Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:HLA-генетические маркеры в предрасположенности к периодической болезни у армян

'! о м 'j

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССШСЖОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ЖСТИТУТ шйувалст

йа правах рукописи

АКОШЗ АР 4M КШГОВИЧ

КЬА-ГЙЯШ№СККЗ MAHffiFK В Г1Р2ДРАС1ТОЖлЗБНОСТИ К

' гшрчотгаческог юшш У шш 14. СО. 36 - Аллергология и .Тьжугслогин

А В Т О F Е $ Е Р А Т

дассе|-тацяя на соискание ученой етепояи Хзвдвдэта медицинских ваук

Москва - 1093 г.

Работа выполнена в 'Институте ик&унодогии Минздрава Российской Федерации :

. Научный руководитель: член-корр. Российской АЫН,

доктор медицинских наук, профессор Р. И. ХАИТОВ

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор „ Л. И. БОРИСОВА доктор ждщинских наук, профессор А.Й.'А2Е338Н

Ведущее учревдеяие — Российский государственный

медицинский университет

Защита диссертации с ос'гонге к "____"........... 1993 года

з "---- " часов на заседании специализированного совета

Д 074.09. 01 при Институте иммунологии Минздрава российской АСэдерации ло адресу: Мэсква, 115478, Каширское шоссе, дом 24, кора. 2.

С диссертацией мо;шо ознакомиться в библиотеке Института. Автореферат разослан "_____"........... 1393 года.

Ученый ее>фетарь специализированного сонета,

доктор медицинских наук -П. С. СЕСЛйВЯНА

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Периодическая болезнь (Ш) или семейная средиземноморская лихорадка (Familial Mediterranean Fever) - это тягилое наследственное заболевание, развивающееся преимущественно в детском возрасте иди в период полового созревания. Благополучное течение ПВ часто (около 35% случаев) омрачается присоединение« хронических н острых осложнений (а\зшж-доз почек, нефрит, непроходимость юшечкикг, панкреатит, миокардит и т. п.), которые в тяявлых случаях приводят к летальному неходу. ШЗ характеризуется трохи основным! формами, диагноз которых нередко бывает затруднен вследствие проявления неполной и нетипичной сдадптаетики, симулируюа^й симптомы других патологий, что ведет к неадекватному лечению.

Это заболевание поражает преимущественно население . в странам Закавказья, зога Европы и Средеяемноморьн. Однако, в последнее время появляется все больше и больше сообщений, евн-детельствувщкх о том, что НЕ встречается по всему миру, что, по-видимому, является результатом увеличения числа скапанных братов и шродсмасштзбной миграции населения. Самым неблагоприятным регионом в плане распространения Ш в СНГ является Армения. Так частота Ш в Армении составляет 0,572, а количество лиц, несущих патологический гея в гетерозиготном состоянии (т. е. без клинических цреявлршй) - 1,4% [ Г. М. Аракедюв 1975].

Предложяо несколько концепций развитая заболевания, которые находятся во взаимосвязи. ^ Среди них приоритетное значение имеют иммунологическая и генетическая концепции. .

Однако, несмотря на наличие аутоиммунного компонента в патогенезе НЕ, фактически не исследоганк яммувогеяетичеекие

маркеры предрасположенности к этому заболеванию. Такими маркерами, эффективно пришкяеьажи в длагностите ряда заболеваний, и. 5 первую очередь, аутоиммунных, в основе которых ле,?лт иммунологические нарушения, являются антигены (АГ) системы Я1А, наиболее подаморфной генетической системы человека

Поскольку изучение особенностей распределения НЬА-АГ при ПВ проводилось а псшулядаи арют, и принимая во внимание данные о различии генетического профиля популяций, что в свою очередь кож? отражаться на особенностях связей АГ сиетеш НЬА с предрасположенностью к заболеваниям, был изучен генетический профиль армянской популяции. Ранее была предпринята попытка изучения распределения НЬА-АГ у армян, однако набрр антиснво-роток, исшльауезлй для этого исследозалия, открывал ограяи-чеснкое количество Ы-А-АГ С В. Ы Яэрсесяя с соавт. , 19923. Для получения об*ьакгивкых денных Оргког.ятэтсм XI 1&зкдународного рабочего совещания га тканевому типированию (Япония, ноябрь 1391 г.) была создана беспрецедентная тшгарувгэл панель, сос-тояиэя/ из сывороток, 'полученньн от представителей различных рас и этнических(групп. ■ Одновременно с этим Оргкомитетом были выбраны для обследования отдельные этнические группы, в числе которых была н популяция арыян, прогиваших на территории Армении. Полученные данные сдуэкили а качестве контроля для группы больных Щ.

Дели и &ааачя. Целью настоящего исследования является:

1. Проведение юа^гогенетического обследования больных ПБ аршяской национальности для выявления маг/ногенетичесгап дар-керов предрасголокенносга к заболеванию с целью дальнейшего совершенствования методов ранней дифференциальной диагностики и профилактика, прогнозирования индивидуальных особенностей

течения и исхода заболевания. Одновременно с эти», место ожидать, что полученныэ данные окажутся полезными я в плане новых сведений о.биологический роли системы НЬЛ.

2. Установление Щ_А- генетического профиля армянской попу-

хчцйи.

Для выполнения зш целей поставлены следует?» задачи: 1) Валвинь особенности распределения НЬА-Й* I и II пассов 7 больных ПБ армянской национальности.

ОЧ Т» ^ К Г' 11 ТГЛГГ'Х.Ч и! ^_ Л11 Т ' * ТТ

¿-у л&у-шло ' У иьм ш * и Д1

з зависимости от формы ИБ, тяжсти и возраста качали заболевания.

3) Установить особенности распределения ЫА-АГ I и II классов в армянской популяции, определить частоту антигенов, генов, гапдотияов, величины неравновесного сцошвяия в армянской популяцш.

Ваучкая новизна Впервые:

- изучены генетические маркеры предрасяологеаноеги к ПК в армянской популяции (жители Армении).

- изучена взаиюсьязь ыекду наличием НЬА-маркероз предрасположенности к заболевании в фгиот:пе больных с кшЕитескими особенностям". .и характером течения заболевания, что позволяет судить, через какие мехайизкн реализуется ассоциированная с зтк-

Ч _

4 ми маркерами генетическая предрасположенность к Ш.

- уточнен НЬА-генетическим профиль армянской популяции (Армения), выявлены особенности распределения антагеясз к генов, установлены ве.пганы неравновесного сцепления и чзегог гапло-типоз, характерные для аршя.

- установлены различия в частоте отдельных генов, гашготипов и величин неравновесного сцепления е арияяской популяции по

- б -

сравнению, со среднеевропейскими даннши.

Практическая анат^дсть. Проведенное изучение НЬА-генегя-ческого профия армянской популяции имеет основополагающее значение для разработки проблемы "НЬА и болезни", успешного развития трансплантологии и трансфузшлогш в регионе, для по-пуляционной генетики и дальнейшего изучения биологической рохч системы НЬА.

Выявленное генетические маркеры предрасположенности к ПВ могут быть использованы в качестве дополнительные диагностических критериев, особенно в целях ранней диагностики, принимая во внимание тот факт, что Ш является семейным заболеванием и чаще всего развивается в детском возрасте; прогнозирования индивидуального течения и исхода ваболевания; установление ассоциативной связи доеду АР система Н1_А и заболеванием позволит выявить группы лиц с "повышенным риском" развития патологии, что, в свои очередь, будет .способствовать эффективному проведении первичной про^лагстьки ПН.

Выявление генетических маркеров предрасположенности к ПН с достаточно высокими значениями относительного риска открывает перспектива для применения ДНК-технологии с целью установления гена(ов) Заболевания. Цри этом допускается, что среди субтшюв НЬА-АГ, или аллелей их кодируацих, из числа выявленные АГ-маркэрав могут шэтьея субтипы АР, или аллели юс кодируйте, тесно связанна, или дакэ идентичные, генам габолева-2ия.

Апробация диссертации. Материалы диссертации- апробированы на ыэжлабораторной научной конференции Института иммунологии Ш РФ 16 шш 1592 года. Диссертация рекомендована к защите.

- Основные положения диссертации были представлены на: 5-№

- t -

European histocompatibility conference (Leiden,1991); 11-th International Histocompatibility Workshop and Conference (Yokohama, 1991); XIV V'orld Conference of health education (Helsinki, 1991).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы, в том числе и в зарубежной печати.

Объем 15 структура работ Диссертация нагюсана по традиционному плану, состоит из введения, обзора литературы, г/ате-риалов и методов исследования, 2 глаз собственных исследований, обсуждения м 5ЫЙ0Д0В. Работа изложена на страницах машинописи. Такс? плтострирован 73 таблицами и рисунками. 'Библиографический указатель включает источников ( отечественных и иностранных).

СОдаЯАЕИБ РАБОТЫ

1&геризды и катоды. Дот изучения язаямосвяз;1 мэяду системой HLA и ПВ у лшц арютской национальности исеольвовэн попу-ляционный кетод. Было обследовано 82 больных ЛЬ' в возрасте от 14 до 68 хэт (таб.д.1).' See больные кксод;:лись под регулярным стационарным и постоянный дисяансэркям завладением с момента постановки диагноза в 1-ой городской болыпедв г. Еревана. Диагноз зо всех случаях бал достоверный и ставился на основании специфическая клинических проявлений, характерных для ПБ (высока1; лихорадка, сочгчанная с болями в области живота и груди), а такте клинлко-лабораторных исследований. У больных были заявлен:; абдеккнальнач, торакальная и- смешанная формы заболе-ганкя (,табх1).

Для изучения HLA-генетического профиля аршнекой популя-

г

- 8 -

Таблица 1

„ Характеристик обследованных больных

Показатели Обшря группа больных N=82 Мужчины N=45 йекщины N«36

Средний возраст (лет) 36,5 + 2,3 35,2 + 2,9 36,9 + 3,7

Возраст начала згболе-ния (лет) 16,2 + 1,5 15,6 + 1,7 17,1 + 2,7

Начало аабодэвашга до 16 лет (человек) 42 (51,22%) 22 (47,8351) 20 (55,56%)

Начало заболевания позже 16 лет (человек) 40 (48,782) 24 (52,172) 16 (44,442)

С амшюидозом (человек) 22 (25,832) 14 (30,432) 8 (22,222)

Зорыы заболевания Абдошпал. (чел.) 64 (78,057.) 36 (78,262) • .28 (77,78%)

Торекальн. (чел.) 6 (7,32« 2 (4,357.) 4 (11,112) ..

Смешанная (чех) 12 (14,63%) 8 (17,392) 4 (11,11%)

дии также использован популяционный ыетод. Все здоровые тест-доноры - лица араганской национальности в возрасте от 18 до 23 лет (средний возраст 21,24 + 1,32 лет), не состоящие б кровном родстве, студенты Ереванского медицинского института. Общее количество тест-доноров - 90 человек, из них 47 мужчин (средний возраст 21,98 + 0,95 лет) и 43 женэдны (средний возраст 20,71 + 1,03).

. Шиуляцйонное обследование больных ПВ и тест-доноров проводилось методом тканевого тишроваана в стандартном шкролим-фоцитотокснческом тесте £Теггвак1 еЬ а1., 19783.

Дяя вьивзеяня АГ I класса использовали набор из 240 образцов, а да выявления АГ II класса - набор из 150 образцов сывороток х кшаюрфаш Ж-А-детермннантам, включающие типирую-

идае сыворотки из коллекции XI Международного Рабочего Совещания (Япония, 1991), а тагане Всесоюзного банка гистоткпирующих стандартов при Ленинградском НИИ гематологии и переливания кроЕИ MB РФ, коммерческие сыворотки фирм "Behring" (ФРГ), "Biotest" (ФРГ), "Pel-Freez" (США).

Бри изучении HLA-гекегического профиля армянской популяции учитывались 78 HLA-AT, из них 18 AT KLA-A докуса; AI, А2, A3, All. 1, All. 2, А23, А24, А25, А26, А28, А29, АЗО, А31, А32,

».лд л.^с а ..мо. чп л г» m д_п dr, ок о г? do

/tno*z>, нпцч, мпсю, ^чгтч;0, пх »д—mk xj uo. lh , u*j,

В13, В14, В17,- В18, В27, В35, В37, В38, В39. Bw41, Bw42, B44, B45, Bv47. 8*48, B49, BvöD, B51, Вч?52, Bw54, Bw55, Bw56, Bw60, Bröl, B',/32, Bw63; Ii AT HLA-C дажуса: Cwl, 02, Cw3, Cw4, Cw5, Cv;5, Cw7, 08, CwS, CwlO, Oll; 15 AT KLA-DR Jicsyca: DR1, DR3, DR4, DR7, DRvÖ, DRw9, DRwlO, DRwll, . DRvri.2, DRwl3, DM4, DRwl5, DM6, DRv/52, DRv/53; 5 AT HLA-DQ xaxyca: DQvrf., DQ-.v2, DQw3,DQtf4, DQV7.

При изучении особенностей распределения HLА-AT I и II классов у больных ИВ учитывались 42 HLA-AT, из них 10 AT HLA-A локуеа: AI, А2, A3, All, Awl9, A23, A24, A25, A26, A28; 17 AT HLA-B znayca: B7, В8, B12, B13, В14, B15, B17, В18, B21, Bvi22; B27, B35,' B38, B39, B40, B51, Bw52; 12 ДГ KLä-ER дзжуса: DR1, DR2, DR3, DR4, DR5, DRrö, DR7, DRwS, DM, 'DMO, DRw52, DRvß3; 3 AT ItLÄ-BQ локуеа: DQwl, DQw2, DQw3.

Наличие ассоциации HLA-AT с изучаемым заболеванием устанавливали по величине относительного, риска (RR) [ Voolf, 1S55; Svejgaard et al. ,1974]. Статистическую дбстоверность отличия RR от 1 (р) определяли по точному двухстороннему критерию Фишера С К. А. Браунли, 1977; Armi tage ,19713 ' с поправкой на количество определяемых HLA-AT tßrmst, 19713. В данном иеследоЕа-

- ю -

нш imnpaEica вводилась на 42 АР. Ассоциация считалась достоверной, если рс, (р с поправкой на число HLA-AT) было меньше 0,05. Для выявления силы ассоциации использовали показатель атрибутивного риска (б),- в том случае, если значение RR было меньше 1, вместо величины 6, использовали величину превентивной фракции (PF) Г Beng-tsson & Thomson, 19813.

Вычисление частят HLA-генов и гаплотилов, а тахкэ величин неравновесного ецеииеыи проводили по формулам, описанным K'at-tiuz и соавт. (1970).

Бее показатели подвергались компьютерной обработке в программах Statgraf к LD.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЙССЛЕЛ0В.4НЙЯ У. ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Изучение периодической болезни в армянской популяции.

При изучении особенностей распределения HLA-AT у больных

ПБ армянской национальности выявлены генетические маркеры

предрасположенности и устойчивости к этоуу заболеваний Из

таблицу 2 следует, что достоверное с коррекцией отклонение от

контроля в обвей группе больных иши? 2 АГ: частота встречае-

-5

мости АГ Bw52 (37,8% - 10,0%, р=2,2:П0 , p^O.OOl) повышена, а АГ 821 (2,42 - 25,6X, p=7,7xl0~f р^'ЛО'Ь (лишена. Наиболее высокое значение RR равное 5,5 било отмечено для АГ Би52, этот л® АГ бык первично связан с заболеванием (8=0,31). Кроые того, в этой группе было отмечэво достоверное (без" коррекции на число АГ) повышение частоты встречаемости AT А24 (39,02 - 24,42, р=0,049).

При разделении группы больных е зависимости от подовой

Таблица 2

Генетические маркеры предрасположенности к периодической йолеанк в армянской популяции

Обследованные группы больше 113 НЬА-кзркзры Н1А-проте:сторы

Обп@я группа больных Н=82 £24 39,07. - 24.41 ИЗ, 049; КИ-2,0; д=0,2 Ве52 37,8Х - 10.CZ р^-0,001: _ Кй----5,5; 5=0,3 В21 2,,4?. - 25,67. Р£=Зх10Ч РЛ?=0,07; РР=0,2

Уугяйни N=46 А24. 43,БХ - 24,42 р=0,031; ЙК-г,4;6-0,25 33,1% - 10,0% Р0 =0,001; НК=6,5;6=0,3 В2Э. 2,2% - 25,62 С09; КЙ-О,06; РГ-0,3 Шй 4,42 - 21,1% р=0,011; кЯ=0,17;РР=0,2

Кзкодяы N=35 А1 33,9% - 12,2% р-0,001; йй-4,-6; 6=0,3 36,1% - 10,0% р=0,0012; 6=0,3 ШО 16,7% - 4.4Т р=0,03; КЙ=4,3; 6=0,13 В21 2,8X - 25,6% р-0,002; Ей=й, 08; РГ=0; 2

<8орш заболевания: Еч52 34,42 - 10,0% р. =0,02; 1Ж=4,7; бнЭ.З В15 0% - 10,0% р-0,01; кК>0,07; РР-0,1 Е21 3,1% - 25,5% рйГ0,С05; РЖ=0,09; РМ),2

абдоыяналъаэя N=64

торакальная • N«8 А2 65,7% - 22,2% р«С»03; Е»~7,0: 5>0,б А24 66,77. - 24,« Р=0,04; Н?-=б,2; 6-0,5 виза 83,®: - ю. о« Р,. =0,008-, РН"45: Ь-0,8 и-» 313 33, зх - з,зг» р-*0,03; ЙМ4,5; &---0.3 Ш5 65,7% - 21.1?. Р=0,02; ГД-7,5; С-0,С КМО 33,3% -0=0,04; ИМ 0,8; Ъ-0,3

Окончание' таблицы 2

Обследованные группы больных ПБ Ю- маркеры НЬА-протекторы

смешанная • N»12 В 17 25,0% - 3,3% р=0,02; Ш=9,7; €=0,2 Ву52 33,3% - 10,0% р=0,045; ¡Ж-4.Б; "6-0,3 ООггЗ 100% - 502 р^-0,04; РЛ-25; 8-0;Эб

С амидоидозоа N=22 " В7 33,4% - 12,2% р=0,01; й?-4,1; <3-0,3 ВгН2 54,6% - 10,0% р -7x1 С*; №=10,8; 0=0,5 ОйгПО 27,3% - 4,4% р=0,004; ЙЙ=8,1; 6-0,2 Б21 0% - 25,6% р-0,006; Н?=0,Об; РР=0,3

Без амилоидоза N=60. А1 26,7% - 12,2% ' р-0,03; й?-2,6; В-0,2 А24 41,7% - 24,4% р«С,03; КК-2,2; Ъ=0,2 В'.у52 31,7%- 10,02-р-0,0012;Н?-4,2; 6-0,2 221 3/3% - 25,6% рс=0,01; Пй=0.1; РР-0,2

Заболевшие в детском возрасте (до 1о лет) .4=42 А1 28,6% - 12,2% р=0,03; №=2,9; Ъ=0,2 А2 42,9% - 22,2% р-0,02; РЛ=2,6; Ь=0,3 Вто2 33,3% - 10,0% р=0,002; Ш=4,5; 6-0,3 ООвЗ 90,5% - 50%, р^2х!(Я; Ю?=9,5; §=0,8 Е21 2,4% - 25,6% р^-0,03; 85?=0,07; РР=0,2 Ш4 9,5% - 38,9% Рд-0,02; Ш=0,17;РР=0,3 ЮКэЗЗ 19,1% - 55,6% 003; {Ж=»0,2; РР=0,4

• Заболевшие после 16 лет N-40 А24 45,0% - 24,4% р=0,02; ИЗ-2,5; 0-0,3 Втй2 35,0% - 10,0% р^-0,003; Ш-6,7;б»0,4 В21 2,5% - 25,6% Ре-0,046; 07; Р.Р-О,3

вьделедо - р < 0,05;

лрткадяежности (табл.2) установлено, что в группе больных ¡.уж-чин маркерами предрасположенности и устойчивости к ПБ является

те АГ', что и з общэй группе больных: Вго2 (39,1% - 10,0%, р

-5 -4

=5x10 , р =0,00?.), Е21 (2,2% - 25,6%, р=2,2х10 7 р =0,009). Л с

Герзнчко с заболеванием ассоциирован маркер Ву;52 (Э=0,33). В группе больных муячин отмечено такж достоверное (без коррекции на одело АГ) повышение частоты встречаемости АГ А24 (43,5%

- 24,4%, р=0,031) и снижение - АР Ш1 (4,4% - 21,1%, р=0,002).

В группе больных генщин не .. выявлены достоверно значимые маркеры предрасположенности к устойчивости к Ж Однако, отмечено достоверное (беа коррекции на число АГ) повышение частоты встречаемости АГ Л1 (38,91 - 12,2%,р=0,001), Втй2 (36,1%

- 10,0%, р=С, 0012), ОЙШО (15,7% - 4,4%. р-0,03) н скимэнке -Б21 (2,8? - 25,6%, р-О.СОй). Наиболее лжоког значение Яй равное 5,1 в группе больных женщин выявлено для АГ Ет»52.

В связи с тем, что различают три клинических варианта ГШ С к. А. Айвазян, 15823: абдоминальный, торакальный и смешанный, шэетле кэ.ч собственную специфику, так и общие проявления, что в некоторых случаях затрудняет постановку диагноза, была признака целесообразность раздельного изучения особенностей распределений _ НЬА-АГ в зависимости от Форш заболевания.

При проведении этой части исследования еьп8лвкы характерные для каждой форш особгнкосгз распределения НЬА-АГ (табл.2). Как саедует из представленных в таблице данных пр>; абдоминальной сохранялось характерное для общей группы

Сольных ПВ достоверное с коррекцией на число АГ увеличение частоты встречаемости ш сраввенкв с конгсолех АГ &п52 (3-1,4%

- 10,0%, р=4х10 , р =0,02), к снюсеииё частоты АГ В21 (3,1% -

.и с

25,6%, р=1,1х10 р =0,005). Помимо этого, при абдоминальной 6

форме ПБ.отмечает достоверное (без поправки на одело АГ) понижение частоты встречаемости АГ В1ё (0 % - 10%, р»0,01).

При торакальной Форш ПВ отмечено достоверное с коррекцк- • ей на число АГ увеличение частоты встречаемости АГ 8*52 ( 83.3%

'¡4

- 10,0%, р-1,8x10 ; р =0,01). Этот же АГ первично ассоциирован

а

с ПВ, что следует из значения атрибутивного риска (&=0,81 по сравненк» с 2=0,27 при абдоминальной форме и 6=0,31 - в общей группе больных). Для АГ Ву52 при торакальной форме ПВ характерно очень высокое значение И? (45,0) по сравнению с абдоминальной формой (4,71) у, обпрй группой Сольных (5,5). ¡Кроме того, отмечено достоверное различие частоты встречаемости АР Ви52 между торакальной формой и обшэй группой больных (83,3% -37,8%, р=0,04), между торакальной и абдоминальной' формаш ПБ (83,3% - 34,41, р=0,03). В группе больных с торакальной формой Ш отмечено также достоверное по сравненио с контролем повышение (без коррекции на число АГ) частоты встречаемости следующих АГ: А2 (66,7% - 22,2%, р-0,03), А24 (б5,71 - 24,4%, р=0,04), В13 (33,3% - 3,3%, р=0,03), (66,7% - 21,IX, 0,03), ОЙЙО (33,3% - 1,4Х: р=0,04).

При смешанной форме Ш отмечено достоверное с коррекцией

на число АГ повышение частоты встречаемости АГ СО^З (100% --I

50%, р=9,7х10 , р =0,04). Для этого АГ характерны чрезвычайно С

высокая ассоциация с данной форшй заболевания (6=0,96) и вьг-сокое значение ИЗ (25,0). Кроыэ того, отмечено достоверное(Ъез коррекции на число АГ]повшение по сравнению с контролем частоты встречаемости следующих АГ: В»52 ( 33,3% - 10,0%, р=0,04)> В17 (25,0% - 3,3%. р=0,02).

Проведено изучение особенностей распределения НЬА-АГ в группах большее ПВ в зависимости от тяжести заболевания: с

амнловдозом я без а\алоидоза (табл.2). В группе больных с али-лоидозом еыяелоно достоверное з коррекцией на число АГ увеличение частоты встречаемости по сравнению с контролем АГ Ву52 (54,62 - 10,ОХ, р-11^-7x10^. В этой группе больных отмечены такке достоверные различия в частоте встречаемости по сравнении с контролем следующих АГ: В7 (36,4% - 12,2%, р=0,01), В21 (0% - 25,6%, р=0,006) и ШМ0 (27,3% - 4, 47., р= 0,004), которыэ не сохраняли достоверность при введении по-

иусшги! па адили л!.

Высокий уровень ассоциации с амилоидоэом . АГ В*52 10,8) позволяет считать, что данный АГ является не только маркером предрасположенности к заболеванию в целом, но и маркирует г.я ж дуй форму течения ГШ.

Следует отметить, что АГ Ву/52 язляется одним из сшштов маркера предрасположенности к болезни Еехчета - АГ В5 С 2грл ; -еуэкй, 1934; Т1таг1 & Тегазака, 19873, что ю;ет служить еще одним доказательством общности этиопатогенетических механизмов С В. А. Аствацатрян с соавт.,19893, подтверждаемой такав морфологическим и иммунологическим сходством П6 и коллагенозов. Этот факт является еще одним весыла убедительным доказательством аутоиммунной природы ГШ.

Ч То, что с АГ'В»52 ассоциирована высокая предрасположен-

ность к ПБ в целом и, особенно, к его торакальной форме (Я?= 45,0), а также предрасположенность к развитию такого тяжелого осложнения как ашиоадоз, свидетельствует о необходимости изучения вопроса о существовании субтилов этого АГ с целью установления гена(ов) заболевания (М^е а1. ,19883. При этом предполагается, что среди субтипов Н1-А-АГ - маркеров ПБ, могут иметься субтипы кодируемые геном, тесно связанным, или даже

идентичным, гену заболевания, как это з настоящее время показано для одного из еубгипов АГ Ш_А-В27, с которым ассоциирован ген анкилозирущего спондилита С и тал & Тегазак!,19673.

Для 13Б свойственна наследственная предрасположенность: передача по наследству в нескольких поколениях и начало заболевания преимущественно в детской возрасте СЕ А. Астаацатрян с соаат. ,1089; А. ¿.Айвазян, 1982,1989; Нириерег еЬ а1. ,19911. Исходя из этого, были изучены маркеры предрасположенности к ПБ в

. ... ..............чш чт.ч >~. . 4 _ —|

ид ¿эио^оилс^ пашна ооу.'лс^аогш. ■!-; а ^л^гс.'м

возрасте (до 16 лет) и 2) - в возрасте старые 16 лет (табл.2). Выявлено достоверное с коррекцией на тесло АГ увеличение частоты встречаемости по сравнению с контролем в группе пациентов, заболэвиих в детском возшсте, АГ ПОгЗ (90,5% - 50%, г>-5;; 10 , и снижение частоты встречаемости АГ В21 (Й. 4%

- 25,6%, р=Б, 3x10*^ ¡э, =0,03), ВК4 (9,5% - ЪВ,21, р-4,4x1 (Н р =0,02) и ВК*53 (19,1?, - 55,5Х, р=7,4х10"^ р6=0,003). Ыэгшэ предположить, что ».аркером предрасположенности к развитии ПБ в детском возрасте является АГ 00*3 (1?К=9,5), имеющий наибодсн>ую силу ассоциации (6=0,8) с заболеванием, а протекторами зтой Форш Ш - АГ Щ4 (Ш-0Д7) и 0»/53 (ИЫЭ,£), которые страдательно ассоциированы с заболеванием (РГ-О,3 и 0,4 соответственно). Значение КН.и РР для протектора В21 з этой группе аналогичны такозкы в обцей. группе больных (ЕК=0,07 к РР «0,2).

Кроме того, в группе больных, заболевших ДБ до 15 лет, огаече-/ *

но достоверное[без поправки на число АГ/по сравнению с контролем повышение частоты встречаемости еяедуецих АГ: .41 (28,6% -12,2%, р=0,СЗ), А2 (42,91 - 22,21, р-0,02), 3*52 ( 33,31 -10,0%, Р-0.С02).

В группе пациентов, заболевших ПБ после 16 лет, выявлены те .та различия в распределении АГ по сравнению с контролем,

X

что и з общей группа больных: достоверное с коррекцией повьше-

киа частоты AT Bv;52 (25% - 10,0%, р=5,5х10 , р =0,003) и пони-

С-*

женив частоты AI' S21 (2,5£ - 25,51, р=С,00И, рл=0,С-15), а также достоверное (без коррекции на число АГ) увеличение частоты встречаемости AT А24 (45%- 24,4%, р-0,02).

ТГриклшя зо внимание значительнее увеличение частоты встречаемости АГ DQw3 з группе больных смешанной формой ПБ (1002), а такяе- s группе больных ИВ, у которых заболевание развилось в детском возрасте, (90,5%), молено предположить существование отдельной формы ПБ, для которой характерен ранний дебют и скндромология смеианной формы, и маркером предрасположенности к которой является AT DQw3, аналогично тому, как ранее был установлен маркер (В35) "детской" формы СКВ £К. А. Буня-тян, 19833.

2. Изучение распределения HLA-AT в армянской популяция

Разработка проблемы "HLA я болезни" у армян сделала необходимым более глубокое я обширное исследование особенностей распределения HLA-AT в этой популяции. С этой целью было обследовано 90 лиц армянской национальности. Шлученные -данные испольаованы в качестве контроля при изучении особенностей распределения HLA-AT у армян, больных DE.

Вши изучены частоты HLA-A, В,С, DR и DQ антигенов и генов, частоты гаплотипов и величины неравновесного сцепления генов двух локусов: HLA А-В, A-DR, B-DR. Шлученные данные были сравнены с данными литературы о распределении HLA-AT в среднеевропейской популяции [Baur et al. ,19843.

- 18 -

Исследование распределения Н1А-фенотипов локусов А,В и ВК ' в представленной популяция .и сравнение их с теоретически рассчитанными до формуле равновесия /арди-Еэйнбгрга данными ползало, что в большинстве случаев наблюдаемые и рассчитанные величины близки мезду собой; то есть выявлено высокой соответствие олидаешх частот с наблвдаеыдаи для каждого локуса: для

2. 2 локуса А - X =106, р >0,05, для локусэ В ~ X' =142, р >0,0а,

#+ г ¿Ц

для локуса ПН - "Х,^ =74, р >0,05.

Результата изучения распределения частот Ыл-дГ и генов представленн в таблице 3. Как следует иг таблицы с наибольшей частотой встречается следующие АР: А2, АЗ, А24; В35, В49, Си?, ПИ, В54, а с учетом сплитов А9 (32,22%), (20,00%)

и. 35 ( 22,22%). В то ке вреыя А1' Ш4, В»42, Ви47 и С'лЗ в армянской популяции ле встречаются вообще. Цри сравнении особенностей распределения НЦ\-АР у армян со Сре^зеыношрскимя популяциями, в которых распространена 13Б, оказалась одинаково высокой частота следующих АГ: А2 и В35, а с учетом сплмгоз -АЭ, А*13 и £5; а такке одинаково шикая частота АГ Ак34. Е«42 и В*?47 [ТаЬа-саЬа: еЪ а1. ,1378; Вэппе-Таюзг еЬ а1. ,1973; КеШегх е1 а1. ,1579; К1ПлкагЛ еЬ а1. ,13852.

Сопоставление подучеялщс даяянх с распределением КЬА-АГ ъ "среднеевропейской" популяции ГЗгиг еЬ а1. ,19843 свидетельствует о том, что ЖА-генегический профиль армянской нозулчции. сохраняя основное особенности распределения европеоидов, в то лэ зремя имеет ряд существенных отличий от кэго (табл.-!). Отмечено достоверное увеличение частоты встречаемости следующих АГ в армянской популяции по сравнению с европеоида!,ж: АЗ (р=

-7

1,5x10'), ¿23 <р=0,Р006), т. (р=0,0002), А25 (р»0,026), Л25 (р-0,011), В35 (р-0,0008), В38 (р=0,0007), В45 (р=0..01), В49

Таблица 3

Частота антигенов и генов в армянской популяции

йзд-зо Частота Частота Кол-во Частота •feeтста

HLA- случаев антиге- гена HLA- случаев антиге- гена

АГ N-SO на в 7. АГ H=90 на в %

А 1 11 12,22 0,0631 3vfi5 4 4,44 0,0225

А 2 20 22 s 22 0,1181 В'А'55 1 1,11 0,0056

А 3 32 35,56 0,1973 ЕУЙО 4 4,44 0,0225

All. 1 7 7,78 0,0397 Bw61 1 1,11 0,0056

All. 2 4 4,44 0,0225 Ev;G2 6 6,67 0,0339

А 23 7 7,73 0,0397 О о 3,33 0,0168

А 24 оо 2*4,44 0,1307 Blank 0,1234

А 25 6 6,67 0,0339

А 26 а 8,89 0,0455 CM 2 2,22 0,0112

А28( Av/58 3 3,33 0,0168 Ow2 6 6,67 0,0339

+ Av*63) Cv3 0 0 0

А 29 4 4,44 0,0225 Cw4 8 8,89 0,0455

А 30 3 3,33 0,0163 е.» 1 1,11 0,0056

А 31 3 3,33 0,0168 Cw6 3 3,33 0,0168

А 32 4. 4, 44 0,0225 Cw7 21 23,33 0,1244

Aw33 4 4,44 0,0225 Cv8 0 6 0

AwSM 0 0 0 C\v9 3 3,33 0,0168

AV.-36 1 1.11 0,0056 OwlQ 3 3,33 0,0168

Av/43 1 1,11 0,0055 Cvdl 4 4,44 0,0225

Blank 0,1804 Blank 0,7065

В5.35 4 4,44 0,0225 Di? 1 19 21,11 0,1112

В 7 11 12,22 0,0531 DR 3 16 17,78 0,0932

В 3 5 5,56 0,0282 OR 4 35 ■ 38,39 0,2133

В 13 3 3,33 0,0168 DR 7 11 12 22 0,0531

В 14 5 5,56 0,0282 DRw8 ' 15 16^67 0,0870

В17( Bw57 3 3,33 0,0158 D.Rv/9 8 8,89 0,0455

+ B'.v58) DRwlO 4 4,44 0,0225

В 18 4 4,44 0,0225 DRyll 15 16,67 0,0870

В 27 4 4,44 0,0225' DBwl2 4 4,44 0,0225

В 35 21 23,33 0,1244 DRrt3 6 6,67 0,0339

В 37 2 2,22 0,0112 DM4 4,44 0,0225

В 38 ■ 3 10,00 0,0513 DiM 5 12 13,33 0,0690

В'39 3 3,33 0,0168 DRvfl6 10 11,11 0,0572

Bv?41 1 1;11 0,0056 Blank * 0,0671

Bw42 0 0 0

В 44 11 12,22 0,0531 DRw52 54 60,00 0,3675

В 45 3 3,33 0,0168 DKw53 50 55,56 0,3334

Bw47 0 0 0

Bw48 1 1,11 0,0056 DQ-.il 57 63,33 0,3944

В 49 19 21,11 0,1113 DQw2 23 25,56 0,1372

Ш50 4 4,44 0,0225 И 12,22 0,0631

В 51 11 12,22 0,0631 Dclwl 34 37,78 0,2112

B4f52 9 10,00 0,0513 DQw7 22 24,44 0,1307

Btf54 1 1Д1 0,0056 Blank 0,0634

Таблица 4

Частота ША-антигенов в армянской популяция .по сравнении со среднеевропейской популяцией л) .

НЬА-АГ

А 1 А 2 А 3 X 1Г А11.1 А11.2 А 23 7ГМ

Г25"

гж

М

Т2Б А 29(*19) А 30(*19) А 31( ¥19) А 32{'Л9) АУГЗЗ(1*19) Аи34 (10) АиЗб АУ?43

В5.35 В 7 В 8 В 13 В 14 В 17 В 18 В 2 7 В 35 Б~37

В 38 (1В) В ЗУ (1Ь; Вуг41 Ву/42 В 44 В 45

111

ши

а?48 В 49 БШГ В 51 (5)

Армянская

<-ш,г.илшг1л

N=90

12,22 22,22 35,56

7,78 4,44 7,78

1131

57§д зтзз

4,44 3,33 3,33 4,44 4,44 О

1,11

1,11

4,44 12,22

5.55 3,33

5.56

з,33 4,44 4,44

23,33

10,00 а, аз 1,11 О

12,22 о оо

и, иа

ТГ~ 1,11 21,11

12,22

Среднеевропейская популяция

14,2 28,9

тК

о,<з

1.4

2,9

3.5 2,9 3,9 1.4 0,1 0,1

0

11,5

9.6 2,9

3.7 2,9 5,5

3.4 10,5

2.5

27и

0,9 0,2 12,3

84'

В б. 2

ни- АГ Аоыянокая популяция ' N=90 Среднеевропейская популяция

В*52 (5) ВнЪАЫгг) Вга5( У22) В*/56( ¥22) В*60 (40) Вигб1 (40) В«52 (15) ВибЗ (15) 10,00 1,11 4,44 1,11 4,44 1,11 6,67 3,33 2.0 07Т 1,6 1,1 3,8 2,1 6,1 0,7

СМ С С«3 ста 0*5 С£5 С*7 С*8 СМ 0*10 СМ1 2,22 • 6,67 0 8789 1Д1 3733 23,33 0 3,33 3,33 4,44 3,3 4,1 12,6 ПТН 6,9 375 24,3 3,7

Ой 1 ш а 3 ЮР? 4 ШТ 0К«8 ОШ пнио 21,11 17,78 38,89 12722 16,67 й'йЭ КМ 15757 4,44 6,67 4,44" -. 13,33 11.11 9,5 157Н 12,0 12.7 12,0 3.0 ста 075 12^3 2,0 5,4 5,8

П&й! (5) Щ И2 (5) №г!КС2)

Р0У1 Ш 53,. 33 ш 24,44 32,3 15Д 23,2

*) - по данным Ваиг еЬ а1., 1984 подчеркнуто - различие достоверно (р < 0,05).

ч

(р-4,Зх1СГ^, В51 (р-0,044), Biv52 (р-0,0002), Bw63 (р-0,034), DR1 (р-0,002), DR4 (р=2,7я10^), DRwS (p=2,8xl0h DRw9 (р»1,9х 105, DRwlO (р=0,013), CQwl (р»9х10~5; и снижение: Cw3 (р=3,3' xlÖ"^.. Сто (р=0,04), DQw3 (р~0,01).

Достоверно наиболее часто встречающимися галлотипам! в армянской популяции являются А1-В37 (Ы112, LD=105), Al-Bw63 (h=109, LD=- 98), A2-B17 (h-163, LD=148), A11.2-Bw52 (h=110, LD -101), A23-B49 (h-266, LD=218), A24-Bw60 (h-161, LD=131), A26Bwc2 (h-107, LD-95), АуЗЗ-314 (h=167, LIM 61), Aw43-B39 (h= 56, LD-55), A2-DR3 (ЫМ6,. LD-23S), All. l-DRwl4 (Ы108, LD=99), A23-DR3 (h-161, UM 43), A23-DRw9 (h~159, LD=139), A24 -DR",vi 5 (h-365, LD=2?5), A28-DR1 (h= 162, LIM 37), B8-DR3 (h=220, UM94), B13-DRwl5 (h=108, LD=97), B18-DRw9 (h=10B, LD -97), B*52-DRwl5 (h-214, LD-184), Bv62-DRwl3 (h=165, LEM53). Достоверно наиболее редким является гаплотил A3-B38 (h—142, LD--247) (табл.5). Таким образом, самое высокое неравновесное сцепление установлено для галлотипов A24-DRwl5 (LD-275), А23-В49 (LD=218) и A2-DR3 (LD-235). С учетом спзштов у армян уве-личгна также частота гачлотипов А9-В5 (LD=193, h-402), А9-В35 (LD-153, h»418) н A9-B12 (LD-252, h-394), го ееть тех гаплоти-пов, которые наиболее часто выявляются у евреев и армян Средиземноморья С Tsfcatabai et al. ,1378].

Наиболее характерные для европеоидов HLA-гаплотшш А1-В8 (h«512, LD-247), А2-В44 (h-332, LIM 45), A1-DR2 ' (Ы287, LD-144), A1-DR3 (h-33S, LD-144), A3-DR2 (h»295, LIM 59), B7-DR2 (h-472, LD-394), B12-DR7 (h-500, LD-300) у армян прак- • т'ичэски не встречается (табл. 5). В то же время гаплотил B8-DR3 достоверно часто встречаемся как в среднеевропейской (Ь=486, LD-440), так и в армянской популяциях (h-220, LD-194).

Следует особо отменить, что в обследованной выборке армян

Таблица 5

Частота (hxlO^) и величины неравновесного сцепления (LD: HLA-гаплотипов, встречающихся с наибольшей частотой в

и "

среднеевропейской популяции по сравнения с данньад: по армянской популяции

HLA-гаплотшы Среднеевропейская популяция -л) Армянская популяция

LD и 11 LD h

А1-В8 247 512 -37 -20

А2-В44 145 332 -98 -23

АЗ-В7 156 378 44 185 .

A3-B38 48 87 -?J?i -142

A1-DR2 ** 144 287 -30 со

A1-DR3 144 386 -30 -5

A2-DR7 235 647 3/ 112

A3-DR2 -ал 159 295 -1S2 -41

B7-DR2 ** 394 472 -103 -55

B8-PR3 440 486 124 220

B12-DR7 300 500 -7 -4

B13-DR7 165 ■ 208 38 49

B17-DR7 233 312 38 49

B35-DR1 • 152 209 40 48

*) - по~данным В. Sohaiebl,1984.

•** - Антиген DR2 считали как сумму сплитов: DRsi-5 + DRv.ri6 шщ-жш 7 р-сО.Оа не был выявлен "классический" для европеоидов HLA-гашютип А1-В8 (табл. 5), с который у европейцев ассоциирована повышенная иммунореактмвность организма [Stobos1982, Gonva et al., 19833. Этот факт, по-видимому, связан с тем, что. гаплотгатА1--В8 очень редок во всех Средиземноморских популяциях, подверженных

ПБ (га яскдичэпием испанцев) [Tabatabai nt al. ,1978; ßonne-Tamir et sl.,1978; Renieri et al. ,1979; KirtiksnL st al. ,1985; Olivetti et al. ,1935].

Таким образом, выявлены выраженные отличия HLA-генетического профиля армянской популяции от среднеевропейской, что свидетельствует о необходимости дальнейшего изучения HLA-маркеров предрасположенности к различным заболеваниям у армян. Крокэ того, порученные данные способствуют дальнейшему углублении представлений о функции системы HLA.

ВЫВОДЫ

1. Генетическим маркером предрасположенности к периодической болезни у ар«ян является AT Bw52 (RR=5,5).

2. AT Bw52 является также маркером предрасположенности к двум форыая периодической болеани: абдоминальной и торакальной (RR составил 4,71 и 45,0 соответственно).

3. АР В™-32 (й?=10,8) ассоциирован тагаэ с тяжелым течением заболевания, осложненным аммоидозом.

4. Маркером смешанной формы периодической болезни является AT DQw3 (RR=25,0).

5. AT DQw3 (RR=9,5) является также маркером развития периодической болезни в детском возрасте.

6. AT В21 является протектором периодической болезни в целом (RR=0,07) и ее абдоминальной формы (RR=0,D9), в частности.

7. Установлен HLA- А,-В, -С, -DR и -DQ генетический профиль ар),ганской популяции.

8. Выявлены различия в частоте встречаемости отдельных

HL А-антигенов, генов к гаплотипов, и в значениях величин неравновесного сцепления у арман по сравнению со "срэдкеевропэй-ской" популяцией.

S. Данные о распределении HLA-антигенов являются основой для развития проблема "HLA и балегви" и клинической трансплантологии в Армении.

СПИСОК РАБОТ, опувшшоашья ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1) А. V. Atop jan Immunogenetiс aspects of periodic fever in Arnsnia //XIV Vor Id Conference of health education, Helsinki. -1991. -P. 113.

2) A. E Акопян, И. С. Полянская Ассоциированная с HLА предрасположенность к периодической бейками в армянской популяции // Сборни; матер. Ереванского Гос. {¿зд. Кн-та. -1S9 .

3) Р. iL Хдаоз, Л. П. Алексеев, JLRAkoesk, Ii С. Полянская Особенности распределении антигенов тканевой совместимости у больных периодической болезнью // К Эксп. и клин, медицины АН Армении. -1392. -Т. 32, N 1. -С. 25-29.

4) P. IL Ззатов, А. В. Аковян, И. С. Ш.танская Ассоциированная с HLA предрасположенность к периодической болезни в ар;<ан-ской популяции // Иммунология.-1S93 (в печати).

5) P. ii Хаитов, А. а Акошгн, TL С. Полянская KLA-генетический профиль армянской популяции IJ ймыунологкя. -1993 (в печати).