Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Разработка технологии, стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 15.00.01
Автореферат диссертации по фармакологии на тему Разработка технологии, стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого
На правах рукописи
"иочао14"
БИНДЮК МАРИЯ АЛЕКСАНДРОВНА
РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ, СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКТА И МАЗИ ИЗ ЛИСТЬЕВ ЛОПУХА БОЛЬШОГО
15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дела
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук
г г .
Пермь - 2009
003458147
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Алтайский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Научный руководитель:
доктор фармацевтических наук, профессор Федосеева Людмила Михайловна
Официальные оппоненты:
доктор фармацевтических наук, профессор Решетников Виктор Иванович
доктор фармацевтических наук, профессор Ковальская Галина Николаевна
Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Защита состоится 13 января 2009 г. в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при Пермской государственной фармацевтической академии по адресу 614670, г. Пермь, ул. Ленина,48
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пермской государственной фармацевтической академии по адресу 614670, г. Пермь, ул. Крупской, 46.
Автореферат разослан 6 декабря 2008 г.
Ученый секретарь диссертационного совета кандидат фармацевтических наук, доцент
И.А. Липатникова
Введение
Актуальность проблемы. В структуре современного фармацевтического рынка неуклонно растет доля препаратов на основе лекарственного растительного сырья. Широкий спектр их действия объясняется многокомпонентностью состава биологически активных веществ, одновременным присутствием соединений различной природы. Мягкое терапевтическое действие, малая токсичность, редкое возникновение побочных явлений, экономическая доступность - это немногие из достоинств растительных средств.
Растущий интерес к фитотерапии стимулирует расширение и обновление ассортимента за счет внедрения в научную медицину растений народной медицины и разработки новых фитопрепаратов на их основе.
В народной медицине широко применяются корни и листья лопуха большого при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сахарном диабете, злокачественных новообразованиях, воспалениях слизистой оболочки полости рта, кожных заболевания и др. В официнальной медицине используют корни лопуха большого в качестве мочегонного и спазмолитического средства.
На кафедре фармацевтической химии АГМУ проведены исследования по изучению листьев лопуха большого. Определено содержание полисахаридов, дубильных веществ, флавоноидов, кислоты аскорбиновой, суммы алкалоидов, суммы липофильных веществ. Установлена антимикробная и антиоксидантная активность (Кнауб H.H. 2006 г.).
Листья лопуха являются перспективным сырьем для
внедрения в медицинскую практику. Разработка технологии получения сухого экстракта из листьев лопуха, содержащего комплекс водорастворимых веществ, является актуальной проблемой для фармацевтической науки и практики.
Цель и задачи исследования. Цель исследования -разработка технологии и стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого.
Для осуществления поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучить технологические параметры листьев лопуха большого.
2. Определить оптимальные условия экстрагирования листьев лопуха.
3. Разработать технологию и технологическую схему получения экстракта листьев лопуха.
4. Провести фотохимическое исследование экстракта листьев лопуха.
5. Установить показатели качества экстракта листьев лопуха.
6. Разработать состав и технологию изготовления основы и мази с экстрактом листьев лопуха, провести биофармацевтическую оценку, установить показатели качества.
7. Установить специфическую активность экстракта листьев лопуха и мази.
8. Разработать проекты ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
9. Разработать лабораторный регламент на производство экстракта листьев лопуха сухого.
Научная новизна. Определены технологические параметры листьев лопуха большого. Установлены оптимальные условия экстрагирования лекарственного растительного сырья, с помощью математических методов планирования, получен экстракт листьев лопуха сухой. Проведены фотохимические исследования экстракта, установлено, что комплекс БАС включает флавоноиды, дубильные вещества, полисахариды, кислоту аскорбиновую.
Разработан состав, технология и схема мазевой основы и прописи мази с экстрактом листьев лопуха. Проведена биофармацевтическая оценка мази. Новизна состава основы и мази подтверждена патентом на изобретение «Состав для фиксации съемных зубных протезов с экстрактом листьев лопуха» по заявке №2007118144.
Проведены фармакологические исследования, в результате которых установлена антимикробная и местная противовоспалительная активность экстракта и мази с экстрактом листьев лопуха.
Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований показана возможность расширения ассортимента лекарственных препаратов на основе растительного сырья за счет использования экстракта и мази листьев лопуха большого, применения их в качестве антимикробного и противовоспалительного средства. Разработаны проекты ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
Степень внедрения. На основании проведенных
исследований разработаны: проект ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», лабораторный регламент на производство экстракт листьев лопуха сухого (Акт апробации ЗАО «Еврофарм» от 9.04.2008 г.), проект ФСП «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
Теоретические положения и результаты экспериментальных исследований используются в учебном процессе и научно-исследовательской работе кафедры фармацевтической химии с курсами органической и токсикологической химии и кафедры фармацевтической технологии Алтайского государственного медицинского университета, в учебном процессе кафедры фармации Иркутского государственного института усовершенствования врачей (акты внедрения).
Основные положения, выносимые на защиту.
Результаты технологического, фотохимического,
фармакологического исследования листьев лопуха большого, экстракта и мази.
Апробация полученных результатов. Основные материалы диссертации обсуждены на научно-практических конференциях "Актуальные проблемы фармации" (Барнаул 2006, 2007, 2008), "Молодежь Барнаулу" (Барнаул, 2005, 2006, 2007), на региональной научно-практической конференции (с международным участием), посвященной 40-летию фармацевтического факультета КГМУ «Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики» (Курск 2006).
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в
соответствии с планом научно-исследовательских работ Алтайского государственного медицинского университета (номер государственной регистрации 01.200316088).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, одна из которых в журнале, рекомендуемом ВАК. Получен патент Российской Федерации на изобретение.
Экспериментальные исследования по теме диссертации выполнялись на базе Алтайского государственного медицинского университета: на кафедре фармацевтической химии с курсами органической и токсикологической химии, на кафедре фармакологии (под рук. к.м.н., доц. Госсен И.Е., д.м.н., проф. Зверева Я.Ф.), на кафедре микробиологии и вирусологии (под рук. к.м.н., доц. Юровой В.А.).
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, четырех глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований, выводов, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 35 таблицами и 24 рисунками. Библиографический указатель включает 140 источников литературы, из них 50 зарубежных.
Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, показана новизна и практическая значимость проведенных исследований, основные положения, выносимые на защиту.
Первая глава содержит обзор отечественной и зарубежной литературы, отражающий современное состояние исследований в
области фитохимии, технологии, фармакологии и медицинского применения вида Arctium lappa L., его распространение в РФ и за рубежом, запасы. Обобщены сведения о вспомогательных веществах, используемых при разработке мягких лекарственных форм на гидрофильных основах.
Вторая глава посвящена описанию объектов и методов исследования.
В третьей главе приведены результаты исследований по определению технологических параметров лекарственного растительного сырья, установлению оптимальных условий экстракционного процесса листьев лопуха, результаты разработки технологии и схемы получения, фитохимического исследования экстракта листьев лопуха.
В четвертой главе изложены результаты экспериментальных исследований по разработке состава мазевой основы и прописи мази, технологии и оценки качества мази с экстрактом листьев лопуха.
В пятой главе изложены результаты микробиологических и фармакологических исследований экстракта и мази с экстрактом листьев лопуха.
Шестая глава посвящена стандартизации экстракта и мази листьев лопуха. Установлены показатели подлинности и доброкачественности препаратов, необходимые для разработки НД.
В приложении представлены данные спектральных исследований БАС, результаты изучения сроков годности экстракта и мази, проекты ФСП, лабораторный регламент,
основные документы, подтверждающие внедрение результатов диссертационной работы.
Объекты и методы исследования
В качестве объекта исследования использовали воздушно-сухое сырье - листья лопуха большого, заготовленное в фазу цветения, в окрестностях г. Барнаула в 2005-2007 гг.
Определение оптимальных условий экстракции проводили математическими методами планирования эксперимента, использовали симплексный метод, не полный факторный эксперимент, метод крутого восхождения (Беликов В.Г. и др.).
Идентификацию основных групп биологически активных соединений осуществляли химическими реакциями, хроматографическими методами исследования: ТСХ, ВЭЖХ («Милихром-А-02»), оптическим методом: УФ-спектрофотометрия (Vanan Сагу 50). Количественное определение основных групп биологически активных веществ проводили титриметрическими и физико-химическими методами.
Противовоспалительную активность исследовали на обоеполых кроликах массой 1,8 - 2,3 кг. В качестве модели воспаления использовали УФ эритемы.
Для изучения антимикробной активности использовали метод культивирования микробной культуры на питательной среде с различными концентрациями изучаемых препаратов (метод серийных разведений, Навашин С.М., Фомин И.П.)
Проведена статистическая обработка полученных результатов согласно ГФ XI издания: проверка выборок на
однородность, расчет среднего значения выборки, стандартного отклонения среднего, граничного значения доверительного интервала среднего, относительной ошибки среднего результат. Использовали компьютерные программы: BIOSTAT, MS Excel.
Разработка технологии экстракта листьев лопуха
Для разработки технологии экстракта листьев лопуха необходимо установить технологические параметры лекарственного растительного сырья, определить оптимальные условия экстрагирования, изучить влияние технологических факторов на процесс извлечения и качество готового продукта.
По общепринятым методикам установили показатели качества листьев лопуха большого (табл. 1).
Таблица 1
Результаты определения показателей качества листьев лопуха
Показатель Метрологические характеристики (п = 5, Р = 95%, tp = 2,78)
Х± АХ Sx 8,%
Экстрактивные вещества, % (экстрагент - вода очищенная) 36,75 ± 0,321 0,1435 1,09
Дубильные вещества, % (СФМ) 8,14 ±0,166 0,0742 2,53
Влажность, % 6,84 ±0,124 0,0556 2,26
Содержание дубильных веществ в листья лопуха большого составило 8,14±0Д7 %, экстрактивных веществ, извлекаемых водой очищенной, - 36,75±0,32 %, влажность - 6,84±0,12 %.
По методикам И.А. Муравьева и Ю.Г. Пшукова установили технологические параметры листьев лопуха большого (табл. 2).
Таблица 2
Результаты определения технологических параметров листьев лопуха большого
Показатель Метрологические характеристики (п = 5,Р = 95%,1р = 2,78)
Х± АХ Бх Е,%
Насыпная масса, кг/мМ О"3 0,23 ±0,005 0,0024 3,01
Коэффициент наполнения сухого сырья, м3/кг *10"3 3,42 ± 0,085 0,0380 3,09
Коэффициент вытеснения сырья, м3/кг «КГ3 1,01 ±0,022 0,0098 2,71
Коэффициент наполнения набухшего сырья, м3/кг *10"3 1,90 ±0,023 0,0102 1,49
Коэффициент поглощения сырья, м3/кг • 10"3 2,74 ± 0,027 0,0121 1,22
Коэффициент образования внутреннего сока, м3/кг *10"3 3,05 ± 0,039 0,0175 1,60
Коэффициент увеличения объема при растворении экстрактивных веществ, м3/г *10"3 0,54 ± 0,010 0,0045 2,30
Насыпная масса составила 0,23±0,01 кг/мЧО'3; коэффициент наполнения сухого сырья - 3,42±0,09 м3/кг *10"3; коэффициент наполнения набухшего сырья - 1,90±0,02 м3/кг *10"3; коэффициент вытеснения сырья - 1,01±0,02 м3/кг «10"3; коэффициент поглощения - 2,74±0,03 м3/кг *10"3; коэффициент образования внутреннего сока - 3,05±0,04 м3/кг • 10"3; коэффициент увеличения объема при растворении экстрактивных веществ -0,54±0,01 м3/кг *10"3.
С учетом установленных параметров рассчитали степень истощения сырья, которая составила в среднем 97,43%.
11
Для установления оптимальных условий экстракции листьев лопуха, с целью максимального извлечения биологически активных соединений при минимальных затратах сырья, экстрагента и времени, применили симплексный метод математического планирования эксперимента.
В качестве метода экстракции применяли ремацерацию, экстрагент - вода очищенная.
Исходя из теоретических основ экстракции, ввели следующие ограничения на переменные факторы: измельченность сырья (х^ от 0,5 до 3,5 мм; соотношение сырья и экстрагента (х2) от 1:5 до 1:15; время одного настаивания (х3) от 15 до 45 минут; число мацераций (Х4) от 2 до 4; температура (х5) от 20 до 100°С.
Параметром оптимизации служило истощение листьев лопуха большого по экстрактивным веществам.
Для описания эксперимента в области оптимума и составления уравнения поверхности отклика поставили неполный факторный эксперимент типа 25'2.
В ходе технологических исследований были конкретизированы условия экстракции и установлен оптимальный режим извлечения биологически активных веществ из листьев лопуха большого по методу крутого восхождения по поверхности отклика с использованием линейного уравнения.
При реализации первого опыта истощенность сырья составила 96,76%, что в пределах ошибки опыта близко к теоретическому.
Установлены оптимальные условия экстракции листьев лопуха: измельченность сырья - 2 мм, соотношение сырья и
экстрагента - 1:10, время одной мацерации - 30 мин., число мацераций - 3, температура - 100°С.
Разработана технология и технологическая схема получения экстракта листьев лопуха (рис. 1). Технологическая схема состоит из следующих технологических процессов: экстракция сырья, очистка извлечения, сушка извлечения.
По разработанной технологической схеме было наработано 5 серий экстракта листьев лопуха, рассчитан технологический выход препарата по экстрактивным и дубильным веществам. Полученные результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3
Технологический выход экстракта листьев лопуха по экстрактивным и биологически активным веществам
Серия № Содержание в сырье, % Получено экстракта % Содержание в экстракте дубильных веществ Выход, %
экстрактивных веществ дубильных веществ экстрактивных веществ дубильных веществ
1 34,67 ±0,344 в* =0,1539 е = 1,23 % 7,99 ±0,019 в* = 0,0086 £ = 0,30 % 33,86 22,07 ± 0,033 Б* =0,0148 е = 0,19 % 97,66 95,76
2 36,75 ±0,335 в* =0,1498 £ = 1,13 % 9,34±0,032 Б* =0,0141 £ = 0,42% 35,42 24,15 ±0,042 Бг =0,0186 6 = 0,21 % 96,38 95,02
3 35,92 ±0,317 в, =0,1419 £=1,10% 8,04 ±0,008 Б* =0,0037 Е = 0,13% 34,99 21,69 ±0,180 в* = 0,0804 £=1,03% 97,41 96,90
4 35,18 ±0,367 в* = 0,1642 £=1,30% 8,01 ±0,009 в* =0,0040 £ = 0,14% 34,28 21,96 ±0,101 Б* =0,0451 £ = 0,57% 97,44 96,45
5 35,54 ±0,269 в* =0,1204 6=1,00% 8,03 ±0,015 Б* = 0,0068 £ = 0,23 % 34,34 21,77 ±0,164 в* = 0,0734 6 = 0,94% 96,62 96,35
Технологический выход экстракта листьев лопуха по экстрактивным веществам составил 96,38 - 97,66%, по дубильным веществам 95,02 - 96,90%.
ВР1. Санитарная обработка производства
ВР 1.1, Подготовка воздуха
ВР 1.2 Подготовка дез. растворов для сан. обработки оборудования
ВР 1.3, Подготовка помещений и оборудования
ВР 1.4 Подготовка персонала
ВР 1.5. Подготовка технологической одежды
Потери механические
ВР 2. Под готовка сырья и экстрагента
И
ВР 2.1. Измельчение растительного сырья
ВР 2.2. Получение воды очищенной
ТП 3. Экстракция измельченного сырья методом ремацерации
ТП 4. Очистка извлечения
Шрот
ТП 4 1. Отстаивание
ТП 4.2. Фильтрование
Влага
И
м
ТП 5. Сушка извлечения
Потери механические
ТП 5.1. Сгущение извлечения в вакууме
ТП 5.2. Собственно сушка
ТП 5.3. Измельчение готового продукта
ТП 5.4. Просеивание готового продуота
ТП б. Стандартизация готового продукта
Потери ии^^^^ механические УМО 7. Фасовка, упаковка, маркировка
Склад готовой продукции *-
Рис. 1. Технологическая схема получения сухого экстракта листьев
лопуха
Для изучения химического состава экстракта листьев лопуха провели качественные реакции. В результате исследований обнаружены фенольные соединения (дубильные вещества, флавоноиды, фенолокислоты), полисахариды, кислота аскорбиновая.
Дальнейшую идентификацию фенольных соединений проводили методом ВЭЖХ. Установили наличие 10 соединений (рис. 2), из которых идентифицированы рутин и кислота хлорогеновая (рис.3). Критериями оценки служили времена удерживания и спектры абсорбции веществ.
Время, мин
Рис. 2. Хроматограмма спиртового раствора экстракта листьев
лопуха
Рис. 3. Спектры абсорбции рутина (А) и кислоты хлорогеновой (Б), обнаруженных в экстракте листьев лопуха
Проведена наработка 5 серий экстракта и установлено содержание дубильных веществ от 36,72 до 41,05%, флавоноидов -от 1,66 до 1,84%, полисахаридов - от 20,72 до 23,14%, кислоты аскорбиновой - от 780 до 983 мг%.
Проведена стандартизация экстракта листьев лопуха. Влажность экстракта листьев лопуха не более 5 %, зола общая не более 15 %. Стандартизацию экстракта целесообразно проводить по дубильным веществам, содержание которых должно быть не менее 15 %. Срок годности - 2 года.
Разработка мази с экстрактом листьев лопуха
Следующий этап исследований - разработка мази с экстрактом листьев лопуха для возможного применения в ортопедической стоматологии. Лекарственная форма должна обладать противовоспалительным, регенерирующим,
дезодорирующим действием и пролонгированным эффектом. Поэтому в состав прописи включили фитопрепараты: экстракт листьев лопуха сухой, масло мяты перечной, масло облепиховое.
Первоначально разрабатывали состав гидрофильной основы с использованием высокомолекулярных соединений и вспомогательных веществ, разрешенных к медицинскому применению и отвечающих требованиям действующей нормативной документации: метилцеллюлоза (ТУ 2231-107-05742755-96м), №-КМЦ (ТУ 2231-034-07507908-01), поливиниловый спирт (марки «гелевин») (ТУ 6-05-05-279-88), поливинилпирролидон среднемолекулярный (ФС 42-2238-84), вода очищенная (ФС 42-2619-97), глицерин (ФС 42-2202-99).
С целью разработки оптимального состава основы нами изучено 8 полимерных композиций. Основы оценивали по способности образовывать устойчивый гель, обладать адгезией. В результате исследований лучшими характеристиками отличалась основа, содержащая Ыа-КМЦ и ПВС.
Для оптимизации состава основы проведены исследования по варьированию концентрации полимеров ПВС и Иа-КМЦ в композиции. В результате подобран состав основы: ПВС - 6,0; Ка-КМЦ - 6,0; глицерина - 15,0; воды очищенной до 100,0.
С целью оказания антимикробного,
противовоспалительного, дезодорирующего действия в состав полимерной композиции включили лекарственные средства растительного происхождения: экстракт листьев лопуха сухой, масло мяты перечной, масло облепиховое. При введении лекарственных средств необходимо сохранение структурно-механических свойств основы. Поэтому концентрации препаратов подбирались экспериментально, с учетом терапевтической концентрации и свойств лекарственных средств.
В результате исследований подобран состав мази: экстракт листьев лопуха сухой - 5,0; масло облепиховое - 0,16; масло мяты перечной - 0,12; ПВС - 5,7; Ка-КМЦ - 5,7; глицерин - 14,2; вода очищенная - до 100,0. Разработана технология и технологическая схема мази с экстрактом листьев лопуха. В технологической схеме выделяется технологический процесс - приготовление лекарственной формы, состоящий из следующих операций: подготовка основы, введение лекарственных средств, гомогенизация.
Биофармацевтические исследования по высвобождению фенольных соединений из мази с экстрактом листьев лопуха проводили методом диффузии в гель и методом равновесного диализа. Полнота высвобождения составила 60% в течение 8 часов, что свидетельствует о пролонгированном действии мази.
Проведена стандартизация мази с экстрактом листьев лопуха по дубильным веществам. Установлен срок годности - 1 год.
Изучение специфической активности экстракта листьев лопуха и мази с экстрактом
Для изучения антимикробной активности (кафедра микробиологии ГОУ ВПО АГМУ Росздрава) использовали метод культивирования микробной культуры на питательной среде с различными концентрациями изучаемых препаратов. В работе использовали 21 штамм патогенных и условно-патогенных микроорганизмов: Staphylococcus epidermidis - 3 штамма; Staphylococcus aureus - 3 штамма; Escherichia coli - 3 штамма; Pseudomonas aeruginosa - 4 штамма; Грибы рода Candida - 4 штамма; Proteus vulgaris - 4 штамма. Анализ проведенных исследований показывает, что экстракт листьев лопуха и мазь с экстрактом оказывают бактерицидное действие на изученные штаммы микроорганизмов. МПК лекарственной формы, в пересчете на экстракт составила 25 мг/мл (кроме штаммов Pseudomonas aeruginosa, МПК - 50 мг/мл). МПК экстракта листьев лопуха для этих штаммов составляет 50 мг/мл, для грибов рода Candida 25 мг/мл (рис. 4).
50
40
i 30
20
10 -I— о
Staphylococcus Staphylococcus Escherichia coli Pseudomonas Грибы рода Proteus epidermidis aureus aeruginosa Candida vulgaris
□ Мазь □ Экстракт
Рис. 4. Минимальная подавляющая концентрация экстракта и мази из листьев лопуха большого
Изучение местной противовоспалительной активности (кафедра фармакологии ГОУ ВПО АГМУ Росздрава) проводили на модели УФ эритем. Исследования проводили на обоеполых кроликах массой 1,8 - 2,3 кг. Эритемы вызывали с помощью ультрафиолетового излучения. Через 24 часа наблюдали пик эритемальной активности. Эритемы имели ярко-красный цвет, четко выраженные границы, «припухлость», повышенную чувствительность кожи (рис. 5).
Рис. 5. УФ эритемы кролика, 1 день после облучения
Угасание реакции воспаления наблюдали на 6 день (рис. 6), полное восстановление процессов наступало через 7-8 дней после облучения (рис. 7). Ежедневно на эритемы наносили: исследуемую мазь с экстрактом листьев лопуха, экстракт листьев лопуха (в основе), полимерную основу, мазь индометациновую. Оценивали развитие УФ эритем ежедневно, в течение 8 дней.
12 3 45
•• ./. •.. да-
Рис.6. УФ эритемы кролика, 6 день после облучения и лечения
1 - основа, 2 - индометациновая мазь, 3 - контроль, 4 - лекарственная форма для ортопедической стоматологии, 5 - экстракт листьев лопуха.
1 2 3 4 5
„ ч
Рис.7. УФ эритемы кролика, 8 день после облучения и лечения
В результате установлено, что экстракт листьев лопуха и мазь проявляют местное противовоспалительное действие, значительно превышающее активность мази индометациновой.
Общие выводы
1. Установлены технологические параметры листьев лопуха большого: насыпная масса - 0,23±0,01 кг/мМ О"3; коэффициент наполнения сухого сырья - 3,42±0,09 м3/кг«10"3; коэффициент наполнения набухшего сырья - 1,90±0,02 м3/кг*10"3; коэффициент вытеснения сырья - 1,01±0,02 м3/кг» 10"3; коэффициент поглощения - 2,74±0,03 м3/кг*10"3; коэффициент образования внутреннего сока - 3,05±0,04 м3/кг*10"3; коэффициент увеличения объема при растворении экстрактивных веществ - 0,54±0,01 м3/кг»10'3; влажность -6,84±0,12%; содержание экстрактивных веществ 36,75±0,32%; содержание дубильных веществ - 8,14±0,17%.
2. Определены оптимальные условия экстрагирования листьев лопуха большого: измельченность сырья - 2 мм, соотношение сырья и экстрагента - 1:10, время одной мацерации - 30 мин., число мацераций - 3, температура - 100 °С. Разработана технология и технологическая схема получения экстракта. Технологический выход по экстрактивным веществам - 96,38 -97,66%, по дубильным веществам - 95,02 - 96,90%.
3. Установлено наличие в экстракте дубильных веществ, флавоноидов, фенолокислот (идентифицированы рутин и кислота хлорогеновая), полисахаридов, кислоты аскорбиновой. Определено содержание основных биологически активных соединений в экстракте: дубильных веществ (21,69 - 24,15%), флавоноидов (1,66 - 1,84%), полисахаридов (20,72 - 23,14%), кислоты аскорбиновой (780 - 983 мг%).
4. Определены числовые показатели экстракта листьев лопуха: дубильных веществ не менее 15%, влажность не более 5%, зола общая не более 15%. Срок годности 2 года.
5. Установлен оптимальный состав мази с экстрактом листьев лопуха: экстракт листьев лопуха сухой - 5,0; масло облепиховое - 0,16; масло мяты перечной - 0,12; ПВС - 5,7; Ыа-КМЦ - 5,7; глицерин - 14,2; вода очищенная до 100,0. Разработана технология и технологическая схема получения мази.
6. Проведена биофармацевтическая оценка лекарственной формы, методом диализа изучена динамика высвобождения дубильных веществ в течение 8 часов, высвобождение составило 60% в течение 5 часов.
7. Разработаны показатели качества мази с экстрактом листьев лопуха: описание, подлинность (по дубильным веществам), содержание дубильных веществ (не менее 1%). Изучена стабильность мази при хранении, установлен срок годности -12 месяцев.
8. Доказано на животных, что экстракт листьев лопуха не обладает токсичностью, экстракт и мазь оказывают выраженный антимикробный эффект и обладают местной противовоспалительной активностью.
9. Разработан проект ФСП и лабораторный регламент «Экстракт листьев лопуха сухой», проект ФСП «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
По теме диссертации опубликованы работы
1. Патент РФ на изобретение «Состав для фиксации съемных зубных протезов с экстрактом листьев лопуха». Заявка № 2007118144, приоритет от 15.05.2007 (соавт. Брюханов В.М., Федосеева JI.M., Ковалев O.A., Госсен И.Е.)
2. Разработка состава лекарственной формы с экстрактом лопуха для ортопедической стоматологии // Молодежь -Барнаулу. Материалы научно-практической конференции. -Барнаул, 2006. - С. 306 (соавт. Федосеева JI.M., Ковалев O.A.)
3. Изучение противовоспалительной активности стоматологической терапевтической системы с экстрактом листьев лопуха // Актуальные проблемы фармации. - Барнаул, 2006. -Вып. 3. - С. 134-138 (соавт. Федосеева JI.M., Ковалев O.A., Госсен И.Е.)
4. Биофармацевтическая оценка стоматологической терапевтической системы с экстрактом листьев лопуха // Молодежь - Барнаулу. Материалы научно-практической конференции. - Барнаул, 2007. С. 202 (соавт. Федосеева Л.М., Ковалев O.A.)
5. Доклинические исследования стоматологической терапевтической системы с экстрактом листьев лопуха // Материалы региональной научно-практической конференции (с международным участием), посвященной 40-летию фармацевтического факультета КГМУ: «Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики» - Курск, 2006. - С. 378-380 (соавт. Федосеева Л.М., Ковалев O.A., Госсен И.Е.)
6. Изучение антимикробной активности экстракта листьев лопуха // Актуальные проблемы фармации. - Барнаул, 2007. -Вып. 4. - С. 177-183 (соавт. Федосеева Л.М., Юрова В.А., Ковалев O.A.)
7. Установление технологических параметров листьев лопуха большого // Химия растительного сырья. - 2008. - №1. - С. 149-150 (соавт. Федосеева JIM.)
8. Изучение антимикробной активности лекарственной формы с экстрактом листьев лопуха // Актуальные проблемы фармации. - Барнаул, 2008. - Вып. 5. - С. 154-161 (соавт. Федосеева Л.М., Юрова В.А., Ковалев O.A.)
9. Разработка технологии получения экстракта листьев лопуха // Достижения и перспективы в области создания новых лекарственных средств: Материалы Российской научно-практической конференции, посвященной 70-летию ПГФА. -Пермь, 2007. - С.469-473 (соавт. Федосеева Л.М.)
10. Оптимизация процесса экстракции листьев лопуха // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных трудов. - Пятигорск, 2008. - Вып. 63. - С. 195-197 (соавт. Федосеева Л.М.)
11. Разработка технологии получения и стандартизация экстракта листьев лопуха // Молодежь - Барнаулу. Материалы научно-практической конференции: в 2т. - Барнаул: БГПУ, 2008. - Т. 2. - С. 179-180 (соавт. Федосеева Л.М., Ковалев O.A.)
Подписано в печать 27.11.08 Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 157
Отпечатано с готового оригинала-макета в типографии ООО «Пять с плюсом». 656049, г. Барнаул, пр. Красноармейский, 73.
Оглавление диссертации Биндюк, Мария Александровна :: 2009 :: Пермь
Введение.
Глава I Обзор литературы.
1.1.Сведения о лопухе большом.
Ботанические сведения, распространение.
Сведения о химическом составе лопуха большого.
Применение лопуха большого в народной медицине.
Применение лопуха большого в медицине.
1.2. Мягкие лекарственные формы на полимерных основах.
Выводы.
Глава П Объекты и методы исследования.
Глава Ш Разработка технологии экстракта листьев лопуха.
3.1. Определение технологических параметров листьев лопуха большого.
3.2. Определение оптимальных условий экстракции листьев лопуха большого.
3.3. Расчет эффективности процесса экстракции.
3.4. Разработка технологии и технологической схемы получения экстракта листьев лопуха.
3.5. Фотохимическое исследование экстракта листьев лопуха.
Флавоноиды и фенолокислоты.
Дубильные вещества.
Полисахариды.
Кислота аскорбиновая.
Алкалоиды.
3.5.1. Исследование содержания особо токсичных элементов в экстракте листьев лопуха.
Выводы.
Глава IV Разработка мази с экстрактом листьев лопуха.
4.1. Разработка состава и технологии изготовления основы.
4.2. Разработка состава мази.
4.3. Разработка технологии и технологической схемы мази с экстрактом листьев лопуха.
4.4. Биофармацевтическая оценка мази с экстрактом листьев лопуха
Выводы.
Глава V Изучение острой токсичности и специфической активности экстракта листьев лопуха и мази с экстрактом.
5.1. Изучение острой токсичности экстракта листьев лопуха большого.
5.2. Изучение антимикробного действия экстракта листьев лопуха и мази.
5.3. Изучение противовоспалительной активности экстракта листьев лопуха и мази.
Выводы.
Глава VI Стандартизация экстракта и мази листьев лопуха.
6.1. Определение подлинности.
6.2. Определение показателей доброкачественности экстракта листьев лопуха.
6.3. Количественное определение дубильных веществ.
6.4. Определение сроков годности.
Выводы.
Введение диссертации по теме "Технология лекарств и организация фармацевтического дела", Биндюк, Мария Александровна, автореферат
Актуальность проблемы. В структуре современного фармацевтического рынка неуклонно растет доля препаратов на основе лекарственного растительного сырья. Широкий спектр их действия объясняется многокомпонентностью состава биологически активных веществ, одновременным присутствием соединений различной природы. Мягкое терапевтическое действие, малая токсичность, редкое возникновение побочных явлений, экономическая доступность - это немногие из достоинств растительных средств.
Растущий интерес к фитотерапии стимулирует расширение и обновление ассортимента за счет внедрения в научную медицину растений народной медицины и разработки новых фитопрепаратов на их основе.
В народной медицине широко применяются корни и листья лопуха большого при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сахарном диабете, злокачественных новообразованиях, воспалениях слизистой оболочки полости рта, кожных заболевания и др. В официнальной медицине используют корни лопуха большого в качестве мочегонного и спазмолитического средства.
На кафедре фармацевтической химии АГМУ проведены исследования по изучению листьев лопуха большого. Определено содержание полисахаридов, дубильных веществ, флавоноидов, кислоты аскорбиновой, суммы алкалоидов, суммы липофильных веществ. Установлена антимикробная и антиоксидантная активность (Кнауб Н.Н. 2006 г.).
Листья лопуха являются перспективным сырьем для внедрения в медицинскую практику. Разработка технологии получения сухого экстракта из листьев лопуха, содержащего комплекс водорастворимых веществ, является актуальной проблемой для фармацевтической науки и практики.
Цель и задачи исследования. Цель исследования - разработка технологии и стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого.
Для осуществления поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучить технологические параметры листьев лопуха большого.
2. Определить оптимальные условия экстрагирования листьев лопуха.
3. Разработать технологию и технологическую схему получения экстракта листьев лопуха.
4. Провести фитохимическое исследование экстракта листьев лопуха.
5. Установить показатели качества экстракта листьев лопуха.
6. Разработать состав и технологию изготовления основы и мази с экстрактом листьев лопуха, провести биофармацевтическую оценку, установить показатели качества.
7. Установить специфическую активность экстракта листьев лопуха и мази.
8. Разработать проекты ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
9. Разработать лабораторный регламент на производство экстракта листьев лопуха сухого.
Научная новизна. Определены технологические параметры листьев лопуха большого. Установлены оптимальные условия экстрагирования лекарственного растительного сырья, с помощью математических методов планирования, получен экстракт листьев лопуха сухой. Проведены фотохимические исследования экстракта, установлено, что комплекс БАС включает флавоноиды, дубильные вещества, полисахариды, кислоту аскорбиновую.
Разработан состав, технология и схема мазевой основы и прописи мази с экстрактом листьев лопуха. Проведена биофармацевтическая оценка мази. Новизна состава основы и мази подтверждена патентом на изобретение «Состав для фиксации съемных зубных протезов с экстрактом листьев лопуха» по заявке № 2007118144.
Проведены фармакологические исследования, в результате которых установлена антимикробная и местная противовоспалительная активность экстракта и мази с экстрактом листьев лопуха.
Практическая значимость работы. В результате проведенных исследований показана возможность расширения ассортимента лекарственных препаратов на основе растительного сырья за счет использования экстракта и мази листьев лопуха большого, применения их в качестве антимикробного и противовоспалительного средства. Разработаны проекты ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
Степень внедрения. На основании проведенных исследований разработаны: проект ФСП «Экстракт листьев лопуха сухой», лабораторный регламент на производство экстракт листьев лопуха сухого (Акт апробации ЗАО «Еврофарм» от 9.04.2008 г.), проект ФСП «Мазь с экстрактом листьев лопуха».
Теоретические положения и результаты экспериментальных исследований используются в учебном процессе и научно-исследовательской работе кафедры фармацевтической химии с курсами органической и токсикологической химии и кафедры фармацевтической технологии Алтайского государственного медицинского университета, в учебном процессе кафедры фармации Иркутского государственного института усовершенствования врачей (акты внедрения - приложения 14,15,16).
Основные положения, выносимые на защиту. Результаты технологического, фотохимического, фармакологического исследования листьев лопуха большого, экстракта и мази.
Апробация полученных результатов. Основные материалы диссертации обсуждены на научно-практических конференциях «Актуальные проблемы фармации» (Барнаул 2006, 2007, 2008), «Молодежь
Барнаулу» (Барнаул, 2005, 2006, 2007), на региональной научно-практической конференции (с международным участием), посвященной 40-летию фармацевтического факультета КГМУ «Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики» (Курск 2006).
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Алтайского государственного медицинского университета (номер государственной регистрации 01.200316088).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, одна из которых в журнале, рекомендуемом ВАК. Получен патент Российской Федерации на изобретение.
Экспериментальные исследования по теме диссертации выполнялись на базе Алтайского государственного медицинского университета: на кафедре фармацевтической химии с курсами органической и токсикологической химии, на кафедре фармакологии (под рук. к.м.н., доц. Госсен И.Е., д.м.н., проф. Зверева Я.Ф.), на кафедре микробиологии и вирусологии (под рук. к.м.н., доц. Юровой В.А.) (Приложения 5, 6, 7, 8, 9).
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, четырех глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований, выводов, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 35 таблицами и 24 рисунками. Библиографический указатель включает 140 источников литературы, из них 50 зарубежных.
Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка технологии, стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого"
Общие выводы
1. Установлены технологические параметры листьев лопуха большого: насыпная масса - 0,23±0,01 кг/м3в10"3; коэффициент наполнения сухого j ^ сырья - 3,42±0,09 м /кгв10"; коэффициент наполнения набухшего сырья - 1,90±0,02 м /кгв10"; коэффициент вытеснения сырья -1,01 ±0,02 м3/кг«10"3; коэффициент поглощения - 2,74±0,03 м3/кг»10"3;
Л ^ коэффициент образования внутреннего сока - 3,05±0,04 м /кгв10" ; коэффициент увеличения объема при растворении экстрактивных
5 л веществ - 0,54±0,01 м /кг* 10"; влажность - 6,84±0,12%; содержание экстрактивных веществ - 36,75±0,32%; содержание дубильных веществ
- 8,14±0,17%.
2. Определены оптимальные условия экстрагирования листьев лопуха большого: измельченность сырья - 2 мм, соотношение сырья и экстрагента - 1:10, время одной мацерации - 30 мин., число мацераций
- 3, температура - 100 °С. Разработана технология и технологическая схема получения экстракта. Технологический выход по экстрактивным веществам - 96,38 - 97,66%, по дубильным веществам - 95,02 - 96,90%.
3. Установлено наличие в экстракте дубильных веществ, флавоноидов, фенолокислот (идентифицированы рутин и кислота хлорогеновая), полисахаридов, кислоты аскорбиновой. Определено содержание основных биологически активных соединений в экстракте: дубильных веществ (21,69 - 24,15%), флавоноидов (1,66 - 1,84%), полисахаридов (20,72 - 23,14%), кислоты аскорбиновой (780 - 983 мг%).
4. Определены числовые показатели экстракта листьев лопуха: дубильных веществ не менее 15%, влажность не более 5%, зола общая не более 15%. Срок годности 2 года.
5. Установлен оптимальный состав мази с экстрактом листьев лопуха: экстракт листьев лопуха сухой - 5,0; масло облепиховое - 0,16; масло мяты перечной - 0,12; ПВС - 6,0; Na-КМЦ - 6,0; глицерин - 15,0; вода очищенная до 100,0. Разработана технология и технологическая схема получения мази.
6. Проведена биофармацевтическая оценка лекарственной формы, методом диализа изучена динамика высвобождения дубильных веществ в течение 8 часов, высвобождение составило 60% в течение 5 часов.
7. Разработаны показатели качества мази с экстрактом листьев лопуха: описание, подлинность (по дубильным веществам), содержание дубильных веществ (не менее 1%). Изучена стабильность мази при хранении, установлен срок годности - 12 месяцев.
8. Доказано на животных, что экстракт листьев лопуха не обладает токсичностью, экстракт и мазь оказывают выраженный антимикробный эффект и обладают местной противовоспалительной активностью.
9. Разработан проект ФСП и лабораторный регламент «Экстракт листьев лопуха сухой», проект ФСП «Мазь с экстрактом листьев лопух».
Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2009 года, Биндюк, Мария Александровна
1. Алексеев, К.В. Изучение осмотической активности гелей на основе редкосшитого акрилового сополимера / К.В. Алексеев, O.JI. Бондаренко // Фармация. 1989. - №1. - С. 22-25.
2. Алюшин, М.Т. Синтетические полимеры в отечественной фармацевтической практике / М.Т. Алюшин, А.И. Артемьев. М.: Медицина, 1974. - 152 с.
3. Арбузов, А.Г. Противоопухолевая активность экстрактов корня лопуха большого // Биолит-инфо Электронный ресурс. 2005. - №3. - Режим доступа: http://biolit.tomsk.ru.
4. Беликов, В.Г. Применение математического планирования и обработки результатов экспериментов в фармации / В.Г. Беликов, В.Д. Пономарев, Н.й. Коковкин-ГЦербак. М.: Медицина, 1983. - 232 с.
5. Блехер, Л.Б. Лечебное применение лекарственных растений и приготовление препаратов в домашних условиях / Л.Б. Блехер, Т.И. Колосова. СПб.: ТЦ "Северо-Запад", 1992. - 278 с.
6. Брюханов, В.М. Бадан толстолистный / В.М. Брюханов, Л.М. Федосеева. Барнаул, 2006. - 209 с.
7. Водные извлечения. Настои и отвары Электронный ресурс. Режим доступа: http://vsww.fito.nnov.ru/ technology/technology 0 l.phtml#stand
8. Воробьева, В.М. Лекарственные формы для наружного применения на основе регенкура: дис. . канд. фармац. наук / Воробьева Валентина Михайловна. Москва, 1995. - 141 с.
9. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств методом «ускоренного старения» при повышенной температуре. НИ-42-2-82. М., 1983, -13 с.
10. Временная Фармакопейная Статья 42-2878-97 «Корни лопуха».
11. Вспомогательные вещества, используемые в технологии мягких лекарственных форм (мазей, гелей, линиментов, кремов) (обзор) / О.А. Семкина, М.А. Джавахян, Т.А, Левчук и др. // Хим.-фарм. журнал. -2005. Т.39, №9. - С. 45-48.
12. Глухов, М.М. Медоносные растения / М.М. Глухов. М.: Колос, 1974. -210 с.
13. ГОСТ 26929-94. Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов. Введ. 01.01.1996. -М.: Изд-во стандартов, 1995, 16 с.
14. ГОСТ 30178-96 Сырье и продукты пищевые. Атомно-адсорбционный метод определения токсичных элементов». Введ. 01.01.1998. М.: Изд-во стандартов, 1997, - 13 с.
15. ГОСТ 26930-86 ГОСТ 26930-86. Сырье и продукты пищевые. Метод определения мышьяка. Государственный стандарт Союза ССР. Введ. 01.01.1987. М.: Изд-во стандартов, 1985, - 14 с.
16. Государственная фармакопея СССР. Вып. 1: Общие методы анализа / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.
17. Государственная фармакопея СССР Вып. 2: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.
18. Грау, Ю. Дикорастущие лекарственные растения / Ю. Грау, Р. Юнг, Б. Мюнкер. М.: ACT, 2002. - 287с.
19. Данников, Н.И. Ваш травник / Н.И. Данников. М.: Рипол Классик, 2003.-704 с.
20. Данилевский, Н.Ф. Фитотерапия в стоматологии / Н.Ф. Данилевский, Т.В. Зинченко. Киев: Здоровье, 1984. - 183 с.
21. Дроздова, И.Л. Аминокислотный и минеральный состав листьев лопуха / И.Л. Дроздова // Фармация. 2004. - №3. - С. 18-19.
22. Дроздова, И.Л. Исследование фенольных соединений листьев лопуха большого (Arctium lappa L.) / И.Л. Дроздова, В.Н. Бубенчикова // Фармация. 2003. - №3. - С. 12-13.
23. Замятина, Н.Г. Лекарственные растения / Замятина Н.Г. М.: ABF, 1998.-493 с.
24. Запрометов, М.Н. Основы биохимии фенольных соединений / М.Н. Запрометов. М.: Высшая школа, 1974. - 214 с.
25. Зимин, В.М. Библиотечка лекарственных растений: собрание народной и научной медицины в 2-х т. 400 лекарственных растений / В.М. Зимин. СПб: АО «Дорваль», 1993. -Т.1.-266 с.
26. Исследование высвобождения некоторых лекарственных веществ из различных основ для мазей и суппозиториев / Е.П. Безуглая, А.Г. Фадейкина, А.А. Лысокобылка и др. // Фармаком. 1999. - №1. - С. 2629.
27. Кимадзе, М.И. Разработка и исследование лекарственных и косметических гелей для регуляции репаративных процессов на базе белковых гидролизатов из гидробионтов: автореф. дис. . канд. фармац. Наук / Кимадзе Марина Ивановна. Пятигорск, 2006. - 23 с.
28. Китанов, Г. Изучение условий определения дубильных веществ / Г. Китанов // Фармация. 1997. - Т.37, №2. - С. 34-40.
29. Клышев, JI.K. Флавоноиды растений / Л.К. Клышев, В.А. Бандюков, JI.C. Алюкина. Алма-Ата: Наука Каз ССР, 1978. - 220 с.
30. Кнауб, Н.Н. Фитохимическое исследование и перспективы использования листьев лопуха большого, произрастающего в Алтайском крае в качестве лекарственного сырья: автореф. дис. . канд. фармац. Наук / Кнауб Надежда Николаевна. Пермь, 2006. - 23 с.
31. Копейкин, В.Н. Ошибки в ортопедической стоматологии / В.Н. Копейкин, М.З. Миргазизов, А.Ю. Малый. М.: Медицина, 2002. -240 с.
32. Корепанов, С.В. Растения в профилактике и лечении рака / С.В. Корепанов. Барнаул, 1999. - 160 с.
33. Королюк, A.M. Медицинская микробиология / А.М. Королюк, В.Б. Сбойчаков. СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2002. - 267 с.
34. Крылов, Г.В. Зеленая аптека / Г.В. Крылов, Н.Ф. Козакова, Э.В.Степанов. Кемерово: Кн. изд-во: Соврем, отечеств, кн., 1993. -334 с.
35. Кузнецова, М.А. Сказания о лекарственных растениях / М.А. Кузнецова, А.С. Резникова. -М.: Высшая школа, 1992.-272 с.
36. Куликов, В.В. Лекарственные растения Алтайского края / В.В. Куликов. Барнаул: Алтайское книжное издательство, 1973. - 178 с.
37. Лагерь, А.А. Лечение травами / А.А. Лагерь. Ростов-на-Дону: Феникс, 1997.-318 с.
38. Лобанова, А.А. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья / А.А. Лобанова, В.В. Будаева, Г.В. Сакович // Химия растительного сырья. 2004. - №1. - С. 47-52.
39. Лопух большой, лопух войлочный, лопух малый Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.golkom.ru/price/group/4014.html
40. Максютина, Н.П. Лопух большой нетрадиционный источник биологически активных веществ / Н.П. Максютина, С.А. Четверня, В.Г.
41. Максютин // Химия и компьютерное моделирование. Бутлеровские сообщения Электронный ресурс. 2001. - № 5. - Режим доступа: http://chem.kstu.ru/butlerovcomm/vol2/cd-a2/data/jchem&cs/russian/n5/ lvr93/93.htm
42. Махлаюк, В.П. Лекарственные растения в народной медицине / В.П. Махлаюк. М.: Нива России, 1992. - 477 с.
43. Методические указания по обнаружению и определению содержания общей ртути в пищевых продуктах методом беспламенной атомной абсорбции, утв. МЗ СССР 21 июня 1990 г. № 5178-90. 16 с.
44. Методы микробиологического контроля лекарственных средств (изменение №2 к общей статье государственной фармакопеи XI издания) / Н.И. Каламова, Л.А. Каграманова, В.Л. Багирова, и др. // Хим.-фарм. журнал. 2001. - Т.35, №12. - С. 34-35.
45. Микробиология / А.В. Воробьева, А.С. Быков, A.M. Рыбакова и др. -М.: Медицина, 1998. 336 с.
46. Муравьев, Й.А. Интенсификация экстрагирования при определении экстрактивных веществ в растительном сырье / И.А. Муравьев, Ю.Г. Пшуков, Л.А. Бережная // Фармация. 1976. - №4. - С. 16-20.
47. Муравьев, И. А. Теоретические основы производства экстрактов методом реперколяции с законченным циклом / И.А. Муравьев, Ю.Г. Пшуков. Пятигорск, 1986. - 48 с.
48. Навашин, С.М. Рациональная антибиотикотерапия / С.М. Навашин, И.П. Фомина. -М.: Медицина, 1982.-496 с.
49. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / сост. А.Е. Александрова, А.П. Арзамасцев, В.Л. Багирова и др.; под ред. В.Л. Багировой, В.А. Северцева. СПб.: СпецЛит, 2001. - 223 с.
50. Оптимизация фармацевтической технологии методами планирования эксперимента: Методические рекомендации. Запорожье, 1981. - 40 с.
51. Ортопедическая стоматология / Н.Г. Аболмасов, Н.Н. Аболмасов, В.А. Бычков, Ахмет Аль-Хаким. М.: МЕДпресс-информ, 2002. - 575 с.
52. Палов, М. Энциклопедия лекарственных растений / М. Палов; пер. с нем. Е. Б. Поспеловой и др.; под ред. И. А. Губанова. -М.: Мир, 1998. -467 с.
53. Пашинский, В.Г. Растения в терапии и профилактике болезней / В.Г. Пашинский. Томск: Изд-во ТГУ, 1989. - 2008 с.
54. Первышина, Г.Г. Эколого-экономическое обоснование комплексного использования растительных ресурсов Красноярского края для получения биологически активных веществ: автореф. дис. . канд. биол. Наук / Первышина Галина Григорьевна. Красноярск, 2006. -31 с.
55. Поле, А.Я. Выделение и общая характеристика полисахаридов из пижмы обыкновенной, мать-и-мачехи и лопуха войлочного / А.Я. Поле, Р.Г. Оводова, С.В. Попов // Химия растительного сырья. 1999. - №1. - С.33-38.
56. Пономарев, В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья / В.Д. Пономарев. -М.: Медицина, 1976. 202 с.
57. Попов, А.П. Лекарственные растения в народной медицине / А.П. Попов. Киев: Здоровье, 1994. - 208 с.
58. Путырский, И.Н. Лекарственные растения: Энциклопедия / И.Н. Путырский, В.Н. Прохоров. Минск: Книжный Дом, 2003. - 655 с.
59. Разработка лекарственных препаратов для лечения воспалительных заболеваний пародонта / Т.А. Панкрушева, Н.В. Автина, А.А. Панкрушев и др. // Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. -2003.-№2.-С. 214-219.
60. Ревякина, Н.В. Лекарственные растения Алтайского края / Н.В.Ревякина. Барнаул: Издательство АГУ, 1994. - 140 с.
61. Редченкова, В.Н. Анализ требований некоторых фармакопей, предъявляемых к экстрактам / В.Н. Редченкова, О.М. Хишова // Хим.-фарм. журнал. 2006. - Т.40, №1. - С. 37-40.
62. Рудский, В.В. Растительные ресурсы Алтая / В.В. Рудский. Барнаул: Изд-во АГУ, 1993. - 30 с.
63. СанПиН 2.3.2.1078-01. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. // Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. М., Минздрав России, 2002.
64. Свиридонов, Г.М. Растения и здоровье: Лечебные и пищевые свойства / Г.М. Свиридонов, М.Г. Свиридонов. -М.: Профиздат, 1992. 271 с.
65. Семкина, О.А. Мази, гели, линименты и кремы, содержащие фитопрепараты (обзор) / О.А. Семкина // Хим.-фарм. журнал. 2005. -Т.39, №7. - С. 30-36.
66. Сесквитерпеновые лактоны сока из листьев лопуха большого / А.А. Савина, В.И. Шейченко, Ю.В. Стихин и др. // Хим.-фарм. журнал. -2006. Т.40, №Ц. с. 43-45.
67. Сиверская, Е.В. Биофармацевтические и технологические исследования мази натриевой соли кислоты 18-дегидроглицерретовой: автореф. дис. . канд. фармац. Наук / Сиверская Елена Вячеславовна. -Пятигорск, 2005. 19 с.
68. Соболевская, К.А. Полезные растения Западной Сибири и перспективы их интродукции / К.А. Соболевская. Новосибирск: Наука, 1972. -258 с.
69. Соколов, B.C. Алколоидоносные растения СССР / B.C. Соколов. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1952. - 380 с.
70. Соколов, С.Я. Фитотерапия и фитофармакология / С.Я. Соколов. М.: Мед. информ. агентство, 2000. - 970 с.
71. Стрижев, А.Н. Русское разнотравье / А.Н. Стрижев. М.: Дрофа, 1995. -575 с.
72. Тенцова, А.И. Современные аспекты исследования и производства мазей / А.И. Тенцова, В.М. Грецкий. М.: Медицина, 1980. - 192 с.
73. Терапевтическая стоматология / Е.В.Боровский, В.С.Иванов, Г.В. Банченко и др.; под ред. Е.В. Боровского. М.: Мед. информ. агентство, 2003. - 798 с.
74. Технологические исследования основы для линимента с дибунолом / М.И. Эльнатанова, Н.С. Николаенко, Н.М. Глумова, В.А. Барсель // Хим.-фарм. журнал. 1983. - №8. - С. 993-995.
75. Турецкова, В.Ф. Методы биофармацевтической оценки лекарственных препаратов / В.Ф. Турецкова, В.М. Воробьева. Барнаул: ЗАО «Диалог Сибирь», 1998.-71 с.
76. Турищев, С.Н. Фитотерапия / С.Н. Турищев. М.: Академия, 2003. -301 с.
77. Улитовский, С.Б. Гигиена полоста рта в ортодонтии и ортопедической стоматологии / С.Б. Улитовский. М.: Медицинская книга, 2003. -220 с.
78. Усевич, T.JI. Терапевтическая стоматология / T.JI. Усевич. Ростов-на-Дону: Феникс, 2003. - 383 с.
79. Федосеева, Л.М. Экспериментально-теоретическое обоснование использование бадана толстолистного флоры Сибири в качестве лекарственного сырья: дис. . доктора фармац. наук / Федосеева Людмила Михайловна. Пермь, 2001. - 337 с.
80. Химический анализ лекарственных растений / под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронича. М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.
81. Ходжиматов, М. Дикорастущие лекарственные растения Таджикистана / М. Ходжиматов. Душанбе: Энциклопедия, 1989. - 366 с.
82. Царев, В.Н. Антимикробная терапия в стоматологии / В.Н. Царев, Р.В. Ушаков. -М.: Мед. информ. агентство, 2004. 143 с.
83. Чахирова, А.А. Биофармацевтические исследования лекарственных форм с маслом рябины обыкновенной / А.А. Чахирова, В.В. Верещагина // Разработка, исследование и маркетинг фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигорск, 2006. - Вып. 61.-С. 145-147.
84. Щербаков, А.С. Ортопедическая стоматология / А.С. Щербаков, Е.И. Гаврилов, В.Н. Трезубов. СПб: Комета, 1994. - 536 с.
85. Яковлев, Г.П. Ботанико-фармакогностический словарь / Г.П. Яковлев, К.Ф. Блинова. М.: Высшая школа, 1990. - 272 с.
86. A biologically active fructan from the roots of Arctium lappa L., var. Herkules / A. Kardosova, A. Ebringerova, J. Alfoldi et al. // Int J Biol Macromol. 2003. - Vol. 33, №1-3. - P. 135-140.
87. Anti-inflammatory and radical scavenge effects of Arctium lappa / C.C. Lin, J.M. Lu, J.J. Yang et al. // Am J Chin Med. 1996. - Vol. 24, №2. - P. 127137.
88. Antimicrobial activity of Arctium lappa constituents against microorganisms commonly found in endodontic infections / J.V. Pereira, D.C. Bergamo, J.O. Pereira et al. // Braz Dent J. 2005. - Vol. 16, № 3. - P. 192-196.
89. Arctium lappa L. Great Burdock Achene Extract. Burdock Seed. Burdock Root Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.mdidea.com/ products/new/new025 .html
90. Baker, С. Methylcellulose & Sodium Carboxymethylcellulose: Uses in Paper Conservation / C. Baker // AIC 10th Annual Meeting, 1982 Электронный ресурс. Режим доступа: http://aic.stanford.edu/sg/bpg/ annual/v01/bpO 1 -04 .html
91. Blake, S. Medicinal plant actions Электронный ресурс. Режим доступа: www.naturalhealthwizards.com/html/medplantactions.html
92. Burdock (Arctium lappa) Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.nlm.nШ.gov/medlineplus/dшginfo/natш■al/patient-burdock.html
93. Burdock Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.herbs2000. com/herbs/herbsburdock.html
94. Corinne, М. Herbal Remedies from the Wild: Finding and Using Medicinal Herbs / M. Corinne. Countryman Press, 2000. - 228 p.
95. Duh, Pin-Der. Antioxidant activity of burdock (Arctium lappa Linne): Its scavenging effect on free-radical and active oxygen / Pin-Der. Duh // Journal of the American Oil Chemists' Society. 1998. -Vol. 75, №4. - P. 455-461.
96. Effects of the lignan, arctiin, on 17-beta ethinyl estradiol promotion of preneoplastic liver cell foci development in rats / T. Kato, M. Hirose, S. Takahashi et al. // Anticancer Res. 1998. - Vol. 18, №2A. - P. 1053-1057.
97. Essiac tea: scavenging of reactive oxygen species and effects on DNA damage / S.S. Leonard, D. Keil, T. Mehlman et al. // J Ethnopharmacol. -2006. Vol. 103, №2. - P. 288-296.
98. Evaluation of two methods for the extraction of antioxidants from medicinal plants / H.B. Li, Y. Jiang, C.C. Wong et al. // Anal Bioanal Chem. 2007. -Vol. 388, №2.-P. 483-488.
99. Extractum Lappae Fluidum (U.S.P.) Fluid Extract of Lappa Электронный ресурс. - Режим доступа: http://www.henriettesherbal. com/php/ get.php?id=l2535
100. Hepatoprotective effects of Arctium lappa Linne on liver injuries induced by chronic ethanol consumption and potentiated by carbon tetrachloride / S.C. Lin, C.H. Lin, C.C. Lin et al. // J Biomed Sci. 2002. - Vol. 9, №5. - P. 401-409.
101. Hepatoprotective effects of Arctium lappa on carbon tetrachloride- and acetaminophen-induced liver damage / S.C. Lin, T.C. Chung, C.C. Lin et al. // Am J Chin Med. 2000. - Vol. 28, №2. - P. 163-173.
102. Herbal Treatment of Diabetes Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.geocities.com/chochoius/herbals. html
103. Identification of arctigenin as an antitumor agent having the ability to eliminate the tolerance of cancer cells to nutrient starvation / S. Awale, J. Lu, S.K. Kalauni et al. // Cancer Res. 2006. - Vol. 66, №3. - P. 17511757.
104. Jones Angie, L. Preparation for treatment of human hair and skin and method of using same. // Patent number US4904471, A61K 8/31, A61K 8/92, A61K 8/30, A61Q 7/00, Priority number US20060101, Publication date 1990-02-27.
105. Kulak, Y. Subjective assessment by patients of the efficiency of two denture adhesive pastes / Y. Kulak, M. Ozcan, A. Arikan // J Prosthodont. 2005. -Vol.14, №4. - P. 248-252.
106. Lappa (U.S.P.) Burdock Электронный ресурс. - Режим доступа: http ://www.henriettesherbal. com/eclectic/kings/arctium. html
107. Lepshin, S.M. Dentifrice water // Patent number RU 2131725, A61K7/26, Priority number RU 19980111002 19980604, Publication date 1999-06-20.
108. Lowing, A. Herbs: Burdock Электронный ресурс. Режим доступа: http://improvehomelife.com/Herbs*Burdock-45027.html
109. Mary, A. Pain relief composition and method of preparing same. // Patent number US4177266, A61K 035/78 Priority number US06000167, Publication date 1979-12-4.
110. Matsumoto, T. Antiproliferative and apoptotic effects of butyrolactone lignans from Arctium lappa on leukemic cells / T. Matsumoto, K. Hosono-Nishiyama, H. Yamada // Planta Med. 2006. - Vol. 72, №3. - P. 276-278.
111. Mkrtchian, T.A. Pectin production from burdock (Arctium sp.) / T.A. Mkrtchian, G.G. Snapian, G.A. Nikogosian // Ukr Biokhim Zh. 1998. -Vol. 70, №1.-P. 98-105.
112. Morita, K. A desmutagenic factor isolated from burdock (Arctium lappa Linne) / K. Morita, T. Kada, M. Namiki // Mutat Res. 1984. - Vol. 129, №1. - P. 25-31.
113. Morita, Т. Dietary fiber and fat-derivatives prevent mineral oil toxicity in rats by the same mechanism / T. Morita, K. Ebihara, S. Kiriyama // J Nutr. -1993.-Vol. 123, №9.-P. 1575-1585.
114. Plants For A Future: Database Search Results Электронный ресурс. -Режим доступа: http://www.ibiblio.org/pfaf/cgi-bin/arrhtml?Arctium+ lappa
115. Polyvinyl alcohol Электронный ресурс. Режим доступа: http://polyvin ylalc.nm.ru/
116. Polyvinylpyrrolidone (PVP) Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.inchem.org/documents/jecfa/jecmono/vl5je08.htm
117. Polyvinylpyrrolidone-sodium hyaluronate gel Электронный ресурс. -Режим доступа: http://www.cancer.gov/SearchClinicalTrialsLink.aspx? id=491931 &idtype=l >
118. Richard, С. Fructan-containing baby food compositions and methods therefor // Patent number US5840361, A23L 1/0528, A23L 1/214, A23L 1/212, A23L 1/052, A23L 1/308, Priority number US20060101, Publication date 1998-11-24.
119. Safety examination of some edible plants, Part 2. / I. Hirono, H. Mori, K. Kato et al. // J Environ Pathol Toxicol. 1978. - Vol. 1, №1. - P. 71-74.
120. Schooley, Jan. Japanese Burdock Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.omafra.gov.on.ca/english/crops/ hort/herbs/alappa.htm
121. Screening of some plants used in the Brazilian folk medicine for the treatment of infectious diseases / F.B. Holetz, G.L. Pessini, N.R. Sanches et al. //MemInst Oswaldo Cruz. -2002. Vol. 97, №7. P. 1027-1031.
122. Sodium Carboxymethyl Cellulose Supplier Data by Wolff Cellulosics a Division of Bayer Materialscience Электронный ресурс. - Режим доступа: http://www.azom.com/details.asp? ArticleID=2788
123. Spang-Brunner, B.H. Release of a drug from homogeneous ointments containing the drug in solution / B.H. Spang-Brunner, P.P. Speiser // J Pharm Pharmacol. 1976. - Vol. 28, №1. - P. 23-28.
124. Sun, W.J. Determination of arctiin and arctigenin in Fructus Arctii by reverse-phase HPLC / W.J. Sun, Z.F. Sha, H. Gao // Yao Xue Xue Bao. -1992. Vol. 27, №7. -P. 549-551.
125. Trial of Essiac to ascertain its effect in women with breast cancer (TEA-BC) / S.M. Zick, A. Sen, Y. Feng et al. // J Altern Complement Med. 2006. -Vol. 12, №10.-P. 971-980.
126. Urolithiasis and phytotherapy / F. Grases, G. Melero, A. Costa-Bauza et al. // Int Urol Nephrol. 1994. - Vol. 26, №5. - P. 507-511.
127. Verbuta, A. The pharmacotechnical assessment of the types of sodium carboxymethylcellulose of Romanian origin (its synthetic appearance) / A. Verbu^, N. Olaru, I. Cojocaru // Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 1993. -Vol. 97, №1,-P. 451-454.
128. Viscoelastic evaluation of topical creams containing microcrystalline cellulose/sodium carboxymethyl cellulose as stabilizer / M.C. Adeyeye, A.C. Jain, M.K. Ghorab, W.J. Jr.Reilly // AAPS PharmSciTech. 2002. -Vol. 3, №2. - P. 8-9.
129. Wang, H.Y. Studies on the chemical constituents of Arctium lappa L. / H.Y. Wang, J.S. Yang // Yao Xue Xue Bao. 1993. - Vol. 28, №12. - P. 911917.
130. William, L. Moisturizing nutritive and healing skin cream // Patent number US4722843, A61K 8/97, A61K 8/96, A61K 8/92, A61Q 19/00, Priority number US20060101, Publication date 1988-02-2.