Фармакологическое обоснование целесообразности использования технологий иммобилизации в клеточные носители антибиотиков для коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальном необструктивн

Сипливый, Геннадий Вячеславович

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Фармакологическое обоснование целесообразности использования технологий иммобилизации в клеточные носители антибиотиков для коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальном необструктивн

ДИССЕРТАЦИЯ

Фармакологическое обоснование целесообразности использования технологий иммобилизации в клеточные носители антибиотиков для коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальном необструктивн - диссертация, тема по медицине

АВТОРЕФЕРАТ

Сипливый, Геннадий Вячеславович Курск 2011 г.

Ученая степень: доктора медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.06

Автореферат диссертации по медицине на тему Фармакологическое обоснование целесообразности использования технологий иммобилизации в клеточные носители антибиотиков для коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальном необструктивн

Сишшвый Геннадий Вячеславович

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЦЕЛЕСООБРАЗНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ТЕХНОЛОГИЙ ИММОБИЛИЗАЦИИ В КЛЕТОЧНЫЕ НОСИТЕЛИ " - АНТИБИОТИКОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ НЕОБСТРУКТИВНОМ ПИЕЛОНЕФРИТЕ

14.03,06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

О з [-ЛДР 2011

Курск-2011

4856394

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научные консультанты:

доктор медицинских наук, профессор Лазарев Алексей Иванович доктор медицинских наук, профессор Братчнков Олег Иванович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Филиппенко Николай Григорьевич доктор медицинских наук, профессор Утешев Даниил Борисович доктор медицинских наук, профессор Хохлов Александр Леонидович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Защита состоится «?$?> 2011 г. в « » часов на заседании

диссертационного совета Д 208.039.03 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (305041, г. Курск, ул. К.Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

Автореферат разослан « » _2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Пашии Е.Н.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

В настоящее время урологические инфекционные заболевания занимают одно из ведущих мест в клинике инфекционных патологий (Лопаткин H.A., Переверзев A.C., 2006; Sobel J.D., Кауе Д., 2005). Пиелонефрит является одним из самых распространенных заболеваний почек в любых возрастных группах, частота которых за последние годы увеличилась и занимает второе место в структуре заболеваний после острой респираторно-вирусной инфекции (Калугина Г.В. и др., 1996; O'Donellj et al., 2002). Пиелонефрит имеет тенденцию к длительному течению, хронизации процесса и является основой глубоких морфологических и энзимопатических нарушений в почках, что в свою очередь вызывает системные иммунометаболические изменения (Лопаткин H.A. и др., 2000; Есилевский Ю.М., 2007).

При инфекционной патологии и, в частности, при необструктивном гематогенном пиелонефрите широко используются химиотерапевтические препараты, обладающие мощным бактериостатическим и бактерицидным действием и достаточно широким антимикробным спектром (Зубков М.Н., 2002; Рафальский В.В., 2004; Cilbert D., 2002; Emmerson A.M., Jones H.M., 2003). Клинические наблюдения последних десятилетий свидетельствуют о значительном снижении эффективности антибиотиков (Неймарк А.И., Гаткин М.Я., 2005). Известно, что антибиотики являются ингибиторами синтеза нуклеиновых кислот, липидов и углеводов, а также активно влияют на функции цитоплазматической мембраны клеток (Навашин С.М., 1997). Применение антибиотиков нередко сопровождается осложнениями, связанными с подавлением иммунитета. Подтверждением этого являются данные о значительном учащении рецидивов и снижении общей реактивности у больных, принимающих антибактериальные препараты (Переверзев О.С., 2006).

Снижение токсичности и повышение эффективности химиотерапевтических препаратов возможно селективным действием фармакологических средств на определенные клетки и органы (Неймарк А.И., 2000; Симамкович A.B., 2007), Направленный транспорт лекарственных средств в охваченную патологическим процессом зону позволяет наряду с созданием в ней высоких концентраций вводимого препарата максимально уменьшить нежелательные реакции организма на медикаментозное воздействие, снизить терапевтическую дозу препарата и кратность введения (Останин A.A. и др., 2000; Карпушина И.А. и др., 2001; Кирдей Е.Г. и др., 2001; Кузьменко В.В. и др., 2009).

Для достижения поставленной цели применяют микроконтейнеры, в качестве которых могут выступать липосомы, капсулы из человеческого альбумина, магнитные микросферы или аутоклетки крови (Костюченко А.Л. и v др., 2000; Аносова Ю.А., 2010). Однако большинство известных носителей имеют ограничения по диапазону и количеству лекарств, которые они могут связывать, а также обладают токсичностью и иммуногенностью. Наиболее

выгодными с точки зрения биологической совместимости считаются системы доставки, в которых используются собственные клетки организма. Реализация идеи направленного транспорта лекарств идет по линии использования эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в качестве контейнеров для доставки лекарственных средств (Лохвицкий C.B. и др., 1999; Шевцова О.М., Денисова О.И., 2001; Вельский А.Н., Потапчук В.Б., 2001).

Органоспецифичность клеточных носителей, полученных из форменных элементов крови, будет определяться в первую очередь свойствами форменных элементов: способностью лейкоцитов мигрировать в очаг воспаления, эритроцитов фиксироваться эритрофагоцитирующими клетками, в основном печени и селезенки, способностью тромбоцитов к адгезии на поврежденных участках интимы сосуда (Генинг Т.П. и др., 1988; Костюченко А.Л., 2000; Третьяков Б.В. и др., 2000).

Цель работы

Разработка экспериментального и теоретического обоснования применения направленного транспорта антибактериальных препаратов, основанного на использовании клеточных носителей, с целью повышения их эффективности и снижения иммунометаболических нарушений при необструктивном пиелонефрите.

Задачи

1. Разработка лабораторной технологии получения клеточных эритро-цитарных и лейкоцитарных форм некоторых антибиотиков аминогликозидов (далее по тексту аминогликозиды) и фторхинолонов для осуществления направленного транспорта лекарственных препаратов.

2. Моделирование экспериментального необструктивного гематогенного пиелонефрита и сравнительная оценка эффективности свободных и клеточных форм аминогликозидов и фторхинолонов в условиях данной патологии.

3. Установление иммунометаболических нарушений и взаимодействий клеточных и молекулярных структур в их развитии при необструктивном пиелонефрите.

4. Анализ путей реализации иммуносупрессии при необструктивном пиелонефрите и возможностей ее предотвращения с использованием антигипоксанта рибоксина и гликолитического фермента лизоцима.

5. Исследование влияния системного введения некоторых антибиотиков и фторхинолонов на иммунометаболические процессы при инфицировании и необструктивном пиелонефрите.

6. Анализ механизмов реализации иммунометаболических эффектов аминогликозидов и фторхинолонов и возможностей их фармакологической коррекции с помощью антиагреганта дипиридамола, антигипоксанта рибоксина, гликолитического фермента лизоцима, дезинтоксиканта поливинилпирролидона при необструктивном пиелонефрите.

7. Изучение влияния аминогликозидов и фторхинолонов, включенных в эритроцитарные носители, на иммунометаболические показатели лабораторных

животных при необструктивном пиелонефрите.

8. Изучение влияния аминогликозидов и фторхинолонов, иммобилизованных на лейкоцитарных носителях, на иммунометаболические показатели лабораторных животных при необструктивном пиелонефрите.

9. Изучение влияния предварительного экспонирования эритроцитов и лейкоцитов в ультрафиолетовых лучах и магнитном поле и обработки клеточных форм антибактериальных препаратов лизоцимом и поливинилпирролидоном на иммунометаболические показатели лабораторных животных при необструктивном пиелонефрите.

10. Сравнительное изучение влияния эритроцитарных и лейкоцитарных форм аминогликозидов и фторхинолонов на активность метаболических маркеров эритроцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов при необструктивном пиелонефрите.

Научная новизна

Впервые экспериментально обоснован метод направленного транспорта аминогликозидов (гентамицин, амикацин) и фторхинолонов (ципрофлоксацин, офлоксацин), включенных в аллогенные эритроцитарные и лейкоцитарные носители, при необструктивном пиелонефрите с целью их селективного воздействия на орган и повышения эффективности, снижения системной токсичности и коррекции нарушенных иммунометаболических процессов.

Установлена высокая бактерицидная и протективная активность аминогликозидов и фторхинолонов, включенных в клеточные носители. Выявлено, что введение аминогликозидов или фторхинолонов, включенных в клеточные носители, по сравнению со свободными антибиотиками оказывало более существенный фармакологический эффект, что выражалось в более ранней нормализации клинических, лабораторных и гематологических показателей.

Установлено, что развитие необструктивного гематогенного пиелонефрита сопровождается резкими иммунометаболическими нарушениями - происходит дезинтеграция окислительно-восстановительных и энергетических процессов в эритроцитах, снижение функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, угнетение гуморальной и клеточной форм иммунного ответа, появление иммуносупрессирующей активности у легких эритроцитов.

Впервые установлена клеточная кооперация в реализации иммунометаболических нарушений при пиелонефрите, которая заключается в том, что при инфекционном поражении почек усиливается выделение в сосудистое русло окислительно-модифицированных фосфолипопротеинов, под влиянием которых тромбоциты индуцируют у легких эритроцитов способность вызывать выделение прилипающей при 4 - 10°С к стеклу фракции спленоцитов иммуносупрессирующих цитокинов, ММ 50-60 кДа (тромбоцитарно-эритроци-тарный механизм).

Показано, что при пиелонефрите изменяется активность метаболических маркеров клеток крови, участвующих в реализации иммунологических

функций. Тромбоциты приобретают способность снижать активность -АТФазы стромы эритроцитов и ингибировать антителозависимую клеточную цитотоксичность.

Введение свободных аминогликозидов или фторхинолонов усиливало иммунометаболические изменения, вызванные пиелонефритом. Дипиридамол, рибоксин, лизоцим и поливинилпирролидон снижали иммунометаболические нарушения при пиелонефрите и введении антибактериальных препаратов.

Впервые установлено, что введение клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) форм антибактериальных препаратов нормализовало окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, не вызывало процессов цитолиза и холестаза, в разной степени повышало функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. Введение клеточных форм аминогликозидов или фторхинолонов отменяло тромбоцито-эритроцитарный механизм иммуносупрессии: снижались иммуносупрессорный потенциал сыворотки крови, активность тромбоцитов, в крови появлялись тяжелые эритроциты, индуцирующие выделение прилипающими при 32-37°С и не прилипающими при 4-10°С клетками селезенки иммуностимулирующих цитокинов ММ <15 кДа. Иммуномодулирующее действие клеточных форм антибактериальных препаратов корригировало с показателями метаболической активности клеток крови. Впервые установлены способы усиления и пролонгации иммунометаболической активности клеточных носителей с антибактериальными препаратами.

Научная новизна подтверждена зарегистрированным открытием «Закономерность развития иммуносупрессии при нарушении энергетического гомеостаза организма человека и животных под действием тромбоцитов» (диплом № 397).

Практическая значимость

включенных в клеточные носители, позволяет предложить схему их однократного введения в дозе в 5 раз меньше, чем курсовое назначение. Установлена инверсия действия аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных в клеточные носители, на окислительно-восстановительные, энергетические процессы в клетках, процессы цитолиза и холестаза, неспецифическую резистентность организма и активность иммунной системы при экспериментальном пиелонефрите. Предложены методы повышения активности клеточных форм антибактериальных препаратов - обработка клеточных форм люоцлмом или поливинидпирролидоном, предварительное воздействие на носители ультрафиолетовыми лучами или магнитным полем.

Показана перспективность клинических испытаний эффективности клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) форм аминогликозидов или фторхинолонов при необструктивном пиелонефрите или других видах патологии, характеризующихся иммунометаболическими нарушениями, на фоне микробной компрометации организма.

Материалы диссертации внедрены в учебный процесс и научную работу ряда кафедр Курского государственного медицинского университета, Воронежской государственной медицинской академии, медицинских факультетов Белгородского и Орловского государственных университетов, ОАО «Фармстандарт-Лексредства».

Связь диссертационной работы с планом НИР

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР Курского государственного медицинского университета (номер государственной регистрации темы 01201056147).

Положения, выносимые на защиту

1. Лабораторная технология получения эритроцитарных и лейкоцитарных форм некоторых аминогликозидов и фторхинолонов для осуществления направленного транспорта лекарственных препаратов и оценка их эффективности в условиях экспериментального необструктивного пиелонефрита.

2. При экспериментальном необструктивном пиелонефрите наблюдается усиление процессов перекисного окисления липидов, снижение активности антиоксидантной защиты и энергетического потенциала эритроцитов, увеличение в крови количества иммуносупрессорных субстанций, угнетение функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, гуморальной и клеточной форм иммунного ответа. В развитии иммуносупрессии важную роль играют тромбоцито-эритроцитарные и эритроцито-лейкоцитарные взаимодействия.

3. Системное введение свободных аминогликозидов или фторхинолонов усиливает иммунометаболические нарушения при необструктивном пиелонефрите.

4. Дипиридамол, рибоксин, лизоцим и поливинилпирролидон снижают иммунометаболические нарушения при пиелонефрите и введении

антибактериальных препаратов.

5. Введение аминогликозидов или фторхинолонов, включенных в эритроцитарные носители, нормализует окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, состояние гепатоцитов, повышает функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа при необструктивном пиелонефрите.

6. Введение аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных на лейкоцитарных носителях без или в присутствии АТФ, нормализует окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, нормализует или стимулирует функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальный и клеточный иммунный ответ при необструктивном пиелонефрите.

7. Иммунометаболическую активность аминогликозидов или фторхинолонов, включенных в клеточные носители, в разной степени корригирует лизоцим, поливинилпирролидон, ультрафиолетовое облучение и магнитное поле.

Апробация работы

«Актуальные вопросы фармакологии», посвященной памяти профессора В.В. Пичугина (Курск, 2009), III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Рациональная фармакотерапия в урологни» (Москва, 2009), межкафедральной научно-практической конференции кафедр фармакологии, микробиологии, биологической химии, клинической фармакологии и фармакотерапии, клинической иммунологии и аллергологии, ЛОР-болезней, кожных и венерических болезней, урологии, патофизиологии, акушерства и гинекологии, спортивной медицины и реабилитации, инфекционных болезней, мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф, фармацевтической, токсикологической и аналитической химии, НИИ экологической медицины, хирургических болезней № 2 Курского государственного медицинского университета.

Публикации

Опубликовано 55 научных работ, в том числе 15 в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России, в двух монографиях и двух учебно-методических пособиях. Работы содержат полный объем информации, касающейся темы диссертации. Зарегистрировано открытие и получены 2 патента на изобретения.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 315 страницах машинописного текста, иллюстрирована 80 таблицами и 21 рисунком. Работа состоит из введения, обзора литературы (3 главы), описания материалов и методов исследования, изложения собственных результатов (14 глав), заключения, выводов, практических рекомендаций. Список использованных работ включает 444 источника, 310 - на русском, 134 - на иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объект исследования

Исследования проведены на крысах Вистар массой 180 - 200 г и мышах СВА массой 19-21 г. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 9 животных. В контрольные и опытные группы входили животные одного возраста. Разброс в группах по исходной массе не превышал ± 10%. Все исследования проводили в одно и то же время суток с 8.00 до 12.00 с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986).

Экспериментальные модели

1. Экспериментальный необструктивный гематогенный пиелонефрит воспроизводили путем внутрибрюшинного введения арахидоновой кислоты в дозе 2,5 мг/кг массы тела, ежедневно раз в сутки в течение 10 дней, на 10 сутки внутрибрюшинно вводили микробный агент Staphyloccocus aureus в количестве 1x10 микробных тел в 0,5 мл раствора (Есилевский Ю.М. и др., 1982) (первая модель).

2. Экспериментальный необструктивный гематогенный пиелонефрит воспроизводили путем перорального введения индометацина в течение 30 дней в дозе 2 мг/кг массы тела ежедневно, на 30 сутки внутрибрюшинно вводили микробный агент Staphylococcus aureus в количестве 1x108 микробных тел в 0,5 мл раствора (Есилевский Ю.М. и др., 1977) (вторая модель).

3. Токсическое поражение почек, осложненное инфицированием, моделировали путем однократного внутрижелудочного введения ртути дихлорида в дозе 2 мг/кг и внутрибрюшинной инъекции предварительно оттитрованных доз суточной агаровой культуры Staphylococcus aureus, содержащих 1 xlO8 микробных тел в 0,5 мл раствора (третья модель).

4. Модель генерализованной стафилококковой инфекции воспроизводили путем заражения животных суточной агаровой культурой Staphylococcus aureus, выделенной от больного с нагноением раны и приготовленной на 0,9% растворе натрия хлорида. Животных инфицировали предварительно оттитрованными дозами стафилококка, содержащими 1хЮ8 или 2*109 микробных тел (летальная доза) в объеме 0,5 или 0,2 мл. Наблюдение за инфицированными летальной дозой стафилококка мышами проводили в течение 10 дней с момента инфицирования. На протяжении этого периода определяли выживаемость мышей в процентах по отношению к контролю.

Выделение, фракционирование и обработка эритроцитов

Эритроциты выделяли двукратным настаиванием в 10 мл натрий-фосфатного буфера (рН = 7,4), содержащего 0,9% натрия хлорид и 3% декстран Т-500, и последующей очисткой с помощью HBS-целлюлозы в натрий-фосфатном буфере (Beutler В. et al., 1985). Эритроциты фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина (Кобозев Т.В. и др., 1978). Получали фракции легких эритроцитов (плотность ниже 1,097г/см3), промежуточные по плотности (1,091-1,105г/см3) и тяжелые эритроциты с плотностью, превышающей 1,117 г/см3. Полученные фракции тщательно отмывали от альбумина изотоническим раствором натрия хлорида. В части опытов эритроциты крыс обрабатывали сывороткой опытных аллогенных животных или препаратами. В качестве контроля использовали сыворотки здоровых животных. Обработку проводили способом, разработанным Л.Г. Прокопенко и Ю.О. Яхонтовым (Прокопенко Л.Г., Яхонтов Ю.О., 1976). Иммуномодулирующие свойства интакгных, обработанных сывороткой или препаратами эритроцитов и их фракций определяли путем двукратного (с интервалом 24 часа) внутрибрюшинного введения (1х108 клеток на 1 кг массы) интактным или опытным аллогенным реципиентам. Иммунизацию животных ЭБ проводили в последний день введения аллогенных эритроцитов.

Получение эрнтроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов

Для включения аминогликозидов или фторхинолонов в строму эритроцитов использовали метод гипоосмотического гемолиза, позволяющий ввести максимально возможное количество препаратов (Гениг Т.П. и др., 1988; Жумадилов Ж.Ш., Макаренкова Р.В., 1990). Для получения аллогенных эритроцитов использовали 3 мл крови. После оседания эритроцитов удаляли плазму вместе с лейкоцитарной пленкой. Эритроциты крыс, выделенные из 3 мл крови, дважды отмывали изотоническим раствором натрия хлорида путем центрифугирования при 500 g в течение 5 мин. при 4°С. К осадку эритроцитов добавляли семикратный объем охлажденной до 0°С воды очищенной и центрифугировали при 1500 g в течение 25 мин. К полученной строме приливали пятикратный объем аминогликозида или фторхинолона, растворенного в охлажденной до 5°С воде очищенной. Концентрация препарата в инкубационной среде соответствовала их разовым дозам в пересчете на крысу. Взвесь инкубировали в течение 20 мин. при 4°С, затем добавляли 1/10 объема 10% натрия хлорида для восстановления целостности стромы и инкубировали в течение 30 мин. при 37°С. После включения препаратов в стромальные сферы последние дважды отмывали изотоническим раствором натрия хлорида, затем осаждали при 1500g в течение 10 мин. (эритроцитарная форма). В части опытов ЭН обрабатывали лизоцимом (0,5 мг лизоцима в изотоническом растворе натрия хлорида) или инкубировали в поливинилпирролидоне. Время инкубации составляло 20 мин. при 37°С.

Для получения суспензии лейкоцитов гепаринизированную кровь (25 ЕД/мл крови) смешивали с 3% желатином (0,1 мг/мл) и выдерживали 15-20 мин. при 37°С. После оседания эритроцитов слой плазмы, обогащенный лейкоцитами, переносили в силиконизированные пробирки. Клетки осаждали центрифугированием в течение 10 мин. при 1500 g. Количество клеток подсчитывали под микроскопом в камере Горяева. Для включения антибиотиков или фторхинолонов в ЛН использовали методику C.B. Лохвицкого (1999). В соответствии с методикой лейкоциты после выделения инкубировали с аминогликозидами или фторхинолонами в разовой дозе в течение 20 мин. при комнатной температуре и периодическом встряхивании (лейкоцитарная форма). Для повышения связывания антибиотиков или фторхинолонов лейкоцитами в инкубационную среду добавляли 0,5 мл 1 % раствора А ТФ.

В отдельных экспериментах аллогенные лейкоциты и эритроциты предварительно помещали в кварцевые кюветы и облучали световыми волнами в УФ спектре (250 нм) в течение 20 мин. В качестве источника УФ излучения использовали кварцевую лампу НКН-11, которую помещали на одном горизонтальном уровне с кварцевой кюветой на расстоянии 20 см. Интенсивность воздействия УФ излучения на клеточные носители выражали в энергии излучения Q, которую определяли по формуле Q = E-Anp t, где Е -поверхностная плотность потока излучения для данного источника, Апр -площадь кюветы, открытая для облучения (мг), t - время облучения, с. Исходя

из расчетов интенсивность воздействия УФ лучей составляла: Q ~ 90Дж/мг (120Дж/с 0,00006 м2 ■ 1200 с) (Кухлинг X., 1982).

В части опытов эритроциты и лейкоциты предварительно подвергали действию постоянного магнитного поля напряженностью 500 эрстед в течение 20 мин. Постоянное магнитное поле создавали стационарным электромагнитом, питающимся от трансформатора с выпрямителем при силе тока 1,3 А и напряжении 15 В. Конструкции используемых установок обеспечивали равномерное воздействие физических факторов на весь объем клеток.

Для определения аминогликозидов в биоматериале была использована спектрофотометрическая методика (Кукурека A.B., 2000).

Для определения фторхинолоков была использована спектрофотометрическая методика (Карлов П.М., 2009).

Иммунометаболическую активность клеточных форм препаратов устанавливали при внутривенном однократном или двукратном, с интервалом 24 часа, введении (в количестве, содержащем разовую дозу препарата) интактным или опытным животным. В части опытов одновременно с последней инъекцией тестируемых объектов животных иммунизировали ЭБ. Контролем служили крысы, получавшие клеточные носители с физиологическим раствором, не содержащим препараты.1

Выделение тромбоцитов и определение их иммуносупрессирующей

активности

Плазму, дефицитную и обогащенную тромбоцитами, получали путем центрифугирования гепаринизированной крови (25 ЕД гепарина на 1 мл крови) в течение 5 мин. при 180 g. После расслоения крови на плазму, лейкоцитарный слой и эритроциты, отбирали первый слой и центрифугировали в течение 10 мин. при 600 g. Супернатант представлял собой плазму, обогащенную тромбоцитами (ПОТ). Для получения плазмы, дефицитной по тромбоцитам (ПДТ), последние осаждали центрифугированием ПОТ в течение 15 мин. в градиенте плотности человеческого альбумина при 1000 g (Коган А.Х. и др., 1992). После выделения ПДТ и тромбоцитов взвесь последних пропускали через колонку с сефарозой 2 В, получая концентрированную и очищенную взвесь тромбоцитов (Ермолаева Т.А. и др., 1991). Метаболическим маркером активности тромбоцитов служила концентрация в них МДА (Негреску Е.В. и др., 1992).

ПОТ и ПДТ использовали для обработки легких эритроцитов (1x107 клеток инкубировали в 1 мл плазмы в течение 1 часа при 37°С). Тромбоциты и легкие эритроциты инкубировали в плазме крови (1x10® тромбоцитов с 1х107 эритроцитов в 1 мл плазмы, 30 мин. при 37°С). Иммуномодулирующую активность инкубата определяли путем двукратного

'Примечание: определение содержания антибиотиков аминогликозидов и фторхинолонов в клеточных носителях и других биологических объектах проведено на кафедре фармацевтической, токсикологической и аналитической химии Курского государственного медицинского университета, за что мы выражаем сотрудникам данной кафедры глубокую признательность.

(с шестичасовым интервалом) внутривенного введения здоровым аллогенным реципиентам, которых иммунизировали ЭБ при последнем поступлении инкубата.

Выделение, фракционирование и изучение функциональной активности клеток селезенки и лимфоцитов периферической крови

Клетки селезенки фракционировали по их способности прилипать к стеклянной поверхности (Дерфлинг П., Вихнер 3., 1987). Прилипающие к стеклу клетки дополнительно фракционировали при температурном градиенте (Родионов C.B. и др., 1985). Определение количества клеток и их жизнеспособности проводили с помощью теста поглощения трипанового синего. Приготовленная таким образом суспензия клеток селезенки содержала 85-90% жизнеспособных клеток, что соответствует литературным данным.

Прилипающие и неприлипающие клетки селезенки культивировали в среде 199 (5х107 клеток на 3 мл среды), содержащей 5% телячьей эмбриональной сыворотки и антибиотики (пенициллин и стрептомицин), в течение 4 ч в ламинарном боксе при периодическом обновлении газовой среды 95% кислорода и 5% углекислого газа. По истечении срока инкубации клетки осаждали центрифугированием (15 мин. при 400 g) и готовили пул супернатантов прилипающих и не прилипающих к стеклу клеток селезенки, содержащих равные объемы супернатантов 5-6 животных. Пул жидкости диализовали 12-15 ч против 50-кратного объёма 0,05 M трис-НС1-буфера (рН 8,0), приготовленного на 0,15 M растворе натрия хлорида. После диализа надосадочную жидкость концентрировали полиэтиленгликолем (молекулярная масса 40 кД) и повторно диализовали против трис-HCl-буфера. Очищенную от низкомолекулярных веществ и сконцентрированную надосадочную жидкость освобождали от образовавшегося при концентрировании осадка центрифугированием (20 мин. при 800 g). Концентрацию белка в супернатантах определяли с использованием красителя Кумасси 0-250 по Бредфорду (Шишков С.С., 1989).

Иммуномодулирующую активность СПКС и СНКС оценивали путём однократного внутрибрюшинного введения интактным аллогенным реципиентам из расчета 1 мг/кг белка супернатанта одновременно с иммунизацией ЭБ.

Лимфоциты периферической крови выделяли по Федосеевой Т.В. и др. (1993) и определяли в них содержание ФДФ (Коровкин Б.Ф. и др., 1999). Клетки культивировали с аллогенными эритроцитами в соотношении 1:2 (5x107 лимфоцитов и 1х108 эритроцитов в 3 мл среды 199). Активность надосадочной жидкости определяли путем добавления ее к взвеси нейтрофилов (1x107 клеток на 100 мкг белка надосадочной жидкости) и последующего определения показателей ФМА нейтрофилов.

Использование фармакологических препаратов

Амикацин - раствор для инъекций, ампулы (500 мг - 2 мл), Болгария, Pharmachin Holding EAD Spharma; гентамицин - раствор для инъекций, ампулы

(80 мг - 2 мл), Индия, Agio Pharmaceuticals Ltd; дипиридамол 0,5% - раствор в ампулах по 2 мл (0,01 г), Венгрия, Gedeon Richter; доксорубицин - порошок для приготовления инъекционного раствора, флакон 10 мг, Индия, Dolphen Laboratories Ltd; лизоцим - флаконы с содержанием активного вещества 100 мг, Россия, ФАО «Ферейн»; офлоксацин (офло) - раствор для инфузий 0,2% (200 мг - 100 мл), флаконы, Индия, Unique Pharmmaceutical Laboratories; поливинилпирролидон - гемодез- Н (6% водно-солевой раствор низкомолекулярного поливинилпирролидона, ММ 8000±2000), Россия, Курская биофабрика; рибоксин (инозин) - 2% раствор в ампулах, Россия, ОАО "Дальхимфарм"; рифампицин (рифогол) - раствор для инъекций, ампулы (500 мг - 10 мл) - Югославия, JCN Galeneka; цефалексин - порошок для приготовления инъекционного раствора, флаконы 1 г, Словения, KRKA; ципрофлоксацин 1% раствор в ампулах по 10 мл или раствор для инъекций 0,2% (200 мг - 100 мл), флаконы, Индия, Wockhardt Ltd.

Способ введения препарата (внутримышечно или внутривенно) соответствовал рекомендациям, приведенным в пособии по фармакотерапии М.Д. Машковского «Лекарственные средства» и аннотациях к использованию препаратов. Используемые дозы препаратов соответствовали рекомендованным терапевтическим дозам, пересчитанным с учетом соотношения поверхности тела биологического объекта и его массы по общепринятой формуле межвидового переноса доз с применением коэффициента пересчета в зависимости от массы тела. При выборе разовых доз также учитывались экспериментальные данные, приведенные в литературе о влиянии препаратов на состояние мембран клеток, в первую очередь эритроцитов.

Определение показателей, характеризующих иммунометаболическое состояние экспериментальных животных

Иммунологическую реактивность животных оценивали по количеству АОК в селезенке (Мальберг К., Зигль Э., 1987) и выраженности ГЗТ по РМЛ и РКЛ (Федосеева В.Н. и др., 1993). ФМА нейтрофилов оценивали по фагоцитарной и кислородзависимой активностям, ФАН оценивали по определению ФИ и ФЧ (Медведев А.Н., Чаленко В.В., 1991). Кислородзависимую активность нейтрофилов определяли по НСТ-сп. НСТ-инд. (Щербаков В.И., 1989). Энергообеспечение эритроцитов определяли по содержанию в них АТФ и БФГ (Виноградова И.Л. и др., 1980). Антиоксидантный статус эритроцитов характеризовали по активности СОД, ГР (Макаренко Е.В., 1988). ПОЛ определяли по содержанию ДК и МДА (Стальная И.Д., Гаришвшш Т.Г., 1977; Стальная И.Д., 1977), АГП (Бенисевич В.И., Идельсон И.А., 1973). Определяли метаболические маркеры клеток крови: активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов (Никанкина Л.В. и др., 2001), содержание ФДФ в лимфоцитах (Коровкин Б.Ф. и др., 1999), активность Mg+2~ АТФазы в эритроцитах (Рыжкова Г.Ф., Вишняков С.И., 2005), содержание МДА в тромбоцитах (Негреску Е.В., 1992). Метаболическое состояние гепатоцитов оценивали по активности АЛТ, ACT, 1ЦФ и содержанию ОБ (Меньшиков В.В., 1987). Оценивали иммуномодулирующие соединения крови

по содержанию ЛНП (Меньшиков В.В., 1987), ААП и АМГ (Рудаков C.B., Кубышкин A.B., 1995), ГАГ (Мурашев Б.Ф. и др., 1986). АЗКЦ лейкоцитов оценивали по величине индекса цитотоксичности (Зимин Ю.И., Ляхов В.Ф., 1985). О состоянии выделительной функции почек судили по концентрации мочевины и креатинина в крови (Меньшиков В.В., 1987). Активность ферментов в почках оценивали по методики Меньшикова В.В. (1987).

Статистическая обработка полученных результатов

Статистическую обработку результатов исследования проводили путем вычисления средних арифметических изучаемых показателей (М) и их стандартных ошибок (m). Существенность различий средних величин оценивали по критериям Стьюдента и Вилкоксона-Манна-Уитни (Гублер Е.В., Генкин A.A., 1973; Гублер Е.В., 1978; Лакин Г.Ф., 1980).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Получение эритроцитарных и лейкоцитарных форм аминогликозндов

и фторхинолонов для их направленного транспорта в организм

Одним из направлений, сформировавшимся в результате исследования возможности транспортировки лекарственных средств к очагу повреждения, является разработка методов, основанных на использовании клеточных носителей, полученных из форменных элементов крови. Такими клетками являются аутологичные или донорские эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.

Для получения эритроцитарной формы аминогликозндов и фторхинолонов использовали методику Генинга Т.П. и др. (1998). Для отработки лабораторной технологии получения эритроцитарных форм антибактериальных препаратов изучены особенности включения гентамнцина, амикацина, ципрофлоксацина и офлоксацина в ЭН здоровых животных и животных с пиелонефритом. С этой целью ЭН здоровых крыс и крыс с пиелонефритом инкубировали с растворами гентамицина, амикацина и фторхинолонов в различных концентрациях в течение 10, 30 и 60 мин. при 4°С. Инкубацию начинали проводить с меньшей концентрацией, а затем концентрацию препаратов в инкубационной жидкости увеличивали в 2 раза. Устойчивость ЭН на десорбцию и выделение препаратов из ЭН определяли путем двукратного предварительного отмывания и инкубации их в аутологичной плазме при 37°С в течение 30 мин.

Было установлено, что в ЭН здоровых доноров включается гентамицина 22,4% и 20,2% амикацина, а в ЭН крыс с пиелонефритом 20,1% и 18,2% соответственно для гентамицина и амикацина. Определено, что в ЭН здоровых крыс включается 17,9% ципрофлоксацина и 16,4% офлоксацина, а в ЭН животных с пиелонефритом, соответственно, 14,5% и 12,3%.

Доказано, что аминогликозиды и фторхинолоны в большей степени включаются в ЭН здоровых доноров. Полученные результаты свидетельствовали о более высоком включении аминогликозидов в ЭН животных с пиелонефритом в сравнении с фторхинолонами. Мы не обнаружили выраженной зависимости степени включения антибиотиков и

фторхинолонов в ЭН от длительности инкубации (рекомендуемое время 30 мин). Повышение концентрации препаратов в 2 раза привело к увеличению их содержания в ЭН как здоровых крыс, так и животных с пиелонефритом в пределах 1,3-1,5 раза.

Изучение стабильности ЭН к возможной десорбции и выделению антибиотиков или фторхинолонов в плазму крови показало достаточную их устойчивость, что позволяет использовать ЭН для направленного транспорта аминогликозидов и фторхинолонов в органы и, в частности, почки.

При направленном транспорте лекарственных средств в организм обсуждаются возможности использования различных векторов, одним из которых является применение лейкоцитов.

С этой целью выделенные из крови лейкоциты инкубировали с растворами препаратов в различных концентрациях в течение 10, 20 и 60 мин. при комнатной температуре (20°С). Затем концентрацию препаратов увеличивали в 2 раза. Установлено, что с ЛН здоровых крыс связывается, соответственно 18,3%, 19,1%, 12,6% и 13,4% от используемого количества, гентамицина, амикацина, ципрофлоксацина и офлоксацина. Отмечена более высокая иммобилизация препаратов на ЛН здоровых животных. Установлено, что введение АТФ в инкубационную среду повышает связывание аминогликозидов и фторхинолонов с ЛН как здоровых крыс, так и крыс с пиелонефритом на 30-50%. Мы установили, что при 20 мин. инкубации в присутствии АТФ количественное содержание препаратов в ЛН здоровых крыс и крыс с пиелонефритом было максимально.

Увеличение концентрации препаратов в 2 раза привело к увеличению их содержания в ЛН в 2,2 - 2,8 раза. Изучение процессов десорбции аминогликозидов и фторхинолонов из ЛН в плазму крови показало их достаточную устойчивость и тем самым подтвердило возможность использования лейкоцитов для направленного транспорта антибактериальных препаратов.

Использование различных технологий введения лекарственных средств изменяет их фармакокинетику. При введении свободных антибиотиков отмечена их высокая пиковая концентрация в крови через один час, а через три часа концентрация антибиотика резко снижалась.

При введении гентамицина и офлоксацина, включенных в ЭН и ЛН, в крови через один час концентрация антибиотиков была незначительна. Концентрация препаратов в почечной ткани при введении их в ЭН была выше в 1,4 для гентамицина и в 1,5 раза для офлоксацина, а введенных в ЛН была, соответственно, в 1,7 для гентамицина и 1,9 раза для офлоксацина выше, чем при введении свободных препаратов. Содержание препаратов в почечной ткани оставалось высоким в течение 24 ч (время наблюдения) и снижалось постепенно.

Важным условием применения клеточных форм антибактериальных препаратов являются их стабильность, сроки и условия хранения. Пригодность свободных ЭН и ЛН определяли по способности включать антибактериальные препараты, а ЭН и ЛН с включенными антибиотиками - по способности

сохранять терапевтическую концентрацию лекарственных средств. В результате было установлено, что свободные ЭН и ЛН сохраняют способность включать антибактериальные препараты в течение 10 дней в условиях хранения при 5°С, а клеточные носители с включенными препаратами хранятся не более двух-трех суток.

Одним из определяющих значений при использовании клеточных форм антибактериальных препаратов является сохранение их антимикробной активности. Установлено, что бактерицидная активность сыворотки животных, в которой инкубировали клеточные носители с включенными гентамицином, амикацином, офлоксацином, была высокой и составляла, соответственно, 89%, 94% и 97% по сравнению с бактерицидной активностью сыворотки животных, в которой инкубировали свободные антибиотики или фторхинолоны.

Проведенные исследования показали, что животные, инфицированные летальной дозой стафилококка, не получавшие или получавшие клеточные носители, не содержавшие антибиотиков, погибали в течение 10 суток и средняя продолжительность жизни равнялась 3,2 - 3,3 суток. В то же время введение клеточных носителей с включенными аминогликозидами или фторхинолонами обеспечивало выживаемость от 60 до 65% инфицированных животных, что свидетельствует об их достаточно высокой протективной активности.

Экспериментальное моделирование необструктивного гематогенного пиелонефрита. Оценка эффективности свободных и клеточных форм аминогликозидов и фторхинолонов при пиелонефрите

Для подтверждения развития необструктивного пиелонефрита проведены определения изменений клинических, лабораторных и гематологических показателей, морфологических нарушений в почках.

Введение арахидоновой кислоты, индометацина или ртути дихлорида совместно с микробным агентом вызывало развитие необструктивного гематогенного пиелонефрита, подтверждавшееся клиническими показателями: гипертермия, снижение веса на 12-14%, нарушение выделительной функции почек. Анализ выделительной функции почек показал появление лейкоцитов и белка в моче и резкое повышение в крови уровня мочевины в 1,75-2,2 раза и креатинина в 1,8-3,2 раза.

Установлены изменения лейкоцитарной формулы: увеличение количества лейкоцитов на 30-35%, уменьшение количества лимфоцитов на 20-24% и повышение количества нейтрофилов крови на 21-23%. В почках отмечены снижение активности СДГ, ГДГ, ЩФ в 1,9-2,3 раза на фоне высокой активности ЛДГ и морфологические изменения (очаговые скопления лейкоцитов в виде микроабсцессов).

При необструктивном пиелонефрите отмечались сладжирование и агрегация эритроцитов и тромбоцитов. Известно, что основной причиной агрегации эритроцитов является снижение их электрокинетического потенциала. Установлено, что введение животным арахидоновой кислоты, индометацина или ртути дихлорида совместно с микробным агентом

приводило к снижению дзета-потенциала эритроцитов: у здоровых животных он равнялся 17,8±1,5 мВ, у крыс с экспериментальным необструктивным пиелонефритом 11,2±1,1 мВ, 11,8±1,3 мВ и 10,4±1,1 мВ соответственно. Полученные результаты свидетельствовали о развитии инфекционного воспалительного процесса в почках, весьма близкого к естественной картине необструктивного пиелонефрита.

Для сравнительной оценки эффективности свободных и клеточных форм аминогликозидов и фторхинолонов при экспериментальном пиелонефрите (вторая модель) использовали рекомендованные в клинике способы введения, разовые дозы препаратов, пересчитанные по общепринятой методике на крысу. При этом температуру тела определяли один раз в сутки в одно и то же время (9-10 ч) до ее полной нормализации и последующие два дня, выделительную функцию почек и массу тела определяли на 4-й и последующие дни. Лабораторные показатели и морфологические изменения определяли во всех группах на 5-е и 10-е сутки после развития пиелонефрита.

Установлено, что пятикратное введение животным с пиелонефритом гентамицина в дозе 2 мг/кг, амикацина в дозе 12 мг/кг, ципрофлоксацина и офлоксацина в дозах 3 мг/кг нормализовало температуру тела на 10-12-е сутки, выделительную функцию почек на 12-14-е сутки, при этом вес животных достоверно не изменялся. На 10-е сутки в крови количество лейкоцитов было повышено на 10-12%, количество лимфоцитов снижено на 8-9%, количество нейтрофилов не изменялось, уменьшался, но не нормализовался дисбаланс активности ферментов в почках, снижались количество и выраженность очагов скопления лейкоцитов.

В отличие от этого однократное введение крысам с пиелонефритом эритроцитарных или лейкоцитарных форм антибактериатьных препаратов в разовых дозах нормализовало температуру тела на 7-8-е или 5-6-е сутки, выделительную функцию почек - на 8-9-е или 5-6-е сутки соответственно, вес животных увеличивался незначительно, на 10-е сутки отмечена полная нормализация количества лейкоцитов, лимфоцитов, нейтрофилов в крови, активности ферментов в почках, отсутствие очагов скопления лейкоцитов в почках.

Иммуиометаболическне нарушения и взаимодействие клеток и молекулярных структур в их развитии при пиелонефрите

Однотипность полученных изменений при различных моделях пиелонефрита позволила в дальнейшем проводить исследования на одной модели: введение индометацина и микробного агента (вторая модель). Определены показатели ПОЛ (МДА и АГП) и активность антиокислительных ферментов СОД и ГР в эритроцитах при необструктивном пиелонефрите. Полученные данные убедительно показали, что уровень МДА и АГП был повышен, а активность СОД и ГР снижена. Установлено, что в эритроцитах крыс с пиелонефритом концентрация макроэргических соединений БФГ и АТФ была достоверно ниже, чем в контроле. Оценка иммуносупрессорного потенциала крови при пиелонефрите показала увеличение концентрации ЛНП,

ГАГ, ААП и АМГ.

Установлено, что у животных с необструктивным пиелонефритом снижаются поглотительная способность и окислительный резерв нейтрофилов крови, ГИО и ГЗТ (табл. 1).

Постоянной составной частью микроокружения иммуноцитов в крови являются эритроциты и тромбоциты, которые активно участвуют в реализации биохимических и иммунологических процессов в организме как в норме, так и при патологиях.

Таблица 1

Изменение ФМА нейтрофилов крови у животных с пиелонефритом (М±т)

Условия опыта ФЧ ФИ НСТ-сп. НСТ-инд.

1. Контроль (здоровые крысы) 1,7±0,2 44,4±4,8 11,7±1,2 33,4±3,3

2. Крысы с пиелонефритом 1,1±0,2*' 35,4± 3,2*' 8,9±0,9*' 24,5±1,5*'

Примечание: * и цифра рядом в этой и последующих таблицах и рисунках указывают на достоверность различий между группами (р$0,05).

Изучена иммуномодулирующая активность эритроцитов крыс с пиелонефритом. Полученные результаты убедительно показали, что введение их интактным животным вызывало угнетение ФМА нейтрофилов, ГИО, ГЗТ. Эритроциты, циркулирующие в сосудистом русле, представляют собой гетерогенную популяцию клеток, отличающихся по возрасту и соответственно этому по плотности и функциональной активности. Аллогенный перенос фракций эритроцитов животных с пиелонефритом показал, что выраженной иммуносупрессирующей активностью обладает легкая фракция эритроцитов, остальные фракции были иммунологически неактивны (табл. 2).

Таблица 2

Иммуномодулирующая активность эритроцитов и их фракции крыс с ____пиелонефритом (М±т) ____

Условия опыта ФАН ОРН АОК РМЛ

1. Контроль 65,2±6,7 16,2±1,6 26,4±2,8 4,9±0,5

2. Введение эритроцитов крыс с пиелонефритом 51,3±4,9*' 12,4±1,2*' 21,4±2,4*' 3,8±0,3*'

3. Введение легких эритроцитов крыс с пиелонефритом 42,3±3,9"''2 9,4±0,8'1,2 17,5±1,6*'-2 3,1±0,3"1,2

4. Введение промежуточных по плотности эритроцитов крыс с пиелонефритом 64,1±5,9 15,9±1,8 27,8±2,1 5,1±0,5

5. Введение тяжелых эритроцитов крыс с пиелонефритом 66,4±6,9 17,1±1,8 27,3±2,9 4,8±0,6

Примечание: фракции эритроцитов здоровых крыс были иммунологически интактиы.

Супрессирующий эффект эритроцитов животных с пиелонефритом, по-видимому, обусловлен связыванием с их мембраной сывороточных факторов, а также способностью индуцировать выделение спленоцитами иммуносупрессирующих цитокинов.

Аллогенный перенос фракций супернатанта спленоцитов крыс, получавших инъекции эритроцитов животных с пиелонефритом, показал, что иммуносупрессирующей и прооксидантной активностью обладала фракция II (50 - 60 кДа) клеток, прилипающих к стеклу при 4 - 10°С. Фракция III клеток (менее 15 кДа), прилипающих к стеклу при 32 - 37°С, проявляла нерезко выраженную иммуностимулирующую активность (табл. 3).

Таблица 3

Влияние фракций супернатаитов клеток селезенки крыс, получавших инъекции эритроцитов крыс с пиелонефритом, на развитие иммунного _ответа и окислительные процессы у интактных крыс (М±т)_

Условия опыта АОК РМЛ сод МДА

1. Контроль 29,4 ±3,0 4,8 ± 0,5 56,6 ±5,1 36,7 ±3,2

Введение )ракций супернатанта клеток, прилипающих к стеклу при 4- 10°С

2. Фракция I 28,6 ± 3,2 4,6 ± 0,4 57,9 ±6,1 37,9 ± 3,7

3. Фракция II 20,4 ±2,2*' 3,9 ±0,3*' 42,8 ±4,1*' 46,1 ±4,2*'

4. Фракция III 30,2 ±3,1 5,1 ±0,5 54,9 ± 5,2 34,9 ±3,4

Введение фракций супернатанта клеток, не прилипающих к стеклу при 4 -10°С

5. Фракция I 28,2 ± 2,9 5,0 ± 0,4 55,6 ±5,5 35,2 ±3,5

6. Фракция II 29,1 ±3,0 4,7 ± 0,5 57,1 ±6,3 38,1 ±4,1

7. Фракция III 27,9 ± 2,8 4,9 ± 0,5 58,1 ±6,0 36,9 ±4,0

Введение с »ракций супернатанта клеток, прилипающих к стеклу при 32 - 37°С

8. Фракция I 28,5 ± 2,7 4,6 ± 0,5 54,8 ± 0,5 34,8 ± 0,4

9. Фракция II 30,6 ±3,1 4,9 ± 0,6 57,6 ± 0,6 38,0 ±0,5

10. Фракция III 36,3 ±3,2*' 5,6 ±0,5*' 60,3 ± 5,9 37,4 ±3,1

Введение фракций супернатанта клеток, не прилипающих к стеклу при 32 - 37°С

11. Фракция I 30,3 ± 3,1 4,7 ± 0,5 58,4 ±0,6 36,1 ±0,4

12. Фракция II 29,9 ±3,0 4,5 ± 0,4 59,1 ±0,6 38,2 ±0,5

13. Фракция III 28,7 ±3,4 4,9 ± 0,6 56,2 ± 0,5 35,9 ± 0,4

Обработка интактных эритроцитов и их фракций сывороткой животных с пиелонефритом вызывала появление иммуносупрессирующей активности у легких эритроцитов.

Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют об участии тромбоцитов в реализации взаимосвязи между гемостазом, неспецифической

резистентностью и иммунологической реактивностью организма.

Приведенные сведения об увеличении содержания в крови животных с пиелонефритом иммуносупрессирующих субстанций свидетельствуют в пользу того, что иммуносупрессирующие свойства эритроциты приобретают, по-видимому, в результате связывания на их мембране ЛНП и тромбоцитов. Подтверждением этого является обнаруженный факт, что сыворотка крови крыс с пиелонефритом теряет способность индуцировать иммуносупрессирую-щую активность у эритроцитов после осаждения ЛНП или тромбоцитов.

Изучена иммуномодулирующая активность тромбоцитов и их инкубатов с эритроцитами и сывороткой, полученными от интактных животных и крыс с пиелонефритом. Установлено, что инъекции тромбоцитов, выделенных из крови крыс с пиелонефритом, а также инъекции легкой фракции эритроцитов, инкубированной в плазме крыс, обогащенной тромбоцитами крыс с пиелонефритом, инкубата эритроцитов интактных крыс с тромбоцитами крыс с пиелонефритом, супрессировали развитие неспецифической резистентности и обеих форм иммунного ответа, что является доказательством повышения их активности (рис. 1).

4 3 2 -11 • -

тГ

1 £ 3

Рис. 1. Иммуномодулирующая активность тромбоцитов животных с пиелонефритом.

Примечания: по оси ординат: А - ФАН, Б - ОРН, В - АОК, Г - РМЛ;

по оси абсцисс: 1 - контроль, 2 — введение тромбоцитов здоровых крыс,

3 - введение тромбоцитов крыс с пиелонефритом.

Сопоставление их иммуносупрессирующей активности показало, что она выше при введении инкубата эритроцитов интактных крыс и тромбоцитов крыс с пиелонефритом. Выраженность этой активации в значительной степени определяется уровнем содержания в крови продуктов ПОЛ, в первую очередь ЛНП. Обращает на себя внимание тот факт, что окислительно-модифицированные ЛНП в определенной степени определяют как появление иммуносупрессирующих свойств у легких эритроцитов, так и повышение

функциональной активности тромбоцитов. В связи с этим обоснованным является предположение о взаимосвязи между этими феноменами при пиелонефрите и о важной роли ЛНП и, возможно, других продуктов окисления липидов в реализации этой взаимосвязи.

Для выяснения этого вопроса поставлено два варианта экспериментов. В первом - эритроциты интактных крыс обрабатывали ФЛП животных с пиелонефритом, а затем инкубировали с тромбоцитами интактных крыс, во втором - эритроциты интактных крыс инкубировали с тромбоцитами интактных животных, предварительно обработанных ФЛП сыворотки крыс с пиелонефритом. В.первом варианте экспериментов эритроциты не приобретали иммуносупрессирующей активности, во втором - они становились способными вызывать при аллогенном переносе супрессирующий эффект.

Результаты этих наблюдений позволяют считать, что феномен тромбоцито-эритроцитарной иммуносупрессии возникает вследствие появления у тромбоцитов под влиянием ФЛП свойства индуцировать появление иммуносупрессирующей активности у эритроцитов.

Иммуиорегулирующая функция лимфоцитов крови и сё коррекция при ппслопефрите

Установлено, что введение лимфоцитов, интракорпорально активированных эритроцитами крыс с пиелонефритом, супрессировало развитие ГИО и ГЗТ у интактных крыс. Аналогичный эффект вызывал сунернатант прилипающих к стеклу спленоцитов крыс реципиентов лимфоцитов, активированных эритроцитами крыс с пиелонефритом. Лимфоциты крыс, получавших неактивированные эритроциты, такого эффекта не вызывали.

Большой интерес представляет вопрос о возможности предотвращения угнетающего влияния эритроцитов крыс с пиелонефритом на выделение лимфоцитами цитокииов, подавляющих ФМА нейтрофилов крови интактных крыс, путем экстракорпорального воздействия на эритроциты крыс с пиелонефритом лизоцима и рибоксина. Перспективность изучения эффективности действия такой фармакологической композиции обусловлена особенностями влияния препаратов на структуру и метаболизм эритроцитов. Лизоцим модифицирует конформацию гликопептидов цитоплазматической мембраны эритроцитов, а рибоксин регулирует энергетический обмен этих клеток, существенно изменяющийся при пиелонефрите. Установлено, что рибоксин ослаблял способность эритроцитов крыс с пиелонефритом индуцировать выделение лимфоцитами интактных крыс цитокинов, угнетающих ФМА нейтрофилов крови интактных крыс. Лизоцим не оказывал влияния на свойства эритроцитов крыс с пиелонефритом, но усиливал эффект, вызываемый рибоксином. Принципиально важно было изучить влияние препаратов на чувствительность лимфоцитов к супрессирующим сигналам, индуцируемым активированными эритроцитами. Оказалось, что обработка лимфоцитов интактных крыс лизоцимом или рибоксином снижала чувствительность, но не обеспечивала полной резистентности этих клеток к

эритроцитам крыс с пиелонефритом. В отличие от этого совместное действие лизоцима и рибоксина на лимфоциты приводило к полной анергии этих клеток в отношении эритроцитов крыс с пиелонефритом.

Иммунометаболические нарушения, вызываемые некоторыми антибиотиками и фторхинолонами при инфицировании и пиелонефрите

Применение антибиотиков нередко сопровождается осложнениями, связанными с подавлением иммунитета. Учитывая изложенное, были изучены иммунометаболические нарушения у здоровых и инфицированных животных при введении антибиотиков различных групп: цефалоспорины - цефалексин (30; 60 мг/кг); аминогликозиды - гентамицин (2; 4 мг/кг), амикацин (12; 24 мг/кг); рифампицин (10; 20 мг/кг); антрациклины - доксорубицин (1,5; 3,0 мг/кг) и фторхинолонов - ципрофлоксацин (3; 6 мг/кг), офлоксацин (3; 6 мг/кг). Для получения объективных результатов исследованы две дозы препаратов с постановкой необходимых контрольных опытов. Установлено, что введение цефалексина, аминогликозидов, рифампицина, фторхинолонов в максимальных дозах здоровым животным оказывало незначительное, но достоверное супрессорное влияние на выраженность ГИО и ГЗТ, индуцируемых ЭБ. У инфицированных животных при введении указанных препаратов отмечено значительное дозозависимое угнетение ГИО и ГЗТ. Введение доксорубицина вызывало резкое подавление обеих форм иммунного ответа как у здоровых крыс, так и у инфицированных животных.

Введение эритроцитов инфицированных крыс, получавших антибиотики или фторхинолоны, интактным животным вызывало выраженный иммуносупрессорный эффект. Наиболее выраженное иммуносупрессорное действие проявляли эритроциты инфицированных животных, получавших инъекции доксорубицина и аминогликозидов. Фракционирование эритроцитов инфицированных крыс, получавших антибактериальные препараты, показало, что значительной иммуносупрессирующей активностью обладают легкие эритроциты.

Установлено, что эритроциты здоровых животных после инкубации с антибиотиками или фторхинолонами проявляют иммуностимулирующую активность, а эритроциты инфицированных крыс после обработки изучаемыми препаратами - слабо выраженную иммуностимулирующую активность. Наиболее выраженные иммуностимулирующие свойства проявляют эритроциты как здоровых животных, так и инфицированных крыс, инкубированных с фторхинолонами. Фракционирование эритроцитов показало, что стимулирующую активность проявляют тяжелые эритроциты (рис. 2).

Иммуностимулирующее действие эритроцитов, обработанных антибиотиками или фторхинолонами, по-видимому, можно объяснить взаимодействием активных функциональных групп препаратов с рецепторами, ферментами и другими функционально-активными белками мембран, приводящим к инверсии их влияния на иммунологическую реактивность организма.

45 -40 -35 -30 -25 -20 -15 -10 ■ 5 -0 J

т*1

тк

Шг

7 6 5 4

34— 2 1 О

ft-rff

Рис. 2. Влияние фракций эритроцитов здоровых крыс, инкубированных с офлоксацином, на ГИО и ГЗТ интактных животных.

Примечания: по оси ординат: А - АОК, Б - РМЛ; по оси абсцисс: 1 - контроль, 2 — введение эритроцитов здоровых крыс, 3, 4, 5 — введение, соответственно, легких, промежуточных по плотности и тяжелых фракций эритроцитов.

Целью следующих исследований было установить, влияют ли in vivo антибиотики непосредственно на мембраны клеток или их действие в целом или в определенной степени опосредовано сывороточными субстанциями. Полученные результаты свидетельствуют о выраженной иммуносупрессирую-щей активности легких эритроцитов и слабовыраженной иммуностимулирующей активности тяжелых эритроцитов как здоровых, так и инфицированных животных, инкубированных в сыворотке крыс, получавших антибиотики или фторхинолоны.

Накопление в сосудистом русле инфицированных животных, получавших антибиотики, субстанций, вызывающих появление иммуносупрессирующей активности у эритроцитов, может быть следствием усиления свободно-радикальных процессов или нарушения состояния гепатоцитов, играющих важную роль в патогенезе инфекционных заболеваний. Установлено, что введение антибиотиков или фторхинолонов вызывает усиление ПОЛ и снижение АОС, повышение уровня АЛТ, ACT, ЩФ, ОБ. Особенно выраженный дисбаланс этих процессов вызывают аминогликозиды и доксорубицин.

Одно из ведущих мест инфекционных патологий занимает необструктивный пиелонефрит. Наиболее часто из химиотерапевтических средств для лечения необструктивного пиелонефрита используют аминогликозиды и фторхинолоны. Интересно было выяснить, как изменятся нарушенные иммунометаболические процессы при пиелонефрите и введении антибактериальных препаратов. Установлено, что в эритроцитах крыс с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, концентрация

АТФ, активность антиокислительных ферментов (СОД и ГР) были ниже, а содержание продуктов ПОЛ (АГП и МДА) выше, чем у животных с пиелонефритом (рис. 3).

МДА

АГП

АТФ

-в— 2

ГР

сод

Рис. 3. Влияние аминогликозидов на энергетические и окислительные процессы эритроцитов крыс с экспериментальным пиелонефритом. Обозначения: 1 - контроль, 2 - пиелонефрит, 3 - пиелонефрит + гентамицин.

Введение свободных аминогликозидов (гентамицин, амикацин) или фторхинолонов (ципрофлоксацин, офлоксацин) опытным крысам с пиелонефритом снижало ФМА нейтрофилов и подавляло ГИО и ГЗТ.

Аллогенный перенос фракций эритроцитов животных с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, показал, что выраженной иммуносупрессирующей активностью обладает легкая фракция эритроцитов. Введение крысам с пиелонефритом свободных аминогликозидов в отличие от фторхинолонов вызвало появление иммуносупрессирующей активности у промежуточной по плотности фракции эритроцитов (табл. 4).

Обработка фракций эритроцитов интактных крыс сывороткой животных с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, вызывала появление иммуносупрессирующей активности как у лёгких, так и у промежуточных по плотности эритроцитов. Инъекции эритроцитов крыс с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, усиливали выделение иммуносупрессирующих цитокинов ММ 50 - 60 кДа спленоцитами, прилипающими к стеклу-при 4 - 10сС.

Ранее проведенные исследования доказали, что у животных с пиелонефритом иммуносупрессирующие свойства эритроциты приобретают в результате взаимодействия с ЛНП и тромбоцитами.

Введение здоровым крысам тромбоцитов животных с пиелонефритом, получавших аминогликозиды (гентамицин, амикацин) или фторхинолоны (ципрофлоксацин и офлоксацин), усиливало иммуносупрессию, которая была наиболее выражена при введении тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин. Эти данные свидетельствуют о том, что введение аминогликозидов или фторхинолонов крысам с пиелонефритом повышает

Таблица 4

Иммуномодулируюшая активность фракций эритроцитов крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин (М±т)

Условия опыта ФАН ОРН АОК РМЛ

1. Эритроциты интактных крыс 65,2±6ji 16,2±1,6 26,4±2,8 4,9±0,5

2. Легкие эритроциты крыс с пиелонефритом 49,4±4,1*' 11,241,3*' 20,1±2,1*' 3,4±0,3*!

3. Промежуточные по плотности эритроциты крыс с пиелонефритом 64,1 ±5,9 15,9±1,8 27,8±2,1 5,1±0,5

4. Тяжелые эритроциты крыс с пиелонефритом 66,4±6,9 17,1±1,8 27,3±2,9 4,8±0,6

5. Легкие эритроциты крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин 37,9±3,3*2 8,9±1,1*2 16,4±2,0*2 2,2±0,2*3

6. Промежуточные по плотности эритроциты крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин 51,3±4,9*' 12,3^,2*' 21,4±2,2*' 3,6±0,4*'

7. Тяжелые эритроциты крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин 63,9±7,1 17,6±1,7 28,9±2,5 4,7±0,4

функциональную активность тромбоцитов, одним из проявлений которой является появление у них иммуносупрессирующих свойств. Приведенные выше результаты показывают, что введение аминогликозидов или фторхинолонов животным с пиелонефритом приводит к усилению иммуносупрессирующей активности легких эритроцитов. Естественно возник вопрос о взаимодействии тромбоцитов и эритроцитов в реализации иммуносупрессорного эффекта аминогликозидов или фторхинолонов при пиелонефрите. Анализ выраженности иммуносупрессорной активности тромбоцитов крыс с пиелонефритом, легкой фракции Эритроцитов, инкубированных в плазме крыс, обогащенной тромбоцитами, инкубата эритроцитов интактных крыс и тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших аминогликозиды или фторхинолоны, показал, что введение инкубата эритроцитов здоровых крыс с тромбоцитами крыс с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, наиболее выражено супрессировало ГИО и ГЗТ. Неясным оставался вопрос о последовательности влияния сывороточных соединений на отдельные клеточные элементы инкубата.

^ Принимая во внимание изложенное, из крови крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин, выделяли ЛНП и тромбоциты. Эритроциты интактных крыс инкубировали с этими компонентами плазмы, а затем определяли их иммуномодулирующие свойства. Установлено, что после инкубации с ЛНП интактных и опытных крыс, а также с тромбоцитами

интактных крыс, эритроциты интактных животных не приобретали иммуносу-прессиирующих свойств. В отличие от этого эритроциты интактных крыс, инкубированные с тромбоцитами животных с пиелонефритом, получавших гентамицин, обладали иммуносупрессирующей активностью. Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что тромбоциты участвуют в развитии иммуносупрессии как при пиелонефрите, так и у животных с пиелонефритом, получавших антибактериальные препараты, а также, что это действие усиливается эритроцитами и ЛНП, накапливающимися в сосудистом русле животных с пиелонефритом.

Обобщение приведенных данных позволяет прийти к заключению, что ФЛП играют роль ключевого звена в развитии тромбоцито-эритроцитарного механизма иммуносупрессии при пиелонефрите и введении химиотерапевтических препаратов.

Иммуномстаболические эффекты дипиридамола, рибоксина, поливинилпирролндона и лизоцима при пиелонефрите и введении аминоглнкозидов или фгорхинолонов

Установлено, что введение дипиридамола (3 мг/кг) или рибоксина (2 мг/кг) животным с пиелонефритом и получавшим антибактериальные препараты снижает выраженность иммунометаболических нарушений. Совместное введение дипиридамола и рибоксина крысам с пиелонефритом, получавшим антибиотик л или фторхинолоны, было значительно эффективнее, чем их раздельное введение.

Инъекции дипиридамола крысам с пиелонефритом уменьшали выраженность снижения активности СОД и ГР, снижали содержание АГП и МДА, но не влияли на содержание БФГ и АТФ в эритроцитах. Инъекции рибоксина повышали уровень БФГ и АТФ, но не изменяли активность СОД и продуктов ПОЛ в эритроцитах. Совместное введение препаратов нормализовало энергетический и антиоксидантный потенциал эритроцитов. Дипиридамол или рибоксин, введенные животным с пиелонефритом, получавшим гентамицин, снижали иммуносупрессорную активность легких эритроцитов. Совместное введение дипиридамола и рибоксина отменяло иммуносупрессорную активность легких эритроцитов и вызывало появление иммуностимулирующих свойств у тяжелых эритроцитов.

Сыворотка крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин и дипиридамол при экстракорпоральной обработке эритроцитов, снижала иммуносупрессирующую активность легких эритроцитов и индуцировала появление иммуностимулирующих свойств у тяжелой фракции эритроцитов интактных крыс. Сыворотка крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин и рибоксин, не вызывала появление иммуносупрессирующей активности при обработке легких эритроцитов интактных животных. Обработка эритроцитов интактных крыс сывороткой крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин, дипиридамол и рибоксин, не вызывала появления иммуносупрессирующих свойств у легких эритроцитов и индуцировала появление иммуностимулирующей активности у тяжелых эритроцитов. Введение дипиридамола и рибоксина

раздельно не индуцировало появление иммуномодулирующих свойств у тромбоцитов здоровых крыс и снижало, но не отменяло полностью иммуносупрессирующую активность тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших инъекции химиопрепаратов. Совместное введение препаратов нормализовало иммуномодулирующую активность тромбоцитов. Обнаруженная активность дипиридамола и рибоксина, по-видимому, обусловлена их влиянием на различные звенья иммуносупрессорного механизма, зависимого от тромбоцитов, эритроцитов и сывороточных факторов. Для подтверждения данного предположения изучали влияние дипиридамола и рибоксина на иммуносупрессорную активность инкубатов тромбоцитов и эритроцитов интактных крыс в сыворотке крыс с пиелонефритом или в сыворотке крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин. Установлено, что введение дипиридамола отменяло появление иммуносупрессирующих свойств как у легких эритроцитов, так и у тромбоцитов. Инъекции рибоксина не влияли на тромбоциты, но отменяли способность легких эритроцитов интактных крыс приобретать иммуносупрес-сирующие свойства после инкубации с тромбоцитами интактных крыс и сывороткой крови крыс с пиелонефритом, получавших гентамицин.

Введение крысам с пиелонефритом аминогликозидов с поливинилпирролидоном (0,5 мг/кг) вызывало нормализацию показателей ПОЛ и АОС. Введение фторхинолонов с поливинилпирролидоном снижало интенсивность ПОЛ, повышало активность ферментов АОС, однако полной нормализации не происходило. Совместное введение лизоцима (1 мг/кг) как с фторхинолонами, так и с аминогликозидами нормализовало показатели ПОЛ, АОС у крыс с пиелонефритом.

Введение поливинилпирролидона крысам с пиелонефритом, получавшим антибактериальные препараты, усиливало ГИО и ГЗТ. Наиболее эффективным при пиелонефрите было совместное введение поливинилпирролидона и аминогликозидов. Лизоцим нормализовал иммунологическую реактивность при совместном введении как с фторхинолонами, так и с аминогликозидами. Введение животным с пиелонефритом аминогликозидов или фторхинолонов с поливинилпирролидоном вызывало более эффективное снижение показателей цитолиза и холестаза, чем при введении их с лизоцимом.

Иммунометаболические изменения при направленном транспорте антибиотиков и фторхинолонов, включенных в эритроиитарные носители, у животных с пиелонефритом

Выявленные иммунометаболические нарушения при пиелонефрите позволили нам определить направление и выделить наиболее информативные показатели для изучения иммунометаболической активности клеточных форм антибактериальных препаратов.

Установлено, что введение ЭН здоровых доноров с включенными препаратами (гентамицин, амикацин, ципрофлоксацин, офлоксацин) значительно уменьшало интенсивность ПОЛ, повышало энергетический и антиоксидантный потенциал эритроцитов крыс с пиелонефритом снижало

концентрацию иммуносупрессорных субстанций. У животных этой группы повышались, но не нормализовались ФАН и ОРН. Введение антибиотиков или фторхинолонов, включенных в ЭН здоровых доноров, значительно снижало иммунодефицит у животных с экспериментальным пиелонефритом (табл. 5). При этом не обнаружено достоверной разницы между показателями групп животных, получавших аминогликозиды и фторхинолоны, включенные в ЭН.

Таблица 5

Изменение ФМА нейтрофилов, ГИО, ГЗТ животных с пиелонефритом, получавших ЭН здоровых животных с включенными

Группа ФАН ОРН АОК РМЛ

1. Контроль (здоровые крысы) 64,3±6,2 17,8±1,5 29,1±2,8 5,4±0,4

2. Крысы с пиелонефритом 42,2±4,Г' 9,2±1,2*' 18,1±1,9*' 3,6±0,3'!

3. Введение ЭН с гентамицином 63,2±5,5 17,Ш,7 28,4±2,6 5,1±0,5

4. Введение ЭН с амикацином 65,1±6,0 16,9±1,6 29,6±3,1 5,8±0,6

5. Введение ЭН с офлоксацином 64,8±5,8 18,3±1,8 27,2±2,7 5,7±0,5

6. Крысы с пиелонефритом + ЭН с гентамицином 54,б±3,3*1,2 13,1±1,2*''2 24,4±2,Г''2 4,6±0,4*1,2

7. Крысы с пиелонефритом + ЭН с амикацином 55,2±3,5'1Д 13,8±1,Г1,2 23,9±1,9*''2 4,4±0,3*1,2

8. Крысы с пиелонефритом + ЭН с офлоксацином 53,8±3,1*1-2 12,9±1,3*''2 24,2±2,Г1,2 4,5±0,4*1,2

Изучено влияние ЭН здоровых доноров с включенными препаратами на выделение иммуномодулирующих цитокинов клетками селезенки крыс с пиелонефритом. Оказалось, что при введении ЭН с включенными антибиотиками или фторхинолонами, прилипающие при 32-37°С и не прилипающие при 4-10°С к стеклу, клетки селезенки выделяют иммуностимулирующий фактор. Можно предположить, что часть ЭН, возможно, старых эритроцитов, после включения антибиотиков или фторхинолонов претерпевает достаточно серьезные структурные изменения мембраны. Такие ЭН поступают в основном в печень, усиливают выделение гепатоцитами протеаз, активирующих продукцию цитокинов различными популяциями спленоцитов.

Нами установлено, что в отличие от эритроцитов крыс с пиелонефритом, получавших свободные аминогликозиды или фторхинолоны, эритроциты, выделенные из крови животных с пиелонефритом, получавших клеточные (эритроцитарные) формы аминогликозидов или фторхинолонов, обладали иммуностимулирующей активностью.

Изучение иммуиомодулирующей активности отдельных фракций эритроцитов крыс, получавших включенные в ЭН антибиотики или обработанных сывороткой этих животных, показало, что фракция легких эритроцитов проявляла иммуносупрессирующую активность, а фракция тяжелых эритроцитов - высокую иммуностимулирующую способность.

Ранее установлена значительная роль тромбоцитов в развитии иммуносупрессии при пиелонефрите. Введение же здоровым животным тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших эритроцитарные формы антибактериальных препаратов, не вызывало выраженных иммунометаболичес-ких нарушений.

Инкубация эритроцитов здоровых крыс с плазмой крыс с пиелонефритом, получавших эритроцитарные формы амииогликозидов или фторхинолонов, обогащенной тромбоцитами, не вызывала появления у них иммуносупрессирующей активности (рис. 4).

Рис. 4. Иммуномодулируюшая активность тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших ЭН с включенными антибактериальными препаратами, и эритроцитов инкубированных в плазме крови этих животных, обогащенной тромбоцитами.

Примечание: по оси ординат: А - ФАН, Б - ОРН, В - АОК, Г - РМЛ; по оси абсцисс: 1 - контроль, 2 - введение тромбоцитов здоровых крыс, 3 - введение тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших ЭН с антибактериальными препаратами, 4 - введение эритроцитов, инкубированных в плазме этих животных, обогащенной тромбоцитами.

Установленный факт свидетельствовал о снижении функциональной активности тромбоцитов у животных с пиелонефритом, получавших инъекции эритроцитарных форм антибактериальных препаратов.

Практический интерес представляет вопрос о возможности использования для включения аминогликозидов или фторхинолонов ЭН крыс с пиелонефритом, что позволило бы исключить или сократить использование донорской крови. Не установлено существенной разницы в иммунометаболической активности ЭН здоровых доноров и ЭН животных с пиелонефритом с включенными антибиотиками или фторхинолонами.

Исследования показали, что клеточные эритроцитарные формы аминогликозидов или фторхинолонов не оказывали влияния на метаболические показатели гепатоцитов у здоровых животных и нормализовали их у крыс с пиелонефритом. Большое значение представляет выяснение вопроса, как долго сохраняются выявленные позитивные сдвиги при введении эритроцитарных форм аминогликозидов или фторхинолонов. Для ответа на этот вопрос определяли изучаемые показатели спустя 10 суток. Определение показателей ГИО, ГЗТ, ФАН, ОРН, а также ПОЛ, АОС через 10 суток показало их дестабилизацию при применении ЭН животных с пиелонефритом с включенными препаратами.

Иммунометаболнческне изменения при направленном транспорте в организм аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных на лейкоцитарных носителях, у животных с пиелонефритом

У животных с пиелонефритом установлена дезинтеграция биохимических процессов в клетках, выражающаяся в нарушениях энергетического и антиоксидантного потенциала эритроцитов. Введение ЛН с аминогликозидами или фторхинолонами значительно уменьшало, а введение ЛН с иммобилизованными в присутствии АТФ препаратами нормализовало антиоксидантный и энергетический потенциал эритроцитов.

Установлено, что введение крысам с пиелонефритом ЛН здоровых животных с аминогликозидами или фторхинолонами нормализовало ФАН, ОРН, ГИО и ГЗТ. ЛН с иммобилизованными в присутствии АТФ аминогликозидами или фторхинолонами стимулировали ФАН, ОРН, ГИО и ГЗТ у животных с пиелонефритом (табл. 6).

Введение аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных на ЛН в присутствии или без АТФ, нормализовало концентрацию в крови имму-носупрессорных субстанций. Установлено, что введение эритроцитов или их фракций крыс, получавших лейкоцитарные формы химиопрепаратов, не вызывало иммуносупрессирующий эффект. Обработка интактных эритроцитов и их фракций сывороткой животных с пиелонефритом, получавших инъекции лейкоцитарной формы аминогликозидов или фторхинолонов, также не приводила к появлению иммуносупрессорной активности у легких эритроцитов и индуцировала появление иммуностимулирующей активности у тяжелых эритроцитов.

Таблица б

Изменение ФМА нейтрофилов, ГИО и ГЭТ животных с пиелонефритом,

получавших ЛН здоровых животных с иммобилизованными _аминогликозидами и фторхинолонами (М±т) _

Условия опыта ФАН ОРН АОК РМЛ

1. Контроль (здоровые крысы) 65,8±6,1 18,4±1,6 28,4±2,7 5,3±0,5

2. Крысы с пиелонефритом 39,6±3,4"' 9,8±0,9М 1б,8±1,8*' 3,9±0,4*'

3. Введение ЛН с гентамицином 63,9±5,9 17,1±1,8 2б,9±2,9 4,9±0,5

4. Введение ЛН с амикацином 61,4±6,8 16,9±1,6 25,9±3,1 5,1±0,6

5. Введение ЛН с ципрофлоксацином 66,2±7,1 19,2±2,1 30,2±3,4 5,5±0,6

6. Введение ЛН с офлоксацином 67,1±7,8 19,4±2,4 29,8±2,9 5,4±0,5

7. Введение ЛН с гентамицином и АТФ 79,8±7,1*1 39,4±3,4*' 6,8±0,6*'

8. Введение ЛН с амикацином и АТФ 80,1±8,0*' 27,5±2,4М 40,1±4,1*' 6,9±0,б*'

9. Введение ЛН с ципрофлоксацином и АТФ 76,4±7,2*' 28,1±2,5'' 42,4±3,9*' 7,2±0,7*'

10. Введение ЛН с офлоксацином и АТФ 75,4±7,Г' 29,4±2,9*' 43,1±4,5*' 6,9±0,8М

Установлено, что супернатант прилипающих при 32-37°С клеток крыс с пиелонефритом, получавших ЛН с антибиотиками или фторхинолонами, проявлял иммуностимулирующую активность, аналогичной, но менее интенсивной активностью обладал супернатант не прилипающих при 4 - 10°С к стеклу спленоцитов крыс с пиелонефритом, получавших ЛН с аминогликозидами или фторхинолонами. Нами установлено, что введение тромбоцитов крыс с пиелонефритом, получавших инъекции ЛН с антибактериальными препаратами или эритроцитов, инкубированных в плазме этих животных, обогащенной тромбоцитами, не вызывало угнетение ФМА нейтрофилов, ГИО и ГЗТ. Однотипные результаты наблюдались при использовании ЛН крыс с пиелонефритом с иммобилизованными химиопрепаратами. При этом не установлено достоверной разницы между группами животных, получавших аминогликозиды или фторхинолоны, иммобилизованные на ЛН.

Для ответа на вопрос о стабильности наблюдаемых сдвигов нами были определены показатели иммунологической реактивности, ФАН и ОРН спустя 10 суток после введения ЛН с гентамицином или офлоксацином. Как видно из полученных результатов, показатели были стабильны в группах животных, получавших инъекции ЛН с иммобилизованными в присутствии АТФ препаратами.

Коррекция иммунометаболическон активности аминогликозидов

нлн фторхннолонов, иммобилизованных в клеточные носители лизоцимом, поливннилпирролидоном, ультрафиолетовыми лучами и магнитным полем

Введение ЭН здоровых доноров, дополнительно обработанных лизоцимом или ЭН крыс с пиелонефритом, обработанных поливннилпирролидоном, животным с пиелонефритом, нормализовало окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах.

Введение животным с пиелонефритом ЭН здоровых доноров с включенными аминогликозидами или фторхинолонами, дополнительно обработанных лизоцимом, нормализовало ФМА нейтрофилов, ГИО и ГЗТ.

Обработка лизоцимом ЭН крыс с пиелонефритом с включенными химиопрепаратами существенно не изменяла их иммунометаболической активности при введении крысам с пиелонефритом.

Дополнительная обработка поливинилпирролидоном ЭН крыс с пиелонефритом, в отличие от ЭН здоровых доноров, существенно повышала их иммунометаболическую активность. Введение ЭН крыс с пиелонефритом с включенными аминогликозидами или фторхинолонами, обработанных поливинилпирролидоном, нормализовало ФАН, ОРН, ГИО и ГЗТ.

Введение антибиотиков, включенных в ЭН, полученных из эритроцитов, экспонированных в ультрафиолетовых лучах или магнитном поле, значительно усиливало их влияние на выраженность иммунного ответа на ЭБ, нормализовало показатели, характеризующие состояние гепатоцитов, интенсивность ПОЛ, повышало антиоксидантный потенциал эритроцитов у животных с пиелонефритом. Выраженность иммуномодулирующего действия была выше у ЭН с включенными антибиотиками или фторхинолонами, полученными из эритроцитов, подвергнутых действию магнитного поля.

В отличие от ЭН предварительное экспонирование лейкоцитов в магнитном поле не вызывало повышения активности полученных из них ЛН с антибиотиками или фторхинолонами, а воздействие ультрафиолетового облучения значительно усиливало их влияние на выраженность изучаемых процессов у крыс с пиелонефритом.

Исследования показали, что иммуностимулирующая, гепатопротекторная и антиоксидантная активность ЭН и ЛН с антимикробными препаратами здоровых животных была сопоставима с аналогичными носителями животных с пиелонефритом, подвергнутых действию ультрафиолетовых лучей и магнитного поля, что позволяет исключить или свести к минимуму использование донорских клеток для получения носителей.

Оценка эффективности влияния эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов на функциональную активность клеток крови при пиелонефрите

У животных с пиелонефритом установлено значительное подавление активности НАДФН-оксидазы нейтрофилов, 1^2+-АТФазы эритроцитов, снижение концентрации ФДФ в лимфоцитах и повышение содержания МДА в

тромбоцитах. Системное введение аминогликозидов и фторхинолонов животным с пиелонефритом достоверно снижало активность метаболических маркёров нейтрофилов, лимфоцитов, эритроцитов и повышало уровень МДА в тромбоцитах.

Введение эритроцитарных форм антибактериальных препаратов повышало активность НАДФН-оксидазы нейтрофилов, 1\^2+-АТФазы эритроцитов, концентрацию ФДФ в лимфоцитах и снижало содержание МДА в тромбоцитах. Введение лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов оказывало аналогичный эффект, за исключением активности Mg2+-ATФaзы эритроцитов, активность которой повышалась незначительно (табл. 7). Оказалось, что активность -АТФазы повышается только в случае введения ЛН с иммобилизованными в • присутствии АТФ аминогликозидами или фторхинолонами.

Таблица 7

Влияние эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов на показатели функциональной активности клеток крови

при пиелонефрите (М±т)

Условия опыта НАДФН-оксидаза ФДФ ме2+ АТФаза МДА

1. Здоровые животные 1,34±0,23 1,1±0,21 0,76±0,06 0,68±0,05

2. Животные с пиелонефритом 0,61±0,07*' 0,71±0,06*' 0,42±0,04*' 0,92 ±0,07*'

3. Животные с пиелонефритом +ЭН с гентамицином 0,82±0,06*2 0,85±0,072 0,84±0,05*2 0,76±0,06*2

4. Животные с пиелонефритом +ЭН с офлоксацином 0,81±0,07*2 0,84±0,06*2 0,65±0,06*2 0,77±0,06*2

5. Животные с пиелонефритом +ЛН с гентамицином 0,82±0,06*2 0,83±0,06*2 0,53±0,05*3 0,78 0,06*2

6. Животные с пиелонефритом +ЛН с офлоксацином 0,86±0,07*2 0,82±0,07*2 0,51±0,05*4 0,79±0,07*2

Важное значение для понимания механизмов иммунологических взаимодействий в целостном организме имеет АЗКЦ. Изучение выраженности феномена АЗКЦ при пиелонефрите показало существенное снижение её показателей с 12,3 ± 1,2% (в контроле) до 4,4 ± 0,5% у крыс с пиелонефритом. Системное введение антибактериальных препаратов приводило к ее дальнейшему снижению с 4,4±0,5% до 3,2±0,3% при введении гентамицина и до 3,4±0,3% при введении офлоксацина. Ведение эритроцитарных форм антибактериальных препаратов повышало, а лейкоцитарных форм нормализовало индекс АЗКЦ у животных с пиелонефритом.

Принимая во внимание полученные данные о тромбоцито-эритроцитарном механизме иммуносупрессии при пиелонефрите, можно было ожидать, что тромбоциты крыс с пиелонефритом оказывают влияние на активность белков и в первую очередь ферментов, интегрированных в мембрану эритроцита. Установлено, что инкубация тромбоцитов крыс с пиелонефритом, не получавших и получавших свободные антибиотики (гентамицин) с цельными эритроцитами интактных животных или с их стромой (соотношение тромбоцитов и эритроцитов или стромальных частиц 10:1), существенно снижает активность ¡^2+-АТФазы в стромальных частицах (активность Мц2+-АТФазы в строме равнялась 0,63 ±0,08, активность фермента после инкубации стромы с тромбоцитами 0,42 ±0,06 или 0,34±0,03 мкмоль фосфата на 1г белка в час). В связи с изложенным возник вопрос о возможном влиянии тромбоцитов на функциональную активность лейкоцитов периферической крови. Оказалось, что тромбоциты снижали выраженность феномена АЗКЦ (до инкубации - 11,6±1,3, после инкубации - 7,2±0,85 или 6,2±0,61).

Введение эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов снижало способность тромбоцитов крыс с пиелонефритом угнетать активность 1\/^2+-АТФазы стромы эритроцитов интактных животных и феномена АЗКЦ. Введение ЛН с иммобилизованными в присутствии АТФ антибактериальными препаратами отменяло свойство тромбоцитов снижать активность К^2+-АТФазы эритроцитов и ингибировать АЗКЦ. Выполненные эксперименты свидетельствуют о сложном механизме влияния тромбоцитов на иммунометаболические процессы при необструктивном пиелонефрите.

Результаты проведенных исследований могли бы лежать в основе разработки нового направления химиотерапии при различных инфекционных заболеваниях, а именно технологии направленного транспорта в организм, основанной на создании и использовании клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) форм антимикробных средств, стандартизованных по количеству действующего препарата. Клеточные формы антимикробных препаратов (аминогликозиды или фторхинолоны) сохраняют спектр бактерицидной активности, нормализируют нарушенные

иммунометаболические процессы и не вызывают системное токсическое действие на организм.

ВЫВОДЫ

1. Технология использования клеточных носителей для направленного транспорта антибиотиков и фторхинолонов включает методики получения клеточных форм препаратов, стандартизации их по количеству действующего вещества, установления условий и сроков хранения. Направленный транспорт антибактериальных препаратов подтверждается кинетикой их распределения с максимальной концентрацией в почках через 1 час после введения и ее сохранения в почках в течение 24 часов. Применение аминогликозидов (гентамицина, амикацина) и фторхинолонов (ципрофлоксацина, офлоксацина), включенных в клеточные носители, позволяет предложить схему однократного

их введения в дозе в 5 раз меньшей, чем курсовое назначение препаратов,

2. Экспериментальное моделирование необструктивного гематогенного пиелонефрита вызывало развитие клинических, лабораторных, гематологических признаков воспалительного процесса в почках, снижение в почках активности СДГ, ГДГ, ЩФ в 1,9-2,3 раза на фоне высокой активности ЛДГ, что подтверждалось характерной морфологической картиной почек.

3. Системное введение гентамицина 2 мг/кг, амикацина 12 мг/кг, ципрофлоксацина 3 мг/кг и офлоксацина 3 мг/кг 1 раз в сутки курсом 5 дней после моделирования пиелонефрита нормализовало температуру тела, выделительную функцию, гематологические показатели, активность ферментов и морфологическую картину в почках к 10-12 суткам наблюдения.

Использование эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов в соответствующих их системному введению дозах оказывало более существенный фармакологический эффект по сравнению с традиционным способом, что выражалось в более ранней нормализации (на 5-7 сутки) клинических, лабораторных, гематологических и морфологических показателей.

4. Развитие экспериментального пиелонефрита сопровождалось резкими иммунометаболическими нарушениями: усилением процессов ПОЛ, снижением активности антиокислительных ферментов, концентрации макроэргических соединений и снижением дзета-потенциала эритроцитов, а также функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, гуморальной и клеточной форм иммунного ответа. Усиливалось выделение в сосудистое русло окислительно-модифицированных фосфолипопротеинов, под влиянием которых тромбоциты индуцировали у легких эритроцитов способность вызывать выделение спленоцитами иммуносупрессирующих цитокинов (тромбоцитарно-эритроцитарный механизм иммуносупрессии).

5. Анализ путей развития иммуносупрессии при экспериментальном пиелонефрите показал, что лимфоциты периферической крови выполняли роль связующего звена между эритроцитами и клетками макрофагального ряда. Обработка эритроцитов крыс с пиелонефритом рибоксином и лизоцимом снижала или полностью предотвращала их способность индуцировать выделение лимфоцитами интактных крыс цитокинов, угнетающих функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови здоровых животных. Обработка лимфоцитов интактных крыс лизоцимом и рибоксином снижала или приводила к полной их анергии в отношении эритроцитов крыс с пиелонефритом.

6. Системное введение инфицированным животным антибиотиков различных групп в широком диапазоне доз: цефалексин (30; 60 мг/кг); гентамицин (2; 4 мг/кг); амикацин (12; 24 мг/кг); рифампицин (10; 20 мг/кг); доксорубицин (1,5; 3,0 мг/кг); ципрофлоксации (3; 6 мг/кг); офлоксацин (3; 6 мг/кг) дозозависимо усиливало свободнорадикальные процессы в эритроцитах, выраженность цитолиза и холестаза, существенно угнетало гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. Иммуносупрессорная активность реализовалась гуморальными факторами сыворотки крови

посредством эритроцитов,

7. Системное введение животным с пиелонефритом антибактериальных препаратов усиливало процессы ПОЛ, цитолиза и холестаза, снижало активность антиокислительных ферментов, накопление макроэргических соединений в эритроцитах, функционально-метаболическую активность нейтрофнлов, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. При этом отмечалось усиление тромбоцитарно-эритроцитарного механизма иммуносупрессии. При обработке эритроцитов антибиотиками и фторхинолонами наблюдалась инверсия их иммуномодулирующей активности.

8. Введение животным с пиелонефритом, получавшим антибактериальные препараты, дипиридамола (3 мг/кг), рибоксина (2мг/кг), лизоцима (1 мг/кг) и поливинилпирролидона (0,5 мг/кг) снижало выраженность иммунометаболических нарушений. При этом в сочетании с аминогликозидами наиболее эффективным оказался поливинилпирролидон, а лизоцим был эффективным как с аминогликозидами, так и с фторхинолонами.

9. Введение крысам с пиелонефритом аминогликозидов или фторхинолонов, включенных в эритроцитарные носители здоровых доноров и крыс с пиелонефритом, нормализовало энергетические и антиокислительные процессы в эритроцитах, показатели цитолиза и холестаза. Эритроцитарные формы антибактериальных препаратов повышали функционально-метаболическую активность нейтрофилов, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа, индуцировали появление иммуностимулирующей активности у тяжелых эритроцитов, усиливали выделение не прилипающими при 4-10°С и прилипающими при 32-37°С к стеклу клетками селезенки иммуностимулирующих цитокинов, отменяли иммуносупрессорную активность у тромбоцитов. Определение показателей через 10 суток показало их дестабилизацию при использовании эритроцитарных носителей животных с пиелонефритом.

10. Введение животным с пиелонефритом лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов нормализовало антиоксидантный и энергетический потенциал эритроцитов, стимулировало функционально-метаболическую активность нейтрофилов, отменяло тромбоцито-эритроцитарный механизм иммуносупрессии.

11. Обработка эритроцитарных носителей с включенными аминогликозидами или фторхинолонами лизоцимом или поливинилпирролидоном усиливала и пролонгировала их иммунометаболическую активность. При использовании эритроцитарных носителей здоровых крыс наиболее эффективным был лизоцим, а для эритроцитарных носителей животных с пиелонефритом -поливинилпирролидон. Предварительное экспонирование клеток в ультрафиолетовых лучах или ■ магнитном поле повышало иммунометаболическую активность эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов. Отмечено, что наиболее эффективными были эритроцитарные формы аминогликозидов и фторхинолонов, полученные из эритроцитов, экспонируемых в магнитном поле, и лейкоцитарные формы

антибактериальных препаратов, предварительно подвергнутые действию ультрафиолетовых лучей.

12. Введение клеточных форм антибактериальных препаратов изменяло нарушенную при пиелонефрите активность метаболических маркеров: повышалась активность М§2+-АТФазы эритроцитов, НАДФН-оксидазы лейкоцитов, ФДФ в лимфоцитах и снижался уровень МДА в тромбоцитах. Введение лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов, полученных в присутствии АТФ, отменяло свойство тромбоцитов снижать активность Mg2+ -АТФазы эритроцитов и ингибировать антителозависимую клеточную цитотоксичность.

Практические рекомендации

Для подготовки клинических испытаний нового подхода введения антимикробных препаратов отработать методику получения стандартизованных клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) лекарственных форм химиотерапевтических средств в условиях клинической лаборатории. Получить экстемпоральные лекарственные клеточные формы химиотерапевтических препаратов и изучить возможности их стабилизации и пролонгации во времени хранения. Изучить эффективность совместного использования фармацевтических препаратов и физических факторов для коррекции имуннометаболической активности свободных и иммобилизованных в клеточные носители химиотерапевтических препаратов в клинической урологической практике.

При проведении дальнейших научных исследований в области изучения направленного транспорта лекарственных препаратов выяснить значение определения активности Mg+2-AT®a3bi эритроцитов, НАДФН-оксидазы нейтрофилов и содержания ФДФ в лимфоцитах в качестве критериев для прогнозирования иммуномодулирующей эффективности эритроцитарных и лейкоцитарных форм химиопрепаратов в условиях гематогенного необструктивного пиелонефрита. Изучить механизм взаимодействия тромбоцитов, эритроцитов и лейкоцитов и выяснить роль этого взаимодействия при необструктивном пиелонефрите и введении клеточных форм антибиотиков и фторхинолонов.

При преподавании вопросов фармакологического лечения заболеваний рекомендовать обращать внимание на перспективный путь введения препаратов на основе использования технологии их направленного транспорта в органы и ткани.

Список опубликованных работ

1. Острый пиелонефрит гестационного периода. Анализ патологии и результатов лечения / С.Д. Долженков, О.В. Катунина, Г.В. Сипливый и др. // Экстренная специализированная медицинская помощь: сб. -Курск, 1999. - С. 295-297.

2. Прокопенко, Л.Г. Иммуномодулирующее, антиоксидантное и гепатопро-текторное действие некоторых антибиотиков, инкапсулированных в

эритроцигарные носители / Л.Г. Прокопенко, Г.В. Сипливый // Метаболическая иммуномодуляция: монография / Под ред. Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля. - Курск, 2000. - С. 212-219.

3. Сипливый, Г.В. Протективная и антиоксидантная активность иммобили-зированной формы аминогликозидных антибиотиков / Г.В. Сипливый, Л.Е. Сипливая, A.B. Кукурека // Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики: материалы науч. - практ. конф., по-свящ. 35-летию фармац. ф-та. - Курск, 2001. - С. 267-268.

4. Сипливый, Г.В. Сравнительная оценка иммуномодулирующей активности некоторых антибиотиков при различных технологиях введения / Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека, E.H. Карпенко // Материалы 67-й межвуз. науч. конф. студентов и молодых ученых. В 2 ч. - Ч. II. - Курск, 2002. -С. 142.

5. Разработка и исследование иммуномодулирующей активности пленок с доксорубицином / Л.Е. Сипливая, Л.Н. Ерофеева, Г.В. Сипливый и др. // Тез. докл. IX Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (апрель 2002 г., г. Москва. - М., 2002. - С.67.

6. Разработка спектрофотометрического определения доксорубицина в субстанции и лекарственных форма / Л.Е. Сипливая, Л.Н. Ерофеева, Г.В. Сипливый и др. // Тез. докл. IX Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство» (апрель 2002 г., г. Москва). - М., 2002. - С. 68.

7. Сипливый, Г.В. Иммуномодулирующая антиоксидантная активность антибиотиков, иммобилизованных в пленки / Г.В. Сипливый // Тр. 67-й науч. сессии КГМУ и отд-ния мед.-биолог, наук Центр.-Чернозем, науч. центра РАМН. В 2 ч. - Ч. 1. - Курск: Изд-во КГМУ, 2002. - С. 38-39.

8. Спектрофотометрическое определение эритромицина / A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый и др. // Фармация. - 2003. - №4. - С. 7-9.

9. Пленки с рифампицином для лечения ЛОР-заболеваний / Л.Н. Ерофеева, Н.Д. Афонина, Г.В. Сипливый и др. // Фармация. - 2003. - №4. - С. 23-25.

10. Сипливый, Г.В. Длительность и объемы стационарного обследования больных гиперплазией простаты пожилого и старческого возраста / Г.В. Сипливый, Е.А. Шумакова, О.И. Братчиков // Рос. науч.-прак. конф. «Реабилитация в геронтологии, гериатрии». - Курск, 2003. - С. 135-137.

11. Сипливый, Г.В. Особенности стационарного обследования больных гиперплазией простаты пожилого и старческого возраста / Г.В. Сипливый О.И. Братчиков, Е.А. Шумакова // Материалы XI Междунар. науч.-практ. конф. - Харьков, 2003. - С. 332-334.

12. Сипливый, Г.В. Экспериментальное обоснование использования новых лекарственных форм доксорубицина для коррекции его гепатотоксиче-ского, прооксидантного и иммуносупрессорного действия / Г.В. Сипливый // Антибиотики и химиотерапия. - 2004. - № 4. - С. 16-20.

13. Иммуномодулирующее, антиоксидантное и гепатопротекторное действие иммобилизованных форм рифампицина и цефалексина / Л.Г. Прокопенко, А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый и др. // Антибиотики и химиотерапия. -2004.-Т. 49, №8-9.-С. 21-24.

14. Сипливый, Г.В. Изучение иммуномодулирующего, антиоксидантного и гепатопротекторного действия иммобилизированных форм рифампицина и цефалексина / Г.В. Сипливый, JI.E. Сипливая, A.B. Кукурека // Сб. работ 69-й итог. науч. сессии КГМУ и отд-иия мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск: Изд-во КГМУ, 2004. - Т. 1. -С. 113-114.

15. Сипливый, Г.В. Экспериментальное обоснование использования иммоби-лизированной формы доксорубицина для коррекции его гепатотоксиче-ского, прооксидантного и иммуносупрессорного действия / Г.В. Сипливый, J1.E. Сипливая, A.B. Кукурека // Сб. работ 69-й итог. науч. сессии КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН.-Курск: Изд-во КГМУ, 2004.-Т. 1.-С. 114-115.

16. Изучение цитотоксического действия доксорубицина, иммобилизиро-ванного в пленках / В.Т. Дудка, E.H. Карпенко, Г.В. Сипливый, Т.И. Ананьева // Сб. работ 69-й итог. науч. сес. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск: КГМУ, 2004.-Т. 2.-С. 260-261.

17. Изучение устойчивости эритроцитарных носителей с доксорубицином / И.Н. Карпенко, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый, Л.Н. Ерофеева // Сб. работ 69-й итог. науч. сессии КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск: КГМУ, 2004. - Т. 2. - С. 271-272.

18. Разработка технологии иммобилизации рифампицина и цефалексина / Л.Г. Прокопенко, А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый и др. // Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы Всерос. науч. конф. с между-нар. участием (Белгород, 11-14 окт. 2004 г.). - Белгород: Изд-во БелГУ, 2004.-С. 156-158.

19. Разработка иммобилизированных лекарственных форм доксорубицина с целью коррекции его гепатотоксического, прооксидантного и иммуносу-пресорного действия / Л.Г. Прокопенко. А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый и др. //Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья: материалы Всерос. науч. конф. с междунар. участием (Белгород, 11-14 окт. 2004 г.). - Белгород: Изд-во БелГУ, 2004. - С. 158-160.

20. Санация ложи аденомы простаты и послеоперационного простатита как профилактика гнойно-воспалительных осложнений простатэктомии / О.И. Братчиков, Д.А. Тисцов, Г.В. Сипливый и др. // Материалы пленума

. правления Рос. об-ва урологов (г. Саратов, 8-10 июня 2004 г.), - М., 2004.-С. 117-118.

21. Сипливый, Г.В. Разработка методики количественного определения цефалексина, иммобилизованного в эритроцитарные носители / Г.В. Сипливый, Л.Е. Сипливая, A.B. Кукурека // II Всерос. съезд фармацевтических работников: сб. материалов. - Сочи, 2005. - С. 135-136.

22. Разработка иммобилизованных лекарственных форм доксорубицина и методик его анализа / Л.Е. Сипливая, В.К. Шорманов, Г.В. Сипливый и др. // II Всерос. съезд фармацевтических работников: сб. материалов. -Сочи, 2005.-С. 136-137.

23. Получение иммобилизованной формы рифампицина, обладающей имму-номодулирующим, антиоксидантным и гепатопротекторным действием / JI.E. Сипливая, А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // II Всерос. съезд фармацевтических работников: сб. материалов. - Сочи, 2005. -С. 138-139.

24. Динамика изменения чувствительности возбудителей инфекции мочевы-водящих путей при терапии цефиксимом / Г.В. Сипливый, Е.А. Шумакова, АЛО. Бобнева, В.В. Приходько // Молодежная наука и современность: юбилейная межвуз. науч. конф, студентов и молодых ученых, посвящ. 70-летию КГМУ. В 2 ч. - Курск: Изд-во КГМУ, 2005. - Ч. 1. - С. 233-234.

25. Оценка антибиотикорезистентности возбудителей инфекции мочевыво-дящих путей в урологическом стационаре / Г.В. Сипливый, Е.А. Шумакова, А.Ю. Бобнева, В.В. Приходько // Молодежная наука и современность: юбилейная межвуз. науч. конф. студентов и молодых ученых, посвящ. 70-летию КГМУ. В 2 ч. - Курск: Изд-во КГМУ, 2005. - Ч. 1. - С. 234-235.

26. Иммуномодулирующая активность некоторых иммобилизованных антибиотиков при экспериментальной почечной недостаточности, осложненной стафилококковой инфекцией / О.И. Братчиков, Е.А. Шумакова, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // Факультет последипломного образования: 20 лет на службе здравоохранения: материалы регион, науч.-практ. конф., посвящ. 20-летию ф-та постдипломного образования КГМУ(24 марта 2006 г.) / Под ред. проф. А.И. Лазарева. - Курск: Изд-во КГМУ, 2006. -С.171-172.

27. Протективная активность иммобилизованных антибиотиков аминоглико-зидов при острой почечной недостаточности и инфицировании / О.И. Братчиков, Е.А. Шумакова, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // Факультет последипломного образования: 20 лет на службе здравоохранения: материалы регион, науч.-практ. конф., посвящ. 20-летию ф-та постдипломного образования КГМУ (24 марта 2006 г.) / Под ред. проф. А.И. Лазарева. - Курск: Изд-во КГМУ, 2006. - С. 173-174.

28. Бактериологическое исследование отделяемого послеоперационных ран у больных острым пиелонефритом на фоне сахарного диабета / Е.А. Шумакова, А.Ю. Бобнева, Г.В. Сипливый и др.// Факультет последипломного образования: 20 лет на службе здравоохранения: материалы регион, науч.-практ. конф., посвящ. 20-летию ф-та постдипломного образования КГМУ (24 марта 2006 г.) / Под ред. проф. А.И. Лазарева. - Курск: Изд-во КГМУ, 2006. - С. 453-454.

29. Исследование некоторых видов активности иммобилизованных форм аминогликозидных антибиотиков при токсическом поражении почек, осложненном стафилококковой инфекцией / A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый, П.М. Карлов // Сб.-тр. 72-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск: Изд-во КГМУ, 2007. -Т. 3,-С. 182-184.

30. Изучение иммуномодулирующей, гепатопротекторной и антиоксидант-ной активности иммобилизованных форм аминогликозидных антибиоти-

ков при токсическом поражении почек, осложненном стафилококковой инфекцией / Л.Е. Сипливая, A.B. Кукурека, Г.В. Сипливый, В.И. Михай-ленко // XIV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: сб. материалов конгр. (тез. докл). - М„ 2007. - С. 582-583.

31. Использование направленного транспорта аминогликозидных антибиотиков при пиелонефрите / Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая // Сб. науч. тр. по материалам междунар. науч.-практ. конф. «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании 2007». - Т. 18. Медицина, ветеринария и фармацевтика. Химия. История. - Одесса: Черноморье, 2007. - С. 36-37.

32. Иммунометаболическая активность направленного транспорта фторхино-лонов при инфекционном и токсическом поражении почек / О.И. Братчи-ков, П.М. Карлов, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем, науч. центра РАМН. В 3 т. - Курск: Изд-во КГМУ, 2008.-Т. 1.-С. 137-140.

33. Изменение иммунометаболической активности некоторых антибиотиков, иммобилизованных в клеточные носители, под влиянием физических факторов / А.И. Лазарев, A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. В 3 т. -Курск: Изд-во КГМУ, 2008.-Т. 1.-С. 150-154.

34. Перспективы использования направленного транспорта аминогликозидов при экспериментальном необструктивном пиелонефрите / О.И. Братчи-ков, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 73-й науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. В 3 т, - Курск: Изд-во КГМУ, 2008.-Т. 1.-С. 185-188.

35. Сипливый, Г.В. Тромбоэритроцитарная иммуносупрессия при экспериментальном необструктивном пиелонефрите / Г.В. Сипливый // Аллергология и иммунология. -2008. - Т. 9, №3.-С. 311.

36. Сипливый, Г.В. Коррекция иммунометаболических нарушений при необструктивном пиелонефрите антибиотиками-аминогликозидами, иммобилизованными в лейкоцитарные носители / Г.В. Сипливый // Аллергология и иммунология. -2008.-Т. 9, №3,-С. 311.

37. Иммуномодулирующая, гепатопротекгорная и антиоксидантная активность иммобилизованных форм аминогликозидных антибиотиков при токсическом поражении почек, осложненном стафилококковой инфекцией / О.И. Братчиков, А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый и др. // Урология. -2008.-№5.-С. 8-12.

38. Эритроцитзависимые эффекты лекарственных и физиотерапевтических средств: монография / А.И. Лазарев, И.Л. Бровкина, Г.В. Сипливый и др.; ГОУ ВПО КГМУ Росздрава. - Курск: Изд-во КГМУ, 2008. - 336 с.

39. Effect of UV irradiation and magnetic field on immunometabolic effects of antibiotics immobilized in cell carries / А.И. Лазарев, A;B. Кукурека, Л.Е. Си-

пливая, Г.В. Сипливый // Bulletin of experimental biology and medicine. -New York, 2008.-Vol. 145. -№ 6. - P. 717-720. [USA, lune, 2008].

40. Влияние ультрафиолетового облучения и магнитного поля на иммуноме-таболические эффекты антибиотиков, иммобилизованных в клеточные носители / А.И. Лазарев, A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - Т. 145, №6.-С. 663-667.

41. Братчиков, О.И. Острый пиелонефрит: учеб.-методич. пособие / О.И. Братчиков, Г.В. Сипливый, Е.А. Шумакова. - Курск: Изд-во КГМУ, 2008.- 166 с.

42. Влияние ультрафиолетового облучения и магнитного поля на иммуноме-таболические эффекты антибиотиков, иммобилизованных в клеточные носители при пиелонефрите / A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый // Кластерные подходы в современной фармации и фармацевтическом образовании: сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. (г. Белгород, 20-21 ноября. 2008 г.) / Под ред. проф. И.В. Спичак. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2008,- С. 324-325.

43. Изменение иммунометаболических показателей в условиях пиелонефрита и направленного траспорта антибиотиков-аминогликозидов / A.B. Кукурека, Л.Е. Сипливая, В.И. Михайленко, Г.В. Сипливый // Кластерные подходы в современной фармации и фармацевтическом образовании: сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. (г. Белгород, 20-21 ноября. 2008 г.) / Под ред. проф. И.В. Спичак. - Белгород: Изд-во БелГУ, 2008. -С. 326-327.

44. Иммунометаболическая активность антибиотиков-аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных в эритроцитарные и лейкоцитарные носители, при пиелонефрите / О.И. Братчиков, Л.Е. Сипливая, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // Университетская наука: теория, практика, инновации: сб. тр. 74-й науч. конф. КГМУ, сессии Центр.-Чернозем, науч. центра РАМН и отд-ния РАЕН. В 3 т. - Курск: Изд-во КГМУ, 2009. -T. 1.-С. 146-149.

45. Сипливый, Г.В. Иммунометаболические эффекты поливинилпирролидона (ПВГ1) и лизоцима при необструктивном пиелонефрите и введении антибиотиков-аминогликозидов / Г.В. Сипливый // Аллергология и иммунология. - 2009. - Т. 10, № 2. - С. 291.

46. Сипливый, Г.В. Коррекция иммуномодулирующего, антиоксидантного и гепатопротекторного действия иммобилизованных в эритроцитарные носители антибиотиков-аминогликозидов при пиелонефрите / Г.В. Сипливый // Аллергология и иммунология. - 2009. - Т. 10, № 2. - С. 292.

47. Иммунометаболическая активность фторхинолонов, иммобилизованных в клеточные носители при токсическом поражении почек в условиях стафилококковой инфекции / О.И. Братчиков, А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый и др. //Урология. - 2009. № 2. - С. 13-18.

48. Братчиков, О.И. Обоснование использования направленного транспорта аминогликозидных антибиотиков при экспериментальном необструктив-

ном пиелонефрите / О.И. Братчиков, Г.В. Сипливый, Е.А. Шумакова // Рациональная фармакотерапия в урологии 2009: III Всерос. науч.-практ. конф.: тез. (г. Москва, 12-13 февраля 2009 г.). - М„ 2009. - С. 65-66.

49. Сипливый Г.В. Иммуномодулирующая активность дипиридамола и АТФ при необструктивном пиелонефрите / Г.В. Сипливый, О.И. Братчиков, Л.Е. Сипливая, // Российский аллергологический журнал. - 2009. - № 3. -С. 454-455.

50. Сипливый, Г.В. Экспериментальное обоснование использования клеточных носителей для направленного транспорта антибиотиков при необструктивном пиелонефрите / А.И. Лазарев, Г.В. Сипливый, A.B. Кукурека // Российский медико-биологический вестник им. акад. И.П. Павлова. -2009.-№ 1,-С. 58-62.

51. Сипливый, Г.В. Корригирующее влияние лизоцима и поливинилпирроли-дона на иммунометаболическую активность эритроцитарных носителей с включенными аминогликозидами или фторхинолонами при пиелонефрите / Г.В. Сипливый, Л.Е. Сипливая, A.B. Кукурека // Актуальные вопросы фармакологии и фармации: сб. тр. межвуз. науч. конф., посвящ. памяти проф. В.В. Пичугина и 75-летию КГМУ. - Курск: Изд-во КГМУ, 2009. -С. 318-320.

52. Влияние дипиридамола и АТФ на иммуносупрессирующие свойства эритроцитов и тромбоцитов при экспериментальном необструктивном пиелонефрите / А.И. Лазарев, Л.Е. Сипливая, A.B. Кукурека, Г.В. Сипливый // Российский медико-биологический вестник им. акад. И.П. Павлова. - 2009. -№ 4. - С. 19-23.

53. Тактика ведения больных с острыми воспалительными заболеваниями почек: учеб.-методич. пособие / О.И. Братчиков, Е.А. Шумакова, Г.В. Сипливый. - Курск: ОАО «ИПП «Курск», 2009. - 231 с.

Открытие

Закономерность развития иммуносупрессии при нарушении энергетического гомеостаза организма человека и животных под действием тромбоцитов: диплом на открытие № 397 / Бровкина И.Л., Конопля А.И., Конопля H.A., Лаза-ренко В.А., Прокопенко Г.В., Сипливый Г.В. - № А-497; заявл.: 09.04.2010.

Изобретения

1. Иммобилизованная форма доксорубицина: пат. 2262923 Рос. Федерация: МПК7 А61 К 9/26, 31/704, А 61 Р 35/00 / Ерофеева Л.Н., Карпенко E.H., Сипливая Л.Е., Дудка В.Т., Печенин О.Д., Ананьева Т.И.; заявитель и патентообладатель ГОУ ВПО КГМУ Росздрава. - №2003137539/15(040253); заявл. 25.12.2003; опубл. 25.10.2005. Бюл.№ 30.

2. Устройство для операции методом троакарной цистостомии под ультразвуковым контролем: пат. 85 324 Рос. Федерация: МПК7 А61В 17/34 / Братчиков О.И., Серегин С.П., Долженков С.Д., Шумакова Е.А., Криков-цов С.И., Басов П.Д., Новиков A.B., Коцарь А.Г., Пахомов В.В.; заявители и патентообладатели Серегин С.П., Долженков С.Д.. - № 2008146897/2; заявл. 27.11.2008; опубл. 10.08.2009. Бюл. №¡22.

Принятые сокращения

ААП - штьфа-1-аитипротеаза, мкмоль/л

АГП - ацилгидроперекиси, AD233 па 1 мл плазмы

АЗКЦ - антителозависимая клеточная цитотоксичность, в %

АЛТ - аланинаминотрансфераза, ммоль/ч*л

АМГ - альфа-2-макроглобулины, мкмоль/л

АОК - антителообразующие клетки, 103/селезенку

ACT - аспартатаминотрансфераза, ммоль/ч*л

АТФ - аденозинтрифосфат, мкмоль/мл эритроцитов

БФГ - 2,3-бифосфоглицерат, мкмоль/мл эритроцитов

ГАГ - гликозаминогликаны, г/л

ГДГ - глюгаматдегидрогеназа, моль/чхл

ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа

ГИО - гуморальный иммунный ответ

ГР - глутатионредуктаза, мкмоль/мл эритроцитов

ДК - диеновые коньюгаты, нмоль/л

ЛДГ - лактатдегидрогеназа, моль/ч><л

ЛН - лейкоцитарные носители

ЛНП - липопротеины низкой плотности, условные единицы МДА - малоновый диальдегид, мкмоль/л ММ - молекулярная масса, кД

НДФН-оксидаза - никотинамидадениндинуклеотидфосфат-оксидаза НТСсп - тест восстановления нитросинего тетразолия спонтанный и НТСинд - индуцированный, % ОБ - общий билирубин, мкмоль/л

ОРН (НСТинд - НСТсп) - окислительный резерв нейтрофилов ПОЛ - перекисное окисление липидов РКЛ - разница кариоцитов лимфоузлов, 10б РМЛ - разница массы лимфоузлов, мг

СНКС - супернатант не прилипающих к стеклу клеток селезенки СПКС - супернатант прилипающих к стеклу клеток селезенки

СОД - супероксиддисмутаза, ЕД на мл эритроцитов СДГ - сукцинатдегидрогеназа, моль/чхл ФАН (ФИхфЧ) - индекс активности фагоцитов ФДФ - фруктоза-2,6-дифосфат, пМ/106 лимфоцитов ФИ - фагоцитарный индекс, %

ФЛП - фракция липопротеинов низкой и очень низкой плотности

ФМА - функционально-метаболическая активность

ФЧ - фагоцитарное число

ЩФ - щелочная фосфатаза, ммоль/чхл

ЭБ - эритроциты барана

ЭН - эритроцитарные носители

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано з набор 14.01.2011 г. Подписано в печать 18.01.2011 г. Формат 30x427g. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 2,0. Тираж 100 экз. Заказ № 145"А". Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Оглавление диссертации Сипливый, Геннадий Вячеславович :: 2011 :: Курск

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

РАЗДЕЛ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Иммунометаболические нарушения при токсическом и инфекционном поражении почек.

2. Иммунометаболические нарушения при антибактериальной терапии.

3. Направленный транспорт лекарственных средств в организм.

РАЗДЕЛ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

4. Материалы и методы исследования.

5. Получение эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибиотиков аминогликозидов и фторхинолонов для их направленного транспорта в организм.

6. Экспериментальное моделирование необструктивного гематогенного пиелонефрита. Оценка эффективности свободных и клеточных форм антибиотиков аминогликозидов и фторхинолонов при пиелонефрите.

7. Иммунометаболические нарушения и взаимодействие клеток и молекулярных структур в их реализации при необструктивном пиелонефрите.

8. Иммунорегулирующая функция лимфоцитов крови и её коррекция при необструктивном пиелонефрите.

9. Иммунометаболические нарушения, вызываемые некоторыми антибиотиками и фторхинолонами при микробной компрометации организма.

10. Иммунометаболические эффекты свободных антибиотиков аминогликозидов или фторхинолонов при необструктивном пиелонефрите.

11. Иммунометаболические эффекты дипиридамола и рибоксина при необструктивном пиелонефрите и введении антибиотиков аминогликозидов или фторхинолонов.

12. Иммунометаболические эффекты поливинилпирролидона и лизоцима при необструктивном пиелонефрите и введении антибиотиков аминогликозидов или фторхинолонов.

13. Иммунометаболические изменения при направленном транспорте антибиотиков и фторхинолонов, включенных в эритроцитарные носители в условиях пиелонефрита.

14. Иммунометаболические изменения при направленном транспорте антибиотиков аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных на лейкоцитарных носителях в условиях пиелонефрита.

15. Корригирующее влияние лизоцима и поливинилпирролидона на иммунометаболическую активность эритроцитарных носителей с включенными аминогликозидами или фторхинолонами при пиелонефрите.

16. Коррекция иммунометаболической активности антибиотиков аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных в клеточные носители ультрафиолетовыми лучами и магнитным полем.

17. Оценка эффективности влияния эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов на функциональную активность клеток крови при пиелонефрите.

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Сипливый, Геннадий Вячеславович, автореферат

Актуальность темы.

В настоящее время урологические инфекционные заболевания занимают одно из ведущих мест в клинике инфекционных патологий (Лопат-кин H.A., Переверзев A.C., 2006; Sobel J.D., Кауе Д., 2005). Пиелонефрит является одним из самых распространенных заболеваний почек в любых возрастных группах, частота которых за последние годы увеличилась и занимает второе место в структуре заболеваний после острой респираторно-вирусной инфекции (Калугина Г.В. и др., 1996; O'Donellj et al, 2002). Пиелонефрит имеет тенденцию к длительному течению, хронизации процесса и является основой глубоких морфологических и энзимопатических нарушений в почках, что в свою очередь, вызывает системные иммунометаболические изменения (Лопаткин H.A. и др., 2000; Есилевский Ю.М., 2007).

При инфекционной патологии и, в частности, при необструктивном гематогенном пиелонефрите широко используются химиотерапевтические препараты, обладающие мощным бактериостатическим и бактерицидным действием и достаточно широким антимикробным спектром (Зубков М.Н., 2002; Рафальский В.В., 2004; Cilbert D:, 2002; Emmerson A.M., Jones H.M., 2003). Клинические наблюдения последних десятилетий свидетельствуют о значительном снижении эффективности антибиотиков (Неймарк А.И., Гат-кин М.Я., 2005). Известно, что антибиотики являются ингибиторами синтеза нуклеиновых кислот, липидов и углеводов, а также активно влияют на функции цитоплазматической мембраны клеток (Навашин С.М., 1997). Применение антибиотиков нередко сопровождается осложнениями, связанными с подавлением иммунитета. Подтверждением этого являются данные о значительном учащении рецидивов и снижении общей реактивности у больных, принимающих антибактериальные препараты (Переверзев О.С., 2006).

Снижение токсичности и повышение эффективности химиотерапевти-ческих препаратов возможно селективным действием фармакологических средств на определенные клетки и органы (Неймарк А.И., 2000; Симамкович A.B., 2007). Направленный транспорт лекарственных средств в охваченную-патологическим процессом зону позволяет наряду с созданием в ней высоких концентраций вводимого препарата максимально уменьшить нежелательные реакции организма на медикаментозное воздействие, снизить терапевтическую дозу препарата и кратность введения (Останин A.A. и др., 2000; Кар-пушина И.А. и др., 2001; Кирдей E.F. и др., 2001; Кузьменко В:В. и др., 2009).

Для достижения поставленной цели применяют микроконтейнеры, в качестве которых могут выступать липосомы, капсулы из человеческого альбумина, магнитные микросферы, или аутоклетки крови (Костюченко A.Jï. и др., 2000; Аносова Ю.А., 2010). Однако большинство известных носителей имеют ограничения по диапазону и количеству лекарств, которые они могут связывать, а также обладают токсичностью и иммуногенностью. Наиболее выгодным и с точки зрения биологической совместимости считаются системы доставки, в которых используются собственные клетки организма. Реализация идеи направленного транспорта лекарств идет по линии использования эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в качестве контейнеров для доставки лекарственных средств (Лохвицкий C.B. и др., 1999; Шевцова О.М., Денисова О.И., 2001; Вельский А.Н., Потапчук В.Б., 2001).

Органоспецифичность клеточных носителей, полученных из форменных элементов крови, будет определяться, в первую очередь, свойствами форменных элементов - способностью лейкоцитов мигрировать в очаг воспаления, эритроцитов фиксироваться эритрофагоцитирующими клетками, в основном печени и селезенки, способностью тромбоцитов к адгезии на поврежденных участках интимы сосуда (Генинг Т.П. и др., 1988; Костюченко А.Л., 2000; Третьяков Б.В. и др., 2000).

Цель работы

Задачи

1. Разработка лабораторной технологии получения клеточных эритро-цитарных и лейкоцитарных форм некоторых антибиотиков аминогликозидов и фторхинолонов для осуществления направленного транспорта лекарственных препаратов.

4. Анализ путей реализации иммуносупрессии при необструктивном пиелонефрите и возможностей ее предотвращения с использованием антиги-поксанта рибоксина и гликолитического фермента лизоцима.

6. Анализ механизмов реализации иммунометаболических эффектов аминогликозидов и фторхинолонов и возможностей их фармакологической коррекции с помощью антиагреганта дипиридамола, антигипоксанта рибоксина, гликолитического фермента лизоцима, дезинтоксиканта поливинил-пирролидона при необструктивном пиелонефрите.

7. Изучение влияния аминогликозидов и фторхинолонов, включенных в эритроцитарные носители, на иммунометаболические показатели лабораторных животных при необструктивном пиелонефрите.

9. Изучение влияния предварительного экспонирования эритроцитов и лейкоцитов в. ультрафиолетовых лучах и магнитном поле и обработки клеточных форм антибактериальных препаратов лизоцимом и поливинилпирро-лидоном на иммунометаболические показатели лабораторных животных при необструктивном пиелонефрите.

10. Сравнительное изучение влияния эритроцитарных и лейкоцитарных форм аминогликозидов и фторхинолонов на активность метаболических маркеров эритроцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов при* необструктивном пиелонефрите.

Научная новизна

Впервые экспериментально обоснован метод направленного транспорта аминогликозидов (гентамицин, амикацин) и фторхинолонов, (ципрофлокса-цин, офлоксацин), включенных в аллогенные эритроцитарные и лейкоцитарные носители, при необструктивном пиелонефрите с целью их селективного воздействия на орган и повышения эффективности, снижения системной токсичности и коррекции нарушенных иммунометаболических процессов.

Установлено, что развитие необструктивного гематогенного пиелонефрита сопровождается резкими иммунометаболическими нарушениями — происходит дезинтеграция окислительно-восстановительных и энергетических процессов в эритроцитах, снижение функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, угнетение гуморальной и клеточной форм иммунного ответа, появление иммуносупрессирующей активности у легких эритроцитов.

Впервые установлена клеточная кооперация в реализации иммуномета-болических нарушений при пиелонефрите, которая« заключается в том, что при инфекционном поражении почек усиливается выделение в сосудистое русло окислительно-модифицированных фосфолипопротеинов, под влиянием которых тромбоциты индуцируют у легких эритроцитов способность вызывать выделение прилипающей при 4 — 10°С к стеклу фракции спленоцитов иммуносупрессирующих цитокинов, ММ 50-60 кДа (тромбоцитарно-эритроцитарный механизм).

Показано, что при пиелонефрите изменяется активность метаболических маркеров клеток крови, участвующих в реализации иммунологических у | функций. Тромбоциты приобретают способность снижать активность М§~ -АТФазы стромы эритроцитов и ингибировать антителозависимую клеточную цитотоксичность.

Введение свободных аминогликозидов или фторхинолонов усиливало иммунометаболические изменения, вызванные пиелонефритом. Дипирида-мол, рибоксин, лизоцим и поливинилпирролидон снижали иммунометаболические нарушения при пиелонефрите и введении антибактериальных препаратов.

Впервые установлено, что введение клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) форм антибактериальных препаратов нормализовало окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, не вызывало процессов цитолиза и холестаза, в разной степени повышало функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. Введение клеточных форм аминогликозидов или фторхинолонов отменяло тромбоцито-эритроцитарный механизм иммуносупрессии: снижались иммуносупрессорный потенциал сыворотки крови, активность тромбоцитов, в крови появлялись тяжелые эритроциты, индуцирующие выделение прилипающими при 32-37°С и не прилипающими при 4-10°С клетками селезенки иммуностимулирующих цитоки-нов ММ <15 кДа. Иммуномодулирующее действие клеточных форм антибактериальных препаратов корригировало с показателями метаболической активности клеток крови. Впервые установлены способы усиления и пролонгации иммунометаболической активности клеточных носителей с антибактериальными препаратами.

Научная новизна подтверждена зарегистрированным открытием «Закономерность развития иммуносупрессии при нарушении энергетического го-меостаза организма человека и животных под действием тромбоцитов» (ди-плом*№ 397).

Практическая значимость

На основе экспериментальных данных разработаны: лабораторные технологии получения эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов для использования в клинической практике, включающие адаптированные методики иммобилизации аминогликозидов и фторхиноло-нов в эритроцитарные и лейкоцитарные носители; экспрессные физико-химические методики их стандартизации по количеству включенного препарата; условия хранения клеточных носителей и клеточных форм антибактериальных препаратов; оптимальные сроки хранения клеточных носителей без и с включенными препаратами. Установлен и экспериментально подтвержден коэффициент включения аминогликозидов и фторхинолонов в клеточные носители и предложена формула для его расчета. Предложены формулы расчета объема крови и исходной концентрации антибактериальных препаратов, необходимых для получения их клеточных форм. Получены клеточные (эритроцитарные и лейкоцитарные) формы аминогликозидов и фторхинолонов, стандартизованные по количеству действующего вещества. Применение при пиелонефрите аминогликозидов и фторхинолонов, включенных в клеточные носители, позволяет предложить схему их однократного введения в дозе в 5 раз меньше, чем курсовое назначение. Установлена инверсия действия аминогликозидов или фторхинолонов, иммобилизованных в клеточные носители, на окислительно-восстановительные, энергетические процессы в клетках, процессы цитолиза и холестаза, неспецифическую резистентность организма и активность иммунной системы при экспериментальном пиелонефрите. Предложены методы повышения активности клеточных форм антибактериальных препаратов - обработка клеточных форм лизоцимом или по-ливинилпирролидоном, предварительное воздействие на носители ультрафиолетовыми лучами или магнитным полем.

Связь диссертационной работы с планом НИР

Положения, выносимые на защиту

2. При экспериментальном необструктивном пиелонефрите наблюдается усиление процессов перекисного окисления липидов; снижение активности антиоксидантной защиты и энергетического- потенциала эритроцитов,-увеличение в крови количества иммуносупрессорных субстанций, угнетение функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, гуморальной-и клеточной форм иммунного ответа1. В развитии иммуносупрессии важную роль играют тромбоцито-эритроцитарные и эритроцито-лейкоцитарные взаимодействия.

3. Системное введение свободных аминогликозидов или фторхиноло-нов усиливает иммунометаболические нарушения при необструктивном пиелонефрите.

4. Дипиридамол, рибоксин, лизоцим и поливинилпирролидон снижают иммунометаболические нарушения при пиелонефрите и введении антибактериальных препаратов.

5. Введение аминогликозидов или фторхинолонов, включенных в эрит-роцитарные носители, нормализует окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, состояние гепатоцитов, повышает функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа при необструктивном пиелонефрите.

6. Введение аминогликозидов или фторхинолонов; иммобилизованных на лейкоцитарных носителях без или в присутствии АТФ, нормализует окислительно-восстановительные и энергетические процессы в эритроцитах, нормализует или стимулирует функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови, гуморальный и клеточный иммунный ответ при необструктивном пиелонефрите.

Апробация работы

Основные положения диссертации представлены на III, IX, XIV, российских национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 1996, 2002, 2007), научно-практической конференции, посвященной 35-летию фармацевтического факультета (Курск, 2001); 67-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых (Курск, 2002), 67-й, 72-й, 73-й, 74-й научных сессиях КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного центра РАМН (Курск, 2002, 2004, 2005, 2006), Всероссийской научной конференции с международным участием «Сорбенты как фактор качества жизни и здоровья» (Белгород, 2004), пленуме правления Российского общества урологов (Саратов, 2004), II Всероссийском съезде фармацевтических работников (Сочи, 2005), юбилейной межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2005), региональной научно-практической конференции, посвященной 20-летию факультета постдипломного образования (Курск, 2006), международной научно-практической конференции «Современные проблемы и пути их решения в науке, транспорте, производстве и образовании» (Одесса, 2007), международной научно-практической конференции «Кластерные подходы в современной фармации и фармобразовании» (Белгород, 2008), международной конференции «Физиология и патология иммунной системы» и IV международной конференции по иммунотерапии, посвященных 100-летию присуждения И.И. Мечникову Нобелевской премии (Москва, 2008), VII съезде аллергологов и иммунологов (Санкт-Петербург, 2009), X международном конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии», посвященном 100-летию со дня рождения академика АМН А.Д. Адо (Казань, 2009), II и III Всероссийских научно-практических конференциях «Биотехнология, биомедицинская инженерия и технология современных социальных практик» (Курск, 2009, 2010), научной конференции «Актуальные вопросы фармакологии», посвященной памяти профессора В.В. Пичугина (Курск, 2009), III Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием «Рациональная фармакотерапия в урологии» (Москва, 2009), межкафедральной научно-практической конференции кафедр фармакологии, микробиологии, биологической химии, клинической фармакологии и фармакотерапии, клинической иммунологии и аллергологии, ЛОР-болезней, кожных и венерических болезней, урологии, патофизиологии, акушерства и гинекологии, спортивной медицины и реабилитации, инфекционных болезней, мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф, фармацевтической, токсикологической и аналитической химии, НИИ экологической медицины, хирургических болезней № 2 Курского государственного медицинского университета.

Публикации

Опубликовано 49 научных работ, в том числе 15 в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России (12 статей, открытие и 2 патента на изобретения), в двух монографиях и двух учебно-методических пособиях. Работы содержат полный объем информации, касающейся темы диссертации.

Структура и объем диссертации

Заключение диссертационного исследования на тему "Фармакологическое обоснование целесообразности использования технологий иммобилизации в клеточные носители антибиотиков для коррекции иммунометаболических нарушений при экспериментальном необструктивн"

ВЫВОДЫ

1. Технология'использования; клеточных носителей для направленного транспорта антибиотиков и фторхинолонов включает методики получения клеточных форм препаратов; стандартизации их по количеству действующего вещества, установления условий и сроков хранения. Направленный транспорт антибактериальных препаратов подтверждается кинетикой; их распределения; с. максимальной концентрацией в почках через 1 час после введения и ее сохранения в почках, в течение 24 часов: Применение аминогликозидов (гентамицина, амикацина) и фторхинолонов (ципрофлоксацина, офлоксаци-на), включенных в клеточные носители, позволяет предложить схему однократного их введения; в дозе в 5 раз меньшей, чем курсовое: назначение препаратов.

3. Системное введение гентамицина (2 мг/кг), амикацина (12 мг/кг), ципрофлоксацина (3 мг/кг) и офлоксацина: (3 мг/кг) 1 раз в сутки курсом 5 дней после моделирования: пиелонефрита нормализовало температуру тела, выделительную функцию, гематологические показатели, активность ферментов и морфологическую картину в почках к 10-12 суткам наблюдения: .

Использование эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов в соответствующих их системному введению дозах оказывало более существенный; фармакологический эффект по сравнению с традиционным способом, что выражалось в более ранней нормализации (на 5-7 сутки), клинических, лабораторных, гематологических и морфологических показателей.

4. Развитие экспериментального пиелонефрита сопровождалось резкими иммунометаболическими нарушениями: усилением процессов ПОЛ, снижением активности антиокислительных ферментов, концентрации макроэр-гических соединений и снижением дзета-потенциала эритроцитов, а также функционально-метаболической активности нейтрофилов крови, гуморальной и клеточной форм иммунного ответа. Усиливалось выделение в сосудистое русло окислительно-модифицированных фосфолипопротеинов, под влиянием которых тромбоциты индуцировали у легких эритроцитов1 способность вызывать выделение спленоцитами иммуносупрессирующих цитоки-нов (тромбоцитарно-эритроцитарный механизм иммуносупрессии).

5. Анализ путей развития иммуносупрессии при экспериментальном пиелонефрите показал, что лимфоциты периферической крови выполняли роль связующего звена между эритроцитами и клетками макрофагального ряда. Обработка эритроцитов крыс с пиелонефритом рибоксином и лизоци-мом снижала или полностью предотвращала их способность индуцировать выделение лимфоцитами интактных крыс цитокинов, угнетающих функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови здоровых животных. Обработка лимфоцитов интактных крыс лизоцимом и рибоксином снижала или приводила к полной их анергии в отношении эритроцитов крыс с пиелонефритом.

6. Системное введение инфицированным животным антибиотиков различных групп в широком диапазоне доз: цефалексин (30; 60 мг/кг); гентами-цин (2; 4 мг/кг); амикацин (12; 24 мг/кг); рифампицин (10; 20 мг/кг); доксо-рубицин (1,5; 3,0 мг/кг); ципрофлоксацин (3; 6 мг/кг); офлоксацин (3; 6 мг/кг) дозозависимо усиливало свободнорадикальные процессы в эритроцитах, выраженность цитолиза и холестаза, существенно угнетало гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. Иммуносупрессорная активность реализовалась гуморальными факторами сыворотки крови посредством эритроцитов.

7. Системное введение животным с пиелонефритом антибактериальных препаратов усиливало процессы ПОЛ, цитолиза и холестаза, снижало активность антиокислительных ферментов, накопление макроэргических соединений в эритроцитах, функционально-метаболическую активность нейтрофи-лов, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа. При этом отмечалось усиление тромбоцитарно-эритроцитарного механизма иммуносупрес-сии. При обработке эритроцитов антибиотиками и фторхинолонами наблюдалась инверсия их иммуномодулирующей активности.

8. Введение животным с пиелонефритом, получавшим антибактериальные препараты, дипиридамола (3 мг/кг), рибоксина (2мг/кг), лизоцима (1 мг/кг) и поливинилпирролидона (0,5 мг/кг) снижало выраженность иммуно-метаболических нарушений. При этом в сочетании с аминогликозидами наиболее эффективным оказался поливинилпирролидон, а лизоцим был эффективным как с аминогликозидами, так и с фторхинолонами.

9: Введение крысам с пиелонефритом аминогликозидов или фторхино-лонов, включенных в эритроцитарные носители здоровых доноров и крыс с пиелонефритом, нормализовало энергетические и антиокислительные процессы в эритроцитах, показатели цитолиза и холестаза. Эритроцитарные формы антибактериальных препаратов повышали функционально-метаболическую активность нейтрофилов, гуморальную и клеточную формы иммунного ответа, индуцировали появление иммуностимулирующей активности у тяжелых эритроцитов, усиливали выделение не прилипающими при 4-10°С и прилипающими при 32-37°С к стеклу клетками селезенки иммуностимулирующих цитокинов, отменяли иммуносупрессорную активность у тромбоцитов. Определение показателей через 10 суток показало их дестабилизацию при использовании эритроцитарных носителей животных с пиелонефритом.

11. Обработка эритроцитарных носителей с включенными аминоглико-зидами или фторхинолонами лизоцимом или поливинилпирролидоном усиливала и пролонгировала их иммунометаболическую активность. При использовании эритроцитарных носителей здоровых крыс наиболее эффективным был лизоцим, а для эритроцитарных носителей животных с пиелонефритом - поливинилпирролидон. Предварительное экспонирование клеток в ультрафиолетовых лучах или магнитном поле повышало иммунометаболическую активность эритроцитарных и лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов. Отмечено, что наиболее эффективными были эритроцитарные формы аминогликозидов и фторхинолонов, полученные из эритроцитов, экспонируемых в магнитном поле, и лейкоцитарные формы антибактериальных препаратов, предварительно подвергнутые действию ультрафиолетовых лучей.

12. Введение клеточных форм антибактериальных препаратов изменяло нарушенную при пиелонефрите активность метаболических маркеров: поо I вышалась активность -АТФазы эритроцитов, НАДФН-оксидазы лейкоцитов, ФДФ в лимфоцитах и снижался уровень МДА в тромбоцитах. Введение лейкоцитарных форм антибактериальных препаратов, полученных в пригу ■ сутствии АТФ, отменяло свойство тромбоцитов снижать активность М^ -АТФазы эритроцитов и ингибировать антителозависимую клеточную цитотоксичность.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для подготовки клинических испытаний нового подхода введения антимикробных препаратов отработать методику получения стандартизованных клеточных (эритроцитарных и лейкоцитарных) лекарственных форм хи-миотерапевтических средств в условиях клинической лаборатории. Получить экстемпоральные лекарственные клеточные формы химиотерапевтических препаратов и изучить возможности их стабилизации и пролонгации во времени хранения. Изучить эффективность совместного использования фармацевтических препаратов и физических факторов для коррекции имунномета-болической активности свободных и иммобилизованных в клеточные носители химиотерапевтических препаратов в клинической урологической практике.

При проведении дальнейших научных исследований в области изучения направленного транспорта лекарственных препаратов выяснить значение определения активности М§ "-АТФазы эритроцитов, НАДФН-оксидазы ней-трофилов и содержания ФДФ в лимфоцитах в качестве критериев для прогнозирования иммуномодулирующей эффективности эритроцитарных и лейкоцитарных форм химиопрепаратов в условиях гематогенного необструктив-ного пиелонефрита. Изучить механизм взаимодействия тромбоцитов, эритроцитов и лейкоцитов и выяснить роль этого взаимодействия при необструк-тивном пиелонефрите и введении клеточных форм антибиотиков и фторхи-нолонов.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Сипливый, Геннадий Вячеславович

1. Абдрашитова, Н.Ф. Антибиотики как про- и антиоксиданты при лечении острой пневмонии / Н.Ф. Абдрашитова, P.P. Фархутдинов, Ш.З. За-гидуллин // Тез. докл. 4-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство". М.,1997.- С. 5.

2. Абдрашитова, Н.Ф. Комплексная оценка антиокислительной активности антибиотиков in vitro и in vivo / Н.Ф. Абдрашитова, P.P. Фархутдинов, Ш.З. Загидуллин // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство". М., 1996. - С. 60.

3. Абу Айда, А.Ш. Направленный транспорт антибиотиков в комплексном лечении больных острым пиелонефритом: автореф. дис. канд. мед. наук / А.Ш. Абу Айда; С-Петерб. гос. мед. ун-т им. акад. И.П. Павлова. СПб., 2008. - 19с.

4. Авакян, А.Р. Иммуномодулируюшее действие кратковременного глубокого охлаждения и его усиление витамином Е / А.Р. Авакян, И.Л. Бровкина, А.И. Лазарев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2003. - №2. - С.13-15.

5. Акалаев, А.И. Фосфолипидный состав мембран эритроцитов у больных хронической почечной недостаточностью / А.И. Акалаев, A.A. Абидов

6. Вопросы медицинской химии. 1993. - Т. 39, № 5. - С.43-44.

7. Алмазов, В.А. Выделяемый тромбоцитами фактор роста: механизм действия и роль в развитии заболеваний / В.А. Алмазов, М.В. Благосклонный, А.Ю. Зарицкий // Терапевтический архив. 1984. - Т. 56, № 6. -С.144-147.

8. Ю.Аникеева, СП. Влияние модификации мембраны эритроцита на скорость высвобождения 02 / С.П. Аникеева // Вопросы медицинской химии. 1991. - Т. 37, №3.- С. 59-60.

9. П.Аносова, Ю.А. Направленный транспорт антибиотиков в лечении острого гнойного пиелонефрита у экспериментальных животных: автореф. дис. канд. мед наук / Ю.А. Аносова; Саратов гос. мед. ун-т им. В.И. Разумовского СПб., 2010. - 22С.

10. Антиоксидантное действие милдроната и L-карнитина при лечении больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова, Е.К. Ким // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66, № 3. - С. 32-35.

11. Антиоксидантные и иммуномодулирующие свойства каротиноидов и токоферолов / A.B. Сергеев, Г.И. Клебанов, Б.С. Утешев и др. // IV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1997. - С. 291.I

12. Антиоксиданты, перекисное окисление липидов и рецепторзави-симое увеличение концентрации Са2+ в тромбоцитах человека / Е.В. Негре-ску, A.B. Лебедев, Т.Н. Балденков и др. // Вопросы медицинской химии. 1992. - Т. 38, вып. 1.- С. 36-39.

13. Априкян, B.C. Влияние различных доз антибиотиков на иммунный ответ / B.C. Априкян, A.A. Михайлова, Р.В. Петров // Иммунология. -1992. №2. - С. 16-18.

14. Гб.Априкян, B.C. Изменение фагоцитарной активности: макрофагов под действием различных доз антибиотиков / B.C. Априкян, А:А. Михайлова, Р.В. Петров // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1992. № 9-10. - С.71-74.

15. Арбулиев, M.F. К вопросу лечения гнойного пиелонефрита / M.F. Ар-булиев, K.M. Арбулиев, F.M. Османов // Урология и нефрология.-1997.-№6,- 0.14-17.

16. Арефьева, H.A. Иммунологические аспекты противовоспалительной, терапии в оториноларингологии // Актуальные* проблемы современой ринологии: материалы конф., посвящ. 5-летию Рос. общ-ва ринологов. -М., 1997.-С. 15-17.

17. Арцимович, HlF. Антибиотики, как регуляторы иммунитета;/ H.F. Ар-цимович, H.H. Настоящая // Гематология и трансфузиология. 1994. -Т.39, №6. - С.42-44.

18. Аутологичные липосомы наиболее эффективный носитель лекарственных средств / Б.И. Гельцер, И.В. Архипенко, В.А. Невзорова и др. // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.). -М., 1996.- С.16.

19. Афанасьев, В.А. О механизме развития иммуносупрессии при острой почечной недостаточности / В;А. Афанасьев, И.Л. Ласкова // Патологическая физиология й экспериментальная терапия. 1997. - № 3. - С.31

20. Бельских, А.Н. Применение экстракорпоральной антибактериальной фармакотерапии у больных с хирургической инфекцией / А.Н. Вельских // Эфферентная терапия. 2003. - Т.9, №11.- С. 55-56.

21. Бельских, А.Н. Совместное применение антибиотиков и экстракорпоральных методов детоксикации в гнойно-септической хирургии / А.Н. Вельских, В.Б. Потапчук // Сб. тр. 9-го ежегод. Санкт-Петербургского нефрологического семинара. СПб., 2001.

22. Бельченко, Д.И. Цитотоксическая активность клеток тромбоцитарной системы / Д.И. Бельченко // Иммунология и аллергология. 2001. - №1.- С. 55-57.

23. Бенисевич, В.И. Образование перекисей непредельных жирных кислот в оболочке эритроцитов при болезни Маркиафава-Микели / В.И. Бени-севич, Л.И. Идельсон // Вопросы медицинской химии. 1973. - Т. 19, вып. 6.-С. 596-599.

24. Березняков, И.Г. Инфекции и антибиотики / И.Г. Березняков. Харьков: Константа, 2004.- 447с.

25. Ботлер, Э. Нарушение метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия: пер. с англ. / Э. Ботлер. М: Медицина, 1981. - 256с.

26. Бочкарев, Е.Г. Влияние на иммунную систему препаратов, обладающих антиоксидантными и антигипоксантными свойствами / Е.Г. Боч-карев, Ю.В. Сергеев // Иммунопатология, аллергология, инфектология.- 2000. № 4. - С. 8-14.

27. Бровкина, И.Л. Иммунометаболические эффекты, вызываемые лизоци-мом при острой кровопотере / И.Л. Бровкина, В.Н. Рыбников»// Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2004. - № 2. -С.14-16.

28. Бровкина, И.Л. Иммуномодулирующее действие активаторов энергетического обмена при физических нагрузках различной интенсивности / И.Л. Бровкина, А.П. Агронин // Курский науч. — практ. вестн. «Человек и его здоровье». 2003. - №4. - С. 317.

29. Бурмейстер, Ю. Удаление эритроцитов из суспензии- иммунокомпе-тентных клеток / Ю. Бурмейстер // Иммунологические методы. М., 1979.-С. 350-354.

30. Бухарин, О.В. Свойства и функции катионного белка тромбоцитов / О.В. Бухарин, К.Г. Сулейманов // Успехи современной биологии. -1988. Т. 118, вып. 2. - С. 194-204.

31. Бухарин, О.В. Экспериментально- клиническое изучение применения лизоцима в комбинации с химиотерапевтическими средствами / О.В. Бухарин, Л.С. Зыкова, Н.Ф. Тарасенко // Антибиотики и медицинская биотехнология. 1986. - Т.31, №12. - С. 917-920.

32. Быстрова, H.A. Тепловая модуляция иммуностимулирующего действия мембранопротекторов и лазерного облучения при остром холодовом стрессе: автореф. дис.д-ра мед. наук / H.A. Быстрова; КГМУ. -Курск, 2003.-46с.

33. Бычков, С.М. Агрегация эритроцитов в крови при различных состояниях организма животного / С.М. Бычков, С.А. Кузьмина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. - Т. 15, №6. - С. 604606.

34. Бэйстон, К. Применение ципрофлоксацина у больных с иммуннодефицитными состояниями / К. Бэйстон, Д. Коэн // Антибиотики и химиотерапия. 1993. - Т.38, №2-3. - С.21-24.

35. Виноградова, И.Л. Метод одновременного определения 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах / И.Л. Виноградова, С.Ю. Багрянцева, Г.В. Дервиз // Лабораторное дело. -1980. № 7. - С.424-426.

36. Влияние различных режимов фотомодификации на направленный транспорт абактала / И.А. Карпушина, Т.Ф. Стеблева, Е.С. Бушуев, Е.Ю. Бонитенко // Российский биомедицинский журнал. 2004. - Т. 5(12).-С. 409-414.

37. Влияние тромбоцитов на генерацию активных форм кислорода лейкоцитами / А.Х. Коган, В.И. Ершов, И.Я. Соколова, Г.Р. Алекперова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1992. - Т. 113, № 6. - С. 582-584.

38. Влияние эссенциале на липидный обмен у больных хронической почечной недостаточностью / А.П. Пелешук, Н.Я. Мельман, В.М. Ани-шенко и др. // Врачебное дело. 1993. - № 3. - С. 24-26.

39. Возможности экстракорпоральной глюкокортикоидной терапии бронхиальной астмы / Э.К. Файст, C.B. Власов, В.Б. Еремеев, В.М. Крейнес // Эфферентная терапия. 1998. - Т.4, № 3. - С. 53-55.

40. Генерация оксида азота лейкоцитами периферической крови в норме и при патологии / П.П. Голиков, Н.Ю. Николаева, В.И. Карта-венко и др. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2003.-№ 4. - С. 11-13.

41. Генинг, Т.П. Использование форменных элементов крови для направленной доставки химиотерапевтических и диагностических препаратов в очаг поражения / Т.П. Генинг, И.И. Колкер, Ж.Ш. Жумадилов // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - Т.ЗЗ, №11 - С. 867-870.

42. Генинг, Т.П. Клиренс экзогенного инсулина из эритроцитарных носителей в условиях нормогликемии / Т.П. Генинг, Н.М Чебан // X Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1998. - С. 556.

43. Генинг, Т.П. Фармакокинетика антибиотика, вводимого в организм в клеточных носителях / Т.П. Генинг, К.К. Мануйлов // Антибиотики и химиотерапия. 1991.- №9. - С. 19-20.

44. Генинг, Т.П. Фармакокинетика антибиотика, вводимого в организм в клеточных носителях / Т.П. Генинг, К.К. Мануйлов // Антибиотики и химиотерапия. 1991. - № 9. - С.19-20.

45. Генинг, Т.П. Эритроцит как нетоксичная и биодеградируемая система с экзогенным инсулином / Т.П. Генинг, Н.М. Чебан // Итоги и перспективы развития современной медицины в контексте 21 века. Бишкек, 1998. - С. 453-459.

46. Генинг, Т.П. Эритроцитарные контейнеры как средство пролонгирования экзогенного инсулина / Т.П. Генинг, Н.М. Чебан // 4-й Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: тез. докл. М., 1997. - С. 254.

47. Генинг, Т.П. Эритроцитарные контейнеры с инсулином как модель эндогенных клеточных депо / Т.П. Генинг, Н.М. Чебан // 3-й съезд физиологов Сибири и Дальнего востока: тез. докл. Новосибирск, 1997.1. С. 38-39.

48. Гнеушев, Е.Т. Связывание лекарственных средств с эритроцитами / Е.Т. Гнеушев, И.А. Гнеушева // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т.59, №5. - с. 71-75.

49. Голод, Е.А. Повышение уровня активных форм кислорода как одна из причин нарушения метаболизма в клетках почечных канальцев у больных острым и хроническим пиелонефритом / Е.А. Голод, В.И. Кирпа-товский // Урология. 2001. - №1. - С. 59-61.

50. Голубчиков, В.А. Оценка анатомо-функционального состояния почек после ДЛТ на установке «Урат-П» / В.А. Голубчиков, Ю.И. Авдейчук // Материалы 4 Всесоюзного съезда урологов (10-12 октября 1990г.). -М., 1990. С. 34-36.

51. Горбунов, Н.В. Влияние структурной модификации мембранных белков на липидбелковое взаимодействие в мембранах эритроцитов человека / Н.В. Горбунов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1993. -Т. 96, №1.- С.488-491.

52. Григорьев, К.И. Пиелонефрит у детей / К.И. Григорьев, И.И. Федорова //Клиническая медицина. 2000. - № 6.- С. 13-17.

53. Гублер, Б.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патало-гических процессов / Е.В. Гублер. Л.: Медицина, 1978. - 294 с.

54. Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях / Е.В. Гублер, A.A. Генкин. Л.: Медицина, 1973. - 141с.

55. Гуляев, А.Е. Направленный транспорт гентамицина, ассоциированного с носителями, при эндолимфатическом введении / А.Е. Гуляев, Г.Я.

56. Кивман, А.Ю. Шерстов // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.). М., 1996. - С. 104.

57. Гуревич, К.Г. Сравнительная фармакокинетика эритромицина при направленном клеточно-ассоциированном транспорте и внутривенном введении у пациентов с пневмонией / К.Г. Гуревич // Антибиотики и химиотерапия. 2006. - Т.51. - С. 13-17.

58. Гурин, Н.Г. Рациональное применение антибиотиков основа профилактики побочных эффектов / Н.Г. Турин, Г.Г. Бурак, А.Г. Захарченко // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. - Т.41 , №3. - С.40-43.

59. Деревянко, И.И. Современная антибактериальная химиотерапия пиелонефрита: автореф. дис. д-ра мед. наук / И.И. Деревянко. М., 1998.-24с.

60. Дерфлинг, П. Выделение макрофагов из суспензии спленоцитов / П. Дерфлинг, 3. Вихнер // Иммунологические методы: пер. с англ. М.: Медицина, 1987. - С. 373-378.

61. Детерман, Г. Гель хроматография / Г. Детерман. М.: Мир, 1970. - 252 с.

62. Дмитриева, Л.А. Закономерности сорбции на эритроцитах глюкокорти-коидных гормонов и тимических пептидов и использование этого феномена в иммунокоррекции: автореф. дис. . канд. мед. наук / Л.А. Дмитриева. Иркутск, 1996.

63. Дмитриева, Л.А. Характер и условия сорбции эритроцитами биологически активных веществ / Л.А. Дмитриева, Е.Г. Кирдей // Сибирский медицинский журнал. 1995. - № 2. - С. 23-25.

64. Долгих, Д.В. Реабилитация больных гнойно-деструктивным пиелонефритом после органосохраняющих операций: автореф. дис. канд. мед. наук / Д.В. Долгих; мед.фак-т Рос. ун-та дружбы народов. М., 2006. -23с.

65. Дранник, Г.Н. Иммунонефрология / Г.Н. Дранник. Киев: Здоровья, 1989.- 184 с.

66. Евтодиенко, Ю.В. Автоколебания трансмембранных потоков кальция в митохондриях и их возможное биологическое значение / Ю.В. Евтоди-енко // Биологические мембраны. 2000. - Т. 17. - С. 5-17.

67. Елизарьев, А.Ю. Эфферентная терапия в предоперационной подготовке больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей: автореф. дис. . канд. мед. наук / А.Ю. Елизарьев. Барнаул, 1993.

68. Ермеченко O.A. Способ лечения воспалительных и вирусных заболеваний / O.A. Ермаченко, С.П. Перетягин //1 Всерос. науч.-практ. конф. «Озон в биологии и медицине».- Н.Новгород, 1992.- С.60.

69. Ермолаева, Т.А. Методы выделения из крови интактных тромбоцитов / Т.А. Ермолаева, О.Г. Головина, В.М. Пономаренко // Лабораторное дело. -1991.-№ 10.-С.33-38.

70. Ершов, А.Л. Опыт применения модифицированной методики направленного транспорта антибиотиков при тяжелом течении внебольнич-ной пневмонии / А.Л. Ершов, И.А. Карпушина // Эфферентная терапия. 2006. - Т. 12, № 3. - С. 39 - 44.

71. Жумадилов, Ж.Ш. Особенности включения некоторых антибиотиков в эритроцитарные тени систему целенаправленной доставки химиоте-рапевтических препаратов / Ж.Ш. Жумадилов, Р.В. Макаренкова // Антибиотики и химиотерапия. - 1990. - Т. 35, № 11, - С.54-56.

72. Жумадилов, Ж.Ш. Особенности включения некоторых антибиотиков в эритроцитарные тени систему целенаправленной доставки химиоте-рапёвтических препаратов / Ж.Ш. Жумадилов, Р.В. Макаренкова // Антибиотики и химиотерапия. - 1990:- №11. - С.54-56.

73. Жумадилов, Ж.Ш. Фармакокинетика канамицина при направленном транспорте в печень в тенях эритроцитов- у животных с экспериментальным острым холециститом / Ж.Ш. Жумадилов, Р.В. Макаренкова // Антибиотики и химиотерапия. 1990. - №11. - С.37-38.

74. Жумадилов, Ж.Ш. Фармакокинетика канамицина при направленном транспорте в печень в тенях эритроцитов у животных с экспериментальным острым холециститом / Ж.Ш. Жумадилов, Р.В. Макаренкова // Антибиотики и химиотерапия. 1990.- № 11.- С.37-38.

75. Изменение мембран!эритроцитовш- их значение вшатогенезе: заболева-нишпеченш/ВЖ^ Сондрс, В.А. Васарина, Н.В. Бароян и др.// Докл. VI Всесоюз. конф. по клинической биохимии, морфологии и иммунологии инфекционных.болезнеш Рига, 1983 ■ - С^ 512-513;

76. Изменение содержания фруктозо-2,6-бифосфата в лимфоцитах периферической крови больных сахарным диабетом // Б.Ф. Коровкин, Н.Ф. Беляева; С.А. Краевой и др. // Вопросы медицинской химии. -1999.1. Т.45, вып.З. -С. 232-237.

77. Иммуномодулирующие действие препаратов витаминов К и его усиление рибоксином при остром холодовом стрессе / H.A. Быстрова, И.Л. Бровкина, Л.Г. Прокопенко, Б.С. Утешев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2000. - Т. 63, № 5. - С. 50-53.

78. Иммунотропная активность ß-лактамных антибиотиков и экосистема "мать плод" / Ю.В. Редькин, Н.И. Степина, H.A. Пеньевская и др. // Материалы юбил. конгр. научных исследований Омской гос. мед. академии. - Омск, 1995. - С. 71-77.

79. Йорданова, А.И. Многофакторный анализ действия норфлоксамина на гуморальный иммунный ответ / А.И. Йорданова, Т.В. Смолкина, A.B. Никитин // Антибиотики и химиотерапия. 1995. - Т. 40, №3. -С.16-21.

80. Йорданова, А.И., Иммунофармакологическая активность фторхино-лонов: критерии оценки и характеристика препаратов: дис. канд. биол. наук / А.И. Йорданова. М.: 1997.

81. Калашникова, И.В. Механизмы взаимодействия антибиотиков пени-циллинового ряда с эритроцитами человека / И.В. Калашникова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2008. - Т. 146,№10. -С. 419-423.

82. Калугина, Г.В. Хронический пиелонефрит / Г.В. Калугина, М.С. Клу-шанцева, Л.Ф. Шехаб -М.: Медицина, 1993.

83. Калугина, Г.В. Хронический пиелонефрит / Г.В. Калугина, М.С. Клу-шанцева, Л.Ф. Шехаб //Клиническая медицина.- 1996.- № 2.- С. 54-56.

84. Каминская,Г.О. Фактор активации тромбоцитов и его роль в легочной патологии / Г.О. Каминская // Проблемы туберкулеза. 1994. - № 1. - С. 45-47.

85. Ш.Караев, З.О. Причины и механизм нарушения иммунитета при антибиотической терапии / З.О. Караев // Молекулярно-генетические аспекты инфицированной патологии. Л., 1978. - С. 23-33.

86. Каркищенко, Н.Н. Фармакокинетика / Н.Н. Каркищенко. Ростов н/Д: «Феникс», 2001.-384 с.

87. Карлов, П.М. Исследование соединений групп фторхинолонов, иммо-билизированных на различных носителях: автореф. дис. канд. фарм. наук / П.М. Карлов; КГМУ. Курск, 2009. - 23с.

88. Карпушина, И.А. Оценка возможностей использования аутогенных нейтрофилов для направленного транспорта антибиотиков / И.А. Карпушина // Эфферентная терапия. 2003. - Т.9, № 1. - С. 88 - 89

89. Карпушина, И.А. Применение методики направленного транспорта лекарственных веществ в клинической практике (обзор литературы) / И.А. Карпушина, Т.Ф. Стеблева, Е.Ю. Бонитенко // Российский биомедицинский журнал. 2004. - Т.5. - С. 404-408.

90. Карташова, А.Ф. Микровезикулы эритроцитов как новая транспортная форма даларгина в лечении острого панкреатита: автореф. дис. канд. мед. наук / А.Ф. Карташова. М., 1994.

91. Кашкин, К.П. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия / К.П. Кашкин, З.О. Караев. Л.: Медицина, 1981. - 200с.

92. Кирдей, Е.Г. Влияние продуктов распада эритроцитов на иммунологические процессы / Е.Г. Кирдей, В.И. Нечаева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1982. - Вып.З. - С. 27-30.

93. Кирдей, Е.Г. Экстракорпоральная иммунокоррекция в лечении хронического остеомиелита / Е.Г. Кирдей // Сибирский медицинский журнал. 2001. - №3.- С.39-43.

94. Кирдей, Е.Г. Экстракорпоральная иммунокоррекция в лечении хронического остеомиелита / Е.Г. Кирдей // Сибирский медицинский журнал. 2001. - №3.-С. 39-43.

95. Кирдей, Е.Г. Экстракорпоральная иммунокоррекция при лечении эндометрита после кесарева сечения, метод, рекомендации / Е.Г. Кирдей, С.И. Кулинич, Ю.В. Трусов. -Иркутск, 1996.

96. Клиническая фармакокинетика антибиотиков при введении их в клеточной массе во время плазмафереза / C.B. Лохвицкий, А.Е. Гуляев, Н.В. Зубцов и др. // Здравоохранение Казахстана.- 1992.- № 8. С. 2224.

97. Конопля, НА. Коррекция иммуносупрессирующих свойств; тромбоцитов и эритроцитов при остром токсическом поражении печени / H.A. Конопля, Л.Г. Прокопенко, Б.С. Утешев // Метаболическая: иммуно-модуляция. Курск, 2000. - С. 51-60.

98. Костюченко, А.Л. // Интенсивная терапия послеоперационной раневой инфекции и сепсиса / А.Л. Костюченко, А.Н. Вельских, А.Н. Тулупов. СПб.: Фолиант, 2000.

99. Костюченко, А.Л. Эфферентная терапия / А.Л. Костюченко. СПб.: Фолиант, 2000. - 432с.

100. Краснов, Б.А. Создание лекарственных фитопрепаратов / Б.А. Краснов, A.C. Саратиков // Тез. докл. 2-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1995г.). М:, 1995. - С.237.

101. Крашенинников, М.Е. Влияние фактора активации тромбоцитов на, пролиферацию и секрецию IgE клетками линии человеческой миеломы U-266BL / М.Е. Крашенинников, Ю.Г. Пляшкевич // Экспериментальная и клиническая фармакология:.- 2005. Т. 68, № 4: - С. 40-42.

102. Кузнецов, М.П. Диагностическое значение внутрикожной пробы с пирогеналом в оценке резистентности резистентности организма у больных хроническим пиелонефритом / М.П. Кузнецов, В. А. Кобел ев //Материалы 4 Всесоюзного съезда урологов.- М.,1990.- С. 291.

103. Кузнецова, О.П. Инфекции мочевыводящих путей. / О.П. Кузнецова; П.А. Воробьев, C.B. Яковлев// Рус. мед. журн. 1997. - №5(2). - С. 8190.

104. Кукес, В.Г. Клиническая фармакология и фармакотерапия / В. Г. Кукес, А. К. Стародубцев. М: ГЭОТАР-Медиа, 2006 г. - 640с.

105. Кукес, В.Г. Изучение транспортеров лекарственных средств как новая возможность персонализации фармакотерапии- / В.Г. Кукес // Врач.-2007.-№5.-С. 2-5.

106. Кукурека, A.B. Спектрофотометрическое определение лекарственных средств из группы аминогликозидных антибиотиков: автореф. дис. канд. фарм. наук/ A.B. Кукурека; КГМУ. Курск, 2000, - 18с.

107. Кулибаба, В.В. Гентамицин: аспекты безопасного применения / В.В. Кулибаба, С.Ш. Сулейманов, В.Т. Поротиков // VI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1999. - С. 306-306.

108. Кургалюк, H.H. Оксид азота как фактор адаптационной зашиты при гипоксии / H.H. Кургалюк // Успехи физиологических наук. 2002. - Т. 33, № 4, - С. 65-79.

109. Кухлинг, X. Справочник по физике: пер. с нем. / X. Кухлинг. М.: Мир, 1982.-526с.

110. Кэбот Е. Экспериментальная иммунохимия: пер. с англ. / Е. Кэбот, М. Мейер; ред. В. Холчев. М.: Медицина, 1968. - 684 с.

111. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник /ред. В.В.

112. Меньшиков. M.: Медицина, 1987. - 365 с.

113. Лазарев, А.И. Иммуномодулирующее действие гликозаминогликанов в норме и при инфицировании стафилококком / А.И. Лазарев, Л.Г. Прокопенко // Актуальные вопросы медицинской науки: сб. науч. тр., посвящ. 60 летию КГМУ. Курск, 1997. - С. 120-127.

114. Лазарев, А.И. Иммунономодулирующее действие ретинола и ß-каротина при иммуносупрессии, вызванной бензилпенициллином /А.И. Лазарев, Б.С. Утешев, Л.Г. Прокопенко // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 59, № 2. - С.31-34.

115. Лазарев, А.И. Фармакологическая коррекция иммуносупремирующего действия некоторых антибиотиков: автореф. дис. . д-ра мед. наук / А.И. Лазарев. М., 1998. - 38 с.

116. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1980.-293с.

117. Лесков, В.П. Экстракорпоральная иммунофармакотерапия / В.П. Лесков, И.С. Гущин // Пульмонология. 1993. - Т.З, № 3. - С. 17 - 19.

118. Логинов, A.C. Медикаментозные гепатиты / A.C. Логинов, Б.Н. Матюшин // VI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1999, - С. 190.

119. Лопаткин, H.A. Неосложненные и осложненные инфекции мочеполовых путей. Принципы антибактериальной терапии / H.A. Лопаткин, И.И. Деревянко // Русский медицинский журнал. 1997. - Т.5, №24. - С. 1579-1588.

120. Лопаткин, H.A. Программа антибактериальной терапии острого цистита и пиелонефрита у взрослых / H.A. Лопаткин, И.И. Деревянко // Клиническая антибиотикотерапия. 2000. - №1(3). - С. 45 - 47.

121. Лопаткин, H.A. Руководство по урологии. В 3-х тт. / H.A. Лопаткин.1. M.: Медицина, 1998.

122. Лопаткин, H.A. Этиологическая структура и лечение инфекционно-воспалительных осложнений в урологической практике / H.A. Лопаткин, И.И. Деревянко, Л.А. Нефедова // Российское общество урологов. Правление. Пленум: материалы. Киров, 2000. - С. 5-29.

123. Лопаткин, H.A. Эфферентные методы в медицине: (теоретические и клинические аспекты экстракорпоральных методов лечения) / H.A. Лопаткин, Ю.М. Лопухин. -М.: Медицина, 1989.

124. Лоран, О.Б. Неосложненные инфекции мочевыводящих путей: проблема выбора рациональной антимикробной терапии / О.Б. Лоран, Л.А. Синякова, И.В. Косова // Фарматека. 2004. - № 11. - С. 65-68.

125. Лоран, О.Б. Острый пиелонефрит / О.Б. Лоран, М. Гвоздев, С. Дубов //Врач.- 1998.- № 1.- С. 13-15.

126. Лохвицкий, C.B. Направленный транспорт антибиотиков при лечении больных диабетической гнойной остеоартропатией / C.B. Лохвицкий // Сахарный диабет. 1999. - №3 (4). - С. 1-5.

127. Лукашов, М.И. Иммунометаболические изменения и их фармакологическая картина при адекватных физических нагрузках: автореф. дис. .канд. мед. наук / М.И. Лукашов; КГМУ. Курск, 2001.- 19с.

128. Макаренко, Е.В. Комплексное определение активности супероксид-дисмутазы и глутатаонредуктазы в эритроцитах больных с хроническими заболеваниями печени / Е.В. Макаренко // Лабораторное дело. -1988. №11. - С.48-50.

129. Мальберг, К. Метод локального гемолиза / К. Мальберг, Э. Зигль //

130. Иммунологические методы: пер. с англ. М.: Медицина, 1987. - С.262-267.

131. Мальцева, Е.С. Клиническое значение микоплазменной инфекции при хроническом пиелонефрите у детей: автореф. дис. канд. мед. наук /Е.С. Мальцева.- Казань, 1996.- 23с.

132. Манько, В.М. Иммуномодулирующие свойства эритроцитов, индуцированные ультрафиолетовым облучением / В.М. Манько, JI.E. Сипли-вая, И.Л. Ласкова // Иммунология. 1994. - №5. - С. 25-27.

133. Маршалл, В.Дж. Клиническая биохимия: пер. с англ. / В.Дж. Маршалл. М.,- 2000. - 367 с.

134. Матюшин, Б.Н. Активные формы кислорода: цитотоксическое действие и методические подходы к лабораторному контролю при поражении печени (Обзор литературы) / Б.Н. Матюшин, A.C. Логинов // Клиническая и лабораторная диагностика. 1996. - №4. - С.51-53.

135. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1983. - 233 с.

136. Маянский, Д.Н. Взаимодействие лимфоцитов с эндотелием сосудов / Д.Н. Маянский // Успехи современной биологии. 1988. - Т. 106, вып. 2 (5). - С. 299-307.

137. Медведев, А.Н. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза / А.Н. Медведев, В.В. Чаленко // Лабораторное дело. 1991. -№ 2. - С. 19-20.

138. Мембраноактивные препараты как корректоры нефротоксичности гентамииина / И.М. Вешкурцева, Э.А. Ортенберг, В.В. Бычков и др. //

139. Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995. - Т. 58, №6. -С.36-39.

140. Меньшиков Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меньшиков, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1993. - Т. 117, вып. 2. - С. 155-171.

141. Меньшиков, В.В. Биохимия / В.В. Меньшиков, Н.И. Волков. М.: Физкультура и спорт, 1986. - 386 с.

142. Меньшиков, Е.Б. Окислительный стресс при воспалении / Е.Б. Меньшиков, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1997. - Т. 117, вып.2. - С. 442-455.

143. Методика разделения эритроцитов на возможные группы / Т.В. Коб-зев, Н.А. Троицкая, В.И. Куприенко, О.М. Кобзева // Патологическая системы крови и кровообращения: сб. ст. Симферополь, 1978. - С.49-51.

144. Мецлер, Д. Биохимия: пер. с англ. / Д.М. Мецлер. М: Мир,1980.-Т. 2.-С. 606.

145. Мовчан, Е.А. Внутривенное введение гентамицина как метод действительного снижения нефротоксичности препарата / Е.А. Мовчан М.Ф. Валентин // VI Рос нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1999. -С.204-204.

146. Мурашов, Б.Ф. Содержание гликозаминогликанов сыворотки крови при вирусном гепатите / Б.Ф. Мурашов, М.А. Осадчук, В.М. Капустин //Лабораторное дело. 1986. - № 12. - С.715-716.

147. Навашин, С.М. Наука об антибиотиках: ретроспектива и взгляд в будущее / С.М. Навашин //Антибиотики и химиотерапия. 1997. - Т.42, №5. - С.3-9.

148. Назаров, И.П. Профилактика и лечение сепсиса при ожоговой травме / И.П. Назаров, Б.В. Протопопов Ж.И. Кокоулина // Тез. докл. 6-го все-рос. съезда анестезиологов и реаниматологов (7-10 октября 1998г.). -М., 1998.-С.182.

149. Наличие полисахаридов в некоторых растениях как манифестация иммуномодулирующей активности / Д.А. Муравьёва, О.И. Попова, Т.И: Муравьёва и др. // Тез; докл. 4-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство", апрель 1997. М., 1997. - С. 277.

150. Направленный транспорт антибиотиков при инфекциях с внутриклеточной локализацией возбудителя / Г .Я: Кивман, А.Е. Еуляев, А.Ю. Шерстов и др. // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.).-М., 1996.-С. 134. '

151. Нартикова, В.Ф. Унифицированный метод определения; активности a l -антитрипсина и а2-макроглобулина в сыворотке (плазме) крови человека / В.Ф. Нартикова, Т.О. Пасхина // Вопросы медицинской химии; 1979. - Т. 25, вып. 4. - С. 494-499.

152. Нарушение обмена линидов и морфологическая нестабильность мембран эритроцита у больных с терминальной почечной- недостаточностью 7 Ю.И. Тринштейщ В.П. Терещенко, Ю.А. Терещенко, В.Д. Романова // Терапевтический архив. 1990. - № 6. - С. 84-88.

153. Неймарк, А.И. Использование криопреципитата в комплексном лечении острого гнойного пиелонефрита / А.И. Немарк, М.Я. Гаткин // Урология. 2005. - №4. - С. 42-48.

154. Неймарк, А.И. Эфферентные методы в лечении урологических заболеваний / Б.А. Неймарк. М.: Медицинская книга,2000.

155. Никитин, A.B. Антибиотики и иммунитет / A.B. Никитин // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.). М., 1996. -С. 173.

156. Никитин, A.B. Методические подходы к изучению действия антибиотиков на иммунную систему / A.B. Никитин // Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т.35, № 8. - С. 45-48.

157. Никитин, A.B. Современные противомикробные препараты и иммунная система / A.B. Никитин // Врач. 1997. - № 4. - С. 6-8.

158. Николаева, Е.А. Принципы фармакологической коррекции митохонд-риальной недостаточности у детей / Е.А. Николаева //X Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 2003. - С. 320.

159. Ничитайло, М.Е. Принципы антибиотикопрофилактики и антибактериальной терапии при панкреонекрозе. / М.Е. Ничитайло, Е.Б. Медвец-кий // Острые и неотложные состояния в практике врача. 2007. -№3. -С25.

160. О способности эритроцитов связывать биологически активные вещества и о влиянии таких клеток на иммунный ответ / Е.Г. Кирдей, Е.Ю. Беломестнова, И.А. Верхозин, В.А. Косых // Тез. докл. I съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. - С. 208.

161. Овчинникова, JI.K. Нефротоксичность гентамицина в условиях комбинированной терапии / JI.K. Овчинникова, Е.А. Овчинникова, Т.Н.

162. Фитилева // VI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 1999. -• С.450-450.

163. Опыт использования экстракорпоральной иммунотерапии в лечении больных с гнойно-септическими заболеваниями / A.A. Останин, A.B. Пальцев, О.Ю. Леплина и др. // Медицина. Иммунология. 2000. - № 1.-С. 43-51.

164. Основы биохимии: пер. с англ. / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит'и др. -М.: Мир. 1981. Т.2. - С. 540 -1152.

165. Падейская, E.H. Антимикробные препараты группы фторхинолонов в клинической практике / E.H. Падейская, В.П. Яковлев. М., 1998.

166. Переверзев, A.C. Инфекции в урологии / A.C. Переверзев. Харьков: Факт, 2000.

167. Переверзев, О.С. Инфекции в урологии / О.С. Переверзев. Харьков: Факт, 2006. - 352с.

168. Петренко, Ю.М. Новые источники оксида азота, их возможная физиологическая роль и значение / Ю.М. Петренко, Д.А. Шашурин, В.Ю. Титов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2001. - Т. 64.-№2.-С. 72-80.

169. Поверхностная архитектоника и деформируемость эритроцитов у больных с терминальной стадией почечной недостаточности / Т.В. Гудим, В.А. Ландарь, Н.В. Ряполова, Г.И. Козинея // Лабораторное дело. -1989.-№ 9:-С. 35-38.

170. Подильчак, MiA. Клиническая энзимология / М.А. Подильчак. Киев: Здоров'я, 1967. -292с.

171. Подымова, С.Д. Болезни печени / С.Д. Подымова — М.: Медицина, 1998. 544с.

172. Покровский, A.A. Печень, лизосомы и питание / A.A. Покровский, Л.П. Пристнев. София: Болгарская АН, 1977. - 207с.

173. Попов, М.П. К методике микроэлектрофореза клеток крови / М.П. Попов // Лабораторное дело .-1976. -N9. С. 520-523.

174. Потапова, И.В. Об агрегации эритроцитов при гломерулонефрите / И.В. Потапова// Врачебное дело. 1980. - № Ю. - С. 77-80.

175. Предуктал и милдронат: влияние на реологические свойства крови и агрегационную активность тромбоцитов / Е.В. Филиппова, А.Ю. Коня-"хин, Т.Р. Каменева, А.Э. Радзевич // X Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 2003. - С. 476.

176. Применение антибиотиков и их сочетаний с иммуномодуляторами с лечебной^ целью при экспериментальном сальмонеллёзе у крыс / Е.С. Кынина, A.B. Никитин, С.Т. Дзюбак и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1993. - Т.38, №7. - С. 26-29.

177. Применение метода реинфузии клеточной массы крови с реланиумом при лечении эпилепсии у детей / JI.B. Смирнова, И.Р. Шмидт, C.B. Власов и др. // Эфферентная терапия. 2000. - Т.6, № 4. - С. 27-30.

178. Пристепский, Д.В. Анализ эффективности внутриклеточного проникновения ивермектина, иммобилизованного корпускулярными носителями / Д.В. Пристепский // Биомедицинская химия. 2007. — Т. 53, №1. - С. 57-64.

179. Провоторов, В.М. Роль и место эритроцитов в системе направленного транспорта различных фармакологических средств / В.М. Провоторов, Г.А. Иванова // Клиническая медицина. 2009: - №9. - С. 4 - 8.

180. Продукция супероксида нейтрофилами крови человека при действии токоферола / A.A. Капралов, А.Г. Федорчук, А.И. Маслюк, О.М. Кобозева //Иммунология. 1997. - № 6. - С. 15-18.

181. Прозоровский, Н.С. Условия индукции диуцифоном иммунорегуля-торных клеток / Н.С. Прозоровский, В.П. Лесков, И.С. Гущин // Иммунология. 1990. - № 6. - С. 19 - 21.

182. Прозоровский, Н.С. Экстракорпорально модифицированные иммуно-циты и использование их для иммунокоррекции: автореф. дис . д-ра мед. наук / Н.С. Прозоровский. М., 1991.

183. Прокопенко, Л.Г. Иммунометаболические нарушения и их коррекция / Л.Г. Прокопенко, И.Л. Бровкина // Окислительный, энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция). Курск, 2003. - С. 1334.

184. Прокопенко, Л.Г. Метаболическая иммуносупрессия и ее коррекция / Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля, И.Л. Бровкина // Метаболическая им-муномодуляция. Курск, 2000. - С. 8-27.

185. Прокопенко, Л.Г. Эритроциты как модуляторы иммунологических реакций / Л.Г. Прокопенко, Л.Е. Сипливая // Успехи физиологических наук. 1992. - Т.23, №4. - С. 89-106.

186. Прокопенко. Л.Г. Иммуномодулирующие свойства^ эритроцитов, индуцированные физическими факторами / JI.F. Прокопенко, JI.E. Сипли-вая // Биологические науки. 1992. - № 9. - С. 71-77.

187. Протопопова, Г.М. Реинфузия клеточной массы крови после её инкубации с антибиотиком в лечении неосложнённой пневмонии у детей / Г.М. Протопопова, C.B. Власов, В.М. Крейнес // Эфферентная терапия.- 1998.- Т.4, №4. С. 47-50.

188. Пути коррекции иммунной недостаточности на разных стадиях ожоговой болезни с целью профилактики и лечения сепсиса / И.П. Назаров, A.A. Попов, Б.В. Протопопов, Ж.Н. Кокоулина // Анестезиология и реаниматология. 1999. - № 1. - С. 63-67.

189. Рафальский, В.В. Лекарственные реакции антимикробных препаратов, применяемых для лечения инфекций мочевыводящих путей / В.В. Рафальский // Урология. 2000. - №6. - С. 51-55.

190. Рафальский, В.В. Обоснование выбора антимикробных препаратов при амбулаторных инфекциях мочевыводящих путей: автореф. дис. . д-ра мед. наук /В.В. Рафальский. Смоленск, 2004 - 35 с.

191. Рациональная фармакотерапия в урологии: рук-во для практикующих врачей / под ред. H.A. Лопаткина, Т.С. Перепановой. М.: Литера. -2006. - 824с.

192. Регуляция нарушений иммунной системы в послеродовом периоде, осложнённом эндометритом / Е.Г. Кирдей, С.И. Кулинич, Л.Н. Воробьёва, Ю.В. Трусов // Проблемы здоровья женщин и детей Сибири. -1996.-№2.-С. 11-14.

193. Реутов, В.П. Проблемы оксида азота и цикличности в биологии и медицине / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина, Н.С. Косицын // Успехи современной биологии.- 2005. Т. 125, №1. - С. 41-46.

194. Розенкранц, A.A. Направленная внутриклеточная доставка локально действующих лекарств: специфическая доставка фотосенсибилизаторов в ядра клеток меланомы / А. А. Розенкранц // Генетика. 2003. - Т. 39, №2 . -С. 259-268.

195. Роль фактора активации тромбоцитов в формировании сенсибилизации / JI.M. Тулуевская, Г.Г. Святкина, Ю.Е. Порядин, Ю.Е. Ветлищев // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1993. - №2- С. 7-9.

196. Руденко, A.B. Микробиологические показатели мочи у больных с различным течением пиелонефрита / A.B. Руденко, В.Г. Майданник, В.Н. Пилипенко // Врачебное дело.- 1998.- № 8.- С. 50-52.

197. Руководство по иммунологическим методам в гигиенических исследованиях / Т.В. Федосеева, JI.B. Порядин, JI.B. Ковальчук и др. М., 1993.-С. 319.

198. Румянцев, А.Ш. Этиология и патогенез пиелонефрита / А.Ш. Румянцев, Н.С. Гончарова//Нефрология.- 2000.- Т.4, № 3. С.40-52.

199. Рыбина, И. JL Лабораторные методы диагностики метаболических нарушений при мочекаменной болезни: учебно-методическое пособие / И.Л. Рыбина, B.C. Камышников, Е.Т. Зубовская. Минск: БелМАПО, 2005.- 29 с.

200. Рыбников, В.Н. Взаимосвязь иммуномодулирующих эффектов вызываемых лизоцимом и нафтохинолонами при острой кровопотере / В.Н. Рыбников, И.Л. Бровкина // Антибиотики и химиотерапия. 2000. - Т. 48, №5. - С.7-10.

201. Рыбников, В.Н. Иммуномодулирующее действие гликозамингликанов и жирорастворимых витаминов при острых кровопотерях/ В.Н. Рыбников, И.Л. Бровкина // Курский науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». Курск, 2002. - №4. - С. 81-86.

202. Рыжкова, Г.Ф: Методическое пособие по выделению; очистке и определению активности транспортных АТФаз в органах и тканях животных / Е.Ф. Рыжкова,1 С.И. Вишняков. Воронеж, 2005. - 31 с.

203. Рязанцева Н,В. Типовые нарушения молекулярной организации мембраны эритроцита при' соматической- и психической патологии / Н.В. Рязанцев, В1В. Новицкий // Успехи физиологических наук. 2004. - Т. 35, №1. С. 53-65.

204. Сагитова, Д.С. Направленный транспорт лекарственно модифицированных элементов крови в профилактике излечении гнойных осложнений» острого панкреатита: автореф. дис: . канд. мед. наук. /Д;С. Сагитова. СПб., 2008: - 22с.

205. Сазыкин, Ю.О. К 75-летию открытия лизоцима / Ю.О. Сазыкин // Антибиотики и химиотерапия. 1997. - Т.42, №5. - С.38.

206. Сарбаш, В.И. Эритроциты носители лекарственных препаратов / В.И. Сарбаш // Российский химический журн. - 2007. - Т.51, №1. - С. 143-152.

207. Свекл о, Л.С. Возможности ультрафиолетовой обработки аутокровиу больных для оптимизации антибиотикотерапии / JI.C. Свекло // Материалы III Съезда фотобиологов России. Воронеж, 2001. - С. 191.

208. Светлов С.И. Фактор* активации тромбоцитов: биохимические и патофизиологические аспекты / С.И. Светлов // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1989. - №1. - С. 70-75.

209. Семенов, Б.В. Конфликт сосудов и верхних мочевых путей в развитии урологических заболеваний /Б.В. Семенов // Здоровье человека,и действие факторов внешней среды: тез. докл. науч.- практ. конф.- Губкин, 1995.-С. 142-143.

210. Сенцова, Т.Б. Иммунобиологические критерии хронизации пиелонефрита /Т.Б. Сенцова//Педиатрия. 1997.- № 2.- С. 64-66.

211. Серая, И.П. Современные представления о биологической роли оксида азота / И.П. Серая, Я.Р. Нарциссов // Успехи современной биологии. -2002.-Т. 122, №3.-С. 249:

212. Синякова, JI.A. Гнойный пиелонефрит (современная диагностика и лечение): автореф. дис.д-ра мед. наук / JI.A. Синякова. М., 2002. - 34 с.

213. Синякова, JI.A. Гнойный пиелонефрит: диагностика и« особенности клинического течения /JI.A. Синякова // Урология.- 2002.- № 5,- С. 6872.

214. Стайер, Л. Биохимия: пер. с англ. / Л. Стайер. М.: Мир, 1984.-Т.2.-308с.

215. Стальная, И.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот / И.Д. Стальная // Современные методы в биохимии / под ред. В.Н; Ореховича.- М.: Медицина, 1977. С; 6364. ■ •

216. Тайгулов, Е.А. Направленный транспорт антибиотиков в аутологич-ных эритроцитарных тенях в комплексном лечении больных острымхолециститом пожилого и старческого возраста: автореф. дисканд.мёд. наук / Е.А. Тайгулов.- Алма-Ата, 1991,- 16 с.

217. Тиктинский, О.Л. Пиелонефриты / О.Л: Тиктинский, С.Н. Калинина. -СПб.: Медиа Пресс,1996.

218. Тихонова, А.Г. Эритроциты как переносчики антрациклиновых антибиотиков / А.Г. Тихонова // Терапевтический Архив. 2008. - Т. 80, №7.-С. 91-94.

219. Третьяков^ B.BL Уточнение показаний к проведению эфферентной терапии при рассеянном склерозе / Б.В. Третьяков, С.Н. Петров, С.В. Лисицын // Тр. восьмой конф. московского об-ва гемафереза. М., 2000. - С. 481

220. Трубчанинов Л.П., Горбунова З.А., Аманжолова А.Б. и др. Цитоток-сическая активность, опосредуемая тромбоцитами у ВИЧ-инфицированных пациентов с разной клинической стадией // Иммунология. 1994. - № 4. - С. 59-63.

221. Утешев, Б.С. Менадион и рибоксин как индукторы иммуномодули-рующей активности стромы эритроцитов / Б.С. Утешев, H.A. Конопля, Л.Г. Прокопенко // Экспериментальная и клиническая фармакология. -2001.-Т. 64, №6.-С. 52-55.

222. Фархутдинов, P.P. Оценка влияния лекарственных препаратов на процессы свободнорадикального окисления / P.P. Фархутдинов, В.В. Лиховских, В.А. Лиховских // Тез. докл. 3-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.). М., 1996. - С. 292-293.

223. Федоров, H.A. Физиологические вариации функционально-биохимических показателей тромбоцитов / H.A. Федоров // Вестн. АМН СССР. 1991. - № 10. - С. 3-4.

224. Фотомодификация действия антибиотиков при остром пиелонефрите / P.M. Сафаров, Э.К. Яненко, В.И. Борисик, В.В. Щукин // Тез. докл. 3-й Росс. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1996г.). М., 1996. -С. 200.

225. Французова, С.Б. Фармакодинамика рибоксина (инозина) / С.Б. Французова, В.Я. Кривелевич, В.П. Пархоньок // Фармакология и токсикология. 1984. - Т. 111, №1.-С. 115-118.

226. Функциональное состояние мембраны эритроцитов у больных острой почечной недостаточностью / Л.В. Борзова, В.В. Беляева, H.H. Скачи-лова, Г.И. Козимец // Проблемы гематологии и переливания крови. -1976.-Т. 21, №12.-С. 16-18.

227. Хазанов, В.А. Новый класс препаратов регуляторы энергетического обмена / В.А. Хазанов // X Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». - М., 2003.-С.678.

228. Хазанов, В.А. Фармакологическое обоснование разработки препаратов регуляторов энергетического обмена / В.А. Хазанов, Е.Д. Гольдберг, М.Н. Кондрашова // XI Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 2004. - С. 714-715.

229. Хараменко, С.С. Электрофорез клеток крови в норме и патологии / С.С. Хараменко, A.A. Ракитянская. Минск, 1974. — С. 35-36.

230. Хелл, К. Роль антибиотиков в профилактике хирургической инфекции. Сравнительный анализ краткосрочно действующих антибиотиков и антибиотиков продленного действия / К. Хелл // Анестезиология и реаниматология. 1997. - №3. - С. 8-10.

231. Хмелевской, В.И. Фторхинолоны и неспецифические факторы защиты организма / В.И. Хмелевской, А.И. Конопля // Актуальные вопросы дерматовенерологии: сб. ст. Курск, 1997. - С. 60-61.

232. Чазов, Е.И. Направленный транспорт лекарств: проблемы и перспективы / Е.И. Чазов, В.Н. Смирнов, В.П. Торчилин // Журн. всесоюз. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. 1987.- № 5. - С. 485-487.

233. Чебан, Н.М. Эритроциты как депо и система транспорта экзогенного инсулина: автореф. дис . канд. мед. наук / Н.М. Чебан Ульянове, 1999.

234. Чернышев, В.В. Наша тактика при пиелонефритах / В.В. Чернышев, Н.Ф. Авдошина, C.B. Сорокин // Сб. науч. тр. НИИ туберкулеза.- Новосибирск, 2000.- С. 92-93.

235. Чехонин, В.П. Направленная доставка лекарственных средств в мозг / В.П. Чехонин, Ю.А. Жирков, Т.Б. Дмитриева // Вестник Российской академии медицинских наук. 2006. - №8. - С. 30-37.

236. Швецов, Д.А. Направленный транспорт антибиотиков в лечении острых неспецифических воспалительных заболеваний лёгких и плевры: автореф. дис. . канд. мед. наук / Д.А. Швецов. Караганда, 1996. - 22 с.

237. Швецов, Д.А. Способ лечения хирургической инфекции: информ. листок КазгосИНТИ / Д.А. Швецов Караганда, 1996. - № 46. - С. 4.

238. Шевцова, О.М. Применение плазмафереза в сочетании с экстракорпоральной инкубацией эритроцитарной массы с антибактериальными препаратами / О.М. Шевцова, О.И. Денисова // Тр. 9-ой конф. Московского об-ва гемафереза. М., 2001.

239. Шинкаренко, Н.В. Химическая основа поведения синглетного кислорода в организме человека: обзор / Н.В. Шинкаренко // Вопросы медицинской химии. 1986. - №5. - С. 2 - 7.

240. Шишкин, A.B. Иммунологические чипы для-исследования эритроцитов человека /A.B. Шишкин // Биологические мембраны. 2008. — Т. 24, №4. - С. 267-276.

241. Шишков, С.С. Использование связывания красителей для количественного определения белка в растворе / С.С. Шишкин // Вопросы медицинской химии. 1989. - №5. - С. 134-141.

242. Шулутко, Б.И. Воспалительные заболевания почек: пиелонефрит и другие тубулоинтерстициальные заболевания / Б.И. Шулутко.- СПб.: Ренкор, 1996.-254с.

243. Щербаков, В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительностинейрофилов к стимуляторам / В.И. Щербаков // Лабораторное дело. -1989. №2.-С. 30-33.

244. Экспериментальное обоснование экстракорпоральной иммунофарма-котерапии / И.С. Гущин, В.П. Лесков, Н.С. Прозоровский, В.М. Писарев // Актуальные вопросы иммунофармакотерапии. М., 1987. - С. 7176.

245. Экстракорпоральная иммунокоррекция в комплексном лечении больных урогенитальными инфекциями / А.И. Якубович, Е.Г. Кирдей, Р.Г. Скворцова и др. // Сибирский мед. журн. 2000. - № 3. - С.40-44.

246. Экстракорпоральная иммунокоррекция в лечении хронического остеомиелита / Е.Г. Кирдей, Т.Е. Белохвостикова, Л.А. Дмитриева и др. // Сибирский медицинский журнал. 2001. - № 3. - С. 39-43.

247. Экстракорпоральная иммунофармакотерапия больных сепсисом и тяжёлой гнойной инфекцией / С.М. Юдина, A.M. Талонов, В.М. Писарев и др.// Вестник интенсивной терапии. 1995. - № 3. - С. 23-28.

248. Экстракорпоральная иммунофармакотерапия с преднизолоном и циа-нокобаламином атопической глюкокортикостероидозависимой бронхиальной астмы / О.М. Курбачёва, Ю.А. Порошина, И.С. Гущин и др. // Пульмонология. 1992. - № 2. - С. 52- 57.

249. Экстракорпоральные методы детоксикации и иммунокоррекции в лечении ожоговой болезни / И.П. Назаров, Е.А. Попова, Ж.И. Кокоулина, A.A. Попов // Тез. докл. 6-го Всерос. съезда анестезиологов и реаниматологов (7-10 октября 1998г.). -М., 1998. С. 182.

250. Эритроциты и метаболическая йммуномодуляция / Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля, И.Л. Ласкова и др. Курск, 1995. - 165 с.

251. Эффективность лечения стафилококковой пневмонии липосомным гентамицином в эксперименте / А.И: Перепелкин, К.А. Ротов, Н.Г. Тихонов и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1996. - Т.41, №10. - С. 2829.

252. Эффективность мексидола при остром токсическом поражении печени / H.A. Соловьева, И.А. Матюшин, O.P. Лимнев и др. // X Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 2003.- С. 755.

253. Ягурдина, Р.И. Гепатопротекторная активность некоторых комплексных препаратов растительного происхождения / Р.И. Ягурдина, B.C. Тишкин // Тез. докл. 4-й Рос. нац. конгр. "Человек и лекарство" (апрель 1997г.).-M., 1997.-С.148.

254. Яковлев, C.B. Антибактериальная терапия пиелонефрита / C.B. Яковлев // Consilium medicum.- 2000.- №2.- С. 156-159.

255. Ahmed, Е. ОПН. Анализ этиологических факторов / Е. Ahmed, R. Na-gui // Renal Failure. 1995. - Vol. 5. - P. 560 - 561.

256. Alayash, A.I. Hemoglobin based blood substitutes and the hazards of blood radicals / A.I. Alayash // Free Rad. Res. - 2000. - Vol. 33. - P. 341348.

257. Anderson, G. Intracellular bacterial biofilm-like pods in urinary tract infections / G. Anderson // Science. 2003.- Vol. 301.- P. 105-107. '

258. Anderson, M.I. Development of the quinolones / M.I. Anderson,A.P. MacGowan // J Antimicrob Chemother. 2003. - Vol. 51. - P. 1-11.

259. Anderson, R.J. Acute renal failure / R.J. Anderson, R.W. Schier //Diseases of the kidney. 6th. ed. / ed. R.W-. Schrier and C. - 1997. - P. 1069-1104.

260. Appelbaum, P.C. The fluoroquinolone antibacterials: past, present and future perspectives / P.C. Appelbaum, P.A. Hunter // Intern J Antyimicorb Agents.-2000.-Vol. 16.-P. 5-15.

261. Ataullakhanov, F.I. .What determines the intracellular ATP concentration / F.I. Ataullakhanov, V.M. Vitvitsky // Biosci Rep. 2002. - Vol.22, № (5-6), P. 501-11.

262. Autoantibolidies to TNF alpha in HJV-1 infection: prospects for ant icy to-kine vaccine therapy / C. Capini, M. Richardson, H. Hendel et al. // Bio-med. Pharmacother. 2002. - Vol. 55, № 1. - P. 23-31. ^

263. Ball, P. New antibiotic Trovan community- acquired lower respiratory tract infections: improved activity at a cost? / P.Ball // Inter J Antimicrob Agents. 2000. - Vol. 16. - P. 263-272.

264. Ball, P. Quinolone induced QT interval prolongation: a not unexpected-class effect / P.Ball // Ibid. 2000. - Vol. 45. - P. 557-559:

265. Bentler, B. Cachection tumor necrosis factor: production, distribution and metabolic fate in vivo / B. Bentier, J. Milsark, A. Cermal // J. Immunol. -1985. Vol. 135. - P. 3972 - 3977.

266. Bergman, A. Practice parameter: the diagnosis, treatment and evaluation of the initial tract infections in febrile infants and young children / A. Bergman, D. Baltz // Pediatrics. 1999. - Vol. 103, № 4. - P.843-852.

267. Bertino, J. The safely profile of the fluoroquinolones / J. Bertino, D. Fish //Clinical Therapeutics. 2000. - Vol. 22, № 7. - P. 798-817.

268. Bingen, E. Escherichia coli virulence factors in pediatric urinary tract infection / E. Bingen //Archive Pediatrics. 1998. - Vol.5, №3. - P. 279-281.

269. Björn, W. Application-of laboratory research in UTI./ W. Björn, B. Goran, F. 1-Ians I I European Association of Urology Urdate Series.- 2004.- Vol.2 .-P.l 16-124. . • ' ; . .

270. Blumberg, J.B. Consideration' of the scientific substantion for antioxidant vitamins and ß-carotene in disease prevention / J.B. Blumberg // American J. Glinic Nutritiom:- 1995; — Vol.62, №6: P; 1521-1-526-.

271. Bonetite, V. Rapid reduction of metric oxide by mitochondria and reversible inhibition of mitochondrial respiration by nirric oxide;/ V. Bonetite, G. Brown // Biochem. J. 1996. - - Vol. 315. - P. 295-299.

272. Bouzourene, H. An unusual granulomatous form of chronic pyelonephritis in mimicking tuberculosis / H. Bouzourene, N. Bouzourene, M. Franckl //Histopathology.- 1998:r, Vol;32, № 5.- P.481-482: • ;

273. Carbon, C. Comparison of side effects of levofloxacin versus other fluoroquinolones / C. Carbon // Chemotherapy. 2001. - Vol.47, № 3.-P. 9-14.

274. Chai, E.M. Thnancement of oxidative response and cytokine production by jam mucopolysaccharide in murine peritoneal macrophage / E.M; Chai, I.K. Hwang//Fitotherapia. 2002. - Vol. 73. - P. 393-399.

275. Ciprofloxacin induces an immunomodulatory stress response in'human T-lymphocytes / K.A. Riesbeck, A.A. Forsgren, A. Henriksson, A. Bredberg //

276. Antimicrob Agents Chemother. 1998. - Vol. 39. - P. 476-483.

277. Comparaative study of modulatory effect to the function of rat peritoneal neutrophils treated with new quinolones / Y. Azuma, P.L. Wang, M. Shionara et al. // Immunol Lett. 1999. - Vol. 69, № 3. - P. 321-327.

278. Comparative pharmacodynamic analysis of QT interval prolongation induced by the macrolides clarithromycin, roxithromycin, and azitromycin / H. Ohtani, C. Taninaca, E. Hanada et al. // Chemotherapy. — 2000. Vol. 44. -P. 2630-2637.

279. Cynamon, M.H. Liposome-encapsulated-amicacin therapy of Mycobacterium avium complex infection in beige mice / M.H. Cynamon, C.E. Swenson, G.S. Palmer // Antimierob. Ag. Chemother. - 1989. - Vol.33, № 8. - P.1179-1183.

280. Dalla-Palma, L. The imaging of chronic renal infections / L. Dalla-Palma, F. Pozzi-Mucelli // Radiologe. 2000. - Vol.40, № 6. - P. 537-546.

281. Davis, B.D. Non-specific membrane permeability and aminoglycoside action / B.D. Davis // J. Antimicrob. Chemother. 1989. - Vol.24, №1. - P.77-96.

282. Differential activation of murene macrophages by angelan and LPS / Y.I. Jeon, S.B. Han, K.S. Ahn, H.M. Kim // Immunopharmacology. 2000. -Vol. 49. - P. 275-284.

283. Djeraba, A. in vivo macrophage activation in chickens with acemannan a complex carbohydrate extracted from Aloe vera / A. Djeraba, P. Quere // Int. I. Immunopharmacol. 2000. - Vol. 22. - P. 365-372.

284. Domagala, J.M. Structure-activity and structure-side-effect relationships for the quinolone antibacterials / J.M. Domagala I IJ Antimicrob Chemother. 1994. -Vol.33. - P. 685-706.

285. Doyle, S.E. Toll-like receptors induce a phagocytic gene program through p 38 / S.E. Doyle / J.Exp.Ved. 2004. - Vol.199. - P. 81-90.

286. Drugs elevation extracellular adenosine enhance cell cycling of hematopo-etic progenitor cells as inferred from the citotoxic effects of 5 fluoracil / M. Pospisil, M. Hojer, A: Vacer et al. // Exp. Hematol. - 2001. - Vol. 29, № 5.-P. 557-562.

287. Effect of ciprofloxacin on lethal and sublethal challenge with endotoxin and on early cytokine responses in a murine in vivo model / M. U. Purswani, S. J. Eckert, H. IC. Arota et al. // J Antimicrob Chemother. 2002. - Vol. 50,№1.-P. 51-58.

288. Effect of ß-lactamase inhibitors on normal immune capabilities and their interactions with staphylococcal pathogenicity / A.F. Tawfik, F.A. Al-Zamil, M.A. Lamadan, A.M. Shibl // J. Chemother. 1996. - Vol.8, №2. - P.l.

289. Effects of inhaled nitric oxide on regional blood flow are consistent with intravascular nitric oxide delivery / R. Cannon, A. Schechter, J. Panza et al. // J. Clin. Invest. 2001. - Vol. 108, № 2. - P. 279-287.

290. Effects of nitric oxide and nitric oxide donore on red blood cell oxyden transport / B. Hrinczenko, A. Alayash, D. Wink et al. // Br. J. Haematol. -2000.-Vol. 110.-P. 412-419.

291. Effects of S-nitrosation of hemoglobin on hypoxic pulmonary vasoconstriction and nitric oxide flux / S. Deem, M. Gladwin. J. Berg et al. Am. J. Respir. Crit. Med.-2001.-Vol. 163,№5.-P. 1164-1170.

292. Effects of trovafloxacin on the IE-l-dependent activation of E-selectin in. humane endothelial cells in vitro / S.M. Zakeri, H. Meyer, G. Meinhardt et al. // Tmmunopharmaco 1 ogy. 2000. - Vol. 48. - P. 27-34.

293. Ehrlich, P. Society for Chemotherapy and the German Respiratory Association. Rational treatment of bacterial respiratory tract infections / P. Ehrlich // Chemother J. 2000. - Vol.9. - P.3-23.

294. Emmerson, A.M. The quinolones: decades of development and use /А.М; Emmerson, A.M. Jones // J Antimicrob Chemother . 2003; - Vol.5 V. -P.1320. : ' . ' : ' ' • .Л

295. Enhanced repopulaiion of murine hematopoetic organs in sublethally irradiated mice after treatment with ciprofloxacin / Y. Kletter, I. Riklis, I. Shalit, I. Fabian // Blood. 1991. - Vol. 78. - P. 1685-1691.

296. Everaert, K. Diagnosis and localization of a complicated urinary tract: infection in neurogenic bladder by tubular proteinuria and scrum prostate specific antigen / K. Everaert // Spinal. Cord. 1998. - Vol.36* № 1.- P. 33-38.

297. Fluoroquinolone-biomembrane interaction at the DPPC/Pg lipid-bilayer interface / S. Merino, J: E. Varquez, O. Demenech et al. // Eangmuir. 2002. -Vol.18, №8.-P. 3288-3292.

298. Forsgren, A.A. 4-quinolone drugs affect cell cycle progression and function of human lymphocytes in vitro / A.A. Forsgren; S.F. Schlossman, T.F. Tedder //Antimicrob Agents Chemother; 1987. - Vol; 31. - P. 768-773; .

299. Foulds, G. The pharmacokinetics of azithromycin in human serum and tissue. / G. Foulds, R.M; Shepard, R.B. Johnson // Antimicrob Chemother. -1990.-Vol. 25.-P. 73-82.

300. Fresta, M. Combining molecular modeling with experimental methodologies: Mechanism of membrane permeation and accumulation of ofloxacin / M. Fresta// Bioorg'Med Chem. 2002. - Vol.10, №12. - P. 3871-3889.

301. Gophna, U.Yersinia HPI in septicemic Escherichia coli strains isolated from diverse hosts / U. Gophna // FEMS Microbiol Lett. -2003. №1- P.57.60. . •

302. Guibert, I. Bacteriology of urinary germs responsible of pyelonephritis /A. Guibert //Rev. Prat. -1993.-Vol.43, № 9. -P; 1081-1085.

303. Hamidi, M. In vitro characterization of human intact erythrocytes loaded by enalaprilat / M. Hamidi// Drug Delivery. 2001. - Vol.8 - P.231-237. •

304. Hauser, W.E. Effect of antibiotics on the immune response / W.E. Hauser, I.S. Bemington // Ainer. J. med. 1982. - Vol.72, №5. - P. 711-715.

305. Henry, Y. Interaction;of nitric oxide with hemoproteins: roles of nitric oxide in mitochondria7 Y. Henry, A. Cuissani // Cell. Mol. Life Sci. 1999. -Vol.55-P: 1003-1014.

306. Hooton, T.M; Diagnosis and treatment of uncomplicated urinary tract infection. / T.M. Hooton, W.E. Stamm // Infect Dis Clin North Am. 1997. -Vol.11.-P; 551-581.

307. Hooton, T.M. Acute uncomplicated cystitis in an era of increasing antibiotic resistance: A proposed approach to empirical therapy / T.M. Hooton // CID. 2004.- Vol. 39.- P. 75-80.

308. Hyatt, J.M. Pharmacodynamic modelling of risk factors for ciprofloxacin resistance in Pseudomonas eruginosa / J.M. Hyatt,. J.J. Schentag7/Infect Control Hosp Epidemiol. 2000. - Vol. 21 - P. 9-11.

309. Immunomodulatory effects of moxifloxacin in comparison to ciprofloxacin and G-CSF in a murine model of cyclophosphamide-induced leucotpenia / I. Shalit, Y. Kletter, D. Halperin et al. // Eur J Haematol. 2001. -Vol. 66, №5. -P. 287-296.

310. Interactions of a series of fluoroquinolone antibacterial drugs with the human cardiac K+ channel HERG / J. Kang, L. Wang, X.L. Chen et al. // Mol Farmacol.-2001.-Vol. 59, № l.-P. 122-126.

311. Kahlmeter, G. An international survey of the antimicrobial susceptibility of pathogens from uncomplicated urinary tract infections: The ECO-SENS Project / G. Kahlmeter // J. Antimicrob. Chemother. 2003. - Vol. 51. - P.69-76.

312. Kassir, K. Cytokine profiles of pediatric patients treated with antibiotics for pyelonephritis: potential therapeutic impact / K. Kassir // Clin. Diagn. Lab. Immunol. -2001. Vol. 8162. - P. 1060 - 1063.

313. Kelm, V. Endothenial dysfunction in human coronary circulation: relevance of the L-arginine NO path way / V. Kelm, J. Rath. // Basic. Res. Cardiol.-2001.-Vol. 96-P. 107-127.

314. Khomeriki, I. Study of the resistance to antimicrobial preparations and bacteriophagts in urological patients / I. Khomeriki //. Experimental and Clinical Medicine. 2006. - Vol.3. - P. 81.

315. Kinetics of the inhibition of mitochondrial respiration by NO / A. Koivis-tro, A. Matthias, G. Bronnikov, J. Nedirgad // FEBS Lett. 1997. - Vol. 417.-P. 75-80.

316. Kubin, R. Safety update of monofloxacin, a current review of clinical trials and post-marketing observational studes / R. Kubin, C. Reiter // Proc 40th ICAAC6. Toronto, 2000. - P. 477.

317. Kwon, G.S. Block copolymer micelles as long — circulating carriers for delivery of therapeutic and diagnostic agents / G.S. Kwon, K. Kataora // Drag Deliv. 1995. — Vol. 16. — P. 297 - 305.

318. Landi, L. Jujury of rat thymocytes caused by exogenous peroxyl radicals in vitro / L. Landi, M. Cipollone, L. Carbine // Biochemica et Biophysica Acta Biomembranes: - 1995;.- № 2. - P. 207 - 212:

319. Langtry, H.D. Levofloxacin: its use in infections of the respiratory tract, skin, soft tissues and urinary tract / H.D. Langtry, H.M. Lamb // Drugs.1998.-Vol. 56.-P. 487-515.•• " *\ . .

320. Le Gras, T. Nitric oxide production in the hypoxic lang / T. Le Gras, J.

321. McMartry // Am. J. Physiol. 2001. - Vol. 280, № 4. - P. L575-L582.

322. Levaquin, G.F.D. A Apporoval for Hospitall-Acquired Pneumonia / G.F.D. Levaquin. N. Y., 2002.

323. Lipsky, B.A. Fluoroquinolones, toxicity profile: a review focusing on newer agents / B.A. Lipsky, C.A. Baker // Clin Infect Dis. -1999. Vol. 28.-P. 352-364. *

324. Lode, H. Evidence of different profiles of side effects and drug- drug interactions among the quinolones- the. pharmacokinetic standpoint / H. Lode // Chemotherapy. 2001. - Vol. 47, № 3. - P. 24-31.

325. Maidannyk, V. The characteristics of lymphocyte membrane function in pyelonephritis patients /V. Maidannyk //Lik. Sprava. 1995. - P.85-88.

326. Mc Cracken, G.H. Clinical pharmacology of antimicrobial agents / G.H. Mc Cracken, B:J. Freij // Infectious diseases ofthe fetus and newborn infant / ed. J.S. Renington, J O. Klein. W.B. Saunders,Company, 1990. -P. 1020-1077.

327. Me Andrews, K.G. Jr. Aminoglycosid pharmacokinetics in Alaskan natives / K.G. Jr. Me Andrews // Amer. J. of Health Syst. Pharm. 1995. -Vol.52,№18.-P. 2015-2018.

328. Membrane-bound glyceraldehydes-s-phosphate dehydrogenase and, multiphasic erythrocyte sugar transport / R. Heard, Mi Diguette, A. Heard, A.

329. CaiTuthers // Rep. Physiol. 1998. - Vol. 83, № 2. - P. 195-202.

330. Meyburg, J. Decreased mechanical stability of neonatal red cells membrane quantified by measurement of the elastic area compressibility modulus / J. Meyburg, T. Bohler, O. Linkerkamp // Clin. Hem. Microcirc. 2000. -Vol. 22, №1.-P. 67-73.

331. Meydani, S.N. Antioxidants and immune response in aged persons: overview of present evidence / S.N. Meydani // Amer. J. of Clinic. Nutrition. -1995. Vol.62, №6. - P. 1462-1476.

332. Modulation of nitric oxide bioavailability by erythrocytes / K. Huang, T. Han, D. Hyduke et al // Proc. Nat. Acad. Sc. USA. 2001. - Vol. 98, №20. -P. 11771-11776.

333. Mulvey, M.A. Astablishment of a persistent Escherichia coli reservoir during the acute phase of a bladder infection /M.A. Mulvey, S.D. Joel, S.J. Hultgren // Infection Immunity. 2001. - №69. - P. 4572-4579.

334. Naber, K.G. Guidelines for the management of urinary and male genital tract infections / K.G. Naber // European Urology. 2001. - Vol.40, №5. - P. 576-588.

335. Naber, K.G. Optimal management of uncomplicated and comlicated urinary tract infection / K.G. Naber // Adv Clin Exp Med. 1998. - Vol.7. -P.41-46.

336. Nitric oxide donor properties of hydroxylurea in in patients with sickle cells disease / M. Gladwin, J. Shelmater, F. Ognibene et al. // Br. J. Haematol. 2002. - Vol. 6, №2. - P. 436-444.

337. Nitric oxide transport of sickle cell hemoglobin: where does in bind / M. Gladwin, F. Ognibence, I. Shelhamer et al. // Free. Radic. Res. 2001.2.-P. 175-180.

338. O'Donnell, J. Selecting drug regimens for urinary tract infection: current recommendations / J. O'Donnell, S. Gelone, E. Abrutyne // Infect Med. -2002.-№19. P. 14-22.

339. Patel, R. Biochemical aspects of the reaction of hemoglobin and NO. Implication for Hb-based blood substitutes / R. Patel // Free Radical. Biology and medicine. 2000. - Vol. 28, № 10. - P. 1518-1525.

340. Pedemonto, C. Ca~ stimulated ATFase from red cell membranes: studies in the kinetic mechanism / C. Pedemonto, H. Balengo // Comp. Biochem. and phisiol. - 1981. - № 3. - P. 559 - 564.

341. Peterson, L. R. Quinolone molecular structure — activity relationships: What we have learned about improving antimicrobial activity / L. R. Peterson. // Clin Infect Dis. 2001. -Vol. 33, № 3. - P. 180-186.

342. Pickering, WJ. Biochemical and hystologic finding in experimental pyelonephritis due ureaplasma urealyticum / WJ. Pickering, D.F. Brich, P. Kin-caid-Smith // Infect. Immun. 1990. - Vol. 58, № 10. - P. 3401-3406.

343. Polymer drugs and drug delivery systems / red. R.M. Ottenbrite, S. W. Kim. Boca Raton (Florida, USA): CRC Press. - 2002. - 212p.

344. Pospishil, Y.O. Antibiotic associated nephropathy /Y.O. Pospishil, T.M. Antonovich // Pol. J. Pathol.- 1996.- Vol. 47, № 1.- P. 13-17.

345. Practice guidelines for the management of community-acquired pneumonia in adults / J.M. Bartlett, S.F. Dowell, L.A. Mondell et al. // Clin Infect Dis. -2000. Vol. 31. - P. 347-382.

346. Priming of grepailoxacin on respiratory burst of human neutrophils — its possible mechanism / M. Niwa, Y. Kanamori, H. Matsuno et al. // J. Antim-icrob Chemother. 2002. - Vol. 50, №4. - P. 469-478.

347. Prins, J.M. Once versus thrice daily gentamycin in patients with serious infections / J.M. Prins // Lancet. 1993. - Vol. 341. - P. 335-339.

348. M. Shiohara, PiL. Wang, K. Ohura et al. // Int Immunopharmacology. -• 2001.-Volo. 1, jY« 2. — P. 179-187. ' .

349. Ramchandani, M. Possible animal origin of human-associated,, multidhig resistant, uropathogenic Escherichia coli / M. Ramchandani // CID. 2005.-Vol. 40.- P. 251-257.

350. Reduction of the NO — mediated response in the rat aorta by metallopor-/ phi sins / H. Vreman,S. Harnen, D. Stevenson, A. Bast;// Can. J. Physiol.

351. Pharmacol. 2000. - Vol.78. - P. 457-461. \

352. Riesbeck, K. A. Immunomodulating activity of quinolones: Review / K. A. Riesbeck // J Chemother. 20021 - Vol. 14, №1. - P. 3-12.

353. Roberts, J.A. Etiology and pathophysiology of pyelonephritis /J.A. Roberts //Kidney Dis.- 1991.- Vol.17, № 1.- P. 1.

354. Rod void, K.A. Pharmacokinetic and Pharmacodynamics of Fluoroquinolones / K.A. Rodvold, M. Neuhaser // Farmacotherapy. 2001; - Vol. 21. -P. 233-252.

355. Rubin, R.H. Urinary tract infaction, pyelonephritis and reflux nephropathy /R.H: Rubin, R.S. Cötran // The Kidney. Philadelphia: Saunders W.B. Company, 1996. - Vol.2.- P.1597-1654.

356. Rubinstein, E. History of quinolones and their side effects. Penetrationinternational; update on levofloxacin and ofloxacin / E. Rubinstein //Bio-medis Int Ltd. 2000. - Vol. 71.

357. Schneider, J. Einflüsse von. Antibiotika auf das Immunosystem / J. Schneider .// Therapiewoche.-1985. Bd.35, H.29. - S. 3477-3478.

358. Schubert, S. Higt-pathogenicity island of Yersinia pestis in enterobacteri-aceae isolated from blood culteres and urine samples: prevalence and functional expression / S. Schubert // Infectional Diseases.- 2000.- Vol.4.- P. 1268-1271.

359. Seedat, Y.K. Acute renal failure in blacks and Indians, in * South Afri-cacomarison after 10'years / Y.K. Seedat, B.C. Nathoo // Nephrol.- 1993. -Vol. 64.-P. 198-201.

360. Segal, A.W. Drag Carries in Biology and Medicine / A.W. Segal; ed. G. Gregoriadis. -N. Y., 2000: P. 155 - 166.

361. Song, I.Y. Induction of secretary and tumoricidal activies in peroneal macrophages by ginsan / I.Y. Song, S.K. Han, E.H. Son et al. // Int. Im-munopharmacol. 2002. - Vol. 2. - P. 857-865.

362. Springklee, M. Safety and tolerability profile of moxifloxacin / M. Springklee, C. Reither, J.M. Meyer // Clin Microbiol Infect. 1999. - Vol. 5, №3. - P. 140-145.

363. Tajerzadeh, H. Evaluation of the hypotonic preswelling method for encapsulation of enalaprilat in human intact erythrocytes / H. Tajerzadeh, M. Hamidi // Drug Devel. Ind. Pharm. 2000. - Vol.26. - P. 1247-1257^

364. Talwar, N. Erythrocytes as carriers of primaguin preparation: Characterization / N. Talwar, N.K. Jain // J. Control. Rel. - 1992. - Vol. 20. - P. 133 -142.

365. Telen, M. J'. The mature erythrocytes / M.J. Telen // Winthrob Clinical Hematology. 1993. - Vol. 9. - P. 101 - 133.

366. The link between sunshine and phototoxicity of sparfloxacin / C. Priefitte, R.J. Royer, N. Moore, B. Begaud // Br J Clin Farmacol. 2000. - Vol. 49, №6.-P. 609-612.

367. The most frequent aminoglycoside resistence mechanisms changes with time and geographic areata reflection of aminoglycoside us age patterns? / G.H. Miller, F.J. Sabatdli, R.S. Hare et al. // Clin. Infect. Dis. - 1997. -Vol.24, № l.-P. 46-52.

368. Tokunaga, S. An experimental5 model ascending pyelonephritis due to Candida albicans in rats / S. Tokunaga, M. Ohkawa, S. Nakamura // Myco-pathologya.- 1993.- Vol. 123, № 3.- P. 149-154.

369. Vitvitsky, V.M. Anion permeability and erythrocyte swelling / V.M. Vit-vitsky // Bioelectrochemistry. 2000. - Vol. 52, №2. - P. 169-176.

370. Wang, B. Drug delivery: principles and applications / B. Wang. Wiley, 2005. - 464p.

371. Warren, J. Long-term uretheral catherization increases risk of chronic pyelonephritis and renal inflammation / J. Warren // J.Amer. Geriatr. Soc- 1994. Vol.42, № 12. - P. 1286-1290.

372. Wise, G.J. Fungal infection of urinary tract / GJ. Wise // Campbell's Urology, 7-th ed. 1998. - Vol. 1. - P. 779-806.

373. Yagawa, K. Latest industry information on the safety profile of levoflox-acin in Japan / K. Yagawa // Chemotherapy. 2001. - Vol. 47, № 3. - P. 3843.

374. Yukawa, O. Biochemistry of the physiopathologic and clinical aspects of free radicals in radiation injuries / O. Yukawa, T. Narazawa // Nippon — Rensho. 1988. - Vol. 46, №10. - P. 2262 - 2268.

375. Zinner, S.H. Principles and practice of Infectious Diseases / S.H. Zinner, K.N. Mayer; ed. G.L., Mandel, J.E. Bennet, R. Dolin. 5th ed. - Philadelphia, 2000. - P. 394-404.

Оглавление диссертации Сипливый, Геннадий Вячеславович :: 2011 :: Курск

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Сипливый, Геннадий Вячеславович, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Сипливый, Геннадий Вячеславович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций