Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Эпидемиологический анализ заболеваемости сальмонеллезами тифимуриум и энтеритидис с использование микробиологических и молекулярно-биологических методов типирования

российская академия медицинских наук . - -

научно-исследовательский ордена трудового красного знамени институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика н. ф. гамалеи

На правах рукописи

РАШИДОВ АЗЕР МАМЕД оглы

ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗАМИ ТИФИМУРИУМ И ЭНТЕРИТИДИС С ИСПОЛЬЗОВАН И ЕМ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО — БИОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ТИПИРОВАНИЯ

14. 00. 30 — эпидемиология

АВТ О РЕФЕРД Т

диссертации на сонскание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА -

1992

Работа выполнена в Московской медицинской Академии им. И. М. Сеченова

Научный руководитель — доктор медицинских паук

Л. А. РЯПИС

Официальные оппоненты — доктор медицинских наук, профессор ю. Г. СУЧКОВ доктор медицинских наук, профессор С. А. ДРАТВИН

Ведущее учреждение: Центральный институт усовершенствования врачей л

■зашита состоится «. мащ 1992 г.

в _у у часов на заседании специализированного совета

Д 001. 07. 02. по присуждению ученой степени кандидата наук в Научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи РАМН (123098, Москва, ул. Гамалеи, 18).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН.

Автореферат разослан «_

1992

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

Н. Б. СИПАЧЁВА

Актуальность т-зга-i. Анализ отечественно'/, и зарубежной лгтзтотл*' свидетельствует, что в последнее десятилетне в большинстве стран мкра наблюдается отчетливая тенденция к росту заболеваемости сачь-'" монеллезаг.ш, особенно в зкононпчеекп развитых странах.

В 1935 году пряг.ме :: косвенные затраты на сальшноллоз в США - -составил:: 50 ют. долларов в год, (в средней экономический ущерб'от одного случаи садыдонеллеза в США составляет G45 долларов). Если учесть норегистрпруеше случаи салшонеллеза, а такт.о iraccamfi ущерб прошшлешгостл я народному хозяйству, то общ'ип затрат» составят до 1,4 шрд. долтаров ежегодно (coht.n к., т-иГко п.v'., г926} Tanya п., 1988). ста проблема актуальна такн? длт распубл;::? СНГ, где в настоящее время в этиологической структура оотрмк тстогасодя-$екцкЯ сальмоиеллез.чоК зтяолог;ш у людей доигшгрупт ftyrhi тлчпя я 3,ontorltidi;i. Рост совокупного сальпоноллоза, ооуеловлек- '

нъ'й ими, отлггчяется определенны-/! элндрмпологичесч.чм своеобразием.-Если в 70-х и начато 80-х годов увеличен::© удельно го тз?са сально-нелчезов среди всех гситсч.чых ин'>экц;;й ек."Эсвлзачо с раопростр'игепл-

ем ГОСПИТЛЛЬНОГО НЮНЯ 3.typhi rrurlun СО СЧЗЦЧ^ИЧССКЩЛ бПОЛОГИ-

чсск:'_мп своИотдат (яачпантвбиотякогозлетентяоот^, «отпплруемость фагагш Международно,! кэдчекцпи, принадлежность к олродел. -нопу бпо-:i фаговару ;; др.), то с серзд.иньГ 80-х годов наблюдается новый подъем заболеваемости, спязаяннЯ с ширэкмя распространением серотипл S.enteriti-Jip. В это же иремг» в южгасс регионах сохраняется

внсотп: уровень заболеваемости саш-'лонечлезом тп'ячдуриум в общей структуре заболеваемоста сачз-т5с.чплл»зп^Я (Попова П.П. и соавт., 19.Ч7; Еар;-:тг"-':й A.M., 1988; .'О'лессо В.A., I98S; Рот нот С. И. и coWVr. 1989).

- л -

ii последние годи в эгацтагслогии и микробиологии шдопцути новие чоицеацди, постул.1руюдио фооовно преобразования популяцкй воз-оудптелол кнфекц-моншк болезной (Беляков В.Д., 1983), их клонйль-цоо риспростршеикс (orsiwv F.,0rakc.vl.I983) к генетическую структурированность прокариот ( aeianaor et' si. 19&7)-Возникает потребность в использовании этих ойосядоши для анализа тех существенных изменен;:!!, которые происходят в эпидемиологии салъмонеллезов. В частности, в зависимости от конкретно!} эпидемиологической ситуации требуется уточнение и обоснование ооъема и содержания микробиологических и молекулярно-б;;ологпчески,{ методов адпирования в системе эпидемиологического надзора за инфекция:.",::, шзызаек.;ш a.typhimurii и 3«ontoritidis. Систематического изучения этой проблема в СНГ

не проведено, хотя за рубежом выполнены отделение исследования по I

КОглПЛОКСНОГЛу ':НШ1рОВаШГЮ ETEttMOB S.typhlmuriua.

. Цель ваботн. Оценка информативности результатов комплексного тяпирования s.typniuuriuB n's.enteritidia . при ирове

донии эпидемиологического анализа.

Задачи исследования.

1. Провести ретроспективный эпидемиологический анализ заболе-томсти салшонеллезами тифилуриум и энтеритидпе в Москве и Новомосковске'.

2. Изучить штамш S.typftinuriun и S.ar.toritidln микр биологическими и молекулярно-биологичеекгаи методами иоследовани

3. Разработать рациональную охему тмпироаашш ■ a.typhiicurium И fl.entsrltJdle,

4. Изучить механизм инфицирования населения сальмонеллами тифяцуриум и энтерит,;дис. ' '

5. Опр ¿делить объем и значимость методов типишвшшя в элвп мости от эпидемической ситуации.

Научная новизна. Впервые выявлена взаимосвязь мевду 'эзпдоМиоло-гическими показателями, микробиологическими и молекулярно-биологи-ческиии параметрами возбудителя при сальмонеллезах тифимуриум и эн-теритидис. Выявлены л обоснованы условно-члэнальнно (биовар и фаго-вар) и виутрнклоналыше (антибиотикевар п плазмидинй профиль) маркеры о.ъуръ; -шг1ия и О.епЬогШгЦэ, Впервые определена тактика типирования з интересах оипдсмкологпчсского анализа в зависимости от эпидемической ситуации. На основе иоеяго методического подхода выявлены механизмы инфицирования лидзй салылонеллезами тптигурнум и энтернтпдпе. • '

Практическая ценность. Разработана научно обосновгпнаА схема тнплровтння итагатаз п.ьурМшПип п з.о^егпша . в'зависимости от конкретной эпвдотчоской ситуации, пепользотпг.'о которой . способствует вскритш механизмов ¡ш^ицировагия люде!) я проведению • эпидемиологического надзора за ин1>е:<ц:'.ям'л, обусловчетшкч этими • сороткпамн сальмонелл.

Ызтерлзлк исследований внедрены з учебный процесс ка^дгн эпидемиологи:: К.?.!.Сеченова :: практику работе СЭС г. Новомосковска,

Апробпц-.с ггСотк. Дсзлертадяя апробирована на научи 1 коя-^эряя-цп ка'Лсдш опадеггтегяп ¡.Щ гга. К.М.Сеченова 26 сентября 1991 год?

Пуйт.чга'т-г'. Осяовши положения диссертации опубликованы в 3 »•лучшее етагьях.

Основное полотатае диссертации, выносимое на защиту.

Характеристика условно клокальннх я впутргаслональннх маркеров з.гурМт.игЬпг и з.г-л-гагШгИз и тактика их использо-

вания для эпидемиологического анализа.»

Структура к объем пнеевртацип. Диссертация состоит из введения, обзора л'-сгерату^п, четырех глав ■ собственных исследовании, заклвчо-

•-.е- '

ния, выводов и списка литературы. Работа изложена на 182 страницах кажшогшеного текста, иллюстрирована 12 рисункам и 67.таблица!,1ш. Би бл: j о г рай ич о ск ий указа!ель диссертации содержит 77 отечественных II. 189 зарубежных публикаций.

СОДЯРНШЕ ДИСЗЕРТЛЦИИ Матери^ли я мчтодн исследования. Работа виполнена б лаборатории научных основ упрааченля эплдемическлтл процессом при кафедре эпидемиологии Í-.Ш и/л. И.i-.!.Сеченова.

Иатешуит иоп.челпвпния. В работе использованы птамш сальмонел энтеритидис и аифгауриум, выделенные в I988-I99I годах от больных людей, носителей, из лицевых продуктов и объектов внешней сродо.

»

1 Всего изучено 226 и'таг.Елоп серотипа тифшлуриум, выдел зшшх в Моске1; и 371 штшлл ссроиша оптер.чтидас, изолированный в Москве и Новомосковска Тульской области.

• .В детской ишкичоской болышце ib 5 г. Москвы изучено 96 историй болезни больных салыЛонеллсзом тифимуриум, в детской клиничес кой больнице Jé 2 г. Баку - 160 историй болезни. В датской инфекционной больнице и в инфекционном отделении городской клиническое больницы г. Новомосковска проанализировано 217 истории болезни больных сальмокеллезом энтеритидис.

]1ри нроводенип эпидемиологического анализа использованы ежегодные отчеты о заболеваемости1 сальмоиеллеэами, карты эпидешоло гического обследования очага инфекционного заболевания', продост; лоннас С&О Москвы, Новомосковска и Баку. Изучены распределение í 'дукщш наличных птицефабрик Тульской области в Новомосковском районе, санитарное состояние птицефабрики "Ширино". lía наличие сальмонелле за у птиц провели исследование крови с пудлоро'зты а •сигеном у'304 яйцепосж кур (в возрасте 130 дней) местной иш:у бчц:и: и у ЦО бройлеров.

■Методика псс.телов'здяй. Для выявления лроявлс ••;:?! -эпгло'.тпчобкого. процесса применяли ретроспективный эпидемиологический анализ (Беляков В.Д. и соавт,, 1981). Для определения сезонного подъема' в группах населения с невысокими показателями заболеваемости испольг эовали спектральный анализ (Джснкянс Г., Ватте Д., I97I-I972; Корн Г., Корн Т., 1977). Данный метод широко используется в физике дня анализа амплитуды, частота и фазы колебательных процессов, но в целях эпидемиологического анализа не притенялся.

Микробиологические нотодн. Первоначально проводили биохгличес- . куп идентификацию, затем серотиплрование согласно актигейноднаг-носгической схемы- Кауфмана-Уайта с применением коммерческих агглкь ■ тлнируицях сывороток. '

Биотипирование штшжов 3.typhiniriuri и s.tvntfM-nidis :

проводили по общепринятой расширенной схеме. Чувствительность.к , -антибиотикам штаммов a.typhioiriua' .. определяли методом серийних.' ' разведений в мясо-пептонном агаре. Предел чувствительности кантк- ■ биотикам устанавливали в соответствии с "Инструктивночдетодичес- • -' клмп указаниями" МЗ РСФСР (1984). Определение чувствительности ытам- t мов s.enteritidia проводили согласно- руководству по исполь-1 ''

зованшо Микробиологического центра "Аваитай" {.'5 5939-26, Abbot хяЬо- . ratorJ es ciapnoBtica Division и^A,1933). Для <|>агот1ширования ШТам— '

мов ■ S.typhinirius, использовала две ехеш: Felix А. (1956),callow в.

- ' _ il?r->l). и Чпракадзе И.Г. и соавт. (1974). Фагогипировашю штаммов ä.entari-

tldfi' осуществляя!! ПО методу bnsslo V.O. et "el. (1905). "."■■

Молекулярно-биологяческие методы. Определение плазмиддой ДНК в культурах сачьмонелл проводили пое., Liu з.т. (1981)рестрик-', цию' плазкидной ДНК проводили по методике, описанной Manintia._T7"e't "Я

(1982). '';'•'.'■■.■•,'.'.. .' !

Статистическую обработку результатов проводили на компьютере-

1Вл1 РС А.Т о использованием пакета статистических программ агагягарЬ

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЖДОВЛ! [Ш

Проявления эпидемического процесса сальмсшелпезов, обуслоакшшх ЗсЛссгюИл гурМитиа. в ааШопеПа опЪегШй!» . ■ Проведен ретроспективный опидеыиологяческий анализ заболеваемости салылонеллезачи в Москве, Новомосковске и Баку, а также саль-ыонеллезамп тпфшлурнум я энтеритддис в Москве и Новомосковске, со. ответственно. ■' .

Уровень заболеваемости совокутшм сальмонеллезом в Баку по сред немдоголетним <1976-1990 гг.) показателям почтя в три раза вше, ч< в Москве и Новомосковске.' Что касается динамики, то в этот период ; времени произошло изменение заболеваемости сальмонеллезами. В Мос-^ кве и Новомосковске подъем заболеваемости приходится на 1985-1390 гг. Однако имеется .и отличие. Если в Москве в цеЛом уровень заболе ваеиостя в это время повышается постепенно, то в Новомосковске на-блвдается ее резкий подъем в точение одного эпидемического года (1985-1986),; В целом .в Москве в. многолетней, динамике заболеваемос можно выделить два периода: снижения со среднегодовым темпом -4,8 (1976-1985 хт.) и подъема со'среднегодовшл приростом 15,06. (19801990 гг») . ' : • : '

' В Боку, как и'в Москве, в целом*наблюдается умеренный спад (-4,1), который.в последцше 5 лет (1986-1990 гг.) был выраиеннш . (-11,08). - ; ..-..' л -

Анализ заболеваемости кишечными инфекциями неясной этиологии сальмонеллезами И дизентерией за 1981-1990 гг. (по-материалам Ба Новомосковска и некоторых городов Тульской области) показал, что ^ на сопредельных, территориях различия в истинной и регистрируемой заболеваемости сальмонеллезамп зависят только от качества лаборг

торной диагностики инфекции, а на разных территориях - от комплекса тракторов (качества лабораторной диагностики, социально-экономических и природно-климатических).

Б серопейзаже сальмонелл, выделенных от больных в Москве,Новомосковске я Баку, преобладали соротипн" s.tsphimuriun, п s.entoriti dio .Для всех трох территорий характерны тенденции нарастания заболеваемости сальмонеллезон энтерптндпе к снижения сальмонеллёзом тщшуриум.

В многолетней дцшамике заболеваемости сальмонеллёзрм тифиму-рпутл в Москве мозно выделить 2 периода: с 1976 по 1385 гг.,когда заболеваемость снизилась в 4,4 раза,я с IS85 по 1990 гг..когда заболеваемость стабилизировалась на низких показателях (6,3 ± 0,6 на 100000 населений).Снижение заболеваемости произошло за счёт детей (-16,2),причём наиболее заметно оно было в возрастной группе 0-2 лет (-19,1).Среди взрослых эта тенденция носила умеренный характер (+1,34).Однако по-пре:п1ему наиболее,порайонными оставались возрастные группы 0-2 лет и 3-6 лет.Возрастные группы 7-14 лет, . 15-19 лет,. 20-49 лет, 50 лот и старое были менее поранены.

Инфицирование детей и взрослых, но не внутри этих возрастных груйп, идёт относительно автоношо (R - 0,02) .Более порааёшше группы среди детей начинали сезонный лодъйм раньше па 2-3 месяца, чем менее пораненные.Так, начало эпидемического года у детой 0-2 лет приходилось на сентябрь-октябрь, 3-6 лет и 7-14 лет - ira декабрь.Яная ситуация наблюдается среда взрослых, где разброс в сроках начала эпидемического года составлял менее 1-го месяца,то есть моягпо било предполагать,что в эпидемический процесс они го-влекаются в одно и то se время.

По данным анализа S3 историй болезни детей, госпиталнзирован-ннх с дкагпозо;,: "салклояеллйз т;-«п!?фиум",13,54? составляла случаи

с Бнутриоольничнш.1 заражением. Б остальных случаях у детей и взрос лих болезнь чаще проявлялась в ваде легких форм гастроэнтерита, пг щрвол тассикок'.^ск!',г.и, либо бессимптомного носительства. Согласно ■ получотшм данник, парад подъемом заболеваемости сальшнеллсзом тифимуриум в Москве наблюдается сникение частоти встречаемости но ' сительства л наоборот. Ясли для заболеваемости начало эпидемического года приходится на ноябрь-декабрь, то увеличение частоты веч чаемости носительства - на ипль-август.

Различия в уровнях и тенденциях заболеваемости отдельных воз растннх групп,. отсутствие корреляции в них, а такхе разброс в ср ках начата эпидемического года свидетельствуют о том, что фактор риска в пределах Москвп в различных группах населения действуют неравномерно.- Это дает основание предположить наличие зоонозггаг< и аитропонозного резервуаров , циркуляцию нескольких клоналыш линий ("антроцопозкых" и "зоопоэных") возбудителей в период низ кех показателей заболеваемости сальмоиеллезоы ткутамуриум, авто! • нсоть инфицирования детского и взрослого населения и доминировг амшонтарного пути заражения при этой инфекции.

"' Гйюгодетняя динамика заболеваемости саяьмонеллезом энтерит дно в Новомосковске имеет выраженную тенден- .) к росту (+22,?) Эта тенденция достоверна для возрастних групп 3-6 лет, 20-49 и 50 лег' и старце. Причем урозонь заболеваемости достоверно В1 1 в возрастной труппе 20-49 лет, в то время как среди лиц 50 ло я старше заболеваемость достоверно нике, чем в возрастной гру 20-49 лет, но достоверно выше, чей в других возрастных группа Показатели эаболэваемости салъыолеллезом эитеритидис ъ воэрас ■ ' группах 0-2 лет,-3-6 лет, 7-14;лот и' 15-19 лет достоверно нй ' яачададь. ' . ^ •г: •

Коэффициент корШадц -й миму величинами интенсивной заба

- н -

мости у детей и взрослых по годам за 1986-1990тг. р:йсн 0,852, , что свидетельствует об отсутствии автономности в процессе инТпщи-ровання этих возрастных групп з отличие от сачьмонеллеза т:ф:муриум. Положительные корреляции установлены также между /ровнями заболеваемости в различных возрастных группах. Начата эпидемического года в отдельных возрастных группах достоверно не отличалось от такового совокупного населения, поскольку все возрастные группы вовлекались в эпидемический.процесс одновременно.

Сравнительный эпидемиологический анализ уровней заболеваемости сачьмонеллезами энгеритядпе и тифимуриум в различных- социа^но-воэ-растннх группах за период 1976-1989 гг. в Новомосковске показал, что имеющий место при инфицировании езльмеяеллезом тнфгмур'иу-л контактно-бытовой путь передачи менее значителен при сягспивдвадв он-'терктидис. При сатьмонэхдезе энтер.чтндпе чаце предполагается алиментарный путь заражения, а сама инфекция клинически протекает, в основном, как пнцевач токсикоинфскцпя.

При анализе 217 учеишх фор:.? .4 171 "Карта эштдемкояогичпехого обследования очага килечного инфекционного заболевания" боле?, чем в половине случаев фактор передачи-установить не удалось и- .5 £ 3,4%). Из расшифрованных случаев оснспнач доля преходилась на * яйца и яйцепредуктц (36 - 3,3%) л кур (5,1 - 2,6). На контакт с сатьмонеллпзннм больным указало 1,8 - 1,3% больных. При сборе эпидемиологического анамнеза достоверно болыде больных указало на яйца л яйцепродуктн, чем на друтпе факторы передачи. Анатаз поступления продуктов питания (яйца, яйцелродукты к птица) за 1989 г. в Новомосковске, а такне положительные результаты (6,4$) серологического исследования ПО бройлеров позволили предположить, что инфицирование населения города.происходит в значительной степени от продукции, получаемой на местной птицефабрике "Шарага»". Рто лредполоке-■

'кие согласуется с данными литературных источников, где 'рост заболеваемости сальмонеллез'ами связывается с продукцией птицефабрик. Б частности, по данным ряда исследователей, штаммы u.untoritidia способны передаваться трансоваркально (Holder а., 1969; Earrow p.a., 1991), что резко увеличивает риск заражения населения при употреблении яиц (Чсркаоог.ий Б.Л. И соавт. I99I;Tnoaua A.D,I92'9;nair,pUng А.

et г.

1989). Доказано также значение цыплят и кур, как факторов передачи при спорадической и вспшиечной заболеваемости (Облапенко Г.П. и соавт., 1991; Muldar H.W., I9SS; WHO Tech.Report Gor. Mo 7'i"*, 1988).

Однонаправленная тенденция заболеваемости, одновременное вовло ченкс всех возрастных групп в эпидемический процесс, отсутствие ■ автономности в инфицировании детей и взрослых, свидетельствуют о том, ч^о факторы риска в пределах Новомосковска в различных группа населения^ действуют равномерно. Зто позволяю предположить наличие , единого зоонозного резервуара возбудители и доминирование.алиментарного пути заражения. •

. : ' Типирование штаммов S.typhlir.urlum И E.e'ntoritUla

с помощью микробиологических и молекулярно-' ; , биологических мет. , ,ов

Выявление реальных механизмов развития эпидемического процесс, основывается не только ка эпидемиологическом анализе заболеваемос ти, ко и на тппировашш возбудителя. .

Данные литературы о стабильности шркеров сальмонелл противоречивы (Худченхо Г.В., 1987; Грация Диас Сильва, 1988;l© Minor L. . IS88; Barfeer r.m., old D,c., 1989). -

До настоящего времени роль, место л значимость этих признаков возбудчтелт, испсшьз^ошх для типирования в интересах эпидемиологического анализа, четко не обоснованы. Нами решение этой пробле ш проведено в рамках клональной концепции в микробиологии, эпид

миологии и таксономии (crekov г., Oraiiov I ЛГ'бЗ), теории с;>гдарегу-ЛЯЦЕИ паразптарвах систем (Беляков В.Д. и соапт., I2U7) и представлений о генетической структурированности прокариот ( solandor n.K.d-al. 1967). При этом исходили из того, что бактериальные виды состоят, из дискретных по генотипу стабильных клоповых линий, роиембинмц/н иекду которыми родда, а клон представляет собой группу генетически идентичных иля почти идентичных клеток, которые про изо,"шп из oöajoil родительской клетки и не претерпели хромосомной рекомбинации. Соответственно, при'анализе mvcpr-лаов полагали, что в понуляшых микроорганизмов анализируют- совокупность не особой, а клопов и что совокупности "родственных" клонов образуют адаптирующиеся "литы" микроорганизмов.

Для дифференциации клонов разных линяй и регист]>ацпп процесс.")» стенотипической адаптации использовали термины: "условно-клонплмшН" и "внутриклональный" маркер. К условно-клонольшш маркерам относили стабильные признаки, обычно используемые для типированил. й внутриклоцальным маркерам причисляли признаки, имеющие япно вно-хроыосоглный контроль и подвергающиеся адаптационной измепчивоотп в пределах нормы реакции фенотипа (идиотина).

В опытах использовали 226 штаммов 3»t.yphlü.uriura, выделении.:: в 1988-1989 гг. з Москве а период епдакеная саболотемости, 157 иг и-поз a.onterltldis, изолированных в I'iö9-I990 гг. а Попомос: в период подъема заболеваемости, а также 132 всиышечных и 82 и; радических штамма s.ententidiü, выделенных п Москве.

В процессе к'емплаксноге тштровакпя штаммов a.typhic-jrvum было выявлено II наиболее чадто пстречаияпхоя условных клонон: ? (<31!СБар)/43 (фзгозар), 7/ZÖ, 7/32, 7/25, 25/43, :'!.'3/йи, /2ь, Г,/П. 6/20,6/25, й/32, которые составили около 40Л всех ¡ющо'я'.тн.ш культур. С учетом антиби'ткоррзкотйягности, еостььа :u.-i идя,, sj-n. ■

тур и данных эпидемиологического 'анализа больных, от которых микроорганизмы были изолированы, выделены в три группы клонов.

В 1-ую группу вошли штамма условных клонов 7/43, 6/43, 6/32, которые обусловливали и болезнь, и носительство, поракаяи равно как детей, Tejí и взрослых, не вызывали госшиалыю-приобротенного саль-монсллеза и в 42,9 - 8,6? случаев были полкрезистен^ными. Наиболее часто встречающимися плазмяднымя профилями били 60,0 Мд и 60,0; 4,0; 3,0 Мд, либо штаммы были бесплазмидными. Учитывая все это, монно утверждать, что в данную группу вокли штата-, "зоонознш;" клонов.

Штаммы клонов 7/20, 25/20, 6/20 и 25/25 составили И группу, которые обусловливали как госпятально-приобретешгай, так и вне-госпитальный сальмокеллез, не вызывали носительотва и поражали исключительно детский контингент. В этой группе наибольший удельный вес полнрезистентных культур .(84,6 - 9,6$). Плазмидные профиля этих культур характеризовались наличием крупных плазмнд (96,0-либо 65,0 Мд), по отличались по набору мелких плазмид. Совокупность полученных .материалов и данных литературы о способности нлазмид обусловливать локальную адаптацию популяций возбудителя позволяет полагать, что П группа представлена шташами, способт "ми к контактной передаче с;еда детей ("антропонозные клоны") пре имущественно за счет модификации идиотипа возбудителя.

Штаммы клонов 25/43 , 7/25 , 7/32 , 6/25, выделенные в Ш групщ по анализируемым критериям обладали отдельными свойствами итавш I и II групп.

Все три группы по антибиотиковарам и плазмидяому профили бы достаточно гетерогенными. Тем не менее плаэмидный профиль оказа ся бзл^о информативным йаркерогл, нежели антибпотпковар.

Комплексное типированге штаммов s.typhinuriuB показало.

в период выроненной тенденция к сно.;\у и низких показателен заболеваемости цяркулноукхчло атанаы достаточно- го?<?рогоннн. Том не менее", правильная ¡к группировка позволяла объяснить результата эпидемиологического анализа.

Автономность процесса инфицирования у детей и взрослых, но но внутри этих групп, можно считать явлением, связанным с отличительными свойствами штаммов 1-й ¡i il-ü групп. Однако, эта автономность относитольпая, поскольку £-ая' ч я-я группн итишоз порахапт :гак детей, »ах и взрослых. Бее три группы птявкоп скалогйчоски пргчя-заяы к датскому контингенту, сбозалчавая его частуо нордаа'й.'.п'ггь к более раннее начало эпидемического года.

Комплексный анализ своими штаммов, многократно изолированных от больных л носителей, позволил выделить два типа маркеров: стабильные (условно-клокалышз) и лабильные (внутриклоналыше). Услов-но-клоналышми>маряврамл оказались бповар и ^¡аговар возбудителя, а внутриклоналышми - антибиотпковар и плазиндныя профиль. В период низких показателей заболеваемости сальмонёллезямп целесообразно ориентироваться в основном па стабильные маркеры.

Вопросу комплексного тииировашш штампов a.onteritidld, я ov-личие от 3.typhitsupiuo, посвящено значительно мопшо работ. Г>т<< связано с тем, что в большинстве стрш мирт. рост заболевав!исти сальмонеллезсм энтеритйдис был отмечен только с середины Si'-x родов. За; последние го ад разработано несколько ехм гуюотяш^пич -иия S.entoriildjs Uttaalo V.O. et ál», Г085; Alonso R, at al., 19:171 Vflrd L.R. ot al., 19 38). Схема бнотйпированкя O.ar.terl Lidia ,(,, разработана. В этой связи наш апробирована сх^мч с.югялирллшн.:, лрЬленлер&п для a.typhiaariua, показавшая юъутЪ nt- ívpop-::rr'v*-TV -кетй »JvíeKT. В_ исслеповл!!!'.«, пройадеше«' за рубежом, ■йчгтги:!:!;^-ваяяе ойазгмго'аь болен чтв ;тг..Л'олышм методом, чем типпровниче jk.

плазмндному профили (Throrr.il Е.,1. о'ъ а!., 1989). Это связано с тем, что большинство штатов з.епгсгтсИв несут только серо-варспсцифическуга плаэмиду 38,0 Ыд (макапига к. еь я1., 1985; Сц118 Л, 1990). Комплексное тилированле штатов ¡з.епЮгШдИя с ус-• похом бшю применено для эпидемиологического анализа таете отечественными авторами (Черкасский Б.Л. и соавт., 1991; Ойлапенко Г.П. и соавт., 1991). Однако в указанных работах нет анализа стабильности маркеров, составляющих клопальную формулу, что но позволило разработать рациональную схему типирования штаммов з.епгегт-ио.

Проведеншгй комплексный анализ показал, что штаммы к.епгепиа! фепотипически менее гетерогепны, чем З,гурытиг1ии. При разделения пх по биоуфаговаргу, было выявлено 3 наиболее часто встречающихся условных клона, которые составили 82,55? всех исследованных культур. Чадо всего наделялись клоны 5/6 (53,1$), 5/1 (32,7$) к 6/6 (14,2$). Из пищевых продуктози объектов внешней среды также чаще выделялся клон 5/6. Клоны 5/1 и 6/6 встречались реже.

Как от больных и носителей, так и из объектов внешней среды и пищевых продуктов выделялись штаммы линий, отличающиеся только по микробиологическим свойствам (в основном по био/фаговаргу). Результаты исследования также свидетельствуют о том, что штаммы одно .го я того же биовара я фаговара могли отличаться по устойчивости к антибиотикам п профилю плазмвд.

Полученные данные дали основание утверждать, что на территория

Новомосковска циркулируют 3 наиболее часто встречающиеся клояовые*

линии, возбудитсля'я.гпЬвгтат . "зоонозного" происхождения. Эпи-

дс!.,!,.олого-!.ш1:т»(?иологический анализ свидетельствовал о тесной свя-

0

зн элаз.-'отическрго процесса и процесса инфицирования лщеи. Эти результаты ггг.схс-подтвердили ранее выдвинутое предположения о до-■ .гг1,.р..н:г; ал:::.:онт:1рюго.дута Заражения, о Атст^р^г п.'рэдачй

(яйца, яйцзпродукти и птаца) о ед'шса зоонозном резервуара ипфокцпя (птицефабрика "Ширппо").

Копш1с;:снай шшиз свойств штаммов s.ontorltidln многократно выделенных от больных и носителей в Новомосковске, а такш» изолированных во BpcsM спор-щйчсско!! и пешииечной оабааовпомоств, позволил придти к впв-Аду, что бковлр я фагопар являются стчбилыю'ли услоыюноюп:ш>ш1мк .маркерами, а гштпбпотнковар и плазммдшш спектр

- лабклышмя, внутриклоначьтп::-:. Иранцяшк'.лыга ловим является положение, что штшлми, отличаюццосл по внугриклоналыиш маркерам, по которш даМюрекциируются различные вспышки в период писоких показателей заболеваемости, могут принадлежать к 'одной ¡слоновой линчи

и происходить из единого резервуара возбудителя, а наблюдаемые различия таких культур могут возникать вследствие протекающих в локальных популяциях процессовадаптации:на уровне фенотийа и (или) идиотина.

В дополнение к микробиологически методам типпроващщ и плпз-мидному анализу при анализе иташов s.enteritidie. нами исполь-зовап метод рестрикции ■ плазмядной ДНК» Профиль рестриктов плаэмид-

- ной ДНК. изучен у 14 штаммов,. виделенних от больных, носителей и из объектов'внешней среда в Новомосковске, а также'у 13 штаг®гсв, выделенных при вспышке, в детском саду . 16 1200 Черемушкинского района г. Москвы. Штаммы s.eritoriUdis, выделенные вовремя вешлаки, не отличалась по всем изученным'свойствам: они принадлежали к ¿повару 5, фаговару I, были резистентны казлоцаллину и имели одинаковый 'плазмздный' профиль (38,0; 3,0; 2,8; 1.7 (,1д). Штаыш, изолированные^ время спорадической заболеваемости, отличались по ртим свойствам, причем степень.гетерогенности по фаговару, антибиотик-) -вару-и плазмидному профилю была пае (4-6 вариантов на А ятаигг-н), чем по биовару (2 варианта на 14 штагаоп). Все "спорадические"

.геамма содержали общую плазмиду с молекулярной массой 38,0. ЭДц-Ферментативное расщепление плазмидной ДНК изучаемых штаммов показало, что профили растриков плазмиды 38,0 Мд,. выявленной у всех штаммов, были одинаковыми. Различия в рестрикционных профилях обнаружили у штаммов, отличающихся по составу плазмвд. Это дает основание полагать, что для эпидемиологического анализа рестрикцио1 ный анализ плазмидной ДНК не имеет существенных преимуществ пере; скринингом плазмвд-за исключением случаев, когда штамм содержит. олазш!ды большой молекулярной массы.

Таким образом, эпидемиологический анализ заболеваемости саль монеллезавд! тифкдуриум и энтеритидис позволил выдвинуть гштотозь относительно резервуаров возбудителей я механизмов инфицирование населения. С помощью нового подхода квитированию, основанного I представлешшх о клональной структурез.гурМгаиг1ит и а.впъегхиа и ориентированного на анализ клональшх и внутриклоналышх марго ов, подтверждены основные выводы ароведещого эпидемиологическо: анализа, выявлены наиболее значимые в инфекционной патологии, гр пы клонов этих серотияов и механизмы инфицирования людей. Преда жена научно-обоснованная тактика тяпирования а.ЬурЫюигИш и з г1ий1в, применение которой будет способствовать повышению эфф« тивности эпидемиологического надзора за вызываемыми ими сальмо-неллезами.

.ВЫВОДЫ

I.' На изученных территориях (Москва, Новомосковск) установ рост совокупной заболеваемости сальмонеллезагя;, изменение их э логической структуры, обусловленные нарастанием тенденции забс -ЛСМ15Т1Г слчькокеллезом энтеритидис и-сшиениом - сальмонелле^ тп.'^туппут.!. ■..'■•. -■-..-".■' .'■•.■.

2. Заболеваемость сальмонеллезом в '.'оо.чгго характе-

ризуется выракенной тонпетдаои.к вшиенко заболеваемости -за счет детских групп насояония, iian:jnw4 автономности в инфицировании • детой и резккмя различиями в воачвчс-ииа лйц пса--: позрастпих групп в эпидемический прсцосс, что опидотельствуо.? о сзрашталорном действии факторов риска заболевания салилонедлезом тпф'.муриутл в пределах Косквн в различай* группах ¡¡послания. Уе-га.чоалоно преобладание алиментарного нуга зарагопия в ¡у^щкроззя»» населения. •

3. Показано, что для заболеваемости салш'яселлезогл онторпти-дас в Новомосковске характерна: выргсхеипгл тоцаешшл иоды-ма заболеваемости, одновременное вовлечение всех возрастных групп, • отсутствие автономности в инфицировании .¡».стой, что указывает на равномерность действия факторов риска, йгидемиологичееким акии-

установлен алимонтпраыЗ путь зарааония, а фактор««! церодачи-яйца, яйцепродукты и мясо птиц.

4.*1!а основании стабильности признаков, обычно испсльзуошх для типирования a.typM-^uriun . и s.cntormdio, сформулировано представление об условпо-гслоналышх и внутрлзслональних маркерах. К уатовио-клоиалышм маркорам огив саны биовар и фагштр, а внутриклоцачышм - плазмлддшй профиль и антибио.тикогрлг.ма.

5. Разработана принципиальная схема тнпнрсьанпя штам.юв зл.у.ь rcuriua ¡Ia.onteritidia. Установлено, что при'высоких показателл:-: v болеваекостн помимо Ояо- а фдгетипировакил необходимо прим*н<..ш-.> антибиотикотппирозапия и скрининга пяадгящ, а при низких - достаточно использовать бно- и фаго'лшвропанав.

6. Применение нового подхода к типпровацни, основанного ¡г; ■'•пределекии условно-клоналънцх и внутрнклинаиних марке!;,:;», .\т,-»•оляот выявлять доминирующие группы клоно» S.typhi^ari'« и J.jnt-rlbidie, 'рзалы.ад механизмы кщ.мцтривпши лил;Л, что ,

собствовать повышению эффективности эпидемиологического надзора за сальмонеллезами тифщуриум и онтсриткдис.

СПИСОК РАБОТ, 01ГУБЖ0ВАШШ ПО ТЕГЛЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Рашидов A.M. Комплексное типирование штаммов 3.tj-nhis!urlub //Тезисы докладов. Всесоюзная, научная конференция молодых ученых и специалистов. - Баку, 1991. - с. 88-90.

2. Ретроспективный эпидемиологический анализ заболеваемости сальмонеляезом тлфилуриум в г. Москве /Рашдов A.M., Герасимов А.Н Рялис Л.Л. и др. //Сб. научных трудов. Вопросы „.шдемиологяя, гигиены и профессиональных заболеваний.- Баку, 1991.- с.10-12.

3. Сравнительная характеристика биологических свойств иташбв сальмонеллы ткфчмуриум, выделенных в г. Москве от носителей и больных /Раашдов A.M., Христинина O.A., Рсжнова С.Ш. я др. //Сб. научных трудов. Вопросы эпидемиологии, гигиены и профессиональных заболеваний. - Баку, 1991.- с.20-21 '.