Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Разработка и исследование мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонита

На правах ¡>укопжм

ХОЛНАЗАРОВ

Баходур Махмадназарович

РАЗРАБОТКА И ИССЛЕДОВАНИЕ МАЗИ ИЗ ЭФИРНОГО МАСЛА ДУШИЦЫ МЕЛКОЦВЕТКОВОЙ НА ОСНОВЕ БЕНТОНИТА

15.00.01 - г • тология лекарств и организация фармацевтического дела

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

МОСКВА 2004

Работа выполнена в Московской медицинской академии им. И М. Сечен и в Научно-экспс,)! .¡нтально-производ^ .ином фармацевтик _ *ом Центре при Министерстве здравоохранения Республики Таджикистан.

Научные руководители: доктор фармацевтических наук, профессор Бунятян Наталья Дмитриевна; кандидат фармацевтических наук, доцент Халифаев Давлат Рахматович.

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор

Краснюк Иван Иванович; доктор фармацевтических наук Гузев Константин Сергеевич

Ведущая организация: Тюменская государственная медицинская академия

Защита состоится «_»_2004 г. в_часов на заседании Диссертационного Совета Д.208.04Р 09 при Московской медицинской академии имени И.М. Сеченова по адресу 121019, Москва, Никитский бульвар, Д. 13.

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ММА им. И.М. Сеченова по адресу: 117998, Москва, Нахимовский проспект, д. 49.

Автореферат разослан «_»_2004 г

Ученый секретарь Диссертационного Совета д.фарм.н., профессор

Садчикова Н.П

тШ

ВВЕД 1.НИЕ

Актуальность проблемы. Одним из важных направлений в повышении эффективности, качества и безопасности лекарственных препаратов является использование экономичных видов природного сырья. Исходя из этого, в данной работе выбор пал на отечественное сырьё, имеющее достаточные запасы. Остановились на растениях, содержащих эфирные масла, в частности, на душице мелкоцветковой и минеральном сырье, наиболее перспективным из которого представлялись местные бентонитовые глины.

Расширение исследований наиболее перспективного природного сырья с целью его использования для производства лекарственных препаратов свидетельствует об актуальности данной диссертационной работы и её практическом значении для фармацевтической отрасли.

Цель и задачи исследования. Основной целью настоящей работы является создание новой лекарственной формы на основе местного сырья. Для этого необходимо было решить следующие основные задачи:

- изучить необходимые при разработке новой лекарственной формы химические, физико-химические и технологические свойства бентонитовых глин Таджикистана как фармацевтического сырья, перспективного для'этой цели;

- выделить эфирное масло из душицы мелкоцветковой и исследовать его химический состав;

- провести комплекс физико-химических и биофармацевтических исследований, необходимых при разработке рационального состава и технологии мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонитовых глин Таджикистана;

- изучить микробиологическую и фармакологическую активность субстанции и мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонитовых глин Таджикистана;

- изучить стабильность мази при её хранении;

- подготовить нормативно-техническую документацию на сырьё и разрабатываемую лекарственную форму.

Научная новизна и теоретическая значимость результатов исследований. Впервые в отечественной практике показана возможность комплексного исследования сырья местного происхождения для получения лекарственных препаратов Доказана пригодность бентонитовых глин Таджикистана для ис-

РОС. НШИОЧА-Л'ЬНАЯ БЙ&,'!ИОТЕКА С, Петербург ЛОбРК

пользования в фармацевтической пауке и производстве Установлена зависимость ка'1< гва бентонитов ог пени их набухаии > держания щелочи. I I щелочноземельных элементов. В результате комплекса физико-химических и биофармацевтических исследований эфирного масла душицы мелкоцветковой и бентонитовых глин Таджикистана получена лекарственная форма - мазь «Су-бинак». Она рекомендуется как противомикробное и бактерицидное средство Изучена стабильность разработанной мази и определён срок её годности.

Практическая значимость работы. Доказана практическая ценность для фармацевтического производства природного сырья Таджикистана - бентонитовых глин и эфирного масла душицы мелкоцветковой. Впервые установлено, что наиболее пригодными к использованию в качестве мазевых основ являются бентониты, выявленные в месторождениях Гулён, Султанабад и Чоркух. Впервые получено эфирное масло и изучен его химический состав из душицы мелкоцветковой как сырья, имеющего потенциальные запасы в республике Таджикистан и являющегося перспективным для фармацевтического производства Определены характеристики предлагаемого для технологических процессов сырья - эфирного масла душицы мелкоцветковой и бентонитовых глин.

Разработаны состав, технология исследуемой мази «Субинак». Проведено доклиническое изучение разрабатываемой лекарственной формы. Подготовлена нормативно-техническая документация на сырьё, используемое при производстве мази «Субинак» и на саму мазь, на основании которой составлена Временная фармакопейная статья (ВФС); составлены лабораторный и производственный регламенты на мазь «Субинак»; получен акт о внедрении научно-технической разработки на базе фармацевтической фабрики Минздрава Республики Таджикистан. Результаты диссертационных исследований внедрены в учебный процесс в Таджикском государственном медицинском университете им. Абуали ибн Сино и на кафедре фармакологии с курсом технологии лекарств факультета последипломного профессионального образования провизоров Московской медицинской академии им. И.М Сеченова.

Положения, выносимые на защиту:

1 Характеристика бентонитовых глин Таджикистана и эфирного масла душицы мелкоцветковой как фармацевтического сырья

2 Степень пригодности бентонитовых глин Таджикистана и эфирного масла душицы мелкоцветковой для фармацевтической технологии

3. Разработка лекарственной формы из эфирного масла душицы мел-чоцветковой на OCHOI • бентонитовых глис 1 джикистана.

4. Биологическая оценка разработанной лекарственной формы из эфирного масла душицы на основе бентонитовых глин.

5. Результаты определения показателей качества мази «Субинак».

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались и обсуждались на VIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2001г.); международной научной конференции «Экологические особенности биологического разнообразия» при Академии наук Республики Таджикистан, (Душанбе, 2002 г.); республиканской конференции «Достижения в области химии и химической технологии» при институте химии Академии наук Республики Таджикистан (Душанбе, 2002 г.); республиканской научной конференции «Актуальные проблемы производства лекарственных препаратов на основе местного сырья» при Научно-экспериментально-производственном фармацевтическом центре Министерства здравоохранения Республики Таджикистан (Душанбе, 2002 г.); международной научно-практической конференции «Современное состояние водных ресурсов Таджикистана - проблемы и перспективы рационального использования» при Академии наук Республики Таджикистан (Душанбе, 2003 г.).

Публикация материалов диссертации. По теме диссертации зарегистрирована в Национальном патентно-информационном центре Республики Таджикистан заявка на изобретение (per. № 03000788 от 10.06.2003г.), подготовлены три ВФС и опубликовано 10 научных работ.

Структура и объём диссертации. Диссертационная работа изложена на 119 страницах машинописного текста, содержит 28 таблиц, 8 рисунков; состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследований, трех глав экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, списка литературы, включающего 198 источников литературы, в том числе 76 на иностранных языках и приложения.

Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цели и задачи исследования, охарактеризованы научная новизна, теоретическая и практическая значимость работы.

В обзоре литературы (глава 1) содержится аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы по проблеме современного состояния исследований бентонитов глинистых минералов различного месторождения, ис-

пользования их в качестве мазевых основ, а также анализ сведений касающихся биологической ' I тности эфирных " > л из природного р ' тельного сырья Таджикистана

В главе 2 представлены характеристика объектов и методов исследования. Приведены методики физико-химического, технологического, микробиологического исследования бентонитовых глин, эфирного масла душицы мелкоцветковой и разрабатываемой лекарственной формы.

В главе 3 приводятся результаты подбора способа очистки бентонитовых глин, исследований химических и физико-химических характеристик бентонитов и их стандартизация.

В главе 4 представлена технология получения эфирного масла душицы мелкоцветковой, его характеристики, стандартизация и результаты его биологической активности.

В главе 5 посвящена разработке составов и технологии мази эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонитовых глин Таджикистана и изучению её биофармацевтических, микробиологических, фармакологических характеристик и сроков годности.

В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследований в практику.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Исследование физико-химических характеристик бентонитовых глин Таджикистана

Наиболее важными характеристиками сырья, используемого при создании лекарственных форм, являются его химические и физико-химические свойства.

Бентонитовые глины, расположенные на терриюрии Таджикисшна, по своему качественному составу существенно не отличаются от известных монтмориллонитов, но имеется различие в количественном соотношении обменных катионов, что определяет весь комплекс физико-химических и технологических свойств минералов.

Для определения возможности применения бентонитовых глин Таджикистана в фармации проводили их соответствующую оценку по требованиям ФС Результаты испытаний представлены в таблице 1

Таблица 1

С( тветствие бентоннт чых глин Таджикпг ша требованиям ФС

Исследуемый показатель Метод определения Требования ФС 42-1269-79 Результаты анализов

Подлинность Прокаливание порошка раствором нитрата Со (качественная реакция на А1) Остаток синего цвета Положительная проба

рН водного раствора потенциометри-ческий 7,3-8,5 7,2-9,5

испытание на карбонаты качественная реакция на наличие со2 по ГФ X, с. 744 отрицательная реакция отрицательная реакция

содержание хлоридов по ГФ X, с. 747 не более 0,4 % 0,1-0,5 %

содержание мышьяка по ГФ X, с. 745 не более 0,0001 % отрицательная реакция

содержание Ре по ГФ X, с. 744 <1,5% 1,3%

содержание Са по ГФ X, с. 744 <3,5 % 0,1-10,0%

потеря массы при высушивании по ГФ X, с. 760 <13,5% 14,0%

дисперсность, % Фармакопея США, XVII изд. 100-10 мкм <10 мкм

Как видно из данных таблицы, бентонитовые глины Таджикистана удовлетворяют всем требованиям Фармакопейной статьи (ФС) и принципиально могут использоваться в фармации. Конкретная целесообразность такого использования зависит от физико-химических и коллоидных характеристик бентонитовых глин Таджикистана, существенных для технологии лекарственных форм.

Представленные в таблице 2 результаты исследований химического состава некоторых бентонитовых глин Таджикистана даны в сравнении с известными азкамарскими и асканскими бентонитами, применяемыми при изготовлении лекарств.

Как видно из таблицы, соотношение БЮг/АЬОз для большинства бентонитовых глин находится в пределах, характерных для количества монтмориллонита, содержащегося в бентонитовых глинах, известных по многим литературным источникам.

Таблица 2

Химический состав бентонитовых глин

Р:прС! (месторождение) Компоненты, % %

1|0, А|,0, Ре,0, ГеО МпО, М{0 СаО N1,0 К,О п п.п н,о СО, | во, | Р,0.

Анэоб 57,44 0,77 15,07 4,48 039 ода 2,23 0,68 0,44 2,06 1037 5,80 0 II 0,17 Ц 0

Гулен 60,1 0,62 19,70 0,35 0,20 0,02 238 0,98 0,42 I 0,03 8,19 4,18 0,03 || 0.02 || 0.03

Гулпнстп 53.77 (из 17,1 2,45 0,20 0 4,03 2,66 0,5 [ 0,48 15,2 4,44 0,40 || 0,15 || 0

Дяштибсд 39.19 0 47 936 1.02 1.09 0.04 6.18 23,52 039 1,83 24,20 1,90 21,44 || 0 || 0,21

1идды 4,56 06 11.78 3,86 0,58 (1,04 5,71 5,92 0,4 2.73 14.88 3,66 4,4 || 038 || 0,84

Кар.гт 60,49 0.74 12.97 2.84 031 0 2,12 0,60 1,14 2,01 7,45 3,77 0 II 0 0.18

(ултанабад 52.4 0.12 16,27 4,99 0^0 0 2,87 1,56 1.19 0,40 16,99 9,01 0 || 2,74 0,03

Чоркух 58,14 0,6» 14,93 3,88 0,19 0,03 2,53 0,98 0.69 2,91 14,0 5,76 0 || 0,60 0.08

Шаршар «1,4 0,76 13,37 3,(2 030 0 2,48 034 0,89 2,12 11,03 5,18 0 || 0,18 | 0,06

Шеркент 61,08 0,22 13,94 2Д4 0,25 0 2,89 2,79 0,71 0,76 13,5« 4,6 0,11 || 0,41 | 0

Азкамарское 52,26 0,31 18,73 3,18 следы 3,22 130 5,06 034 - -1-1

Аскянское 53,20 0.32 18,4 3.89 - следы 3,64 1,67 2,74 1,56 - •ИИ

В бентонитовых глинах Таджикистана содержание оксидов и Са выше, чем (держание оксидор >' и К, за исключение оентонитов из мес1 >ж-дения Султанабад.

В целом химический состав бентонитовых глин Таджикистана близок к химическому составу бентонитов Азкамарского (Узбекистан) и Асканского (Грузия) месторождений. В изученных образцах находятся все те же оксиды, что и в образцах узбекистанского и грузинского месторождений, а их количественное содержание различается незначительно.

Природа обменной способности монтмориллонита (бентонита)

Для характеристики ионообменной (катионообменной) способности бентонитов была определена их общая обменная ёмкость, т.е. сумма всех обменных катионов - результаты определения для различных бентонитовых глин Таджикистана приведены в таблице 3.

Таблица 3

Ёмкость катионного обмена, мг-экв/100 г бентонитовых глин Таджикистана

Месторождения, №№ образцов Vo, мл Vi, мл V2, мл Е, мгэкв/ЮОг

Султанабад, 16 5,0 22,8 11,1 234,0

Каратаг, 18 5,0 14,9 11,1 76,0

Каратаг - мел, 27 5,0 13,8 11,1 55,0

Гулписта, 31 5,0 14,4 11,1 66,0

Шеркент, 33 5,0 18,0 11,1 38,0

Зидды, 38а 5,0 15,8 11,1 94,0

Зидды, 386 5,0 15,7 11,1 92,0

Зидды, 40 5,0 17,3 11,1 124.0

Обычно ёмкость катионного обмена монтмориллонита (бентонита) колеблется в пределах 80-150 мг-экв/100 г глин По данным таблицы 3 ёмкость катионного обмена всех изученных бентонитовых глин Таджикистана находится в этих пределах, кроме бентонша образца № 16, ёмкость которого досшгает значения 234 мг-экв/100 I глины, что говори! о хорошем качес1ве данного образца с целью его использования в виде сырья при производстве мазей.

Обменные катионы в бентонитах чаще всего представлены ионами натрия и кальция. Однако результаты проведенного эксперимента показали, что у бентонитов Гулписта и Зидды в качестве обменных катионов выступают также и ионы калия (табл 4) Для бентонита № 16 обменные катионы представлены только ионами натрия Количество обменных катионов в различных бентонитах колеблется в пределах 1 -2% от общей массы бентонита.

Таблица 4

Содерл ..ние обменных канонов в бентонитах различного

Разрез (месторождение), №№ проб Обменные катионы

К* Са2+ Сумма обменных катионов

Анзоб, б/н 0,124 - 0,320 0,444

1 улен, б/н 0,118 - 0,922 1,040

1 улписта, 31 0,231 0,426 0,246 0,903

Даштибед, б/н 0,115 - 0,861 0,976

Зидды, 39 0,133 0,154 1,206 1,493

Каратаг, 18 0,261 - 0,085 0,345

Султанабад, 16 0,333 - - 0,333

Чоркух, б/н 0,293 - 0,777 1,071

Шаршар, 52 0,191 - 0,060 0,252

Шеркент 33 0,206 - 0,106 0,313

Прежде всего, обращает на себя внимание то, что содержание обменных катионов находится на уровне 0,25-1,49 мг-экв/100 г глины, что является наиболее характерным для бентонитов Как было сказано выше, обменные катионы чаще всего бывают представлены ионами натрия и кальция, а их соотношения зависят от месторождения бентонита. В частности, обменные катионы бентонита Султанабада исключительно состоят из ионов натрия, в то время, как другие монтмориллониты, в основном, из ионов кальция. В целом, общее содержание ионов щелочных и щелочноземельных элементов в бентонитовых глинах Таджикистана достигает значительных величин.

Таким образом, высокое значение обменной емкости в бентонитах Анзоб, Гулен, Даштибед, Каратаг, Чоркух, Шаршар, Шеркент объясняется наличием катионов натрия и кальция, которые компенсируют отрицательный заряд решетки, в результате чего в структуре монтмориллонита появляется четырёхвалентный изоморфизм Присутствие в бентонитах поверхностных гидроксиль-ных групп повышает катионообменную способность посаедних Так, наличие гидроксильных групп $¡-011 группировок) на внешней поверхности монтмориллонита Султанабад, выявленных в результате 1ермо1 равиметрических исследований, обеспечивают высокие технологические свойства данного бентонита.

Влажность бентоинтовых глин Таджикистана

Б~|Г нитовые глины, по авнению с другим! шами глин, характеризуются высокой водопоглощаемостью или влагоёмкостью Наиболее влагоёмкими являются щелочные бентониты, в которых вода может находиться как в свободной форме, являясь сравнительно легко отделяемой, так и в связанной форме, т.е. удерживаемой обменными катионами.

Рассмотрим только воду, которая может удерживаться глинами при относительно низких температурах и которая удаляется при нагревании до температуры 100-150°С. В таблице 5 приведены показатели влажности бентонитов, на основании которых рассчитано количество определяемой воды, выделенной при 110° С.

Таблица 5

_Влажность бентонитовых глин Таджикистана_

Месторождение № проб образцов Влажность, \¥% Кол-во воды на 1 г глины

1 3,949 0,040

4 7,932 0,080

Султанабад 9 6,184 0,062

11 5,776 0,058

12 6,403 0,064

16 10,501 0,105

18 2,489 0,025

20 1,889/ 0,020

Кара! а! 22 2,644 0,026

24 1,569 0,016

25 1,993 0,020

Каратаг мел 27 1,068 0,0107

30 2,079 0,021

Гулписта 31 1,426 0,014

33 4,735 0,047

Ширкент 34 5,340 0,053

35 5,212 0,052

37 1,088 0,011

38 1,400 0,014

39 1,200 0,012

40 4,900 0,050

41 2,670 0,027

43 2,330 0,023

46 2,326 0,023

51 5,224 0,052

52 5,62 0,036

60 3,76 0,038

Как видно из данных таблицы 5, водоудерживаюшая способность бентонитов вар! ир; ет в широких переч ах - от 1,09% до '0 "0%, что связано с >м чием свободных гидроксильных групп в структуре монтмориллонита, так как вода, находящаяся в порах и между плоскостями кремнекислородных тетраэдров, связана водородными связями. Следует предположить, что различие количества воды, удерживаемой в этих слоях в разных образцах бентонитов, происходит за счёт влияния обменных катионов.

Гндрофильность бентонитовых глин Таджикистана

Надёжной количественной характеристикой гидрофильных и адсорбционных свойств бентонитовых глин является их удельная поверхность (табл. 6).

Таблица 6

Удельная поверхность 5, м2/г, сорбционная вода А, моль/г и степень набухания Р, см3 _бентонитовых глин Та джикистана_

№ образцов А, моль/г Р,см3 в, м2/г

Султанабад 5,80 27,29 516,75

Каратаг 1,39 3,80 123,80

Каратаг-мел 0,60 2,99 53,45

Гулписта 0,80 3,47 31,28

Шеркент 2,61 4,62 232,5

Зидды 0,78 3,48 69,50

Зидцы-уголь 2,78 3,78 247,7

Шаршар 2,00 4,75 178,2

Из таблицы 6 видно, что найденные значения удельной поверхности для бентонитов различных месторождений, хорошо коррелируются с их процессом набухания, который в значительной степени зависит от природы катионов, находящихся между алюмосликатными слоями и количества сорбционно связанной воды. Следовательно, можно считать, что различие природы и соотношение катионов в бентонитовых глинах существенно влияет на процессы сорбции органических веществ.

Термогравиметрические исследования бентонитовых глин Как известно, нагревание бентонитовых глин до температуры, выше комнатной, ведет к потере ими межслоевой, поровой и адсорбционной воды

Результаты термографических исследований представлены в таблице 7 и на рисунке 1 Изучение термограмм исследованных образцов показывает, что их общий вид идентичен термографическим кривым бентонитовых глин, из-

вестиых во всём мире Ото даёт возможность более убедительно утверждать о аличии монтморит 11 ита в составе изучче лх образцов.

Таблица 7

Температура эндо- и экзотермических эффектов, °С

Месторождение, № обрата Эндотермические эффекты Экзотермические эффекты

I П Ш IV I II III IV

Султанабад 140 390 650 || 810 - - 510 880

Зидды 75 390 530 | - 180 380 430 960

Шаршар 120 400 810 - 380 450 880

Рис. 3.1. Термографические кривые бенюнитовых глин. А - Султанабад, В - Шаршар, С - Зидды

На термограммах наблюдается значительный эндотермический эффект при 80-150°С, характеризующийся удалением адсорбционной воды. При температуре 200-250°С в случае бентонитов Султанабад и Шаршар фиксируется перегиб кривых, вызываемый удалением межслоевой воды монтмориллонита Эндоэффекты, наблюдаемые при 390-530°С и связаны с удалением кон-

ституционной (координационной и гидратной) и гидроксильной воды монтмориллонита соответственно Эндотермические эффекты при -)40-150оС с после-

дующим слабым экзотермическим эффектом при 330-380°С на термограммах свидетельствуют о ■ тичии гипса в данин образцах.

Наличие экзотермических эффектов при температурах 180, 330 и 380°С в бентонитах Зидды и Шаршар вероятно связано с присутствием органического материала, так как при температурах 200-300°С начинается его окисление. Окисление сульфидов, которые присутствуют во многих глинах (часто в форме пирита), начинается между 400 и 500°С. Пирит в этом температурном пределе в присутствии большого количества кислорода теряет серу и окисляется с резкой экзотермической реакцией.

При температурах выше 500°С, а в некоторых случаях до 900°С, из глинистых минералов начинает удаляться гидроксильная вода. Точная температура и скорость потери гидроксила зависят от природы глинистых минералов. Так, монтмориллонитовые глинистые минералы теряют гидроксильную воду в пределе 400-700°С. Как правило, потеря воды у глин, содержащих железо происходит при наиболее низких температурах, тогда как образцы, включающие магний теряют воду при максимально высоких температурах.

На кривых термограммы у бентонита Сутанабада обнаружена двойная эндотермическая реакция (650 и 810°С), связанная с потерей гидроксильной воды, что указывает на ступенчатую дегидратацию. Данную особенность можно объяснить присутствием в нем смеси двух разновидностей монтмориллонита, которые имеют разный состав и, по-видимому, ^несколько различную структуру Это подтверждается наличием высокой степени набухании, характерного для бентонита Султанабад.

Структура безводных монтмориллонитов сохраняется до температуры порядка 900°С. Кривые термограммы в данном температурном интервале свидетельствуют об эндотермической реакции, по-видимому, связанной с разрушением безводной структуры.

Термографические кривые нагревания и обезвоживания исследуемых бентонитов, за исключением Султанабада, не отличаются от таковых для бентонитов Таджикистана, описанных ранее.

На основании термографических исследований можно заключить, что бентониты разных месторождений отличаются между собой содержанием свободной (межслоевой), связанной (гидратационной) и гидроксильной (связанной со свободными гидроксильными группами, находящимися на поверхностях глины) воды. В отличие бентонита Султанабада и Шаршара, у бентонита Зидды не обнаружено наличие гидроксильной воды, что объясняется его слабой степенью набухаемости.

Эфирное масло душицы мелкоцветковой

' хледуемое сырье , ава душицы мелк^ тковой Ог'щатчч уНап-¡Иит Соп1яс1г. (сем. Губоцветные ЬаЫШае) собрана в период массового цветения Эфирное масло получали из свежесобраннрго сырья методом гидродис-цилляции. Выход масла составлял от 0,4 до 0,8% Масло'представляет собой легко подвижную жидкость с приятным запахов и острым жгуЧим вкусом.

Полученное эфирное масло душицы анализировали на хроматографе «СНЯОМ-5», марка колонки БЕ-ЗО, длина колонки 3 м. £азоноситель - гелий (Не)под давлением 6,5 105 Па; скорость расхода водорода - 40 мл/мин; скорость расхода воздуха - 400 мл/мин Температуру программировали от 100 до 260°С со скоростью 5 град/мин. •

Содержание компонентов эфирного масла (-табл 8) выражено через соотношение площади пика отдельного вещества к сумме площадей всех пиков на"

"" ' " Таблица 8

Компоненты эфирных масел- душицых>$мкнгове£шой и душицы мелкоцветковой- . -

Соединение Содерж ание, %

Душица обыкновенная Душица мелкоцветковая

а-туйен 0,61 2,90

а-пинен * 1,20 4,21 . '

кам(|)ен 0,50 0,35 -ч-

Р-пинеК 5,33 5,63

сабинен 1J0 . . . 1,84

мирцен 1,30 0,38

а-терпинен 1,20 0,82

терпинолен 1,50

п-цимол 3,20 2,70

лимонен 7,20 - • ' ' 8,52

1,8-ценнеол 14,10 9,67

и-октиловый спирт 0,50 0,53

ли нал ил ацетат 1,50 1,35

линалоол 5,16 1,98

бурбонен 0,10 ' 0,18

элемен 0,10 0,16

терпиненол-4 7,70 2,56

кариофиллен 14,80 2,00 . •

a-i умилен 0,10. 0,11

борнеол 9,00 3,21

а-терпинеол 1,00 2,64

тимол 11,00 35,20

карвакрол 10,00 15,60

i

j i

хроматограмме («VI -од нормализации»1 Идентификацию по " ¿нных данных по составу эфирного масла душицы мелкоцветковой проводили в сравнении с литературными данными для душицы обыкновенной. Как видно из таблицы 8, отдельные компоненты эфирного масла душицы мелкоцветковой по составу и содержанию существенно не отличались от показателей, характерных для фармакопейного сырья. Разнообразность количества компонентов, по-видимому, зависит от времени сбора и места произрастания душицы мелкоцветковой.

Разработка мази с эфирным маслом душицы мелкоцветковой на бентонитовой основе и ее . биофармацевтическое исследование

В качестве возможных мазевых основ нами исследовались образцы глин из различных бентонитовых месторождений Таджикистана. Первоначальную оценку качества изучаемых бентонитов проводили путём исследований физико-Механических свойств: набухаемости и гелеобразования, которые являются основными крйтериями при отборе образцов для дальнейших исследований. Результаты исследований представлены в таблице 9.

- ! * ~ Таблица 9

л Набухаемость и гелеобраз вание бентонитов из-различных месторождений Таджикистана

. „ Местонахождения Набухаемость Р, см Гелсобразовамие, мл

Анзоб 3,04 15,20

Гулён 7,50 68,40

Гулписта 3,47 15,10

Даштибед 2,99 12,30

Зидды 3,48 16,70

Каратаг 2,99 11,30

Султанабад 12,07 100,00

Чиркух 8,30 85,60

Шйршар 4,75 10,80

Шеркент 4,62 22,40

Как видно из таблицы, наилучшие показатели по степени набухаемости и гелеобразования обнаруживаются у бентонита из Султанабадского месторождения Поэтому, дальнейшее исследование проводили именно с ним

Выбор оптимального состава мази, в зависимости от её вязкости, высы-хае ■ оти и тиксотропнгк- ■ представлен в табни* 10.

Таблица 10

Высыхаемость, эффективная вязкость и тиксотропность бентонитовых основ

№ Состав* Содержа ние компонентов, % Высыха емость, дни Эффективная вязкость, пуаз Тиксотроп Ность

1 Бентонит Вода очищенная 10,0 90,0 98 37,5 1987

2 Бентонит Вода очищенная 12,0 88,0 105 32,6 3492

3 Бентонит Глицерин Вода очищенная 14,0 10,0 76,0 110 28,3 4380

4 Бентонит Глицерин Вода очищенная 16,0 15,0 69,0 125 24,7 3743

5 Бентонит Глицерин Вода очищенная 18,0 18,0 64,0 117 23,8 2448

6 Бентонит Глицерин Вода очищенная 20,0 20,0 60,0 120 23,1 2384

*В состав каждой из бентонитовых основ, кроме представленных в таблице компонентов, включено также около 1% (входит в цифровой показатель воды) эфирного масла душицы мелкоцветковой.

Как видно из таблицы, высыхаемость исследуемых составов различна и, в зависимости от концентрации компонентов, варьирует от 98 до 125 дней. Наибольшей высыхаемостью обладает состав № 1, а наименьшей - состав № 4. Дальнейшее увеличение количества глицерина на высыхаемость влияла незначительно. Это объясняется тем, что набухаемость бентонита в глицерине меньше, чем в воде Наименьшую эффективную вязкость имели составы № 5 и 6. При увеличении концентрации глицерина от 15 до 20% эффективная вязкость уменьшалась.

Таким образом, исследования по определению высыхаемости, а также эффективной вязкости и тиксотропности показали, что по комплексу этих характеристик оптимальной является основа, состоящая из 16% бентонита, 15% глицерина и 69% воды Разработанный состав имеег мазеобразную консистенцию белого цвета с сероватым оттенком, хорошо намазывающуюся на кожу и легко смывающуюся водой

Подбор оптимальной концентрации эфирного масла душицы и г учение антимикр«')> >й активности мат • Субинак»

Для доказательства оптимального содержания действующего вещества с целью достижения максимального терапевтического эффекта лекарственной формы были изготовлены мази с различным содержанием эфирного масла душицы: 0,5; 1,0; 1,5; 2,0%. Активность полученных мазей исследовалась методом диффузии в агар, зараженный патогенными микроорганизмами (табл.11).

Как видно из таблицы, мазь из эфирного масла душицы мелкоцветковой обладает высокой антимикробной активностью в любой представленной концентрации эфирного масла.

Таблица 11

Антимикробная активность мазей с различными концентрациями эфирного масла душицы

Испытуемые микроорганизмы Зона задержки образцов, мм

при содержании эфирного масла, %

0,5 1,0 1,5 2,0

Е coli 19,5±0,4 39,0±0,6 52,3±0,6 61,5±0,5

Ps. aerugenosa 12,0±0,6 19,0±0,7 32,0±0,7 44,3±0,6

St. aureus 23,0±0,2 42,«±0,6 55,7±0,5 69,2±0,7

р < 0,05

Результаты исследований раздражающего действия мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой показали, что мазь на основе бентонита Султанаба-да, содержащая ]%, эфирного масла душицы, не оказывала раздражающего действия и обеспечивала высокую терапевтическую эффективность.

Таким образом,, оптимальный состав антимикробной мази душицы будет следующим:

Эфирного масла душицы мелкоцветковой - 1 ,0;

Бентонита Султанабад -16,0;

Глицерина -15,0;

Воды очищенной - 68,0.

На данную лекарственную форму разработана нормативно-техническая документация, на основании которой утверждена ВФС Получен акт о внедрении научно-технической разработки на базе фармацевтической фабрики Минздрава Республики Таджикистан.

Антимикробная активность разработанной мази в сравнении с мазями, выпускаемыми фармацевтическими компаниями

Результат исследований активности разработанной мази из эфирного масла

душицы мелкоцветковой в сравнении с активностью некоторых образцов, вы-пускаем1'* фармацевтическими эмпаниями, предел ч' он в таблице 12 Кт 1д-но из таблицы, противомикробное действие мази с эфирным маслом душицы мелкоцветковой на основе бентонита значительно превышает бактерицидность сравниваемых аналогичных по назначению мазей, выпускаемых фармацевтическими компаниями.

Таблица 12

Антимикробная активность некоторых мазей, выпускаемых фармацевтическими компаниями_

Испытуемые микроорганизмы Зона задержки роста образцов, мм

Ихтиоловая мазь Тетрациклино вая мазь Эритромициновая мазь Мазь с эфирным маслом душицы

F, coli 14,0±0,8 28,0±0,6 32,0±0,4 39,0±0,6

Ps aeroginosa 11,0±0,3 16,0±0,3 20,№0,7 19,0±0,7

St aureus 19,0±0,3 25,0±0,2 28,0±0,6 42,0±0,6

р < 0,05

Высвобождение эфирного масла душицы из бентонитовых основ

Интенсивность высвобождения эфирного масла из разработанной мази представлена в таблице 13, из которой видно, что за 3 часа высвобождение эфирного масла статическим и динамическим методами диализа составило 40,4% и 76,3% соответственно, что свидетельствует о преимуществе динамического метода.

Таблица 13

Кинетика высвобождения эфирного масла душицы из мази _статическим и динамическим методами, в %_

Метод диализа Г Вре мя высвобождения мин

I " 30 1 45 . 60 90 120 150 i 180

1 Статический 1 1,2 3,6 1 6,4 1 11,5 22,3 28,7 37,7 i 40,4

2 Динамический JLäU 7,6 1 15,4 1 23,5 39,6 58,7 69,2 \ 76,3

Исследования стабильности мази из эфирного масла душицы установление сроков её годности в процессе хранения

Исследование стабильности мази с экстрактом душицы на бентоните проводили в процессе ее хранения в естественных условиях, а также при различных температурных режимах температуре холодильной камеры 4°С и при хранении в термостате при 40°С. Активность препарата оценивали по показателям противомикробной активности и количественному содержанию в лекарственной форме эфирного масла. Результаты проведенного эксперимента показали, что мазь «Субинак» оставалась стабильной в течение двух лет

ВЫВОДЫ

1. На основании химических и физико-химических методов анализа доказана перспективность использования в фармацевтической практике бентонитовых глин Таджикистана. Установлена идентичность минералогического состава бентонитов Таджикистана известным в мире бентонитовым глинам по содержанию в них монтмориллонита. Показано, что незначительные отличия их физико-химических и технологических свойств зависят от различий в количественном соотношении обменных катионов.

2. Проведено определение общей обменной емкости исследуемых бентонитовых глин и выявлена их ионообменная (катионная) способность. Установлены наиболее высокие значения емкости катионного обмена у бентонита Салтанабадского месторождения, связанные с большим содержанием в нем катионов натрия, что свидетельствовало о высоком качестве данного минерала.

3. Термогравиметрическим методом исследования установлены отличия свойств бентонитов различных месторождений Таджикистана по содержанию в них свободной, связанной и гидроксильной воды. Отмечено, что слабая набухаемость отдельных образцов глин связана с низким содержанием в них гидроксильной воды Установлена прямо пропорциональная зависимость степени набухаемости бентонитов от содержания в них гидроксильной воды. По показателю степени набухаемости и гелеобразования отобран наиболее перспективный для использования в качестве мазевой основы бентонит Султана-бадского месторождения.

4. Доказана высокая противомикробная активность эфирного масла душицы мелкоцветковой. Показано, что противомикробная активность изучаемого эфирного масла не снижается при сорбировании его бентонитом Сул-танабадского месторождения, отобранным в качестве основного объекта исследования.

5 Проведена сравнительная оценка противомикробной активности мази с эфирным маслом душицы мелкоцветковой в сравнении с аналогичными по фармакологическому действию мазями, зарегистрированными в России и Таджикистане. Показано, что противомикробная активность разработаннойй мази на бентонитовой основе значительно превышает бактерицидность известных препаратов.

6 Результаты изучения фармакокинетических параметров разработанной лекарственной формы показали высокую скорость высвобождения эфирного масла душицы из бентонитовой основы, что свидетельствовало о правильности подбора состава потенциального лекарственного препарата «Суби-

мак» Доклиническое исследование мази эфирного масла душицы, проведенные i двух видах жиро ых, подтвердили м окий противомикр>' ¡ый эффект препарата.

7 В процессе хранения мази «Субинак» при повышенной температуре, температуре холодильной камеры и в естественных условиях установлен срок годности лекарственной формы, который составил не менее двух лет.

8. На основании проведенных физико-химических и биофармацевтических исследований, а также результатов изучения специфической активности бентонитов и эфирного масла душицы мелкоцветковой, разработан технологический регламент на получение мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонита. Фармакопейным комитетом МЗ Таджикистана утверждены три ВФС на бентонит медицинский, масло душицы мелкоцветковой и мазь «Субинак».

Список опубликованных работ

1. Халифаев Д.Р., Куканиев М.А., Тагоймуродов З.Н , Холназаров Б.М. Зависимость адсорбции эфирного масла герани на бентониновые глины от природы растворителя. - Материалы VIII Национального конгресса «Человек и лекарство». - M., 2001.-С. 150.

2 Халифаев Д.Р., Холназаров Б M, Зоиров С.Б., Халифаев Х.Д. Очистка бентониновых глин - Фармация и народная медицина - Душанбе, 2001. - С 196.

3 Халифаев Д.Р., Эльназаров М.Х., Холназаров Б.М. Некоторые показатели при выборе основ мягких лекарственных форм -Там же - С. 118-120.

4. Халифаев Д.Р., Куканиев M А., Хайдаров К.Х., Холназаров Б.М. Адсорбция сульфадиметоксина на бентонитовых глинах. - Достижения в области химии и химических технологий. - Душанбе: Ин-т химии АН РТ, 2002. - С. 9597.

5 Куканиев М.А., Холназаров Б М., Халифаев Д Р Адсорбционная способность бентонитовых глин Таджикистана. - Мат междунар. конф. «Современное состояние водных ресурсов Таджикистана - проблемы и перспективы рационального использования». - Душанбе, 2003. - С. 58.

6 Бунятян Н.Д., Халифаев Д.Р., Куканиев M А , Сафиев X , Холназаров Б M Термогравиметрические исследования бентонитовых глин Таджикистана, применяемых в фармации - Фармация -2003,№3. С 27-28

7 С'алимов Т M , Халифаев Д Р , Куканиев M А , Холназаров Б M , Юсупов M M , Мулоджанова M Д Средство, обладающее антибактериальной активностью / Изобретение № 03000788 от 10 06.2003

8 Бунятян Н.Д., Халифаев Д.Р., Холназаров Б.М., Куканиев М.А., Салимов ТМ ' 4 следование адсор^и 11 эфирного масла дуиицы на бентоните целью создания лекарственных препаратов. - Фармация. - 2003, № 6. - С. 26-27.

9 Холназаров Б.М Разработка и биофармацевтическое исследование мази из эфирного масла душицы на основе бентонита: Экспресс-информ./НПИЦентр РТ. - Душанбе. - 2004, вып. 1. - 12 с.

10. Бунятян Н.Д., Халифаев Д.Р., Шаропов Ф.С., Холназаров Б.М., Куканиев М.А., Салимов Т.М. Сорбция эфирного масла иссопа зеравшанского на бентонитах с целью создания лекарственных средств. - Фармация. - 2004, № 1. -С. 39-41

РНБ Русский фонд

2006-4 20650

V,"

i о-

а » г а

15 m 2004

Актуальность проблемы. За последние годы в мире ясно очертилась тенденция ускоренного роста потребностей в медикаментах. Значительная часть этих потребностей удовлетворяется препаратами, полученными из лекарственного сырья природного происхождения. Проверка 20 тысяч рецептов, выданных в Республике Таджикистан (РТ) за один год, показала, что 43% из них — это именно лекарства, полученные из сырья растительного и минерального происхождения. О росте потребностей в этих лечебных средствах, в том числе производимых из эфирномасличных растений, говорят и факты всё более усиливающегося спроса на них на мировом рынке, а также непрерывное увеличение цен на такие лекарства.

Одним из факторов, влияющих на популярность природных лечебных средств и возвращение к ним, является то, что они, несомненно, отвечают одному из наиболее правильных направлений в развитии лечебного дела, а также соответствуют важной проблеме современности — проблеме охраны окружающей среды.

Таджикистан разнообразен по условиям, благоприятствующим развитию растительного мира. Низкие и высокие равнины и речные долины, высочайшие цепи гор, разнообразие почвенных условий и климата, сравнительно большое количество солнечных дней в году — это существенные факторы для формирования растительного богатства республики.

Несмотря на сравнительно малую площадь, в Таджикистане произрастает около 4500 видов высших растений [98], в то время как в Англии, по площади намного превосходящей РТ, имеется лишь 1500 видов. По предварительным подсчётам, около 1500 видов лекарственных растений, произрастающих в Таджикистане, применяется в народной медицине республики и лишь небольшая часть их используется в научной медицине.

Из лекарственного сырья нерастительного происхождения особенным богатством отличается минеральное сырьё республики, из которого наиболее перспективным для фармацевтического производства на данном этапе оказались местные бентонитовые глины (БГ).

После приобретения суверенитета в Таджикистане, при Министерстве здравоохранения (МЗ) республики, был создан Научно-экспериментально-производственный фармацевтический Центр по разработке новых лекарственных препаратов на основе местного сырья (НЭПФЦ), что позволило интенсифицировать фитохимические и технологические исследования. Значительная научно-исследовательская работа (НИР) по изучению отечественных лечебных растений и минералов привела к накоплению знаний и опыта, на базе которых создаётся промышленное производство как классических, так и новых лечебных средств из сырья природного происхождения.

Поэтому, расширение исследований местного сырья, с целью его использования для производства лекарственных препаратов, свидетельствует об актуальности данной диссертационной работы, её практическом значении для фармацевтической отрасли.

Диссертационная работа «Разработка и исследование мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонита» является составной частью исследований, проводимых НЭПФЦ в тесном многолетнем сотрудничестве с научными учреждениями СНГ, особенно с Московской медицинской академией им. И.М. Сеченова.

Цель и задачи исследования. Основной целью настоящей работы является создание новой лекарственной формы на основе перспективного местного сырья. Для этого необходимо было решить следующие основные задачи:

- изучить необходимые при. разработке новой лекарственной формы химические, физико-химические и технологические свойства бентонитовых глин Таджикистана (БГТ) как фармацевтического сырья, перспективного для этой цели;

- выделить эфирное масло (ЭМ) из душицы мелкоцветковой и исследовать его химический состав;

- провести комплекс физико-химических и биофармацевтических исследований, необходимых при разработке рационального состава и технологии мази из ЭМ душицы мелкоцветковой на основе БГТ;

- изучить микробиологическую и фармакологическую активность субстанции и мази из ЭМ душицы мелкоцветковой на основе БГТ;

- изучить стабильность мази при её хранении;

- подготовить нормативно-техническую документацию на сырьё и разрабатываемую лекарственную форму.

Научная новизна и теоретическая значимость результатов исследований. Впервые в отечественной практике показана возможность комплексного исследования сырья местного происхождения для получения лекарственных препаратов. Доказана пригодность БГТ для использования в фармацевтической науке и производстве. Установлена зависимость качества бентонитов от степени их набухания, содержания щелочных и щелочноземельных элементов. В результате комплекса физико-химических и биофармацевтических исследований ЭМ душицы мелкоцветковой и БГТ получена лекарственная форма — мазь «Субинак». Она рекомендуется как противомик-робное и бактерицидное средство. Изучена стабильность разработанной мази и определён срок её годности.

Практическая значимость работы. Доказана практическая ценность для фармацевтического производства природного сырья Таджикистана — БГ и ЭМ душицы мелкоцветковой. Впервые установлено, что наиболее пригодными к использованию в качестве мазевых основ являются бентониты, выявленные в месторождениях Гулён, Султанабад и Чоркух. Впервые получено ЭМ (и изучен его химический состав) из душицы мелкоцветковой как фармакологически ценного сырья, имеющего потенциальные запасы в Республике Таджикистан и поэтому являющегося перспективным для фармацевтического производства. Определены характеристики предлагаемого для технологических процессов сырья — ЭМ душицы мелкоцветковой и местных БГ. Разработаны состав и технология мази из этого сырья, получившей название «Субинак». Проведено доклиническое изучение разрабатываемой лекарственной формы (прил. 7, 8). Подготовлена нормативно-техническая документация на сырьё, используемое при производстве мази «Субинак» и на саму мазь, на основании которой составлена Временная фармакопейная статья (ВФС, прил. 3). Составлены лабораторный и производственный регламенты на мазь «Субинак» (прил. 4 и 9). Получен акт о внедрении научно-технической разработки в производство на базе фармацевтической фабрики МЗ РТ (прил. 6). Результаты диссертационных исследований внедрены в учебный процесс в Таджикском государственном медицинском университете им. Абуали ибн Сино (прил. 10) и на кафедре фармакологии с курсом технологии лекарств факультета последипломного профессионального образования провизоров Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (прил. 11).

Положения, выносимые на защиту:

1. Характеристики БГТ и ЭМ душицы мелкоцветковой как фармацевтического сырья.

2. Степень пригодности БГТ и ЭМ душицы мелкоцветковой для фармацевтической технологии.

3. Разработка лекарственной формы из ЭМ душицы мелкоцветковой на основе БГТ.

4. Биологическая оценка разработанной лекарственной формы из ЭМ душицы на основе БГТ.

5. Результаты определения показателей качества мази «Субинак».

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались и обсуждались на VIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2001г.); международной научной конференции «Экологические особенности биологического разнообразия» при Академии наук Республики Таджикистан (АН РТ), (Душанбе, 2002 г.); республиканской конференции «Достижения в области химии и химической технологии» при институте химии АН РТ (Душанбе, 2002 г.); республиканской научной конференции «Актуальные проблемы производства лекарственных препаратов на основе местного сырья» при НЭПФЦ МЗ РТ (Душанбе, 2002 г.); международной научно-практической конференции «Современное состояние водных ресурсов Таджикистана — проблемы и перспективы рационального использования» при АН РТ (Душанбе, 2003 г.).

Публикация материалов диссертации. По теме диссертации зарегистрирована в Национальном патентно-информационном центре РТ. заявка на изобретение (per. № 03000788 от 10.06.2003 г.), подготовлены три ВФС и опубликовано 10 научных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 126 страницах машинописного текста, содержит 30 таблиц, 9 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследований, трёх глав экспериментальных исследований и их обсуждения, общих выводов, списка литературы, включающего 198 литературных источников, в том числе 76 на иностранных языках, и 11 приложений.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. На основании химических и физико-химических методов анализа доказана перспективность использования в фармацевтической практике бентонитовых глин Таджикистана. Установлена идентичность минералогического состава бентонитов Таджикистана известным в мире бентонитовым глинам по содержанию в них монтмориллонита. Показано, что незначительные отличия их физико-химических и технологических свойств зависят от различий в количественном соотношении обменных катионов.

2. Проведено определение общей обменной ёмкости исследуемых бентонитовых глин и выявлена их ионообменная (катионная) способность. Установлены наиболее высокие значения ёмкости катионного обмена у бентонита Салтанабадского месторождения, связанные с большим содержанием в нем катионов натрия, что свидетельствовало о высоком качестве данного минерала.

3. Термогравиметрическим методом исследования установлены отличия свойств бентонитов различных месторождений Таджикистана по содержанию в них свободной, связанной и гидроксильной воды. Отмечено, что слабая набухаемость отдельных образцов глин связана с низким содержанием в них гидроксильной воды. Установлена прямопропорциональная зависимость степени набухаемости бентонитов от содержания в них гидроксильной воды. По показателю степени набухаемости и гелеобразования отобран наиболее перспективный для использования в качестве мазевой основы бентонит Сул-танабадского месторождения.

4. Доказана высокая противомикробная активность эфирного масла душицы мелкоцветковой. Показано, что противомикробная активность изучаемого эфирного масла не снижается при сорбировании его бентонитом Султанабадского месторождения, отобранным в качестве основного объекта исследования.

5. Проведена сравнительная оценка противомикробной активности мази с эфирным маслом душицы мелкоцветковой в сравнении с аналогичными по фармакологическому действию мазями, зарегистрированными в России и Таджикистане. Показано, что противомикробная активность разработанной мази на бентонитовой основе значительно превышает бактерицидность известных препаратов.

6. Результаты изучения фармакокинетических параметров разработанной лекарственной формы показали высокую скорость высвобождения эфирного масла душицы из бентонитовой основы, что свидетельствовало о правильности подбора состава потенциального лекарственного препарата «Субинак». Доклиническое исследование мази эфирного масла душицы, проведённые на двух видах животных, подтвердили высокий противомикробный эффект препарата.

7. В процессе хранения мази «Субинак» при повышенной температуре, температуре холодильной камеры и в естественных условиях установлен срок годности лекарственной формы, который составил не менее двух лет.

8. На основании проведенных физико-химических и биофармацевтических исследований, а также результатов изучения специфической активности бентонитов и эфирного масла душицы мелкоцветковой, разработан технологический регламент на получение мази из эфирного масла душицы мелкоцветковой на основе бентонита. Фармакопейным комитетом МЗ Таджикистана утверждены три ВФС на бентонит медицинский, масло душицы мелкоцветковой и мазь «Субинак».