Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Исследование химического состава и разработка методик анализа растительного сырья некоторых видов берез
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 15.00.02
Оглавление диссертации Березовская, Юлия Валерьевна :: 2002 :: Пятигорск
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 1. Перспективы исследования и использования растений рода Береза сем. Веш1асеае.
1.1. Распространение видов березы на территории Российской Федерации.
1.2. Химический состав отдельных органов видов рода Береза.
1.3. Методы выделения, качественного и количественного анализа флавоноидных соединений растительного происхождения
1.3.1.Физико-химические свойства и методы выделения флавоноидных соединений из растительного сырья.
1.3.2.Использование хроматографических методов в анализе флавоноидных соединений.
1.3.3.Химические методы анализа флавоноидных соединений растительного происхождения.
1.3.4.Использование спектрофотометрии в анализе флавоноидных соединений.
1.4. Методы очистки, разделения, качественного и количественного анализа сесквитерпеновых соединений.
1.5. Фармакологические свойства БАВ березы, применение березы в народной и научной медицине
1.5.1. Фармакологические свойства флавоноидов и терпенов.
1.5.2. Применение различных видов березы в народной и научной медицине.
1.5.3. Нормативная документация на почки березы и лекарственные препараты, содержащие почки березы.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Объекты и методы исследованию!.
ГЛАВА 2. Выделение и иследование химического состава биологически активных соединений некоторых видов березы
2.1. Исследование группового состава полифенольных соединений почек некоторых видов березы.
2.2. Получение и анализ методом ТСХ эфирного масла почек березы и препаративное выделение образца бетулена
2.3. Анализ докритического СО2 - экстракта почек березы пушистой методом ТСХ.
2.4. Препаративное выделение бетулетола из листьев березы карликовой.
2.5. Результаты анализа методом ТСХ БАВ растительного сырья и докритического ССЬ - экстракта из почек березы.
ВЫВОДЫ.
ГЛАВА 3. Идентификация флавоноидных соединений с использованием методов ТСХ и спектрофотометрии
3.1. Получение фракции флавоноидов и проведение кислотного гидролиза.
3.2. Идентификация флавоноидных гликозидов в этилацетатной фракции почек некоторох видов берез.
3.3. Оценка результатов ТСХ анализа полифенольных соединений почек берез.
3.4. Использование спектрофотометрического анализа для идентификации флавоноидных соединений
3.4.1. Идентификация агликонов флавоноидов.
3.4.2. Идентификация гликозидов флавоноидов
3.5. Идентификация веществ докритического С02 - экстракта почек березы.
ВЫВОДЫ.
ГЛАВА 4. Разработка методик количественного определения флавоноидов в растительном сырье и % ♦ докритическом СС^-экстракте почек березы методом спекгрофотометрии 4.1. Спектрофотометрический анализ флавоноидов содержащихся в почках Betula pubescens Ehrh. (=В. alba L.)
4.1.1. Изучение УФ спектров извлечений из почек березы
Betula pubescens Ehrh. (=В. alba L.).
4.1.2. Изучение факторов, влияющих на процесс извлечения флавоноидов из почек Betula pubescens Ehrh. (=В. alba L.).
4.1.3. Обоснование возможности использования дифференциальной спектрофотометрии и разработка методики количественного определения флавоноидов почек Betula pubescens Ehrh. (^В. alba L.).
4.2. Спектрофотометрический анализ докритического С02 экстракта почек березы.
ВЫВОДЫ.
ГЛАВА 5. Исследование состава эфирного масла и докритического СО? - экстракта почек березы методом ГЖХ
5.1. Разработка условий качественного анализа эфирного масла и докритического С02 - экстракта почек березы пушистой методом ГЖХ.1.
5.1.1. Выбор неподвижной фазы.
5.1.2. Определение возможности использования индексов удерживания (ИУ).
5.2. Идентификация БАВ эфирного масла и докригического С02 -экстракта почек березы.
5.3. Разработка методики количественного определения БАВ методом ГЖХ
5.3.1. Обоснование выбора режима работы термостата хроматогрофа "Хром-5".
5.3.2. Выбор оптимального режима подачи газа-носителя.
5.3.3. Оптимизация температурного режима газо-хроматографического анализа.
5.4. Использование метода внутреннего стандарта для количественной оценки эфирного масла и докритического СО2 - экстракта почек березы
5.4.1. Выбор внутреннего стандарта.
5.4.2. Количественное определение бетулена в эфирном масле и докритическом СО2 - экстракте почек березы.
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Березовская, Юлия Валерьевна, автореферат
Актуальность темы. Возрастающий интерес к лекарственным средствам, созданным на основе растительного сырья, объясняется их комплексным воздействием на организм. Из 15 тысяч наименований, используемых в Российской Федерации, лекарственные средства растительного происхождения составляют более трети. Сочетание огромного разнообразия биологически активных веществ (БАВ) расширяет фармакологические перспективы применения растительных лекарственных средств.
Семейство Betulaceae является перспективным источником флавоноидов и терпенов. В настоящее время известно более 40 видов биологической активности флавоноидов, таких как: мембраностабилизирующее, кардиотоническое, сосудоукрепляющее, антимикробное, противовоспалительное, гипоазотемическое и др. Терпены обладают фунгицидной активностью. Объектами нашего исследования были: лекарственное растительное сырье почки березы повислой (березы бородавчатой) - Betula pendula Roth. (=В. verrucosa Ehrh.) и березы пушистой - Betula pubescens Ehrh. (=B. alba L.), докритические C02-экстракты почек березы пушистой, производства АО «Абицея» г.Екатеринбурга. Широкое использование почек березы в народной медицине и вместе с тем ограниченное применение в научной медицине, из-за недостаточной изученности химического состава БАВ, делает актуальным исследование этого растительного сырья. ФС на почки березы регламентирует качество сырья по количественному содержанию эфирного масла, однако, исследований компонентного состава эфирного масла, используемых в медицине берез ранее не проводилось. В лекарственных средствах, содержащих в своем составе почки березы (эликсир «Кедровит» и бальзам «Демидовский») согласно действующей НД идентифицируют бетулен методом ГЖХ, в то же время само сырье по данному показателю не стандартизируют.
Важным направлением в создании новых лекарственных средств растительного происхождения является разработка технологий, позволяющих максимально извлечь БАВ из исходного сырья. Экстракция биологически активных веществ с помощью оксида углерода (IV) - это сравнительно новый вид извлечения БАВ из сырья растительного или животного происхождения. Исследования докритического углекислотного экстракта представляет как практический, так и теоретический интерес, вследствие малой изученности компонентного состава подобных извлечений. Вместе с появлением новых технологий, в том числе СО2 -экстракции из сырья, повышаются требования, предъявляемые к качеству, как растительного сырья, так и к лекарственным средствам, созданным на основе полученных экстрактов. В связи с этим актуальным направлением современного фармацевтического анализа является разработка методов контроля качества биологически активных веществ, содержащихся в почках березы и докритическом СОг-экстракте почек березы.
Связь с планом НИР. Работа выполнена в соответствии с планом НИР академии, номер государственной регистрации 01.9.80 008688.
Цель и задачи исследования. Цель нашего исследования состоит в изучении химического состава и разработке методов анализа сырья почек березы и экстрактов из них по содержанию терпенов и флавоноидов.
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- исследовать состав и идентифицировать биологически активные соединения, содержащиеся в почках березы;
- разработать методики очистки и разделения флавоноидных соединений и терпенов;
- идентифицировать флавоноидные и терпеновые соединения почек березы;
- разработать методики качественного и количественного анализа Б AB в почках березы;
- изучить качественный и количественный состав компонентов докритического углекислотного экстракта из почек березы.
Научная новизна. Предложена теоретически и экспериментально обоснованная схема выделения и очистки суммы флавоноидов из почек березы. Показана возможность использования дифференциальной спектрофотометрии по продуктам комплексообразования флавоноидов с алюминия (III) хлоридом для количественного определения флавоноидов почек березы в пересчете на кверцетин.
Изучен с использованием ГЖХ метода анализа компонентный состав эфирного масла почек березы. Впервые в эфирном масле идентифицированы: а- и ß- кариофиллены, гуммулен, ß - бисаболен, кариофилленоксид, ß-кариофилленовый спирт.
Впервые изучен состав докритического углекислотного экстракта почек березы. В С02 - экстракте почек березы пушистой, с использованием ГЖХ идентифицированы терпены: а- кариофиллен, гуммулен, ß - бисаболен, кариофилленоксид, а-бетуленол, бетулен, а-бетуленилацетат. С использованием тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии доказано наличие в докритическом углекислотном экстракте метоксилированных флавоноидов: бетулетола, 3-метил-бетулетола. Теоретически обоснована возможность коррекции «фона» сопутствующих веществ экстракта при спектрофотометрическом определении бетулетола в СОг - экстракте почек березы пушистой.
Проведены сравнительные исследования компонентного состава эфирного масла и докритического углекислотного извлечений из почек березы. Показано, что докритический углекислотный экстракт почек березы содержит меньше кислородсодержащих производных сесквитерпеновых углеводородов, а содержание терпенов в нем больше, чем в эфирном масле.
Практическая значимость работы. Проведенные исследования и разработанные методики позволяют стандартизировать почки березы по основным фармакологическим активным веществам: флавоноидам и терпенам. Разработана методика определения флавоноидов с использованием метода дифференциальной спектрофотометрии, по реакции комплексообразования с алюминия (III) хлоридом. Методика дает возможность проводить оценку качества сырья по флавоноидам в пересчете на кверцетин.
Экспериментально разработана методика количественного определения бетулетола в докритическом СО? - экстракте почек березы методом производной спектрофотометрии с использованием комбинированного полинома, составленного из полиномов 1 и 2 степени.
Проведенный выбор условий ГЖХ анализа и разработанные методики идентификации и количественного определения позволяют проводить оценку эфирного масла и докритического СОг - экстракт почек березы по содержанию терпенов.
Положения выдвигаемые на защиту:
- результаты изучения флавоноидных соединений и терпенов эфирного масла почек березы повислой (березы бородавчатой) - Betula pendula Roth. (-=В. verrucosa Ehrh.), березы пушистой - Betula pubescens Ehrh. (=B. alba L );
- методы выделения, идентификации и количественного определения флавоноидов сырья и терпенов эфирного масла и докритического углекислотного экстракта почек березы;
- результаты анализа компонентов докритического СОг-экстракта почек березы пушистой, методы их выделения, идентификации и количественного определения;
- сравнительная оценка компонентного состава эфирного масла и докритических СОг-экстрактов почек березы пушистой.
Внедрение результатов работы. Методика спектрофотометрического анализа бетулетола в докритических углекислотных экстрактах почек березы внедрена в работу НИЦ экологических ресурсов ГОРО г.Ростов-на-Дону.
Методические рекомендации по идентификации и количественному определению содержания основных биологически активных соединений СОг-экстракта внедрены в работу Уральского НИИ технологии медпрепаратов МЗ РФ г.Екатеринбурга и НИЦ экологических ресурсов ГОРО г.Ростова-на-Дону. Методики идентификации и количественного определения компонентов СОг-экстракта апробированы в АО «Абицея» г.Екатеринбурга. Получено 2 акта апробации и 5 актов внедрения разработанных методик качественного и количественного анализа докритических углекислотных экстрактов.
Апробация работы. Основные результаты исследований доложены на научных конференциях Пятигорской государственной фармацевтической академии в 1997, 1998, 1999, 2000 и 2001 годах.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 работ, в т.ч. в соавторстве с В.Г.Беликовым и В.А. Бандюковой опубликован обзор «Полифенольные и тритерпеноидные соединения растений рода ВеШ1а».
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 139 стр., состоит из введения, обзора литературы и 4 глав экспериментальной части, общих выводов, списка литературы и приложения. Работа проиллюстрирована 21 рисунком и 27 таблицами. Библиография имеет 173 наименований, из которых 42 на иностранных языках.
Заключение диссертационного исследования на тему "Исследование химического состава и разработка методик анализа растительного сырья некоторых видов берез"
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ
1. Разработана методика выделения флавоноидов из почек берез: Betula pendula Roth. (В. verrucosa Ehrh.) и Betula pubescens Ehrh. (B.alba L.).
2. Подобраны оптимальные условия для ТСХ разделения флавоноидных соединений, содержащихся в почках некоторых видов берез.
3. Идентифицированы в почках Betula pendula Roth. (=В. verrucosa Ehrh.) флавоноиды: акацетин (4' -метиловый эфир апигенина). пендулетин, рамназин, бетулетол, 3-метилкверцетин, кверцетин, рутин.
4. Изучен флавоноидный состав почек Betula pubescens Ehrh. (=В. alba L.), в сьфье идентифицированы: бетулетол, 7,4'-диметилапигенин, апигенин, кемпферол, акацетин, рамноцитрин (7-метиловый эфир кемферола), эрманин (3,4'-диметиловый эфир кемпферола), пендулетин, кемферид (4'-метиловый эфир кемпферола) и гликозиды: астрагалин и гиперозид.
5. Впервые в докритическом С02-экстракте почек березы установлено наличие флавоноидов (бетулетола, 3-метил-бегулетола), терпенов (а- кариофиллена, гуммулена, ß -бисаболена, кариофилленоксида, а-бетуленола, бетулена, а-бетул енилацетата).
6. Исследованы УФ спектры поглощения спирто-водных извлечений из почек березы. Разработаны методики количественного определения в них флавоноидов методом дифференциальной спектрофотометрии. Методики апробированы на образцах почек березы, пох[ученных из различных регионов РФ.
7. Разработана методика количественного спекгрофотометрического определения бетулетола в СОг экстракте почек березы с использованием метода комбинированного полинома, составленного из полиномов первой и второй степени. Содержание бетулетола не превышает 158,4 мг/100 г,
8. Разработана методика идентификации компонентов эфирного масла и докритического С02-экстракта из почек березы методом ГЖХ с помощью индексов удерживания. В эфирном к масле почек березы идентифицированы: а- и р- кариофиллен, гуммулен, р - бисаболен, кариофилленоксид, р-кариофилленовый спирт, бетулен, а-бетуленол, р-бетуленол, а- бетуленилацетат.
9. Теоретически обоснованы и оптимизированы условия ГЖХ анализа для количественного определения бетулена. Разработана методика количественного газо-хроматографического определения бетулена методом внутреннего стандарта с использованием ДБФ в эфирном масле почек березы и докритическом С02-экстракте почек березы.
Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2002 года, Березовская, Юлия Валерьевна
1. Авдеева, E.B. Изучение некоторых фенольных и терпеноидных соединений, используемых в стандартизации лекарственных растений: Автореф. дис. .канд. фармац. наук /Авдеева Е.В.-М, 1997.-23с.
2. Айрапетова, А.Ю. Использование метода ГЖХ в анализе «Валеодикрамена»/ А.Ю. Айрапетова, C.B. Клочков, Е.В. Компанцева // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (52; 1997; Пятигорск): Материалы . .-Пятигорск, 1997. -С.67.
3. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский, В В. Бражников, С. А. Волков и др. М.: Химия, 1993.-464с.
4. Андреева, В.Ю. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemila vulgaris L.S.L./ В.Ю. Андреева, Г.И. Капинкина // Химия растит, сырья 2000 - №1. -С.85-88.
5. Анискина, A.A. Betula fruticosa Pall, как кормовое растение центральной Якутии // Раст. Ресурсы 1999. - Т.35,Вып.1. - С.111-116.
6. Аносова, О.Г. Совершенствование анализа и технологии настоев и отваров, содержащих флавоноиды / О.Г. Аносова, М.В. Колпакова, Н.И. Минникова // Фармация. -1994. Т.43, №1. - С.30-34.
7. Антибактериальная и цитостатическая активность полиолов даммаранового ряда / С.И. Стехова, Е.Б.Шевцова, М.М.Анисимов идр. // Новые лекарственные препараты Сибири и Дальнего Востока: Тез. докл. науч. конф. Томск, 1988. - Т. 2. -С.168.
8. Антимикробная активность гликозидов бетулафолиентриола и его 3-эпимера /С.И. Стехова, М.М. Анисимов, Л.Н. Антопкина и др. // Раст. ресурсы.-1989.- Т.25, вып.1.-С.103-105.
9. Атопкина, Л.Н. Гликозилирование тритерпеноидов даммаранового ряда. VI. 3-моно-и 3,12-ди-0-(3-0-глюкопиранозы пиксинола /Л.Н. Атопкина, Н.И.Уварова //Химия природ, соединений.- 1986.-N4.-С.451-455.
10. Атопкина, Л.Н. Гликозилирование тритерпеноидов даммаранового к ряда. I. 25-0-(3-0-глюкопиранозид 20(S), 24(К)-эпоксидаммаран-За, 123,25- триол /Л.Н. Атопкина, Н.И.Уварова //Химия природ. Соединений.-1980.-N2.-C.205-208.
11. Бандюкова, В. А. Полифенольные и тритерпеноидные соединения растений рода Betula Хим.-фарм. пр-во: Обзорн. информ. / В.А. Бандюкова, В.Г. Беликов, Ю.В. Березовская -М.: НИИСЭНТИ, 1997. Вып.5,№11.-23с.
12. Беликов, В.В. Избирательный метод анализа флавоноидов в фитохимических препаратах / В.В. Беликов, Т.В. Точкова, Н.Т. Колесник // Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных средств. -М., 1991. -Т.2., ч.2. С. 13-14.
13. Беликов, В.Г. Идентификация компонентов эфирного масла почек березы / В.Г. Беликов, Ю.В. Березовская, C.B. Клочков //
14. Белов, В.Н. Об извлечении эфирных масел из растительного сырья пароводяным методом / В.Н. Белов, Т.В. Гаврилова, Н.Г. Вашкович // Прикладная химия.-1994.-Вып.1.-С.167-169.
15. Белодубовская, Г. А. Основная номенклатура растительного сырья для получения гомеопатических средств / Г.А. Белодубовская, Е.В. Зданевич, В.В. Вандышев // Раст. ресурсы. 1996. - №4.-С.105.
16. Белоусова, Н.И. Химический состав эфирного масла багульников / Н.И. Белоусова, В.А. Хан, A.B. Ткачев // Химия раст. сырья. 1999. - №3. - С.5-38.
17. Беляев, Н.Ф. Хроматографическое изучение состава эфирного масла Zizifora Clinopodioides, викарного вида Origanum vulgare /Н.Ф. Беляев, A.M. Демеубаева // Химия природ, соединений.-1999.-N1.-С.66-68.
18. Березовская, Ю.В. Исследование химического состава и антибактериальной активности листьев березы карликовой / Ю.В. Березовская // Матер, конф. студенческого науч. о-ва КГМА -Краснодар, 1995, -С.40-41.
19. Березовская, Ю.В. Идентификация биологически активных компонентов извлечений из почек березы белой / Ю.В. Березовская //
20. Человек и лекарство: Тез.докл. Рос.нац.конгр. 21-25 апр.1998 г. -М., 1998.-С.348.
21. Бернпгтейн, И.Я. Спекгрофотометрический анализ в органической химии. -2-е изд., перераб. и доп. / И.Я. Бернпгтейн, Ю.Л. Каминский -Л.: Химия, 1986. 200 с.
22. Бетулафолиентриол в листьях четырех дальневосточных видов Betula L. / Н.Г. Горовой, Н.И. Уварова, Г.И. Ошиток и др. // Раст. ресурсы.-1975.-T.il, вып.1.-С.97-98.
23. Бондаренко, А.И. Количественное определение эфирного масла в воде мяты перечной / А.И. Бондаренко, Н.В. Бондаренко // k Фармация. -1989. Т.38, №3. - С.69-70.
24. Бубенчикова, В.Н. Фармакогностическое изучение некоторых видов семейства астровых и перспектива из практического использования: Автореф. дис. .д-ра фармац. наук / В.Н. Бубенчикова -Пятигорск, 1993.-40с.
25. Булатов, И.А. Практическое руководство по фотоколориметрическим и спектрофотометрическим методам анализа / И.А. Булатов, И.П. Кал инки н -Л.: Химия, 1988.-314с.
26. Василенко, Ю.К. Экспериментальное обоснование новых препаратов из коры березы / Ю.К. Васеленко, В.Ф. Семенченко, Н.М. Фролова // Фармация. 1994. - Т.44, № 6. - С. 6-9.
27. Вергейчик, E.H. Разработка методов производной и дифференциальной спектрофотометрии для анализа лекарственных средств: Дис. . д-ра фармац.наук. / E.H. Вергейчик Пятигорск, 1988.-260с.
28. Вергейчик, E.H. Методологический подход к анализу фармацевтических средств / E.H. Вергейчик // Всерос.конф. по истории и методологии аналит. Химии (2; 1999; Москва): Тез.докл. -М., 1999.-С. 10-11.
29. Верещагина, В.В. Использование раствора уксусной кислоты в этаноле для извлечения аралозидов при стандартизации корней аралии маньчжурской / В.В. Верещагина, Д.Г. Короткое, Э.Т. Оганесян // Фармация.-1999.-Т. 49, №3.-С.18-20.
30. Вяхирев, Д.А. Руководство по газовой хроматографии. 2-е изд.,кперераб. и доп. /Д.А. Вяхирев, А.Ф. Шушунова М.: Высш.шк., 1987.-336с.
31. Газо-жидкостная хроматография тритерпеновых спиртов даммаранового ряда / Т.В. Покушалова, Н.Д. Похило, Н.И. Уварова и др. // Химия природ, соединений.-1986.-N5.-С.592-596.
32. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений. / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук -Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1990. 333с.
33. Гиполипидемические свойства гликозидов бетулина / А.С.Иванов, Т.С. Захарова, Л.Е. Одинокова и др. // Хим. фармац. журн. 1987.-Т.21,№9.-С.1091-1094.
34. Гликозилирование тритерпеноидов даммаранового ряда. IV. ß-D-глюкопиранозы бетулафолиентриола и его производных/ Л.Н.Атопкина, В.Н. Денисенко, Н.И. Уварова и др. //Химия природ, соединений,-1986.-N3 .-С.301-312.
35. Гликозилирование бетулина и его ацетатов в присутствии карбоната кадмия/ Л.Э.Одинокова, , Г.И. Ошиток, В.А. Денисенко и др. //Химия природ, соединений.-1984.-N2.-C. 182-187.
36. Гликозилирование тритерпеноидов даммаранового ряда. V. ß-D-глюкопиранозиды 12-О-ацетил 20(S), 24(Я)-эпоксидаммаран3а,12(3,25-три0ла и З-эпиокотиллола/ Л.Н. Атопкина, .В.Н. Денисенко, Н.Ф. Самошина и др. //Химия природ. соединений.-1985.-К4.-С.445-451.
37. Государственная фармакопея СССР. 11-е изд., доп. М.: Медицина, 1987.-Вып. 1.-334с.
38. Государственная фармакопея СССР. 11-е изд., доп. М.: Медицина, 1989.-Вып.2.-397с.
39. Гризодуб, О.И. Создание современных методов анализа лекарственных средств. Стандартизация /О.И. Гризодуб // Фармац. журн,- 1994. №5-6. - С.72-74.
40. Деменьтьева, Н.Н. Метод газожидкостной хроматографии в контроле качества лекарственных средств / Н.Н. Деменьтьева // Фармация. -1993.-T.42,N6.-С. 63-66.
41. Деменьтьева, Н.Н. Качественный газохроматографический анализ лекарственных веществ / Н.Н. Деменьтьева, Т.А. Завражная, В.Н. Потапова // Фармация. -1982. Т.31, №3,-С.31-47.
42. Денисова, Г.А. Терпеноидсодержащие структуры растений. Монография /Г.А. Денисова -Л.: Наука, 1989.- 140с.
43. Достижения и перспективы создания различных лекарственных препаратов / В.И.Литвиненко, М.Ф.Комисаренко, И.Х.Макаревич, О.П. Прокопенко // Фармац.журн.- 1994. №5-6. - С.236-237.
44. Евдокимова, О.В. Изучение тритерпеновых соединений сырьевых источников боярышника. Ресурсоведческое и фитохимическое изучение: Науч.тр. /О.В. Евдокимова, И.А. Самылина / ВНИИ Фармации. -1995.-Т.34. С. 172-177.
45. Еськин, А. П. Метод количественного фотометрического определения к дигидрокверцетина / А.П. Еськин, В.А. Левданский, Н.И. Волежаева // Химия раст. сырья.-1998.- №3.- С.111-114.
46. Зенкевич, И.Г. Обобщенные индексы удерживания для хроматографического анализа с линейным программированием температуры / И.Г. Зенкевич // Журн. аналит. химии. 1984. - Т.39, Вып.7,- С. 1297-1306.
47. Зенкевич, И.Г. Аналитические параметры компонентов эфирных масел для их хроматографи'^ес кои и" хромато-масс-спектрофотометрической идентификации. Моно- и сесквитерпеновые углеводороды / И.Г. Зенкевич // Раст. ресурсы.-1996. -Т.32, Вып. 1-2. С.48-58.
48. Зенкевич, И.Г. Аналитические параметры компонентов эфирных масел для хроматографической и хромато-масс-спектрофотометрической идентификации. Ацетаты терпеновыхспиртов / И.Г. Зенкевич // Раст. ресурсы.- 1999. Т.35,Вып.1. - С.ЗО-37.
49. Исследования химического состава лекарственного препарата «Эликсир Кедровит» / В.Г.Макаров, К.А.Краснов, В.А.Утсаль и др.// Фармация .-1998. -№4. -С.44-45.
50. Кашникова, М.В. Методика количественного определения гиперозида в цветках и настойке цветков боярышника /М.В. Кашникова // Хим.-фармац. журн. 1984. - Т. 18, №2. - С. 192.
51. Кинтя, П.К. Тритерпеноиды растений / П.К. Кинтя, Ю.М. Фадеев, Л.С. Аиокина Кишенев: Штиинца, 1990.-151с.
52. Киселев, A.B. Межмолекулярное взаимодействие в адсорбции и хроматографии /A.B. Киселев М.: Высш.шк., 1986. - 360с.
53. Количественное определение лекарственных веществ в смесях методом производной спектрофотометрии /В.Г.Беликов, Е.Н.Вергейчик, А.С.Саушкина, С.В.Клочков// Современные методыанализа фармацевтических препаратов/ ВНИИ Фармации. 1988. -Т.26. -С.7-10.
54. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография: М: Мир, 1981.-Т.1.-616с.
55. Компонентный состав эфирного масла Thymus Dimorphus / А.Б. Приходько, Н.А Клюев, С.В.Волкович, Т.И. Елец и др. // Химия природ, соединений.-1999.-N1.-С.59-65.
56. Коновалова, O.A. Сесквитерпеновые лактоны из некоторых растений семейств сложноцветные и зонтичных: Автореф.дис. . .канд.хим.наук./ O.A. Коновалова -Ташкент, 1975. 25с.
57. Косман В.М., Зенкевич И.Г. Информационное обеспечение для идентификации фенольных соединений растительного происхождения в обращенно-фазовой ВЭЖХ // Раст.ресурсы. 1997. -Т.ЗЗ, вып. 2.-С. 14-26.
58. Костенникова, З.П. Контроль качества настоек З.П. Костенникова, JI.B. Акашкина, Т.Э. Терещенко // Фармация. 1991. - Т.40,№3. -С.58.
59. Клышев, Л.Л. Флавоноиды растений (распространение, физико-химические свойства, методы исследования) /Л.Л. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алкжина -Алма-Ата: Наука КазССР., 1978. 228с.
60. Краснова, P.P. Газохроматографический анализ летучих соединений на малогабаритном хроматографе МХТ /P.P. Краснова, С.М. Яновский //Суд.-мед.экспертиза. 1998.-№1,- С. 18-24.
61. Лавренова, Г.В. Энциклопедия лекарственных растений / Г.В, Лавренова, В.К. Лавренов -Донецк: Донетччина, 1996. -Т2. -512с.
62. Лекарственные растения в бальнеологии / Л.С. Семенова, К.Ф. Блинова, Б.Л. Молдавер и др. // Раст. ресурсы.-1993.- Т.29, вып.1,-С.83-88.
63. Лекарственные растения: Каталог. М.:Медицина, 1985. - 250с.
64. Ляпича, М.И. Определение ментола в углекислом экстракте мяты перечной / М.И.Лялина, Л.ИБрутко// Фармация. 1991- Т.40, №1-С.59-60.
65. Малиновская, Г.В. Тритерпеноиды из листьев дальневосточных видов кустарниковых берез Betula ovalifolia и Betula middendorfii /Г.В. Малиновская, Н.Д. Похило, В.В. Маханьков // Химия природ, соединений.-1981 .-N3 .-С.323-329.
66. Максютина Н.П. Флавоноиды // Растительные лекарственные средства Киев: Наука, 1985. - С.85-102.
67. Маравина, И.Н. Исследования в области разработки галеновых препаратов из сборов /И.Н. Маравина, В.Я. Яцюк, O.A. Елецкая // Фармация,-1998,-Т39,№6.-С.13-14.
68. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: В 2 ч,- 14 изд., перераб., испр. и доп. /М.Д. Машковский -М., 1999. Т. 1.-736с; Т.2. -688с.
69. Махнев, А.К. Тритерпеноиды листьев алтайских видов Betula L. и вопросы их хемотаксономии / А.К. Махнев, Н.Д. Похило, Н.И. Уварова // Раст. ресурсы, 1990. Т.26,Вып.2. - С.214-219.
70. Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири /В.Г.Минаева -Новосибирск: Наука, 1991. -430с.
71. Митрука, Б.М. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине: Пер. с англ. /Б.М. Митрука М.: .Медицина, 1978. - 600 с.
72. Моровинова, Н.М. Тонкослойная хроматография как способ идентификации жиров и масел / Н.М. Моровина, В.И. Иванов // Анал. объектов окруж. среды: Тез.докл. 3 Всерос.конф.
73. Павелковская, Г.П. Новые подходы к созданию фитопрепаратов /Т.П. Павелковская, P.C. Куздынбаева // Человек и лекарство: Тез.докл. 6 Рос.нац.конгресса 19-23 апр. 1999г.-М., 1999. С.453.
74. Пасешниченко, В. А. Биосинтез и биологическая активность растительных терпеноидов и стероидов /В. А. Пасешниченко // Ит«*г« науки и техники. Биологическая химия. М., 1987.-Т.25.-С.5-194.
75. Получение сухого экстракта из корней девясила высокого и изучение его химического состава / С.А. Матаева, H.A. Митина, Г.Л. Рыжова и др. // Химия раст. сырья. 1999. - №2.- С. 119-123.
76. Полякова, Л.В. Изменчивость фенольных соединений у некоторых травянистых и древесных растений от межпопу ля ционного до внутриикдивидуального (эндогенного) уровня /Л.В. Полякова, Г.А. Еренова // Химия раст. сырья.-2000.-№1.-С.121-129.
77. Пономарев. В.Д. Спектры поглощения пентациклических тритерпеноидов в серной кислоте /В.Д. Пономарев, Э.Т. Оганесян,
78. В.Ф. Семенченко // Химия природ.соединений. 1971. - №2. -С.147-151.
79. Попов, Д.М. Определение флавоноидов и тритерпеноидов в жидком экстракте боярышника фотометрическими методами / Д.М. Попов,
80. B.В. Дюкова, Д.Т. Берашвили // Современные методы анализа фармацевтических препаратов/ ВНИИ фармации. 1998. - Т.26.1. C.161-166.
81. Похило, Н.Д. Тритерпеноиды в листьях уральских и алтайских берез и вопросы их хемотаксономии /Н.Д. Похило, А.К. Махнев, Н.И. Уварова // Химия природ, соединений.-1990.-N2.-C.278-279.
82. Пецев, Н. Справочник по газовой хроматографии: Пер. с болг. / Н. Пецев, В. Коцев. М.: Мир, 1987. - 260 с.
83. Пронченко, Г.Е. Символ России /Т.Е. Пронченко // Медико-фармац. вестник. -1997.- № 1. С.49-53.
84. Прудников, Е.Д. Проблемы теории погрешностей в анализе / Е.Д. Прудников, Е.Е. Прудников // Всерос.конф. по истории и методол. аналит. химии, (2; 1999; Москва): Тез.докл. . М., 1999.-С.38-40.
85. Прудников, Е.Д. Чувствительность в анализе /Е.Д Прудников // Всерос.конф. по истории и методол. аналит. химии, (2; 1999; Москва): Тез.докл. . М., 1999.-С.40-41.
86. Родовниченко, М.С. Изучение лидокаина и новокаинамида в химико-токсикологическом отношении: Автореф. дис. канд.фармац.наук. /М.С. Родовниченко -Пятигорск, 1998. -24с.
87. Разработка аллерговакцины из пыльцы березы и иммуностимулятора полиоксидония / В.А. Камышева, P.M. Хаитов, В.Н. Федосеева и др. // Человек и лекарство: Тез.докл. 6 Рос.нац.конгресса 19-23 агтр.1999г. -М„ 1999. С.415.
88. Рапп, O.A. Противоязвенная активность экстракта из коры Betula pendula Roth. / O.A. Рапп, В.Г. Пашинский, Т. И. Фомина// Раст. Ресурсы. -1995. Т.31,Вып.2. - С.50-52.
89. Рапп, O.A. Сравнительная оценка фармакологической активности экстрактов из сырья березы, полученных на этаноле различной концентрации / O.A. Рапп, В.Г. Пашинский, В.С.Чучалин // Раст. Ресурсы. 1996. - Т.30,Вып.6. - С.23-24.
90. Рапп, O.A. Сравнительная оценка фармакологической активности экстрактов коры березы, приготовленных на этаноле различной концентрации / O.A. Рапп, В.Г. Пашинский, В.С.Чучалин // Хим.-фармац. журн.- 1999.-№ 1.-С.З-5.
91. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Magnoliaceae Limonaceae. - Л.: к Наука, 1984. - 460с.
92. Ревельский, И.А. О путях развития хроматографии состояние, проблемы и перспективы / H.A. Ревельский // Всерос.симпоз. по теории и практике хроматографии и электрофореза: Тез.докл., 13-17 апр., 1998 г. -М.: Прогресс, 1998. - С. 15-23
93. Руководство по газовой хроматографии / Под ред. Лейбница Э. и Х.Г. Штруппе. М.: Мир, 1988. - 985с.
94. Сараф, A.C. Перспективы поиска и создания природных антиаллергических, противовоспалительных и иммунотропных средств /A.C. Сараф, В.А. Бандюкова // Хим.-фармац. пр-во: Обзорн. информ. -М.: НИИСЭНТИ, 1994. Вып.4.-43с.
95. Связь между химическим строением и антистафилококковой активностью полиолов даммаранового ряда и их глюкозидов /С.И.Стехова, М.М.Анисимов, Л.Н.Атопкина и др. // Раст. ресурсы.-1998,-Т.34, вып. 1.-С.51-56.
96. Семенченко, В.Ф. Исследование природных тритерпеноидов в ряду лупана и ß-амирина и разработка на их основе новых лекарственных средств: Автореф. дис. .д-ра фармад. наук /В.Ф. Семенченко- Пятигорск, 1993.-34с.
97. Смирнова, JI.В. Количественное определение суммы флавоноидов в цветках бессмерника /Л.В. Смирнова, Л.Н. Первых // Хим.-фарм. журн. -1998. №6. - С.35-38.
98. Сподобцева Н.И. Сезонная динамика листовой массы Betula nana L. Subsp. Exilis (Sukacz.)Hulten в лесотундре Таймыра // Раст. ресурсы.-1981,- Т. 17, вып.2.-С.251-256.
99. Способ выделения бегулинола. Пат. 2138508 РФ, МПК6. С 07J53 / 00, С 07 J 63/ 00. / Кислицин А.Н., Сластников H.H., Трофимов А.Н. РФ-Зс.
100. Справочник биохимика: Пер. с англ./ Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. -М.: Мир, 1991. 544с., ил.
101. Справочник Видаль: -Лекарственные препараты России / Ред.сост. Николаева Н.Б. и др. -М.: АстраФармСервис, 1995. 1166 с.
102. Сур, C.B. Методы выделения, идентификации и определения терпеновых соединений (обзор) /C.B. Сур // Хим.-фармац. журн. -1990. Т.24,№5. - С.42-50.
103. Тодорова, B.I. Пол ¿фенол и дроку красильного i перстачу битого та ix використання у стандартизацп сировини: Автореф. дис. .канд. фармац. наук / В.1. Тодорова -Кшв, 1997,-16с.
104. Тритерпеноиды и флавоноиды из листьев сибирских видов рода Betula / Н.Д. Похило, В.А. Денисенко, В.В. Маханько и др. // Химия природ, соединений,-1983 43.-C.392-393.
105. Тритерпеноиды и флавоноиды листьев Betula fruticosa и Betula platyphylla / Н.Д. Похило, Г.В. Малиновская, В.В. Маханько, Н.И. Уварова//Химия природ. соединений.-1981.-Ы6.-С.804.
106. Тритерпеноиды и флавоноиды из листьев сибирских видов берез Betula nana и Betula exilis / Н.Д. Похило, Г.В. Малиновская, В.В. Маханько и др. // Химия природ. соединений.-1985.-№.-С.352-356.
107. Ушанова, В.М. Выделение малыша из коры пихты сибирской углекислотным методом / В.М. Ушанова, А.В.Зиганпшн, С.М. Репях. // Химия природ. соединений.-1998.-Ы1.-С.131-132.
108. Хакимова, Д.Р. Унификация методов стандартизации флавоноидов в процессе производства препаратов боярышника, зверобоя и календулы: Автореф. дис. . канд.фармац.наук /Д.Р. Хакимова -М., 1994.-23с.
109. Химический анализ лекарственных растений /Под ред. Н.И.Гринкевич, Л.Н.Сафронич. М.:Высш.шк., 1983. -145с.
110. Экстракция жидким диоксидом углерода / И.М. Балакин, А.Н. Рощин, В.Т. Ильиных и др. // Тр. Свердл. НИИ хим. машиностр. -1998. №5. - С. 73-79.
111. Эфирное масло почек Betula pendula Якутии / P.A. Степень, В.А. Хан, В.А. Вершняк и др. // Химия природ, соединений.-1987.-N6.-С.803-805.
112. Чирков, А.И. Лекарственные сборы /А.И. Чирков, B.C. Серый -М.:Медицина, 1993. -285с.
113. Arzneipecase des Iahers Birke (Betula) // Therapeuticon, 1993. Vol. 7, № 10-C. 440.
114. Bate-Smith, E.C. The phenolic constituents of plants and their taxonomic significance /Е.С. Bate-Smith // J.Linn.Soc.bot. -1962. Vol. 58, N 3H. -P. 45-173.
115. Borkowski, B. Farmacologiczhe i biologiczne znaczenie zwiazkow trojterpenowych / B. Borkowski, B. Pasich // Farm.Polska.- 1962. -Vol.18, N3.-S.49-50.
116. Chemical evaluation of Betula species in Japan .1. constituents of Betula ermanii /Fuchino, H., Satoh, Т., Tanaka, N. // Chemical & Pharmaceutical Bulletin.- 1995. Vol 43, N11,- P1937-1942.
117. Composition of essential oils from two endemic sideritics species of Turkey /N.Kirimer, N.Tabanca, T.Ozek and ets. // Химия природ, соединений.-1999.-N1 .-C.76-80.
118. Clarkes. Isolation and identification of drags in pharmaceuticals body fluids, and post-mortem material. Second editor. London: The pharmaseutical Press., 1986. - 1223 p.
119. Danzer, K. Three- and higher-dimensional calibration in analyticalK chemistry: Abstr. 14 th Semin. Atom. Spectrochem., Hightatras-Podbanske, Sept. 7-11, 1998 / K. Danzer // ISP Inf. Newslett. -1999.-Vol.24,№8.- P. 642.
120. Dencitometricno dolocanje rutina in Kvercetina v zmesch / M.Cinc, T. Podboj. K.Lomovsek et al.// Farm. Vesth. 1977. - Vol. 28, N 1. -P.23-24.
121. Dulelenbach-Tollke K., Nyiredy Sz., Gross G.A., Sticher O. Flavonoid glycosides from Betula pubescens and Betula pendula // J. Natur. Prod. -1986.-Vol. 49, N6.-P. 1155-1156.
122. Ekman, R. The Suberin Monomers and triterpenoids from outer Bark of Betula verrucosaEhen / R. Ekman // Hölzforschung.- 1983. -Vol. 37, N 4.-P. 205-211.
123. Extraction method for the isolation of terpenes from plant-tissue an<3 subseguent determination by gas-chromarograthy / Bowman J.M., Braxton M.S., Churchill M.A. ets // Microchem. J. 1997. - Vol.56, №3. - P.10-18.
124. Fischer, F.G. Die Triterpenalkohole der Birkenblätter /F.G. Fischer, N. Seiler// Liebigs Ann. Chem, 1959. - Bd.626, №l-3.-S/185-205.
125. Furuya, T. Gas-ligid chromatography of trimethylsilyl ethers of some Flavonoids and compounds /T. Furuya // Ibid. -1965.- Vol.19, №3.-P.607-610.
126. Caspar, G. Cromatographie in plase gazeuse. I'asymetrir de de pin n'est pas une fatalite. /G. Gaspar // Srectra anal. 1997.- Vol.26, №199. -P.36-37.
127. Han, B.H. A new triterpene betulafolienpentaol from Betula platyphylla / B.H. Han, B.I. Song // Phytochemistry, 1977. Vol. 16, N 7. - P. 10751078.
128. Hansel, R. Vergleichende Untersuchungen über die Flavonglykoside der * Betulaceen /R. Hansel, L. Horhammer // Arch. Pharm., 1954. -Bd.257/59,№3.-S.l 17-126.
129. Hiroyuki, F. Chemical evaluation of Betula species in Japan /F. Hiroyuki, S. Tetsuya, T. Nobutoshi // Chem. And Pharm. Bull. 1995. -№11.-P. 1937-1942.
130. High-performance liquid-chromatographic separation and identification of phenolic-compounds from leaves of Betula pubescens and Betula pendula / Ossipov, V., Nurmi, K., Loponen, J. et al. // J. of Chromatography A.- 1996. Vol.721 (1). - P.59-68.
131. Hegnauer, R. Chemotaxonomie der Pflanzer /R. Hegnauer Basel; Stuttgart.- 1964.-Bd.3.-743 s.
132. Horhammer, L. Isolering von Rutin aus Betula humilis / L. Horhammer, R. Hansel, P. Frank // Arch. Pharm.- 1953. Vol. 286, N 10. -S. 481482.
133. Horhammer, L. Isolering eines Myricetin 3 - digalaktosides aus Betula verrucosa and Betula pubescens / L. Horhammer, H. Wagner, R. Luch // Arch. Pharm.- 1957. - Vol. 290, N 7. -S. 338-341.
134. HPLC isolation and identification of flavonoids from white birch Betula pubescens leaves / Ossipov, V., Nurmi, K., Loponen, J. et al. //
135. Biochemical systematics and ecology.- 1995.- Vol. 23, № 3. P.213-222.
136. Ikekawa, N. Two new triterpenes from Betula platyphylla / N. Ikekawa, A.Ohta, M. Seki, A. Takanashi // Phytochemistiy. 1972. - Vol.2.,-P.3037.
137. Karrer, W. Konstitution und Vorkommen der organischen Pflanzenstoffe / W. Karrer Basel; Stuttgart, 1958. - 1207 s.
138. Lawrence, B.M. Progress in essential oils /В.М. Lawrence // Perfum. and Flavor. 1990. - Vol. 14, N5. - P.57-65.к
139. Losungsmitteealauswahl in der GC / Brodacz W. // LaborPraxis. 1998. - Vol.22, №9. - P. 14,16,18-19.
140. Masada, J. Analysis of Essential Oils by Gas Chromatography and Mass-Spectrometry /J.Masada New-York: Johu Wilky, 1976. - 334p.
141. Morphological and molecular variation in natural-populations of Betula/ Howland, D.E., Oliver, R.P., Davy, A.J.// New Phytologist, 1995 -Vol.130,№1. -P.l 17-124.
142. Ohmoto, T. Constituents of Pollen: Constituents of Betula platiphylla var. japonica /Т. Ohmoto, T. Nicaido, M. Ikuse // Chem. And Pharm. Bull.- 1978. Vol.26, N5. - P. 1437-1442.
143. Ozek, T. Supercrtical CO extraction of volatile components from leaves of laurus Nobilis L. / T. Ozek, B. Bozar, K.H. Barek // Химия природ, соединений,-1998.-N6.-С. 746-750.
144. Pawlowska, L. Quantitative daily changes of flavonoid glycosides in the leaves of Betula humilis. Schirk. iL. Pawlowska // Acta.Soc.bot.polon.-1976. Vol. 4S, N 4. - P. 395-400.
145. Phytochemical evaluation of essential oils, medicina plants and their preparations / Lemberkonics E., Kery A., Marcrai G. et al.// Acta Pharmaceutica Hungarica. 1998.- 68, №3.-P.141-149.
146. Rimpler, H. Triterpens of Betula pendula and Betula pubescens. Comparative study / H. Rimpler, H. Kuhn, Ch. Leuchkert // Arch. Pharm.- 1968. Vol. 299, N 5. -S. 422-428.
147. Santamonr, F.S. The distribution of Rododendrin in birch (Betula) species /F.S. Santamonr, Y.E. Vettel // Biochem.Syst. and Ecol.- 1978. -Vol. 6, N2.-P. 107-108.
148. Schöpke, Th. Triterpenoid saponins. Part.VI /Th. Schöpke, K. Hiller //Pharmazie.-1990.-Vol.45, N5.-S.313-342.
149. Singla, A.K. Quantitative spectrofluorometric determination of flavonoids and their glycosides / AK.Singla, Kamla Pathak // Indian J. Pharm. Sei. 1991. - Vol. 53, N 1. - P.27-30.
150. The standart addition methodology for evaluation of resalts in chromatographic analysis / Bagur. M.G., Gazguer D., Sanchervinas M. ets // Analisis. 1997. - Vol.24, №9-10.-?. 774-380.
151. Triterpenoids from Betula alnoides / Kamperdick, C., Thuy, T.T., Vansung, T. & ets // Planta Medica.- 1995. Vol. 61,№5, -486p
152. Two new triterpenes from Betula platyphylla / Ikekawa N., Ohta A., Seki M„ Takahashi A. // Phytochemstry.- 1972. Vol. II, N 10. - P. 30373040.
153. Wollenweber, E. Flavonoidmuster im Knopsenexkret der excretions of Betula ermanii / E. Wollenweber // Z. Pflanzenphysiol.- 1971. Bd. 65, N 5. - P.427-431.
154. Wollenweber E. Le betuletol (dihydroxy 5,7 - dimethoxy 4,6' -flavonol) et le methyl - 3 - betuletol, nouveax composes naturels extraits de Betula ermanii Cham. / E. Wollenweber, Ph. Lebreton // Biochimie.-1971.-Vol. 53, N8. - P.935-938.
155. Wollenweber, E. Rare methoxyflavonoids from buds of Betula nigra / E. Wollenweber // Phytochemistry.- 1977. Vol. 16, N 2. - P.295