4. Процесс подготовки организма к родам сопровождается прогрессивным снижением содержания ТОР^2 в сыворотке крови, уровень которого у первобеременных женщин со «зрелой» шейкой матки значительно ниже аналогичного параметра у женщин с «незрелой» шейкой матки.

5. При неэффективной комплексной подготовке организма к родам у первобеременных женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки отмечаются исходно сниженные уровни С049е+ и СИ62Ь+ нейтрофилов, а также СБ62Ь+ моноцитов на фоне повышенного количества 1Ь-8+ нейтрофилов. Уменьшение экспрессии мРНК ММР-9 и мРНК 1Ь-8 периферическими нейтрофилами у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки связано с последующим развитием аномалий родовой деятельности.

6. Высокие значения CD49e позитивных нейтрофилов (24,6 % или более) у первобеременных женщин с «незрелой» шейкой матки в 38-39 недель беременности позволяют прогнозировать «созревание» шейки матки к 40 неделям гестации с точностью 82%.

Практические рекомендации:

У первобеременных первородящих женщин, поступающих на дородовую госпитализацию в 38-39 недель гестации с «незрелой» шейкой матки, с целью прогнозирования ее «созревания» целесообразно определять относительное содержание CD49e позитивных периферических нейтрофилов и при его значении, равном 24,6% или более, прогнозировать «созревание» шейки матки, а при значении менее 24,6% -отсутствие «созревания» шейки матки к 40 неделям гестации.

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Динамика сывороточного содержания TGFß2 и уровня экспрессии ММР-9 и Т1МР-1 периферическими нейтрофилами в процессе подготовки организма женщины к родам [Текст] / Л.В. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Н.К.Дорофеева, Ю.С. Анциферова // Аллергология и иммунология. - 2009. - Т.10, №2. - С. 248249.

2. Изменение экспрессии CD49e молекул фагоцитами периферической крови в процессе подготовки организма к родам у женщин с неосложненной беременностью и гестозом [Текст] / Н.К. Дорофеева, Л.В. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Ю.С. Анциферова // Иммунологические аспекты репродукции человека: материалы междунар. науч. - практ. конф. - Новосибирск, 2009. - С. 28 — 30.

3. Исследование особенности содержания периферических фагоцитов CD 49е+ в крови женщин с разной степенью готовности организма к родам [Текст] / Н.К. Дорофеева, Л.В. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Ю.С. Анциферова // Актуальные проблемы акушерства, гинекологии и перинатологии: сборник науч. работ и материалов науч. - практ. конф. молодых ученых, посвященной

75- летию со дня рождения основателя института, проф., З.д.н. РФ Виктора Николаевича Городкова. - Иваново, 2007. - С. 86 - 87.

4. Особенности экспрессии CD 49е молекул фагоцитами периферической крови беременных женщин с разной степенью зрелости шейки матки [Текст] / Н.К. Дорофеева, JI.B. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Ю.С. Анциферова // Российский аллергологический журнал. - 2007. -№3. - Прил. 1. - С. 17-18.

5. Особенности экспрессии генов ММР-9 и TIMP-1 нейтрофилами периферической крови женщин в процессе подготовки организма к родам [Текст] / JI.B. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Н.К. Дорофеева и др. // Вестник российской военно-медицинской академии. - 2009. - Прил. 1. - С. 498.

6. Характеристика экспрессии генов 1L-8, ММР-9 и TIMP-1 нейтрофилами периферической крови женщин при подготовке организма к родам [Текст] / JI.B. Посисеева, Н.Ю. Сотникова, Н.К. Дорофеева и др. // Медицинская иммунология. - 2009. - Т. 11, №4-5. - С. 415-416.

Список условных сокращений мРНК - матриксная рибонуклеиновая кислота ППП- патологический прелиминарный период СЗРП - синдром задержки развития плода ФНО (TNF) - фактор некроза опухоли CD- молекулы дифференцировки лимфоидных клеток FITC- флюоресцеин изотиоционат 1FN - интерферон IL - интерлейкин

ММР- матриксная металлопротеиназа РЕ- фикоэритрин

RT-PCR (ПЦР) - полимеразноцепная реакция

TGFß- трансформирующий фактор роста ß

TIMP- тканевой ингибитор матриксной металлопротеиназы

Подписано в печать 06.11.2009 г. Формат издания 60х84'/16. Печ. л. 1,25. Усл. печ. л. 1,17. Тираж 100 экз. Заказ 1060.

Типография ГОУСПО Ивановского энергоколледжа, 153025, г. Иваново, ул. Ермака, 41. Тел.: 37-52-44, 32-50-89 E-mail: tip-l@mail.ru, www.tipl.ru

В современном практическом акушерстве проблема подготовки к родам остается чрезвычайно актуальной (Тираспольский И.В, Каширина Т.Н, 2000). В настоящее время отмечается выраженное снижение числа женщин у которых беременность и роды протекают без осложнений (Айламазян Э.К., 2007). Биологическая готовность к родам - необходимое условие для нормального течения родов, родовозбуждения и проведения программированных родов, которые в настоящее время широко используются в акушерской практике (Быковская JI.H., 2003). Подготовленность женского организма к родам в значительной степени определяется состоянием шейки матки (Чернуха Е.А., 2005). «Зрелость» шейки матки достигается в результате сложного комплекса изменений в организме беременной, затрагивающих нейрогуморальную, эндокринную и иммунную системы как материнского организма, так и фетоплацентарного комплекса (Посисеева JI.B., 2006, Подтетенев А.Д., 2004, Воскресенский C.JL, 2007). Родовозбуждение при «незрелой» шейке матки связано с повышенной частотой осложнений как со стороны как матери, так и плода (Глаголева Е.А., Никонов А.П., 2000, Гаспарян Н.Д., 2001). Своевременная и адекватная подготовка беременных к родам позволяет значительно снизить осложнения, связанные с нарушением сократительной деятельности миометрия (Айламазян Э.К., 2007, Гаспарян Н.Д., 2003).

Важную роль в «созревании» шейки матки играют иммунные механизмы (Denis S., Hong W., 2002). В ряде работ было продемонстрировано, что фагоциты, инфильтрирующие ткань шейки матки, и продуцируемые ими цитокины и другие биологически активные молекулы, непосредственно участвуют в ремоделировании тканей шейки матки (Timmons B.C., Fairhurst A.M., 2009). Однако данные об особенностях функционирования фагоцитарных клеток на системном уровне на разных этапах подготовки организма к родам практически отсутствуют. Остаются не изученными механизмы, определяющие выход циркулирующих фагоцитов из сосудистого русла в ткань и их взаимодействие с белками внеклеточного матрикса. Белкам из семейства матриксных металлопротеиназ (ММР), а также хемокинам отводится основная роль в осуществлении процесса «созревания» шейки матки (Соболева Г.М. Сухих Г.Т., 2007, Törnblom S.A., Klimaviciute А., 2005, Jian L., Mu X., 2002). Известно, что фагоциты являются одними из основных продуцентов ММР и хемокинов (Просекова Е.В., 2007, Пинегин Б.В., 2007). Однако в литературе отсутствуют данные о характере продукции фагоцитами периферической крови протеолитических молекул и IL-8 на разных этапах подготовки организма к родам.

В настоящее время доказано, что трансформирующий фактор роста ß (TGFß) играет чрезвычайно важную роль в регуляции иммунологических взаимоотношений матери и плода на всем протяжении гестационного процесса (Thellin О., Heinen Е., 2003, Chen Z., O'shaughnessy M.J., 2003). В литературе есть данные о том, что к концу беременности происходит снижение продукции TGFß, связанное с отсутствием необходимости иммуносупрессии на данном этапе гестационного процесса (Сотникова Н.Ю., 2005). Однако в литературе отсутствуют данные о динамике сывороточного содержания TGFß2 при «созревании» шейки матки у женщин в процессе подготовки организма к родам.

Таким образом, определение особенностей функционального состояния периферических фагоцитов и продукции цитокинов на разных этапах подготовки организма к родам позволит уточнить системные иммунные механизмы, определяющие «созревание» шейки матки, на основании которых возможна разработка новых прогностических критериев готовности к родам, что имеет большое значение для практического акушерства.

Цель исследования:

Установить роль периферических фагоцитов и продуцируемых ими хемокинов и протеолитических ферментов, а также ТОР(32 в процессах подготовки шейки матки к родам у первобеременных женщин, на основании чего разработать новые прогностические критерии «созревания» шейки матки и характера течения родовой деятельности.

Задачи исследования:

1. Определить медико-биологические факторы риска, связанные с неэффективностью подготовки организма к родам у первобеременных женщин.

2. Установить особенности экспрессии СБ49е и СБ62Ь молекул и внутриклеточной продукции 1Ь-8 нейтрофилами и моноцитами периферической крови первобеременных при различной степени «зрелости» шейки матки.

3. Определить уровень экспрессии мРНК 1Ь-8, ММР-9 и Т1МР-1 нейтрофилами периферической крови первобеременных при различной степени «зрелости» шейки матки.

4. Установить закономерности изменения сывороточного содержания ТОР(32 у первобеременных женщин при различной степени «зрелости» шейки матки.

5. Разработать новые прогностические критерии «созревания» шейки матки у первобеременных женщин и характера течения родовой деятельности.

Научная новизна исследования:

Впервые установлено, что процесс «созревания» шейки матки у первобеременных женщин при доношенной беременности сопровождается выраженными изменениями функционального состояния фагоцитов периферической крови, характеризующиеся усилением экспрессии интегриновых молекул СБ62Ь на поверхности нейтрофилов и моноцитов и рецепторов к фибронектину периферическими нейтрофилами.

Показано, что подготовка организма к родам ассоциирована с изменением баланса активности протеолитических и антипротеолитических ферментов, продуцируемых периферическими нейтрофилами. При отсутствии готовности организма к родам в периферических нейтрофилах преобладает антипротеолитическая активность за счет низкого уровня синтеза ММР-9, тогда как у женщин со «зрелой» шейкой матки уровень экспрессии мРНК ММР-9 резко повышен, что приводит к доминированию протеолитической активности.

Установлено, что в процессе «созревания» шейки матки происходит прогрессивное снижение содержания периферических нейтрофилов, экспрессирующих внутриклеточно 1Ь-8.

Выявлено, что сывороточное содержание ТвРр2 снижается по мере развития готовности организма к родам и достигает минимальных значений у женщин со «зрелой» шейкой матки.

Показано, что у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки уровень экспрессии интегриновых молекул на поверхности периферических фагоцитов связан с эффективностью медикаментозной подготовки организма к родам, а уровень экспрессии мРНК ММР-9 и 1Ь-8- с патологическим прелиминарным периодом и нарушениями сократительной деятельности матки в родах.

Практическая значимость:

Разработан и предложен в клиническую практику новый способ прогнозирования «созревания» шейки матки в процессе подготовки организма к родам на основании определения относительного содержания СБ49е позитивных нейтрофилов в периферической крови первобеременных женщин в 38-39 недель гестации (положительное решение о выдаче патента на изобретение от 01.10.09).

Положения, выносимые на защиту:

Процесс «созревания» шейки матки у первобеременных женщин ассоциирован с изменением функционального состояния фагоцитарных клеток периферической крови, которое проявляется в прогрессивном усилении экспрессии интегриновых молекул С062Ь на поверхности периферических фагоцитов, увеличении содержания нейтрофилов с рецепторами к фибронектину, повышении уровня экспрессии мРНК ММР-9 в периферических нейтрофилах при одновременном снижении сывороточного содержания ТОРр2 и количества циркулирующих нейтрофилов, продуцирующих внутриклеточно 1Ь-8.

Эффективность медикаментозной подготовки организма к родам ассоциирована с изначально высокими уровнями СБ49е+ и СБ6 2Ь+ нейтрофилов и СБ62Ь+ моноцитов, а также низким содержанием 1Ь-8+ нейтрофилов в периферической крови первобеременных. Развитию аномалий родовой деятельности предшествуют низкие уровни экспрессии мРНК 1Ь-8 и ММР-9 периферическими нейтрофилами.

Показатель относительного содержания СБ49е позитивных нейтрофилов в периферической крови первобеременных женщин в 38-39 недель гестации служит прогностическим критерием «созревания» шейки матки в процессе подготовки организма к родам.

Внедрение результатов в практику:

Разработанный новый способ прогнозирования «созревания» шейки матки прошел предрегистрационное испытание в акушерской клинике Федерального государственного учреждения «Ивановский НИИ материнства и детства имени В.Н.Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи ».

Апробация работы:

Основные результаты исследований по теме диссертации докладывались и обсуждались на научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 75-летию со дня рождения основателя института, профессора, Заслуженного деятеля науки РФ, Заслуженного врача РФ Виктора Николаевича Городкова (Иваново, 2007) и конференции молодых ученых, посвященной памяти основателя института, профессора, Заслуженного деятеля науки РФ, Заслуженного врача РФ Виктора Николаевича Городкова (Иваново, 2009).

Публикации: по теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Структура и объем диссертации:

выводы

1. Медико-биологическими факторами риска, влияющими на отсутствие готовности шейки матки к родам у первобеременных женщин молодого возраста при доношенной беременности являются наличие у них нейроциркуляторной дистонии и анемии.

2. Динамика экспрессии интегриновых молекул на поверхности фагоцитов периферической крови в процессе «созревания» шейки матки у первобеременных женщин характеризуется прогрессивным повышением показателей С049е+ и СОб2Ь+ нейтрофилов и СБ62Ь+ моноцитов. В процессе подготовки организма к родам происходит снижение содержания 1Ь-8+ периферических нейтрофилов, наименьший уровень отмечается у женщин со «зрелой» шейкой матки.

3. У женщин с «незрелой» шейкой матки отмечается сниженный уровень экспрессии мРНК ММР-9 периферическими нейтрофилами по сравнению с аналогичным показателем у женщин со «зрелой» шейкой матки. У женщин с «недостаточно зрелой» шейкой матки в периферической крови снижена экспрессия мРНК Т1МР-1 нейтрофилами по сравнению с таковым при «зрелой» шейке матки, что приводит к относительному преобладанию протеолитической активности нейтрофилов. Женщины со «зрелой» шейкой матки характеризуются максимальными значениями экспрессии мРНК ММР-9 и Т1МР-1 нейтрофилами крови при выраженном доминировании протеолитической активности периферических нейтрофилов.

4. Процесс подготовки организма к родам сопровождается прогрессивным снижением содержания ТСР(32 в сыворотке крови, уровень которого у первобеременных женщин со «зрелой» шейкой матки значительно ниже аналогичного параметра у женщин с «незрелой» шейкой матки.

5. При неэффективной комплексной подготовке организма к родам у первобеременных женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки отмечаются исходно сниженные уровни СЭ49е+ и С1)62Ь+ нейтрофилов, а также СВ62Ь+ моноцитов на фоне повышенного количества 1Ь-8+ нейтрофилов. Уменьшение экспрессии мРНК ММР-9 и мРНК 1Ь-8 периферическими нейтрофилами у женщин с «незрелой» и «недостаточно зрелой» шейкой матки связано с последующим развитием аномалий родовой деятельности.

6. Высокие значения СЭ49е позитивных нейтрофилов (24,6 % или более) у первобеременных женщин с «незрелой» шейкой матки в 38-39 недель беременности позволяют прогнозировать «созревание» шейки матки к 40 неделям гестации с точностью 82%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

У первобеременных женщин, поступающих на дородовую госпитализацию в 38-39 недель гестации с «незрелой» шейкой матки, с целью прогнозирования ее «созревания» целесообразно определять относительное содержание СБ49е позитивных периферических нейтрофилов и при его значении, равном 24,6% или более, прогнозировать «созревание» шейки матки, а при значении менее 24,6% -отсутствие «созревания» шейки матки к 40 неделям гестации.