Динамика экспрессии сигнальных факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках при естественном и радиационном старении

Грабежев, Лев Александрович

Диссертации по медицине → Геронтология и гериатрия

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.30) на тему:Динамика экспрессии сигнальных факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках при естественном и радиационном старении

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Динамика экспрессии сигнальных факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках при естественном и радиационном старении - тема автореферата по медицине

Грабежев, Лев Александрович Санкт-Петербург 2011 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.30

Автореферат диссертации по медицине на тему Динамика экспрессии сигнальных факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках при естественном и радиационном старении

На правах рукописи

ГРАБЕЖЕВ Лев Александрович

ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ СИГНАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ КЛЕТОЧНОГО ОБНОВЛЕНИЯ В ПЕЙЕРОВЫХ БЛЯШКАХ ПРИ ЕСТЕСТВЕННОМ И РАДИАЦИОННОМ СТАРЕНИИ

14.01.30 - геронтология и гериатрия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

484/оээ

2 6 МАЙ 2011

Санкт-Петербург - 2011

4847595

Работа выполнена в отделе клеточной биологии и патологии Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН

Научные руководители:

доктор медицинских наук Коновалов Сергей Сергеевич

доктор биологических наук Полякова Виктория Олеговна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Малинин Владимир Викторович

доктор медицинских наук, профессор Репетий Николай Григорьевич

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ

Защита диссертации состоится 2011г. в часов

на заседании Диссертационного Совета Д 601.001.01 в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197119, Санкт-Петербург, пр. Динамо, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Автореферат разослан «

С>У 2011г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета

доктор биологических наук, профессор Козина Л.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

По современным представлениям, пищеварительный тракт является самым крупным нейроэндокринным органом, клетки которого продуцируют более 100 гормонов и факторов роста, которые активно участвуют в процессах пищеварения и обеспечивают общий гомеостаз организма.

Наряду с этим, в последнее время выяснилось, что кишечник обладает также мощной системой иммунного надзора, благодаря многочисленным скоплениям лимфоцитов в подслизистом слое, формирующим пейеровы бляшки [Rogerson B.J., et al., 2003; Chiba S. et al., 2011]. Составляющие их клетки, в основном, являются лимфоцитами В-типа. Они способны секретировать различные цитокины и другие сигнальные молекулы, запускающие, контролирующие и регулирующие локальный иммунитет, нарушения которого во многом определяют выраженность и прогноз реакции кишечника на действие ионизирующей радиации в модели преждевременного старения.

Именно поддержание достаточного пула активно функционирующих лимфоидных клеток лежит в основе адаптационного барьера и нивелирует повреждающие эффекты ионизирующего излучения, которое по современным представлениям рассматривается в качестве основного неблагоприятного экологического фактора, приводящего к ускоренному старению организма человека [Tsaprouni L.G., et al., 2011; Winkelmann R., et al., 2011].

Принимая во внимание указанные обстоятельства, изучение структурно-функциональной организации, пролиферативной активности, процессов апоптоза и элиминации лимфоцитов в пейеровых бляшках в процессе естественного и моделированного старения следует считать актуальным как для выяснения фундаментальных механизмов старения, так и для разработки новых подходов к гормоно- и иммунотропной профилактике возраст-ассоциированной патологии желудочно-кишечного тракта.

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования явилось изучение пролиферативной активности и программированной гибели клеток в пейеровых бляшках кишечника людей и крыс возраста при старении. Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. выявить динамику пролиферативной активности лимфоцитов в пейеровых бляшках кишечника человека при естественном старении;

2. изучить пролиферативную активность клеток в пейеровых бляшках кишечника крыс при радиационно-индуцированном старении;

3. определить интенсивность апоптоза в пейеровых бляшках кишечника человека при естественном старении;

4. исследовать динамику программированной гибели клеток в пейеровых бляшках кишечника крыс при радиационно-индуцированном старении;

5. выявить корреляции между процессами пролиферации и апоптоза лимфоцитов в пейеровых бляшках кишечника человека и крыс;

6. определить вклад пейеровых бляшек в обеспечение локального тканевого гомеостаза кишечника при естественном и индуцированном старении.

Научная новизна работы

Впервые проведено исследование уровня пролиферации клеток в пейеровых бляшках кишечника у пожилых людей, людей старческого возраста и долгожителей, а также исследование уровня пролиферации клеток в пейеровых бляшках кишечника облученных и необлученных крыс разных возрастных групп.

Установлено снижение экспрессии пролиферотропного белка Кл-67 на фоне увеличения экспрессии проапоптозного фактора Р-53 при старении у людей. Подобные данные получены и при исследовании пейеровых бляшек крыс.

Полученные данные свидетельствуют о том, что при старении, как у людей (начиная с 55 лет), так и у крыс (18-месячных) апоптоз доминирует над процессами пролиферации в пейеровых бляшках, что является одной из причин старческой инволюции органа.

При воздействии ионизирующей радиации в пейеровых бляшках, как молодых, так и старых крыс резко возрастает антипролиферативная активность и, соответственно, уровень апоптоза. Во всех возрастных группах животных баланс пролиферативной активности и апоптоза при индуцированном старении (после облучения) достоверно смещается в сторону антипролиферативной активности и клеточной гибели.

Практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют говорить об инволюции пейеровых бляшек млекопитающих с возрастом и об ускорении этого процесса под воздействием ионизирующего облучения в модели радиационного старения. Проведенное исследование свидетельствует о том, что пейеровы бляшки кишечника являются одной из основных мишеней геротропного действия ионизирующей радиации. Снижение пролиферативной активности лимфоцитов и, наоборот, увеличение пропорции клеток, гибнущих путем апоптоза при старении и облучении значительно усугубляет дистрофические и инволютивные процессы, развивающиеся в кишечном эпителии в этих условиях.

Полученные данные позволяют наметить новые подходы к профилактике и лечению возраст-детерминированного и радиационно-индуцируемого

«кишечного синдрома» через активацию иммунотропных сигнальных механизмов поддержания и восстановления пула дифференцированных лимфоцитов в пейеровых бляшках человека.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Пролиферативная активность и апоптоз клеток пейеровых бляшек у людей пожилого и старческого возраста находятся в прямой зависимости друг от друга, в то время как у долгожителей подобных корреляций не выявлено.

2. При естественном старении в клетках пейеровых бляшек человека и крыс происходит смещение баланса процессов пролиферации и апоптоза в сторону антипролиферативных процессов и усиления апоптоза.

3. При индуцированном (радиационном) старении в клетках пейеровых бляшек крыс зарегистрировано достоверное усиление процессов клеточной гибели. При этом выраженность процесса апоптоза усугубляется с увеличением возраста крыс, подвергнутых облучению.

4. Нарушение процессов клеточного обновления в пейеровых бляшках при старении усугубляют развитие возраст-ассоциированной патологии желудочно-кишечного тракта.

Связь с научно-исследовательской работой Института

Диссертационная работа выполнялась в соответствии с планом НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов и указателя литературы. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии пейеровых бляшек, а также особенностях экспрессии белков Ki-67 и Р-53, являющихся маркерами пролиферации и апоптоза. Глава 2 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Глава 3 представляет собственные экспериментальные данные изучения возрастной динамики экспрессии белков Ki-67 и Р-53 в клетках пейеровых бляшек человека и крыс и их обсуждение.

Текст диссертации изложен на 115 страницах, содержит 8 таблиц, иллюстрирован 37 рисунками. Список литературы содержит 204 источника, из которых 84 отечественных и 120 зарубежных авторов.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в том числе 4 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ, 1 статья в другом издании и 8 тезисов докладов.

Апробация и реализация диссертации

Материалы диссертации доложены на VII международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2010); VI Международной научно-практической геронтологической конференции «Пушковские чтения» (Санкт-Петербург, 2010); XV Международной научно-практической конференции «Пожилой больной. Качество жизни» (Москва, 2010).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Характеристика исследуемого материала

Исследования были проведены как при радиационном старении (у крыс), так и при естественном старении (на аутопсийном материале людей).

Материал для исследования радиационного старения

Исследования были проведены на 40 самцах крыс линии Вистар. Животные содержались в обычных условиях вивария при дневном освещении и сбалансированном рационе питания. Все животные были разделены на 4 группы (в каждой группе по 10 животных):

1 - необлученные крысы трехмесячного возраста;

2 - необлученные крысы восемнадцатимесячного возраста;

3 - облученные крысы трехмесячного возраста;

4 - облученные крысы восемнадцатимесячного возраста.

Для моделирования радиационного старения была применена общепринятая методика гамма-облучения на аппарате ЛУЧ-1 (источник 60Со; мощность дозы 17,166 х 10"4 Гр/с). Животные получали ежедневную дозу 6,0 Гр в течение 7 суток. Выбор данной схемы эксперимента обусловлен тем, что, компенсаторная пролиферация и другие процессы, изменяющие клеточную кинетику, наиболее ярко проявляются при фракционированном и протрагированном облучении [Конопляников А.Г., 2002, 2008]. Сравнение изученных параметров клеточного обновления проводили по общепринятому стандарту у необлученных и облученных крыс одинакового возраста для исключения влияния повреждающего (а не геротропного) эффекта действия ионизирующего излучения [Южаков В.В., 1996; Кветной И.М., Южаков В.В., 1998;(Зп>Ьзе1е1а1., 2001]

Забой животных и выделение пейеровых бляшек проводили утром с 10 до 12 ч при естественном освещении под нембуталовым наркозом (50 мг/кг) на 7 сутки после облучения.

Материал для исследования естественного старения

Для изучения естественного старения было отобрано 47 образцов тонкого кишечника людей разных возрастных групп, полученных при аутопсиях.

Весь материал был разделен на 3 группы по классификации ВОЗ:

1. люди пожилого возраста (60-74 лет) - 16 образов;

2. люди старческого возраста (75-89 лет) - 16 образцов;

3. долгожители (90 лет и старше) - 15 образцов,

Аутопсийный материал был получен в Санкт-Петербургском городском патологоанатомическом бюро и городской больнице № 3. По данным аутопсий во всех наблюдениях пациенты страдали ишемической болезнью сердца (ИБС) и цереброваскулярной болезнью (ЦВБ). Патология желудочно-кишечного тракта у пациентов отсутствовала.

Подготовка препаратов пейеровых бляшек для гистологического исследования

Полученные фрагменты кишечника с пейеровыми бляшками фиксировали в нейтральном растворе формалина (рН=7,2), проводили через спирты, ксилолы и заливали в парафин по стандартной методике. Из парафиновых блоков на микротоме Leica 540М готовили срезы толщиной 3-5 мкм и наносили их на предметные стекла, обработанные адгезивом.

Для обеспечения фиксации гистологического среза к стеклу чистые обезжиренные стекла предварительно были обработаны адгезивом (поли-Ь-лизином). Сухой поли-Ь-лизин растворяли в дистиллированной воде из расчета 1 мг:10 мл. В приготовленный раствор помещали стекла в контейнере так, чтобы между стеклами был зазор, и они не слипались. Выдерживали в растворе 5-10 минут, вынимая, тщательно стряхивали остатки раствора и помещали контейнер со стеклами в термостат на 37°С до полного высыхания стекол. Затем сухие стекла повторно обрабатывали в растворе поли-Ь-лизина в течение 5 минут, также хорошо стряхивали остатки раствора и помещали контейнер со стеклами в термостат на 37°С до полного их высыхания.

Для морфологического изучения срезы окрашивали гематоксилин-эозином по стандартной методике [Полак Дж., Ван Норден С., 1987].

Для верификации в пейеровых бляшках экспрессии белков Р-53 и Ki-67 был использован иммуногистохимический метод с применением авидин-биотиновой системы визуализации [Автандилов Г.Г., 1990; Кветной И.М., Южаков В.В., 1990; Полак Дж., Ван Норден С., 1987]

Иммуногистохимическое исследование

Для иммуногистохимического исследования использовали первичные моноклональные антитела к Р-53 (1:100, Dako) и Ki-67(1:100, Dako). В качестве вторых антител использовали биотинилированные анти-мышиные

иммуноглобулины из универсального набора (Dako). Визуализацию окрасок проводили с применением комплекса авидина с биотинилированной пероксидазой (ABC-kit), с последующим проявлением пероксидазы хрена диаминобензидином (все реагенты от Dako).

Морфометрический анализ и статистическая обработка результатов

Для оценки интенсивности иммунокрашивания были проведены морфометрические исследования с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений Nikon Eclipse 400 и лицензионной программы «Видео-Тест, Морфология 5.0». Были подсчитаны два параметра: оптическая плотность экспрессии и процент суммарной площади иммуноокрашенных структур. Измерение оптической плотности позволяет оценить интенсивность экспрессии гормона в каждой отдельно взятой клетке и вычислить среднее значение для среза в целом. Процент суммарной площади показывает, какая доля в исследуемых тканях приходится на позитивно окрашенные клетки.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы Статистика 7,0. Для оценки достоверности использовались непараметричекие критерии Kruskal Wallis Anova и Mann -Whitney. Для выявления корреляционной связи производился подсчет коэффициента корреляции:

_ cov(X, Y) вхх ~ УЩхУЩУ]

где соу обозначает ковариацию, а Б —дисперсию, или

Е[ХУ]-ЕХ-ЕУ_

вх'г ~ у/(ЩХг\ - (ЕХ)2) ■ (Е[У2] - (ЕУ)г)

где символ обозначает математическое ожидание.

Ошибка коэффициента корреляции считалась по следующей формуле: m

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка Р-53 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс в радиационной модели преждевременного старения

Для оценки поведения лимфоцитов пейеровых бляшек крыс при преждевременном старении было проведено исследование экспрессии белка Р-53 у 3-х месячных и 18-и месячных крыс.

По данным Massari L.P., Kastelan М., Gruber F. Ультрафиолетовое (неионизирующее), как и ионизирующее облучение приводит к мутации в гене Р-53, что ведет к подавлению разрушения ДНК клетки, т.е. препятствует апоптозу [Massari L.P., Kastelan М., Gruber F., 2007].

Потеря Р-53 приводит к неспособности элиминировать разрушенные и потенциально-неустойчивые клетки апоптозом или блокируя клеточный цикл [Schwartz J.L., Jordan R., 1997].

& и

m А 5

Змее. 18мес.

возраст

Змее. 18мес.

возраст

Рис. 1. Оптическая плотность (А) и суммарная площадь экспрессии (Б) экспрессии белка Р-53 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс разного возраста. * статистически значимое отличие облученных животных от необлученных; **статистически значимое отличие крыс 3 мес. от крыс 18мес. (р<0,05).

Полученные нами данные (рис.1) свидетельствуют о том, что при облучении (преждевременном старении) в клетках накапливаются генетические ошибки, это приводит к статистически значимому увеличению экспрессии белка Р-53 в них по сравнению с необлученными животными (например, по показателю площади экспрессии с 3,74% у 18-месячных необлученных крыс до 6,92% у 18-месячных крыс в модели радиационного старения). При этом с возрастом интенсивность экспрессии данного маркера в отдельных клетках по показателю оптической плотности статистически значимо снижается, как в контрольной, так и в облученной группах (например, с 1,42 у.е. до 1,28 у.е. 18-месячных необлученных животных).

Показатель площади экспрессии белка Р-53 статистически значимо увеличивается с возрастом и при облучении животных с 6,25% у 3-месячных животных до 6,92% у 18-месячных крыс (рис. 1). Также отмечается компенсаторное увеличение суммарной площади иммуноокрашенных структур на фоне снижения интенсивности экспрессии данного белка.

При сравнении результатов, полученных на крысах, с соответствующими показателями у людей, можно отметить одинаковую тенденцию изменений характера экспрессии белка Р-53 с возрастом, что позволяет подтвердить адекватность воздействия радиационного облучения в качестве геротропного фактора, вызывающего сходные изменения экспрессии белка Р-53 у крыс.

Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка Ю-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс в радиационной модели преждевременного старения

Проведено исследование экспрессии белка Кь67 в лимфоцитах пейеровых бляшек 3-х и 18-и месячных крыс. У необлученных животных оптическая плотность экспрессии маркера Ю-67, т.е. пролиферативная активность, статистически достоверно (р<0,05) снижается с возрастом (табл.).

Таблица

Оптическая плотность экспрессии белка Ю-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс

№ крысы Змее, Змее, 18мес, 18мес,

облученные необлученные облученные необлученные

1 0,906 1,309 1,327 1,123

2 0,886 1,313 1,299 1,105

3 0,897 1,289 1,279 1,095

4 0,912 1,318 1,318 1,076

5 0,922 1,299 1,342 1,143

6 0,887 1,275 1,299 1,109

7 0,897 1,301 1,289 1,099

8 0,941 1,273 1,337 1,076

9 0,877 1,311 1,298 1,132

10 0,942 1,292 1,346 1,098

Среднее 0,907 1,298 1,313 1,106*

значение

* статистически значимое отличие облученных животных от необлученных (р<0,05).

У облученных животных (в модели преждевременного старения) картина меняется на противоположную: пролиферация клеток увеличивается с возрастом, что возможно, это связано с компенсаторной экспрессией маркера Кл-67.

£ Ь2

в о.»

а 0,6

X 0,4

о 0,2

I облуч. 3 необлуч.

Змее. 18мес.

возрасг

Рис. 2. Оптическая плотность (А) и суммарная площадь экспрессии (Б) экспрессии белка Кл-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс разного возраста.

* статистически значимое отличие облученных животных от необлученных; **статистически значимое отличие крыс 3 мес. от крыс 18мес. (р<0,05).

Суммарная площадь иммуноокрашенных структур по маркеру Кл-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек крыс статистически достоверно снижается с возрастом в 4 группах: у облученных и необлученных животных (рис. 2). Еще большее снижение данного показателя наблюдается у облученных животных по сравнению с необлученными крысами. Это свидетельствует о снижении пролиферативной активности лимфоцитов с возрастом и под воздействием радиации, как фактора, ускоряющего процессы старения.

Коэффициент корреляции между экспрессией маркеров Р-53 и Кл-67 по показателю оптической плотности у крыс составляет 0,376655, т.е. корреляции между экспрессией данных маркеров не наблюдается, что свидетельствует о том, что данные маркеры экспрессируются независимо друг от друга (рис. 3).

Р53 К67

маркер

Р53 Ю67

маркер

Рис. 3. Оптическая плотность (А) и суммарная площадь (Б) экспрессии белков Р-53 и Кл-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек у крыс Зх месяцев. * статистически значимое отличие облученных животных от необлученных р<0,05.

Соотношение площадей экспрессии белков Р-53 и Кд-67 увеличивается под воздействием радиации и меняется на противоположное: у облученных крыс преобладают процессы апоптоза, у необлученных - пролиферации.

Коэффициент корреляции по показателям оптической плотности белков Р-53 и Ю-67 у крыс 18 месяцев составляет 0,015011, т.е. корреляционной связи не наблюдается.

Как видно из данных, приведенных на рисунке 3, разница между данными показателями выравнивается с возрастом: у облученных животных экспрессия маркеров Р-53 и Ю-67 выражена практически одинаково, тогда как у необлученных животных интенсивность экспрессии маркера Кь67 немного выше.

Разница по показателям площади экспрессии существенно увеличивается с возрастом: у облученных и необлученных животных апоптотические процессы преобладают над пролиферативными. Эти данные свидетельствуют о развитии процессов старения при действии облучения и однотипности их проявления, при естественном и индуцированном старении.

При сравнении экспериментальных данных с результатами, полученными при исследовании на людях, обнаруживается тенденция к снижению пролиферативной активности с возрастом. Такая же тенденция наблюдается при облучении крыс.

Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка Р-53 в лимфоцитах пейеровых бляшек людей разных возрастов

Экспрессия белка Р-53 была верифицирована иммуногистохимическим методом. Морфометрический анализ микроскопических изображений позволил сравнить уровень экспрессии белка Р-53 у людей трех исследуемых | групп (рис. 4).

Подсчет оптической плотности иммуноокрашенных клеток и последующая статистическая обработка полученных данных показали, что с вероятностью р=0,0048 этот показатель увеличивается с возрастом.

1 группа 2 группа 3 группа

Возрастные группы

1 группа 2 группа 3 группа Возрастные группы

А Б

Рис.4. Оптическая плотность (А) и площадь экспрессии (Б) белка Р-53 в лимфоцитах пейеровых бляшек у людей разных возрастных групп: группа 1 — люди пожилого возраста; группа 2 — люди старческого возраста; группа 3 - долгожители С*р<0,01).

Суммарная площадь окрашенных структур отражает статистически значимое (р<0,01) увеличение в 6 раз в группе долгожителей по сравнению с лицами пожилого возраста площади экспрессии белка Р-53 и составил 1,999±0,157 в группе людей пожилого возраста, 8,921 ±1,103 у людей старческого возраста и 12,642±1,574 у долгожителей.

Иммуногнстохимическое исследование особенностей экспрессии маркера Ю67 в лимфоцитах пейеровых бляшек людей разного возраста

Было проведено сравнение средних значений оптической плотности экспрессии белка Кл-67 у перечисленных выше возрастных групп людей. При этом было выявлено статистически значимое (р=0,0039) снижение оптической плотности с возрастом (рис. 5), что свидетельствует об ослаблении пролиферативной активности клеток в пейеровых бляшках при старении.

1 группа 2 группа 3 группа

Возрастные группы

Рис.5. Площадь экспрессии белка Кл-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек людей разных возрастных групп: группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 - люди старческого возраста; группа 3 - долгожители (*р=0,0004).

При суммарном анализе маркеров Р-53 (рис. 6) и Кл-67 в разных возрастных группах были получены следующие результаты. Оптическая плотность по маркеру Кл-67 снижается с возрастом, тогда как по маркеру Р-53, она возрастает. Показатели оптической плотности по маркерам Р-53 и К1-67 в группе людей пожилого возраста составляют: 0,186±0,026 и 0,341±0,081 соответственно, для сравнения с таковыми у долгожителей: 0,292±0,056 и 0,244±0,027.

По показателю площади экспрессии наблюдается сходная тенденция по данным маркерам: по маркеру Р-53 она увеличивается, тогда, как по маркеру Ю-67 снижается.

Подобная динамика наблюдается и по показателю площади экспрессии данного маркера, которая снижается с возрастом (р=0,0004). В третьей 1-руппе площадь экспрессии в два раза ниже таковой в первых двух группах и составляет 2,485±0,289.

1 группа 2 группа 3 группа Возрастные группы

Рис. 6. Экспрессия белков Р-53 и Кь67 в лимфоцитах пейеровых бляшек человека. Оптическая плотность иммуноокрашенных структур в разных возрастных группах: группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 — люди старческого возраста; группа 3 - долгожители (*р<0,01).

Разница между показателями оптической плотности экспрессии маркеров Р-53 и К-67 уменьшается с возрастом, при этом их соотношение меняется на противоположное. Таким образом, в группе пожилых людей процессы пролиферации значительно преобладают над процессами апоптоза.

У людей старческого возраста разница менее существенна, хотя процессы пролиферации по-прежнему идут интенсивнее апоптотических процессов.

У долгожителей соотношение изменяется: процессы апоптоза преобладают над пролиферативными процессами (рис. 7).

Полученные данные позволяют предположить, что при старении пейеровых бляшек человека повышается частота апоптоза лимфоцитов на фоне снижения их пролиферативной активности, что приводит к частичной возрастной инволюции пейеровых бляшек и играет важную роль в старении иммунной системы в целом.

Таким образом, полученные результаты позволили выявить инволюцию пейеровых бляшек млекопитающих с возрастом и ускорение этого процесса в модели радиационного старения. Проведенное исследование свидетельствует о том, что пейеровы бляшки кишечника являются одной из основных мишеней геротропного действия ионизирующей радиации.

Снижение пролиферативной активности лимфоцитов и, наоборот, увеличение пропорции клеток, гибнущих путем апоптоза при старении и облучении значительно усугубляет дистрофические и инвояютивные процессы, развивающиеся в кишечном эпителии в этих условиях.

и и и а

С и И

п ее

1 группа 2 группа 3 группа

Возрастные группы

Рис. 7. Экспрессия белков Р-53 и Кл-67 в лимфоцитах пейеровых бляшек человека. Суммарная площадь иммуноокрашенных структур в разных возрастных группах: группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 - люди старческого возраста; группа 3 — долгожители (*р<0,01).

Полученные данные позволяют наметить новые подходы к профилактике и лечению возраст-детерминированного «кишечного синдрома» через активацию иммунотропных сигнальных механизмов поддержания и восстановления пула дифференцированных лимфоцитов в пейеровых бляшках человека.

ВЫВОДЫ

1. В пейеровых бляшках человека и крыс обнаружена выраженная экспрессия ключевых белков пролиферации и апоптоза - Кл-67 и Р-53, что свидетельствует об активности процессов клеточного обновления во всех возрастных группах.

2. Экспрессия белка Р-53 в пейеровых бляшках людей с возрастом прогрессивно усиливается, достигая максимума в группе долгожителей, отражая резкое усиление апоптоза лимфоцитов при старении.

3. Снижение экспрессии протеина Ю-67 в пейеровых бляшках человека при старении является следствием возрастного ослабления пролиферативной активности лимфоцитов.

4. В модели радиационного старения происходит усиление апоптоза и снижение пролиферативной активности лимфоцитов в пейеровых бляшках крыс, что может приводить к локальному ослаблению иммунологической реактивности кишечника.

5. Однотипность изменений баланса пролиферативной активности и апоптоза в пейеровых бляшках человека и крыс при старении и облучении позволяет рассматривать воздействие ионизирующей радиацией в сублетальных дозах как адекватную модель ускоренного старения.

6. Нарушение процессов клеточного обновления в пейеровых бляшках кишечника при старении может способствовать развитию возраст-ассоциированой патологии желудочно-кишечного тракта.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Рекомендуется провести детальное исследование иммунотропных синтетических пептидов, как потенциально возможных геропротекторов при профилактике возрастных нарушений деятельности желудочно-кишечного тракта.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в журналах, включенных в Перечень ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации

1. Возрастные особенности экспрессии факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках кишечника /Л.А. Грабежев, H.H. Севостьянова, А.Н. Колмаков, С.С. Коновалов, В.О. Полякова, И.М. Кветной// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2010. - Т. 150, № 10.-С. 440-442.

2. Закономерности формирования нейроиммуноэндокринного статуса у пациентов пожилого возраста с заболеваниями желудочно-кишечного тракта / O.A. Болховитина, O.A. Чижова, JI. А. Грабежев, JI.B. Козлов, Г.Н. Совенко // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия «Медицина. Фармация». - 2011. - Вып. 13/2. -С. 101-107.

3. Нейроиммуноэндокринные аспекты полиморбидных состояний у лиц пожилого возраста и у лиц с преждевременным старением/ К.И. Прощаев,

A.Н. Ильницкий, Л.И. Постникова, Н.И. Жернакова, Г.И. Гурко, Л.А. Грабежев//Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия «Медицина. Фармация». - 2011. - Вып. 13/2. -С. 90-95.

4. Репаративное действие пептида везугена на структуру двенадцатиперстной кишки в модели ускоренного старения / Г.А. Рыжак, H.H. Севостьянова, Т.В. Кветная, A.B. Трофимов, Н.С. Линькова, Е.А. Гусельникова, Л.А. Грабежев, С.С. Коновалов//Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия «Медицина. Фармация», Геронтология и гериатрия- 2010. - Т. 22, № 12. - С. 53-55.

Статьи в других изданиях

5. О состоянии слизистой оболочки и нейроэндокринных клеток желудка и кишечника после ваготомии/И.М. Кветной, А.Л. Грабежев, Н.И. Жернакова, С.С. Коновалов//Геронтологический журнал им. В.Ф. Купревича. - 2011. - Т.2. - №1. - С.24 -31.

Тезисы докладов

6. Апоптоз в пейеровых бляшках кишечника человека при старении/ Л.А. Грабежев, H.H. Севостьянова, Е.А. Гусельникова, С.С. Коновалов,

B.О. Полякова//Матер. VI научно-практической геронтологической конференции с международным участием, посвященной памяти Э.С. Пушковой «Пушковские чтения» - Санкт-Петербург. - 2010. -

C. 274-275.

7. Возрастная динамика апоптоза в пейеровых бляшках кишечника человека/Н.Н. Севостьянова, Л.А. Грабежев, А.Н. Колмаков, С.С. Коновалов, В.О. Полякова // Матер. VII международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». - Москва. -2010.-С. 170-171.

8. Возрастная динамика пролиферативной активности в кишечнике человека/Н.Н. Севостьянова, Л.А. Грабежев, Е.А. Гусельникова, С.С. Коновалов, В.О. Полякова // Матер. VI научно-практической геронтологической конференции с международным участием, посвященной памяти Э.С. Пушковой «Пушковские чтения» - Санкт-Петербург. - 2010. - С. 288-289.

9. Возрастная динамика экспрессии хромогранина А в эпителии кишечника человека/Н.Н. Севостьянова, Л.А. Грабежев, А.Н. Колмаков, С.С. Коновалов, В.О. Полякова // Матер. VII международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». - Москва. -2010. - С. 169-170.

10. Динамика экспрессии баланса пролиферации и апоптоза в пейеровых бляшках кишечника человека при патологии, ассоциированной с возрастом /Е.А. Гусельникова, H.H. Севостьянова, Л.А. Грабежев,

С.С. Коновалов, В.О. Полякова//Матер. VI научно-практической геронтологической конференции с международным участием, посвященной памяти Э.С. Пушковой «Пушковские чтения» - Санкт-Петербург. - 2010. - С. 275-276.

И. Иммуногистохимическая верификация нейроэндокринной активности эпителия кишечника человека у людей разного возраста / С.С. Коновалов, H.H. Севостьянова, JI.A. Грабежев, Е.А. Гусельникова, В.О. Полякова // Матер. VI научно-практической геронтологической конференции с международным участием, посвященной памяти Э.С. Пушковой «Пушковские чтения» - Санкт-Петербург. - 2010. - С. 280.

12. Сравнительное действие везугена и везилюта на восстановление функций лимфоцитов при их старении / JI.A. Грабежев, A.B. Трофимов, Н.С. Линькова, В.О. Полякова // Матер. XV Международной научно-практической конференции «Пожилой больной. Качество жизни». - М., 2010.-С. 22.

13. Экспрессия протеина Ki-67 в кишечнике человека при старении /Л.А. Грабежев, H.H. Севостьянова, А.Н. Колмаков, С.С. Коновалов, В.О. Полякова//Матер. VII международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». - Москва. - 2010. - С. 64-65.

Грабежев Лев Александрович ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ СИГНАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ КЛЕТОЧНОГО ОБНОВЛЕНИЯ В ПЕЙЕРОВЫХ БЛЯШКАХ ПРИ ЕСТЕСТВЕННОМ И РАДИАЦИОННОМ СТАРЕНИИ// Автореф. дис. канд. мед. наук: 14.01.30 - СПб., 2011. - 19 с.

Подписано в печать «26» апреля 2011. Формат 60*84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ /¿. Отпечатано с готового оригинал-макета. ЗАО "Принт - Экспресс" 197376, С.-Петербург, ул. Большая Монетная, 5 лит. А

Оглавление диссертации Грабежев, Лев Александрович :: 2011 :: Санкт-Петербург

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Основные сведения об анатомии, особенностях онтогенетического развития, эволюции и гистофизиологии пейеровых бляшек.

1.1.1. Анатомия пейеровых бляшек.

1.1.2. Особенности развития пейеровых бляшек в ходе онтогенеза.

1.1.3. Гистофизиология пейеровых бляшек.

1.2. Возрастная инволюция пейеровых бляшек.

1.3. Функциональная роль нейроиммуноэндокринологических взаимодействий в пейеровых бляшках.

1.4. Взаимодействие эндокринных клеток кишечника и пейеровых

I бляшек.

1.4.1. Краткая характеристика белка Кл-67.

1.4.2. Основные сведения о белке Р53.

1.5. Возрастные изменения в иммунной системе в целом.

1.6. Ионизирующее облучение как повреждающий геротропный фактор окружающей среды.

1.7. Слабое радиоактивное облучение как модель преждевременного старения.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика исследуемого материала.

2.1.1. Материал для исследования радиационного старения

2.1.2. Материал для исследования естественного старения.

2.2. Подготовка препаратов пейеровых бляшек для гистологического исследования.

2.3. Иммуногистохимическое исследование.

2.4. Анализ полученных данных.

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждения.

3.1. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка Р53 в радиационной модели преждевременного старения на лимфоцитах пейеровых бляшек крыс.

3.2. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка Кл67 в радиационной модели преждевременного старения на лимфоцитах пейеровых бляшек крыс.

3.3. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии белка р53 в лимфоцитах пейеровых бляшек людей разных возрастов.

3.4. Иммуногистохимическое исследование особенностей экспрессии маркера Кл67 в лимфоцитах пейеровых бляшек людей разных возрастов.

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Грабежев, Лев Александрович, автореферат

Актуальность темы

По современным; представлениям, пищеварительный тракт является самым крупным нейроэндокринным органом, клетки; которого продуцируют более 100 гормонов и факторов роста, которые активно участвуют в процессах пищеварения и? обеспечивают общий гомеостаз организма.

Наряду с этим, в последнее время выяснилось, что кишечник обладает также мощной системой иммунного надзора, благодаря многочисленным скоплениям лимфоцитов в подслизистом слое, формирующим т.н. пейеровы бляшки [Rogerson B.J., et al., 2003; Chiba S. et al., 2011]. Составляющие их клетки, в основном, являются лимфоцитами В-типа. Они способны секретировать различные цитокины и другие сигнальные молекулы, запускающие, контролирующие и> регулирующие локальный иммунитет, нарушения которого во многом определяют выраженность и прогноз реакции кишечника на действие ионизирующей радиации в модели преждевременного старения.

Цель и задачи исследования

2. изучить пролиферативную активность клеток в пейеровых бляшках кишечника кишечника крыс при радиационно-индуцированном старении;

3. определить интенсивность апоптоза в пейеровых бляшках кишечника человека при естественном старении;

4. исследовать динамику программированной гибели клеток в пейеровых бляшках кишечника крыс при радиационно-индуцированом старении;

Научная новизна работы

Установлено снижение экспрессии пролиферотропного белка Кл-67 на фоне увеличения экспрессии проапоптозного фактора Р53 при старении у людей. Подобные данные получены и при исследовании пейеровых бляшек крыс.

Полученные данные свидетельствуют о том, что при старении, как у людей (начиная с 55 лет), так и у крыс (18 -месячных) апоптоз доминирует над процессами пролиферации в пейеровых бляшках, что является одной из причин старческой инволюции органа.

Практическая значимость работы

Полученные данные позволяют наметить новые подходы к профилактике и лечению возраст-детерминированного и радиационно-индуцируемого «кишечного синдрома» через активацию иммунотропных сигнальных механизмов поддержания и восстановления пула дифференцированных лимфоцитов в пейеровых бляшках человека.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

Связь с научно-исследовательской работой Института

Структура и объем диссертации

Заключение диссертационного исследования на тему "Динамика экспрессии сигнальных факторов клеточного обновления в пейеровых бляшках при естественном и радиационном старении"

ВЫВОДЫ

1. В пейеровых бляшках человека и крыс обнаружена выраженная экспрессия ключевых белков пролиферации и апоптоза - Кл67 и Р53, что свидетельствует об активности процессов клеточного обновления во всех возрастных группах.

2. Экспрессия белка Р53 в пейеровых бляшках людей с возрастом прогрессивно усиливаете т, достигая максимума в группе долгожителей, отражая резкое усиление апоптоза лимфоцитов при старении.

3. Снижение экспрессии протеина Кл67 в пейеровых бляшках человека при старении является следствием возрастного ослабления пролиферативной активности лимфоцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Грабежев, Лев Александрович

1. Автандилов Г. Г. Анализатор изображений «Имаджермедиа» для медицинской диагностики / Г. Г. Автандилов, В. Е. Баскаков, К. Б. Саниев // Диагностическая медицинская морфометрия. — М., 2002. — С.152-158.

2. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистоцитпатологии / Г. Г. Автондилов. М.: РМАПО, 1996.-256 с.

3. Аклеев А. В. Реакции тканей на хроническое воздействие ионизирующего излучения / А. В. Аклеев // Радиац. биол. Радиоэкол. -2009.-Т. 49, № 1,-С. 5-20.

4. Акоев И. Г. Проблемы постлучевого восстановления / И. Г. Акоев. -М.: Атомиздат. 1970. 368 с.

5. Алексахин Р. М. 55-я сессия Научного комитета ООН по действиюатомной радиации / Р. М. Алексахин // Радиац. биол. Радиоэкол. 2008. - Т. 48, № 2. - С. 234 - 250.

6. Алексахин Р. М. Радиоэкологические уроки Чернобыля / Р. М. Алексахин // Радиобиология. — 1993. — Т. 33, № 1. — С. 3 — 14.

7. Анненков Б. Н. Основы сельскохозяйственной радиологии / Б. Н. Анненков, Е. В. Юдиннева. — М.: Агропромиздат, 1991. — 287 с.

8. Артемова Н. Е. Допустимые выбросы радиоактивных и вредных химических веществ в приземный слой атмосферы / Н. Е. Артемова, А. А. Бондарев, В. И. Карпов и соавт.; под ред. Е. Н. Теверовского, И. А. Терновского. — М.: Атомиздат, 1980. 240 с.

9. Афанасьев Г. А. Ядерная безопасность / Г. А. Афанасьев. — Харьков: Дельта, 1997. 142 с.

10. Бабаева А. Г. Кроветворные и лимфоидные органы / А. Г. Бабаева // Структурные основы адаптации нарушенных функций: Рук. / Под ред. Д. С. Саркисова. М.: Медицина, 1987. - С. 328 - 342.

11. Бадев В. В. Охрана окружающей среды при эксплуатации АЭС / В. В. Бадев, Ю. А. Егоров, С. В. Казаков. М.: Энергоатомиздат, 1990. -42 с.

12. Батуев, К. М. К вопросу о возрастной морфологии пейеровых бляшек тонкого кишечника человека / К. М. Батуев // Вопросы1 морфологии. — Пермь: Пермск. мед. ин-т, 1967. — Вып. 2. — С. 30 — 38.

13. Биология старения / В. В. Фролькис. Л.: Наука, 1982. — 616 с.

14. Бойко В. И. Аргументы и проблемы атомной энергетики. Безопасность, экономика и экология ядерных технологий. Учеб. пособие / В. И. Бойко, Ф. П. Кошелев. Томск: Компания Янсон, 2001.-80 с.

15. Бурлакова Е. Б. Особенности биологического действия малых доз облучения / Е. Б. Бурлакова, дописать 2х соавт. и соавт. // Радиац. биол. Радиоэкол. 1996. - Т. 36, № 4 . - С. 610 - 631.

16. Воробьев Е. И. Ионизирующие излучения и кровеносные сосуды / Е. И. Воробьев, Р. П. Степанов. — М.: Энергоатомиздат, 1985. — 296 с.

17. Галактионов В. Г. Эволюционная иммунология: Учеб. пособие. -М.: ИКЦ Академкнига, 2005. 408 с.

18. Гундобин Н. П. Особенности детского возраста / Н. П. Гундобин. — СПб., 1906.-344 с.

19. Гусейнова Т. П. Проблема здоровья в экологии человека: философский анализ: Автореф. дис. . канд. филос. наук М.: Наука, 1981.-26 с.

20. Демидчик Е. П. Рак щитовидной железы у детей последствия аварии на Чернобыльской АЭС / Е. П. Демидчик, А. Ф. Цыб, Е. Ф. Лушников . М.: Медицина, 1996. - 208 с.

21. Зеленина Н. В. Гуморальная регуляция апоптоза / Н. В. Зеленина, А. Т. Марьянович, В. Н. Цыган // Программированная клеточная гибель. СПб.: Наука, 1996. - С. 89- 103.

22. Зимина О. А. Влияние пептидов эпифиза на выделение иммуноглобулинов Пейеровыми бляшками крыс vitro / О. А. Зимина, Р. И. Коваленко, А. Д. Ноздрачев // Рос. физиол. журн. им . И.М. Сеченова. -2002. Т. 88, № 1(7). - С. 886 - 893.

23. Зимина, О. А. Пептиды эпифиза в формировании ответа пейеровых бляшек крыс на антиген / О. А. Зимина. СПб., 2003. - 144 с.

24. Зуфаров, К. А. Органы иммунной системы (структурные и функциональные аспекты) / К. А. Зуфаров, К. Р. Тухтаев. Ташкент: Фан, 1987.- 184 с.

25. Зуфаров. К. А. Компенсаторно-приспособительные процессы в кишечнике/К. А. Зуфаров, И М. Байбеков- М.: Медицина, 1974. -208 с.

26. Иванов, А. Е. Патологическая анатомия лучевой болезни / А. Е. Иванов, Н. Н. Куршакова. — М.: Медицина, 1981. — 303 с.

27. Иванов, В. К. Медицинские радиологические последствия Чернобыля для населения России: оценка радиационных рисков / В. К. Иванов, А. Ф. Цыб. М.: Медицина, 2000. - 392 с.

28. Комарова, JI. Н. Комбинированное действие ионизирующего излучения и других факторов окружающей среды на живые организмы: новые закономерности и перспективы: Автореф. дис. . д-ра биол. наук. — Обнинск, 2009. — 28 с.

29. Конопляников, А. Г. Молекулярные и клеточные механизмы поздних лучевых повреждений / А Г. Конопляников // Радиац. биол. Радиоэкол. 1997. - Т. 37, вып. 4. - С. 621 - 628.

30. Конопляников, А. Г. Радиобиология стволовых клеток / А. Г. Конопляников. — М.: Энергоатомиздат, 1984. — 120 с.

31. Корнев, М. А. Анатомия человека от эмбриогенезе до зрелости (избранные разделы спланхнологии): Учеб. пособие / М. А. Корнев, Т. Н. Надъярная. СПб.: ФОЛИАНТ, 2002. - 232 с.

32. Краевский, Н. А. Острая лучевая болезнь / Н. А. Краевский // Патологическая анатомия радиационных поражений. — М.: Медгиз. — Кн. 2.-С. 17-26.

33. Кудряшов, Ю. Б. Лучевое повреждение «критических систем» / Ю. Б. Кудряшов // Лучевое поражение (острое лучевое поражение, полученное в эксперименте). — М.: Изд-во МГУ, 1987. — С. 572.

34. Лобанок, Л. М. Эффекты пролонгированного гамма-облучения и гипоксии на биоэлектрическую активность клеток миокарда / Л. М. Лобанок, А. П. Малыхина // Радиац. биол. Радиоэкол. 1998. - Т. 38, вып. 2.-С. 201 -206.

35. Москалев, Ю. И. Отдаленные последствия воздействия ионизирующих излучений / Ю. И. Москалев. — М.: Медицина, 1991. 464 с.

36. Нестеренко, В. С. Кишечный лучевой синдром / В. С. Нестеренко, Л. И. Уклонская, В. Ф. Черкасов // Мед. радиол. — 1971. — № 12. — С. 68 -83.

37. Нечипоренко, В. В. Радиационная психосоматическая болезнь у лиц, повергшихся воздействию экстремальных факторов аварии на Чернобыльской АЭС / В. В. Нечипоренко, М. П. Боржак, И. С. Рудой и соавт. СПб., 1997. - 68 с.

38. Никитин, Д. П. Окружающая среда и человек: Учеб. пособие для вузов / Д. П. Никитин, Ю. В. Новиков. 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Высш. шк., 1986.-415 с.

39. Николаева, Т. Н. Helicobacter инфекции / Т. Н. Николаева, В. В. Зорина В. М. Бондаренко // Название журнала. 2004.- Т. 14, № 2 — С. 57-60.

40. Николаева, Т. Н. Иммуностимулирующая и антиканцерогенная активность нормальной лактофлоры кишечника / Т. Н. Николаева, В. В. Зорина, В. М. Бондаренко // Экспер. клин, гастроэнтерол. — 2004. — №4.-С. 39-43.

41. Никонова, М. Ф. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию / М. Ф. Никонова, М. М. Литвина, М. И. Варфоломеева и соавт. // Иммунология. — 1999. -№2.-С. 20-23.

42. Ноздрачев, А. Д. Начала физиологии: Учеб. для вузов / А. Д. Ноздрачев, Ю. И. Баженов, И. А. Баранникова и соавт. — СПб.: Изд-во Лань, 2001 1088 с.

43. Одинцова, Е. А. Возрастные ультраструктурные пострадиационные изменения эндокринных клеток кишечника / Е. А. Одинцова, И. М. Кветной, А. В. Трофимов и соавт. // Бюл. экспер. биол. и мед. ЦАЗИ. -2001. -№ 11.-С. 132-579.

44. Пальцев, М. А. Руководство по нейроиммуноэндокринологии / М. А. Пальцев, И. М. Кветной. М.: Медицина, 2006. - 384 с.

45. Пелевинаи, И. И. Особенности действия радиации в малых дозах / И. И. Пелевинаи, дописать 2х соавт. и соавт. // Докл. V съезд по радиационным исследованиям. — М., 2001. — Т. 1. — С. 13.

46. Петренко, В; М. Основы эмбриологии: Вопросы развития в анатомии человека / В. М. Петренко. СПб.: ДЕАН, 2003. - с.

47. Петренко, В. М. Развитие лимфатической системы в пренатальном онтогенезе человека / В. М. Петренко. М.: Петр; СПб.: СПбГМА, 1998;-162 с.

48. Петренко, В. М. Эволюция и онтогенез лимфатической системы / В. М. Петренко. СПб.: ДЕАН, 2003. - 336 с.

49. Петров, РГ В: Иммунный ответ и старение / Р. В. Петров, Р. М. Хаитов // Успехи соврем, биол. 1975. - Т. 79, вып. 1. - С. 111 — 127.

50. Полак, Д. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы / Д. Полак, С. Ван Норден. — М.: Мир, 1987. — 74 с.

51. Поленов, А. Л. Нейроэндокринология: в 2 кн. / А. Л. Поленов. -СПб.: Наука, 1993. 398 с.

52. Пономарева, Н. В. Анализ корреляции между нейрофизиологическими показателями и уровнем гормона стресса кортизола при нормальном старении / Н. В. Пономарева, В. Ф. Фокин, О. А. Павлова и соавт // Вестн. РАМН. 1999. - № 3. - С. 46 — 49.

53. Пономарева, Н. В. Нейро-иммунные взаимодействия при нормальном старении и болезни Альцгеймера / Н. В. Пономарева, В. Ф. Фокин, Л. В. Андросова и соавт. // Вестн. РАМН. 1995. - № 12. -С. 27-32.

54. Привес, М. Г. Анатомия человека / М. Г. Привес. — М.: Медицина, 1985. — С. 269 — 275.указать общее количество страниц

55. Ревелль, П. Среда нашего обитания: в 4 кн. / П. Ревелль, Ч. Ревелль // Энергетические проблемы человечества / Пер. с англ. — М.: Наука, 1995. Кн. 3.-С. 296.

56. Руководство по гистологии: в 2 т. / Под ред. В. Л. Быкова, Р. К. Данилова, Л. А. Одинцовой. СПб.: СпецЛит, 2001. — Т. 2. — 736 с.

57. Сапин, М. Р. Иммунная система человека / М. Р. Сапин, Л. Е. Этинген. М.: Медицина, 1996. - 384 с.

58. Сапин, М. Р. Иммунные структуры пищеварительной системы / М. Р. Сапин. -М.: Медицина, 1987. 218 с.

59. Саркисов, Д. С. Обновление структур организма / Д. С. Саркисов, Л. И. Аруин // Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. М.: Медицина, 1987. - С. 20 - 36.

60. Смирнов, В. С. Коррекция радиационных иммунодефицитов / В. С. Смирнов, В. X. Хавинсон, Г. М. Яковлев и соавт. — СПб.: Наука, 1992.-32 с.

61. Старков, В. Д. Радиационная экология / В. Д. Старков, В. И. Мигунов. Тюмень: ФГУ ИПП Тюмень, 2003. - 304 с.

62. Степанова, Е. Н. Надпочечники / Е. Н. Степанова // Структурные основы адаптации нарушенных функций / Под ред. Д. С. Саркисова. -М.: Медицина, 1987.-С. 310-319.

63. Трофимов, А. В. Нейроэндокринные клетки желудочно-кишечного тракта в моделях преждевременного старения / А. В. Трофимов, И. В. Князькин, И. М. Кветной. СПб.: ДЕАН, 2005. - 208 с.

64. Тяжелова, В. Г. Кинетический принцип в межвидовых экстраполяциях / В. Г. Тяжелова. М.: Наука, 1988. - 194 с.

65. Угрюмов, М. В. Современные методы иммуноцитохимии и гистохимии / М. В. Угрюмов. — М., 1991. 186 с.

66. Физиология человека / Под ред. В. М. Покровского, Г. Ф. Коротько. -М.: Медицина, 2003. 656 с.

67. Фокин, В. Ф. Взаимосвязи между деятельностью головного мозга и иммунной системой у человека / В. Ф. Фокин, Н. В. Пономарева, Т. П. Секирина и соавт. // Физиол. чел. 1995. - Т. 21, № 2. - С. 15 - 23.

68. Фокин, В. Ф. Нейрофизиологические предикторы смерти / В. Ф. Фокин, Н. В. Пономарева, Е. Е. Букатина // Успехи геронтол. 1997. -Т. 1.-С. 61-65.

69. Фокин, В. Ф. Нервно-иммунные отношения при нормальном старении и деменциях альцгеймеровского типа / В. Ф. Фокин, Н. В. Пономарева, Л. В. Андросова и соавт. // Вестн. РАМН. — 1996. — № 4. -С. 32-39.

70. Хлыстова, 3. С. Становление системы иммуногенеза плода человека / 3. С. Хлыстова. -М.: Медицина, 1987. 256 с.

71. Хлыстова, 3. С. Структурные и иммунологические показатели пейеровых бляшек зародыша человека / 3. С. Хлыстова, Т. А. Минина // Бюл. экспер. биол. и мед. ЦАЗИ. — 1987. — Т. 105, № 5. — С. 3-621.

72. Хромова, С. С. Микрофлора кишечника и механизмы иммунорегуляции / С. С. Хромова, А. Н. Шкопоров, Б. А. Ефимов и соавт. // XII Конгр. дет. гастроэнтерол. Рос. М., 2006. — С.

73. Цыган, В. Н. Роль апоптоза в патогенезе и лечении заболеваний / В. Н. Цыган, Д. В. Булавин, А. Т. Марьянович и соавт. // Программированная клеточная гибель. — СПб.: Наука, 1996. С. 120 - 135.

74. Чернышева, М. П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию: Учеб. пособие / М. П. Чернышева. СПб.: Глаголь, 1995. - 296 с.

75. Штылик, А. В. Метасимпатическая иннервация лимфоидных фолликулов Пейеровых бляшек тонкой кишки крыс / А. В. Штылик, В. Г. Скопичев, А. Д. Ноздрачев // Рос. физиол. журн. им . И.М. Сеченова. 1996. - Т. 82 (7). - С. 85 - 92.

76. Южаков, В. В. APUD-механизм в эндокринных и неэндокринных клетках. Возможное значение биогенных аминов в патогенезе пострадиационных дисфункций / В. В. Южаков, И. М. Кветной // Хирургия эндокринных желез. — СПб., 1995. — С. 211—213.

77. Ярилин, А. А. Основы иммунологии / А. А. Ярилин. М.: Медицина, 1999. - 608 с.

78. Ярилин, А. А. Тимус как орган эндокринной системы / А. А. Ярилин, И. М. Беляков // Иммунология. 1996. — № 1. — С. 4 — 11.

79. Abreu, М. Т. Immunologic regulation of toll-like receptors in gut epithelium / M. T. Abreu // Curr opin gastroenterol. 2003. — Vol. 19. -P. 559 - 564.

80. Alignani D., Maletto В., Liscovsky M., Ropolo A., Moron G., Pistoresi-Palencia M.C. Orally administered OVA/CpG-ODN induces specific mucosal and systemic immune response in young and aged mice // J. Leukoc. Biol. 2005. - Vol. 77, N 6. - P. 898-905.

81. Andrew, A. The APUD-concept. Where has it led us? / A. Andrew // Brit med bull. 1982. - Vol. 38. - P. 221 - 225.

82. Asigbetse K.E., Eigenmann P.A., Frossard C.P. Intestinal lamina propria TcRgammadelta+ lymphocytes selectively express IL-10 and IL-17 // J. Investig. Allergol. Clin. Immunol. 2010. - Vol. 20, N 5. - P. 391-401.

83. Beyaz, F. Identification of intestinal M cells in isolated lymphoid follicles and Peyer's patches of the Angora rabbit / F. Beyaz, E. Ergiin, A. G. Bayraktaroglu et al. // Cell tissue res. 2010. - Vol. 341, № 3. -P. 417-27.

84. Boasen, J. House dust extracts elicit Toll-like receptor-dependent dendritic cell responses / J. Boasen, D. Chisholrn, L. Lebet et al. // J allergy clin immun. 2005. - Vol. 116. - P. 185 - 195.

85. Brandtzaeg, P. Mucosal immunity: induction, dissemination, and effector functions / P. Brandtzaeg // Scand j immunol. — 2009. — Vol. 70, № 6. — P. 505- 15.

86. Cameron, I. L. Evidence for an essentially constant duration of DNA synthesis in renewing epithelia of the adult mouse / I. L. Cameron, R. C. Greulich // J cell biol. 1963. - Vol. 18. - P. 31 - 40.

87. Carril M.S., Aragón J.P., González Fernández A. Age-related accumulation of memory cells in mouse Peyer's patches // Immunol. Lett. 2002. - Vol. 83, N 1. - P. 39-45.

88. Casarett, G. W. Ratiation Histopathology / G. W. Casarett Boca Raton: CRC Press, 1980. - Vol. 1. - 160 p.

89. Casarett, G. W. Ratiation histopathology / G. W. Casarett. Boca Raton: CRC Press, 1980. - Vol. 2. - 160 p. Vol. 2. -176 p. указать один источник!

90. Chassaing В., Rolhion N., Vallée A., Salim S.Y., Prorok-Hamon M., Neut

91. Chiba S., Nagai T., Hayashi T., Baba Y., Nagai S., Koyasu S. Listerial invasion protein internalin В promotes entry into ileal Peyer's patches in vivo // Microbiol. Immunol. 2011. - Vol. 55, N 2. - P. 123129.

92. Chiba, Y. Well-controlled proinflammatory cytokine responses of Peyer's patch cells to probiotic Lactobacillus casei / Y. Chiba, К. Shida, S. Nagata et al. // Immunology. 2010. - Vol. 130, № 3. - P. 352 - 62.

93. Coles, M. Cellular and molecular requirements in lymph node and Peyer's patch development / M. Coles, D. Kioussis, H. Veiga-Fernandes //

94. Prog mol biol transi sci. 2010. - Vol. 92. - P. 177 - 205.

95. Conlon, J. M. The evolution of neuroendocrine peptides / J. M. Conlon,

96. D. Larhammar // Gen cotp endocrinol. 2005. - Vol. 142. - P. 53 - 59.

97. Cornes, J. S. Number, size and distribution of Peyer's patches in the human small intestine / J. S. Cornes // Gut. 1965. — Vol. 6. - P. 225 -233.

98. Cupedo T. Human lymph node development: An inflammatory interaction // Immunol. Lett. 2011. - Vol. 54, N 3. - P. 98-102.

99. Daley-Bauer L.P., Purdy S.R., Smith M.C. et al. // Clin. Vaccine Immunol.-2010. Vol. 17, N 12. - P. 2007-2015.

100. Debard, N. Development of Peyer's patches, follicle-associated epithelium and M cell: Lessons from immunodeficient and knockout mice / N. Debard, F. Sierro, J. P. Kraehenbuhl // Immunology. 1999. - Vol. 11.-P. 183-191.

101. Debard, N. Development of Peyer's patches, follicle-associated epithelium and M cell: Lessons from immunodeficient and knockout mice / N. Debard, F. Sierro, J. P. Kraehenbuhl // Semin immunol. 1999. -Vol. 11.-P. 183-191.

102. Defaweux V., Dorban G., Antoine N. et al. Neuroimmune connections in jejunal and ileal Peyer's patches at various bovine ages: potential sites for prion neuroinvasion // Cell Tissue Res. 2007. - Vol. 329, N 1.-P. 35-44.

103. Dobson, B. J. Development of the thymus and Peyer's patches in the first year of life in red deer (Cervus elaphus) / B. J. Dobson, C. G. Mackintosh, J. F. Griffin // Vet immunol immunopathol. 2010. - Vol. 15, 137? № 1-2.-P. 93-98.

104. Donis-Hernandez F.R., Parkhouse R.M., Santos-Argumedo L. Ontogeny, distribution and function of CD38-expressing B lymphocytes in mice// Eur. J. Immunol.-2001.-Vol. 31, N4.-P. 1261-1267.

105. Dubois, A. Prospects for management of gastrointestinal injury associated with the acute radiation syndrome / A. Dubois, R. I. Walker // Gastroenterology. 1988. - Vol. 95, № 2. - P. 500 - 507.

106. Dunn-Walters D.K., Banerjee M., Mehr R. Effects of age on antibody affinity maturation I I Biochem. Soc. Trans. 2003. - Vol. 31, N 2.-P. 447-448.

107. Eberl, G. An essential function for the nuclear receptor RORyt in the generation of fetal lymphoid tissue inducer cells / G. Eberl, S. Marmon, M. J. Sunshine et al. // Nat immunol. 2004. - Vol. 5, № 1. - P. 64 - 73.

108. Ermak, Th. H. Phenotype and distribution of T lymphocytes in Peyer's patches of athymic mice Histochemistry and Cell Biology Springer Berlin / Th. H. Ermak, R. L. Owen // Heidelberg. 1987. - Vol. 87, № 4. - P. 321 -325.

109. Flo J., Massouh E. Age-related changes of naive and memory CD4 rat lymphocyte subsets in mucosal and systemic lymphoid organs // Dev. Comp. Immunol. 1997. - Vol. 21, N 5. - P. 443-453.

110. Foster N., Macpherson G.G. Murine cecal patch M cells transport infectious prions in vivo // J. Infect. Dis. 2010. - Vol. 202, N 12. - P. 1916-1919.

111. Fujihashi K., McGhee J.R. Mucosal immunity and tolerance in the elderly // Mech. Ageing Dev. 2004. - Vol. 125, N 12. - P. 889-898.

112. Ginaldi, L. Cell proliferation and apoptosis in the immune system in the elderly / L. Ginaldi, M. De Martines, A. D'Ostilio et al. // Immunol res.-2000.-Vol. 21, № 1.-P. 31-38.

113. Gottero, C. Ghrelin: a link between eating disorders, obesity and reproduction / C. Gottero, F. Broglio, F. Prodam et al. // Nutr neurosci. -2004. -Vol. 7. P. 255 - 270.

114. Hansson J., Bosco N., Favre L., Raymond F., Oliveira M., Metairon S., Mansourian R., Blum S., Kussmann M., Benyacoub J. Influence of gut microbiota on mouse B2 B cell ontogeny and function // Mol. Immunol. — 2011.-Vol 53.-P. 1032-1035.

115. Harari, Y. Intestinal anaphylaxis: radiationinduced suppression / Y. Harari, D. Kester, E. Travis et al. // Am j physiol. 1994. - Vol. 267. - P. 709-715.

116. Hausman, P. B. Changes in the immune response with age / P. B. Hausman, M. E. Weksler // Handbook of the Biology of Aging / Ed. by C. E. Finch, E. L. Schneider. — 2 nd ed. New York: Van Nostrand Reinhold, 1985.-P. 414-432.

117. Helm R.M., Golden C., McMahon M., Thampi P., Badger T.M., Nagarajan S. Diet regulates the development of gut-associated lymphoid tissue in neonatal piglets // Neonatology. -2007. Vol. 91, N 4. P. 248255.

118. Isaacson, P. G. Primary B-cell gastric lymphoma / P. G. Isaacson, J. Spencer, T. Finn // Hum pathol. 1986. - Vol. 17. - P. 72 - 82.

119. Jung C., Hugot J.P, Barreau F. Peyer's Patches: The Immune Sensors of the Intestine // Int. J. Inflam. 2010. - Vol. 19. - P. 358-361.

120. Kamani, N. R. Structure and development of the immune system / N. R. Kamani, S. D. Douglas // Basic and Clinical Immunology / Ed. by D. P. Stites, A. I. Terr. — 7 th ed. — East Norwalk, Conn.: Appleton and Lange, 1991.-P. 9-33.

121. Koboziev I., Karlsson F., Grisham M.B. Gut-associated lymphoid tissue, T cell trafficking, and chronic intestinal inflammation // Ann. N Y Acad. Sei. 2010. - Suppl. 1. - P. 86-93.

122. Krege J., Seth S., Hardtke S., Davalos-Misslitz A.C., Förster R. Antigen-dependent rescue of nose-associated lymphoid tissue (NALT) development independent of LTbetaR and CXCR5 signaling // Eur. J. Immunol. 2009. -Vol. 39, N 10. - P. 2765-2778.

123. Kvetnoy, I. M. Diffuse neuroendocrine system: structural and functional effects of radiation injury to APUD-cells / I. M. Kvetnoy, V. V. Yuzhakov, A. O. Molotkov et al. // Scann micr. 1996. - Vol. 10, № 1. -P. 112.

124. Kvetnoy, I. M. Diffuse neuroendocrine system: structural and functional effects of radiation injury to APUD-cells / I. M. Kvetnoy, V. V. Yuzhakov, A. O. Molotkov // Scanning micr. 1996. - Vol. 10, № 1. - P. 261 -278.

125. Lawson V.A., Furness J.B., Klemm H.M., Pontell L., Chan E., Hill A.F., Chiocchetti R. The brain to gut pathway: a possible route of prion transmission//Gut.-2010.-Vol. 59, N 12.-P. 1643-1651.

126. Levast, B. Differences in transcriptomic profile and IgA repertoire between jejunal and ileal Peyer's patches / B. Levast, M. De Monte, S. Melo et al. // Dev comp immunol. 2010. - Vol. 34, № 2. - P. 102-6.

127. Lochner M., Ohnmacht C., Presley L., Bruhns P., Si-Tahar M., Sawa S., Eberl G. Microbiota-induced tertiary lymphoid tissues aggravate inflammatory disease in the absence of RORgamma t and LTi cells // J. Exp. Med. 2011. - Vol. 208, N 1. - P. 125-134.

128. Lyu S.Y., Park W.B. Mistletoe lectin transport by M-cells. in follicle-associated epithelium (FAE) and IL-12 secretion in dendritic cells situated below FAE in vitro // Arch. Pharm. Res. 2010. - Vol. 33, N 9. -P. 1433-1441.

129. Machado J.G., Hyland K.A., Dvorak C.M., Murtaugh M.P. Gene expression profiling of jejunal Peyer's patches in juvenile and adult pigs // Mamm. Genome.-2005.-Vol. 16, N 8.-P. 599-612.

130. Madden, K. S. Alteration in Sympathet ic NA-erg ic Innervation in Lymphoid Organs with Age / K. S. Madden, S. Thyagarajan, D. L. Feiten // Ann n y acad sci. —1994. Vol. 840. - P. 262-268.

131. Mason, K. A. Comparison of the gastrointestinal syndrome / K. A. Mason, H. R. Withers, W. H. McBride et al. // Radiat res. 1988. - Vol. 91, № l.-P. 242-249.

132. Mason, K.A. Comparison of the gastrointestinal syndrome after totalbody or totalabdominal irradiation / K. A. Mason, H. R. Withers, W. H. McBride et al. // Radiat res. 1989. - Vol. 117, № 3. - P. 480 - 488.

133. Massari, L. P. Epidermal malignant tumors: pathogenesis, influence of UV light and apoptosis / L. P. Massari, M. Kastelan, F. Gruber // Coll antropol. 2007. - Vol. 31, suppl. 1. - P. 83 - 5.

134. McFarland A.P., Savan R., Wagage S., Addison A., Ramakrishnan K., Karwan M., Duong T., Young H.A. Localized Delivery of Interferon-P by Lactobacillus Exacerbates Experimental Colitis // PLoS One. — 2011. -Vol. 18, Suppl. 6.-P. 1562-1568.

135. Norrby, R. Antibiotics in the elderly / R. Norrby // Aging Process: Therapeutic Implications / Ed. by R. N. Butler, A. G. Beam. New York: Raven Press, 1984. - P. 229 - 245.

136. Ogra, P. L. Vaccination strategies for mucosal immune responses / P. L. Ogra, H. Faden, R. C. Welliver // Clin microbial rev. 2001. - Vol. 14. -P. 430-445.

137. Oliveira G.G., Holton J., Lydyard P.M. Long-term treatment of NZB mice with anti-CD4 results in wasting disease, lymphoid atrophy and chronic diarrhea// Gut Microbes. -2010. Vol. 1, N 5. - P. 345-355.

138. Ouyang, Q. Reduced IFN-y production in elderly people following in vitro stimulation with influenza vaccine and endotoxin / Q. Ouyang, G. Cicek, R. G. J. Westendorp et al. // Mech ageing dev. 2000. - Vol. 121. -P. 131 - 137.

139. Owen, J. J. T. Embryology o the lymphoid system / J. J. T. Owen, E. J. Jenkinson // Progr allergy. 1981. - Vol. 29. - P. 1 - 27.

140. Owen, R. L. Epithelial cell specialization within human Peyer's patches: an ultrastructural study of intestinal lymphoid follicles / R. L. Owen, A. L. Jones // Gastroenterology. 1974. - Vol. 66. - P. 189 - 203.

141. Owens, R. J. Human phosphodiesterase 4A: characterization of full-length and truncated enzymes expressed in COS cells / R. J. Owens, C. Catterall, D. Batty et al. // Biochem j. 1998. - Vol. 326. - P. 53-60.

142. Pawelec, G. T-cells and aging / G. Pawelec, R. B. Effros, C. Caruso et al. // Front biosci. 1999. - № 4. - P. d216 - d269.

143. Pearse, A. G. E. Neural crest origin of the endocrine polypeptide (APUD) cells of the gastrointestinal tract and pancreas / A. G. E. Pearse, J. M. Polak // Gut. 1971. - Vol. 12. - P. 783 - 788.

144. Pearse, A. G. E. The diffuse neuroendocrine system: peptides, amines, placodes and the APUD theory / A. G. E. Pearse // Progr brain res. -1986.-Vol. 68.-P. 25-31.

145. Phair, P. J. Host defence in the aged. In: Infections in the Elderly / P. J. Phair; ed. by R. A. Gleckman, N. M. Gantz. Boston: Little Brown, 1983.-P. 114-135.

146. Ping X., Li Y., Li J. Antigen sampling on the Peyer's patches in a murine small bowel transplantation model // Transplant. Proc. 2010. — Vol. 42, N 9. - P. 3803-3808.

147. Polak, J. M. Immunocytochemistry of regulatory peptides / J. M. Polak, S. R. Bloom // Immunocytochemistry: Modern Methods and Application / Ed. by J. M. Polak, S. Van Noorden. Bristol, 1986. - P. 328 - 348.

148. Pospischil, A. Struktur und Funktion von Peyerschen Platten im Darm verschiedener Tierarten / A. Pospischil // Schweiz arch tierheilk. — 1989. -Vol. 131.-P. 595-603.

149. Press C.M., Heggebo R., Espenes A. Envolvement of gut-associated lymphoid tissue of ruminants in the spread of transmissible spongiform encephalopathies // Adv. Drug. Deliv. Rev. 2004. - Vol. 56, N 6. - P. 885-899.

150. Raikhlin, N. T. The APUD system (diffuse endocrine system) in normal and pathological states / N. T. Raikhlin, I. M. Kvetnoy // Sov sci rev f physiol gen biol (USA). 1994. - Vol. 8, pt. 4. - P. 1 - 44.

151. Rogerson B.J., Harris D.P., Swain S.L., Burgess D.O. Germinal center B cells in Peyer's patches of aged mice exhibit a normal activation phenotype and highly mutated IgM genes // Mech. Ageing Dev. — 2003. -Vol. 124, N2.-P. 155-165.

152. Romero-Trevejo, J. L. Immunohistochemical study of macrophage and cytokine dynamics in the gut of scrapie-infected mice / J. L. Romero-Trevejo, J. C. Gomez.Villamandos, M. Pedrera et al. // Histol histopathol. 2010. - Vol. 25, № 8. - P. 1025-38.

153. Rowe, J. W. Physiologic changes with age and their clinical relevance / J. W. Rowe // Aging Process: Therapeutic Implications / Ed. by R. N. Butler, A. G. Beam. New York: Raven Press, 1984. - P. 41 - 50.

154. Saito, H. Generation of intestinal T cells from progenitors residing in gut cryptopatches / H. Saito, Y. Kanamori, T. Takemori et al. // Science. -1998. Vol. 280. - P. 275-278.

155. Schmucker D.L., Owen R.L., Outenreath R., Thoreux K. Basis for the age-related decline in intestinal mucosal immunity // Clin. Dev. Immunol. 2003. - Vol. 10, N 2-4. - P. 167-172.

156. Schmucker D.L., Thoreux K., Owen R.L. Aging impairs intestinal immunity // Mech. Ageing Dev. 2001. - Vol. 122, N 13. - P. 13971411.

157. Scholzen, T. Division of Molecular Immunology / T. Scholzen, J. Gerdes // J cell physiol. 2000. - Vol. 182. - P. 311 - 322.

158. Schuppler M., Loessner M.J. The Opportunistic Pathogen Listeria monocytogenes: Pathogenicity and Interaction with the Mucosal Immune System //Int. J. Inflam.- 2010. -Vol. 14.- P. 1875-1881.

159. Schwartz, J. L. Selective elimination of human lymphoid cells with unstable chromosome aberrations by p53-dependent apoptosis / J. L. Schwartz, R. Jordan // Carcinogenesis. 1997. - Vol. 18, № 1. - P. 201 -5.

160. Sedgwick, D. M. Dose-response studies of depletion and repopulation of rat intestinal mucosal mast cells after irradiation / D. M. Sedgwick, A. Ferguson // Int j radiat biol. 1994. - Vol. 65, № 4. - P. 483 - 495.

161. Smith, J. R. C. The passage of ferritin into jejunal epithelial cells / J. R. C. Smith, J. R. Casley-Smith // Experentia. 1980. - Vol. 23 - P. 370 -37 1.

162. Smith, R. G. Molecular endocrinology and physiology of the aging central nervous system / R. G. Smith, L. Betancourt, Y. Sun // Endocr rev. 2005. - Vol. 26. - P. 203-250.

163. Solarino, B. Postmortem morphology and viability of human Peyer's patches in distal ileum: a technical note / B. Solarino, G. Di Vella, T. Magrone et al. // Immunopharmacol immunotoxicol. 2009. - Vol. 31, №4.-P. 563-9.

164. Solomon, G. F. Psychoneuroimmunologic aspects of aging / G. F. Solomon, D. Benton /7 Handoook of Human Stress and Immunity / Ed. by R. Glaser, J. K. Kiekolt-Glaser. — San Diego, Calif.: Academic Press, 1994.-P. 341 -363.

165. Strober W. Adherent-invasive E. coli in Crohn disease: bacterial "agent provocateur" // J. Clin. Invest. 2011. - Vol. 121, N 3. - P. 841844.

166. Sun, J. Association of Lactobacillus acidophilus with mice Peyer's patches / J. Sun, T. T. Zhou, G. W. Le et al. // Nutrition. 2010. - Vol. 26, № 10.-P. 1008-13.

167. Suzuki K., Kawamoto S., Maruya M., Fagarasan S. GALT: organization and dynamics leading to IgA synthesis // Adv. Immunol. —2010.-Vol. 107.-P. 153-185.

168. Tachibana M., Tenno M., Tezuka C., Sugiyama M., Yoshida H., Taniuchi I. Runxl/Cbf.32 complexes are required for lymphoid tissue inducer cell differentiation at two developmental stages // J. Immunol.2011.-Vol. 186, N3. — P. 1450-1457.

169. Taganna J., de Boer A.R., Wuhrer M., Bouckaert J. Glycosylation changes as important factors for the susceptibility to urinary tract infection // Biochem. Soc. Trans. 2011. - Vol. 39, N 1. - P. 349-354.

170. Terry, N. H. The influence of bone marrow depletion on intestinal radiation damage / N. H. Terry, E. L. Travis // Int j radiat oncol boil phys. 1989.-Vol. 17, №3.-P. 569-573.

171. Tezuka H., Abe Y., Asano J., Sato T., Liu J., Iwata M., Ohteki T. Prominent Role for P!asmacytoid Dendritic Cells in Mucosal T Cell-Independent IgA Induction // Immunity. 2011. - Vol. 34, N 2. - P. 247257.

172. Thrasher, J. D. The duodenal progenitor population. II. Age related changes in size and distribution / J. D. Thrasher, R C. Greulich // J exp zool. 1965. - Vol. 159, № 3. - P. 385 - 96.

173. Tsai, Y. T. Effect of the administration of Lactobacillus paracasei subsp. paracasei NTU 101 on Peyer's patch-mediated mucosal immunity / Y. T. Tsai, P. C. Cheng, J. W. Liao et al. // Int immunopharmacol. — 2010. — Vol. 10, №7.-P. 791-798.

174. Tsaprouni L.G., Ito K., Powell J.J., Adcock I.M., Punchard N. Differential patterns of histone acetylation in inflammatory bowel diseases // J. Inflamm. (Lond). 2011. - Vol. 8, N 1. - P. 1-17.

175. Wang X., Ohnishi T. p53 accumulation in various organs of rats after whole-body exposure to low-dose X-ray irradiation / X. Wang, H. Matsumoto, K. Okaichi // Anticancer res. 1996. - Vol. 16, № 4A. - P. 1671 -1674.

176. Windhorst D. B. Chediak-Higashi syndrome: Hereditary gigantism of cytoplasmic organelles / D. B. Windhorst, A. S. Xelickson, R. A. Good // Science. 1966. - Vol. 7. - P. 81-83.

177. Zhou Y.J., Gao J., Yang H.M., Zhu J.X., Chen T.X., He Z.J. Morphology and ontogeny of dendritic cells in rats at different development periods // World J. Gastroenterol. 2009. — Vol. 15, N 10. — P. 1246-1253.

Оглавление диссертации Грабежев, Лев Александрович :: 2011 :: Санкт-Петербург

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Грабежев, Лев Александрович, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Грабежев, Лев Александрович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций