Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Создание лекарственных препаратов на основе фитохимического изучения некоторых видов наиболее распространенных растений, применяемых в народной медицине Монголии

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ УКРАИНСКАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи

ДЭНСМААГИЙН ДУНГЭРДОРЖ

СОЗДАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ФОТОХИМИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЕННЫХ РАСТЕНИЙ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В НАРОДНОЙ МЕДИЦИНЕ МОНГОЛИИ

Специальность 15.00.01 Технология лекарств

ДИССЕРТАЦИЯ

в форме научного доклада на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

Харьков - 1996

Работа выполнена на кафедре Фармации Монгольского Государственного Медицинского Университета и в Институте химии АН Монголии

Научные консультанты: — доктор фармацевтических наук, професс<

ПАВЛИЙ АЛЕКСАНДР ИВАНОВИЧ — доктор фармацевтических наук, професс< ДМИТРИЕВСКИЙ ДМИТРИЙ ИВАНОВИЧ

Официальные оппоненты:— доктор фармацевтических наук, профессор

ЧУЕШОВ ВЛАДИСЛАВ ИВАНОВИЧ

— доктор фармацевтических наук, член — корреспондент ИА Украины КАЗАРИНОВ НИКОЛАЙ АЛЕКСАНДРОВА

— доктор фармацевтических наук, профессор ЖОГЛО ФЕДОР АНДРЕЕВИЧ

Ведущее учреждение: Запорожский Медицинский Университет

Защита состоится « ЛР » ____ 19дб

в « часов на заседании специализированного совета Д.02.16.

при Украинской фармацевтической Академии по адресу: 3100( г. Харьков, ул. Пушкинская, 53

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Украинск Фармацевтической Академии (310168, г. Харьков, ул. Блюхера, 4)

Доклад разослан « » Н^О-^^/^^ 1996 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор фармацевтических наук, профессор //] ПЕРЦЕВ И.М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Изыскание эффективных лекарственных ;дств на основе природных продуктов для профилактики и лечения ¡личных заболеваний относится к числу важнейших задач мединской и фармацевтической науки. Из этого следует, что особое 1чение придается химическим исследованиям лекарственных расте — й, разработке технологии и стандартизации лекарственных Маратов и сырья.

В настоящее время лекарственные вещества растительного прохождения составляют около 30% всех препаратов, применяющихся в (ременной медицине. Практика показывает, что во многих случаях :арственные препараты из растений предпочтительнее синтетичес — (с. При лечении сердечно — сосудистых, желудочно-кишечных ¡олеваний, болезней печени и почек доля растительных лекарствен — х препаратов особенно высока.

В Монголии зарегистрировано более 2200 высших растений, из с около 750 известны как лекарственные. Между тем химическое гчение биологически активных веществ лекарственных растений галось лишь в последние 25 — 30 лет.

Актуальность поиска новых источников биологически активных цеств побуждает нас постоянно обращаться к опыту монгольской )одной, в частности тибетской медицины. Лечебный эффект лекар — енных композиций, применяемых в традиционной монгольской и ¡етской медицине широко подтверждается практикой. Известно, что [им из основных принципов монголо—тибетской медицины является ение всего организма больного, поэтому в ней используются не гничные растения, а сложные лекарственные смеси. Эта тенденция тела к выбору лекарственных растений не по семействам, а по .ельным растениям, входящим в рецептуру.

Следовательно, химическое изучение природных соединений действенных растений Монголии, выяснение действующего начала жных лекарственных смесей, поиски новых путей применения их в чной медицине и сельском хозяйстве, а также разработка совре — шых технологий получений препаратов, являются актуальными. Поэтому химическое изучение биологически активных веществ, работка технологии некоторых растительных композиций, облада— [их желчегонным, противовоспалительным, гепатозащитным и ибактериальным действием, является одним из основных направ — ий данной работы.

Актуальность поиска и изучения биологически активных веществ

и их препаратов, в частности предназначенных для лечения и профилактики повреждений органов гепатобилиарной системы определяете тем, что заболевания печени и билиарной системы занимает большо удельный вес /более 40%/ в группе нозологических форм, относящихся к патологии пищеварительной системы.

Более того, на высоком уровне устойчиво сохраняется заболеваемость населения вирусными гепатитами, многообразными стал токсические лекарственные и аллергические поражения органов гепатобилиарной системы. В этой связи актуальность и необходимоа продолжения поиска и изучения новых эффективных лекарственны препаратов, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний печени и желчевыводящих путей еще более возрастает.

Поэтому поиск лекарств среди растительной флоры Монголи имеет важное значение.

Как известно, биологическая активность растения обусловлен наличием веществ, относящихся к разным классам природных соеди нений. Мы изучили главные компоненты исследуемых растени] такие как алкалоиды, кумарины, флавоноиды, ксантоны, иридоид] терпеноиды и др.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являет( создание лекарственных препаратов, обладающих желчегонным, ге патозащитным, противовоспалительным и капилляроцкрепляющи действием, на основе химического изучения некоторых видов наибо лее распространенных и широко применяемых в народной медицш лекарственных растений Монголии.

Для достижения этой цели решались следующие задачи:

1. Поиск перспективных растений, которые могли бы служи-сырьевыми источниками биологически активных веществ желчегон ного, гепатозащитного, противовоспалительного капилляроукрепля ющего действия.

2. Разработка методов выделения и очистки биологически актив ных веществ из изучаемых видов растений.

3. Изучение химических, физико-химических и спектральных ха рактеристик полученных веществ.

4. Установление структуры новых и идентификация известив соединений.

5. Исследование метаболизма флавоноидов на примере кверцетин

6. Разработка технологии получения препаратов и нормативно технической документации на лекарственное сырье и препараты.

Теоретическая значимость и научная новизна работ!

В Монголии впервые организовано химико — фармакологическс

ледование в области химии природных биологически активных ве — :тв. В результате изучения 12 видов лекарственных растений, [меняемых в монгольской народной и тибетской медицине выделено природное соединение, в том числе 4 алкалоида, 42 флавоноида, 16 нтонов, 4 иридоида, 3 кумарина, и 2 эфира тритерпеновой кислоты, них 6 оказались новыми, а 65 идентифицированы с известными.

эти вещества впервые найдены в изучаемых видах растений Мон — ии.

На основании спектральных данных /ИК —, УФ —, 'Н —, ,3С — ЯМР, :с —спектры/ и химических превращений установлено строение овых природных соединений, 4 из которых относятся к алкалоидам, злавоноидам и одно к ксантонам. Среди новых веществ большой ерес представляет алкалоид, полученный из остролодочника мяг — [гольчатого — / + / — N — никотинол—2 — фенил — 2 — оксиэтиламин, орый оказался первым алкалоидом, производным фенилэтиламина, ;ющим в своем составе пиридиновый остаток.

Впервые в видах рода астрагал выделен агликон рамноцитрин, з астрагала перепончатого-редко встречающийся агликон-кумата— [ин, который в данном растении находится в свободном виде, делено новое природное вещество, не описанное в литературе и ванное пропингозидом.

Выявлена тенденция к существованию природных соединений в арственных растениях Монголии в отличие от других регионов в ее окисленной /гидроксилированной/ форме.

На основании анализа результатов исследований обоснована це — ообразность и доказана перспективность создания лекарственных паратов с желчегонным, гепатозащитным, противовоспалительным апилляроцкрепляющим действием.

Показано, что для развития этих исследований перспективны оторые виды горечавковых /семейство Сепиапасеае/, астрагалов ;1гада1и8 Ь./, остролодочников /Оху1гор1з БС./ и т.п. Они актеризуются оригинальным составом биологически активных {еств, имеют достаточную сырьевую базу и признаны научной ,ициной.

На примере кверцетина изучены пути метаболизма флавоноидов ультуре клеточных суспензий №со^апа ТаЬасиш и обнаружена ¡реляция между структурой и биологической активностью дленных веществ и их промежуточных метаболитов.

Практическая значимость работы и внедрение результатов :ледования. Результаты химического, фармакологического и нологического исследования изучаемых видов растений

позволили получить 6 новых медицинских препарато: /Биофлавон пропингозид, таблетки Силодин, Генцихол, Галехол сухой экстракт остролодочника шишковидного и гранулы Гепахол/ оригинальность которых защищена 18 авторскими свидетельствам] и патентами.

Разработана и утверждена нормативно— техническая документация на сырье и предложенные препараты. Технологи: производства созданных препаратов внедрена в медицинску* практику Монголии.

На защиту выносятся следующие основные положения:

— Результаты химического изучения 12 видов дикорастущих лекарственных растений флоры Монголии на содержание алкалоидог ксантонов, флавоноидов, кумаринов и других классов природных соединений;

— Разработка схем выделения и разделения вышеуказанных классов природных соединений;

— Установление строения 6 новых природных соединений и иден -тификация 65 веществ;

— Разработка технологии и нормативно — технической документа -ции для получения 6 новых медицинских препаратов и их внедрени в медицинскую практику Монголии.

Апробация. Результаты исследования доложены и обсуждены н I Международной конференции по химии и биотехнологии биологически активных веществ /Варна, 1981 г., Болгария/; 1У Всесоюзно симпозиуме по химии природных соединений /Тбилиси, 1983 г., отчете за 1984—1985 гг. по программе сотрудничества стра членов СЭВ и СФРЮ по проблеме «Исследования в облает биологической физики» /Путина, 1986 г./; республиканско конференции «Реализация научных достижений в практическо фармации» /Харьков, 1991 г./; конференции молодых учены Института химии растительных веществ, посвящении 60—летию СССР /г. Улан-Батор, 1990 г./; очередных конференция Института химии АН МНР /г. Улан-Батор, 1979, 1982, 198 1985, 1987, 1989 гг./; научно — практических конференция преподавателей Монгольского государственного медицинско1 университета /г. Улан-Батор, 1978 — 1996 гг./; республиканско научно — практической конференции по вопросам производств потребления, снабжения лекарств и изучения лекарственного сыр] /г. Улан-Батор, 1990 г./; Международной научно — практическс конференции «Традиционная медицина Монголов» /г. Улан —Бато

Э5 г./; научно — практических конференциях национального этра медицины Монголии /г. Улан-Батор, 1986 — 1995 гг./.

Публикации. По результатам исследований опубликовано 59 ра — г, получено 12 авторских свидетельств и 6 патентов.

Объекты и методы исследования. Объектами исследования сдули надземные части 12 видов растений (таблица №2), заготовленные время цветения в различных регионах Монголии экспедициями £едры фармации Монгольского Государственного Медицинского иверситета и лаборатории химии растительных веществ Института нии АН Монголии, а также полученные растительные препараты и ■овые лекарственные формы-настойки, гранулы и таблетки.

Получение биологически активных веществ осуществлено по об — принятым методам, в частности экстракцией органическими :творителями и перегонкой эфирного масла с водяным паром. Для (деления и выделения флавоноидов, алкалоидов, ксантонов, кума— юв и иридоидов использовали методы колоночной и препаративной [кослойной хроматографии, а для терпеноидов-высокоэффективной овой хроматографии. Окончательную идентификацию выделенных ¡динений проводили методами ИК —, УФ — , 'Н—, ,3С — ЯМР спек — эскопии, масс— и хроматомасс — спектрографии, а также ■шческими методами.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Разделение и выделение индивидуальных веществ. Для

уучения суммы алкалоидов использовали хлороформную :тракцию. Индивидуальные основания получили из суммы алоидов с применением различных органических растворителей, юльзуя растворимости как самих оснований, так и их ей, колоночную хроматографию и другие методы выделения.

Что касается выделения фенольных веществ-ксантонов, кумари — флавоноидов и других соединений, проводили экстракцию [ртом. Индивидуальные вещества выделили с помощью различной творимости и хроматографических методов.

Известные соединения отождествлялись сравнением физико —хи — 1еских констант /состав, т.пл., /а/„ и данных спектральных /ИК —, —, 1Н —, 13С—ЯМР —, масс —спектров/.

В таблице I приведен перечень выделенных соединений из изу— ;ных некоторых видов лекарственных растений Монголии.

Таблица №

Природные соединения, выделенные из изученных лекарственных растений флоры Монголии

№ Название Состав Т. ПА, град. /о/, град. Раст., из кот. получеао Лит. ссылка

0 1 2 3 4 5 6

АЛКАЛОИДЫ

1. М-Бензоил-2-феяилэтиламнв «уую 117-118 3 20,23,59,63

2. (+)-М-Бензоил-2-фенил-

2-окснэтиламин (уую, 154-155 +35.2 1 18,65,73

3. (-) Г<-Бензонл-2-фенил-

2-оксиэтилаиан «ууго, 154-156 -29.1 3 20,24,57,63

4. (-) 1^-Никотиноил-2-фенил-

2-оксиэтиламив 157-158 -25.3 1 18,20,57,63

КСАНТОНЫ

1. 1,5,8-тригидрокси-

3-метоксиксантов ад.0. 275-278 5 34,36

2. 1,3,8-тригидрокси-

4,5-димегоксиксантон с.ДА 263-268 5 25,30

3. 1,3,5,8-тетрагидрокснксавтон син,о, 310-312 5 25,67

4. 8~0-(И)-глюкош|ранозил-1,5-дигидрокси-

3-монометокснксантон С^О.-НЮ 210-212 5 25,26

5. 8-0-{М)-глюкопвравозил-

1,3,5-тригидроксиксаятон САА, 241 5 25,67

6. 2-С-{И)-глюкопиравозил-

1,3,6,7-тетрагадроксиксантов с.,н,А. 268-269 5 25,68

7. 1-мовогвдрохси-3,7,8-

триметохсиксантов СЛА 154-156 4,6 35,72

8. 1 -моногидрокси-3,5,6-

трнметоксиксантон С,АА 214-215 6 28,30

9. 1,8-дигидроксн-3,5-

днметоксиксантон с,ДА 182-184 6 29,30

10. 1,7-дигидрокся-3,8-

днметоксиксантов СДА 192-193 4 25,34

11. 7-0-|Ю-глю1«ниранозил-

1-моногидрокси-3,8

-диметокснксантон с^о,, 150-152 4 25,34

12. 1-0-(И)-глюкопиранозил-

3,7.8-триметоксихсантои санйо„ 138-140 4 25,34

13. 1-0-[Н)-тлюхогшранозил-

7-мовогидрокси-

3,8-диметоксиксантов «уу».. 144-146 4 25,34

14. 3,7,8-тримето1си-1(6-1)-

примеверозилксантон СЛА, 150-152 4 25,34

15. 3,8-диметокси-7-мовогидрокси-1-0-^-0-(6-1)-

првмеверозилхсантоп с»н,о15 160-162 8 4 25,34

ФЛАВОНОИДЫ

Робинии свнаои 250-251 -122 1 22,58,75

Лнхвиритигеннн С.ДА 203-204 3 19,64

Рутин спнмо„ 192-193 -28 2,8,11 56,66,74

Пратол С..Н.О, 272-274 3 19,21,64

7,4'-до™дрос1;сифлавои с,ДА 319-321 3 19,32,64

5,7,3'-тригиАрокси-4'-

иетоксифлавон С,ДА 252-254 4 71

б-С-(И)-глю»опиранознл-

5,7,3',4'-тетрагидроохсифлавон санпо„ 239-242 5,6 68

В-С-Р-О-глюкопиранозил-

5,7,3',4'-тетрагидроксифлавон санао„ 256-258 5,6 69

^-О-Р-О-глюкопиранозвл-

5,3',4'-1ригнлроксифлавон 262-264 5,7 70

5,7,3,,4,-тетрагиАроксифлавон с„н„о, 252-254 4 71

Кверцетин С,ДА 310-311 1,2,7,9,10 33,58,60,74

Изорамнетин с,Д,о, 314-316 7,8,10 2,6,10

Кемпферол 274-276 1,3,9,10 19,66,75,76

Раиноцитрвн с,Д,о, 282-284 7,8,9 5,61,62

Апигенни с,ДА адл 346-348 10 61

Куматакенин 246-247 9 4,8

З-О-рО-глюкопиранознА-

изорамнетин 138-140 7,8,10 10

З-О-Р-Ь-арабопиранозил-

рамноцитрин 210-212 8 3,11

З-О-р-О-галактопиранознл-

изорамнетин сннпои 148-150 7 1

3-0-|М)-глю1Юш1ранозил-(6-1) -

О-р-Ь-рамнопяранозиАкверцетин СА°» 148-150 8 2,9

3-0-р-0-глюкопиранозил-(6-1)-

0~{Н.-рамшш1ранозилизорамнетин 135-136 8 1

3-0-р-В-1алактопиранозиА-(6-1)_

1.-рамн<шираиозилкверцетин санао„ 158-159 10 61

3-0-|М>-галажтопиранозил-(2-1)-

0-Р-0-1.-арабопиранозилкемпферол САА. 143-145 10 62

Изокверцнтрин САД, 218-221 -36.5 И 12,14

ИРИДОИДЫ

Гентиопикрозид с,ДА 122-124 4.5 71

Свертиамарин С.ЛА, 113-115 4,6 72

КУМАРИНЫ

Умбеллиферон с,н,о, 228-230 И 12,13

Скополетия С..Н.О, 202-204 И 12,14

Зскулетин с,н,о( 220-224 И 12,15

ОРГАНИЧЕСКИЕ КИСЛОТЫ

З-моногидроксн-28-карбоксиолеанен С„Н„0, 302-305 5

Хлорагениая кислота /Н/ с,ДА 203-204 32.0 И 13,15

ТЕРПЕНОИДЫ

41 терпеноид И 13,15

49 терпенондов 12 13,15

Примечание: В пункте 5 таблицы номер соответствует номеру :тения в списке. В пункте б таблицы номер соответствует поряд— вому номеру опубликованной работы.

Установление строения некоторых алкалоидов, ксантонов эфирных масел проведено совместно с учеными Института Химии AI Монголии Д.Батсурен и О.Пурэв.

Таблица №

СПИСОК ИЗУЧЕННЫХ РАСТЕНИЙ

Сем. Fabaceae lindl

1. Oxytropis muricata (Fa.ll) DC-остролодочник мягкоигольчатый

2. О. Strobilacea Bge-остролодочник шишковидный

3. О. Trichophysa Bge-остролодочник пушисто — пузырчатый

Сем. Gentianaceae

4. Gentiana Barbata Froel-горечавка бородатая

5. G. Acuta L.-горечавка острая

6. Lomatogonium rotatum (L) Fries-ломатогониум колесовидный

Сем. Leguminosae

7. Astralagus Mongolicus Bge-астрагал монгольский

8. A. propinguus B. Schischk-астрагал сходный

9. A. membrenaceus Fisch-астрагал перепончатый

10. A. Dahuricus DC-астрагал даурский

Сем. Umbelliferae

11. Bupleurum scorzonerifolium Willd-володушка козлецелистная

12. В. Sibiricum Vest-володушка сибирская

I СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ АЛКАЛОИДОВ

1. Строение ' N-бензоил-фенилэтиламина. Новый ациклически алкалоид /1/ состава CI5H15NO/MCBP/M+255, хорошо растворяете в метаноле, диметилсульфоксиде, хуже в ацетоне. УФ —спектр 208, 226 нм, характерен для веществ, содержащих ароматическс кольцо. В ИК —спектре алкалоида I обнаружены полос: поглощения NH — СО группы при 3390 и 1650 см-1 . В масс —спектр его отмечены пики ионов с m/z 225 /М+/ 134, 105, 104, 91, 7' Образование осколков с m/z 105 и 77 указывают н присутствие в молекуле 1 бензоильного остатка, а пиков ион с m/z 104 и 91-на возможное содержание в нем фенилэтильного радикала, который с учетом ИК —спектра и иок с m/z 134 (С HeNO) связан с бензоилом посредство

Н-группы. Данное предположение всецело подтверждается ? 'Н спектром соединения I (500 МГц, ДМСО —с!6, 8) 2.84 /т., .1=6.5 Гц, С6Н6-СН2 /; 3.48 (м., 2Н,-СН2-НН-); 7.12 (т., 1Н, [.5 Гц, Н6); 7.24 (д., 2Н, Л = 7.5 Гц, Н-4, Н-8); 7,29 (т., 2Н, Л = 7.5Гц, 5, Н —7); 7.44 (т., 2Н, .1 = 7.5 Гц, Н-31, Н-51); 7.51 (т., 1Н, 3 = 7.5 Гц, 41); 7.81 (д., 2Н, .1 = 7.5 Гц, Н-31, Гц Н-21, Н-61); 8.55 м.д. (уш.с., -N£1 —). Сравнение физико-химических констант и спектральных мстерстик I с таковыми известных алкалоидов показывает, что I яется природным новым алкалоидом —Ы — бензоил —2 —фенил —

2. Строение (+) Ы—бензоил-2-фенил-2-оксиэтиламина. Алкало — /2/ состава С15Н,5>Ю2 (МСВР)-новое оптически активное мнение /а/0+35,2 (с 0,68; метанол). В ИК —спектре 2 присутству— полосы поглощения активного водорода /3350 см-1/ и амидного бонила /1650 см—1/, а его УФ —спектр (А,тм нм, 207, 204 /плечо/ ти идентичен с таковым мурикатинина. ПМР — спектр 2 отличается :пектра 1 лишь тем, что вместо картины, типичной для группировки -СН2—СН2 —РЬ—С = 0 в нем присутствуют сигналы, характерные структуры:

Они проявляются в спектре в виде АВМХ системы при 3,51 {м.д. .1Ц, ^вх —5,0 Гц; Лвл—8,0Гц; Лвм=14Гц, Н-В), 3,91/мд, 1Н, ^=3,5 ^ = 7,0 Гц; ^=14 Гц; Н-М), 4,95 м.д. (дд, 1Н, ^ = 3,5 Гц, ^ = 8,0 Н-А/

Эти данные, а также разница в массах молекулярных ионов 1 и 2 ная 16 м.е. показывают, что в молекуле 2 при С —2 расположена роксильная группа. Следовательно, алкалоид 2 имеет строение ( + ) бензоил—2 —фенил—2 —оксиэтиламина, что хорошо согласуется с масс спектром /схема 1/.

камином.

ОН На нх РЬ

• I о I

РЬ- С - С - N - С - О

« I

НА НМ

Схема 1

Масс — фрагментация соединений 1, 2 и 3.

I-- m/z 10« (3)

m/z(-Hj 104(0 --Г ! """" т/г 105(1,2^

р ;н | i^JN 1. R»H, х=сн (tftz<s) 2. R.0H, х-сн (tfal) j1; ¡8 3. R.0H, X.M (M+2ii;

'--—m/z 1Л(1,а;

|-tjs(2;, 1з5(з;

'-чу* (+«лзб(з;

3. Строение /-/М-никотиноил-2-фенил-2-оксиэтиламиш

Алкалоид/3/ новое оптически активное соединение, имеет т. пл. 157-158°С /из ацетона/, /и 2/ 25,3/с0,79,метанол/. В масс —спектре 3 схема 1/ имеется незначительный по интенсивности пик молекулярного иона C14HuN202 (МСВР), с m/z 242 и интенсивные пики ионов m/z 135, 136, 107, 106, 79, 78. Близкие аналогии между масс —спектрами 2, 3 и смещение пиков в последнем на 1 м. е. в сторону высоки масс по сравнению с 2 присутствие в составе этих ионов дополнительного атома азота /например, с m/z 106, C6H4NO/, свидетельствуй о замене в 3 бензоильного кольца в ацильной части молекулы 2 i гетероароматическое. Его структура, а также подтверждение предполагаемого строения всей молекулы вытекает из сравнительно! анализа ПМР —спектров 2 и 3.

В ПМР —спектре 3 /500МГц, ДМСО —d6, рис. 1/, как и в спектр 2, имеются сигналы протонов Ph — СН(ОН) — CH2NH — группиров* при 3,30 м. д. (м, IH, Н-С-Н); 3,48 (м, IH, Н-С-Н), 4,77(м, IH, Н С-ОН; 5,49 (д, IH, J = 2,5 Гц; ОН) и 8,70 м.д.(т, IH, J = 5 Гц, № Однако в области резонанса ароматических протонов спектры 3ti соеднений различаются. Сигналы протонов фенильного радикала име ющийся в спектре 2, проявляются в спектре 3 при 7,22 м. д. (т. IH, Jop = 7,0 Гц, Н-6); 7,31 (т 2Н, JQPro =7,0 Гц, Н5, N-7); 7,35 м. д. (д, 2] JOPTO =7,0 Гц, Н —4, Н —8), а сигналы протонов бензоильного остат] отсутствуют. Вместо них обнаружено 4 четких однопротонных сигна. при 7,45 (ад. IH, J' = 5,0 Гц J"OPTO=8,0 Гц, Н-5'); 3,13 (дт, Л1оэто =8, Гц; J^ =1,3 Гц, Н —4'); 8,65 (ад, IH, J'OPTO = 5,0 Гц; JMETA= 1,3 Гц, Н 6'); 1,95 м.д. (д, 1Н,7 =1,3 Гц; Н —2'), химическиесдвиги мультиплетность которых свойственны протонам-замещенного пири динового кольца /Эмоли Дж. и др./

Li

Mt

7.1

1.0 m

m

1 ПМР-спектр /-/ 1М--никотиноил-2-фе1шл-2-оксиэтиламина.

Следоватеьно, алкалоид 3 отличается от 2 тем, что его ацильная ть представлена не бензойной, никотиновой кислотой. Отсюда [ него следует строение ( —) N — никотиноил — 2 — фенил —2 — :иэтиламин, которое подтверждается присутствием в масс— спектре [нтенсивных пиков никотиноильного и пиридинового ионов с m/z и 79.

Таким образом впервые был найден нами в природе алкалоид с зым заместителем никотиноила, относящийся к группе яилэтиламина, что позволяет расширить число и номенклатуру алоидов данного типа.

Важность масс — спектрометрической информации в дальнейшем ¡удила нас более детально изучить поведение соединений 1, 2 и 3 ^ электронным ударом.

Особенности масс — спектрометрической фрагмантации соединений 2 и 3 /Схема 1/ определяются характером ацильного остатка т. е. лчием бензамидной /1, 2/ либо никотинамидной /3/ группировки, гакже присутствием гидроксила при |3 —углеродном атоме яилэтильной группы /2, 3/. Последнее обстоятельство приводит к гтабильности молекулярных ионов 2 и 3, ввиду повышенной онности к разрыву связи — СН/ОН/ —СН2 —. Наряду с простым

разрывом этой связи имеет место перегруппировка с миграцией атом водорода к а углеродному атому, что дает пики ионов максимально: интенсивности с m/z 135 /2/ и 136 /3/. Происхождение этих ионо подтверждено измерением их точной массы и спектрам: метастабильной дефокусировки. Часть продуктов распада молекулярны ионов 2 и 3 стабилизируется в виде /М —Н20/+ с m/z 223 и 22 соответсвенно.

Молекулярный ион 1 намного стабилнее. И он с m/z 131 (CgHBNC в его спектре имеет среднюю интенсивность, перегруппировочный ио: с rn/z 135 не образуются, а максимальным является пик бензоильног катиона с rn/z 105. В спектре 2 пик этого иона второй п интенсивности, а в спектре соединения 3 аналогичный ион п происхождению пиридиноильный катион с m/z 106 является средни! по интенсивности. Другое свидетельство присутстви гетероциклического кольца—наличие пика иона пиридина C5H5N (т/ 79), превосходящие по интенсивности пика фенилкатиона с m/z 77.

Что касается фрагментов, образуемых за счет фенилэтильной част молекулы, то наиболее характерным является С8Н8 с m/z 10^ появляющийся в спектре соединения 1. Ион тропилия с m/z 9 значительно уступает ему по интенсивности. Это объясняете устойчивостью нейтрального фрагмента молекулы бензамида —пр образовании иона с m/z 104.

Пики оксибензильных катионов С6Н5СН = ОН с m/z 107(2 и ^ также невелики по своей высоте. Спектры 2 и 3 дополнительн характеризуются пиками ионов с m/z 122 (C7H8NO, 2) и 123 (C6H7N2C 3), представляющими собой протонированный бензамид и никотинами соответсвенно. Кроме того в этих спектрах имеются пики ионов с m z 117 (CgH7N, 3),и 118 (C?H6N2, 3), анализ происхождения которы потребовал дополнительного экперимента. Спектр МД ионов с m/z 11 (2) и 118 (3) показал качестве предшественников ионы (М —Н20) и m/z 135 (2) и 136 (3). Из этого следует, что рассматриваемые ион! возникают в результате последовательного альтернативного удалени Н20 от амидной группировки и разрыва связи — СН (ОН) —СН2— Дл них характерна следующая структура:

1. 1,5,8 — Тригидрокси — 3 — метоксиксантон представляет собо игольчатые кристалы. Имеет молекулярную массу М+274 и элементны

IÄJlJ 13)

II СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ КСАНТОНОВ

ав CuHle06 т. пл. 275 —278°С. В УФ спектре вещества наблюдаются 1ктерные максимумы поглощения при 254, 279, 330, 340 /нм/ [ениях, свидетельствующие о принадлежности соединения к [тонам, дополнительно, при снятии УФ —спектра вещества с гностическими реагентами (AICI3, AICI3/HCI, NaOAc) гистрированы следующие максимумы поглощения, указывающие оличество и положение функциональных групп в молекуле. А1С13 — 284, 330,390, AICI3/HCI-255,286, 330,378, NaOAc-269, 290, 368. Как видно из спектра, снятого с А1С13 наблюдается батохромный г в первой полосе поглощения на 50 нм, что указывает на наличие ¡одной гидроксильной группы в положении С —1 или С —8. В нейшем при добавлении HCl к тому же раствору изменяется 1ение максимума поглощения в первой полосе в сторону >хромного сдвига на 12 нм, что указывает на разложение тлексов, образующихся между двумя хелатным гидроксилами /С — С —8/ . При снятии УФ спектра с NaOAc не выявлено отличия по нению с основным спектром, что свидетельствует об отсутствии ¡одных гидроксильных групп в положениях С —3 и С —6. В ПМР спектре, снятом в ДМСО имеется синглет с интенсивностью ротонов при 3,91 м.д., указывающий на присутствие одной жсильной группы в положении С —3 молекулы вещества. При 11,9 ,2 м.д. значениях зарегистрированы два синглета с одно протонной шсивностью в слабом магнитном поле, что подтверждает наличие юдной гидроксильной группы в положении С —5. Таким образом, »лекуле данного ксантона найдены 4 функциональные группы. Как ictho, в основном скелете ксантона, 4 положения ароматичесого t должны быть не замещенными.

Это подтверждается следующими данными спектра. Так, при 6.42 53 м.д. (д.д. по 1Н, J = 2.3 Гц, Н-4) п 7.27 и 6.66 м.д., по 1Н, J=8.9 Н —6 и Н —7) (/Рис.1, Табл.3/

Для доказательств количества и положения свободных эоксильных групп, допольнительно получено ацетильное изводное и для него сняты ПМР —спектры. ПМР —спектр -ильного производного содержит сигналы при 2,49 м. д. (СН, СОСН3, С-1 и С-8) и 2,34 м.д. (с.ЗН, ОСОСН, С-5). Для определения количества углеродных атомов в молекуле были ■ы )3С-ЯМР спектр в ДМСО: 161. 9/С-1/, 97.4/С-2/, 167.0/С-92,9/С — 4/, 157,3/С —4а/, 137,2/С-5/, 123,8/С-б/, 109,5 /С-7/, /С —8/, 107,4/С — 8а/, 184,0 /С-9/, 102,1 /С-9а/, 143,3 /С-10а/ ,2/С —ОСН3/.

По данным результатам 13С —ЯМР спектра обнаружены 14 родных атомов, положения которых интерпретируются согласно «ратурным данным (Kurt Hostettmann, 1978).

Рис.2 ПМР спектр вещества 1, 5, 8 тригидрокси — 3 — метоксиксантош

В масс —спектре кроме молекулярного иона М+274 присутствую пики иона с m/z 245 /М-29/+, 231 /М-43/+, 203 /М-71/+.

На основании вышеуказанных спектральных данных веществ идентифицировано с 1.5.8 — триокси —3 —метоксиксантоуном ил] белли — дифолином.

2. 1.3,8 —тригидрокси —4,5—диметоксиксантон получено в вид желтого игольчатого кристалла, состава С16Н1207 с температуро] плавления 263 —268°С /из метанола/.

В УФ —спектре вещества наблюдаются 4 максимума поглощения МеОН-255, 275, 339, 350. В УФ-спектре с диагностическим] реагентами / нм/: А1С13-255, 279, 350, 390, NaOM - 279, 370, NaOAc -278, 350, NaOAc /Н3В03-278, 355, 390, AICI3, /HCl-255, 281, 356, 39C Батохромные сдвиги УФ —спектра с А1С13 и NaOAc/40 нм и 3 ш соответственно указывают на наличие гидроксильных групп положениях С —1 или С —8 и С —3 или С —6. Эти предположения ] дальнейшем подтверждаются 'Н — ЯМР и ,3С—ЯМР — спектральным] данными. В ПМР спектре проявляются протоны при 3.83, 3.88, м.д. , с.с. по ЗН, 2хОСН3, С —4, С-5/, 6.30 м. д. /с. 1Н, Н-2/, 7.48, 6.73 м д. /д.д. 1Н, Н-6, Н-7, J= 1069 Гц/, 11.26, 11.57 м.д./с по 1Н, 1-ОН,8 —ОН/ /Рис. 3/

В ПМР спектре ацетильного производства СНС13 присутствуют I протонный синглет ацетильных групп при 2,39 м.д. /с пл 6Н, 2хО-СОСН3/, который свидетельствует о наличии хелатного гидроксила ] положениях С — 1, С —8. А также 3-х протонный синглет при 2,34 м.д.

орый соответсвует ацетильной группе в положении С —3. В масс — ктре наряду с молекулярным ионом М+ —304, имеются пики ионов . 274, 246, 231. 185.

»-г

ы.

Jli_

i

it

-rt/.-T-

J£

i JL_-¿J ■

VJ

-JUk-V.

Рис.3. ПМР спектр вещества 1,3,8— тригидрокси — 4,5—диметоксиксантона.

На основе вышеуказанных данных и по сравнению их с гературными данными его характеризовано с 1.3.8—триокси —4.5 — летоксиксантоном или коримбиозином.

3. 1, 3, 5, 8 — тетрагидроксиксантон. Игольчатые желтые кристаллы, еют элементный состав С13Н8Ов Т.пл.310 —312°С. По данным УФ ;ктра оно относится к 1.3.5.8—тетразамещенным ксантоном. Это утверждается изучением ПМР спектра /ДМСО/, где проявляются 'налы протонов при 6.21,6.41 м.д. /которые соответстуют Н —2 и Н — V ^1.0 Гц/, 7.24, 6.63 м.д. /д.д. по 1Н, J = 8.6 Гц, Х-6, Н-7/, 11.9, 7 м.д./с.с. по 1Н, 1 — ОН,8 —ОН/.

В ПМР —спектре ацетильного производного содержатся сигналы ;тильных протонов при 2.46 м.д /2хОСОСН3 в положениях С—1 и -8/ и 2.39 м.д. /2хОСОСН3 в положениях С-3 и С-5/.

Положения функциональных групп и свободных протонов толнительно доказано 13С —ЯМР спектром /Рис 4 и Табл. 4/

г *

) i

Jj

г i

■ij^aJii^J«*»'1

-x "

в м n W t*

• w m »

Рис. 4. UC — ЯМР спектр вещества 1, 3, 5, 8 — тетрагидроксиксантона

Иа основе Уф, ПМР, 13С — ЯМР — спектральных данных онс идентифицировано, как 1.3.5.8 — тетраоксиксантон ил» дезметилбеллидифолин.

4. 8 — 0 —b — D — глюкопиранозил— 1,5 — дигидрокси — 3 — моно — метоксиксантон — кристаллы светло-желтого цвета, состава С,„Н,.0,,Н,С

ZU ¿U 11 л*

Рис. 5. ПМР —спектр вещества свертианолина.

пл. 210 —212°С /из метанола/. В УФ —спектре наблюдаются эактерные поглощения МеОН /нм/:254, 276, 325 свидетельствующие принадлежности соединения к ксантонам. В ПМР — спектре дечаются следующие характерные сигналы: 6.37, 6.58 м.д. /д.д.Н —2, -4, ^2.3 Гц/, 7.28, 7.12, м.д. /д.Н-6, Н-7, .1=-9.2 Гц/, 3.89 м.д. ЗН, С —3, ОСНЗ/, сигнал аномерного протона /д. 1Н, ^7,6 Гц/ при 1 м.д. /Рис.5 Табл.3/ Из 13С—ЯМР — спектра /ДМСО/ видно, что одна метоксильная гппа находится в положении С —3 /56.2,ОСН3/ /Табл.4/

При кислотном гидролизе вещества свертианолина обнаружены лкон, идентичный веществу беллидифолин и сахар —Б —глюкоза. В 4Р —спектре ацетильного производного наблюдаются ароматические стильные группы при 2.34 м.д. /по ЗН, 1хОСОСН3, С —5/ 2.40 м.д. 5 ЗН, 1хОСОСН3, С—1/, это подтверждает, что одна из хелатных фоксилов /1—ОН или 8 —ОН/ замещена остатком сахара. Таким разом, это вещество охарактеризовано с 8—0—р—О— окопиранозил—1.5 —дигидрокси —3 —метоксиксантоном или фтианолином.

5. 8 — 0 — р — Б — глюкопиранозил— 1.3.5 — триоксиксантон или рсвертианолин.

6. 2 —С —Р~О— глюкопиранозил—1.3.6,7

Таблица №3.

'Н - ЯМР спектр ксантоновых соединений горечавки острой.

щество Аромат Л-2. Н-4 Протон Н-6. Н-7 Метоксил Аиомер

ллидифолин 6.42, 6.63 7.27,6.66 3.91

(д. 1=2,3 Гц) (д.1=8.9Гц) С-3

>римбиозин 6.30 7.48,6.73 3.83,3.88

(д.1=10,9Гц) С-4, С-5

эметнлбелли- 6.21, 6.41 7.24, 6.63

шин (д. 1= 1.0Гц) д. 1=8.6Гц)

ертианолин 6.37,6.58 7.28,7.12 3.89 4.81

(д. 1=3.2 Гц) (д. Х=9.2Гц) С-3 (д.1=7.6Гц)

рсвертианолин 6.17,6.39 7.26, 7.11 4.76

д. 1=2.2 Гц д. 1=8.8 Гц (д. 1=7.6 Гц)

шгиферин 6.54 4.84

(д. 1=10 Гц)

Таблица Г1

"С - ЯМР спектр ксантоновых соединений горечавки острой

Карбонил Беллиди-фолин Дезметил- беллиди- фолин Свертианолин

1 161.9 162.1 162.8

2. 97.5 98.5 97.3

3. 167.0 166.6 166.3

4. 92.3 94.3 92.3

4а. 157.3 157.4 156.5

5. 137.2 137.1 141.0

6. 123.8 123.8 141.0

7. 109.5 109.3 112.3

8. 151.7 151.7 149.5

8а. 107.4 107.2 111.9

9. 184.0 183.6 181.1

9а. 102.1 101.0 103.0

10а. 143.3 142.3

ОМе 56.2 56.2

С-1' 103.6

С-2' 7263

С-3' 76.1

С-4' 69.8

С-5' 77.5

С-6' 60.9

7. 1 — моногидрокси — 3, 7, 8— триметоксиксантон получено в в* кристаллов желтого цвета, состава С16Н)4О0 с температурой плавлен 154 — 158°С /метанол/. Имеет молекулярную массу М+302. В УФ спект вещества наблюдаются 4 максимумы поглощения: МеОН /нм/ —2 254, 314, 380.

ПМР спектр /СНС13/: 6.21 м.д. /р.2Н.Л = 2.5 Гц Н-2, Н-4/, 7.21м, Д.2Н, У=9Гц,Н-5,Н-5,Н-6/, 3.86 м.д./с.ЗН,ОСН3, С-3/, 3.91 м, с.ЗН,ОСН3, Н —7/, 3.98 м.д./ с.ЗН, ОСН3,С-8/, 13.24 м.д./ с ОН, С 1/ /Табл.5/. В масс —спектре кроме молекулярного иона М+2 присутствуют пики ионов с фрагмантацией 287, 284, 273 характерн для 1.3.7.8 замещенных ксантонов. На основе его спектральн:

иных оно идентифицировано, как 1 — моногидрокси — 3.7.8— яметоксиксантон.

8. 1 — моногидрокси — 3,5,6 — триметоксиксантон — игольчатые, гтло —желтые кристаллы, состава С(6НМ06 с темпратурой плавления 4 —215°С. УФ спектр /нм/ 252, 273, 328, 370. В ПМР спектре мечаются следующие характерные сигналы: 3.94 м.д./с 6Н, 2хОСН3/ .84м.д. /с ЗН.ОСН3/, 6.44, 6.31 м.д. /д.д. 1Н, Л = 2.5 Гц, Н-1, Н-2/ ¡.62 м.д. /д. 1Н, Л=8.8 Гц,Н —6/, 7.22 м.д. /д.1Н, ^8.8 Гц, Н-7/, .16 м.д. /1Н,ОН/. На основании спектральных данных и по авнению со стандартным образцом, оно охарактеризовано как изомер кусатина.

9. 1,8—дигидрокси —3,5—диметоксиксантон. Представляет собой .>лтые кристаллы, состава С15Н(2Ов М + 288 т.пл. — 182—184°С етанол/. УФ спектры с диагностическими реагентами являются эдующими /нм/: МеОН-230, 255, 333, 392., ЫаОАс-255, 276, 334,, С13 -266, 288, 333, 392. В ПМР спектр /СНС13/ отмечаются гдующие протоны: 6.34 м.д. /д. 1Н, J = 2.5 Гц, Н —2/, 6.53 м.д. /д. 1Н, 2.5 Гц, Н —4/, 6.70 м.д. /д. 1Н, 1 = 9.0 Гц, Н-6/, 7.22 м.д. /д. 1Н, 9.0 Гц, Н —7/ 12.48 м.д. /с. 20Н, С-1 С-8/, 3.88 м.д. /с. ОСН3,С-3.94 м.д. /с, ЗН, ОСН3, С —5/. Следовательно, его охарактеризовано

1.8—дигидрокси —3,5—диметоксиксантоном. Это предположение в \ьнейшем подтверждается спектральными данными ацетильного оизводного.

Таблица №5.

Ш-ПМР спектр ксантоновых соединений Ломатогониума колесовидного

щество Ароматнк Метоксил

протон протон

Н-2. Н-4 Н-6. Н-7

куссатин 6.21 7.21 3.86,3.91, 3.98

(Д. 1=2Гц) (д. 1=9Гц) (С-3,У-7,С-8)

омердекус-

гин 6.44, 6.31 7.22,7.71 3.94, 3.98

(д. 1=2.51 Гц) (д.д.Ь8.8Гц) (С-3,С-5,С-8)

ягилбеллиди-

1ЛИН 6.35, 6.31 7.16,7.51 3.92,3.96

(д. 1=2,5Гц) (д.д.1=9 Гц) (С-5.С-3)

10. 1,7—дигидрокси —3,8—диметоксиксантон. С15Н1206 т.пл. /°С/-192 — 193 /метанол/. Оно составляет более 30% от сумм! у-пиронов. Масс-спектр /т/е/: 280М+, 270 /М-18/+, 259 /М-29/"> 245 /М-43/+. ПМР — спектр /WP-200^, в СДС13 /: 6,33 /д. 2Н, J = 2b J = 2,1 Гц, Н —2, Н —4/, 7.21, 7,15/ д.д. по IH, J = 9,0 Гц Н-5, Н-6/, 3,8 /с. ЗН, ОСН3С-3/, 4,01 /с ЗН, ОСН3С-8/, 13,12 /с. ОН, С-1/ 5.29/ С.ОН, С —7/. 13С-ЯМР-спектр /СДС13/: 180,49 /С-9/, 166,02 С-6/, 162,82 /С-8/, 156,68 /С-13/, 149, /37//С-1/, 146,98 /Q.-1 ) 145,32 /С-12/, 124,38 /С-4/, 114,83 /С- 11/, 113,06 /С-3/, 103,25 С-14/, 96,70 /С—7/, 91,72 /С-5/, 60,97 /8-ОСН/, 55,96/3-ОСН3/ Оно харектеризовано с 1,7 дигидрокси —3,8 диметоксиксантон.

11. 7 — 0 — р — D — глюкопйранозил— 1 — моногидрокси — 3,8—диметоксиксантон С21НмОи, т.пл. —150—152° /метанол/, по данны] УФ-спектр /МеОН/ —244, 256, 302, 365 относится к 1, 3, 7, тетразамещенным ксантоном. Это подтверждается изучением ПМ спектра //ДМСФ de, —шкала/, где проявляются сигналы протонов пр 7,36 и 7,20 /оба д. 5 = 9,0Гц, Н-6 и Н-5/, 6,86 и 6,72 /оба д. J = 2,5rr Н —4 и Н — 2/, 5,30 /д. J = 6,0 Гц Н-118 386 /с ЗН, 3-ОСН/, 3,94 с. ЗН, 8 — ОСН3/, 13,12/с. ОН, С-1/

Спектр ПМР —ацетильного производного, полученног ацетилированием этого соединения уксусным ангидридом в пиридин содержит сигналы протонов четырех ацетоксильных групп углеродно: части при 1,90 — 2,10 м.д. и одной Аг—ОСОСН3—группы при 2,40 м.^

Действительно, при кислотном гидролизе гликозида веществ получены агликон состава С15Н,206 т. пл. —192—195°, идентичный 1, дигидрокси —3,8—диметоксиксантону и D —глюкоза.

УФ —спектр гликозида снятые с добавлением растворов А1С13 HCI, указывает на наличие в его составе хелатной гидроксильно группы. Это согласуется с данным ПМР —спектра /5. 13,12 м.д./.

Величина КССВ дублетного сигнала аномерного протона /5.5, м./ >1 = 6,0Гц/сведетельствует о [J — гликозидной связи D — глюкозы агликоном. Таким образом это вещество имеет строение 7 — 0 — 0 — D-глюкопиранозил — 1 — моногидрокси —3,8 —диметоксиксантона является новым природным соединением.

12. 1 — 0 — р — D — глюкопиранозил — 3,7,8 — триметоксиксанто*

С22Н24Ои т.пл. —138—140° /из метанола/. Уф —спектры диагностическими образцами показывают на отсутсвие свободны гидроксильных групп во всех положениях молекулы этого веществ« ПМР — спектр /ДМСО-d/S: 6.76, 6.72 /оба д. по IH, J=2, Гц Н-2, Н-4/, 7,21, 7,26, /оба д. по JH, j=8,5 Гц, Н-5, Н-6/, 3,80 /сЗН, ОСН

3/, 3,84 /с ЗН, ОСН3, С-7/, 3,88 /с ЗН, ОСН3 С-8/, 5,43 /д. 1Н, ¡,5 Гц р—гликозидной связи, Б —глюкозы/. 13С—ЯМР — спектр / 20 с16/5: 174,55 /С-9/, 164, 19 /С-6/,159, О /С-8/, 157,67 /С-13, 28 /С-1/, 149,00 /С — 2/, 147,5 /С-12/, 119.79/С-4/, 112,17 /С-107,4 /С-14/, 117,4 /С-И/, 102,98 /С-7/, 94,86 /С-5/, 100,43/ I1, 74,54 /С-21/, 75,97 /С-31/, 73,44 /С-41/, 69,90 /С-51/, 60,89 -б1/, 60,80 /С-3, ОСН3/, 55,90 /ОСН3С-8/, 56,64 /ОСН3, С-7/. [ кислотном гидролизе гликозида получены агликон состава С16Н|406, 1л. —164 —165°, идентичный —3,7,8 —/ОСН3/3— ксантону и Э — коза.

Это вещество идентифицировано, как 1—0 — Р~О — глюкопиранозил 7,8—триметоксиксантон.

13. 1— 0—р — Э — глюкопираноз ил—7 — моногидрокси — 3,8—димето — ксантон. С21Н220и, т.пл. — 144 —146° /из метанола/. ПМР —спектр / СО — с16/5: 7.28. 7,07 /оба. д. по 1Н, Л = 9,0 Гц, Н-5, Н-6/, 6,80, 6,64 а д. по 1Н, Л = 2,5 Гц, Н-2, Н-4 /, 3,87 /с. ЗН, ОСН3, С-3/, 3,82 )Н, ОСН3 С —8/, 5,48 /сШ, Л = 6,5 Гц, р - гликозидная связь /с. 9,24 [ ОН при С-7/.

,3С-ЯМР-спектр /ДМСО — с36/5: 174,90 /С-9/, 163, 96 /С-6/, , 18 /С-8/, 157, 55 /С-13/, 148, 53 /С-1/, 146, 53 /С-2/, 145, 05 -12/, 122,73 /С-4/, 117, 07 /С-11/, 112, 17 /С-3/, 107, 62 /С, 104, 08 /С-7/, 95, 01 /С-5/, 60, 60 /ОСН3, С-3/, 55,59 /ОСН3, 8/, 101,10 /С-11/, 77,50 /С-2V, 75,67 /С-31/, 73,33 /С-41, 69,86 -51/, 60,91 /С — б1/. При кислотном гидролизе этого вещества аружен агликон, идентичный веществу 10 и сахар — О — глюкоза. В спектре, снятом в присутствии А1С13 не наблюдается бато. сдвиг, зывающий на наличие хелатной гидроксильной группы в молекуле. » согласуется с данными ПМР и 13С—ЯМР —спектров. Таким образом, вещество охарактеризовано с 1—0 —р —О — 1Копиранозил — 7 — моногидрокси — 3,8 — диметоксиксантон.

14. 3,7,8—триметокси— 1(6 — 1) — примеверозилксантон. С27Н32015, 150 -152°. УФ-спектр /нм/: /МеОН/-242, 250, 306, 360.

[гностические реактивы не влияют на УФ —спектр молекулы, что яется доказательством того,что оно не содержит свободные роксильные группы в молекуле. При кислотном гидролизе получены икон, идентичный веществу 1 — моногидрокси — 3,7,8— ;метоксиксантону и сахара — Б —глюкоза и ксилоза. При сравнении ПМР и 13С — ЯМР — спектров этого вещества, оно кяется биозидом вещесвта 1 — моногидрокси — 3,7,8— [метоксиксантона. Следовательно, вещество идентифицировано как 8 —триметокси —1—/б1 — 1"/ —примеверозилксантон.

15. 3,8—диметокси — 7 — моногидрокси — 1 — 0 — 0 — Б(6 — 1) — приме-верозилксантошС^НздО^, т.пл.- 160-162°. ПМР-спектр /ДМСО-с16/^ 6,64, 6,94/оба д.по Н, Л = 2,5 Гц Н-2, Н-4/, 7,12, 7,36// оба д. по I? Л = 9,0 Гц, Н— 5, Н-6/, 3,90/с 6Н, 2хОСН3 С-3, С-8/, 10,05/ с1 ОЬ С —7/, 5,12 и 5,32 /оба дЛ = 60 Гц, Р — конфигурации аномерны протонов биозидного остатка/. При кислотном гидролизе обнаружен! агликон, идентичны веществу 1,7—дигидрокси —3,8—диметоксиксантог сахар: В—глюкоза и ксилоза. Следовательно, ег охарактеризовано с 3,8—диметокси —7 —гидрокси—1 — 0 —Р~ Б—(6'-1") — примеверозилксантоном.

СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ ФЛАВОНОИДОВ Флавоноиды некоторых остролодочников

1. Робинии. Соединение состава СмН40О19 с т.пл. 250 —251 °С /и метанола/ и 195-197°С /из воды/. ИК-спекр: А,тах 1670 /СО/, 3500 ОН/, 1610, 500, 1460 / С = С —связи ароматического кольца/ ] 1100 см _> /гликозидная связь/.

В ПМР —спектре вещества в области ароматических протоно имеются сигналы при 6,85 и 8,09 м.д.,дд- Л = 8,3 Гц по 2Н Н —21 б1] 3',57, 6,43 и 680 м.д.,дд- Л = 2-1 Гц по 1Н каждый Н-6 и Н-8/, чт( подтверждает строение вещества 3,7 —замещенного флавоноида. Такж< наличие сигналаов трех аномерных протонов сахарной част! показывает, что это соединение является флавоноидным гликозидом Действительно, кислотный гидролиз этого вещества приводит ] образованию агликона и углеводной части, состоящей из рамнозы 1 галактозы /2:1/. Присутствие сигналов, характерных 6 ароматически! протонам, а также 4 ОН при 12,45, 10,73 10,67 и 9,35 м.д. в спектр! агликона указывает на идентичность его кемпферолу. Пр1 ацетилировании этого соединения уксусным ангидридом в пиридин! получили переацетатное производное с т.пл. 150—155°С. В ПМР спектр! которого выявлены сигналы протонов метальной группы и дву: ароматических /2.41 и 2.0 м.д. по ЗН каждый, с /из девятз алифатических /2.16, 2.13, 2.12, 2.07, 2.03, 2.00, 1.90 м.д. по ЗН каждьп с и 1.96, м.д. 6Н с/ ацетоксильных групп.

Порядок присоединения к месту расположения этог< соединения установлено сравнительным изучением его спектр; ЯМР 13С снятого ДМСО с16, с данными ЯМР13С спектров < кемпферол—7 — 0 — рамнопиранозил—3 — 0 — глюкопиранозил— /6 — 1/ -0 —Ь —рамнопиранозида и кверцетин —3 —0 —галактопиранозид« /табл. 6/.

но но

он

он он

ОН о

но он

Таблица №5. Данные спектров ЯМР 13С /ДМСО-с1в/

эм уг- кемпф-7-гЬ8 соединение кверц-3-0-£а1 муль-

рода 3-0-Ба1-/6--1/ углеводная часть типлет-ность

г 156,0 156,0 синглет

3 153,7 133,7 синглет

\ 177,6 177,6 синглет

5 180,9 16,9 синглет

5 99,4 99,4 дублет

7 161,7 161,7 синглет

8 84,6 84,6 дублет

9 157,1 157,1 синглет

10 105,8 105,64 синглет

I1 120,8 120,7 синглет

21 130,7 131,0 дублет

З1 115,1 115,1 дублет

41 159,1 160,1 синглет

51 115,1 115,1 дублет

б1 130,7 130,0 дублет

2» . 70,0 70,0 дублет

3» 70,6 70,6 дублет

4" 71,9 71,7 дублет

5» 69,8 69,8 дублет

б11 17,5 17,7 квартет

1ш 101,4 102,0 102,3 дублет

2ш 74,2 71,3 71,3 дублет

дш 76,6 73,1 73,4 дублет

4Ш 70,2 68,5 68,8 дублет

5Ш 76,0 73,7/-1,9/ 75,5 дублет

6Ш 66;6 63,5/5,1/ 60,2 триглет

00,6 100,1 дублет

2п 70,3 70,4 дублет

31У 70,8 70,8 дублет

72,1 72,0 дублет

5пг 68,1 68,2 дублет

б" 17,5 17,7 квартет

2. Ликвиритигенин. Игольчатые желтые кристаллы, С15Н1204, т.пл. -203 — 204° По физико-химическим свойствами, результате» химического исследования и данным УФ, ИК, 'Н — ПМР —спектров, этс вещество идентифицировано как 2,3 —дигидро —7,4'—дигидроксифлаво! или ликвиритигенин.

3. Рутин. Зеленовато — желтые кристаллы, состава С^Н^О^ М+610 с т.пл. 192 —193°С /из этанола/. Для идентификации был снят ЯМР13С-спектр в ДМСО — с!6. Спектр ЯМР —|3С соединения изучали н< оснвании анализа сигналов, полученных в условиях полной и неполно! развязки от протонов, а также путем сопоставления их с химическим! сдвигами углеродных атомов кверцетин —3 —глюкопиранозида I кверцетин —3 —0 —З1 —ОМе — рутинозида. Совпадение значенш химсдвигов агликоновой части сравниваемых соединений указывает н< идентичность этого вещества рутину.

Действительно, кислотный гидролиз его приводит к получении агликона и углеводной части, состоящей из Б —глюкозы и I,—рамнозы Таким образом, сопоставление физико-химических характеристик I отсутствие депрессии в т.пл. смешанной пробы с подлинным образцо» позволили идентифицировать это соединение рутином.

4. Пратол представляет светло —зеленый порошок, хорош! раствормый в спирте. Имеет элементный состав С)6Н1204, т.пл. 272274°. Структура данного вещества установлена УФ, ИК, 'Н — ПМ] спектральными показателями. На основании спектральных данных I по сравнению со стандартным образцом, это веществ! идентифицировано как 7 —моногидрокси —41 —монометокси —флаво! или пратол.

5. УЛ'-дигидроксифлавон представляет желтые порошки растворимый в спирте, имеет элементный состав С,5Н10О4 т.пл. 319321°. На основе Уф, ПМР, 13С — ЯМР — спектральных данных он< идентифицировано, как 7,4'—дигидроксифлавон, также подтвердило ш сравнению со стандартным образцом и химическим расщепление! этого вещества. Кроме того, что в остролодочниках шишковидном I пушисто — пузырчатом содержатся кверцетин и кемпферол, химически» исследования этих флавоноидов дано в разделе флавоноиды астрагалов

Флавоноиды некоторых горечавковых

6. 5.7.3|-тригидрокси-41-метоксифлавон. С,6Н1206т.л. —252 —254° метанол/ 13С-ЯМР-спектр /ДМСО-^/5:181,69 /С-4/, 164,22/С-7.

163,61/С —2/, 161,51 /С — 9/, 157,38/С —5/, 151,28/С-4'/, 146,88/С-

123,12/С — IV, 118,72/С —б1/, 113,04/ С-21/, 112,32/С-5'/, 103,82/ -10/, 103,58/С —3/, 98,92/С — 6/, 93.95/С-8/, 55,85/ОСН3, С-41/. На нове УФ —, ПМР —, 13С — ЯМР — спектральных данных оно идентифи — ровано, как 5, 7, З1— тригидрокси —41 —метоксифлавон.

7. 6—С~Р~0—глюкопиранозил-б^.ЗМ'—тетрагидроксифлавон. 2Н22Оп, т.пл. — 239 — 242°, по физико-химическим свойствам, зультатам химического исследования и данным УФ, ИК, ПМР — ектров по сравнению со стандартным образцом вещество ентифицировано как изоориентин или 6 — С—Р-О — глюкопиранозил— г,3',4' —тетрагидроксифлавон.

8. в-С-Р-О-глюкопиранозил-б^ЗМ'-тетрагидроксифлавон. ,^0,,, т.пл.—256 —258°. Это вещество охарактеризовано на основе 13ико— химических исследований и УФ, ИК, 'Н, 13С —ЯМР ектральных данных как ориентин или 8 — С-р-О — глюкопиранозил—

3',4' — тетрагидроксифлавон.

9. 7-0-Р-В-глюкопиранозил-5,31,4|-тригидроксифлавои.

,Н20Ои, т.пл. — 262 — 264°. По физико-химическим данным это щество оказалось 0 —гликозидом флавоноидов. На снове УФ, ИК, 13С—ЯМР спектральных данных оно идентифицировано, как 7 — р-0 — глюкпиранозил—5,31,41—тригидроксифлавон или цинарозид.

10. 5,7,31^1—тетрагидроксифлавон. С15Н]0О6 т.пл.— 330 —332°С. О —, ПМР — , 13С— ЯМР —спектральные данные позволяют его ентифицировать как 5,7,ЗМ1 — тетрагидроксифлавон.

Флавоноиды астрагалов.

Нами получено в общей сложности 23 флавоноидных веществ из грагалов монгольского, сходного, перепончатого и даурского. На новании проведенных исследований 14 из них отнесено к агликонам, -к моногликозидам и 4 —к биозидам флавоноидных гликозидов.

Химическое изучение этих флавоноидов нами проведены в 1970 — •одах и поэтому мы считали целесообразным изложить данные о том, э как мы / Д.Дунгэрдорж и В.В.Петренко/ доказали химическую руктуру изученных флавоноидов, выделенных из астрагалов, оизрастающих и широко распространенных во флоре Монголии.

Изучение агликонов полученных из астрагалов:/флавоноид 11/ ерцетин из астрагалов монгольского, сходного, перепончатого и урского, /флавоноид 12/изорамнетин из астрагалов монгольского, одного и даурского, /флавоноид 13/ кемпферол из астрагалов репончатого и даурского, / флавоноид 14/ рамноцитрин из грагалов монгольского, сходного и перепончатого, /флавоноид 15/

апигенин из астрагала даурского и /флавоноид 16/ куматакенин и астрагала перепончатого.

Изучаемые агликоны дают положительную цианидовую реакцик которая характеризует их флавоноидную природу, а перехо оранжево — краснго окрашивания в слой октанола свидетельствует принадлежности исследуемых соединений к агликонам.

Темно —зеленое окрашивание с хлоридом окисного железа желтое с раствором циркония хлорокиси, исчезающее под влияние раствора лимонной кислоты, показывают коплексообразующу] оксигруппу в 5 положении апигенина и куматакенина. Сохранени желтого окрашивания после добавления раствора лимонной кислот] указывает на наличие оксигруппы в 5 и 3 положениях всех остальны веществ.

Раствор кверцетина в отличие от других восстанавливаю аммиачный раствор серебра нитрата, вероятно, за счет о-диоксигруппировки, которая обнаруживается также по образованш осадка с ацетатом свинца.

Хроматографическое поведение апигенина и куматакенин позволяет предположить отсутствие оксигруппы в 3 положении или ж замещение водорода в этой оксигруппе.

В ИК— спектрах максимиумы полос поглощения при 3500 — 3200 с /ОН — группы/, при 1650—1670 см-1/С=0 у —пирона/, при 1520 см '/СН —ароматических циклов/ при 840 см-1/, пара —замещение бензольном кольце/. В изорамнетине, рамноцитрине и куматакенин отмечен максимум полосы при частоте 2945 см -1( что указывает н наличие метоксильной группы.

Помимо качественных реакций на отдельные оксигруппь положение фенольных гидроксилов обнаруживали по данным УФ-спектроскопии, применяя ионизирующие и комплексообразующи диагностирующие реагенты /таблица 7/. В УФ — спектрах исследуюмы соединений соотношение интенсивностей I и II полос поглощени является характерным для флавоноидов.

5 —оксигруппу в апигенине и куматакенине обнаруживали п батохромному эффекту на 45 — 48 нм в результате реакции комплексо -образования с раствором цирконила хлорокси, который исчезает пр добавлении раствора лимонной кислоты. Эта же группа проявляете также и по батохромному сдвигу длинноволновой полосы на 33 — 42 н; под влиянием хлористого алюминия в присутвстви хлористоводородной кислоты.

Батохромный сдвиг максимума 1 полосы в керцетин« изорамнетине, рамноцитрине и кемпфероле на 90 нм под воздействие: цирконила хлорокиси и на 40 — 60 нм при добавлении цирконил

эрокиси и лимонной кислоты указывает на оксигруппу в 3 и 5 южениях.

7 —оксигруппа обнаруживалась в кверцетине, изорамнетине, 1генине и кемпфероле по батохромному сдвигу максимума 1 полосы 15 — 40 нм под ионизирующим влияниям натрия ацетата. Оксигруппа I1 —положении обнаруживалась во всех исследуемых веществах по гохромному сдвигу на 33 — 60 нм под влиянием натрия этилата. В эрцетине выявлена 3',4'— диоксигруппировка по сдвигу шноволновой полосы на 18 нм под влиянием борной кислоты и грия ацетата. Это же подтверждается и результатами асутствии хлористоводородной кислоты. Известно, что алюминия эрид с флавонами и флвонолами, содержащими гидроксильные гппы в 3 и 5 — положениях, образует устойчивый комплекс в кислой эде и малостойкой — с веществами, содержащими о — жсигруппировку.

Следовательно в кверцетине имеются оксигруппы в 3,5,7,3',4' — южениях,рамноцитрине —3,5,4' — положениях, изорамнетине —3,5,7,4' положениях,апигенине —5,7,4'— положениях и в куматакенине —5,4' положениях.

Учитывая данные ИК — спектров изорамнетина, рамноцитрина и натакенина нами было проведено дезметилирование указанных цеств иодистоводородной кислотой в среде жидкого фенола и гусного ангидрида. При исследовании продуктов дезметилирования УФ —области с применением диагностирующих реагентов было гановлено наличие дополнительных оксигрупп в положении 3' зрамнетин, в положении 7 рамноцитрин, в положении 3,7 апигенин.

Положение свободных оксигрупп подтвердили также получением и щелочном расщеплении фенола,идентифицированного с ороглицином, что свидетельствует о флороглюциновой структуре и,ца А,и фенолкарбоновых кислот: п—оксибензойной /рамноцитрин, «пферол,апигенин, куматакенин/, протокатеховой /кверцетин/, шлиновой /изорамнетин/,характеризующих строение кольца «В».

Таким образом, в результате проведенного исследования изученных цеств охарактеризованы как 3,5,7,3',4' — пентагидроксифлавон / ;рцетин/ 3,5,7,4' — тетрагидрокси —3' —метоксифлавон /изорамнетин/ >,4'— тригидрокси —7 —метоксифлавон /рамноцитрин/, 3,5,7,4' — грагидроксифлавон /кемпферол/, 5,7,4' — тригидроксифлавон / 1генин/, 5,4'—дигидрокси —3,7 —диметоксифлавон / куматакенин/.

Смешанные пробы полученных ацетильных и метильных оизводных с достоверными образцами не давали депрессии чпературы плавления,а количество найденных ацетильных и гильных групп соответствовало количеству гидроксильных групп.

ОБ

Кверцетин Израмнетин Рамноцитрин Кемпферол Апигенин Куматакенин Изучаемые соединения

Полосы поглощения

ыммимимимими ОМООМ<4(вОМО«ЛО Исходен Хтах м о с* г о 3 ! х< * 3 ■8 V | 0) ш а ш

опмочмеоомо ).Ш1Ч .♦хлорокись циркония

«к ^ 10 (0 <о м (О впммоиоыооо

и М и м ^ N Й 1Л Ь 09 М (Л и м о о о 111 о о о «л о ). тах • .♦хлорокись циркония .♦лимонная кислота

«к «Ь 1А А О О О (Л С* К> О ООО А*

мимимымимцми Л тах .♦ натрия ацетат

мимоюё^оми о^ ДХ

мимимими ими N А « (ЛМООЧМОй! о ^ 5 Хтах .♦натрия ацетат .♦борная кислота

■ 1 «А ииоомммм ото* ДХ

321 355 405 275 - 405 275 400; I 277 385; 260 ). тах .♦этилат натрия

¿»<4 А А и и и 1к ои*4ооа«4м «л «в ДХ

МЦМЫМДЮДМКМА и(лиме»1>>свиомм«1 ). тах .♦алюминия хлорид

Ы ^ «Л и И м д>.

Хтах .♦алюминия хлорид . ♦ соляная кислота

и (Л сл ф <л Л/.

О э л

3

и

ел 5

Изучение монозидов из астрагалов: /флавоноид 17/ — 3 —ß —D —

юкопиранозид изорамнетина из астрагалов монгольского, сходного, ¡репончатого и даурского,/флавоноид 18/ —3 —ß —L— арабопиранозид 1Мноцитрина из астрагала сходного и /флавоноид 19/ —3 —ß —D — лактопиранозид изорамнетина из астрагала монгольского.

Эти вещества дают положительную цианидиновую реакцию по »ианту ,а факт не перехода красно —оранжевого пигмента в слой ;танола позволяет отнести их к гликозидам,что находит утверждению также в реакции восстановления жидкости Фелинга 1сле предварительного гидролиза. На основании положительных чественных реакции соотношения агликона к углеводному мпоненту исследуемые вещества отнесены к моногликозидам.

Со спиртовым раствором хлорного железа изучаемые гликозиды разуюут темно — зеленое окрашивание, отрицателтьная реакция с 2% !танольным раствором циркония хлорокси и лимонной кислоты наруживает свободную оксигруппу в 5 положении. Исследуемые щества не восстанавливают аммиачного раствора серебра нитрата, о указывает на отсуствие о — диоксигруппы в В —кольце.

При хроматографировании на бумаге с достоверными образцами икозидов в различных системах растворителей, полное совпадение раски пятен до и после проявления а также значения Rf, наблюдалось вещств выделенных из астрагалов монгольского и даурского с орамнетин — 3 — ß — D — глюкопиранозидом.

Спектральные исследования монозидов в УФ —области /таблица — с применением комплексообразующих и ионизирующих реактивов казали свооодные оксируппы в 5, 7, 4'— положениях вещества грагала мон — гольского, сходного и даурского и в 5, 4" — положениях щества астрагала сходного. Место присоединения сахарных мпонентов к агликонам устанавливали цирконий лимонокислотной обой и УФ — спектроскопией. Малый батохромный сдвиг в спектрах дкозидов по сравнению с агликонами при добавлении цирконила орокиси и отсутсвие сдвига с лимонной кислотой свидельствует о м, что сахара находятся в 3 положении.

Все анализируемые вещества подвергаются ферментативному аролизу ферментным препаратам гриба Aspergillus orysae.

В результате проведенного кислотного и ферментативного аролиза получены продукты, которые выделены препаративно и на нове физико-химических свойств и хроматографического сравнения изестными образцами идентифицированы как D —глюкоза и орамнетин, D —галактоза и изорамнетин, и L — арабиноза и мноцитрин. Изменение окраски пятен изучаемых моногликозидов на оматограммах в УФ —свете до и после гидролиза, а также

Спектральная характеристика изучаемых монозидов астрагалов.

Таблица 8

СО

2*10 5 молярный раствор вещества в эталоне

к X <0 5 ь н а „ а ^ ж 1

3 1 »X 2 5 X Ь £ ш ■з о ГУ £ г 1 ю 5 1 | 3

Изучаемые соединения | | к о 1 1 ь л и г а 1 5 X X о X а ♦ к £ н (0 X ♦ к X о. н $ X § $ X X Я а 5 § о ГУ о

к щ Е г-е X 1 X ч с X Щ с 3 X 1« £ X 1 У 1 ^ X а

Флааоноид 17 1 355 400 45 355 0 375 20 355 0 407 52 400 45 410 55

II 255 255 0 255 0 275 20 257 2 269 14 267 12 272 17

Фпавоноид-18 . 1 376 416 40 380 4 377 1 зго 4 416 40 415 39 406 30

гез 270 7 270 7 265 2 265 2 270 7 25» 5 465 2

Флавоноид 19 1 356 402 46 355 -1 378 22 357 1 405 49 400 44 403 47

II 255 256 1 255 0 270 15 257 2 265 10 267 12 270 15

носительная легкость отщепления углеводных компонентов при слотном гидролизе дают основание считать местонахождение Сахаров 3 —положении. Гидролиз ферментом гриба Aspergillus orysae дает нование предполагать наличие ß — гликозидной связи в изучаемых эдинениях.

Исследования в ИК —области методом дифференциального анализа казали полосы характерные для карбонила у —пиронового кольца / 60 — см-1/, сопряженных двойных связей /1595, 1578 см-1/, нольных гидроксилов /3300, 3340, 3270 см-1/. Наличие полосы О см-1 является определяющим фактором ß— конфигурации якозидной связи в пиранозидах. Полосы при 1052, 1074 и Э8 см-1 указывает, что углеводный компонент в исследуемых 1козидах находится в пиранозной форме.

Итак, на основании химического и спектрального исследования цества из астрагалов сходного, монгольского и даурского можно арактеризовать как 3 — ß — D — глюкопиранозид, рамноцитрин 3 — ß — -арабопиранозид, это вещество выделено впервые и названо опингозидом, изорамнетин 3—ß —D —галактопиранозид.

Изучение биозидов, полученных из астрагалов: /флавоноид 20/ -0 — ß — D — глюкопиранозил /6—1/ —0 — ß — D — рамнопиранозид эрцетина, /флавоноид 21/ — 3 — 0 —ß — D —глюкопиранозил—/6 — 1/ ) — ß — L—рамнопиранозид изорамнетина из астрагала сходного, / авоноид 22/ 3 —0 —ß —D —галактопиранозил —/6—1/ —0 —ß —D — мнопиранозид кверцетина и /флавоноид 23/ •0 — ß — D — галактопиранозил — /2 — 1/ —0 — ß — L — арабопиранозид чпферола из астрагала даурского.

Полученные соединения — желтые мелкокристаллические рошки, хорошо растворимые в 70% этаноле, метанола, практически растворимые в эфире, хлороформе, бензоле, петролейном эфире ют положительные качественные реакции на флавоноиды. .авоноиды 20 и 22 окисляются на холоду аммиачным раствором зебра нитрата.

Одномерной и двумерной хроматографией на бумаге в различных стемах растворителей доказана индивидуальность выделенных адинений. На хроматограммах в фильтрованном УФ —свете [козиды обнаруживаются в виде темно — коричневых пятен, окраска горых становится желтой при действии циркония хлорокиси. При следующей обработке влажных хроматограмм парами аммиака авоноиды 20 и 22 обнаруживаются по оранжевой, флавоноид 21 — желто — оранжевой, флавоноид 22— по желто — зеленой уоресценции пятен. Значение Rf, в различных системах

Таблиц»^

СПЕКТРАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЗИДОВ АСТРАГАЛОВ

Исследуемые соединения Поло-лосы погло-игскпя 2. 10' молярныЛ раствор вещества в этаноле

Исходный X тах +хлорокиа> инрколня +хлорокпсь циркония лимонная кислота +иатрия ацетат ♦натрия ацетат+ борная кислота +алюминия хлорид +алюминая .<лорнд+ хлористо водородная кислота +этлат натрия

X тдх ¿X X тах &X X шах ¿X X тах IX Хтах 4Х X шах ДХ Хщах ¿X

Флавононд 21- I 356 410 54 360 4 373 17 360 4 401 45 396 39 415 59 '

II 253 255 2 258 5 271 18 255 2 268 15 267 14 273 20

Флавоноид 20 1 358 403 45 359 1 383 25 379 21 420 62 395 37 • -

II 237 260 3 261 4 268 11 255 -2 275 18 270 13 255 -2

Флавонопд 22 I 360 405 45 365 5 385 5 387 27 25 65 400 40 - -

II 255 270 15 267 12 270 15 257 2 273 18 271 16 270 15

Флавононд23 I 355 395 40 356 1 370 15 355 0 393 38 355 0 370 15

II 258 255 -3 257 •I 272 14 260 2 268 10 270 12 268 10

творителей характеризуют изучаемые вещества как биозиды или ликозиды. При спектральном исследовании в УФ —области /таблица установлены свободные группы в 5, 7, 4' —положения /флавоноиды и 23/, 5, 7, 3', 4' —положениях /флавоноиды 20 и 22/. Батохромное щение максимума 1 полосы под влиянием циркония хлорокиси на -54 нм, которое устранялось при добавлений избытка раствора юнной кислоты, свидетельствуют о наличии углеводного заместителя 2 — 3, что подтверждается также устойчивостью изученных козидов к щелочному гидролизу. Для идентификации составных лпонентов выделенных веществ был проведен кислотный пенчатый гидролиз 0,05% раствором хлористоводородной кислоты в этаноле. При этом агликоны в виде следов появляются уже на 3 1уте. Одновременно образуются новые вещества, которые занимали хроматограммах промежуточное положение к концу первого часа ¡людалось значительное количество этих продуктов. Данные пенчатого гидролиза вызвали у нас предположение, что образующие *ества являются моногликозидами, для идентификации которых мы делили их препаративно хроматографией на бумаге. Спектральные исследования в УФ — области свидетельствуют о козидировании анализируемых веществ по С —3. При »матографическом исследовании в присутствии достоверных 1азцов установлена тождественность промежуточных флавоноидов 20, 22, и 23 соответственно изорамнетин — 3 — Р~ Б — экопиранозиду, кверцетин — 3 —р —О— глюкопиранозиду, рцетин — 3 — р — Б — галактопиранозиду и кемпферол — Зг— Р~ Б — актопиранозиду.

Для определения строения биозного заместителя в исследуемых >зидах подвергали их также ферментативному расщеплению с реоспецифическим ферментным препаратом рамнодиастазы, *епляющим биозы с /1—6/ порядком связи между остатками моноз. эматографией на бумаге установлено, что флавоноиды 21, 20 и 22 щепляются до биозы и агликонов. Агликоны на основании физико — гаческих свойств, спектральных и хроматических исследований растеризованы как изорамнетин /флавоноид 21/, кемпферол / шоноид 23/ и кверцетин /флавоноид 18 и 16/. На основании шческого изучения сахарный компонент гликозидов /флавоноид 22 О/ идентифицировали с О —глюкозой и Ь—рамнозой, флавоноида 22 »лактозой и Ь—рамнозой, гликозида флавоноида 23 с Б — галактозой I —арабинозой. Порядок связи Сахаров в биозе установили длительной деструкцией ароматической части гликозида перекисью орода с последующим аминолизом. Окраска биоз на хроматограммах :ле проявления их специфическими хромогенными реактивами ;азывает, что монозы в биозидах 21, 20 и 22 —связаны друг с другом

в порядке 1 — 6, в биозиде 23 можно предположить— в порядке 1—2.

Исследование биозидов методами дифференциального спектрального исследования в ИК—области показало, что оба сахара имеют пиранозную форму и ß — конфигурацию гликозидной связи между сахарами с агликонами исследуемых биозидов, которая подтверждается также расщеплением изучаемых гликозидов ферментными препаратом Aspergillus orysae и эмульсином.

Таким образом, исследуемые биозиды охарактеризованы как изорамнетин — 3 — 0— ß — D — глюкопиранозил — /6 — 1/ — 0 — ß — L — рамнопиранозид /флавоноид 21/, кверцетин —3 — 0—ß — D — глюкопиранозил—/6—1/ —0 —ß — L—рамнопиранозид /флавоноид 20/, кверцетин — 3 — 0 — ß — D — галактопиранозил — /6 — 1/ — 0 — ß — L — рамнопранозид /флаваноид 22/, кемпферол —3 —0—ß —D — галактопиранозил —/2 —1/ —0 —ß —L—арабопиранозид /флавоноид 23/

ФЛАВОНОИДЫ ВОЛОДУШКИ

24. Изокверцитрин — желтое кристаллическое вещество с т.пл 218 — 221°, удельные вращения —63,5°. УФ —спектры 355, 268, 358 нм, с ацетатом натрия 372 нм, с цирконилом хоридом 418 нм, с метилатом натрия 392 нм.

По физико-химическим свойством, данным УФ — , ПМР—спектре а также непосредственным сравнением с подлинным образцом этс вещество идентифицировано с изокверцитрином или кверцетин — 3 — 0—Ь — Е) — глюкопиранозид.

СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ ИРИДОИДОВ

1. Гентопикрозид является масляной жидкостью состава С)6Н20О9 т. пл. -122-124°. УФ-спектр /нм/6/ МеОН/-246 пл., 256 пл., 270 ИК-спектр /см-'/: 3533,3460, 3267, 1712, 1677, 1612, 931, 772 пики характерные для монотерпеноидных гликозидов.13С—ЯМР — спектр / й20/б: 98,5 /1/, 150,4 /3/, 104,4 /4/, 125,2/5/, 117,8 /6/, 71,2 /7/, 133,£ /8/, 45,4 /9/, 119,5 /10/, 167,5 /СО/, 99,6/1'/, 73,3 /2'/, 76,5 /3'/, 70,^ /4'/, 77,1 /5'/, 61,6 /6'/,. Иа основании спектральных данных пс сравнению со стандартным образцом, вещество идентифицировано как гентиопикрозид.

2. Свертиамарин представляет светло —зеленый порошок, хорошс растворимый в спирте. Имеет элементный состав С16Н22Ои, т.пл. 113 — 115°С. Структура данного вещества установлена ниже указанным! спектральными показателями.'Н —ПМР спектр /200МГц, ДМСО—Д20/

.60 м.д./д.1Н, J= 1.4Гц,7.5 м.д./1К,Н~6в/, 4.60 м.д. /д.д.д. 1НД2=10.8Гц, Гц, Н —7а, 4,29 м.д./д.д.д. 1И,1Н,5 = 10,8Гц 9,9Гц, 3.2Гц, Н-7в/, 5,35 /1Н,Н —8/, 535 м.д. /1Н, Н-10а/ 5,25 м.д. /1Н,Н-10в/, 4,48 м.д./ 1Н, 1 = 7.6Гц, Н-17, 3.00 м.д./д.д. 1H,J = 8,9 Гц, 7.6Гц, И-2/, 3. 10 /1Н.Н-37, 3.10 м.д. /1И,Н —4'/, 3.55 м.д. /д.д. 1П,У=11,9Гц, 1,5Гц, -6'а/, 3.45 м.д. /д.д. 1Н,1 = 11,9Гц, 6.3Гц, H-6'в/ /Рис.6/

Рис. 6. 'Н — ПМР спетр свертиамарина.

13С -спектр /60МГц, ДМСО-Д 0, м.д. /: 96,48 /С-1/, 151,83 /С-108,6 /С — 4/, 62,53 /С —5/, 32,04 /С-6/, 64,04 /С-7/, 132,79 / -8/, 49,87 /С —9/, 120,28 /С-10/, 164,33 /СО/, 98,24 /С-17, 72,87 -27, 76,10 /С —37, 69,99 /С-47, 77,37 /С-57, 60,92 /С-67. На «звании исследований вещество охарактеризовано с секоиридоидом :вертиамарин/, количество которого достигает до 2%.

СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ КУМАРИНОВ.

1. Умбеллиферон. УФ —этого фенольного соединения с ксимумами при 229 пер., 294, 318 нм (Ige 4,19, 4,34, 4,45) /характерен i производных кумарина. В ПК —спектре присутствуют полосы фоксильных групп /3280 — 3540 см"1, С = 0 а —пирона /1706 см ~7 ! = 0 a,ß — ненасыщенного сложного эфира /1693 см "'/, — С —С — 1зей ароматической системы /1608, 1590 см "V и простых С — 0 шей / 1030-1112 см -Ч. По данным УФ — , ИК —, ПМР-спектров и эматографическим сравнением с подлинным образцом это вещество энтифицировано с умбеллифероном или 7 — моногидроксикумарином.

2. Скополехин — вещество, хорошо растворимое в метаноле пиридине и растворах щелочей. УФ —спектр с максимумами при 241 251, 296 пер., 321 нм (lge 3,65, 3,53, 3,94, 4,08) указывает н< принадлежность вещества 7 — 0 — замещенным кумаринам. В ИК-спектре этого вещества имеются полосы поглощения, характерные длз гидроксильных групп /3300 — 3350 см-1/, сложноэфирного карбонила , 1723 см-1/, карбонила а —пирона /1710 см "'/ и простых С —0 связе; /1100, 1046—1105 см-1/. Данные УФ — , ИК — спектров позволяю' отнести это исследование к производным кумарина. ПМР— спектр! данного вещества обнаружены сигналы протонов, обусловленньи наличием в молекуле — СН3 группы и гидроксильных групп. Также, п< хроматографическим сравнением со стандартным веществом данно! соединение охарактеризовано как 6 — монометокси — 7-моногидроксикумарин или скополетин.

3. Эскулетнн. В ИК —спектре полоса при 3300 см -1 обусловлен колебаниями ОН групп, при 1666 см-1 С —О, а —пирона, при 1600 ] 1560 см-1 — С = С— связами ароматической системы. Согласно данньп УФ—спектра с максимумами при 223 пер., 253 пер., 261, 334 нм (lg 4,15, 3,86, 3,91, 4,19) это вещество относится к 6,7— диоксикумаринак

Данные ПМР —спектра полностью согласуются со сделанным заключениями: дублеты при 6,02 и 8,09 м.д., J =10 Гц, обусловлен! протонами Н3 и Н4 уширенный двухпротонный синглет при 6,46 м.д. -протонами Н5 и Н8.

Масс —спектр содержит следующие пики ионов: m/z 178 /М+, 100' / 150/ М —С0,70/, 121/89, 111/7/, 94/10/, 81/8/, 74/8/, 69/23/ 65/13/, 65/9/.

Изложенные выше данные ПМР — , масс— и УФ —спектро показывают, что это вещество по —видимому, являете диоксикумарином. Значение химедвига Н4 и Hs указывает на то, чт одна из гидроксильных групп занимает положение С6 мета-расположение гидроксильных групп исключается на основани отсутствия батохромного сдвига в УФ —спектре при добавлени спиртового раствора ALCL3. Следовательно это соединение должно бьп 6,7—диоксикумарин.

ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФИРНЫХ МАСЕЛ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ ВОЛОДУШКИ

Мы исследовали эфирные масла в двух видах володушки Bupleu-rum Scorzonerifolium Willd и B.Sibiricum E.

Эфирные масла из изучаемых видов володушки мы получил

одом перегонки в аппарате типа Клевенжера.

Идентификация выделенных компонентов проводилась путем внения физико-химических констат и методом хромато — масс — ктрометрии и газожидкостной хроматографии.

Качественное и количественное определения состава эфирных ел сделано совместно с профессором Роберт Д.Адамса в Центре •технологии и растений Вауларского Университета, Штата Техаса, [А.

В эфирном масле володушки козлецелистном содержатся 53 1ества в общем количестве 5,6%, а из них 41 идентифицированы с естными, например: лимонен (15.21%), 0 — цимен (11.54%), (Е) —13 — мен (10.502%) мирцен (8.09%) сабинен (6.56%), а-пинен (6.33%), макрен Д (4.08%), р —пинен (3.13%), спатуленол (2.73%), кариофилен ид (2.53%), кариофиллен—(Е) — (2.04%), метилсалицилат (1.76%), еканал (1.44о), у—терпинен (1.34%), у —муролен (1.35%), Щ — 0 — ¡мен (1.00%), тетрадеканал (1.00%), гумулененоксид (0.91%), камфен 4%), а —терпинен (0.367о), линалол (0.20%), а—камфоленал (0.40%), пин —4 —о1 (0.48%), р-цимен —8 —о1 (0.34%), борнеол ацетат (0.36%), туйен (0.69%), туйе-2.4 (10), диен (0.13%), периллен (0.50%), транс бенол (0.24%), транскарвеол (0.21%), кумин — альдегид (0.24%), карвон 9%), (цист) — карвилацетат (0.47%), а—копаен (0.50%), р — элемен 7%), гумулен (0.77%), тетрадеканал (1%) + нефиллен (0.57%). В володушке сибирской установлено, что в ней содержатся 58 фномасляничных компонентов 1.8%. Нам удалось установить [ическую структуру у 49 терпеноидов, именно: кариофиллен оксид 97%), спаталенол (7.25%), пентадекан (3.33%), гумуленосид (4.83%), пинен (4.20%), гентанол (3.18%), лимонен (3.30%), мирцен (3.1%), д зэргийн хэмжээтэй агуулагдаж байгаа нь Ь —цимен (1.68%), (Е) — оцимен (1.1%), линалол (1.63%). а —камфоленал (1.91%), не —пионкарвел (1.02%), транс вербенол (1.16%), и а —кубебен 6%), карвилацетат (1.69%), а-копаен (1.21%), Ь-кубебен (1.48%), кубебол (1.29%), Ь —кадинен (1.92%), (Е) — неролидол (1.179о), кубебол %) бага зэрэг хэмжээтэй байгаа нь Ь —пинен (0.64%), октанол (0.37%), -Ь —оцимен (0.27%), периллен (0.13%), транспинокамфон (0.36%), -терпинеол (0.33%), миртенол (0.3%), транскарвеол (0.66%), карвон 5%), борнилацетат (0.58%), тридекан (0.57%), (ЕЬ) — 2,4—декадиенал, цимен —8 —о1 (0.39%), (Е) кариофиллен (0.43%), Ь — (Е) ионен (0.32%), кадинен (1.92%), 1—эпикадинол (0.64%), герейкасан (0.56%).

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТАБОЛИЗМА ФЛАВОНОИДОВ В КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРАХ ТАБАКА (ШСОТШЧА ТАВАСиМ)

Флавоноиды обладают широкими спектрами биологическог действия в зависимости от их структурных особенностей. Однако, и метаболические пути превращения в живых клетках и механизм] действия еще не достаточно ясны. А также взаймосвязь межд структурами и биологической активностью флавоноидов и и метаболитов представляет большой интерес в науке. В связи с этил мы представляем здесь результаты метаболического превращени флавоноидов в культурах клеточной суспензии №соиапа ТаЬасит н примере кверцетина и данные корреляции: структура — биологическа активность флавоноидов и их метаболитов.

Для исследования эффектов флавоноидов на рост и дыхани клеточных культур N.ТаЬасит нами использованы суспензи Ы.ТаЬасит, ШВ1 —0, выращенные в питательных средах (ЛГ4) (Ми-гаБЫде. Т.Бкоод.Р., 1962), как стационарная культура, в течение 4 дне! Клеточно — суспензионные культуры N. ТаЬасит 3-х дневного возраст инкубированы с флавоноидами с концентрацией (10~в—10"4 м) течение 4 часов.

Эффекты флавоноидов исследованы путем измерения поглощение кислорода культурой ТаЬаса, используя полярографию — ЬР6 с кислородным электродом типа Кларка. Все измерения проведен] в 0.1 М фосфатном буфере, рН —6.5 при температуре 27°С. Результат: измерения иллюстрированы в табл. 10, 11 где показаны большо эффект на рост культуры ^ТаЬасит для кверцетина, рутина и и метаболических продуктов — димеров. При сравнении различны флавоноидов видно, что гидроксильные группы при положениях С —2 С —4, С —7 также возможно и положении С —3 имеют большо значение в регуляции дыхательнного процесса клеточной культурь Помимо этого гидроксильные группы этих положений могут служит активными центрами метаболического превращения флавоноидов клеточных культурах и в присутствии ферментных систем.

Для исследования флавоноидных метаболитов на пример кверцетина использованы клеточно — суспензионные культур) ^ТаЬасит 14 дневного возраста, которые инкубированы с 10" М кверцетином в течение 10 дней, жидкостная среда содержаща окислителные метаболиты кверцетина фракционирована и очищена помощью гель — фильтрации на сополимере (С — 5) (рис. №7) и их УФ -спектры показаны на рис. №8.

Таблица № 10.

Эффекты флавоиоидов на дыхание клеточно-суспензионной культуры Н.ТаЬасиш

къ * Зшестятел Ков-цетгт-рвдп (М) (02X1 г) 60 1 Сред, эцэвке (X) Эффект %>

спмул»-ромпе ЯПВДО-

роль - - Т"® 5.59,6,51,6.60 5.53,3.49,6.10 «.».6.15.5.97 Х-6.05

з.з; 4! 5,7-пеят*пщ-воксжЬтм« 104 т*9 ¿01.1.97,2.11 1.9», 100,2,12 2.15.2.09.2.15 Х-0.06 44.03

ролк • - т-9 4.85,4.79,4.82 4.79,5.10.4.»0 4 *4 4 70 4 07. ХМ.&4 - -

[ 3; 415,7-тетрагащкжса -З-О-рупшом флтяов 10* Т-9 5.91,5.»9,5.96 5.79,5.«5,6.25 5.9», 5.96,6.10 Х-5.91 23,0

>олъ - 1-6 9.02 9.10, ».»3 «.97. 9.15. 9 Ор ЭЁ9.04 1 -

о- змг 5.7 теграпвдрокс* флаэоя 10* т=в 7.39,7.25,7.54 7.25,7.55,7.30 - 19.0

>0ль - - т=6 ».91. ».90.7.96 * 07 7 47 К 0Л Х5.53 -

■ 4; 5,7-трвппдрокс! -3-5 двкстоксж-флоов 10« Т«6 «.81, ».»2,7.99 1.10, 7.9», 7.96 т-6 ЭМ.39 - 4,0

ЮЛЬ - - 7.»», 7.76 7.70 7.*« 7.0Л - -

вши 4? 5.7 трвгвдрокев-флион 104 7.2», 732.7.2 5 Х-7.24 - ».0

ЮЛЬ - - 5.»9,5.»6.5.79 5.94,5.96,«.«» Х*5.»9 - -

|е- оеагагюро-кекЬлиоя 10* т-6 4.80» 4.82* 4.79 4.7». 4.85.4.81 &4Л1 - 11,0

оль 5.30,5.45 5.34. 5.46 ¿5.41

1»- 4! 3,5,7 тетр«тщро- кс»4л»»вв 1С т-6 5.42,5.4«, 5.45 5.41. 5.46. 5.4« №5.4« - 20,0

оль - - т*« 3-50,3.49 3.55, 3.50 Ш - -

к- 4.4. \ тетриццро-ксв-31-кето-ксжфлиов 10* т-<5 4.50.4.53,4.36 4.51,4.54,453 хмл - 24.0

Таблица № 11

Эффекты метаболитов кверцетина на дыхание клеточно — суспензионной культуры.

ФрШЦД! (02) [1 г) 60' Сред, яиаж г» Эффсхт (%)

сгжмулжро- ■ипйшро-вомняе

Т"3

Ковгрол» 4.1», Э.М. Ш х-з.»а - -

т»3 |

I фрахта 4.29.4.29.4.29 Х-4.29 10« -

т-3

Г1 фрахтуй 6.60,5.90,6.30 Х-5ЛЭ 140 -

1-3 ._

Ш фракам 6.60.5.90,6.20 Х-6.23 147 -

Рис. 7. Разделение метаболитов жидкостной среды с помощью колоночной хромотографии 1Л/М — 4

Рис. 8. УФ —спектр выделенных кверцетин метаболитов.

II

Стандарт кверцетина.

III

IV

Из УФ— спектров видно, что метаболит (II) имеет полимерный актер, метаболит (Ш) имеет максимумы поглощения при 350 нм и аболит (IY) при 292 и 330 нм, соответственно.

Вещество (I) имеет белковую природу, которая обнаружена в трольном испытании. Структура метаболита (III) кверцетина шовлена на основе его масс — спектральной фрагментации, как азана на рис. № 9.

Примечание:

— о —о —

— х—х —

СМ*Ю°6 т/г-(2*4)

Г

С15НЮ°7

♦ * он Г~

он

с7н4о3

т/г- (13В)

С7НбРз т/г-(138)

саНвоз т/г» (152) т/х.(150]

Рис. 9. Масс — спектр на фрагментации метаболита(III).

Основные метаболиты, образующиеся в клеточно — суспензионной .туре М.ТаЬасит являются фенокси — радикалом, ортохинонов, эром и полимером, о которых допольнительно подтверждают ше дифференциально — импульсивной полярографии. Согласно I данным кверцетин метаболизируется следующим образом:

1. Кверцетин— ОН—> кверцетин —0° +пе + пН°

2. 2 кверцетин —0°-> димер ^—0°

3. Димер 0°-> димер + 02

4. Димер,—— 0° + димер — 0°

^•0° /п-> полимер.

Основываясь на результатах исследований метаболизма зоноидов в клеточных культурах табака, мы считаем, что:

1роцесс дбгидрации флавоноидов в культуре клеточных суспензий Г^.ТаЬасит происходит с образованием фенокси —радикалов, ортохинонов, димеров и полимеров. Образующиеся промежуточные метаболиты флавоноидов оказывают более сильные эффекты на рост и дыхание клеточной культуры М.ТаЬасит по сравнению с исходными веществами.

Чути дегидрации флавоноидов в присутсвии ферментных систем сильно зависят от количества гидроксильных групп и двойных связей и их расположений. В этом смысле гидроксильные группы при положениях С —3, С —7, С —4', С —3' и двойная связь между С —2, С —3 флавоноидов являются чрезвычайно важными факторами для их метаболических процессов.

Га основании исследования метаболизма и биологического действия флавоноидов предполагаем, что биологическое действие флавоноидов ксантонов обуславливается образующимся в ходе их дегидратации промежуточными метаболитами в форме радикалов и хинонов. Эти интермедиаты взаимодействуют с теми ферментными системами, участвующими в данном биологическом цикле и тем самым проявляют свою биологическую активность.

РАЗРАБОТАННЫЕ МЕДИЦИНСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

На основании результатов химического и фармакологическо1 исследований 12 видов изучаемых растений, разработана технологи получения 6 новых медицинских препаратов и соответствующе нормативно — техническая документация на лекарственнное сырье предложенные препараты.

1. Настойка — Биофлавон пропингозид.

2. Сухой экстракт остролодочника шишковидного

3. Таблетки Генцихол

4. Таблетки Галехол

5. Таблетки Силодин

6. Гранулы Гепахол

1. Настойка-Биофлавон пропингозид.

На основе данных химического исследования некоторых виде астрагала нами получены препараты, содержащие суммы флавоноидо

Сумма флавоноидов астрагала сходного является составной часть препарата, условно названного нами Биофлавон пропингозид, которы является настойкой надземной части данного растительного сырья.

Получение Биофлавон пропингозида осуществляете экстрагированием растительного сырья 70% этиловым спирто! используя метод перколяции.

Биофлавон пропингозид представляет собой жидкость темно-коричневого цвета с приятным ароматным запахом и горьковаты вкусом.

Для контроля качества предложенного препарата разработаг методика количественного спектрометрического определения сумм флавоноидов на основе измерения максимума поглощения агликона продукта гидролиза гликозидов.

Содержание суммы флавоноидов в этом препарате должно быг 7.45±0.16%.

Препарат прошел клиническое испытание (Постановлен! фармакологического комитета МЗ МНР N3 от 17 февраля 1974 г.) внедрен в медицинскую практику в качестве гипотензивного успокаивающего средства (Приказ Министра здравоохранения МГ: N158 от 22 мая 1976 г.).

2. Сухой экстракт остролодочника шишковидного

Химические исследования травы остролодочника шишковидного зали, что в нем содержатся из биологически активных веществ н и кверцетин в общем количестве 5.42±0.66% Это обстоятельство побудило нас получить сухой экстракт из травы олодочника шишковидного и изучить его фармакологический ект.

1ухой экстракт из травы остролодочника шишковидного получали :ледующей методике: высушенное сырье очищали от примесей, ¡льчали на траворезке и просеивали через сито с размером рстий 3 мм. Просеянное сырье в реакторе с паровой рубашкой вали горячей дистиллированной водой и настаивали в течение 2 в при температуре 60°С и атмосферном давлении. Затем теплую ую вытяжку фильтровали через бязь и отжимали на винтовом се. Шрот вторично заливали горячей дистиллированной водой и аивали в вышеуказанных условиях еще 2 часа. После этого »тровали через бязь. Водные извлечения объединяли и отстаивали чение 24 часов в прохладном месте, верхний слой сливали, а ний слой фильтровали через нутч —фильтр Полученное водное ечение выпаривали на вакуум—испарителе при температуре 70° — . Сухой остаток измельчали и просеивали через сито №6. ученный сухой экстракт стандартизовали и фасовали в ветствующую тару.

Технологическая схема производства сухого экстракта из олодочника шишковидного представлена на рис. 10. Пухой экстракт из травы остролодочника шишковидного уставляет собой порошок темно —коричневого цвета, легко ворим в горячей воде, мало растворим в спирте. Фармакологическими исследованиями, проведенными в раториях Всесоюзного Центра гипербарической оксигенации и 1,ры фармакологии МГМУ установлено, что сухой экстракт юлодочника шишковидного обладает структурными юксидантными, капилляроукрепляющими и противовоспа — льными свойствами.

Таким образом, в результате химического, фармакологического и ологического исследований нами получен новый источник для [зводства рутина и рутинсодержащих препаратов., на основании разработана и утверждена необходимая НТД на сухой экстракт сударственный стандарт на новый вид лекарственного сырья 1ава остролодочника шишковидного (УСТ —3304 —91).

ГОТОВЫЙ ПРОДУКТ

Рис. Ю.Технологическая схема производства сухого экстракта и травы остролодочника шишковидного.

3. Генцихол- таблетки из сухого экстракта горечавки бородатой.

"оречавка бородатая широко известна в флоре Монголии и 1еняется в традиционной медицине при различных заболеваниях ни, и входит в состав многих лекарственных прописей, но ее ^акологическая активность мало изучена.

На основании проведенного химического исследования нами аботана технология получения суммы биологически активных ?ств из травы горечавки бородатой в виде сухого экстракта. Получение сухого экстракта сводилось к 3-х кратной дробной грации 80% —м этанолом воздушно —сухого сырья (надземная ь). Полученные настойки объединяли и сгущали на вакуумном [рителе. К упаренной вытяжке добавляли (соотношение 1:1) чую дистиллированную воду, отстаивали в течение 4-х часов и ляли фильтрацией выпавший осадок. Очищенную водно — 1товую вытяжку выпаривали на вакуумном испарителе до сухого гка, который измельчали и просеивали через сито №6. Сухой ракт стандартизовали и фасовали в соответствующую- тару. Полученный нами экстракт горечавки бородатой был использован получения таблеток Генцихол методом прямого прессования. В стве вспомогательных веществ использовали крахмал, стеарат ция и тальк в необходимых количествах.

Фармакологическое исследование таблеток Генцихола проведено в гитуте Улан-Удэ, под руководством профессора С.М.Николаева, шческие испытания успешно прошли в Экпериментальном Центре гкционных болезней при Министерстве Здоровья Монголии. Как показали фармакологические и клинические испытания, 1арат Генцихол обладает выраженным желчегонным, тозащитным, противовоспалительным и мембраностабили — тощим действием.

Па предложенные таблетки Генцихол разработана и утверждена >ходимая нормативно —техническая документация. Технология «цена Патентом Монголии и препарат разрешен к применению сазом Министра здоровья Монголии в 1994 г.

4. Галехол-таблетки из густого экстракта ломатогониума колесовидного.

Густой экстракт ломатогониума колесовидного содержит сумму югически активных веществ (3 ксантона: 1 — моногидрокси — 3,7,8 — летоксиксантон; 1 — моногидрокси — 3,5,6 — триметоксиксантон;

ГОТОВЫЙ ПРОДУКТ

Рис. 11. Технологическая схема получения густого экстракта ломатогониума колесовидного.

дигидрокси —3,5—диметоксиксантон; 3 флавоноида: 6—С—Р~ •люкопиранозил — 5,7,3',4' — тетрагидроксифлавон; 8 — С — р — 'люкопиранозил — 5,7,3',4' — тетрагидроксифлавон; 7 — О — | — глкжопиранозил—5,3',4' — тригидроксифлавон; 1 иридоид — тиамарин).

\ля получения сухого экстракта из травы ломатогониума совидного измельченное до размера 1 — 8 мм. воздушно — сухое ительное сырье перколировали 70° спиртом (соотношение 1:10). ученное извлечение отстаивали при 8°С в течение суток и »тровали через марлю для отделения от балластных веществ, затем фивали на вакуумном испарителе и к остатку добавляли горячую иллированную воду. Полученный осадок отделяли фильтрованием з марлю, очищенное водное извлечение выпаривали на вакуумном рителе до 1/3 от взятого растительного сырья. 3 полученном густом экстракте определяли влажность и сумму аоноидов и ксантонов. После стандартизации экстракт >асовывали в соответствующую тару.

Технологический процесс получения густого экстракта пгогониума колесовидного представлен на рис. 11. Густой экстракт был использован для получения таблеток Галехол, >став которых в качестве вспомогательных веществ включены: юза, крахмал, стеарат кальция и тальк. Таблетки получали методом юго прессования. Технология таблеток Галехол защищена Патентом голии.

5. Таблетки Силодин.

Эсновываясь на разультатах химико — фармакологических едований горечавки острой, ломатогониума колесовидного, данных опционной медицины и некоторых исследователей нами )аботаны состав и технология комбинированного препарата, (анного Силодин, обладающего желчегонным действием и шающим функцию печени.

В состав таблеток Силодин кроме густого экстракта ломатогониума совидного и сухого экстракта горечавки острой входят суммы [фенольных соединений, выделенные из семян силибума марианума калоидов из хиазоспермума прямого.

Состав таблеток Силодин. Сухой экстракт горечавки острой 0.125 г.

Густой экстракт ломатогониума колесовидного 0.125 г. Препарат силибума марианума 0.015 г.

Сумма алкалоидов из хиазоспермума прямого 0.020 г. Крахмал 0.023 г.

Магния стеарат 0.003 г.

Гальк 0.009 г.

Препараты и экстракты.

Крахмал и другие вспомогательные вещества.

[Т.п.1.1. Измельчение |Т.п.1.2. Просеивание

|Т.п.1.3. Взвешивание

Т.п.2.1. Подготовка 4-х лопастного сместителя

Т.п.2.2. Смешивание

Т.п.3.1. Приготовление _магния стерата

Т.п.3.2. Приготовление талька

Т.п.4.1. Настройка таблеточной машины

Т.п.4.2. Прессование

Т.п.4.3. Контроль

[Т.п.5.1. Бракераж таблеток |— |Т.п.5.2. Подгоовка стеклотары |—

Т.п.5.3. Фасовка

>

Т.п.5.4. Маркировка

Г.п.1. Подготовка ингредиентов

Г.п.2. Смешивание в сместителе

Г.п.З. Опудриванне

Г.п.4. Таблетиро вание

Г.п.5. Фасовка, упаковка и маркировка

ГОТОВЫЙ ПРОДУКТ

Рис. 12. Технологическая схема производства таблеток Силодин

Технология получения сухого экстракта травы горечавки острой логична экстракту горечавки бородатой. Получение густого ракта ломатогониума колесовидного описана ранее. Препарат силибума марианума, содержащий сумму полифенольных мнений, получешгую из семян этого растения, и сумму алкалоидов зоспермума прямого, которые производятся в Монголии, эльзовали в качестве действующих веществ дяя получения минированного действия предлагаемого препарата. Технологическая схема производства таблеток Силодин ^ставлена на рис. 12.

В процессе производства все действующие вещества и крахмал ;льчали, просеивали и смешивали, затем опудривали необходимым [чеством магния стеарата и талька. Таблетировали методом прямого :сования.

Таблетки Силодин стандартизовали по содержанию у—пиронов лрометрическим методом после их выделения и очистки методом »ночной хроматграфии.

Содержание у—пиронов в одной таблетке должно быть в пределах 3-0.048 г.

Фармакологическими и клиническими исследованиями установлено, таблетки Силодин обладают антиоксидантным, браноукрепляющим, ярко выраженным желчегонным и тозащитным действием.

Технология защищена Патентом Монголии N4203, 1994 г. На вышеперечисленные препараты разработана и утверждена вся Зходиая нормативно — техническая документация (Стандарт на готовление надземной части горечавки острой—УСТ 4157 — 93, ды Силибума марианума —УСТ 4160 — 93, препарат горечавки эдатой — ТНЭМЯ 50 — 94, Технологический регламент получения карата из некоторых видов горечавки (ЭМЯ —ны сайдын тушаал, I оны А/11 тоотын 3 — р заалт), метод получения суммы флавоноидов 2-х видов горечавки (ЭМЯ —ны сайдын тушаал, 1994 оны А/И 'ын 2 —р заалт).

6. Гранулы Гепахол.

На основе проведенных химических, технологических и макологических исследований нами разработан препарат "Гепахол", гржащий сумму полифенольных соединений и эфирные масла эчавки острой, ломатогониума колесовидного и володушки цщелистной. Гепахол представляет собой гранулы буро—желтого

готовый ПРОДУКТ

Рис. 13. Технологический процесс получения гранул Гепахол.

а, горьковатого вкуса со своеобразным запахом, размер гранул 2.5мм., хорошо растворим в воде.

Состав гранул Гепахол (на 100 г.)

Сухой экстракт горечавки острой 17.6

Густой экстракт ломатогониума колесовидного 4.80 Густой экстракт володушки 11.4

Молочный сахар 66.2

Технология получения сухого экстракта горечавки острой и густого ракта ломатогониума колесовидного описана выше. Густой экстракт равы володушки козлецелистной получали по следующей методке: твующие вещества из растительного сырья экстрагировали 70° олом методом перколяции. Полученные настойки выпаривали на гумном испарителе и к остатку добавляли горячую иллированную воду. Осадок отделяли фильтрованием через марлю, [ценное водное извлечение выпаривали на вакуумном испарителе /3 от взятого растительного сырья.

Полученный густой экстракт стандартизовали и фасовали в ветствующую тару.

Технологический процесс получения гранул Гепахол представлен ис. 13.

3 четырехлопастном смесителе тщательно смешивали до получения )родной массы рассчитанные количества сухого экстракта чавки острой и густых экстрактов ломатогониума колесовидного и душки козлецелистной. К этой смеси частями добавляли молочный р и перемешивали до получения влажной пластической массы, не .ипающей к пальцам, которую затем пропускали через гранулятор аметром отверстий 2 мм. Гранулы сушили на листе пергаментной 1ги в сушильном шкафу при температуре не выше 33°С до точной влажности 5%. Высушенные гранулы дополнительно >льчали и увлажняли 95% спиртом, тщательно перемешивали, .авливали через металлическое сито диаметром отверстий 2 мм., м сушили при комнатной температуре. Высушенные гранулы еивали и проводили количественное определение на содержание шого масла и полифенольных соединений. Сумму полифенольных ^инений определяли методом фотоэлектроколометрии с льзованием калибровочного графика рутина. Содержание суммы фенольных соединений в гранулах "Гепахол" должно быть 8.2±2%.

Эфирные масла в препарате определяли газожидкостной [атографией, их содержание должно быть 1.85±0.23%.

Гранулы фасовали по 50 г. в стеклянные флаконы или в мешочки

из пергаментной бумаги по 1 г. Для производства предложенных граи разработана и утверждена нормативно — техническая документац] Технология защищена Патентом Монголии.

Результаты клинических и фармакологических исследован гранул "Гепахол" показали, что они по сравнению с таблетка "Генцихол" обладают более выраженным желчегонным гепатозащитным, антиоксидантным и капилляроукрепляющ действием. Приказом Министра здоровья Монголии №65 от 16 ию 1994 года гранулы "Гепахол" разрешены к медицинскому применен] и промышленному выпуску.

ВЫВОДЫ

1. Впервые в Монголии организованы фитохимико — фа{ макологические исследования 12 видов наиболее распространненн растений /3 вида Oxytropis и Gentiana, 4 вида Astragalus, 2 вида Вх pleurum/, широко применяемых в народной медицине при лечен различных заболеваний печени.

В результате химических и физико-химических исследован изучаемых растений выделено и идентифицировано 71 природ* соединение, 6 из которых оказались новыми.

На оснований спектральных данных /УФ — , ИК—, масс — , 'Н 13С — ЯМР — спектров/ и химических превращений установле строение всех выделенных веществ. При этом 4 из новых веще< отнесены к алкалоидам, одно — к ксантонам и одно — к флавоноид

2. Разработана схема выделения алкалоидов и флавоноидов надземных частей трех видов остролодочника. Впервые выявлено, ' растения рода Oxytropis содержат алкалоид, производи фенилэтиламина, имеюший в своем составе пиридиновый остаток.

Из трех видов остролодочника выделено 12 индивидуальн соединений, в том числе 4 алкалоида и 8 флавоноидов.

Из надземной части остролодочника пушисто — пузырчат< выделен природный новый ациклический алкалоид, относящий« фенилэтиламинам. Установлено его строение как N —бензоил—1 фенилэтиламин. Также выделены и идентифицированы извести алкалоид мурикатинин и флавоноидные соединения—ликвиритиген 7,4' — дигидроксифлавон и пратол. Причем, все три флавоно) выделены из представителей растения рода остролодочник впервы

На основании химических превращений и изучения спектралы данных доказано строение двух алкалоидов, производи фенилэтиламина — (+) — N —бензоил — 2 — фенил — оксиэтилами

ленных из надземной части остролодочника мягкоигольчатого. лоид ( —)— Г^ — никотиноил— 2 — фенил—2—оксиэтиламин является ым представителем производных фенилэтиламина, содержащим в составе пиридиновый остаток. Другой алкалоид оказался новым гческим антиподом — ( + ) — И —бензоил —2 —фенил —2 — 1этиламином. Также из данного растения выделены и тифицированы кемпферол и его дигликозид робинин. выделены, идентифицированы также рутин и кверцетин из емной части остролодочника шишковидного, являющегося одним сточников получения ценного препарата — рутина. $. Экспериментально установлены товароведческие показатели ства травы остролодочника шишковидного, на основания которых аботан и утвержден государственный стандарт на новый вид .я —«Трава остролодочника шишковидного» (УСТ —3304 —91), также аботан регламент технологического процесса получения сухого ракта из него.

I. Из надземной части горечавки бородатой выделены и тифицированы 7 ксантонов, 2 флавоноида и 2 иридоида. Из них юногидрокси - 3,8 — диметокси — 7 — 0 — |} — Б — глюко — нозилксантон является новым ксантоном. Флавоноид: диосметин и ^оиды: гентопикрозид и свертиамарин выделены из горечавки датой впервые.

>. На основании химико — фармакологических и технологических 1едований разработана технология по созданию нового [цинского препарата таблетки «Генцихол», который обладает ярко 1женным желчегонным, гепатозащитным, противовоспалительным твием. Он превосходит по желчегонной активности в 3 раза хол и в 1—3 раза ЫУ—52, силибинин, силибор, холензим, холосос рые используются в медицинской практике.

}. Из надземной части горечавки острой впервые выделены [тоны: беллидифолин, десметилбеллидифолин, коримбиозин, 'иферин; флавоноиды: лютеолин, цинарозид, гомоориентин; ^оид: гентопикрозид.

}. Из надземной части Аоматогониума колесовидного впервые лены и идентифицированы ксантоны: 1—моногидрокси —3,7,8— «етоксиксантон, 1,8 — дигидрокси — 3,5 — диметоксиксантон; юноиды: лютеолин, цинарозид, ориентин, изоориентин и иридоид: тиамарин.

3. В результате химико — фармакологического исследования 2-х в горечавковых получен новый медицинский препарат таблетки л.один», который обладает желчегонным и гепатозащитным

действием.

9. При помощи адсорбционной хроматографии на полиамидн сорбенте из изученных 4-х видов астрагалов выделено флавоноидных соединения, которые в результате физико — химическ исследований идентифицированы с кверцетином /выделленные астрагалов сходного, монгольского, даурского, перепончатог изорамнетином; рамноцитрином; апигенином; кемпферолс куматакенином; 3 — 0 — (} — О — глюкопиранозидом изорамнетина; 3 —( Р — Б — глюкопиранозил — (6 — 1) — 0~р — Ь — рамнопиранозид изорамнетина; 3 — О — Р~ V — глюкопиранозил — (6 — 1) — р — I рамнопиранозидом кверцетина; 3 —0 —р —Ь—арабопиранозид рамноцитрина, глюкозид выделен нами впервые и назв пропингозидом, 3 —0~Р~Б —глактопиранозидом изорамнетина; 3 —( р —Б —галактопиранозил— (6— 1) — 0 — р — Ь —рамнопиранозид кверцетина, 3 — 0 — р — Б — галактопиранозил — (2 — 1)—О — р — I арабопиранозидом кемпферола. Полученные соединения монгольских видов астрагала выделены впервые.

10. Разработана методика выделения очищенной сум] флавоноидов, содержащихся в надземной части астрагалов сходног< монгольского.

• Препарат, в состав которого входит сумма флавоноидов а стран сходного, названный нами «Биофлавон пропингозид» успешно проп клинические испытания и разрешен Министерством здравоохранен МНР к выпуску в качестве гипотензивного и успокаивающего средс Препарат из астрагала монгольского, по предварительным данш вызывает значительное снижения артериального давления продолжительностью более 60 минут.

11. В результате изучения 2 видов Володушки получено и идеь тифицировано 2 флавоноида, 3 кумарина и 90 терпеноидов.

12. На основе всесторонных исследований разработана и внедре в медицинскую практику технология получения нового препарг гранулы «Гепахол», полученный из двух видов горечавки и володуш козлецелистной.

Гепахол является эффективным желчегонным, гепатозащитнь антиоксидантным и капилляроукрепляющим средствами.

13. На предложенные препараты — настойка "Биофлав пропингозид", таблетки "Силодин", "Генцихол", "Галехол", грану "Гепахол" и сухой экстракт из травы остролодочника шишковиднс разработана и утверждена нормативно — техническая документам Препараты разрешены к медицинскому применению и промышленно выпуску. Технология получения их защищена Патентами Монголи]

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНО В СЛЕДУЮЩИХ РАБОТАХ

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Данные бумажно— роматографического изучения качественного состава флавоноидов ;екоторых видов астрагала, произрастающих в МНР. «Монголын нагаах ухаан», 1970, N1, С. 91-96.

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Изучение флавоноидов некоторых идов астрагала, произрастающих в МНР. "Фармацевтичний журнал", 1970, N6, С. 37-41.

Дунгэрдорж Д., Содов Ц. Определение содержания урана в юнгольском астрагале. Труды института физики и математики АН 4НР. г. Улан-Батор, N10, И. 1972, С. 41-42. Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Кумататекин из перепончатого страгала. «Химия природных соединений», 1972. N3, С. 389 Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Флавоноидные гликозиды астрагала ходного. "Химия природных соединений", 1973. N2, С. 272. Дунгэрдорж Д., Петренко В.В., Дерюгина Л.И. Агликоновый остав флавоноидного гликозида астрагала монгольского. «Химия [риродных соединений», 1974. N2, С. 256.

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. фитохимическое изучение ^страгала сходного. Материалы научно — практической :онференции врачей, УБ, 1973, С. 129-131.

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Изучение флавоноидов состава страгала перепончатого. Материалы республиканской научно — гракической конференции, посвященной 50 летию аптечного дела I МНР. УБ, 1973, С.9-10.

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. фитохимическое изучение [страгала монгольского. Материалы научно-практической конференции, посвященной 1У съезду монгольских учителей. УБ, 975, С. 17-25.

Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Монгол хунчрын химийн судалгаа. Монголын анагаах ухаан, 1980, №4, С. 45 — 46.

дунгэрдорж Д., Петренко В.В., Цэцэгмаа С., Батсурэн Д. Ижил хунчрын флавоноидын судалгаа. Монголы анагаах ухаан, 1985, №5, :. 234-236.

Цэрэндулам Л., Оюунгэрэл 3., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Сависхана навчит бэришийн (Вир1еигшт всоггопегИоНит \Villd) — 1Йн кумарины химийн судалгаа. Труды национального Центра Медицины, Улан-Батор, Декабрь. 1995. С. 77 — 81.

Цэрэндулам Л., Шатар С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Зарим (уйл (Вир1еигит) Бэришийн биологийн эфирийн тосны судалгаа. Груды национального Центра Медицины, Улан-Батор, Декабрь.

1995. С. 81-85.

Цэрэндулам Л., Дунгэрдорж Д. Хависзана навчит болон Сибирийн 5эришийн флавоноидыг судалсан дун. Монголын анагаах ухаан,

1996, №2. С. 66-75.

Цэрэндулам Л., Дунгэрдорж Д., Батсурэн Д. Зарим зуйл бэришийн 5иологийн идэвхт бодисыг судалсан дунгээС. Монголын анагаах ^хаан. 1996, №2. С. 180-186. Дунгэрдорж Д., Цэрэндулам Л., Батсурэн Д. Монгол ардын

змнэлэгт ерген хэрэглэж байсан зарим зуйл бэришийн фитохимв судалгаа. АУИС —ийн багш нарын эрдмийн чуулган —38. Ула1 Батор. 1996. С. 358-365.

17. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Дугуй дэгдний фитохимийн судалг Монгол анагаах ухаан. 1994. №4, С. 10—11.

18. Батсурэн Д., Цэцэгмаа С., Батбаяр Н., Дунгэрдорж Ахмеджанова В.И., Мильгром Ю.М., Рашкес Я.В., Ибрагимов А Алкалоиды Oxytropis. Химия природных соединений, 1992, N8. 388-393.

19. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Батиров Э.Х., Малш

B.М. Флавоноиды двух видов Oxytropis, произрастающих Монголии. Химия природных соединений, 1992, №5, С. 722 — 7

20 Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Уст хеенге ортууз алкалоидын судалгаа Анагаах ухаан, 1991, №2, С. 22 — 25.

21. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Даваасамбуу Г. Зее/ ергест ортуузын флавоноидын судалгаа Анагаах ухаан, 1990, №2, 13-17.

22. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Зеелен ергест ортууз флавоноидын судалгаа. Анагаах ухаан., 1990, №2, С. 13—17.

23. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Уст хеенге ортууз акалоидын судалгаа. Анагаах ухаан 1991, №2, С. 29 — 30

24. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г. Зеел ергест ортуузын шингэн хандын хими, технологи, эм судлал судалгааны дунгээС. АУИС —ийн багш нарын эрдэм шинжилгээн онол практикийн бага хурлын илтгэлийн хураангуй. УБ., 1991, N

C. 90-91

25. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Gentiana acuta, Gentiana Barbata гэс xoep зуйл дэгдний флавоноидыг судалсан дун. Монголын анаге ухаан. УБ. 1993, №1. С. 125-128.

26. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Пурэв О. Хурц дэгдний ксанто химийн судалгаа. ХХБ, 1989, №27, С. 18-20.

27. Хишгээ Д., Амбага М., Дунгэрдорж Д. Хурц дэгдний бэлдмэлл элэгний эсийн ухжлээс хамгаалах идэвхийг судалсан дунгэ: ШУТ—ийн тевийн мэдээлэл. 1988. С.48 —51. _

28. Хишгээ Д., Пурэв О., Дунгэрдорж Д. Дугуй дэгдний фитохими судалгаанд. Тэжээхуйн ухаан №1, 1991, С. 54 — 57.

29. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Пурэв О. Дугуй дэгдний (Lomatogonii rotatum L.) ксантоны судалгаа. Монголын анагаах ухаан, 1993, М С. 56-58.

30. Хишгээ Д., Пурэв О., Дунгэрдорж Д. Ксантоны и флавонои, Lomatogonium rotatum. ХПС, 1993, №6, С. 86-87.

31. Хишгээ Д., Пурэв О., Одонтуяа Г. и др. Флавоноиды Halei corniculata и Lomatogonium rotatum. Растит, pec. 1994, том 30, 148-151.

32. Дамдинсурэнн В., Чултэмсурэн М., Дунгэрдорж Д., Ковалев В.] Журавлев Н.С. Тарный овгийн зарим ургамалд антраце] уламжлалын бодисын тооны тодорхойлолт хийсэн дун, 1995, С. ;

33. Эрдэнэцэцэг Г., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Боргоцойрхуу ортууз) хуурай хандыг шахмал эмийн хэлбэрт оруулах асуудалд. М бутээлд, 1995, С. 87.

34. Пурэв О., Жамъянсан Я., Оюун X., Дунгэрдорж Д. Ксантоны флавоноиды Gentiana Barbata. ХПС, Ташкент, 1990, №4, С. 284-2

1урэв О., Дунгэрдорж Д., Хишгээ Д. Зарим зуйл дэгдний химийн грьдчилсан судалгаа. Монголын анагаах ухаан. 1992. №4, С. 56 — 58. дунгэрдорж Д., Хишгээ Д., Пурэв О. Хурц дэгдний ксантоны зуйл дэгдний флавоноидыг судалсан дун. Монголын анагаах ухаан. УБ. 993. №1, С. 125-128.

с. № 255 Дунгэрдорж Д., Петренко В.В.Технология получения )утина из Oxytropis strobilacea Bge (УСТ 255 — 75). A.c. № 4157 Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. и др. Стандарт о фиготовлении надземной часи Горечавки острой (УСТ 4157 — 93). I. с. № 4160 Хишгээ Д., Пурэв О., Дунгэрдорж Д. Плоды Силибума Марианума (УСТ 4160-93).

А. с. № 4156 Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Надземная часть \оматогониума колесовидного (УСТ 4156 — 93). V. с. № 50 ЭМЯ Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Пурэв О. Препарат "оречавки бородатой (ТН —ЭМЯ —50—94)

А., с. № 11/А —3 Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Саранцэцэг Б. Технологический регламент получения препарата из некоторых Ъречавки. (ЭМЯ —ны сайдын тушаал 1994 оны А/11 тоотын 3—р 1аалт).

V. с. № И/А —2 Пурэв О., Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Методы юлучения суммы флавоноидов из 2х видов Горечавки. (ЭМЯ —ны :айдын тушаал. 1994 оны А/11 тоотын 2 —р заалт). к., с. № 4203 Хишгээ Д., Саранцэцэг Б., Амбага М., Дунгэрдорж Д. Технология приготвления таблетки «Силодин» (0,32г). V. с. № 3304 Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Шийрэвдамба Ц. Трава Oxyropis strobilaceae, Bge (УСТ—3304 —

t. с. № 21271 Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц \ Источник рутина. От 17 сентября 1990.

А. с. № 21179 Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. биологические активные веществыа Oxytropis trichophysa Bge, 1990. l. с. № 21178 Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Флавоноиды Dxytropis Muricata DC. и их количественное определение. 1990. 1ат. 15876. Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Медицинский препарат Биофлавон пропингозид".

1ат. 33041. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г., Дийрэвдамба Ц. Трава остролодочника шишковидного. 1ат. 11394. Пурэв О., Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Медицинский фепарат "Генцихол".

1ат. 5094. Пурэв О., Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Цэрэндулам Л. и ф. Лекарственный препарат "Галехол".

1ат. 420394. Хишгээ Д., Наранцэцэг Б., Амбага М., Дунгэрдорж Д. Таблетки "Силодин" 0.32 г.

Пат. 651695. Цэрэндулам Л., Оюунгэрэл 3., Дунгэрдорж Д. Медицинский препарат "Гранулы Гепахол".

[эцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г., Шийрэвдамба Д. Боргоцойрхуу ортуузын евС. Улсын стандарт 3304 — 91. (эцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г. Рутины шинэ »x булаг. Оновчтой санал, унэмлэх N21271 17.9.1990. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Уст хеенге ортуузын >иологийн идэвхт бодиС. Оновчтой санал 1990. N21179. Дэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Зеелен ергест ортуузын

флавоноид, туунийг тодорхойлох арга. Оновчтой санал. N21

1990.

59. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Уст хеенге ортуу: алкалоидны судалгааны дунгээС. ШУТМТ —ийн эр, шинжилгээний судалгаа, боловсруулалтын ур дун. т.3/2 —91, 1! С. 3-9.

60. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г., Эрдэн цэцэг Г. Боргоцойрхуу ортуузын хуурай ханд бэлтгэх технолог! заавар. Эмийн заводын даргын 1991 оны 191—р тушаал батлагдсан.

61. Дунгэрдорж Д., Петренко В.В. Изучение флавоноидного cocí некоторых астрагалов, произрастающих в МНР. Тезисы докла республиканской научно — практической конференц посвященной 100 —летию со дня рождения В.И.Ленина, УБ, 11 С. 33-34.

62. Дунгэрдорж Д. Установление структуры флавоноидов астраг сходного. В кн. Тезисы докладов научно — практичес] конференции преподавателей МГМИ. УБ, 1972, С. 7 — 8.

63. Батсурэн Д., Цэцэгмаа С., Дунгэрдорж Д. Выделение и исследова: алкалоида из Oxyrtopis trichophysa Bge. Тезисы докла, Республиканской научной конференции Реализация науч* достижений в практической фармации, Харьков, 1991, С.111—'

64. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Исследование алкало: — остролодочника пушисто —пузырчатого. Тезисы доклад посвященных 70 летию Харьковского фармацевтическ> института. Октябрь. 1991.

65. Цэцэгмаа С., Дунгэрдорж Д. Ортуузын тархалтын талаар. АУД< ийнбагш нарын эрдэм шинжилгээний онол практикийн бага хур/ илтгэлийн хураангуй. УБ, 1989, С. 16.

66. Цэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г. Боргоцойр ортууз (Oxytropis strobilacea Bge) — ын судалгаа /ШУТМЭ — i эрдэм шинжилгээний судалгаа, боловсруулалтын ур дун эмхтгэл*

1991, №2, С. 10-13.

67. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Стихии В.А. Фитохимическое изуче! горечавки острой Научно — практическая конференция. Велш октябрь и актуальные проблемы здравоохранения и медицине! науки МНР, 1987, С. 66-70.

68. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Phytochemical and chemotoxpanoi features of Mongolian Gentianaceae, Devoted to the thesis of 2 Aniversity Chemistry Institute, Mongolia, 1994, p. 32 — 36.

69. Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д., Стихии В.А. К фитохимическс изучению горечавки острой. Тезисы "Докладов научн конференции и семинара. К вопросу рационального использова!

. ресурсов лекарственных растении МНР" УБ, 1987, С. 2 — 3.

70.' ' Хишгээ Д., Саранцэцэг Б., Амбага М., Дунгэрдорж Д. Э. хамгаалах уйлдэлтэй нэгдлуудийн химийн бутэц болон фармакол< уйлдлийн хоорондын харилцааны уялдаа. Монгол орны ургамал аймаг, ургамжилтын судалгаа суулийн 20 жилд. Ботаники хурээлэнгийн эрдэм шинжилгээний бага хурлын илтгэли .хураангуй. 1994, С. 50-51.

7Í: Хишгээ Д., Дунгэрдорж Д. Gentiana acuta Michx — хурц дэгдн: бэлдмэл гарган авч стандартчлах. "Монгол туургатны уламжл

анагаах ухаан" олон улсын эрдэм шинжилгээний бага хурлын илтгэлийн хураангуй УБ, 1995, С. 39 — 41.

Дунгэрдорж Д., Хишгээ Д. Biological investigation of the crude alcohol etxracts from the species of Gentianaceae, devoted to the international conference, Ulaanbaatar, 1995, p. 48 — 49. Дэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д. Зеелен ергест ортуузын флавоноидын дигликозид. Эх орны эмийн уйлдвэрлэл, эмийн кэрэгцээ, хангамж, эмийн ургамалын судалгаа сэдэвт эрдэм шинжилгээний хурлын илтгэлийн хураангуй. УБ., 1990, С.20 —21. Дэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Чойжамц Г. Боргоцойрхуу эртуузын хандны хими, фармакологийн судалгаанааС. мен тэнд х 15.

Дэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Жамъянсурэн О. Зеелен эргест ортуузын евсний флавоноидын тооны тодорхойлолтын 1суудалд. АУДС —ийн багш нарын эрдэм шинжилгээний онол трактикийн бага хурлын илтгэлийн хураангуй УБ., 1990, С. 96 — 97. Дэцэгмаа С., Батсурэн Д., Дунгэрдорж Д., Жамъянсурэн О. Зеелен гргест ортуузын флавоноидын тоон тодорхойлолтын асуудалд. \УИС — ийн багш нарын эрдэм шинжилгээний 32 дугаар бага сурлын илтгэлийн хуаангуй. Уланбаатар, 1990, С. 96 — 97.

«The development of the Medicinal preparations on the basic of the study of some species plants is used in Mongolian traditional medicine»^

The thesis for the degree of Doctor of Pharmacy in speciality 15.00.01 — the íology of drugs; Ukrainian Academy of Pharmacy, Kharkov, 1996. The thesis is represented in the form of a manuscript. There was studied 12 species plants of kinds Astragalus, Oxytropis, iana and Bupleurum, have educed and identified from them 71 substance ding 6 new substances: 4 alkaloids (N—benzoyl — 2—phenylaethylamin, — N—benzoyl — 2 — phenyl—2—oxyaethylamin, / — / — N—benzoyl — 2 — iyl — 2 — oxyaethylamin, / — / — N — nicotinoyl — 2 — phenyl — 2 — ethylamin), 1 flavonoid (propingozid), 1 xanton (7 —0 —p —D — ipiranozyl — 1 — monohydroxy—3,8 — dimethoxyxanton). On the basic of chemical, pharmacological and technological investiga — of studing plants were developed 6 new medicines: tablets «Gencichol», íchol», «Silodin», nastoyka «Bioflavon propingozid», dried extract from ropis Strobilaceae, granul «Gepachol», which have used in treatment of us diseases of liver.

Resume

Dungerdorj D.