Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6-го типа

Калугина, Мария Юрьевна

Диссертации по медицине → Эпидемиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6-го типа

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Калугина, Мария Юрьевна Москва 2009 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.30

Автореферат диссертации по медицине на тему Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6-го типа

00340237В

На правах рукописи

Калугина Мария Юрьевна

ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИНФЕКЦИИ, ВЫЗВАННОЙ ВИРУСОМ ГЕРПЕСА ЧЕЛОВЕКА 6-ГО ТИПА

14.00.30-«эпидемиология»

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2009

003482376

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени почётного академика Н.Ф. Гамалеи РАМН

Научный руководитель:

доктор биологических наук

Каражас Наталия Владимировна

Официальные оппоненты:

Заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор Сергеева Тамара Ивановна доктор медицинских наук, профессор Селькова Евгения Петровна

Ведущая организация: ГОУ ВПО Российская медицинская академия последипломного образования (РМАПО) Минздравсоцразвития

Защита диссертации состоится « 20 » ноября 2009г. в 1100 часов на заседании диссертационного совета Д 001.07.02 в НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д.18).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН.

Автореферат разослан « 19 » октября 2009г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета доктор медицинских наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Герпесвирусы широко распространены в человеческой популяции, пан-тропны, способны поражать все органы и системы организма хозяина, вызывая латентную, острую и хроническую формы инфекции. Количество лиц с иммунодефицитами разной природы (ВИЧ - инфицированные, пациенты после трансплантации органов и костного мозга, онкологические больные и др.), на фоне которых герпетические инфекции являются оппортунистическими, постоянно возрастает, поэтому изучение особенностей клинических проявлений, диагностики, терапии и профилактики герпесвирусных инфекций у таких людей имеет важное значение. Наименее изучена инфекция, вызываемая ВГЧ-6 (ВГЧИ-6), которая способна поражать больных с иммунодефицитами различной природы (Баринский И.Ф., 1992; Долгих М.С., 2001; Исаков В.А., 2006; Панченко Л.А., 1999; Akashi К. 1993). Вирусы герпеса способны пожизненно персистировать в организме, формируя нестерильный иммунитет. При этих заболеваниях развиваются иммунодефицитные состояния, обусловленные недостаточностью различных звеньев иммунной системы и ее неспособностью элиминировать вирус из организма. Сохраняющиеся в течение всей жизни вируснейтрализующие антитела не предупреждают возникновение рецидивов (Баринский И.Ф., 1992). Уже не вызывает сомнения неблагоприятное влияние герпетических инфекций на течение беременности и родов, патологию плода и новорожденных.

Эпидемиологический надзор за герпетическими инфекциями в полном объеме (учет абсолютного числа заболевших и заболеваемости в интенсивных показателях, выявление факторов и групп риска, проведение противоэпидемических и профилактических мероприятий) осуществляется только в отношении официально регистрируемых герпесвирусных инфекций (ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз, генитальный герпес). Другие формы герпесвирусных инфекций не регистрируются, поэтому противоэпидемические мероприятия проводятся весьма ограниченно. В отношении инфекции, вызванной ВГЧ-6, система эпиднадзора пока не сформирована из-за трудности диагностики и учета этой инфекции, разнообразия её клинических проявлений и отсутствия мер специфической профилактики (Баринский И.Ф., 1992; Каражас Н.В., 2002; Исаков В.А., 2004).

Из 8-ми известных типов герпесвирусов, вирус герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-6), выделенный в 1986г., по патогенетическим свойствам недостаточно изучен. Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной этим вирусом, также малоизвестны. Предполагается участие ВГЧ-6 в этиологии рака, хронических заболеваний ЦНС, рассеянного склероза, синдрома хронической усталости, внезапных экзантем у детей (Палецкая Т.Ф. и др., 1998; Komaroff A.L., Bucwald D.S., 1998). Однако существуют сложности в дифференциации причины и следствия, необходимых для окончательного установления роли ВГЧ-6 в патогенезе этих заболеваний. В последние годы за рубежом активно изучают различные аспекты эпидемиологии, клиники и

профилактики инфекций, вызванных относительно мало известными герпес-вирусами человека - ВГЧ-6, ВГЧ-7 и ВГЧ-8 (вирус саркомы Капоши) (Ward K.N., 2005). В настоящее время российские производители диагностических тест-систем выпускают только наборы для выявления антител класса IgG к ВГЧ-6. Из-за высокой рыночной стоимости импортные тест-системы практически недоступны отечественному здравоохранению, что не только затрудняет своевременную и правильную диагностику ВГЧ-6-инфекции, но и не позволяет проводить эпидемиологические исследования.

В настоящее время среди коммерческих диагностических тест-систем практическому здравоохранению доступно только выявление антител класса IgG и ДНК вируса, что не всегда свидетельствует об острой инфекции. Метод культуры клеток, позволяющий выявлять ранние антигены ВГЧ-6 и репродукцию вируса, а также культивирование ВГЧ-6 на различных питательных средах описано только в научной литературе (Yasuko Mori, Masato Koike, Eiko Moriishi, 2008). Учитывая вышеизложенное, необходимо создание и внедрение в практику отечественных высокоэффективных лабораторных методов диагностики ВГЧ-6-инфекции.

Цель и задачи исследования

Цель работы: изучение эпидемиологических характеристик инфекции, вызванной ВГЧ-6: определение широты территориального распространения ее в России, выявление наиболее поражаемых контингентов (групп риска), выяснение возможной связи с другими ГИ в целях обоснования противоэпидемических и профилактических мероприятий в отношении ВГЧ-6-инфекции.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

1. Разработать экспериментальную диагностическую тест-систему на основе метода непрямой иммунофлюоресценции для определения антигенов ВГЧ-6 в биологических материалах человека.

2. Определить частоту выявления маркеров ВГЧ-6-инфекции среди населения отдельных городов России с помощью серологического метода (ИФА).

3. Установить частоту встречаемости признаков ВГЧ-6-инфекции и других ГИ у детей с внезапными экзантемами и с неонатальной патологией.

4. Определить признаки ВГЧ-6-инфекции у лиц с иммунодефицитными состояниями различной природы на стадии вторичных осложнений.

5. Определить инфицированность ВГЧ-6 лиц с болезнью Шегрена.

6. Выявить признаки ВГЧ-6-инфекции у взрослых больных с депрессиями и детей с задержкой психомоторного развития.

7. Выявить частоту наличия маркеров ВГЧ-6-инфекции среди медицинского персонала стационаров различного профиля.

8. Разработать алгоритм диагностики инфекции, вызванной ВГЧ-6.

Научная новизна

1. Разработана экспериментальная диагностическая тест-система на основе метода непрямой иммунофлюоресценции для выявления антигенов ВГЧ-6, позволяющая диагностировать активную форму инфекции.

2. Показана высокая частота выявления маркеров ВГЧ-6 (от 71,2% до 93,8%) среди населения разных городов России. Не выявлено различий в числе серопозитивных среди мужчин и женщин.

3. Впервые определены признаки инфицирования ВГЧ-6 у детей с «внезапными экзантемами» и с «иммунными нейтропениями». Показано присутствие в биологических материалах новорожденных, погибших от тяжелой неонатальной патологии, маркеров ВГЧ-6, а также ВЭБ, ЦМВ и вируса краснухи, что позволяет предположить возможное участие этих возбудителей в патогенезе неонатальной патологии. Антигены ВГЧ-6 были обнаружены в тканях печени (15,2%), сердца (19,0%) и головного мозга (23,8%).

4. Определены признаки острой и латентной инфекции, вызванной ВГЧ-6, у ВИЧ-инфицированных (от 52,6% до 55,4%), больных с гемобластозами (от 5,0% до 25,0%), у лиц с болезнью Шегрена (57,5%).

5. Впервые выявлены маркеры острой (от 17,1% до 31,4%) и латентной (от 31,4% до 57,1%) ВГЧ-6-инфекции у медицинского персонала различных стационаров, что дает основание отнести обследованный медперсонал к группе риска по инфицированию ВГЧ-6.

6. Впервые разработан алгоритм лабораторной диагностики ВГЧ-6 инфекции.

Практическая значимость

■ Разработана экспериментальная диагностическая тест-система на основе НРИФ для диагностики антигенов ВГЧ-6 в биологических материалах.

■ Разработан алгоритм лабораторной диагностики ВГЧ-6-инфекции.

■ По результатам работы опубликованы и утверждены в 2007 г. Департаментом здравоохранения г. Москвы Методические указания «Герпесвирус-ная инфекция». Материалы диссертации используются при чтении лекций на кафедрах эпидемиологии РМАПО Росздрава и инфектологии ММА им. И.М. Сеченова. Подготовлены и опубликованы Методические указания «Инфекция, вызванная вирусом герпеса человека 6-го типа (эпидемиология, клиника и диагностика)», утвержденные на совете по внедрению научных достижений в практику НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН (протокол №2 от 26.06.2008г.).

Внедрение результатов диссертационной работы в практику

ломного образования (утверждено Комитетом Здравоохранения при правительстве Москвы), 2007 год. Материалы диссертации используются в лекциях по курсу эпидемиологии на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии ММА им. Сеченова И.М., на кафедре эпидемиологии РМАПО, на кафедре детских инфекционных болезней и кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии РГМУ.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: {°} II Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье», Рязань 2007г.;

II Международном молодежном медицинском Конгрессе "Санкт-Петербургские научные чтения", Санкт-Петербург, 2007г.; 0 Всероссийской научной конференции, посвященной 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» «Диагностика, лечение и профилактика опасных и особо опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология», Киров, 2008г.;

0 Научных конференциях отдела эпидемиологии НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи РАМН (протокол №17), Москва, 2008г. Апробация диссертационной работы состоялась 03.06.2009г на научной конференции отдела эпидемиологии ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (протокол №24).

Опубликованные материалы

По теме диссертации опубликованы 23 работы: 16 тезисов докладов в сборниках российских конференций, 2 методических рекомендаций и 5 статей в рекомендованных ВАК российских научных журналах.

Положения, выносимые на защиту

1. Инфекция, вызываемая ВГЧ-6, является в настоящее время малоизученной из-за отсутствия ее официальной регистрации, разнообразия клинических проявлений, наличия явных и скрытых форм инфекции, персистенции возбудителя в организме человека, трудностей лабораторной диагностики.

2. Для диагностики ВГЧИ-6 в России выпускают коммерческие наборы (тест-системы), с помощью которых можно обнаружить только антитела класса ^О («Вектор-Бест», г.Новосибирск), тогда как отсутствуют диагностикумы для выявления маркеров свежего инфицирования. Это обосновывает необходимость разработки тест-систем для определения активной формы ВГЧИ-6.

3. Впервые в России изучены следующие эпидемиологические характеристики ВГЧИ-6: показана широкая циркуляция возбудителя этой инфекции среди населения разных городов России; определено значение этой инфекции у отдельных групп детей и взрослых с различными заболе-

ваниями (внезапная экзантема, неонатальная патология, иммунная ней-тропения, гемобластозы, болезнь Шегрена, ВИЧ-инфекция, депрессия).

4. Впервые установлено наличие маркеров острой и латентной ВГЧИ-6 у медицинского персонала различных стационаров и их изменения в динамике наблюдения, что дает основание отнести медицинский персонал к группе повышенного риска инфицирования ВГЧ-6.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, изложения результатов собственных исследований в 9 главах, заключения, выводов и библиографического указателя, включающего ссылки на 72 отечественные и 85 иностранных работ (всего 157 источников). Работа изложена на 169 страницах машинописного текста, иллюстрирована 39 таблицами и 35 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Серологические методы.

Для определения AT классов IgM и IgG к ВПГ (I, II типов), ВЭБ, ВВЗ, ЦМВ, ВГЧ-6 и ВГЧ-8 использовались коммерческие тест-системы ЗАО «Вектор-Бест», г.Новосибирск. Постановку реакций проводили в строгом соответствии с инструкциями к диагностикумам.

Иммунобиологические методы.

Выявление антигенов ГВ проводили, используя непрямую реакцию им-мунофлюоресценции (НРИФ) с помощью разработаных экспериментальных тест-систем для определения антигенов ЦМВ, ВЭБ и ВПГ в лаборатории эпидемиологии оппортунистических инфекций [39]. В связи с отсутствием отечественной тест-системы для определения антигенов ВГЧ-6, возникла необходимость ее разработки.

Ранние антигены и репродукция вирусов ЦМВ и ВПГ выявляли быстрым культуральным методом (БКМ) с помощью тест-систем ЦитомегаФлюоСкрин и ГерпесФлюоСкрин, разработанных д.м.н., профессором Кущ A.A. в НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского.

Молекулярно — генетические методы.

В данной работе осуществлялось определение ДНК ВГЧ-6 тест-системой «Амли Сенс HHV-VI-380» ФГУН «Центрального научно-исследовательского института эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Эпидемиологические методы.

Работа выполнена с использованием эпидемиологического метода, в основе которого лежит совокупность методических приемов, позволяющих оценить заболеваемость ВГЧИ-6 по группам, возрасту и во времени (Покровский В.И., 2004).Анализ полученных данных по динамике и структуре заболеваемости использовали для изучения роли отдельных путей и факторов передачи возбудителей ГИ среди различных групп населения г.Москвы. Установлены «группы риска», связанные с заболеваемостью изучаемыми герпесвирусными инфекциями.

Статистические методы.

Для определения достоверности полученных результатов вычисляли среднюю ошибку процентного отклонения - т. Достоверность различий показателей определяли при помощи t - критерия достоверности Стьюдента вычисляется по формуле (Ашмарин И.П., Воробьев А.А., 1962).

Для оценки способности организмов к длительному совместному существованию рассчитывали коэффициент Жаккара (Годков М.А., Брико Н.И., 2009; Wittakker R.N., 1990). Данный показатель является критерием экологической общности, изменяется от 0 до 100 (или от 0 до 1 в абсолютных величинах) и характеризует сходство между различными видами, взятыми попарно, т.е. способность микроорганизмов к сосуществованию.

Материалы.

Для изучения широты распространения ВГЧ-6 среди населения отдельных городов России на наличие специфических антител класса G был исследован 1881 образец сыворотки крови здоровых людей, из них 552 образца от детей и 1329 образцов от взрослых.

Для изучения роли ВГЧ-6 в возникновении внезапных экзантем были обследованы 160 детей, находившихся на лечении в диагностическом отделении ТДКБ с диагнозом «внезапная экзантема» в возрасте от 8 месяцев до 14 лет в остром периоде лихорадочного заболевания как с признаками сыпи, так и без нее.

Были исследованы образцы материалов 105 детей, умерших от тяжелой неонатальной патологии.

Для изучения роли ВГЧ-6 в возникновении вторичных осложнений у ВИЧ-инфицированных с диагнозом ВИЧ ШБ с осложнением в виде легочного туберкулеза были обследованы 90 пациентов в возрасте от 22 до 58 лет, среди которых мужчин - 74 (82,2%), женщин - 16 (17,8%), находившихся на лечении в туберкулезной клинической больнице №3 им. проф. Г.А. Захарьина.

Для изучения роли ВГЧ-6 в возникновении вторичных осложнений у больных различными формами туберкулеза были обследованы 95 человек, находящихся на лечении в ТКБ №3 им. проф. Г.А. Захарьина.

Для изучения распространения ГВ у больных гемобластозами были обследованы больные взрослые с диагнозом «острый лейкоз» (40 человек - 20 мужчин и 20 женщин в возрасте от 16 до 68 лет) и дети младшего возраста -с диагнозом «иммунная нейтропения» (40 человек - 14 мальчиков и 26 девочек в возрасте от 2,5 мес. до 5,5 лет). Все дети были обследованы в динамике с интервалом в 1 месяц. Дети находились под наблюдением в Федеральном научно-клиническом центре детской гематологии, онкологии и иммунологии на базе Морозовской ДГКБ. Также был проведен эпидемиологический мониторинг за 50 взрослыми с различными гематологическими заболеваниями с интервалом от 2-х недель до месяца. Взрослые находились на лечении в отделении химиотерапии гемобластозов РОНЦ им.Н.Н. Блохина РАМН.

С целью изучения распространения ГВ у больных с депрессиями были обследованы больные, проходящие стационарное лечение в психиатрической

больнице № 12 с различными диагнозами.Всего обследовано 97 человек (28 женщин, 69 мужчин) в возрасте от 17 до 72 лет. Кроме того, были обследованы некоторые дети с задержкой психомоторного развития на наличие маркеров ВГЧ-6, всего 51 ребенок в возрасте от 6 дней до 3-х лет, среди них - 25 девочек и 26 мальчиков. Среди обследуемых детей данной группы у двоих детей отмечался синдром Дауна, у пяти - церебральная ишемия.

С целью изучения уровня инфицирования ГВ у лиц с аутоиммунными заболеваниями были обследованы пациенты с БШ. Обследованы 40 женщин с БШ/СШ (у 35 из них диагностирована БШ, у 5-х - СШ), в возрасте от 16 до 76 лет, с длительностью заболевания - от 2 до 35 лет. Больные находились на стационарном лечении и амбулаторном наблюдении в отделении изучения механизмов и коррекции аутоиммунитета Института ревматологии РАМН.

Для изучения источника инфицирования герпесвирусами, включая ВГЧ-6. был обследован медицинский персонал различных стационаров:

- противотуберкулезного стационара (4 мужчины и 31 женщина) в возрасте от 20 до 68 лет;

- отделение химиотерапии гемобластозов онкологического научного центра им. H.H. Блохина РАМН г. Москвы (35 женщин) в возрасте от 25 до 45 лет;

- отделения респираторных инфекций детской больницы Св. Владимира (35 женщин) в возрасте от 20 до 70 лет;

- приемного отделения клинической больницы №86 (2 мужчин и 33 женщины) в возрасте от 21 до 76 лет.

Всего было обследовано 140 медицинских работников в возрасте от 20 до 68 лет.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Разработка экспериментальной диагностической тест-системы на основе метода непрямой иммунофлюоресценции (НРИФ) для определения антигенов ВГЧ-6 в биологических материалах человека

В разработанной нами тест-системе для выявления антигена вируса герпеса человека 6-го типа в биологических жидкостях применялся метод непрямой иммунофлюоресценции. Для проведения указанной реакции потребовалась гипериммунная сыворотка, содержащая специфические иммуноглобулины к ВГЧ-6 высоких титрах. Такие сыворотки были выявлены при помощи иммуноферментного анализа, с использованием коммерческих тест - систем, изготовленных ЗАО «Вектор - Бест» (определение специфических антител класса IgG в сыворотках крови пациентов).

Рисунок 1. Обнаружение ВГЧ-6 в слюне ребенка с «внезапной экзантемой» с помощью НРИФ.

Опыт Контроль

Антигены ВГЧ-6, синтезированные в зараженных или трансформированных клетках, визуализировались с помощью окрашивания флуоресцирующими специфическими антителами. В непрямом методе реакции имму-нофлюоресценции антитела не сочетаются с флуорохромом. Положительная реакция (желто-зеленый цвет в люминесцентном микроскопе) указывает на присутствие в клетках вирусных антигенов. Вместо этого после взаимодействия антител с антигенами в фиксированных препаратах клеток к ним добавляют антигаммаглобулиновые антитела, конъюгированные с флуорохромом.

Чувствительность метода определяли сопоставлением результатов, полученных при помощи ПЦР в материалах у детей с клинически подтвержденным диагнозом «внезапная экзантема». Для определения специфичности указанной реакции при выявлении антигена были отобраны три группы лиц. В каждой из групп была выявлена одна какая-либо инфекция, вызванная возбудителями, относящимися к семейству герпесвирусов. Разработанная нами тест-система обладает высокой чувствительностью (88%) и специфичностью (97,2%).

Этот метод более чувствителен и позволяет избежать конъюгации каждого индивидуального антитела с флуоресцентным красителем. Достоинством НРИФ являются невысокая стоимость, высокая специфичность и чувствительность, быстрота получения результатов (около 2 ч), а недостатком -зависимость результатов от качества забора материала, стадии заболевания и квалификации исследователя, проводящего реакцию.

Частота выявления маркеров ВГЧ-6-инфекции среди населения отдельных городов России с помощью метода серологической диагностики

(ИФА)

Для изучения широты распространения ВГЧ-6 среди здорового населения (доноры, здоровые беременные, женщины фертильного возраста) отдельных городов России, находящихся в различных регионах страны (Центральный, Приволжский, Уральский и Сибирский Федеральные округа). Нами было исследовано 404 образца сыворотки крови человека в Москве, 100 -в Омске, 201 - в Челябинске и 200 - в Чебоксарах методом иммунофермент-ного анализа на наличие антител класса к ВГЧ-6.

Данные, полученные нами, свидетельствуют о достаточно частом выявлении серопозитивных лиц во всех обследуемых группах в разных городах, при этом число серонегативных варьировало от 6,2% в Омске до 28,8% в Челябинске 0>2). Лица с антителами к ВГЧ-6 в низких титрах чаще встречались в Челябинске (53,4%), реже всего в Чебоксарах (28,4%); в средних титрах они распределились практически равномерно, в высоких титрах были наиболее характерны для жителей Омска (45,7%), и наименьшее их число определялось в Челябинске - 20,5% (1:>2).

Рисунок № 2. Распространение ВГЧ-6 среди здорового населения отдельных

городов России.

100% 80% 60% п 40% 20% 0%

,.21,20% 34,80% /''29,20%

36,00% I

_6,20% _28,80% I

-25,50%

45,70% У

серонегативные

> 8.00% '

8,80%;--' ---

| 28,40%

_53,40%

26,10%

-29,80% I

_41,80% У

<3>

О*'

„ низкие анамнестические

титры АТ класса ^ ~ (1:100*1:250)

в средние диагностические титры АТ класса ^ (1:250*1:500)

:: высокие диагностические титры АТ класса № (>1:500)

В Москве как число серонегативных, так и количество серопозитивных мужчин и женщин в отношении ВГЧ-6 практически не отличалось, то есть встреча с возбудителем не была характерна для какого-то пола определенно. Однако антитела в высоких титрах преобладали у мужчин - 34,5% ($>2), в то время как для женщин было характерно наличие в сыворотках крови антител с низкими (44,5%) титрами (1>2). В Челябинске же ситуация прямо противоположная, чем в столице - антитела в высоких титрах выявлялись в два раза чаще у женщин (22,5%), чем у мужчин, в то время как для мужчин было характерно наличие в сыворотках крови антител с низкими (44,8%) титрами

(Ч>2). Наличие антител класса в к ВГЧ-6 свидетельствует о предшествующей встрече обследуемых с данным возбудителем, однако о форме перенесенной инфекции судить на основании только серологических данных не представляется возможным.

Далее, для того, чтобы более объективно судить и широте циркуляции вируса, нами была изучена иммуноструктура населения в отношении ВГЧ-6 г. на примере жителей г. Москвы. Для этого были обследованы дети 1-го года жизни, дети более старшего возраста и подростки, женщины детородного возраста, здоровые беременные и доноры.

Рисунок №3. Иммуноструктура населения г.Москвы в отношении ВГЧ-6.

100,00%

2,5%

л/

СР

ч/ ч/

* ^ ^ ,,У Л'

О^ ч*5

О4 С^

/ / / / > «Р <£

ч?

о о

Из данных, приведенных на рисунке №3, следует, что инфицирование ВГЧ-6 происходит постепенно, начиная с 1-ых дней жизни, количество серо-позитивных среди детей до года составляло 83,3% (такой высокий процент объясняется наличием у детей материнских антител). От года до 7 лет наблюдалось уменьшение количества детей с АТ к ВГЧ-6 и в возрастной группе от 3 до 7 лет составляло 55,0%. От 7 до 15 лет отмечается стабилизация числа серопозитивных. Начиная с 15 лет отмечается резкий подъем количества серопозитивных до 83,3%. Эта тенденция сохраняется и в других возрастных группах, включая 60 лет и старше.

Признаки ВГЧ-6-инфекции и других герпесвирусных инфекций у детей с диагнозом «внезапная экзантема» Наиболее частым проявлением ВГЧ-6-инфекции у иммунокомпетент-ных детей является «внезапная экзантема» и острая лихорадка без видимого очага инфекции (Linde A., Dahl Н., Wahren В., 1990).

Данные литературы свидетельствуют о том, что ВГЧ-6 играет главную роль, а значение других ГВ в этиологии внезапных экзантем не изучено, поэтому перед нами и встала задача провести работу для определения значения ЦМВ, ВЭБ, ВПГ и ВГЧ-6 для данной категории больных детей. При обследовании детей высыпания обычно появлялись сначала на спине, а затем на животе, груди, разгибательных поверхностях конечностей. На лице сыпь встречалась редко. Через 2-3 дня сыпь исчезала, не оставляя следов.

Рисунок №4. Дети с признаками «внезапной экзантемы».

В результате проведенных нами исследований наиболее часто - у 47,5% детей с «внезапными экзантемами» были выявлены признаки острой ЦМВИ и в 45,0% - острой ВЭБИ, в то время как маркеры острой ЦМВИ и ВЭБИ у практически здоровых детей определялись реже (в 9,5 и 4,5 раза соответственно). Признаки острой ВПГИ и острой ВГЧ-6-инфекции определялись приблизительно у одинакового количества больных детей (28,75% и 31,25%), что было в 6 раз чаще, чем в группе сравнения.

Нами была предпринята попытка оценки взаимного влияния ГИ на их распространенность с помощью расчета коэффициента Жаккара и коэффициента общности.

Таблица №1. Коэффициенты Жаккара и общности, рассчитанные для сочетаний ГИ, выявленных среди детей с внезапной экзантемой с признаками сыпи.

Показатели Сочетания выявляемых ГИ

ВГЧИ6 ВГЧИб ВГЧИб ВПГИ ВПГИ ВЭБИ ВГЧИб ВГЧИб ВГЧИб ВПГИ

ВПГИ ВЭБИ ЦМВИ ВЭБИ ЦМВИ ЦМВИ ВЭБИ ВПГИ ВПГИ ВЭБИ

ЦМВИ ЦМВИ ВЭБИ ЦМВИ

ч 2,12 5,17 10,5 7,27 5,17 7,25 7,6 2,38 5,0 5,43

ко" 0,02 0,03 0,07 0,05 0,03 0,05 0,05 0,01 0,04 0,04

- коэффициент Жаккара

- коэффициент общности

Представленные расчеты демонстрируют, что ГИ обладают различной способностью к сосуществованию. Наибольшей способностью к сосуществованию обладают ВГЧ-6-инфекция и ЦМВИ. Данное явление обусловлено, вероятно, наличием единых путей передачи возбудителя (контактный, парентеральный). Заметно ниже способность к сосуществованию у возбудителей ВГЧ-6-инфекции и ВПГИ. Как и следовало предполагать, более низкие значения показателей д и КО выявлены для тройного сочетания ГИ (ВГЧИ-6+ВПГИ+ЦМВИ). Однако более низкой является вероятность одномоментного выявления у детей маркеров ВГЧИ-6 и ВПГИ. Установленные закономерности не могут быть объяснены лишь различными механизмами распространения рассматриваемых видов ГИ. По-видимому, способность к сосуществованию возбудителей ГИ детерминирована на генетическом уровне и реализуется путем сложного межвидового взаимодействия вирусов и взаимодействия тех или иных образующихся ассоциатов с макроорганизмом. Следует предположить наличие групп риска распространения микст-инфекций не только в связи с особенностями поведения лиц из тех или иных социальных групп, но и за счет генетической предрасположенности (или резистентности) определенных групп населения к заражению комбинацией возбудителей.

Признаки ВГЧ-6-инфекции и других герпесвирусных инфекций у детей с неонатальной патологией

Учитывая способность ВГЧ-6 вызывать экзентематозные проявления, мы сочли целесообразным провести дифференциальную диагностику инфекций, связанных с появлением сыпи, и в первую очередь - с краснухой. Всего было исследовано 315 гистопрепаратов различных органов от 105 детей, умерших от тяжелой неонатальной патологии, методом НРИФ.

Таблица 2. Частота выявления маркеров (общих антигенов) ВГЧ-б, ВЭБ, ЦМВ и краснухи у детей, родившихся с тяжелой неонатальной патологией и умерших в течение первых трех месяцев жизни в г. Москве.

Возбудитель Исследуемый материал Маркеры возбудителя инфекции (антигены вируса)

Абс %

ВГЧ-6 головной мозг 25 23,8

печень 16 15,2

сердце 20 19,0

ВЭБ головной мозг 7 6,7

печень 6 5,7

сердце 8 7,6

ЦМВ головной мозг 25 23,8

печень 7 6,7

сердце 10 9,5

КРАСНУХА головной мозг 15 14,3

печень 10 9,5

сердце 8 7,6

Иммунобиологические исследования, предпринятые для обнаружения ВГЧ-6, ЦМВ, ВЭБ и вируса краснухи, позволили установить присутствие маркеров всех упомянутых возбудителей в органах и тканях у 105 (100,0%) обследованных детей (таблица №3). Полученные данные позволяют предположить этиологическую роль указанных вирусных агентов в тяжелой неонатальной патологии, завершившейся летальными исходами. Обращает на себя внимание, что маркеры ВГЧ-6 определялись значительно чаще во всех органах, чем другие возбудители.

ВГЧ-6-инфекцию как моно- наблюдали в 5 случаях (4,8%), ВЭБИ диагностировали в 3 случаях (2,8%), ЦМВИ удалось зафиксировать в 5 случаях (4,8%), антигены вируса краснухи без антигенов всех исследуемых герпетических вирусов не выявляли. Во всех остальных случаях наблюдалась микст-инфекция.

Герпесвирусные инфекции являются одной из актуальных проблем в педиатрии, так как они занимают ведущее место в причине мертворождаемо-сти, преждевременных родов, младенческой смертности, заболеваемости новорожденных и ранней инвалидизации (Гриноу А., Сазерленд Ш., 2000). Внутриутробная инфекция развивается у 27-36,6% детей, рожденных живыми у матерей группы высокого инфекционного риска, обусловливая от 11% до 45% перинатальных потерь, достигая по данным разных авторов 65,6% (Царегородцев А.Д, Рюмина И.И., 2001). Сложной задачей остается выявление конкретной этиопатогенетической причины заболевания, несмотря на широкий арсенал современных методов диагностики, включающих ПЦР, серодиагностику. Данные литературы по этиологической роли ВГЧ-6 в младенческой смертности отсутствуют. Наши исследования по обнаружению ВГЧ-6, ЦМВ, ВЭБ и вируса краснухи позволили установить присутствие маркеров всех упомянутых возбудителей в органах и тканях детей, умерших от тяжелой неонатальной патологии.

Таблица №3. Коэффициенты Жаккара и общности, рассчитанные для сочетаний ГВ, выявленных среди детей, умерших от неонаталъной патологии.

Показатели Сочетания выявляемых возбудителей

ВГЧ-6 ВГЧ-6 ВГЧ-6 ВГЧ-6 ВГЧ-6 ВГЧ-6

ВЭБ ЦМВ ВЭБ ВЭБ ЦМВ краснуха

ЦМВ краснуха краснуха

краснуха

21,4 44,4 11,6 43,4 >100 33,3

ко" 0,18 0,32 0,1 0,31 0,7 0,26

- коэффициент Жаккара

- коэффициент общности

Расчет коэффициента Жаккара показал, что наибольшей способностью к сосуществованию обладают ВГЧ-6-инфекция и ЦМВИ. Самая низкая способность к сосуществованию выявлена при тройном сочетании ВГЧ-6, ВЭБ и краснухи. Антигены ВГЧ-6 определялись значительно чаще, чем антигены других ГВ в сердечной мышце (19%), в печени (15,2%) и головном мозге (23,8%). Таким образом, показана значительная роль ВГЧ-6 и др. ГВ в неонаталъной патологии детей. Передача вирусов от матери к ребенку возможна как за счет реализации вертикального пути передачи инфекции, так и при прохождении плода по родовым путям. Поэтому необходимо обследовать беременных женщин на ГИ и при выявлении таковых своевременно проводить лечебно-профилактические мероприятия. Не менее важной проблемой является выбор тактики терапии, минимизация этиотропной и иммунокорри-гирующей терапии в неонатальном периоде.

Определение маркеров ВГЧ-6-инфекции у лиц с иммунодефицитны-ми состояниями различной природы на стадии вторичных осложнений

Для пациентов с иммунодефицитными состояниями герпесвирусные инфекции являются оппортунистическими и могут приводить к тяжелой болезни, а в некоторых случаях - к летальному исходу. Количество ВИЧ-инфицированных лиц в стране составляет на сегодняшний день 433 827 и их число постоянно возрастает, поэтому исследование особенностей клинических проявлений, диагностики, профилактики и терапии герпесвирусных инфекций у таких больных имеет огромное значение.

Для изучения роли ВГЧ-6 и других ГВ в возникновении вторичных осложнений у ВИЧ-инфицированных мы проводили обследование больных туберкулезом с диагнозом ВИЧ-инфекция стадия ШБ и без нее. Показано, что в группе ВИЧ-инфицированных, больных туберкулезом, так и в группе лиц, больных туберкулезом, не отягощенных ВИЧ-инфекцией, доминировали лица с острой ВГЧ-6-инфекцией (55,4% и 52,6%). Маркеры острой ВГЧИ-6 в указанных группах встречались в 22 и 21 раз чаще, чем в группе контроля. Сочетание туберкулеза, ВИЧ-инфекции и острых ГВИ значительно отягощает кли-

ническое течение этих заболеваний, что необходимо учитывать при выборе средств медикаментозной терапии и противоэпидемических мероприятий.

Установлено, что среди ВИЧ-инфицированных беременных г.Москвы и г.Челябинска выявляли маркеры острой ВГЧИ-6 в 76,0% и 56,0% случаев соответственно, в то время как среди здоровых беременных и здоровых женщин фертильного возраста как Москвы, так и Челябинска, маркеры острой ВГЧ-6-инфекции определяли значительно реже - в 11,0% и 3,2% случаев соответственно, что свидетельствует о поражении ВГЧИ-6 иммунокомпрометированных лиц. Выявление острых форм ГВ-инфекций даже у здоровых беременных еще раз подчеркивает необходимость обследования не только беременных с патологией, но и здоровых, и своевременно проводить лечебно-профилактические мероприятия при детекции возбудителей.

Характеристика герпесвирусных инфекций у взрослых и детей младшего возраста с гематологическими заболеваниями

Результаты исследований показали, что существует особенность в распределении маркеров инфекций у обследованных лиц: в группе взрослых больных острым лейкозом выявлены признаки острого инфицирования ВПГИ (45%) и ЦМВИ (42,5%), тогда как в группе больных детей доминировали маркеры ВЭБИ (40%), ВГЧИ-6 (25%) и ЦМВИ (23%). Полученные данные свидетельствуют о необходимости учитывать опасность развития герпесвирусных осложнений, в том числе вызванных ВГЧ-6, у больных гемобластозами. Вероятно, что в ряде случаев клинического проявления ВГЧИ-6 имело место трансфузионное заражение вирусом больных при проведении у них гемоком-понентной терапии. Это указывает на необходимость тестирования донорской крови и ее препаратов, предназначенных для трансфузий больным с ослабленным иммунитетом, на содержание ДНК или антигенов ВГЧ-6, с целью исключения вероятности их трансфузионного заражения.

Далее нами была отобрана группа гематологических больных от 18 до 70 лет в количестве 50 человек, у которых исследования на наличие ВГЧИ-6, ВПГИ, ВЭБИ и ЦМВИ были проведены в динамике.

1-ое обследование проводилось при поступлении больных в стационар и пациенты, у которых были выявлены маркеры острой ВГЧ-6-инфекции или другой герпетической инфекции расценивались как источники этих инфекций и изолировались в отдельные палаты как представляющие эпидемиологическую опасность, тем самым предотвращалось развитие внутрибольничной инфекции. Назначенные до химиотерапии противовирусные препараты исключали развитие острых форм инфекции при нарастании иммунодефицита, который неизбежно развивается при лечении таких больных. 2-ое обследование проводилось уже после курса химиотерапии. Выявление маркеров острой герпетической инфекции, сопровождающееся развитием клинических симптомов, требовало срочного назначения противовирусных препаратов. В случае выявления лишь персистенции вируса можно ограничиться проведением мероприятий, направленных на профилактику внутрибольничных инфекций. Данные

обстоятельства диктуют необходимость контроля за ГИ как до начала лечения, так и во время его проведения.

В нашем исследовании впервые были обследованы дети с диагнозом «иммунная нейтропения». Показана высокая инфицированность этих детей изучаемыми ГИ, с превалированием острых форм, по сравнению с контрольной группой. Обследование детей показало, что существует необходимость регулярного эпидемиологического мониторинга за этими больными, т.к. из динамики наблюдения следует, что эти пациенты подвержены риску активации скрытой инфекции, либо новому инфицированию ГВ, которое возможно как в пределах лечебного учреждения, так и внутри семьи, что диктует необходимость изменения тактики ведения таких больных, а также своевременного проведения противоэпидемических мероприятий.

Для того, чтобы наблюдать циркуляцию ГИ внутри семьи мы решили обследовать 40 детей с иммунными нейтропениями и их матерей. Результаты исследований показали, что внутри семьи идет активная циркуляция возбудителей герпетической инфекции от матери к ребёнку и от ребёнка к матери, возникают внутрисемейные очаги ГИ, что требует своевременного проведения противоэпидемических мероприятий.

В литературе давно дискутируется вопрос о значении ГВ в этиологии БШ. В связи с противоречивыми литературными данными о роли ВГЧ-6 среди них, нами были обследованы 40 женщин с этим заболеванием и было показано частое выявление маркеров (57,5%), свидетельствующих об активной ВГЧ-6-инфекции у лиц с болезнью Шегрена (рисунок №5).

Рисунок № 5. Маркеры герпесвирусных инфекций у лиц с БШ.

Герпесвирусные инфекции у лиц с болезнью Шегрена

микст-инфекции

■ острая форма ГИ доноров

ВГЧИ-6

и всего с маркерами хронической ВГЧИ-6 в стадии обострения кап основной инфекции

и всего с маркерами

ВЭБИ

хронической ВГЧИ-6 в стадии обострения кап основной инфекции в сочетании с ЦМВИ

хронической ВГЧИ-6 о стадии обострения как основной инфекции о сочетании с ВЭБИ

ЦМВИ

25,00%

всего с

маркерами ГИ у лиц с диагнозом

Н всего с маркерами хронической ВГЧИ-6 в стадии обострения как основной инфекции в сочетании с ЦМВИ и ВЭБИ

0,00% 50,00% 100,00%

Наряду с выявлением ВГЧ-6-инфекции, у этих же больных обнаруживали маркеры острых форм ЦМВИ в 25% случаев и ВЭБИ в 15% случаев. У лиц с болезнью Шегрена ВГЧИ-6 наиболее часто протекала в сочетании с цитомегаловирусной инфекцией. Проведенные исследования подтвердили существенную роль ВГЧ-6 в развитии или отягощении БШ.

Признаки ВГЧ-6-инфекции у взрослых больных с депрессиями и детей с задержкой психомоторного развития

Поскольку в последнее время в средствах массовой информации и научной литературе живой интерес вызывает участие ВГЧ-6 в развитии синдрома хронической усталости, признаками которого являются: субфебриль-ная температура на протяжении полугода, увеличение лимфатических узлов, генерализованная мышечная слабость, а также потеря работоспособности до 50%, мы решили провести обследование 98 взрослых с различными формами депрессий из психиатрической больницы и 40 детей с задержкой психомоторного развития. Следует отметить, что у взрослых с депрессиями и детей с задержкой психомоторного развития острые формы ВГЧ-6-инфекции диагностировали практически в равной степени (48,4% и 45,2% соответственно), в то время как в группах контроля острую ВГЧИ-6 обнаруживали в 2,5% случаев у детей и в 2,5% случаев у взрослых. Факторами риска для них, по-видимому, можно считать воздействия, ослабляющие общую, иммунологическую и нервно-психическую сопротивляемость организма, а также наследственную предрасположенность, на фоне которых и проявляются ГИ.

Медицинский персонал как группа риска в отношении герпесви-русных инфекций

Среди практически здоровых группой риска в отношении инфицирования ВГЧ-6 являются медицинские работники. Нами был обследован персонал противотуберкулезного стационара, гематологического отделения онкоцентра, отделения респираторных инфекций ДБ и приемного отделения городского стационара. Показано, что у медработников противотуберкулезного стационара острые формы ВГЧИ-6 составили 31,4%, в то время как острые формы ВГЧИ-6 у медработников остальных отделений'установлены значительно реже - практически в одинаковом количестве (в 17,1%, 17,2%, 17,2% соответственно). Достаточно высокий процент выявления острых форм ВГЧИ-6 свидетельствует, что медперсонал является группой риска по развитию острых форм, а также может быть источником изучаемой инфекции.

Алгоритм диагностики ВГЧ-6-инфекции

На основании проведенных исследований разработан алгоритм диагностики ВГЧ-6-инфекции как для системы эпидемиологического надзора за указанной инфекцией, так и для использования в клинической практике (рисунок №6).

Рисунок № 6. Алгоритм диагностики ВГЧ-б-инфещии.

Нами предложен алгоритм диагностики ВГЧ-6-инфекции, который разработан с учетом опыта проведенных исследований. От практически здоровых людей, которые привлекаются для скринингового обследования, достаточно исследовать сыворотку крови методом ИФА на наличие антител к ВГЧ-6. Другая тактика должна применяться при обследовании больных с иммунодефицитом, а также детей с внезапными экзантемами. Расширяется спектр исследуемых материалов. Помимо сыворотки необходимо исследовать методом НРИФ на наличие антигенов ВГЧ-6 следующие материалы: лимфоциты периферической крови, мокроту, мочу, ликвор. Данное исследование способствует выявлению острой ВГЧ-6-инфекции у лиц с иммуноде-фицитами, так как они не всегда могут адекватно ответить антителами и поэтому поиск только серологических маркеров острой ВГЧ-6-инфекции у этой группы людей может быть не эффективным. Выявление антигенов вируса и специфических его ДНК в биологических материалах подтверждает развитие острой формы инфекции. Разработанный алгоритм рекомендуется использовать как в клинической практике, так и для совершенствования системы слежения за инфекционной заболеваемостью.

Профилактика изучаемой инфекции должна включать в себя: 1. Выявление и санацию противовирусными препаратами женщин, планирующих беременность, для исключения вертикальной передачи ВГЧ-6.

2. В случае постановки диагноза «внезапная экзантема» у ребёнка необходимо исключить у него ВГЧИ-6.

3. Проведение скринингового исследования больных с иммунодефи-цитами различной природы (ВИЧ-инфицированных, гематологических и онкологических пациентов) на наличие изучаемой инфекции.

4. Обследование медицинских работников на ВГЧИ-6 и другие ГИ и

своевременную санацию противовирусными препаратами. * *

Таким образом, с использованием комплекса современных иммунобиологических и серологических методов диагностики были показаны следующие характеристики ВГЧ-6-инфекции:

установлено проявление эпидемического процесса при ВГЧ-6-инфекции как среди детского, так и среди взрослого населения: начиная с 15 лет отмечается увеличение количества инфицированных, что сохраняется и в других возрастных группах, включая 60 лет и старше;

определены группы риска в отношении ВГЧ-6-инфекции (дети с «внезапными экзантемами», больные с ВИЧ-инфекцией, дети с «иммунными нейтропениями», больные с гемабластозами, лица с болезнью Шегрена, больные с депрессиями, медицинский персонал); установлено сочетание ВГЧ-6 с другими ГВ; подтверждена высокая значимость ВГЧ-6-инфекции у больных с различными иммунодефицитными состояниями;

показана активная циркуляция возбудителей герпетических инфекций внутри семьи от матери к ребенку и от ребенка к матери, что подтверждает контактный путь передачи возбудителя в раннем периоде жизни;

показана роль медицинских работников, как группы инфицирования ВГЧ-6.

Выводы

1. Впервые в России разработана диагностическая тест-система на основе метода непрямой иммунофлюоресценции, отличающаяся высокой чувствительностью и специфичностью, для определения ВГЧ-6 и его антигенов в образцах биологических материалов человека, позволяющая усовершенствовать экспресс-диагностику ВГЧ-6-инфекции. Показана необходимость использования комплекса методов, направленных на выявление антител, ДНК вируса и его антигены для определения конкретной стадии заболевания.

2. Установлена высокая частота выявления IgG к ВГЧ-6 среди населения городов, расположенных в различных климатогеографических регионах России: в Москве (78,8%), в Омске (93,8%), в Челябинске (71,2%) и в Чебоксарах (92%), что свидетельствует о широкой повсеместной циркуляции ВГЧ-6.

3. Показано значение смешанных и моно- герпесвирусных инфекций при «внезапных экзантемах». Установлено, что наибольшей способностью к со-

существованию обладают ВГЧ-6-инфекция и ЦМВИ (q=I0,5). Моно-ВГЧ-6-инфекция диагностирована в 3,75% случаев.

4. Впервые обнаружены антигены ВГЧ-6 в тканях головного мозга (23,8%), сердечной мышцы (19%) и печени (15,2%) детей, умерших от неона-тальной патологии, что свидетельствует о возможном участии этого вируса в развитии данной патологии.

5. Определена значимость ВГЧ-6-инфекции у больных различными им-мунодефицитными состояниями:

доказана необходимость проведения диагностики ВГЧ-6-инфекции у больных ВИЧ-инфекцией на стадии вторичных заболеваний и больных туберкулезом, т.к. она отягощает течение основного заболевания;

впервые выявлено наличие признаков свежего инфицирования ВГЧ-6 у детей с иммунными нейтропениями в возрасте до 4-х лет (25,0%), что было значительно чаще, чем у взрослых больных острым лейкозом (5,0%);

установлено, что у ВИЧ-инфицированных беременных выявляли маркеры острой ВГЧ-6-инфекции чаще (76,0%), чем у других ВИЧ-инфицированных;

выявлено наличие маркеров ВГЧ-6-инфекции у лиц с болезнью Шегрена (57,5%), а также сочетание ВГЧ-6-инфекции с цитомегало-вирусной инфекцией у данной категории больных (17,5%).

6. Установлено наличие маркеров острой ВГЧ-6-инфекции у больных с нервно-психическими расстройствами и депрессиями (48,4%) и детей с задержкой психомоторного развития (45,2%).

7. Впервые определена частота наличия маркеров ВГЧ-6-инфекции (свежей и перенесенной) у медицинского персонала противотуберкулезного стационара (31,4%), гематологического отделения (17,1%), отделения респираторных инфекций (17,2%) и приемного отделения городского стационара (17,2%).

8. Впервые разработан алгоритм диагностики ВГЧ-6-инфекции, необходимый как для определения стадии и тяжести развития инфекции в клинической практике, так и для совершенствования системы эпидемиологического надзора за этой инфекцией.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Феклисова JI.B., Репина И.Б., Калугина М.Ю., Клочков С.А. Выявляемость маркеров краснухи у детей, умерших от тяжелой неонатальной патологии // Материалы V Российского конгресса детских инфекционистов «Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики у детей». М. - 2006. - С. 14-16.

2. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Русакова Е.В., Рыбалкина Т.Н. Эпидемиологическая характеристика инфекций, вызываемых вирусом герпеса человека 6 типа // Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных болезней. Сборник научных трудов. М. - 2006. -выпуск 8,-С. 474 - 476.

3. Казарян С.М., Орлова O.A., Бошьян P.E., Калугина М.Ю., Даншенко Е.Д., Рыбалкина Т.Н., Каражас Н.В., Кожевникова Л.К., Русакова Е.В. Частота обнаружения маркеров парентеральных вирусных гепатитов и оппортунистических инфекций у ВИЧ-инфицированных

беременных и их новорожденных детей // Эпидемиология и инфекционные болезни. -2007,-№6.-С. 16-20.

4. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н., Русакова Е.В., Самгина Т.С., Комаров В.В., Замковой C.B. Характеристика частоты встречаемости антител вируса герпеса VI типа среди больных с депрессивным состоянием // Материалы 9 Съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов «Итоги и перспективы обеспечения эпидемического благополучия населения Российской Федерации». М. - 2007. - Т2. - С. 238 - 239.

5. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Ермакова Т.М., Русакова Е.В., Бачабанова P.M., Козина В.И. Диагностика человеческого герпес - вируса 6 типа у больных с синдромом Шегрена // Материалы 9 Съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов «Итоги и перспективы обеспечения эпидемического благополучия населения Российской Федерации». М. - 2007. - ТЗ. - С.40.

6. Феклисова Л.В., Репина И.Б., Калугина М.Ю., Клочков С.А. Результаты обследования плодов и умерших новорожденных на краснушную инфекцию // Материалы 9 Съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов «Итоги и перспективы обеспечения эпидемического благополучия населения Российской Федерации». М.-2007.-Т2.-С.175-176.

7. Калугина М.Ю., Бошьян P.E., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н., Галстян Г.М., Османов Е.А., Ларионова В.Б. Выявление маркеров герпетических инфекций у больных гемобластозами // Материалы 2 Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье». Рязань. - 2007. - С. 124 - 125.

8. Репина И.Б., Калугина М.Ю. Особенности формирования противокраснушного иммунитета у женщин-медработников детских инфекционных стационаров // Материалы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». М. - 2007. - С. 578.

9. Калугина М.Ю., Орлова O.A., Рыбалкина Т.Н., Каражас Н.В~ Сравнительная характеристика частоты встречаемости вируса герпеса VI типа и цитомегаловируса среди ВИЧ-инфицированных и здоровых женщин детородного возраста города Челябинска и Москвы // ЖМЭИ. -2007. -№3. -С.81 - 83.

10. Калугина М.Ю., Юдицкий М.В., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н., Бошьян P.E. Инфекция, вызванная вирусом герпеса 6-го типа у ВИЧ-инфицированных, больных туберкулезом // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. -№9. - С. 71.

11. Калугина М.Ю., Бошьян P.E., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н., Ермакова Т.М. Маркёры вируса герпеса 6-го типа, цитомегаловируса и вируса Эпштейна-Барр у больных гемобластозами // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. - №9. - С. 71.

12. Репина И.Б., Калугина М.Ю, Клочков С.А. Клинико-морфологические изменения при микст-внутриутробных инфекциях. СПб,.2007. - С. 84.

13. Бошьян P.E., Каражас Н.В.,.Рыбалкина Т.Н, Ермакова Т.М., Кожевникова Л.К., Калугина М.Ю., Юдицкий М.В. Маркеры цитомегаловируса и вируса Эпштейна Барр ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом // Материалы 9 Съезда Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: «Итоги и перспективы обеспечения эпидемического благополучия населения Российской Федерации». М. - 2007. - Т1. - С.278.

14. Репина И.Б., Калугина М.Ю., Клочков С.А. Патология перинатального периода как проявление внутриутробного инфицирования плода // Материалы II Ежегодного Конгресса специалистов перинатальной медицины «Новые технологии в перинаталогии». Вопросы практической педиатрии. М. - 2007. - Т2. - №5 - С. 36-37.

15. Каражас Н.В., Малышев H.A., Рыбалкина Т.Н., Калугина М.Ю, Бошьян P.E. Кистенева Л.Б., Чешик С.Г., Мозанкова Л.Н. Герпесвирусная инфекция (эпидемиология, клиника, диагностика, профилактика и лечение) // Методические рекомендации. М. - 2007.

16. Калугина М.Ю. Герпетические инфекции у взрослых и детей младшего возраста с гематологическими заболеваниями // Материалы II Международного молодежного медицинского конгресса «Санкт-Петербургские научные чтения». СПб. - 2007. - С.31 - 32.

17. Мамедова Е.А., Финогенова Н.А., Половцева Т.В., Каражас Н.В., Калугина М.Ю., Васильева М.Н. и др. Герпетические инфекции при нейтропениях у детей раннего возраста // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Инфекционные аспекты соматической патологии у детей». М. - 2008. - С. 45.

18. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н. Диагностика инфекции, вызванной ВГЧ-6 // Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» «Диагностика, лечение и профилактика опасных и особо опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология». Киров. - 2008. -С.73 - 76.

19. Калугина М.Ю, Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н. Инфекция, вызванная вирусом герпеса человека 6-го типа (эпидемиология, клиника и диагностика). Методические рекомендации. М. - 2008.

20. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Рыбалкина Т.Н., Мамедова Е.А., Половцева Т.В., Финогенова Н.А., Ермакова Т. М. Некоторые эпидемиологические особенности герпетических инфекций у взрослых и детей младшего возраста с гематологическими заболеваниями // Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных болезней. Сборник научных трудов. М. - 2009. - выпуск 9, - С. 259 - 261.

21. Калугина М.Ю., Каражас Н.В., Козина В.И., Балабанова P.M., Рыбалкина Т.Н., Ермакова Т.М. Герпетические инфекции у больных с иммунодефицитным состоянием // ЖМЭИ. -2009.-№1,-С. 79-80.

22. Мамедова Е.А., Лаврентьева И.Н„ Половцева Т.В., Финогенова Н.А., Каражас Н.В., Калугина М.Ю., Русакова В.Д., Фетисова Л.Я. Течение герпетических инфекций, вызванных вирусами Эпштейна-Барр и герпеса человека 6-го типа при нейтропениях у детей раннего возраста // Материалы Всероссийской конференции «Инфекционные аспекты соматической патологии у детей». М. - 2009. - С. 65 - 67.

23. Репина И.Б., Калугина М.Ю., Клочков С.А. Частота встречаемости ВГЧ-6 типа у новорожденных и плодов при патологических состояниях // Материалы I Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням. М. - 2009. - С. 182.

Считаю своим принятым долгом поблагодарить своего научного руководителя - д.б.н. Каражас Н.В. за огромную помощь и постоянное внимание при выполнении работы.

Сердечно благодарю учёного секретаря, профессора, д.м.н. Русакову Е.В. за помощь при подготовке диссертации к защите. Глубокую признательность выражаю ученому секретарю к.б.н. Кожевниковой Л.К.

Искреннюю благодарность выражаю всем сотрудникам лаборатории оппортунистических инфекций НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи: к.м.н. Рыбалкиной Т.Н., Ермаковой Т.М., Бошьяну P.E., Корниенко М.Н., Никитиной М.Б. за методическую помощь и ценные рекомендации.

Благодарю врачей научно-клинического центра детской гематологии, онкологии и иммунологии на базе Морозовской ДГКБ профессора Фи-ногенову H.A., к.м.н. Мамедову Е.А., к.м.н. Половцеву Т.В.

Благодарю:

член-корр.РАМН, д.м.н., профессора Ананьину Ю.В., профессора, д.м.н. Сергееву Т.Н., профессора, д.м.н. Селькову Е.С.,

д.м.н. Дрынова И.Д., к.б.н. Демидову Т.Н., к.м.н. Парфенова В.В.,

к.м.н. Данилину Г.А., к.м.н. Салман Э.Р.,

д.м.н., профессора Феклисову Л.В., д.м.н. Репину И.Б.,

к.б.н. Колкову Н.И., Козину В.И., Моргунову Е.Ю., Николаеву JI.A.

за разностороннюю помощь в практической работе и за желание щедро делиться своими знаниями.

Отдельно теплые слова благодарности адресую Додоновой H.A., Додоновой И.А. и Молькову С.А.

Подписано в печать:

14.10.2009

Заказ № 2723 Тираж - 100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 www.autoreferat.ru

Оглавление диссертации Калугина, Мария Юрьевна :: 2009 :: Москва

1.ВВЕДЕНИЕ.

П.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. ИНФЕКЦИЯ, ВЫЗВАННАЯ ВГЧ-6: ЭТИОЛОГИЯ, ПАТОГЕНЕЗ, КЛИНИКА, ПРОБЛЕМЫ ДИАГНОСТИКИ.

Глава 2. СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И ПРОФИЛАКТИКИ ВГЧ-6-ИНФЕКЦИИ.

III.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Материалы исследования.

3.2. Методы:

3.2.1. Серологические методы исследования.

3.2.2. Иммунобиологические методы исследования.

3.2.3. Молекулярно-генетические методы (ПТIP).

3.2.4. Эпидемиологические методы исследования.

3.2.5. Статистические методы исследования.

Глава 4. РАЗРАБОТКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ МЕТОДА НЕПРЯМОЙ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ (НРИФ) ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ ВГЧ-6 В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ ЧЕЛОВЕКА.

Глава 5. ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ МАРКЕРОВ ВГЧ-6-ИНФЕКЦИИ

СРЕДИ НАСЕЛЕНИЯ ОТДЕЛЬНЫХ ГОРОДОВ РОССИИ.

Глава 6. ПРИЗНАКИ ВГЧ-6-ИНФЕКЦИИ И ДРУГИХ ГЕРПЕСВИРУС-НЫХ ИНФЕКЦИЙ У ДЕТЕЙ С «ВНЕЗАПНЫМИ ЭКЗАНТЕМАМИ» И УЧАСТИЕ ИХ В НЕОНАТАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ

6.1. Признаки ВГЧ-6-инфекции и других герпесвирусных инфекций у детей с диагнозом «внезапная экзантема».

6.2. ВГЧ-6-инфекция и другие герпесвирусные инфекции у детей с неона-тальной патологией.

Глава 7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ ВГЧ-6 У ЛИЦ С ИММУНОДЕФИЦИТНЫМИ СОСТОЯНИЯМИ РАЗЛИЧНОЙ ПРИРОДЫ НА СТАДИИ ВТОРИЧНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ

7.1. Герпесвирусные инфекции у больных с ВИЧ-инфекцией, осложненной туберкулёзом, у больных туберкулёзом.

7.2. Герпесвирусные инфекции у ВИЧ-инфицированных беременных.

7.3. Характеристика герпесвирусных инфекций у взрослых и детей младшего возраста с гематологическими заболеваниями.

7.4. Динамическое наблюдение за гематологическими больными в отношении герпесвирусных инфекций.

Глава 8. ГЕРПЕСВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ У ЛИЦ С БОЛЕЗНЬЮ ШЕГ-РЕНА(БШ).

Глава 9. ПРИЗНАКИ ВГЧ-6-ИНФЕКЦИИ У ВЗРОСЛЫХ БОЛЬНЫХ С

ДЕПРЕССИЯМИ И УДЕТЕЙ С ЗАДЕРЖКОЙ ПСИХОМОТОРНОГО РАЗВИТИЯ.

Глава 10. МЕДИЦИНСКИЙ ПЕРСОНАЛ КАК ГРУППА РИСКА В ОТ

НОШЕНИИ ГЕРПЕСВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

Глава 11. РАЗРАБОТКА АЛГОРИТМА ДИАГНОСТИКИ

ВГЧ-6-ИНФЕКЦИИ.

Введение диссертации по теме "Эпидемиология", Калугина, Мария Юрьевна, автореферат

Актуальность темы

Из 8-ми известных типов герпесвирусов, вирус герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-б), выделенный в 1986г., по патогенетическим свойствам недостаточно изучен. Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной этим вирусом, также малоизвестны. Предполагается участие ВГЧ-6 в этиологии рака, хронических заболеваний ЦНС, рассеянного склероза, синдрома хронической усталости, внезапных экзантем у детей (Палецкая Т.Ф. и др., 1998; Komaroff A.L., Bucwald D.S., 1998). Однако существуют сложности в дифференциации причины и следствия, необходимых для окончательного установления роли ВГЧ-6 в патогенезе этих заболеваний. В последние годы за рубежом активно изучают различные аспекты эпидемиологии, клиники и профилактики инфекций, вызванных относительно мало известными герпес-вирусами человека - ВГЧ-6, ВГЧ-7 и ВГЧ-8 (вирус саркомы Капоши) (Ward K.N., 2005). В настоящее время российские производители диагностических тест-систем выпускают только наборы для выявления антител класса IgG к ВГЧ-6. Из-за высокой рыночной стоимости импортные тест-системы практически недоступны отечественному здравоохранению, что не только затрудняет своевременную и правильную диагностику ВГЧ-6-инфекции, но и не позволяет проводить эпидемиологические исследования.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

5. Определить инфицированность ВГЧ-6 лиц с болезнью Шегрена.

8. Разработать алгоритм диагностики инфекции, вызванной ВГЧ-6.

Научная новизна

6. Впервые разработан алгоритм лабораторной диагностики ВГЧ-6-инфекции.

Практическая значимость

Разработана экспериментальная диагностическая тест-система на основе НРИФ для диагностики антигенов ВГЧ-6 в биологических материалах.

Разработан алгоритм лабораторной диагностики ВГЧ-6-инфекции.

По результатам работы опубликованы и утверждены в 2007 г. Департаментом здравоохранения г. Москвы Методические указания «Герпесвирус-ная инфекция». Материалы диссертации используются при чтении лекций на кафедрах эпидемиологии РМАПО Росздрава и инфектологии ММА им. И.М. Сеченова. Подготовлены и опубликованы Методические указания «Инфекция, вызванная вирусом герпеса человека 6-го типа (эпидемиология, клиника и диагностика)», утвержденные на совете по внедрению научных достижений в практику НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН (протокол №2 от 26.06.2008г.).

Внедрение результатов диссертационной работы в практику

Полученные результаты используются в работе детской консультации при Федеральном научно-клиническом центре детской гематологии, онкологии и иммунологии на базе Морозовской Детской Городской Клинической Больницы г.Москвы. Изданы методические рекомендации для врачей инфекционистов, эпидемиологов, педиатров и врачей других специальностей лечебно-профилактических учреждений г. Москвы, кафедр эпидемиологии инфекционных болезней высших учебных заведений и факультетов последипломного образования (утверждено Комитетом Здравоохранения при правительстве Москвы), 2007 год. Материалы диссертации используются в лекциях по курсу эпидемиологии на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии ММА им. Сеченова И.М., на кафедре эпидемиологии РМАПО, на кафедре детских инфекционных болезней и кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии РГМУ.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на: 0 II Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Окружающая среда и здоровье», Рязань 2007г.; О II Международном молодежном медицинском Конгрессе "Санкт-Петербургские научные чтения", Санкт-Петербург, 2007г.;

Всероссийской научной конференции, посвященной 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» «Диагностика, лечение и профилактика опасных и особо опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология», Киров, 2008г.;

0 Научных конференциях отдела эпидемиологии НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи РАМН (протокол №17), Москва, 2008г.

Апробация диссертационной работы состоялась 03.06.2009г на научной конференции отдела эпидемиологии ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (протокол №24).

Опубликованные материалы

Структура и объем диссертации

Заключение диссертационного исследования на тему "Эпидемиологические характеристики инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6-го типа"

V. выводы

1. Впервые в России разработана диагностическая тест-система на основе метода непрямой иммунофлюоресценции, отличающаяся высокой чувствительностью и специфичностью, для определения ВГЧ-6 и его антигенов в биологических материалах человека, позволяющая усовершенствовать экспресс-диагностику ВГЧ-6-инфекции. Показана необходимость использования комплекса методов, позволяющих выявлять антитела, ДНК вируса и его антигены для установления конкретной стадии заболевания.

3. Выявлено значение смешанных и моно-герпесвирусных инфекций при «внезапных экзантемах». Установлено, что наибольшей способностью к сосуществованию обладают ВГЧ-6-инфекция и ЦМВИ (q=10,5). Моно-ВГЧ-6-инфекция диагностирована в 3,75% случаев.

4. Впервые обнаружены антигены ВГЧ-6 в тканях головного мозга (23,8%), сердечной мышцы (19%) и печени (15,2%) детей, умерших от неонатальной патологии, что свидетельствует о возможном участии этого вируса в развитии данной патологии.

5. Определена значимость ВГЧ-6-инфекции у больных различными им-мунодефицитными состояниями: доказана необходимость проведения диагностики ВГЧ-6-инфекции для больных ВИЧ-инфекцией на стадии вторичных заболеваний и больных туберкулезом, т.к. она отягощает течение основного заболевания; впервые выявлено наличие признаков свежего инфицирования ВГЧ-6 у детей с иммунными нейтропениями в возрасте до 4-х лет (25,0%), что было значительно чаще, чем у взрослых больных острым лейкозом (5,0%). установлено, что у ВИЧ-инфицированных беременных выявляли маркеры острой ВГЧ-6-инфекции чаще (76,0%), чем у других ВИЧ-инфицированных; выявлено наличие маркеров ВГЧ-6-инфекции у лиц с болезнью Шегрена (57,5%), а также сочетание ВГЧ-6-инфекции с цитомегало-вирусной инфекцией у данной категории больных (17,5%);

IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Значимость герпетических инфекций по сравнению с другими инфекционными заболеваниями в последние годы возрастает, что объясняется их широким распространенением, эпидемиологической ролью и сложностью диагностики. За последние 15 лет выделены три новых антропонозных представителя семейства герпесвирусов— ВГЧ-6, ВГЧ-7 и ВГЧ-8, которые также характеризуются многообразием клинических проявлений и бессимптомным носительством. Количество эпидемиологических исследований в отношении ВГЧ-6-инфекции в нашей стране очень ограничено из-за недостатка пациентов, имеющих ВГЧ-6 в качестве единственного патогена.

До настоящего времени ВГЧ-6-инфекция не регистрируется как самостоятельная нозоформа и официально не учитывается из-за многообразия клинических форм и ограниченности методов лабораторной диагностики в практическом здравоохранении РФ. Основой диагностики инфекции является наличие выраженных клинических симптомов, что встречается достаточно редко. Учитывая все вышеизложенное, возникла необходимость создания и внедрения в практику высокоэффективных лабораторных методов диагностики ВГЧ-6-инфекции.

В связи с этим целью настоящей работы было изучение эпидемиологических характеристик ВГЧ-6-инфекции с использованием комплекса современных иммунобиологических методов диагностики.

Для совершенствования методов диагностики ВГЧ-6-инфекции, а также проведения эпидемиологических исследований нами была разработана и апробирована диагностическая тест-система на основе метода непрямой реакции иммунофлюоресценции для детекции антигенов ВГЧ-6 в различных биологических жидкостях организма человека. Были показаны преимущества разработанной тест-системы, которые заключались в небольшой затрате времени на постановку (около 2 ч), высокой специфичностью (97,2%) и чувствительностью (88,0%) данной системы. В связи с тем, что каждый метод (ИФА, ПЦР, НРИФ) дополняет другой, мы рекомендуем проводить комплексные исследования с использованием всех предложенных методов. Именно так можно достичь 100% выявления маркеров острой ВГЧ-6-инфекции.

Использование комплекса методов позволяет выявлять конкретную стадию заболевания. Основываясь на выявлении разнообразных маркеров можно констатировать встречу с возбудителем в прошлом, острую инфекцию, стадию реконвалесценции, латентную инфекцию, носительство или реактивацию инфекции.

Так как ВГЧ-6-инфекция не регистрируется и официально не учитывается, нами было проведено изучение распространения ее среди различных возрастных групп за период с 2004 по 2008 годы. Исследование показало, что инфицирование ВГЧ-6 происходит постепенно, начиная с 1-ых дней жизни, количество серопозитивных среди детей до года составляло 83,3% (такой высокий процент объясняется наличием у большинства детей материнских антител). От года до 7 лет наблюдалось уменьшение количества детей с антителами к ВГЧ-6 и в возрастной группе от 3 до 7 лет составляло 55,0%. От 7 до 15 лет отмечалась стабилизация эпидемического процесса. Начиная с 15 лет, отмечался резкий подъем количества серопозитивных до 83,3%. Эта тенденция сохранялась и в других возрастных группах, включая 60 лет и старше. Исследования в различных регионах мира свидетельствуют о широком распространении ВГЧ-6 (85%) в человеческой популяции (Исаков В.А., 2001), что полностью согласуется с результатами наших исследований. Полученные данные свидетельствуют о проявлении эпидемического процесса, как среди детского, так и среди взрослого населения. Наши результаты по изучению широты распространения ВГЧ-6-инфекции среди населения отдельных городов России с помощью методов серологического контроля свидетельствуют о достаточно широком распространении ВГЧ-6 среди населения в изучаемых городах. В Челябинске и в Москве количество серопозитивных составило 71,2% и 78,8% соответственно, в Чебоксарах и в Омске их количество было существенно выше-92,0% и 93,8%.

На сегодняшний день проблема герпесвирусных инфекций в педиатрии стоит наиболее остро. Как известно, наиболее частым проявлением ВГЧ-6-инфекции у иммунокомпетентных детей является внезапная экзантема и острая лихорадка без видимого очага инфекции. При обследовании детей высыпания обычно появлялись сначала на спине, а затем на животе, груди, разгиба-тельных поверхностях конечностей. На лице сыпь встречалась редко. Через 2-3 дня сыпь исчезала, не оставляя следов. Данные литературы свидетельствуют о том, что ВГЧ-6 играет главную роль в возникновении внезапных экзантем. На сегодняшний день мало изучено значение других ГВ в их этиологии, поэтому перед нами и встала задача провести работу для определения значения ВПГ, ВЭБ, ЦМВ, по-мимо ВГЧ-6 у данной категории больных детей. Острая ВГЧ-6-инфекция и острая ВПГ-инфекция определялись приблизительно у одинакового количества больных детей (31,25% и 28,75%), что было в 6 раз чаще, чем в группе сравнения. Наиболее часто - у 47,5% детей с внезапными экзантемами была выявлена острая ЦМВИ и в 45,0% случаев - острая ВЭБИ, в то время как маркеры острой ЦМВИ и ВЭБИ у практически здоровых детей определялись реже (в 9,5 и 4,5 раза соответственно). Острые формы ВГЧ-6-инфекции наблюдали у 25 детей, среди них у 13 (16,25%) антигены вируса выделялись со слюной, у 5-х (6,25%) их обнаруживали в клетках крови и у 7-х (7,75%) в обоих исследуемых материалах, что говорит о преобладании воздушно-капельного пути передачи ВГЧ-6 у данной категории больных детей. Несмотря на то, что маркеры острой ВГЧИ-6 определялись у одной трети обследуемых детей (31,25%), моно-инфекция отмечалась всего лишь у 3,75% детей, у остальных наблюдалась микст-инфекция. Проведенные исследования показали огромную роль ГИ в возникновении внезапных экзантем. Если по данным литературы существенная роль отводилась ВГЧ-6 как этиологическому агенту в возникновении внезапных экзантем, то наши исследования показали лидирующее положение ВЭБ и ЦМВ у данной категории больных.

Герпесвирусные инфекции являются одной из актуальных проблем в педиатрии, так как они занимают ведущее место в причине мертворождаемости, преждевременных родов, младенческой смертности, заболеваемости новорожденных и ранней инвалидизации (Гриноу А., Осборн Д., Сазерленд Ш. и др., 2000). Это обусловлено убиквитарным распространением герпесвирусов, многообразием вызываемых заболеваний, часто принимающих хроническое течение. Внутриутробная инфекция развивается у 27-36,6% детей, рожденных живыми у матерей группы высокого инфекционного риска, обусловливая от 11% до 45% перинатальных потерь, достигая по данным разных авторов 65,6% (Ца-регородцев А.Д, Рюмина И.И. и др., 2001). По данным исследований за 2001 год среди детей, заболевших в ранний неонатальный период, инфекционные заболевания выявляются у 50 - 60%, а у 37,5% умерших новорожденных инфекционная патология явилась основной причиной смерти. Сложной задачей остается выявление конкретной этиопатогенетической причины заболевания, несмотря на широкий арсенал современных методов диагностики, включающих ПЦР, серодиагностику. Данные литературы по этиологической роли ВГЧ-6 в младенческой смертности отсутствуют. Наши исследования по обнаружению ВГЧ-6, ЦМВ, ВЭБ и вируса краснухи актуальны и позволили установить присутствие маркеров всех упомянутых возбудителей в органах и тканях детей, умерших от тяжелой неонатальной патологии. ВГЧИ-6 как моноинфекцию наблюдали в 5 случаях (4,8%), ВЭБИ как моно-инфекцию диагностировали в 3 случаях (2,8%), ЦМВИ как моно-инфекцию удалось зафиксировать в 5 случаях (4,8%), антигены вируса краснухи без антигенов всех исследуемых герпетических вирусов не определяли. Во всех остальных случаях наблюдалась микст-инфекция. Антигены ВГЧ-6 определялись значительно чаще, чем антигены других ГВ в сердечной мышце - в 19%случаев, в печени в 15,2% и головном мозге - в 23,8% случаев. Проведенные исследования показали огромную роль ВГЧ-6 и других ГВ в неонатальной патологии детей. Передача вирусов от матери к ребенку возможна как за счет реализации трансплацентарного пути передачи инфекции, так и при прохождении плода по родовым путям. Поэтому необходимо обследовать беременных женщин на ГИ и при выявлении таковых своевременно проводить лечебно-профилактические мероприятия.

Для пациентов с иммунодефицитными состояниями герпесвирусные инфекции являются оппортунистическими и могут приводить к тяжелой болезни, а в некоторых случаях - к летальному исходу. Количество ВИЧ-инфицированных лиц в стране составляет на сегодняшний день 433 827тыс и их число постоянно возрастает, поэтому исследование особенностей клинических проявлений, диагностики, профилактики и терапии герпесвирусных инфекций у таких больных имеет большое значение.

По данным литературы известно, что ВГЧ-6-инфекция, а также другие ГВИ широко распространены среди больных ВИЧ-инфекцией и больных туберкулезом. В нашем исследовании впервые показана роль ВГЧ-6, ВПГ, ВЭБ и ЦМВ в возникновении вторичных осложнений среди больных ВИЧ-инфекцией и больных туберкулезом с различными формами туберкулеза.

Показано, что в группе ВИЧ-инфицированных, больных туберкулезом, так же как и в группе лиц, больных туберкулезом, не отягощенным ВИЧ-инфекцией, доминировали лица с маркерами острой ВГЧ-6-инфекции (55,4% и 52,6%). Маркеры острой ВГЧИ-6 в указанных группах встречались в 22 и 21 раз чаще, чем в группе сравнения.

Сочетание туберкулеза, ВИЧ-инфекции и острых ГВИ значительно отягощает клиническое течение этих заболеваний, что необходимо учитывать при выборе средств медикаментозной терапии и противоэпидемических мероприятий. При этом больной нередко инфицирован одновременно герпесвирусами нескольких типов, что обусловливает непрерывно-рецидивирующий характер заболевания. Исследования показали, что наиболее уязвимыми среди этих больных оказались подгруппы ВИЧ-инфицированных с диссеминированной (24,6%) и инфильтративной формой туберкулеза (21,0%).

Показано распространение маркеров ВГЧИ-6 также и среди ВИЧ-инфицированных беременных г.Москвы и г.Челябинска. Выявлено 76,0% и 56,0% острых случаев соответственно, в то время как среди здоровых беременных и здоровых женщин фертильного возраста как Москвы, так и Челябинска, маркеры острой ВГЧ-6-инфекции определяли значительно реже - в 11,0% и 3,2% случаев соответственно, что свидетельствует о поражении изучаемой инфекцией иммунокомпрометированных лиц. Выявление острых форм ГВ-инфекций даже у здоровых беременных еще раз подчеркивает необходимость обследования не только беременных с патологией, но и здоровых для предупреждения развития внутриутробной инфекции плода.

Результаты обследования гематологических больных-детей и взрослых показали, что существует особенность в распределении маркеров ГИ: в группе взрослых больных острым лейкозом выявлены признаки инфицирования ЦМВИ и ВПГИ, тогда как в группе больных детей доминировали маркеры ВЭБИ, ВГЧИ-6 и ЦМВИ. Полученные данные свидетельствуют о необходимости учитывать опасность развития герпесвирусных осложнений, в том числе ВГЧИ-6 у больных гемобластозами. Вероятно, что в ряде случаев клинического проявления ВГЧИ-6 имело место трансфузионное заражение вирусом больных при проведении у них гемокомпонентной терапии. Это указывает на необходимость тестирования донорской крови и ее компонентов, предназначенных для трансфузий больным с ослабленным иммунитетом, на содержание ДНК или антигенов ВГЧ-6, с целью исключения вероятности их трансфузионного заражения.

С целью предотвращения внутрибольничного распространения ВГЧ-6-инфекции, а также для предупреждения развития осложнений после курса лечения проводилось наблюдение за взрослыми гематологическими больными в динамике.

1 -ое обследование проводилось при поступлении больных в стационар и пациенты, у которых были выявлены маркеры острой ВГЧ-6-инфекции или другой герпетической инфекции изолировались в отдельные палаты как представляющие эпидемиологическую опасность, тем самым предотвращалось развитие внутрибольничной инфекции. Назначенные до химиотерапии противовирусные препараты исключали развитие острых форм инфекции при нарастании иммунодефицита, который неизбежно развивается при лечении таких больных. 2-ое обследование проводилось уже после курса химиотерапии. Выявление маркеров острой герпетической инфекции, сопровождающееся развитием клинических симптомов, требовало проведения, как противоэпидемических мероприятий, так и срочного назначения противовирусных препаратов. В случае выявления лишь персистенции вируса можно ограничиться проведением противоэпидемических мероприятий, направленных на профилактику внутрибольничных инфекций. Данные обстоятельства диктуют необходимость контроля за ГИ как до начала лечения, так и во время его проведения. Именно так можно выявить и купировать острые формы ВГЧ-6-инфекции, а также препятствовать внутрибольничному распространению ее среди остальных больных и медицинских работников данного отделения.

Помимо взрослых пациентов впервые были обследованы и дети с диагнозом «иммунная нейтропения». Показана высокая инфицированность этих детей изучаемыми ГИ, с превалированием острых форм, по сравнению с контрольной группой. При первом обследовании маркеры ВГЧ-6-инфекции выявлялись у 40,0%, при этом отмечено, что при втором обследовании они выявлялись в 32,5% случаев. Обследование детей показало, что существует необходимость регулярного эпидемиологического мониторинга за этими больными. Из динамики наблюдения следует, что эти пациенты подвержены риску активации скрытой инфекции, либо новому инфицированию ГВ, которое возможно как в пределах лечебного учреждения, так и внутри семьи, что диктует необходимость изменения тактики ведения таких больных, а также своевременного проведения санитарно-эпидемических мероприятий.

Для выявления возможных источников заражения ВГЧ-6-инфекцией было обследовано 40 детей с иммунными нейтропениями и их матери.

Из результатов обследования следует, что преобладали пары (35,0%) у которых маркеры острой ВГЧ-6-инфекции определяли среди детей, матери при этом были серонегативными или с анамнестическими тирами антител к ВГЧ-6. В данном случае матери находятся в группе риска, поэтому необходим постоянный контроль над ними, санация детей и строгое соблюдение противоэпидемического режима, для предотвращения заражения. У 2,5% обследованных пар маркеры острой ВГЧ-6-инфекции определяли только среди матерей. В этой ситуации наоборот дети находятся в группе риска, что требует контроля над ними, а матерям проводят лечебно-профилактические мероприятия.

Маркеры острой ВГЧ-6-инфекции и у матери, и у ребенка определяли в 20,0%. Установить источник инфекции в данном случае не удалось. Лечебно-профилактические мероприятия проводили как в отношении матери, так и ребенка.

Из полученных результатов следует, что внутри семьи идет активная циркуляция возбудителей герпетических инфекций от матери к ребенку и от ребенка к матери, что подтверждает контактный путь передачи вирусов в раннем периоде жизни, первично от матери к ребенку, а также возможное инфицирование ребенка в ЛПУ при проведении лечения.

В связи с противоречивыми данными литературы о роли ВГЧ-6 в этиологии болезни Шегрена, нами были обследованы 40 женщин с этим заболеванием и было показано частое выявление маркеров, свидетельствующих о активной ВГЧИ-6 у них (57,5%). Наряду с выявлением ВГЧ-6-инфекции, у этих же больных обнаруживали маркеры острых форм ЦМВИ в 25% случаев и ВЭБИ в 15% случаев. У лиц с болезнью Шегрена ВГЧИ-6 наиболее часто протекала в сочетании с цитомегаловирусной инфекцией. Наши исследования подтвердили существенную роль ВГЧ-6 в развитии или отягощении БШ. Обнаружение антигена ВГЧ-6 в слюне является важным диагностическим признаком. Однако получение слюны от пациентов с болезнью Шегрена не всегда возможно, так как при данной аутоиммунной патологии значительно снижена функция слюноотделения, поэтому целесообразно исследовать клетки крови на ВГЧ-6 и его антигены методом НРИФ.

Поскольку в последнее время в средствах массовой информации и научной литературе живой интерес вызывает участие ВГЧ-6 в развитии СХУ, было проведено обследование 98 взрослых с различными формами депрессий и 40 детей с задержкой психомоторного развития. Следует отметить, что у взрослых с депрессиями и детей с задержкой психомоторного развития острые формы ВГЧ-б-инфекции диагностировали практически в равной степени (48,4% и 45,2% соответственно). Факторами риска для них, по-видимому, можно считать воздействия, ослабляющие общую, иммунологическую и нервно-психическую сопротивляемость организма, а также наследственную предрасположенность, на фоне которых и проявляются ГИ. Известно, что ВГЧ-6 способен вызывать СХУ, что крайне негативно отражается на психике и может вызывать длительные депрессивные состояния у больных. Своевременное выявление и лечение указанной инфекции будет способствовать стабилизации психоэмоционального состояния.

Обследование персонала медицинских учреждений различных профилей показало, что маркеры острых и недавно перенесенных ГИ среди персонала всех медицинских учреждений определялись значительно чаще, чем в контрольной группе. У медицинских работников противотуберкулезного стационара острые формы ВГЧИ-6 составили 31,4%, в то время как острые формы ВГЧИ-6 присутствовали практически в одинаковом количестве у медработников гематологического отделения, отделения респираторных инфекций и приемного отделения КБ № 86 (в 17,1%, 17,2%, 17,2% соответственно). Достаточно высокий процент выявления острых форм ВГЧИ-6 свидетельствует, что медперсонал является группой риска по развитию острых форм, а также может быть источником изучаемой инфекции, поэтому для своевременного выявления заболевания и предотвращения ВБИ целесообразно проводить контроль за наличием ГИ у медработников по эпидемическим показаниям и своевременно проводить санацию или лечение в зависимости от стадии выявленной инфекции.

На основе существующих, на сегодняшний день тест-систем, включая авторский вариант НРИФ, разработан алгоритм диагностики ВГЧ-6инфекции необходимый как для использования его в клинической практике, так и для системы эпидемиологического надзора за указанной инфекцией.

Профилактика изучаемой инфекции должна включать в себя:

1. Выявление и санацию противовирусными препаратами женщин, планирующих беременность, для исключения вертикальной передачи ВГЧ-6.

2. Проведение скринингового исследования больных с иммунодефи-цитами различной природы (ВИЧ-инфицированных, гематологических и онкологических пациентов) на наличие изучаемой инфекции.

3. В случае постановки диагноза «внезапная экзантема» у ребёнка необходимо исключить у него ВГЧИ-6.

4. Обследование медицинских работников на ВГЧИ-6 и другие ГИ и своевременную санацию противовирусными препаратами.

Таким образом, с использованием комплекса современных методов диагностики были проведены широкие иммунобиологические и серо-эпидемиологические исследования и показаны следующие эпидемиологические характеристики ВГЧ-6-инфекции: установлено проявление эпидемического процесса при ВГЧ-6-инфекции как среди детского, так и среди взрослого населения: начиная с 15 лет отмечается резкое увеличение количества инфицированных, эта тенденция сохраняется и в других возрастных группах, включая 60 лет и старше; определены группы риска в отношении ВГЧ-6-инфекции; установлено сочетание ВГЧ-6 с другими ГВ; подтверждена высокая значимость ВГЧ-6-инфекции у больных с различными иммунодефицитными состояниями; показана активная циркуляция возбудителей герпетических инфекций внутри семьи от матери к ребенку и от ребенка к матери, что подтверждает контактный путь передачи в раннем периоде жизни; показана роль медицинских работников, как группы риска внут-рибольничной инфекции; разработан алгоритм диагностики ВГЧ-6-инфекции.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Калугина, Мария Юрьевна

1. Абрамова Н.М., Акимкин В.Г.,Артеменко А.В. и др. Справочник госпитального эпидемиолога. М.: Хризостом. 1999.

2. Анджапаридзе О. Г., Червонский Г. И. Краснуха. М.: Медицина . -1975.

3. Арестова И.М. Клиническое значение герпесвирусной инфекции при беременности. // Автореф. дисс.канд. мед. наук. Минск . — 1993.

4. Арцимович Н. Г. Синдром хронической усталости и иммунной дисфункции //Междунар. журнал по иммунореабилитации.— 1996.— № 2.— С. 38-44.

5. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. 1962 г. Статистические методы микробиологических исследований. Л.: Медгиз. - 1962. - С. 178.

6. Баринский И.Ф. и др. Герпес. М.: Медицина. 1986. — С.206.

7. Баринский И.Ф. XIV Международная конференция по изучению герпесвирусов // Вопросы вирусологии. М. 1992 - № 1. .- С.73.

8. Баринский И. Ф., Шубладзе А. К., Каспаров А. А., Гребенюк В. Н. Герпес: этиология, диагностика, лечение. М.: Медицина. 1986. - С.272.

9. Белов Б. С., Балабанова P.M., Манукян С.Г., Полянская М.В. Инфекции и ревматические болезни: взгляд на проблему в начале XXI века // Вестник РАМН. Москва. - 2008 . -№6. - С.- 14-18.

10. Белова Е.Г., Кускова Т.К. Журнал «Лечащий врач» // Герпесвирусы 6, 7, 8-го типов. М. 2006. - №2. - С.81.

11. Бехало В. А., Ловенецкий А. Н. Клиника, лечение и лабораторная диагностика герпесвирусных заболеваний человека // Руководство для врачей. М.: Ниармедик плюс. 1998.

12. Болотовский В.М., Михева И.В., Лыткина И.Н., Шаханина И.Л. Корь, краснуха, эпидемический паротит: единая система управления эпидемическими процессами. Москва. 2004. - С. 180-223.

13. Васильев В.И., Симонова М.В., Сафонова Т.Н. Клиника, диагностика и лечение болезни Шегрена // Методические рекомендации. 1989.

14. BeKToHHV-6 — IgG стрип. Инструкция по применению тест-системы. Документ доступен по адресу http://www.vector-best.ru/.

15. ВИЧ-инфекция и СПИД-ассоциируемые заболевания. А .Я. Лысенко, М.К. Турьянов, М.В. Лавдовская, В.М. Подольский. М.: 1996. 624с.

16. ВИЧ-инфекция: Клиника, диагностика и лечение. В.В. Покровский, Т.Н.Ермак, В.В.Беляева, О.Г.Юрин. Под общей редакцией В.В. Покровского. М.: 2000.

17. Возианов А. Ф., Дранник Г. Н., Петровская И. А. и др. Нарушения иммунитета и синдром повышенной утомляемости у жителей г. Киева // Врач, дело.— 1991.—№ 11.—С. 14-17.

18. Врожденные, перинатальные и неонатальные инфекции: Пер. с англ./ Под ред. Гриноу А., Осборна Дж., Сазерленд ILL- М.: Медицина. 2000. -С.287.

19. Герпесвирусная инфекция // Пособие для врачей. Барнаульский Государственный медицинский институт; сост. О.П. Морозова, Е.Ю. Кожевникова под ред. В.М. Гранитова и Л.В. Султанова. Барнаул . -1996 . 46с.

20. Герпесвирусные инфекции // Тематическая рассылка «Актуальные проблемы медицины». Выпуск 7: 05.02.2004. Документ доступен по адресу http://subscribe.ru/

21. Герпетические инфекции. Эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика // Методические рекомендации. Каражас Н.В., Малышев Н.А., Рыбалкина Т.Н., Калугина М.Ю., Бошьян Р.Е., Кистенева Л.Б., Чешик С.Г. Москва. 2007.

22. Детская и перинатальная смертность в России: тенденции, структура, факторы риска «Социальные аспекты здоровья населения» . №1. - 2008. Документ доступен по адресу: http://vestnik.mednet.ru/.

23. Диагностика герпесвирусных инфекций человека. Меморандум совещания ВОЗ//Бюлл. ВОЗ.— 1991.— Т. 69.— № 3.— С. 11-19.

24. Долгих М.С. Вирус герпеса 6 у иммунодефицитных пациентовЖур-иал // Вестник трансплантологии и искусственных органов — Часть 1. М. — 2001.-№ 1.

25. Евсюкова И.И. Хламидийная инфекция у новорожденных // Педиатрия. 1997. -№3. - С.77 - 80.

26. Ершов Ф.И., Касьянова Н.В., Халдин А.А., и соавт. // Materia Medica Бюллетень для врачей и фармацевтов. М. «Фармарус-Принт» . 2003. - № 4 (40).-С. 60-80, 92-103.

27. Ершов Ф. И., Оспельникова Т. П. Современный арсенал антигерпетических лекарственных средств // Инфекции и антимикробная терапия. М.: Медиа Медика. 2001 . - Т. 3 . -№ 4. -С. 100-104.

28. Зотиков Е.А., Васильева М.Н., Порешина Л.П., Кутьина P.M., Финоге-нова Н.А., Мамедова Е.А., Половцева Т.В. Аутоантитела, подобные анти-дифференцировочным при иммунных нейтропениях // Микробиология и иммунология . -М.- 1998. №4 . - С. 427.

29. Исаков В. А. Современные методы лечения герпетической инфекции // TERRA MEDICA NOVA. СПб. 1997. - № 3. -С. 2-7.

30. Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека // Руководство для врачей. СПб., ООО «СпецЛит» . 2006 . -С. 12 — 15.

31. Исаков В. А., Борисова В. В., Исаков Д. В. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика // Руководство для врачей. СПб.: Лань . 1999.

32. Исаков В. А., Ермоленко Д.К., Чайка Н.А., Ермоленко Е.И., Норманн Л.Л. Эпидемиологические аспекты инфекции, обусловленной лимфотропным вирусом герпеса 6 типа // ЖМЭИ . 1995. - №4 . - С.111-114.

33. Исаков В. А., Ермоленко Д.К., Черных М.Д. Терапия герпетической инфекции. СПб.: Гиппократ . -1993. 40с.

34. Исаков В.А., Ковалевский A.M. Линимент циклоферона в стоматологии // Методические рекомендации. СПб. 2003. - 23с.

35. Исаков В.А., Рыбалкин С.Б., Романцов М.Г. Герпесвирусная инфекция // Рекомендации для врачей. СПб. ООО «Тактик-Студио» . 2006 .-6с.

36. Исаков В.А., Сельков С.А., Мошетова Л.К., Чернакова Г.М. Современная терапия герпесвирусных инфекций // Руководство для врачей. СПб.; М.: ООО «Тактик-Студио» . -2004. -167с.

37. Исаков В.А., Чайка Н.А., Ермоленко Д.К. Вирус герпеса человека и СПИД. СПб. -1990.

38. Казанцев А.П., Попова Н.И. Внутриутробные инфекционные заболевания детей и их профилактика. JL: Медицина. 1980 . -232с.

39. Каражас Н.В. Эпидемиологическая характеристика цитомегаловирус-ной инфекции и пневмоцистоза как оппортунистических инфекций // Диссертация докт. биол. наук. М. 2002.

40. Каримова И.М. Герпесвирусная инфекция. Диагностика, клиника, лечение // Медицинское информационное агентство. -М. 2004.

41. Коломиец А. Г. Генерализованная герпетическая инфекция: факты и концепция.— Минск.— 1992.— 183 с.

42. Коломиец А. Г., Коломиец Н. Д. Новые герпесвирусы человека и вызываемая ими патология //Клиническая медицина. -1997. —№1.

43. Коломиец А. Г., Малевич Ю. К., Коломиец Н. Д. и др. Вирус простого герпеса и его роль в патологии человека.— Минск.— 1986. — 262с.

44. Корнеев А. В., Арцимович Н. Г. Синдром хронической усталости и иммунной дисфункции // Лечащий Врач. -1998. -№3.

45. Кудашов Н.И., Зубков В.В., Помелова В.Г. и др. Клинико-диагностическая характеристика пневмонии у новорожденных при герпетических инфекциях // Педиатрия. -2001. -№3. -С.8 13.

46. Кускова Т.К., Белова Е.Г. Семейство герпесвирусов на современном этапе // Лечащий врач. -2004. -№5. -С. 17-24.

47. Лавров В.Ф., Кузин С.Н. Вирус герпеса человека 6-го типа и ассоциированные с ним заболевания детей и взрослых // Эпидемиология и вакцино-профилактика. М. -2003. -№3.

48. Львов Н. Д., Мельниченко А. В. Вирусы герпеса человека 6, 7 и 8-го типов новые патогены семейства Herpesviridae // Вопросы вирусологии. -1999. -Т.44. —№3.

49. Малашенкова И. К., Дидковский Н. А. Синдром хронической усталости // РМЖ. -1997. -Т.5. -№ 12.

50. Малкова Е.М., Помогаева А.П., Кравец Е.Б. и др. Внутриутробные инфекции у новорожденных: использование генодиагностики, клинические особенности и подходы к лечению // Педиатрия. -2002. -№1. -С.36 40.

51. Мурзич А. В., Голубев М. А. Герпетическая инфекция // ЮжноРоссийский медицинский журнал. -1998. —№ 3.

52. Руководство по международной статистической классификации болезней и причин смерти. -Женева. -ВОЗ. -Т.1—С. -21983.

53. Никулин Л.А., Иноземцева Л.Н., Пересада С.П. Диагностика внутриутробной инфекции у новорожденных методом ПЦР и нейросонографии // Мат. 3-го съезда Российской ассоциации спец. перинатал. медицины. Москва. — 2000 . С. - 94-95.

54. Онищенко Г.Г., Беклемишева О.А., Наркевич М.И. О неотложных мерах по борьбе с распространением заболеваний, вызываемых иммунодефицитом человека // ЖМЭИ. 1999. - №1. - С.5-9.

55. Орлова О.А. Эпидемиологическая характеристика вирусных инфекций у ВИЧ-инфицированных беременных и их новорожденных детей // Автореферат. Москва. - 2006.

56. Пале^кая Т.Ф., Тимофеев Н.В., Перминова Н.Т. и др. Роль герпесви-русной инфекции 6-го и 7-го типа у больных рассеянным склерозом // Бюллетень СО РАМН. 1998. - Т.89. - №3. - С. - 89-94.

57. Панченко Л. А., Кириченко И. И., Ходак Л. А. Возбудители герпесвирусных инфекций и наиболее важные клинические проявления у человека // Провизор. -1999.

58. Перминова Н. Г., Тимофеев И. В., Палецкая Т. Ф., Максютов А. 3., Кожина Е. М. Вирус герпеса 6-го типа (HHV-6): современное состояние вопроса // Вестник РАМН. 1998. - №4. -С. - 21-24.

59. Петру хина М.И., Старостина Н.В. Статистические методы в эпидемиологическом анализе. М.: «Петит-А» . - 2003. - 94с.

60. Петру хина М.И., Ющенко Г.В., Суранова Т.Г. и др. Внутрибольничные инфекции: эпидемиология и профилактика // Учебное пособие для врачей. М.: ЗАО «МП Гигиена» . 2008.

61. Покровский В.И., Пак С.Г., Брико Н.И., Данилкин Б.К. Инфекционные "болезни и эпидемиология // Учебник для ВУЗов. М. «Гэотар-Мед» . — 2004 . -С. 417-422.

62. Прозоровский С. В., Тартаковский И. С. Возбудители оппортунистических инфекций — роль в инфекционной патологии человека и методы лабораторной диагностики // Клин. лаб. диагностика. — 1998.— № 2.— С. 24, 33— 35.

63. Редакционная заметка. Вирус герпеса 6 — новый вирус человека // Вопр. вирусол.— 1990.—№ 2.—С. 171-172.

64. Редакционная заметка. Герпетический иммунодефицит как условие генерализованного патологического процесса // Вопр. вирусол.— 1990.— № 6. — С. 524-526.

65. Салман Э. Р. Прогнозирование эпидемии ВИЧ-инфекции среди потребителей внутривенных наркотиков // Автореферат. Москва. 2005.

66. Семериков В.В. Оптимизация системы эпидемиологического надзора и контроля за краснушной инфекцией // Автореферат. Пермь. 2007. - С.5-7.

67. Семериков В. В., Лаврентьева И. Н., Таточенко В. К., Нисевич Л. Л., Фельдблюм И. В. Краснуха. Пермь. СПб. - М. - 2002. - 175с.

68. Таточенко В.К. Профилактика вирусных инфекций // Лечащий врач. М. -2006.-№9.

69. Фролов В. М., Дранник Г. Н. Проблемы иммуноэкологии: от синдрома повышенной утомляемости до синдрома хронической усталости // 1ммунолопя та алерголопя.— 1998.— № 1-2. — С. 69-82.

70. Хахалин JL Н., Соловьева Е. В. Герпесвирусные заболевания человека // Клиническая фармакология и терапия. -1998. —Т.7.

71. Царегородцев А.Д., Рюмина И.И. Заболеваемость новорожденных внутриутробными инфекциями и задачи по ее снижению в Российской Федерации // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. 2001. -№2. - С. 4-7.

72. Шульженко А.Е., Викулов Г.Х., Тутушкина Т.В. Герпетические инфекции настоящее и будущее // Трудный пациент. — 2003 . - № 4. Т. 1 . - С. 615.

73. Ablashi D.V., Josephs S.F., Buchbinder A. et al. J. // Virol. Methods. -1988. Vol.21.-№1.- P.29-48.

74. Ablashi D.V., Zonipetta C., Lease C. et al. Canad. Dis. // Wkly. Rep. 1991. - Vol. 1781 .-P. 33-40.

75. Agut H., J. T. Aubin, and J. M. Huraux. 1991. Homogeneous susceptibility of distinct human herpesvirus 6 strains to antivirals in vitro // J. Infect. Dis. -163:1382-1383.

76. Akashi K., Y. Eizuru, Y. Sumiyoshi, T. Minematsu, S. Нага, M. Harada, M. Kikuchi, Y. Niho, and Y. Minamishima. 1993. Severe infectious mononucleosislike syndrome and primary human herpesvirus-6 infection in an adult N. // Engl. J. Med.-329:168-171.

77. Albrigh A. V., E. Lavi, J. B. Black, S. Goldberg, M. J. O'Connor, and F. Gonzalez-Scarano. 1998. The effect of human herpesvirus-6 (HHV-6) on cultured human neural cells: oligodendrocytes and microglia // J. Neurovirol. 4:486-494.

78. Alessio L., Carricart S., Bustos D., et. al. Loss of Maternally Derived Human Herpesvirus-6 Immunity and Natural Infection in Argentinian Infants // Int. J. In-fec. Deseases . 2001. - V. 5. - P. 202-204.

79. Alvarez-Lafuente R., C. Martin-Estefania, V. de las Heras, C. Castrillo, J. J. Picazo, E. Varela de Seijas, and R. A. Gonzalez. 2002. Active human herpesvirus 6 infection in patients with multiple sclerosis // Arch. Neurol. 59:929-933.

80. Asano Y., T. Yoshikawa, S. Suga, I. Kobayashi, T. Nakashima, T. Yazaki, Y. Kajita, and T. Ozaki. 1994. Clinical features of infants with primary human herpesvirus 6 infection (exanthem subitum, roseola infantum) // Pediatrics. -93:104-108.

81. Asano Y., T. Yoshikawa, S. Suga, T. Yazaki, K. Kondo, and K. Yamanishi. 1990. Fatal fulminant hepatitis in an infant with human herpesvirus-6 infection // Lancet.-335:862-863.

82. Asano Y., T. Yoshikawa, Y. Kajita, R. Ogura, S. Suga, T. Yazaki, T. Nakashima, A. Yamada, and T. Kurata. 1992. Fatal encephalitis/encephalopathy in primary human herpesvirus-6 infection // Arch. Dis. Child. 67:1484-1485.

83. Asano Y., T. Yoshikawa, S. Suga, T. Yazaki, K. Kondo, and K. Yamanishi, 1990. Fatal fulminant hepatitis in an infant with human herpesvirus-6 infection // Lancet3.-35:862-863.

84. Barone S. R., M. H. Kaplan, and L. R. Krilov. 1995. Human herpesvirus-6 infection in children with first febrile seizures // J. Pediatr. 127:95-97.

85. Beovic В., N. Pecaric-Meglic, J. Marin, J. Bedernjak, I. Muzlovic, and M. Cizman. 2001. Fatal human herpesvirus 6-associated multifocal meningoencephalitis in an adult female patient. Scand // J. Infect. Dis. 33:942-944.

86. Bonura F., A. M. Perna, F. Vitale, M. R. Villafrate, E. Viviano, R. Guttadau-ro, G. Mazzola, and N. Romano. 1999. Inhibition of human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) by variant В of human herpesvirus 6 (HHV-6) // New Microbiol. -22:161-171.

87. Braun D. K., G. Dominguez, and P. E. Pellett. 1997. Human herpesvirus 6 // Clin. Microbiol. Rev. - 10:521-567.

88. Buchbinder S., A. H. Elmaagacli, U. W. Schaefer, and M. Roggendorf. 2000. Human herpesvirus 6 is an important pathogen in infectious lung disease after allogeneic bone marrow transplantation // Bone Marrow Transplant. 26:639644.

89. Carrigan D. R., D. Harrington, and К. K. Knox. 1996. Variant A human herpesvirus six as a cofactor in the pathogenesis of AIDS // J. Acquir. Immune Defic. Syndr. Hum. Retrovir.

90. Caserta M. Т., M. P. McDermott, S. Dewhurst, K. Schnabel, J. A. Carnahan, L. Gilbert, G. Lathan, G. K. Lofthus, and С. B. Hall. 2004. Human herpesvirus 6 (HHV6) DNA persistence and reactivation in healthy children // J. Pediatr. -145:478-484.

91. Cuende J. I., Civers P., Diez M. et al. High prevalense without reactivation of herpes vims 6 in subjects with chronic fatique syndrome // Ann. Med. Interna. — 1997.—№ 9.—P. 441-444.

92. Dahl H., G. Fjaertoft, T. Norsted, F. Z. Wang, M. Mousavi-Jazi, and A. Linde. 1999. Reactivation of human herpesvirus 6 during pregnancy // J. Infect. Dis. 180:2035-2038.

93. Daibata M., T. Taguchi, H. Taguchi, and I. Miyoshi. 1998. Integration of human herpesvirus 6 in a Burkitt's lymphoma cell line // Br. J. Haematol.

94. Dammann O., Allred E.N., Genest D.R., et al. Chemokines are differentially expressed by astrocytes, microglia and inflammatory leukocytes in Toxoplasma encephalitis and critically regulated by interferon // Neuropathology 2002. 103. -P. 68 -458.

95. De Clercq, E., L. Naesens, L. De Bolle, D. Schols, Y. Zhang, and J. Neyts. 2001. Antiviral agents active against human herpesviruses HHV-6, HHV-7 and HHV-8 //Rev. Med. Viroll. 1:381-395.

96. Downing R.L., Servankambo N., Serwada D. et. al. // Ibid. 1987. Vol.1. -P.390.

97. Dubedat S., Kappagoda N. // Ibid. 1989. - Vol.2. - P. 1963-1964.

98. Eschenbach D.A. Ureaplazma urealyticum and premature birth // Clinical Infectious Diseas. 1993. - 17 (1). - P. 6 - 100.

99. Fifth International Symposium on Sjogren's Syndrome // Fox RI. Arthritis Rheum. 1996. -№39 (2). - 195-6.

100. Fox G.P., Briggs M., Ward P.A. et.al // Ibid. 1990. - Vol.336. - P.590-593.

101. Frey Т.К. Molecular biology of rubella virus. Advances in virus research . -1994. №44. - P.69 - 160.

102. Higashi K., Asala H., Kurata T. tt al. // J. Gen. Virol. 1989. - Vol.70. - № 12.- P. 3171-3176.

103. Huang L. M., C. Y. Lee, P. I. Lee, J. M. Chen, and P. J. Wang. 1991. Meningitis caused by human herpesvirus-6 // Arch. Dis. Child. 66:1443-1444.

104. Huraux G.M., Agut H., Ingrand D. // Rev. Tr. Lab. 1989. - Vol.17. -№193. - p.79-82.

105. International Seminar on Sjogren's Syndrome. Editors R.Manthorpe, J.U. Prause // Scand Jorn of Rheum. 1986. - 61:1-291.

106. Jarnett R.F., Clark D.A., Josephs S.F. // J. Med. Virol. 1990. - Vol.32. -№1. - P.73-76.

107. Jenkins F. J., D. T. Rowe, and C. R. Rinaldo, Jr. 2003. Herpesvirus infections in organ transplant recipients // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 10:1-7.

108. Josephs S.F., Buchbinder A., Streicher H.Z. et al. Leukemia. 1988. -Vol.2.-P. 132-135.

109. Kazuo Y., Shizuko H., Fumishiko В., et.al. // J. Infect. Dis. 1990. . -Vol.161.-№1.-P.153-154.

110. Kido S., Kondo K, Kondo T. et. al. // J. Med. Virol. 1990. - Vol.32. - №3.- P.139-142.

111. Kishi M., Harada H., Takashi M. et. al. // J. Virol. 1988. - Vol.62. -№12. - P.4824-4827.

112. Klishe S., Kremmer E., Hammer S.W. et al. Persistent Infection of Epstein-Barr-Positive В lymphocytes by Human Herpesvirus 8 // J. Virology. — 1998.— V. 72.—№ 10.—P. 8143-8149.

113. Knox К. K., Harrington D. P., Carrigan D. R. // J. Med. Virol. 1995. - V.4.- P.288-292.

114. KomaroffAX. Canad. Dis. Wkly.// Rep. 1991.- Vol.1781.- P. 23-28.

115. Komaroff A. L., Bucwald D. S. Chronic fatique syndrome: An Update // Ann. Rev. Med.— 1998.— 48.— P. 1-13.

116. Komaroff A. L., Fagioli L. R., Geiger A. M. et al. An examination of the working case definition of chronic fatique syndrome // Am. J. Med.— 1996.— 100.- P. 56-64.

117. Kondo K., Hayakawa Y., Mori H. et al. // J. Clin. Microbiol. 1990. -Vol.28. - №5. - P.970-974.

118. Levy Bruhl D., Pebody R, Veldhuijzen I, Valenciano M, Osborne K. ESEN: a comparison of vaccination programmes Part three : measles mumps and rubella. //Euro Surveillance. - 1998.-3(12): 115-9.

119. Linde A., Dahl H., Wahren B. et.al. // J. Virol. Methods. 1990. - Vol.21. -№1. - P.l 17-123.

120. Lusso P.,Gallo R. C. Lancet. 1994. - V.343. - P. 555-556.

121. Melbye M., Ebbesen P, Levine P., Bennike T. Early primary infection and high Epstein-Barr virus antibody titers in Greenland Eskimos at high risk for nasopharyngeal carcinoma // Int J .Cancer. 1984. - Nov 15.-34 (5):619-23.

122. Pellet P. E., Black J. В., Yamamoto M. // Advanc. Virus Res. 1992. -V.41. -P.l-52.

123. Pietroboni G.R., Harnett G.B., Farr T.G. et. al. // J. Clin. Pathol. 1988. -Vol.41.-№12.-P. 1310-1312.

124. Plotkin S.A., Reef S. Rubella Vaccine. In: Plotkin SA, Orenstein WA, editors // VACCINES. 4th ed. 2003. - P. 707-44.

125. Razzaque A. Oncogene. 1995. - V. 5. - P. 1365-1370.

126. Rodier G., Fox E., Constantine N. et.al. // Trahs. Roy. Soc.Trop. Med. Hig. -1990.-Vol.84.-№1.- P.148-150.

127. Rubella vaccines : WHO position paper. // Wkly. Epidemiol. Rec. 2000. -(20): 161-72.

128. Salahuddin S.Z., Ablashi D.V., Markham P.D., et al. Isolation of new virus, HBLV, in patients with limphoproliferative disorders // Scince. 1986. - V. 234. -P.596 -601.

129. Saxinger C., Polesky H., Eby N. et. al. // J. Virol. Methods. 1988. -Vol.21.-№2.-P. 199-208.

130. Sjogren's Syndrome. Clinical and Immunologicai Aspects. Editors N. Talal, Moutsopoulos HM, Kassan SS. Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg. 1987. - P.l-299.

131. Sieczkowski, L., В. Chandran, and C. Wood. 1995. The human immunodeficiency virus tat gene enhances replication of human herpesvirus-6 // Virology. -211:544-553.

132. Siogren's Syndrome. State of the art. Kugler Publications. Amsterdam/New York. Editors Homma M., Sugaj S., Tojo Т., Miysaka N., Akizuki. M. 1994. -P.l-615.

133. Tajiri H., K. Tanaka-Taya, Y. Ozaki, S. Okada, S. Mushiake, and K. Yama-nishi. 1997. Chronic hepatitis in an infant, in association with human herpesvirus-6 infection // J. Pediatr. 131:473-475.

134. Takashi K., Sonoda S., Kawakami K. et al. // Lancet. 1988. - Vol.l. - p. 1463.

135. Takeshita H., Furukawa M, Fujieda S, Shoujaku H, Ookura T, Sakaguchi M, Ito H, Mineta H, Harada T, Matsuura H, Saito H. Epidemiological research into nasopharyngeal carcinoma in the Chubu region of Japan // Auris Nasus Larynx. -1999 Jul.-26(3):277-86.

136. Takikawa Т., H. Hayashibara, Y. Harada, and K. Shiraki. 1992. Liver dysfunction, anaemia, and granulocytopenia after exanthema subitum // Lancet. -340:1288-1289.

137. Tedder R.S., Briggs M., Cameron C.H. et.al. // Ibid. 1987. - Vol. . -P.390-392.

138. Timbury M.C., and E. Edmond. 1979. Herpesviruses // J. Clin. Pathol. -32:859-881.

139. Ueda K., Kusuhara K., Nirose M. et al. // J. Infect. Dis. 1989. - Vol.189. -№4. - p.750-752.

140. Wagstaff, A. J., and H. M. Bryson. 1994. Foscarnet: a reappraisal of its antiviral activity, pharmacokinetic properties and therapeutic use in immunocompromised patients with viral infections // Drugs. 48:199-226.

141. Ward K. N. 2005. Human herpesviruses-6 and -7 infections // Curr. Opin. Infect. Dis. 18:247-252.

142. Ward K. N., and J. J. Gray. 1994. Primary human herpesvirus-6 infection is frequently overlooked as a cause of febrile fits in young children // J. Med. Virol. -42:119-123.

143. Wilborn F., C. A. Schmidt, V. Brinkmann, K. Jendroska, H. Oettle, and W. Siegert. 1994. A potential role for human herpesvirus type 6 in nervous system disease // J. Neuroimmunol. 49:213-214.

144. Yalcin S., T. Mukai, K. Kondo, Y. Ami, T. Okawa, A. Kojima, T. Kurata, and K. Yamanishi. Experimental infection of cynomolgus and African green monkeys with human herpesvirus 6 // J. Gen. Virol. 1992. - 73:1673-1677.

145. Yamanishi К., T. Okuno, K. Shiraki, M. Takahashi, T. Kondo, Y. Asano, and T. Kurata. Identification of human herpesvirus-6 as a causal agent for exan-them subitum. Lancet. - 1988. - i:1065-1067.

146. Yasuko Mori, Masato Koike, Eiko Moriishi. Human Herpesvirus-6 Induces MVB Formation, and Virus Egress Occurs by an Exosomal Release Pathway // Blackwell Publishing. 2008. - V.9. - P. 1728-1742(15).

147. Yoshida M., F. Uno, Z. L. Bai, M. Yamada, S. Nii, T. Sata, T. Kurata, K. Yamanishi, and M. Takahashi. Electron microscopic study of a herpes-type vimsisolated from an infant with exanthem subitum // Microbiol. Immunol. 1989. -33:147-154.

148. Yoshikawa T. and Y. Asano. 2000. Central nervous system complications in human herpesvirus-6 infection // Brain Dev. 22:307-314.

149. Yoshikawa Т., S. Suga, Y. Asano, T. Nakashima, T. Yazaki, R. Sobue, M. Hirano, M. Fukuda, S. Kojima, and T. Matsuyama. Human herpesvirus-6 infection in bone marrow transplantation // Blood. 1991. - 78:1381-1384.