Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Феномен эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных артериальной гипертонией и его клиническое значение

На правах рукописи

,1

Рогова Зульфия Шамшиддиновпа

ФЕНОМЕН ЭНДОГЕННОГО АУТОРОЗЕТКООБРАЗОВАНИЯ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ И ЕГО КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

14.00.06-кардиология 0034533иь

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Тверь-2008

003453308

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении профессионального образования «Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава) на кафедре госпитальной терапии и профессиональных заболеваний

Научный руководитель

заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор Виолен Степанович Волков

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Юрий Михайлович Поздняков доктор медицинских наук, доцент Сергей Васильевич Колбасников

Ведущая организация

ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет» МЗ РФ

Защита состоится " 2 декабря" 2008 г. в 12:00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.099.01 при ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава по адресу: 170642, Тверь, ул. Советская, 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тверской государственной медицинской академии и на сайте академии: http://www.tsma.tver.ru

Автореферат разослан 2008г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат медицинских наук, доцент

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Артериальная гипертония в настоящее время является одним из самых распространенных хронических неинфекционных заболеваний (Арабидзе Г.Г. и др, 1999; Оганов Р.Г., Масленникова Г.Я., 2000; Чазова И.Е., 2002, Оганов Р.Г., 2003; и др.). Активное лечение больных АГ позволяет существенно смягчить клинические проявления заболевания и улучшить прогноз как в отношении жизни, так и трудоспособности (Кушаковский М.С., 2002; Шляхто Е.В., 2002; Гогин Е.Е., 2004; Бойцов С.А., 2004 и др.). Больные АГ для поддержания удовлетворительного состояния и контроля АД должны принимать гипотензивные препараты постоянно, фактически пожизненно (Чазова И.Е., 2002; Карпов Ю.А., 2003; Остроумова О.Д. и др., 2004, 2005 и др.). Количество назначаемых врачом препаратов зависит от стадии АГ, степени повышения АД, с одной стороны, а также от особенностей патогенеза заболевания, наличия осложнений и сопутствующей патологии, с другой. Однако, с увеличением длительности приема лекарств и увеличения их количества нарастает частота их побочного действия (Jeunemaitre X. et al. 1988; Neil S. et al., 2000; Mogenson C.E. et al., 2003; Кобалава Ж.Д. и др., 2005; Голиков А.П. и др., 2006; Чазова И.Е., 2006 и др.). О возникновении последних судят в основном по появлению клинических признаков лекарственной непереносимости как аллергического, так и токсического характера. При этом не исключено, что проявления лекарственной непереносимости, возможно, имеют более ранние доклинические признаки, но этот вопрос практически не изучен.

В этом отношении привлекает внимание феномен эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови. Он рассматривается в настоящее время как один из механизмов удаления из крови измененных эритроцитов. Можно полагать, что увеличение числа эритроцитов с измененными мембранами активирует розеткообразующую способность нейтрофилов и моноцитов в периферической крови. В настоящее время феномен внутрисосудистого ауторозеткообразования изучен у интактных животных, здоровых людей и при некоторых патологических состояниях (Бельченко Д. И., 1993, 1999; Волкова О.В., Бельченко Д.И., 1996; Смирнова Е.А., Бельченко Д.И., 1996; Шубич М.Г. и др. 1997; Волков B.C. и др., 2004; Коричкина JI.H и др., 2006, 2007; и др.). Исследование внутрисосудистого розеткообразования при АГ представляется весьма актуальным и не исключено, что полученные результаты будут иметь клинико-диагностическое значение.

Цель исследования. Изучить характер эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных АГ в зависимости от длительности и интенсивности гипотензивной терапии и

сопоставить его с показателями функционального состояния эритроцитов крови и иммунологического статуса пациентов.

Задачи исследования:

1. Исследовать интенсивность эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у здоровых лиц.

2. Выявить особенности эндогенного ауторозеткообразования у больных эссенциальной АГ.

3. Изучить изменения эндогенного ауторозеткообразования у больных эссенциальной АГ под влиянием гипотензивной терапии.

4. Исследовать средний размер, деформируемость, осмотическую резистентность, сорбционную способность эритроцитов и удельное сопротивление крови у больных артериальной гипертонией и сопоставить полученные показатели с характером ауторозеткообразования.

5. Изучить показатели иммунологического статуса у больных эссенциальной АГ (общее число лейкоцитов, фагоцитоз, метаболическую активность лейкоцитов, содержание иммуноглобулинов) и сопоставить их с характером ауторозеткообразования.

Научная новизна. Впервые проведено изучение эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных эссенциальной АГ. Установлено, что у больных с впервые выявленной АГ без лечения количество эндогенных ауторозеток не отличается от такового у здоровых лиц при значительном снижении числа ауторозеток с лизисом эритроцитов. Впервые отмечено у больных АГ увеличение числа ауторозеток и лизиса эритроцитов на фоне приема как периодического, так и постоянного приема гипотензивных средств. При длительной лекарственной терапии у этих больных зарегистрировано образование эозинофильных ауторозеток. Впервые выявлена у больных АГ взаимосвязь интенсивности и характера эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови с показателями размеров, деформируемости, осмотической и сорбционной способности эритроцитов, с общим числом лейкоцитов, фагоцитозом, метаболической активностью. Установлено, что при значительном увеличении общего числа ауторозеток и ауторозеток с экзоцитарным лизисом эритроцитов у больных АГ, длительно принимающих гипотензивные средства, снижается количество эритроцитов в периферической крови.

Практическое значение

I. У больных АГ под воздействием приема гипотензивных средств наблюдается повышение частоты эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови.

2. Контроль ауторозеткообразования в периферической крови у больных АГ может рассматриваться как один из дополнительных методов слежения за состоянием больных, длительно принимающих гипотензивные препараты. С увеличением длительности и количества принимаемых лекарств общее число и число ауторозеток с лизисом эритроцитов у больных АГ значительно возрастает.

3. Подсчет числа ауторозеток в периферической крови на фоне лечения у больных артериальной гипертонией может служить в качестве дополнительного диагностического теста побочного действия лекарственной терапии.

Внедрение. Результаты исследования используются на практических занятиях кафедры госпитальной терапии и профессиональных заболеваний, внедрены в профпатологическом отделении ГУЗ «ОКБ» г. Твери.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Частота выявления феномена ауторозеткообразования в периферической крови у больных с впервые выявленной АГ не отличается от таковой у здоровых лиц, при значительном снижении экзоцитарного лизиса эритроцитов в образованных ауторозетках.

2. Интенсивность ауторозеткообразования и лизис эритроцитов в ауторозетках у больных АГ повышается под влиянием гипотензивной терапии.

3. Частота образования ауторозеток у больных АГ, принимающих гипотензивную терапию, увеличивается и сопровождается снижением деформируемости, осмотической резистентности эритроцитов, незавершенностью фагоцитоза и повышением числа НСТ -положительных клеток.

Апробация работы. Результаты исследования докладывались на заседании Тверского областного общества терапевтов и кардиологов (2004, 2005, 2006), на Всероссийском национальном конгрессе кардиологов (г. Москва, 2005), на Всероссийской конференции по артериальной гипертонии (г. Москва, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 научных работ, из них в центральной печати - 13, в том числе 4 в рекомендуемых ВАК РФ изданиях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста, иллюстрирована 22 таблицами, 5 микрофотографиями, состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, изложения собственных результатов, заключения,

выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 114 отечественных и 52 иностранных источника.

Содержание работы

Материал и методы исследования

В условиях стационара ГУЗ «ОКБ» и МУЗ «ГБ № 7» г. Твери было обследовано 250 больных эссенциальной АГ (150 мужчин, 100 женщин, средний возраст 49,5±1,3 года). Из них 50 больных были с впервые выявленной АГ I стадии, 100 больных АГ имели II стадию заболевания, они получали гипотензивные препараты периодически. У 100 больных диагностировали АГ III стадии, они постоянно и длительно принимали лекарственную терапию. Диагноз АГ был верифицирован на основании клинических данных, анализа ЭКГ, показателей эхокардиографии, суточного мониторирования АД, биохимических исследований крови.

Больным АГ I стадии было назначено в среднем 1-2 гипотензивных препарата, АГ II стадии - 2-3 препарата, больные АГ III стадии принимали 3 и более гипотензивных средства постоянно в течение несколько лет (в среднем 7,3±0,9 года). Больные получали следующие группы гипотензивных препаратов: ингибиторы АПФ, диуретики, бета-адреноблокаторы, антагонисты кальция, агонисты имидазолиновых рецепторов, реже - антагонисты рецепторов ангиотензина II. При II и III стадии заболевания все больные принимали комбинированную гипотензивную терапию. Наиболее частая комбинация состояла из диуретика и ингибитора АПФ. Дозы препаратов подбирались индивидуально под контролем АД и самочувствия больных. При неэффективности указанной комбинации к лечению добавляли бета-адреноблокатор или антагонист кальция, реже агонисты имидазолиновых рецепторов и другие препараты. Гипотензивная терапия признавалась эффективной, если величина АД не превышала уровень 140/90 мм рт.ст.

В соответствии с поставленными задачами основным методом исследования было определение частоты эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных АГ при поступлении в стационар и через 1-2 недели постоянной гипотензивной терапии.

У всех обследованных феномен внутрисосудистого розеткообразования изучался по методу, разработанному Д.И. Бельченко (1990): у больных АГ - при поступлении и перед выпиской из стационара. Утром натощак из 4-го пальца левой кисти по стандартной методике с использованием игл-скарификаторов бралась капиллярная кровь. Подсчет ауторозеток производили в окрашенных мазках методом микроскопии. Их находили в самом тонком месте, ближе к концу мазка, рассчитывали их количество на 200 лейкоцитов. За ауторозетку принимали клеточную ассоциацию,

образованную нейтрофилом или моноцитом с плотно прилегающими к их поверхности тремя и более эритроцитами. Подсчитывались ауторозетки с экзоцитарным лизисом, последний характеризовался деструкцией мембраны эритроцитов и появлением в них участков цитоплазмы, лишенной гемоглобина (фото 1). Подсчет АР проводили в абсолютном количестве (109/ л) и в процентах на 100 лейкоцитов, определяли соотношение чисел АР без экзоцитарного лизиса к АР с экзоцитарным лизисом по методике, разработанной Д.И. Бельченко (1993).

Микрофото 1. В мазке периферической крови видна ауторозетка, образованная нейтрофилом с лизисом эритроцитов. Окраска по Романовскому-Гимзе. Ув.хЮОО

Количество розеткообразующих клеток подсчитывали раздельно от общего числа Н и М (109/л и в %), что позволяло определить их розеткообразующую способность (Коричкина JI.H., 2003). Для сравнения розеткообразующей способности Н и М определяли индекс соотношения РОН (%) и РОМ (%) (Коричкина Л.Н., 2003) повышение которого свидетельствовало об увеличении розеткообразующей способности нейтрофилов. Для подсчета общего числа лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, количества эритроцитов и концентрации гемоглобина использовали автоматический гематологический анализатор «Cobas Micros-18 ОТ».

Биохимическое исследование включало определение ферментативным методом в сыворотке венозной крови натощак уровня общего холестерина (норма <5,2 мМ/л), бета-липопротеидов (норма<3,5 мМ/л).

У больных АГ I-II-III стадии определяли деформируемость эритроцитов методом фильтрации (норма 1,134-1,25), осмотическую резистентность эритроцитов в изотоническом и в гипотоническом растворах NaCl фотометрическим методом (норма минимальная - 0,48-0,46%, максимальная - 0,34-0,32%), диаметр эритроцитов - микроскопическим методом (норма 6,9-8,0 мкм, 68,0±0,4% от их общего числа), сорбционную способность эритроцитов (колориметрическим методом при длине волны 630 нм), удельное сопротивление крови (на автоматическом гематологическом анализаторе).

Оценивали иммунологический статус больных (Петров Р.В., 1984). Определяли показатели лейкограммы (микроскопический метод подсчета лейкоцитов), фагоцитоза (микроскопический метод подсчета фагоцитирующих клеток после инкубации с бактериальной взвесью), метаболической активности лейкоцитов (тест восстановления нитросинего тетразолия - НСТ-тест) строго в стандартных условиях. Содержание иммуноглобулинов - А, М, О определяли радиальным методом иммунодиффузии по Манчини (1964).

Контрольную группу составили 40 здоровых лиц (20 мужчин, 20 женщин, средний возраст 46,5±1,1 и 48,5±0,9 года соответственно). Здоровые лица не подвергались воздействию неблагоприятных факторов (воспаление, не получали каких-либо лекарственных или токсических средств) и не имели хронических заболеваний. У них проводился подробный сбор анамнеза, регистрация ЭКГ, клинический анализ крови, исследовались показатели деформируемости, осмотической резистентности, эритроцитов и иммунологического статуса.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы "М1кгоБоА Ехе1 - 98". При анализе материала рассчитывали средние величины (М), их средние стандартные ошибки (±м), доверительный 95% интервал. Для сравнения основной и контрольной группы использовали однофакторный дисперсионный анализ. Для анализа нормальности распределен™ применяли метод расчета среднего квадратичного отклонения (а). Гипотезу о равенстве средних величин оценивали по парному ^критерию Стьюдента. Взаимосвязь между количественными признаками выявлялась с помощью корреляционного анализа. Статистические отличия выборок устанавливались при р < 0,05.

Результаты исследования

В результате проведенных исследований было установлено, что у здоровых лиц (табл. 1) в периферической крови отмечались единичные ауторозетки, причем, более чем в половине наблюдений (53,0%) зарегистрирован экзоцитарный лизис эритроцитов. Соотношение ауторозеток без лизиса к ауторозеткам с лизисом составило 0,9. Преобладали ауторозетки, образованные нейтрофилами, тогда как образованные моноцитами встречались реже. При этом розеткообразующая способность моноцитов (4,7%) была выше, чем нейтрофилов (0,9%; р<0,01). Индекс соотношения РОН/РОМ составил 0,19. В КГ содержание эритроцитов и гемоглобина в периферической крови было в пределах физиологической нормы (4,6x10%, 135 г/л соответственно).

У больных АГ без лечения (табл. 1), по отношению к КГ, общее количество JI было в 1,1 раза больше, общее число АР не имело различий, при значительном снижении числа АР с лизисом эритроцитов. Индекс соотношения АР без лизиса к АР с лизисом эритроцитов был в 999 раз больше, чем у обследованных КГ. Доминировали ауторозетки, образованные нейтрофилами, тогда как моноцитарные ауторозетки выявлялись значительно реже. При этом розеткообразующая способность нейтрофилов (1,4) была выше, чем у моноцитов (0,4; р<0,01). По отношению к КГ у больных АГ без лечения показатели эритроцитов и гемоглобина не различались (р>0,05).

Исследование ауторозеткообразования на фоне гипотензивной терапии показало достоверное увеличение числа АР у больных АГ I-II-Ш стадии. Как видно из приведенных в таблице 2 результатов, с повышением стадии болезни, количеством принимаемых препаратов отмечается значительное увеличение как общего числа АР, так и АР с лизисом эритроцитов.

Таблица 1

Содержание общего числа лейкоцитов (109/л), ауторозеток и ауторозеток с лизисом (на 100 JI, 109/л, % от общего числа лейкоцитов), нейтрофильных и моноцитарных ауторозеток (% от общего числа ауторозеток) в контрольной группе и у больных с впервые выявленной артериальной гипертонией без лечения (М±ш и %)

Показатель (в единицах СИ) КГ (п=40) Больные АГ без лечения (п=50) Р»<

Лейкоциты 4,8±0,04 5,2±0,03 0,01

Ауторозетки (на 100 Л) - абс. число -с лизисом (%) 0,75±0,11 0,036±0,04 53 0,85±0,37 0,044±0,04 0,1 0.001

Индекс АР без ЭЛ/АР с ЭЛ 0,9 999 0,001

НАР, % 81 98

МАР, % 19 2 0,01

Индекс РОН/РОМ 0,19 3,5 0,001

Примечание: pi< - показатель достоверности между обследованными контрольной группы и больными АГ без лечения, здесь и далее - КГ - контрольная группа, АГ -артериальная гипертония, здесь и далее АР ауторозетки, АР без ЭЛ - ауторозетки без экзоцитарного лизиса; АР с ЭЛ - ауторозетки с экзоцитарным лизисом: НАР -нейтрофильные ауторозетки, MAP - моноцитарные ауторозетки.

Установлено, что на фоне постоянной терапии у больных АГ II стадии в периферической крови регистрируется число АР в 2,6 раза больше, чем при периодическом приеме гипотензивных препаратов (р<0,001) и в 2,4 раза больше, чем у больных АГ I стадии при постоянном приеме 1-2 лекарственных препаратов.

У больных АГ III стадии на фоне длительного приема 3-х и более лекарственных препаратов количество АР было в 3,7 раза и в 1,5 раза больше, чем соответственно у больных АГ I и II стадии на фоне постоянной гипотензивной терапии, и в 4 раза больше, чем у больных АГ II стадии при периодическом приеме лекарственных препаратов.

Таблица 2

Общее число лейкоцитов (109/л), общее число ауторозеток и ауторозеток с лизисом эритроцитов (на 100 лейкоцитов) у больных артериальной гипертонией I-II-III стадии на фоне лекарственной терапии (Mim) _

Группа обследованных Общее число лейкоцитов (109/л) Общее число ауторозеток на 100 Л Число ауторозеток с лизисом (%) Число эритроци TOB (1012/л) Концентрация Нв (г/л)

КГ (п=40) 4,8±0,04 0,75±0,11 53 4,6±0,05 135,0*1,1

Больные АГ I стадии без лечения 5,2±0,03 р<0,01 0,85±0,37 р>0,05 0,1 р<0,001 4,8±0,02 р>0,05 138,0±1,2 р>0,05

Больные АГ I стадии (1-2 препарата постоянно) 5,8±0,03 р, pi <0,001 6,0±0,9 р,р,<0,001 1 р, р,<0,001 4,8±0,03 р, pi>0,05 137,0t 1,5 Р, pi<0,05

Больные АГ II стадии (периодическое лечение) 6,3±0,04 р, pi<0,001 5,5±0,4 р<0,001, Pi>0,05 11 Р,Р1<0,001 4,5±0,05 р,р,>0,05 141±3,1 P,Pi<0,05

Больные АГ II стадии (2-3 препарата постоянно) 6,7±0,06 р, pi <0,001 14,2±0,8 p,pi<0,001 15 р, р,<0,001 4,3±0,07 р, pi<0,01 137,0±1,1 р,р,>0,05

Больные АГ III стадии (3 и более препарата постоянно длительно) 5,9±0,06 р,р,<0,01 22,0±0,8 Р,Р)<0,001 29 р,р,<0,001 3,9±0,07 Р,Р.<0,01 131,0±1,5 р, pi<0,01

Примечание: р - показатель достоверности по отношению к КГ, pi - показатель достоверности по отношению к больным АГ I стадии без лечения.

Установлено (табл. 2), что у больных АГ II и III стадии на фоне постоянного лечения с увеличением числа АР и АР с лизисом эритроцитов отмечается уменьшение количества эритроцитов в крови (р<0,01), а также у больных АГ 1П стадии - снижение концентрации гемоглобина (р<0,01). Результаты исследования показали, что у всех больных АГ независимо от стадии заболевания в периферической крови доминировали

нейтрофильные АР (87% от числа всех ауторозеток), моноцитарные АР (11 %) отмечались значительно реже.

И нейтрофильные АР □ моноцитарные АР □ эозинофильные АР

Рис. 1 Процентное содержание нейтрофильных, моноцитарных и эозинофильных ауторозеток в периферической крови больных артериальной гипертонией.

Особо следует отметить, что на фоне постоянной лекарственной терапии в периферической крови больных АГ I-II-III стадии впервые начинали регистрироваться АР, образованные эозинофилами (2%) [рис. 1 ].

У больных АГ III стадии длительно принимающих лекарственные препараты наблюдалось повышение розеткообразующей способности моноцитов: до 46,3% от их общего числа, против 27,9% у нейтрофилов. Индекс РОН/РОМ у больных АГ I-II-III стадии составил 0,93, 1,5 и 0,6 соответственно.

Результаты исследования показали, что у больных АГ средние размеры эритроцитов в целом не выходили за пределы физиологических величин. Показатель деформируемости эритроцитов у больных АГ I-II-III стадии составил 1,1, 1,24, 1,34 соответственно (все р<0,05), свидетельствуя о его увеличении. Выявлена положительная корреляция между числом АР и показателями деформируемости эритроцитов у больных АГ III стадии (г=0,41, р=0,06), тогда как у больных АГ I-II стадии коэффициент корреляции между указанными показателями составил 0,019 (р=0,9).

У больных АГ на фоне лекарственной терапии (рис. 2) установлено снижение осмотической резистентности эритроцитов в изотоническом и гипотоническом растворе NaCl. При этом наиболее высокие показатели снижения осмотической резистентности эритроцитов выявлены в гипотоническом растворе NaCl. Резко выраженное снижение осмотической резистентности наблюдалось у больных АГ III стадии, длительно получающих комбинированную терапию.

АГI стадии АГ il стадии АГ III стадии

50,8 р<0,001

70,£ р<0,001

р<0,001

90

I_S5QP3 а 0,9% растворе NaCI_ ¡3 ОРЭ в 0,45% растворе NaCI_|

Рис. 2 Показатели осмотической резистентности эритроцитов в периферической крови у больных артериальной гипертонией I-II-III стадии на фоне гипотензивной терапии. Примечание: р - по отношению к КГ, ОРЭ - осмотическая резистентность.

Полученные результаты показали, что по отношению к КГ у больных АГ I-II-III стадии с повышением стадии заболевания и количеством принимаемых лекарственных препаратов достоверно увеличивается сорбционная способность эритроцитов. При этом отмечается (рис. 3) значительное увеличение показателя количества витального красителя на 1 эритроцит. Наиболее высокие показатели сорбционной способности эритроцитов выявлены у больных АГ III стадии получающих длительную лекарственную терапию. Можно высказать предположение, что повышение показателя сорбционной способности эритроцитов зависит не только от воздействия лекарственной терапии, но и увеличения количества принимаемых лекарственных препаратов.

Полученные результаты показали (рис. 4), что у больных АГ с повышением стадии болезни, количеством принимаемых лекарственных препаратов и увеличением числа АР в крови возрастает удельное сопротивление крови (150,7, 158,7, 175,8 Ом/см соответственно при АГ III-III стадии, против 125,0 Ом/см в КГ).

7,85 1 □ сорбционная j способность эритроцитов

^ 6,1 * * •» « ♦Ф»» «к ь + + *<>Щ

/■ * * + * » ♦ * •: Ш ♦ ♦»»♦(и

S 2,3

XX р<0.001 t J «ДУ * iM х D<0.001 ........! H D<0.001

КГ АПстадия АГНстадия АГ ¡(1 стадия

Рис. 3. Показатели сорбционной способности эритроцитов (пг/л) в периферической крови у больных артериальной гипертонией на фоне гипотензивной терапии. Примечание: р - по отношению к КГ.

Наиболее выраженное повышение удельного сопротивления крови выявлено у больных АГ III стадии, длительно принимающих лекарственные препараты.

И удельная сопротивляемость крови (ом/см)

Рис. 4. Показатели удельной сопротивляемости крови у больных артериальной гипертонией на фоне гипотензивной терапии. Примечание: р -по отношению к КГ.

На фоне лекарственной терапии у больных АГ 1-II-III стадии установлено повышение показателей фагоцитоза. Так фагоцитарный индекс через 30 мин увеличился по отношению к КГ на 4%, 9,4%, 23% соответственно, через 120 мин - на 6%, 9,5%, 20%. С повышением стадии заболевания и количества принимаемых лекарственных препаратов увеличились показатели спонтанного НСТ-теста, показывающего метаболическую активность лейкоцитов, соответственно при АГ I-II-III стадии: 31,0; 35,25; 39,6, против КГ - 12,0 (все р<0,001), отмечалось повышение среднего цитохимического показателя до 0,39, 0,46, 0,68 соответственно (КГ - 0,12, все р<0,001). Выявлена положительная корреляция между показателями АРО и НСТ-теста. Так у больных АГ [ стадии коэффициент ранговой корреляции Спирмена был равен 0,533 (р=0,017), у больных АГ II стадии - 0,581 (р=0,002), АГ III стадии - 0,595 (р=0,006). Все это свидетельствует о том, что с увеличением стадии заболевания и количества принимаемых лекарств, по-видимому, повышается окислительно-восстановительная функция нейтрофилов, их функциональное напряжение.

Результаты исследования количества иммуноглобулинов А, М и G в крови у больных АГ показали, что их значения в целом не превышают физиологические показатели. Однако при этом отмечено увеличение иммуноглобулинов А и М с повышением стадии заболевания и количеством принимаемых лекарственных препаратов.

Таким образом, впервые описан феномен эндогенного АРО в периферической крови у больных АГ. Выявлено, что у больных АГ с повышением стадии заболевания, увеличением количества принимаемых лекарственных препаратов и длительностью их приема, количество АР в периферической крови отчетливо возрастает. Показано, что на фоне длительного лечения в крови появляются АР, образованные эозинофилами. Особенностью межклеточных соотношений у больных АГ явилось резкое уменьшение лизиса эритроцитов в образованных АР. При этом у больных АГ с повышением стадии заболевания на фоне лекарственной терапии выявлено изменение функционального состояния эритроцитов, лейкоцитов и нарушения в системе гуморального иммунитета. Наряду с увеличением

числа АР и АР с лизисом у больных АГ III стадии наблюдается снижение эритроцитов и гемоглобина крови. Одной из возможных причин изменения межклеточных соотношений в периферической крови у больных АГ является лекарственная терапия. В этом плане требуются дальнейшие исследования.

Выводы

1. У здоровых людей в периферической крови выявляются единичные ауторозетки в половине которых отмечается экзоцитарный лизис эритроцитов.

2. У больных с впервые выявленной артериальной гипертонией общее число ауторозеток не отличается от их числа у здоровых лиц, при значительном снижении ауторозеток с лизисом эритроцитов.

3. Интенсивность внутрисосудистого ауторозеткообразования возрастает с увеличением количества принимаемых лекарств и длительностью их постоянного приема.

4. У больных артериальной гипертонией III стадии длительно принимающих лекарственную терапию и больных с осложненной артериальной гипертонией наблюдается снижение количества эритроцитов и концентрации гемоглобина в периферической крови.

5. Увеличение количества ауторозеток у больных АГ сопровождается повышением среднего размера эритроцитов, снижением их деформируемости, а также осмотической резистентности и повышением их сорбционной способности.

6. С увеличением общего числа ауторозеток и ауторозеток с лизисом повышается метаболическая активность лейкоцитов крови на фоне изменения фагоцитоза у больных АГ.

Практические рекомендации

1. Метод определения феномена эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови может служить у больных АГ дополнительным тестом, свидетельствующим об активности лекарственного лечения.

2. Длительный прием большого количества гипотензивных препаратов через увеличение интенсивности феномена АРО может привести у больных АГ к развитию анемии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Волков B.C. Ауторозеткообразование в периферической крови больных артериальной гипертонией на фоне медикаментозного лечения./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова З.Ш. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика.- 2004.- № 3.- С. 78-80

2. Волков B.C. Роль эндогенного ауторозеткообразования в патогенезе нарушения микроциркуляции у больных ишемической болезнью сердца./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова З.Ш. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика».- 2005.-т.4, № 4.-С. 69

3. Коричкина JI.H. Ауторозеткообразование в периферической крови и микроциркуляцня у больных острым коронарным синдромом./ Коричкина JÏ.H., Соловьева A.B., Боголюбов C.B., Рогова З.Ш., Лавриненко Л.С. // Ангиология и сосудистая хирургия, 2004.-том 10, № 3. С. 15

4. Коричкина JI.H. Особенности розеткообразования в периферической крови у больных острым инфарктом миокарда./ Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова З.Ш., Лавриненко Л.В. //Российский кардиологический журнал.- 2004.- № 6.- С.71-73

5. Бельченко Д.И. Феномен эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови (обзор литературы в эксперименте и клинике)./ Бельченко Д.И., Волков B.C., Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш. // Верхневолжский медицинский журнал,.- Тверь,- № 3-4,- 2005. - С. 57-61

6. Волков B.C. Феномен внутрисосудистого ауторозеткообразования у больных ишемической болезнью сердца и артериальной гипертонией./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова З.Ш.//Материалы Российского национального конгресса кардиологов стран СНГ,- М. - 2003.-С. 67-68

7. Волков B.C. Ауторозеткообразование в периферической крови как новый метод исследования микроциркуляции у больных ишемической болезнью сердца./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова З.Ш.// Материалы конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркулящш в клинике».- С-П; 2004.- С. 98

8. Волков B.C. Эндогенное ауторозеткообразование в патогенезе нарушения микроциркуляции больных инфарктом миокарда./ Волков B.C. Коричкина Л.Н., Соловьева A.B., Рогова 3.111., Лавриненко Л.В.// Материалы Российского национального конгресса кардиологов 12-14 октября 2004г. - Томск,- 2004,- С. 91

9. Волков B.C. Фармакотерапия артериальной гипертонии у больных с профессиональной патологией./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Братолюбова Т.Н., Рогова З.Ш. // Материалы 6-й Российской конференции по реабилитации больных. 11-13 мая 2005 г. - М.-2005,- С. 33.

10. Волков B.C. Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови у здоровых лиц. / Волков B.C., Коричкина Л.Н., Соловьева AB., Рогова З.Ш. // Научные труды I съезда физиологов СНГ, 19-23 сентября. / под редакцией Р.И. Сепиашвили. Сочи,- 2005.- том 2.- С. 22

11. Волков B.C. Увеличение АРО в периферической крови - индикатор эндоэкологического неблагополучия человека./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Тофило Е.Л., Рогова З.Ш., Виноградова Т.С.// Материалы конференции «Социально-медицинские аспекты экологического состояния Центрального экономического района России». - Тверь- 2007.- С. 282- 284

12. Волков B.C., Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш., Соловьева A.B. Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови при лекарственной терапии./ Волков B.C., Коричкина Л.Н., Рогова 3.LLL, Соловьева A.B. // Материалы VIII Всероссийского научно-образовательного форума «Кардиология 2006». - М. - 2006.- С. 36-37

13. Коричкина Л.Н. Влияние лекарственной терапии на ауторозеткообразование в периферической крови больных артериальной гипертонией./ Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш., Соловьева А.В// Материалы XI Российской национальном конгрессе «Человек и лекарство» 19-23 апреля,- М.- 2004. - С. 199-200

14. Коричкина Л.Н. Динамика интенсивности ауторозеткообразования в микроциркуляторном русле под влиянием гипотензивной терапии у больных АГ. / Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш. //Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Артериальная гипертония: разнообразие клинических форм, сосудистые осложнения», 1-2 декабря.-Иваново. -2005,- С. 44

15. Коричкина Л.Н. Динамика эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных артериальной гипертонией под влиянием лечения. / Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш. //Материалы 4 съезда аллергологов и иммунологов СНГ, 11-14.09.06,- М.- 2006.- С. 345-346

16. Коричкина Л.Н. Ауторозеткообразование в эксперименте и в процессе лечения больных с заболеваниями сердечно-сосудистой системы как показатель изменения эндоэкологического статуса./ Коричкина Л.Н., Волков B.C., Волкова О.В., Рогова З.Ш, Лавриненко Л.С., Виноградова Т.С. //Материалы третьей международной научной конференции «Проблемы диагностики и эндоэкологического статуса в современных условиях». - СПб- 2007- С. 98-100

17. Коричкина JI.H. Взаимосвязь интенсивности внутрисосудистых межклеточных соотношений и удельного сопротивления крови у больных гипертонической болезнью/Коричкина Л.Н., Рогова З.Ш., Виноградова Т.С.// Материалы Российского национального конгресса кардиологов, 7-9 октября 2008 г.- М-2008-С. 188-189

18. Рогова З.Ш. Клиническое значение эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных артериальной гипертонией./ Рогова З.Ш., Коричкина Л.Н., Соловьева А.В.//Верхневолжский медицинский журнал. Тверь,- 2004,- № 1.- С. 12-15

Список сокращений

АГ - артериальная гипертония АД - артериальное давление АР - ауторозетка АРО - ауторозеткообразование ИБС - ишемическая болезнь сердца КГ - контрольная группа М - моноциты Н - нейтрофилы

MAP - моноцитарная ауторозетка

НАР - нейтрофильная ауторозетка

НСТ-тест - тест восстановления нитросинего тетразолия

РОМ - розеткообразующая способность моноцитов

РОН - розеткообразующая способность нейтрофилов

ЭКГ - электрокардиограмма

Технический редактор A.B. Жильцов Подписано в печать 28.10.2008. Формат 60 х 84 7i6. Усл. печ. л. 1,25. Тираж 100 экз. Заказ № 369 Тверской государственный университет Редакционно-издательское управление Адрес: Россия, 170100, г. Тверь, ул. Желябова, 33. Тел. РИУ: (4822) 35-60-63.

Актуальность исследования. АГ в настоящее время является одним из самых распространенных хронических неинфекционных заболеваний (Арабидзе Г.Г. и др, 1999; Оганов Р.Г., 1997, 2002, 2003; Оганов Р.Г., Масленникова Г .Я., 2000; Чазова И.Е., 2002 и др.). Активное лечение больных АГ позволяет существенно смягчить клинические проявления заболевания и улучшить прогноз как в отношении жизни, так и трудоспособности (Шляхто Е.В., 2002; Гогин Е.Е., 2004; Бойцов С.А., 2004; Кушаковский М.С., 2002 и др.). Однако нет также сомнений, что больные АГ для поддержания удовлетворительного состояния и контроля АД должны принимать гипотензивные препараты постоянно, фактически пожизненно (Чазова И.Е., 2002; Остроумова О.Д. и др., 2004, 2005; Карпов Ю.А., 2003 и др.). Количество назначаемых врачом препаратов зависит от стадии^ АГ, степени повышения АД, с одной стороны, а также от особенностей патогенеза заболевания, наличия осложнений и сопутствующей патологии, с другой. Нет сомнений также и в том, что с увеличением длительности приема лекарств и увеличения их количества нарастает частота их побочного действия (Кобалава Ж.Д. и др., 2005; Голиков А.П. и др., 2006; Чазова И.Е., 2006; Mogenson С.Е. et al., 2003; Jeunemaitre X. et al. 1988; Neil S. et al., 2000 и др.). О возникновении последних судят в основном по появлению клинических признаков лекарственной непереносимости как аллергического, так и токсического характера. Однако не исключено, что проявления лекарственной непереносимости, возможно, имеют более ранние доклинические признаки, но этот вопрос практически не изучен.

В этом отношении привлекает внимание феномен эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови. Он рассматривается в настоящее время как один из механизмов удаления из крови измененных эритроцитов. Можно полагать, что увеличение числа эритроцитов с измененными мембранами активирует розеткообразующую способность нейтрофилов и моноцитов в периферической крови. В настоящее время феномен внутрисосудистого ауторозеткообразования изучен у интактных животных, здоровых людей и при некоторых патологических состояниях (Бельченко Д. И., 1990, 1992, 1993, 1999, 2001; Волкова О.В., Бельченко Д.И., 1992, 1996; Смирнова Е.А., Бельченко Д.И., 1996; Шубич и др. 1997; Кривошеина E.J1.; Поляков Д.И., 2000; Попыхов Д.Н., 2000; Волков B.C. и др., 2003, 2004; Коричкина Л.Н и др., 2003, 2004, 2005, 2006, 2007; и др.). Исследование внутрисосудистого розеткообразования при АГ представляется весьма актуальным и не исключено, что полученные результаты будут иметь клинико-диагностическое значение.

Цель исследования. Изучить характер эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных АГ в зависимости от длительности и интенсивности гипотензивной терапии и сопоставить его с показателями функционального состояния эритроцитов крови и иммунологического статуса пациентов.

Задачи исследования

1. Исследовать интенсивность эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у здоровых лиц.

2. Выявить особенности эндогенного ауторозеткообразования у больных эссенциальной АГ.

3. Изучить изменения эндогенного ауторозеткообразования у больных эссенциальной АГ под влиянием гипотензивной терапии.

4. Исследовать средний размер, деформируемость, осмотическую резистентность, сорбционную способность эритроцитов и удельное сопротивление крови у больных артериальной гипертонией и сопоставить полученные показатели с характером ауторозеткообразования.

5. Изучить показатели иммунологического статуса у больных эссенциальной АГ (общее число лейкоцитов, фагоцитоз, метаболическую активность лейкоцитов, содержание иммуноглобулинов) и сопоставить их с характером ауторозеткообразования.

Научная новизна. Впервые проведено изучение эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у больных эссенциальной АГ. Установлено, что у больных с впервые выявленной АГ без лечения количество эндогенных ауторозеток не отличается от такового у здоровых лиц при значительном снижении числа ауторозеток с лизисом эритроцитов. Впервые отмечено у больных АГ увеличение числа ауторозеток и лизиса эритроцитов на фоне приема как периодического, так и постоянного приема гипотензивных средств у больных АГ. При длительной лекарственной терапии у этих больных зарегистрировано образование эозинофильных ауторозеток. Впервые выявлена у больных АГ взаимосвязь интенсивности и характера эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови с показателями размеров, деформируемости, осмотической и сорбционной способности эритроцитов, с общим числом лейкоцитов, фагоцитозом, метаболической активностью. Установлено, что при значительном увеличении общего числа ауторозеток и ауторозеток с экзоцитарным лизисом эритроцитов у больных АГ, длительно принимающих гипотензивные средства, снижается количество эритроцитов в периферической крови.

Практическое значение

1. У больных АГ под воздействием приема гипотензивных средств наблюдается повышение частоты эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови.

2. Контроль ауторозеткообразования в периферической крови у больных АГ может рассматриваться как один из дополнительных методов слежения за состоянием больных, длительно принимающих гипотензивные препараты. С увеличением длительности и количества принимаемых лекарств общее число и число ауторозеток с лизисом эритроцитов у больных АГ значительно возрастает.

3. Подсчет числа ауторозеток в периферической крови на фоне лечения у больных артериальной гипертонией может служить в качестве дополнительного диагностического теста побочного действия лекарственной терапии.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Частота выявления феномена ауторозеткообразования в периферической крови у больных с впервые выявленной АГ не отличается от таковой у здоровых лиц, при значительном снижении экзоцитарного лизиса эритроцитов в образованных ауторозетках.

2. Интенсивность ауторозеткообразования и лизис эритроцитов в ауторозетках у больных АГ повышается под влиянием гипотензивной терапии.

3. Частота образования ауторозеток у больных АГ, принимающих гипотензивную терапию, увеличивается и сопровождается снижением деформируемости, осмотической резистентности эритроцитов, незавершенностью фагоцитоза и повышением числа НСТ — положительных клеток. »

Апробация работы. Результаты исследования докладывались на заседании Тверского областного общества терапевтов и кардиологов (2004, 2005, 2006), на Всероссийском национальном конгрессе кардиологов (г. Москва, 2005), на Всероссийской конференции по артериальной гипертонии (г. Москва, 2006). Публикации

По теме диссертации опубликовано 17 научных работ, из них в центральной печати - 13, в том числе 4 в рекомендуемых ВАК РФ изданиях.

10

Выводы

У здоровых людей в периферической крови выявляются единичные ауторозетки в половине которых отмечается экзоцитарный лизис эритроцитов.

У больных с впервые выявленной артериальной гипертонией общее число ауторозеток не отличается от их числа у здоровых лиц, при значительном снижении ауторозеток с ~ лизисом эритроцитов.

Интенсивность внутрисосудистого ауторозеткообразования возрастает с увеличением количества принимаемых лекарств и длительностью их постоянного приема.

У больных артериальной гипертонией III стадии длительно принимающих лекарственную терапию и больных с осложненной артериальной гипертонией наблюдается снижение количества эритроцитов и концентрации гемоглобина в периферической крови.

Увеличение количества ауторозеток у больных АГ сопровождается повышением среднего размера эритроцитов, снижением их деформируемости, а также осмотической резистентности и повышением их сорбционной способности.

С увеличением общего числа ауторозеток и ауторозеток с лизисом повышается метаболическая активность лейкоцитов крови на фоне изменения фагоцитоза у больных АГ.

Практические рекомендации

Метод определения феномена эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови может служить у больных АГ дополнительным тестом, свидетельствующим об активности лекарственного лечения.

Длительный прием большого количества гипотензивных препаратов через увеличение интенсивности феномена АРО может привести у больных АГ к развитию анемии.