Анализ участия транспортера серотонина в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс линии wistar

Кожевникова, Валерия Владимировна

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Анализ участия транспортера серотонина в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс линии wistar

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Кожевникова, Валерия Владимировна Москва 2010 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.03.06

Автореферат диссертации по медицине на тему Анализ участия транспортера серотонина в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс линии wistar

На правах рукописи

КОЖЕВНИКОВА ВАЛЕРИЯ ВЛАДИМИРОВНА

АНАЛИЗ УЧАСТИЯ ТРАНСПОРТЕРА СЕРОТОНИНА В РАЗВИТИИ МОНОКРОТАЛИНОВОЙ ФОРМЫ ЛЕГОЧНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У КРЫС

ЛИНИИ \VISTAR

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология ' 03.03.01 -физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

0046

540? -2 пен 2010

Москва - 2010

004615407

Работа выполнена на факультете Фундаментальной медицины и Биологическом факультете Московского Государственного Университета им. М. В. Ломоносова

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор доктор биологических наук, профессор Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор доктор биологических наук, профессор Ведущая организация: ГОУ ВПО Первый Московский госуда] Сеченова Минздравсоцразвития России

Медведев Олег Стефанович Медведева Наталья Александровна

Мирзоян Рубен Симонович Данилова Раиса Александровна

й медицинский университет имени И. М.

Защита диссертации состоится « 2 » 2010 года вН-ОО часов на заседании

•О /

диссертационного совета Д 001.024.01 при Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте фармакологии имени В. В. Закусова РАМН по адресу: 125315, Москва, ул. Балтийская, д.8.

С диссертацией можно ознакомиться в Ученой части НИИ фармакологии имени В. В. Закусова РАМН по адресу. 125315, Москва, ул. Балтийская, д.8.

Автореферат разослан «1 » крЗО^З 2010 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Е. А. Вальдман

ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Легочная артериальная гипертензия (ЛАГ) определяется как хроническое возрастание среднего и систолического артериального давления в легочной артерии (оно превышает 25 мм рт. ст. в покое и более 30 мм рт. ст. при физической нагрузке) [Galie N., 2004; Демьянченко С., 2009]. Заболевание характеризуется прогрессивным повышением легочного сосудистого сопротивления и гипертрофией правого желудочка сердца [Simonneau G., 2004; Волков А. В., 2008]. Имеется большое количество классификаций легочной гипертензии, но основной является деление ЛАГ на идиопатическую легочную гипертензию (ранее известную как первичная легочная гипертензия) и ЛАГ, возникающую как осложнение различных болезней органов кровообращения и дыхания (вторичная легочная гипертензия) [Rubin L. J., 1997; Тео Y. W., 2010]. Все эти состояния характеризуются развитием сходных нарушений в микроциркуляции системы легочной артерии, включая пролиферацию эндотелиальных клеток, гипертрофию гладкомышечных клеток, локальные тромбозы (in situ) [Nicod L. P., 2007]. Диагностировать легочную гипертензию на ранних этапах очень сложно, поэтому изучение развития и возможных причин этого заболевания, а также поиск новых методов лечения, осуществляют с помощью моделирования легочной гипертензии у животных [Robbins I. М., 2004; Bauer N. R., 2007; McMurty I. F., 2008]. В нашей работе была выбрана экспериментальная модель первичной легочной гипертензии, которая развивается после разовой инъекции монокроталина. Токсичный метаболит монокроталина, избирательно действуя на сосуды малого круга кровообращения, вызывает дисфункцию эндотелия легочных сосудов [Dumitrascu R., 2008].

первичной легочной гипертензии [Ullmer С., 1995; Cortijo J., 1997; Green A. R., 2006]. К хроническим последствиям относят пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток, которую может запускать серотонин, попадая внутрь гладкомышечных клеток легочных сосудов через транспортер, локализованный на их плазматической мембране [Eddahibi S., 2001]. Указанные изменения приводят к тому, что формируется стойкая легочная гипертензия с ремоделированием легочных сосудов, гипертрофией и ремоделированием правого желудочка сердца.

Действие практически всех препаратов, использующихся для лечения легочной гипертензии в настоящее время, направлено на снижение давления в легочной артерии. В то время как, вне зависимости от этиологии, у пациентов наблюдается ремоделирование сосудистой стенки. В связи с этим представлялось интересным исследовать влияние препаратов, изменяющих активность транспортера серотонина, на степень развития ЛАГ, эффекты которых могут быть направлены не только на уменьшение вазоконстрикции, но и на предотвращение ремоделирования легочных сосудов.

Цель исследования заключалась в том, чтобы в модельных экспериментах на крысах линии Wistar, изменяя активность транспортера серотонина фармакологическими препаратами, проанализировать его роль в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии и пути коррекции данной патологии.

Задачи исследования. Для достижения цели настоящего исследования были поставлены следующие задачи:

1. Оценить влияние хронического применения ингибитора транспортера серотонина флуоксетина на степень развития монокроталиновой формы легочной гипертензии.

2. Изучить влияние хронического ингибирования транспортера серотонина на реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина.

3. Провести анализ изменения содержания серотонина и его метаболита оксииндолилуксусной кислоты в крови и тканях легочных артерий после хронического применения флуоксетина.

4. Провести сравнительный анализ морфометрических параметров ветвей легочных артерий у животных всех экспериментальных групп.

5. Исследовать влияние хронического применения активатора транспортера серотонина тианептина на развитие легочной гипертензии.

сократительных ответов легочных сосудов на перфузию серотонина позволил заключить, что реактивность сосудов малого круга кровообращения определяется уровнем свободного серотонина в плазме крови, и как результат повышенного сопротивления легочных сосудов происходит структурная перестройка правого желудочка сердца. Возрастание констрикторных ответов легочных сосудов является ведущим фактором в формировании давления в правом желудочке сердца, так как степень ремоделирования легочных сосудов уменьшалась как в группе с меньшей, так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии.

Получены приоритетные данные о раннем компоненте реакции животных на развитие легочной гипертензии, который можно рассматривать, как маркер для прогнозирования действия активатора и ингибитора транспортера серотонина на развитие легочной гипертензии.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты, полученные в настоящей работе, конкретизируют существующие представления об участии транспортера серотонина в патогенезе первичной легочной гипертензии, которая моделируется введением монокроталина. Проведенное комплексное исследование, включающее в себя эксперименты in vivo и in vitro, а также изучение механизмов реализации физиологических реакций, позволило получить новые данные о взаимосвязи уровня свободного серотонина в плазме крови и реактивности легочных сосудов, играющей ведущую роль в формировании давления в малом круге кровообращения при легочной гипертензии. Показано, что препараты, модулирующие активность транспортера серотонина, могут рассматриваться как потенциальные медикаментозные средства для комплексной терапии легочной гипертензии.

Положения, выносимые на защиту:

1. Применение ингибитора транспортера серотонина флуоксетина или активатора транспортера серотонина тианептина при монокроталиновой легочной гипертензии может как уменьшать, так и потенциировать развитие данной патологии у животных.

2. Главным компонентом, участвующим в повышении давления в малом круге кровообращения при монокроталиновой легочной гипертензии, является увеличение реактивности гладких мышц легочных сосудов к сосудосуживающим факторам и, в частности, к серотонину, которая поддерживается увеличением сосудистого сопротивления за счет ремоделирования стенки сосудов.

3. Нормализация констрикторных реакций легочных сосудов после хронического применения флуоксетина у животных с монокроталиновой легочной гипертензией коррелирует с уменьшением действия свободного серотонина на рецепторы.

Апробация результатов исследования. Основные положения диссертации были представлены на XX съезде физиологического общества им. И. П. Павлова (Москва, 2007); V Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 100-летию со дня рождения В. Н. Черниговского (Санкт-Петербург, 2007); ежегодной встрече Скандинавского Физиологического Общества (Оулу, 2008); 6-ой Лейденской Международной конференции для студентов-медиков (Лейден, 2009); 19-ой Европейской встрече, посвященной изучению гипертензии (Милан, 2009), а также на 16-ом Мировом конгрессе по базовой и клинической фармакологии (Копенгаген, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 2 статьи - в научных журналах, рекомендуемых ВАК, и 6 тезисов докладов - в сборниках материалов отечественных и международных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, экспериментальной части, заключения, выводов и списка цитируемой литературы (250 источников, в том числе 18 отечественных и 232 зарубежных). Объем диссертации 136 страниц машинописного текста, в том числе 35 рисунков и 33 таблицы.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (1977) на самцах белых крыс линии Wistar, полученных из вивария НИИ Общей патологии и патофизиологии (РАМН). Животных содержали в стандартных условиях, согласно требованиям европейской ассоциации FELASA-1CLAS [Guide for the care and use of laboratory animals, 1996].

Моделирование легочной гипертензии и деление животных на экспериментальные группы. Для создания физиологической модели легочной гипертензии животным массой 180-230 г подкожно под эфирным наркозом осуществляли инъекцию водно-спиртового раствора алкалоида монокроталина (мкт) в дозе 60 мг/кг в объеме 0,5 мл [Dumitrascu R., 2008], контрольным животным подкожно вводили водно-спиртовой раствор (к) в том же объеме. Через неделю в зависимости от вещества, которое вводили внутрижелудочно ежедневно в течение 3 недель - дистиллированная вода (к), флуоксетин в дозе 10 мг/кг в сутки (ф), тианептин в дозе 12,5 мг/кг в сутки (т) - были сформированы 6 экспериментальных групп животных: к-к (контроль-контроль), к-ф (контроль-флуоксетин), к-т (контроль-тианептин), мкт-к (монокроталин-контроль), мкт-ф (монокроталин-флуоксетин), мкт-т (монокроталин-тианептин). Протокол исследования и количество животных в экспериментальных группах приведены в таблице 1.

Таблица 1.

Протокол исследования и количество животных в экспериментальных группах.

Регистрируемые параметры Количество животных в группах

к-к мкг-к к-ф мкт-ф 1 мкт-ф 2 к-т мкт-т 1 мкт-т 2

Вес (ежедневно) 31 37 31 27 25 31 29 23

Сист. давление в хв. артерии (1 раз в неделю) 31 37 31 27 25 31 29 23

Потребление корма (1 раз в неделю) 31 37 31 27 25 31 29 23

Поведение (1 и 5 недели) 31 37 31 27 25 31 29 23

2 в и о. о е у а л Л о ч о In vivo 10 16 10 8 8 10 10 5

In vitro 10 10 10 8 9 10 9 8

Морфометрические исследования сердца 31 37 31 27 25 31 29 23

Морфометрические исследования ветвей легочной артерии 11 11 11 11 8 и 10 10

Содержание серотонина в тромбоцитах 10 И 10 10 8 10 9 9

Содержание серотонина в плазме 8 11 9 9 8 9 10 7

Содержание ОИУК в плазме 8 10 9 9 8 9 10 9

Содержание серотонина в ткани легочных сосудов 9 10 9 11 8 10 10 9

Содержание ОИУК в ткани легочных сосудов 9 9 10 И 8 8 10 9

Методы изучения поведения животных. Поведение животных оценивали в тестах «открытое поле», «крестообразный приподнятый лабиринт» и «принудительное плавание».

Измерение артериального давления в хвостовой артерии. Давление в хвостовой артерии измеряли плетизмографическим методом [Malkoff J., 2005; Feng М., 2008]. Регистрацию и обработку экспериментальных данных проводили с помощью модифицированной программы BioShell.

Эксперименты in vivo. Гемодинамические параметры (среднее и сист. системное артериальное давление, среднее, сист., диастолическое давление в правом желудочке сердца и частоту сердечных сокращений) регистрировали у животных под этаминал-натриевым наркозом (40 мг/кг, внутрибрюшинно) через катетеры, имплантированные в бедренную артерию и правый желудочек сердца. Обработку экспериментальных данных проводили с помощью модифицированной программы BioShell [Мурашев А. Н., 1997].

Исследования in vitro реактивности изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина. Используемый в эксперименте препарат сегмента легочной

артерии (ответвление второго порядка) выделяли из левого легкого и фиксировали на канюле. Длина препарата составляла -4 мм, дистальный конец изолированного сосуда оставался незакрепленным и сохранял всю рабочую поверхность эндотелия. Исследование активного сосудистого тонуса начинали после 20-минутной стабилизации сосуда (перфузия физиологическим раствором Кребса-Хенсляйта, pH 7,4, аэрирован карбогеном, расход 2 мл/мин внутренний и 4 мл/мин внешний проток, температуру поддерживали на уровне 37-37,5°С). О реакции сосуда судили по изменению перфузионного давления, измеренного с помощью датчика давления (Statham) и аналого-цифрового преобразователя (L-Card, модель Е 14-140). Регистрацию и обработку экспериментальных данных проводили с помощью программы PowerGraph [Измайлов Д. Ю., 2007]. Для анализа констрикторной реакции были проведены эксперименты с перфузией серотонина в диапазоне концентраций от 3-Ю"8 М до МО'5 М (используемые концентрации: 3-Ю"8 М, МО"7 М, 3-Ю"7 М, 1-Ю"6 М, 3106 М, МО"* М). Смену раствора на более концентрированный проводили после достижения плато ответа на предыдущую концентрацию. Данные экспериментов на изолированных сосудах представлены в виде величины перфузионного давления в мм рт. ст. за вычетом фонового значения давления на момент стабилизации изолированного сосуда при перфузии физиологическим раствором.

Морфометрические исследования сердца и ветвей легочной артерии. Степень развития легочной гипертензии оценивали по величине абсолютного веса правого и левого желудочков сердца, межжелудочковой перегородки и относительного веса правого желудочка сердца, рассчитанного по формуле: вес пр. ж./вес пр. ж.+вес л. ж.+вес меж. пер.* 100%, где пр. ж. - правый желудочек сердца, л. ж. - левый желудочек сердца, меж. пер. - межжелудочковая перегородка сердца [Zhang Т. Т., 2004; Hessel М. Н. М., 2006]. Морфометрическое исследование ветвей легочной артерии проводили на гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином [Саркисова Д. С., 1996] (работа выполнена в центральной окружной лаборатории патоморфологии и цитологии ГУЗ «Консультативно-диагностического центра № 6», заведующий лабораторией - к.м.н. П. Г. Мальков). С помощью программы WCIF ImageJ [Collins Т. J., 2007] на поперечных срезах оценивали (в мкм): наружный и внутренний диаметр легочных артерий, общую площадь сосуда и площадь просвета, толщину и площадь всей стенки сосуда.

Определение содержания серотонина и его метаболита оксииндолилуксусной кислоты в крови и тканях легочных сосудов. Для определения содержания серотонина в ткани сосудов из правого легкого выделяли фрагмент легочной артерии, взятие проб крови осуществляли через катетер, установленный в общую сонную артерию [Ortiz J., 1992].

Определение содержания серотонина и его метаболита оксииндолилуксусной кислоты (ОИУК) проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (Amperometric detector LC-4B, Bioanalytical Systems, USA) [Кириллова В. В., 2009].

Статистический анализ. Статистический анализ данных проводили с помощью программного обеспечения Statistica Release 8 (StatSoft) [Гланц С., 1999]. Предварительную оценку характера распределения данных осуществляли с помощью критерия Шапиро-Уилка (Shapiro-Wilk's W-test), при допустимой вероятности ошибки меньше 0,05 распределение признака считали отличающимся от нормального. В соответствии с полученным результатом, при дальнейшей обработке применяли однофакторный дисперсионный анализ с последующей проверкой по критериям Ньюмана-Кейлса (ANOVA post hoc test Newman-Keuls) и Даннетта (ANOVA post hoc test Dunnett) или однофакторный дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса с последующей проверкой по критерию Данна (Kruskal-Wallis ANOVA with Dunn post hoc test). В таблицах и на рисунках результаты экспериментов, отвечающие нормальному закону распределения, представлены в виде арифметического среднего ± стандартная ошибка среднего, в случае непараметрических данных - в виде медианы, минимальных и максимальных значений признака, 25 и 75 процентилей. Корреляционные связи между показателями, отвечающими закону о нормальном распределении, оценивали с помощью критерия согласия Пирсона (Pearson Chi-square test/ Анализ вида зависимости между показателями проводили с помощью метода регрессионного анализа. Разделение группы на однородные подгруппы осуществляли с помощью однофакторного дисперсионного анализа и апостериорной проверки по методу Дункана (ANOVA post hoc Duncan's test). Различия считали статистически значимыми при допустимой вероятности ошибки менее 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Влияние флуоксетина на степень развития легочной гипертензии.

Известно, что достоверным способом диагностики легочной гипертензии является катетеризация правых отделов сердца. Таким образом, относительный всс правого желудочка и систолическое давление в нем являются показателями, по которым оценивается степень развития заболевания. В нашем исследовании были получены данные, подтверждающие, что после инъекции монокроталина у животных развивается легочная гипертензия, о чем свидетельствует увеличение относительного веса правого желудочка сердца и давления в нем (р<0,001) (Табл. 2).

При анализе эффекта применения флуоксетина на данные показатели у животных с монокротапиновой легочной гипертензией было выявлено разделение животных на группу с низким давлением (мкт-ф 1) и группу с высоким давлением в правом желудочке сердца (мкт-ф 2). Апостериорная проверка по методу Дункана показала, что группы мкт-ф 1 и мкт-ф 2 статистически значимо отличаются по степени проявления у них легочной гипертензии (р<0,001). Регрессионный анализ показал, что между систолическим давлением в правом желудочке и его относительным весом существует сильная корреляционная связь (коэффициент корреляции г=0,8781), поэтому критерием для разделения животных по степени развития у них легочной гипертензии при применении флуоксетина был выбран относительный вес правого желудочка сердца. При значениях относительного веса правого желудочка сердца меньше 35% животных относили к подгруппе 1, больше 35% - к подгруппе 2. Таким образом, хроническое применение флуоксетина оказывает двойственное воздействие на развитие изучаемой патологии, у одних животных (в 50% случаев) приводя к уменьшению гипертрофии правого желудочка сердца и давления в нем, у других (в 50% случаев) напротив, вызывая их прогрессирование.

Таблица 2.

Оценка степени развития легочной гипертензии.

Группы Отн. вес пр. ж. сердца (%) Сист. давление в пр. ж. сердца (мм рт. ст.) Абс. вес л. ж. сердца (г) Сист. давление в хв. артерии (мм рт. ст.)

к-к 22,38±0,30 33,5±0,70 0,46±0,01 8 день 30 день

134±1,94 135±1,56

к-ф 22,63±0,33 33,3±0,70 0,43±0,01 134±2,15 138±1,80

мкт-к 34,64±1,04 *** 74,7±1,30 *** 0,43±0,01 134±2,26 125±1,80 ***

мкт-ф 1 29,39±0,51 (1) $$$, (1) £££ 54,9±1,95 (1) $$$, (1) £££ 0,40±0,01 141 ±2,29 (1)$ 134±2,98 (1) £££

мкт-ф 2 38,81±0,65 (2) $$$, (2) £££ 105,5±4,00 (2) $$$, (2) £££ 0,38±0,01 (2)$, (2) £ 132±2,16 127±2,90 (2) $$

Статистически значимые отличия: *** - мкт-к ув к-к, р<0,001; (1) $, (1) $$$ - мкт-ф 1 уэ к-ф, р<0,05, р<0,001; (2) $, (2) $$, (2) $$$ - мкт-ф 2 ув к-ф, р<0,05, р<0,01, р<0,001; (1) £££ - мкт-ф 1 у5 мкт-к, р<0,001; (2) £, (2) £££ - мкт-ф 2 У5 мкт-к, р<0,05, р<0,001.

Наблюдение за развитием легочной гипертензии в ходе исследования осуществляли, измеряя систолическое давление в хвостовой артерии непрямым методом, так как монокроталиновая форма легочной гипертензии может сопровождаться системной гипотонией. В нашем исследовании было показано, что монокроталиновая форма легочной гипертензии у животных действительно сопровождается пониженным систолическим

давлением (мкт-к - 125±1,80 мм рт. ст. vs к-к - 135±1,56 мм рт. ст., р<0,001), в то время как у животных с меньшей степенью развития изучаемой патологии применение флуоксетина предотвращало понижение систолического давления (Табл. 2). В группе с большей степенью развития легочной гипертензии кроме понижения систолического давления в хвостовой артерии (мкт-ф 2 -127±2,90 мм рт. ст. vs к-ф -138±1,80 мм рт. ст., р<0,01) также было отмечено уменьшение абсолютного веса левого желудочка сердца (мкт-ф 2 -0,38±0,01 г vs к-ф - 0,43±0,01 г, р<0,05), которое вероятно возникает вследствие прогрессировавия степени гипертрофии правого желудочка сердца [Chen L., 2001]. Разделение животных группы мкт-ф на подгруппы по величине систолического давления в правом желудочке сердца в конце эксперимента позволило выявить разницу на начальных этапах развития заболевания. Через неделю после инъекции монокроталина (до применения флуоксетина) у животных группы мкт-ф 1 (141±2,29 мм рт. ст.) систолическое давление статистически значимо выше, чем у животных группы к-ф (134±2,15 мм рт. ст.) (р<0,05), в то время как систолическое давление в группах мкт-ф 2 и к-ф статистически значимо не отличается (Табл. 2).

Таким образом, результаты нашего исследования показали, что легочная гипертензия является заболеванием, затрагивающим циркуляцию крови в сосудах не только легочного, но и системного кровообращения. Деление животных на подгруппы позволило выявить разницу на начальных этапах развития легочной гипертензии: через неделю после инъекции монокроталина было отмечено повышение системного давления, которое проявлялось не у всех животных. Хроническое применение флуоксетина у животных группы мкт-ф 1 предотвращало понижение системного давления, вызванное инъекцией монокроталина.

Кроме мониторинга систолического давления в хвостовой артерии, наблюдение за развитием легочной гипертензии в ходе исследования осуществляли по изменению веса животных, так как согласно данным литературы, монокроталиновая форма легочной гипертензии сопровождается уменьшением скорости его прироста [Clozel М., 2006; Kamezaki F., 2008]. Было показано, что животные с монокроталиновой легочной гипертензией уже со второй недели после инъекции монокроталина медленнее набирают вес, чем животные контрольных групп. На 30 день эксперимента разница в весе животных групп мкт-к и к-к составила 6% (р<0,01). При применении флуоксетина вес животных также остается пониженным (на 7%) (р<0,01).

Имеются данные, указывающие на то, что монокроталин обладает анорексигенным действием, которое также указано как один из возможных побочных эффектов при применении флуоксетина [Kato Y., 2003]. Так как уменьшение прироста веса животных

является одним из показателей степени развития легочной гипертензии, в ходе нашей работы проводилась оценка количества потребляемого корма на 100 г веса животного. На 8 день эксперимента у животных группы мкт-к отмечалось уменьшение потребления корма (8,35±0,27 г на 100 г веса животного) по сравнению с группой к-к (9,85±0,19 г на 100 г веса животного) (р<0,01). Разделение животных по степени развития у них заболевания при применении флуоксетина позволило выявить разницу в потреблении корма на 8 день после инъекции монокроталина и еще до применения флуоксетина. Было показано, что у животных группы в дальнейшем со сниженной степенью развития изучаемой патологии при действии флуоксетина, на 8 день эксперимента (до начала его введения) не происходило уменьшения потребления корма, данный параметр был выше, чем у животных группы мкт-к (р<0,05). Дальнейшее измерение потребления корма не выявило значимых отличий между всеми исследуемыми группами животных.

Таким образом, возможное анорексигенное действие при используемых дозах монокроталина и флуоксетина в нашем исследовании после 8 дня эксперимента не проявляется, а разделение животных при применении флуоксетина по степени развития легочной гипертензии в конце эксперимента позволило выявить разницу на начальных этапах развития изучаемой патологии.

Флуоксетин легко проникает через гематоэнцефалический барьер, и как следствие может оказывать влияние на характеристики поведения животных, поэтому поведение животных оценивали в тестах «открытое поле», «крестообразный приподнятый лабиринт» и «принудительное плавание». Было показано, что флуоксетин при хроническом применении оказывает легкое протективное противострессовое действие (тест «принудительное плавание», р<0,05) и способствует увеличению ориентировочно-исследовательской активности у контрольных животных (тест «открытое поле», р<0,05), не влияя на характеристики поведения у животных с монокроталиновой легочной гипертензией.

2. Влияние флуоксетина на реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина.

Известно, что ранним компонентом возрастания давления в правом желудочке сердца при легочной гипертензии является увеличение констрикторной реакции легочных сосудов [01ЬЬэ .1. Б. Я., 2003]. В связи с этим в следующей серии экспериментов оценивалась реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина. На рисунке 1 видно, что сократительный ответ изолированных легочных сосудов животных с монокроталиновой легочной гипертензией при концентрации

серотонина 110"5 М [5-НТ]=-5,0) в 6,6 раз повышен по сравнению с контрольной группой (р<0,001).

(2) £££ (2) £££

Рис. 1. Изучение реактивности изолированных легочных сосудов после хронического применения флуоксетина.

Статистически значимые отличия: *, *** - мкт-к уб к-к, р<0,05, р<0,001; (2) $, (2) $$$ - мкт-ф 2 уб к-ф, р<0,05, р<0,001; (1) £££ - мкт-ф 1 уб мкт-к, р<0,001; (2) £, (2) £££ - мкт-ф 2 уэ мкт-к, р<0,05, р<0,001.

При изучении действия флуоксетина у животных с меньшей степенью развития легочной гипертензии было выявлено уменьшение сократительного ответа, легочных сосудов на серотонин по сравнению с животными группы мкт-к (мкт-ф 1 - 2,33±0,54 мм рт. ст. уб мкт-к - 7,30±0,94 мм рт. ст., р<0,001). В то время как в группе, где при применении флуоксетина наблюдалось прогрессирование развития изучаемой патологии, было отмечено увеличение реактивности изолированных легочных сосудов в ответ на серотонин в 1,6 раз (р<0,001).

3. Определение содержания серотонина и его метаболита оксииндолилуксусной кислоты в артериальной крови.

Для того, чтобы ответить на вопрос - может ли серотонин участвовать в изменении реактивности легочных сосудов у животных с монокроталиновой легочной гипертензией и как применение флуоксетина сказывается на его концентрации - мы определили содержание серотонина в крови животных. Было отмечено, что при монокроталиновой легочной гипертензии происходит увеличение содержания свободного серотонина в плазме крови (мкт-к - 3,7 нмоль/л уб к-к - 0,6 нмоль/л, р<0,01) (Табл. 3).

Применение флуоксетина в группе с меньшей степенью развития легочной гипертензии приводит к аккумуляции серотонина в тромбоцитах (мкт-ф 1 - 2597,7 нмоль/л

уб мкт-к - 790,8 нмоль/л, р<0,05) (Табл. 3), которая коррелирует с уменьшением сократительных ответов изолированных легочных сосудов при перфузии серотонином (Рис. 1). Напротив, повышение содержания свободного серотонина в плазме крови при применении флуоксетина (мкт-ф 2 - 8,4 нмоль/л уэ мкт-к - 3,7 нмоль/л, р<0,05) коррелирует с увеличением сократительных ответов легочных сосудов животных группы мкт-ф 2 в 1,6 раза по сравнению с группой мкт-к.

Таблица 3.

Содержание серотонина и ОИУК в артериальной крови (данные представлены в

виде медианы, в скобках указаны тт и шах значения).

Группы Тромбоциты Плазма

Серотонин (нмоль/л) Серотонин (нмоль/л) ОИУК (нмоль/л)

к-к 1150,4(241,6-1982,9) 0,6 (0,3-1,0) 89,2 (24,0-166,7)

к-ф 103,3 (13,9-709,9) ££ 1,8 (1,3-5,8) £££ 76,8 (22,1-134,4)

мкт-к 790,8(155,5-5319,3) 3,7(0,2-13,5)** 135,1 (122,9-224,7) *

мкт-ф 1 2597,7 (409,5-7612,7) (1)$$$,(1)£ 4,3 (0,5-7,0) 139,1 (54,8-179,4)

мкт-ф 2 155,4 (39,3-293,8) (2) ££ 8,4(2,6-15,2) (2) $$, (2)£ 55,8 (27,9-139,1) (2) ££

Статистически значимые отличия: ££, £££ - к-ф уб к-к, р<0,01, р<0,001; *, ** - мкт-к уэ к-к, р<0,05, р<0,01; (1) $$$ - мкт-ф 1 уэ к-ф, р<0,001; (2) $$ - мкт-ф 2 УЭ к-ф, р<0,01; (1) £ - мкт-ф 1 уэ мкт-к, р<0,05; (2) £, (2) ££ - мкт-ф 2 уэ мкт-к, р<0,05, р<0,01.

Таким образом, увеличение реактивности легочных сосудов к серотонину при монокроталиновой легочной гипертензии может определяться содержанием свободного серотонина в плазме крови.

4. Морфометрические исследования ветвей легочной артерии.

В формировании давления в правом желудочке сердца играет роль не только увеличение реактивности легочных сосудов к серотонину, но и сужение внутреннего просвета при разрастании и утолщении их стенок [С^паЬе!! С., 2005]. Поэтому для оценки степени ремоделирования легочных сосудов в нашем исследовании проводилось измерение толщины стенки на поперечных срезах ветвей легочных артерий разного диаметра.

Из таблицы 4 видно, что монокроталиновая легочная гипертензия действительно сопровождается увеличением толщины стенки легочных сосудов (мкт-к - 41,46±2,40 мкм ув к-к - 33,41±1,80 мкм при 0н=151-200 мкм, р<0,05; мкт-к - 70,57±5,42 мкм уб к-к -45,92±2,88 мкм при 0н>200 мкм, р<0,001). А при применении флуоксетина отмечается

уменьшение ремоделирования легочных сосудов с наружным диаметром более 200 мкм как в группе с меньшей (мкт-ф 1 - 44,32±2,74 мкм уз мкт-к - 70,57±5,42 мкм, р<0,001), так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии (мкт-ф 2 - 48,14±1,79 мкм уб мкт-к - 70,57±5,42 мкм, р<0,001).

Таблица 4.

Морфометрические параметры ветвей легочной артерии.

Группы Наружный диаметр сосуда

<100 мкм 100-150 мкм 151-200 мкм >200 мкм

Толщина стенки (мкм)

к-к 20,55±0,68 27,01±1,39 33,41±1,80 45,92±2,88

к-ф 18,81±0,76 24,79±1,47 31,63±1,21 35,91±1,43 ££

мкт-к 20,98±0,71 27,52±1,05 41,46±2,40* 70,57±5,42 ***

мкт-ф 1 20,54±0,81 28,93±1,13 (1) $ 40,53±4,48 (1) $ 44,32±2,74 (1) $, (1) £££

мкт-ф 2 20,24±0,89 29,85±1,61 (2)$ 43,90±2,85 (2) 5$$ 48,14±1,79 (2)$$$, (2)£££

Статистически значимые отличия: ££ - к-ф УБ к-к, р<0,01; *, *** - мкт-к уэ к-к, р<0,05, р<0,001; (1) $ - мкт-ф 1 уэ к-ф, р<0,05; (2) $, (2) $$$ - мкт-ф 2 уз к-ф, р<0,05, р<0,001; (1) £££ - мкт-ф 1 уб мкт-к, р<0,001; (2) £££ - мкт-ф 2 ув мкт-к, р<0,001.

5. Определение содержания серотонина и его метаболита ОИУК в ткани легочных сосудов.

Согласно данным литературы, серотонин является потенциальным индуктором пролиферации гладкомышечных клеток легочных сосудов [ЕсИаЫЫ Б., 2001, Ти(1ег Я. М., 2007], поэтому в данной серии экспериментов измерялось содержание серотонина в ткани легочных сосудов (Табл. 5).

Таблица 5.

Содержание серотонина и ОИУК в ткани легочных сосудов (данные представлены в

виде медианы, в скобках указаны гшп и тах значения).

Группы Серотонин (нмоль/г ткани) ОИУК (нмоль/г ткани)

к-к 18,2(8,6-29,9) 0,59 (0,27-1,11)

к-ф 16,0 (8,0-28,0) 0,50 (0,24-0,75)

мкт-к 68,0(15,2-122,7)** 0,71 (0,27-1,06)

мкт-ф 1 61,6 (19,1-121,3) (1)5$$ 0,40 (0,29-0,66)

мкт-ф 2 29,6 (11,1-63,1) (2) £ 0,28(1,13-0,48) (2) $,(2) ££

Статистически значимые отличия: ** - мкт-к У5 к-к, р<0,01; (1) $$$ - мкт-ф 1 уз к-ф, р<0,001; (2) $ -мкт-ф 2 уэ к-ф, р<0,05; (2) £, (2) ££ - мкт-ф 2 уэ мкт-к, р<0,05, р<0,01.

В нашем исследовании было показано, что у животных группы мкт-к в ткани легочных сосудов происходит увеличение содержания серотонина в 3,7 раза по сравнению с показателями группы к-к (р<0,01), которое коррелирует с развитием гипертрофии медии легочных сосудов у животных данной группы (толщина стенки легочных артерий в группе мкт-к в 1,5 раза превышает показатели группы к-к). Анализ результатов биохимического определения серотонина в ткани легочных сосудов при применении флуосетина показал, что статистически значимых отличий между группами мкт-ф 1 и мкт-к по данному показателю не наблюдается, в то время как у животных группы мкт-ф 2 серотонина в ткани легочных сосудов было не больше, чем у животных группы к-ф.

Таким образом, хроническое применение флуоксетина у животных с монокроталиновой легочной гипертензией приводит к уменьшению степени ремоделирования легочных сосудов как в группе с меньшей, так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии. Корреляции между толщиной стенки легочных сосудов и содержанием серотонина в тканях сосудов не прослеживается. Вероятно, уменьшение ремоделирования легочных сосудов при применении флуоксетина связано не с ингибированием активности транспортера серотонина, а скорее с уменьшением уровня его экспрессии в гладкомышечных клетках [О^паЬеЛ С., 2005]. Двойственный эффект флуоксетина на степень развития легочной гипертензии не определяется степенью ремоделирования легочных сосудов: толщина стенки легочных сосудов при применении флуоксетина уменьшалась как в группе мкт-ф 1, у животных которой происходило уменьшение развития легочной гипертензии, так и у животных в группе мкт-ф 2, где применение флуоксетина потенциировало развитие изучаемой патологии.

Резюмируя вышеизложенное можно сказать, что применение ингибитора транспортера серотонина - флуоксетина - при монокроталиновой легочной гипертензии может как уменьшать, так и потенциировать развитие данной патологии у животных. Анализ сократительных ответов сосудов малого круга кровообращения показал, что их увеличение коррелирует с возрастанием содержания свободного серотонина в плазме крови и возможно возрастание констрикторных ответов является ведущим фактором в формировании давления в правом желудочке сердца, так как степень ремоделирования легочных сосудов уменьшалась как в группе с меньшей, так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии.

В связи с чем интересно было посмотреть как повлияет применение активатора транспортера серотонина - тианептина - на развитие монокроталиновой формы легочной гипертензии.

6. Исследование влияния хронического применения активатора транспортера серотонина тианептина на развитие легочной гипертензии.

При применении тианептина у животных с монокротапиновой легочной гипертензией был выявлен двойственный эффект воздействия на степень гипертрофии правого желудочка сердца и давления в нем, так же как и при изучении действия флуоксетина на данные показатели. У 67% экспериментальных животных данные показатели уменьшались, что свидетельствует о меньшей степени развития у них легочной гипертензии, в то время как у оставшихся 33% было выявлено увеличение степени гипертрофии правого желудочка сердца и давления в нем, то есть наблюдалось потенциирование развития легочной гипертензии (Табл. 6).

Наблюдение за развитием легочной гипертензии в ходе исследования по изменению веса животных показало, что применение тианептина не оказывает влияние на прирост веса у животных с меньшей степенью развития легочной гипертензии, а животные с большей степенью развития изучаемой патологии на 8% медленнее набирают вес, чем животные группы мкт-к (р<0,05).

Наблюдаемое уменьшение прироста веса у животных группы мкт-т 2 вероятно обусловлено увеличением степени развития легочной гипертензии, а не анорексигенным эффектом тианептина, который указан как один из возможных побочных эффектов этого препарата, так как анализ количества потребляемого корма не выявил изменений его потребления.

В нашем исследовании было показано, что у животных с меньшей степенью развития изучаемой патологии применение тианептина предотвращало понижение систолического давления в 56% случаев (Табл. 6). В группе с большей степенью развития легочной гипертензии (в 44% случаев) кроме понижения систолического давления в хвостовой артерии (мкт-т 2 - 124±2,81 мм рт. ст. vs к-т - 136±2,14 мм рт. ст., р<0,01) также было отмечено уменьшение абсолютного веса левого желудочка сердца (мкт-т 2 -0,39±0,01 г vs к-т - 0,45±0,01 г, р<0,01), которое вероятно возникает вследствие прогрессирования степени гипертрофии правого желудочка сердца [Chen L., 2001]. Разделение животных группы мкт-т на подгруппы позволило выявить разницу на начальных этапах развития заболевания. Через неделю после инъекции монокроталина (до применения тианептина) у животных группы мкт-т 1 (138±2,28 мм рт. ст.) систолическое давление статистически значимо выше, чем у животных группы к-т (132±1,74 мм рт. ст.) (р<0,05), в то время как систолическое давление в группах мкт-т 2 и к-т статистически значимо не отличается (Табл. 6).

Таблица 6.

Влияние тианептина на развитие легочной гипертензии.

Регистрируемые параметры к-т мкт-т 1 мкт-т 2

Отн. вес пр. ж. сердца (%) 22,36±0,39 29,03±0,64 (!)###,( 1)¥¥¥ 38,63±0,62 (2) ###, (2) Ш

Сист. давление в пр. ж. сердца (мм рт. ст.) 33,2±0,42 57,9±2,31 (1)###,(1)¥¥¥ 89,8±4,88 (2) ###, (2) ¥¥¥

Абс. вес л. ж. сердца (г) 0,45±0,01 0,41 ±0,01 0,39±0,01 (2) ##, (2) ¥

Сист. давление в хв. артерии (мм рт. ст.) 8 день 132±1,74 138±2,28 (1) # 132±2,75

30 день 136±2,14 130±2,43 124±2,81 (2) Ш

Содержание серотонина в тромбоцитах (нмоль/л) 961,2 (58,5-2315,9) 2757,7(1636,2-7973,7) (1)###,(1)¥¥ 752,8 (87,2-2204,4)

Содержание серотонина в плазме (имоль/л) 1,3(0,3-8,1) 8,3 (1,4-25,5) (1)###, (1)¥¥ 1,1 (0,9-2,5)

Содержание ОИУК в плазме (нмоль/л) 90,0 (30,2-190,9) 220,3(155,5-290,0) (1) ###,(!)¥¥ 73,4(45,2-161,8) (2)¥¥

Толщина стенки (мкм)

Наружный диаметр сосуда <100 мкм 19,19±0,73 20,43±0,74 21,34±0,63

100-150 мкм 28,50±1,18 29,86±1,60 28,86±0,74

151-200 мкм 31,14±1,78 35,29±1,84 33,82±1,27 (2)¥

>200 мкм 53,12±3,28 ¥ 50,54±1,80 (1) ¥¥¥ 46,91±1,92 (2)¥¥¥

Содержание серотонина в ткани легочных сосудов (нмоль/г ткани) 13,1 (5,9-30,7) 92,7 (48,9-128,4) (1)###,(1)¥¥ 24,5(10,4-69,6) (2) ¥

Содержание ОИУК в ткани легочных сосудов (нмоль/г ткани) 0,60 (0,27-1,30) 0,95 (0,38-2,28) (1) #,(!)¥ 0,74(0,35-1,92)

Статистически значимые отличия: ¥ - к-т УЭ к-к, р<0,05; (1) #, (I) #Ш - мкт-т 1 уэ к-т, р<0,05, р<0,001; (2) ##, (2) ### - мкт-т 2 уэ к-т, р<0,01, р<0,001; (1) ¥, (1) ¥¥, (1) Ш - мкт-т 1 уб мкт-к, р<0,05, р<0,01, р<0,001; (2) ¥, (2) ¥¥, (2) ¥¥¥ - мкт-т 2 уэ мкт-к, р<0,05, р<0,01, р<0,001.

Известно, что тианептин так же как и флуоксетин способен легко проходить через гематоэнцефалический барьер, поэтому проводилось тестирование животных для выявления возможного влияния хронического применения тианептина на поведение животных. Было показано, что при хроническом применении тианептина у контрольных животных наблюдается проявление его протективного противострессового действия и увеличивается их ориентировочно-исследовательская активность, характеристики поведения у животных с монокроталиновой легочной гипертензией не изменяются.

Изучение реактивности сосудов малого круга кровообращения показало, что в группе животных, где при применении тианептина наблюдается меньшая степень развития легочной гипертензии сократительный ответ изолированных легочных сосудов на перфузию серотонина меньше по сравнению с группой мкт-к (мкт-т 1 - 2,11±0,64 мм рт. ст. уб мкт-к - 7,30±0,94 мм рт. ст., р<0,001) (Рис. 2). В то время как в группе, где применение тианептина вызывает потенциирование развития изучаемой патологии, реактивность легочных сосудов фактически не отличается от реакции сосудов животных группы мкт-к (статистически значимо только при концентрации МО"5 М). При изучении реактивности изолированных легочных сосудов животных группы к-т было отмечено увеличение констрикторной реакции по сравнению с группой к-к при концентрации серотонина МО"5 М (1^ [5-НТ]=-5,0) в 4,2 раза (р<0,05).

| -7,5 -7,0 -6,5 -6,0 -5,5 -5,0

Lg [серотонин]

Рис. 2. Изучение реактивности изолированных легочных сосудов после хронического применения тианептина.

Статистически значимые отличия: *, *** - мкт-к уэ к-к, р<0,05, р<0,001; ¥ - к-т уэ к-к, р<0,05; (2) #, (2) Ш - мкт-т 2 ув к-т, р<0,05, р<0,001; (1) ¥,(])¥¥¥ - мкт-т 1 уз мкт-к, р<0,05, р<0,001; (2) ¥ - мкт-т 2 уэ мкт-к, р<0,05.

Биохимический анализ образцов крови у животных с меньшей реактивностью изолированных легочных сосудов на перфузию серотонина показал, что в данной группе содержание этого моноамина повышено как в тромбоцитах, так и в плазме крови (в тромбоцитах мкт-т 1 - 2757,7 нмоль/л уб мкт-к - 790,8 нмоль/л, р<0,01; в плазме мкт-т 1 -8,3 нмоль/л уб мкт-к - 3,7 нмоль/л, р<0,01) (Табл. 3, Табл. 6). А его концентрация в крови у животных с большей степенью развития легочной гипертензии не отличается от показателей контрольной группы. Полученный результат противоречит сделанному нами ранее при изучении действия флуоксетина выводу о том, что увеличение реактивности

изолированных легочных сосудов на серотонин у животных с монокроталиновой легочной гипертензией определяется содержанием в плазме крови свободного серотонина. Данное несоответствие вероятно объясняется тем, что при применении тианептина не только увеличивается количество свободного серотонина в плазме крови, но и ускоряется оборот данного моноамина [Узбеков М. Г., 2009]. Таким образом, свободный серотонин в плазме крови не принимает участие в формировании констрикции, так как при применении тианептина, по-видимому, активность транспортера серотонина преобладает над активностью рецепторов серотонина, участвующих в реализации вазоконстрикции [Могесгой I., 2005].

Оценка степени ремоделирования легочных сосудов показала, что так же как и в случае флуоксетина применение тианептина у животных с монокроталиновой легочной гипертензией приводит к уменьшению толщины стенки легочных сосудов с наружным диаметром более 200 мкм как в группе с меньшей (мкт-т 1 - 50,54±1,80 мкм уб мкт-к -70,57±5,42 мкм, р<0,001), так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии (мкт-т 2 - 46,91±1,92 мкм уз мкт-к - 70,57±5,42 мкм, р<0,001) (Табл. 6). Хроническое применение тианептина у контрольных животных приводило к увеличению толщины медии легочных сосудов по сравнению с группой к-к (к-т - 53,12±3,28 мкм уэ к-к - 45,92±2,88 мкм при 01 [>200 мкм, р<0,05), которое коррелировало с повышенной в 4,2 раза реактивностью изолированных легочных сосудов данной группы на перфузию серотонина.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Заключая вышеизложенное, можно сказать, что активность транспортера серотонина определяет как содержание свободного серотонина в плазме артериальной крови, так и степень ремоделирования медии легочных сосудов. Главным компонентом, участвующим в повышении давления в правом желудочке сердца при монокроталиновой легочной гипертензии является, по-видимому, увеличение реактивности гладких мышц легочных сосудов к сосудосуживающим факторам и в частности к серотонину, которая поддерживается увеличением сосудистого сопротивления за счет гипертрофии стенки сосудов малого круга кровообращения. Анализ сократительных ответов легочных сосудов на перфузию серотонина позволил заключить, что реактивность сосудов малого круга кровообращения определяется уровнем свободного серотонина в плазме крови, и как результат повышенного сопротивления легочных сосудов происходит структурная перестройка правого желудочка сердца. Когда степень гипертрофии правого желудочка достигает некоторого критического значения, то это затрагивает и большой круг кровообращения, что проявляется понижением системного давления.

Применение флуоксетина и тианептина позволило выявить ранний компонент реакции животных на действие монокротапина (изменение давления в хвостовой артерии и количества потребляемого корма), который можно рассматривать, как маркер для прогнозирования действия как активатора, так и ингибитора транспортера серотонина на развитие легочной гипертензии. Уровень свободного серотонина в плазме крови в будущем может стать эффективной терапевтической мишенью для коррекции легочной гипертензии, поскольку это заболевание по-прежнему остается большой проблемой клинической медицины. В связи с показанной в нашем исследовании возможностью как флуоксетина, так и тианептина не только предотвращать вазоконстрикцию, но и уменьшать ремоделирование легочных сосудов можно рекомендовать данные препараты для использования в качестве лекарственных средств при комплексной терапии легочной гипертензии после дальнейшего изучения маркера, выявляемого в ранние этапы развития гипертензии, который позволит использовать данные препараты в связи с индивидуальными особенностями развития заболевания.

ВЫВОДЫ

1. Хроническое применение флуоксетина при монокроталиновой легочной гипертензии в 50% случаев приводит к уменьшению степени развития данной патологии у животных, на что указывают уменьшение относительного веса правого желудочка и давления в нем, нормализация реактивности сосудов малого круга кровообращения и системного систолического давления.

2. Формирование давления в правом желудочке сердца при монокроталиновой форме легочной гипертензии преимущественно зависит от сосудосуживающих реакций сосудов малого круга кровообращения, опосредованных действием серотонина на рецепторы, а не определяется степенью ремоделирования легочных сосудов.

3. Реактивность легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина может определяться содержанием свободного серотонина в плазме крови. Нормализация констрикторных реакций сосудов малого круга кровообращения после хронического применения флуоксетина коррелирует с увеличением аккумуляции серотонина в тромбоцитах.

4. Хроническое применение тианептина в 70% случаев приводит к уменьшению степени развития монокроталиновой формы легочной гипертензии у животных, но степень развития изучаемой патологии не определяется уровнем свободного серотонина в плазме крови, так как тианептин увеличивает оборот данного моноамина.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Кожевникова В. В. Восстановление реактивности легочных сосудов на сосудосуживающие агенты у крыс с монокроталиновой формой легочной гипертензии при хронической блокаде транспортера серотонина [Текст] / В. В. Кожевникова, Н. А. Медведева // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2007. - Т. 70, № 4. - С. 26-29.

2. Кожевникова В. В. Хроническое применение блокатора транспортера серотонина (флуоксетина) уменьшает степень развития монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс [Текст] / В. В. Кожевникова, Н. А. Медведева // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2007. - Т. 70, № 5. - С. 15-18.

3. Кожевникова В. В. Влияние хронического применения блокатора транспортера 5-гидрокситриптамина на развитие легочной гипертензии у крыс [Текст] / В. В. Кожевникова, Н. А. Медведева // Тез. докл. XX съезд физиологического общества им.

И. П. Павлова, Москва, 4-8 июля 2007 г. - М„ 2007. - С. 267.

4. Кожевникова В. В. Хроническое применение блокатора транспортера 5-гидрокситриптамина уменьшает степень развития легочной гипертензии у крыс [Текст] / В.В. Кожевникова, Н. А. Медведева // Механизмы функционирования висцеральных систем. Тез. докл. V Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 100-летию со дня рождения В. Н. Черниговского. Санкт-Петербургпб, 16-19 октября, 2007. - С-Пб., 2007. - Стр. 152.

5. Kozhevnikova V. V. Chronic administration of serotonin transporter inhibitor (fluoxetine) decreases monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats [Текст] / V. V. Kozhevnikova, N. A. Medvedeva // The Scandinavian Physiological Society's Annual Meeting, Finland, Oulu, august 15-17, 2008. - Finland, Oulu, 2008. -P. 99.

6. Kozhevnikova V. V. Chronic administration of serotonin transporter inhibitor (fluoxetine) renders dual effect on the development of monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats [Текст] / V. V. Kozhevnikova, N. A. Medvedeva, M. V. Vorontsova, N. M. Gagloeva, О. V. Sagaydak, M. A. Zhukova // The 6-th Leiden International Medical Student Conference (L1MSC), The Netherlands, Leiden, March 12-14, 2009. - Netherlands, Leiden, 2009. - P. 108.

7. Kozhevnikova V. V. Differential effects of chronic fluoxetine treatment on the development of monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats [Текст] / V. V. Kozhevnikova, N. A. Medvedeva, M. V. Vorontsova, N. M. Gagloeva, О. V. Sagaydak, M. A. Zhukova // 19-th European Meeting on Hypertension, Italy, Milan, june 12-16, 2009. - Italy, Milan, 2009. - P. S300 (P29.403).

8. Kozhevnikova V. V. Dual effect of activation and inhibition serotonin transporter on the development of monocrotaline-induced pulmonary hypertension [Текст] / V. V. Kozhevnikova, N. A. Medvedeva, O. S. Medvedev // The 16-th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology (WorldPharma 2010), Denmark, Copenhagen, july 17-23, 2010. - Denmark, Copenhagen. - P. 789.

Список используемых в работе сокращений

Абс. вес л. ж. сердца - абсолютный вес левого желудочка сердца

К-к - группа контрольных животных, которым внутрижелудочно вводили через зонд

дистиллированную воду (контроль) К-т - группа контрольных животных, которым внутрижелудочно вводили через зонд

тианептин, растворенный в дистиллированной воде К-ф - группа контрольных животных, которым внутрижелудочно вводили через зонд

флуоксетин, растворенный в дистиллированной воде Мкт-к - группа животных с монокроталиной формой легочной гипертензии, которым

внутрижелудочно вводили дистиллированную воду (контроль) Мкт-т - группа животных с монокроталиной формой легочной гипертензии, которым

внутрижелудочно вводили тианептин, растворенный в дистиллированной воде Мкт-ф - группа животных с монокроталиной формой легочной гипертензии, которым

внутрижелудочно вводили флуоксетин, растворенный в дистиллированной воде ОИУК - оксииндолилуксусная кислота

Отн. вес пр. ж. сердца - относительный вес правого желудочка сердца Сист. давление - систолическое давление Хв.артерия - хвостовая артерия

Заказ№ 207-а/10/10 Подписано в печать 27.10.2010 Тираж 120 экз. Усл. п.л. 1

ООО "Цифровичок", тел. (495) 649-83-30 www.cfr.ru; e-mail:info@cfr.ru

Оглавление диссертации Кожевникова, Валерия Владимировна :: 2010 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

СОДЕРЖАНИЕ

I. Клиническая классификация легочной гипертензии.

II. Патогенез легочной гипертензии.

III. Модели легочной гипертензии.

IV. Факторы риска легочной гипертензии.

V. Серотонин: открытие, биосинтез, метаболизм.

VI. Физиологические функции серотонина.

VII. Транспортер серотонина: строение, механизм действия, роль в патогенезе легочной гипертензии.

VIII. Рецепторы серотонина.

IX. Взаимодействие транспортера и рецепторов серотонина при легочной гипертензии.

X. Терапия легочной гипертензии.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. Моделирование легочной гипертензии и деление животных на экспериментальные группы.

II. Методы изучения поведения животных.

III. Электроплетизмографическое измерение артериального давления в хвостовой артерии.

IV. Регистрация in vivo гемодинамических параметров с использованием имплантируемых катетеров.

V. Исследования in vitro реактивности изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина.

VI. Морфометрические исследования сердца и ветвей легочной артерии.

VII. Биохимические эксперименты.

VIII. Вещества, использовавшиеся в экспериментах. 41 IX. Статистический анализ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. Деление животных на экспериментальные группы. s

II. Влияние флуоксетина на степень развития легочной гипертензии. 47 Влияние флуоксетина на вес правого желудочка сердца.

Влияние флуоксетина на вес левого желудочка сердца и межжелудочковой перегородки.

Влияние флуоксетина на системное систолическое давление.

Влияние флуоксетина на поведение животных.

Влияние флуоксетина на вес животных.

Влияние флуоксетина на потребление корма.

III. Изучение влияния флуоксетина на давление в правом желудочке сердца, регистрируемое с использованием имплантируемых катетеров.

IV. Влияние флуоксетина на реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина.

V. Биохимические эксперименты. 63 Определение содержания серотонина в тромбоцитах. 63 Определение содержания серотонина и его метаболита ОИУК в плазме крови. 65 Определение содержания серотонина и его метаболита ОИУК в ткани легочных сосудов.

VI. Морфометрические исследования ветвей легочной артерии.

VII. Исследование влияния хронического применения активатора транспортера серотонина (тианептина) на развитие легочной гипертензии.

Влияние тианептина на степень развития легочной гипертензии. 76 Изучение влияния тианептина на давление в правом желудочке сердца, регистрируемое с использованием имплантируемых катетеров. 85 Влияние тианептина на реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина.

Биохимические эксперименты.

Морфометрические исследования.ветвей легочной артерии.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В РАБОТЕ СОКРАЩЕНИЙ

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Кожевникова, Валерия Владимировна, автореферат

Актуальность темы. Легочная артериальная гипертензия (ЛАГ) определяется как хроническое возрастание артериального давления в легочной артерии (величина систолического давления превышает 25 мм рт. ст. в покое и более 30 мм рт. ст. при физической нагрузке) [Galie N., 2004; Демьянченко С., 2009]. Заболевание характеризуется прогрессивным повышением легочного сосудистого сопротивления и гипертрофией правого желудочка сердца [Simonneau G., 2004; Волков А. В., 2008]. Имеется большое количество классификаций легочной гипертензии, но основной является деление ЛАГ на идиопатическую легочную гипертензию (ранее известную как первичная легочная гипертензия) и ЛАГ, возникающую как осложнение различных болезней органов кровообращения и дыхания (вторичная легочная гипертензия) [Rubin L. J., 1997; Тео Y. W., 2010]. Все эти состояния характеризуются развитием сходных нарушений в микроциркуляции системы легочной артерии, включая пролиферацию эндотелиальных клеток, гипертрофию гладкомышечных клеток, локальные тромбозы (in situ) [Nicod L. P., 2007]. Диагностировать легочную гипертензию на ранних этапах очень сложно, поэтому изучение развития и возможных причин этого заболевания, а также поиск новых методов лечения, осуществляют с помощью моделирования легочной гипертензии у животных [Robbins I. М., 2004; Bauer N. R., 2007; McMurty I. F., 2008]. В нашей работе была выбрана экспериментальная модель первичной легочной гипертензии, которая развивается после разовой инъекции монокроталина. Токсичный метаболит монокроталина, избирательно i действуя на сосуды малого круга кровообращения, вызывает дисфункцию эндотелия легочных сосудов [Dumitrascu R., 2008].

Большим достижением в выяснении последовательности патогенетических событий при ЛАГ стало обнаружение диффузной эндокринной системы легких, функциями которой являются регистрация изменения состава вдыхаемого воздуха и приспособление кровотока в соответствии с вентиляцией легких [Kemp P. J., 2002; Weichselbaum М., 2005; De Proost I., 2008]. При хронической гипоксии адаптивный ответ организма на изменение содержания кислорода во вдыхаемом воздухе заключается в гиперплазии нейроэпителиальных клеток. [Dahiya М., 2000] и увеличении выброса ими серотонина [Fu X. W., 2002], что способствует развитию вторичной легочной гипертензии. Напротив, при ЛАГ, обусловленной введением алкалоида монокроталина отмечено только повышение содержания свободного серотонина в малом круге кровообращения [Van Lommel А., 1999]. Увеличение концентрации свободного серотонина может иметь острые и хронические последствия. К острым относят вазоконстрикцию, которая возникает при действии серотонина на рецепторы типа 1В, увеличение экспрессии которых отмечено при первичной легочной гипертензии [Ullmer С., 1995; Cortijo J., 1997; Green A. R., 2006]. К хроническим последствиям относят пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток, которую может запускать серотонин, попадая внутрь гладкомышечных клеток легочных сосудов через транспортер, локализованный на их плазматической мембране [Eddahibi S., 2001]. Указанные изменения приводят к тому, что формируется стойкая легочная гипертензия с ремоделированием легочных сосудов, гипертрофией и ремоделированием правого желудочка сердца.

Задачи исследования. Для достижения цели настоящего исследования - были поставлены следующие задачи:

Оценить влияние хронического применения ингибитора транспортера серотонина флуоксетина на степень развития монокроталиновой формы легочной гипертензии.

Изучить влияние хронического ингибирования. транспортера серотонина на реактивность изолированных легочных сосудов в ответ на перфузию серотонина. ^ Провести анализ изменения содержания серотонина и его метаболита оксииндолилуксусной кислоты в крови и тканях легочных артерий после хронического применения флуоксетина. t Провести сравнительный анализ морфометрических параметров ветвей легочных артерий у животных всех экспериментальных групп.

Исследовать влияние хронического применения активатора транспортера серотонина тианептина на развитие легочной гипертензии.

Научная новизна работы. Получены результаты, свидетельствующие о том, что применение ингибитора транспортера серотонина флуоксетина или активатора транспортера серотонина тианептина при монокроталиновой легочной гипертензии может как уменьшать, так и потенциировать развитие данной патологии у животных. Анализ сократительных ответов легочных сосудов на перфузию серотонина позволил заключить, что реактивность сосудов малого круга кровообращения определяется уровнем свободного серотонина в плазме крови, и как результат повышенного сопротивления легочных сосудов происходит структурная перестройка правого желудочка сердца. Возрастание констрикторных ответов легочных сосудов является ведущим фактором в формировании давления в правом желудочке сердца, так как степень ремоделирования легочных сосудов уменьшалась как в группе с меньшей, так и в группе с большей степенью развития изучаемой патологии.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты, полученные в настоящей работе, конкретизируют существующие представления об участии транспортера серотонина в патогенезе первичной легочной гипертензии, которая моделируется введением монокроталина. Проведенное комплексное исследование, включающее в себя эксперименты in vivo и in vitro, а также изучение механизмов реализации физиологических реакций, позволило получить новые данные о взаимосвязи уровня свободного серотонина в плазме крови и реактивности легочных сосудов, играющей ведущую роль в формировании давления в. малом круге кровообращения при легочной гипертензии. Показано, что препараты, модулирующие активность транспортера серотонина, могут рассматриваться как потенциальные медикаментозные средства для комплексной терапии легочной гипертензии.

Положения, выносимые на защиту:

2. Главным компонентом, участвующим в повышении давления^ в малом круге кровообращения при монокроталиновой легочной гипертензии, является увеличение реактивности гладких мышц легочных сосудов к сосудосуживающим факторам и, в частности, к серотонину, которая поддерживается увеличением сосудистого сопротивления за счет ремоделирования стенки сосудов.

3. Нормализация- констрикторных реакций легочных сосудов после хронического применения флуоксетина у животных с монокроталиновой легочной гипертензией коррелирует с уменьшением действия свободного серотонина на рецепторы.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 2 статьи -в научных журналах, рекомендуемых ВАК, и 6 тезисов докладов — в сборниках материалов отечественных и международных конференций.

Заключение диссертационного исследования на тему "Анализ участия транспортера серотонина в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс линии wistar"

выводы

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В РАБОТЕ СОКРАЩЕНИЙ

ЛАГ — легочная артериальная гипертензия ЛГ — легочная гипертензия

5-НТ - 5-hydroxytryptamine, 5-гидрокситриптамин, серотонин ЦНС - центральная нервная система

HIF-1 - hypoxia inducible factor, индуцируемый гипоксией фактор-1 ЛСД - диэтиламид d-лизергиновой кислоты 5-НТ1.7 рецепторы - рецепторы серотонина 1-7 подтипов ПНС - периферическая нервная система ЖКТ - желудочно-кишечный тракт , ССС - сердечно-сосудистая система ГТФ-азы Rho A, Rac - семейство ферментов гидролаз, которые связывают и гидролизуют гуанозинтрифосфат (ГТФ) на консервативном G-домене, сходном для всех ГТФ-аз ROCK - Rho A-activated protein kinase, Rho А-активируемая киназа

ERK - extracellular signal-regulated kinase, регулируемая внеклеточными сигналами киназа

GATA-4, Erg-1, Elk-1 - транскрипционные факторы

PI3K - фосфатидилинозит-3-киназа

ФИФ2 - фосфатидилинозитол-дифосфат

ФИФз - фосфатидилинозитол-трифосфат

Akt - протеинкиназа В mTOR - mammalian target of rapamycin, белок-киназная субъединица внутриклеточных мультимолекулярных сигнальных комплексов mTORC mTORC - сигнальный комплекс, отвечающий за регуляцию клеточного роста NADPH-оксидаза - клеточный мембраносвязанный мультимолекулярный ферментный комплекс, катализирует окислительно-восстановительные реакции с участием кофермента никотинамидадениндинуклеотидфосфата (NADP) ROS - reactive oxygen species, активные формы кислорода

МЕК - mito gen-activated protein kinase kinase, киназа митоген-активируемой протеинкиназы к-к — группа контроль-контроль к-ф - группа контроль-флуоксетин к-т - группа контроль-тианептин мкт-к - группа монокроталин-контроль мкт-ф 1,2-группа монокроталин-флуоксетин, 1 и 2 подгруппы мкт-т 1,2 - группа монокроталин-тианептин, 1 и 2 подгруппы

RVW - right ventricle weight, вес правого желудочка сердца LVW - left ventricle weight, вес левого желудочка сердца

IVSW - interventricular septum weight, вес межжелудочковой перегородки сердца

ОИУК — оксииндолилуксусная кислота

К-клетки — клетки Кульчицкого

DH - наружный диаметр легочной артерии

DBH - внутренний диаметр легочной артерии

Тст - толщина стенки легочной артерии

DHBA - 3,4-диоксибензиламин, внутренний стандарт

5НТ]Пр - концентрация серотонина в пробе h„p - высота пика серотонина в пробе her - высота пика в стандарте

5-НТ]сг - концентрация серотонина в стандарте hDHBAcT — высота пика внутреннего стандарта DHBА в стандарте hüHBAnp - высота пика внутреннего стандарта DHBA в пробе

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Кожевникова, Валерия Владимировна

1. Волков А. В. Диагностика легочной-гипертензии при системной склеродермии // Современная ревматология. — 2008. — Вып. 4. — Стр. 22-26;

2. Гланц С. Медико-биологическая-статистика // Практика. 1999;

3. Демьянченко С. Легочная гипертензия: новые рекомендации ESC (2009) // Med. Rev. 2009. - Вып. 4(9). - Стр. 32-33;

4. Иззати-Заде К. Ф. Роль серотонина в патогенезе и- клинических проявлениях мигренозной атаки // Журн. Неврол. и Психиат. — 2007. Вып. 107(3). - Стр. 51-55;

5. Иззати-заде К. Ф., Баша А. В., Демчук Н. Д. Нарушения обмена серотонина в патогенезе заболеваний нервной системы // Журн. Неврол. и Психиат. — '2004. — Вып. 9. Стр. 62-70;

6. Измайлов Д. Ю. Виртуальная измерительная лаборатория PowerGraph // ПиКАД. — 2007. Вып. 3. - Стр. 42-47;

7. Маколкин В. И;, Овчаренко С. И. Внутренние болезни // Медицина. — 1999;

8. Мартынюк Т. В., Коносова И. Д., Чазова- И. Е. Современные подходы к медикаментозному лечению легочной гипертензии // Consilium medicum. 2003. -Вып. 5.-Стр. 5-10;

9. Мурашев А. Н., Медведев О. С., Давыдова С. А. Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения.// Изд-во СГУ. — 1992;

10. Узбеков M. Г. Нейрохимический механизм действия серотонинергического антидепрессанта тианептина: гипотеза // Журн. Неврол. и Психиат. — 2009. — Вып. 1. — Стр. 67-69;t

11. Филатова Е. Г., Вейн А. М. Фармакология боли // Русс. Мед. Ж. 1999. - Вып. 9. -Стр. 410-418;

12. Цырлин В. А. Бульбарный вазомоторный центр морфофункциональная и нейрохимическая организация // Артер. Гиперт. - 2003. - Вып. 9(3). — Стр. 77-81;

13. Alonso A., Garcia Rodriguez L. A., Logroscino G., Hernan M. A. Use of antidepressants and the risk of Parkinson's disease: a prospective study // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 2009. - Vol. 80(6). - P. 671-674;

14. Apparsundaram S., Stockdale D. J., Henningsen R. A., Milla M. E., Martin R. S. Antidepressants targeting the serotonin reuptake transporter act via a competitive mechanism//J. Pharmacol. Exp. Ther. -2008. Vol. 327(3). - P. 982-990;

15. Badesch D. В., Abman S. H., Ahearn G. S., Barst R. J., McCrory D. C., Simonneau G., McLaughlin V. V. Medical therapy for pulmonary arterial hypertension: ACCP evidence-based clinical practice guidelines // Chest. 2004. - Vol. 126. - P. 35-62;

16. Badesch D. В., Abman S. H., Simonneau G., Rubin L. J., McLaughlin V. V. Medical therapy for pulmonary arterial hypertension // Chest. 2007. — Vol. 131. - P. -1928;

17. Budhiraja R., Tuder R. M., Hassoun P. M. Endothelial dysfunction in pulmonary hypertension // Circulation. 2004. - Vol. 109. - P. 159-165;

18. Bunag R. D., Butterfield J. Tail-cuff blood pressure measurement without external preheating in awake rats // Hypertension. 1982. - Vol. 4. - P. 898-903;

19. Camilleri M. Serotonin in the gastrointestinal tract // Curr. Opin. Endocrinol. Diabetes Obes. 2009. - Vol. 16(1). - P. 53-59;

20. Campian M. E., Hardziyenka M., Michel M. C., Tan H. L. How valid are animal models to evaluate treatments for pulmonary hypertension? // Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 2006. - Vol. 373(6). - P. 391-400;

21. Caterson I. D. Obesity and its management // Aust. Prescr. 1999. - Vol. 22. - P. 12-16;

22. Cheatham L., Monfar M., Chou M. M., Blenis J. Structural and functional analysis of pp70S6k // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92(25). - P. 11696-11700;

23. Chen F., Larsen M. B., Neubauer H. A., Sarnchez C., Plenge P., Wiborg O. Characterization of an allosteric citalopram-binding site at the serotonin transporter // J. Neurochem 2005. - Vol. 92. - P. 21-28;

24. Chen J. G., Rudnick G. Permeation and gating residues in serotonin transporter // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol: 97(3). - P. 1044-1049;

25. Clozel M., Hess P., Rey M., Iglarz M., Binkert C., Qiu C. Bosentan, sildenafil, and their combination in the monocrotaline model of pulmonary hypertension in rats // Exp. Biol. Med. 2006. - Vol. 231. - P. 967-973;

26. Cohen K. Fen-Phen Nation // Frontline. 2003;

27. Collins T. J. ImageJ for microscopy // BioTechniques. 2007. - Vol. 43(1). - P. 25-30;

28. Connolly H. M, Crary J. L., McGoon M. D., Hensrud D. D., Edwards B. S., Edwards W. D., Schaff H. V. Valvular heart disease associated with Fenfluramine-Phentermine // N. Engl. J. Med. 1997. - Vol. 337 (9). - P. 581-588;

29. Cornfield D. N., Resnik E. R., Herron J. M., Reinhartz O., Fineman J. R. Pulmonary vascular K+ channel expression and vasoreactivity in a model of congenital heart disease // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2002. - Vol. 283. - P. 1210-1219;

30. Cowan K. N., Heilbut A., Humpl T., Lam C., Ito S., Rabinovitch M. Complete reversal of fatal pulmonary hypertension in rats by a serine elastase inhibitor // Nat. Med. — 2000. -Vol. 6. P. 698-702;

31. Crona D., Harrall J., Adnot S., Eddahibi S., West J. Gene expression in lungs of mice lacking the 5-hydroxytryptamine transporter gene // BMC Pulm. Med. 2009. - Vol. 9. -P. 19-26;

32. Dahiya M., Husain A. N., Pathologic quiz case: patient with chronic obstructive pulmonary disease // Arch. Pathol. Lab. Med. 2000. - Vol. 124. - P. 171-173;

33. Dahl C. F., Allen M. R., Urie P. M., Hopkins P. N. Valvular regurgitation and surgery associated with fenfluramine use: an analysis of 5743 individuals // BMC Medicine. — 2008.-Vol. 6.-P. 34-46;

34. Davies R. J., Morrell N. W. Molecular mechanisms of pulmonary arterial hypertension// Chest.-2008.-Vol. 134.-P. 1271-1277;61. de Caestecker M. Serotonin signaling in pulmonary hypertension // Circ. Res. 2006. -Vol. 98.-P. 1229-1231;

35. Dempsie Y., MacLean M. R. Pulmonary hypertension: therapeutic targets within the serotonin system // Br. J. Pharmacol. 2008a. - Vol. 155. - P. 455-462;

36. Dorfmuller P., Perros F., Balabanian K., Humbert M. Inflammation in pulmonary arterial hypertension // Eur. Respir. J. 2003. - Vol. 22. - P. 358-363;

37. Du L., Sullivan C. C., Chu D., Cho A. J., Kido M., Wolf P. L., Yuan J. X.-J., Deutsch R., Jamieson S. W., Thistlethwaite P. A. Signaling molecules in nonfamilial pulmonary hypertension // N. Engl. J. Med. 2003. - Vol. 348. - P. 500-509;

38. Dupuis J., Hoeper M.4 M. Endothelin receptor antagonists in pulmonary arterial hypertension // Eur. Respir. J. 2008. - Vol. 31. - P. 407-415;

39. Durmowicz A. G., Stenmark K. R. Mechanisms of structural remodeling in chronic pulmonary hypertension // Pediatr. Rev. 1999. - Vol. 20. - P. 91-102;

40. Eddahibi S., Adnot S. Anorexigen-induced pulmonary hypertension and the serotonin (5-HT) hypothesis: lessons for the future in pathogenesis // Respir Res. — 2002. — Vol. 3 (1). -P. 9-13;

41. Eddahibi S., Hanoun N., Lanfumey L., Lesch K. P., RafFestintB., Hamon M., Adnot S.- Attenuated hypoxic pulmonary hypertension in mice lacking the 5-hydroxytryptaminetransporter gene // J. Clin. Invest. 2000. - Vol. 105. - P. 1555-1562;

42. Eddahibi S., Humbert M., Fadel E., Raffestin B., Darmon M., Capron F., Simonneau G., Dartevelle P., Hamon M., Adnot S. Serotonin transporter overexpression is responsible

43. Barrett G. M., Bardi M., Guillen A. K., Mori A., Shimizu K. Regulation of sexual behaviour in male macaques by sex steroid modulation of the serotonergic system // Exp. Physiol. 2006. - Vol. 91(2). - P: 445-456;

44. Bauer N. R., Moore T. M., McMurtry I. F. Rodent models of PAH: are we there yet? // Am. J! Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2007. - Vol. 293. - P. 580-582;

45. Berger G., Azzam Z. S.,-Hoffman R., Yigla M. Coagulation^ and anticoagulation in pulmonary arterial hypertension // Isr. Med. Assoc. J. 2009. - Vol. 11 (6). - P. 376-378;

46. Borsini F., Meli A. Is the forced swimming test a' suitable model for revealing antidepressant activity? // Psychopharmacol. 1988. - Vol. 94. - P! 147-160;

47. Bray G. A. Drug insight: appetite suppressants // Nat. Clin: Pract. Gastroenterol. Hepatol. 2005. - Vol. 2(2). - P. 89-95;

48. Brouns I., Adriaensen D., Burnstock G., Timmermans J.-P. Intraepithelial vagal sensory nerve terminals in rat pulmonary neuroepithelial" bodies express P2X3 receptors // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2000. - Vol: 23. - P. 52-61;

49. Brunner F. Cardiac endothelin and,big endothelin in right-heart hypertrophy due to monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rat // Cardiovasc. Res. 1999. — Vol. 44.-P. 197-206;

50. Eddahibi S., Raffestin B., Launay J.-M., Sitbon M., Adnot S. Effect of dexfenfluramine treatment in rats exposed to acute and chronic hypoxia // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1998.-Vol. 157.-P. 1111-1119;

51. Egermayer P., Peacock A. J. Is pulmonary embolism a common cause of chronic pulmonary hypertension? Limitations of the embolic hypothesis // Eur. Respir. J. — 2000. -Vol. 15.-P. 440-448;

52. Egermayer P., Town G. I., Peacock A. J. Role of serotonin in the pathogenesis of acute and chronic pulmonary hypertension // Thorax. 1999. — Vol. 54. - P. 161-168;

53. Eickelberg O., Yeager M. E., Grimminger F. The tantalizing triplet of pulmonary hypertension-BMP receptors, serotonin receptors, and angiopoietins // Cardiovasc. Res. -2003. Vol. 60(3). - P. 465-467;

54. Fanburg B. L., Lee S. L. A new role for an old molecule: serotonin as a mitogen // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 1997. - Vol. 272. - P. 795-806;

55. Farber H. W., Loscalzo J. Mechanisms of disease. Pulmonary arterial hypertension // N. Engl. J. Med. 2004. - Vol. 351. - P. 1655-1665;

56. Feng M., Whitesall S., Zhang Y., Beibel M., D'Alecy L., DiPetrillo K. Validation of volume-pressure recording tail-cuff blood pressure measurements // Am. J. Hypertens. -2008.-Vol. 21(12).-P. 1288-1291;

57. Fishman A. P. Acute hypoxia and pulmonary vasoconstriction in humans: uncovering the mechanism of the pressor response // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2004b. -Vol. 287. - P. 893-894;

58. Fishman A. P. Aminorex to Fen/Phen: an epidemic foretold // Circulation. 1999. - Vol. 99.-P. 156-161;

59. Fishman A. P. Primary pulmonary arterial hypertension: A look back // J. Am. Coll. Cardiol. 2004a. - Vol. 43. - P. 2-4;

60. Follath F., Burkart F., Schweizer W. Drug-induced pulmonary hypertension? // Br. Med. J. 1971. - Vol. 1. - P. 265-266;

61. Fornaro E., Li D., Pan J., Belik J. Prenatal exposure to fluoxetine induces fetal pulmonary hypertension in the rat // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2007. - Vol. 176. - P. 10351040;

62. Friedman R., Mears J. G., Barst R. J. Continuous infusion of prostacyclin normalizes plasma markers of endothelial cell injury and platelet aggregation in primary pulmonary hypertension// Circulation. 1997. - Vol. 96. - P. 2782-2784;

63. Fu X. W., Nurse C. A., Wang Y. T., Cutz E. Selective modulation of membrane currents < by hypoxia in intact airway chemoreceptors from neonatal rabbit // J. Physiol. 1999.1. Vol. 514(1).-P. 139-150;

64. Fu X. W., Nurse C. A., Wong V., Cutz E. Hypoxia-induced secretion of serotonin from intact pulmonary neuroepithelial bodies in neonatal rabbit'// J. Physiol. — 2002. — Vol. 539(2).-P. 503-510;

65. Fu X. W., Wang D., Pan J., Farragher S. M., Wong V., Cutz E. Neuroepithelial bodies inimammalian lung express functional serotonin type 3 receptor // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2001. - Vol. 281. - P. 931-940;

66. Gaine S. P., Rubin L. J., Kmetzo J. J., Palevsky H: I., Traill T. A. Recreational use of aminorex and pulmonary hypertension //Chest. 2000. - Vol. 118. - P. 1496-1497;

67. Am.s Coll. Cardiol. 2003. - Vol. 42 (1). - P. 158-164;i

68. Glatz K., Mossner R., Heils A., Lesch K. P. Glucocorticoid-regulated human serotonin transporter (5-HTT) expression is modulated by the 5-HTT gene-promotor-linked polymorphic region // J. Neurochem. 2003. - Vol. 86. - P. 1072-1078;

69. Gohar O. Contribution of ion channels in pain sensation // Modulator. 2005. - Vol. 19. -P. 9-13;

70. Green A. R. Neuropharmacology of 5-hydroxytryptamine // Br. J. Pharmacol. -2006.-Vol. 147.-P. 145-152;

71. Guide for the care and use of laboratory animals // National Academy Press. — 1996;

72. Guyton K. Z., Liu Y., Gorospe M., Xu Q., Holbrook N. J. Activation of mitogen-activated protein kinase by H2O2. Role in cell survival following oxidant injury // J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271(8). - P. 4138-4142;

73. Hamidi S. A., Prabhakar S., Said S. I. Enhancement of pulmonary vascular remodelling and inflammatory genes with VIP gene deletion // Eur. Respir. J. — 2008. — Vol. 31.-P. 135-139;

74. Hampl V., Herget J. Role of nitric oxide in the pathogenesis of chronic pulmonary hypertension // Physiol. Rev. 2000. - Vol. 80. - P. 1337-1372;

75. Hay N., Sonenberg N. Upstream and downstream of mTOR // Genes Dev. 2004. -Vol. 18(16).-P. 1926-1945;

76. Hegde S. S., Eglen R. M. Peripheral 5-HT4 receptors // FASEB J. 1996. - Vol. 10(12).-P. 1398-1407;

77. Heils A., Teufel A., Petri S., Stôber G., Riederer P., Bengel D., Lesch K. P. Allelic variation of human serotonin transporter gene expression// J. Neurochem. — 1996. -Vol. 66.-P. 2621-2624;

78. Hill N. S., Warburton R. R., Pietras L., Klinger J. R. Nonspecific endothelin-receptor antagonist blunts monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats // J. Appl. Physiol. 1997. - Vol. 83. - P. 1209-1215;

79. Hirsjarvi P., Valiaho T. Effects of gentling on open-field behaviour of Wistar rats in fear-evoking test situation // Lab. Anim. 1995. - Vol. 29(4). - P. 380-384;

80. Hodges M. R., Richerson G. B. Interaction between defects in ventilatory and thermoregulatory control in mice lacking 5-HT neurons // Respir. Physiol. Neurobiol. — 2008. Vol. 164(3). - P. 350-357;

81. Howell K., Ooi H., Preston R., McLoughlin P. Structural basis of hypoxic pulmonary hypertension: the modifying effect of chronic hypercapnia // Exp. Physiol. —2004.-Vol. 89.-P. 66-72;

82. Humbert M., Morrell N. W., Archer S. L., Stenmark K. R., MacLean M. R., Lang I. M., Christman B. W., Weir E. K., Eickelberg O., Voelkel N. F., Rabinovitch M.

83. Cellular and molecular pathobiology of pulmonary arterial hypertension // J. Am. Coll. Cardiol. 2004. - Vol. 43. - P. 13-24;

84. Humbert M., Trembath R. C. Genetics of pulmonary hypertension: from bench to bedside // Eur. Respir. J. 2002. - Vol. 20. - P. 741-749;

85. Ito K. M., Sato M., Ushijima K., Nakai M., Ito K. Alterations of endothelium and smooth muscle function in monocrotaline-induced pulmonary hypertensive arteries // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2000. - Vol. 279. - P. 1786-1795;

86. Jackson K. Phen/Fen // Nutrition Bytes. 1997. - Vol. 3(2). - P. 1-5;

87. Johnson S. R., Granton J. T., Mehta S. Thrombotic arteriopathy and anticoagulation in pulmonary hypertension // Chest. 2006. - Vol. 130. - P. 545-552;

88. Kay J. M:, Smith P., Heath D. Aminorex and the pulmonary circulation // Thorax. 1971. - Vol. 26. - P. 262-270;

89. Kemp P. J., Lewis A., Hartness M. E., Searle G. J., Miller P., O'Kelly I., Peers C. Airway chemotransduction: from oxygen sensor to cellular effector // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002. - Vol. 166. - P. 17-24;

90. Khoury C. K., Couch J. R. Sumatriptan-naproxen fixed combination for acute treatment of migraine: a critical appraisal // Drug Des. Devel. Ther. 2010. - Vol. 4. - P. 9-17;

91. Krug S., Sablotzki A., Hammerschmidt S., Wirtz H., Seyfarth H. J. Inhaled iloprost for the control of pulmonary hypertension // Vase. Health Risk Manag. 2009. — Vol. 5 (l).-P. 465-474;

92. Kugathasan L., Dutly A. E., Zhao Y. D.s Deng Y., Robb M. J., Keshavjee S., Stewart D. J. Role of angiopoietin-1 in experimental and human pulmonary arterial hypertension // Chest. 2005. - Vol. 128. - P. 633-642;

93. Kushnir-Sukhov N. M., Gilfillan A. M., Coleman J. W., Brown J. M., Bruening S., Toth M., Metcalfe D. D. 5-Hydroxytryptamine induces mast cell adhesion and migration // J. Immunol. 2006. - Vol. 177(9). - P. 6422-6432;

94. Laçasse J. R., Leo J. Serotonin and depression: a disconnect between the advertisements and the scientific literature // PLoS Med. 2005. - Vol. 2(12). - P. 12111216;

95. Lai H., Woodward B., Williams K. I. Investigation of the contributions of nitric oxide and prostaglandins to the actions of endothelins and sarafotoxin 6c in rat isolated perfused lungs // Br. J. Pharmacol. 1996. - Vol. 118(8). - P. 1931-1938;

96. Lame M. W., Jones A. D., Wilson D. W., Dunston S. K., Segall H. J. Protein targets of monocrotaline pyrrole in pulmonary artery endothelial cells // J. Biol. Chem. — 2000. Vol. 275(37). - P. 29091-29099;

97. Lechin F., van der Dijs B., Lechin A. E. Circulating serotonin, catecholamines, and central nervous system circuitry related to some cardiorespiratory, vascular, and hematological disorders // J. Appl. Res. 2005. - Vol. 5(4). - P. 605-621;

98. Lee S. L., Simon A. R., Wang W. W., Fanburg B. L. H202 signals 5-HT-induced ERK MAP kinase activation and mitogenesis of smooth muscle cells // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2001. - Vol. 281. - P. 646-652;

99. Lee S. L., Wang W. W., Finlay G. A., Fanburg B. L. Serotonin stimulates mitogen-activated protein kinase activity through the formation of superoxide anion // Am. J. Physiol. 1999. - Vol. 277(2 Pt 1). - P. 282-291;

100. Lee S. L., Wang W. W., Moore B. J., Fanburg B. L. Dual effect of serotonin on growth of bovine pulmonary artery smooth muscle cells in culture // Circ. Res. — 1991. — Vol. 68.-P. 1362-1368;

101. Levy A. S., Chung J. C. S., Kroetsch J. T., Rush J. W. E. Nitric oxide and coronary vascular endothelium adaptations in hypertension // Vase. Health Risk Manag. — 2009. Vol. 5. - P. 1075-1087;

102. Liang J., Slingerland J. M. Multiple roles of the PI3K/PKB (Akt) pathway in cell cycle progression // Cell Cycle. 2003. - Vol. 2(4). - P. 339-345;

103. Linder A. E., Ni W., Diaz J. L., Szasz T., Burnett R., Watts S. W. Serotonin (5-HT) in veins: not all in vain // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2007. - Vol. 323(2). - P. 415421;

104. Linnoila R. I. Functional facets of the pulmonary neuroendocrine system // Lab. Invest. 2006. - Vol. 86. - P. 425-444;

105. Liu Y., Fanburg B. L. Phospholipase D signaling in serotonin-induced mitogenesis of pulmonary artery smooth muscle cells // Am. J. Physiol.' Lung Cell. Mol. Physiol. 2008. - Vol. 295. - P. 471-478;

106. Liu Y., Suzuki Y. J., Day R. M., Fanburg B. L. Rho kinase-induced nuclear translocation of ERK1/ERK2 in smooth muscle cell mitogenesis caused by serotonin // Circ. Res. 2004. - Vol. 95(6). - P. 579-586;

107. Loscalzo J., Genetic clues to the cause of primary pulmonary hypertension // N. Engl. J. Med. 2001. - Vol. 345 (5). - P. 367-371;

108. MacLean M. R. Pulmonary hypertension and the serotonin hypothesis: where are we now? // Int. J. Clin. Pract. 2007. - Vol. 61 (156). - P. 27-31 ;

109. MacLean M. R., Herve P., Eddahibi S., Adnot S. 5-hydroxytryptamine and the pulmonary circulation: receptors, transporters and relevance to pulmonary arterial hypertension // Br. J. Pharmacol. 2000. - Vol. 131.-P. 161-168;

110. Malkoff J. Non-invasive blood pressure for mice and rats // Animal Lab. News. -2005.-P. 1-8;

111. Marcos E., Adnot S., Pham M. H., Nosjean A., Raffestin B., Hamon M., Eddahibi S. Serotonin transporter inhibitors protect against hypoxic pulmonary hypertension // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2003. - Vol. 168. - P. 487^193;

112. Marcos E., Fadel E., Sanchez O., Humbert M., Dartevelle P., Simonneau G., Hamon M., Adnot S., Eddahibi S. Serotonin-induced smooth muscle hyperplasia in various forms of human pulmonary hypertension // Circ. Res. 2004. - Vol. 94(9). — P. 1263-1270;

113. Mark E. J., Patalas E. D., Chang H. T., Evans R. J., Kessler S. C. Fatal pulmonary hypertension associated with short-term use of Fenfluramine and Phentermine // N. Engl. J. Med. 1997. - Vol. 337. - P. 602-606;

114. Marsboom G. R., Janssens S. P. Models for pulmonary hypertension // Drug Discov. Today: Disease Models. 2004. - Vol. 1(3). - P. 289-296;

115. McMurty I. F. Animal models of human severe PAH // Pulmonary Hypertension. 2008. - Vol. 7(3). - P. 20-24;

116. Menard G., Turmel V., Bissonnette E. Y. Serotonin modulates the cytokine network in the lung: involvement of prostaglandin E2 // Clin. Exp. Immunol. 2007. -Vol. 150(2).-P. 340-348;

117. Meyer J. H. Imaging the serotonin transporter during major depressive disorder and antidepressant treatment // J. Psychiatry Neurosci. 2007. - Vol. 32(2). - P. 86-102;

118. Mitro P., Hijova E., Mudrakova K. Role of the peripheral serotoninergic system in the pathogenesis of vasovagal syncope // Bratisl. Lek. Listy. — 2006. — Vol. 107(6-7). P. 248-252;

119. Morecroft I., Heeley R. P., Prentice H. M., Kirk A., MacLean M. R. 5-hydroxytryptamine receptors mediating'contraction tin human'small muscular pulmonary arteries: importance of the 5-HTib receptor // Br. J. Pharmacol. 1999. - Vol. 128. - P. 730-734;

120. Murphy D. L., Lerner A., Rudnick.G., Lesch K. P. Serotonin transporter: gene, genetic disorders, and pharmacogenetics // Mol. Interv. 2004. - Vol. 4(2). - P.' 109-123;

121. Naeije R., Brimioulle S. Physiology in medicine: importance of hypoxic pulmonary vasoconstriction in maintaining arterial oxygenation during acute respiratory failure // Crit. Care. 2001. - Vol. 5. - P. 67-71;

122. Nathan S. D., Noble P. W., Tuder R. M. Idiopathic pulmonary fibrosis and pulmonary hypertension. Connecting the dots // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2007. -Vol. 175.-P. 875-880;

123. Nicod L. P. The endothelium and genetics in pulmonary arterial hypertension // Swiss. Med. Wkly. 2007. - Vol. 137. - P. 437-442;

124. O'Kelly I., Lewis A., Peers C., Kemp P. J. O2 sensing by airway chemoreceptor-derived cells: protein kinase C activation reveals functional evidence for involvement of NADPH oxidase // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275(11). - P. 7684-7692;

125. Ortiz J., Artigas F. Effects of monoamine uptake inhibitors on extracellular and platelet 5-hydroxytryptamine in rat blood: different effects of clomipramine and fluoxetine // Br. J. Pharmacol. 1992. - Vol. 105(4). - P. 941-946;

126. Ossowska G., Danilczuk Z., Klenk-Majewska B., Czajkowski L., Zebrowska-Lupina I. Antidepressants in chronic unpredictable mild stress (CUMS)-induced deficit of fighting behavior // Pol. J. Pharmacol. 2004. - Vol. 56(3). - P. 305-311;

127. Pauwels P. J. 5-HT receptors and their ligands // Tocris Rev. 2003. - Vol. 25. -P. 1-11;

128. Petit-Demouliere B., Chenu F., Bourin M. Forced" swimming test in mice: a review of antidepressant activity // Psychopharmacol. — 2005. — Vol. 177. P. 245—255;

129. Pietra G. G., Capron F., Stewart S., Leone O., Humbert M., Robbins I. M., Reid L. M., Tuder R. M. Pathologic assessment of vasculopathies in pulmonary hypertension // J. Am. Coll. Cardiol. 2004. - Vol. 43. - P. 25-32;

130. Pihl R. O., Lemarquand D. Serotonin and aggression and the alcohol-aggression relationship // Alcohol Alcoholism. 1998. - Vol. 33(1). - P. 55-65;

131. Rabinovitch M. Linking a serotonin transporter polymorphism to vascular smooth muscle proliferation in patients with primary pulmonary hypertension // J. Clin. Invest. -2001.-Vol. 108.-P. 1109-1111;

132. Rabinovitch M. Molecular pathogenesis of pulmonary arterial hypertension // J. Clin. Invest. -2008. Vol. 118(7). - P. 2372-2379;

133. Ramos M. F., Lame M. W., Segall H. J., Wilson D. W. Smad signaling in the rat model of monocrotaline pulmonary hypertension // Toxicol. Pathol. — 2008. — Vol. 36. — P. 311-320;

134. Rhodes J. Comparative physiology of hypoxic pulmonary hypertension: historical clues from brisket disease // J. Appl. Physiol. 2005. - Vol. 98. - P. 1092-1100;

135. Rich J., Hoeper M. M. The search for an oral prostanoid* tot treat pulmonary arterial hypertension continues. Are we getting any closer? // Int. J. Clin. Pract. 2009. — Vol. 63 (161).-P. 17-18;

136. Rich S. Prostacyclin and primary pulmonary hypertension // Ann. Intern. Med. — 1994. Vol. 121. - P. 463-464;

137. Robbins I. M. Advancing therapy for pulmonary arterial hypertension. Can animal models help? // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2004. - Vol. 169; - P. 5-6;

138. Rosenberg H. C., Rabinovitch M. Endothelial injury and vascular reactivity in monocrotaline pulmonary hypertension // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. — 1988. — Vol. 255(6).-P. 1484-1491;

139. Rothman R. B., Ayestas M. A., Dersch C. M., Baumann M. H. Aminorex, fenfluramine, and chlorphentermine are serotonin transporter substrates: implications for primary pulmonary hypertension // Circulation. 1999. - Vol.' 24 (8). - P. 869-875;

140. Rothman R. B., Baumann M. H. Methamphetamine and idiopathic pulmonary arterial hypertension: role of the serotonin transporter // Chest. 2007. - Vol. 132(4). -P. 1412-1413;

141. Rubin L. J. Primary pulmonary hypertension // N. Engl. J. Med. 1997. - Vol. 336.-P. 111-117;

142. Rubin L. J., Badesch D. B., Barst R. J., Galie N. Black C. M., Keogh A., Pulido T., Frost A., Roux S., Leconte I., Landzberg M., Simonneau G., Bosentan therapy for pulmonary arterial hypertension //N. Engl. J. Med. 2002. - Vol. 346 (12). - P. 896-903;

143. Rudge J. S., Thurston G., Yancopoulos G. D. Angiopoietin-1 and pulmonary hypertension: cause or cure? // Circ. Res. 2003. - Vol. 92. - P. 947-949;

144. Rudnick G. Biogenic amine transporters of the plasma membrane // Elsevier Science. 1996. - Vol. 2. - P 381-404;

145. Sakao S., Tatsumi K., Voelkel N. F. Endothelial cells and pulmonary arterial hypertension: apoptosis, proliferation, interaction and transdifferentiation // Resp. Res. — 2009. Vol. 10 (1). - P. 95-105;

146. Sauvageau S., Thorin E., Caron A., Dupuis J. Endothelin-1-induced pulmonary vasoreactivity is regulated by ET A and ET B receptor interactions // J. Vase. Res. — 2007. Vol. 44. - P. 375-381;

147. Sham J. S. K. Hypoxic pulmonary vasoconstriction: ups and downs of reactive oxygen species // Circ. Res. 2002. - Vol. 91. - P. 649-651;

148. Sommer N., Dietrich A., Schermuly R. T., Ghofrani H. A., Gudermann T., Schulz R., Seeger W., Grimminger F., Weissmann N. Regulation of hypoxic pulmonary vasoconstriction: basic mechanisms // Eur. Respir. J. 2008. - Vol. 32. - P. 1639-1651;

149. Song D., Wang H. L., Wang S., Zhang X. H. 5-Hydroxytryptamine-induced proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells are extracellular signal-regulated kinase pathway dependent // Acta Pharmacol. Sin. 2005. - Vol. 26(5). - P. 563-567;

150. Steiner M. K., Syrkina O. L., Kolliputi N., Mark E. J., Hales C. A., Waxman A. B.t1.terleukin-6 overexpression induces pulmonary hypertension // Circ. Res. — 2009. — Vol. 104.-P. 236-244;

151. Stenmark K. R., Davie N., Frid M;, Gerasimovskaya E., Das M. Role of the adventitia in pulmonary vascular remodeling // Physiology. — 2006. Vol. 21(2). — P. 134-145;

152. Stenmark K. R., McMurtry I. F. Vascular remodeling versus vasoconstriction in chronic hypoxic pulmonary hypertension: a time for reappraisal? // Circ. Res. — 2005. — Vol. 97. P. 95-98;

153. Strange J. W., Wharton J., Phillips P. G., Wilkins M. R. Recent insights into the pathogenesis and therapeutics of pulmonary hypertension // Clin. Sci. (Lond). — 2002. — Vol. 102(3).-P. 253-268;

154. Summers C. H., Winberg S. Interactions between the neural regulation of stress and aggression // J. Exp. Biol. 2006. - Vol. 209. - P. 4581-4589;

155. Suzuki Y. J., Day R. M., Tan C. C., Sandven T. H., Liang Q., Molkentin J. D., Fanburg B. L. Activation of GATA-4 by serotonin in pulmonary artery smooth muscle cells // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278(19). - P. 17525-17531;

156. Tavoulari S., Forrest L. R., Rudnick G. Fluoxetine (prozac) binding to serotonin transporter is modulated by chloride and conformational«changes // J. Neurosci. 2009. — Vol. 29(30). - P. 9635-9643;

157. Teo Y. W., Greenhalgh D. L.' Update on anaesthetic approacht to- pulmonary hypertension// Eur. J. Anaesthesiol. 2010. - Vol: 27(4). - P. 317-323;

158. Thomson-J. R:, Trembath R. K. Primary pulmonary hypertension: the pressure rises for a gene // J. Clin; Pathol. 2000. - Vol. 53". - P. 899-903;

159. Tsai B. M., Wang M., Turrentine M. W., Mahomed Y., Brown J. W., Meldrum D. R. Hypoxic pulmonary vasoconstriction in cardiothoracic surgery: basic mechanisms to potential therapies // Ann. Thorac. Surg. 2004. - Vol. 78. - P. 360-368;

160. Tu V. C., Bahl J. J., Chen Q. M. Signals, of oxidant-induced cardiomyocyte hypertrophy: key activation of p70 S6 kinase-1 and phosphoinositide 3-kinase // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2002. - Vol. 300(3). - P. 1101-1110;

161. Tuder R. M., Marecki J. C., Richter A., Fijalkowska I., Flores S. Pathology of pulmonary hypertension // Clin. Chest Med: 2007. - Vol. 28(1). - P. 23-42;

162. Ullmer C., Boddeke H. G. W. M., Schmuck K., Lubbert H. 5-HT2B receptor-mediated calcium release from' ryanodine-sensitive intracellular stores in humanpulmonary artery endothelial cells // Br. J. Pharmacol. 1996. - Vol. 117. - P. 10811088;

163. Ullmer C., Schmuck K., Kalkman H.O., Lobbert H. Expression of serotonin receptor mRNAs in blood vessels // FEBS Lett. 1995. - Vol. 370. - P. 215-221;

164. Van Lommel A., Bolle T., Fannes W., Lauweryns J. M. The pulmonary neuroendocrine system: the past decade // Arch. Histol. Cytol. 1999. - Vol. 62(1). - P. 1-16;

165. Voelkel N. F., Tuder R. M. Hypoxia-induced pulmonary vascular remodeling: a model for what human disease? // J. Clin. Invest. 2000. - Vol. 106(6). - P. 733-738;

166. Voelkel N. F., Tuder R. M., Bridges J., Arend W. P. Interleukin-1 receptorantagonist treatment reduces pulmonary hypertension generated in rats by monocrotaline

167. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1994. - Vol. 11(6). - P. 664-675;

168. Waif A. A., Frye C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents // Nature Protocols. 2007. - Vol. 2(2). - P. 322-328;

169. Wang H.-L., Dong X., Zhang X.-H., Xing J. 5-HTiB receptor augmented 5-HT vasoconstrictor response of pulmonary artery in monocrotaline-induced pulmonary hypertensive rats // Acta Pharmacol. Sin. 2001. - Vol. 22 (3). - P. 269-273;

170. Wang X., Li W., Williams M., Terada N., Alessi D. R., Proud C.G. Regulation of elongation factor 2 kinase by p90 (RSK1) and p70 S6 kinase // EMBO J. 2001. - Vol. 20(16).-P. 4370-4379;

171. Watts S. W. 5-HT in systemic hypertension: foe, friend or fantasy? // Clin. Sci. (Lond). 2005. - Vol. 108(5). - P. 399-412;

172. Weichselbaum M., Sparrow M. P., Hamilton E. J., Thompson P. J., Knight D. A. A confocal microscopic study of solitary pulmonary neuroendocrine cells in human airway epithelium // Resp. Res. 2005. - Vol. 6. - P. 115-126;

173. Weir E. K., Archer S. L. The mechanism of acute hypoxic pulmonary vasoconstriction: the tale of two channels // FASEB J. 1995. - Vol. 9. - P. 183-189;

174. Weir E. K., Hong Z., Varghese A. The serotonin transporter: a vehicle to elucidate pulmonary hypertension? // Circ. Res. 2004. - Vol. 94. - P. 1152-1154;

175. White K. J., Walline C. C., Barker E. L. Serotonin transporters: implications for antidepressant drug development // AAPS J. 2005. - Vol. 7(2). - P. 421-433;

176. Will J. A., Bisgard G. E. Haemodynamic effects of oral aminorex and amphetamine in unanaesthetized beagle dogs // Thorax. — 1972. — Vol. 27. — P. 120-126;

177. Xie Z., Lee S. P., O'Dowd B. F., George S. R. Serotonin 5-HT.B and 5-HT]D receptors form homodimers when expressed alone and heterodimers when co-expressed // FEBS Lett. 1999. - Vol. 456(1). - P. 63-67;

178. Yuki H., Sato S., Arisaka Y., Kato S., Tomoike H. V. Orally administered beraprost sodium inhibits pulmonary hypertension induced by monocrotaline in rats // Tohoku J. Exp. Med. 1994. - Vol. 173. - P. 371-375;

179. Zhang T. T., Cui B., Dai D. Z. Downregulation of Kv4.2 and Kv4.3 channel gene expression in right ventricular hypertrophy induced by monocrotaline in rat // Acta Pharmacol. Sin. 2004. - Vol. 25(2). - P. 226-230;

180. Zhu S. P., Mao Z. F., Huang J., Wang J. Y. Continuous fluoxetine administration prevents recurrence of pulmonary arterial hypertension and prolongs survival in rats // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2009. - Vol. 36(8). - P. 1-5;

181. Zielinski J. Effects of intermittent hypoxia on pulmonary haemodynamics: animal models versus studies in humans // Eur. Respir. J. 2005. — Vol. 25. - P. 173-180;

182. Zolkowska D., Baumann M. H., Rothman R. B. Chronic fenfluramine administration increases plasma serotonin (5-hydroxytryptamine) to nontoxic levels // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2008. - Vol. 324(2). - P. 791-797.1. БЛАГОДАРНОСТИ

Автореферат диссертации по медицине на тему Анализ участия транспортера серотонина в развитии монокроталиновой формы легочной гипертензии у крыс линии wistar

Оглавление диссертации Кожевникова, Валерия Владимировна :: 2010 :: Москва

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Кожевникова, Валерия Владимировна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Кожевникова, Валерия Владимировна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций