Автореферат и диссертация по медицине (14.00.01) на тему:Функциональные особенности клеточных популяций децидуальной оболочки при различных клинических формах позднего токсикоза беременных

с , .

ОРДЕНА ТРУЛОВОГО КРАСНОГО 211ЛМЕШ! !!АУЧНО-ИССЛЕЛб ЗАТЕЧЬ СКИЛ ИНСШУТ ЛК.Ш5РСТПА

и шшшгогж их д.о.отта ра:;.п

На прапах рукописи УДК 618 3-008.6 345.38.08

ЛИНДЕ Виктоп Анатольевич

ФУ1КЦИ01ШГЬШЕ ОСОБЕННОСТИ ЮТГОЧНПХ ПСПУЛ-ЦЙ ДЕЦИДУАЛЬНОЯ ОБОЛОЧКИ ПРИ РЛЗДИЧШХ КЛ;К!ЧЕСК:К ФОРМАХ ПОЗДНЕГО ТОКСИКОЗА БЕРЕ-ЕЛЯХ

14.00.01 - акуиорстчо и гинекология 14.00.РЗ - гистология, цитология, эубр.'ологля

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 199?

Работа пополнена п Лсшшграцском санитарно-гигиеническом i-etKUKHCKCffi 'институте,, ^¿¿/¿//VfWf //щ/Я^^^гУ

Научите рукопол'/.тс ли: поктор тедицинских наук, профессор

Л.А. С.услопароч !'пнл!пат №"uH)'hckhx наук, старший научт-!! сотрудник

■ В.,¡.'ихаЯлоп

С'?;г,ц:пльн!'Р оппонент: доктор мепвдшеких наук, профессор 3.3. Абрамченко доктор f.:eniTUHHCKir;< наvy, профессор Г.С. Катинас

■inrcvm'io учрекю»::е - !.iOI!i«J»r

Зштета диссерткмул состоится _ISO .f? г.

п часов на заседании сгсциаи:яироранного совета ■

Л D01.P1.01 г>ри научко-ясслс'чогатольсггом институте акушерства и гинекологии PA.7J! /1991?-'., С,- Петербург, Менделеевская линия, 3/.

С диссертацией кожно ознакомиться в библиотеке ЛЖАГ РЛМ1.

Автореферат разослан

Ученый секретарь специализированного совета

доктор медицинских наук, про fe: ссор Н.Н. Константинова

1. 0Ы11АЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

Актуальность проблемы. Поздний токсикоз бетскешшх остается одной из главннх причин материнской и детской смертности /Слепых A.C., 1984; Репина М.А., 196$; Чернуха Е.А., 1091/. При этом опасны не только тяжесть, но и длительность течения заболевания /Стряяова Н.З., 1957; Гриценко В.И., Иербина ii.A., 1988; Серов В.Н. с соавт., 1990/. Борьба с последствиями позднего токсикоза, его диагностика и лечение являются одной из наиболее актуальных к сложных проблем современного акугюмслп А'ечинашвили Г.Г., 1985; Ушганова Т..Б, с соавт., 1387;- Ярем-ченко А.Е., 1988/.

В развитии позднего токсикоза беременных значительную роль играют изменения, происходящие в фето-штцентарном комплексе / eU'iä'iit 1 #> 1S81; риГллбПо Н, «S 1983; Мустафьева H.A. с соавт., 1987/. Большая часть работ, посвя-шенннх этой проблеме, основное внимание уделяет анатомическим я функциональным им.'рнекиям, происходящим в плаценте /Коло-мейчук Л.В., 1985; Федорова М.В., Калашникова Е.П., 1Э06; Ишпахтин К.И., 1988; Червакова Т.В. с соавт,, 1989/. Гораздо меньшее число исследований посвящено изменениям, происходящим в яецидуалькой оболочке/л/ямацентаряой ее части/ Дотцова H.A. с соавт., 1989; Sl'^M'f Р 1989;//¿'н^// Я 1289/. ?,'езду тем известно, что децидуальная оболочка активно участвует в обеспечении нормального течения беременности, родов а внутриутробного развития плода, выполняя такие функции как защитная, эндокринная, иммунная, участие в гемостазе и др. /Сусдопаров Л.А., 19SÜ; Михайлов B.U. с соавт., 1986; ChltfH

6 1987; Савицкий Г.А., 1988/. В частности,, клетки деци-дуальнсй оболочки синтез'.груют пролактин, простагландины Е2 и [2Ч , белки беременности РР-12, РР-14, РАРР-А и другие биологически активные вещества / В'^с^о/ Р ^ 19а4 / 1987\У«{'(иЛ(!Л /V., 1988; (п> АшЖг />/.,

1-88/.

Цель к задачи исследования. Целью настоящей работы явилось исследование (Тункционалышх особенностей клеточных популяций децидуальиой оболочки при физиологическом течения беременности и различных клинических йорках позднего токсикоза.

Для достижения указанной цели били поставлены следупцио задачи:

1. Изучить пролиЯератнвную активность децидуалышх клеток при Физиологическом течении беременности и беременности осложненной позднем токсикозом.

2. Провести анализ стабмьности содержания ДЖ в диплоад-шх клетках децидуальиой оболочки иетолои проточной ДЖ-цито-метрни ггрк физиологически протекаюцей беременности и различных клинических $ориах позднего токсикоза.

3. Изучить кхллерную активность гранулярных клеток эндометрия н других лЕмфоядных клеток, находтщася в составе децидуальной оболочки при физиологически протекаодей беременности и различных клинических формах позднего токсикоза.

4. Изучить супрессорную активность гранулярных клеток эндометрия и других лстйоидных клеток, находящихся в составе децидуальной оболочки при физиологическом течении беременности

и различных клинических формах позднего токсикоза.

5. Проанализировать изменения содеряания пролактина в сыворотке крови беременных при физиологической беременности и различных клинических формах позднего токсикоза и пзаш/ос-шзь этих изменений с морфофутщкональным состоянием децидуальной оболочки.

6. Выработать диагностические критерии для уточнения степени тяжести .позднего токсикоза беременных по даншм монофункциональных изменений децидуальной оболочки.

Научная новизна работа,

1. Впервые методом проточней ДНК-цитометрии установлено изменение вариабельности содержания ДНК в децидуалышх клетках по мере прогрессированкя беременности и при различных клинических формах позднего токсикоза беременных.

2. Впервые измерена пролиферативная активность децидуаль-шх клеток в разные сроки беременности и при позднем токсикозе беременных.

3. Впервые показана связь мозду степенью вариабельности содержания ДНК в клетках децидуальной оболочки и их пролифе-ративной активностью и степень» тяжести и длительности позднего токсикоза беременных.

4. Установлена корреляционная связь генду изменениями сывороточного уровня гролакгина и вариабельности содержания ЛЗК в децидуальянх клетках.

5. Впервые исследог.ались киллернат и супрессорная активность гранулярных клеток эндометрия и других лимфоидшх клеток, находящихся в составе децидуальной оболочки при различ-

Ю1Х кл:шнческ::х <^ор;/.ах позднего токсикоза беременных.

Научно-практичее-кая ценность работы.

Дака клиническая. интерпретация кор^офункционалышх изменения, Лроисходгаих в децидуальноЯ оболочке при позднем гог.~ сикозе беременных. Пуказана связь степени т;рахенности этих иатеноккР. с тяжестью и длительностью течения позднего токсикоза бетх'кешп.'х.

Установлен дополнительный тест диагностики степени тяжести позднего 'юксиксэа берем иных, оаклтшх::у,\он в повысешш ' вар.икЗа 1!<::с.сти содешнннл Д!5\ в децпдуальккх клетках и снижена:' их пролиЛератигно;; актгкнос?;:.

Нкодг.-'Н'.'ь результатов н практику. Результаты исследования притеняются в повседневно?. практической работе ь родилышх • догах И5 к при больнще ЯЗВ г. С.-Петербурга, а такте в процессе преподавания на каН'ДРе акушерства к гинеколога: ¡.:едмко-про^плакткческого факультета ЛСГлЛ.

По результатам работы зьрбггестрнроьако рационализаторе- ' кое предложение /удостоверение Я235 от 13.12.91/.

Ащюбещ'-Я тботк. Результаты и основные положения работы долохекы на Всесоюзной кон^рекцик •Чуккционатьная морфология клетка" /Санкт-Петербург, 1921/ а ХХХ1У конференции студентов и аспирантов мер; ологкческ.тх кафедр а лабораторий ленинградских ВУЗов и научно-исследовательских институтов /Санкт -Петербург, 1991/,. на расширенном заседании кафедры акулерства гинекологии кедгасо-профилактэтеского факультета ДСП.-; /Санкт -Петербург, ЗЬ92/.

Основные положения. шносисье на защиту:

1. При доношенной беременности, по сравнению с первым триместром, наблюдается увеличение гетерогенности клеток де-цидуальной оболочки по содержанию ДНК. Дальнейшее увеличение гетерогенности клеток по содержанию ДНК происходят при позднем токсикозе беременных, причем степень его коррелирует с длительностью и тяжестью заболевания.

2. Доношенная беременность характерезуется более низкой, по сравнению с первым триместром, пролиферативной активностью децвдуальных клеток. Дальнейшее снижение пролиферативной активности клеток происходит при позднем токсикозе беременных, причем степень снилсения коррелирует с тяжестью и длительностью течения заболевания.

3. Определение степени гетерогенности клеток децидуальной оболочки по содержанию ДНК и уровня их пролифзративноЯ активности может использоваться в качестве дополнительного диагностического теста для оценки степени тяжести позднего токсикоза беременных.

4. При развитии у беременных клиники позднего токсикоза происходит изменение содержания пролактина в енворотке крови. При легкой преэклш.шсии отмечается повышение его содержания, при тяжелой преэклашсии - снижение. Поваиение сывороточного уровня пролактина при позднем токсикозе беременных коррелирует с увеличением гетерогенности клеток децидуаяыюй оболочки по содержанию ДНК.

5. Лкмйоидная популяция децидуальннх клеток в поздние срок:; беременности обладает высокой еупрессорной активностью;

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работк и 3 нпхопятся в печати. Перечень работ праведен в конце автоСтруктур у ол-ьрм работы. Диссертация изложена на 191 странице к состоит из вне юшш, 4 глав, гч'подов, практических рекомендация и списка литературу, включагкего 335 источников /1?7 отечественных и ?08 иностранных авторов/. .

Работа иллюстрирогаша 58 рисункам! и содержит 11 таблиц.

?. С0ДЕР2АНЖ ГАГОШ

Материалу и метод» исследования. При вчполнении работ»' било обследовано 107 женгш. "з них 9 - неберемешшх женщин во вторую (Тазу менструального никла, 11 береметшх женщин при сроке беременности 7-9 недоль и 48 женпган с <Тизиологически протекавшей беременностью при сроке 37 - <10 недель. Основную группу составили 99 беремешшх с различными клиническими Ирмами позднего токсикоза. 13 том числе с отеком беременных - 31 человек, с легкой преэклампсией - 39 человек, с длительт'м течением позднего токсикоза /более 4 недель/ - 9 и с тяжелой преэклампсией - 18.

Децидуальную оболочку для исследования брани сразу после ролов из нескольких мест у края плацента» и п области разрнва плоддах оболочек или при операции искусственного аборта.

Для мор-Тологического исследования препарату Яиксит^гачнсь в 10^ нейтральном Формалине и готовились по обкепринятнм методам /Меркулов Г.А., 19Л9/. Изучение препаратов осуществлялось при увеличениях х 300 и х 900.

Доя изучения содержания ДНК в клетках лецядуачьной оболочки приготовляли взвесь клеток путем механического измельчения с последуюлеИ последовательной обработкой материал^ трипсином /0,5 ?лг/мл; 30 минут/ !' коллагеназой /1 мг/мя; 60 минут/. Содержание Л!К в децидуалыгнх клетках исследовалось с помощью проточной ДКК-цктометрии с использованием красителей олиромадна и бромистого эткдия. ¡3 результате математической обработки ДНК-гистограмм определяли коэффициент вариации 0( пика и долю клеток находяяихся в (?аэе синтеза ДНК. Кроме

того анализировали изменения формы $! пика.

Дад изучения лкмФоидной популяции децидуальных клеток, после получешш клеточкой взвеси /без применения трипсина/, клетки центрифугирован: на градиенте плотности фиколла - ве-porpafüiia. Дальнейшее ¡^акционирование клеток проводилось на градиенте плотности перколла различных концентраций /20?, 40* и &)£/. Цитотоксическпй и суггрессоршй тести ставились после удаления мокоц-тов ¡:з суспензии.

При постановке тестов использовались клетка К-562 - эри-тробла.;.'озк человека к кровь здоровых доноров - мужчин. Инкубация проводилась 4 часа к 18 часов. Для определения естественной цитотскспчкости лкиТопдных клеток децидуальной оболо-

О

чки применяли ¡.здн&щнроЕанккй °11-ур::д:!.човк1! тест Хазш/ото и Судо fMaJ'.'rwt-O Г ., /., 1971/. Супрессорнув ак-

тивность определял:: по методике описанной £, ¿Mifi'W'1 J и P.S. }(ich»;fi.s) /1980/.

Содержание пролактнна в сыворотке крови обследованных .тешлин определяли радиоимиунолсгическ;::.! i.-етодом с помощь» стандартных наборов " фкр:.ц !-((Z/>u'i filt-is/3

/Финляндия/.

Весь цифровой материал подвергайся статистической обработке с исгодьэованкем пакета ШТбМРШН /Канада/.

Результаты собственных исследований. Оценка вариабельности содержания дгХ в децкдуалышх клетках проводилась путек определения коэффициента вариаци:: ¿V пика ДЖ-гистогршяж-а учета, количества аномальных тков при ДЦК-цитометрки. Анализ этих показателей вчяыл достоверное отлячие вариабэль-

ности содержания ДИК в клетках децидуальной оболочки при физиологически протекающей беременности 37 - 40 недель от вариабельности на ранних сроках /7-9 недель/ беременности. Коэффициент вариации Он пика при беременности 37 - 40 недоль составлял 2,98 + 0,11 % /при 2,36 + 0,1 % к ранние срост/, аномальные пики встречались в 47,4$ случаев /в ранние сроки не встречались/.

При позднем токсикозе беременных имеет место дальнейшее увеличение коэффициента вариации и количества аномальных пиков на ДНК-гиетограмыах децидуальной оболочки. Причем увеличение происходило пропорционально степени тяжести и длительности заболевания. Так, например, коэффициент вариации (ft пика при легкой лреэклампсии был равен 3,82 + 0,21 %, нря длительном течетш /более 4 недель/ позднего токсикоза беременных - 4,09 + 0,17 % , а при тяжелой преэклампски - 4,41 + 0,22 %. Известно, что терминально дифференцированные клетки некоторых клеточных популяций характеризуются нестабильностью содержания ДЖ / Moc/az . et й/ ., 1970; famtWf/o .

lif ., 1990/. Так, показано, что-наиболее даффзренциро-ванные большие децидуальше клетки крко содержат меньшее количество МК, чем клетки на более ранних этапах тш5ференцк-ровки /Михайлов В.М. с соавт., 1S89/. Эти данные в сочетании с выявленным при тяжелой преэкл-чглсии увеличение!.! доли, терминально длТхТерещировалных больших децидуалъачх клеток /Котцо-ва H.A. с- соавт. , 1989/ позволяют сделать вывод, что выя&лен-нне увеличения коэффициента вариации (if пика и колотества аномальных (Ü пиков на ДШ-гиотогракмах децидуальных клеток

объясняется увеличением терминально дифференцированных клеток в популяции. Данное увеличение терминально дифференцированных клеток при позднем токсикозе беременных свидетельствует с "преждевремг-нном старении" децидуалыюй оболочки при данном заболевании, степень которого зависит от степени тяжести и длительности патологического процесса.

При отеке беременных было выямено уменьшение значения коэ№щ1:сн~а вариации С-1 пика до 2,54 + 0,15 % и количества ано:.'ачш:х /у пиков до 25?!. Это дает основание считать, «то отек ¿с-ремишчх, если он не соправеждается другими клиническими симптомами гестоза, можно рассматривать как самостоятельную нозологическую единицу.

0 лратаТеративноЯ активности клеток децидуалыюй оболочки судили по количеству клеток, находящихся в с[азе синтеза ДНК / - фазе клеточного цикла/ вкяменмому при ДЦК-цитометркк. Обнаружено достоверное снижение пролитеративной активности деиидуаяьннх глеток по мере прогресспрования беременности. При беременности 7-9 недель долл клеток а 3 - Зазе клеточного текла составила 3,5 + 0,33 а в 37 - 40 недель беременности - 1,59 + 0,15 %. Данное явление может быть объяснено тем, что в поздние сроки беременности в связи с прекращением роста отодннх оболочек в децндуа устанавливается уровень про-лиферативной активности клеток необходимый для ко:.гпенсац:м естественной клеточной гибели к поддержанвд условий для нормального функционирования оболочки.

При развитии у беременных явлений позднего токсикоза снижение прелифератквной активности децпдуальнкх клеток ста-

ловилось более выраженным. Так, при легкой преэклаштсии доля клеток, находящихся в фазе синтеза ДНК составила 1,05 + 0,17 %. Что в сочетании с увеличением количества терминально дифференцированных клеток свидетельствует о трудности нормального функционирования децидуальной оболочки. Снижение пролифератив-ной активности клеток продолжалось при длительном течении заболевания и достигало своего максимума при тяжелых его формах. О чем свидетельствует уменьшение при течении гестоза более 4-х недель доли децидуатымх клеток в фазе синтеза ДНК до 0,79 + 0,23 %, а при тяжелой преэклампоии - до 0,45 + 0,14 %%

Для уточнения котаенсаторнкх возможностей децидуальной оболочки при гестозе подсчлтнвалось количество клеток на единицу площади ее контактного слоя. Выбор объясняется тем, что компактней слой децидуальной оболочки состоит из нескольких рядов плотно прилегающих круг к другу преимудественно больших децидуалышх клеток Датарова H.A., 1990/.

Прл физиологическом течении беременности в сроке 37 - 40 недель количество клеток на 4хЮ~6 им2 компактного слоя децидуальной оболочки соответствовало 9,64 + 0,32. Достоверное снижение данного показателя отмечалось при длительном /7.С8 + 0,27 клеток на 4 х 10"6 мл2/ и тяжелом /6,29 + 0,22 клетки на 4 х Ю~° rai2/ течении гестоза. Необходимо подчеркнуть, что уменьшение количества децидуаль.чых Клеток на единицу площади компактного слоя при длителыюм и тяжелом течении позднего токсикоза беременных происходит на фоне выраженного снижения их пролиферативной активности. Очевидно, что пролиферативная активность децидуальшх клеток не может скомпенсировать их гибели, что подразумевает нарушение нормального функционирования

децидуадьной оболочки. Вместе с тем возникает вопрос о механизме гибели децидуальных клеток. При гистологическом анаяезе H.A. Татеровой /1990/ было выявлено, что большие децидуальные клетки, доля их в петпуа в эти сроки беременности достигает 70/5, на терминальной стадии ди^ференцировки характеризуются ядрами с большим числом хромоцентров и глубоким; инвагинациями ядерной оболочки. Вместе с электронно-микроскопическими данными о том, что для больших-децидуальных клеток человека характерна секреция по типу блобинга /Михайлов В.М. с соавт., 1936; ^Жг , ¿2/ ., 1986/ это позволяет сделать вывод, что выявленные в конце срока гестации увеличение коэффициента вариации пика и появление аномальных & пиков на ДНК-гистограммах, усиливающиеся при гестозе, свидетельствуют о том, что гибель децвдуальных клеток происходит по механизму алоптоза, т.о. по механизму программированной клеточной гибели Дманский, 1982; Wytä'e , rf/., 1986/.

0 функциональных особенностях децидуальных клеток мояно отчасти судить и по содержанию пролактина в снворотке крови беременных. Известно, что пролактин активно синтезируется клетками децидуальной оболочки /У. 1988/. Кроме того есть данные о связи изменений сывороточного уровня пролактина с изменениями доли больших децидуальных клеток в децидуальной оболочке при поз,днем токсикозе беременных /Татарова H.A., 1990/,

При легкой преэклампсии у беременных било выявлено достоверное увеличенго сывороточного уровня пролактина /2163,1В + 118,09 ^/'Z / по сравнению с уровнем при физиологической беременности тех же сроков /1400 + 43,54/l/j'''/ii' /. При тяжелой

преэклампсии содержание пролактима в сыворотке крови беременных падало до 1241,67 + 84,57 Ц .

Анализ случаев динамического наблюдения за содерзанием пролактина в'крови беременных показал, что найти связь между э^-ективностьв лечения гестоза и характером изменений сывороточного уровня пролактина не удается.

При сопоставлении концентрации пролактина в сыворотке крови с мор.];офункционалышми характеристиками деци,дуальной оболочки обнаруг^-ио, "что повышение содержания пролактина ъ крови беременных имеет положительную коррелятивную связь с увеличением вариабельности содержания ДНК в деш:дуалышх клетках /косИичиент корреляции равен + 0,762/, а снижение сывороточного уровня пролактина положительно коррелирует с уменьшением количества клеток на единицу площади компактного слоя дециду-ать.чой оболочки /коэффициент корреляции равен + 0,636/. Таким образом, подтверздена связь мо.уду изменениями содержания пролактина в сыворотке крови беременных и морфо&ункционалышгж изменениями в децидуальной оболочке при гестозе.

Исследован;» функций лим^оидпой -популяции клеток дециду-с^.опой оболочки проводилось в следующих группах рожениц: с физиологическим течением беременности и.родов /15 наблюдений/, с рода:.« на Зоне отека беременшх /7 наблюдений/ и с родами на Зоне легко!! преэклаьтски /8 наблюдений/.

Цитотоксическая активность ликфоидных клеток децидуальной оболочки оказалась более вмраченной в 18-и часовом тесте, чем в 4-х часовом как в не фракционированной суспензии лимфоидшх клеток, так л во фракциях,полученных при разделении на града-

енте плотности перколла. Например, цитотоксическая активность нефракционировашмх лимфовдных децидуалышх клеток при физиологических беременности и родах в 4-х часовом тесте составила 1,3 + 0,8 ■%, а в 18-и часовом - 5,0 + 1,1 %.

■ Ъ целом можно отметить, что децидуальная оболочка в поздние сроки беременности обладает низкой киллерной активностью по отношению к клеткам-мишеням К-562 во всех обследованных группах. Хотя по фракции клеток, соответствующей G0% перколла была выявлена достоверно более высокая киллерная активность при легкой треэклампсии /16,5 ± 3,4 % - в 4-х часовом тесте/ по сравнению с активностью при физиологической беременности, 8,0 + 2,1 - в 4-х часовом тесте.

Супрессорная активность лимфоидных клеток децидуальной оболочки оказалась более выраженной в 4-х часовом тесте, чем в 18-и часовом. Причем уровень супрессорной активности нефрак-ционарованных лимфовдных клеток фактически не менялся в зависимости от группы обследованных женщин и составил в среднем около 72$ в 4-х часовом тесте и 12% в 18-и часовом.

Анализ супрессорной активности по фракциям выявил, что она более характерна для фракций, соответствующих 20% перколла /около 100$ в 4-х часовом тесте/ и 60/5 перколла /около 87/Í в 4-х часовом тесте/ и так ж.е не зависит от группы обследованных.

Интересно отметить, что при подсчете количества клеток во фракциях, во фракции,соответствующей 20$ перколла количество их оставалось примерно одним и тем же во всех группах женщин /около 7 млн на 1 ш/, в то время как во фракции, соответствующей G0Í перколЛа количество ктеток оказалось значительно

большим при легкой преэклампсии /16,0 +1,4 млн на 1 мл/, чем при физиологических ролах /7,6 + 0,5 шн на 1 мл/. Этим, возможно, и объясняется высокая киллерная активность данной фракции клеток при легкой преэклампсии.

Известно, что основными лимфоидннми клетками децидуальной оболочки являются гранулярные клетки эндометрия /Котцова Н.Л. с соавт., 1989; / ., У-1У"., 1990/, характерным

признаком которых является наличие в цитоплазме ШИК-положитель-HUX ЛЕЖА и гранул (S^Cnibz/ J S ., 1977/.

Для оценки вклада этих меток в цитотоксическую и супрес-сорную актиг юсть децидуальной оболочки проводился количественный анализ клеток, содержащих 1ПЖ/+/ гранулы во Фракциях. Било выявлено, что наименьшее число таких клеток находится во фракции, соответствующей 40$.перколла, гйе их доля не превышает 1,5$ ни в одной из обследованных групп рожениц. Наибольшим количество клеток с КЖ/+/ гранулами оказалось зо фракции, соответствующей 20* перколла, где оно составило около 30* всех клеток во всех обслслопанных группах. Доля клеток, содержащих ЕИК/+/ гранулы во фракции, соответствующей 60$ перколла при Физиологических родах и при родах на фоне отека бе-реме гшых составила примерно 4%, при легкой же преэклампсии доля их соответствовала 17,5 + 6,2 %.

МорфокстрическиЯ анализ клеток, содержащих ШИК/+/ гранулы выявил их гетерогенность. Для фракции, соответствующей 20$ перколла характерными оказались крупные овальные клетки с большим округлым ядром и большим количеством гранул. Диаметр этих клетск был равен в среднем 14,1 + 2,3 мкм. А для фракции, соответствующей 60£ перколла более характерными были небольшие

округлые клетки с незначительном количеством мелких ШИК/+/ гранул. Диаметр этих клеток равнялся в среднем 8,7 + 1,0 мкм. Можно предположить, что первому типу гранулярных клеток /крупные метки с большим количеством гранул/ свойственна супрес-сорная Функция, а второму типу - цитотокоическая активность.

ВЫ ВОДЫ

1. К окончанию физиологически протекавшей беременности по дашдам проточной ДНК-цитометрии наблюдается увеличение гетерогенности клеток деципуапьной оболочки по содержанию ДНК по сравнению с гетерогенностью при беременности 7-9 недоль. Коэффициент вариации пика в конце беременности равен 2,9В ± О,11$; при беременности 7-9 недель - ?,3б + 0,1$. При позднем токсикозе беременных установленные нами изменения усиливаются, причем степень усиления коррелирует а длительностью и тяжестью течения заболевания. Так при легкой преэкпампсии коэффициент вариации (м пика соответствует 3,8? + 0,21 %, йри длительном течении - 4,09 + 0,17 %, при тяжелой преэклампсии -4,41 + 0,22 %.

2. По пандам ДНК-цитометрии в конце Физиологически проте-каюдей беременности децидуальная оболочка характеризуется сниженном тгроли<!еративной активности клеток по сравнению с беременностью 7-9 недель. Доля децидуальдах клеток,'находящихся

в Фазе синтеза ДНК в коже беременности составляет 1,59 + 0,15% при 3,5 + 0,33 % при беременности 7-9 недель.

3. При позднем токсикозе беременных отмечается дальнейшее снижение пролиферативной активности клеток децидуальной

оболочки, коррелирующее с длительностью и тяжестью течения заболевания. Так при легкой преэклампсии доля децидуальных клеток, находящихся в фазе синтеза ДЖ составляет 1,05 + 0,17 %; при длительном течении - 0,79 + 0,23 %; при тяжелой преэклампсии - 0,45 + 0,14

4 . Количество клеток на единицу площади компактного слоя

децидуальной оболочки в поздние сроки берикс тюстч состааллот

9,04 ± 0,32 клетки на 4'х 10~D мм2. При длительном течении

/более 4-х педель/ позднего токсикоза беременных наблюдается

G ?

снижение этого показателя до 7,08 + 0,27 клетки на 4 х 10" :д.г.

Л Г)

Прл тяжгло? ir;.cэклампсии количество клеток на 4 х 10" mf' компактного слоя децидуалыюй оболочки сшшается до 0,29 + 0,22.

5 . Увеличение гетерогенности децклуаль'ннх клеток .по содержанию ™3\ в конце срока гестации, усиливавшееся при позднем токсикозе беременных позволяет сделать внвод, что в основе выявленных гибели и потери клеток компактного слоя децидуальной оболочки лежит явление апоптоза.

S. При физиологической беременности поздних сроков сывороточный уровень пролактина ранен 1400 + 43,54. Повышение сквсроточного уровня пролактина при легкой преэклампсии до 2163,15 + IIS,09коррелирует с увеличением вариабельности содержания ДЖ л децидуатьшх клетках. Снижение сывороточного уровня про тактика при тяжелой преькдампсии до 1241,67 + 34,57 А//' сопровождается снижением количества децидуальных клеток на единицу площади компактного с.7:оя.

7. В качестпе дргюшнтг.льного диагностического теста np,i

оценке степени тяжести позднего токсикоза беременных может использоваться определение методом проточной ДК-цитометрии степени гетерогенности 'клеток децидуальной оболочки по содержанию ДНК и уровня их пролиферагивной активности.

8 . Децидуальная оболочка поздних сроков беременности характеризуется высокой супрессорной активностью лимфоидной популяции клеток - 73,0 + 4,0в 4-х часовом тесте.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКО,МЕЩЦШ

1. В ;вязи с тем, что установленное изменения в лещ-дуальных клетках, такие, как увеличение гетерогенности клеток децидуачьной оболочки по содержанию ДНК и снижение их ггроли-феративной активности, а также уменьшение количества дециду-альных клеток на единицу площади компактного слоя существенно прогрессирует как при утяжелении клинических проявлений позднего токсикоза беременных, так и при увеличении длительности •течения заболевания, при длительно текущем позднем токсикозе беременных /более 4-х недель/ рекомендуется тактика ведения, аналогичная используемой при тяжелых его формах.

2. С целью уточнения степени тяжести позднего токсикоза беременных для корректировки объема послеродовых реабилитационных мероприятий рекомендуется проводить цитомстркчоское исследование гетерогенности клеток децидуалыю^ оболочки по содержанию ЛЖ и их пролиферативной активности.

• 3. Чрезмерная задержка воды на поздних сроках беременности не сопровождающаяся другими симптомами, характерными для позднего токсикоза может рассматриваться как самостоятельная нозологическая единица. •

Список работ. опубликованных по теме диссертации:

1. Проточная ДНК-цитометрия терминально rwWeренцировант»х клеток человека // Цитология.- 1991,- № 9. /в соавт.. с Ю.М." Розановым, B.W. Михайловым, H.A. Татаровой/.

?. Особенности пролиферации клеток децидуальной оболочки при физиологически протекающей беременности и беременности, осложненной гестозом // программа ХХХ1У конференции студентов и аспирантов морфологических каФедр и лабораторий ленинградских ВУЗоп и научно-исследопательских институтов.- С.-Петербург. _ 1991.- С. 1?-13.

3. Способ диагностики гсстоза,- Рационализаторское прец-лояение !'" 1235 от 13.1?, 1991. /в соавт. с Е.А, Коннчевой/.

РотчААНИИ.З«*. 13-100 11.02.» Учлшил. 0.4'