Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Фармакология ГАМК - и опиоидергической систем при травматическом отеке - набухании головного мозга

РГ6 ОД ^ Г /V г

- 7 ГпОЦ 1333

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ Л\ЕДИЦИНСКИХ НАУК

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФАРМАКОЛОГИИ

На правах рукописи НОВИКОВ Василий Егорович

ФАРМАКОЛОГИЯ ГАМК-И ОПИОИДЕРГИЧЕСКОЙ СИСТЕМ ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКОМ ОТЕКЕ-НАБУХАНИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА

14.00.25 — фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва — 1993

Работа выполнена в Смоленском государственном меди цннском институте.

Научные консультанты: доктор медицинских паук, профессор В. В. Яснецов;

заслуженный деятель наук РФ, доктор медицинских наук, профессор Н. Б. Козлов.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

Чл.-корр. РАМН, доктор медицинских наук, профессор В. С. Шашков;

доктор медицинских наук Р. С. Мирзоян;

доктор медицинских наук, профессор Р. Д. Сейфулла.

Ведущая организация — Российский государственный медицинский Университет.

Защита состоится « » 1993 года в /^

ча •

сов на заседании специализированного Ученого совета Д.001.25.01 при Научно-исследовательском институте фармакологии РАМН по адресу: 125315, Москва, ул. Балтийская, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ фармакологии РАМН.

Автореферат разослан « » ^ЛСй.^__1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

А. Н. ЯВОРСКИЙ

ОБДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблема. Отек-яабухакие головного' мозга (ОНГй) зедотавляат собой не с по цифичо с кую ответную реакции мозговой сани на патогенные факгорч экзогенной и эндогенной природы. Он. >знккает как осложнение г.ри различных заболеваниях и патоло-¡ческих процессах: травма мозга, нарушения мозговой гекодина-¡ки, внутричерепные объемные процессы, отравления, интсксика-1И, инфекционные заболевания и др. (К з игл и цк ий ы*о в D.H.. »83; Коновалов А.Н. и др. ,1939; Коззш.шп ,1980; rutzo, 1985, IS7). Развитие ОНГМ - неблагоприятней признак течения основ-)ГО заболевания, т.к. рез':о ухудшает состояние больного и не-)дко приводит л летальному исходу (Носкова §.3. ,1932; Сировс-:й 3.5. и др. ,1989).

Наиболее часто СИГМ развивается при черепно-мозговой травме IMT) и нейрохирургических операциях (Коновалов А.Н. и др., 189; Рыбаков Г.ь.,1992). ЧКТ составляет Э0-50& от всех травн летальностью до 35-10% (Клигунзнко З.Н.,1991). 7 11% больных ¡коре после ЧЭТ возникает ОНГМ С ito e-t ai .,1936). В ряде :учаев явления выраженного отеке, и, особенно набухания мозга, 1(5лодали в отдаленная период ЧМ7 (Обргизнко Т.М. я др.,1989). юлеоперационный ОНГМ у нейрохирургических больных отвдчаят 95$ случаев (Ингороква Г.И. ,1987; Сировсхий Э.5. и др.,1939) | мнении Р о гада ко та А.П. и Сергиенко Т.М. С 19(77), нет такого |йрохирургического заболевания.головного мозга, при котором , определенном этапе его развития или послеоперационного тения не развивалась бы та или иная степень и форма ОНГМ.Выс-.зывэется предположение, что ОНГМ есть универсальная, бяоло-;чески целесообразная приспособительная реакция мозга на его вреядение (СировскиД Э.Б. и др.,1991).

Нэсмогря на многолетнее изучение, многие вопроса проблекн ГМ до настоящего времени остаются открытыми. Одним из них ляется вопрос профилактики и эффективной фармакотерапия ека-набухания. Сейчао с это Л целыо в клиниках пркмэняется вольно широкий арсенал лекарственных средств: гипэртоничос-е растворы, диуретики, гормональные, вазэа/.тизнь'э, нэЯро?-пные препараты,; "ангигипоксанты, антиоксиданта и др. чСамаэ-н З.К. ,£901;. Зэндарзнко З.С. ,5рзПдкоэ 3.11. ,1934; Квитниц-Л-Ркмв Р.Н'..Отопаногл JI.3..I935; Сзргиснхо Т.М. и др.,

1990; Касловг H.H. ,1992). Однако больной набор срсдстз из разных фармакологических групп, предлагаемых для коррекции ОНГМ, лииь свидетельствует о слабой зфдектигаости проводимой лекарственно.! терапии ¡1 но достаточной разработке этого вопроса. К сояслениэ, современная фармакотерапия ОиГд нередко носит змаяричоокг.и характер (так как из всегда является патогенетически обоснованной,) и поэтому ез проведение часто но только но эффективно, но и приводит к развитию серьезных осложнений чйсхаков 0.u.,1983; Ячоддяшвили Г.И.,1986; Солодаренко А.Г., 1990).

Недостаток эффективных патогенетически осЗоснованних мер профилактика и лечения ОНГЫ в определенной степени объясняется топ,что остается неясными многие аспекты механизма развитая данного процесса. В последние годы вникание исследователей привлекло состояние кедиаторных и метаболических систем и их роль в возникновении ОНГМ (Мчедлиавили Г.И. ,1936; Яонецов З.С. и др.,1986; toneвич А.3.,1989; Евсеев A.B.,1990; Tapado-po\ilos et ni,I939). Знявлсна определенная роль и-холин- , & -адрен- , серотонин- и гистаминаргичоских систем, а также изменений углеводно-онзргетическо го обмона з патогенезе ОНГМ.

В свате современных представлений о целесообразности отечно!! реакции, весьма интересны сообцения о ззвлеченности стресс-лимитирующих систои мозга в формирование ОНГМ. Нами ранее показана способность некоторых вэцоств, активирующих ГАМК-снстему, тормозить развитие отэка мозга (Новиков 3.3.,1933). ','кеатся единичные сообщения' об участии опкоидной системы в ■ возникновении ОНГМ (Сергизнко Т.Н. и др.,1990; Silvia nt «l., 1987.). Как известно, ГАШ- и опиоидоргическая системы таско взаимодействует друг а другом и выполним в организме регуля-' торную роль 5 отнодении нейрогукоральних и метаболических процессов (Закусов В.В. и др. ,1932; Ашмарин И.ii. .Каменская H.A., I9d3;Meepcoa i,3..Олейникова К.Г.,1938; Зрагин Е.О.,Жнецов 3.3. ,1991.).

Однако кногкз вопросы участия этих систем в развитии ОНГМ остаятся открытыми: неясна роль конкретных структур л функции '..различных видов рецепторов, лигандов, медиаторных и метаболических преобразований и др.), прямые и косвенные связи с метаболическими изменениями в мозговой ткани и т.д. Успевшая раз-

лботка этих вопросов позволит глубко вокрцть нзханизкы развития ОНГМ и предложить патогенетически обоснованную профялакти-:у и лекарственную т^рапта его.

Зоська в проблеме фармакотерапия ОНГМ является воп-

юс о критериях, адекватно оценивающих г1>фзктивность проводи-юго лечения. Судестзугацие сегодня гсляничзскио и лебзраторние юказатели, свидетельствующие об ОНГ'!!, связаны в основной с гсслздо: .нием головного и спинного мозга, козговоЯ.генодинанн-•.11 и ликвора (Рскодашв А.Г1. .Сергконко Т.К.,1987; Сергизнхо \М. и др.,1990; Tto et п1., 1986). Они но язлявтся специгЬпч-щми, на всегда доступна. Ьекоториэ автору счлтавт, что более юрспективны в этом плана гопатологические показатели, которые пособии вполне адекватно отражать картину ОНГМ, а тахдо эф-,активность его фармакологической коррекции (Врищез Е.П. ,1982; 'ородник Г.А.,1983; Маслова Н.Н.,1992). Однако этот вопрос ребует дальнейшего изучения н уточнения.

Цель работа. Целыз настоящей работа являлось изкс какие элективных протиЕоотечнах средств среди производных ГАЮ, бчи-одиазспина и лигандов опиоидных рецепторов, а также изучение еханизма их протизоотечного действия.

Настоящая работа является плановой. Она входит в план науч-о-исследовательской работы Смоленского медицинского института государственны! регистрационный й 019200С32'Ю). Тема диссэрта-ии утверждена на Всесоюзной Проблемно;! комиссии "£арнахология ервноЯ системы" при Научном Совете по фармакологии и фаркааии резидиука АМН СССР 16 января 1991 года в, г. Москзэ.

Основные задачи исследования. Для достижения указанной цели или поставлена следупчио задачи:

1. Провести сравнительный анал'лз влияния различных ГА'-К-ер-ических средств на динамику ОНГМ.

2. Исследовать влияние ряда лигандов опиш.дшх рецепторов а динамику ОНГМ.

3. Исследозать роль ГА11К- и опиоидергичзсхоЯ систем з раз-нтии ОНГМ и механизме действия протявэотечшх ерздегз.

4. Изучить влияние ГАИ-зрппэсг.их средств и лигандов опкэ- ■ дных рецепторов на углезодно-энзргетичэсккЯ нзтаболгз: в мэз-звой ткани при ОНГМ.

5. наследовать влияние ГАмС-ергкчзскйх сродстз а лигандов

опиовднзх рецепторов на процесса ПОЛ ъ китохондриальной фракции мозговой ткани з динамике ОПТУ.

6. Разработать способ исследования динамик;: ОНГь к оценки эффективности его фармакологической коррекции по гематологическим показателям

Научная новизна работу. Зпзрвые проведено детальное изучение влияния ГА^-прглчсоких средств и дигандог опионднах рецеггороз на развитие тразпатичзск^гс ЭНГМ. Установлено, что агокиста ГА!-"С-ЗД-роцзпторного комплекса и коотрог.ние препараты пирацетам и гикамилон обладаю? вир&кенной противоотечкоД активность:«). Среди лигандоа опиоидкых рецепторов наиболее выражена противо-отечнне свойства у синтетических аналогов энкэ^алинов В33/2Т к 1)430.

Впервые проведен фармакологический и биохимический анализ роли ГАМК- и опиэидергической с истей в патогенезе СНГ'-!. Показано, что специфически;; антагонист наркотических анальгетиков и опнопдных пептидов налохсон потенцирует эдематогенный эффект ГАКК-негативннх ьедостБ бикукуллика и пикротоксина, а также изменяет их метаболическое действие на мозговую ткань. Противо-отечная активность ГАЖ-ергичоских средств и агонистов опиоид-ных рецепторов полностьэ устраняется или существенно ослабляется бккукуллином, что свидетельствует о ъэсноГС функциональной сблз;! ГА1К- и опкоидной систем в процессе формирования ОНГМ и его дариакстерапии.

Раднолигавдцнк кзтодои исследовано состояние бзнзодиаззпино-вих и опиоидниу. рецепторов. Установлено, что в динамика травматического ОКГЫ в мозговой ткак"! снижена концентрация БД-реце -торов к пошаона концентрация га-ог.ио;оди'х рецепторов. Крою того, от;».зчается повылзнкз сродства лигандов к БД-рсцепторам.

Исследовано значение и кестс изконек:?. углеводно-энергетического метаболизма мозговой ткани в динамике ОКГ!! к зависимость протквоотечного эффекта ГАЖ-ергических средств и агонис-гов оли-оидных рецепторов от их влияния на метаболическиз процессы. В ди наилке травматического ОИРИ изучена активность ПОЛ и фэркзнтов антирадикальной защиты и влияние на эти процессы ГАКК-ергических средств к агокистов опиоидных рецепторов.

Впервые проведено комплексное изучение гематологических показателей чводно-злектролитний баланс, осмотическая резистентность эритроцитов Ш>3), углеводно-энергетический катаболизм, коагуло-

■"раима крови) в динамике травматического ОНГМ, что позволило ¿заработать адекватные критерии исследования динамики ОНГМ :í ¡ффективности его фармакотерапии.

З'г.зрзне на моделях экспериментального ОНГМ исследована отз-юстззкные препараты: фонибут, фоназепам, паитогам, пккакклон i новые соединения, синтезированные з насей стране,- произвол-юе ¿ензодиазепика цкказепам, ряд синтетических аналогов энке-)аликоз. Среди них установлены вещества, обладающие выраженной фотивоотечноЯ актииностьо.

Теоретическая значимость работы. Теоретически и экспериментально обосновано новое перспективное направление поиска эффективных протавоотечнкх срздстз среди ГАКС-зргичесетх вацестз [ лигакдоз опнскднгх рецзпторов.В динамике травматического )НГМ выявлены количественные и качествовниз изменения бэнзодп-.зепиковых и опкоядкых рэцеятороз. Фармакологически и бнохи:.::г-[ески показано наличие взаииорегулятоснах отношений между 'A'-iK- и опноэдэргичесхоЯ системами при формировании 0HRÍ и го фармакологической коррекции. Все это дает зозкоишость на-:етить новые подходы z позшманко патогенеза ОНГМ я разработке :атогенетичзски обоснованных рзконендацШ адекватного воздеЯ-тз.тя на форнирозание отечной реакции мозговой ткакп и дальнеЯ-ея ез регуляция.

Практическая ценность паботн. Сродя исследованиях ГАПК-ер-'ическпх еоззст'в и лигандоз опиоидных речептсров выявлены со-днкекия с знрагкекным противоотечным действием: фзнибут, сиба-он, пикамглон, 3SIS5, DAGO и парапетам, которые по ряду ло-азателеЯ превосходят натрет оксибутират. Результаты работы озволяпт распирять показания к применение названных ГЛг£{-ар-ических препаратов и рекомендовать их для клинического испы-ания в качестве против о отечных средств. Синтетические аналои онкес-аликов DSIET и DAGO нспгно рекомендовать для дальнеЯ-их доклинических испытаний. .

По результатам изучения гематологических показателей при HTM разработан способ исследования динамики ОНГМ и оценки эф- . активности его фармакотерапии, основанный на изучении водно-лектролитного баланса эритроцитов.

В научно-исследовательском аспекте имеет практический гате-ес предложенный в работе способ моделирования тразматического ЯГМ, позволявший наносить строго дозированное, локализованное,

контролируемое повреждение мозговой ткани и облегчающий воспроизведение этой процедуры у мелких лабораторных животных.

Зкедрокио. Ряд фактических данных я теоретических полсжениГ: кае:оядзго иселодовация внедрен в практику преподавания фармакологии, невропатологии и нейрохирургии студэктан лечебного, педиатрического и стопатологачесгого ¿.акудугстсз, a та.таз сду-JC.7XZÜфакультет?, усов-зраа изтвэздиия врачз;'. СГ-'И. '3 хяиклк-кйврологак и койрзхирургш: Смоленск-2 оЗластно« кланкчзслог.

m 1слшглч<эской базе кафедр нергакх болозней и нейро-.".¡'.рургин СП? Л с цель-) профила.спжл и лечения отека головного козга в результате 4ÍÍT ;¡ др;.-гэ?. нейрохирургической патолог;:;: используется разрабогзнше в диссертация рекомендации, гкглчая применений производных ГЛПК и бе^зодиазепика. При диагностике

оизнке доисимкн ШГН в качестве дополнительных критериев при-хзкязтоя рекомендованные з диссертации гематологические показатели. В научко-исследозател ьской работе ice.-; едрн фародсозогяя к UK;u: СПЯ используется разработанный в диссертации способ кэдо-лпров^кид травматического ОНГМ. Крона того, по г.аторнодам настоящей работы получено 2 авторских свидетельства m изобретения и сделано 8 рационализаторских предложений.

fi;убл икании. По текэ диссертации опубликовано 34 работа.

Основные положения, выносимые га заакгу.

1. Разработаны способ моделирования .травматического O'íI'j'í у г-.елкнх лабораторных кизоткых и способ исследования динамик;: ОНГй по гематологическим показателям, позволявшие воспроизводить адекЕатруя модель ШГИ в эксперименте и проводить оцен-у о?феЕ1ИЕЗоотг. его ааргахотерапии.

2. Предлагается повое направление поиска потенциально перспективных веществ, обладавших протквоотечкеи активностью, в ряду производных ГА'К и бэнзодяазэпина, а такие среди лигандов оппоиднмх рецепторов.

3. ГАЬК-позитивное средство фенибут, агинист БД-рецепторов скбазоч, изотропные препараты ликамилон и пирацетаи, синтетические аналога знкешалинов DSEST и bago обладают выраженный противоотзчкым действием.

При формировании ОНГИ и его фармакологической коррекции ииовт место взаиморегуляторныэ отношения между FAKÍ - и огмои-дергическоХ системами.

3. 3 диканикз траъпатлчсского ОНГИ происходят количественный и качественнее изменения бензодиаззпикових и опиоидких рзцэптороп.

о. Развитие ОНГМ сопровождается глубоким яаруиэнаэм процессов биоэнергетики з позговоХ ткан::, прнзодяце:« к энергетическому дефициту. 3 митохондрлалыюп фракции мозга з пэсттравга-тичсскпГ; период активируются процесси ПОЛ. ГАШ-оргачесхлз

.;5э-;тг.:г ;; aro:-;!:-;?:: эпкэадск рацепторо.з, •.•орте.г;::2 раззнтнэ ОНГИ, предупреждал г шрувзяяя углзводкэ-зноргггичесхого кзто-боднзка з мозгов'.:.'! ткани з псогграиэтическом периоде и о-'.азн-вапт полсусте^ьнсз т-.'.'лт.гп-:з на процессы ПОЛ з :<::?о>:онлризлькой фракции мозга.

t.xit .'лтя pa-jйкержхдн дисс-зртг.ц:':: доплачивались на за-Смоленского научного ебц-зегз-г фаркгкологэв, б;юлзгол, биск»::::;ов, фкзиологоз, сато^лзкодогэз з £936, 1590, 13-1 годах, б-он Зсесозгиои сгззде фармакологов (Гаакзнт, 1333), Зсо-сеззной конференции. :'Пл:са:;илон- ноги:* цореброзаскудярапй л но-отрог:ни1: препарат" О'фа, Ï.S39), 3'1-зсооенод hof.c¡spsnr,;r:î кологилсская коррекция гнлохсичесхих состояний" (Гродно. 1991). Зсзсоэзной конференции с кггсдуиарзднвы участие:.: "Синтез, Гар-гаколо«л к аопокти вопгх о5зз5олй£.-.:>д;к средств"

'..Новгород, 1991), ЗсосеоеноП Проб-то:;:«."; ::o::::ac:::¡ "^аркаколо-г;;л церзлол спате:!::'' при научно;.: Совете по фармакология и '¿арканил Црззидкука ЛлЛ СССР СЛсзхва, ÏS9I), на научно?., конфзрен-ц:;;: Смоленского .".здиксглгута* "Содорлакиз води и её фракцхй в тканях органлзча з норне и патологии" з. 1992 г., КзасдународноЗ хоафгре;шк, поевяцокной 1С0~яет$а со. дня рокдезяя академика С.З.Аничкова (Санкт-Петербург, 1992), региональной конференции "Зпслвракзнгадьная фармакология - клинике" (Згегница, 1992"), Проблемной комиссии rio "Неврологии и ясллпатртн;" Смоленского мединститута в 1991 и D93 гг. , на совместном заседании кафедр фармакологии, биологической химии, клинической фармакологии, бйокеорганмческой хинин, о1:г,о,1 биологии, нормальной физиологии, патологической физиологии, нервных болезней и КШ Смоленского мединститута (2 апреля 1993 года).

Объем и структура работа,Диссертация изложена на 292 стсани-цах :'^;ц-.оплсного. текста и состоит из введения, 8 глаз, заключения и заводов, включает 35 таблиц и 3£ рисунок.Библиография представлена 2G3 отечественных:! а 130 иностранннми истопниками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выполнены на 1334 белых крысах обоего пола као-со.1 150-220 г линии Внстар и нзллизЛншс.

3 работе исследованы лигандк опиоидных рецепторов: наркотические анальгетики к их специфические антагонисты (морфин, про-мздол, налорфкн, налоксон), ¡(-зндорфин, а такие синтетические аналоги эккефаяинов*: даларгян ( Туг-2-Л1а-С1у-Рпэ-1эи-;.ге ), ЗЛЗГЬА.'? СГ5'Г-Б-Д1а-С-1у-Р11е-Хеи-«л-£-:Та-ГЕ> , Ы: (Туг-В-;.1£.-

Пу-НеГае-Хпи-Аге-НЬ-З-Ь) , ВЛ-ИЮ (2у:-3-Л1а-С-1у-РЬ£-Ь^и-С1и), Б.'.ОС (г'уг-г-аа-зху-пэрье-сху-ох), згьзт ( ауг-э-зег-сиу-рпе-

Из группы ГАиК-оргнчееких средств .чзучзш: структурные аналоги и производное ГАгК: натрия оксибутират, фенпбут, пан? о гак, пакоииок, пирацата!-; и производима бзкЕодпазглика скбазэк (д::а-зепам), фзказепам, цннасепам-''. Натрия окслбут.-.рат использован как препарат сравнения. Ь качестве фармакологических анализаторов ГАМК-ергическоД система применяли: кусциьол (специфический агонист ГАкКа-рецепторов), баклофек* (специфический агонист ГАЬлб-рецепторов), у-зикпл-ГАкК (специфический необратхмып бло-катор ГАйС-трансаминазы), вальпроат натрия" (депакик; изменяет метаболизм эндогенной ГАйО, бнкукулл ;к (споцлфлчеекнп конкурентный блокатор Г А»Жа-рецепторов), г.икротокпкн (бдокатор хлорных к.?, нал о и ГАЖ-ЗД-роцепторных комплексов), тиссеникарбазид чийгибетор ферментативного биосинтеза зндо пик-юГ: ГДЖ, бдокатср глутамагдекарбоксклазы).

Зсе использованные вэцества вводили знутрибр-слкно. Яри коррекции тразматпчоокого ЭНГИ препараты вводгл:: за 30 мин до на-косзния тразяи чозиоидкиз пептиды за 15 мин), а затем ежедневно з течение везго опыта. Бдокаторн рецепторов вводили за 15 мин до инъекции лекарственных средств. При изучении роли блокаторов ГАЖ- и опяоидноЯ систем з развитии ОКГК их вводили красам через 24 ч посла трепанации черэпа, забой кквотных осуществляли через I ч после инъекции ввдестза. Объем раствора на одну инъекции не превышал 0,5 мл. Ингакгним животным вводили аналогичные объемы изотонического раствора натрия хлорида.

Е некоторых сериях экспериментов лекарственные взцества вво-днлх в желудочки мозга, используя для этого специальное устроа-

* Автот) благодарит проф. Т.А.Воронину « к.х.н. Е.Д.Беспалову за лябезко предоставленные вецестза.

ство. Место пункции соответствовало проекции бокового желудочке. на поверхности мозга (фифкова 3..Маряал Д.Д962; Прахьо ¡[.Б. и др.,1932).

3 работе использована травматическая модель ОНГМ как наиболее адекзатная часто встрочааязмуся в клинической практике ОНГМ после ЧМТ и не1:рох!фургических вмеиательств (Коновалоз А.Н. и др. ,1939; Tto et.al., 1936). Моделировали ОНГМ путем уколоз иглой з мозговую ткань с нокоцьа специальных устройств и приспособления (лоло;к.решение на изобретение по заявке 49337 2D/I-V от '3.05.92). Зое травматические манипуляции выполнялись под эфирным наркозом. Развитие ОНП! определяли в динамике, докапи-тнруя низотних чороз I, 1 i! 7 суток посла траз::а.

3 некоторых опигах для сравнения использовали токоическуа модель ОНГМ (Козлов О.Н.,1578).

Критериями оценки развития СНГ*, слух«л показатели содержа-нмя общзп воды з мозговой ткани и се плотность. Содержание об-азЯ вода определяли по сухому остатку, внеуцкзая ткань мозга до постоянной .чассп пр;г ГГ0°С (Серзда П.И., 1939). Плотность мозговой ткани определяли по методике iitjorit et al. (1965) в собст-ЕешюЛ кодификации, используя для этого раствори меди сульфата разного удельного ззеа.

Содержание лактата, пирузата, АТФ, АД1, А® з мозговой ткани и крови определяли с поморья стандартных тест-наборов " Tost Conbination ATT", чТезГ Conbinition .VDP/WP", "Test Combination Lac tat vollenzyraatiECh" фирмы "Boehringer Jrennhein" (ФРГ). При исследовании данных метаболитов в мозговой ткани производилась прижизненная фиксация кивотних в жидком азоте. ЭкоргстичоскиЛ заряд Й) система АТ^-ЛДФ-ЛМ^ рассчитывали по формула Atkinson (1958); избыточный диктат - по формуле Tíuckaboe (1958).

активность ца,К- АТч'ази и Kg- Айазы в-мозговой ткани уста-навдизали по приросту количества неорганического фосфора, высвобождаемого из АТ<5 ферментом АТ5азоЯ за единицу времени feova-chich.lünchra, Г931). Содержание неорганического фосфора в безбелковом фильтрате находили по методу schibuya et al. \.1967).

Диханио и фосфорилировэние митохиндрий регистрировали поля-рографически с помочью закрытого электрода Кларка уДедухова З.К.,"охова Е.Н. ,1971; Заров А.Н., 193'+). Выделение митохондрий из ткани головного мозга производили методом дифференциального центрифугирования.

Б митохондриальной фракции мозга регистрировали активность процессов ПОЛ. Содержание малонового дпальдегида (МДА) определяли ло методике, описа:-щой В.Б.Газриловзм к соавг.(1987). Активность супероксиддисмутазя ССОД) определяли по методу ViisV.i-kini et al. 11972), активность каталазы - по методу С.Л.Крайнева 11967). Активность ферментов и кекоторие другие показатели зырагглли в расчете на белок, который определяли по Xo-.vry et pi. a95l).

Состояние бензодиазепшювых и опиоидннх рецепторов оценивали радиолигандням методом с использованием "'н-«ало:-:сонг. и %-флуиит-разепама. Расчеты концентрации рецепторов и константы диссоциации проводили в координатах Скетчарда ( }'oriakow et al,I989). данный раздел работы выполнен в ГКЦ наркологии Д РФ совместно со с.я.с. канд.мед.наук Д.Э.Русаковым.

Одектро.чнокикроскошчеекое исследование субклеточных структур мозговой ткани проведено по общепринятой методике чГайор Г., 1974; Боголепов Н.Н.,1975) совместно со о.н.с. канд. код. наук В.В.На-пзрстникоши.

Рид показателем определяли в эритроцитах и плазме крови¡содержание различных видов (фракций) води - дилатометрическим методом а.5.1ара";ука (Л.с. К 1544331, 1938), содержание ионов натрия и калия - истодом пламенной фотометрии (Колб В.Г.,Камиаников B.C., 1932), 0?Э - по методу Дейчи (Тодоров П.,1963), гематохритнуг величину (КассирскиЛ И.А..Алексеев Г.А. ,1970). Изучение ссзрти-зззцеб система крови проводили методом длектрокоагулографин (Ба-луда З.П. и др.,1930).

?•'• гуль гати экспериментов обработани методом вариационной ста-гистики ^Каминский Л.С., 1964; Кокунин В.А.,1975).

РЕЗУЛЬТАТЫ КССЛЗДОВАНИЙ и '¡ИХ 0БС7НДЗНКЗ

Спустя 24 ч поело нанесения ЧЫТ развивался ОНГМ, что проявлялось повышением уровня обцей води в мозге и сшжением его плотности. К 4 суткам травмы ОНГИ достигал максимального развития, а через 7 суток наступала устойчивая динамита его обратного развития. Зо все сроки посттравматичоского периода развитие ОНГМ у.-.еньлали фенибут, сибазон, феназепам, пикамилон, пирацетам и натрия оксибучират. Через сутки после травмы были эффективны мусцимол и вальпроат натрия.

Анализ действия ГАКК-ергических средств показал, что больпуп

значимость з процесса формирования травматического ОНГК имеет' функциональное состояние постсинаптических ГАКК-БД-рэцепторш« комплексов и их субъединиц ГАККа- и БД-рецепторов, т.к. препараты с пряным действием на зги рецепторы Смусцимол, сибазон) оказывали более вырекешшй протизооточный эффект,-чем вещества, избирательно влияние на ГАККб-рзцептори (баклофен) или изменяющие метаболизм эндогенной ГАКК С У-винил-ГАМ, вальпроат натрия). Ингибитор ГАКл-грансаминазы у-винил -ГАЙ* но предотвращал развития ОНГМ дахе при введении в келудочки мозга. Отсутствие протизоатечного эффекта мусцимола в более поздние сроки травин объясняется кратковременностью действия препарата ввиду его быстроЯ метаболической деградации з организме (Раевский К.С., Георгиев Б.П. ,1936). Проти-Боотечныэ свойства ноотропннх прэпа-ратоз пикамилена и пнрацзтама, вероятно, связаны с их полотей-толышм влиянием на биоэнергетические процессы з мозговой ткани.

Среди лигандоз опиопдных рецепторов развитие ОНГМ во все сроки посгтравпатического периода тормозили синтетические аналоги энкефолиноз 33L3T и в меньшей степениDftGO . Через сутки поело травмы били эффективны морфии, промедол, налорфин и опиоидннЯ пептид DAGT'PLAiI. ■ ..

Наличие яротивоогзчннх свойств у преимущественного агониста опиолдннх дельта-рецепторов r¡SL"ST (Tejwrxni et al, 1990) свиде-тсльстзузт о вовлеченности данного типа рецепторов в процесс развития ОНГМ. 3 то не время не исключается участие мэ-опиомд-¡шх рецепторов з патогенезе ОНГМ, особенно на ранних стадиях его формирования, з связи с тем, что селективные агокнеты кя-рецепторов морфии И ÜAGO 'JCostorlitz ,1937; Keyman et al 1933) з определенном диапазоне доз оказались взсьма эффективными через сутки после травмы.Предполагается, что дельта- и ма-опиэ-лдныэ рецепторы определенным образом связаны с комплексом моди-аторно-мзтаболичеекпх изменения, приводят.;* к развития ОНГМ. Проти'йоотечноо действие лигандоз опноидных рецепторов реализуется путем модулирующего влияния их на различные нзПромедиаторные структуры, мозговое кровообраценио, кикроциркулящго и биохимические процессы (Хугаова З.К. и др. ,1990, 1991; "ирзоян Р.С. и др.,1991). Следует отметить, что кривая зависимости доза- эффект для аналогов энкеЯалнноз имела и - образнуо форму, что согласуется с данными литературы (Лснецов 3.Í3. ,1993; I->.rtin«a et al., 1938;.

Противоотечный эффект лигандоз опиоидных рецепгороз устранялся бикукуллином и налоксоном. Аналогичное действие ГА?л-позитивных средств полностью предупреждал бикукуллин и не изменял налоксон (табл.1). Эти данные свидетельствует о наличии тесной функциональной связи мезкду ГАМК- и опиоидергическоГ: системами в процессе формирования ОПГЯ, а такке при ого фармакологической коррекции.

3 следувлэЛ серии экспериментов был проведен фармакологический анализ роля ГАКК- и опиоадергкхескоЕ систем в развитии ОКГи, для чего бша изучена возможность развития ОНГМ в результате блокады ГА1К- и опиокдних структур специфическими антагонистами, а та кг а проведено радиолигандиое исследование количественного и качественного состояния рецепторов в динамике ОНГМ.

Установлено, что угнетение ГАШ-зргической системы бикукуллином, пикрогоксинок, тиосекикарбазидом монет привести к развитию ОНГМ. Перечисленные ГАШ-негативные вещества проявляли эдематогенкоо действие в судорожных дозах. Однако ото не являлось прямим следствием судорог, т.к. в контрольных экспериментах со стрихнином отечных изменений в мозговой ткани но наблюдалось Стабл.2). Вероятно, ГАьК-негативные всцсстза устраняют тормозно-регулирующее влияние ГАМК-ергяческоЯ системы в ЦНС, в результате чего наступает дисбаланс кедиаторких и метаболических процессоз, нарушение мозговой гемодинамики и кикроциркудя-ц!1И, что в конечном итоге и ведет к развитию ОНГМ.

Влокатор опиоидннх рецепторов налоксон потенцировал эдема-тогенное действие ГАЖ-негативных веществ. На ого фоне бикукуллин к пикротоксин вызывали развитие ОНГМ в субконзульсивных дозах Стабл.2).

В условиях угнетения ГА®-системы отмечено своеобразное изменение окислительного фосфорилирования в митохондриях мозга. Так, на фоне действия тиосемикарбазида митохондрии меньше расходовали кислорода на процессы, не связанные с синтезом АТ5. Под влиянием бикукуллина повышалась активность дыхания митохондрий. Налоксон проявлял антагонизм в отнэпении эффектов бикукуллина и пикротоксина на дыхание митохондрий.

3 динамике травматического ОНГМ, начиная с I суток, снижалась концентрация БД-рецепторов в мозговой ткани. К 4 суткам

Таблица I. Фармакологическая коррекция ОНГИ на фоне деПстзия '___бикукуллина и нал оке он а __;_____________

Группы : :Доза, ■ :0тат.: Общая вода, : Плотность мозга>

животных : :кг/кг; : показ: "■> : г/см3

"йтактная п=13 М+ и 77,75 * 0,14 1,0412 - 0,0002

Контрольная п= 8 М* м 78,35 £0,33 1,0335 ±0,0003

;травна I сутки) р •£0,01 ■¿0,001

Травма на фоне действия:

"мхукуллин + 2 •¡¿к 79,00£0,24 1,03914 0.0003

зенибут 50 ? <0,001 ¿0:001

п - 3 Т> ; т >0,05 >0,05

Бпкукуллин + р Ы* н 78,90± 0,36 1,0392* 0,0004

Натрия оксибутират 2С0 ? <0,0Г ¿0,001

я= 9 Рт 1. >0,05 >0,05

Бпкукуллин + 2 М£ м 78,39^0,30 1,0397 £ 0,0003

Яоомздол I Р ■¿0,05 <0,001

п= 9 рт * ^ >0,05 <0,05

Зикукуллин + 2 М к 73,73^ 0,24 1,039Г£0,0003

ОД Р <0,01 ^о.^от

п - 7 >0,05 >0,05

Зикукуллин + 2 £ к 73.44i0.32 Г ,039 2 £0,0004

од Р <0,05 <0,031

п= 7 >0,05 >0,05

Нал оке он +■ Г М£м 78,03 ¿0,27 1,0-Ю Г— 0,0003

¡генибут 50 р >0,05 <0,01

п- 7 >0,05 <0,01

Налоксон * т !!£м 73,03*0,16 Г,0404 + 0,0003

Натрия оксибутират 200 Р >0,05 ■¿0,05

п= 6 -^0,03- -<0,01-

Налоксон + I . М±м 73,52*0,30 1,0393 ±-0,0004

Промодол I Р <0,05 <0,-001

п= 7 Р1 М 4 М >0,05- >0,05

Налоксон + -I 79,701=0,20 1,0388± 0,0003

тио 0,1 Р <0»001 <0,001

п= 9 Рт <0,05- >0,05

Налоксон т I К 4 к 79.11*0,23 1,0391£-0,0002

¿Э-ЯЕГ 0,1 Р <0,001 <0,001

п~ 9 >0,05 >0,05

Примечание.достоверность различия: Р- с нормой , Р, - с контролем,

Таблица 2. Злияние РАйК--негатазкь1Х-вещзс*ь..-стрихнина-к-палок-_сона ка содержание вода, и. плотность мозга__-

Группа животных :Доза, ■:мг/кг :Стат.: :показ: Общая.-вода, : <i A ' ¿ Плотность мозга, г/см"-

Лнтактная п=13 Кг к 77,752:0,14 .1,0412*0*0002

3;:ку:-сулл«н I it* к •77,43- 0,13' 1,0414—0,0002

п= ó ?• . -?C ,05 ' >0,05

Зккукуллик 2 K't к 77,3S¿0,34 1,0417-* 0,CGC2

п= 5 7> ■ - 0,65 ,0,05

Бш.укуллин з - îi±M '73,63± 0,42 1,0403*0,0002

п= 5 ? • ■ <0,05 •'' , <0,05

4 M i м 78,74±0,59 1,0 ¡¡03* 0,0033

. л= У . P . ■ <0,05- . <0,05

Тиссемпкарбазнд -- /75. l'.±-)í ,78,44t 0,10 1,0400*0,0002

п=14 p. ' : ' <C,»0I - , - <0,001 i

Пикротоксик ; i К * к 77,9Z±C,55 1,0410 tO,0002

п= 7 ? ■ ' ' ->0,05- >0,05-

Пикротоксин . ■2: ' 78,49 ±0,33 1,0415*0,0003

л= 6 •P. ■■ -¿0,05 ; >0,05

Стрихнин . i • 78,02± 0,37 1,0411*0,0004

п= 6 P ' -0,05- >0,05

,Стр.!хнин ■• ' 2 MtH/ 77,76¿0,46 1,0413*0,0003

П- 6- , - . P >0,05- - >0,05

НадокооЕ 2. . М±м 78,34*0,46 1,0403*0,0003

п= 6 ' P >0,05 , >0,05 ;

Нглэксон ' 4- Kiu 73,42*0,40 1.0407*0,0003 '

п- б P >0,03 - >0,05 -

Бнкукуялин + 2 M* и 78,83*0,32 Д,0394+0,0002

палоксон 2 . ■P - 1 <0,01 <0,001

п=Ю

•Ькротоксин +■ ■ I ■ К±к 78,57* 0,28 . 1,0406 ¿ 0,0003

Налоксон 2 P <•0,01 >0,05

п= 8

наряду со снижением концентрации возрастало сродство рецепторов к лигандам (табл. 3). Так как БД-рецепторы диссоциированы в одном рецепторном комплексе и тесно функционально связаны с ГАККа-рецепторами (Сергеев П.В..ШимановскиЛ Н.3.,1987; Корнеез А.Я.,1983), можно предположить, что последглз прэторпевапт такие же количественные я качественные изменения а динамике ОНП'. Отсюда отановиася понятным полияительныЯ эффект производных бен-зодиазепина и ГАКХ в отношении ОНГК.

Состояние мл-опиоидных рецепторов в динамике травматического ОНГМ изменялось противоположно БД-рецепторам. С 4 ио 7 сутки травмы их концентрация постоянно возрастала (таол.4.'. Возможно, повышение количества опиэидкых рецепторов является компенсаторной реакцией организма на снижение активности тормозной ГА"л-системы, вследствие уменьпенияконцентрации ГАНК-БД-рецепторных комплексов.

Представленные факты доказывает участие ГА'К- я опкоьдерги-ческой систом в патогенезе ОНГК, а такие- свидетельствует о наличии определенных зганморегуляторкых отноаэняя наяду этими системами з формировании данного процесса.

В динамике травматического. ОНГМ обнаружены выраженные нарушения биоэнергетических процессов.в мозговой ткани. Причем наи-больаиз изменения биоэнергетики были отмечены через сутки поело травмы, хотя максимальное развитие - ОНГМ наступало только к 4 суткам. Ззроятно, нарузенче процессов б"оэнзргетика в травмированном нояге является одной из причин развитая ОНИ-!.

Через сутки после травматического воздействия в мозговой ткани происходило нарастание уровня- мэлочнэЯ кислота баз значительных изменений в содеркакии пировнногр одной, увеличивался коэффициент лактат/пиру ват, появлялся йзбыточинй лактат. Эти показатели свидетельствует об угнетении.процессов окпелензя. В системе адениловнх нуклеотлдов было обнаружено «даяние концентрации АТ$, общего фонда нуклэотядов н энергетического заряда, при этом уроши АД$ и АК5 повалялись.

Энергетический дефицит в мозговой ткани з- пооттравкатачзехий период мог бить вызван недостаточной скоростьв синтеза макроээ-гичэских фосфатов или их усиленным распадом. 3 связи с этик мк изучили оба процзсса, связанных с энергообеспечением клеток,-окислительное фосфор&зированиэ в митохондриях мозга (основной

Таблица 3. Состояние бенздиазепиновых рецепторов в динамике травматического отека головного мозга.

Группы животных Вшах Р» к<1 Р» .

( Ршо1/тд ) ( ПМ )

Интактная 1661,0 ± 12.8 2,78±0,0Э

Травма I сутки 1255,7±13,9 I,2x10"10 2,99±0,08 0,05

Травма 4 сутки 1262,7±15,0 2,ЗхЮ"10 2,54±0,04 0,02

Травма 7 сутки 1673,2±33,7 0, 36 2,44±0,05 4,9х10"3

Таблица^. Состояние н-опиатных рецепторов в динамика

травматического отека головного мозга

Группы животных Вшах Р- ка р-

{ Ршо1/тд ) ( ЧМ )

Интактная 59,39±3,20 0,98±0,24

Травма I сутки 59,98^4,12 0,46 0,65±0,П 0,10

Травма 4 сутки 87,75±2,94 1.66Х10"4 0,59±0,09 0,07

Травма 7 сутки 104,44±5,26 1,22х10"4 0,75±0,16 0,21

путь синтеза АТФ) и активность ТГа.К- АТ§азы и Мд-.АТ^ази (осуществляющих гидролиз АТ§).

Было установлено угнетение активности ГГа.К- АТФазн я Мз-АТФази через 24 ч после травмы и их поотепеннуо нормализации к 7 суткам. Возмокно, снижение активности АТФазы связано с падением концентрации АТ5 в мозговой ткани.

Изучение окислительного фосфорллярования митохондрия мозга показало, что в динамике травматического ОНГМ страдают в основном процессы окисления. Эти изменения значительно выредэны через сутки после травмы, а спустя ^ суток нормализуются. Лизгь в митохондриях, выделенных и» зоны травмы, показатели дыхания в это время оставались несколько сниженными. Быстрое восстановлена е процессов окисления в лосттравматически.1 период может быть обусловлено несколькими причинами. На наи взгляд, главными из них являются следувщие: срабатывает известная биологическая особенность клетки восстанавливать целостность нарушенных структурных образования и функция в кратчайшие периоды времени; неповрежденные травмой митохондрии усиливая? свою функцип и компенсируют недостаточную работу пораженных структур. Снигсеняе окислитэлн-тых процессов в митохондриях мозга в посттравматическом периоде, по-видимому, связано о угнетением активности дыхательных ферментов.

При травматическон ОНГМ .через сутки после травмн и при токсическом ОНГМ были установлены однотипные изменения з работе митохондрий. Данный факт свидетельствует о том, что нарушение функции митохондрий определенный образом связано именно с ОНГМ. Вероятно, нарушение углеводно-энергетического метаболизма мозговой ткани в посгтравматичэском периоде, приводящее к энергетическому дефициту, метаболическому ацидозу и срыву активного транспорта ионов через клеточные мембраны, вызывает изменение мозговой гемодинамики, сосудистой и тканавой проницаемости, на-Р7яае? осмотический градиент и водно-солевой баланс в ткани мозга. Зсе пэречислекноо, как известно, способствует формирования ОНГМ (Мчеддиявили Г.И. ,1936; Оагепааа.Гиаг+з, 1980).

' ГАКК-ергические препараты и аналоги энкефалинов, тормозившие развитие травматического ОНГМ, з большей или меньшей ста пен:; предотвращали нарушения процессов биоэнергетики мозговой ткани в посттрааматическом периоде (рис.1,2,3). Возможно, з механизме

Рис.1. Показатели биоэнергетики мозговой ткани при «илрмакотЕрапии травматического ОИГМ к норме).

а/ »а

ята» J__j контроль

■W

it- it

TF fV

4/у ••À,

UV ■Л,

•л' vV

Í: К'/ ЧЛ.

t i7''

vV

'v-S-'

■■ k-' VV

ядер яма» е ¿i.

окоибутират Мп^^Ц «рснибуг [Щ]рм»аИЕТЛм

Лоотобсрмооть раоличин.-Н-о нормой.

ЛЛИТДГ/'

пи^иплг 3 тюмсЗоя »SLET

Го

сз

X—о КОНТРОЛЕН

t С

i а

а й у,

h и * я 7 ^

в V

S2

s°

I3 i

i 4

i I 6 4

6.

h

4 fi. H

Ы S I

ц z

с о о с

« о

3

&

Игч- i-'!;}

î3l

«ППЩППЩПЯ

'■s', * --' " " ■

i < XWsKt-jíí'/Xíí'Z'Z',?.

«S >-

M

>ч*-->C4\S>>>-Nvil.JL-j

u 3

et

t-

я а з

* Й

м> и

u »3

S M ■Д Ö

<a о

<0 &

h—

<x

s s

с «

a.

Ltl H

o

a£

S

S g

c. S

<s a

0 о

1 *

с . « «

с.

es ta о

X ^

■S С? =

 О

(О

1 °

О S

s « z

u s

X «

>c 2 «a

k5

ci s a

утш шшштт

I

о о

о

v>

i i—г-О о v гз

противоотечного действия исследованных препаратов определенное место занимает их положительное влияние на процессы биоэнергетики .

Действие ГА!К-позитивных средстэ на метаболические процессы мозга связано с активацией ГЛ!ЗС-системы, которая обладает стимулирующим действием на обм-:н основных окэргетических источников, способствует лучшему использовании метаболитов, активирует обходные пути метаболизма (Лабори Д97'(; I^nicoue-, 19^2).

Положительный эффект опиог'дпнх пептидов на метаболизм мозга может быть обусловлен нормализацией мякрош'ркуляции, п трйчз их регуляторным влиянием на процесса медиации и метаболизма (Крыжановский Г.М. я др., 1937; орагин К.О. .Яонецов 3.В.,1991; Мирзоян P.C. и др.,1991).

По современным представлениям, метаболические нарушения в ткани мозга могут быть вызваны изменением процессов свободно-радикального окисления ССРО) (Дурнев А.Д..Серзденин С.о.,1990; Сейфулла ?.Д. .Борисова Л .Г. ,1593; Дкандагава Г.Г.,Закартавили P.P..IS92). изучили активность ПОЛ в мнтохондрмальной фракции мозга з динамике травматического ОНГК и при его фармакологической коррекции, для чего исследовали содержание Г'ДА и активность ферментов антирадикальной защиты СЭД и каталазы.

Была обнаружена значительная активация процессов ЛОЛ в дина мяке ОНГМ, что проявлялось накоплением ИДА к расстройством Функциональной сопрякзкности ангирадикалышх ферментов, когда активность СОД падала, а активность каталазы возрастала. Один из возможных механизмов инициирования DP') в поеттравкатическом периоде - попадание крови н форменных элементов в веаестзо мозга с выходом из них сильнеЯзмх активаторов ПОЛ - изноз железа и меди С Seligmen et al,1979).

ГАМК-позитивнно препараты к агонясты опиоидных рецепторов оказызали положительное влияние разной степени выраженности ка процессы пероксидации чепез 2h ч поело травмы. Эффск™ грог.ара-тов, прекдо всего, трахался в позпзепни активное".! аптирадн-кальных ферментов, особенно СОД (р:;с.^. Однако четко;*; зависимости мекду протиЕООтечнсй активностью препаратов и ;:х влиянием на процессы ПОЛ не отмочено.

С помоиьо электронной микроскопии в иос прагматическом ii«p:i оды в зоне травма и в перифокальной к месту травмы зоне мозга обнаружены выраженные деструктивные изменения в митохондриях

Pue.-4. Активность процессов ПОЛ при ФаРиекотЕРапии травматического 014ГМ (о % к норме)

200

210

200

ICO

120

Vit w * i-fv.v •г 4 {

t + í-K

iiiss

__сод

i_1 Контроль <тра6ма 1 сутки)

ШЕ1 Пмрацст{

ПромеОол

)кси&утнрат На

Mjai-ï

Диаинпам

(набухание, частичное ил;! полное размывание крист\ На фоне действия фенибута в телах нервных клеток и нейропкле (преимущественно в области синансоэ) перифокальной к месту травмы зоне мозга отменено увеличение числа митохондрия. При этом деструктивные изменения в митохондриях бкли ко нее вираяош!.

С цель? шязления гематологических показателе Г;, объективно отражаадих динамику развития и эффективность фаркакотерапии ОНГМ, з динамике травматического 0НГ14 били изучены водно-электролитами баланс крови, углезодно-знергетическнИ метаболизм, ОР'Э, гематокритная величина я свертывай¡¡ая система крови.

Выявлена изменения з содержании различных видео воды г компонентах крови с повкиекиои свободной фракции га счет сквздняя связанной. При этом з эритроцитах к плазме крови повн-алась концентрация ненов натрия, отмечено такхо сн^-.ение гематскрит-ноЯ величины. Папзгаал&кне изменения водно-олептрэлатаого баланса крош! приходились на Ч сутки после траппы, когда в мозговой ткани наблюдались стойкие выраг,;энныэ признаки СНГ!-!. Наиболее стабильные изменения содержания фракций годы и электролитов были обнаружены в эритроцитах, что, могло быть, обусловлено большей чувствительностьа этих клеток к различным с^еессо-вым воздействиям. Изменение концентрации электролитов з эритроцитах з динамике Э!!Г!' наиболее полно отрвхал К+Да+-коэффициент, которип могло использовать как адекватный показатель оцзв-ки эффективности фармакотерапии ОНП'.

Изменения водно-электролитного баланса эритроцитов в динамике ОНГМ были тесно связаны с содержанием воды и плотностью мозговой ткани, а проведенный корреляционный анализ обнаружу, эн-сокуо степень прямой или обратной зависимости ме:*г,у ними. Ка этом основании мы разработали способ исследования динамики 0КГ15 по водно-электролитному балансу крози (Авт. свидетельство И 177 27 -'¡б, 1992).

Развитие ОНП' сопровождалось нарушением ОРЭ с повышением показателя средней клеточной хрупкости (СЮО. 5 динамике травматического ОНГК обнаружены такке изменения углеводно-онеогети-ческого метаболизма крози.

Фенибут и натрия оксибутират, предупреждавшие развитие ОНП;, оказывали положительное влияние на гематологические показатели а динамике посттравматического периода.

На основании изучения коагулограммы крови выявлена повншон-кая активность свзртивакщей системы через 24 ч после травмы, что выражалось замедлением начала ретракции и фибринэлиэа, а такие сшпсснйзм скорости этих процессов.

Таким образом, комплексный подход с использованием фармакологических, биохимических, радиолиганднах и электронномикроско-пичеиких методов исследования позволил установить наличие взаи-морогулягорнмх отношений мозду ГАг-Х- и опизядэргпчеокоЯ системами при формировании ОНГМ и его фармакологической коррекции. 3 динамике травматического 011ГМ заявлены количественные и качественные изменения опиоидних к БД-рецепторов. Зираяэнные сдвиги при ОНГМ установлены в углеводно-энергетическом метаболизме мозгозой ткани, процессах ПОЛ, а таске ультраструктурэ митохондрии а зоне травмы и перифокальноЯ к месту травмы зоне мозга. Поклзана зависимость биохимических изменений в динамике ОНГ." от Функциональной активности ГА!!К- и опиоидно.': систем.

Летальное исследование разнообразных ГА^-сргичзских средств и лигандов опиоидних рецепторов позволило установить преимущественную вовлеченность в формирование травматического ОНГМ ГА'-а-Зд-рецепторанх комплексов, а также дельта- и м:а~зп;;оидных рецепторов. В качестве эффективных противоотечных средств рекомендуются фзнибут, сибазон, пикакилон и пирацзтам. Целесообразно такке проведение расширенных доклинических испытаний синтетических аналогов энкефолинов бзьзт и мйО в связи с наличием у них виракенноЛ нрогиооотечноЛ активности.

Разработан способ исследования динамики ОНГМ и оцзнки эффективности его фармакотерапии по гематологическим показателям, который :-;0;Кет быть одинаково успеано использован в экспериментальных исследованиях и клинической практике.

ВЫВОДУ

I. На разработанной модели травматического ОНГМ проведен скрининг веществ, обладающих прстивоотечно;! активностью, среди ГЛ;^-ергпческих средств и лигандов бензодиаззпиковых и опиоидних рзцепторов. Заявлен ряд соодинений с выраженными противоо-точнымм свойствами¡причем их эффект имеет разную форму зависимости от дозы и неодинаково выражен в различнее сроки поеттрав-матлч'зского периода.

2. Среди производных ГА®, бензодиазепина и лигапдоз опио-идных рецепторов выраженной протмвоотечной активность-: обладают: фенибут С30 мг/кг), сибазон (0,5 иг/кг), фзназепам СО,5 мг/кг), пикамилои оОО мг/кг), ппрацетам [I г/кг), СО,Т мг/кг) и баоо СО,I мг/кг). Указакнне ведаотк» пр-зоосхопт по ряду показателей эталонный препарат натрия скоибутир:т .200 мг/кг).

3. Противоотечное действие ГАМК—зргкчеокнх стзедзтз poa.cn.v-'-стоя через ГА^-БД-рецзптопкмП кэкпязг.с. ^.фзпт зптг.тд-чх пептидов и наркотических анальгетиков связан со Щ'жгши^' дслг-та- •*. кэ-олиоидкчх рецепторов. Кроне того, ?. коханизме действия опиоидэв ккеется ГАК'-ергичвсг.кЛ ионпо^снт.

к. О использованием различных фармакологических анализаторов показано участие ГАК- и оппоидсргичсской систон з фэрмн-позанки ШГС. При этом обе екегв%> оказылцуь нодуля-

торное .влияние друг на друга. 3 частности, применение тиосеми-карбазида, бикукуллина и пккротоксииа мотгот привести к а блокатор опиоидных рецепторов налоксон потенцирует эдемато-генное действие ГАьК-деготхвиих вецестз.

3. Радиолиганднын методом установлено снижение концентра:!,::".: Бд-рэцегггоров » повшгениз ко:;центрам::;-, кп-эпкоидних роцеп: ороз г- динамике гравматяче о кого 0!!?''. При этом повы^'югся с^о.'е.т:--лигандоз к БД-ргцепторгк. 0т;:-:-ч2:;-п.?о з гзцепторнои йппарт"»: изменения могут лежать з основе проткзоотечного ддйстзмл г>е::;остз соотзетствупдкх групп.

6. Формирование ОКГМ сопровождается глубоким иаруагпкем углеводно -энергетического обмена в ьэзгозой ткана, '''"э чорс-з 2;г-поело Ч!чГ происходит резкое нарастание лактата, появляется ::?-бнточнил лактат, укеньагется содер-'йнке А?!1, об:;;::Л фонд лозых нуклеотидоз и энергетический заряд системы АТ'-Ад* -.'."Г, возрастает количество. А"'?, снижается активность "а,К- Л'К'пзи

и Не- А'ГФазы. В ото ке время снижаете,- дыхание митохондрий мозга в различных метаболических состояниях. " '4 суткам грал-мы восстанавливается дыхание митохондрий и актизкссть Через 7 Суток после травмы осталыюо показатели приобретав? устойчивую полохитэльнуо динамику.

7. В динамике травматического ЭЯГМ актиЕпрузтся процессы ПОЛ в митохондриальной фракции мозга, что .-появляется

ином я расстройством функциональной солряяешости формантов

антлра/.пкпльноЯ защиты- СОД и катадазн.

0. В механизме протквоэтечкого действия ГАЖ-зргичсских сро^сгл и ллг:-.ндоз одиоидных рецепторов определенное значение имеет их полткятглыюэ влияние на показатели биоэнергетики и процессы ПОЛ,

9. 3 динамике ОПТ!! происходят значитольккз изменения гематологических показателей: в эритроцитах и плазмо прок: позывается содержание сзободноЗ води и снижается количество связанной, увеличивается хоидектрация ионов «птрия, изменяемся соотношение калпЯ/клтрнй, уизньыгется кинимольная и максимальная осмотическая рзздстзнтносгь оратроцдтов . возрастает ::х средняя клеточная хрупкость, нарушается углеводно-энергетический кзтабэ-нага (возрастает уровень лактата плазмы, лактата и плрузата оритооцитод, изменяется количество кно о еоотноадкяз какроэргоз

з системе АТ:г-\,'^-А'и, снижается эгаргэтяческий заряд), изменяется коагулограмма крови в сторону активации процессов свертывания. Пзмоненпя гематологических показателей копболео варахена з 1-г сутки пссгтрлпматичзского периода и хооозо коррелируют с показателям и воды и плотности мозговой ткани.

10. Один из путей патогенетической лекарственной профилакти-::и и терапии ОШ'М состоит в активации эндогенных защитных систем - ГА!-'1'~ и оппоидзргической (применение ГАМХ-иозит5пзгшх средств л агзаистов олиоидинх рецепторов), что приводит к тор-мо.ке;г.:-.о развития ОНГМ.

НАУЧНО ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОЖНДАЦИК

1. !.;рл проведокил комплексной фармакотерапии травматического ОлГЛ целесообразно использовать препараты, активирующие ГА!>К-

п олиоидергичоскуэ системы. В качество эффективных противоотеч-ныл средств рекомендуется применять фзнибут, сибазон, пикамилон и ппрайстам.

Результаты работы позволяв! рекомендовать синтетические аналоги знкесалиноз взкт и вл&о для расширенного доклинического испытания.

2. Для диагностики ОНГМ и оценки эффективности его фармако-хзрапи;: чпрогрзеенруедез, непрэгресспруидое течение, обратное слзз'.гзлз') в лабораторноцинических условиях рекомендуется не-

пользовать способ исследования динамики ШП» по геиатологпчос-кип показателям.

3. Для научно-лоодсдэьа^ольсккх целей предлагаете г. cn>vx; моделирования травматического '.'НГМ у колких лабораториях г:-.-ветних, котор!!'.: мохет :.ib!Tb попользован для изучения Г/:ТС1 CK'J-за öiir.'i и скрининга ведсств, обладачдих прс-тм:-ое13чке.Ч аг.;.:?-ностьп.

сл:;сок работ, элтзликэзакн:-тл по ajcclpiai;:;:;

1. Новиков 3.3. ,Коз.тзз С.Н. ,Дс.»гцов З.С. дхшмв лтонз^едних <5энзоднззеп;пи л ГА.'л па некоторое показатели энергетического обмена в условнж отека головного мозга // £аркакол. точоп-кол,-1234.- з.-с.33-35.

2. Лснсцоз B.C. .Hoimkob З.л. ГА!"£-оргччзскг.я система г отзг. голодного мозг.-! // 5злл.эхелор.баол. - ~9?-5.~ !« С. (-7-59.

3. Новиков 3.3. .Яскецоа З.С..Козлов О..»;, лд;:.-:-.\ ; ''.мигала и фентэлампнг. на уровень макроергичееких фосфатов з :озгу г.р.: orv отеке //?5ф.т.. ВШЫТй.Заркакол. обсая:*аркахэлогня нзоенон скстз-на.- 193. .- С. 13.

•г. Ясизиов 3.3. .Платонов ;!.А.,Нозихэв 3.3. К механизму про-тиззотечкоге действия кзйротропк?:х средств // с-армг^солог;:.-. л научно-технический прогресс: Тез. докл. 71 3сзсо-озн.съезда фармакологов. - Ташкент, 1958.-С. 443.

3. Лскзцзв 3.G..Новиков 3.S. Профилактика отека головного мозга произзодкьши FALK // ¿армакология и токсикология природных и синтетических соединений.- Нинск, 1929.-0. !*';! - 1;;2.

6, Новиков В.Е..Ясмецов B.C. Влияние пякамилока на развитие отека головного мозга // Пикамилок - козий цереброзаекуляэнн;: и ноотрог.ниГ; препарат: Тез. докл. Все с on зн. конференции.- М., 1989.-С. 63-63.

7. Новиков З.Е.,Ясмецов B.C. Злняниэ фенибута и натрия ок-сибутирата на динамику развития травматического отека головного мозга // Рукопись деп. з ЗпНПГ;4. - ¿989.- 221?- 35?.

3. Новиков З.Е. ,5огефатов A.C. Состояние сззртшвд системы крови в динамике травматического отека -набухания .■■о." о ■:кого мозга // рукопись дзп. в ЗДК«Г>1. - 1933.- Z- ЗОсЗ- Bö?.

9. Новиков 3.3. Калий-натриевый баланс эригроцптзз при экспериментальном отеке-набухании головного мозга различной этиологии //Рукопись деп. в ЗКВГГй.- 1989.- 2 6.:9-385.

10. Новиков 3.2..Чемодурова Л.Н. Электролитный баланс крови в динамике черепно-мозговой травмы // Рукопись деп. в ВИНИТИ. -1990.- 13 532- 390.

11. Новиков В.Е.,Яонеиов B.C. Влияние некоторых нейротроп-ных средств на развитие токсического отека головного мозга у неполовозрелых животных // Фармакол. и токсикол.- 1990.- 55.-С. 61-52.

12. Новиков 3.3. Оценка эффективности влияния фенибута на развитие травматического отека-набухания голодного мозга по ■электролитному балансу крови // Рукопись деп. з ЗИНЛТЛ. - 1990. - и 69- 390.

10. Новиков 3.5..Яскзцов З.С. Эффективность производных ГА!.,а в динамике травматического отека-набухания головного мозга // Повнз данииз по фармакологии мздпаторкых аминокислот и -Злэлоглчзски активных веществ: Труды ЗГШ. - Т. ч2, вып.1,- Волгоград, IS90.

14. Новиков 3.3. Состояние биоэнергетики мозговой ткани в динамике травматического отзка-набухания головного мозга // Рукопись деп. в ЗЖЭТй.- ISS0. - is 266Г-390.

15. Новиков Б.Е. Методика воспроизведения и критерии оценки травматического отека-набухания головного мозга // Рукопись деп. в ВИНИТИ. - IS90.- К 2662- 3S0.

16. Заров А.Н..Новиков З.Е. Окислительное фосфорилирэваниз и отек головного мозга // Рукопись деп. в З'ПШТИ. - 1991.-.•¿913-891...

17. Новиков З.Е. Осмотическая резистентность эритроцитов при отск-з головного мозга // Рукопись деп. вЗИШШ.- 1991. -S 1962- 391.

13. Маслова Н.И..Новиков В .Е./Зарацук Н.2. Коррекция сотрясения голобного козга и его последствий пикамилоном // Фармакологическая коррекция гипоксичзских состояний: '.аториалы Все-соззн. конференции. - Гродно, 1991. - Ч.2.-С. J05-306.

19. Новиков В.Б. Углеводно-энергетический метаболизм мозговой ткани л-динамике остроЯ черэпно-мозговой травмы // Там же.-С. 3I0-3II.

20. Новиков В.З.,¡Паров А.Н. Окисление и фосфорллирование при отекэ головного мозга и его фармакологической коррекции //Там же.-С. 311-312.

21. Новиков З.Е. Изменения гематологических показателе?, з динамике острой черепно-мозговой травмы // Актуальнее вопросы педиатрии и детской хирургии. - Смоленск, 1991.-С. 7'4-76.

22. Новиков ВЛ. .Лснепов З.В. дяиянпсг антагонис.эв оппоид-ных и ГАМК-рецепторов на формирование отека мозга // Синтез, фармакология и клинические аспякты новых эбсзболизаггцчх средств: Тез. Зоесочзн.конф. с млндународнш: участием.- Новгород, 1991.-С. 52-53.

21. Новиков В.3. Даров А.Н. Злияние ГА^Д-ергнческих средегз на окислительное фосфорилирование в митохондриях мозга пр:: его тоавматическом отеке // 5-армакол. и токск.чол. - 1991.- б.-С.

24. Новиков 3,5. .Чемодуроза JI.il. Влияние ГАКК-ергическкх средств на электролитный баланс крови при острой черз-шо-мозго-вой травка // Эксперт.и оинич.фармакол.- 1992,- Ю. - С.70-72.

25. Новиков 3.3. Злияние натрия оксибутирата на динамику развитая травматического отека-набухания голодного мозга // Эксперим. и хликлч. фармакология. - 1592.-5 З.-С. 75.

26. Евсеев А.3..Новиков В.Е..Ясцецов В.З. Роль процессов

ПОЛ в механизме лротизоотзчного действия фе:-: :бута //Келруфарма-кологил ка рубеже двух тысячелетий: Материалы международно.": конференции поев. ЮО-лет:п со дня рождения академика С.3.?и:;:ч-кова.-Санкт-Петербург, 1992.-С. 67.

27. Новиков З.Е. Злияние ГАКК-ергических средстз Н1 развитие отека головного мозга // Там же.-С. 155.

23. Коеиков З.ь. Экспериментальная 5аркзкотэрап::я отека го-лозного мозга ГА1-1К- и опиоидерглчесхиш средствами // Экспериментальна.-; фармакология - клинике: Тез. дою*. - З:ншицг-У.::ез, 1992.-С. 59.

29. Новиков 3.". £аркакалогичесциД анализ ролл опкэадзрги-ческой енотамы з динамике развития черзпно-мозгэьо?. травмы // Актуальные проблекн физического воспитания и здоров*.; наезле-ния.- Смоленск, 1992,-С. 55-36.

30. Новиков 3.3. ,?ара:дук К.5. Способ исследован:« д.: -:аниг.:: отёка голошого мозга // Новые методы диагностик:: к в хирургии, травматологии и стогатологии. - Смоленск, 1952. -".7-3.

31. Шаров А.Н. .Новиков З.Е. Состояние окислительно:'-" ;зсфо-рилирования в митохондриях головного мозга ..ри егз г-:;:

и травматическом отеке-мабуханки // Вопр. мод. химии. - 1992. -2 5.- С. 24-26.

32. Новиков З.Е..Андреева Т.А. Активность Na,К- АТФазы и üj - АНазы в динамике травматического отека головного мозга // Рукопись дол. в К1ШГГИ. - 1992.- 5 3333- 39¿.

33. Новиков В.2.,Яснецоз В.3.,'Паров А.К. "ГариакологическиЯ анализ роли ГАИ- и опноидзргичеокой систем в развитии от'эка голодного мозга // 5элл. экспзр. биэл,- 1992.- % 8.-С.163-163.

34. Новиков В.З. .Ясноцов 3.3. Влияние лигандов эпиэидных рзьоптороз на раззптиз травматического отека головного мозга // Экспзрпи. и клинич. фармакология. - 1993.- 'г 4.

ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Новиков З.Е.,5арауук H.í. Способ исследования динамики о тока головного мозга. - Авт. свидетельство 51772746, 1992.

2. Новиков В,С. .¿аращук II.Способ моделирования травматического ot'íkg головного мозга. - Поло», решение на изобретение по заявке $ 493572C/I4 от 3.05.92, выданное КИЯ ГПЭ.

РАЦИОНАЛИЗАТОРСКИ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Новиков 3.2. Способ получзния экспериментального токсического огэка головного мозга. - Удост.на ран. предложение

!.' 613, выданное БРНЗом СШ 21. Г 1.33.

2. Новиков З.Е. Устройство для введония лекарственных веществ в желудочки мозга. - Удост.на рац. предложение !S 340, выдан. -з БРИЗ о к СГМИ 21.12.87.

3. Новиков З.Е. Игла для нанесения дозированной травмы головного мозга. - Удост.на рац. предложение й 873, выданное БРЛЗом СГМй 15.02.83.,

4. Новиков З.Е. Способ определения плотности мозговой ткани,- Удост.на рац. предложение ICOS, выданное БРНЗом СГМИ 13.12.89.

5. Новиков З.Е. Способ оценки эффективности экспериментальной фармакотерапии or'jKa головного кч/3га. - Удост.на рац. предложение 2 1047, выданное БРНЗом СПИ! 19.02.90.

6. Новиков З.Е. Способ моделирования травматического отека-набухания головного мозга.- Удост. на рац. предложение 3 1060, выданное БРЛЗом СГШ 19.03.90.