Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора мочегонного действия

Елецкая, Ольга Анатольевна

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора мочегонного действия

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Елецкая, Ольга Анатольевна Рязань 2004 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора мочегонного действия

На правах рукописи

Елецкая Ольга Анатольевна

РАЗРАБОТКАИ СТАНДАРТИЗАЦИЯ МНОГОКОМПОНЕНТНОГО СБОРА МОЧЕГОННОГО

ДЕЙСТВИЯ

15.00.02- фармацевтическая химия и фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

(Т

Рязань-2004

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет МЗ РФ».

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, профессор Валентина Яковлевна Яцюк

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор Григорий Андреевич Чалый

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор Николай Степанович Фурса кандидат фармацевтических наук Елена Владимировна Акульшина

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет МЗ РФ», г. Томск

Защита состоится » Ц.&М'*-1'/,^**-, 2004 Г. в « часов на

заседании Диссертационного Совета Д 208.084.01 в ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет им. академика И.П.Павлова МЗ РФ» (390026, г. Рязань, ул. Высоковольтная, 9)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет им. академика И.П.Павлова МЗ РФ» по адресу: 390026, г. Рязань, ул. Шевченко, 34

Автореферат разослан «

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук,

доцент

2004 г.

Е.А. Рязанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время в медицине при лечении различных заболеваний сердечно-сосудистой системы, суставов, почек и мочевыводящих путей широко применяются мочегонные средства. Выбор мочегонного средства зависит от тяжести состояния больного, эффективности препарата, чувствительности больного к диуретику. При совместном применении диуретиков с препаратами других групп возникает опасность развития нежелательных реакций, особенно общих для многих синтетических диуретиков: гипокалиемии, гиперкалиемии, гиперурикемии, а также усиливаются нефро- и ототоксичность антибактериальных и общая токсичность нестероидных противовоспалительных средств (В.В.Гусель, 1989). Кроме того, характерной современной социальной и медицинской проблемами является хронизация различных форм патологии, причиной которой ВОЗ считает развитие у больных вторичной иммунологической недостаточности, ведущей к снижению сопротивляемости организма к инфекционным и другим провоцирующим болезнь агентам (И.А.Борисов, 1997). Создание диуретических препаратов, которые не только направлены на выведение из организма больного натрия и отечной жидкости с мочой, но при этом оказывают противовоспалительное, антибактериальное, протективное и иммунокоррегирующее действие, актуально. Препараты, отвечающие таким требованиям, могут быть созданы на основе лекарственного растительного сырья. Общепризнанным преимуществом лекарственных растений и суммарных препаратов из них является малая токсичность, возможность длительного применения без побочных явлений, широкий спектр фармакологического действия. Целесообразным является применение сборов лекарственных растений, обеспечивающих комплексное воздействие за счет сочетания лечебного действия различных компонентов.

В перечне диуретических препаратов, разрешенных к применению в РФ, доля сборов незначительна - менее 2%. В состав отечественных диуретических сборов включены виды лекарственного растительного сырья, потребность в которых многократно превышает объем заготовки, и районы промышленной заготовки которых находятся за пределами России.

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ!

БИБЛИОТЕКА }

Поиск и разработка новых многокомпонентных растительных композиций из отечественного сырья и внедрение их в медицину является актуальной задачей. Не менее актуальным является также создание на основе сборов суммарных препаратов, сохраняющих все преимущества многокомпонентных лекарственных средств: синергизм ингредиентов, отсутствие токсичности и побочных эффектов, - но при этом имеющих преимущества при дозировании и хранении.

Цель работы: Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора, обладающего мочегонным и противовоспалительным действием для лечения хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы, сопровождающихся развитием дефицита ряда параметров иммунитета; разработка технологии и норм качества жидкого экстракта из предлагаемого сбора.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

- разработка с помощью фармакологическою скрининга рациональной прописи сбора;

- изучение макро- и микродиагоностических признаков сбора, позволяющих идентифицировать его компоненты, его качественного химического состава, разработка методик и проведение количественной оценки содержания основных групп БАВ в сборе;

- определение товароведческих показателей сбора, изучение его стабильности в процессе хранения;

- разработка технологической схемы получения жидкого экстракта сбора, изучение его качественного состава и стандартизация по основным группам БАВ, изучение его стабильности в процессе хранения;

- изучение общей и специфической фармакологической активности сбора и жидкого экстракта сбора;

- разработка проекта нормативной документации на сбор.

Научная новизна. На основании фармакологического скрининга, с учетом специфической фармакологической активности каждого компонента разработан состав нового мочегонного сбора, обладающего также противовоспалительным и иммуномодулирующим действием, позволяющим

использовать его как диуретик на фоне воспалительных процессов мочеполовой системы.

В ходе химического анализа сбора, выявлено наличие в сборе веществ первичного обмена: аминокислот и полисахаридов, а также установлен их качественный состав; и веществ вторичного обмена: флавоноидов, дубильных веществ, простых фенолов, органических кислот, эфирных масел, сесквитерпеновых лактонов и каротиноидов; определено содержание макро-и микроэлементов.

Определены факторы оптимизации процесса экстракции основных действующих веществ (природа экстрагента, измельченность сырья, температурный и временной режимы экстракции, кратность экстракции и соотношение сырья и экстрагента). На основании реакции комплексообразования флавоноидов с алюминия хлоридом, галловой кислоты с железо-тартратным реактивом в фосфатном буфере разработаны методики дифференциального спектрометрического определения содержания флавоноидов и дубильных веществ сбора, и также методика спектрофотометрического определения фенологликозидов.

По результатам изучения стабильности при хранении предложены показатели нормирования качества сбора.

На основании изучения технологических параметров сырья определены условия экстракции и разработан способ получения жидкого экстракта мочегонного сбора, методики количественного определения в нем суммы полифенольных соединений, флавоноидов и фенологликозидов, подтверждена стабильность экстракта при хранении в течение полутора лет.

Изучены общая и специфическая фармакологическая активность водных извлечений сбора и жидкого экстракта.

Показаны возможности включения сбора в комплексное лечение больных хроническим простатитом в сочетании с новым препаратом «Полиоксидонием».

Практическая значимость. Предложен новый фитопрепарат, представляющий собой пятикомпонентный сбор, состоящий из сырья растений, разрешенных к медицинскому применению на территории РФ, сырьевые запасы которых достаточны.

Разработана методика пробоподготовки и проведения микроскопического анализа многокомпонентного сбора.

Описаны внешние и микродиагностические признаки, разработаны характеристики подлинности и методики определения действующих веществ в многокомпонентном сборе и жидком экстракте.

На основании проведенных исследований составлен проект фармакопейной статьи на мочегонный сбор.

Обоснована возможность получения жидкого экстракта на основе мочегонного сбора.

Показано, что включение в комплексное лечение больных хроническим простатитом дополнительно к различным формам «Полиоксидония» предлагаемого мочегонного сбора, оказывает более эффективное влияние на показатели иммунного и цитокинового статуса пациентов, способствуют значительному снижению индекса симптоматики и клинического индекса у данной категории больных, улучшению качества жизни пациентов с хроническим простатитом.

Результаты внедрения.

Разработанные спектрофотометрические методики определения дубильных веществ, суммы флавоноидов и суммы фенологликозидов в сборе апробированы в МУЗ «Центр контроля качества и сертификации лекарственных средств» г. Курск (акты об апробации от 15.01.2004, 20.01.2004,01.04.2004) и рекомендованы для включения в ФС.

Результаты исследований по определению подлинности многокомпонентного сбора с использованием микроскопического анализа и спектрофотометрические методики стандартизации сбора по содержанию фенологликозидов и флавоноидов внедрены в учебные процессы кафедр фармакогнозии с курсом ботаники Рязанского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова (акты № 11,12,13 от 14.04.04) и СевероОсетинского государственного медицинского университета им. КЛ.Хетагурова (акты № 28,29,30 от 03.06.04).

Состав, способ приготовления и применения мочегонного сбора внедрены в практику урологических отделений ГВКГ им. академика

Н.Н.Бурденко (акт № 4 от 22.08.04) и Курской областной клинической больницы (акт от 12.10.2004).

На состав сбора и способ его применения получен патент РФ № 2238750 «Урологический сбор «Фито-Про» для комплексного лечения простатита и способ его лечения».

Показатели качества мочегонного сбора включены в проект фармакопейной статьи (акт №1 от 23.10.04 КГМУ).

На защиту выносятся следующие положения, характеризующиеся научной новизной:

- разработка рецептуры мочегонного сбора;

- результаты исследований по разработке характеристик подлинности и показателей качества мочегонного сбора;

- методики и результаты количественного определения основных групп биологически активных веществ в сборе;

- результаты исследований по получению и анализу жидкого экстракта из мочегонного сбора;

- результаты определения общей и специфической фармакологической активности препаратов сбора.

медицина, фармацш, б1отехнолопя» (Харьков, 2003), Российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь, 2004), совместном заседании кафедр органической химии, фармацевтической химии, аналитической химии, фармакогнозии с курсом ботаники, фармацевтической технологии, коллоидной и физической химии, экономики и управления здравоохранением с курсом медицинского товароведения, биохимии Курского государственного медицинского университета (2004).

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского Государственного медицинского университета по проблеме «Фармация». Номер государственной регистрации 01.200.2008426.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 206 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (глава 1-2), собственных исследований (главы 3-7), списка литературы и приложений. В тексте содержится 54 таблицы, 8 рисунков. Приложение содержит таблицы, рисунки, проект фармакопейной статьи на сбор, акты внедрения результатов работы в практику. Список литературы состоит из 396 источников, из них 56 на иностранном языке.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объекты и методы исследования

Объектом исследования служили образцы 6 сборов, приготовленных из лекарственного растительного сырья, заготовленного или закупленного в 2000-2002 гг, соответствовавшего требованиям нормативной документации и прошедшего радиационный контроль. Сборы готовили в соответствии с требованиями статьи «Сборы», ГФ XI. Степень измельченности - 5 мм. Образцы сборов упаковывались и хранились в соответствии с требованиями нормативной документации (ОСТ 64-4-143-75 и ГФ XI).

При разработке и оформлении проекта ФС на сбор руководствовались ОСТ 42-506-96 «Порядок разработки, согласования и утверждения нормативно-технической документации на лекарственные средства и лекарственное растительное сырье». Настои из сбора получали по методике статьи «Настои и отвары» ГФ XI.

Объектом химических и фармакологических исследований также служил жидкий экстракт 1:1, полученный на основе сбора методом реперколяции с законченным циклом.

В работе были использованы физико-химические и биологические методы исследования.

Подлинность сбора устанавливали по наличию диагностических признаков всех компонентов прописи, которые определяли приемами макро- и микродиагностического методов анализа в соответствии со статьями на отдельные виды сырья. Изучение признаков сбора проводили на микроскопе Биолам-С11 и окулярами х7,хЮ,х15 объективами х8, х40. Фотосъемку осуществляли на микроскопе МБИ-6 с фотонасадкой хЮ и объективом х9 на пленке Коника.

В соответствии с требованиями к качеству сборов, для него по методикам статей ГФ XI определяли числовые показатели: влажность, содержание золы общей и золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной кислоты, измельченность и содержание примесей, содержание экстрактивных веществ. Отбор и подготовку проб для анализа проводили в соответствии требованиями статьи «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб для анализа» ГФ XXI и ОФС 42-0013-03 «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб».

Для разработки технологии получения жидкого экстракта определяли такие технологические характеристики, как доброкачественность сырья, насыпная масса, коэффициенты наполнения сухого и набухшего сырья, коэффициент вытеснения, коэффициент образования внутреннего сока, коэффициент поглощения. Анализ жидкого экстракта проводили методами, указанными статьей «Экстракты» ГФ XI.

Для определения биологически активных веществ в сборе и жидком экстракте использовали различные методы фитохимического скрининга: хроматографические (тонкослойная, бумажная и колоночная хроматография), методы экстракции различными растворителями (в зависимости от природы биологически активных веществ), спектрофотометрические и колориметрические методы, а также методы классической органической химии. Изучение качественного химического состава жидкого экстракта мочегонного сбора проводилось в сравнении с водным извлечением из мочегонного сбора, приготовленного по фармакопейной методике как настой и отвар (1:10).

Обнаружение классов биологически активных веществ (каротиноидов, дубильных веществ, фенологликозидов, флавоноидов, кумаринов,

аскорбиновой кислоты) проводили с помощью общепринятых специфических качественных реакций. Качественные реакции проводили с водным (1:10) извлечением сбора, спирто-водными извлечениями различной концентрации, гексановыми (1:10) извлечениями. Хроматографическое исследование сбора проводили методами восходящей одномерной и двумерной хроматографии. Количественное содержание природных биологически активных веществ оценивали с использованием современных методов химического анализа.

Количественное определение аскорбиновой кислоты, свободных органических кислот, арбутина, дубильных (окисляемых) веществ, эфирного масла проводили по методикам статей ГФ XI.

Содержание полисахаридов в сборе определяли гравиметрическим методом, осаждая полисахариды из водных извлечений 96% этанолом, с последующим взвешиванием сухого остатка. Определение содержания восстанавливающих моносахаров в водорастворимом полисахаридном комплексе проводили после гидролиза с использованием реакции с натрия пикратом спектрофотометрическим методом при длине волны 460 нм в пересчете на стандартный раствор глюкозы.

Количественное определение пигментов, витамина осуществляли методом УФ-спектроскопии при соответствующих длинах волн.

Количественное содержание аминокислот в мочегонном сборе и отдельных его компонентах проводили на аминокислотном анализаторе ААА-339 (ЧССР), в стандартных условиях, используемых обычно для разделения белковых гидролизатов. В качестве внутреннего стабилизатора использовали смесь, состоящую из 12 аминокислот. По 50 мкл исследуемых образцов вводили в колонку анализатора. Колориметрическое измерение окрашенных комплексов, образующихся в результате реакции с нингидрином, проводили при длине волны 570 нм. Для количественной оценки определяли автоматически площади пиков удержания идентифицированных аминокислот.

Определение элементного состава в образцах сбора проводили после предварительного сжигания и озоления по методике полуколичественного спектрального анализа минерального сырья на спектрометре ДФС-8-1.

Биологические исследования проводили на мышах, крысах, морских свинках Подопытные животные получены из питомников АМН РФ

«Столбовая» и «Крюково». В опытах использовали животных, прошедших карантинный режим вивария Курского государственного медицинского университета. Материалом исследования служила кровь и спленоциты селезенки мышей и крыс, сердца, почки, легкие, печень, селезенки, надпочечники морских свинок.

Исследовали острую и хроническую токсичность, противомикробную, мочегонную, седативную, иммунотропную, и противовоспалительную активность сбора.

Изучение острой токсичности проводили на мышах-самцах и крысах-самцах. Определение острой токсичности на мышах проводили при однократном внутрибрюшинном 1 мл и пероральном (в желудок металлическим зондом диаметром 1 мм) введении 1,2 мл растворов препаратов. В опытах на крысах per os вводили растворы препаратов в дозах 2 мл/100 г массы животного. Изучение хронической токсичности мочегонного сбора и жидкого экстракта проводили на мышах-самцах, которым вместо воды в поильники ежедневно помещали исследуемые препараты, и морских свинках через день вводили per os no 2 мл препаратов.

Противомикробную активность сбора и экстракта изучали методом диффузии в агар на плотной питательной среде путем анализа угнетения зон роста тест-микроорганизмов, используемых для определения антимикробного действия

Мочегонный эффект определяли по модифицированной методике Фольгарда (В.В.Гацура, 1974)

Для выявления седативного действия препаратов были использованы группы мышей-самцов, которым вводили внутрибрюшинно по 0,2 мл 1% раствора коразола, вызывающего клонические судороги. В опытах регистрировали латентный период появления судорожного приступа и его длительность в секундах.

Противовоспалительное действие настоя и жидкого экстракта сбора определяли на модели острого асептического воспаления, вызванного инъекционным введением раствора формалина, и сопровождающегося экссудативной фазой (отеком), и на модели анафилактоидной или псевдоаллергической реакции, вызываемой полисахаридом бактериального

происхождения декстраном. Опыты проводили на группах мышей-самцов. Результаты влияния исследуемых препаратов на тяжесть воспалительного отека оценивали через 24 часа после инъекции формалина, а оценку антиаллергического действия проводили через 3 часа после инъекции анафилактогена, по разнице масс воспаленных и контрольных лапок по отношению к весу животных, выраженной в промилях (%о), и учитывали по индексу реакции (ИР). ИР препаратов относили к ИР контрольной группы и вычисляли процент снижения отека под воздействием препаратов в сравнении с контрольной группой.

Опыты по изучению гуморального иммунного ответа (ГИО) проводились на крысах-самцах. Количество АОК и РОК в селезенке животных определяли на 5-й день после иммунизации.

Реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) индуцировали по методу Черноусовой Л.Н., Кульберг А.Я. (А.Я. Кульберг, 1986) в группах крыс-самцов. О выраженности реакции ГЗТ судили через 24 часа после введения сенсибилизирующей дозы антигена по разнице масс (РМ) и разнице количества кардиоцитов (РК) регионарного и контрлатерального лимфатических узлов.

Эффективность клинического применения сбора на базе урологических отделений МУЗ ГБ СМП г. Курска оценивали по сравнению сроков лечения и количества рецидивов в группах больных с хроническим простатитом (ХП), которым применялись только традиционная противовоспалительная терапия и по способу, включающему в комплексную терапию лекарственный сбор. Настой сбора, приготовленный по ГФ назначался внутрь по 1/3 стакана 3 раза в день, за 20-30 мин до еды, в течение 2-4 недель.

Результаты экспериментов обрабатывались статистически с использованием критерия Стьюдента в соответствии с требованиями ГФ XI. Статистическую обработку данных проводили при помощи электронных таблиц программы Excel 2000.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Разработка рецептуры сбора

В результате предварительного анализа литературных сведений была составлена рецептура шести трех-пяти компонентных мочегонных сборов, сочетание компонентов которых позволило бы применять их при заболеваниях, сопровождающихся воспалительными процессами в почках и мочевыводящих путях, В состав были включены растения, разрешенные к медицинскому применению на территории РФ (табл.1). Для выбора одной рецептуры сравнивали мочегонное действие всех шести сборов и официнального «Сбора мочегонного №1», а также учитывали сырьевую доступность компонентов сбора.

Таблица 1

Диуретическое действие растительных сборов при внутрибрюшин-

ном введении

Препарат Объем мочи вмл/1гвеса животного Диуретический эффект

в % к воде в% к сбору мочегонному №1

Контроль - вода 0,26±0,06 100 42

Сбор мочегонный №1 0,61±0,Н 235 100

Пропись 1: Лист толокнянки. Лист мяты. Трава хвоща, Трава тысячелистника аа 0,58±0,12 223 95

Пропись 2: Трава тысячелистника. Трава хвоща, Трава спорыша, Лист мяты аа 0,46±0,08 176 75

Пропись 3: Корневище и корни марены. Лист мяты, Трава хвоща аа 0,83±0,21 317 136

Пропись 4: Трава тысячелистника. Трава хвоща, Лист мяты, Почки березы аа 0,73±0,17 280 120

Пропись 5: Корень солодки. Лист брусники, Трава тысячелистника, Лист мяты, Трава хвоща аа 0,33±0,08 126 54

Пропись 6: Почки березы. Лист брусники, Лист крапивы, Трава пустырника, Трава тысячелистника аа 0,91±0,09 350 149

Для дальнейшего изучения был выбран сбор по прописи 6, в 1,5 раза превосходящий по диуретическому эффекту официнальный сбор. В его состав включены 5 видов растительного сырья: трава пустырника (20%), лист

брусники (20%), лист крапивы (20%), трава тысячелистника (20%), почки березы (20%). Все виды сырья включены в ГФ XI, растения произрастают на территории РФ, сырьевые запасы достаточны. При приготовлении сбора из промышленно измельченного сырья, получился сбор, при ситовом анализе которого установлено, что до 90% частиц сбора имеет степень измельчения до 5 мм. Учитывая практический результат, а также перспективу промышленного производства сбора, для сбора была предложена степень измельченности до 5 мм.

Морфолого-анатомические исследования сбора

При визуальном осмотре сбор представляет собой смесь частиц растительного сырья, серовато-зеленого цвета, с включениями буровато-коричневого, светло-розового, беловато-серого цвета, проходящих сквозь сито с отверстиями 0=5мм. В ходе визуального исследования сырье сбора было сгруппировано но морфологической принадлежности.

Для микроскопического исследования сбора из аналитической пробы брали навеску 10,0 г и, используя стсрсомикроскоп и лупу, выделяли отдельные компоненты и готовили из них микропрепараты.

Диагностические признаки всех компонентов визуализировались хорошо и соответствовали своему описанию в частных статьях ГФ XI. Для листьев брусники дополнительно проводили гистохимическую реакцию на дубильные вещества - производные катехина с 1% раствора ванилина и НС1(конц). Эту же реакцию использовали для идентификации листа брусники в сборе, т.к. красное окрашивание порошка наблюдается и невооруженным глазом.

Качественный анализ сбора

Качественными реакциями в сборе подтверждено присутствие аминокислот и поли- и моносахаров, флавоноидов, дубильных веществ, простых фенолов, органических кислот, эфирных масел, сесквитерпеновых лактонов и каротиноидов, хлорофилла. Идентификацию индивидуальных веществ проводили хроматографически (табл.2).

Таблица 2

Результаты хроматографического анализа сбора

Группа БАВ Системы растворителей Идентифицированы

Флавоноиды и феноло-глико-зиды Этилацетат-уксусная кислота-вода (25:5:5), н-бутанол-кислота уксусная ледяная - вода (5:4:1), бензол-кислота уксусная (5:2) рутин, кверцетин, гипе-розид, лютеолин, гисперидин, арбутин

Органические кислоты, в т.ч. ароматические (фенол-карбо-новые) Хлороформ-метанол-вода (61:32:7), н-бутанол-кислота уксусная ледяная - вода (4:1:2) коричная, кофейная, глюкуроновая, галловая кислоты.

Этанол 95% раствор аммиака концентрированный (16:4,5) аскорбиновая кислота

Каротиноиды Гексан-диэтиловый эфир (3:7), гексан-бензол-этанол (81:15:4), гексан-ацетон (9:1) у-, р-, а-каротины

Аминокислоты Бутанол-уксусная кислота ледяная - вода (4:1:2), (12:3:5), бутанол-ди-этиловый эфир-уксусная кислота ледяная - вода (9:6:3:1), бутанол-пиридин-вода (6:4:3) гистидин, лизин, аргинин, серин, глицин, треонин, аланин, тирозин, валин, фенилаланин, лейцин, аспарагиновая и глута-миновая кислоты

Сахара Этилацстат-пиридин-вода (12:5:4), пропанол-этилацетат-вода (7:1:2), н-бутанол-пиридин-вода (6:4:3), этилацетат-уксусная кислота-муравьиная кислота-вода (18:3:1:4) лактоза, ксилоза, галактоза, глюкоза, арабиноза, рамноза и глюкуроновая кислота.

Определение содержания действующих веществ

Исходя из сведений о качественном составе сбора, полученных в ходе предварительного анализа, проведено определение содержания экстрактивных веществ, содержания веществ вторичного обмена: дубильных (окисляемых) веществ, суммы флавоноидов, арбутина, аскорбиновой и органических кислот, витамина К; веществ первичного обмена: полисахаридов и аминокислот, а также анализ микроэлементного состава сбора.

Для количественного определения флавоноидных соединений, имеющих собственное поглощение в УФ и видимой области спектра, содержащихся в мочегонном сборе, использовали УФ-спектрофотометрический метод анализа. При разработке методики с целью выбора аналитической длины волны

изучили УФ-спектры комплексов флавоноидов спиртовых извлечений из сбора и стандартных образцов ГСО рутина и кверцетина с алюминия хлоридом. При сравнении дифференциальных УФ-спектров сбора и стандартных образцов рутина и кверцетина установили, что при длине волны 412 нм наблюдается максимум поглощения комплекса флавоноидов сбора и ГСО рутина. Максимум поглощения комплекса ГСО кверцетина по отношению к максимуму сбора смещен в длинноволновую область. Это позволило выбрать в качестве стандартного образца рутин, входящий во все компоненты сбора.

Установленными предварительными исследованиями оптимальными условиями экстрагирования суммы флавоноидов из исходного мочегонного сбора являются: степень измельчения сырья - до размера частиц диаметром 1 мм, экстрагент - 70% этанол, соотношение сырье-экстрагент 1:50, температурный режим - 80 С0, кратность экстракций - 2, каждая продолжительностью 30 мин; оптимальными условиями реакции комплексообразования флавоноидов с А1С13 являются: количество 2% раствора А103 - 2мл, время достижения стабильной оптической плотности - 40 мин; полученный комплекс стабилен в течение последующих 2-х часов. На основании проведенных исследований условий определения суммы флавоноидных соединений предложена методика количественного определения суммы флавоноидов в мочегонном сборе в пересчете на рутин, которой проведено десятикратное определение содержания суммы флавоноидов в одном образце мочегонного сбора (табл.3).

Таблица 3

Метрологические характеристики методики количественного определения

{ X I Э | Р,% ДА- Е,%

9 1,69 | 0,01197 | 2,26 95 0,03 1,69

Количественное содержание дубильных веществ определяли по оптической плотности окрашенных продуктов взаимодействия дубильных веществ с железо-тартратным реактивом при длине волны 545 нм в присутствии 0,Ш фосфатного буфера с рН 8,2. Оптимальными условиями экстрагирования дубильных веществ из исходного мочегонного сбора являются: степень измельчения сырья - до размера частиц диаметром 2 мм, экстрагент - вода, соотношение сырье-экстрагент 1:100, температурный режим - 90° С, кратность

экстракций - 1, продолжительностью 15 мин. На основании проведенных исследований условий экстракции нами предложена методика количественного определения дубильных веществ. Их содержание в сборе в пересчете на галловую кислоту, определенное по этой методике в десяти образцах, составило 4,26±0,16% (табл.4).

Таблица 4

Метрологические характеристики методики количественного определения дубильных веществ в мочегонном сборе ________

1 X 5 Р,% &Х

9 4,26 0,2654 2,26 95 0,16 3,75

Определение содержания суммы фенологликозидов в пересчете на арбутин проводили спектрофотометрическим методом, для чего использовали удельный показатель поглощения (£,'*) арбутина стандарта. Для раствора арбутина стандарта снимали спектры в интервале длин волн от 250 до 300 нм. Его максимум поглощения отметили при длине волны 280-281 нм, которую впоследствии использовали в качестве аналитической. Найденный удельный показатель поглощения арбутина-стандарта составил 74,26 при аналитической длине волны 281 нм. Оптимальными условиями экстрагирования суммы фено-логликозидов из исходного мочегонного сбора являются: степень измельчения сырья - до размера частиц диаметром 1 мм, экстрагент - 60-70% этанол, соотношение сырье-экстрагент 1:100, температурный режим - 90 С0, кратность экстракций - 2, каждая продолжительностью 30 мин.

На основании предварительных исследований предложена методика количественного определения фенологликозидов в мочегонном сборе в пересчете на арбутин. Предложенной методикой проанализировано 5 серий сбора. Содержание фенологликозидов в них составило от 2,53 до 2,88% (Табл.4), что позволяет рекомендовать в качестве числового показателя содержание фенологликозидов в пересчете на арбутин не менее 2,5 %. Определение содержания арбутина в сборе проводили также йодометрическим методом, предлагаемым ГФ XI для листа брусники и толокнянки. Оно составило 1,41±0,09%. (табл.5). При этом предлагаемая нами методика оказалась менее трудоемкой и продолжительной и более точной.

Таблица 5

Метрологические характеристики методики количественного определения фенологликозидов в мочегонном сборе

Результаты количественного определения различных групп БАВ веществ, осуществленного по методикам ГФ XI, а также по заимствованным методикам, изложенным в доступной литературе, приведены в таблице 6.

Таблица 6

Количественное содержание некоторых групп БАВ в сборе

Группа БАВ f X ' Б 1(Р,0 Р,% ДХ

Экстрактивные в-ва, извл. 70% этанолом, % 4 26,04 0,6310 2,78 95 0,880 3,38

Дубильные (окисляемые) в-ва, % 9 6,79 0,0553 2,26 95 0,120 1,84

Эфирное масло, %ГФ 4 0,09 0,0004 2,78 95 0,001 1,11

Аскорбиновая кислота, % 4 0,10 0,0011 2,78 95 0,003 3,16

Органические кислоты,% 4 2,17 0,0216 2,78 95 0,060 2,77

Полисахариды, % 4 4,62 0,0616 2,78 95 0,171 3,71

Витамин Кь % 4 0,73 0,0127 2,78 95 0,035 4,82

Каротиноиды, мг% 4 3,27 0,0313 2,78 95 0,087 2,66

Хлорофилл, % 4 1,53 0,0151 2,78 95 0,042 2,74

Аминокислоты, мг% 4 86,64 1,2871 2,78 95 3,578 4,13

В сборе определено содержание 6 макро- (К, №, Ca, Mg, Fe, P) и 15 микроэлементов (Оц Zn, Pb, Ag, Ba, Sг, Mn, Ni, Ti, V, Cг, Zг, В, А1, Si). Содержание алюминия, железа, меди, никеля, свинца, хрома и цинка не превышает ПДК для пищевых продуктов.

На основании проведенных исследований по изучению числовых показателей, товароведческих характеристик, содержанию действующих веществ и стабильности этих показателей в течение двухгодичного срока хранения разработаны требования к качеству сбора, включенные в проект Фармакопейной статьи.

Получение и анализ жидкого экстракта мочегонного сбора

В результате проведенных предварительных исследований установлены оптимальный состав и режим экстрагирования, разработана технология получения жидкого экстракта мочегонного сбора 1:1 на 70% этаноле, по которой в лабораторных условиях из различных образцов сбора получено 5 образцов экстракта с идентичными органолептическими свойствами, которые в дальнейшем были использованы для стандартизации и изучения стабильности в процессе хранения. Согласно требованиям статьи «Экстракты» ГФ XI в жидком экстракте определены содержание действующих веществ, тяжелых металлов, содержание спирта или плотность и сухой остаток.

Сравнение содержания действующих веществ в водных извлечениях сбора и жидком экстракте проводили по четырем показателям, применяемым для нормирования качества сбора и жидкого экстракта (табл.7).

Таблица 7

Сравнительные показатели качества препаратов мочегонного сбора

Показатели* Объекты

Сбор Пастой Отвар Экстракт

Сумма фенологликозидов, % 2,63 0,25 0,25 2,59

Сумма флавоноидов, % 1,67 0,14 0,13 1,58

Сумма полифенольных соединений, % 6,77 0,61 0,62 6,24

Сухой остаток, % 26.15** 2,44 2,49 22,89

*- среднее пяти определений. **-экстрактивные вещества

Поскольку содержание действующих веществ сбора, его водных извлечений и жидкого экстракта имеют близкие значения, можно утверждать, что жидкий экстракт - перспективная лекарственная форма мочегонного сбора, которая может быть изготовлена на мелкосерийном производстве и служить адекватным заменителем нативной формы отпуска сбора - резанного фасованного сырья, использоваться для приготовления растворов, заменяющих настои в количестве, эквивалентном сырью.

Биолого-фармакологические исследования водного извлечения и жидкого экстракта мочегонного сбора

По результатам определения острой токсичности мочегонный сбор и

жидкий экстракт мочегонного сбора при введении крысам per os в максимально возможной дозе 20000мг/кг относится к относительно безвредным

веществам, или 6 классу токсичности, согласно классификации токсичности веществ КХ.Сидорова (К.К.Сидоров, 1973)

При изучении хронической токсичности мочегонного сбора и жидкого экстракта в течение двухнедельного срока не было зарегистрировано летальных исходов животных опытных и контрольных групп, состояние и поведение их было одинаковым. Клинических проявлений интоксикации отмечено не было. Исследования микропрепаратов сердца, почек, легких, печени, селезенки, надпочечников забитых животных не выявили каких-либо изменений по сравнению с микропрепаратами органов интактных животных. Проведенные исследования позволили сделать вывод об отсутствии у изучаемых препаратов хронической токсичности при потреблении экспериментальными животными.

Учитывая, что сбор и экстракт предлагаются для перорального приема в виде водного извлечения или раствора, представляло интерес изучение диуретического действия препаратов Диуретический эффект при приеме лабораторными животными per os водных настоев сбора и растворов жидкого экстракта выражен сильнее, чем у препарата сравнения, зависит от дозы действующих веществ. Жидкий экстракт в дозе, сравнимой с водным извлечением из сбора несколько сильнее повышает диурез (рис.1).

офщинальный настой 15 200 настой 10-200 р-р экстракта р-р экстракта сбор 15 200 10 200

Рис. 1. Влияние мочегонного сбора и жидкого экстракта на диурез при пероральном приеме.

Исследуемые препараты проявляют седативную активность, выражающуюся в уменьшении длительности судорожного периода и удлинении латентного в коразоловом тесте (рис.2).

16 ги

-12

1 8 $ «

г 4

г г

0,97

11,03

10,9В

1,95

1,2

гЬ пЬ

1Я

■латаный период □судорога

настои с

раствор экстракта

контроль настои пустырника

Рис. 2. Оценка седативного действия мочегонного сбора и жидкого экстракта в коразоловом тесте.

Применение мочегонного сбора и жидкого экстракта статистически достоверно (р<О,ОЗ) уменьшало развитее острого асептического воспаления (на 5358%) подобно диклофенаку (на 64%), хотя и не превосходило его по выраженности (рис.3).

Рис.3. Влияние мочегонного сбора и жидкого экстракта на экссудативную фазу воспаления (объем острого формалинового отека).

Применение мочегонного сбора и жидкого экстракта статистически достоверно (р<0,04) уменьшало развитие анафилактоидного воспаления на 50,1% для настоя сбора и на 73,2% для экстракта (рис. 4).

Рис. 4. Влияние мочегонного сбора и жидкого экстракта на развитие анафилактоидного воспаления.

По результатам определения противовоспалительной активности мочегонного сбора и жидкого экстракта на его основе установлено, что противовоспалительное действие препаратов обусловлено влиянием на различные механизмы развития воспаления и сравнимо по выраженности с синтетическими нестероидными противовоспалительными и противогистамин-ными препаратами.

Введенное различными способами водное извлечение сбора мочегонного статистически достоверно (р<0,05) стимулировало показатели ГИО в опытных группах(4 и 5) по сравнению с контрольными (1-3) (табл.8).

Таблица 8

Влияние настоя мочегонного сбора на развитие гуморального иммунного

ответа к ЭБ

№ Условия опыта Кол-во клеток на орган

АОК-ЮЗ РОК-103

1. Иммунизация ЭБ 31,1±3,0 47,2±6,7

2 Иммунизация ЭБ + вода внутрибрюшинно 27,8±2,5 50.5±5,0

3. Иммунизация ЭБ + вода per os 29,7±2,4 40,5±3,2

4. Иммунизация ЭБ + настой внутрибрюшинно 75,0±7,7 112,1±11,0

5. Иммунизация ЭБ + настой per os 58,4±5,6 92,1 ±9,3

Хотя количество АОК и РОК в опытных группах (4 и 5) статистически не различались между собой (р>0,005), их абсолютное количество при внутри-брюшинном введении было несколько выше, чем при пероральном.

Установлено, что используемая доза сбора мочегонного, вводимая per os до инъекции сенсибилизирующей дозы антигена достоверно (pi<0,05) стимулирует развитие ГЗТ, увеличивая РМ в 3,1 раза и в 1,9 раза РК, подопытной группы животных по сравнению с контрольной. Применение водной вытяжки после сенсибилизации организма оказывает также достоверно (pi<0,05, рг<0,05) стимулирующее действие на показатели ГЗТ, по отношению к контролю, однако несколько слабее, чем в группе животных, получивших препарат до введения сенсибилизирующей дозы антигена. Так РМ в 3-й группе крыс в условиях этого опыта в 2,3 раза, а РК в 1,7 раза превышает контроль (табл.9).

Таблица 9

Влияние настоя мочегонного сбора на развитие ГЗТ

Таким образом, установлено, что сбор мочегонный оказывает стимулирующее влияние на развитие гуморального иммунного ответа и клеточное звено иммунитета, что экспериментально обосновывает перспективность дальнейшего экспериментального исследования и клинической его апробации при различных формах патологии, патогенез и саногенез которых обусловлен состоянием иммунологической системы организма.

Опыт клинического применения подтвердил экспериментальные данные и показал что, коррекционная терапия ХП комплексом витаминов и полиокси-дония с мочегонным сбором нормализовало большинство показателей иммунного статуса пациентов, снизило значение таких показателей, как боль, дизурия, сократило сроки лечения на 7±1,3 дня и количество рецидивов на 15%, клинический исход расценивался как легкий.

выводы

1. Разработан состав нового фитопрепарата - мочегонного сбора, включающего 5 видов лекарственного растительного сырья, разрешенного к медицинскому применению: лист брусники, лист крапивы, траву пустырника, траву тысячелистника и почки березы в равном количестве.

2. Изучен качественный состав биологически активных веществ мочегонного сбора, его водных извлечений и жидкого экстракта, в которых установлено присутствие веществ первичного обмена: аминокислот и полисахаридов, и веществ вторичного обмена: флавоноидов, дубильных веществ, простых фенолов, органических кислот, эфирных масел, сесквитерпеновых лактонов и каротиноидов, а также изучен элементный состав сбора.

3. Разработаны спектрофотометрические методики определения в мочегонном сборе флавоноидов, фенологликозидов и дубильных веществ.

4. Установлено количественное содержания биологически активных веществ в мочегонном сборе: полифенольных соединений 6,79+0,12%, суммы флаво-ноидов 1,69+0,027%, дубильных веществ % 4,26+0,16%, суммы фенологликозидов 2,65+0,048%, эфирного масла 0,09+0,001%, полисахаридов 4,62+0,17%, аминокислот 0,87+0,01%, органических кислот 2,17+0,06%, аскорбиновой кислоты 0,1+0,003%, витамина Kt 0,73+0,035%, суммы каро-тиноидов 3,27+0,087%, суммы хлорофиллов 1,59%+0,033%, экстрактивных веществ 26,04+0,88%.

5. Разработана технологическая схема получения жидкого экстракта сбора 1:1 на 70% этаноле, разработан метод стандартизации экстракта по основным группам БАВ, изучена его стабильность в процессе хранения в течение полутора лет, общая и специфическая фармакологическая активность, что дало возможность рекомендовать экстракт как заменитель сбора для использования в виде растворов.

6. Определено, что мочегонный сбор и экстракт относятся к 6 классу токсичности или группе относительно безвредных веществ; обладают выраженным мочегонным и противовоспалительным, легким седативным действием; обладают противомикробным действием в отношении тест-микроорганизмов, используемых для определения антимикробного действия: Proteus vulgar is АТСС 4636; Pseudomonas aeruginosa ATCC 1313; Staphylococcus aureus 209-

p; Bacillus subtilis ATCC 6633; Escherichia coli ATCC 25922; Candida albicans NCTC 2625.

7. Установлено, что мочегонный сбор оказывает стимулирующее влияние на развитие гуморального иммунного ответа и клеточное звено иммунитета в эксперименте, что подтверждено опытом клинического применения сбора в терапии хронического простатита, показавшим, в большей степени по сравнению с традиционным лечением, снижение частоты послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений и сокращение сроков пребывания больных в стационаре при применении сбора в сочетании с витаминами и полиоксидонием.

8. Создан проект фармакопейной статьи, в который на основании изучения макро- и микродиагностических признаков, стабильности сбора в процессе двухгодичного хранения включены характеристики подлинности и показатели качества сбора.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Перспективы использования сырья крапивы двудомной в составе мочегонных сборов //Актуальные вопросы дерматовенерологии: сб.науч. тр. -Вып.З. - Курск, 2000. - С.42-43. (Соавт.: Яцюк ВЯ.,Чалый ГА)

2. Фитопрепарат с диуретическим и противовоспалительным действием // Новые фармакологические средства в ветеринарии: материалы 12-й междунар. межвуз. научн.-практ. конф. - СПб., 2000. - С. 123-124. (Совм.: Чалый ГА, Яцюк В.Я., Попова Л.А.)

3. Аминокислотный состав сбора лекарственного мочегонного и противовоспалительного действия// Человек и его здоровье: сб. науч. работ Петровской Акад. наук и искусств, вып. 3. - Курск, 2000. - С.326-328. (Соавт.: Яцюк В.Я.,Чалый Г.А.)

4. Полисахариды сбора мочегонного и его компонентов// Материалы VIII Рос-сийск. нац. конгр. «Человек и лекарство». - М., 2001.- С.691 (Соавт.: ГА Чалый, Яцюк В.Я, Сурнина Н.Т., Чалая Л.П.)

5. Аминокислотный состав подземных органов крапивы двудомной //Достижения, проблемы, перспективы фармацевтической науки и практики: материалы науч. конф., посвящ. 35-летию фармацевтичю ф-та КГМУ. -Курск: КГМУ, 2001. - С.206-207. (Соавт.: Яцюк В Л., Чалый ГА, Чертова О.В.)

6. Исследования общетоксического действия диуретического фитопрепарата // Новые фармакологические средства в ветеринарии: материалы 14-й междунар. межвуз. науч.-практ. конф. - СПб., 2002. - С.129-130. (Соавт.: Попова Л.А., Чалый ГА, Яцюк В.Я., Швец Г.И., Чувашенко Т.Н.)

7. Изучение противовоспалительной активности лекарственного сбора // Материалы 67-й межвуз. науч. конф. студентов и молодых ученых. - 4.2. -Курск: КГМУ, 2002. - С. 119-120. (Совм.: Конарева Е.Г, Харичкова Е.В.)

8. Изучение жидкого экстракта из лекарственного сбора мочегонного и противовоспалительного действия/ /Тр. 67-й науч. сес. КГМУ и отд-ния медико-биол. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Ч. 2. - Курск: КГМУ, 2002. - С. 83-84. (Соавт.: Яцюк В.Я.,Чалый ГА)

9. Определение подлинности пятикомпонснтного растительного сбора по микродиагностическим признакам// Тр. 68-й науч. сес. КГМУ и отд-ния медико-биол. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Ч. 2. - Курск: КГМУ, 2003. - С. 218-219. (Соавт.: Яцюк В.Я., Чалый ГА)

10..Изучение различных видов фармакологической активности лекарственного сбора и жидкого экстракта на его основе// Наука i сошалш проблеми сусшльства: медицина, фармацш, бютехнолопя: тез. докл. III междунар. на-уч.-практ. конф., ч. I. -Харьков: Изд-во НФаУ, 2003. - С.317. (Совм.: Чалый ГА, Яцюк В.Я.)

11.Исследования по расширению медицинского использования лекарственного растительного сырья крапивы.// Современные вопросы фармакогнозии. Межвуз. сб. науч. тр. с междунар. участием, посвящ. 20-летию кафедры фармакогнозии ЯГМА.- Ярославль: ЯГТУ, 2004. - С. 112-119. (Соавт.: В.Я.Яцюк, ГА.Чалый, О.В.Сошникова, Н.Т.Сурнина)

12.Перспективы использования растений рода тысячелистник// Современные вопросы фармакогнозии: межвуз. сб. науч. тр. с междунар. участием, по-свящ. 20-летию каф. фармакогнозии ЯГМА.- Ярославль, 2004. - С. 337-345 (Совм.: В.Я.Яцюк, ГАЧалый, Н.Т.Сурнина)

Б.Разработка методики стандартизации мочегонного растительного сбора по содержанию фенологликозидов.// Тр. 69-й науч. сес. КГМУ и отд-ния ме-дико-биол. наук Центр.-Чернозем. Научи, центра РАМН. - Ч. 2. - Курск: КГМУ, 2004. - С. 261-262 (Соавт.: Чалый ГА, Яцюк В.Я.)

Н.Разработка методики стандартизации лекарственного растительного сбора мочегонного действия по количеству дубильных веществ.// Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигор. гос. фарм. акад.. - Вып. 59. - Пятигорск. - С. 162-163 (Соавт.: В.Я. Яцюк).

15.Исследования по разработке лекарственного растительного сбора мочегонного, противовоспалительного и иммуномодулирующего действия //Рациональное назначение лекарств: мат. Рос. науч.-практ. конф. 19-12 марта 2004 года. - Пермь, 2004 -С.295-296. (Соавт.: Чалый ГА, Яцюк В.Я.)

16.С2 2238750 RU 7 А 61 К 35/78, А 61 Р 13/00. Урологический сбор «Фито-Про» для комплексного лечения простатита и способ его лечения // Изобретения (Заявки и патенты). - 2004. - № 30. (Соавт.: Шатохин М.Н. (RU), Шестаков С.Г. (RU), Конопля А.И. (RU), Чалый TA(RU), Яцюк В.Я. (RU) (Курский государственный медицинский ун-т (RU)).

Сдано в набор 25.11 2004 г. Подписано в печать 25.11.2004 г. Формат 30x427%. Бумага офсетная Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз Заказ № 159.

Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул К. Маркса, 3.

Отпечатано в множительном центре ВНИИЗиЗПЭ 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70-6

12 5 04 7

Оглавление диссертации Елецкая, Ольга Анатольевна :: 2004 :: Рязань

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ДИУРЕТИЧЕСКИЕ И ИММУНОТРОПНЫЕ СРЕДСТВА В ТЕРАПИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ МОЧЕВЫВОДЯЩЕЙ СИСТЕМЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

ГЛАВА 2. СБОРЫ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТИТЕЛЬНЫЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ РАСТЕНИЙ, ВХОДЯЩИХ В ИХ

СОСТАВ (ОБЗОРЛИТЕРАТУРЫ)

2.1. Стратегия создания лекарственных растительных сборов.

2.2 Характеристика лекарственных растений.

2.2.1 .Брусника - Vaccinium vitis-idaea L. (Rhodoccocum vitis-idaea (L.)

Avror.).

2.2.2. Тысячелистник обыкновенный —Achillea millefolium L.

2.2.3. Пустырник пятилопастный - Leonnrus quinquelobatus Gilib. и пустырник сердечный - Leonurus cardiaca L.

2.2.4. Крапива двудомная - Urtica dioica L.

2.2.5. Береза повислая (или бородавчатая) — Betula pendnla Roth.

В. verrucosa Ehrh.).

2.3. Сведения об иммунологических свойствах основных групп биологически активных веществ растений.

ГЛАВА 3. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1.Характеристика объектов исследования.

3.2.Методы исследования.

3.2.1.Определение подлинности сырья и числовых показателей.

3.2.2. Фитохимические методы изучения сбора.

3.2.3. Биологические методы исследования.

3.2.3.1. Модель острого формалинового воспаления.

3.2.3.2. Модель анафилактоидной реакции

3.2.3.3. Оценка гуморального иммунного ответа (ГИО) на тимусзависимый антиген. Оценка клеточного иммунного ответа (ГЗТ).

3.2.4. Методы микробиологических и радиологических исследований.

3.2.5. Клинические методы.

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ХАРАКТЕРИСТИК ПОДЛИННОСТИ СБОРА.

4.1. Разработка состава сбора.

4.2. Исследование внешних признаков сбора.

4.3. Определение микроскопических характеристик отдельных компонентов сбора.

4.4. Качественный анализ сбора.

4.4.1. Качественные реакции.

4.4.2. Хроматографический анализ мочегонного сбора.

4.4.2.1. Определение фенольных соединений.

4.4.2.2. Определение органических кислот.

4.4.2.2.1.Определение аскорбиновой кислоты.

4.4.2.3. Определение каротиноидов.

4.4.2.4. Определение сесквитерпеновых лактонов.

4.4.2.5. Определение аминокислотного состава.

4.4.2.3.Определение качественного состава полисахаридного комплекса, выделенного из сбора.

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА СБОРА И НОРМАТИВНОЙ ДОКУМЕНТАЦИИ НА СБОР.

5.1. Определение влажности.

5.2. Определение содержания золы общей и золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной кислоты.

5.3. Определение содержания примесей и измельченности.

5.4. Определение коэффициента водопоглощения сбора.

5.5. Определение содержания действующих веществ.

5.5.1.Определение содержания экстрактивных веществ.

5.5.2. Определение содержания дубильных (окисляемых) веществ.

5.5.2.1. Спектрофотометрическое определение содержания дубильных веществ.

5.5.3.Определение содержания суммы флавоноидов.

5.5.4. Определение содержания арбутина.

5.5.4.1. Обсуждение возможности и создание экспресс-методики анализа двух групп БАВ.

5.5.5. Определение содержания эфирного масла.

5.5.6. Определение содержания полисахаридов.

5.5.7. Определение содержания аскорбиновой кислоты и органических кислот в мочегонном сборе.

5.5.8. Определение содержания аминокислот.

5.5.9. Определение содержания витамина Kj.

5.5.10. Определение содержания пигментов.

5.5.11. Анализ микроэлементного состава сбора.

5.6. Разработка нормативной документации на сбор мочегонный.

5.7. Определение сроков хранения мочегонного сбора.

ГЛАВА 6. ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ ЖИДКОГО ЭКСТРАКТА ИЗ МОЧЕГОННОГО СБОРА.

6.1. Получение жидкого экстракта мочегонного сбора.

6.1.1. Изучение технологических свойств сбора.

6.1.2. Выбор способа экстрагирования.

6.1.3. Технология жидкого экстракта мочегонного сбора 1:1.

6.2. Анализ жидкого экстракта.

6.2.1. Сравнительное изучение качественного состава жидкого экстракта мочегонного сбора и настоя мочегонного сбора.

6.2.2. Стандартизация жидкого экстракта.

6.2.2.1. Определение содержания тяжелых металлов, спирта, плотности и сухого остатка.

6.2.2.2. Определение содержания действующих веществ.

6.2.2.2.1. Определение содержания суммы полифенольных (окисляемых) соединений.

6.2.2.2.2. Определение содержания суммы флавоноидов.

6.2.2.2.3. Определение содержания фенологликозидов.

6.2.2.3. Сравнительный анализ количественного содержания основных групп БАВ в экстракте и водных извлечениях из сбора.

6.2.2.4 Определение стабильности экстракта мочегонного сбора

ГЛАВА 7. БИОЛОГО-ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДНОГО ИЗВЛЕЧЕНИЯ И ЖИДКОГО ЭКСТРАКТА МОЧЕГОННОГО СБОРА.

7.1. Изучение острой и хронической токсичности сбора и жидкого экстракта.

7.2. Изучение специфической фармакологической активности.

7.2.1. Изучение мочегонного действия сбора и жидкого экстракта.

7.2.2. Изучение антимикробной активности мочегонного сбора и жидкого экстракта.

7.2.3. Изучение противовоспалительной активности.

7.2.4. Изучение седативного действия.

7.2.5. Изучение иммуномодулирующих свойств мочегонного сбора.

7.3. Клинический опыт фармакологической коррекция нарушений иммунологического статуса у больных хроническим простатитом (ХП).

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Елецкая, Ольга Анатольевна, автореферат

Актуальность темы. В настоящее время в медицине при лечении различных заболеваний сердечно-сосудистой системы, суставов, почек и мочевыводящих путей широко применяются мочегонные средства. Выбор мочегонного средства зависит от тяжести состояния больного, эффективности препарата, чувствительности больного к диуретику. При совместном применении диуретиков с препаратами других групп возникает опасность развития нежелательных реакций, особенно общих для многих синтетических диуретиков: гипокалиемии, гиперкалиемии, гиперурикемии, а также усиливаются нефро- и ототоксичность антибактериальных и общая токсичность нестероидных противовоспалительных средств [49]. Кроме того, характерной современной социальной и медицинской проблемами является хронизация различных форм патологии, причиной которой ВОЗ считает развитие у больных вторичной иммунологической недостаточности, ведущей к снижению сопротивляемости организма к инфекционным и другим провоцирующим болезнь агентам [20]. Создание диуретических препаратов, которые не только направлены на выведение из организма больного натрия и отечной жидкости с мочой, но при этом оказывают противовоспалительное, антибактериальное, протективное и иммунокоррегирующее действие, актуально. Препараты, отвечающие таким требованиям, могут быть созданы на основе лекарственного растительного сырья. Общепризнанным преимуществом лекарственных растений и суммарных препаратов из них является малая токсичность, возможность длительного применения без побочных явлений, широкий спектр фармакологического действия. Целесообразным является применение сборов лекарственных растений, обеспечивающих комплексное воздействие за счет сочетания лечебного действия различных компонентов.

В перечне диуретических препаратов, разрешенных к применению в РФ, доля сборов незначительна — менее 2%. В состав отечественных диуретических сборов включены виды лекарственного растительного сырья, потребность в которых многократно превышает объем заготовки, и районы промышленной заготовки которых находятся за пределами России.

Поиск и разработка новых многокомпонентных растительных композиций из отечественного сырья и внедрение их в медицину является актуальной задачей. Не менее актуальным является также создание на основе сборов суммарных препаратов, сохраняющих все преимущества многокомпонентных лекарственных средств: синергизм ингредиентов, отсутствие токсичности и побочных эффектов, — но при этом имеющих преимущества при дозировании и хранении.

Цель работы: разработка и стандартизация многокомпонентного сбора, обладающего мочегонным и противовоспалительным действием для лечения хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы, сопровождающихся развитием дефицита ряда параметров иммунитета; разработка технологии и норм качества жидкого экстракта из предлагаемого сбора.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи: разработка с помощью фармакологического скрининга рациональной прописи сбора; изучение макро- и микродиагоностических признаков сбора, позволяющих идентифицировать его компоненты, его качественного состава, разработка методик и проведение количественной оценки содержания основных групп БАВ в сборе; определение товароведческих показателей сбора, изучение его стабильности в процессе хранения; разработка технологической схемы получения жидкого экстракта сбора, изучение его качественного состава и стандартизация по основным группам БАВ, изучение его стабильности в процессе хранения; изучение общей и специфической фармакологической активности сбора и жидкого экстракта сбора; разработка проекта нормативной документации на сбор.

В ходе химического анализа изучения сбора, выявлено наличие в сборе веществ первичного обмена: аминокислот и полисахаридов, а также установлен их качественный состав; и веществ вторичного обмена: флавоноидов, дубильных веществ, простых фенолов, органических кислот, эфирных масел, сесквитерпеновых лактонов и каротиноидов; определено содержание макро- и микроэлементов.

Определены факторы оптимизации процесса экстракции основных действующих веществ (природа экстрагента, измельченность сырья, температурный и временной режимы экстракции, кратность экстракции и соотношение сырья и экстрагента). На основании реакции комплексообразования флавоноидов с алюминия хлоридом, галловой кислоты с железо—тартратным реактивом в фосфатном буфере разработаны методики дифференциального спектрометрического определения содержания флавоноидов и дубильных веществ сбора, и также методика спектрофотометрического определения фенологликозидов.

По результатам изучения стабильности при хранении предложены показатели нормирования качества сбора.

На основании изучения технологических параметров сырья определены условия экстракции и разработан способ получения жидкого экстракта мочегонного сбора, методики количественного определения в нем суммы полифенольных соединений, флавоноидов и фенологликозидов. подтверждена стабильность экстракта при хранении.

Изучены общая и специфическая фармакологическая активность водных извлечений сбора и жидкого экстракта при хранении в течение полутора лет.

Практическая значимость. Предложен новый фитопрепарат, представляющий собой пятикомпонентный сбор, состоящий из растений, разрешенных к медицинскому применению на территории РФ, сырьевые запасы которых достаточны.

Разработаны методика пробоподготовки и проведения микроскопического анализа многокомпонентного сбора, описаны внешние и микродиагностические признаки, характеристики подлинности и методики определения действующих веществ в многокомпонентном сборе.

На основании проведенных исследований разработан проект фармакопейной статьи на мочегонный сбор.

Обоснована возможность получения жидкого экстракта на основе мочегонного сбора.

Результаты внедрения.

Разработанные спектрофотометрические методики определения дубильных веществ, суммы флавоноидов и суммы фенологликозидов в сборе апробированы в МУЗ «Центр контроля качества и сертификации лекарственных средств» г. Курск (акты об апробации от 15.01.2004, 20.01.2004, 01.04.2004) и рекомендованы для включения в ФС.

Результаты исследований по определению подлинности многокомпонентного сбора с использованием микроскопического анализа внедрены в учебные процессы кафедр фармакогнозии с курсом ботаники

Рязанского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова (акт № 11, от 14.04.04) и Северо-Осетинского государственного медицинского университета им. К.Л.Хетагурова (акт № 29, от 03.06.04).

Спектрофотометрические методики стандартизации сбора по содержанию фенологликозидов и флавоноидов внедрены в учебные процессы кафедр фармакогнозии с курсом ботаники Рязанского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова (акты № 12, 13 от 14.04.04) и Северо-Осетинского государственного медицинского университета им. К.Л.Хетагурова (акт № 28, 30 от 03.06.04).

Состав, способ приготовления и применения мочегонного сбора внедрены в практику урологических отделений ГВКГ им. академика Н.Н.Бурденко (акт № 4 от 22.08.04) и Курской областной клинической больницы (акт от 12.10.2004).

Показатели качества мочегонного сбора включены в проект фармакопейной статьи (акт №1 от 23.10.04 КГМУ).

На защиту выносятся следующие положения, характеризующиеся научной новизной: разработка рецептуры мочегонного сбора; результаты по разработке характеристик подлинности и показателей качества мочегонного сбора; методики и результаты количественного определения основных групп биологически активных веществ в сборе; результаты исследований по получению и анализу жидкого экстракта из мочегонного сбора; результаты определения общей и специфической фармакологической активности препаратов сбора.

Апробация работы. Основные результаты исследований доложены на 67, 68, 69-й научных конференциях Курского медицинского университета (2002-2004), VIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2001), 12-й и 14-й международных межвузовских научно-практических конференциях «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2000, 2002 гг), III международной научно-практической конференции «Наука i сощалш проблеми суспшьства: медицина, фармащя, бютехнолопя» (Харьков, 2003), Российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь, 2004), совместном заседании кафедр органической химии, фармацевтической химии, аналитической химии, фармакогнозии с курсом ботаники, фармацевтической технологии, коллоидной и физической химии, экономики и управления здравоохранением с курсом медицинского товароведения, биохимии Курского государственного медицинского университета (2004).

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Курского Государственного медицинского университета по проблеме «Фармация». Номер государственной регистрации 01.200.2008426.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 206 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (глава 1—2), собственных исследований (главы 3—7), списка литературы и приложений. В тексте содержится 54 таблицы, 8 рисунков. Приложение содержит таблицы, рисунки, проект фармакопейной статьи на сбор, акты внедрения результатов работы в практику. Список литературы состоит из 396 источников, из них 56 на иностранном языке.

Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора мочегонного действия"

выводы

1. Разработан состав нового фитопрепарата — мочегонного сбора, включающего 5 видов лекарственного растительного сырья, разрешенного к медицинскому применению: лист брусники, лист крапивы, траву пустырника, траву тысячелистника и почки березы в равном количестве.

4. Установлено количественное содержания биологически активных веществ в мочегонном сборе: полифенольных соединений 6,79±0,12%, суммы флавоноидов 1,69±0,027%, дубильных веществ % 4,26±0,16%, суммы фенологликозидов 2,65±0,048%, эфирного масла 0,09±0,001%, полисахаридов 4,62±0,17%, аминокислот 0,87±0,01%, органических кислот 2,17±0,06%, аскорбиновой кислоты 0,1±0,003%, витамина Ki 0,'73±0,035%, суммы каротиноидов 3,27±0,087%, суммы хлорофиллов 1,59%±0,033%, экстрактивных веществ 26,04±0,88%.

5. Разработан способ получения жидкого экстракта сбора 1:1 на 70% этаноле, разработан метод стандартизации экстракта по основным группам БАВ, изучена его стабильность в процессе хранения в течение полутора лет, общая и специфическая фармакологическая активность, что дало возможность рекомендовать экстракт как заменитель сбора для использования в виде растворов.

6. Определено, что мочегонный сбор и экстракт относятся к 6 классу токсичности или группе относительно безвредных веществ; обладают выраженным мочегонным и противовоспалительным, легким седативным действием; обладают противомикробиым действием в отношении тест-микроорганизмов, используемых для определения антимикробного действия: Proteus vulgaris АТСС 4636; Pseudomonas aeruginosa АТСС 1313; Staphylococcus aureus 209-p; Bacillus subtilis ATCC 6633; Escherichia coli ATCC 25922; Candida albicans NCTC 2625.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2004 года, Елецкая, Ольга Анатольевна

1. Азарян, Р.А. Способ расчета расходных и загрузочных норм на растительное сырье и экстрагент при производстве суммарных экстракционных препаратов текст. / Р.А. Азарян, И.А. Муравьев // Фармация.- 1985.- №1.- С.38-41.

2. Акопов, И.З. Кровоостанавливающие растения Текст. / И.З. Акопов; Ташкент: Медицина, 1981- 325 с.

3. Акопов, И.З. Важнейшие отечественные растения и их применение Текст. / И.З. Акопов;— Ташкент: Медицина, 1986 667с.

4. Алехин, Е.К. Стимуляторы иммунитета Текст. / Е.К. Алехин, Д.Н. Лазарева- М.: Медицина. 1985 - 256 с.

5. Ангархаева, Т.Г. Растения тибетской медицины используемые как желчегонные средства Текст./ Т.Г. Ангархаева // Тез. докл. регион, конф. по фармации и фармакологии. Пятигорск, 1991. - С.6.

6. А.с. 2129006 РФ, МКИ3 6А 61 К 35/78. Сбор "Седоспазмил" для лечения хронических колитовТекст./ В.Г. Кукес, Т.Л.Киселева, А.В. Чаузова и др. 7с.

7. А.с. 2129007 РФ, МКИ3 6А 61 К 35/78. Сбор "Сираток" для лечения хронических колитов Текст./ В.Г. Кукес, Т.Л. Киселева, Чаузова А.В. и др. 10 с.

8. Асеева, Т.А. Пищевые растения в тибетской медицине Текст./ Т.А. Асеева, Ц.А Найдакова- Новосибирск: Наука. Сиб. отд- ние., 1991.- 129 с.

9. Асеева, Т.А., Лекарственные растения тибетской медицины Текст. / Т.А. Асеева, К.Ф. Блинова, Г.П. Яковлев— Новосибирск: Наука. Сиб. отд- ние, 1985.- 159 с.

10. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР Текст.— М.:ГУГК, 1983.- 340с

11. Атлас спектральных линий для кварцевого спектрографа Текст./ С.А. Калинин, А.А. Явнель, А.И. Алексеева и др. М., 1959, - 53с.

12. Афанасьев, В.А. Иммуномодулирующее действие фосфолипидов и растительных гетерополисахаридов при холодовом стрессе Текст.: Автореф. дис.д-ра. мед. наук: (14.00.36) / В.А. Афанасьев; КГМУ. -Москва, 1999 г.- 20 с.

13. Бакуридзе, А.Д. Создание и стандартизация фитоэкстракционных препаратов иммуномодулирующего действия и фитовалеологичеких средств Текст.: автореф. дис. .д— ра фарм. наук.(15.00.02) / А.Д. Бакуридзе. М.,1994. 51с.

14. Балвочюте, Я.П. Эфирные масла почек березы в условиях Литовской ССР Текст. / Я.П. Балвочюте, Ю.А.Акимов,

15. A.В.Моркунас.// Актуальные вопросы изучения и использования эфиромасличных растений и эфирных масел. Симферополь, 1980,- С.222.

16. Блуз, К.И. Фитотерапия гриппа и острых распираторных заболеваний у детей Текст./ К.И. Блуз // Тез.докл. третьей Украин. конф. по мед. Ботанике. Киев- 1992 — 4.1— С.53- 55.

17. Бобкова, Н.В. Микроскопический анализ порошка листьев крапивы различных способов измельчения и идентификация его в комплексных лекарственных препаратах Текст./ Н.В. Бобкова,

18. B.А. Ермакова, И.А. Самылина // Фармацевтическая наука и практика в новых социально—экономических условиях. — М.; — 1997,- Ч.2.- С.231-237.

19. Бодруг, В.М. Некоторые биологические особенности, содержание и качественный состав эфирного масла тысячелистника паннонского Текст./ В.М. Бодруг // Изв. AM МССР. Сер. биол. и хим. наук. -1977.- вып.6.— С.75-77

20. Борисов, И.А. Пиелонефрит и его лечение на современном этапе Текст./ И.А. Борисов // Терапевтический архив- 1997- №81. C.49- 54.

21. Боряев, В.Е. Товароведение дикорастущих плодов, ягод и лекарственно- технического сырья Текст.: учебник для вузов./ В.Е. Боряев. М.: Экономика, 1991 — 207с.

22. Ботанико- фармакогностический словарь Текст.: справ, пособие/ К.Ф. Блинова, Н.А.Борисова, Г.Б. Гортинский и др М.: Высш.шк., 1990.-272с.

23. Брезгин, Н.Н. Лекарственные растения центральной части России Текст./Н.Н. Брезгин. М.: Слог, 1993.- 320с.

24. Варгин, В.В. Вторичные иммунодефициты, возникающие в ходе инфекции Текст./ В.В. Варгин, Б.Ф. Семенов. // Иммунология инфекционного процесса: М., 1993,— С. 178-192.

25. Васильев, И.Б. Разработка технологии и норм качества жидкого и сухого экстрактов листьев брусники Текст.: автореф. дис. .к.ф.наук (15.00.01). / И.Б. Васильев; Пятигорская фарм. академия. — Пятигорск. 1997.-21 с.

26. Венгеровский, А.И. Влияние полисахаридов маахии амурской на антитоксическую функцию печени Текст./ А.И.Венгеровский, И.М. Седых, А.С. Саратиков // Экспериментальная и клиническая фармакология- 1993.- №5.- С.47-49.

27. Вплив препарату «простафгг» на показники сперматогенезу щур1в Текст./ 1.П. Дзюба, Н.С.Нжтн, Пар'яновскька и др.// Актуальш питания фармацевтичноТ науки i освгги: зб1рник наукових статей. — Запорожье.:изд. ЗДМУ, 2004. вып. XII., - С. 151-155.

28. Выделение и анализ природных биологически активных веществ Текст. / Е.А.Краснов, Т.П. Березовская, Л.А. Демиденко и др., -Томск, 1987.-184 с.

29. Галютеева, Г.И. Влияние арбутинсодержащих растений на мочеотделение у крыс Текст./ Г.И. Галютеева // Лекарственные растения Алтайского края. Томск, 1986.- С.31- 36.

30. Галютеева, Г.И. Диуретические свойства арбутинсодержащих растений Текст./ Г.И. Галютеева // Регуляция функций почек и водно- солевого обмена. — Барнаул, 1987.— С.52— 56.

31. Гаммерман, А.Ф., Дикорастущие лекарственные растения СССР Текст. / А.Ф. Гаммерман, И.И. Гром. М.: Медицина, 1976. - 268 с.

32. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ Текст. / В.В. Гацура,. М.: Медицина, 1974. - 143 с.

33. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений Текст. / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук. — Новосибирск: Наука, Сиб. Отд-ние, 1990.-333с.

34. Гепатопротекторные и иммунотропные лекарственные средства: состояние и перспективы фармацевтического рынка Текст.: монография / Егоров В.А., Мошкова JI.B., Куркин В.А., Петрухина И.К. Самара: СамГМУ, 2000.- 120с.

35. Глицирризиновая кислота и ее производные как новые иммуномодуляторы Текст. /Балтина JI.A, Рыжова С.А, Исмагилова

36. A.Ф. и др. // Тез. докл. IV Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство» — М.: РЦ «Фармединфо», 1997.- С.247.

37. Гончарова, Н.Е. Фитохимическое исследование листьев березы повислой, технологии лекарственных препаратов и их фармакологическая оценка Текст.: автореф. дис. .к.ф. наук.( 15.00.02) / Н.Е. Гончарова; ЛФТИ. Л., 1975.- 19 с.

38. Государственная фармакопея СССР: Вып .1. Общие методы анализа. / МЗ СССРТекст. -11-е изд., доп.- М.: Медицина, 1987.- 336с.

39. Государственная фармакопея СССР: Вып .2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье/ МЗ СССРТекст. — 11- е изд., доп.- М.: Медицина, 1989 400с.

40. Государственный реестр лекарственных средств Текст. — М., 2000. 2002 с.

41. Гребнева, Н.Ф. Разработка и стандартизация многокомпонентного растительного сбора для лечения легочных заболеваний Текст.: Автореф. дис. .к.ф. наук: (15.00.02)/ Н.Ф. Гребнева; СПбФТИ. -СПб., 1998 25с.

42. Грибель, Н.В. Противометастатический эффект подорожника, полыни, алоэ, почек березы, бефунгина Текст./ Н.В. Грибель// Актуал. пробл. фармакологии и поиска новых лекарственных препаратов. Томск, 1984,- Т.1.- С. 119-124.

43. Губанов, И.А. Дикорастущие полезные растения Текст./ И.А. Губанов, К.В. Киселева, B.C. Новиков. М.: Изд- во МГУ, 1987. -160с.

44. Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях Текст./ Е.В. Гублер, А.А. Генкин. Л.: Медицина, 1973.- 142 с.

45. Гуляев, В.Г. Гипоазотемическое и диуретическое действие леспефлана при острой почечной недостаточности Текст./

46. B.Г.Гуляев, Ю.Н.Иванов, С.Ф. Гуляева // Урология и нефрология. -1993.- №4.~ С. 32-34.

47. Гусель, В.А. Справочник педиатра по клинической фармакологииТекст./ В.А. Гусель, И.В. Маркова. Л.: Медицина, 1989.-320 с.

48. Гущин, И.С. О состоянии и перспективах развития антиаллергических лекарственных средств Текст./ И.С. Гущин, А.С. Сараф // Хим— фармацевтический журнал. — 1992. — №4. —1. C.4-20.

49. Дабадаева, Р.К. Коррекция иммуиомодулином нарушений иммунитета у женщин фертильного возраста, больных хроническим пиелонефритом Текст./ Р.К. Дабадаева, А.Г. Гадаев, И.А. Ибрагимов // Нефрология. 2000. - Т.4. - №3. - С.58- 61.

50. Данилова, Н.А. Исследования по созданию методик контроля качества и стандартизации сырья щавеля конского Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02) / Н.А. Данилова; Москва, НИИ фармации МЗРФ. Рязань, 2001. - 23 с.

51. Доклиническая токсикология лекарственных средств Текст./ Н.С. Никитин, И.П. Дзюба, Г.В. Оболенцева и др.// Технология и стандартизация лекарств. Сб. науч. трудов ГНЦЛС. — Харьков: НГ «РНРЕГ», 2000. Т.2. - С. 490-540.

52. Доржбал, Э. Фармакогностическое изучение антимикробного сбора и сухого экстракта Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02) / Э. Доржбал; ММА. М., 2001- 20 с.

53. Доржбал, Э. Качественное определение фенольных соединений антимикробного сбора и сухого экстракта Текст./ Э. Доржбал, Ермакова В.А. // Диагноз. Улан-Батор, 2000. - С.35- 37.

54. Дорогойченков, В.Н. Количественное определение восстанавливающих моносахаридов в водорастворимом полисахаридном комплексе из цветков липы сердцевидной Текст./ В.Н.Дорогойченков, В.Н. Чушенко // Фармация. — 1988- т.37, № 9.- С. 39-40.

55. Дранник, Т.Н. Иммунонефрология Текст./ Т.Н. Дранник. К.: Здоровь'я, 1989.- 184 с.

56. Дремова, Н.Б. Маркетинговые исследования лекарственных средств растительного происхождения Текст.: учебно-методическое пособие / Н.Б. Дремова, Т.Г. Афанасьева. — Воронеж: ВГУ, 2003. 74 с.

57. Дроговоз, С.М. Фармакологический анализ рынка иммуностимуляторов в Украине/ С.М.Дроговоз // Провизор. — 1999.- №6. С.50-52.

58. Елецкая, О. А. Поиск новых лекарственных препаратов мочегонного действия Текст./ О.А. Елецкая, В.Я. Яцюк //

59. Современные экологические проблемы провинции: Междунар. экологический форум. Курск, 1995 - С.91-92.

60. Ермакова, В.А. Фармакогностическое изучение и стандартизация новых лекарственных сборов Текст./ В.А Ермакова// Второй международный съезд «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов растительного происхождения». — СПб., 1998.- с.20-23.

61. Ермакова, В.А. Фармакогностическое изучение и стандартизация сборов, брикетов, растительных порошков Текст.: автореф. дис. .д- ра фарм. наук (15.00.02) / В.А Ермакова; ММА. М., 1999. -46 с.

62. Ермакова, В. А. Стандартизация лекарственного сбора для профилактики комплексного лечения алкоголизма Текст./

63. B.А.Ермакова, Е.В.Кривошеева, Н.В. Лобанчикова // Современные аспекты изучения лекарственных растений. М.,1995 — С.71—74.

64. Ермакова, В.А. Разработка и стандартизация антимикробного сбора Текст./ В.А.Ермакова, И.А. Самылина // Третий международный съезд «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов растительного происхождения». — СПб., 1999.— с. 115121.

65. Запесочная, Г.Г. О флавоноидах из Achillea cartilaginea Текст./ Г.Г. Запесочная, А.И. Баньковская // Химия природн. соединений. — 1976, вып. 6,- С.814- 816.

66. Зверев, Я.Ф. Диабетогонное действие диуретиков Текст./ Я.Ф. Зверев, В.М. Брюханов//Нефрология. 2000.— Т.4, №1. - С.17-27.

67. Зеликсон, Ю.И. История и тенденции развития технологии сборов Текст./ Ю.И. Зеликсон, Т.С. Кондратьева// Фармация. 2001, №2. - С.45-48.

68. Земсков, В.М. Принципы дифференцированной иммунокоррекции Текст. / В.М.Земсков, A.M. Земсков // Иммунология. — 1996. — №3.- С.4-8.

69. Ибатов, А.И. Растительный сбор в комплексном лечении больных алкоголизмом Текст.// Казанский мед. журнал. — 1997, №2. —1. C. 115- 116.

70. Ибрагимов, Д.Т. Антимикробное действие калины обыкновенной, тысячелистника обыкновенного и тысячелистника Биберштейна Текст. / Д.Т.Ибрагимов, Г.В. Казанская//Раст. ресурсы. 1981.— Т.26, № 2. - С. 108- 109.

71. Иванова, Л.Ф. Физиология почки и водно— солевого обмена: основные направления исследования в России Текст./ Л.Ф. Иванова// Успехи физиол.наук. -1995 Т.26, №3.— С. 3- 13.

72. Ивашин, Д.С. Инструкция по сбору и сушке травы пустырника сердечного Текст./ Д.С. Ивашин // Правила сбора и сушкилекарственных растений (Сборник инструкций).— М.: Медицина, 1985.- С. 211-214.

73. Ивашин, Д.С. Инструкция по сбору и сушке травы и цветков тысячелистника обыкновенного Текст.// Правила сбора и сушки лекарственных растений (Сборник инструкций).— М.: Медицина, 1985.- С.264— 268.

74. Ивашин, Д.С. Инструкция по сбору и сушке крапивы двудомной Текст. / Д.С. Ивашин, Г.К. Шретер // Правила сбора и сушки лекарственных растений (Сборник инструкций). — М.: Медицина, 1985.- С.128— 130.

75. Изучение иммуностимулирующей активности флавоноидов Текст./ Н.П. Максютина, А.П. Дуплищева, Г.Н. Синилова и др. // Фармац. журнал.- 1987.- №5.- С.67-69.

76. Иммунокоррегирующая активность сухого экстракта из черных (перезимовавших) листьев Bergeenia crassifolia (L.) Fritsch. Текст./ С.Д. Жамсаранова, Е.Г. Седунова, С.Н.Лебедева, С.М. Николаев // Растительные ресурсы. — 2001. т. 37. — вып. 4. - С.20-31.

77. Иммунокоррегирующее, антианемическое и адаптогенное действие полисахаридов из донника лекарственного Текст./ А.А. Подколзин, В.И. Донцов, И.А. Сычев и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины— 1996 — № 6— С.661-663.

78. Иммуномодулирующая и противоопухолевая активность полисахаридов растительного происхождения Текст./ А.В. Сергеев, Е.С.Ревазова, С.И. Денисова и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1985. -№ 12 — С. 741- 743.

79. Иммунные нарушения при врожденном гидронефрозе, осложненном обструктивным пиелонефритом Текст. /Иллек Я.Ю., Зайцева М.П., Разин М.П. и др. // Урология. 2000. №2. - С.42-45.

80. Иммуномодуляторы растительного происхождения Текст. /Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш., Писарев В.М. и др. //Хим.— фармац. журнал. 1993. - № 8 - С. 43- 47.

81. Ионушайте, Ю. Динамика витамина Е в почках, листьях и соцветиях березы (Betula verrucosa Ehrh.) Текст. / Ю.Ионушайте, И.Дагис //Научн. тр. высш. учебн. заведений ЛитССР: Биология. — Вильнюс,1970.- т. 10,- С.83-88.

82. Итжанова, Х.И. Фармакогностическое изучение полыни горькой и разработка лекарственной формы арглабина Текст.: автореф. дис. .к. ф. наук (15.00.02) / Х.И. Итжанова. Томск, 2003.- 25 с.vy м

83. Йорданов, Д. Фитотерапия Текст. / Д. Йорданов, П. Николов, Асп. Бойчинов. София, 1970.- 342 с.

84. Кавтарадзе, Н.Ш. Хроматоспектрофотометрический метод определения витамина Kj в листьях Urtica dioica L. Текст. / Н.Ш. Кавтарадзе, М.Д. Алания // Растительные ресурсы., 2002— т.38, вып.4.-С. 118- 120

85. Караулов, А.В. Иммунотерапия и иммунореабилитация в клинике внутренних болезней Текст. / А.В. Караулов // Russian Journal of Immunology. Vol.4, Supp.l. 1999.- P.209-213.

86. Кетлинский, С.А. Иммунология для врачей Текст. / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина- СПб.-1998. 156 с.

87. Кирхнер, Р. Тонкослойная хроматография в 2- х томах Текст./ Р. Кирхнер, [Пер. с англ. Д.Н.Соколова, под ред.В.Г. Березкина.] -М.:Мир, 1981.- Т.2. с.527с.

88. Киселева, Т.Д. Разработка алгоритма действия по составлению сборов на основе опыта традиционной медицины России Текст./ Т.Д. Киселева, А.В. Чаузова, А.А. Карпеев // Фармация. 2000 — №2.- С. 15-18.

89. Кшшчна сексолопя та андролопя Текст./3а ред. О.Ф. Воз1анова, I.I. Горпинченка. — К.: Здоров'я, 2000. — 536 с.

90. Ковальчук, JI.B. Современные проблемы вторичных (приобретенных) форм иммунной недостаточности Текст./ JI.B. Ковальчук, Б.В. Пинегин // Russian Journal of Immunology. Vol.4, Supp.l. 1999.- P. 181-184.

91. Козин, Ю.И. Возможности иммунокоррегирующей терапии биоглобином у урологических больных Текст. / Ю.И. Козин, Г.Г. Шитов // Аллергология и иммунология. 2001. — Т.2, №2. - С.42-43

92. Козлова, Л.М. Фитохимическое исследование пустырника пятилопастного Текст.; автореф. дис. .к.ф. наук (15.00.02) / Л.М. Козлова; 1 ММИ. М., 1968,- 14 с.

93. Козлюк, А.С. Особенности иммунного статуса у больных инфекционным и неинфекционным простатитом А.С. Козлюк, Н.Г. Богомольский, Л.А. Анисимова // Материалы VI Всесоюзного съезда урологов (10-12 окт.1990 г.). М., 1990.- С.210-211.

94. Коновалов, Д.А., Сесквитерпеновые лактоны из Achillea millefolium Текст./ Д.А. Коновалов, В.А. Челомбитько //Химия природных соединений. 1991. - № 5. - С.724- 725.

95. Кононенко, Г.П. Флавоноидные агликоны почек березы бородавчатой {Betula verrucosa) Текст. / Г.П. Кононенко, С.А. Поправко, Н.С. Вульфсон // Биоорганическая химия. — 1975. -Т. 1 .№4. С.506- 511.

96. Конопля, А.И. Использование лекарственных препаратов растительного происхождения в качестве иммуномодуляторов Текст. / А.И. Конопля, Г.А. Дрозд, Н.И. Кедровская // Фармация. -1988.-№2. -С. 17-20.

97. Конопля, А.И. Пролиферативная активность гетерополисахаридов растительного происхождения Текст. / А.И. Конопля, А.И. Яковлев, И.А. Швейнов //Сост. и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке. Томск. - 1991. - ч.1. - с.69.

98. Корсун, В.Ф. Гормонорегулирующие растения в лечении миомы матки Текст./ В.Ф. Корсун, П.С. Кухарский // Практическая фитотерапия. 1999. - №3 - С.66- 67.

99. Костенникова, З.Ф. Количественное определение флавоноидов в настойке календулы методом УФ— спектрофотометрии Текст./ З.Ф. Костенникова, Г.А. Попова, Р. Дамбраускине //Фармация. -1984.- №6.- С.33-35.

100. Кривцова, Н.И. Влияние водных и спиртовых препаратов тысячелистника на желудочно- кишечную секрецию Текст./ Н.И. Кривцова // Материалы II совещания по исследованиюлекарственных растений Сибири и Дальнего Востока— Томск, 1961.-47 с.

101. Крылов, В.И. Клиническая фармакология мембранстабилизирующих процессов при нефропатиях у детей Текст. / В.И. Крылов, А.Д. Петрушина, В.А. Жмуров // Фармакология и токсикология. 1986. - № 5. - С. 114- 119.

102. Куваев, В.Б. Растения и средства для профилактики и лечения аденомы предстательной железы Текст./ В.Б. Куваев, В.М. Жуков, А.Б. Николаев // Раст. ресурсы. 1988. - Т. 24, вып. 4- С. 615- 621.

103. Кудрин, А.В. Иммунофармакология микроэлементов Текст./

104. A.В.Кудрин, А.В.Скальный, А.А. Жаворонков.- М.: изд. КМК, 2000. -537 с.

105. Кузнецова, А.А. Осморегулирующая функция почки в естественных условиях: соотношение индекса осмотического концетрирования и реабсорбции осмотически свободной воды Текст./ А.А. Кузнецова, Ю.В. Надточин // Физиология человека-1997.-Т.23,№2.- СЛ 15- 123.

106. Кузнецова, М.А. Сказания о лекарственных растениях Текст./ М.А. Кузнецова, А.С. Резникова.- М.: Высш.шк., 1992- 272 с.

107. Кульберг, А.Я. Регуляция иммунного ответа Текст./ А.Я. Кульберг, М.:Медицина,1986. - 224 с.

108. Куприянова, Н.Е., Разработка спектрофотометрического метода количественного определения арбутина Текст./ Н.Е. Куприянова, С.В. Онегин, М.С. Коротаева // Сборник научных работ студентов и молодых ученых ЯГМА — Ярославль, 2003 С.94-95

109. Куркин, В.А. Применение лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды, в качестве тонизирующих и иммуностимулирующих лекарственных средств Текст./

110. B.А.Куркин // Тез. докл II. Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство».- М.: РЦ «Фармединфо», 1995 .- С.138.

111. Курцикидзе, М.П., Разработка и стандартизация растительной композиции иммуномодулирующего действия Текст. / М.П. Курцикидзе, А.Ф. Букуридзе // Ресурсоведческое и фитохимическое изучение лек.флоры СССР: Сб.ст. М., 1991, С.205- 210.

112. Лагерь, А.А. Фитотерапия некоторых заболеваний Текст./ А.А. Лагерь. Красноярск, 1986. 112с.

113. Ладыгина, Е.Я. Тысячелистник обыкновенный—Achillea millefolium L. Текст./ Е.Я. Ладыгина // Фармация. 1991. - № 6. — 90 с.

114. Ладынина, Е.А. Фитотерапия Текст./ Е.А. Ладынина, Р.С. Морозова. Л.: Медицина, 1990- 304с.

115. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета Текст./ Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. М.: Медицина, 1985. - 256 с.

116. Лакин, К.М. Фармакологические свойства и клиническое применение различных препаратов витамина К Текст./ Лакин

117. К.М., Крылов Ю.Ф., Еникеева Д.А и др. // Фармакология и токсикология. 1974. T.XXXVII, №5, С.620- 632.

118. Лебеда, А.Ф. Перспективы использования растений в борьбе с иммунодефицитами Текст./ А.Ф. Лебеда // Четверта м1жнародна конференция з медичжм боташки/:Тези доповщнй. — Юев, 1997. — С.З- 17.

119. Лебедев, А.В. Сравнительное фармакогностическое изучение официнальных видов рода зверобой Текст.: автореф. дис. .к.фарм. наук. (15.00.02)/ А.В. Лебедев; Яр.ГМА. Пермь, 2000. - 22с

120. Лебедев, А.В. Аминокислотный состав зверобоя четырехгранного Текст./ А.В. Лебедев // Современные проблемы фармакогнозии и фитотерапии: межвуз. сб. науч. трудов, поев. 15- летию каф. фармакогнозии ЯГМА. Ярославль: ЯГТУ, 1999. - С. 21- 22.

121. Лежнева, Л.П. Фармакотехнологические исследования по расширению области использования крапивы двудомной в медицине Текст.: Дис. . канд.ф.н.: (15.00.01) / Л.П. Лежнева; Пят.фарм.ин-т. Пятигорск,1986 - 146с.

122. Лекарственные растения Сибири для лечения сердечно— сосудистых заболеваний Текст./ Н.В. Казаринова, М.Н. Ломоносова,

123. B.М.Триль и др. — Новосибирск: Наука.Сиб.отд— ние, 1991. — 240с.

124. Лекарственные растения в гастроэнтерологии Текст./ Зинченко Т.В., Стахив И.В. и др.- Киев: Наук, думка, 1989. 237 с.

125. Лесков, В.П. Клетки образующие розетки с аутолитическими эритроцитами Текст. / В.П. Лесков // Иммунология.-1980.-№ 2.1. C.26-31.

126. Лечение хламидийного уретрита с применением иммуномодулятора «Полиоксидоний» Текст. /Иванов О.Л., Ломоносов К.М., Фадеев А.А., Алленов С.Н. // Вестник последипломного медицинского образования. — 2000, №1. — С.11.

127. Лобанова, И.В. Исследования и стандартизация сбора, настоя и сухого экстракта «Мирфазин» Текст.: автореф. дис. .канд. ф. наук. (15.00.02) / И.В. Лобанова; ММА. М., 2001. - 21с.

128. Лобанчикова, Н.В. Разработка и стандартизация седативных растительных сборов Текст.: Автореф. дис. .канд.ф. наук. (15.00.02)/Н.В. Лобанчикова; 1 ММИ. М., 1991,-27с.

129. Лопаткин, Н.А. Лечение острой и хронической почечной недостаточности Текст./ Н.А. Лопаткин, И.Н. Кучинский. — М.,1972,- 272 с.

130. Лоскутов, И.А. Иммунотропная активность природных флавоноидов Текст.: автореф. дис. .канд.м. наук./ И.А. Лоскутов Челябинск, 1989 - 23 с.

131. Лукьяненко, В.И. Антимикробное, регенеративное и дезодорирующее свойства препаратов хлорофилла Текст./ В.И. Лукьяненко, Л.И. Фрагина, С.А. Черноморский // Стоматология —1973.-Т. 52, №2.- С.95-97.

132. Луцук, Н.Б. Витамины и иммунитет Текст./ Н.Б. Луцук, Н.В. Васильев Томск, 1979. - 210 с.

133. Макарова, Н.В. Фитофармакологическое направление создания новых иммуномодуляторов Текст./ Н.В. Макарова // Тез. докл. III Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство».- М.: РЦ «Фармединфо», 1995 .- С. 136.

134. Мальберг, К. Метод локального гемолиза Текст./ К.Мальберг, Э. Зигль //Иммунологические методы: пер. с нем.; Под ред. X. Фримеля: М.: Мир, 1987. - С.57-72.

135. Мамчур, Ф.1. Фитотерашя в урологи Текст./ Ф.1. Мамчур. Киев: Здоров я, 1983.- 112с.

136. Маркарян, А.А. Исследования по разработке методов контроля качества желудочно— кишечного сбора и полученного из него сухого экстракта Текст.: автореф. дис. .к.ф. наук (15.00.02) / А.А. Маркарян; ММА. М.,2001 - 27 с.

137. Мацку, Я., Атлас лекарственных растений Текст./ Я. Мацку, И. Крейча. Братислава, 1981- 461 с.

138. Машковский, М.Д. Лекарственные средства Текст.: Пособие по фармакотерапии для врачей: В 2 т. Т.1/ М.Д. Машковский. — М.: ООО «Новая Волна», 2001.- 540 с.

139. Медведев, А.А. Лечение доброкачественной гиперплазии предстательной железы препаратом простаплантом Текст. / А.А. Медведев, Л.А. Синякова, А.В. Зайцев // Урология.- 2000 — №4 — С.13- 15.

140. Метаболическая коррекция токсических и лекарственных иммунопатий Текст./ Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля, И.Л. Ласкова и др. Курск. - 1997 - 199 с.

141. Методика определения запасов лекарственных растений Текст. / [Редкол.: Шретер А.И. (гл.ред.) и др.]- М., 1986, 52 с.

142. Методические указания о порядке доклинического и клинического изучения препаратов природного происхождения и гомеопатических лекарственных средств Минздравмедпрома России от 08.09.94 г. Текст. М.,1994. - 64с.

143. Методические указания Фармакопейного комитета МЗ СССР по составлению проектов фармакопейных статей и объяснительной записки на лекарственное растительное сырье Текст. — М., 1978. 23 с.

144. Миназова, Г.И. Разработка и стандартизация многокомпонентного сбора «Гепафит» Текст.: автореф. дис. .канд. ф. наук.(15.00.02) / Г.И. Миназова; ММА. М.,1997. - 21 с.

145. Михайленко, Е.Г. Лекарственные растения в акушерстве и гинекологии Текст. / Е.Г.Михайленко, В.Е. Радзинский, К.А. Захаров— Киев: Здоров'я, 1987.— 191 с.

146. Муравьев, И.А. Производство экстракта водяного перца жидкого методом реперколяции с законченным циклом Текст./ И.А. Муравьев, Ю.Г. Пшуков // Фармация 1986. -Т.35, №5. с. 17-22,

147. Муравьева, Т.И. Фармакосанирующие эффекты полисахаридов растительного происхождения Текст.: Автореф. дис. .д- ра фарм. наук (15.00.02)/ Т.И. Муравьева; Пят. фарм.' академия. СПб., 1999.-39 с.

148. Мухин, Н.А. Диагностика и лечение болезней почек Текст./ Н.А.Мухин, Е.И. Тареева- М.: Медицина, 1981 240с.

149. Несоответствие данных иммунологического анализа клиническим признакам вторичного иммунодефицита Текст./Горлина Н.К., Гуськов JI.P., Козлов И.Г., Чередеев А.Н. // Russian Journal of Immunology. Vol.4, Supp.l. 1999.- P. 199.

150. Никитин, В.М. Методическое пособие по оценке иммунного статуса организма в лечебных учреждениях СА и ВМФ Текст./ В.М. Никитин. 1987. - 45 с.

151. Никитин, В.М. Справочник методов иммунологии Текст./ В.М. Никитин. Кишинев.: Штиница, 1982. - 303 с.

152. Никитина, JI.E. Физические методы идентификации органических соединений Текст./ JI.E. Никитина, В.В Племенков. — Казань, 2003.-92с.

153. Николаев, А.И. Влияние оксибутирата натрия на анафилактическую и анафилактоидную реакцию Текст./ А.И. Николаев, B.C. Черемнев // Иммунология. 1983. — № 6. - С.59-61.

154. Николаев, А.И. Подавление и стимуляция иммуногенеза лекарственными препаратами Текст./ А.И. Николаев, О.А. Федоренко. Ташкент: Медицина, 1984. - 224с.

155. Николаев, С.М. Общие принципы составления многокомпонентных лекарственных препаратов в тибетской медицине Текст./ С.М. Николаев, Д.Б. Дашиев, С.М. Батарова //Фармация.- 1988.- №2,- С.51-54.

156. Николаева, В.Г. К вопросу изучения растений, применяемых народами СССР при заболевании кишечно- желудочного тракта Текст./ В.Г. Николаева // Фармация.- 1978. Т. 27, № 5- С.58- 61.

157. Николаева, В.Г. Некоторые растения, применяемые народной медициной СССР при симптомах бронхиальной астмы Текст./ В.Г. Николаева//Раст. ресурсы— 1979 Т. 15, вып. 1— С. 298-307.

158. Николаева, В.Г. Растения, применяемые народами СССР при заболеваниях почек и мочевыводящих путей Текст./ В.Г. Николаева//Раст. ресурсы. 1976. - Т. 12, вып. 2. - С. 307-315

159. Николаева, В.Г. Антимикробная активность некоторых фракций из почек березы бородавчатой. // IV Всероссийский съезд фармацевтов Текст./ В.Г. Николаева, Хохлова А.А. — Воронеж, 1981.- С.460-461.

160. Николаева, Н.А. Влияние препаратов крапивы на морфо— функциональное состояние слизистой желудка Текст.: Автореф. дис. .к.б. наук. (14.00.17) / Николаева Н.А. Улан- Уде, 1997-18с.

161. Николайчук, Г. Сравнительное фармакогностическое изучение некоторых видов рода Тысячелистник Текст./ Г. Николайчук, В. Сивак // Изучение некоторых растительных ресурсов и технологии фитохимических препаратов Пермь, 1975 - С. 38—39.

162. Новиков, Д.К. Лекарственная аллергия Текст./ Д.К. Новиков, Ю.В.Сергеев, П.Д. Новиков. М.: Национальная академия микологии, 2001. - 330с.

163. Номенклатура гомеопатических средств (комплексы) Текст.-Б.м.и.: LEK; Aventis.;KRKA, Б.г.и. 2000. - 64 с.

164. О возможности комплексного использования Achillea asiatica Serg. как лекарственного растения Текст./ Г.И.Калинкина, М.И. Слипченко, Д.Д. Таран и др. // Раст. ресурсы- 1989— Т. 25, вып. 1.- С. 74-78.

165. О рациональном подходе к разработке многокомпонентных лекарственных препаратов Текст./ С.М. Николаев, Т.Д. Даргаева, Г.И. Российская и др. — Улан— Удэ, 1986. — 59 с.

166. Олеников, Д.Н. Фитохимическое исследование листьев какалии копьвидной (Cacalia hastate L.) Автореф. дис. .канд.ф.наук.( 15.00.02)/ Д.Н. Олеников; Бурят.МУ. Улан- Уде, 2003. -22 с.

167. Определение суммы фенологликозидов в жидком экстракте листьев брусники/ И.Б.Васильев, Г.В.Пахолков, Т.П.Зюбр, Ю.Г.Пшуков Текст.// Матер, юбил. науч. конф., посвящ. 75- летию Иркутского мед. ун- та. Иркутск, 1996 - С.70.

168. Опыт применения настойки березовых почек для лечения гнойных ран и полостей при перитонитах Текст./Захаров И.А., Приданцева М.Д., Хохлова А.А., Николаева В.Г. // Научные труды Рязанского мед ин- та. Рязань, 1980. - Т.69. - С.94- 99.

169. Орлов, Д.С. Экология и охрана биосферы при химическом загрязнении Текст.: учебн. пособие для хим. и хим.-технол. и биол. спец. вузов/ Д.С.Орлов, Л.К.Садовникова, И.Н.Лозановская. М.: Высш. шк., - 2002. - 384с.

170. Осетров, В.Д. Альтернативная фитотерапия Текст./ В.Д. Осетров-Киев: Наукова Думка, 1993. 223 с.

171. ОФС 42-0013-03. Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб Текст./ Фармация. -2003.- №6. С.З-8.

172. Оценка влияния пектиновых веществ амаранта при иммунологической недостаточности Текст./ А.А. Лагин, А.И.Коновалов, И.Г. Мустафин и др.// Тез. докл. IV Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство».- М.: РЦ «Фармединфо», 1997. -С.271.

173. Пастушенков, Л.В. Растения- антигипоксанты (фитотерапия) Текст./ Л.В.Пастушенков, Е.Е. Лесиовская. — СПб., 1991. -95 с.

174. Пастушенков, Л.В. Лечение иммунодефицитных состояний Текст./ Л.В.Пастушенков, Е.Е. Лесиовская. // Фармакотерапия с основами фитотерапии. СПб., 1995. - С. 173- 189.

175. Петков, В. Современная фитотерапия Текст./ В. Петков. София,1998.-504с.

176. Петренко, В.В. Фотохимическая характеристика пустырника пятилопастного (Leonurus quibquelobatus Gilib.) Текст.: Автореф. дис. .канд.ф. наук.(15.00.02)/ В.В. Петренко Тарту,1967 — 18 с.

177. Петров, Е.В. Разработка и стандартизация противодиабетического средства растительного происхождения Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук.(15.00.02)/ Е.В. Петров; Бурят.МУ- Улан-Уде,1999.- 18 с.

178. Племенков, В.В. Введение в химию природных соединений Текст./ В.В. Племенков. — Казань, 2003. — 376 с.196.197.198,199.200,201,202,203204205206207208209

179. Плешков, Б.П. Практикум по биохимии растений Текст./ Б.П. Плешков М.: Колос, 1978- 255с

180. Плецитый, К.Д. О влиянии витамина Е на иммунный ответ Текст./ К.Д. Плецитый//Иммунология.- 1985 №2.-С.72-73 Плецитый К.Д. Витамины как иммуномодуляторы [Текст]/ К.Д. Плецитый // Тез.докл. I Всесоюзн.иммунологического съезда — М.- 1989.- С.345.

181. Показатели местного иммунитета у больных хроническим простатитом Текст./ А.И. Конопля, М.Р. Хальзов, А.И. Мартынов // Метаболическая иммуномодуляция [Под ред. Л.Г. Прокопенко и

182. A.И. Конопля. Курск: КГМУ, 2000. - С.289- 294.

183. Порядок разработки, согласования и утверждения нормативно-технической документации на лекарственные средства и лекарственное растительное сырье Текст.: ОСТ 42-506-96. М., 1996,- 49 с.

184. Почему растения лечат Текст./ М.Я. Ловкова, А.М.Рабинович,

185. С.М. Пономарева и др.- М.: Наука, 1989 256 с.

186. Практическая фитотерапия Текст./ Т.А.Виноградова, Б.Н. Гажаев,

187. B.М. Виноградова, В.К Мартынов. -М.:ОЛМА-ПРЕСС; СПб: Издательский дом «Нева», Валери СПД, 1998. — 640 с. Прикладная медицинская статистика В.М. Зайцев, Зуева Л.П., В.Г. Лифляндский и др. СПб.: СПб ГМА им И.И.Мечникова, 2000. -299 с.

188. Проблемы безопасности биологически активных добавок и лекарственных трав Текст./ Безопасность лекарств. Экспресс-информация. 2000. - Бюлл.№1. - С. 83-95.

189. Прокопенко, Л.Г., Иммуномодулирующее действие растительных гетерополисахаридов при инфицированных ожогах кожных покровов Текст./ Л.Г. Прокопенко, И.В. Шишкова // Актуальные вопросы дерматовенерологии: сборник научных работ- Курск, 2000.- Вып.З. с.74.

190. Противовоспалительные свойства эфирных масел тысячелистника азиатского и некоторых видов полыней Текст./ А.С.Саратиков, Т.П. Прищеп и др. // Химико— фармац. журнал- 1986— № 6 — С.585- 587

191. Противоязвенный эффект настоя крапивы Текст./ Л.В. Ратахина В.Г. Пашинский, Э.И. Белобородова и др. // Сиб. журн. гастоэнтерологии и гепатологии. — 1999, №8.- С.60.

192. Пряхина, Н.И. Фитохимическое изучение касатика молочно-белого — Iris lacteal Pall. Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02)/ Н.И. Пряхина; ЛХФИ. Л., 1984. - 23 с.

193. Пупыкина, К.А. Разработка и стандартизация растительной композиции "Экзофит" и масляного экстракта на ее основе Текст.: автореф. дис. .к.ф. наук: (15.00.02)/ К.А. Пупыкина; Башк.ГМУ-Уфа., 1995.- 26 с.

194. Путноки, Л.А. Терапия гингвитов и хейлитов экстрактом березовых почек Текст./ Л.А. Путноки // Проблемы патологии в эксперименте и клинике: Сб.ст. Львов, мед.ин— т. — Львов, 1980, Т.4. С. 165.

195. Пшуков, Ю.Г. Методика одновременного определения коэффициентов поглощения, образования внутреннего сока и увеличения объема при растворении экстрактивных веществ Текст./ Ю.Г. Пшуков //Фармация.- 1990.- №4.- С.24-27.

196. Пшуков, Ю.Г. Причины расхождения теоретических расчетов эффективности экстрагирования с экспериментальными данными и способ их устранения Текст./ Ю.Г. Пшуков // Фармация. — 1990-№5.- С.35- 37.

197. Пшуков, Ю.Г. Разработка ресурсосберегающей технологии и принципов нормирования качества жидких экстрактов и настоек Текст.: автореф. дис. .д.ф. наук: (15.00.01)/ Ю.Г. Пшуков; ВНИИХТЛС- Харьков,- 1988.- 25 с.

198. Пытель, Ю.А. Транспорт мочи в почечной паренхиме Текст./ Ю.А. Пытель, В.В. Борисов // Урология и нефрология- 1999. №3. - С. 8- 13.

199. Рабинович, A.M. Лекарственные растения на приусадебном участке Текст./A.M. Рабинович М.: Росагропромиздат, 1989 - 207 с.

200. Рабинович, М.И. Лекарственные растения в ветеринарной практике Текст./ М.И. Рабинович. М.: Агропромиздат, 1987. — 288 с.

201. Разработка методов определения подлинности сбора «Мирфазин» Текст./ И.В.Лобанова, Е.В. Сергунова, А.А. Сорокина, И.А.Самылина //Современные проблемы фармацевтической науки и практики: Научные труды НИИФ. М.,- 1999, - T.XXXVIIL-4.2 - С.238- 242.

202. Растительные лекарственные средства / Максютина Н.П. ,Ко-миссаренко Н.Ф., Прокопенко А.П. и др. К.: Здоров'я, 1985 — 280 с.

203. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Magnoliaceae- Limoniaceae Текст./ [Редкол.: Соколов П.Д (гл.ред) и др.] Л.: Наука, 1984460 с.

204. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae — Thymelaeaceae Текст./ [Редкол.: Соколов П.Д (гл.ред) и др.].- Л: Наука, 1985 200 с.

205. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Hippuridaceae— Lobeliaceae Текст./ [Редкол.: Соколов П.Д (гл.ред) и др.].- СПБ: Наука, 1991.200 с.

206. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae Текст./ [Редкол.: Соколов П.Д (гл.ред) и др.].- СПБ: Наука, 1993.-200 с.

207. Растения тибетской медицины: Опыт фармакогностического исследования Текст./ С.М. Баторова, Г.П. Яковлев, С.М. Николаев, З.Г. Самбуева— Новосибирск: Наука, 1989— 159 с.233.234.235,236,237,238,239240,241242243244245246

208. Ратахина, Л.В. Крапива двудомная (Urtica dioica) в терапии экспериментальных опухолей Текст./ Л.В. Ратахина // Новые лекарственные препараты растений Сибири и Дальнего Востока.-Томск, 1986.- 124 с.

209. Рафальский, В.В. Лекарственные реакции антимикробных препаратов, применяемых для лечения инфекций мочевыводящих путей Текст./ В.В. Рафальский // Урология. 2000 - №6. - С.51-55.

210. Регистр лекарственных средств России Текст./ [Редкол.: Крылов Ю.Ф (гл.ред) и др.] -5-е изд.- М.: Ремако, 1997/1998. 880с. Регистр лекарственных средств России. РПС— пациент[Текст]. — М. -2001.

211. Регистр лекарственных средств России. РПС— пациентТекст.- М. -2003.

212. Рыбалко, К.С. Природные сесквитерпеновые лактоны Текст./ К.С. Рыбалко. М.: Медицина, 1978.-268 с.

213. Рыбников, В.Н. Иммуномодулирующее, антиоксидантное и актопротекторное действие нафтохинонов в покое и при интенсивных физических нагрузках Текст.: автореф. дис. .канд. м. наук: (14.00.36)/ В.Н. Рыбников; КГМУ. Курск., 1997. - 23 с.

214. Рябов С.И., Надточин Ю.В. Функциональная нефрология Текст./ С.И.Рябов, Ю.В. Надточин.- СПб.: Лань, 1997.- 304 с.

215. С1 2177328 RU 7 А 61 К 35/78. Средство, обладающее противовоспалительной, анальгетической и антиноцицептивной активностью Текст./ Чалый А.Г. (RU), Сурнина Н.Т. (RU), Яцюк

216. B.Я. (RU), Елецкая О.A. (RU) (Курский гос. мед. ун- т.) № 2000110564/14; Заявл. 24.04.2000// Изобретения (Заявки и патенты). -2001.-№36.

217. Сербии, А.Г. Химический состав и лечебное применение видов — Achillea L. Текст./ А.Г. Сербии, Л.С.Картамазова, Н.М. Ткаченко // Раст. ресурсы- 1987.- Т. 23, вып. 2 .- С. 257-258.

218. Сергеева, К.М. Вторичные нефропатии у детей. Диагностика и принципы лечения Текст./ К.М. Сергеева, Н.Н. Смирнов // Нефрология, 2000.- Т.4, №2. - С.19-29.

219. Серов, В.В. Почки и артериальная гипертензия Текст./ В.В.Серов, М.А. Пальцев-М.: Медицина, 1993. -254 с.

220. Сидоров, К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии Текст.: справочник/ К.К. Сидоров, -М.,1977. 217 с.

221. Скляревский, Л.Я. Лекарственные растения в быту Текст./ Л.Я. Скляревский, И.А. Губанов— М.: Россельхозиздат, 1986 — 272 с.

222. Слипченко, М.И. Противоязвенные свойства нового лекарственного препарата из Achillea asiatica Serg. в эксперименте Текст./ М.И. Слипченко, Г.И.Калинкина // Раст. ресурсы- 1994-Т. 30, вып. 4.- С. 56- 62.

223. Смахтин, М.Ю. Иммуномодулирующее действие полисахаридов одуванчика. Текст./ М.Ю. Смахтин, Ю.А. Сухомлинов, Л.А Дремова //Актуальные вопр. эксперим. и клинич. медицины и фармации Курск, 1993. — с. 119- 120.

224. Смирнов, B.C. Фитотерапия иммунодефицитных состояний Текст./ B.C. Смирнов, В. JI. Пастушенков// Сб. «Иммунодефицитные состояния»; [Редкол.: Смирнов B.C. (гл.ред) и др.].- СПб.: Фолиант, 2000.- С.468-492.

225. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям: Фитотерапия Текст./ С.Я. Соколов, И.П. Замотаев. М.: Недра, 1993.-464 с.

226. Соколов, С.Я. Фитотерапия и фитофармакология Текст./ С.Я. Соколов. — М.: Медицинское информационное агентство, 2000. — 965 с.

227. Соколова, В.Е. О гипоазотемическом действии флавоноидов Текст./ В.Е. Соколова // Фармакология и токсикология. 1975, вып. 10 — С.62— 66.

228. Соловьев, A.M., К вопросу о применении иммунотерапии при лечении персистирующего урогенитального хламидиоза Текст./ A.M. Соловьев, М.А. Гомберг // Вестник последипломного медицинского образования, 2000, №1. С.11

229. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник Текст. М.: Астра- Фарм.Сервис - 2002.- 1488 с.

230. Стандарт качества лекарственных средств. Основные положения. ОСТ- 91500.05001-00 Текст./. М., 2000, 54 с.

231. Стандартизация сбора "Трезлевлон" Текст./ Т.Л.Киселева, А.В.Чаузова, Н.Н.Мельникова, В.Г. Ребров // Фармацевтическая наука в решении вопросов лек. обеспечения: Сб.ст. М., 1998. — 4.2. - С. 165- 174.

232. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов: Моносахариды Текст./ Б.Н Степаненко М.: Высш. шк., - 1977.-222 с.

233. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов: Полисахариды Текст. / Б.Н Степаненко М.: Высш. шк., - 1978. - 256 с.

234. Стрелкова, М.А. Иммуностимуляторы из культивируемых клеток женьшеня Текст. / М.А.Стрелкова, Э.Е. Гойло, Ю.А. Грачева // Тез. докл. III Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство».— М.: РЦ «Фармединфо», 1996 С.50.

235. Сурнина, Н.Т.Изучение химического состава и биологических свойств густого экстракта и шрота травы тысячелистника обыкновенного Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02)/ Н.Т. Сурнина; КГМУ- Курск, 2000.-21 с.

236. Тареев, Е.М. Принципы современной терапии нефрита Текст./ Е.М. Тареев // Урология и нефрология. 1977, №5 — С.38- 43.

237. Тенцова, А.И. Современные аспекты исследования и производства мазей Текст./ А.И.Тенцова, В.М.Грецкий. М.:Медицина, 1980. — 192 с.

238. Технологические и фитотерапевтические аспекты исследования травы эхинацеи пурпурной Текст. / О.И.Авдеева, В.А.Куркин, П.Г. Мизина и др. // Самарский медицинский архив. — 1997- №5 — С.34-36.

239. Технологические параметры растительного сырья Текст./ Ветров П.П., Гарная С.В, Прокопенко С.А., Кучер О.В. // Фармацевтический журнал- 1987,- №3.-С.52—56.

240. Требования к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ: временные методические рекомендации Мин. Здравоохранения СССР Текст.- М., 1985.- 26 с.

241. Трембаля, Я.С. К вопросу повышения качества тысячелистника обыкновенного Текст. / Я.С.Трембаля, В.Я. Яцюк // Лекарственные растения центрального Черноземья и вопросы их рационального использования. Курск- 1994— С. 95- 101.

242. Трубников А.А. Фармакогностическое изучение цикория дикорастущего и культивируемого в Ярославской области Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02)/ А.А. Трубников — Пермь, 2000.- 24с.

243. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение Текст./ А.Д. Турова, Э.Н. Сапожникова М.: Медицина, 1982288 с.

244. Тысячелистники Текст./ К.М.Сытник, Л.Ф.Андрощук и др. — Киев: Наукова думка, 1984.-272 с.

245. Урбанович, З.И. Исследования по разработке сбора «Нормавит» Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02)/ З.И. Урбанович. -М., 2000-21 с.285.286.287.288.289,290,291,292293294295296297298

246. Утешев, Д.Б. Противовоспалительное, антианафилактическое и противоаллергическое действие p-каротина при местном применении Текст./ Д.Б. Утешев, А.А. Карабиненко, В.Л. Ковалева //Russian Journal of immunology 1999 — Vol.4.- Suppl.l — P.118.

247. Фармако-химическое обоснование возможностей фитолечения в хирургии Текст./ Н.С. Фурса, Ю.Н. Шкобродько, В.И. Литвиненко и др.//Неотложная хирургия: научный альманах. — Ярославль, 1999. -вып.2.-С.218-221.

248. Федоров, А.А. Растительные ресурсы СССР для народного хозяйства и медицины Текст./ А.А. Федоров // Раст. ресурсы .— 1965 Т.1, вып. 1 - С. 5- 18.

249. Хаитов, P.M. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах Текст./ P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин// Иммунология. -1996.- №3.- С. 4-9.

250. Хайс И.М., Мацек К. Хроматография на бумаге Текст./ И.М. Хайс, К. Мацек М.: Изд-во иностранной литературы, 1962 — 851с. Халматов Х.Х. Растения Узбекистана с диуретическим действием [Текст]/ Х.Х. Халматов. - Ташкент, 1979.180с.

251. Хальзов, М.Р. Состояние местного иммунитета у больных хроническим простатитом Текст.: Дисс. .канд. м. наук: 14.00.36. / Хальзов М.Р.; КГМУ. Курск., 2000- 106 с.

252. Химический анализ лекарственных растений Текст./ [Редкол.: Гринкевич Н.И. (гл.ред) и др.] М.: «Высшая школа», 1983 — 176с.

253. Химия и биохимия бобовых растений Текст./ [Редкол.: Запрометый М.Н. (гл.ред) и др.]- М.: Агропромиздат., 1986-С.21-22.

254. Хроматоспектрометрическое определение арбутина в листьях Bergenia crassifolia (L.) Fritsch. Текст./ П.Б. Лубсандоржиева, Б.С.

255. Жигжитов, Т.Д. Даргаева и др. // Хим.-фармац. журнал. — 2000. — т.34. -№5. — С.38-40.

256. Цейтина, А.Я. Определение комплекса катехинов в фармацевтических препаратах из листьев чая Текст./ А.Я. Цейтина, М.Б. Жданова, Э.А. Петрова //Фармация. 1971. - №1— С.50- 51.

257. Цомая, И.В. Разработка и стандартизация ранозаживляющего противоязвенного средства растительного происхождения Текст.: автореф. дис. .канд.ф. наук: (15.00.02)/ И.В.Цомая; ММА-М., 1997-24 с.

258. Чеботарева, В.Д. Значение иммунологических нарушений в развитии ХПН у детей Текст./ В.Д. Чеботарева, В.Г. Майданник //Педиатрия.- 1986.- №4.- С.104-111.

259. Чопик, В.И. Дикорастущие полезные растения Украины Текст./ В.И. Чопик, Л.Г. Дудченко, А.Н. Некрасова. Киев, 1983 - 399 с.

260. Шантанова, Л.Н. Диуретическая активность отвара из листьев брусники Текст./ Л.Н. Шантанова, Т.Г. Ангархаева // Матер, юбил. науч. конф., посвящ. 75- летию Иркутского мед. ун— та. — Иркутск,1996.- С. 169.

261. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии Текст. / М.Шаршунова, В.Шварц, У. Михалец,- М.: Мир, 1980. Т.1.-288 е.,- М.: Мир, 1980. - Т.2.-319 с.

262. Шатохин, М.Н. Использование полиоксидония для коррекции иммунных нарушений у больных хроническим простатитом Текст.: Автореф. дис. .к.м. наук: (14.00.36) / М.Н. Шатохин; КГМУ. Курск, 2003- 27 с.

263. Шафтан, Э.А. О получении биологически активных экстрактов из Achillea millefolium сжиженными газами Текст./ Э.А. Шафтан, Н.С. Михайлова, Н.Ф. Дюбанькова // Раст. ресурсы .— 1981- Т. 17, вып.4 С. 105-109.

264. Шейман, Дж. А. Патофизиология почки Текст./ Дж. А. Шейман; пер. с англ. Л.З. Певзнера; под ред. Ю.В. Надточина- М.: БИНОМ,1997.-224 с.

265. Шепетков, В.Д. Лечение тысячелистником больных язвенной болезнью и хроническим гастритом Текст./ В.Д. Шепетков, А.А. Еременко // Воен.мед.журн. — 1953 — №1. — с. 79.

266. Шестаков, С.Г. Иммунологические нарушения и их коррекция у больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы Текст.: Дисс. .канд. м. наук: 14.00.36/ С.Г. Шестаков; КГМУ-Курск., 2000- 135 с.

267. Шильман, А.И. Иммуномодулятор «Полиоксидоний» в комплексном лечении хронического уретрогенного простатита Текст./ А.И. Шильман, Б.И. Блюмберг // Вестник последипломного медицинского образования. 2000.- №1.— С.9.

268. Ширинский, B.C. Аутоимунные заболевания: проблемы патогенеза, диагностики и лечения Текст./ B.C. Ширинский // Russian Journal of Immunology. 1999. - Vol. 4, Supp.l - P.127- 130.

269. Шишкин, A.H. Гломерулонефрит и инфекция Текст./ А.Н. Шишкин // Нефрология.- 2000.- Т.4.- №2.- С.19- 29.

270. Шматова, В.В. Флавоноиды туркменских видов рода Achillea Текст./ В.В. Шматова, М.О. Коррыев, Н.Ф. Комиссаренко //Химия природн. соедин. 1987. - №2. - С.301- 302.

271. Шмид, О. Природные дубильные вещества Текст./ О. Шмид // Биохимические методы анализа растений. М - 1960. - С.239- 278.

272. Шнякина, Г.П. Компоненты листьев Arctostaphylos uva— ursi и Vaccinium vitis— idaea. Текст./ Г.П. Шнякина, Н.Б. Цыганкова //Химия природн. соедин. 1981. - №5.- С.675- 676.

273. Шретер, А.И. Лекарственные растения и растительное сырье, включенные в отечественные фармакопеи Текст./ А.И. Шретер . -М., 1972.-119 с.

274. Штабский, В.М. К методике определения среднесмертельных доз и концентраций химических веществ Текст./ В.М.Штабский В.М.// Гигиена и санитария. 1980 - №10. - С. 49- 61.

275. Экспериментальное и клиническое изучение действия настойки березовых почек на инфицированные раны Текст./ Захаров И.А., Приданцева М.Д., Хохлова А.А. и др. // Клинич. хирургия, 1984, №1. С.72- 73.

276. Экстракт брусники Текст. / Е.В.Михеев, Л.В.Поленова, Д.А. Швайко и др. // IV Всероссийский съезд фармацевтов. Воронеж, 1981. С.221— 222.

277. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения Текст.: учебн. пособие/ Под ред.

278. Г.П.Яковлева и К.Ф.Блиновой.- СПб.: Специальная литература, 1999.- 407 с.

279. Энциклопедия травяных чаев Текст./ А.Ю.Нестеровская, Т.Д. Рендюк, Л.Я.Спешилов и др.- М.: КРОН-ПРЕСС, 1997.- 592 с.

280. Эстифан первый отечественный препарат иммуностимулирующего действия из эхинацеи Текст./ Г.С.Сакович, В.К. Колхир, Е.Ю. Енютина и др.// Тез. докл. II Росс, нац. конгр. «Человек и лекарство».- М.: РЦ «Фармединфо», 1995. -С.143.

281. Эффективность комплексного лечения хронического простатита, включающего иммунокоррегирующую терапию Текст./ Гуськов Л.Р., Горлина Н.К., Козлов И.Г., Чередев А.Н. // Russian Journal of Immunology. Vol.4, Supp.l. 1999 - P.269.

282. Эффективность фармакологических и нефармакологических воздействий на нарушения иммунного статуса больных с урологической патологией Текст./ С.Г.Шестаков, А.И. Конопля, А.В.Котов и др. // Аллергология и иммунология— 2001 — Т. 2, № 2.- С. 43.

283. Юдина, В.Ф. Полезные растения Карелии Текст./ В.Ф. Юдина, Н.П. Холопцева, Л.А. Либман. Л.: Наука, 1988 — 280с.

284. Юдина, В.Ф. Рациональное использование и химический состав некоторых лекарственных растений болот Текст./ В.Ф. Юдина, Н.П. Холопцева. Петрозаводск, 1985.- 12 с.

285. Юшков, В.В. Иммунокорректоры Текст.: руководство для врачей и провизоров./ В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, А.В. Казьянин. -Екатеринбург, 2002. — 255с.

286. Яременко, К.В. Иммуномодуляторы растительного происхождения Текст.: справочник по иммунологии/ К.В. Яременко, С.А.Иванова.- СПб.: Диалог, 2002. С. 197- 250.

287. Ярилин, А.А. Основы иммунологии Текст.: учебник/ А.А. Ярилин.- Москва, Медицина. - 1999. - 608с.

288. Яцюк, В.Я. Влияние условий заготовки на качество сырья тысячелистника обыкновенного Текст./ В.Я. Яцюк // Тез. докл. науч. конф. «Резервы совершенствования лекарственного обеспечения РСФСР».- Владимир, 1991- С. 39-40.

289. Яцюк, В.Я. Поиск противоопухолевых средств среди растений флоры СССР Текст./ В.Я. Яцюк // Тез. докл. «Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики». — Курск, 1991.-С.229-230.

290. Яцюк, В.Я. Влияние процесса ферментации сырья на выход и состав эфирного масла травы тысячелистника обыкновенного/Текст./ В.Я. Яцюк / Актуальные проблемы фармации — Тюмень, 1994— С. 151.

291. Яцюк, В.Я. Фармакогностическое изучение растений рода Achillea L., произрастающих в Курской области Текст./ В.Я. Яцюк //

292. Лекарственные растения центрального Черноземья и вопросы их рационального использования. Курск, 1994 - С. 102- 111.

293. Яцюк, В.Я. Препарат тысячелистника обыкновенного для профилактики и лечения дерматозов Текст./ В.Я. Яцюк, Е.А.Губарев, В.А. Жигулин // Современные вопросы дерматовенерологии. — Курск, 1995 С. 160-162.

294. Яцюк, В.Я. Углеводы травы и корней тысячелистника обыкновенного Текст./ В.Я. Яцюк, М.Д. Ванина, И.П. Юдина // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации Курск, 1995.-С.125.

295. Яцюк, В.Я. Биологически активные вещества корней тысячелистника обыкновенного Текст./ В.Я. Яцюк, И.П. Юдина // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации. Курск, 1995. - С. 123- 124.

296. Akbay, P. In vitro immunomodulatory activity of flavonoid glycosides from Urtica dioica L. Text./ Akbay P. , Basaran AA, Undeger U, Basaran // N.Phytother. Res; 2003 Jan; 17(1): 34- 7. PMID: 12557234 [PubMed indexed for MEDLINE].

297. Anticomplementary and hypoglycemic activities of the glucans from the seeds of Malva verticillata Text./ Tomoda M., Shimizu N e.a. // Kitasato Arch. Esp. Med. 1991. - V. 64- N 4.- P. 315- 316.

298. Antioxidant, Antimicrobial, Antiulcer and Analgesic Activities of Nettle (Urtica dioica L.) Text./ Guelcin, I, Kuefreviogu, OI, Oktay, M, Bueyuekokuroglu, ME. //- J. Ethnopharmacol. 2004. - 90: 205- 215 (2-3)

299. Bazaran, A.A. An investigation of some Turkish medicines in Salmonella thyphimurium and in the COMET assay in human lymphocytes. Text./ Bazaran A.A., Yu. TW, Plewa MJ, Anderson D.// Teratog. Carcinog. Mutagen., 1996.- 16(2): 125-38.

300. Beintema, JJ. The primary structure of stinging nettle (Urtica dioica) agglutinin. A two- domain member of the hevein fanily. Text./ Beintema JJ, Peumans WJ.// FEBS Letters. 1992. - Mar/ - 9, 299 (2): 131-4.

301. Benson Y.R. Some recent advances in amino acid sequence analysis Text./ Benson Y.R. // Instrumentation in amino acid sequence analysis.- London-New-York San-Francisco., 1975.—P. 1-40

302. V beta- specific deletion of mature thymocytes by thee plant superantigen Urtica dioica agglutinin. Text./ Delcourt M, Peumans WJ, Wagner MC, Truffa- Bachi P//Cell Immunology. 1996.- Mar. 15.- 168(2): 158-64.

303. Bilgrami, KS. Fundamentals of botany. Text./ Bilgrami KS, Srivastava LM, Shreemali JL. Vikas publishing house PVT LTD, Delhi, 1983.698 p.

304. Carbohydrate binding properties of the stinging nettle (Urtica dioica) rhizome lectin. Text./ Shibuya N, Goldstein IJ, Shafer JA, et al. // Archives of Biochemistry and Biophysics. 1986. - Aug. - 15, 249(1): 215- 24.

305. Cardiovascular effects of Urtica dioica L. in isolated heart and aorta, текст ./ Legssyer A, Ziyyat A, Mekhfi H, Bnouham M, etc.// Phytother. Res. 2002. - Sep; - 16(6):503- 7. PMID: 12237804 [PubMed - indexed for MEDLINE],

306. Characterization of two novel polysaccharides having immunological activities from the root of Panax ginseng Text./ Tomoda M., Hirabayashi K. e. a. // Biol. Pharm. Bull. 1993. - V. 16. - № 1. -P. 1087-1090.

307. Contact urticaria due to the common stinging nettle (Urtica dioica) -histological, ultrastrucutral and pharmacological studies. Text./ Oliver F, Avon EU, Breatnach A, etc.//Clinical and Experimental Dermatology. 1991.-Jan. - 16(1): 1-7.

308. Cytokine secretion in whole blood of healthy subjects following oral administration of Urtica dioica L. plant extract. [Text]/ Teucher T, Obertreis B, Ruttkowski T, Schmitz H.// Arzneimittelforschung, -1996.-Sep.-46(9): 906-10.

309. Czarnetski, BM. Immunoreactive leucotrienes in nettle plants (Urtica urens) Text./ Czarnetski BM, Thiele T, Rosenbach T,// International Archives of Allergy and Applied Immunology/- 1990/- 91(1): 43-6.

310. Determination of micro— and macro elements in preparations made from pipermint and nettle leaves. Text./ Fijalec Z, Soltyc K, Lozak A.ets. Pharmazie. - 2003. - Jul; 58(7): 480- 2. PMID: 12889531 PubMed - indexed for MEDLINE.

311. Dvorkin, L. Herbs for benign prostatic hyperplasia. Text./ Dvorkin L, Song KY.// Ann. Pharmacother. 2002. - Sep; 36(9): 1443- 52. PMID: 12196065 [PubMed - indexed for MEDLINE].

312. Fagelman, E. Herbal medications in the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH) Text./ Fagelman E. Lowe FC.// Urol Clin North Am. 2002. - Feb; 29(1): 23- 9. PMID: 12109350 [PubMed - indexed for MEDLINE].

313. Galelli, A, Urtica dioica agglutinin. A superantigenic lektin from stinging nettle rhizome. Text./ Galelli A, Truffa- Bachi P. // Journal of immunology.- 1993. -Aug 15.-151(4): 1821-31.

314. Galkovich, R.R.The Immune Status of Patients with Inflammatory Diseases of the Male Reproductive Systems. Text./ Galkovich R.R. // Russian Journal of Immunology. December 15, 1998 - P.255-262.

315. Glycaemic effects of traditional European plant treatments for diabetes. Studies in normal and streptozotocin diabetic mice. Text./ Swantson- Flatt SK, Day C, Flatt PR, et al 11 Diabetes Research. 1989. -Feb.- 10(2): 69-73.

316. Gozum, S. Complimentary alternative treatments used by patients with cancer in eastern Turkey. Text./ Gozum S, Tezel А, Кос M. Cancer

317. Nurs. 2003. - Jun; 26(3): 230- 6. PMID: 12832956 PubMed - in process.

318. Guidelines for the assessment of herbal medicines Text.// Programme on traditional medicines.- Geneva: World Health Organization, 1991. — 4 p.

319. Heinerman, J. Heinerman's Encyclopedia of Healing herbs and species Text./ J. Heinerman. 1996.

320. Hill, N. The efficacy of Prrikwig gel in the treatment of insects bites: a double- blind, placebo- controlled clinical trial Text./ Hill N, Stam C, van Haselen R A.// Pharmacy world and science/ 1996. — Jan. - 18(1) 35-41.

321. Hirano, T. Effects of stinging nettle root extract and their steroidal components on the Na+' K+ATFase of the benign prostatic hyperplasia. Text./ Hirano Т., Homma M., Oka K.//Planta Med. 1994/ - Feb. -60(1): 30-3.

322. Hypoglycemic activity of Urtica pilulifera in streptozotocin— diabetic rats. Text./ Kavalali G, Tuncel H, Goksel S, Hatemi HH.// Ethnopharmacol. 2003. - Feb; 84(2- 3):241- 5. PMID: 12648821 [PubMed - indexed for MEDLINE].

323. Hypoglycemic effect of plants used in Mexico as antidiabetics. Text./ Roman Romanos R, Alaecon- Aguilar F, Lara- Lemus A, Flores- Saenz JL.// Archives of Medical Research. 1992. - Spring. - 23(1): 59- 64.

324. Jondal, M. Surface markers of human T- and B-lymphocytes: A large population of lymphocytes forming no immune rabbets with sheep red blood cells Text./ Jondal M., Holt J., Wigzell A. //J.Exp.Med. 1972. -N 136.-P.207-215.

325. In vitro antioxidant activity of non cultivated vegetables of ethnic Albanians in southern Italy Text./ Pieroni A, Janiak V, Durr CM, etc.//Phytother. Res. - 2002.- Aug;16(5):467- 73. PMID: 12203269 [PubMed - indexed for MEDLINE].

326. Inhibition of the growth of cariogenic bacteria in vitro by plant flavonones Text./ Tsuchiva N, Sato M e.a. // Experientia- 1994-V.50. №5.- P.501- 508.

327. Le Moal, MA. Urtica dioica agglutinin, a new mitogen for murine T— lymphocytes: unaltered interleukin- 1 production but late interleukin-2- mediated proliferation. Text./ Le Moal MA, Truffa- Bachi P.// Cell Immunology. 1988. - Aug. - 115(1): 24-35.

328. Mittman, P. Randomized, double- blind study of freeze- dried Urtica dioica in the treatment of allergic rhinitis. Text./ Mittman P. // Planta Med.-1990.-Feb. 56(1): 44-7.

329. Modification by suppressor cells and serum factors of the cell- mediated immune response in experimental pyelonephritis Text./ Miller ТЕ, Scott L, Stewart E, North D. // J. Clin.Invest. 1978. - 61, P. 964- 972.

330. Mouse T- lymphocyte activation by Urtica dioica agglutinin. I — Deliniation of two lymphocyte subsets. Text./ Le Moal MA, Colle

331. JH, Galelli F, Truffa- Bachi P.// Research in immunology. 1992. -Sept. - 143(7): 691-700.

332. Quercetin, a regulator of polymorphonuclear leucocyte functions Text./ Schneider C., Berton C., Spisani S. et al. // Adv. Exp. Med. Biol-1979.- vol.121.- p.-371-385.

333. Scott, K. Modification by suppressor cells and serum factors of the cell-mediated immune response in experimental pyelonephritis Text./ Scott K., Stewart E, North D. // J. Clin.Invest. 1978. - 61, P. 964- 972.

334. Studies on the polysaccharides having immunological activities from the root of Glycyrrhiza uralensis and the stolen of Glycerrhiza glabra var. glandu libera Text./ Tomoda M., Shimuzu N. e.a. // Pharmacobio. -1992.- V. 15.- № 1.- P. 5-7.

335. The effects of extract of the stinging nettle (Urtica dioica) on the interaction of SHBG with its receptor on human prostatic membranes. Text./ Hryb DJ, Khan MS, Romans NA, Rosner W.// Planta Med.1995.-Feb. 61(1): 31-32.

336. Treas. Pharmacognosy Text./ Treas and Evans, W.C. — London, Philadelphia, Toronto,Tokyo; WB Saunders, 1996.

337. Tyler, Pharmacognosy. Text./ Tyler, Varro E. Philadelphia, PA. 1988.-520 p.

338. Vahlensieck, W Jr Drug therapy of benign prostatic hyperplasia. [Text]/ Vahlensieck W Jr, Fabricius PG, Hell U // Fortschr Med.1996.-Nov.- 10,114(31): 407-11.

339. Wagner, H Biologich active Verbindungen aus dem Wasserextract von Urtica dioica. Biologically active compounds from the aqueous extract of Urtica dioica. [Text]/ Wagner H, Wilier F, Kreher B. // Planta Med. 1989.- Oct. - 55(5): 452- 4.

340. Wheeler- Aceto, H. Standartization of the rat pow formalin test for the evaluation of analgesis Text./ Wheeler- Aceto H., Cowan A. //Phychopharmacology— 1991.- Vol.104.-N 1- P.35- 44.

341. Yarnell E. Botanical medicines for the urinary tracts. Text./ Yarnell E. // World J Urol. 2002.- Nov; 20(5):285- 93. PMID: 12527244 [PubMed - indexed for MEDLINE].

342. Сведения о химическом составе компонентов сбора.