Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Бруцеллиез в регионе Северного кавказа (эпидемиология, природная очаговость, лабораторная диагностика)

Р Г 5 ОД 2 3 ОПТ Ш

На правах рукописи

ЛЯМКИН ГЕННАДИЙ ИВАНОВИЧ

БРУЦЕЛЛЕЗ В РЕШОКЕ СЕВЕРНОГО КАВКАЗА

(ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ПРИРОДНАЯ ОЧАГОВОСТЬ, ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА)

14.00.30 - Эпидемиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук'

Саратов, 1995

Работа выполнена в Ставропольском научно-исследовательском противочумном институте Госком-санзпиднадзора России.

Научной консультант - заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор медицинских наук, профессор И.Ф.Таран

Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки Российской Федерации, д.м.н., профессор Л.В.Самойлова; д.м.н., профессор Анисимова Т.И.; д.м.н., профессор Липницкий A.B.

Ведущая организация: Научно-исследовательский противочумный институт (г.Иркутск) "

Защита состоится 14 ноября 1995г . в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 074.32.01 при Российском научно-исследовательском противочумном институте "Микроб" Госкомсанэпиднадзора России (410071,. .Саратов, ул.Университетская, 46).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке института "Микроб".

Автореферат разослан 12 октября 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Г. А. КОРНЕЕВ

Актуальность п р о б л е и Заболеваемость бруцеллезом в Российское Федерации а течение последних лег не имеет стойкой тенденции к сниманию, что обусловлено, п основном, зпиэоотологическим неблагополучием по бруцеллезу в ряде еельпко-коэяйатЕенных регионов страны и несоблюдением санитарно-гигиенических норм и правил при ведении мшотиоводстза. Одним из таких неСлагополучкьэ: по бруцеллезу регионов Российской Седерации является Северней Кавказ, вкличащнй 9 административна территорий, е том числе Ставропольский л Краснодарский края, Ростовскую область и 6 респубьик (Дагестан, Северная Осетия, Кае'артино-Гллкария, Карачаево-Черкессия, Чечня, Ингушетия). Перечнеленкие территорий харакчеригутптся разнообразием гслимато-географ.тческик условна, националы««-. особенностей и экономического уклада. Однако, обеты для всех является интенсивное развитие кивотноводзтьа, сопровождающееся распространение« бруцеллеза среди мелкого и крупного рогатого скота. Значьтельно ре л? регистрируется бруц&ллеа свилей, а заражение людей в районах развитая свиноводства ва последнее годы ограничилось едини'шыми случаями. '

Со времени начала изучения бруцеллеза на Северном Иавкаэс-акспедицией ВИЭЦ под руководством Ü. О. Здродоьс. jro з 193?. г. рядом исследоЕатеяеп Сыли довольно подробно изучены основна-: зако-. номерности течения этой ¡тнфекции, пути к факторы передачи, вскрыта пртз.иы широкого ра^прогч-ранькня шфекцки в регионе (Таран л соаьт. , 1959, 1471, 1978; Рровой к соаат. , 1959, 1977, Рсьлоь, 1S62; Ли/гонос, 1965; СуьороЕ i, 1968; ¡Зершдова и сонат.1370. '¿972; Яров, 1S74; Honort И оозвт. , 1333; Агкроь, ¿J84; йлы»т)Н, 1937).

Однако, происходящие в последние годы (1987-1993 гг.) су-кэств?нниэ ¡вменения социально-экономических отношений в сельской хоьяйстве, кйл внутри регион Северного Кавказа, чак к в соаре-дельаых государствах Закавказья, связанные с возникновением лсиш. форм ведется гавотководстЕа," разукрупнением совхозов и кодуоаон, рэ^р.^ч'еы бартерных: отношений с использованием сельхозпродуктов й •лг. реа.тагаичэ11 негосударственными торговыми стр'псгураш, анхива-ьащсей миграционных процессов, предопределяют существенное изменение эпизоотической к эпидемический ситуации по бруцеллёзу. В эти.X усло£ил>. вапюе значение приобретает оперативное ележэнив ва заболеваемостью бруцеллёзам на территории Сэаеиюго Кавказа, установление особенностей проявления атой инфекции на отдел: шх ад-шнжгративьнх -геррсториях, совершенствование такими агшэаотэпо-гич^стаго л эдидомиологического обследования очагов бруцэллеза, Еьнвлекда фактором,' способствующих сохранению и укоренении этой инфекции.

Однси из оеобеньсстеЛ С&Ебро-Кавкэаского реггх-ыа является существование да его территории природного очага бруцеллеза в се-веркчх предгоръга; Голыюгз Кавказа. й?смотря па то, что с. моменте ьсраого выведения ззгбу,жителя в гтои очаге а 1959 году, прайс: Соле-; ЗС лэг, почти ежегодное выделение от грызунсЕ возбудитель сйид&телъствуэт о постоянном функциокираванл*. очага. Иаследовыс-ллми.. гаучааташ различные аспекты проблемы существования аочбу-дмгелк бруъеллеза на территории северные предгорий Бо-ьтаго Кавказа, ¿ыли описаны начдшфтно- географические особенности террито рий очага, осеозныЗ виды мышевидных грызунов-носителей инфэвдп; яаучеьы основные сиойствь циргуляругарго среди них возбудителя

л -

308ШЖЕЫ9 механизмы его существования-и природе, даны предложения по таксономическому положения возбудителя в клэссифясгщии рода Сруцелл (Душгаа и соавт. , 1964; Дрэловская, 1975; Таран, Цьйта, 1979; Лямкин и соавт., 1982, 1983). Однако, в результате происходящих на территортш очага изменений антропогенного характера. 1а»Ея?1вся знания об очаге нуядаи'сь в существенном дополнении. Это капается' вопроса о границах очага, уточнения сведений о в/дс-сом составе и численности грызунон-нолпелей икфега.\ии, характере изменения их ареала, свойствах циркулиру1эд?го возбудителя, эпнэо-отологическом и эпидемиологическом значении очага.

Сложная эпидемиологическая ситуация по бруцеллезу, сложивпа-яса к настоящему времени в Северо-Кавказском регионе, отсутствию сведений ой источниках заражения у значительней части ааЗолезшгс, достоверных данных от ветеринарной службы о благополучии хозяйств по бруцеллезу, а также, маюмопцюсть лабораторной • базы и отсутствие высококвалифицированных врачей-бактериологов, осущест-аляш}1х первичную диагностику бруцеллеза в условиях раЛокных центров санитарно-эпидемиологического надзора, ведут к неточности И несвоевременности лабораторной диагностики бруцеллеза. Этя факторы, наряду с трудоемкостьп и длительностью процесса выделения, идекхифккации и дифференциации возбудителя бруцеллеза, оОусловли-Зают необходимость научней раз^зботкл и гнедреннп в практику, деятельности практических учреждений санитарно-эг-адемшлогичеокого профиля новых современных методов лабораторной диагностики бруцеллеза, направленных ка сокращенно сроков проведения Оачтрриэло-гической диагностики, минимизацию тестов, используемых для идентификации и дифференциации выделенной куль тур ь возбудителя,

- б -

использование новых дополнительных тестов для характеристшш бруцеллезного инфекционного процесса.

Все наломанное послужило оснсзани&м для проведения настоящего исследования.

■•-Цель и основ'я ые вадвчи и с с л е д ое а ь и я. Цель раЗоты - научное обоснование пути оптимизации •эпидемиологического надзора за бруцеллезом в регионе Северного Кавказана основе анализа сведений о заболеваемости людей, выяснения элиэостологлческюс и эпидемиологических особенностей, путей и условий распространения инфекции, разработки ускоренных методов, схем и способов выделения, идентификации и дифференциации возбудителя бруцеллеза.

Для достижения поставленной цели предполагалось решить следующее задачи:

.- проаагли~ирсвать и обобицггь статистические материалы по заболеваемости бруцеллезом людей в регионе Северного Кавказа за период с 1937 по 1593 годы;

- изучить эпидемиологические особенности и определить основные тенденции развития эпидемического процесса при бруцеллезе е регионе Северного Кавказа,

- определить тактику зпизоотодогического и эпидемиологического обследований очагов бруцеллёза в современных условиях;

- .чаучно обосновать автономность существования Северо-Кавказского природного очага бруцеллёза. Охарактеризовать его биоце-нотичеекую структуру, видовой состав носителей инфекции, свойства циркулпруюшего возбудителя;

- рэзработать новые методические приемы, ускоренные способы.

и схемы индикации, выделения, идентификации и дифференциации возбудителя бруцедлэза;

- экспериментально обо"''овать целесообразность использования дополнительных тесто: для характеристики Оруцеллёезнаго инфекционного процесса.

Научная н о а и з н а и теоретическая значимость работы:

- впервые проанализированы показатели заболеваемости бруцеллёзом лпдей за период с 1987 по 1993 годы в регионе Северного Кавказа. Выявлены причины широкого распространения атой инфекции среди сельскохозяйственных животных и высокой заболеваемости людей;

- установлена эпидемиологическая значимость очагов бруцеллёза мелкого рогатого скота как ведущего источника заражения людей бруцеллёзом в регионе Северного Кавказа;

- научно обоснована автономность существования Сечэро-Кав-казского предгорного природного очага бр5И9л<гэза. Дана его ланд-шафтно-географическая характеристика, биоценотическая и пространственная структуры;

теоретически обоснована необходимость включения в классификацию рода бруцелл в качестве самостоятельного биовара вида .В.suis возбудителя бруцеллёза, .циркулирующего среди мшзвндных грыьунов в,Северо-Кавказском предгорном природном очаге бруцеллеза;

- разработаны научно-методические подхода к повышению ¡эффективности бактериологической диагностики бруцеллеза, П03Р0ля1;<цие сократить сроки и повысить достоверность результатов на ьтапах

индшгации, выделения, идентификации и дифференциации возбудителя ^бруцеллеза;

- эксперимента! но обоснована оффекгивность использования показателей некоторых ферментных систем лейкоцитов крови для характеристики бруцеллезного инфекционного процесса.

Практическая ценность работы:

- установлены эпидемиологические особенности бруцеллеза в регионе Северного Кавказа, позволяющее объяснить причини высокой заболеваемости людей; на маатериалах проведенных исследований

' основан раздел бруцеллёза i 2-х региональных комплексных программах: "Профилактика особо опасных инфекций и санитарная охран* Ставропольского края от завоза и распространения конвенционных инфекционных заболеваний на 1993-1995 годы", утверзденной Главой администрации Ставропольского края 14.10.1093 г. и "Обеспечение эпидемиологического-благополучия по особо опасный и природнооча-говыы инфекциям и улучшение медико-экологической обстановки на Dre России" (19Ô4-1996), угьержденной Советом Ассоциации.социально-экономического сотрудничества республик, краев и областей Северного Кавказа 20.05.1994 г.;

- предложены оптимальные схемы проведения апизоатологическо-го и эпидемиологического" обслбдоьанья очагоз бруцеллёза в регионе Северного Кавказа. Разработаны и предложены для использования : практической деятельности учрендений санитарно-эпидемиологическо! слукбы региона "Методические рекомендации цо тактике эпизоотоло гического и эпидемиологического сбследовзняя очагов бруцеллеза" утвержденные директором ОтааШЯТЧИ 01.03. .993 года;

-'показано эпизоотолсгическое и эпидемиологическое значение Северо-Кавказского предгорного природного очага бр.уцеллёлч, составлен паспорт оч-зга, предложена охегсг анализа апнзоотологи-. ческах и эпидемиологических данных н приречном очага бруцеллёза;

- установленные нами особенности штаммов бруцелл, Еыделенних от мышевидных грызунов на территории Северо-Кавказского предгорного природного очага бруцеллеза, явились основой для внесекия дополнений а классификацию рода бруцелл. .реэением подкомитета по таксономии бруцелл Международного комитета по таксономии бактерий ОАО/ВОЗ (1086 г.) з классификацию рода бруцелл введен новый, пятый биовар вида В. suis, к которому отнесены изученные нами лигам-МЫ; .

- в качестве эталонного птамма пятого биовара В. sais нами предложено использовать штамм В. suis 513, выделенный от домогых мышей в 1975 году на территории Наарановского района Чечено-Ингушкой АССР. Решением Подкомитета по таксономии бактерий <5АС/В03 (198Ö г.), предложенный нами штамм утвержден в качестве референтного сламма Б биоваргРВ. suis;

- разрабэтань. оригинальные методические приёма, способы и схзкы индикации, выделения, идентификации и дифференциации возбудителя бруцеллёза. Они представлены в "Методических рекомендациях по выделению, идентификации и дифференциации гемокулътур возбудителей бруцеллеза", утвержденных директором СтавКЙПЧИ ¿2.10.1992 г. Получено авторское свидетельство N 1565233 на изобретение "Способ индикации возбудителей особо опасных инфекций" и подучено положительное решение Госкомизсбретзний H 92-003934/13 от 8 ноября 1992 года на "Способ индикации возбудителя бруцеллеза";

- разработаны методические приемы безопасной работы с натив-ним материалом, инфицированным возбудителем бруцеллёза при проведении гистоцитоэиэимохимических исследований. Изтериалы исследований вошли в "Инструкцию пс первичной обработке материала, зараженного или подозрительного' на зараженность возбудителями чумы, холеры, туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы при проведении гистоцитоэиэимохимических исследований" (Ставрополь, 1987), утвержденную ГУКИ Ю СССР 03.08.1987 г.

- разработана технология изготовления питательной транспортной среды для выделения бруцелл, подготовлена и утверждена директором Ставропольского НИПЧИ "Инструкция' по изготовлению и контролю питательной транспортной среды для выделения бруцелл, жидкой", приготовлены образцы 3-х лабораторных серий, прошедшие лабораторные и полевые испытания;

>- научно . обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность использования показателей некоторых ферментных систем лейкоцитов крови для характеристики бруцеллёзного инфекционного процесса.

Материалы диссертации включены в монографию "Бруцеллёз (микробиология, иммунология, эпидемиология, профилактика и борьба)" и методическое пособие "Лабораторная диагностика бруцеллёза", подготовленные совместно с доктором м&дицинских наук, профессором И. Ф. Таганом, которые используются при чтении лекций и проведении практических занятий на курсах специализации врачей по особо опасным и природно-очаговнм инфекциям и противоэпидемической защите населения при Ставропольском НИПЧИ.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Материалы изучения эпидемиологии бруцеллёза в регионе Северного Кавказе за период 1987-1993 гг.

2. Эпидемиологическая значимость очагов бруцеллёза мелкого рогатого скота как ведущего источника заражения людей бруцеллёзом в регионе Северного Кавказа.

3. Обоснование автономности существования на территории Северного Кавказа,природного очага бруцеллёза (Северо-Кавказский предгорный природный очаг).

4. Эпидемиологическая и диагностическая значимость разработанных методических приемов, способов и схем выделения, идентификации и дифференциации возбудителя бруцеллеза.

Апробация иаботн

Основные результаты диссертационной работы были доложены и представлены на У съезде Азербайджанского научного общества эпидемиологов, микробиологов 'и паразитологов. (Баку, 1980); научно-практической конференции по повышении эффективности диагностики особо опасных инфекций (Саратов, 1931);- Всесоюзной междуведомственной конференции "Современные проблемы аоонозных инфекций" ("Симферополь, 1981); Краэзой н!1^чной конференции, посвященной 60-летию образования СССР /"Болезни с природной очаговостью на Кавказе" (Ставрополь, 1982); Всесоюзной научно-практической конференции по бруцеллёзу (Саратов, 1983); Всесоюзной научно-практической конференции "Профилактика природно-очаговых инфекцчй" (Ставрополь, 1983): Всесоюзной научной конференции "Современные аспекты профилактики згонозных инфекций" (Иркутск, 1984); Всесо-

изной научно-практической конференции "Актуальные вопросы иммунодиагностики особо опасных инфекций" (Ставрополь, 1985); 6-й краевой научной коифер нции "Особо опасные инфекции на Кавказе" (Ставрополь, 1987); областной научной конференции молодых ученых "Эпидемиология, микробиология и иммунология бактериальных и вирусных инфекций" (Ростов, 1589); Всесоюзной конференции "Актуальна. вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным"(Новосибирск, 19*9); Всесоюзной научной конференции ."Современные аспекты профилактики еоонозных инфекций" (Ставрополь, 1991); Российской н<_;чной конференции "Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфэкций" (Волгоград. 1992); научной конференции "Разработка и производство препаратов

медицчнекэй биотехнологии" (Махачкала, 1992); Всероссийской науч*

ной конференции "Иммунология а специфическая профилактика особо опасных инфекций" (Саратов, 1993); научной конференции "Современные аспекты природной очаговости, эпидемиологии и профилактики особо опасных инфекционных иолеэней" (Омск, 1993); междуведомственной научной конференции "Актуальные вопросы профилактики чумы и других инфекционных заболеваний", посвященной 100-летюо открытия возбудителя чумы (Ставрополь, 1994); научной конференции "Актуальные проблемы профилактики особо опасных и природно-очаговых инфекционных болезней", :освящзнной 60-лети» Иркутского противочумного института (Иркутск, 1994); совместном заседании комитета по таксономии и номенклатуре патогенных бактерий, простейших и грибов СССР и межведомственной комиссии по борьбе с бруцеллезом при-ИЗЧЙЗХ СССР (Москва, 1981); заседай> лх Подкомитета по тило-номки бруцелл Мэждународнс ро комитета по таксономии б актера

ФАО/ВОЗ (1978, 1980); ме«лабораторных- научных конференциях Стар-ропольского НИПЧИ (1990-1994).

Публикации. Основные результаты диссертации изло-. ны в 35 научных работах, 3-х заключительна отчетах, 4-х инструктивно-методических документах, 2-х изобретениях.

•Объем и структура, работы. Диссертация изложена на 273 страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы (.1 глава), собственных исследований (5 глав), заключения и выводов.' Материалы диссертации иллюстрированы 6 рисунками, 2 фотографиями, 30 таблицами. Указатель литературы содержит 353 наименования работ отечественных и заоубелньа авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ . . .

Обзор литературы состоит из одной главы, включающей 4 рагде-ль, в которых изложены краткие исторические сведения о распространении бруцеллеза в мире, эпидемиологические особенности бруцеллеза, как вооантропояозногс заболевания, значение лицевых продуктов в эпидемиологии бруцеллеза, а такие показана история эволюции взглядов на проблему природной очаговости бруцеллёза.

Материалы и методы. Материалами исследований злулшш статистические да^ныэ официальной регистрации авбола-заемости бруцеллёзом в СССР и России, материалы го заОодева&иости бруцеллёзом, полученные из центров Госсанэпиднадзора рагжчльгс уровней СеЕвро-НавказскохJ региона за период 1987-1993 гг., отдельные документы и матери_лы агропромышленных комитетов и упр?з-лен^й гетеринарки краев, областей и республж Саперного Кавказа, даьные по эпизоотологии и профилактике бруцеллёза, спубл^коганные в периодической печати,а так*», матерная« экспедиционных выеадоя

сотрудников лаборатории бруцеллёза Ставропольского НИПЧИ в животноводческие хозяйства и комплексы, промышленные предприятия по переработке продуктов и сырья животного происхождения, населённые пункты, где отмечались случаи заболеваемости бруцеллёзом.

Объектами исследования 'служили международные референтные штаммы бруцелл видов melitensis, abortus, suis, neotomae, штаммы бруцелл, выделенные от мышевидных грызунов в Северо-Кавказском предгорноь природном очаге, бруцеллёза и L-форма штамма В. suis 518.

Для дополнительной характеристики штаммев бруцелл, изолированных от мышевидных грызунов, проводили изучение деэаминаэней активности по методике, предложенной В. Г. Мг-Поким (1988) в нашей модификации, антиб'котикоустойчивость - методом двухкратных серийных разведений, нейраминидаэную активность - тиобарбитуровым методом (Warren, 1959), белковые спектры бруцелл с использованием дискэлектрофореза в полиакриламидном геле (Маурер, 1Э71).

Изучение гксперю.-сштального инфекционного бруцеллезного процесса проводили на модели морских свинок и белых беспородных мышей с использованием коммерческих и экспериментальных серий меди-гчнеких иммунобиологичесюгх препаратов и принятые методы бактериологического, серологического, гистологического и аллергического исследований. Цктоэнэимохимическое исследотнш лейкоцитов периферической коови ьключало выявление щелочной фосфатаэы (Н. Ф. 2.1.3.1) по L. S.Karlow (1955), кислой фосфатээы (К. Ф. 3.1.3.2.) по Р. TL Нарциссов/ (]970), пероксилааы (KS. 1.11.1.7.) по Р. Лилли (1939), катионных белков по В. Е. Шгаревскому (1978).

Сравнительное изучение вирулентности и п^тогекшети, экспе-

риментальное изучение возможных путей передачи возбудителя бруцеллёза, циркулирующего среди мышевидных грызунов, проводили на модели юрских свинок и белых беспородных мышей. Статистическую обработку полученных данных проводили по И. П. Ашмарину, А. А. Воробьеву (1962).

Современная эпидемиологическая ситуация по бруцеллезу в регионе Северного Кавказа.

Анализ заболеваемости бруцеллезом с впервые установленным диагнозом в различных административных территориях Северного Кавказа за период с 1987 по 1995 годы показал неравномерное её распределение (табл.1). Как видно из представленных в таблице данных, более половины всех больных зарегистрировано в Ставропольском крае и Республике Дагестан, где основным источником инфекции для людей являлся мелкий рогатый скот. 3 этих ДЕух регионах наметилась тенденция к увеличению числа групповых заболеваний и эпидемических Бспьшек, составляющих' от 20 до 40 % от общего количества заболеваний свежим бруцеллёзом.

Эпидемиологическая обстановка по бруцеллёзу в других административных территориях региона характеризовалась преимущественно спорадической заболеваемостью, интенсивные показатели которой . на протяжении последних лот колебалась от Г), 08 до 1,44 ьа 100 тысяч населения.

Эпидемиологический анализ материалов касающихся основных источников и путей передачи инфекции в регионе Северного Кавказа за 1987-1993 гг., показал, что основным источником бруцеллёза является мелкий рогатый скот.

Таблица 1

Дчщше а заболеваемости людей бруцеллезом ь административных территориях региона Северного Кавказа еа период с 1887 по 1993 гг (абс. ци.|ри)

КН : Наименование здешни-: Бруцеллез, впервые Еиявленний (год)

гг : стративнэй терркто- :-----------------------------------------

: рпн : 1937:1083:1589:1990:1^91:1832:1993: всего

1.' Ставропольский край

1 [с Карачаево-Черкес- 195 104 93 Q5 103 158 193 952

ской республикой)

2. Дагестан 61 57 40 92 107 67' 61 485

3. Чзчеяо- Ингушетия 18 16 25 19 18 8 3 107

4. Северная Осетия . 23 16 22 16 13 12 16 121

б. Кабардино-Балкария 15 6 8 < 7 10 17 70

6. Ростовская область Е: 8 13 Б 8 '19 34 110

7. Краснодарская край

(с республикой

Адыгея) 3 2 2 - 1 3 Б 16

bjero: 342 209 Г:03 ?.Ц 257 2й7 326

в. Российская Федерация 806 Е65 524 ьго 539 Б61 755

Анализ динамики удельного Беса мелкого и крупного рогатого скота как источника заражения людей бруцеллёзом в региснг Северного Кавказа, позволил установить, что кр т Краснодарского края, Росювской области и Кабардино-Балкарии, во всех остальных административных территориях прослеживалось увеличение роли мелкого рогатого скота, причем, в последние годы в этих зеках с ним связано подавляюще болыгинствс случаев заболевания лядей (табл.2).

Б Краснодарском крае очаги бруцеллеза мелкого рогатого скота были ликивдированы к 1964 году путем убоя неблагополучного поголовья вместе с приплодом, а к .1985 году практически ликзидированч очаги бруцеллеза крупного рогатого сг.ста в результате разработанных методических подходов^ по выявления, "скрытых" очагов Г Яров и соавт. ,1991).

Снижение показателе.1 заболеваемости людей бруцеллезом в Ростовской области и- Кабардино-Балкарии объясняется оздоровлением этих территорий' от очагов оеечоего бруцеллеза с помощью массовой вакцинации овец вакциной из ¡птаммд В. аЬогищ 19 е- комплексе с другими ветеринарно-санитарными мероприятиями. Случаи заражения от свиней в аналшлруемые года ке регистрировались.

Наиболее частым путем передачи инфекции является контактный 'Е9Х). 'Алиментарный путь отмечен в 22 7, случаев, смешанный ^кои-тактио-алкьенгарный) - в 8 % случаев "свежего" бруцеллеза. Р 11 * случаев заболеваний эпидемиологическое расследование не привело к установлению источников и аутей передачи га'фсчсцчг.

Еруцеллээ в регионе остается инфекцией, порг-у^кп,-?:. преимущественно, сьльсно* -тй нетто чхгхя зарегестрпрог-знь'их у а анали?круемый даргод Ссльш«::, .тге.чи -гльскс-й м*сгнозти сос—

Таблица 2

Удельный вес сельсчохозяйственнш животных в качестве источника варэм<"чия людей бруцелл-эвом в 1988-1993 гг., % к общему числу установленных источников инфекции

Название административной территории

• Источник инфекции .1___________________

М-лкий рогатый скот : Крупный рогатый скот

1988: 1909: 1990: 1991: 1992: 1993: 1988: 1989: 1990: 1991 : • 1992 : 1993

1. Ставропольский край (с Карачаево-Черкесской республикой). 55,4 57,2 60,8 65,3 67,5 68,9 43,6 42,8 39,2" 34,7 32,5 31,1

2. Дагестан 51,3 64,8 66,2 59,5 71,3 72,5 за, 7 35,2 33,8 30,5 28,7 27,5

3. Чечено-Ингушетия 42,3 45,0 45,3 46,4 47,5 ы сг 57,7 55,0 54,2 53,6 52,5 51,8

4. СеЕернак 0сет1.. 50,1 52,3 53,5 53,8 56,2 56,7 ■ 49,9 47,7 46,5 43,2 43,8 43,3

с Кабардино-Бал-

кария 9,9 10,8 12,5 11,3 15,8 14,4 90,1 89,2 87,5 88,7 04,2 85,6

6. Ростовская •

область 13,0 14,8 13,6 . 12,5 15,0 16,8 87,0 85,2 86,4 87,5 85,0 83,2

7. Краснодарский крэй(с республикой Адыгея) ■ - - - - - - 100 . 100 100 100 100 100

тавляля Происходя-дие изменения в эпизоотической обстановке

отразились на профессиональной структуре заболевших людей (табл. 3).

Таблица 2

Заболеваемость бруцеллезом людей в Северо-Кавказском регионе в 1988-1993 гг. е зависимости от профессии, X к обсэку числу больных

ЦН пп

Контингент больных

Годы

1988 : 1989 : 1590 : 1991 : 1932: 1993

1. Постоянные животноводы

2. Временно прив-лечбрные

3. Профессионально несвязанные

4Р в 58,б 21,8 24,3 20,6 21,0

8,3 9,4 13,8 15,6 22,5 26,4

43,1 45,9 - 54,4 60Д 56,9 52,3

Как видно из таблицы, процент заболеваемости работников, постоянно связанных с общественным животноводством (чабаны, доярки, скотники, зоовэтяерсонал), неуклонно снижается. Зге объясняется, с одной стороны, приобретёнными за время работы естяствен-{ым и искусственным иммунитетом, с другой - улучшением пробила; :ичэских и противоэпидемических мероприятий, осуществляемых орга-1ами санэпидслуибы ч здравоохранения. Увеличение удельного веса шц, временно привлекаемых к работе г иивотноводство, объясняется

недостаточной подготовленность*! этого контингент;.; к работе ь лагопо.дучньж по бруцеллезу хозяйствах, )иЧ' официально зарегисл«-рованнш., так л считающихся благополучный:*..

Отмечается некоторое снижение удельного веса лиц работоспособного возраста (21-50) за счет увеличения оолее молодого, в сй-шэй сумме габг^лзвэний бруцеллезом возрос удельный ес-с детей ю (с 9,3 до 13,8). Заметно возрос удельный вес Сольных мужского по да ( с 64,2 X в 1906 г. до 77 7* в 1893 г.)

Сезоннш характер заболеваемости бруцеллезом обусловлен интенсивностью выделонкя возбудителя во внешня среда' в определены® чериоды биологического цикла развития животных (ягнение, отелы, лактация), к контактами (профессиональным и Сиговым) различит категорий населения с основными исючн,1Кчма и факюоаш передачи иьфекцик э определенные интервалы времени.

Анализ аейолеваемости ладей бруцеллезом в регионе пакааыы!-ет, что случаи возникновения заболеваний более иди менее равномерно оты^чаится в течение календарного года с двуыа сезокаоы; подъемами.

Первый подъем приходится на февраль-апрель (38 % среднегодовой заболеваемости) и по времени совпадает с периода» иассоьосс окота и отела скота. Второй сезонный подъем выпадает пь. Ссд-тпбрь-октясрь С19 7. среднегодовой заболеваемости) и связан с проведением ь Э1-0 ьреш целевых профилактических сештроь работнике!; животноводства на бруцеллез и активным выявлением больнее. В остальное месяцы иокауатэли среднегодовой заболеваемости были зна-чьте/ьнс ми*.--.

Зз аналиыгруемый период четко -прослеживается тенденция к увеличению роли поголовья сельскохозяйственных животньсг индивидуального сектора в качестве источника Зруцеллезной инфекции (таСл.4).

Таблица 4

' Удельный вес сельскохозяйственных животных индивидуального сектора в качестве источник заражения людей бруцеллезом в 1988-1993. гг. в Сезеро-Кавказскои регисне; X к общему числу установленных источников инфекции

NN : :' Годы

пп : Источник инфекции : --------------г---------------------------

: : 19G8 : 1983 i 1990 : 1991 : 1S92: 1653

1. Шлкий рогатый

скот , ■* 19,3 21,9 31,0 31,1

2. Крупный рогатый

скот 4,2 5,3 5,8 6,4

3. Смепанный 1-3,1 13,3 14,6 14.9

lib всей вероятности, в . ближайшие годы эта тенденция будет нарастать в связи с развитием новых форм хозяйствования (фермерские, крестьянские хозяйства, арендные к кооперативные предприятия по переработке сельскохозяасгяонкой праду/д^ц).

Наблюдается корреляция ЯЕ0с<Л1?зае.моати людей с видом возбудителя циркулирующего преимуп^стьенно среди со.^скохоряйстБеннь'х животных данного региона. При .этом указ^чна^ зависимость в целом

31,4 31,8

6,4 3,7 15,4 16,3

сохраняется даже в администрат;тных территориях с преобладанием хозяйств крупного рогатого скота, а также б районах со смешанным

миестнободством.

Так, ка территории Ставропольского края и республики Дагестан выделяется преимущественно яозбудигел* вида Б. пкИ Ьегшэ. На других административных территориях в очагах смешанного типа соотношение выделенных культур составляло примерно 1,5:1 для видов В. аЬз^цз г- В. 1ГйП1епз1з соответственно. Однако В. ггеШопзм остается наиболее эт'дешчес;<н значимым повсеместно в регионе Северного Кавказа.

Таким образом. ревюмируп изложеьчое.. можно констатировать, что е настоящее • время регион Северного Кавказа кпляется наиболее неблагополучным пс бруцеллезу регионом Гог.'с.'лйс.чой Федерации, где регистрируется свыше 30 " общероссийской заболеваемости атой болезнью. На протяжении последние лет (1.383-1393 гг.) наметилось нексторое, весьма неустойчивое, узгу-ипэьие гпидемической ситуации, однако темпы снимекш аболезаемостк людэй этой инфекцией в регионе существенно отстан/г от такова по России.

Стало обычным явлэнизм, когда габолеьаемость животноводов боутде.мёзом внетупает своеобразным "индшеаторэм" эпкзосйёского неблагополучия по этой инфекции кивотчсзодческих .хозяйств. Предп-рини/ае'лые г.етсринаг-кой йяужСсй прэтьвобруцеллёэные меры носят Еапоедэяый характер. а хозяйства переводятся в статус неблагополучных спустя 1-3 года после выявления первых случаев заболеваний средь работников животноводства.

"Благополучие" ряда животноводческих хозяйств к- попытка ликвидировать ?.)уцеллёв среди сельскохозяйственна ливотных полуме-

ЙЭ -

рами, способствуют дальнейшзму распространении ик|ккции и, в иго-ге, приводят к росту заболеваемости населения.

Создавшаяся ситуация по бруцеллёзу^егионе определяет необходимость обьединэния усилий администраций территорий, ученые и практических работников медицинской, санитарно-эпидемиологической и ветеринарной оду?5 ка разработку эффективна мероприятий по борьбе с этим заболеванием.

Неблагополучно по бруцеллазу по региону Сеьеуного Кавкава в целом, и значительный рост заболеваемости бруцеллезом в республиках Закавказья (.Армения, Азербайджан) в условиях "прозрачных" государственных границ с эт¡ил: республиками, и отсутствия долхного надзор л ва ввозом продукции на территорий СеЕеоного Кавказа приводит к тому, что многие виды сельскохозяйственной продукции поступают безконтролыю, минуя соответствующие еанитарно-карантинныз пункты. Возможн и ввоз частными лицами более деиового скота иг сопредельных республик Ззкзвказьл, чю при недостаточно полном ветеринарном контроле ¡«жт повлечь ещё более интенсивный рост заболеваемости бруцеллезом людей в "регионе.

Все вышиалакзнное, а такнэ повышенная миграционная активность в регионе боканцев и переселекцэЕ, наличка открытых в и&нь-тарцо-эпидешюлогкчегком и к??ерипьрном отношении границ с саранами Закавказья, явилось основанием для разработ! специалистами Ставропольского НЙПЧМ 2-х региональна:: комплексных программ: ".Обеспечение эпидемиологического благополучия по особо опасигл« и природноочаговым инфекциям и у учкение медико-экологической обстановки на Юге России" (1691-1996 гг.) л программ* "Пройияакгпкч особо опасны/ инфекций и санитарная охрана Сталропольско! с края

от завоза и распространения конвенционных заболеваний на 1993-!995 годы", в которых разделы по бруцеллёзу составлены на основе проведенных нами исследований. Программы рассмотрены л утверждены советом Ассоциации социально-экономического сотрудничества республик, краев и областей Северного Кавказа £0.05.19Э<1г. и Глагой администрации Ставропольского крал 14.10.1993 г. _

Совершенствование тактики а п и -в о о I о л с г и ч е с в о г о и эпидемиологического обследования очагов бруцеллеза.

Социально-экономические преобразования, происходя!, .) в настоящее время в животноводстве (разукрупнение колхозов и совхозов, формирование новых организационных форм ведения животноводства), и связанные с этим перегруппировки скота, обусловливают необходимость ьктивиьации профилактических, противобруцеллйаных мероприятий. Решение; этой задачи невозможно без .юдрсбного анализа эпиор-отологнч кой ситуации по бруцеллёзу ь каждом конкретном очаге, оценки и учета факторов распространения инфекции, особенностей ьедеьия животноводства, быта населения' и условий его труда.

Несмотря на всестороннюю изученность общих закономерностей, проблема оздоровления хозяйств от бруцеллеза «нвотных и предупреждение с^учаеЕ заражения людей остаётся трудно разрешимой. Это объясняете* отсутствием единого метода профилактики и оздоровления очагов Ср/цвллеза, одинаково эффективного в неблагополучных кйгяйзтвах р&злчичпК видвз животных при разных формах ведены животноводства и н рзеличннх климато-географических зонах. Правильная оценка обстановки, основанная на анализе зплзоотологлчбских и

эпидемиологических факторов, позволяет найти наиболее эффективное

сочетание методов борьбы с бруцеллёзом. *

При проведении эпиэоотологического обследолания необходимо . исходить из следующих положений. Во-первых, основными носителями возбудителя являются наиболее массовое виды сельскохозяйственных животных, на которых базируется сельскохозяйственное производство. Бо-втсрых, бруцеллёз является хронической, латентно протекающей инфекцией, что крайне затрудняет осуществление эффективной диагностики, своевременного выявления и санации очагов. В-третьих, специфика ведения животноводства определяет необходимость ежегодных перегруппировок к передислокаций отдельных стад, отар или групп яивотных. ■ ;

Основываясь на вышеизложенном, нами предлагается следующая зтапность анализа эпиэооталогическлх данных при проведении эпиго-отологического обследования в очаге бруцеллёза:

- описание-'прострзнственно-структурной и экономической характеристики хозяйства;

- выяснент характера и обьема перегруппировок животных;

- анализ сведений о заболеваемости животных бруцеллёзом в предшествующей обследованию период;

- анализ результатов массового обследовачия на бруцеллез всех ви^ов живбтных в очаге;

- анализ косвенных показателей неблагополучии хозяйства по бруцеллёзу:

- анализ сведен^ о санитрном состоянии хозяйства;

- выявление возможности миграции возбудителя бруцеллеза мелкого рогатого спита.

из -

После апизоотологичзского иэучеш-.я отдельных очагов, собранный материал целесообразно систематизировать в целом по району. На схематических картах изучаемого административного района целесообразно указать расположение очагов бруцеллёза, маршруты скотопрогонных трасс, проценты'пораженности бруцеллезом различных Ы1Д01-. животных. Указывается также Еоэраст очагов, их активность, пути и факторы распространения возбудителя, состав биоваров циркулирующего возбудителя в изучаемом административном районе.

Таким образом, при реализации изложенных рекомендаций фактически создается эпиэоомлогичэский паспорт по бруцеллёзу района. На этой основе представляется возможность квалифицированно осуществлять эпидемиологическое обследование.

В настоящее бремя сбор информации об очагах бруцеллёза осуществляется с применением единой карты эпидемиологического обследования, котора.. заполняется в случае заболевания человека. Далее информация поступает на вышестоящее уровни санитарно- эпидемиологической служ€н в форме елемесячных и годовых отчетов, содержащих лишь сведения об абсо.шотном числе заболевши, 'а также о доле детей до 14 лет е ебщэм числе заболевших. Этих сведений явно недостаточно для углубленного анализа и выявления причин возншаювения ¿вбслевакия и риска заражений для населения. Йсэтому система эпидемиологического обследования очагоЕ бруцеллёза требует своего соБрршеЛ'ЛвоьБния. Нами разработаны рекомендации по эпидемиологическому обследованию очагов бруцеллёза, включающие следующую статность:

- обор эпидемиологического анамнеза у заболевших, определение места нахождения очага, его границ и времени возникновения;

- ршвлеьле источника возбудителя инфокц™, изучение при'ии возникновения очага и обстоятельств зарзлания людей;

- выявление круга лиц, подвергшихся риску заражения в очаге;

- проведение экстренной профилактики дщэм, подяэр.чт мел риску заражения:

- уничтожение, изоляция и дезинфекция источнлкоь и вероятных факторов передачи;

- проведение подоорпьлс обходов и повторных лосегрииД счага

Предлагаете этапы элиэоотологического л эпидемиологического

обследования направлены на пиявлонш дейстьччелъногэ источника возбудителя инфекция, позволят четко очертить круг Л1:ц, подвергшихся риску-заражения в данном очаге, сгруппировать больи^х по принадлежности к нему. Описанные схемы упорядочивают ход эпизоо-тологического и эпидемиологического обследования и детально изложены в "1&этоди.ческих рекомендациях по тактике шиаоотологпческогс и эпидемиологического обследования очягов Оруцеллееа", утчер.*деч-ных директором Ставропольского НИПЧИ 1. СЗ. 1993 г. и прс-дложнню. для использования работникам санитйгно-эпидеи,'ологичэокой службы Северного Кавказа.

Современное ооотоянизизученно-сти Север о-К а в к а г с р о р о предгорного .природного очага .бруцеллеза.

Территория Терско-С/нженскогз междуречья, с которой с 195С г. почти ежегодно выделяется возбудитель бруцеллёза от .мышевидных грызунов, расположена, в основном, в предела;: двух фигчко-геогра-.¿ических районов Предкавказья: Терско-Оукжэяской воввыпечностн, Кабардинской, Осетинской и Грозненской наклонных рэвнин.

Эго восьмой и девятый физико-географические районы среднего Цред-кавказья (Гвоздзцкий, 1953, 1963). Для Терско-Сунжэнского мевду-речьн, значительная часть которого ганпта природными очагами чумы и туляремии, характерно рагнообразие ландпафтов, климатически-/, условий, растительных к фаунистических группировок.

Преобладают типично степные й десостепаш ландшафты. В растительном покрове степи преобладают елакоЕке и разнотраЕно-элаке-вые формации, лишь в притеречной равнине доминирует полынно-елаковые группировки. В предгорной лесостепи представлены остепнен-ные паптбиша, заросли кустарников, лесополосы. В долинах рек ка небольших участках сохраняются пойменные леса и разнотравные луга.

Вся территория описываемого района интенсивно осваивается, свыше 60 7, площади распахано, занято орошаемым земледелием.

Климат района в степной его части уморенный, засушливый, а ь предгорной части более мягкий, умерен.;о-ьлалный. Среднегодовая темгерат^ра Еоздуха. около плос ЮоС, годовая сумма осадков - от 300 (.степь) до Б00-800 ым (лесостепь).

Зона Ассино-Сунхенского междуречья, расположенная в, среднем течении ре?и Асса, где выделялось наибольшее число культур бру-целл от мышевидных грызунов, г.вляется природным очагсм туляремии и представляет собой предгорную лессстепь ка высотах от 100 до 300 м нвд уровнем моря. Центральная гасть территории природного очага Сруцеллэаа расположена в междуречье Аееа-Суька. з окрестностях. сел йвстеровской . Ассиноасксй Су1.ленского района.

Рядовой состав • грызунов игучаемого района представлен 18 видами, из которых, по многолетним данным зараженность возбудителей:

- Й'Э -

бруцеллйза выявлена у Б видов. Из штаммов, выделенных от грызунов, от кашей домовых (Mus nusculus Linnaeus, 1756) изолировано -39,Б от полевых (Apodemus (А.)'aerarius Pallas, 1771) - 26,5 .7., от лесных (Apodémus (5.) sylvaticus Linnaeus, 1758) - 21,0 от обыкновенной полевки (Miorotus (М.) arvalís Fallas, 1779) -10,0 X, от мышей малюток (Micromus ninutus Fallas, 1771) - ?>Z.

Различия э . фауне грызунов сгепкых и лесостепных участков заключаются, з .основном, в структуре их населения и амплитуде колебания численности. В степной зоне доминируют домовая мыль и обыкновенная полевкл. В лесостепной еонэ доминируют лесная, домовая мыши и обыкновенная полевка, в целом в структуре населения грызунов преобладает 4 вида - лесная (индекс доминирования 55,5), домовая (23,3), полевая (10,0) мыш и обыкновенная полевка (11,2). В сумме названные 4 вида в ¿бой сезон и год составляют 95-97 7. среди всех грызунов. Численность и доминирование каждого кэ этих видов зависит от характера биотопа. Так, в лесах, лесополосах, зарослях кустарников, в садах, виноградниках преобладает лесная мьяеь (62 X), второе место ло численности занимает домовая мышь (21 X). В зарослях бурьянов, в скирдах соломы, в хилых и складских помещениях доминирует домовая мышь (до 80 X), второе место занимает лесная мышь (до 15 X). В увлажненных биотопах (пойменные леса и луга, берег оросительных каналов) Фоноеым видом является полекзя мышь (от 20 до 40 7.}. Обыкновенная полевка доминирует ка лугах, на полях многолетних трав,_ на опушках .теса.

Довольно разнообразна фауна клевдэй. Гамазоидные клеши представлены 19, а иксодовые - 11 вида!®.

Среди последних в степных ландшафтах доминируют Haemaphysa-

lis sulcata и H. otcphils. (Schulze, 1918). В лесссте~чой ьоне преобладают пастбишкый клещ Demacenter marginatum и гнездо-норовой илмгц Ixod«s redtkorzevi.

В лесостепной зоне численность грызунов более стабильна во все сезоны года, чем в степной, с небольшим повышением к осени. Межвидовые и внутривидовые контакты среди мышевидных грызунов наблюдаются зо все сезоны года Домовые, лесные, полевые мыси и по пев га довольно ч-лто еашшапт одни и те т места обитания.

Описанная территория. Цредкавказья с её растительностью и животным шром представляет собой оптимальный, биоценоз, в котором _ существует длитолоное время возбудитель' бруцеллёза lto географи-' четкому положению к ландшафтной приуроченности существующий на территории Тбрско-С^нхйнского. меэдуречья природный очаг бруцеллеза предложено наэзагь ОвЕеро-Кавкааскиы предгорным (Лямкин, Таран,, 1991; ЛяьлИн, Тарасов, Таран, .1953). Пространственно очаг площгдью 3500 км2 включает два участка. Один из них расположен ь степной зоне западной части Терско-Сунженского междуречья, где раньше преобладали, разнотраано-злшювые и злаковые формации. Второй участок находится в лесостепной зона предгорий Большего Кавказа, £ долине среднего течения peiai Асса

Биологические свойства «иаммов бруцегл, выделенных от ште-ьидных гривуно.ч на территории Северо-йазкзасксго природного очага бруцеллеза в 1933-1992 гг. и находящихся в коллекция патогенных микроорганизмов Ставропольского НИЛЧК, были изучены в соответствии с критериями таксономических признаков, рекомендованных Подкомитетом по таксономии бруцелл Международного комтета по таксономии бактерий (Икнхен, 197И). Результаты сравнительного '©учения

их свойств и международных референтных штаммов бруцелл показали,

что все штаммы, выделенные от мышевидных грызунов, обладали мог»

фологическичи и тинкторкальными свойствами, характерны!.« для бру-. цел л. Культуры были в 5-форме, росли в обычной атмосфере воздуха, признаков сероводородообразования не огмечзлось. Все штаммы росли на среде с тионином з применяемы}: концентрациях и не росли на средах с основным фугаином. ГЬ чувствительности к. бруцеллёзным фагам Tb, Wb, , ВК2, Fi, научаемое етамш бруцелл были идентичны референтным штаммам В. suis. Изучение характера окислительного метаболизма показало, что штаммы бруцелл, выделенные от грызунов, окисляют L-аргинин, DL-орнитин, LL-цитрулин и L-лизин, что является характерной особенностью для представителей вида В. suis. В то »а в;емя окисление L-аланина, L-аспаргина и L-глугамилозой кислоты было отличительным признаков Все культуры, выделенные от мышэридных грызунов, хорошо апшзтинировались сывороткой анти-те-lltensis, реакция с сывороткой анти-abortus была отрицательной. Цри исследовании эндотоксина иа высушенной, убитой ацетоном культуры H 513 установлено, что по общему химическому составу липопо-лисахарид (ЛПС) из штамма N Б13 был сходен с ЛШ, выделенным из клеточной стенки 3-форм представителей разных- видов бруцелл -В. melttensis.S. abortiis и В. suis: количество общи* Сахаров в среднем 70 7 липидоз - 93 %, бе чи - 5,8 7., отсутствие нуклеиновых кислот. Результаты инфракрасной спектрофотометр«« выявили общее сходство спечтрсв изучаемых ЛПС с референтными_ культурами бруцелл. Изучение антигенной структуры ЛПС, выделенных из штамма 3. suis, показало, что они были иммунологически родственны и иден- ■ тичны. Эти результаты согласовались с данными определения сероло-

гической активности изучаемых ЛПС. Вместе с тем установлено, что ЛПС, выделенные из штаммов Б. suis 513, подобно ЛПС, выделенным из В.suis 1330, обладали слабым сенсибилизирующий свойствами и низкой акт иь к остью в РКГА, в отличие от ЛЕЮ В. abortus 544 и В. ireiiteri3is 16-It

Токсичность для белых мышей была сходной с таковой у ЛПС других видов бруцелл. При исследовании белковых спектров бруцелл установлено, что протеннограммы видов abortus и melitensls отличаются от прогеинсграмм вада sui3 наличием фракций с RF подвижностью 0,77. Бее представители вида В. suis примерно в 2 раза ин-.тенсианее утилизировали уридин, чем урацил, аначения относитель-"но<* удельной активности (ОУА) составляли 15,2-29,9. Все исследованные штаммы не усваивали вкзогэнный цитозин и цитидин, не утилизировали экзогенный тимин, как и представители вида В. suis.

. Прь игучеИли чувствительности к антибиотикам штамызв бруцелл, выделенкык от грызунов и эталонных штаммов вида В. sals, установлено, ч" з по данному признаку все штаммы представляют собой однородную группу. Они были малочувствительны1 к стрептомицину (VCJK - 3,0-16,0 мкг/мл) и чувствительны в отношении ка-нгмздина (МГШ - 0,1-2,5 ккг/мл), левомицетнна ( 1.ШГ< - 0,5-1,0 ыкг/нп), тетрацнклша (ШК - 1,0-6,2е мкг/мл), окситэтрацюшша ( МГЖ •• 2,0-5,0 мкг/мд), доксицикдкна (ШК - 0,4-1,6 мкг/мл), ри-фампицкна (ШК - 0,4-1,5 ют/мл), бенэилпенициллина (ЫЖ - 2,5 ЕД/ш). Кб ученные культуры, как и представители других видов бруцелл, гкдролие-овалк мочевьну и содержали нейраминидазу. активность которой з среднем составляла 135 НЕ.

Вирулсштнссть культур, выделенных or мышевидных грызунов,

•изучали на морских сьинка>: и белых мьаах. Для заражения использовали дозы 20, 200 и 2000 КОЕ. Установлено, что штампы бруцедл, выделенные от миловидных грызунов, менее вирулентны, чем референтный ятамм sais 1330. При заражении животных куда тур оД 513 в дозе 20 КОЕ, индекс ы:фицированнысти составлял 77 f. для морских свинок и 90 7. - для белых мышей.

Патогенность культур бруцелл, изолированных от мшэвидчых грызунов, изучали на морских свинках. Для исследования брапи ре-гионарнкй (паховый) к месту введения культуры 'руцелд и отдаленный (шейный) лкмфоувлы, а г а юн барьерные органы - п-чень, легкое, селезёнку. Заражение животных проводили подко.чно г различны.! дозах: от 20 до 2СЮ0 КОЕ.

Инокуляция животным малых дое бруцэлл у;ке к 16 суткам вызывало тяжелые патоморфологнчвскиа изменекия в лимфатических узлах, которые усугублялись к 1 месяцу после заражения. К 3-му месяцу после заражения происходило формирование многочисленных: гранулём и очагов некроза в лимфатических узлах к селезенья. В печени о«а-ги гнойного воспаления и некроза'были отграничены.от екружзюшрй паренхимы грануляционной тканью. У hgpc^hx свинок ь семенниках формировались однотипные изменения, аналогичные тем, которые наблюдались после введения референтного штамма В. suis 1S30. 1 шюны .атрофия, некробиоз и некроз зародышевого эпителия соыеиных канальцев. Во многих кз них. обнаружены лишь клетки Сертоли к ля единичные дистрофически измененные сперматогонии, Полученные данные позволяют предполагать, что оСлздэа высокой ъоспрнимчтаоетьй л инфекционной чувствительностью к бруцеллезной ннфе^уии, мидевид-ные грызуны, га-ъидкшму, могут являться звеном в эпизоотической

цпг.и, как резервуар возбудителя в природном очаге.

Результаты проведенных экспериментов по изучению возможных путей передачи возбудителя бруцеллёеа в S и L- формах на модели белой мыши показали принципиальную возыояаость передачи бруцелл £ S-форме здоровым зверькам контактным путем и через экскременты, причем частота такой передачи повышалась с увеличением дозы, которой ьарамали "донора". Отрицательные результаты опыта по передач? бруцелл в L-форме поэволяют делать вывод об отсутствии роли L-форм бруцелл в циркуляции возбудителя среди мышевидных, грыау-ное. Это подтверждается тага« данными по сравнительному изучению вирулентности L-форм итамма В. suis SIB и исходной культуры В. sius 518. При введении экспериментальным животным культуры В. ruis 618 -Lb дозе 1x109 КОЕ'ыл индекс высеьаемости не превышал SO X, тсгда как у исходного штамма В. 3uis 618 индекс высэваемостк составлял 75 что говорит о значительно ослабленной вирулентности L-форм возбудителя. Видимо, ■ снижение вирулентности, сопутствуйте L-трансф жации возбудителя бруцеллеза, не позволяет включиться механизму передачи инфекции от больного животного здоровому и осуществлять циркуляцию воабудитля в популяции грызунов-носителей инфекции.

Изучение биологических свойств 'зовбудителя бруцеллеза, цир-кулирукдего среди" мышевидных грызунов ь Сэперо-Хавквзском предгорном природном очаге показало, чт. независимо ст срока и места выделения, еид^ грыьунэ--носителя спи стабильны и однотипны. О одной стороны, штаммы зтогэ возбудителя иыеют свойства,характерные для вида В. suis - С'Ь2 - независимость, неспособность к продукции сч-ровид^рсда, высокуч редуцирушую способность ь отношении тиоки-

- Б5 -

на и ее отсутствие по отношению к осжвному- фуксину, лизис бруцеллёзным! фагами Tb и Fi в 104 RTD и фагами Wo ВК2 в RTD и 104xRTD, наличие типичных протеиногрэмм, окислительная активность ч отношении субстратов цикла мочевины L-рргин'.ша, DL-орнптнна, DL-цитруллина и L-лизина. По характеру усвоения экзогенных пред■ Еестаеьников нуклеиновых кислот- (пурин:-з и пиримидпнсв). чувствительности к антибиотикам, вирулентности и патогеннс-сти н&учвичые штаммы такие ближе всего стоят к представителям вида В. suis. С другой стороны, выявлены признаки, отличающие эти штаммы от эталонных культур Б.suis: способность к агглютинации моноспецифической сьтэороткой aHTH-'melitensis, наличие окислительной активности в отношении L-аланин^, L-аспарагика и L-глутаминовой кислоты.

Результаты изучения штаммов С^уцелл, изолированных ст мышевидных грызунов .в СеЕеро-Кавказском предгорном природном очаге бруцеллёза, позволили поставить вопрос о внесении изменений в классификацию рода brucella и, в частности, о придании этим штаммам самостоятельного статуса - нового биоварэ вида В. suis. Результаты исследований быяи налравлеьы в Подкомитет по таксоном/,и бруцелл ¡Международного комитета по таксономии бактерий, где после рассмотрения было принято решение о включении их в качестве б биовара вг^а В. suis в классифика ,ию рода бруцелл. 3 качестве референтного штамма 5 биовара по нашему предложению используется штамм В. suis Б13 выделенный от /тоновой мыши в 197Б году на территории Северо-Кавказского предгорного природного очага бруцеллеза.

Таким образом, результаты проведенных исследований позволяют утЕерчдать, что территория северных предгорий Большого Кавказа ь

района Терско-Сунженекого междуречья, характеризующаяся множественностью дандлэгтов, богатым видовым составом мышевидных грызунов с циркулирующем среди них возбудителем бруцеллёза, отличающемся от существующих биоваров бруцэдл, представляет собой автономный природный очаг бруцеллёза (Северо-Кавказский предгорный природный очаг бруцэллеаа). Находящийся в природе возбудитель бруцеллеза, самостоятельно существующий ' в организме мышевидных грызунов, способен к размножении и пассированию от одного животного к другому благодаря особенностям биологических свойств, тем самым поддерживая свои циркуляцию в популяции.

Систематические тесные внутривидовые контакты мышевидных гры-" зунов и частая -смена поколений создают условия для распространения инфекции и возможного вовлечения в эпизоотический процесс одомашненных и сельскохозяйственных животных, увеличивая эпидемическую опасности очага. ,

С о в в р з е н с г в с э а н л е лабораторной диагностики бруцеллеза.

При бруцеллёзе регистрируемая заболеваемость лодей не всегда полно и достаточно объективно характеризует эпидемиологическую и эгшоото.тогичеекую обстановку, поскольку в очаге инфекции нередки стертые, латентно дотекающие формы бруцеллёза, что ссздает видимость благополучия в хозяйствах. Изучение иммунологической структуры населения, свойств выделяемого ЕО<збудителя с использованием широкого набора лабораторных методов исследования в различных очагах (5руцолл?за даёт более полное представление об эпидемическом и гпкзоотическом процессе, а также воамогаость правильной оценки эффективности осуществляемых противсбруцеллезных мероприя-

ткй. Поэтому .цАльнэйгев совершекстзсвакие лабораторной диагностики бруцеллёза с.целью ускоренного выявления инфицированных и заболевших бруцеллёзом людей, характеристики давности еокрацзнля сроков выделения и дифференциации возбудителя, иисли-рованного из объектов, подозреваемых я качестве 'факторов передачи инфекции, приобретает важное значение при эпнаоо геологическом и эпидемиологическом обследовании очагов бруцеллёза.

При эпидемиологическом расследовании случаев возникновения бруцелл&за у людей, особэнчо в благополучных по бруцеллёзу хозяйствах, ваедо как можно раньше выявить источник чкф&кции, а также установить пути и факторы передачи.

С', этой. целью проводится отбор проб для лабораторного исследования объектов, подозреваемых в гачестве возможного источника или ф&ктора передачи возбудителя бруцеллезной инфекции.

Одним из наиболее чувствительных и специфических методов, примэнлоьых для индикации бруцелл, является метод ишунофлуорьс-центного анализа (ИФА), позволяющий обнаружить возбудителя бруцеллёза через 1-2 часа после начала исследования (Игнатьева, 1961; Уралева и соазт., 1-261; Чернышева и соаьт., 1965; Кагэзек, ^гзсЬ, 1963 к др.).

Методика флуоресцирующих антител позволяет идентифиц юьат^ бруцеллы в материале., содержащем вольере количество сопутствуящчх микробов, что не возможна при использовании других, методов.

О целью повышения чувствительности ИФА нами разработан способ индикации возбудителей особо опасных инфекций', еуцность которого сос.'оит в особенностях подготовки предмгтнл стекал, приготовлении и ф'1ксации мазке в ислольвуемых ной проведении '¿ТА.

После очистки и обезжиривания предметных стекол предложена их обработка антистатическим препаратом "Лана". Шсле подсыхания препарата в течение суток, на поверхность предметного стекла вместо капли фигиосогичэского растзора наносится тканевой гомогениэат, приготовленный путем эмульгирования ткани печени и селезенки белой мыши в дистиллированной воде в соотношении 1:11 - 1:22 с последующим двукратным центрифугированием в течение 15-20 мчнут при 6-3 тыс. об/мин и консервацией мзртиолатом -натрия в раввздешш 1:10000. Применение ткакеЕого гомогекизата с целью закрепления мазкоа на предметных стеклах позволяет проводить иммунофлуорес-центно« исследование катианогс- (нефиксированного) материала.

Результаты сравнительного изучения чувствительности ИФЛ известным и предлагаемым способами показали преимущество предлагаемого способа, позволяющего выявить 10000 KDE в 1 ш;. На способ оформлена заявка на -изобретение - "Способ индикации ocoûo опасных инфекций" и получено авторское свидетельство N 1565230.

йспс.цэование ИФА для выявления возбудителя бруцеллеза в пробах из продуктов животноводства, загрязненных посторонней микрофлорой и содержащих малую концентрацию возбудителя, показало сравнительно невысокую его эффективность (Гандшвин и соавт. ,1961; Барсков. 1961; Ьагина, 1959; Мэуег, 1965 и др. ). Поэтому при использовании метода проводят предварительное концентрирование бактерий в нагишом материале путем ^¿нтриадтировакия, фпльтрацш. чер¿в мемоъаьные фильтры, а также подращивание на питательных средах и в организме би^г.робных животных. Наиболее надемньь» способом подращивания палого количества бруцелл, находящихся ь материале, загрязненном посторонней микрофлорой, является г-араление

биопробных животных, генерализация -инфекции у которых достигает . максимального уровня к концу 30 суток у морских свинок и к концу 20 суток у белых мьшей (Вершилова, 1972'.

С целыэ сокращения сроков накопленгя бруцелл в организме биопробных тавотных для последующего их выязления в ИЗА, нами разработан новый способ постановки биологической пробы, сущность которого заключается в подкожном введении биопробнш животным в область спины исследуемого материала, предварительно смешанного с гепаринизированной кровью морской свинки и последующим добавлением к полученной смеси желтка куриного яйца, кортизона и сухого молока. Исследованию подвергают только место введения, к-зэкл-от-печатки которого фиксируют;по общепринятой методике, окрашивают флуоресцирующими иммуноглобулинами и подвергать люминесцентному микроскопическому исследованию. Добавление к исследуемой пробе желтка куриного, яйца, гепаринизированной крови морской свинки и кортизона создает оптимальные условия для локализованного размножения и накопления возбудителя бруцеллёза только ка месте введения, в результате чего отпадает необходимость в исследовании всех внутренних органо. биопробных животных, что сокращает обьем работы я ускоряет выдачу результатов исследования. Добавление к пробе сухого молока ускоряет качало роста бруцелл и усиливает их размножение, что сокращает сроки выявления Еозбудятеля. Подкожная инокуляция в области спи. . позволяет вводить исследуемый материал в значительных объемах (д- 3 мл.).

При использовании разработанного способа выявление зойбуди-теля возможно уже на 2-4 сутки с момента начала исследования, что на 4-5 суток раньше, чем при применении "тэвестного способа и иди-

кации.

На разработанный способ оформлена заявка на изобретение "Способ индикации возбудителя бруцеллеза", на которую получено положительное решение (К »2-006609/13 от 18 ноября 1992 года).

3 результате проведения'экспериментальных исследований, направленных на сокракэние времени проведения бактериологического анализа на бруцеллез, обеспечение условий, икижащих возможность контаминацгти проб материала, посторонней микрофлорой на этапах взятия, хранония и транспортировки исследуемого материала, нами предложены в качестве емкостей для проб, вместо используемых в практике лрсбкрок с ватно-марлевыми прсбкаки, стерильные флаконы, обьемоы в 10 мл,- с герметично гарктыми резиновыми пробками. Ксс-ледуемук кровс в количеств? 1,0 ял берут шприцем стерильно иэ вены и веодят во флаконы через предварительно обработанную спиртом резиновую пробку. Использование герметично егкрнгых флаконов позволяет исключить кэктеминацик; яроб кроак посторонней микрофлорой.

Использование предлагаемы* емкостей позволяет также наряду с сохранением стерильности, осуществлять безопасную транспортировку кров»*, не слагаясь нарушения целостности емкости и разбрызгивания подозрительного на зараженность возбудителем бруцеллеза исследуемого материала при неосторожных действиях сопровождающего лица.

Вместе с тем, ири нововможкостк быстрой доставки проб крови в стационарную бактериологическуюлабораторию, возникает необходимость более или менее длительного хранении флаконов с пробам крови. С целью изучения зогможности одновременного хранения » подращивания исследуемого материала, подозрительного в отношенш наличия в нем воаСудягелк бруцеллёза, нами пр&дло.тено добавляй

ьи флакон до автоклаяироваккя по Ь мл жидкой среди каког.'хнг.л возбудителя бруцеллеза. 2 качестве среди накоплении тми предложен бульон Хогтичгера, рй 7,0-7,?.'.

На основании результатов проведенных экспериментов по использованию герметично закрытых флаконов для хранения и транспортировки проб исследуемого на бруцеллез материала, а тзклэ по г.с-пользсваиип в качестве среды накопления для бруцеллезного микроба бульона Хоттингера, нами пред ложна питательная среда транспорт -нзя для выделения бруцэлл, жндчая. Предлагаемая среда представляет собой бульон Йэтткнгерз, разлиты"! по 5 мл во флаконы емкостью 1С мл, герметически укупоренные и проавтоклавировэнн'гае.

На среду составлена "Инструкция по иэготовленчи и контролю питательной среды для Еыращквэлия Сруцелл, жидкой", утвержденной директором СтавНИПЧИ 29. ОЭ. 1994 г

Экспериментальные серии транспортной питательной среды прошли лабораторные и полевые испытания в Ставропольском краевом центре санитарно-эпидемиологического надозорч и Кабардино-Балкарской противочумной станции. Результаты использования транспортной питательной среды при бактериологическом исследовании на бруцеллёз в этих учреждениях покааывакд' значительное (в 2-3 раза) увеличение высеваемости бруцэлл в сравнении с традиционным способом доставки исследуемого материала. Использование предложенной транспортной среды в практической работ? псззоляет исключить выезд сотрудника центра еря-зпиднадвора непоср?'цс*геекно к больному в отдаленные районы для взятия крови и осуществлять забор крови силаш сотрудников фельдшерски-акутерских пактов с последующ)?.} доставкой в отделы особо опаскых.-инфекцкй центров ГСО:1

Таччм образом, предлагаемая нами транспортная питательна!! сре^а для бруцелл позволяет сохранять словия стерильности на ртапах хранения и -ц. нспортировки проб крови га счет применения герметически ьакрьиых флаконов, а тагам? осуществить одновременное подращивание посевного материала при соответствующем температурном режиме (+37оС) и сроках подращиьанид (7-14 суток).

Положительные результаты апробации транспортной пптательноГ; среды явились оснозанием для и следований, направленных на совершенствование схемы проведения бактериологического анализа на бруцеллез. Предполагалось, что использование транспортной питательной среды позволяет в течение 3-10 суток осуществлять в ней под рыцкванпе исследуемого материнча при +37оС, исключить атап посева исследуемого материала по методу Кастанеда и осуществлять Еысев содержимого флакона с транспортной питательной средой непосредственно на чашки с плотней питательной средой.

Использование предлагаемой схемы бактериологического анализа кров к на бруцеллез, .иогЕоляит сократить сроки его проведения на 6-7 с;ток. Сокращэние сроков дифференциации возбудителя бруцеллеза приобретает ваэпкое значение в эпидемиологии бруцедлё&а б связи е ьвлекиег- киграьии вогСудителя вида гпе1иепз1з с мелкого рогатого скота нь другие виды Животных и, главным образом, на крупный рогатый дкот.

Яакт миграции, подтвержденный бактериологическим исследованием, имеет равное значение при эпидемиологическом расследовании, так. ках во многих случаях позволяет объяснить групповые заболевание и эьпдемичс'скиэ вспышки с тяжелым течением инфекции, характерные д.'<п ковье-свечьего бруцеллёза в хозяйствах крупного ро-

гатого скота. Будучи источником особо патогенного для людей вида

возбудителя бруцеллёза, крупный рогатый скот приобретает еще *

большее эпидемическое значение главньм оС азом потому, что молоко и мелочные продукты от .него имеют значите иго более широкое употребление, чем овечье и даже козье молоко. Миграции бруцелл с одного вида животных на другой способствует совместное содержание или совместный выпас различных видов животных, один из которых поражьн бруцеллёзом.

Выделение от людей культур бруцелл, не свойственных тому виду животных, на контакт с которыми указывает заболевали в эпидемиологическом анамнезе,' не всегда может быть принят как доказательство миграции. Достоверным доказательством миграции может быть лишь выделение культуры возбудителя у тавотных, ее последующая идентификация и дифференциация, как культуры возбудителя Сру- _ целлёза вида В. тэШег^з.

В настоящее время в соответствии с рекомендациями паду&жгв-та по таксономии рода бруцелл Международного комитета по таксономии бактерий ФА0/В03 для дифференциации бруцелл используется свыше 10 технически сложных тестов, на выполнение которых затрачивается от 3 до 7 суток.

С целью сокращения сроков проведении дифференциации возбудителя бруцеллёза нами проведены исследования, направленные на обоснование »««»шального вбера тестов, позволявших осуществлять межвидовую дифференциацию бруцелл в ьозможно более короткие сроки. Анализ литературных данные и собстзекных исслодоЕаки". по вопросам дифференциации возбудителей бруцеллеза коаголил выделить дв'- группы дифференциальных тесгоз, ¿он^ещЕЮщих в себе быстроту

получения результата и видовую специфичность. Это тест на .лизис бруцеллофагами i'6 (Тбилиси), Mb (Vey-bridge), Fi (Firenze), BKZ (Berkeley) и тест агглютинации моноспецифическими-сыворотками anti-abortus и anti-rralitensis.

Сравнительное изучение культур бруцелл, поступивших в лабораторию бруцеллёза Ставропольского НИПЧИ с 19Э7 по 19S3 гг. , с использованием всего набора дифференциальных тестов, рекомендованных Подкомитетом по таксономии рода бруцелл и Е-х тестов (лизис бгтцеллофагаш! и агглютинация моноспецифическими сыворотками) показало идентичные результаты по определению видовой принадлежности.

Вместе с тем, следует отметить, что агглгсгинабильность моноспецифпческими сывороткам не являете?: строго специфичным видовым признаком, так как представители различных биовароз одного вида, по разному агглютинируются этими сызоротками. Следующим этапом исследований явилось более детальное изучение спектра лити-ческэго действии бруце лофагов Тб, Vb, Е¥2 и F: на возбудителей бруцеллёза различных видов. Результаты проведенного исследования спектра льтлческого действия 4- х бруцеллоф&гоь показали, что для межродовой дч-Зференциации возбудителя бруцеллёза наиболее оптимальным является использование 2-х бруцеллофагов - Тб и БК2, позволяющее дифуеронцироиать возбудителей вкдоэ nwiitensis г. s^ts от вовбудк эля щда abortus.

Е результате анализа литературкьх данны;: было установлено, что ряд возбудителей особо опасных инфекций обладает адениндеза-м:тна<?нсй активностью и возможна их дифференциация по этому признаку (М=>йскгЛ, 1968). Ба.\.ч проведены исследования по адаптации

методики определения адениндеэамкназы у микроорганизмов, предложенной В. Г. ).'лйскин ( 1S88) дат изучения возбудителя бруцеллеза. Данная методика, основанная на качественном определении иаллчня аммиака, обрззуйг.ог^ся в результате дезамшшровашп адзнина до гипоксантша микробными клетками, позволяет проводить учет результатов визуально, по изменению окраски. Проведенное изучение наличия адениндеэашшаэкоД активности у различных представителей рода бруцелл показало, что возбудители бруцеллёза различных бпс-вароп видов В. abcrtus и 8. nvelitensis не обладают адени.чдезаминаэ-ной активность», в то время как возбудитель бруцеллеза вида В. suis чькой актииностью обладает.

Ка основании результатов проведенных исследований по изучению спектра литкческогз действия бруцеллофагов и адениндеэаминаз-кой активности у различных представителей рода бруцелл, на».«! предложено применять длл быстрой дифференциации возбудителей бруцеллеза, имею^.х важное эпидемиологическое значение, два теста: лизис бруцеллофагэмн TÛ и БК2 и определение аденг.нде&ашмазной активности. " ...

Дифференциация возбудителей бруцеллёза, находлгцихея в коллекции патогенных микроорганизмов СтаийПЧИ и относя^исч к. вида;.! В. abortus (24 штамма) В. melitonsis (42 тачма), В. suis (J9 итяь.-. мов), ¿¡¿деленных в различных. очагах бруцеллез"., проведенная по предлнгаекь-ч тестчм, понл-алз, что все возбудители бз-цел^за ви-доз В. abortus к 3. iftîlit«>nsts не обладают эдеч;пгдэзам1'Н^8лок активностью, а возбудитель бруцеллеза вида В. suis такой екшвьосгьь обладает. Бруцеллофчг 76 лидировал все культуры ендг, £. abortus и не лизировал вскбудитэлеа ор/целлэз?. видов В. ¡relit^nsis и P. suie.

Бруцеллофаг ЕК2 лизировзл Еозбудителей бруцеллеза всех 3-х видоь.

Таким образом, в результате проведенных исследований, нами предложено испопьзоветь для межвидовой дифференциации возбудителей два теста, выполняемых параллельно: выявление лизабельности культур бруцелл Зруцеллофагами Тб и ВК2 и определение адениндеза-миназной активности. Использование предложенных тестов позволяет сократить сроки дифференциации выделяемой культуры возбудителя с 6 до 2 суток.

В очагах бруцеллеза, как правило, кроме лиц, у которых развилось манифестное зайолеваяке, есть и такие', у которых инфекционный процесс протекает в суб!ишнической форме. Склонность бруцеллёзной инфекции к хроническому рецидивирующему течению приводит к тому, что больные не обращаются за. лечебной помощью сразу после начала болезни и диагноз ставится спустя длительное время при обращении к врачу в момент рецидивов. Такие больные попадают в число хронических больных,, а очаги бруцеллёза, где эти эаболе-аанил возникают, остаются длительное время нераспознанными.

В этой свяак Еажнае а пи де миолог ичес ;оте значение приобретают данные лабораторных.методов исследования, позволяющие выявить инфицированных людей, не обращавшихся за медицинской помощью. Однако судить о сроках возникновения заболевания бывает крайне затруднительно, так как чаете при сборе эпидемиологического анамнеза у заболевшего не всегда возможно выявить время контакте с больными сельскохозяйственными животными и инфицированными продуктами >м:вотно.водствэ, как ь быту, так и в процессе профессиональной дея-"."ельнрети.

С целыз установления ериентировочных сроков инфицирования

возбудителем бруцеллёза на основе данных серологических, аллергических и цитоэнзимохшмчэсглх показателей крепи, наш проведены эксперименты на модели морской свинки. Результаты проведенных исследований показали, что положительные результаты реакций Хед-дельсона, Райта и РНГА, а также повышенная активность щелочной фосфатаэн и катионных белков при отрицательных показателях еллер-гической пробы Бюрне свидетельствуют о случаях раннего развития инфекционного' .процесса и недавнего инфицирования (2-3 недели). Положительная проба Бюрне и положительные серологические реакции на фоне снижения показателей активности щелочной фосфзтазч и катионных белков свидетельствуют о развитии икфе!щионного бруцеллёзного процесса и переходе его в хроническую фару. Таким сбраэом определённое сочетание показателей отдельных диагностических ре-акгдй может быть использовано при определении давности инфицирования Еозбудителе.м бруцеллёза в активных или скрытых очагах бруцеллеза.

Сочетания указанных показателей нами рекомендуется использовать при проведении иммунологического обследования, населения, занятого в сельскохозяйственном производстве. Результаты серологических, аллергических и цитоэнзимохимических реакций, полученные :ри обследовании населения на бруцеллёз, имеют не только диагностическое значение, позволяющее судить о фаге течения бруцеллёзной инфекции, но и зпидемис югическое значение, так как позволяют вскрыть очаги бруцеллёзной инфекции, в частности, в тех слу1аях, -югяа клинические проявления заболевания оказываются слабо рырн--кекными и инфэкция может был- нераспознанной.

Применение цитоэнзимохимических методов ксиледоьаым при

бруцеллезе требует использования методических приемов, гарантирующих надежное обеззараживание мазков крови в соответствующих фиксирующих жидкости:-:, применяемых в цитохимической практике. Нами были проведены исследования по изучению обезэараживающэго действия некоторых фиксатороч на возбудителя бруцеллёза в мазках крови в различных экспозициях на модели морской свинки. В результате проведенных опытов установлено, что обеззараживающим действием на бруцедлбэниЛ микроб обладает лишь 10 7. раствор формалина на метиловом сьирте в экспозиции 30 секунд. Полученные результаты позволяют рекомендовать 10 % раствор формалина на метиловом спирте к применению при проведении цитознзимохимических реакций как в научных, так к практических учреждениях, занимающихся изучением различных аспектов патогенеза бруцеллеза. Разработанные нами методические приемы, гарантирующие безопасность обращения с катив-ным материалом, инфицированным возбудителем Срууцеллеаа с указанием сроков фиксации и одновременного обеззараживания; подробно изложены в "Инструкции по первичной обработке материала, зараженного или подозрительного на зараженность возбудителями ч/мы, холеры, бруцеллеза и сибирской язвы при проведении гистоцитознзимо-'.мических исследований" (Ставрополь, 1987), являщейся дополнением к действующим Санитарным правилам СП 1.2.011-91 "Безопасность работы с микроорганизмами 1-11 групп I :тогенности" (М^гква, 1994).

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что заболеваемость ладей с впервые диагностированным бруцеллёзом в вгминистративных территориях Северного Кавказа за пер"')д с 1-97 по 1993 годы не имеет стойкой тенденции к снижению и составляет свыше 30 7. всех заболевших в Российской Федерации.

2. Выявлены эпидемиологические особенности бруцеллёза в регионе Северного Кавказа. К ним относятся: преобладание роли мелкого рогатого скота, как источника бруцеллёзной инфекции для людей; рост уровчя групповых заболеваний людей, обусловленных контактным заражением з активных очагах бруцеллёза мелкого рогатого скота и смешанных хозяйствах; увеличение в общей структуре заболеваемости бруцеллёзом доли сельского населения, занятого в индивидуальном секторе животпводства, и лиц, временно привлекаемых к работе в животноводстве.

3. Установлено, что наивысдий уровень заболеваемости бруцеллёзом в регионе Северного Кавказа регистрируемся в Ставропольском крае, что обусловлено нарастанием активности эпизоотического процесса среди мелкого рогатого скота в животноводческих хозяйствах общественного и личного поголоеья, расширением зоны эпизоотического неблагополучия га счет взноса инфекции с сопредельных терри-•торий, несвоевременностью выявления заболевших животных и проведения противоэпизоотийных мероприятий.

4. Установлено, что головное значение в заболеваемости бруцеллёзом в Ставропольском крае имеет контактный путь заражения (свыше 90 X из числе, всех заболевших). Выявлена выраженная весенне-летняя сезонность заболеваемости бруцеллезом е крае, при кото-

- БО -

.port свыше 60 X. всех случаев заболеваний регистрируется в период с марта по нюнь.

Е. Олтимиэировг-' комплекс мероприятий по проведению апигоо-тологнческого и эпидемиологического обследования очагов бруцеллеза: предложены схемы и ¿тапность их обследования.

В. Научно обосновано и практически доказано существование л 1родного очага бруцеллёза на Северном Кавказе - (Северо-Кавказский предгорный природный очаг бруцеллёза), территория которого составляет 3500 км2 и включает сопредельные районы Северо-Осе-тинской, КабардилО-Балкар. юй, Чеченской и Ингушской республик. Составлен паспорт очага, карта мест выделения возбудителя, дана ландшафтно-геогрвфическая характеристика территории.

7. Еперьые предложен для внесения в классификацию рода бру-целл дополнительный самостоятельный биовар вида В. suis, циркулирующей среди мышевидных грызунов на территории Северо-Кавказского природного очага. Референтным штаммом нового биовара определен штамм В. suis 513, выделенный от домовой мыши в 1975 году, .

8. Установлено, что Северо-Кавказский природный очаг бруцеллеза поддерживается циркуляцией возбудителя среди мышевидных грызунов - основных носителей инфекции, относящихся к 5 вккам: обыкновенная полевка, полевая, лесная, домовая мыши, мышь-малютка.

9. Разработаны, апробированы и рекомендованы для использования в работе практических учреждений системы санэпиднадзора Северного Кавказа:

г транспортная питательная среда для выделения возбудителя бруцеллёза из кровет больных и лиц, подозрительных на заболевание бруцеллезом, применение ког рей способствует ускорению выявления

юзбудителя за счет соЕмеп^ния этапов транспортировки и подращи-

(ания исследуемого материала; *

- схема бактериологического анализа и методы индикации и ¡ифф^ренциацки возбудителя бруцеллёза, позволяющие существенно ¡ократить срок выдачи окончательного результата исследования до 5-6 ауток. .

10. Научно обоснована и экспериментально подтверждена целе-¡ообразность использования в комплексной оероаллергяческой диаг-юстике бруцеллёза у людей цитоэнгимохимических показателей (пр-ючнач и кислая фосфат азы, . катиовные белки, миелоперо!ссидаза), определяемых в крови для уточнения фазы течения бруцеллёзной инфекции.

- 52 -СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лямкин Г. IL , Тихенко. Н. И., Воскресенский А.Е. Характерис тика возбудителей бруцеллёза, выделяемых в очагах Кавказа //Со] ременные проблемы зооноэных инфекций: Всесоюз. мекдуведометзеш конф. (Симферополь, 28-29 мая 1971 г.): Тез. докл. - М. ,1981. С. 99-100.

2. Таран II О., Лямкин Г. И. Современнее состояние системати Еозбудиуе/. й бруцеллёзной инфекции // Там те. - С. 92-93.

3. Лямкин Г. И., Таран И. Ф., Ткхенко II И. Изучение штамм бруцелл, вьщеленных от мышевидных грызунов,, на территории севе ных предгорий Большого Кавказа //Болезни с природной очаговост на Кавказе: Teai докл. краевой науч. конф. , посбяц. 60-летив обр зования СССР. - Ставрополь, 1992. - 0.9 5-97.

4. Ткхенко Н. И. , Таран И. Ф., Лямкин Г. IL К изучению мехаш мов -циркуляции возбудителя бруцеллёза среди мышевидных грызл //Там же. - С. 136-137.

5. Афанасьев Е. Е ., Ляыкин Г. И. Белковые спектры бруцелл i видовые признаки //Тач же. - С. 7.

6. Таран И.Ф., Банша В.М., Лямк/н Г. Ж., Цыбин Б. Е , Тихе: в Л Сравнит льное изучение спектра литического. действия бакте сфзгов ' ¿6, Wb, Fi, БК2 и R на различные виды рода bruce //ЖШ. - 1933. - N 2. -С. 43-52.

7. Лямкин Г. II, Тюмонцева К. С., Афанасьев Е. Е Таксономич пеложние и экология возбудителя бруцеллёз а, выделяемого

мышевидных грызунов в районах северных предгорий Большого Kai и а. Сообщение I. Кулътуральныэ и биохимические свойства бруце

выделенных от каплевидных грызунов //К2Ш. •• 1993. - N 6. 3. 30-33.

8. Ля1лскн Г. И., Таран Г1Ф. , Сафронова а М. , Тихенко К. Я. , Ширанович М П. Таксономическое положение к а гало г ия возбудителя бруцеллёза, выделяемого от мышевидных грызунов в районах северных предгорий Большого Кавказ?.. Сообщение- II. Экологические и патогенетические особенности штаммов бруцелл, выделяемых от мышевидных грызунов //ЗШЗИ. - 1983. - N ?.. - С. 31-34.

9. Дегтярева С. Н. , Афанасьев Е. Н., Лямкин Г. И. Нейраминидаз-нэя активность у представителей рода ВгисеПа //Профилактика при-родксючагоэых инфекции: Тез. докл. Всесоюз. науч.. практ. конф. 6-8 декабря 1983 г. - Ставрополь, 1983. - С. 287-288.

10. Афанасьев Е. II , Тюменцева И. С., Таран ¡1 Ф., Лямхин Г. 11 Изучение белкового спектра и антигенной структуры бруцелл, ' выделенных в различных очагах Кавказа //Современные аспекты профилактики зоонозных .шфекции: Тез. дскл. к Всесовд. науч. кснф. специалистов противочумн. учр. Ч. II.' - Иркутск, .1984. - С. 35-95.

11. Сафронова В. М., Локтев К.'А., Борисов - II В., Ширанович М. Е , Иванова В. 0., Басилова Г. И. , Некрасов А. А., Лямкин Г. И., Проскурина В. А., Чернов В. С. Изучение абеззараливашрго действия некоторых фиксаторов на возбудителей туляремии, бруцеллеза, си, бирс кой яобы в мазках крова. - Ставрополь, 1985. - 6 с. - Деп. в ЕИНИТИ 30.01.85. , N901-85.

12. Йданова Е. Б., Цыганкова р, Ё. , Ллмкин Г. И; К изучению аи-тнбиотикоусгойчльости и усвоения экзогенных предшественников нуклеиновых кислот штаммами бруцелл, выделенными от мьагезидных грызунов в Предкавказье //Особо. опасные- инфекции ка '/лвчаае:

Тез. докг. б-й Краевой науч. конф., посвящ. 70-леткю Великой Октябрьской соц. революции, (деекабрь, 1987 .). - Ставрополь, 1987. - С. 231-232.

13. Лямнин Г: И., Таран И. 4., Афанасьев Е. Н., Тюменцева И. С. Свойства и таксономическое положение штаммов бруцелл, взделенньв от ш^видных грызунов на Кавказе //Особо опасные инфекции не К зкав-^: Тез. докл. к 6-й Краевой науч. конф., посвящ. 70-летию Великой Октябрьской соц. революц!!,:, (декабрь, !987 г.). - Ставрополь, 1987..- С.236-237.

14. Цыганкова Р. Е., клйский Е Г., Захарченко Л Д., Ляыкш Г. И., Ляпустияа Л. Е Возможные пути утилизации пуриновых пред шествевников .нуклеиновых кислот у некоторых видов бруцелл. -Ставрополь, 1988. - 7 с. - Деп. в ЕИНИТИ 29.06.89, N Б206-В 88.

15." Цыганкова К Е., Майский В. Г. , Захарченко Л. Д., Ляыкии Г. И., Ляпустина Л. Е Штаба лмм урацнла и уридина у бруцелл. -Ставрополь, 1983. - 8 с. - Деп. в ВИНИТИ 09'. 08.89, N 6427- В 88.

16. Лямкш Г.И.., Щедрин Б. И. Прогностическое значение некоторых показателе^ кроаи лабораторных животных при экспериментальном бруцеллезе //Эпидемиол., микробкол!, иымунсбиол. вирусных инфекций: Теэ.докл. областной науч. конф. молодых ученых. V17-20 'октября 1989 г.) - Ростов-на-Дону, 1Э89. - С. 126-127.

17. Ллмкин Г. Л , Щедрин Е И. Изучение некоторых биохимических показателей крови при экспериментальном бруцеллезе //Актуальные вопросы профилактики бруцеллёза и организации медицинской помощи Сольным: Гез. докл. Всесоюэ. коьф. (Новосибирск, 24-25 октября 1939.г.) . - и., 1989. - С. 114-116.

18. Щедрин ЕИ., Лямк/ш Г. И., Зарубин В. Е Способ индикации

возбудителей особо опасных инфекций ^/Актуальные вопросы эпидемиологии, профилактики и диагностики особо огасных инфекций: Тез.докл. итоговой конф. (21-22 декабря 1989 г.). - Ч. II. - Ставрополь, 1959. - С. 149-161.

19. Лямкин Г. И. Сравнительна! оценка питательных сред, используемых для выделения гемэкультур Сруцелл //Современные аспекты профилактики гооноакых инфекций: Тез. докл. науч. кокф. - Ставрополь, 1391. - С. 39.

20. Лямкин Г. И., Таран И. Ф. Состояние к перспективы изучения Зеверо-Кавказского природного очага бруцеллеза //Там же.

41-42.

21. Лямкин Г. И. , Щедрин Е И. К возможности использования некоторых показателей неспецифической' резистентности для контроля эффективности антибиотикотерапии экспериментального бруцеллёза '/Там же. - С. 39-41.

22. Лямкин" Г. И. , Таран И. Ф. . Щедрин 3. И. Состояние и перспективы изучения Северо-Кавказского природного очагг. бруцеллеза.

■ Ставрополь, 1991. - 12 с. - Еиблиогр: 22 назз. - Деп. в ВИНИТИ )5. 12.91, N 4499-Е91.

23. Лямкин Г. И. , 1зран И.О. , Майский В.Г. , Цыганкова Р. 2. , Щедрин В. И. Изучение адениидеззмкнаэной активнсстн Сруцелл, цир-■:улируг*"нх в популяциях грызу в '/Генетта, и биохимия вирулект-гаста возбудителей оссРо опасны;: инфекций: Тез.докл. (Волгоград, ¡1-22 октября 1592 г.). - Волгоград, 1932. - С. 110.

24. Лл!,г-г!:я Г. И. , .Таран И. Ф. , Юндин.Е. В. , Щедо;:н. В. ',1 Транспортная х:т?.тельнз» среда для Сруцелл //?^зр»5откз. и прскээодстза :реларыгов медицинской биотехнологии: Тег. конф. - !,1ахачкала. 1а'г2.

■ С. 43-44.

£5. Лямкга Г. К., Т£раз И. 0?. , Шэдрмн Б. И. Природная очаго-еость бруиелд-'ээ (обзор литературы) - Ставрополь," 1933. - 14 с. -Геи. в КЮ1ТИ 12.03.93 Г. , М Б85-ВЗЗ.

26. Л'угаш Г. К., Щедрин Е И., Ьолохоьа И. А. К возможноси: ислольвсганш 1 а-гое- неимохгоодчес ких показателей крови для характеристики Ьр.-гц&ллеэкого инфекционного процесса в эксперименте /7.4м-мукнлогия и специфическая • профплактнкз особо опасных инфекций: }'лте?г.аль: Розскйсяог науч..конф. (21-23 сентября 1993 г.) - Оара-тсв, 1923. - С. £26- 227.

27. Лямкнн Г. У., Таран И. О. К вопросу о тактика апчзооголо го-эичдэмиологического обследования очагов бруцеллеза //Соврекен пые аспекты природной очаговости, апидешолопш и прэфилактик особо опасных инфекционных болезней: "ее. докл. науч. конф. (Омск октябрь. 1СЫЗ I.) - Ставрополь, 1393, - С.79-80.

'¿3. Лямккн Г. И., Тарасов М. П., Таран И. Ф. К типизации пр! р0цчк>: очагор бруцеллеза /7 Там же. - С. 77-78.

29. Лямгсин Г. И. , В&дрнк В. И. , Таран И. & Способ индикэц! возбудителя бруцеллёза //Тыл же. - С. 231-232.

30. Таран II. Ф., Еааиков И. А., Лямага Г. Я..,' Дальзадякц Е : Соьременг.ое состояние заболеваемости оруцеллё'гом людей в зоне О верного Кавказа //Там же. - С. 144-146.

31. .М, Таран УН., ЛяпустккаЛ. В, , Дзльвадя Е. , Дуказина Л. М. Современное состояние 5пиде\аотлсга; бруцелл га не. Северном Кавказе '/Материала науч. конф. по проблемам зс кознь:.' к других инфекционных Селезней. Ставрополь, 23 мая, 199,' - Стасроподь, 1294. - С. 53. - Деп. в БШТЯ 19.09.24., N 221 <