"Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии"

Сергеев, Николай Сергеевич

Диссертации по фармакологии → Технология лекарств и организация фармацевтического дела

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:"Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии"

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Сергеев, Николай Сергеевич Пятигорск 2009 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.01

Автореферат диссертации по фармакологии на тему "Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии"

цу - ^ 663

На правах рукописи

СЕРГЕЕВ НИКОЛАЙ СЕРГЕЕВИЧ

РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ИЗ ТРАВЫ ФИАЛКИ ПОЛЕВОЙ НА ОСНОВЕ МАЛООТХОДНОЙ ТЕХНОЛОГИИ

15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дела

АВТОРЕФЕРАТ

ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

ПЯТИГОРСК 2009

Диссертационная работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор

Сампиев Абдулмуталип Магаметович Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному

развитию»

Защита состоится «13» мая 2009 года в 9°° часов на заседании Диссертационного совета Д 208.069.01 при ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (357532, Ставропольский край, Пятигорск, пр. Калинина, 11).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава.

Автореферат разослан « » _2009 г

Ученый секретарь диссертационного совета,

Молчанов Геннадий Иванович доктор фармацевтических наук Хаджиева Захра Джамалеевна

доктор фармацевтических наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Из нескольких тысяч растений с установленными видами фармакологической активности лишь немногим более 200 разрешены в России к медицинскому применению. В их числе десятки видов лекарственного растительного сырья до сих пор используются только в форме водных извлечений - краткосрочных по хранению и практически неоцениваемых по качеству настоев и отваров. Данный подход в отношении растительного сырья, к ¡ому же отягощенный устаревшими технологиями переработки, не соответс твует современному требованию к его рациональному использованию, в частности, через получение в условиях мало- или безотходного производства нескольких фитосредств. К числу таких лекарственных растений относятся два близких вида фиалки - трехцветная и полевая, надземная часть которых применяется пока только в форме настоя отхаркивающего действия. Область применения и качество обоих видов лекарственного растительного сырья регламентируется единой для них фармакопейной статьей (ФС), в которой основным нормируемым показателем качества сырья является содержание двух гидрофильных групп биологически активных веществ (БАВ) - полисахаридов и флавоноидов. При этом фармакогностическому и технологическому изучению фиалки полевой, rio сравнению с трехцветной, уделено значительно меньше внимания со стороны исследователей. Между тем, трава фиалки полевой имеет существенную сырьевую базу, особенно на территории Северо-Кавказского региона и могла бы стать объектом малоотходной переработки с получением нескольких лекарственных средств, в частности, на базе содержащихся в ней полисахаридов и флавоноидов.

Одновременно с рассмотрением вопроса о более полной переработке в

промышленных условиях травы фиалки полевой, представляется

целесообразным, с учетом фармакологических свойств этого сырья, создавать, в

первую очередь, отхаркивающие средства для педиатрической практики.

Ассортимент этой категории лекарственных препаратов отечественного

производства крайне ограничен. Трава фиалки полевой с проверенной временем

достаточно высокой степенью безопасности применения для детского организма, является вполне подходящим объектом исследования и в этом аспекте. При этом для детей наиболее предпочтительной формой перорального применения лекарственных средств считается сироп, в котором удается сбалансировать необходимые фармакокинетические и органолептические свойства.

Таким образом, представляется актуальным исследование по технологическому изучению травы фиалки полевой, получению из нее в условиях малоотходного производства эффективных, удобных для применения и стандартизованных по качеству лекарственных средств.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлась разработка технологии лекарственных средств, содержащих гидрофильные комплексы БАВ из травы фиалки полевой, с использованием принципа малоотходной переработки растительного сырья.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

- провести фармакогностическое изучение травы фиалки полевой, собранной на территории Северо-Кавказского и других регионов, и составить проект фармакопейной статьи предприятия (ФСП) для использования сырья в производстве из него готовых лекарственных средств по малоотходной технологии;

- обосновать целесообразность и выявить возможность получения фитоэкстракционных препаратов в условиях малоотходной переработки травы фиалки полевой;

- разработать малоотходную технологию производства жидкого спиртового экстракта из травы фиалки полевой и сухого экстракта из её шрота, содержащих в качестве основных групп гидрофильные БАВ - флавоноиды и водорастворимые полисахариды, соответственно;

- предложить показатели и нормы качества лекарственных средств, содержащих гидрофильные группы БАВ травы фиалки полевой, изучить условия и сроки их хранения;

- обосновать состав и разработать технологию пероральной жидкой лекарственной формы, с сухим экстрактом из шрота травы фиалки полевой, изучить условия и сроки ее хранения.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты фармакогностического изучения травы фиалки полевой, собранной на территориях Северо - Кавказского региона и Центрального Черноземья;

- обоснование целесообразности и возможности малоотходной переработки травы фиалки полевой;

- итоги исследований по разработке технологии жидкого экстракта травы фиалки полевой с применением метода вакуум-фильтрационного экстрагирования сырья;

- предложенная схема малоотходной переработки, предусматривающая последовательное получение жидкого спиртового экстракта травы фиалки полевой и сухого экстракта с водоэкстрагируемым комплексом БАВ из шрота;

- результаты разработки состава, технологии и норм качества сиропа отхаркивающего действия, содержащего сухой экстракт из шрота травы фиалки полевой.

Научная новизна. Впервые показана возможность, обоснована целесообразность и предложена малоотходная технология переработки травы фиалки полевой, предусматривающая последовательное получение из сырья двух фитопрепаратов - жидкого спиртового и сухого экстрактов.

Разработана технология жидкого спиртового экстракта травы фиалки полевой с использованием метода вакуум-фильтрационной экстракции, отличающегося высокой эффективностью и рядом преимуществ по сравнению с большинством применяемых в настоящее время способов извлечения БАВ из сырья.

Выявлена особенность экстрагирования флавоноидов из травы фиалки

полевой вакуум-фильтрационным экстрагированием, заключающаяся в их

максимальном переходе из сырья в два первых получаемых слива. Ориентируясь

на флавоноиды как на основные спиртоэкстрагируемые БАВ травы фиалки

полевой, предложено получать жидкий экстракт с коэффициентом съема готовой продукции 1:2. Показана перспективность использования жидкого экстракта в лечении заболеваний, осложненных воспалительным процессом.

Впервые проведены исследования по разработке сухого экстракта, содержащего извлекаемый водой комплекс БАВ из шрота травы фиалки полевой. С учетом содержащихся в траве фиалки и обеспечивающих отхаркивающее действие полисахаридов, разработана оптимальная технология сухого экстракта, основанная на трехступенчатой ремацерации шрота горячей водой с последующим концентрированием и высушиванием в щадящих температурных условиях полученного извлечения. Для жидкого спиртового и сухого экстрактов осуществлено нормирование качества, определены условия и сроки их хранения. Разработан состав и предложена технология детского сиропа отхаркивающего действия, содержащего сухой экстракт из шрота травы фиалки полевой, проведена его стандартизация, установлены условия и сроки хранения.

Практическая значимость результатов исследования.

Разработанная технология жидкого экстракта (1:2) травы фиалки полевой, базирующаяся на вакуум-фильтрационном способе экстрагирования, позволяет истощить сырье на 85% по сумме всех извлекаемых 70% спиртом БАВ и на 90% - по флавоноидам. Установленное противовоспалительное действие жидкого спиртового экстракта травы фиалки полевой предполагает возможность его использования в качестве вспомогательного средства в комплексной фармакотерапии заболеваний, сопровождающихся воспалительным процессом. Предложенный жидкий экстракт позволяет расширить номенклатуру выпускаемых фармацевтическими фабриками суммарных фитопрепаратов.

Использованный в исследованиях принцип малоотходного производства делает возможным получение в одном технологическом цикле кроме жидкого спиртового экстракта травы фиалки полевой еще одного продукта - сухого экстракта, содержащего извлекаемый водой комплекс БАВ из остающегося шрота. Получение двух потенциальных лекарственных средств из одной

производственной загрузки сырья будет способствовать повышению уровня рентабельности переработки травы фиалки полевой.

Проведенные исследования по созданию малоотходной технологии переработки травы фиалки полевой, результаты ее фармакогностического изучения позволили разработать проект фармакопейной статьи предприятия для использования этого сырья в производстве по малоотходной технологии последовательно двух лекарственных средств - жидкого и сухого экстрактов.

Разработанный состав, технология, проведенная стандартизация сиропа, выявленное отхаркивающее действие, а так же низкая токсичность входящего в его состав сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой, создает предпосылку для внедрения в педиатрическую практику этой пероральной лекарственной формы. Разработанный сироп будет способствовать расширению ограниченного в настоящее время ассортимента эффективных и малоопасных фитосредств отхаркивающего действия для детей.

Степень внедрения. По результатам исследований разработан проект ФСП «Фиалки полевой трава» (акт внедрения ООО «Кубаньлектравы» от 19.09.06 г.), предназначенной для использования сырья в последовательном получении жидкого и сухого экстрактов по малоотходной технологии. Методики оценки качества и предложенные технологии фитопрепаратов травы фиалки полевой апробированы в отделах контроля качества и производственных цехах ООО «Кубаньлектравы» (акт апробации от 24.11.06 г.), ЗАО «Роскарфарм» (акты апробации от 14.04.07 г. и 18.04.07 г.). Разработан и утвержден лабораторный регламент на производство сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой на основе предложенной технологии (ГОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет Росздрава», 10.09.08 г.).

Фрагменты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс фармацевтического факультета ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (акт внедрения от 04.09.08 г.).

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной

работы доложены на III и IV региональных научно-практических конференциях

молодых ученых и студентов юга России «Медицинская наука и здравоохранение» (Анапа, 2004 и 2006 гг.); Всеукраинской научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фармацевтической науки и практики» (Запорожье, 2006 г.); конгрессе «Человек и лекарство. Краснодар 2008» (Краснодар, 2008 г.).

По результатам исследований опубликовано 10 работ, из них 1 - в рекомендуемом ВАК издании.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (№ гос. регистрации 0120.0500289).

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения; обзора литературы; главы, посвященной объектам и методикам исследований; 3-х глав собственных исследований; выводов; списка литературы, включающего 168 наименований, в т.ч. 22 источника иностранных авторов. Работа изложена на 125 страницах машинописного текста, содержит 34 таблицы, 12 рисунков.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объектом исследования служила заготовленная в фазу массового цветения в 2004-2006 гг. на территории Курской области, Краснодарского края и Ставрополья трава фиалки полевой.

Разработка технологии и нормирование качества жидкого экстракта травы фиалки полевой

Результаты исследования последних лет в отношении травы фиалки

позволили разработать новую фармакопейную статью на это сырье (ФС 42-014205). Для использования травы фиалки полевой как источника готовых лекарственных средств, производимых серийно по малоотходной технологии, требовалось разработать соответствующую фармакопейную статью предприятия (ФСП). Учитывая богатую сырьевую базу фиалки полевой на территории Северного Кавказа, а также наличие в Краснодарском крае и на Ставрополье

большого числа заготавливающих и перерабатывающих растительное сырье предприятий, представлялось целесообразным использовать в исследованиях сырье данных регионов произрастания. Наряду с этим, вызывали интерес сравнительные фармакогностические исследования сырья, заготовленного в Курской области, поскольку при разработке ФС 42-0142-05 в основном использовалась собранная в этом регионе Центрального Черноземья трава фиалки полевой.

В анализируемых образцах травы фиалки были определены основные числовые показатели, предусмотренные ФС для этого растительного сырья (Таблица 1).

Таблица 1 - Результаты определения основных числовых показателей для травы фиалки полевой, собранной на территории Курской области, Краснодарского и Ставропольского краев

Показатель Норма по ФС Регион заготовки сы рья

Курская область Краснодарский край Ставропольский край

Сумма флавонондов, не менее (%) 1 от 1,32*0,04 до 2,21 ±0,09 от 3,17 ±0,09 до 4,10 ±0,12 от 2,28 ± 0,07 до 3,39 ±0,10

Сумма полисахаридов, не менее (%) 8 от 9,12 ±0,14 до 10,80 ±0,16 от 9,41 ±0,14 до 14,31 ±0,15 от 8,74 ± 0,44 до 9,72 ± 0,49

Экстрактивные вещества, извлекаемые водой, не менее (%) 30 от 53,20 ±2,63 до 57,80 ±2,78 от 60,20 ±2,89 до 63,40±3,20 от 51,70±2,53 до 54,90±2,70

Влажность, не более (%) 14 от 8,42 ± 0,02 до 8,51 ±0,02 от 7,34 ±0,02 до 8,56 ± 0,03 от 9,58 ±0,03 до 9,61 ±0,02

Зола общая, не более (%) 13 от 7,40 ±0,01 до 8,31 ±0,02 от 7,52 ± 0,03 до 8,79 ± 0,02 от 7,11 ±0,01 до 8,21 ±0,02

Зола, нерастворимая в 10% кислоте хлористоводородной, не более (%) 3 от 1,33 ±0,01 до 1,53± 0,01 от 1,46 ±0,01 до 1,64 ±0,01 от 1,39 ±0,02 до 1,72 ±0,02

Органической примеси не более 3 от 1,04 ±0,02 до 1,21 ±0,03 от 1,10 ±0,02 до 1,17 ±0,02 от 1,12 ±0,02 до 1,13 ±0,02

Минеральные примеси, не более (%) 1 от 0,10 до 0,20 от 0,10 до 0,20 от 0,10 до 0,30

Приведенные в таблице 1 данные показали, что по числовым показателям все исследованные образцы травы фиалки полевой соответствуют требованиям действующей ФС. Полученные значения числовых показателей и проведенные анатомо - морфологические исследования позволили составить проект ФСП для возможного получения из травы фиалки полевой готовых лекарственных средств по малоотходной технологии переработки. Кроме того,

фармакогностический анализ был необходим для характеристики исходного сырья как объекта последующих технологических разработок.

Дальнейший этап исследования состоял в определении целесообразности получения экстракционных препаратов из травы фиалки полевой в условиях малоотходной схемы переработки сырья, в т.ч. по их технологическому выходу. С этой целью устанавливали значения показателя «экстрактивные вещества» как ориентира на максимально возможное количество потенциально получаемого фитоэкстракционного продукта. Поскольку к основным группам действующих веществ травы фиалки полевой отнесены флавоноиды и полисахариды, представлялось оправданным рассмотреть возможность получения двух экстракционных препаратов: одного - с содержанием флавоноидов, другого -полисахаридов. В этой связи, в качестве экстрагентов в тесте «экстрактивные вещества» использовались 70% спирт этиловый и вода очищенная. В последнем случае в эксперименте применялось как исходное сырье, так и остающееся после обработки 70% спиртом. Результаты исследования приведены в таблице 2.

Таблица 2 - Содержание экстрактивных и действующих веществ в траве фиалки полевой_

Содержание в сырье в %

экстрактивных веществ, извлекаемых

Серия* водой очищенной спиртом этиловым 70% водой очищенной после экстракции 70% спиртом флавоноидов полисахаридов

1 51,70±2,52 22,74±1,09 21,3 ЬЫ,04 2,28±0,08 8,74±0,44

2 63,40±3,19 37,29±1,75 34,21±1,64 4,10±0,12 14,31±0,65

приведены средние результаты 6 определений для исследуемых образцов сырья с минимальным (1)

и максимальным (2) содержанием «экстрактивных веществ» в сырье_

Полученные результаты показывают, что существенно значимым оказалось

содержание в траве фиалки полевой суммы извлекаемых 70% спиртом веществ,

которое колебалось от 22,74 до 37,29%. Также было определено, что

значительная часть гидрофильных соединений (21,31-34,21%) не переходит в

спиртовое извлечение, оставаясь в шроте. Эти данные свидетельствовали о том,

что из травы фиалки полевой можно с достаточно высоким выходом получать

последовательно как спиртовой, так и водный экстракт. В этой связи,

представлялось оправданным и возможным последовательное получение в рамках малоотходной переработки травы фиалки полевой двух лекарственных средств с содержанием, соответственно, флавоноидов и полисахаридов.

В качестве конечного продукта с содержанием спиртоэкстрагируемой суммы веществ, в т.ч. флавоноидов, был выбран жидкий экстракт, исходя из его предпочтительности в ряду суммарных фитопрепаратов и с учетом технологических возможностей отечественных производителей данной категории лекарственных средств.

Для обеспечения высокой эффективности экстрагирования травы фиалки полевой использовался метод вакуум - фильтрационного экстрагирования (ВФЭ) сырья, преимущества которого по сравнению с широкоприменяемым реперколяционным способом были показаны рядом научных работ. Одной из особенностей ВФЭ является применение тонкоизмельченного сырья, прошедшего специальную подготовку. Она заключается в двух-трехкратном вальцевании растительного сырья, сочетающего принцип одновременного раздавливания и истирания. В ходе такой подготовки значительно увеличивается удельная поверхность растительного материала, наблюдается разрушение многих клеточных стенок, что в совокупности обеспечивает ускорение процесса экстракции и полноту извлечения из сырья БАВ.

Для вальцованной измельченной травы фиалки полевой были достигнуты необходимые для ВФЭ технологические свойства: значительная удельная поверхность материала (1147,61 см2/г), высокая сыпучесть сырья (2,9 г/сек), низкий показатель порозности (0,201).

На следующем этапе исследования уточнялась оптимальная концентрация этанола в водно-спиртовой смеси для максимального извлечения флавоноидов из травы фиалки полевой. В таблице 3 приведены данные о содержании суммы флавоноидов в извлечениях, полученных отличающимися по концентрации спиртоводными смесями.

Таблица 3 - Влияние концентрации этанола в водно-спиртовой смеси на

содержание флавоноидов в получаемом извлечении 1:1 из травы фиалки полевой _

Концентрация спирта этилового в экстрагенте,% Содержание суммы флавоноидов (в пересчете на рутин), %

30 0,73±0,02

50 0,87±0,03

70 1,25±0,04

95 1,21 ±0,04

Примечание: приведены средние результаты 6 определений

Оказалось, что наилучшей экстракционной способностью по отношению к флавоноидам обладает 70% спирт этиловый.

Для изучения процесса экстракции флавоноидов и определения технологически приемлемого максимального их перехода из травы фиалки полевой в получаемый экстракт, изучали динамику извлечения этой группы БАВ. С этой целью 100 г сырья загружали в экстрактор с ложным дном и через слой тонкоизмельченного растительного материала пропускали («фильтровали») 70% спирт, собирая в отдельности 5 сливов по 100 мл (1:1). Динамика экстракционного процесса по флавоноидам представлена на рисунке 1.

Анализ данных исследования динамики экстрагирования флавоноидов травы фиалки методом ВФЭ свидетельствовал о том, что достаточно эффективное истощение (на уровне 90%) сырья по этим БАВ достигалось двумя объемами экстрагента (без учета коэффициента спиртопоглощения сырья). Технология жидкого экстракта оказалась нерациональной при использовании одного слива ввиду существенного остаточного количества флавоноидов в сырье. Получение же более чем двух сливов приводило к неоправданному снижению концентрации веществ («разбавлению» экстракта) и излишнему расходованию спирта. Таким образом, был сделан вывод о том, что оптимальным является получение жидкого спиртового экстракта травы фиалки с коэффициентом съема готовой продукции 1:2.

Рисунок 1 - Динамика процесса извлечения суммы флавоноидов из травы фиалки вакуум - фильтрационным методом

Стандартизацию жидкого экстракта травы фиалки полевой проводили на

пяти его сериях, полученных из сырья с низким содержанием флавоноидов -1,32%, влажностью - 8,42%. Содержание этилового спирта в жидком экстракте варьировало от 62,70 до 65,30 %, а флавоноидов - от 0,52 до 0,57 %.

На основании полученных результатов были предложены показатели и нормы качества жидкого экстракта фиалки, приведенные в таблице 4.

Таблица 4 - Показатели и нормы качества жидкого экстракта травы фиалки полевой_

Показатели Нормы

Описание Прозрачная жидкость темно-зеленого цвета со своеобразным запахом. При хранении возможно выпадение осадка.

Подлинность Образование зеленовато-желтого окрашивания при добавлении раствора алюминия хлорида (флавоноиды). В УФ-свете на хроматограмме (ТСХ) должны быть видны пять основных зон: одна на уровне зоны ГСО рутина, остальные - с Rs около 0,28, Rs около 0,72, Rs около 1,26, Rs около 1,38, имеющие темную флуоресценцию.

Тяжелые металлы Не более 0,01 %

Содержание флавоноидов Не менее 0,5 %

Содержание этилового спирта, % Не менее 62 %

Микробиологическая чистота Категория 3 Б: общее число аэробных бактерий не более 1 х 104 в 1 мл, общее число грибов и энтеробактерий - не более 102 в 1 мл, отсутствие Esherichia coli и Staphylococcus aureus в 1 мл, отсутствие Salmonella в 10 мл

Срок годности полученного жидкого экстракта устанавливали на образцах

пяти серий, заложенных на естественное хранение в сухом, защищенном от света месте при температуре не выше 25°С во флаконах из светозащитного

стекла вместимостью 25 мл. В образцах каждые полгода определяли внешний вид, подлинность, содержание спирта и флавоноидов. Результаты исследования дали основание рекомендовать срок хранения для жидкого экстракта травы фиалки полевой 2 года.

Проведенные предварительные исследования на моделях экссудативного отека, пролиферации и проницаемости капилляров показали наличие у жидкого экстракта умеренно выраженного противовоспалительного действия.

Разработка технологии и нормирование качества сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой

Следующим этапом исследования была разработка технологии сухого

экстракта на базе водоэкстрагируемого комплекса БАВ, остающегося в шроте травы фиалки полевой после получения жидкого экстракта и рекуперации спирта. При этом учитывалось богатое содержание в шроте полисахаридов, являющихся, наряду с флавоноидами, второй основной группой БАВ травы фиалки полевой. Таким образом, исходили из того, что технология и нормирование качества разрабатываемого сухого экстракта должны быть ориентированы на полисахариды травы фиалки.

На основании этого представлялось необходимым осуществить выбор способа и режима экстракции, обеспечивающих максимальное извлечение полисахаридов и других ценных водоэкстрагируемых БАВ в технологии сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой. При этом принимали во внимание то, что полисахариды из растительного сырья лучше всего экстрагируются горячей водой (90°С). Учитывая свойства горячей воды как экстрагента и полисахаридов как высокомолекулярных соединений, наиболее подходящим способом получения водоэкстрагируемого комплекса БАВ являлась ремацерация. При определении числа стадий экстракции учитывали то, что реализация процесса более чем тремя ступенями не приводит к существенному увеличению выхода полисахаридов из шрота и, кроме того, требует значительных энергетических затрат при удалении использованного экстрагента из извлечения. По этим причинам ограничивали и общий объем получаемого извлечения - 1:10. В этой

связи, осуществляли сравнительную оценку бисмацерации и трехступенчатой экстракции как способов получения извлечений из шрота травы фиалки полевой, максимально содержащих полисахариды. В обоих случаях на первой ступени экстракции использовали пятикратный по отношению к массе шрота травы фиалки объем нагретой до 90°С воды очищенной. На второй стадии экстракции для бисмацерации применялось то же соотношение, а для второй и третьей стадии другого сравниваемого способа - соотношение 1:3 и 1:2 соответственно. Время контакта фаз на любой ступени экстракции составляло 60 минут.

Оценку эффективности рассматриваемых вариантов ремацерации осуществляли по переходу полисахаридов и всей суммы водоэкстрагируемых веществ (в %) из шрота в получаемые извлечения. Результаты исследования приведены на рисунке 2.

бисмацерация

I и ш трехкратная мацерация экстракции

Рисунок 2 - Эффективность извлечения водоэкстрагируемых полисахаридов и суммы БАВ из шрота травы фиалки полевой при использовании двух- и трехкратной ремацерации

Как видно из представленных диаграмм, при равном общем объеме

получаемого водного извлечения (1:10), по эффективности экстрагирования полисахаридов и суммы БАВ предпочтительной выглядит трехкратная ремацерация.

Для установления времени экстракции на каждой ступени трехкратной ремацерации определяли концентрацию «насыщения» (равновесное состояние) по количеству полисахаридов в извлечениях. Результаты исследования представлены на рисунке 3.

----1 ступень

- • -II ступень

— • III ступен

—i Время экстракт 150 мин

Рисунок 3 - Динамика извлечения полисахаридов из шрота травы фиалки по каждой ступени ремацерации в зависимости от времени экстракции

Полученные результаты свидетельствовали о том, что равновесное состояние наступало в течение 2-х часов на любой из трех стадий ремацерации.

Таким образом, оптимальным способом получения комплекса БАВ в технологии сухого экстракта оказалась трехступенчатая ремацерация шрота травы фиалки горячей водой с соотношением сырье : экстрагент по ступеням экстракции 1:5; 1:3; 1:2 и продолжительностью 2 часа на каждой стадии. Достигаемая при этом эффективность экстракционного процесса составляла около 90% (по переходу полисахаридов из сырья в извлечения).

В результате проведенного исследования была разработана технология сухого экстракта, содержащего полисахариды и другие водоэкстрагируемые БАВ травы фиалки полевой, суть которой заключалась в следующем. В экстрактор, представляющий собой емкостный аппарат с мешалкой и паровой рубашкой, загружают шрот, затем дозируют с помощью мерника воду и проводят трехступенчатую ремацерацию при температуре 90°С и времени контакта фаз 2 часа на каждой стадии. Полученные водные извлечения объединяют, подвергают очистке, концентрируют и высушивают. Высушенный водный экстракт измельчают, просеивают, фасуют, упаковывают и маркируют.

Совокупность результатов проведенных исследований по рациональному получению сухого экстракта послужили основанием для разработки схемы

малоотходной переработки травы фиалки полевой (рисунок 4).

ВР.1.1 Санитаркам обработка помещения и оборудования

ВР 1 2 Подготовка персонала

ПР.2.1 Пригоговлашс 7(1? ó этанола

ВР 2 2 Шмельченне н просеивание сырья

ВР 2 3 Получение воды очищен но ¡i

ВР.2.4 Подготовка стеклотары, упаковочного, укупорочного и маркировочного материала

ТПЗ 1 Экстрагирование еырм 70% этанолом

ТП 3 2 Отстаивание и фильтрация спнртоводного tu влечении

ТПЗ 3 Рекуперация спирта »и шрота

ВР 1 Кт,Кх,Км Санитарная подготовка нрошиодства и персонала

ВР. 2 Кт.Кх Подготовка сырья и вспомогательного материала

Воду очищенную на ТП. 5.1

Í ►

\ ТП. 3 1

Намельченное сырьс и 70% этанол на

Потери

Спиртовые отгоны на DP 2.1

УМО. 4.1

Pqi.ihb экстракта do флаконы, укупорнвание и маркировка

УМО 4,2

Рашсщскне флаконов во вторичную упаковку , групповую тару, маркировка

ТП. 3 Кт.Кх Получение жидкого экстракта травы фиалки полевой

УМО 4 Кт.Кх, Км Упаковка и жидкого экс фиалки пол маркировка траста травы вон

Экстракт на YM0.4

Шрот на ТП. 5.1

Потери

Трехступенчатая экстракции трота травы фиалки горячей водой

Обьсдннснис. отстаивание и фильтрация водного ювлечения

Концентрирование, сушка и ТП.5.3 юмельченне су~чого экстракта

ТП. 5 Кт.Кх

Готовый продукт

Получение сухого экстракта ш шрота тралы фиалки полевой

УМО. Ы Фасовка в стеклянные банки, укупорившие и маркировка

УМО. 6.2 Помещение единичной фасованной проду кции в групповую тару, маркировка

Сухой экстракт на YM0.6

Отходи в отвал

Потерн

УМО.6 Упаковка и маркировка

Кт.Кх, Км сухого экстракта ш шрота

фааы фиалки полевой

Готовый продукт

Потерн

На кара<тшнос хранение

На склад totoboí продукции

Рисунок 4 - Схема малоотходной переработки травы фиалки полевой

С целью нормирования качества сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой в рамках предложенной малоотходной схемы ее переработки было наработано и проанализировано шесть серий этого продукта по

предусмотренным ОСТ 91500.05.001-00 показателям. Анализ полученных в итоге этого исследования данных позволил предложить показатели качества для сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой (таблица 5).

Таблица 5 - Показатели и нормы качества сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой___

Наименование показателя Характеристика и норма

Описание Аморфный, гигроскопичный порошок светло-коричиевого цвета со специфическим запахом, сладковатым вкусом.

Подлинность Образование осадка при добавлении 96% этилового спирта к водном раствору сухого экстракта травы фиалки полевой (полисахариды)-

Потеря в массе при высушивании Не более 5,0%

Содержание полисахаридов Не менее 45 %

Микробиологическая чистота Категория ЗБ

Разработка состава и технологии лекарственной формы, содержащей

сухой экстракт из шрота травы фиалки полевой

На заключительном этапе исследований разрабатывали детскую

лекарственную форму с сухим экстрактом из шрота травы фиалки отхаркивающего действия. Была всесторонне обоснована предпочтительность создания детского сиропа. Решение поставленной задачи начинали с разработки состава сиропа и, в первую очередь, определения необходимого содержания в нем сухого экстракта из шрота травы фиалки. Расчет дозировки сухого экстракта проводили исходя из рекомендуемого для детей количества и концентрации настоя (по полисахаридам) травы фиалки полевой. При этом учитывали, что объем сиропа на один прием должен составлять одну чайную ложку (5 мл). Было установлено, что при этой дозировке необходимо включить в состав сиропа около 3% сухого экстракта.

Однако создать такую концентрацию сухого экстракта в данной лекарственной форме оказалось технологически сложным из-за возникающей при его растворении высокой вязкости. В этой связи, концентрацию основного компонента в сиропе определили в 1,5%, а дозировку лекарственной формы рекомендовали по десертной ложке (10мл) на один прием 2-3 раза в сутки. В качестве компонентов для основы сиропа рассматривались растворы сахарозы, фруктозы, сорбита и их комбинации.

Поскольку сам экстракт фиалки придавал при растворении сиропу приятную окраску и слабый травяной запах, не было необходимости в выборе и добавлении корригента цвета и запаха в разрабатываемый сироп.

Важным моментом для детских лекарственных форм является их микробиологическая чистота. Результаты определения микробиологической чистоты показали, что свежеприготовленные сиропы с различным составом использованных вспомогательных веществ укладывались в нормы микробиологической чистоты категории 36 (не более 500 аэробных бактерий и 50 дрожжевых и плесневых грибов в 1 г.), однако в процессе их хранения наблюдался рост микробной флоры. Учитывая данный факт, в состав сиропов вводили консервант - сорбиновую кислоту, как наиболее приемлемую по безопасности для детских лекарственных форм.

В результате сравнительной оценки модельных сиропов по таким критериям как внешний вид, выкристализация, вязкость, значения плотности и рН был выявлен оптимальный состав лекарственной формы (в г):

Сухого экстракта из шрота травы фиалки 1,5

Сорбита 40,0

Сахарозы 20,0

Сорбиновой кислоты 0,2

Воды очищенной до 100,0

Итоги исследований по разработке состава и технологии сиропа с сухим экстрактом из шрота травы фиалки полевой позволили предложить схему его получения (рисунок 5).

По предложенной технологии было наработано 5 серий сиропа фиалки с целью нормирования качества по предусмотренным ОСТ 91500.05.001-00 для этой лекарственной формы показателям. В частности регламентировано минимальное содержание полисахаридов в сиропе -0,65 % (Таблица 6).

Предварительное фармакологическое изучение сиропа с сухим экстрактом травы фиалки полевой выявило у него отхаркивающее действие, сравнимое с эффектом отвара корня алтея и мукалтином.

ВР.1.1 Сащгтарная обработка помещения н оборудования

BP. 1.2 Подготовка персонала

ВР.2.1 Отвешивание п отмеривание компонентов сиропа

Подготовка стеклотары,

BP.2.2 укупорочных и

маркировочных

вспомогательных материалов

Растворение сухого экстракта id шрота травы фиалки полевой в воде очищенной

Смешение сорбита и сахарозы в растворе экстракта

ТП.3.1. Варка енроиа

ТП.3.2. Растворение коиссрва|гта

УМО.4.1. Ршлив сиропа во флаконы, нх укупорнванне и маркировка

Помсшеннс флаконов с

УМО.4.2. сиропом во вторичную

нотрсбшсльскую упаковку.

формирование ipynnOBOii и

транспортной тары

На склад готовой продукции

BP 1 Кт.Кх.Км Санитарная подготовка производства н персонала

ВР.2 Кт,Кх,Км Подготовка сырья

ТП.З Кт.Кх Получение сиропа с сучим экстрактом и ! шрота травы фиалки полевой

УМО.-1 Кт.Кх.Км Фасовка и упаковка

Сырье с DP.2 1 на

ТП.З

Потери

Сироп на УМО 4

Потерн

Готовый П)ЮЛ> кг

Потер»

Карштннюс хранение

Рисунок 5 - Технологическая схема производства сиропа с сухим экстрактом из шрота травы фиалки полевой

Таблица 6 - Показатели и нормы качества сиропа с сухим экстрактом из шрота травы фиалки полевой_

Наименование показателя Норма качества

Внешний вид вязкая прозрачная жидкость коричневатого цвета

Запах слабый карамельно - травяной

Вкус сладкий вкус

Плотность 1,250-1,310

Микробиологическая чистота Категория 3 Б. общее количество бактерий не должно превышать содержания в 1 г более 500 аэробных бактерий и 50 дрожжевых и плесневых грибов при отсутствии бактерий семейств Entcrobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa.

Номинальный объем 100±3%

Количественное определение (полисахариды) не менее 0,65 %

рН 5,5-5,6

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведено фармакогностическое исследование травы фиалки полевой

различных регионов произрастания и разработан проект фармакопейной статьи предприятия для использования сырья в производстве готовых лекарственных средств.

Выявлена возможность последовательного получения из травы фиалки полевой по малоотходной технологии переработки двух фитоэкстракционных препаратов на базе содержащихся в сырье спирто- и водоизвлекаемых веществ.

2. Обоснована целесообразность получения из травы фиалки полевой жидкого спиртового экстракта, содержащего сумму флавоноидов - одну из основных групп биологически активных веществ сырья. Разработана технология жидкого экстракта, предусматривающая использование оптимального для извлечения флавоноидов из сырья экстрагента - 70% спирта этилового и способа экстрагирования - вакуум-фильтрационного.

3. Выявлена особенность вакуум-фильтрационного экстрагирования флавоноидов из травы фиалки полевой, заключающаяся в их максимальном (до 90%) переходе из сырья в два первые получаемые сливы, что послужило основанием рекомендовать производство жидкого спиртового экстракта с коэффициентом съема готовой продукции 1:2.

4. Разработана технология сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой, остающегося после получения жидкого спиртового экстракта. Показано, что полнота экстракции полисахаридов достигается путем трехкратной ремацерации горячей водой (90°С) в соотношении сырье : экстрагент 1:5, 1:3, 1:2 и временем контакта фаз на каждой стадии в 2 часа.

5. Предложена малоотходная схема переработки травы фиалки полевой, предусматривающая последовательное получение в одном производственном цикле жидкого спиртового и сухого водного экстрактов. Проведено нормирование качества двух получаемых экстрактов, в т.ч. по содержанию действующих веществ - флавоноидов (не менее 0,5%) и полисахаридов (не

менее 45%) соответственно, а так же установлен срок их хранения, который для обоих суммарных фитопрепаратов составил 2 года.

6. Разработан состав и предложена технология детского сиропа, содержащего 1,5% сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой в сорбито-сахарозной основе, проведена его стандартизация, установлены условия и сроки хранения (18 месяцев). Показано, что сироп обладает отхаркивающим действием, сравнимым с мукалтином и отваром корня алтея.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Возможность разработки гидрофильных фитокомплексов из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии //Медицинская наука и здравоохранение: науч.-практ. конф. молодых ученых и студ. юга России (3, 2005, Краснодар): материалы...- Краснодар, 2005.- С.347 - 349.

2. Стандартизация сырья фиалки полевой (Viola arvensis L.) по содержанию флавоноидов // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: между нар. съезд «Фитофарм 2005» и конференция молодых ученых Европейского Фитохимического Общества «Растения и Здоровье»; (9; 2005г.; СПб): материалы ... - СПб.: НИИХ СПбГУ, 2005. - С.236-238. (соавт.: Бубенчиков P.A.).

3. Разработка состава и технологии сиропа с водным экстрактом травы фиалки полевой // Медицинская наука и здравоохранение: науч.-практ. конф. молодых ученых и студ. юга России (4; 2006; Краснодар) материалы...-Краснодар, 2006,- С.232-233.

4. Возможность производства спиртового экстракта и гидрофильного фитокомплекса травы фиалки полевой по совмещенной технологической схеме // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2006. - Вып. 61. - С.133-134. (соавт.: Бубенчиков P.A., Сампиев A.M.).

5. Некоторые концептуальные подходы к оптимизации производства и использования растительного сырья на фармацевтических фабриках // Актуальш питания фармацевтичшн та медичнси науки та практики: 361'рник наукових статей. - Запориокя: видавництово ЗДМУ, 2006. - Випуск XV, Том 2.- С.391-394 (соавт.: Сампиев A.M., Хочава М.Р., Никифорова Е.Б., Давитавян H.A., Дзаурова М.М., Шевченко А.И.).

6. Стандартизация травы фиалки полевой (Viola arvensis L.) по содержанию полисахаридов // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: междунар. съезд «Фитофарм 2006» и конференция молодых ученых Европейского Фитохимического Общества «Растения и Здоровье»; (10; 2006г.; СПб): материалы ... - СПб.: НИИХ СПбГУ, 2006. - С.307-309. (соавт.: Смирнова М.А., Гусейнов А.Я., Шабанов А.Г., Бубенчиков P.A.).

7. Разработка состава и технологии сиропа отхаркивающего действия на основе водного экстракта травы фиалки полевой // Кубанский науч. мед. вести. -2006. - №13 (93) - С.123-125. (соавт.: Бубенчиков P.A., Сампиев A.M.).

8. Разработка состава и технологии сиропа отхаркивающего действия с гидрофильным фитокомплексом из травы фиалки полевой // Человек и лекарство; (13; 2006; Москва) тез. докл. Рос. нац. конгресса - М., 2006. -С.651-652. (соавт.: Бубенчиков P.A.).

9. Изучение противовоспалительной активности жидкого спиртового и сухого водного экстрактов травы фиалки полевой, полученных по малоотходной технологии // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2007.- Вып. 62. -С.536-538. (соавт.: Бубенчиков P.A., Сампиев A.M.).

10. Исследование микробиологической чистоты сиропа с водным экстрактом травы фиалки полевой // Человек и лекарство. Краснодар - 2008: тез. докл. конгр. 16-18 окт. 2008 г. - Краснодар, 2008. -С.78.

и'

СЕРГЕЕВ НИКОЛАЙ СЕРГЕЕВИЧ

РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ИЗ ТРАВЫ ФИАЛКИ ПОЛЕВОЙ НА ОСНОВЕ МАЛООТХОДНОЙ ТЕХНОЛОГИИ

05-09134

АВТОРЕФЕРАТ

ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

Подписано к печати « »«/¿¿^у^ 3009 г. Форм« бумаги 60x84 1/16 Бумага кяижно-журнальна*. Печать ротапринта ад. Усл. яеч. л. 1,0, Тираж 100 ма Заказ-.Ш47 Отпечатано ■ типографии «Жираф», г. Краонодар, уд. Алма-Атинот, 13®

2008166109

Оглавление диссертации Сергеев, Николай Сергеевич :: 2009 :: Пятигорск

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 ФИАЛКА ПОЛЕВАЯ, ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ, ПРИМЕНЕНИЕ В НАУЧНОЙ И НАРОДНОЙ МЕДИЦИНЕ.

1.1 Ботаническая характеристика растений рода фиалка.

1.2 Фитохимический состав травы фиалки полевой.

1.3 Применение фиалки полевой в научной и народной медицине.

1.4 Способы получения экстракционных препаратов из лекарственного растительного сырья.;.

1.5 Взаимосвязь анатомо-физиологических особенностей детского организма и технологии детских лекарственных форм.

1.6 Современное состояние исследований в области создания детских лекарственных форм отхаркивающего действия.

Введение диссертации по теме "Технология лекарств и организация фармацевтического дела", Сергеев, Николай Сергеевич, автореферат

Актуальность темы. Из нескольких тысяч растений с установленными видами фармакологической активности лишь немногим более 200 разрешены в России к медицинскому применению. В их числе десятки видов лекарственного растительного сырья до сих пор используются только в форме водных извлечений -краткосрочных по хранению и практически неоцениваемых по качеству настоев и отваров. Данный подход в отношении растительного сырья, к тому же отягощенный устаревшими технологиями переработки, не соответствует современному требованию к его рациональному использованию, в частности, через получение в условиях мало- или безотходного производства нескольких фитосредств. К числу таких лекарственных растений относятся два близких вида фиалки - трехцветная и полевая, надземная часть которых применяется пока только в форме настоя отхаркивающего действия. Область применения и качество обоих видов лекарственного растительного сырья регламентируется единой для них фармакопейной статьей (ФС), в которой основным нормируемым показателем качества сырья является содержание двух гидрофильных групп биологически активных веществ (БАВ) — полисахаридов и флавоноидов. При этом фармакогностическому и технологическому изучению фиалки полевой, по сравнению с трехцветной, уделено значительно меньше внимания со стороны исследователей. Между тем, трава фиалки полевой имеет существенную сырьевую базу, особенно на территории Северо-Кавказского региона и могла бы стать объектом малоотходной переработки с получением нескольких лекарственных средств, в частности, на базе содержащихся в ней полисахаридов и флавоноидов.

Одновременно с рассмотрением вопроса о более полной переработке в промышленных условиях травы фиалки полевой, представляется целесообразным, с учетом фармакологических свойств этого сырья, создавать, в первую очередь, отхаркивающие средства для педиатрической практики. Ассортимент этой категории лекарственных препаратов отечественного производства крайне ограничен. Трава фиалки полевой с проверенной временем достаточно высокой степенью безопасности применения для детского организма, является вполне подходящим объектом исследования и в этом аспекте. При этом для детей наиболее предпочтительной формой перорального применения лекарственных средств считается сироп, в котором удается сбалансировать необходимые фармакокинетические и органолептические свойства.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

- разработать малоотходную технологию производства жидкого спиртового экстракта из травы фиалки полевой и сухого экстракта из её шрота, содержащих в качестве основных групп гидрофильные БАВ — флавоноиды и водорастворимые полисахариды, соответственно;

Основные положения, выносимые на защиту:

- обоснование целесообразности и возможности малоотходной переработки травы фиалки полевой;

Научная новизна. Впервые показана возможность, обоснована целесообразность и предложена малоотходная технология переработки травы фиалки полевой, предусматривающая последовательное получение из сырья двух фитопрепаратов -жидкого спиртового и сухого экстрактов.

Выявлена особенность экстрагирования флавоноидов из травы фиалки полевой вакуум-фильтрационным экстрагированием, заключающаяся в их максимальном переходе из сырья в два первых получаемых слива. Ориентируясь на флавоноиды как на основные спиртоэкстрагируемые БАВ травы фиалки полевой, предложено получать жидкий экстракт с коэффициентом съема готовой продукции 1:2. Показана 7 перспективность использования жидкого экстракта в лечении заболеваний, осложненных воспалительным процессом.

Практическая значимость результатов исследования.

18.04.07 г.). Разработан и утвержден лабораторный регламент на производство сухого экстракта из шрота травы фиалки полевой на основе предложенной технологии (ГОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет Росздрава», 10.09.08 г.).

Фрагменты диссертационного исследования внедрены в учебный процесс фармацевтического факультета ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (акт внедрения от

04.09.08 г.).

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы доложены на III и IV региональных научно-практических конференциях молодых ученых и студентов юга России «Медицинская наука и здравоохранение» (Анапа, 2004 и 2006 гг.); Всеукраинской научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения фармацевтической науки и 9 практики» (Запорожье, 2006 г.); конгрессе «Человек и лекарство. Краснодар 2008» (Краснодар, 2008 г.).

По результатам исследований опубликовано 10 работ, из них 1 - в рекомендуемом ВАК издании.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (№ гос. регистрации 0120.0500289).

Заключение диссертационного исследования на тему ""Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии""

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведено фармакогностическое исследование травы фиалки полевой различных регионов произрастания и разработан проект фармакопейной статьи предприятия для использования сырья в производстве готовых лекарственных средств. Выявлена возможность последовательного получения из травы фиалки полевой по малоотходной технологии переработки двух фитоэкстракционных препаратов на базе содержащихся в сырье спирто- и водоизвлекаемых веществ.

2. Обоснована целесообразность получения из травы фиалки полевой жидкого спиртового экстракта, содержащего сумму флавоноидов — одну из основных групп биологически активных веществ сырья. Разработана технология жидкого экстракта, предусматривающая использование оптимального для извлечения флавоноидов из сырья экстрагента — 70% спирта этилового и способа экстрагирования - вакуум-фильтрационного.

5. Предложена малоотходная схема переработки травы фиалки полевой, предусматривающая последовательное получение в одном производственном цикле жидкого спиртового и сухого водного экстрактов. Проведено нормирование качества двух получаемых экстрактов, в т.ч. по содержанию действующих веществ — флавоноидов (не менее 0,5%) и полисахаридов (не менее 45%) соответственно, а так же установлен срок их хранения, который для обоих суммарных фитопрепаратов составил 2 года.

108

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

Таким образом, анализ литературных данных показывает, что трава фиалки полевой содержит богатый комплекс биологически активных веществ и широко применяется в народной медицине в качестве разнообразных лечебно-профилактических средств. В научной же медицине ее применение ограничено использованием в основном в виде настоев и отваров, которые во многом не только не отвечают современным требованиям к лекарственным формам, но и не могут обеспечить полноту реализации фармакотерапевтического потенциала такого ценного лекарственного растительного сырья как трава фиалки полевой. Более того, современный фармацевтический рынок диктует потребность в коммерчески успешных, эффективных, безопасных и удобных для применения лекарственных препаратах. Таким препаратом, в частности, может быть сироп отхаркивающего действия на основе комплекса фармакологически активных веществ травы фиалки полевой, предназначенный для применения в детской практике.

В этой связи, исходя из современного ресурсосберегающего подхода к переработке растительного сырья, представляется целесообразным организовать малоотходную технологию получения препаратов из травы фиалки полевой. В частности, реализовать такую малоотходную переработку травы фиалки полевой возможно путем последовательного получения на первом этапе жидкого экстракта, а затем водного экстракта из шрота, остающегося после обработки исходного сырья этиловым спиртом. Такой способ получения экстракционных препаратов из травы фиалки полевой позволит сначала получить экстракт, обогащенный соединениями, преимущественно растворяемыми в спирте, а затем фитокомплекс, содержащий в основном полисахариды, очищенный от фенольных соединений.

Все изложенное выше дает основания считать актуальным исследование, посвященное разработке технологии фитопрепаратов травы фиалки полевой, нормированию их качества и выявлению перспектив применения в медицинской практике. Успешное решение этой задачи позволит расширить номенклатуру лекарственных средств на основе травы фиалки полевой и раскрыть возможности и перспективы применения данного сырья в медицинской практике.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1. Материалы и объекты исследований

Настоящая работа проводилась с 2004 по 2007 г. на кафедре фармации ГОУ ВПО Кубанского государственного медицинского университета.

Объектами исследования служили измельченная трава фиалки полевой, заготовленные в Курской области, Краснодарском крае и Ставрополье.

Сырье заготавливалось в июне-августе 2004, 2005, 2006 гг. в период массового цветения растения. Сырье упаковывалось и хранилось в соответствии с требованиями нормативной документации на траву фиалки при комнатной температуре в сухом, хорошо вентилируемом не зараженном амбарными вредителями помещении, без прямого попадания солнечных лучей.

Образцы сырья травы фиалки полевой, использованные в качестве объекта исследований, приведены в таблице 2. Таблица 2 — Образцы сырья травы фиалки полевой образца Место сбора

1 Курская область, ур. Знаменская роща

2 Курская область, с. Черемисиново

3 Курская область, с. Прямицино

4 Краснодарский край, г. Краснодар, Первомайская роща

5 Краснодарский край, ст. Старонижнестеблиевская

6 Краснодарский край, ст. Троицкая

7 Ставропольский край, х. Казачий

8 Ставропольский край, г. Ессентуки, парковая зона

9 Ставропольский край, с. Воздвиженское

Образцы шрота травы фиалки полевой были наработаны в лабораторных условиях после получения жидкого спиртового экстракта из данного лекарственного растительного сырья (вакуум-фильтрационное экстрагирование, экстрагент - спирт этиловый 70%, соотношение сырье-экстрагент 1:2) и удаления остатков экстрагента острым» паром. Шрот травы фиалки полевой представлял собой однородную влажную массу светлого зеленовато-коричневого цвета с влажностью 52%.

При проведении экспериментальных исследований использовались субстанции лекарственных и вспомогательных веществ, отвечающим требованиям НД (ГФ СССР X и XI изд., отдельных ФС, ГОСТ, ОСТ и ТУ).

В качестве экстрагентов: спирт этиловый (ФС 42-3071-00), воду очищенную (ФС 42-02619-97) и спирто-водные смеси.

В качестве вспомогательных веществ для приготовления сиропа использовали:

- Сорбит пищевой ТУ 64-5-17-86 и ФС 42-2660-89;

- Сахар-рафинад ГОСТ 22-78Е, ФС 42-77-72;

- Сахарозу ГОСТ (5833-75);

- Фруктозу РОСС NL ПП05 В 04300 (Финляндия);

- Сорбиновую кислоту (ГОСТ 26181 -84);

При выполнении исследований использовалась следующая основная аппаратура:

- весы аналитические лабораторные 2 класса по ГОСТ 24108-80 (предел взвешивания 200,0 г);

- разновес аналитический по ГОСТ 7328-82;

- термостат по ГОСТ 25336-82;

- эксикатор по ГОСТ 25336-82;

- измельчитель двухвалковый лабораторный типа ПД 320-160/160;

- вакуум-сушильный аппарат;

- спектрофотометр СФ-56 (кварцевые кюветы с толщиной рабочего слоя 10 мм);

- центрифуга лабораторная УЛР-1;

- вакуумный роторный испаритель ИР-1М2;

- микроскоп тринокулярный ML-200T-S оснащенный цифровой камерой;

- экстракторы, фильтрационные установки, набор сит, приборы для определения технологических и товароведческих показателей и др.

2.2. Методы и методики исследований

Определение влажности

Содержание влаги в исследуемом сырье определяли методом высушивания по ГФ XI [39]. Влажность сырья (W) в процентах вычисляли по формуле: (т-т,)х 100

W =-!-, (1) т v ' где m — масса сырья до высушивания, г; mi — масса сырья после высушивания, г Определение экстрактивных веществ

Содержание экстрактивных веществ определяли по методике ГФ XI [39]. Исследовали следующие показатели: экстрактивные вещества, извлекаемые из травы фиалки полевой 70% спиртом и экстрактивные вещества, извлекаемые водой очищенной непосредственно из сырья и шрота.

Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц диаметром 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) помещали в коническую колбу вместимостью 200-250 мл, прибавляли 50 мл экстрагента, колбу закрывали пробкой, взвешивали и оставляли на 1 час. Затем колбу соединяли с обратным холодильником, нагревали, поддерживая слабое кипение в течение 2 часов. После охлаждения колбу с содержимым вновь закрывали той же пробкой, взвешивали и потерю в массе восполняли экстрагентом. Содержимое колбы тщательно взбалтывали и фильтровали через сухой бумажный фильтр в сухую колбу вместимостью 150-200 мл. 25 мл фильтрата пипеткой переносили в предварительно высушенную при температуре 100-105°С до постоянной массы и точно взвешенную фарфоровую чашку диаметром 9 см и выпаривали на водяной бане досуха. Чашку с остатком сушили при температуре 100-105°С до постоянной массы. Все измерения проводили с точностью 0,0001 г.

Содержание экстрактивных веществ рассчитывали по формуле: шх 200x100

100-W) ' (2) где х — содержание экстрактивных веществ в сырье, г m - масса сухого остатка, г; mi — масса сырья, взятого на анализ, г; W - потеря в массе при высушивании сырья, %; Определение золы

Определение общей золы в исследуемом сырье проводили по методике, рекомендуемой ГФ XI. Точную навеску (около 5,0 г) измельченного лекарственного растительного сырья помещали в предварительно прокаленный и взвешенный фарфоровый тигель, равномерно распределяя сырье по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревали, давая сырью сгореть при возможно более низкой температуре. После почти полного сгорания угля пламя увеличивали. Прокаливание в муфельной печи вели при слабом красном калении (около 500°С). По окончании прокаливания тигель охлаждали в эксикаторе и взвешивали.

Для определения золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте к остатку в тигле, полученному после сжигания измельченного сырья, прибавляли 15 мл 10 % раствора хлористоводородной кислоты, тигель накрывали часовым стеклом и нагревали 10 минут на кипящей водяной бане. К содержимому тигля прибавляли 5 мл горячей воды, обмывая ею часовое стекло. Жидкость фильтровали через беззольный фильтр, перенося на него остаток с помощью горячей воды. Фильтр с остатком промывали горячей водой до отрицательной реакции на хлориды в промывной воде. Затем его переносили в тот же тигель, высушивали, сжигали, прокаливали и взвешивали. Исследование флавоноидов

Качественный состав флавоноидов изучали, предварительно подвергнув фракционированию сконцентрированное спиртовое извлечение (70% этиловый спирт) из травы фиалки полевой, последовательно обрабатывая его хлороформом, этилацетатом и бутанолом.

Наличие флавоноидов определяли в этилацетатных фракциях и водных остатках извлечений из исследуемых растений с помощью характерных качественных реакций:

- цианидиновой (к исследуемым растворам прибавляли концентрированную кислоту хлористоводородную и магниевую стружку);

- цианидиновой по Брианту: к окрашенному продукту цианидиновой реакции добавляли 1/3 часть октанола по объему, разбавляли водой до разделения слоев, встряхивали и отмечали переход пигментов в водную или органическую фазу. Пигменты гликозидов остаются в воде, а агликоны переходят в слой органического растворителя. Окрашивание октанольного слоя указывает на агликоновую природу исследуемого вещества;

- с 10% раствором натрия гидроксида образуется желто-бурое окрашивание;

- с 2% раствором алюминия хлорида образуется желто-зеленое окрашивание;

- с 1% спиртовым раствором железа (III) хлорида возникает темно-зеленая или коричневая окраска;

- - с борно-цитратным реактивом 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы дают ярко-желтое окрашивание с желто-зеленой флуоресценцией.

- с жидкостью Фелинга гидролизаты флавоноидных гликозидов при нагревании образуют кирпично-красные осадки [39,].

Также нами была использована хроматография на бумаге в системах растворителей: 15%-ная уксусная кислота; бензол-этилацетат-уксусная кислота (50:50:1), с использованием для проявления специфических реактивов (пары аммиака, спиртовый раствор щелочи, 2%-ный метанольный раствор циркония хлорокиси) [10,33,79].

Хроматограммы рассматривали в УФ-свете до и после обработки хромо-генными реактивами.

Исследование количественного содержания флавоноидов

Аналитическую пробу сырья, измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья, помещали в колбу со- шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 100 мл 70% спирта этилового и взвешивали с погрешностью ± 0,01 г. Колбу присоединяли к обратному водяному холодильнику, нагревали на кипящей водяной бане в течение 45 минут, периодически встряхивая для смывания частиц

39 сырья со стенок. Колбу с содержимым искусственно охлаждали до комнатной температуры, взвешивали и при необходимости доводили до первоначальной массы 70% спиртом этиловым. Извлечение фильтровали через бумажный фильтр, смоченный тем же спиртом, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

2 мл извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 5% раствора алюминия хлорида 70% спирте этиловом и через 10 мин 1 мл 3% раствора кислоты уксусной. Объем раствора доводят тем же спиртом до метки и оставляют на 30 минут.

Оптическую плотность полученного раствора измеряли на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 2 мл извлечения, 1 мл 3% раствора кислоты уксусной и доведенный 70% спиртом этиловым до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина (ГСО), приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Содержание суммы флавоноидов в процентах (X) в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляется по формуле: где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

D0- оптическая плотность раствора стандартного образца (ГСО) рутина; m - масса сырья в граммах; то- масса ГСО рутина в граммах;

W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.

Приготовление рабочего стандартного образца рутина

Около 0,05 г (точная навеска) РСО рутина (ФС 4-2508-87), предварительно высушенного при температуре 130-135°С в течение 3 ч, растворяют в 85 мл 95% спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают. 1 мл раствора РСО содержит 0,0005 г рутина. Срок годности

40 раствора 1 мес.

Приготовление 2% раствора алюминия хлорида в 95%

2 г алюминия хлорида х.ч. или ч.д.а. (ГОСТ 3759-75) растворяют в 50 мл 95% спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100мл. доводят объем раствора этим же спиртом до метки и перемешивают. Срок годности раствора 3 мес. [67,98,77,79,132].

Исследование макро- и микроэлементного состава

Для исследования макро- и микроэлементного состава применяли эмиссионную и атомно-адсорбционную спектрометрию с помощью спектрографа ДФС-8-1.

Пробоподготовку проводили путем мокрой минерализации. 250 мг измельченной травы фиалки полевой заливали 5 мл концентрированной азотной кислоты в кварцевой колбе. Содержимое колбы нагревали, не допуская интенсивного вскипания, периодически помешивая. С целью предотвращения разбрызгивания минерализационной массы в качестве пробки использовали каплеуловитель от колбы Кьельдаля.

При появлении коричневой окраски минерализата нагревание прекращали, добавляли 1-3 мл азотной кислоты и продолжали нагревать при более низкой температуре. Минерализацию заканчивали, когда жидкость становилась прозрачной или с легким желтоватым оттенком. Минерализат концентрировали путем выпаривания до объема 0,1-0,2 мл. Остатки минеральных солей смывали в мерные пробирки водой очищенной, тщательно обмывая стенки колбы, воронки и пробирки. Объем жидкости доводили до 15 мл.

Параллельно из государственных стандартных образцов (ГСО) готовили стандартные растворы ионов металлов (с концентрацией от 0,24 мг/л до 500 мг/л) и проводили калибровку прибора. Концентрация ГСО - 100 мг/л. Концентрация стандартных растворов приведена в таблице 3.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2009 года, Сергеев, Николай Сергеевич

1. Азарян, Р.А. Опыт по совершенствованию получения настоек и экстрактов / Р.А. Азарян // Фармация.-1980.-№1.-С.24-26.

2. Азарян, Р.А. Способ расчета расходных и загрузочных норм на растительное сырье и экстрагент при производстве суммарных экстракционных препаратов / Р.А. Азарян, И.А. Муравьев // Фармация.-1985.-№2.-С.44-46.

3. Аксельруд, Г.А. Экстрагирование. Система твердое тело-жидкость / Г.А. Аксельруд, В.М. Лысянский Л.: Химия, 1974.-254с.

4. Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: материалы 2 междунар. съезда 29 июня-2 июля 1998г. — СПб; Валаам: Феникс-Плюс, 1998. 214 с.

5. Антимикробные и ранозаживляющие свойства комбинации этанольных экстрактов и эфирных масел лекарственных растений / А.К. Кулатаева и др. // Раст. ресурсы. 2006. - Вып. 2. - С. 102-107.

6. Анализ качества растительного сырья и фитохимических препаратов /В .И. Литвиненко и др. //Основные направления работы по улучшению качества лекарственных средств: тез. докл. всесоюз. науч. конф: в 2 ч.— Харьков, 1983. — 4.2.-С. 64-65.

7. Бандюкова; В.А. Распространение флавоноидов в некоторых семействах высших растений / В.А. Бандюкова // Раст. ресурсы. 1968. - Т.4, вып. 1. - С.97-112.

8. Бандюкова, BiA. Качественный анализ флавоноидов в растительном материале при* помощи хроматографии* на бумаге: метод, рекомендации / В.А. Бандюкова;

9. A.JI. Шинкаренко: Пятигорск, 1972.- 24 с.

10. Бандюкова, В.А. Тонкослойная хроматография флавоноидов: метод, указания /

11. B.А. Бандюкова, A-.JI. Шинкаренко. Пятигорск, 1973. - 15 с.

12. Биологически активные вещества пищевых продуктов: справочник. — Киев: Техника, 1985.-С.61.

13. Биологически-активные вещества растительного происхождения: в-3-т. / Б.Н. Головкин и др.. -М.: Наука, 2002. — Т.З. 216 с.

14. Барабой, BiA\ Биологическое действие растительных фенольных соединений /В.А. Барабой Киев: Наук, думка, 1976. - 260 с.

15. Бойко, В.Д: Экстракция растительного-сырья с применением электрического' разряда в жидкости / В.Д. Бойко, И.В. Мизиненко // Хим.-фармац. журн.-1970.-№9.-С.38-40:

16. Брем, А. Жизнь растений. Новейшая ботаническая энциклопедия /А. Брем — М: Изд-во Эксмо, 2005.- С.361.

17. Ветров, П.П. Комплексная технология переработки растительного сырья /П.П.Ветров // Состояние и перспективы создания новых готовых лекарственных средств и фитохимических препаратов: тез. докл. всесоюз. науч.-технич.конф. -Харьков, 1990. С.38.

18. Витяжки у виробництв1 фiтoxiмiчниx npenapaTiB / Т.П. Попова и др. // Фармац. журн. 1995. - №2. - С.30-31.

19. Возможности создания малоотходных производств фитохимических препаратов / Литвиненко В.И. и др. // Малоотходная технология и охрана окружающей среды на предприятиях медицинской промышленности: тез. докл. науч.-техн. совещ. Уфа, 1981. - С. 14-15.

20. Видшення та вивчення флавонодав деяких рослин родин Бобовг та СелеровГта ix лшазотропна актившсть / П.С. Янченко и др. // Фармаком. — 2004. №4. — С. 1-11.

21. Влияние сухого экстракта ортилии однобокой на течение воспалительной реакции в эксперименте / Ботоева Е.А. и др. // Человек и лекарство: тез.,докл. 9. Рос. нац. конгр. 8-12 апр. 2002 г. М., 2002.-С.588.

22. Ворошилов, В.Н Поиски нового лекарственного растительного сырья / ВН. Ворошилов // Тр. Всесоюз. НИИ ин-та лекарств и ароматичесьсих растений (ВИЛАР). 1941. -Вып. 6.- С. 1-6.

23. Гаммерман, А.Ф. Лекарственные растения (Растения-целители)/ А.Ф. Гаммерман, F.H. Кадаев, А.А. Яценко-Хмелевский 4-е: изд. перераб. и дон. -М.: Высш. шк., 1999. - 544 с.

24. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ/В.В.,Гацура М.: Медицина,,1974. - 143 с.

25. Гейдеман, Т.С Полезные дикорастущие ресурсы Молдавии. / Т.С. Гейдеман. -Кишинев, 1962.-416с.

26. Георгиевский, В.П. Применение величин nRf и nRst для идентификации флавоноидов / В.П. Георгиевский // Раст. ресурсы.— 1982. Вып. 3. - С. 427-434.

27. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук. — Новосибирск: Наука, 1990.-333 с.

28. Гончаров^ А.Г. Исследования растительного полисахаридного комплекса/А.Г. Гончаров, Т.И. Исакова, Л.Д. Халеева // Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств: тез. докл. Республик, науч. конф. Харьков, 1981. - С. 139:

29. Горин, А.Г. Получение и фитохимическое исследование полисахаридов из лекарственных, растений: /А.Г. Горин // Всерос. съезд фармацевтов: тез. докл. -Свердловск, 1975. С. 313-314.

30. Государственный реестр лекарственных средств. — М.: Медицина, 2000. 1204с.

31. Государственная фармакопея СССР: — 10-е изд. — М.: Медицина, 1968. — 1080 с.

32. Государственная фармакопея СССР: в 2 вып. 11-е изд. - М.:Медицина, 1987 -1990.- Т. 1,2.

33. Гунар, О.В. Методы определения антимикробного действия лекарственных > средств / О.В. Гунар, К.А. Каграманова // Хим.-фармац. журн.- 2005.- Т. 39,№5.1. С.53-56.

34. Дикорастущие полезные растения Крыма / под ред. Н.И Рубцова. Ялта, 1971.-278с.

35. Дикорастущие полезные растения России / отв. ред. A.JI. Буданцев, Л.Е. Лесиовская. СПб.: Изд-во СПХФА, 2001. - 663с.

36. Дорогочейников, В.Н. Количественное определение восстанавливающих моносахаридов в водорастворимом полисахаридном комплексе из цветков липы сердцелистной /В.Н. Дорогочейников, В.Н. Чушенко //Фармация 1988. - №4. -С.39-40.

37. Досягнення та перспективи дослщжень бюлопчно активних речовин рослинного походження / В.М. Ковальов и др. // Актуальш питания фармацевтично!' та медично'1 науки та практики: зб. наук. ст. -Запор1жжя, 2006,-Вип. 15.-С.155-160.

38. Драшк, Л.1. Фгготерашя сегодш /Л.1. Драшк, Л.Г. Долганенко, О.С. Аммосов //Фармац. журн. 1995. - №1. - С. 67-74.

39. Енгалычева, Е.И. О противовоспалительной активности полисахаридов мать-и-мачехи / Е.И. Енгалычева, В.Н. Рожкова, Е.Я. Ладигина // Фармация. — 1982. — Т. 31, № 2. — С.37 -40.

40. Жизнь растений: в 6 т. М.: Просвещение, 1974-1981. -Т. 1-6.

41. Забазная, Е.И. Полисахариды Viola tricolor / Е.И. Забазная. // Химия природ, соединений. 1985. - N 1. - С. 113.i к (

42. Западнюк, И.П. Лабораторные животные, их разведение, содержание ииспользование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария. — Киев, 1983.-350 с.

43. Запесочная, Г.Г. О флавоноидах некоторых лекарственных растений / Г.Г. Запесочная, А.И. Баньковский // Лекарственные растения. — М.: Колосс, 1969. — Т. 15.- С.629-639.

44. Извлечения в производстве фитохимических препаратов / Попова Т.П. и др. //Основные направления работы по улучшению качества лекарственных средств: тез. докл. Всесоюз. науч. конф. Харьков, 1983. - Ч. II. - С. 94-96.

45. Кабишев, К.Э. Фитопрепараты в отечественной дерматологической практике / К.Э. Кабишев // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2005. - №1. -С. 189-204.

46. Калошина, Н.А. Живительные бальзамы, эликсиры и экстракты / Н.А. Калошина, А.В. Мазулин, Н.И. Федюкович.- Минск:Элайда, 1997.- С.-53-68.

47. Камышев, Н.С. Флора Центрального Черноземья и ее анализ./ Н.С. Камышев -Воронеж: Изд-во ВГУ, 1978. 116 с.

48. Касьянов, Г. И., Натуральные пищевые ароматизаторы С02-экстракты /Г.И.Касьянов, А.В. Пехов, А.А. Таран. -М.: Мед. пром-сть, 1978. - 175 с.

49. Кемертелидзе, Э.П. Физико-химические методы анализа некоторых биологически активных веществ растительного происхождения/ Э.П. Кемертелидзе, В.П. Георгиевский Тбилиси, 1976. - 224 с.

50. Количественная оценка технологических процессов по степени мало- и безотходности / В.И. Комарови др. // Пищ. пром-сть. 1995. - №3. - С. 2-3.

51. Корсун В.Ф. Фитотерапия аллергических заболеваний кожи / В.Ф. Корсун, А.А. Кубанова, С.Я. Соколов Минск: Палымя, 1988. - 403 с.

52. Киселёва, Г.С. Биофармацевтические методы оценки in vitro качества лекарственных форм / Г.С. Киселёва // Решение актуальных задач фармации на современном этапе: тез. докл. науч. конф. М., 1994. - С.118.

53. Клышев, JI.K. Флавоноиды растений / JI.K. Клышев, В.А. Бандюкова, JI.C. Алюкина. Алма-Ата, 1978.- С.9-10.

54. Количественное определение суммы флавоноидов в черных листьях Bergenia crassifolia (L.) Fritsch. / И.Б. Лубсандоржиева и др. // Раст. ресурсы. 1996. - Т. 32, №3. — С.92-95.

55. Корсун, В.Ф. Лечение кожных болезней препаратами растительного происхождения: справочник / В.Ф. Корсун, А.Е. Ситкевич, В.В. Ефимов. -Минск: Беларусь, 1995. — 383с.

56. Костинская, Н.Е. Детская зеленая аптека / Н.Е. Костинская Минск.: Ушверсггэц., Междунар. центр культуры книги, 1999.-С.146-176.

57. Кошовий, О.М. Амшокислотний та мшеральний склад екстракт1в 13 листя евкалшту/О.М. Кошовий, A.M. Комюаренко // Фармаком. -2004. №4.- С. 1-5.

58. Краснюк, И.И. Фармацевтическая гомеопатия: учеб. пособие / И.И. Краснюк, И.Г. Михайлова; под. ред. Н.А. Замеренова.- М: Академия, 2005.- 272с.

59. Кугач, В.В. Лекарственные формы флавоноидов (Обзор) / В.В. Кугач, Н.И. Никулышина, В.И. Ищенко // Хим.-фармац. журн. 1988. - №8. - С.1018-1025.

60. Лавренов, В.К. Полная энциклопедия лекарственных растений / В.К. Лавренов, Г.В. Лавренова.- Спб.; М.: Нева; ОЛМА-ПРЕСС, 1999. С 276-277.

61. Лекарственные растения государственной фармакопеи. Фармакогнозия / под ред. И.А. Самылиной М.:АМНИ, 1999.- 496 с.

62. Лесиовская, Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии: учеб. пособие / Е.Е. Лесиовская, Л.В. Пастушенков.-2-е изд.-М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003.-С.297-333.

63. Литвиненко, В.И. Спектральное исследование флавоноидов. Обнаружение свободных фенольных оксигрупп в различных положениях / В.И. Литвиненко, Н.П. Максютина//Химия природ, соединений. 1965. - №6. - С.420-424.

64. Литвиненко, В.И. Фитохимическое изучение флавон-содержащего растительного сырья / В.И. Литвиненко, Н.В. Попова, И.Л. Оккерт // Актуальш питания фармацевтично1 та медично1 науки та практики: зб1рник наук. ст. — Запор1жжя, 2006. Вып. 15, т.1. - С.97-101.

65. Лобанова, А.А. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья / А.А. Лобанова, В.В. Будаева, Г.В. Сакович // Химия раст. сырья. 2004. - №1. - С.47-52.

66. Ложкин, А.В. Природные кумарины: методы выделения и анализа (Обзор) / А.В. Ложкин, Е.И. Саканян // Хим.-фармац. журн. 2006.- Т. 40,№6. — С.47-56.

67. Математическая модель процесса экстрагирования из растительного сырья / Е.М. Безчаснюк и др. // Фармаком.- 2003.-№1.-С.54-57.

68. Махлаюк, В.П. Лекарственные растения в народной медицине /В.П. Махлаюк -Саратов, 1967. 559 с.

69. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский — 15-е изд., перераб., испр. и доп. М.: Изд. Новая волна, 2005. - С.523.

70. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных средств / Тринус Ф.П. и др. -М.: Медицина, 2005. 398 с.

71. Методические указания к обработке результатов эксперимента по технологии лекарств / А.И.Тенцова и др. Ташкент, 1980. - 71 с.

72. Мирахмедов, Ч.М. Применение лекарственных растений и их препаратов для лечения некоторых заболеваний кожи / Ч.М. Мирахмедов, Л.В. Белова // Вестн. дерматологии и венерологии. 1983. - №7. - С. 23-27.

73. Минина, С.А. Химия и технология фитопрепаратов / С.А Минина, И.Е. Каухова. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 560 с.

74. Михайленко, Е.Г. Лекарственные растения в акушерстве и гинекологии / Е.Г. Михайленко, В.Е. Радзинский, К.А. Захаров //Киев: Здоровье, 1987. 192 с.

75. Михайлов, И.Б. Фитотерапия в педиатрии / И.Б. Михайлов СПб.: Наука, 1995.- С.37

76. Моисеева, Г.Ф. Иммуностимулирующие полисахариды высших растений (обзор) / Г.Ф.Моисеева, В.Г. Беликов // Фармация. 1992. - Т.41, №3. - С.79-84.

77. Молчанов, Г.И. Интенсивная обработка лекарственного сырья / Г.И. Молчанов- М.: Медицина, 1981.-208 с.

78. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / В.Л. Багирова и др.. -Спб.: СпецЛит, 2001.- 223 с.

79. Некоторые аспекты- технологии получения биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья / В.И. Литвиненко и др. // Фармаком. — 2003. №4. - С.27-31.

80. Никифорова, Е.Б. Исследование полисахаридов кукурузных рылец / Е.Б. Никифорова, А.М. Сампиев // Кубанский науч. мед. вестн. — 2006: №1-2. — G.96-99.

81. Николаева, ВАнтимикробное действие некоторых растений, используемых в народной- медицине СССР в качестве антисептиков / B.F. Николаева, А.А. Хохлова. // Раст. ресурсы. 1978. - Т. 14, вып.2.- С.234-237.

82. Ноздрюхина, ЛР. Биологическая роль микроэлементов в: организме животных и человека / Л.Р. Ноздрюхина. М., 1986. - С. 184.

83. О стандартизации жидких экстрактов г. пастушьей сумки, пустырника; крушины и левзеи / Ю.Г. Пшуков и др. // Проблема стандартизации и контроля качества лекарственныххредств: тез. докл. Mi, 1991.-Т.2, ч.2.-С.39-41.

84. Особенности применения стандартного образца рутина в анализе растительного сырья, витаминных и фитопрепаратов // Хим. фармац. журн. - 2000: - N1. - С. 2931. ;

85. Пастушенков, Л.В: Фармакотерапия с основами фитотерапии: в 2-х ч./ Л.В: 11асгушенков, Е.Е. Лесиовская// СПб, 1994-1995. - 4.1,2.

86. ОСТ 91500.05:001.00. Стандарты качества, лекарственных средств: — Утвсрж. 2001. 01.11. - № 388. - М., 2001. - 26 с.

87. Полный медицинский травник / П: Оуди. и др. — М.: Дарлинг Киндерсли, 2000. 192с.

88. Перспективы разработки препаратов из отходов производства настоек и жидких экстрактов /А.М:Сампиев и др. // Науки о человеке: материалы 4 конгр. молодых ученых и специалистов. — Томск, 2003. — С.213.

89. Перспективы создания сухих экстрактов / И.А. Самылина и др. // Фармация — 2006. № 2. - С.43-46.

90. Полная энциклопедия практической фитотерапии / Т.А. Виноградова и др.. -М.; СПб.: ОЛМА-ПРЕСС; Нева, Валери-СПД, 1998 С.35.119

91. Пономарев, В.Д. Экстрагирование лекарственного растительного сырья /В.Д. Пономарев. М.: Медицина, 1976. -204с.

92. Поперечный, А.Н. Интенсификации процесса экстрагирования эфирномасличного сырья / А.Н. Поперечный // Совершенствование теории и практики экстрагирования. Киев, 1984. - С.41.

93. Попова, Т.П. Некоторые общие закономерности извлечения действующих веществ из лекарственного растительного сырья. Сообщ. 1. / Т.П. Попова, В.И Литвиненко// Фармаком- 1993.-№1.-С.13-16.

94. Попова, Т.П. Некоторые общие закономерности извлечения действующих веществ из лекарственного растительного сырья. Сообщ. 2. / Т.П. Попова, В.И Литвиненко // Фармаком 1993. -№2. -С.8-12.

95. Попова, Т.П. Некоторые общие закономерности извлечения действующих веществ из лекарственного растительного сырья. Сообщ. 3. / Т.П. Попова, В.И Литвиненко//Фармаком 1993. -№3. -С.13-16.

96. Попова, Т.П. Фильтращйна екстракция та ii аппаратурне оснащения. Повщомления IV / Т.П. Попова, О.С. Амомов, B.I. Литвшенко // Фармац. журн. -1999.-№6.-С. 91-95.

97. Практикум по фармакогнозии: учеб. пособие для студентов вузов / под ред. В.Н. Ковалева. Харьков: Изд-во НФаУ; Золотые страницы; МТК - Книга, 2004. -512 с.

98. Промышленная технология лекарств / В.И. Чуешов и др..-Харьков.: МТК-Книга; изд. НФАУ, 2002.-С. 393-415.

99. Прокопенко, А.П. Современное состояние и пути повышения уровня фитохимических производств. Сообщ. 1. Технология и технологическая документация /А.П. Прокопенко, П.П. Ветров, Г.А. Жуков // Фармаком 1993. -№4.-С. 3-9.

100. Пути усовершенствования технологии настойки пустырника / В.И. Литвиненко и др. // Традиционные методы лечения основные направления и перспективы развития: материалы науч.-практич. конф. - М., 1998. - С. 135-136.

101. Пшуков, Ю.Г. Методика одновременного определения коэффициента поглощения, коэффициента образования внутреннего сока и коэффициента увеличения объема при растворении экстрактивных веществ / Ю.Г. Пшуков // Фармация.- 1990.- №4,- С.24-28.

102. Разработка технологии получения сухого экстракта из грудного сбора №3 и исследование его фенольного комплекса / Шилина Т.С. и др. // Вестн. ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2004. - №2. - С.282-287.

103. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав и использование; Семейства Paeoniaceae Thymelaeaceae. - Л.: Наука, 1985. - 336 с.

104. Регистр лекарственных средств России. РЛС Энциклопедия лекарств.-11-й вып. / гл. ред. Г.Л. Вышковский. -М.: РЛС, 2004.-1503с.

105. Российская энциклопедия биологически активных добавок к пище: учеб. пособие / Петров В.И. и др.. М.: ГЕОТАР-Медиа, 2007.- 1065 с.

106. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. В.П. Фисенко. М.: Медицина, 2000. -398с.

107. Самылина, И.А. Пути использования лекарственного растительного сырья и его стандартизация. / И.А. Самылина, И.А. Баландина // Фармация. -2004. №2. — С.39-41.

108. Сернов, JI.H. Элементы экспериментальной фармакологии / JI.H. Сернов, В.В. Гацура. М., 2000. - 352 с.

109. Скальный, А.В. Химические элементы в физиологии и экологии человека / А.В. Скальный М: ОНИКС 21 век; Мир, 2004.- 216с.

110. Современное состояние и пути повышения уровня фитохимических производств / А.П. Прокопенко и др. // Фармаком.- 1993.-№6-7-С. 16-25.

111. Содержание и состав суммарных водорастворимых полисахаридных комплексов в надземной части Lamium album L. и Galeobdolom luteum huds / B.C. Березина и др. //Раст. ресурсы. 2003. - Вып. 1. - С.69-75.

112. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям / С.Я. Соколов, И.П. Замотаев М.: Медицина, 1990. - 510 с.

113. Спектрофотометрическое определение флавоноидов в лек. раст. сырье и лек. формах на его основе / Саушкина А.С и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (51; 1996; Пятигорск): материалы . -Пятигорск, 1996. С.93.

114. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. — М.: АстраФармСервис, 2006. 1536 с.

115. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов (Моносахариды) / Б.Н. Степаненко. — М.: Высш. шк., 1977. 222 с.

116. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов (Полисахариды) / Б.Н Степаненко. М.: Высш. шк., 1978. - 256 с.

117. Тенцова, А.И. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств (Введение в биофармацию) / А.И. Тенцова, И.С. Ажгихин -М.: Медицина, 1974.-336с.

118. Требования к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ: метод, рекомендации. М., 1985. - 20 с.

119. Технология и стандартизация лекарств / под ред. В.П. Георгиевского, Ф.А. Конева // Сб.науч.тр.ГНЦЛС. Харьков: Рирег, 2000. - 784с.

120. Турищев, С.Н. Лекарственные растения при кожных болезнях / С.Н. Турищев // Фармация 2003. - №5. - С.47-48.

121. Удельнова, Т.Н. Микроэлемент, экология и здоровье человека/ Т.Н. Удельнова, С.Г Торгин., В.А. Ягодин // Успехи современной биологии. Вып. 2.-М.: -1990. -С. 279.

122. Фитотерапия с основами клинической фармакологии / под ред. В.Г. Кукеса. -М.: Медицина, 1999. 192 с.

123. Химический анализ лекарственных растений / Н.И. Гринкевич и др.. М.: Высш. шк., 1984. - 176с.

124. Химические и биохимические процессы в производстве растительных препаратов /В .И. Литвиненко и др. //Исследования по изысканию лекарственных средств природного происхождения: тез. докл. всесоюз. науч. конф.-Л.: 1981.-С. 35.

125. Чопик, В.И. Дикорастущие полезные растения Украины / В.И Чопик, Л.Г. Дудченко, А.Н. Краснова Киев, 1983.- 398с.

126. Чистохин, Ю.Г. Совершенствование процесса экстрагирования излекарственного растительного сырья: автореф. дис.канд. фарм. наук: 15.00.01

127. Чистохин Юрий Георгиевич. Харьков, 1990.-25с.

128. Чушенко, В.Н. Исследования в области анализа полисахаридных препаратов:автореф. дис.канд. фармац. наук: 15.00.02 / Валентина Николаевна Чушенко. 1. Харьков, 1980. 16 с.

129. Duke, J.A. CRS handbook of medical herbs / J.A. Duke.- Boca Raton (Fla): CRC press., 1986.- 677p.

130. Российский сводный каталог no HTJI Электронный ресурс.-Электрон, Dr. Duke's. Phytochemical and Ethnobotanical Database. 2004,-Режим доступа: http: // www.ars-grin.gov / duke /. — Загл. с экрана.

131. Analiza jaksciowa i ilosciowa kwasow fenolowych w kwiatostanach nagietca lekarskiego /А. Kurowska et al. // Acta Polonia Pharmaceutica 1985. - Bd.XLII, №5.-P. 473-476.

132. Baumann, J. Flavonoids and related compounds as inhibitors of arachidonic acid peroxidation / J. Baumann, F. Von Bruchhausen, G.Wurm // Prostoglandins. 1980. -Vol.20, N2. - P. 627-639.

133. Ferrandis, M.L. Effect of flavonoids from Spanish and Indian medicinal herbs on arahidonate metabolism in rat peritoneal leukocytes/ M.L. Ferrandis, A.G. Ramachandron Nair, M.J. Alkaraz // Farmazie. 1990. - Bd.45, H.6. - S.444-445.

134. Triterpenoid Saponin from Viola hondoensis W. Becker et H Boss, and Their Effect on MMP-1 / M. Hyung at al.// Arch. Pharm. Res.- 2004.-Vol. 27, N 7.-P. 730-733.

135. Johnston, S. Epidemiology of respiratory tract infections. In: Myint S . Taylor-Robinson D., eds. Viral and other infections of the human respiratory tract. / S. Johnston, S. Holgate London: Chapman & Hail, 1996. - P. 24-27.124

136. Karrer, W. ^Constitution und Vorkommen der organischen Pflanrenstoffe / W. Karrer-Basel. Stuttgart, 1958. - S.217.

137. Kasprzyk, Z. Triterpene alcohols of Calendula officinalis flowers /Z. Kasprzyk, J. Pyrek // Phytochemistry 1968. - Vol.7, N9. - P. 1631-1639.

138. Kasprzyk, Z. The variations of free-and bound sterols in Calendula officinalis L. during vegetation./ Z. Kasprzyk, J. Pyrek, // Acta Biochim. Pol. 1968. - Vol.15, N2. -P. 149-159.

139. Kasprzyk, Z. The structure of triterpenic glycosides from the flowers of Calendula / Z. Kasprzyk, Z. Wojciechowsky //Phytochemistry. 1967. - Vol.6, N1. - P.69-75.

140. Klarsfeld, A. Medicaments: sur la piste vegetale /А. Klarsfeld // J. int. med. 1993. -N273. - P.43-47.

141. Liquid chromatographic-mass spectrometric determination of genistin and daidzin in soybean food samples after accelerated solvent extraction with modified of extraction cell / Borivoj Klejdus et al. // Analytica Chimica Acta.- 2004.- 517.- P. 1-11.

142. Middleton, E. Some biological properties of plant-flavonoids / E. Middleton // Ann: Allergy. 1988. - Vol.61, N6, Pt2. - P.53-57.

143. Novel neutral polysaccharide having activity on the reticuloendothelial system- from the root of Glycyrrhiza uralensis / N. Shimizu et al. // Chem. Pharm. Bull. 1990. -Vol.38, N11. - P.3069-3071.

144. On the antiinflammatory effect of polysaccharides of plant origin / E. Minker et al. // Pharmacol. Res. Commun. 1988. - Vol.20, N1. - P.9-10.

145. Evaluation of antitussive agents in man / L. Parvez, M-. Vaidya, A. Sakhardande»et al. // Pulm. Pharmacol. 1996. - Vol 9. - P!299-308.

146. Studies on the polysaccharides having immunological activaties from the root of Glycyrrhiza uralensis and the stolon of G. glabra Var. glandulifera / Tomoda Mi, et al. // J. Pharmacobio-Dyn. 1992. - Vol.15, N1. - R5-7.

147. Wagner, H. An immunologically active arabinogalactan from.Viscum album: Berries/ H. Wagner, E. Jordan // Phytochemistry. 1988. - Vol.27, N8. - P.2511-2517.

148. Wagner, H. Search for new plant constituents with potential antiphlogistic and antiallergic activity/». Wagner //Planta. med. 1989. - Vol.55, N4. - P.235-241.

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:"Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии"

Автореферат диссертации по фармакологии на тему "Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии"

Оглавление диссертации Сергеев, Николай Сергеевич :: 2009 :: Пятигорск

Введение диссертации по теме "Технология лекарств и организация фармацевтического дела", Сергеев, Николай Сергеевич, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему ""Разработка лекарственных средств из травы фиалки полевой на основе малоотходной технологии""

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2009 года, Сергеев, Николай Сергеевич

Похожие научные работы

Каталог диссертаций