Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Исследования по разработке и стандартизации таблеток плодов боярышника

На правах рукописи

1 5 ЛЕК 1В0С

ЕВДОКИМОВА Ольга Владимировна

ИССЛЕДОВАНИЯ ПО РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ ТАБЛЕТОК ПЛОДОВ БОЯРШНИКЛ

(15.00.02 - фармацевтическая химия и фармакогнозия, ■ 15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дела).

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук.

Москва, 1996 г.

Работа выполнена И.М. Сеченова Научные руководители

в Московской медицинской академии имени

- доктор фармацевтических паук, профессор И. А. Самшшна

- кандидат фармацевтических наук, доцент И.А.Девяткина

Официальные оппоненты

доктор фармацевтических наук, профессор Л.А.Муравьева кандидат фармацевтических наук, с.н.с. О.В.Щербакова

Ведущая организация

Научно- исследовательский институт фармации

.Защита диссертации состоится 16 декабря 1996 г. в 13.00 часов на заседании Диссертационного Совета (Д 074.05:06) при Московской медицинской академии имени И.М.Сеченова (Москва, Никитский бульвар, Д.13). ' "

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ММА имени И.М.Сеченова (Москва, Зубовский бульвар, д.1).

Автореферат разослан 15 ноября 1996 г.

Ученый секретарь ; Диссертационного Совета

Д- 074.05.06' кандидат фармацевтических наук, доцент

Н.П.Садчикова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. В связи с увеличением в последнее десятилетие числа заболеваний сердечно-сосудистой системы и смертности от них поиск, изучение и внедрение в медицинскую практику препаратов для лечения сердечно-сосудистых заболеваний является чрезвычайно актуальным. Особое значение и ценность имеют нативные препараты из лекарственного растительного сырья, так как они обеспечивают комплексное воздействие на организм больного. Среди лекарственного растительного сырья, оказывающего влияние на сердечно-сосудистую систему, наше внимание привлекли растения рода Боярышник, так как они издавна известны как источники получения препаратов сердечно-сосудистого действия. Чаще всего используются препараты боярышника, представляющие собой водные или водно-спиртовые извлечения, в которые переходит только часть биологически активных веществ, находящихся в сырье. При наличии многолетнего - опыта по исследованию сырья и. жидких лекарственных средств боярышника, остается не - решенной задача создания таблетированных лекарственных форм боярышника. Решение этого вопроса, во-первых, позволит максимально и комплексно использовать сумму биологически активных веществ, а во-вторых, подойти к решению вопроса о безотходной технологии получения лекарственных препаратов из сырья боярышника.

Наша работа является продолжением научных исследований кафедры фармакогнозии по боярышнику, проводимых совместно с кафедрой Общей фармацевтической и биомедицинской технологии.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы явилось изучение возможности получения таблеток из плодов боярышника и разработка • вопросов их стандартизации.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие

- г -

задачи:

1. Провести сравнительное изучение химического состава биолог чески активных веществ сырья и препаратов боярышника.

2. Исследовать возможность получения таблеток плодов боярышн:

\

ка, разработать рационадьыыи состав. •

3. Изучить вопросы стандартизации таблеток плодов боярышника.

4. Обобщить полученные результаты и на их основании разработа проект нормативной документации (ВФС) на таблетки плодов боярышник;

Научная новизна результатов исследования. Разработано лекар( твенное средство на основе плодов боярышника. Получено Решение о ы даче патента на изобретение N .94041842/14 от 28 марта 1996 года I "Средство для лечения пароксизмальной тахикардии и ангионеврозов".

Проведено сравнительное изучение содержания экстрактивных ве ществ, флавоноидов, тритерпеновых соединений, полисахаридов, липе фильного комплекса цветков, плодов и побегов' боярышника; изучен вд нокислотый состав, фосфолипиды, каротиноиды плодов боярышника.

Предложены-альтернативные методики определения "флавоноидов сырье боярышника.

,На основании проведенных исследований технологических х ар акте ристик порошков плодов боярышника'Предложен рациональный состав таб деточкой смеси, позволяющий получать таблетки плодов-боярышника ме тодом прямого прессования, отвечающие требованиям ГФ XI ст. "Таблет ки". Разработан проект лабораторного регламента получения тайлето плодов боярышника.

разработаны характеристики подлинности таблеток плодов боарии ' ника: микроскопия с псдуоб!?ш описанием диагностических признаков ; качественные реакции, основанные на определение оспаъных груп'т биологически активных соединении. Разработаны нормы показателей кагзст-

ва таблеток плодов боярышника в соответствие с требованиями ГФ XI.

На основание предложенных методик определения флавоноидов в сырье установлены нормы содержания суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид и гиперозида в таблетках плодов боярышника.

Разработан тест растворения и предложена методика количественного определения высвобождения гиперозида из таблеток плодов боярышника. - -

Показано, что предлагаемая технология таблеток^шгодов боярышника обеспечивает соответствие качества препарата современным требованиям нормативной документации по микробиологической чистоте.

По результатам определения острой токсичности разработанное средство отнесено к нетоксичным препаратам.

Практическое значение работа. На основании экспериментальных данных составлен и апробирован лабораторный регламент на производство таблеток плодов боярышника в таблеточном цехе Московской фармацевтической фабрике.

Материалы'проведенных научных исследований по стандартизации вошли в проект ВФС на "Таблетки плодов боярышника".

Получен положительный отзыв о результатах апробации лекарственного средства в ЦКБ с поликлиниками ГМУ АН РФ при пароксизмальной тахикардии, атеросклерозе, ангионеврозах, при нарушении сердечного ритма.

Апробацкя работа. Материалы диссертации доложены на межреспубликанской научной конференции "Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных средств", . посвященной 20-летию ГНИИСКЛС (Москва, 1391 Гу.) , межреспубликанской научной конференции "Поиск, создание и изучениечновых лекарственных средств растительного и синтетического-происхождения" (Томск, 1993 г.), 90-ой конференции СНО

ММА км.И.М.Сеченова "Клинические и экспериментальные исследования медицине" (Суздаль,. 1993 г.).. Всероссийской студенческой конференщ "Актуальные, вопросы медицины", посвященной.50-детию. академии мед] цинских наук (Москва, 1994), научной конференции молодых учеш "Проблемы развития и совершенствования технологии лекарствен^ средств", посвященной 50-летию ВНИИ фармации (Москва, 1994 г.), I Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москв; 1996г.); ,• ■•

Публикации. По материалам исследования опубликовано 20 научи работ, в том числе получено Решение о выдаче патента на изобретен] N 94041842/14 от 28 марта 1996 года на "Средство для лечения пара сизмаяьнои тахикардии и ангионеврозов".

Связь задач исследования с проблемным плавом фармадевтическ: наук. Диссертационная работа выполнена по проблеме Межведомственно: ' совета N 047 МЗ РФ и РАМН, проблемная 'комиссия "Изученйе лекарстве: ных растений" в соответствии с планом научно-технических работ М им.И.М.Сеченова по теме: "Фармакогностическое научение лекарствен?!, го растительного сырья, лекарственных сборов, лекарственных форм : сырья и разработка методов их стандартизации с учетом антропогени факторов" (номер государственной регистрации 01930006976).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 2, страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литер туры, четырех глав собственных исследований, выводов, библиограф ческого указателя и приложения. Работа иллюстрирована 46 таблицами 55 рисункаш!.^ Библиографический указатель включает 219 источников* 'них 63 иностранных. - '

В обзоре литературы обобщены сведения о хшгчесгсом ' состав фармакологическом • действии, стандартизации сырья и препарат

боярышника, а также по технологии получения препаратов боярышника; и данные о лекарственных формах, содержащих измельченное лекарственное растительное сырье.

Во второй главе приводится подробная характеристика объектов и методов исследования.

В третьей и четвертой главах изложены результаты сравнительного изучения химического состава сырья ;и препаратов боярышника.

. Пятая глава посвящена вопросам изучения возможности создания таблеток плодов боярышника, а также вопросам их стандартизации.

На защиту выносятся: результаты сравнительного изучения химического состава сырья и препаратов боярышника; результаты исследования по разработке рационального состава и технологии таблеток плодов боярышника, а также- исследования по стандартизации разработанного препарата.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Для решения вопроса о целесообразности использования сырья -плоды боярышника для получения таблетированной лекарственной формы нами были проведены исследования по сравнительному изучению тех групп природных соединений различных видов сырья и препаратов боярышника, которые обеспечивают комплексное терапевтическое действие и могут оказывать влияние на состав, технологические свойства и стандартизацию таблетируемых смесей.

. Изучение химического состава сырья боярышника.

На первом этапе наших исследований было проведено определение экстрактивных веществ в различных сырьевых .источниках боярышника по методике, изложенной в общей статье' ГФ XI "Определение содержания

- б -

экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье". В качестве экстрагента использовали воду, 70% и 96% этанол.

Данные (Таблица 1) по сравнительному изучению различных видов сырья боярышника показывает, что плоды превосходят цветки и побеги по содержанию экстрактивный веществ, извлекаемых водой и 70% этанолом, а содержание экстрактивных веществ, извлекаемых 96% этанолом практически одинаково во всех исследуемых видах сырья. Эти результаты -свидетельствуют также о том, что из сырья боярышника экстрагируется в достаточней! количестве как гидрофильные, так и липофильные вещества.

Продолжением наших исследований явилось сравнительное изучение качественного и количественного состава различных видов сырья боярышника по содержанию флавоноидов, тритерпеновых соединений, полисахаридов и липофильных веществ.

• изучению флавоноидного состава различных' видов сырья боярышника посвящены многочисленные работы. Показано,- что гиперозид является доминирующим соединением в сумме, флавоноидов. Поэтому в нормативную документацию введены такие показатели, как содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид для плодов и содержание гиперозида для ■цветков, установлены нормы содержания - 0,06% и 0,5% соответственно. Установление этих норм, проведено с использованием спектрофотометрии после предварительной, очистки флавоноидов колоночной хроматографией (для плодов) и тонкослойной хроматографией (ТСХ) (для цветков). Надо отметить, что используемые методики требуют больших затрат времени, реактивов, шогостмгшшы. Во многих фармакопейных статьях на лекарственное растительное сырье определение содержания'суммы флавоноедов проводят спектрофотометрическим методом по реакции гампдексообразо-вания с хлоридом алюминия без введения различных методов очистки,

что значительно сокращает время анализа.

Нами- показана •возможность использования реакции комплескообра-зования с хлоридом алюминия для определения суммы флавонридов в сырье боярышника. На основании полученных результатов нами подобраны оптимальные условия и предложена методика определения суммы флавоно-идов в пересчете на гиперозид с использованием в качестве стандартного образца кверцетина.

С помощью предложенных методик проанализированы цветки, побеги и плоды боярышника. Результаты анализа представлены в Таблице 1.

Статистическая обработка всех полученных результатов была проведена в соответствии•с требованиями ГФ XI т.1 стр.199.

На основание полученных данных - разработанная методика может быть отнесена к альтернативной методике, используемой при стандартизации плодов боярышника по содержанию суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид.

В работах Киселевой Т.Л. показана возможность определения гипе-

ч-

розида в сырье боярышника методом ВЭЖХ. Однако в нормативную документацию эти методики не включены из-за отсутствия импортных сорбентом. Цветки боярышника стандартизуют по содержанию гиперозида. Нами были подобраны оптимальные условия разделения флавоноидов, позволяющие определить гиперозид в цветках, плодах и побегах методом ВЭЖХ с использованием отечественных сорбентов.

Для определения количественного содержания гиперозида в сырье нами использовался метод абсолютной градуировки (Таблица 1).

Предложенные методики позволяют проводить идентификацию гиперозида в цветках, Кпобегах и плодах боярышника и количественно оценивать его содержание в.сравнении с гиперозидом-стандартом, кроме того данная методика может быть рекомендована как современная альтерна-

тивная методика для включения в нормативную документацию на цвет? боярышника. . •

В литературе имеются сведения по тритерпеновым соединениям плс дов и галеновых препаратов боярышника, о гипохолестеринемическс действии тритерпенов, данные же по сравнительной оценке сырьевых ис точников и водных извлечений отсутствуют.

Количественное определение суммы тритерпеновых соединений прс водили гравиметрическим методом. Данные представлены в Таблице 1 Установлено, что наибольшее количество тритерпеновых соединений на капливается в цветках боярышника, чуть меньше в плодах и значительн меньше в побегах. Содержание суммы тритерпеновых соединений доста точно высокое, чтобы использовать этот показатель для стандартизаци сырья. Изучение качественного состава тритерпеновых соединений про водили методом ТСХ с использованием в качестве свидетелей маслинову и шеаноловую -кислоты, которые были достаточно просто* обнаружены в всех изучаемых видах сырья. Тритерпеновые соединения могут быть ис пользованы в стандартизации, как для качественных .реакций, так и дл введения дополнительного числового показателя по содержанию действу ющих веществ.

Полисахариды используются для стандартизации сырья таких вида сырья как трава череды, лист подорожника, ламинария.- Однако дл сырья боярышника вопрос о содержании полисахаридного комплекса раз личных видов сырья остается не проработанным. Мы провели исследова ния по определения суммы;полисахаридов в изучаемом сырье по ¡/этоди ке, изложенной б ГФ XI ст.20 "Листья подорожника большого".

Данные (Таблица 1) со сравнительному изучению различных вида сырья боярышника показывают, что плоды превосходи по соде^.г-ани суммы полисахаридов цветки и побеги. Содержание суиш полисахгр'^о

достаточно высокое, чтобы использовать этот показатель для стандартизации-сырья, из которого готовят настои и отвары.

Перспективность получения таблеток из плодов боярышника, учитывая не только комплекс гидрофильных веществ, но и сырьевую базу и фармакологическую ценность, делает целесообразным проведение исследований по изучению липофильного комплекса плодов боярышника, так как данные о липофильных соединениях в литературе практически отсутствуют. Изучению " качественного и количественного состава гидрофобных веществ был посвящен следующий раздел нашей работы.

Оценку содержания суммы липофильных веществ в сырье боярышника проводили гравиметрическим методом в аппарате типа Сокслет, в качестве экстрагента использовали хлороформ. Результаты определения

содержания суммы липофильных веществ в сырье боярышника представлены

•А'

в Таблице 1.

Показано, что наибольшее количество липофильных веществ содержится в побегах и цветках боярышника, в плодах же их содержится в 2 раза меньше, что объясняется отсутствием в них хлорофилла.

Определение жирнокислотного состава липофильной фракции плодов боярышника после щелочного гидролиза проводили методом ГЖХ.

По результатам анализа в составе липофильной фракции плодов боярышника идентифицированы: миристиновая, пальмитиновая, стеариновая, олеиновая и линолевая кислоты, количественное определение состава анализируемой смеси осуществляли методом нормализации площадей (Таблица 2).

Нами было также определено содержание суммы фосфолипидов в плодах боярышника гравиметрическим • методом. ' Фосфолипиды исчерпывающе

• . ' - \

экстрагировали смесью-хлороформ-метанол (8:2); фосфолипиды осаждали ацетоном и осадок высушивали (Таблица 2).

ТАБЛИЦА 1.

Содержание- биологически активных веществ в сырье боярышника. '

Биологически Содержание биологически" активных веществ,%

активные вещества цветки побеги плоды

Экстрактивные вещества,

извлекаемые водой 31,8+7,1 29,8+6,1 34,5+10,2 Экстрактивные вещества,

извлекаемые 70% этанолом 30,8+4,7 30,3+2,3 37,7+6,7 Экстрактивные вещества,

извлекаемые 96Z этанолом 23,0+9,1 19,9+3,1 21,1+7,7 Суша флавоноидов

в пересчете на кверцетин 0,93+0,42 1,05+0,08 О^'Ю^+О^-Ю"1

Сумма флавоноидов- • - - ■ •

в пересчете на гиперозид 1,52+0,41 1,62+0,12 0,88• 10_1+0, 11 ■ Ю-1

Гиперозид 0,82+0,39 0,33+0,19 0,41 -Ю^+0,30" Ю-1 Сумма тритерпеновых

соединений 2,94+0,60 1,29+0,26 2,33+0,54

Сумма полисахаридов 3,98+0,38 3,78+0,23 5,97+0,97

Сумма липофильных веществ 5,27+0,69 5,98+0,92 .2,88+0,62

Качественный хроматографический анализ каротиноидов изучаемых видов плодов бояршшга показал присутствие многочисленных пятен ка-рстиноидной природы, среди катерах был идентифицирован в-каротия.

Количественную -спешу ссяержаяия суммы каротиноидов в пересчете на ii-каротш проводили, спйктрофотометричесюм методом (Таблица 2)'. Таким образом, показано что плоды бояршшика следуем рассматри-

вать как источник ценных гидрофильных и липофильных биологически активных веществ, что необходимо учитывать при комплексно переработки растительного сырья боярышника.

ТАБЛИЦА 2.

Содержание липофильных веществ в плодах боярышника.' Биологически активные вещества Количественное содержание

Жирные кислоты: миристиновая следовые количества

пальмитиновая 14,9+1,0%

стеариновая 4,4+0,5%

олеиновая 23,1+1,02

линолевая 57,3+0,7%

Сумма фосфолипидов 0,87-10-1+0,49-10-1%

Сумма каротиноидов в пересчете на в-каротин . 1,02+0,39 мг%

Анализ препаратов боярышника.

В настоящее время качество галеновых лекарственных средств боярышника определяется по содержанию экстрактивных веществ, сухого остатка, концентрация спирта, тяжелых металлов, а водные извлечения имеют только органолептические показатели качества. Нами были предприняты попытки разработки объективных показателей стандартизации препаратов боярышника.

Мы провели исследования по определению гиперозида и суммы три-

ч

терпеновых соединений' в водных и галеновых лекарственных средствах из различных видов сырья боярышника по разработанным методикам, в

основу которых полажены исследования по количественной оценке этих соединений в лекарственном растительном сырье. .

Нами показано, что при получении настоек и экстрактов в сырье боярышника остается до 40Z гиперозида (жидкий экстракт плодов боярышника), до 73Z суммы тритерпеновых соединений (жидкий экстракт плодов боярышника). При получении водных извлечений в сырье остается до 807. гиперозида (отвар плодов боярышника) и до 76% суммы тритерпеновых соединений (отвар плодов боярышника). Поэтому чрезвычайно важно создать 'лекарственное средство, содержащие весь комплекс биологически активных веществ плодов боярышника - таблеток непосредственно из сырья боярышника.

Изучение возможности получения таблеток плодов боярышника методом прямого прессования и исследование их качества.

Для изучения возможности получения таблеток из плодов боярышника мы определили технологичебкие. свойства порошка плодов. • Порошки получали на валковой мельнице, а-также с целью повышения хрупкости материала, плоды боярышника измельчали на шаровой криомельнице.

Полученные порошки оценивали по следующим показателям: влажность, фракционный состав, насыпная масса, сыпучесть, прессуемость. Результаты представлены в Таблице 3.

При анализе полученных результатов видно, что порошок плодов боярышника обладает недостаточной сыпучестью и средней прессуе-мостью. Условия измельчения плодов боярышника не оказывают существенного влияние па технологические характеристики порота плодов бо-. яршшика.

Также на основании наших исследований по изучению состаза оио-логически активных веществ и технологических свойств сырья боярина-

ТАБЛИЦА 3.

Технологические характеристики порошков плодов боярышника.

рактеристика Условия измельчения

валковая мельница криомельница

;ажность, X »акционный состав, 1: 5 и более 25 - 0,5 1 - 0,25 1 и менее

юыпная масса,г/см3 _ шучесть, г/сек )эффициент прессуемости ¡ессуемость, кг

6,7+0,3

0,30+0,05 22,63+0,32 45,40+0,38 31,67+0,27 0,49+0,03 0,94+0,13 0,114+0,003 1,23+0,03 -

6,9+0,3

6,72+0,16 22,77+0,76 41,54+0,61 28,97+0,86 0,57+0,03 0,93+0,12 0,116+0,003 0,41+0,02

I можно предположить возможность получения таблеток плодов боярыш-¡ка как с использованием влажной грануляции, так и путем прямого зессования с применением вспомогательных веществ. Мы попытались сработать состав таблетяруемой массы, позволяющий таблетировать пей прямого прессования.

Учитывая, что порошок плодов боярышника при хранении слегка змкуется, слеживается, что затрудняет самопроизвольное объемное до-фование при прессовании; налипает на пуансоны и стенки матрицы при 1зработке состава препарата, с учетом ассортимента отечественных фокоприменяемых вспомогательных веществ различного назначения, бы-\ использованы вспомогательные вещества: крахмал картофельный, мик-

рокристаллкческая целлюлоза (МКЦ), лактоза, тальк, стеарат кальция аэросил.

На основании предварительных исследований мы разработали рацио нальный состав на одну таблетку по следующей прописи:

порошка плодов боярышника - 0,300

^крахмала картофельного - 0,023

азросила - 0,015

стеарата кальция ^ - 0,003

талька - о,009

Итого: - 0,350

Основные технологические характеристики таблетируемых смесе; порошка плодов боярышника приведены в Таблице 4.

ТАБЛИЦА 4.

Основные характеристики табл. смесей порошка плодов боярышника Образец Сыпучесть,г/с Насыпная масса,г/см3 Прессуемость,га

Табл.смесей порошка плодов боярышника, полученного

на валковой мельнице 3,08+0,13 0,44+0,02 ■• 4,77+0,48 Табл.смесей криопорошка

плодов боярышника 2,78+0,12 0,43+0,02 ' 4,22+0,21

Как видно из Таблицы 4, .таблетируемыё смеси исследуемых образцов обладают достаточной сыпучестью, удовлетворительное значение насыпной массы,.хорошей прессуемостью.

Таблетки плодов боярышника получали в соответствии с типовое

технологической схемой получения таблеток прямым прессованием, которая состоит из следующих стадии и операций:' ТС-1 Подготовка исходных компонентов - ■ плоды боярышника измельчали до размера частиц проходя-цих сквозь сито с размером отверстий 0,5 мм; вспомогательные вещест-за, отвечавшие требованиям НД, и измельченные плоды боярышника от-аешивали. ТС-2 Приготовление таблетируемой смеси - все исходные ком-юненты смешивали в смесители до получения однородного порошка. ТС-3 1олучение и отбраковка таблеток - таблетирование проводили на таблеточной машине "Когс!У фирмы "Егяека", пуансон диаметром 10 мм. ТС-4 Фасовка, маркировка, упаковка.

Проведена апробация технологии получения таблеток плодов боярышника в таблеточном цехе Московской фармацевтической фабрики на ¡ромышленной таблеточной машине РТМ-41. Таблетки соответствуют требованиям общей ст. "Таблетки" ГФ XI. Таким образом, показана юзможность 'получения* таблеток' плодов боярышника"' прямым [рессованием.

Для оценки качества новой лекарственной формы были разработаны -.арактеристика подлинности и показатели качества препарата.

Так как таблетки плодов боярышника получены на основе лекарс-■венного растительного сырья, была предложена одна из характеристик 'одлинноста: описание диагностических признаков при микроскопическом :сследоваяие.

В литературе отсутствуют данные по мшсроскопии порошка пледов оярышника и данные о влиянии фракционности и условии измельчения на ыявляемость диагностических признаков, нами были проведены соот-етствуюшие исследования.

Нами установлено, что диагностика признаков не вызывает зтруднений во фракциях порошка плодов боярышника с размером частиц:

0,25-0,16 мм; . 0,16-0,1 мм. Во фракции 0,1 мм и менее диагноста возможна, но затруднена, так как доля частиц, не • несущ диагностические признаки увеличивается. Во фракциях с размер частиц 0,5 мм и более; 0,315-0,5 мм; 0,25-0,315 мм диагности

затруднена, так как фракции в основном содержат большие фрагмен

1 -

каменистых клеток. Кроме того установлено, что условия измельчен не влияют на проявляемость диагностических признаков порошков плод-боярышника. '. - ' . ■

■Мы предложили методику проведения микроскопического анали таблеток плодов боярышника. Методика сводится к измельчению таблет без истирания, выделению фракции с размером частиц 0,1-0,25 м просветлению в 3х растворе гидроксида натрия - все это позволяет о вободится от вспомогательных веществ и достаточно четко диагностир ватъ основной растительный компонент плодов боярышника по наличи многоугольных клеток зкзокарпия с утащенными стенками и желтов то-коричневым содержимым; одиночным простым волоскам; кускам мез карпия, состоящих из паренхимных клеток округлой формы, с тонк бесцветной оболочкой и с содержимым желто-оранжевого цвета; отдел ным призматическим кристаллам и их сросткам; мелким единичным др зам; обрывкам проводящих пучков со спиральными сосудами; каменист клеткам различной формы и размеров. Однако . отмечено, что дру оксалата кальция в порошках плодов боярышни.са встречаются край редко и поэтому не могут рассматриваться как стабильный диагност ческий признак.

Исследования качественного состава биологически активных в ществ были положены в основу разработки одной из характеристик по линности - качественных реакций. Наличие большого количества гру природных соединений в порошке плодов' боярышника делает целесообра

им для разработки этого раздела использование хроматографических летодсь. Разработанные нами методики подготовки проб позволили пред-

южить метод ТСХ для идентификации, флавоноидов, тритерпеновых соеди-

о

гений, каротиноидов в таблетках плодов боярышника. Кроме того, нами разработана для этого раздела методика определения гиперозида в сравнение со стандартным .образцом методом ВЗЖХ. Жирные кислоты в таблетках плодов боярышника идентифицированы с использованием метода ГЖХ.' Показано, что вспомогательные вещества не влияют на проведение анализов.

Оценку показателей качества таблеток, полученных методом прямого прессования, проводили по методикам ГФ XI. Определены: геометрические показатели таблеток; средняя масса и отклонения от нее; рас-падаемость; прочность на истирание; содержание золы общей и золы, нерастворимой в 10% хлороводородной кислоте (Таблица 5).

' Показано, что 'предлагаемые нами таб'летки плодов боярышника соответствуют требованиям ГФ XI ст."Таблетки".

При выборе показателей качества, характеризующих содержание биологически активных веществ в таблетках плодов боярышника, мы'руководствовались тем, что основным показателем качества сырья является содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид. Мы предлагаем использовать этот показатель, а также содержание гиперозида, как показатели качества таблеток плодов боярышника. Присутствие вспомогательных веществ не оказывают влияние на проведение определения этих показателей. • •

Нами проведены исследования высвобождения гиперозида из таблеток плодов боярышника как одного из биологически активных компонентов, для которого разработана методика, определения в сырье с использованием метода ВЗЖХ. Определение высвобождения гиперозида из табле-

ток плодов боярышника проводили на приборе "Вращающаяся корзин? фирмы "Епчека", при стандартных условиях: в корзинку помещали.оя таблетку, скорость вращения корзинки - 100 об/мин, в качестве сре растворения использовали воду (800 мл), температура среды высвобс дения - 37+1 °С. Оценку осуществляли по количеству гиперозида, пер шедшего в среду растворения за 45 мин методом ВЭЖХ. Для этого ве об'ем среды высвобождения фильтровали на колонку с полиамидом, су* флавоноидов с сорбента элюировали 96% этанолом. ВЭ2К-определен осуществляли в условиях используемых для анализа сырья. Использов ние современной технологии обработки лекарственного растительнс сырья (измельчение в шаровой мельнице в среде жидкого азота) позв ляет обеспечить высокое высвобождение действующих веществ и микррб ологическую чистоту, удовлетворяющие требованиям ГФ XI, что необх димо учитывать в технологической схеме получения таблеток плодов б ярышника (Таблица 5).

Кроме того, нами установлена стабильность всех показателей к чества препарата при хранении в естественных условиях и рекомендов срок хранения 2 года.

На основании проведенной научно-исследовательской работы и п лученных результатов нами подготовлен проект ВФС на таблетки плод боярышника, включающий новые методики для определения, подлинности микроскопия и оценки качества - количественное содержание суммы фл воноидов в пересчете на гилерозид и содержание гиперозида, а также проект лабораторного регламента на получение таблеток плодов бояри

л-

ника путем прямого прессования. На Московской фармацевтической фа "рике проведена апробация лабораторного регламента и получено полот тельное заключение. Проведено определение острой токсичности и уст новлено, что предлагаемое лекарственное средство относится к нетс

ТАБЛИЦА 5.

Показатели качества таблеток плодов боярышника.

Показатель Таблетки из порош- Таблетки из Предлагаемые

ка плодов боярыш- криопорошка нормы

ника измельч. на боярышника

валковой мельнице

9,2+0,8

98,9+1,1 0,359+0,008

0,77+0,08

9,39+0,05

7,22+0,11

не более 15

3аспадаемость,мин 9,3+1,7 1рочность на

лстирание, % 99,3+0,8 :редная масса,г 0,347+0,006 Зткл.от средней лассы, + X 0,69+р,11

Содержание

золы общей,X 9,67+0,05 Содержание золы, jepacT. в 10%

эастворе HCl,% 7,42+0,05 Содержание суммы .

¡шавоноидов в -1ересчете на

таерозид, мг 2,09' 10-1+0,31'Ю-1 2,12-10_1+р,33-10_1 не менее 0,2 Содержание - ; . .

гаерозида, мг 1,10-10~1+0,04-10~1^l,13-10_1+0,06-10-1 не менее 0,1

'астворение

таерозида

за 45 мин,% 61,6+5,1 79,8+3,3 не менее 75

не более 97

не более 5

не более 9,7

не более 7,4

сичным. Предлагаемые наш таблетки плодов боярышника • прошли npeü рительную клиническую апробацию в ЦКБ с поликлиниками ГМУ АН РФ, показана их эффективность при пароксизмаяьной тахикардии, атерос: розе, ангионеврозах, при нарушении сердечного ритма. По проведе: исследованиям получено Решение о выдаче патента- на изобретение 94041842/14 от 28 марта 1996 года на "Средство для лечения парою мальной тахикардии и ангионеврозов".

ВЫВОДЫ

1. Для разработки характеристик подлинности и доброкачест; ности сырья и препаратов боярышника проведено сравнительное изуч< содержания экстрактивных веществ, флавоноидов, тритерпеновых coi нений, полисахаридов, липофильного комплекса (жирнокислотного со< ва, фосфолипидов, каротиноидов), с использованием методов ВЗИХ, ] ТСХ и др. Предложены альтернативные методики определения флавоно: в сырье боярышника.

2. На основании изучения технологических характеристик пора плодов боярышника, измельченных при различных условиях, пред'л рациональный состав и технология таблеток плодов боярышн соответствующих требованиям ГФ XI ст. "Таблетки"... В резуль апробации предложенной технологической схемы разработан пр лабораторного регламента получения таблеток плодов боярышн который апробирован в промышленных условиях.

3. Разработаны, на основе фармакогностического и химичес изучения,'характеристики подлинности таблеток плодов боярышн микроскопия, качественные реакции. . ,

4. Проведена стандартизация таблеток плодов боярышник

установлены нормы содержания золы общей; золы, нерастворимой в 10% растворе хлороводородной кислоты; суммы флавоноидов в пересчете на гиверозвд; гиперозида. Впервые разработан .тест и методика количественного определения высвобождения гиперозида из таблеток плодов боярышника. Проведено определение микробиологической чистоты таблеток плодов боярышника.

5. На основании изучения показателей подлинности и качества установлена стабильность при хранение в- течение..2 лет таблеток плодов боярышника, установлен срок хранения таблеток - 2 года.

6. Результаты исследований нашли свое отражение в проекте ВФС "Таблетки плодов боярышника".

7. Проведено определение острой токсичности предлагаемого препарата. Показано, что таблетки плодов боярышника относятся к нетоксичным лекарственным средствам.

Основное содержание •-диссертации- изложено в' следующих-работах:

1. Киселева Т.Л., Самылина И.А., Орлова Л.П., Фролов В.П., Евдокимова О.В. Изучение микроэлементного состава препаратов боярышника // Химико-фармацевтический журнал.- 1989.-N5.-0.614-618.

2. ЕусЗок1тоуа 0. V. УуЬег кУаЬ^аИУпусй икагоуа1а1оу ойуаги г МоЬоуеЬо куе1и// Тез.докл.международной науч.студ.конф. 70-летия университета им.Коменского, Братислава, "1989. С. 18. "

3. Самылина И.А., Киселева Т.Л., Евдокимова О.В. Разработка показателей качества настоя цветков боярышника //Химико-фармацевтический журнал.- 1990.-N1.-0.52-53 .

4. Евдокимова О.В., Нестерова О.В. Оценка количественного содержания липофильной фракции в плодах боярышника// Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных'средств: Тез. дота.межреспубликанской науч. конф., посвящ. 20-летию ГНИШСЯС.-М.-1991.- т.2.-

4.1.-c:il9-120.

5. Евдокимова O.B., Самылинай.А., Нестерова р.В. Изучение je пофильной фракции плодов боярышника// Фармация.-1992.-N3.-С.60-61.

6. Евдокимова 0.В., Самылинай.А., Нестерова 0.В. Определен] содержания суммы фосфолипидов и каротйноидов в плодах некоторых В) дов боярышника// Фармация.-1992.-N6.-С.70-72.

7. Марухленко С.А., Евдокимова О.В. Количественное определение тритерпеновых кислот в цветках и плодах некоторых представителей р< да Боярышник//Тез.докл. 90-ой конф. СНО ММА и итоговой конференщ "Клинические и экспериментальные исследования в медицине", Суздаш 1993. С.72.

8. Евдокимова О.В., Самылина И.А., Нестерова О.В. Оценка кол] чественного содержания фосфолипидов в плодах боярышника// Поиа создание и изучение новых лекарственных средств растительного и ст тетического происхождения:' Тез.докд.республиканской науч.конф. Томск.-1993.- С.18-20.

9. Евдокимова О.В., Самылинай.А., Калшикова М.В. О перспектш ном виде лекарственного растительного сырья - побегах боярышника/ Фармация.-1994. -N4.-С.28-30. ' и

10.Самылина И.А., Евдокимова О.В., Кашникова М.В. Использован! хлорида алюминия для определения суммы флавоноидов в цветках боярьи ника// Фармация.-1994.-N6 доп.-С.42-45.

11.Гусарова Н.С., Евдокимова О.В., Девяткина И.А. Изучение во: можности получения таблеток плодов боярышника// Тез.докл.Всероссийс кой студ.науч.конф. 50-летие академии мед.наук "Актуальные вопрос медицины",М.,1994,4.1, С. 95.

12.Севосн>янова Е.В.,. Евдокимова 0. В.. Определение числовых пс казателей перспективного лекарственного растительного сырья - побе

гов боярышника// Тез.докл.Всероссийской студ.науч.конф. 50-летие академий мед.наук "Актуальные-вопросы медицины",М.,1994,ч.II, С.109. ■

13.Евдокимова О.В. . Фармакогностическое изучение побегов боярышника// Сб.докл. "Проблемы развития и совершенствования технологии лекарственных средств". Депонир. ГЦНМБ Д N-24384.

14.Самылина И.А., Евдокимова 0.В., Девяткина И.А., Кузнецова 1.В. Средство- для лечения пароксизмальной тахикардии и ангионевро-зов// Приоретет на изобретение N 94041842/14 от 28 марта 1996 года.

15.Евдокимова'0.В.,- Осога-ш Д.М., Самылина И.А., Соколов И.В., "унар В.И. Применение метода ВЭЗХ в анализе сырья боярышника// Современные аспекты изучения лекарственных растений: Науч.труды НИИ Фармации. -М. -1995.-т.XXXIV. -С. 105-109.

16.Йваденко Н.В., Самылина И.А., Евдокимова 0.В. Разработка по-сазателен качества гипотензивного сбора// Современные аспекты изуче-шя" лекарственных растений: Науч. труды НИИ Фармации'. -М.-1995.-

XXXIV. -С. 125-129.

1?. Евдокимова 0.В., Самылина И.А. Изучение тритерпеновых сое-' (инений сырьевых источников боярышника// Современные аспекты изуче-гая лекарственных растений: Науч.труды НИИ Фармации.-М.-1995.-т. XXIV.-С.172-177.

18.Самылина И.А., Евдокимова О.В., Девяткина И.А., Ермакова ¡.А. Стандартизация таблеток плодов боярншника//Тез.докл. III Рос-'ийского нац.конгресса "Человек и лекгрство" 16-20 апреля 1996г., 1осква.-М.: РЦ "Фармединфо",' 1996.- С. 320. 4

19.Евдокимова О.В., Осокин Д.М., Самылина И.А., Соколов И.В., унар В.И., Девяткина й.А. Стандартизация настойки плодов "боярышника етодом ВЭЖХ// Актуальнае проблемы фармацевтической химии: Науч. тру-ы НИИ Фармации.-М.-1996.-т.XXXV.-С.85-87.

20.Евдокимова В., Самылина И.А., Девяткина И.А., Барда* А. И. ' Оценка качества таблеток плодов боярышника по гиперозвду// / туалъные проблемы фармацевтической химии: Науч.труды НИИ Фармащ -М.-1996.-T.XXXV.-С.149-151.