Автореферат и диссертация по медицине (14.01.25) на тему:Диагностическая значимость цитокинового профиля конденсата выдыхаемого воздуха у пациентов с бронхиальной астмой
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.01.25
Оглавление диссертации Дугарова, Ирина Далаевна :: 2010 :: Москва
Список принятых сокращений
Общая характеристика работы
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Введение
1.2. Механизм действия цитокинов
1.3. Классификация цитокинов
1.4. Характеристика цитокинов
1.5. КВВ и методологические вопросы
1.6. Цитокины в КВВ при бронхиальной астме
1.7. Цитокины в КВВ при других заболеваниях органов дыхания
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика обследованных групп
2.2. Методы исследования
2.2.1. Клинико-инструментальные методы
2.2.2. Исследование функции внешнего дыхания
2.2.3. Сбор КВВ
2.2.4. Определение рН КВВ
2.2.5. Определение цитокинов в КВВ
2.3. Статистическая обработка результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Клиническая характеристика групп
3.2. Уровень рН и объем КВВ
3.3. Концентрация цитокинов в КВВ и сыворотке крови
3.4. Корреляционный анализ
3.5. Клинические примеры 83 ВЫВОДЫ 87 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 87 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
БА - бронхиальная астма
БАЛ — бронхоальвеолярный лаваж
ПС - глюкокортикоиды
ГМ-КСФ - колониестимулирующий фактор гранулоцитов и моноцитов
ДН - дыхательная недостаточность
ИКЧ - индекс курящего человека
ИЛ-4 - интерлейкин
ИЛ-6 - интерлейкин
ИЛ-8 - интерлейкин
ИЛ-13 — интерлейкин
ИМТ - индекс массы тела
ИФН-у - интерферон-гамма
КВВ - конденсат выдыхаемого воздуха
ЛТ — лейкотриены
ОФВ1 - объем форсированного выдоха за первую секунду
ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция
ПГ — простагландины
ПСВ - пиковая скорость выдоха
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СДЛА — среднее давление в легочной артерии
ФВД - функция внешнего дыхания
ФЖЕЛ - форсированная жизненная ёмкость легких
ФНО-а — фактор некроза опухолей-а
ХОБЛ - хроническая обструктивная болезнь лёгких
ЧД - частота дыхания
ЧСС - частота сердечных сокращений
ATS - Американское торакальное общество
ERS - Европейское респираторное общество
GINA - Глобальная стратегия по бронхиальной астме
IgE — иммуноглобулин класса Е
PDGF — фактор роста тромбоцитов
TGF-J3 - трансформирующий фактор роста-(
TSLP - тимус-стромальный лимфопоэтин
VCAM-1 — молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 типа
Введение диссертации по теме "Пульмонология", Дугарова, Ирина Далаевна, автореферат
Бронхиальная астма (БА) является серьезной глобальной проблемой мирового здравоохранения. Люди всех возрастов во всем мире страдают этим хроническим заболеванием, и в случае тяжелого неконтролируемого течения эта болезнь ограничивает и значительно ухудшает качество жизни человека. Эта болезнь приводит к потере трудоспособности и снижает участие пациента в жизни семьи [5].
БА является одним из самых распространенных заболеваний человечества. В 1998 г. число больных БА во всем мире равнялось приблизительно 155 млн. человек, а в настоящее время эта цифра достигла 300 млн. За последние 10 лет произошло удвоение числа заболевших этим недугом. По данным некоторых прогностических аналитических исследований, подсчитано, что к 2025 г., в том случае, если процесс урбанизации будет продолжаться теми же темпами и городское население во всем мире увеличится с 45 до 59%, БА разовьется дополнительно у 100-150 млн. человек. В настоящее время в Европе Б А страдают более 30 млн. больных [6].
Несмотря на большое число исследований, начиная от эпидемиологических исследований и заканчивая изучением тонких механизмов реализации болезни на молекулярном уровне, в понимании БА, ее течении, механизмах развития и подходах к лечению, существует много неясностей и противоречий, что заставляет продолжать исследования в данной области [12].
В настоящее время наибольшее значение для диагностики БА имеют клинические и функциональные тесты. Однако симптомы болезни не всегда отражают природу и степень выраженности воспаления, о чем» свидетельствуют слабовыраженные взаимосвязи между значениями функциональных тестов и маркеров воспаления [128].
БА является комплексным хроническим воспалительным заболеванием с вовлечением многих структурных клеток и клеток воспаления, с высвобождением медиаторов воспаления, как результат патофизиологических изменений при Б А [30]. Цитокины и хемокины являются белковыми медиаторами, которые играют ключевую роль в управлении патофизиологическими процессами при БА. На данный момент известно около 50 цитокинов и хемокинов, участвующих в патогенезе этого заболевания [29], однако их роль в патогенезе Б А остается малоизученной.
В настоящее время в клинической практике широко используются неинвазивные методы диагностики и контроля лечения при БА, в частности исследование цитокинов в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ) [78].
Несмотря на наличие стандартизованных международных рекомендаций по лечению и ведению пациентов с БА, ни у всех пациентов удается достичь контроля заболевания. Более чем у 25% пациентов, несмотря на терапию системными глкжокортикоидами (ГК), сохраняется нестабильное течение заболевания и высокий риск обострений. Поэтому изучение особенностей воспаления при БА с помощью исследования КВВ является весьма перспективным, так как помогает совершенствовать диагностику и расширяет возможности патогенетической терапии.
Исследование маркеров воспаления в легких обычно осуществляется при использовании метода индуцированной мокроты [1, 34, 76], бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), бронхобиопсий [23], а также сыворотки крови и мочи для оценки системных эффектов. Однако получение БАЛ и бронхобиоптатов являются инвазивными, травматичными методами, вызывающими множественные побочные эффекты, вследствие чего не могут проводиться через короткий промежуток времени, а также у тяжелых больных, детей и в амбулаторной практике [2]. В противовес этих методик исследование КВВ является практически единственным неинвазивным методом исследования для изучения выраженности воспаления при БА, хорошо переносится пациентами, проводится в течение 10 минут и не требует больших материальных затрат [118].
Цитокины выполняют одну из ключевых ролей в развитии и поддержании хронического воспаления дыхательных путей при БА. Анализ КВВ позволяет оценить активность воспаления в легких, уточнить состояние местного воспаления и оценить роль цитокинов в нем. Однако работы посвященные изучению концентраций цитокинов, как ключевого звена воспаления при БА, носят единичный, разрозненный, не систематизированный и дискуссионный характер. Скорее всего, это обусловлено разными методиками получения КВВ, определения цитокинов, неоднородной выборкой больных.
В то же время известно, что цитокины атопии (интерлейкин (ИЛ)-4 и ИЛ-13) запускают синтез иммуноглобулина Е (IgE), отвечают за развитие аллергического типа иммунного ответа. Провоспалительные цитокины активируют факторы транскрипции, приводящие в действие множество генов, отвечающих за запуск воспалительной реакции [28].
Кроме того, о дефекте противовоспалительных механизмов при БА свидетельствуют фактор некроза опухолей-а (ФНО-а), ИЛ-6, противоспалительный цитокин - интерферон-у (ИФН-у) и хемокин (ИЛ-8).
Цель исследования:
Изучить значение цитокинов атопии (ИЛ-4, - ИЛ-13), провоспалительных (ИЛ-6, ФНО-а), противовоспалительного (интерферон-у) и хемокина (ИЛ-8) в КВВ и сыворотке крови, установить взаимосвязь между концентрацией цитокинов и клинико-функциональными показателями у больных БА среднетяжелого течения в разные фазы течения заболевания.
Задачи исследования:
1. Определить содержание различных цитокинов в КВВ и сыворотке крови у здоровых субъектов и у больных БА в период обострения и ремиссии.
2. Установить диагностическую значимость концентрации цитокинов в КВВ для оценки активности воспалительного процесса в дыхательных путях при БА.
3. Провести сравнительную оценку концентраций цитокинов в КВВ и сыворотке крови у больных БА в разные периоды заболевания.
4. Изучить взаимосвязь уровня цитокинов с клинико-функциональными показателями БА в разные периоды течения заболевания.
Научная новизна.
Впервые:
- проведено определение цитокинового профиля КВВ у пациентов со среднетяжелым течением БА в разные фазы течения заболевания;
- показано, что частота определения различных интерлейкинов, ИФН-у и ФНО-а в КВВ выше, чем в сыворотке крови;
- полученные значения неинвазивных маркеров определяют степень активности местного воспаления в дыхательных путях при БА;
- показано, что высокая концентрация ИЛ-4 и ИЛ-13 в КВВ свидетельствует о степени тяжести обострения заболевания;
- выявленная высокая концентрация ИЛ-4 и ИЛ-13 в КВВ у пациентов с атопической БА указывает на наличие фенотипа заболевания с преобладанием ТЪ2-типа иммунного ответа;
- установлено, что обострение при БА проявляется воспалительным отеком в слизистой оболочке стенки бронхов и гиперсекрецией слизи, о чем свидетельствует достоверное увеличение объема КВВ и снижение его рН;
- выявлена прямая взаимосвязь между содержанием ИЛ-13 в КВВ с показателями функции внешнего дыхания (ФВД) у пациентов с БА в период ремиссии, что свидетельствует о персистирующем характере воспаления в дыхательных путях;
- обнаружена обратная корреляционная взаимосвязь между уровнем ИЛ-4 в КВВ со степенью бронхиальной обструкции в фазе обострения БА;
- выявлена прямая корреляционная зависимость между эозинофилией крови и коэффициентом соотношения ИЛ-4/ИФН-у в КВВ, что отражает взаимосвязь системной реакции организма с активностью местного воспаления.
Практическая значимость.
• Анализ цитокинов в КВВ следует использовать в качестве неинвазивного метода оценки активности воспалительного процесса в дыхательных путях при БА.
• Определение концентрации различных интерлейкинов, ИФН-у и ФНО-а в КВВ позволяет оценить эффективность проводимого лечения.
• Исследование цитокинов в КВВ, отражающих природу и особенности местного воспаления, позволяет корректировать дальнейшую тактику ведения пациентов с БА.
Основные положения, выносимые на защиту.
• Анализ цитокинового профиля (различных интерлейкинов, ИФН-у и ФНО-а) КВВ при БА более четко отражает активность местного воспалительного ответа в дыхательных путях, чем исследование сыворотки крови.
• Высокая концентрация ИЛ-4 и ИЛ-13 в КВВ у пациентов с обострением БА, а также их взаимосвязь с легочной функцией указывает на преобладание ТЪ2-типа иммунного ответа и персистирующий воспалительный процесс в дыхательных путях при ремиссии заболевания.
• Выявленная прямая зависимость между эозинофилией крови и коэффициентом соотношения ИЛ-4/ИФН-у в КВВ указывает на взаимосвязь системной реакции организма с местным воспалением.
Внедрение полученных результатов.
Исследование цитокинов в КВВ внедрено в качестве дополнительного метода диагностики у больных Б А в аллерго логическом отделении ГКБ №57 г. Москвы. Материалы исследования включены в лекционный курс на кафедре пульмонологии ФУВ ГОУ ВПО РГМУ Росздрава.
Апробация работы.
Основные положения диссертационной работы доложены и всесторонне обсуждены на выездной сессии ФГУ «НИИ пульмонологии» ФМБА России (Рязань, 2007); 17-м и 19-м национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Казань, 2007; Москва, 2009); 3-ей международной научной конференции «Традиционная медицина, перспективы развития» (Улан-Удэ, 2008); 18-м ежегодном конгрессе Европейского респираторного общества (Берлин, 2008); 1-ой научно-практической конференции «Актуальные вопросы респираторной медицины» (Москва, 2009); 50-м ежегодном конгрессе Германского общества пульмонологов (Маннхайм, 2009); на совместной конференции ФГУ «НИИ пульмонологии» ФМБА России и кафедры госпитальной терапии педиатрического факультета ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (Москва, 23.06.2010.).
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 2 статьи в журнале, входящем в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Заключение диссертационного исследования на тему "Диагностическая значимость цитокинового профиля конденсата выдыхаемого воздуха у пациентов с бронхиальной астмой"
выводы
1. В КВВ больных БА удалось определить как провоспалительные, так и противовоспалительные цитокины, за исключением ИЛ-8.
2. Анализ цитокинов в КВВ позволил всесторонне оценить активность местного воспаления в дыхательных путях у пациентов с БА, в то время как их уровень в сыворотке крови отражает системный характер воспаления в период обострения и ремиссии заболевания.
3. Увеличение концентрации ИЛ-4, 6 и 13 в КВВ у больных БА указывает на степень выраженности воспалительного процесса в дыхательных путях и позволяет оценить эффективность проводимого лечения.
4. Наличие взаимосвязи между содержанием ИЛ-4 в КВВ и показателем ОФВь а также коэффициента ИЛ-4/ИФН-у в КВВ и эозинофилии крови у больных с обострением БА свидетельствует о доминирующей роли атопического компонента в воспалительной реакции дыхательных путей.
5. Выявленные корреляционные взаимосвязи между содержанием ИЛ-13 в КВВ и ОФВ1 в период ремиссии свидетельствуют о персистирующем характере воспаления дыхательных путей у больных БА.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Анализ цитокинов в КВВ следует использовать в качестве неинвазивного метода оценки активности местного воспалительного процесса в дыхательных путях при БА.
2. Определение концентрации различных интерлейкинов, ИФН-у и ФНО-а в КВВ является важным способом оценки эффективности проводимого лечения.
3. Исследование цитокинов в КВВ следует использовать для оценки степени выраженности и природы обострения для определения фенотипа заболевания, что позволяет уточнить дальнейшую тактику ведения пациентов с БА.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Дугарова, Ирина Далаевна
1. Авдеев С.Н., Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Применение метода индуцированной мокроты для оценки интенсивности воспаления дыхательных путей. Пульмонология. 1998; 2: 81-86.
2. Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Исследование конденсата выдыхаемого воздуха в пульмонологии (обзор зарубежной литературы). Пульмонология. 2002; 2: 57-66.
3. Бронхиальная астма. Клинические рекомендации. Под ред. А.Г. Чучалина. М.: Издательский дом «Атмосфера»; 2008.
4. Гельцер Б.И., Маркелова Е.В., Просекова Е.В., Кочеткова Е.А. Система цитокинов и болезни органов дыхания. Тер архив. 2002; 11: 94-98.
5. Глобальная стратегия по лечению и профилактике бронхиальной астмы (GINA). Пересмотр 2006: Пер. с англ. М.: Издательский дом «Атмосфера»; 2007.
6. Горячкина Л.А., Ненашева Н.М. Базисная терапия бронхиальной астмы. Справочник поликлинического врача. 2008; 2: 51-55.
7. Драник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. Издательство «Медицинское информационное агентство»; 2003.
8. Дюсембаева Н.К., Семенова Р.И., Турланов К.М. Иммунокоррекция в лечении бронхиальной астмы: глюкокортикостероиды, системнаяэнзимотерапия, интерфероны и цитокины. Пульмонология. 2006; 1: 57-59.
9. Ковальчук JI.B., Ганковская JI.B, Рубакова Э.И. Система цитокинов. РГМУ. Издательство «Янус-К»; 2000.
10. Ю.Осипова В.В. Бронхиальная астма и аллергический риноконъюнктивит: маркёры воспаления и современные подходы к иммунокорригирующей терапии поллиноза. Автореф. дисс . канд. мед. наук. Москва, 2008. - 25с.
11. И.Поливанова А.Э. Системные биомаркеры сыворотки крови у больных хронической обструктивной болезнью легких. Автореф. дисс . канд. мед. наук. Москва, 2008. - 23с.
12. Респираторная медицина. Руководство. Под редакцией академика РАМН А.Г. Чучалина. В 2-х томах. Издательская группа «ГЭОТАР-Медиа», 2007; т.1: 665-693.
13. Рябичева Т.Г., Вараксин Н.А., Тимофеева Н.В., Рукавишников М.Ю. Определение цитокинов методом иммуноферментного анализа. Новости ВекторБест. 2004; 4 (34): 7-14.
14. Серебренникова С.Н., Семинский И.Ж. Роль цитокинов в воспалительном процессе. Сибирский медицинский журнал. 2008; 8: 5-8.
15. Симбирцев А.С. Интерлейкин-8 и другие хемокины. Иммунология. 1999; 4: 9-14.
16. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции. Цитокины и воспаление. 2004; 3 (2): 16-22.
17. Стандартизация тестов исследования легочной функции. Пульмонология. 1993; приложение: 1-92.
18. Суровенко Т.Н., Шелудько Я. С., Овчинникова О.В, и др. Прогностическое значение исследования IL-4, IFN-y и IgE в конденсате выдыхаемого воздуха при бронхиальной астме и аллергическом рините у детей. Цитокины и воспаление. 2002; 4: 3842.
19. Функциональная диагностика в пульмонологии: Практическое руководство. Под ред. Чучалина А.Г. М.: Издательский холдинг «Атмосфера», 2009; 192 с.
20. Царегородцева Т.М., Серова Т.И. Цитокины в гастроэнтерологии. Издательство «Анахарсис», 2003; 1-96.
21. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии. Иммунология. 1997; 5: 7-14.
22. Abehsira-Amar О., Gibert М., Joliy М. et al. IL-4 plays a dominant role in the differential development of ThO into Thl and Th2 cells. J Immunol. 1992; 148 (12): 3820-3829.
23. Adelroth E. How to measure airway inflammation: bronchoalveolar lavage and airway biopsies. CanRespirJ. 1998; 5 (Suppl.A): 18A-21A.
24. Akdis C.A., Blesken Т., Akdis M. et al. Role of interleukin 10 in specificimmunotherapy. J Clin Invest. 1998; 102 (1): 98-106.
25. Antus В., Barta I., Czebe K. et al. Analysis of cytokine pattern in exhaled breath condensate of lung transplant recipients with bronchiolitis obliterans syndrome. Inflamm Res. 2010; 59 (1): 83-86.
26. Baraldi E., De Jongste J.C. ERS, ATS. Measurement of exhaled nitric oxide in children, 2001. Eur Respir J. 2002; 20 (1): 223-237.
27. Barlaam В., Bird T.G., Lambert-Van D.B. et al. New a-substituted succinate based hydroxamic acids as TNF-a convertase inhibitors. J Med Chem. 1999; 42 (23): 4890-4908.
28. Barnes P.J. Cytokine-directed therapies for the treatment of chronic airway diseases. Cytokine Growth Factor Rev. 2003; 14 (6): 511-522.
29. Barnes P.J. Cytokines and chemokines in asthma. ERS Congress, Stockholm, September 15-19, 2007.
30. Barnes P.J. Pathophysiology of asthma. Br J Clin Pharmacol. 1996; 42 (1): 3-10.
31. Barnes P.J. The cytokine network in asthma and chronic obstructive pulmonary disease. J Clin Invest. 2008; 118 (11): 3546-3556.
32. Bayley D.L., Abusriwil H., Ahmad A., Stockley R.A. Validation of assays for inflammatory mediators in exhaled breath condensate. Eur Respir J. 2008; 31 (5): 943-948.
33. Benjaponpitak S., Oro A., Maguire P. et al. The kinetics of change in cytokine production by CD4 T cells during conventional allergen immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 1999; 103 (3 Pt 1): 468-475.
34. Berlyne G.S., Parameswaran K., Kamada D. et al. A comparison of exhaled nitric oxide and induced sputum as markers of airway inflammation. J Allergy Clin Immunol. 2000; 106 (4): 638-644.
35. Boguniewicz M., Martin R.J., Martin D. et al. The effects of nebulized recombinant interferon-y in asthmatic airways. J Allergy Clin Immunol. 1995; 95 (1 Pt 1): 133-135.
36. Borish L., Aarons A., Rumbyrt J. et al. Interleukin-10 regulation in normal subjects and patients with asthma. J Allergy Clin Immunol. 1996; 97 (6): 1288-1296.
37. Borish L.C., Nelson H.S., Lanz M.J. et al. Interleukin-4 receptor in moderate atopic asthma. A phase I/II randomized, placebo-controlled trial. Am JRespir Crit Care Med 1999; 160: 1816-1823.
38. Brewster C.E.P., Howarth P.H., Djukanovic R. et al. Myofibroblasts and subepithelial fibrosis in bronchial asthma. Am J Respir Cell Mol Biol. 1990;3:507-511.
39. Brunetti L., Francavilla R., Tesse R., Armenio L. Exhaled breath condensate cytokines and pH in pediatric asthma and atopic dermatitis. Allergy Asthma Proc. 2008; 29 (5): 461-467.
40. Biyan S., O'Connor B.J., Matti S. et al. Effects of recombinant human interleukin-12 on eosinophils, airway hyperreactivity and the late asthmatic response. Lancet. 2000; 356 (9248): 2149-2153.
41. Campbell E.M., Charo I.F., Kunkel S.L. et al. Monocyte chemoattractant protein-1 mediates cockroach allergen-induced bronchial hyperreactivity in normal but not CCR2-/- mice: the role of mast cells. J Immunol. 1999; 163 (4): 2160-2167.
42. Carpagnano G.E., Kharitonov S.A., Foschino-Barbaro M.P. et al. Increased inflammatory markers in the exhaled breath condensate of cigarette smokers. Eur Respir J. 2003; 21 (4): 589-593.
43. Carpagnano G.E., Ruggeri C., Bergantino L. et al. Menopausal asthma: a new biological phenotype? ERJ. 2009; 34 (Suppl. 53): 42s.
44. Choi A.M., Jacoby D.B. Influenza virus A infection induces interleukin-8 gene expression in human airway epithelial cells. FEBS Lett. 1992; 309 (3): 327-329.
45. Diez-Pina J.M., Fernandez-Acenero M.J., Llorente-Alonso MJ. et al. Tumor necrosis factor alpha as a marker of systemic and local inflammation in "healthy" smokers. Int J Gen Med. 2009; 2: 9-14.
46. Dixon A.E., Raymond D.M., Suratt B.T. et al. Lower airway disease in asthmatics with and without rhinitis. Lung. 2008; 186 (6): 361-368.
47. Douglass J.A., Dhami D., Gurr C.E. et al. Influence of interleukin-8 challenge in the nasal mucosa in atopic and nonatopic subjects. Am J Respir Crit Care Med. 1994; 150: 1108-1113.
48. Edme J.L., Tellart A.S., Launay D.R. et al. Cytokine concentrations in exhaled breath condensates in systemic sclerosis. Inflamm Res. 2008; 571-576.
49. Effros R.M., Casaburi R., Su J. et al. The effects of volatile salivary acids and bases on exhaled breath condensate pH. Am J Respir Crit Care Med. 2006; 173 (4): 386-392.
50. Effros R.M., Hoagland K.W., Bosbous M. et al. Dilution of respiratory solutes in exhaled condensates. Am J Respir Crit Care Med. 2002; 165: 663-669.
51. Elsner J., Petering H., Hochstetter R. et al. The CC chemokine antagonist Met-RANTES inhibits eosinophil effectors functions through thechemokine receptors CCR1 and CCR3. Eur J Immunol. 1997; 27 (11): 2892-2898.
52. Eschenbacher W.L., Sheppard D. Respiratory heat loss is not the sole stimulus for bronchoconstriction induced by isocapnic hyperpnoea with dry air. Am Rev Respir Dis. 1985; 131 (6): 894-901.
53. Fairchild C.I., Stampfer J.F. Particle concentration in exhaled breath. Am IndHyg Assoc J. 1987; 48 (11): 948-949.
54. Feltis B.N., Wignarajah D., Zheng L. et al. Increased vascular endothelial growth factor and receptors: relationship to angiogenesis in asthma. Am J Respir Crit Care Med. 2006; 173 (11): 1201-1207.
55. Fiorentino D.F., Zlotnik A., Mosmann T.R. et al. IL-10 inhibits cytokine production by activated macrophages. J Immunol. 1991; 147 (11): 38153822.
56. Flood-Page P.T., Menzies-Gow A.N., Kay A.B. et al. Eosinophil's role remains uncertain as anti-interleukin-5 only partially depletes numbers in asthmatic airways. Am J Respir Crit Care Med. 2003; 167 (2): 199-204.
57. Flood-Page P., Swenson C., Faiferman I. et al. International Mepolizumab Study Group. A study to evaluate safety and efficacy of mepolizumab in patients with moderate persistent asthma. Am J Respir Crit Care Med. 2007; 176 (11): 1062-1071.
58. Fritter D., Knobler C.M. Experiments and simulation of the growth of droplets on a surface (breath figures). Physical Review. 1991; 43 (6): 2858-2869.
59. Ganas K., Loukides S., Papatheodorou G. et al. Total nitrite/nitrate in expired breath condensate of patients with asthma. Respir Med. 2001; 95 (8): 649-654.
60. Gately M.K., Renzetti L.M., Magram J. et al. The interleukin-12/interleukin-12-receptor system: role in normal and pathologic immune responses. Annu Rev Immunol. 1998; 16: 495-521.
61. Gavett S.H., CTHearn D.J., Karp C.L. et al. Interleukin-4 receptor blockade prevents airway responses induced by antigen challenge in mice. Am J Physiol. 1997; 272: L253-L261.
62. Gessner C., Hammerschmidt S., Kuhn H., Wirtz H. Expired diagnosis?--the potential of exhaled breath analysis. Pneumologie. 2004; 58 (4): 230237.
63. Gessner C., Kuhn H., Seyfarth HJ. et al. Factors influencing breath condensate volume. Pneumologie. 2001; 55 (9): 414-419.
64. Gessner С., Scheibe R., Wotzel M. et al. Exhaled breath condensate cytokine patterns in chronic obstructive pulmonary disease. Respir Med. 2005; 99 (10): 1229-1240.
65. Gosset P., Tsicopoulos A., Wallaert B. et al. Increased secretion by tumor necrosis factor and interleukin 6 by alveolar macrophages consecutive to the development of the late asthmatic reaction. J Allergy Clin Immunol. 1991; 88(4): 561-571.
66. Gratzl S., Palca A., Schmitz M., Simon H.U. Treatment with IFN-a in corticosteroid-unresponsive asthma. J Allergy Clin Immunol. 2000; 105 (5): 1035-1036.
67. Griese M., Noss J., von Bredow C. Protein pattern of exhaled breath condensate and saliva. Proteomics. 2002; 2 (6): 690-696.
68. Gutierrez-Ramos J.C., Lloyd C., Kapsenberg M.L. et al. Non-redundant functional groups of chemokines operate in a coordinate manner during the inflammatory response in the lung. Immunol Rev. 2000; 177: 31-42.
69. Haldar P., Brightling C.E., Hargadon B. et al. Mepolizumab and exacerbations of refractory eosinophilic asthma. N Engl J Med. 2009; 360 (10): 973-984.
70. Hamzaoui A., Abid H., Berraies A. et al. Low number of regulatory T cells in bronchial asthma: association with inflammatory cytokines Department B, A Mami Hospital, Ariana Research Unit Medicine School (99/08-40), Tunis Tunisia.
71. Hanania N. Airway inflammation in asthma: current and future targets and therapies. Breathe. 2010; 6 (3): 245-252.
72. Hargreave F.E. Quantitative sputum cell counts as a marker of airway inflammation in clinical practice. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2007; 7 (1): 102-106.
73. Horvath I., Donnelly L.E., Kiss A. et al. Combined use of exhaled hydrogen peroxide and nitric oxide in monitoring asthma. Am J Respir Crit Care Med. 1998; 158 (4): 1042-1046.
74. Horvath I., Hunt J., Barnes P.J. et al. On behalf of the ATS/ERS Task Force on Exhaled Breath Condensate. Exhaled breath condensate: methodological recommendations and unresolved questions. Eur Respir J. 2005; 26 (3): 523-548.
75. Hsieh C.-S., Macatonia S.E., Tripp C.A. et al. Development of TH1 CD41 T cells through IL-12 produced by Listeria-induced macrophages. Science (Wash. DC) 1994; 260: 547-549.
76. Hunt J. Exhaled breath condensate: an evolving tool for noninvasive evaluation of lung disease. J Allergy Clin Immunol. 2002; 110 (1): 28-34.
77. Hunt J.F., Fang К., Malik R. et al. Endogenous airway acidification. Implications for asthma pathophysiology. Am J Respir Crit Care Med. 2000; 161:694-699.
78. Huszar Ё., Vass G., Vizi Ё. et al. Adenosine in exhaled breath condensate in healthy volunteers and in patients with asthma. Eur Respir J. 2002; 20 (6): 1393-1398.
79. John M., Lim S., Seybold J. et al. Inhaled corticosteroids increase IL-10 but reduce MlP-la, GM-CSF and IFN-gamma release from alveolar macrophages in asthma. Am J Respir Crit Care Med. 1998; 157 (1): 256262.
80. Jutel M., Akdis M., Budak F. et al. IL-10 and TGF-b cooperate in the regulatory T cell response to mucosal allergens in normal immunity and specific immunotherapy. Eur J Immunol. 2003; 33 (5): 1205-1214.
81. Kaditis A.G., Winnie G., Syrogiannopoulos G.A. Anti-inflammatory pharmacotherapy for wheezing in preschool children. Pediatr Pulmonol. 2007; 42 (5): 407-420.
82. Kastelijn E.A., Rijkers G.T., Van Moorsel C.H. et al. Systemic and exhaled cytokine and chemokine pofiles are associated with the development of bronchiolitis obliterans syndrome. J Heart Lung Transplant. 2010 Jun 4.
83. Kelleher M.D., Abe M.K., Chao T.S. et al. Role of MAP kinase activation in bovine tracheal smooth muscle mitogenesis. Am J Physiol. 1995; 268: L894-L901.
84. Kharitonov S.A., Barnes P.J. Exhaled biomarkers. Chest. 2006; 130 (5): 1541-1546.
85. Kietzmann D., Kah R., Muller M. et al. Hydrogen peroxide in expired breath condensate of patients with acute respiratory failure and with ARDS. Intensive Care Med 1993; 19 (2): 78-81.
86. Kips J.C., Tavemier J.H., Joos G.F. et al. The potential role of tumor necrosis factor-a in asthma. Clin Exp Allergy. 1993; 23: 247-250.
87. Koczulla A.R., Noeske S., Herr C. et al. Acute and chronic effects of smoking on inflammation markers in exhaled breath condensate in current smokers. Respiration. 2010; 79 (1): 61-67.
88. Kostikas К., Papatheodorou G., Ganas K. et al. pH in expired breath condensate of patients with inflammatory airway diseases. Am J Respir Crit Care Med. 2002; 165 (10): 1364-1370.
89. Lack G., Bradley K.L., Hamelmann E. et al. Nebulized IFN-gamma inhibits the development of secondary allergic responses in mice. J Immunol. 1996; 157 (4): 1432-1439.
90. Lasagna L., Peveri S., Pilotti E. Inflammatory cytokines in exhaled breath condensate (EBC) of exacerbated COPD patients. ERJ. 2008; 32 (Suppl. 52): 1105.
91. Le Gros G., Ben-Sasson S.Z., Seder R.A. et al. Generation of interleukin 4 (IL-4)-producing cells in vivo and in vitro: IL-2 and IL-4 are required for in vitro generation of IL-4-producing cells. J Exp Med. 1990; 172(3): 921-929.
92. Leckie M.J., ten Brincke A., Khan J. et al. Effects of an interleukin-5 blocking monoclonal antibody on eosinophils, airwayhyperresponsiveness and the late asthmatic response. Lancet. 2000; 356 (9248): 2144-2148.
93. Lenschow D.J., Walunas T.L., Bluestone J.A. CD28/B7 system of T cell costimulation. Annu Rev Immunol. 1996; 14: 233-258.
94. Levine S.J. Bronchial epithelial cell-cytokine interactions in airway inflammation. J'Investig Med. 1995; 43 (3): 241-249.
95. Levine S.J., Wenzel S.E. Narrative review: the role of Th2 immune pathway modulation in the treatment of severe asthma and its phenotypes. Ann Intern Med. 2010; 152 (4): 232-237.
96. Liu Y.J. Thymic stromal lymphopoietin: master switch for allergic inflammation. J Exp Med. 2006; 203 (2): 269-273.
97. Luster A.D. Chemokines chemotactic cytokines that mediate inflammation. New Engl J Med. 1998; 338 (7): 436-445.
98. Maneechotesuwan K., Xin Y., Ito K. et al. Regulation of Th2 cytokine genes by p38 MAPK-mediated phosphorylation of GATA-3. J Immunol. 2007; 178 (4): 2491-2498.
99. Markham A., Lamb H.M. Infliximab: a review of its use in the management of rheumatoid arthritis. Drugs. 2000; 59 (6): 1341-1359.
100. Martinez F.D., Wright A.L., Taussig L.M. et al. Asthma and wheezing in the first six years of life. The Group Health Medical Associates. N Engl J Med. 1995; 332 (3): 133-138.
101. Matsunaga K. The utility of exhaled breath condensate analysis for asthma management. Rinsho Byori. 2007; 55 (4): 375-380.
102. Matsunaga K., Ichikawa Т., Yanagisawa S. et al. Clinical application of exhaled breath condensate analysis in asthma: prediction of FEV(l) improvement by steroid therapy. Respiration. 2009; 78 (4): 393-398.
103. Matsunaga K., Yanagisawa S., Ichikawa T. et al. Airway cytokine expression measured by means of protein array in exhaled breath condensate: correlation with physiologic properties in asthmatic patients. J Allergy Clin Immunol 2006; 118 (1): 84-90.
104. Matsunaga K., Yanagisawa S., Ichikawa T. et al. Molecular mechanism of the additive effects of leukotriene modifier in asthmatic patients receiving steroid therapy. AllergolInt. 2009; 58 (1): 89-96.
105. Mauser P.J., Pitman A.M., Fernandez X. et al. Effects of an antibody to interleukin-5 in a monkey model of asthma. Am J Respir Crit Care Med. 1995; 152 (2): 467-472.
106. Miller M.R., Hankinson J., Brusasco V. et al. ATS/ERS Task Force. Standardisation of spirometry. Eur Respir J. 2005; 26 (2): 319338.
107. Montuschi P. Indirect monitoring of lung inflammation. Nat Rev DrugDiscov. 2002; 1 (3): 238-242.
108. Moser R., Fehr J., Bruijnzeel P.L. IL-4 controls the selective endothelium-driven transmigration of eosinophils from allergic individuals. J Immunol. 1992; 149 (4): 1432-1438.
109. Nair P., Pizzichini M.M., Kjarsgaard M. et al. Mepolizumab for prednisone-dependent asthma with sputum eosinophilia. N Engl J Med. 2009; 360 (10): 985-993.
110. Naseer Т., Minshall E.M., Leung D.Y. et al. Expression of IL-12 and IL-13 mRNA in asthma and their modulation in response to steroid therapy. Am J Respir Crit Care Med. 1997; 155 (3): 845-851.
111. Nicolaides N.C., Holroyd K.J., Ewart S.L. et al. Interleukin 9: a candidate gene for asthma. Proc Natl Acad Sci USA. 1997; 94 (24): 13175-13180.
112. Ohkawara Y., Yamauchi K., Tanno Y. et al. Human lung mast cells and pulmonary macrophages produce tumor necrosis factor-a in sensitised lung tissue after IgE receptor triggering. Am J Respir Cell Mol Biol. 1992; 7 (4): 385-392.
113. Ojoo J.C., Mulrennan S.A., Kastelik J.A. et al. Exhaled breath condensate pH and exhaled nitric oxide in allergic asthma and in cystic fibrosis. Thorax. 2005; 60 (1): 22-26.
114. Papineni R.S., Rosenthal F.S. The size distribution of droplets in the exhaled breath of healthy human subjects. J Aerosol Med. 1997; 10 (2): 105-116.
115. Proudfoot A.E., Power C.A., Wells T.N. The strategy of blocking the chemokine system to combat disease. Immunol Rev. 2000; 177: 246256.
116. Robroeks C.M., van de Kant K.D., Jobsis Q. et al. Exhaled nitric oxide and biomarkers in exhaled breath condensate indicate the presence, severity and control of childhood asthma. Clin Exp Allergy. 2007; 37 (9): 1303-1311.
117. Rosias P.P., Dompeling E., Dentener M.A. et al. Childhood asthma: exhaled markers of airway inflammation, asthma control score, and lung function tests. Pediatr Pulmonol. 2004; 38 (2): 107-114.
118. Rossi D., Zlotnik A. The biology of chemokines and their receptors. Annu Rev Immunol. 2000; 18: 217-242.
119. Saunders M.A., Mitchell J.A., Seldon PM. et al. Release of granulocyte-macrophage colony stimulating factor by human cultured airway smooth muscle cells: suppression by dexamethasone. Br J Pharmacol. 1997; 120 (4): 545-546.
120. Scheideler L., Manke H.G., Schwulera U. et al. Detection of nonvolatile macromolecules in breath. A possible diagnostic tool? Am Rev Respir Dis. 1993; 148 (3): 778-784.
121. Schleimer R.P., Sterbinsky S.A., Kaiser J. et al. IL-4 induces adherence of human eosinophils and basophils but not neutrophils to endothelium. Association with expression of VCAM-1. J Immunol 1992; 148(4): 1086-1092.
122. Schleiss M.B., Holz O., Behnke M. et al. The concentration of hydrogen peroxide in exhaled air depends on expiratory flow rate. Eur Respir J. 2000; 16(6): 1115-1118.
123. Seitz M., Loetscher P., Dewald B. et al. Interleukin-10 differentially regulates cytokine inhibitor and chemokine release from blood mononuclear cells and fibroblasts. Eur J Immunol. 1995; 25 (4): 1129-1132.
124. Shahid S.K., Kharitonov S.A., Wilson N.M. et al. Increased interleukin-4 and decreased interferon-gamma in exhaled breath condensate of children with asthma. Am J Respir Crit Care Med. 2002; 165 (9): 1290-1293.
125. Shanafelt A.B., Forte C.P., Kasper JJ. et al. An immune cell-selective interleukin 4 agonist. Proc Natl Acad Sci USA. 1998; 95 (16): 94549458.
126. Shannon J., Ernst P., Yamauchi Y. et al. Differences in airway cytokine profile in severe asthma compared to moderate asthma. Chest. 2008; 133 (2): 420-426.
127. Smith C.M., Anderson S.D. Hyperosmolarity as the stimulus to asthma induced by hyperventilation. J Allergy Clin Immunol. 1986; 77 (5): 729-736.
128. Steinke J.W., Borish L. Interleukin-4: its role in the pathogenesis of asthma, and targeting it for asthma treatment with interleukin-4 receptor antagonists. Respir Res. 2001; 2 (2): 66-70.
129. Swain S.L., Weinberg A.D., English M., Huston G. IL-4 directs the development of Th2-like helper effectors. J Immunol. 1990; 145 (11): 3796-3806.
130. Sznajder J.I., Fraiman A., Hall J.B. et al. Increased hydrogen peroxide in the expired breath of patients with acute hypoxemic respiratory failure. Chest. 1989; 96 (3): 606-612.
131. Taussig L.M., Wright A.L., Holberg С J. et al. Tucson Children's Respiratory Study: 1980 to present. J Allergy Clin Immunol. 2003; 111 (4): 661-675.
132. Temann U.A., Geba G.P., Rankin J.A. et al. Expression of interleukin 9 in the lungs of transgenic mice causes airway inflammation, mast cell hyperplasia, and bronchial hyperresponsiveness. J Exp Med. 1998; 188 (7): 1307-1320.
133. Teran L.M., Campos M.G., Begishvilli B.T. et al. Identification of neutrophil chemotactic factors in bronchoalveolar lavage fluid of asthmatic patients. Clin Exp Allergy. 1997; 27 (4): 396-405.
134. Tornberg D.C., Marteus H., Schedin U. et al. Nasal and oral contribution to inhaled and exhaled nitric oxide: a study in tracheotomized patients. Eur Respir J. 2002; 19 (5): 859-864.
135. Vaughan J., Ngamtrakulpanit L., Pajewski T. et al. Exhaled breath condensate pH is a robust and reproducible assay of airway chemistry. Eur Respir J. 2003; 22 (6): 889-894.
136. Warringa R.A., Koenderman L., Кок P.T., Kreukniet J. Modulation and induction of eosinophil chemotaxis by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin-3. Blood. 1991; 77 (12): 26942700.
137. Wenzel S.E. Eosinophils in asthma closing the loop or opening the door? N Engl J Med. 2009; 360 (10): 1026-1028.
138. Wenzel S.E., Szefler S.J., Leung D.Y. et al. Bronchoscopic evaluation of severe asthma. Persistent inflammation associated with high dose glucocorticoids. Am J Respir Crit Care Med. 1997; 156 (3 Pt 1): 737-743.
139. Wenzel S., Wilbraham D., Fuller R. et al. Effect of an interleukin-4 variant on late phase asthmatic response to allergen challenge in asthmatic patients: results of two phase 2a studies. Lancet. 2007; 370 (9596): 1422-1431.
140. White J.R., Lee J.M., Young P.R. et al. Identification of a potent, selective non-peptide CXCR2 antagonist that inhibits interleukin-8-induced neutrophil migration. J Biol Chem. 1998; 273 (17): 1009510098.
141. Wills-Karp M., Finkelman F.D. Untangling the complex web of IL-4- and IL-13-mediated signaling pathways. Sci Signal. 2008; 1 (51): pe55.
142. Wills-Karp M., Luyimbazi J., Xu X. et al. Interleukin-13: central mediator of allergic asthma. Science. 1998; 282 (5397): 2258-2261.
143. Wilson J. The bronchial microcirculation in asthma. Clin Exp Allergy. 2000; 30 (Suppl. 1): 51-53.
144. Yamamoto C., Yoneda Т., Yoshikawa M. et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8. Chest. 1997; 112(2): 505-510.
145. Yates D.H., Barnes P.J., Thomas P.S. Tumor necrosis factor-a alters human bronchial reactivity and induces inflammatory cell influx. Am Rev Respir Dis. 1993; 147: A1011.
146. Zhao J.J., Shimizu Y., Dobashi K. et al. The relationship between oxidative stress and acid stress in adult patients with mild asthma. J Investig Allergol Clin Immunol. 2008; 18 (1): 41-45.
147. Zhou Y., McLane M., Levitt R.C. Th2 cytokines and asthma. Interleukin-9 as a therapeutic target for asthma. Respir Res. 2001; 2 (2): 80-84.
148. Zhu Z., Tang W., Ray A. et al. Rhino virus stimulation of interleukin-6 in vivo and in vitro: evidence for nuclear factor-kB-dependent transcriptional activation. J Clin Invest. 1996; 97 (2): 421-430.