Автореферат и диссертация по медицине (14.00.20) на тему:Биотестирование в системе оценки и контроля источников токсического загрязнения водной среды

АВТОРЕФЕРАТ
Биотестирование в системе оценки и контроля источников токсического загрязнения водной среды - тема автореферата по медицине
Крайникова, Алла Николаевна Купавна 1991 г.
Ученая степень
доктора биологических наук
ВАК РФ
14.00.20
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Биотестирование в системе оценки и контроля источников токсического загрязнения водной среды

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ПО БЕЗОПАСНОСТИ

биологически активных взкрстз

КРАСИКОВА АЛЛА НИКОЛАЕВНА.

ЕЮТЕСТИРОБ1НИЕ В СИСТЕМЕ ОЦЕНКИ И КОНТРОЛЯ исгочшвдоз ТОКСИЧЕСКОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ВОДНОЙ

среди

14.00.20 - гоясикология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

На прадах рукописи

Дупавна 1991 г.

/

Работа выполнена, во Всесоюзной научно-исследовательском институте по охране эод (БЯ1ИВ0)

Научный консультант - доктор биологических наук, профессо Л.П.Брагинский

Официальные - докгор медицинских наук, профессор

оппоненты: Г.Н.Красовский;

докгор биологических наук, проЛессо С.А.Патин;

докгор медицинских наук, Г.И.Рожнов.

Ведупее учреждение - Институт биологии внутренних вод АН

Запита состоится 1992 г. в 7Р часов

заседании специализированного Совета Д 098.01.02 при Всес научного-центре по безопасности биологически активных в^ае адресу: 142450, Московская обл., Ногинский р-н, пос. Стар Купавка, ул. Кирова, 23.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке БНЦ БАВ

Автореферат разослан 1991 г.

Учений секретарь специализированного Совета, кандидат биологических наук

Т.Н.Робакид

j ОоЩАЯ 2АРШЕРИСГШ РАБОГН

r з

5

; Актуальность тоблет/ы. Ояггсй яз ваашьгх залач в области охраны окруасагасй среда является разработка эфЬекгивнык методов оценки антропогенного воздействия на гидросферу с целью ограничения ее токсического загрязнения и обеспетекгя нормального '.*уш:-циокиравгния ваяниг биоценозов. Экосистема водного объекта нв «ктег рас еда гривагься изолированно, вне сеязи с пловадьв водосбора СКамЕШГов, 1979}» иоэгму формирование качества зода, со-ответеявувшего гребойанилм .разяжчнас видов водопользования, существенна зависят от состава и свойств сточных вод, постуг.ггпж в водные объекты.

До последнего Ервиевя в иашеХ стране система контрогк и коп-мгрсезнкя гвгрязиеядас водной среда с точка® водами базировалась яа слрзяагснзя содершгам стдегышх веществ в сравнении получении* зкачшшй с предельно доцргяаоии кищенградаяя! (ПДК).

Имеете с тем иэввегяо, что бодьшясегво сточных вод гсредегзр-лены сложным ксашпексом хкмгческте веяесгв, которые взаимодействуя аезду собой, oöpaavri новые соединения, токсичность которых асасет отличаться о? исходных эепгств, рад как интегральная гок-сядаоегь сточной воды - а го особый качественный уровень взаимодействия зеовсгв между собой я их взаимосвязанного возиействия на организм, вжявчамяего кивергкзи, антагонизм, образование ме-табашгоя и. т.д. В этой езязн существенный недостатком гистеж генгрояя качке ras зады является невозможность учета всего многообразия токсяческпс ветеетв, прясугствутагос и постудивши с котике объект, их дагегрироваяного отрицательного воздеПствия к".; пгдробяоятсв. Иютно это обстоятельство обусловило явойхолк-.'огг.-разработки Сиотеспгроваякя как метода определения токсически:' сбойсгв вздыло ответным решпвшг тест-ортанжогав.

Анализ применение Сяогеггог в водоохранной практике покапал, что за рубежом пряемы биотеетировашя достаточно oineit тлено попользуется в мониторинге природных: и сточных зод. В яазе? стране: исследования по яаяноз цвоблеае начадя интенсквно проводиться г 70-е гезз, когда ййотеегкрояакяе офостгалось в одно из недузк г-ыггткеггтсг! водной тоггодколсгиЕ. Оеновололагавпизд f .эта.1 aös^r-

ти науки яшгйюгся работы огечественных токсикологов: Л.П.Бра гикгкого, Е.А.Весслова, ЛАЛесниноза, В.Й.Яукьякенко, С.А.П тина, Н.С.Строганова, Б.А.йяерова я др. Нзсмогря на очевидну целесообразность, применение биотестов в системе оценки каче ва воды в налей стране сдерживалось а основном из-за нераэра ганносги методологии использования бисгестирсвания в практик охраны еод. сг токсических аагрязкяизиж вепестз. отсутствия е методического к нормативного обеспечения,

В снязи с этим в 2СЛ0ЕИЯХ все возраставшего отрицательн антропогенного воздействия на гидросферу, распкрения кочгшне кого состава отводиишс в водные объекта сточных вод соверпен «з о Банке системы оценки их биологической опасности путем орда ни я бг.от эстярованЕя является ваяной актуальной научной задач .Цель и задачи исследований. Цельи работы было нсследова реакция водных организмов на токсические воздействия, научна обоснование и разработка рядд методологических, биотежнологи кях релений и норматквно-мегодическга документов, обеспечива применение биогестирования в система кзнтроля. качества волы, как метода оценки ее токсических свойств и биологической без сности.

В соответствии о поставленной целью были сформулирована решены ряд конкретных научных я практических задач:

разработка новых и совершенствование суаествуших мегол устройств биотеекгровакия для текущего и оперативного токсин гкчеемгэ контроля источников загрязнения видные экосистем;

обоснование к разработка концепции комплексной гокежол ческой оценки сточных и природных вод, как обязательного зле та в системе кенгроля качества воды;

определение критериев подбора биотестов для оценки токе но с г и еоды я разработка рекомендация по их применению в токе логическом контроле различных категорий сточных вод;

разработка методического и нормативного обеспечения бис тярованЕя, определение нсркатисгадс требований к качеству «оз по тсксикаюгаче скотчу показатели;

гграктаческая реализация результатов исследовании, я ваниг перечня первоочередных объектов, псоиеяагшх токсиколог кс-цу контроле..

Научная новизна работы. В диссертации сделано обобщение [ставленных в отечественных и зарубежных цубликациях георогл-:их положений и методических приемов в области биогесгирова-водной среды, на основе которых разработаны новые методоло-ские, биотехнологяческяе и методические решения, созданы ативно-правовыэ основы, обеспечиваюпие применение биогестиро-я в системе контроля качества водной среды. В . рамках диссертационной'работы впервые разработаны и выно-я на зашту:

методология использования бмотестирования для комплексной икологическоЛ оценки источников загрязнения водных объектов, обязательного элемента системы контроля качества воды; методы биотестировагат, основанные на использовании реакций обионтов (дас^гй, моллюсков и рыб), предназначенные для ресс-оцешш источников токсического загрязнения водных эко-ея и нелреравного контроля токсичности сточных вод; комплекс методических и нормативных документов, обзепечив-пряменение биогестированля в водоохранной практике. Практическое значение я внедрение результатов работы. В эссе выполнения работы была получены следующие практические вьгагы:

Разработаны пнструцснтадьныэ методы и устройства биотесги-«яя (биосягнализаторы токсичности) для непрерывного гоксико-ческого контроля с гофпас вор на выцусхах в водные объекты с о предотвращения.аварийных и иных залповых сбросов. Биослг-заторы испытаны и внедрены на раде (свше 10) промышленных ктов;

Разработан модифицированный метод и портативное устройство -эесс-индякатор острой токсичности (ЭИТ), предназначенный -ля пивной. токсикологической оценки (паспортизации) источников танения йозшкх объектов. ЭИТ пропел эксплуатационные испига-з различных регкоюх и используется в практической работе эолйрувших лабораторий;

Обоснованы области применения биотестов в токсикологическом золе сточных вод различных отраслей про:¡ыаленности, состав-иняированныЯ перечень источников загрязнения водных объек-подлехаших первоочередному токсикологическому контролю;

Сформулированы нормативные требования к качеству сточн природной воды по токсикологическое показатели;

Разработан ряд методических руководств и нормативных д ментов, юридически обосновывающих включение биотестирования систем контроля качества воды. Нормативно-методические док ты используются специалистам: республиканских и территории ко:.итетов по охране природа, а также других ведомств, о суше ляюяюс контроль качества воды.

Выполненные разработки осуществлены впервые, они завис авторскими свидетельствами СССР и хозяйственными патентами ганки, Чехословакии и Болгарии.

Результаты диссертационной работы использованы для coi шенствования Государственной системы контроля качества вод! выпения ее информативности, эффективности и усиления эколо! кой направленности. Социальный и экономический эффект при i зевании биогестирования в водоохранной практике выражается предотвращении ушерба народному хозяйству, наносимого nocti ш и залповыми загрязнениями водных объектов токсичными en водами. Одмарный народнохозяйственный эффект от внедрения зультатов исследований, подтвераденный документально, сост! 1805 тыс.р.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались Международном, 112 Всеамериканском конгрессе ассоциации ры хозяйства (США, да. Ю.Каролина, IS32); симпозиуме.специали стран-членов СЭВ "Создание л совершенствование авгоматизир fan систем контроля, управления качеством вод, исследовани внутренних и внеанах связей" (СССР, Карьков,- 1984); симпоз специалистов стран-членов СЭВ "Комплексные методы контроля сгва природной среды" (СССР, М., 1986); О Всесоюзной конфе по водной токсикологии (Петрозаводск, 1975); У Всесоюзной не:! симпозиуме по современны« методам самоочипзния и регул ния качества зоды (Таллинн, 1975); Всесоюзной конференции ка и классификации качества поверхностных воддля'водополь ния" (Харьков, 1979); Всесоюзной научно-технической' конфе^ А ¡'НОС (¡Сасань, 1979); Всесоюзной конференции "Разработка у рение авгоматизироваишк систем управления водоохранными í

лми" (Харьков, 1981); 1У съезде Всесоюзного гидробиологического бсесгва (Киев, 1981); Всесоюзном симпозиуме "Теоретические особы биотестирования" (Борок, 1981); Всесоюзном симпозиуме "05-боенные показатели качества вод-83". Практические вопроси био-естирования и биоиндикации (Черноголовка, 1983); 1У ВсесоазноЯ отференции по водной токсикологии (Рига, 1983); Всесоюзно» кон-еренции "Проблемы охраны природы" (БаЯкальск, 1984); 1У Вое-оюзном лимнологическом совегадаи "Круговорот весесгва и энергии водоемах" (Листвеяичное-на-Байкале, 1985); УП Всесоюзно.1! сим-ээиуме по современным проблемам прогнозирования и контроля ка-эства воды водосмоз и озонирования" {Таллинн, 1985); У съезде зесоюзного гидробиологического общества (Куйбьпев, 1985); Все-зюэной конференции "Бнопвдикация и биогестяровакле природных эд" (Ростов-на-Дону, 1986); У Всесоюзном со в солки по санигар-зй гидробиологии (IL, 1986) ; I Всесоюзной конференции "Актуаль-je проблемы современной альгологии" (Черкассы, 1987); I Все-зюзном симпозиуме по методам ихтиотоксикологическкх исслеяова-!й (Л., 1987); У Всесоюзной конференции по водной токсикология >десса, 1988); П Всесоюзной школе по экологической химии водкой >еды (Ереван, 1988); Всесоюзном семинаре "Состояние разработки внедрения автоматических средств контроля за качеством природ-tx и сточных вод (Харьков, 1978); Всесоюзном семинаре "Опыт игорного ИСПОЛЬЗОВанИЯ вод в промышленное водоснабяении" (Баку, '80); Всесоюзном семинаре "Аналитическая химия природных и сточ-х вод" СМ., 1981); Всесоюзном семинаре "Обезвреживание отходов хшческюс производств с использованием биологических систем" еркассы, 1987) ; У Республиканской конференции Украинского дробиологического обсесгва (Одесса, 1987); I ВсесотноЯ кондиции по рыбохозяйстэенной токсикология (Рига, 1988); Всесоаз-м совеиании "Применение биотестирования в реаения экологнч«. J-х проблем" (Л., 1989); Всесоюзной конференции "Методология алогического нормирования" (Харьков, 1990); Международном сим-зчуме "Проблемы токсикологии и прикладной экологии" (М.-Яер.тъ, 91).

Публикации. Основные результаты и положения диссертации из-кены в 98 опубликованных работах, включзших 9 авторских сви-

дегельств. Под редакцией автора вышли в свет "Методы биотестир еония вод" (Черноголовка, 1988) и РД 118-02-90. Методическое руководство по б ¡«тестированию воды ('.!., 1991). В публикациях паяли отражение основные научные результаты, полученные лично автором, а также материалы экспериментальных исследований, выполненной под руководством ангора сотрудниками лаборатории био логических исследований ВНИИВО.

Автор выражает глубокую признательность всем коллегам, ок завшим пометь в подготовке работы.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 319 стр ницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, закл чения, выводов, списка литературы, включающего 480 источников, в том числе 148 иностранных, и приложения на 202 страницах. Ра бога иллюстрирована 36 рисунками и 28 таблицами.

В приложении приведены данные о частоте лимитирования рыб хозяйственных ПДп загрязняющих вешеств, содержащихся в сточных водах, различными гест-организмами; рекомендуемые наборы биоте гов для определения токсичности сточных вод основных отраслей промышленности; перечень источников экстре."ально высокого загр ненкк токсически:«! веществами водных бассейнов; сведения о вне, рении результатов по теме диссертационной работы.

В диссертации подведены итоги многолетних исследований автора, выполненных во ВНИИЗО в период с 1977 по 1992 г.г. по задании ПОТ СССР (постановления }} 207 от II мая 1977 г. и № 4 от 30 ноября 1931 г.) к заказам Минприроды СССР. Всего было вы полнено более двадцати госбюджетных и хоздоговорных научно-исследовательских работ, непосредственно связан.чых с темой диссе гации.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ПРОЕЯК.й Е10ТЕСГЛР0&1КИЯ ВОД И ЕЕ СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ

Б настоящей главе дана характеристика источников токсичес кого загрязнения гидросфера, к которни относятся пра-амленные, у.о^.'у.'лл^!ю-С:.!Т0Епе, сельскохозяйственные сточные води и повер: ностн'.::*: г.-.-ок. Приведены сселения об объемах сбросов сточных по, в тс:.- "."ело загрязненных, и соаше бассейны страны. Проанашзи

на ¿¡¡утскцкоюфуидая систем контроля качества воды и показана ходимость ее совервенствования пугс:.; дополнения лепользуе.'злх дов анализа сточных и природных вод биотесгированизм. С-боб-I и систематизированы эарубеянке и отечественные литературные .не по вопросам теории бяогестированмя, разработки методик : использования в прантике контроля качества воды. Определены яективные направления, задачи и подходы, выгекаклие из сов-итого состояния пробюзд. •

ОБЪЕКТЫ И МЕТОД! ИССВДОВШЯ

Биологическими объектам:! являлись тест-арганизш, сироко «еняемые з еодной токсикологии и легко культивируема при сс--ан:ш в лабораторных условиях; в качестве токсических Еешестз I использованы отдельные химические велества, относящиеся к 5олее опасным и часто встречающимся в составе сточных вод, же некоторые категория промышленных сточных вод (табл. I).

Культивирование и содержание тест-объектов, выполнение про-Гр биотестирования на ЕарЬп1а тавг.а, йсепейез-иа чиайг1саи(3а, гаЬуаепа íyrííoтmia , Рагатос1ит свийа^а в лабораторных эвкях осуществляли по обаепринятьи в водной токсикологии ме-«ам. Для регистрации актигаости фотосинтеза водорослей, от-эгки режимов и процедуры биотестированяя на да'|ниях с исполь-анием экспресс-якшисагора токсичности, на рыбах и моллюсках спользованнеп бпосягнализаторов применяли специально разработка кегодихи.

В кагур.'пд: условиях исследования проводила в изолированных елытх экосистемах (микрокосмах) объеме»! I м^, бенгичесяих, рытых в атмосферу. ?!оделироваше различных режимов загрязне-.чикрокосяов, наблюдения га состоянием биоценозов, тесг-орга-мов и изменением гидрохимических показателей проводили по ме-ике, специально разработанной для этих целей. Отбор проб веды шествляли с помоаьэ батометра ^угнера. Х;гг,!ческий, гадробио-ический и микробиологический анализы волы проводили об5-глри-методиками, первичную продукцию и деструкции определяли яночным методом. Экспериментальные данные подвергали стандарт-статистмеской обработке.

Методы биотестироаания и токсические веаествз

выполнении работы

Таблица использовавшиеся при

Тесг-организм ! Тест-реакция

! Регистрируемый I параметр

! Критерий токсичности

!Токсичсс-!кие веие-! ства

!

!

1

Микроорганизмы Угнетение дегидро-актизного ила генаэной активности

?аг&~е с 1и.а саийаЪиа

ТеггаЬуюпя. руг1Гого1в

всепедеашив Чи^гАсаиба

Сложение вьямвае-мосги

•Сшскение интенсивности размножения

Изменение интенсивности размножения

Интенсивности окрашивания раствора под влиянием дегцпрогеназы

Процент различия в численности клеток меяду опытом и контролем

Коэ-Иициенг прироста численности клеток в опыте и контроле

Процент различия коэффициента прироста численности клеток в опыте и в контроле

Снижение интенсивности окрашивания раствора на 20% и более по сравнению с контролем

Снижение численности клеток на 50$ и белее по сравнению с контролем с период от I до 3 ч

Достоаерное отклонение от контроля коэффициента прироста численности клеток за 24 ч (острое токсическое действие) и за 65 ч . (хроническое токсическое действие)

Достоверное отклонение от контроля коэффициента прироста численности клеток за 96 ч (острое токсическое действие) и 14 сут (хроническое токсическое действие)

медь , кадмий.

железо ,

хром?*,

хром ,

алюминий, ртуть,аммиак, формальдегид , масляный альдегид, кротоно-вий альдегид, ацеталь-дегвд, параль-дегид, бутанол, поливиниловый спирт,

Scenedesous, quadrlcauda

Daphnia raagn»

CHiisemie активности уогосинтеза

Сшсзение вшивав-мости и плодовитости

Различия з содержании кислорода, .выделившегося в процессе фотосинтеза

Различия в количестве вшивших давний и народив-вейся молоди в опыте и в контроле

УоесЩа Опкенне вшивао- Различия в коли-

го1Хоа1ага ' мости чесгве вшивших

рыб в om.ro и в контроле.

Cyprirma carpió

Unió tuoldue Unto pictoru®

Реакция Ухода d безопасную эсну, подавляхтя приоб-poTeinm;'; ро'лег.с на элегггpitttéciíoe поле

Закрывание створок раковин

Процент рцб, ушедших в безопасную зону

Процент моллюсков с закрытыми створками

Л

I 4

- Достоверное отклонение от контроля содержания выделившегося кислорода

Гибель 50^, и более даТннй за 9o ч по сравнению с - контролен (острое токсическое действие); достоверное отличие от кон?ро-Ля количества вметвсих исходных саг.гак и народившейся молода за 30 сут (хроническое токсическое действие)

Гибель 5С$ и более рыб за 95 ч по сравнении с контроле:.! (острое токсическое действие); достоверное снижение вькнпаеиости pul за 30 сут по сравнению с контролем

Уход и более рыб в безопасную зону за определенный период Бремени

70Й и более моллюсков с закрытии створка:!»

! 5

изопропи-

ловый спирт, бутиловый спирт, хлорбензол, нитробензол, динитро-хлорбен-зол, анилин, Синод, я -нитрофенол, 0- ю нитро?»-нол, 2 Я -нафтол винияаце-тат,этил-ацетат, адипино-вая, глу-таровая, себаципс-вая, янтарная, уксусная кислоты, ОН-10,

СУД!) Т.') -нол, ди~ гол'щ

Информационной базой при разработке рекомендаций по при: нению ta6opoB биогестов для определения токсичности сточных i различных категорий и составления ранжированного перечня объ< тов, требующих проведения токсиколргического контроля, слузш данные по установлению рыбохозяйственных ПДК и материалы Гос2 дарственной статистической отчетности- о содержании загрязняю: вешеств в сточных водах предприятий, относящихся к основным < раслям промышленности.. Обе задачи решали с помощью ЭВМ EC-ICX

исследование реакция пщробжштов на токсические

. воздействия и РД.зраб0ш методов шотесшюва.нмя

для контроля токсичности вода

Метод и устройство для экспресс-оценки токсичности воды токсикологической паспортизации выпусков сгочннх вод. Первоо1 редной задачей, решаемой с помощью биотестирования при опред< нии степени биологической опасности загрязнений, является ср нительная токсикологическая оценка (паспортизация) выпусков ■ личных категорий сточных вод. Для этих целей наиболее приемл* биогест с использованием организмов, широко распространенных достаточно чувствительных к воздогно большему спектру токсич! ких Еешеств и представлявших одно, из ванных трофических звен] водной экосистемы. Перечисленным требования!.! отвечает метод i тестирования, основанный на использовании рачков Daphnia magi которые применяются в качестве стандартизированных тест-объе: при определении токсичности воды во многих странах.

Для токсикологической паспортизации выпусков сточных во, разработана модификация дайниевого теста, осуществляемого с новью портативного переносного устройства - экспресс-индикат острой токсичности (э!1т), конструкция которого позволяет гра: нормировать тест-объекты, проводить биотестирование сразу по отбора проб и производить необходимую кратность разбавления тируемой еодц непосредственно в индикационных сосудах. ЭИТ у длсктопан дзумя кассе таия, содержащими по 12 индикационных с дов к-аудая. '.¡ндикационный сосуд представляет собой градуиров ний цилиндр объемом 20 мл, внутри которого с помощью втока п двигается псрсснь. Сосуд оканчивается штуцером с капилляром

jcrKOBbM клапаном, предназначен; nri для удаления из сосуда iyxa, на дне расположена сетка, препятствующая попаданпп даф-в капилляр. Сосуд снабжен элементами подсветки для ислользо-1я реакции фототаксиса при учете пивых и погибзих лаяний

I).

Процедура определения токсичности с помоеью Э<1Т состоит в опошем: в лаборатории индикационные сосуды заполняет вопой, >горой культивируются дафнии и в кавдый помечают по 10 особе"' >ди. Сосуды закрывают пробками-поранями, удаляют из них лу->ки воздуха для предотвращения механического воздействия на '-объекты в процессе транспортирования, фиссируэт в кассетах, шапт в футляр Э;ГГ и доставляют к месту отбора проб. Для за-[ения индикационных сосудов тестируемой водой вытесняют опт:--¡ннуп часть чистой воды, готовя таким образом ряд необходимых' ¡авлений.

Для данной модификации метода экспериментально установлен ерий токсичности - гибель 50$ и более дафний за период вре-: до 48 часов по сравнению с контролем. Для сравнительной :ки биологической опасности тестируемых проб воды рекомецпу-г использовать кратность разбавления, при которой острое ток-:ское действие устраняется.

В процессе испытаний метода и устройства установлено, что ваемость дафнн."..в изолированном объеме жидкости зависит от ко-хгсотческгас своЯсгз воды, используемой для транспортирова-тест-объекгов. Бак, в дехлор^ованной, отстоянной в течение ольких суток, проаэрированной водопроводной воде ELKíBae-ь дафний составила S0Í в течение 7 суток. Дафнии хоропо ле-сяг транспортировку любым видом транспорта пр;: услсвии, если ух полносгьв вытеснен из иняикационньк сосудов. Сравнита1::.-данные определения минимально двЛс?вувяих концентраций С-:.~ ата калия и резорц:ша с использованием классического метода те;);:.'; токсичности ZK^q за 96 ч) и ¡гндн^ациокнц/: сосудов терий токсичности ЛK^q за 48 ч) показали, чго различия этих чин били недостоверны, а в ряде случаев с псмэзьп Э1ГГ были чены меяьиие значения ЯК^л (рис. 2). Это свидетельствует с лении экспресснос.'И биотестировання при использовании предстой модификации метода.

ЯК50, vrfr

0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2

0,1 0,0

Ж

50 > 0,6 0,5

0,4 0,3

0,2 0,1 0,0

!.!г/л

Ж

I

!

серия зкспериме:

I

i

!

серия эксперинс

Рис. 2. Определение ЛК50 для дг в растворах К^р ■ и резорцина (Л)

I- с использованием индикг ционных сосудов;

- с ислользоЕание.м стока;

Рис. I. Схе.-'а ¡гндихационого' сосуда

I - агок; 2 - поршень; 3 - се .та; 4 - капилляр; 5 - лепестковий клапан

Результат эксплуатационных испытаний ЭИТ в производстЕсн-с условиях на сточных водах ряда промышленных объектов: очист-с сооружениях Харьковской области, предприятиях "Стирол" . Горловка), "Эра" (г. Тосно), "Искся" (г. Кгаинев) и др., а яке в полевых условиях (источники загрязнения р. Тисы) показа-кадевкость работы Э1ТГ и позволили сделать вшеда о значигель-к лрекмупестгах данной модификации метода ло сравнению с клас-ческигл да^ниевым тсстсм. Были выявлены также недостатки неко-рых элементов конструкции ЭИТ и ограничения в его применении, язашшз в основном с температурным факторе«. Полученные резуль-ты использованы для разработки рекомендаций по усовераенство-ния ЭИТ при организации его серийного изготовления.

Методы и устройства для непрерывного токсикологического 'нгроля сточных вод. Выявленные в процессе токсикологической спортизации биологически опасные источники загрязнения подле-■т систематическое контролю. Основными требованиям, предьяв-¡ешки к биотестам, используемым для этих целей, являются воз-|Еность организации непрерывного контроля сточных вод на выцус-■х в водные объекты, получение оперативной сигнальной информа-гк о превышении уровня токсичности контролируемой воды для принял необходимых водоохранных мер. Такой контроль конно осу-зствить с помояью устройств биотестирования, основанных на пользовании реакций тест-организмов, характеризующихся досгаточ-з высокой скоростью отклика на токсические воздействия, демои-грагивностью и возмогиостьп приборной регистрации.

Изучение реакций гидробионгов позволило отобрать для разра-этки инструментальных методов биотестировакия поведенческие гакции водных животных: избегание рыбами токсических веществ я акршание стаорох раковин двустворчатых моллюсков.

Анализ супествуюдих методов и устройств по реакции изб. ,'а-,!я рыб показал, что они имепт ряд. недостатков, снизакелх объек-лвноегь оценки токсичности (использование единичных экэемпля-ов тесг-объекгов, их адаптации к токсикантам и др.). С учетом того разработан метод и на его основе создано устройство био-естирования - биосигнализатор токсичности СБ-I (рис. 3), в оснс-у которого полояена реакция ухода рыб из токсичной среды в без-пасцую зону, подавляшая приобретенный реТлскс на действие

Л

•ей* «аа< |==г]

2_

<£~>С

<®>с «ах

<5-

<Йк

17

рио. 3 . Структурная схема биосчгналу,затора токсичности с использованием реакции укода раб: I - блок еодоподго-товки; 2 - пробоотборник; 3 -рабочие аквариумы, 4 - аэ-, ратср; 5 - аквариум для содержания резервных раб; 6 -блок управления и сигнализации; ? - электроды отпугивающего поля; 8 - фотодатчики; 9 - ввод чистой вода

электрического поля, В качестве гес?-объек?ов рекомендуется использовать доступные, внракгеаемче в рыбоводных хозяйствах, вкди рыб,.например, сеголеток или годовиков Cyprinus carpió .

. Принцип работы биосигналлззтора: вначале выполняют ряд предварительных процедур (акклимацкя ряб; опредолекио напряжения отлугквежгаего поля, предо?врапгэ:иггс их произвольный уход в зон;/ датчиков; подготовка сточной воды к биотеотировагага путем последовательного определения кратности ее раэбазления, ебсспе'ги-взшв! вю/лзаемоегь 5Г& и балов рыб за 96 часов и не зтаузаяз?. ре а иуд ухода), затем в рабочие аквариуму помечают по 5-8 аккян-мкрованнше рыб. Яри отсутствии в контролируемой воде токсических в злеет в рвбы находятся в зона прздпочгигельного пребыаакн.ч, их уходу ия зтой юны препятствует электрическое поле. 3 случае появления о сточной воде гокс::ческ«х вепеегг с концентрациях, преэшашях пореговш.{предварительно установленные экспериментально) , реакция ухода преобладает над приобретенным рефлексом на действие электрического поля, к рыбы уходят в чистую яопу, пересекая зону датчиков. При уходе более cQ& рыб нормируется сигнал "токсично", автоматический пробоотборник отбирает пу^йы воды с опрэдяя&нним интервалом для ваяензю'я причины сигнала. Подача контролируемой воды э данный аквариум прекращается, производится промывка его чистой водой., а реже.: вклгтчзегся т-тзрой аквариум, Продолжительность рабочего цикла катдого акаар:^ма при отсутствии сигнала сос^вляет 24 ч. Этот прием :сэеоляэт лредс-тврааать адаптации гест-органиомов к токсическим везес?вам.

3 методе и устройстве использованы н*>выз методические ярио-ш: для предогврааений адаптагаи рыб к с:яженил :tx чувствительности предусмотрена ежесуточная сиена режгмоа работы акваруысв; используется группа тест-организмов (не менее 5), а сигнал "токсично" формируется, если количество упедзаос из -з^нн предпочги-тедьного пребывания рыб презыи« заданное значение; для исчлкчс— ния случайных уходов рыб в зону датчиков установлены электроды от пути вашего поля; бсзс-асяость рыб достигаемся подачей чистой воды в зону, расположенную за летчиками. повыли элементам с<ио-сигнализатора является блоки разэ'азлени;; води, скгнаипг.:;ж и управления, с помоаьв которых устанавливается регим рс-.боен биз-сигнализатора, учягкаашиЯ особенности проазоодстза.

В ochcf;' -:э?сда биотеогирогакия по реакции закрывания сгео-рок раковин двустЕорчатн:: .чолжокое положена способность органично« изменять периодичность и продолжительность филы рацион- ■ ной активности в зависимости от условий среды.

При установлении кротеря гок^ичности для данного аеаода на при^зре представителей сем. унио.чид Anodonta cydnea , Uuio tumiduE, Unió piotorua показано, что количество особей, однозре-сенно находящихся с закрытая створками при содержании их в чистой воде, составляет не более 35Í. Учитывая, специфику проявления реакции закршзакия (периодическое прикрциание створок раковин в начальный период интоксикация), 'щюдвоаен способ регистрации x:v¿.b дзух положений ovaopos - закрытых (плотно сог'кдутых) и открыдлх. Походя лз .этого, в качестве критерия гс;;сичносгя ■ для данного «зтода принято увеличение относительного числа нол-люскоз с аакрикки створками до я более. Мегод биотестирова-!:ля осуиестзллегся с ло-огзыз биоенгнализатора токсичности СБ-2 (рис. 4). В качестве тес?-объектоз рекомендованы двустворчатое ск'ч Anodonta cyô.noa, Unió tuffiidue, Unió pictoruo. Бпосигкояиза-'ср СБ-2. кач :i CB-I, позволяет регистрировать групповой циник гест-орпнизмов, предотврадагь :ос адаптацию к тс.:с5асак?а»1, производить рз&бавхзнке контролируемой воды, передавать нал "гог.си'-шо" на пробоотборник и, кроне этого, обеспечивать контроль жзнс'.;пссо-5но0ти тзет-обьектов, • /•

3 процессе опытно-ripa'лзлошшк ясгаяаиай СБ-I и СБ-2 на , егшедеях контроля сгсчшк вод рдде жтаеекке предприятий опре-гелекм пзрогорле концангрздаи токсичных яо'лпонецуов сточных вод и врэ'-ijî прсяпя^мя peaocií!. Реакция ухода рыб бкла зарегистрирована при содерг'.аьи!: в годе-ьдаигацетата 0,001; зтшицетата, ацсггльпегиса и яаральдегида 2,5; кротонового альдегида 0,1; .. . ."ясяянсго альдегида 0,01 и фор:,сльдегкда 0,05 îir/л. В присутствии изопрегалокого спирта реакция'ухода проявлялась 'в' йокцеотра-цлн 15,'0; палгтшзиового - 0,25 й бутилового спирта - С,1 мг'/л; при содзрсакии :;оосроюсгло актних веаеств с хонцечграции' ' 0,25 ::г/л. Яаг*жянг' резгарелалв эжрзтмех створок раковини '¡а np:ici*?c:c;te з еодо СШ.В - 5,0; попов меди - 0,1--С,2; кад?г,;я -■5,0 ■■'/::. íísirepo'-ui зрг'Чски проявления реакция достаточно коротки й - от 0,5 до 35 :глн. ' \ '

Рио. 4. Структурная схема биосигнализатора о использованием иоллюакоз: I ~ кассета; 2 - иоллкюи;* 3 - рабочий аквариум; 4 - элзктроды; 5 - патрубка подачи водн; 6 - гидрораспрвдвллтель; 7 - блох рэгзсгргляи и сигнализации; 8 - зязктроспшулятор; 9 - патрубки слива воды

По результатам испытаний СБ-1 рекомендован для контроля токсично сги сточных вод, содержат« амино-, нигросоедкнения, нолы, ацетаты, альдегиды, спирты, нафголы, активный хлор, ам:. и другие химические соединения; СБ-2 - для контроля гоксичнос сточных вод, содераазих ионы тяжелых металлов, СПАВ, формаль; гид, активный хлор и другие токсические вешества. Биосигнали: торы, работая автономно или в составе автоматизированной сис: контроля качества воды, позволяют в непрерывном режиме о пред? лять токсичность сточных вод на выцусках в водные объекты, ог ративно выявлять аварийные и иные залповые сбросы, получать V формацию о превышении установленного уровня токсичности конт£ лируемой воды.

т0ксшш0гичесш1 оценка. и контроль

источников аотязнаш водной срда .

Улучшение эколого-то"синологического состояния водных объектов можно достигнуть путам устранения очагов поступления гидросферу биологически опасных загрязняюшх веяесгв на основ проведения токсикологической оценки сточных вод непосредствен в ходе технологического процесса, осуществления контроля рабе очистных сооружений и определения степени влияния выпусков с* ных вод на качество природной воды. Таким образом, комплекса токсикологическая оценка сточных и природных вод включает ряп взаимоувязанных и взаимодополняющих элементов и монет базироваться на использовании разработанных и апробированных в отеч ственной и зарубегшой практике биотесгах. Какдый используемый биогест должен выполнять определенную, функцию и в соогветстви с этим отвечать раду критериев. При подборе биотестов для опр деления токсичности той или иной категории воды первоочередно значение приобретает выбор гест-организма, и регистрируемой ре ции, на основе которых разрабатывается биогест. Различат два типа гесг-организмов - индикаторные и представительные. По со стоянию индикаторных тест-организмов мокно судить о свойствах воды, представительные организмы характерны для сообществ гад бионгов, которые необходимо оградить от вредного влияния токе кантов (Дсдю, 1990). Вазным критерием выбора тест-организмов

яется их чувствительность к токсическс-чу воздействию, которая актеризуется значениями минимально обнаруживаемой концеатра-: тестируемого вешества или максимальной кратности разбавления ы, при которых токсическое действие по выбранному показателю раняегся.

При исследовании в лабораторном эксперименте острого токси-кого действия меди, фенола, формальдегида и их смеси на ш-1сивн0сть размножения TetrabJ-aena pyriformia , прирост числении клеток И активность фотосинтеза Scexiedeemue quadrlcauda , сиваеаосгь Dephaia osgaa установлено, что чувсгвителышми к ««альдегиду являются инфузории (0,0005 иг/л). Разгара в реаги-iaшш на воздействие формальдегида инфузорий, дафний и водолей достаточно велика (0,0005; 0,01 и 0,5 от/л соответствен'. Водоросли оказались чувствительными к меди по показатели [роста численности клеток - 0,05 ыг/л (при 0,1 мг/л для кмфу-зий и дафний). По отношении к фенолу биогесты характеризова-:ь одинаковым (200,0 иг/л) для инфузорий и водорослей (при-:т численности) и 20,0 мг/л для дафний и водорослей {актив-;ть фотосинтеза) величинами минимально действующих концентра-

При совместном действии испытанных веиесгв на регисгрируе-) реакции токсические эффекты были различными в зависимости от 19тания токсикант'-3 в смеси. В экспериментах о инфузориями этически одинаковое действие оказала грехкоилонентная (фенол, 1Ь, форяльдегца) я двухкоипонентная (фенол, формальдегид) геи, в то время как при раздельном присутствии этих вепеств ссическое влияние на инфузорий было ненее вырзаено. Отмечена ганируюаая роль фенола в проявлении токсического эффекта сме-токсикантов. При действии испытанных вешестз в различных со-ганиях на водоросли установлено такяе значительное усиление ксичесяого эффекта смесей токсикантоЕ. Об этом свидетельствует ксение численности клеток водорослей по сравнению с контролем грехкомпоненгной и двухкомпоненгных смесях. Приведенные данные вдетельствуют об избирательности в реагировании тест-срганиз-з, относящихся к различным систематическим группам, на токси-зкяе воздействия и о существенных отличиях в проявлении гокси-ского эффекта в зависимости от сочетания в смеси тестируемых

вешеств.

Кроме чувствительности, в оценке биогестов вагшая роль с водится экспрессности получения информации, которая связана с скоростьп отклика тесг-о5ьекга. Этот критерий не всегда сопря с высокой чувствительностью, поэтому для сопоставления тест-объектов необходимо учитывать данные показатели во взашодейс вии* Исходя из такой оценки, место, занимаемое гесу-объекти1 раду других, раннированнсе по чувствительности и экспрессное: можно назвать ранговым показателем эффективности (РПЭ). Одна» РПЭ может значительно варьировать не только в зависимости от особенностей и времени проявления реакции тест-объекта, но и химической природы веществ или их.комплексов, подлеаащих'био! тировадив. В этой связи, уточняя пригодность биогесга для бис тестирования воды определенного состава, следует ориентирова; ся на специфический ранговый показатель эффективности (СРГО). Таким образам, важнейшим критерием подбора биогестов для опр< лекия токсичности является адекватность тест-объекта специфзг кой природе тестируемой вода.

И, наконец, eme одним сушественным аспектом, требующим 1 мания при подборе биотестов, являемся принцип соответствия bi его характеристик функциональное назначению, которое ограде; evo я конкретными целями биотесгирования.

С учетом этих критериев и принципов на основе результат' лабораторных экспериментов, испытаний, различных наборов биог тов в производственных условиях (химические производства, го ские очистные сооружения и др.) предложена структура компяек токсикологической оценки и контроля источников загрязнения в ных объектов, которая предусматривает определение токсичност вода в технологической и экологической сферах применения био тов (табл. 2). Технологическая сфера предполагает токсиколог чески;? контроль воды, забираемой для использования в процесс производства, оценку токсичности сточных вод на всех этапах формирования, счистки и на сбросе в водный объект. Экологиче кия сфера предусматривает токсикологическую оценку воды водн объекта в зоне влияния сточных вод.

Одним из основных -функциональных назначений биогестов г, стсл ~г0;:ср:м соответствия токсических свойств контролируемо

X а длпц^

Рекомендуете биотести для комплексной токсикологической оценки сточных и природных вод

Объект бистестирования

! Цель биогесп'рования

Бода водного о<й>екга, забпра.^зя для исполь зевания а гзхнологи-чгсксм процесса

Технологические 2Г01ИЫЗ зады

Стсч:а:о воды, направ-ляэщэ на б~лологичес-к:;о счнстныо сооруке-ния

Сточная вода на выпуске в годный объект

Определение фоновой токсичности

Токсикологическая паспортизация

Выявление зысокогоксичадх сточных вол, пледетавляших опасность для биоценоза активного ила

Приролкая ззда а створе смоасния сточно.1. ПОЛИ С ВОДОЙ ВОДНОГО объекта

Определение острого токсического действия на гест-объекты, проверка ооотвегсгаия установленному нормативу. Оперативный сигнальный контроль

Определение хронического токсического действия на гесг-объек-гы, проверка соответствия установленное нормативу

¡Рекомендуемые биотесга (используемые 1 реакции и тест-объекты)

Снижение выживаемости и плодовитости дафний, снижение выживаемости рыб, изменение интенсивности разделения водорослей

Снжение выживаемости дафний или рыб

■ Шиаение выживаемости парамеций нет интенсивности размножения гетрахиыен; изменение дегидроганаэной активности микроорганизмов,активного ила, гапе-ние люминесценции светящихся бактерий

Снижение выживаемости да "гки," или це-риода^ний; изменение поведения водных животных

Снияениа выживаемости и плодовитости да.'ний или цериодайний; снижение вн-ниваемосги рыо; изменение интенсивности размножения водорослей

го

вода нормативны.! требованиям. На>ш сЛо радированы и Еключены в перечень обязательных показателей качества воды, подлекапих кон ролз (Правила охраны поверхностных вод, 1991), следушие нормативные требования: сточная вода на выпуске в водный объект не должна оказывать острого токсического действия, вода водного объекта в створе смешения со сточной водой не должна оказывать хронического токсического действия на тест-объекты. Для досгике ния нормативного качества сточной вода на выпуске в водный объе токсикологический контроль в технологической сфере должен обеспечить своевременное выявление (для последующего изъятия из общего стока) наиболее токсичных компонентов сточных год. При это начальным объектом контроля является вода, забираемая из водоис сочника для ведения технологического процесса с целью проверки се токсических свойств. Цель биотестирования сточных вод, направляемых на биологические очистные сооружения г предотврааени нарушения нормального хода процесса очистки сточных вод.'В каче ствс основного токсикологического приема рекомендуется тест на острую токсичность с использованием организмов, представительны для азрогенков активного ила: инфузорий тетрахкмен или парамеци микрофлоры биоценоза активного ила. Важнш ¡элементом в технологической сЪере является оценю токсичности сточной вода на выпу ке в зодньй объект для поверки соответствия ее качества устанс ленному норгаг-тау. В экологической сфере применения биогесгов, объектом биотестирования является природная вода в зоне влияния выпуска сгочшвс вод. Зашьет критерия;.!)! подбора биотестов, применяемых для этих целей, являптся их экологическая значимость и представительность для основных трофических уровней водной экосистема. Подбор биотестов, соответствующий упомянутым критериям очевидно, следует осуществлять с учетом вклада отдельных биоценозов в сохранение нормального Акционирования водной экосисте в целом. Ы.М.Ка:яшлов (1979) отмечал, что наилучшим показателем благополучия водной экосистемы является, '^ункцяонировэдие пастбизноП составляются биотического круговорота - ракообразных и питающихся ¡си рнб. Из приведенных в литературе многочисленна зарубежных данных также следует, что в токсикологической оценке отдельных хгеп'.ческих соединений, в мониторинге сочных и пркро; них вед ч^гиг всего применяются биогесты с использование!', рыб,

афяий и водорослей как представителей основных трофических веньев водной экосистема.

Таким образом, подытоживая приведенные данные, для исполь-ования в комплексной оценке и контроле источников токсического агрязнения водной среды можно рекомендовать следующий набор иотестов:

Метод биотестирования по показателям выживаемости и плодо-итости Dephnia magna и Ceriodaphnia affinis. Критерий острого оксического действия - гибель 5Q5 и более дафний в тестируемой оде по сравнению с контролем за 93 ч; гибель 50^ и более церио-а:Тний за 48 ч; критерий хронического токсического действия -остоверное отклонение от контроля значений выживаемости и пло-овигости да?Тшй и цернодафний а тестируемой воде;

Метод биотесткрования по показателю изменения интенсивности аззгножения водорослей Scenedeeotaa quadricauda и Cbloreila, vul-;aria . Критерий острого токсического действия - достоверное тклонение от контроля величины коэффициента пр.-гроста числешос-и клеток за 96 ч; критерий хронического действия - достоверное уклонение коэффициента прироста, численности клеток за 14 суток;

Метод биотестирования по показатели изменения интенсивности азмножения инфузорий Tetrehymena pyriformie . Критерий острого оксического действия - достоверное отклонение от контроля веди-иш коэффициента прироста численности клеток в тестируемо;! поде а 24 ч; критерий хронического действия - го яе за 95 ч;

Метод биотестирования по показателя выжгеаемости инфузорий aranecium caudatum. Критерий острого токсического действия -нияение численности клеток на 50% я более по сравнении с конт-олем в период от I до 3 ч;

Метод биотестирования по показателю вшсипаемосги рыб ioeci-ta reticulata и Eraehydanio rerlo. Критерий острого токси-есяого действия - гибель 50?, и более рыб в тестируемой воде по равнению с контролем за 96 часов, критерий хронического дойст-ип - достоверное снижение вшиваемое?« рыб за 30 суток по ерлз-енив с контролем.

Кроме перечисленных методов, могут применяться и другие потеет, что будет поетоать надежность, нрЛ.орпт'.'.гл'.ооть ->vсоленость оценки токсичности води. В целом же комплексно-? биотзе-

тирование сточных и природных вод, основанное на критериях и каторности, представительности, чувствительности, экспрессно к адекватности биогестов и соответствующее определенны:..! целя: контроля качества воды представляет собой пироко доступное с; ство экологического мониторинга водной среды, способствующее ограничению отрицательного токсического воздействия на гидро:

Р2К0ЩЦЛ.ЩЙ ПО ПРЖЕгЕНИЮ БИОТЕСТОВ В ТОКаИОЛОПКЕСКОМ КОНТРОЛЕ СТОТЫХ ВОД РАЗЛИЧНЫХ ОТРАСЛЕЙ ГРОШШЕННОСГга

.Учитывая болызой перечень предлокённых для использовали: биотесгировании тест-организмов, различных по степени органл: 1дгл и систематической принадлежности, а тамке их избиратель^ чувствительность к воздействию токсикантов, возникают значит! ныс трудности в определении области применения биогестов 'для синологического контроля многокомпонентных сточных вод. Наиб: полные .сзедения о чувствительности различных гидробионтов к ] действгга отдельных вепеств получены в процессе установления I дельно допустимых концентраций (ПДа).

С целью разработки рекомендаций по применению определен} наборов биогеегов в токсикологическом контроле различных кат« -рнй сточных вод был выполнен анализ и систематизация данных с частоте лимитирования отдельными оргашзма-'.гл рыбохозяйственш ПДН и сведений о содержании в сточных водах основных ограсле! :гро!гы^ленности загрязняющих веаеств.

Обработка массива данных с пояопью ЭЕ" ЕС-1060 показала, что при установления ПДл приоритетных компонентов, входящих I состав различных категорий сточных вод, лшятирушге.и в больг стве случаев были рыбы, дафнии, сапрофитные бактерии и водорс (43,6; 17,44; 1.5,0 и 9,1% соответственно). Зги данные свидете струит о том, что для определения токсичности рассмотренных с ных вод мохно рекодюндавагь методы биотестирования с использс нисм в качестве тесг-объектов рыб, да*нкй, водорослей и бактс Такой подход принят и для первого этапа разработки биотестов, ксгда экспериментально устанавливается соответствие откликов гаст-сргоннамов комлонентиау составу тестируемой веда. Довод та-сге область применения в качеств« гест-обьсктов прос

Они мсгут быть исаользосыш при бистестировашк сто^и/х азотной и лакокрасочной кромы'лленноста, произволстз плости-осковкоЯ и битовой яжвш, невесте огчзскоП, хге.мко-Лар?»цез-скоЯ прсмыпягшюсгк, синтетического каучука и органического оза. •

Биотести с исподьзозанлем двустворчатых молдяскоэ ыотко снять пш определении токсичности сточных вод предприятий кострсптельной и электротехнической прсмыеленности, различ-произзсдств черной и цветной металлургии я др. ; с испольэо-ем тагсарид - для биогс-сгаропишя продуктов основного орга-ского синтеза; хнрэнагг.щ - предприятий кеЬгедобываюпеГ;, авиа-но-;:, аято.мобмдьпоЛ, лесохимической, медицшскоГ: ппо.'.гыилен-и я др.; прудовиков - ал я определения гсксичнссгп сточных предприятяЛ, производящих синтетические стелы и плясг.тлссм, красочные.материалы и др.

Таким образом, уздгивая критерий эдоггаагяоегя тест-органкз-хгсетчоскоП природе гоксияантэя, разлитые сточные воды мотл^

cth к тому или ц.чоцу клзссу в qooysei'cïbsei с типом tcki.h'^.v

геЛствия. Вместе с тем, несмотря на бсльдоз разнообразие окентнг-го сссг?ел с'?очзаос вод, приоритетными по чувегпнтсль-и к г.х воздействию ялдяится рыбы, да.-яии, воде росли, йакте-и npoevettste. Эти дошке р.од5верадоэг правомерность порво-едного. приг.«онекия в комплексной токсйполоииескоЯ опенке кс-нков эстрязиенкг сода.тх экосистем набора биогзстов с ясг.ояь-:<ием переедслешпд; организмов.

PAffiCJFODAHî-^s КСТОЧШОБ тсксжского 3\ГРЯЗНШ1Я

' по СП1Ш их аиснош для бодш экосистем

Дополнение ¿ршциошиузжеЗ систем! контроля качества волы м уогсдическик пр;:емем - бпотостирсггитем - моне? ссуп-стк-' ся, поэтапно.'3 -згой а.язи возпдкае? необходимость а слрсдо-и первоочередных .обгенто*; додлезайц гоксикологичссксир/ роли. Очевидно, чте глапк:^ крптсриач их вийора является окь опасности сгочнкх под для водных, экосяста-. Один из лра-определеннл такой о;;зеност:т - установление значский г.ревы-я дедусям*« сбросов'наг. иоркдтяыпгаи». С о?им понятием езя.е.к

термин "экстремально Епсоксе загрязнение". (ЭВЗ) водного об% стократное и более превиаекке величины ЦЩ1 по сравнению с у повлекши значением. Исходя из этого можно сделать -следуше предположение: в связл с прояясацяаиии процессами сауоочиае сулестаует определенный уровень допустимой нагрузки загрязн везаств на водную з::зсисгецу. Й хогп поступление токсикакто отрицательно зли лет на водные- биоценозы, необра»чмие измене в функционировании экосистем Еозмоакы лиаъ в случае превшо такого уровня. В связи с этим при разработке методики ражи няя объектов по степени их опасности для .водных экосисте:: п ставлядось целесообразньи а условиях, близких к ес?ественш; выяснить зависимость происходя®* в в одних биоценозах фунзд к^шьньос изменениях от характера достуяления :токсических заг няпаих вепнетв. 3 экспериментах был использован метод эколс четкого шдолирсвшгик, Екрзко примеияокый для изучения разл аспектов взаимодействия токсикантов и биотической составляя водных: экосистем. ..'■-.■'• -

Исследования проводили в коделжлс экосистемах (мяхрок открытие в грунт и зпгосНоделировались различны? рек сброса органических и генеральных загрязнявших взсеств -' за вый и установившийся. Реагирование биоценоза макрокосмов на сичсское воздействие изучалось по ирыенегош кислородного ре динамике вродукционно-деструкцаонних'процессов; изменения 1 го состава к численности фитопланктона, численности сзлро]й: ^«рз Ълора.

Результаты эксперимента показали, что залповое загряз* »'.сдольнцх экосистем токсикантами, относяяюзгсп к классу орг чоскиас вепесгв {беноли, аамно-, кигрссоедкнсния) и гянеры« '-оединоиий (сульфат леди), вызывает более глубокие структур гункционалыше изменения биоценозов по сравнению с устаков; с я решило:.- загрязнения. Это проявилось в значительно;.». уаеш численности клеток сапрофитных бактерия и зодорослеГ;, етгн; .•гпиалтшгх видов в фитопланктоне, нарушения кислородного рез и протекания продукциогшо-деструкциогопэс процессов,

С учетов/полученных дагмых предложен крпгерил ранэтро; объектов, поглеагдих токсикологическое контролю, основание

окрагном и более превышении допустимого уровня загрязнения иродных вод в местах выпуска сточных.

Систе:'лтизация и обработка сведен:!:4, о превышении 'Тактических ачений предельно допустимых сбросоз над расчетным для более адцати тысяч выпусков сточных вод позволили сформировать ран-роганный перечень объектов, подле-тлазк первоочередному roi.cn-логическсхду контроля, который содержит 2700 предприятий, впеки сточных вод которых '.-кят фактическое пресыщение предельно пустимых сбросов над расчетным в 100 и более роз по о дм с:-у и нескольким компонента!.!. Эти данные свидетельствует о том.,

0 в водные объекты страны гбрасиназтся бользое количество ток-;ческих весеств, лредставляизих значительлуп опасность не толь-| для гидробионтов, но и для здоровья людей.

ДОЕМВШ-ПРЛВОВЫЕ, !ОЩ1Ч2СД!Е, OFTAHimiSIŒiiiHS

и отщльчо-эшнештеаж аспекты пр;г.!Ены::ш

ЮОТЕСГтРОВЛНЩ В ВОДООХРАННОЙ ПШШИ

Обязательны:.! условием применения биотестирования в системе ;енки качества воды и контроля водоотведения является его пра->вая и методическая обеспеченность.

С это'й цельв в новую редакции рагламектирутак сброс иа->язняюлих веиесгв в водные объекты Правил схранц поверхностных >д (M., 1991) £ ключей интегральный показатель "токсичность по-i", определяемы!1, с помощью методоп биотестирования. Однозремон-) с отмм подготовлен, утвержден Госкомприродой СССР и гводсн в гйствис с января 1991 г. РД 118-02-90. Методическоо руководство > биогесгировалгео воды, в осношшх положениях которого педчер-5вается,- что биотестирование является обязательным элементом югемы оцени и контроля качества воды и проводится для пропер-

1 соответствия ое свойств норматиэ'гым требованиям. Д:я опр"д<глс~ !Я токсичности води обязательными реномендовзны методы биотсеги-зваяия с использованием дафний или цсриодаЛгай, дополнительм!,;-

» - с использованием водорослей сценедоо^ус иди хлерг-ллы н pt:*5 гппи или данио.

Результаты биогестировэния предлеяено такт.с учитывать при становлении и корректировке велиодн предельно додустимдх сбр'пон

о

загрязняю« вепеств. Для этого необходимо определить кратное; разбавления сточной води ;ia сбросе в водный объект, при которс не проявляется хроническое токсическое действие (нормативное требование к качеству воды водного объекта) и сравнить ее с р: четной кратностью обдего разбавления сточных еод е контрольно: створе. Если последняя меньзе, чем установленная эксперимента: но при биотвотировании сточной воды, величину ДДС необходимо, скорректировать в сторону уменьшения и предусмотреть меры по устранения токсического агента.

Интегральный показатель "токсичность" включен также в ГОСТ I7.C.0.C4-S0, Экологический паспорт про.мшяенного предпр тия и является обязательны:! при составлении характеристики ка чесгва сточной воды на выпуске в водный объект.

Помимо приведенных, разработан еса ряд портативных и мет ческих руководств и других документов (табл. 3), которые явля ся пособием при внедрении биотестирования в практику Государс венного и ведомств энного контроля качества воды.

Применение биогестирования в практике охраны вод монет с низаться двумя результатам - социальным и эконо?.мческин. Ось ну-! социальным эффектом является повышение инфордативности и ративности системы контроля водоотведения, выражатаееся в свс мениом выявлении экологически опасных источников загрязнения рессоры и ограничении поступления в водную среду токсических едилонлй. Конечны:.! результатом такого эффекта является сохрзг 1гле качества воды, соответствующее нормативны;.! требованиям, : счет обеспечения нормального функционирования водных биоцено; Эконо!ЯчсскнЯ гф'скт от использования биотестов монет быть oj делен с учетом сум::зрного результата, выракашкгося в предог: цении !атер;сального удерба, наносимого народному хозяйству ( моры рыб, гибель кормовых организмов, выход из строя очистки :дорущей:::! и т.д.), в сокр^дении затрат fa проведение хнмиче анализов веды, водоподготовку и т.д.

Согласно подходам к оценке эффективности при

нения бпотссгироракня в водоохранной практике были произволе расчеты, по а г с г-;-nt^io внедрение результатов, -толучонных в гах диссертационной г—боты.

Таблица 3

Портативнее и -гстодичсскне документа, созданию пртвсвке оснагзи применения биотестирования в водоохранной практике

именование документа !Дата утверждения пли стадия разработки

I 1 2

эсобие для органов по регу- Утл сражено Глзеьпп государотпе::н!.-1

яровашга использования и • инспектором по регулированию нс-

кране вод по вшвленшо ис- пользования ¡1 охране вод 30 августа

очников аварийных сбросов 1985 г.

згрязняших веществ и экст-

эмально высокого загрязне-

ия водных объектов

етодические указания по Утверждены заместителем Главного иотестированиз сточних вод государствскного инспектора по ре-использованием рачка да£- гулиропания использования и охране ия магна вод 31 шпаря 1936 г.

ОСТ 17.0.0.04-90. Экологи- Утвержден.постановление!! Госксмлри-есхий паспорт промшшенно- роды СССР У? 4 от 3 января 1920 г. о предприятия. Основные по-ожения

ременные методические реко- Утверждены начальником Главного енрации по применение управления научно-технического

кспрессчшдикатора острой прогресса и экологических ногепти-оксичностк ' воп Госкомприроду СССР •! июля

. 1990 г. .

'Д 118-02-90. Методическоо Утвержден постановление:! Госксмпш-гукоЕодство по биотеетиро- роди СССР .V» 37 от 6 августа 1930'г., ашш воды постановленном Государственного по-

литеса УССР го экологии и рацио-■ ¡шьному .природопользовании 10 от (kj.03.91. овеясн в яейстаао на территории Украшш с 01.03,91

[равнла охраны позерхност- Утгерхлвки 21.02.91 пори г; замг»с?:ь tux вод тело« Председателя Госкскглрирсдм

СССР

)храна природы.. Гидросфера. Проект ГОСТа !е годика определения токсич-!оеги води па даяниях

Ьсрана природы. Гидрос . Проект ГОСТа (етодака определения гсксич-гостк водах на инГузс^лях

)хракс. прирч., .с-. Гидроспера. Проект ГОСТа »а годика определима токсич-юсти водц на рыбах

гшяшя

Анализ современного состояния проблемы загрязнения окрузап щей среды к суяествуших подходов к оценке его экологической опасности показал, что наиболее элективным средством выявления источников токсического загрязнения гидросферы является биотес-тирозание. Сб этом достаточно убедительно свидетельствует наличие свыге 50 стандартов та методы биотестирования, применяемых различных странах для определения токсичности сточных и природных вод.

Ьютесгирован;:е, как метод определения токсических свойств воды, базируется на теоретических представлениях, вытекающих из всей совокупности знаний о закономерностях реагирования гидро-бнаитов на воздействие токсических веществ. Отечественными

токсикология з на~ей стране бшщ созданы научные основы био тестирования водно;: среды.

Однако результаты апробации более 40 биотестов, разработан :-:ых э различных учреждениях, показали, что их широкое внедрение в портику работы контролирующее служб сдергивалось из-за нераз работанности целого ряда методологических, методических и кора тизно-правовых аспектов рассматриваемой проблемы.

Б процессе выполнения диссертационных исследования бил оборон отечественный и зарубежный опыт- в области разработки и пр меяения бнотестов, определены место и задачи биотестирования в судострусзеЛ системе контроля водоотведения, установлена взаимо связь результатов определения-токсичности воды с общепринятыми птзгтелямк ее состава и свойств.

О-лим из нг.ибодсе существенных факторов, тормозящих применен:» биотсстировзния в практике, как отмечалось ранее, являлос сг.-угстгис интегрального показа:еля "токсичность воды" в догдгие •.ах, регламскгигунзес водопользование. В связи с эти« возникла и^сбхглнмссть ы белее четком определении этого, а такяе ряда др хчпе тсрт:ноп, иестагссн^ис'-трактуемых разим:гл артормги. В процо сп гылолиеиия диссертациоююй работы иияк с^ор-'улкровани и в гена в РД Методическое руководство'по бцотестировани

основные горийш я лояснония к кии, наиболее часто применя

te г рассматриваемой области:

токсичность води - свойство воды вызывать' патологические менения или гибель организмов, обусловленное присутствием в ¡Я токсических веиесгв;

биологическое тестирование - сценка качества воды по ответ-и реакция;.! водных■ организмов, яаляшихся тест-о&ьектзл'И (термин оточен в ГОСТ 27065-86) ;

тест-реакция - изменение какого-либо показателя тес:—объек-i под воздействием токсических веаеств, содер-даплхся в воде; тест-параметр - количественное выражение тест-реакции; критерия токсичности - значение тест-параметра или правлю, i основании которого делают вывод о токсичности воды;

токсикологический контроль - проверка метода-и биогеегкро-шия соответствия качества воды установленным нормативам.

Исходя из определения термина "токсикологический контроль" учитывая уке .еудесгвущую практику функционирования систем; знтроля качества воды, основанную на сопоставлении .фактических гачений ПДи отдельных загрязняющих Еепеств с нормативными, нами т'л установлены (на основе имевшихся в теории биотестировзния редставдениП) нормативные требования к качеству сточной и при-эднои воды: сточная вода на выпуске в водныЛ объект не додана ■сазывать острого токсического действия по показатели выаивасмос-л тест-организмов; вода водного объекта в створе смешения со точно:! - хронического токсического действия по показателя, утл-=шашему репродукгивность тест-организмов.

Для оценки стелеии токсичности тестируемой води лреплегено спользовать"значение кратности ее разбавления (в случае наличия оксичности), при когорой токсическое действие устраняется. Taon прием удобен и необходим при определенш ассимиллдгапей спо-обности водного объекта и получении сравнительных данных о био-огическо:! опасности ряда выпусков. С это:», целью сравнивается асчегная кратность разбавления сточной воды в створс водного йьекта ( п ) с полученной экспериментально (путам биопстирова-ия) безопас.ноп для тест-организмов кратностью разбавлею'.я ( пт). евпгтоднение при сбросе сточной воды уелогня п > п,. Яудст видетельствовагь о возможном токсическом загрязнении ведчоге

объекта и нанесении ущерба водной экосистеме.

Таким образом, основным итогом выполненных в рамках дисс! гацик исследований является юридически обоснованное включение биотестирования в сисге-'.у Государственного и ведомственного к< роля качества воды.

Дополнение снсге: гы контроля водоотведения новы:.: методичес Kit! приемом - биотестирование:! и проведение комплексной токсю логической оценки качества воды, которая в настоящее время уже практикуется, будет, способствовать повышению эффективности ко: роля источников загрязнения водной среды и усилению его эколог ческой направленности.

ШВОДЦ

1. Одни:.! из основных направлений совершенствования систе: оценки экологических последствий токсического загрязнения вол контроля его источников является применение методов биотестирс ниг. на водных организмах.

2. Разработаны модифицированный метод.биотестирования на дафниях и портативное переносное устройство - экспресс-индипат острой токсичности, -позволяющие осуаествлять биотестирование н посредственно в местах отбора проб с целью токсикологической паспортизации сточных вод и выявления источников ок^тремдльно гысоксго загрязнения водных объектов.

,3. Разработали методы биотестирования, в которых использо т: поведенческие рсакц:м рыб и двустворчатых моллюсков. Ка их ссного созданы устройства - биосигналнзаторы токсичности CB-I CS-Ï, апробированные и Енедренныз на ряде производств. СБ-1 эф феыглвен для контроля токсичности сточных вод, содер-::акк амин нитрссоедииония, фонолы, ацетаты, альдегиды, спирты, нафгоды, Сензслы, активны:! хлор и другие химические соединения; СВ-2 -для кентредя токсичности сто-гак вед, co.icpr.-iiD: ио!ш тяжелых металлов, С"'A3 и другие токеичас:.::е вещества.

-i. Ха :;.::-: тер реапгроваиик тест-организмов различных систем: le.групп на токсические воздействия определяется компоне! та согтавсм тесгируе-'гх смесей токсикантов сточных вод. Бвиду избирательности реагирования тост-организмов на воздойсп

юличных токсических веществ использование какого-либо одного ютеста для определения токсичности води недостаточно эффект:«—

5. Многокомпонентность состава сточных вод: обусловливает ¡обходимость применения набора методов бнотеспгрозания, огвечак-IX определенны!.* критериям гыбора. Комплексная токсикологическая денка качества воды вхлшаст технологическую и экологическую ' ;:сри применения биотестов. Первая охватывает все звенья водо-эзяЛственной деятельности предприятия как источника загрязнения здной экосистема! и предусматривает контроль токсичности воды, 1бираемой для использования в процессе производства,, стсчн^

)л на всех этапах их формирования, очистки и на выпуске в вод-¿й объект; вторая предполагает гоксикологичеасуя оценку воды эдного объекта в местах выпуска сточных вод.

6. Нормативным требованием к качеству стошо,: воды на, сбросе водный объект является отсутствие острого токсического дейст-1я, а к воде э контрольном створе водного объекта - отсутствие зонического токсического действия на тест-обьекти.

7. Набор бяотестов, рекомендуемы;5. для комплексной гоксиксдо-wecKoít оценки .воды, включает методы биотестирования, основание на использовании реакций простейших, водорослей, дафпий, мол-осков и рыб. Биотесты долины соответствовать критериям индика-эрносги, представительности, адекватности, чувствительности, ¡сспрессносги, доступности к простоты в осуществлении процедур аогестирования.

8. В качестве первоочередных рекомендованы слсдуягло методы нотос'.лрования: для определения острого токсического действия точной воды на сбросе в водный обьякт - кратковременный биотест х Daphnia magna или Ceriodaphnia affinia;. ,пля определения хро-пческого токсического действия воды в контрольном створе подлоге бьекга - длительные биотесгн на ¡taphnla magna или Ceriodaphnia ffinio, Sconedoomiis quadricauda ИЛИ Cblorslla vulgar lo,, roccilin roticulatatmi Brachydanio xorio.

9. 3 результате- экспортонтос in eitu установлено, что nv.--овое загрязнение модельных экосистем приводит к более глу£г.:::м трукгурно-'ункциональньг! нарушениям водных биоценозов по ор;.г::с~

к::я с равномерном поступлением токсических веществ. Исходя из этого, в основу ранжирования источников токсического загрязнен; по степени их опасности для подидсс экосистем положен критери!':, учигнваюаий уровень загрязнения природных вод токсическими вешс ствами в местах выпуска сточных вод в концентрациях, стократно и более презиааю'дпх допустимые. ' .

10. Впервые разработанные и введенные в дейсгЕие род методических и нормативных документов создают правовые основы прим! нения биогеетирования в водоохранной практике в налея стране и обеспечивают включение интегрального токсикологического показателя в систему оценки и контроля качества воды.

СШЖ РАБОТ, 0ПУБ31ЙК0В1ШНЫХ ПО TBE ДЙССЕРГАЦЖ

I. КраЯкюкйва А.К., Васенко Д.Г. Основные направления в р витии метода приборной биоиндикации токсичности сточных вод // Состояние разработки и внедрения автоматических средств коитро. за jtfuiecïBQM природных и сточных вод: Тез.докл. Всесоюзн. семи нара, Харьков, 1978. С. 24-26. -

2..Крайняяова А.Н., Ксробов H.H., Катриченко Г.Н., Васенк Л.Г., Еаелев В.П. Оценка токсичности сточных вод автоматически устройствами с биологическим чувствительным элементом // Гам к С. 29-31. О

3. Красникова Л.Н., Васенко А.Г. О перспективах испсльзов ния автоматизированных устройств биотестирования для интеграль оценки токсичности сточных вод // Сценка и классификация качес поверхностных вод для водопользования: Тез .докл. Всессшн.кок*! Харьков, -1979. С. I65-IÔ9-.

.4. КраЛнюкова 'А.Н., Еурбенко Й.З. Использование показател о тосянтегическоЯ активности водорослей при оценке токсичности химических ве:;оста и сточнпх вод // Хам не. С. 169-173.

5. КраГлгокова Л.Н., Антонов C.B., Носикова ii.C. Эксперт тальнке исследования всмохзгаст!: гцнмснскня биосигнализагоров АСУ M // Разработка и внедрение автоматизированных систем уяр лечил водоохранной комплексами: Тез.докл. Всесоюз.конф., Xapi ког, 1931. С.

6. Крайншова A.H., Ошрнова Л.Н., Рязанов А.В., Басенко

, Лурбенко И.З,, Ульянова Я.П. Применение методов биотести--■ния для оценки токсичности сточных вод // 1У съезд Всесоэз-.ч юбиолог. об-ва: Тез.докл., Киев, IS8I. С. 84-86.

7. Рязанов А.В., Крайншова А.Н., Емельякенко В.В. О возмся-■и использования двустворчатых моллюсков в приборном бнотзсти-.нии сточных вод // Контроль качества природных и сточных вод. >ков, 1982. С. 51-55.

8. Крайвокова А.Н., Ульянова И.П., Горбань Н.С. О перспек-IX применения токсикологических методов для контроля сточных // Обобиенные показатели качества вод-83. Практические вопро-шотестиропания и биоиндикации : Тез .докл. Всесою.симпоз., ¡оголовка, 1983. С. 17-19.

9. Змельяненко В.В., Крайнюкова А.Н. Кспользозание некото-физиологических показателей даЛимЯ для контроля токсичности сшх вод // Там ке. С. 47-49.

10. Антонов C.B., Крайнюкова А.Н. Принцип построения и штурные особенности биосигнолизаторов для автоматизирование- • сонтроля токсичности // Там яе. С. 65-69.

11. Ьс.фбенко И.З., Крайнюкова А.Н. Использование показателей шсивности фотосинтеза и уровня замедленной флуоресценции веселей в бнотестировании // Там де. С. 72-75.

12. КраР.кюкова А.Н., Стшрнова А.Н., Носиков! ,Н..С. Рсэульта-зпытной эксплуатации экспериментальных образцов биосигналяза-53 токсичности // Там тле. С. 77-70.

13. Васенко А.Г., Красикова A.IÎ., Несмеянов ЮЛ., Karp'.i-to Г.i!. ИнструмекталькыГ! экспресс-метод оценки токсичности nose вод по реакции ухода рыб // Теоретические вопросы Спотос->вакнл, Волгоград, 1983. С. 100-104.

14. ;;урбснко И.З., Крапнакооа А.Н., Ульянова ПЛ1. Непольоо--le показателей газообмена водсрослеН и бактерий в качество

?а в инстручснталыпас методах биотесгароэания. // Там see. ." [70-175.

15. Ем 'ьянсько Б.В., ;{рл"л:гк:ойа А.Н. Двустворчатые мол.-'.- -«ас инпикагорч нажппя ?с!.*сикан?ов ь сточных водах //'Лрс';.:.vr; хш природы: Тез.докл. иссосщ.кон!.., Охйкидьск, I(J¿i. С. I—

о

16. Крайншова Л.H. Ко-.щдокснзя оценка токсичности его цод методами биотестироаэния // Комплексные оценки качества .верхностных вод: Сб. сгаге:":. Л., 1984. С. 61-65.

17. Крайншова А.Н. Биотесгирозание сточных вод в сист контроля водоотеедения и управления качествол вод // Регули нне качества природных вод, Харьков, 1984. С. 120-125.

18. Красникова А.И., Брагинский Л.П., Антонов C.B., Ул ра И.П. Современное состояние и перспективы применения в пр ие контроля вод .методов и средств биотестирования // Всесою: екмпоз. по cosa, проблемзд прогнозирования,контроля качеств: ды водоемов .-и озонирования: Тез.докл., Таллинн, 1965. С. 98

19. Крайшкова Д.К.. Носнкова Н.С., Омрнова А.Н., Уль. И.П. Результаты испытаний методов и средств биотестирования них вод в водоохранном комплексе на Сев. Донце // Водоохрак комплексы речных бассе Га-юз. Харьков, 1985. С. 133-138.

20. Крайжкова А.Н. Роль биотестирования в охране водт объектов от загрязнения сточными водами //У съезд Зсесоюэ. гидробиолог. общества: Тез.докл. Тольятти, 1936. С. 201-202,

"21. Крайнюкова А.Н...Ульянова Я.П., Селегей Л.А. Научн< .'методические основы выявления потенциальных источников и слз экстремально высокого загрязнения (ЗБЗ) водных объектов // i индикация и биотестированис природных вод: Тез.докл. Всесоа; кенф., РостсО-на-Дону, 1986. С. 172-173.

22. Крайнюкоза А.Н., Васьковец Л.А., Волковинский В.В. Стандартизация в области охраны еод // Комплексные методы кс ля качества природной среды: Тез.докл. Мезд/нар.симпоз. М., С. 75-7Ô.

23. ¿урбонко ¡Í.3., Край1юкова А.Н. Сравнительная чу в cri тсльность различных тестовых реакция водоросли Scenedesmus q driceuda (Тигр) Вг^ь. к действию некоторых токсических вс ста // Гидробиологические исследования на Украине в XI пятил ¿tes, IS87. С. 205-206.

24. Нурбенхо И.З., КраПнюкова А.Н. Использование кульад водорссле:1, Sccnedeeiauo ¡juedricauda (Тигр) Breb. для оценки t сичносги сбросных вод рисовых оросительных систем // Актуаль !1ро5лс:.щ современно?. альгологии: Тез-догл. Зсесс:^з.ксн> , Че кассы, I?o7.~G. 25G-26I.

25. Крайтокова А.Н., Вальтер Г.Д., Антонов С.В., Катриченко Г.Н. Метод биотестиравания сточных вод по.реакции ухода рыб пз токсичной среды // Методы ихтиотоксикологических исследований: Тез.докл. BcecoK3.cir.mo3. Л., 1987. С. 73-74.

• 26. Брагинский Л.П., КраГиюкова А.Н. Практические вопросы биотестирования и биоиндикации природных и сточных вод // Пробло-качества природных вод. Черноголовка, 1987. С. 55-71.

27. Брагинский Л.П., КрайнгокоЕа А.Н. Биологические методы контроля эффективности очистки сточных вод ст токсических загрязнений // Обезвреживание отходов химических производств с использованием биологических систем. Черкассы, 1987. С-. 20-22.

28. Брагинский Л.П., Крайшокова А.Н., Ульянова И.О., Соловьев А.Е. О результатах апробации методов биотестирования природных и сточных вод, разработанных в XI пятилетке // Проблемы охраны окружающей среды. М., 1987, 2. С. 75-98.

29. Селегей Л.А., Крайнюкова А.Н. Оценка токсичности сточных и речных вод з контрольных створах предприятия химической промнд-ленности // Экологические и технологические аспекты обезвреживания промышленных отходов. Черкассы, 1988. С. 18-19. •

30. Крайизокоза А.Н. Состояние и перспективы применения методов биотестирования для оценки загрязнения водной среды // Экологическая химия водной среда. Ереван, 1938. с. 108-125.

31. Краплакова А.К. Еютесгирование в охрана вод от загрязнения // Методы биогестировалня вод. Черноголовка, 1903. С. 4-15.

32. Цурбепко И.З., КраШгокова А.Н. Метод биотесгарованил по газообмен;' и уровню замедленной ¡Тяуорссценции одноклего'огих водорослей //Там. яе. С. 30-33.

33. Крайнккова А.Н., Рязанов A.B., Емедьяненко В.Б. "стод бногестирования по реакции закрывания створок раков:ш двустворчатых моллюсков // Таи пз. С. 57-65.

34. Крайивкова АЛ., Вальтер Г.А., Антонов С.З., Катриченко Г.Н. Метод биотескфовагсгя сточных вод по реакции ухода рыб из токсичной срсды // Том r;ü, С. G6-69.

. 35. Кр-Ч'люкопа А.П., Селегей Я.Л., Ткачеико Г.Н. "Лзучспп"; тсч'.сл'пмсти водкой среды в модельных змсистсмлх с помосьп биотестов // Ьсесовд.конп. по водной токсикологии: Тез.дохл., Одесса, 1988. С. 42-43.

■ о

35. Крайнюкова А.Н., Сюгрнова А.Н., Бобров О.Г. Бнотестиро-вание сточных вод химических производств // Обзор.информ.сер. охрана окруж. среда и рац.использов.природ, ресурсов. 1989. &га, 12(91). М. 18 с.

37. Брагинский Л.П., Крайняхова А.Н. Метода оценки токсичности сточных вод и перспективы их использования в контроле при родных вод /■/ Методы биоиндикации и биогесгирования природных вод. Л.: Гидрометеоиздаг, 1989. С. 194-203.

38. Крайнпкова А.К., Ярох А.И., Васьковец I.A.. Токсикологи ческий контроль вод и оценка его эффективности // Там яе. С. 21 215.

• 39. Крайнвкова А.Н., Смирнова А.Н. Оперативный контроль го сирости сточных вод химического производства // Экологические и технологические аспекты обезвреживания промышленных выбросов полимерных производств. Черкассы, 1990. С. 21-23. * 40. КраЯнюкова А.Н., Ульянова И.П. Биотестирование и яколо гическое нормирование // Проблемы экологической химии п токсико логая в схране природа. БзйкаЛьек, 1990. С. 12-14.

41. Брагинский Л.П., Крайнокова А.Н.,' Подцашсин A.B., &ир нова Л.Н. Оценка околого-токсикологического состояния водных объектов при экологическом нормировании // Методология экологического нормирования. Ч. Z: Тез.дскл. Всесовз.кону. Харьков, 1990. С. 116-1:18. \ ' . .

42. Васьковец 1Л,, КраЯншова А.Н. Перспективы разработки комплексной оценки токсичности воды, для целей экологического но мирования // Tau se. С. II8-I20.

43. Красикова А.Н. Система оценки, контроля.и нормирована токсических загрязнений гидросферы// Там se .С. 134-136. -

44. Крайшкоса Л.Н. Кор.мрованке токсического воздействия на коую природу// Экологические проблема охрану живой природа Тез.докл. Всесоюз.конф. М., 1990. С. 129-130.

- 45; Васьковец Л.А., ХраЯнюкоэа А.Н., Ильюхин JD.B. Стандартизация методики определения токсичности на рыбах // Вторая Зсесоюз.конр. по рыбохозяйств. токсикологии. Т. I: Теэ.докл., Сакхт-Пзтербург, 1991. С. 75-76.

46. РД II6-C2-90. Методическое руководство по биотестировг

води / Госкомприрода СССР: Под ред. АЛ.КраЯгаэковой, Ы.,

1. 4а с.

Ковизи» бяотегиологнчрскяс реюеняЯ ваядаоена мторсюао! детелъствым:

I« Устройство для сцекжм токсичности сточннг вод. I.e. 186 СССР. ШШ А OZ.Ä 61/00, G 01 Ч 33/IB. Опубя. ЕИ [Ii Cf7.II.S2 (ooaat. Кгтркчекко ГЛ., Bscühko А.Г., Аню-I C.B.).

2. Устройство для оценки токсичности сточных вод:, i.e. >0054 СССР. Ш А 01 К 61/00, 0 01 H Xi/IB. Опубл. ЕИ !3, 23.11.83 (соавт. Антош« C.B., Катрячвшю ГЛ., Быя-гко Ь.П., Ёаеенжо АЛ1.).

3. Способ бшзлогячесхоЯ оцеаося юхсичкосте водн в устает ео для биологической оцепхя гокскчносм вида. A.c. 56063 СССР. НИИ А 01 К 61/10, G 01 » 33/16. Опубж. Ш 3, 23.01.84 (соаэ?. Кмалыгнвяхо З.В., йатркчеяхо ГЛ., евшео А.Г.).

4. Способ определения скорости потреблеетя кислороде днши организмами я устройство для его осудаствденвя.

с. 1169575 СССР. ШШ А 01 H 61/00, G Ol * 33/18. Опубл. tf 28 , 30.07.85 (соавт. &ю1Ьяпвихо З.В., Хурбенхо И.З.).

5. Устройство для бюлогкчзсЕОЙ оценка «скекчкосди да» A.c. 946027 СССР. Ж А Ol Ü 61/00, о 31 а 33/Ш. •эрсаеао к опубл. 24.04.66 » 28-7/9II0 (соist. Рлзааов В., Васвнк» Д.Г.).

6. Способ бизлогячвсхоЯ оценки текеячяоетн вода. A.c. ■44203 СССР. Ht® А 01 К 61/00, G 01 Я 33/Ï8. Unyfta. Ей 38, 13.06.86 (соавт. яывльянеако В.В.).

7. Устройство ляп оценка тоженчкостя «очзшх вод. A.c. ¡83654 СССР. ¡ИИ А 01 К 61/00, о 01 л 33/IB. Опубж. Ei

2, 15.01.87 Icoanr. Аятоаоо C.B., ÄÖssos А.Й., ttorçimca-> ГЛ., й&хароа В Л., Л«ро» ЕЛ.).

8. Устройство для биололгаэсхой оценки токекчяоета да. A.c. i507275 СССР. Ш А,01 К 61/00, 0 01 S 33/18. зубл. Бй 5 34, 15.09.89 (ссавт. ьиздьязвнко В.В., йахжхйъ Л., Длехсешш Д.И.).