Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Химико-токсикологическое исследование фурадонина

Р Г Б ОД

2 2 МАЙ ®

На правах рукописи

ПАВЛИК Игорь Петрввич

ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ФУРАДОНИНА

15.00.02 — фармацевтическая химия и фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степенн кандидата фармацевтических наук

ПЕРМЬ — 1995

Работа выполнена в Курском государственном медицинском университете.

Научный руководитель — доктор фармацевтических наук, профессор Квач А. С.

Официальные оппоненты: д. ф. н., профессор Вергейчик E.H.

к. ф. н., доцент Хомов Ю. А.

Ведущая организация — С-Петербургскнй химикофар-мацевтический институт.

Защита состоится «30» мая 1995 г. в «13» час. на заседаний Диссертационного совета К 084.70.01 при Пермском государственном фармацевтическом институте (614600, г. Пермь, ул. Ленина, 48).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пермского фармацевтического института (614070, г. Пермь, ул. Крупской, 46).

Автореферат разослан «¿ji» апреля 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат

фармацевтических паук, доцент / О Метелена Е. В^

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ: В настоящее время а медицине широко применяются препарата нятрофуранового ряда,к числу.которых откосится фурздонга.- Иногда он мокет быть причиной отравлений, то есть исследоваться ¡сак объект химпко-токсикологичоскогого анализа. Не смотря ка определенное токсикологическое. значение данного препарата, аетодц выделения и ¡.«тодккп гаш. гес&'энного определения фурадснн-па в силу их неспецифичности,невысокой чувствительности,длительности проведения этпоз при копольвованк! тс; в практике работы хелико-токсикологических лабораторий,вызывают определенные затруд-нгши. ';

Изыскание новых методов анализа, пригодных---''для о-рэделекия предлагаемого препарата в крови, моче, '¿ланях организма и других объектах биологического происхождения необходимы н? только для целей хкмико-токсикологического анализа. Эти методы необходим фармакологам, биохимикам,специалистам, изучающим распределение препарата в органах и тканях людей и киеотных, для определений токсичности, динамики накопления, и выделения фурадонкяа из сргз-нна!а,для выполнения ряда биофармацевтических последовать. и т.д.

Остается актуальной проблема создания надежных методов выделения дурздояин из объектов биологического происхождения, его паче твен:.ого п количественного определения, пригодных для целей судебно-хкмкческого анализа.

Яродоллают повышаться требования к качеству лекарственных форм с фурадонияом.что неразрывно связанно с совершенствованием методик постадкйного контроля и последующей объективной стандартизацией конечного продукта.

Поэтому решение комплекса вопросов ■ связанных о разработкой методик его обкаруления' и количественного пределения в с'ютан-цки и других лекарственных формах,дальнейшей унификации процесса контроля производства фурадончна,методик изолирования фурздонина ;:з объектов биологического происхождения, методов очистки вытялек из биологического материала от белков и других веществ, мешающих определения фурадшина,представляется актуальной проблемой современного химике-токсикологического анализа.

ЦЕЛИ РАБОТЫ К ОСНОВНЫЕ З.йДАЧЯ ИСГЧЕДОБДКЙ:Целью работы являлось создание новых,высокочувствительных методик качественного обнзру-яенкя и количественного определения фурздонина к полупродуктов

аго злнтеза, пригодлих длк поо2эд:а1ясго консрола яри эго прол-еодствэ, спр. молоке- проперага в субегалцггя.в лакзретвекни:: еор-ызс, создание аффекетвык иогодов аздэлешг: £.урздо:-п::... \ на объектов Сшеопг-юксго преизхекдопл! :: пселгдуягдего коликеохвеьасго .лэгяеяеЕия в них препарата, яригодаЕ.: длл хгслл^-тско^ологзгчес-кзго ензллза. Для достзл-епхя псстсзл^лпэй цзлл пгс5ходл,:о смло релить сле-дужгцие задачи:

- наиги реагенты, пр:ыэкеш:е которых пс '.згает чугогиктел^поо» ^чоотвеш-гаго и количественного определения "усЕдоннна в суОстэнцпп, друпгх лекарственных формах

- разработать ушйицироьанвыэ зксолзчувствительнке фотометрически© кетод».'и^пр;-:гсд!:ые длл поогадлйкого контроля синтеза процесса пролЕгодсзЕа йурадонпна

- разработать чувствительном методу обларукеькл oohqbhlec походных продуктов п полупродуктов теза фурадонина (5-нятрофур-С'/Рола, 5-ннтрофурфуролдиацетага, пздантоика, 1-аминогидазто1ша) 2 СубСТЗНЩШ

- разработать методы количественного определения основных исходник продуктов к полупродуктов синтеза фурадоннпа (5-нктрофур-фурола,Б-шгерофурфуроддиацетата,гпдэнтонна,1-аминсгидантоина)

субстанции;

- разработать мзтод:-;:?/ количественного .определения фуредонинс. в воздухе пвс:13?с,дс?з ; jsrk :ю>,:зп,ен::й

- выбрать опта^Л!!-".": рдзтаор;?гал* для "золпрооанпл фурадмпаа из б;:слсг::-:ззг,:.>зо .члтерпзпп

- опредегтгь вг"п:'г.5 г" era:::; i: ti:-:^.™.' cprxcwoc::;!?; растворителей га стзггг:.^ фуотдели;;;;!

- изучить г criv':::;: ::го:£гро!>а:шя шурадонннз па биологического г ^ rr-v^r.r'i г. глщонтрацж кислот

- C03"3"i : " ':::з:\- — rr-j.:;:.фурздонлне из тканей а,:„7„,....... с^.-.-;-^,.';-:-.".-; :,'лдкостей организма прел-

т:' ^"^зссвеннуа сц:::'.'/ с\;-',р:.<£.ш:я препарата в mix

- со:-:р.а;-:я9!.::ст:> v/pc з;;;:;:а г. трупном натогиале в про-т'з.-. ого гнплс ~тного разлз:-.::-:;;;л.

'"•-••"i е теорьтяшуя значлость работы: б процессе

¡'5 пэдзбрзга! опт.з.'эльные услззлг. проведения козьих ш-ч-'З^1'л :;:;:< цзик^х резлцлл определен;:? ^уряцокп;:: . Сзздлпы

- Б -

га количественного определения фурвдонинз з чьотом виде,лекарственных формах. азработаньы унифицированные методики количественного определения фурадонкса п'! полупродуктов эго синтеза пригодные для постадийного контроля и последующей объективной стандартизации конечного продукта. Предложен метод выделения,обнаружения и количественного определения фурадонинз на тканей внутренних органов,биологических жидкостей организма и проведена количественная оценка содержания в них препарата. Изучено распределе-Епгэ фурадонинг в органах и биологических жидкостях кроликов, отбавленных этим препаратом,а также влияние процессов гниения на • ;охрэняемость фурадонина в трупном материале-.

По к :ериалам работ*' изданы и внедрены на фармацевтических Предприятиях СНГ "Методические указания по слределешга содержания зурадонина и фу. ягина в воздухе рабочей вот проигводственкш по-(ез шй" ,.1У 54-104-90.

Методики определения изучаемых препаратов в биологических .идкостях могут Сыть испольвоезны при разработке индивидуальных оз конкретным больным.' СВЯЗЬ ИССЛЕДОВАНИЯ С ПРОБЛЕМ!ИМ ПЛАНОМ ФАВЭДЕВТИЧЕСЮХ НАУК. Диссертант Еыпотаена в соответствии с планом чаучно-исследова-ельоких сабо? Курского государственно]. медицинского унив^репте-а по прЛ;леме "Фармация".

АПРОБАЦЯЛ РАБОТЫ. Основные результаты диссертационной рьбеты или доложены на:

- Есесоюзкок научно-практическом семинаре "Опыт работы иьуч-о-техНической общественности Всесоюзного химическою обществе <1. Д.И.Менделеева по.зсэданио экологически ицепк реггопов." (г. гла, 19Э0 г.);

- конференции 1ТМИ "Актуальные вопросы йкслори'-'ечталхной и кли-'ческой медицины и фармации " (г. Курск, 1900 г.);

- научно-практической конференции (г. _Елэдими}, К"31 г.);

- мл-ддународном научном симпозиуме "Уэтэ?,н чечтрелл лс-кг.рсгзон-« средств." (г. А!гх£*0а.7ь 1СР1 т.у, •

- иеучно-лрактгческой к^ншррс-.чцуч областного глчес;-:ого дества за 1590 год (г. Трл/сгод, г.);

- на/чко-грахклЗскгЛ кгн^зк'.'иге;, пссдешш; Ю-я/гчн &ту-ЧГ г,т;пгсчогс ' Оут.. л игГзэ^-пти 1 г.

ции в Сибири и на Дальнем Востоке." (г. Томск, 1991 г.);

- нау^шс-практстесютй конференции,посвященной 25-детко фарма-цовтачес ого факультета Курского медицинского института "Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики."(i.Кур^к, 1991г.).

ПУЕ." ЗСАЦИИ ПО РАБОТЕ. Па материалам диссертационных исследований опубликовано в центральной печати 22 работы,в тол-: числе; 8 авторских свидетельств, 1 методические указания; получено 2 пояснительное реие-ио ВНШ1ГПЭ, 5 удостоверений на рационализаторские предложения.

НА ЗАЩИТУ ВЫНОСЯТСЯ СЛЕДЯЩИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И

ИХ ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ.

- методы обнаружения и количественнага определения фурадонинг ь субстанции, лекарственных формах, объектах биологического происхождения, воздухе рабочей вони производственных помещений;

- методы обнаружения - количественного определения основных походных продуктов и полупродуктов синтеза фурадонина в субстанции, биологич-сгак объектах;

- методы изолирования фурадонина и его во. южных метаболитов из объектов биологического происхождения;.

- результаты изучения сох, лняеиостк фурадснина в миологических тканях;

- результаты изучения распределения фурадонина в органах подопытных «ивогных (кроликов).

ОКЬШ и СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертационная работа изложена на 170 страниц .: машинописного текста, содераи 57 таблиц, 32 рисунка, состоит из введения, 7 глав, общих вызовов, списка' ; литературы, вкшочащего EOS источников,из них 93. на иностранных - языках, приложения.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ. Во введении отражается актуальность,нау^-1 нал йовпзна и практическая значимость исследований.определены их цель и задачи.

В обзоре литературы отражены физико-химические характеристики фурадонина, сравнительный анализ существующие методов определении ere в лекарственных формах и биологических объектах, приведены ■ фармакологические и токсические свойства фурадонина.

1. Обнаружение фурадонина

В. химичвсх I отношения фурадонин представляет собой: N- (Б-нитро-2 фурфури-'с ден)-1 -амикогидантскн

НС-сн н.яс--С=0

0„N-C C-CH-N-N NH я \ / \ /

Дня идстифктции фурвдошяв пргас'Я.тот ряд цгеттлх petiKu^'T о использованием в качестве цветоребгентов;2,4.-динитрофеЕилгидразина, растворов едких щелочей. (Царева В.А. .Вестфань Н.И. Цветные реакции на фурадонин,фуразолидон и фурациллин //- Аптечное деле - 1965, - т.14 - N.3 -С. 60-61. ,Эгэрт В.Э. .Шлманскал M.S. ,Гшшер С. А. Методы количественное. определения 5-нитрофуранов //- Изв. Академии Наук Латвийской ССР - 1S62.- К.1 - 0.39-43.). Однако область применения этил р_еакщш,кэк правило,ограничена обнаружением фурадонина . лекарственных корках.

В доступной нам литературе ш не обнаружили методов идентификации исходных продуктов и полупродуктов синтеза фурадонина, хотя ото имеет больпое значение как для контроля процесса синтеза так и для определения возможных примесей з готовом продукте.

В основу предлагаемых нами метод:« обнаружения с&уредснжи, 5-нктрофурфУРОлар 5-нитрофурфуролдизцет~г"а, гядантоина и 1-амино-гидантоина положено использование ряда цаетореагентов-. род анидов натрия, кадия п аммония, гексацианоферратсв (II) к (III) калия, производных родгнинз, производных фенола, хромотроповол кислоты, триптофана. Эффекты предлагаемых рс-£кцил, предел обнаружения, обнаруживаемый минимум исслег 'емкх препаратов предотаьлень в та^идал 1,2. Ирн.цлохеннь!'-: реакции обнаружения фурадонина использованы для его j лекарстгекн^х фзризх." Ивучопа свхэкгпзнсоть р^счгии.

О

Таблица 1

Результаты идентификации фурадонина

Обнаруди Предель- Предел Показатель

Реаге 7 ваешй ное раз- обнаружения чувствитель-

- минимум бавление (Г/СМ3) ности

- (мкг) (см3)

Роданин 1.0 1х10б 1.0x10"® 6.0

3-е,т-Дикарбокси- 2.0 5х105 0.2хЮ"5 4.3

пропклроданин 1

3-Ц-Карбокоиэтил- 5.0 2х105 0.5х10-5 4.7

роданин

З-Карбоксиметил- 5.0 2х103 0.5Х10"3 4.7

роданин

Гидрохинон 5.0 2x10® 0.5Х10"5 4.7 • |

Пирогаллол "А" 1.0 1х10б • 1.0x10"® G.0 |

•Тимол 5.0 .2x10® 0.5x10"® 4.7 J

Пирокатехин 2.0 5x10® 0.2x10"® 4.3 б

Фенол 2.0 5x10® 0.2x10"® 4.3

Флороглюцш: 5.0 2x10® 0.5x10"® 4.7

■1-нафтол ■ - 5.0 2:с100 0.5x10"® 4.7

2-нафтол S.0 2х10б 0.5x10"® 4.7

Резорцин 1.0 1х10б 1.0x10"® 6.0

Хооыотроповая к-та 5.0 ?Х105 0.5Х1С"® 4.7

Роданид калия 2.0 5x10® 0.2x10"® 4.3

Роданид натрия 2.0 5x10® 0.2x10"® 4.3

Роданид аммония 2.0 5х105 0.2r:0"® 4.3. |

Ге. ¿зацианоферрат

(И) калия .-' 10.0 0.5x10® С.2x10"6 б.з 1

Гексацианоферрат 1

(III) какия 10.0 О.БхЮ5 0.2х10~б D. S 1

Триптофан 0.5 5х1С7 1 .2.0x1.0"® 5.7

1вми разработана методика идентификации фурадонина и полуарс-гов его ■ штеза о помощьи метода хроматографии в тонком слое >ента "Силуфол и1/-254" с использованием известных систем ■верителей. Для проявления пятен на хроматограммах мы пельво-юь раствором 4,4-тетрзмет11лдиамгага-дифечилметана смешанного створам иодида калия и рйлЕорсм нингидркна пригстов ценного коусной кислоте.Предел обнаружении соотазляэт Аик!' ч 0.1 мл. лскенная ГСХ-методикз использована для идекткфика11да фурадо-а биологическом материале (см.табл.3)

'.{етоды, пригодные для клинических и химико—гсксккологич-эских гдований фурадонина,йтличаются неспецкфичиоотьп и для их принта к работе о биологическим материалом потребовалась бы очень сая степень очиотки полученного извлечения. Разработка мето-соличественшго определений фурадонина в лекарствен^: : формах

Таблица 2;

'еэультаты вденткфикации полупродуктов синтеза фурадонина

еагент Препараты Обнаруяи ваемый минимум (ыкг) Предельное разбавление (см3) Предел обнаружения (г/см1)

г-«икар-шропил-ИЕ Фурфурол 5-натрофурф,'рол 5-нитрофурфурод-диацэтаг "1.0 5.0 0.0 1х106 2х?05 2х105 1х1ГГб I 0 5Х10"? 0.5Х1С"3

аллод Фурфурол 5-нитр'1 '//рфурол 5-нитргфурфурол-дпаце-тгт • £.0 1.0 1.0 5х108 1К10б 0.2к10~5 | 1.СХ1СГ6 1.0к1С'"Р|

ГГ)ОПО- 1- а,,!Ч1,'''г;-г.а:г1 о^п Гллачтсич ■1.0 . г- /Т * - л!. и 1' ...... ■ ■ 1'I

- IQ -

Таблица 3

Значения Rf фурэдонича и его долупродуктов синтез в различных системах растворителей

111 Rf препаратов

Сисхеш растворителей

Фурадонин 5-Нитро Гидантош. 1-Амино

фурфурол гидантоик

Ацвтон-этилацетат (7:3) 0.84 0.93 0.83 0.74

Ацетон--этанол (1:1) 0.76 0.86 0.00 0.69

Ацетон 0.65 0.77 0.0Q 0.60

Ацзтон-эгилацетат (3:7) 0.85 о.ео 0.47 0.57

Гекоак -хлог форм- ледяная

ухсускгд кислота (г-3:1) 0.02 0.43 0.00 0.00

Гекса^-бекгсл-атил'-цетат 0.00 0.24 П. 00 0.00

(6:2:1) Хлороформ 0.04 0.71 0.00 0.19

Пропалил-этилгцзтат- зода

(?:fc:l) 0.?7 0.65 0.00 0.49

Метанол-ацеток (1:15) 0.73 0.65 0.00 0.63

Ацетон-ледяная уюусная 0.71 0.82 0.00 0.62

кислота (10:1) "ексан-ацетсщ (1:1)

0.41 0.09 0.27 0.36

[Хлороформ-метанол (9:1) 0.Е5 0.52 0.19 0.41

¡Д!'оксг.:»-0енэол (1:1) 0.93 0.28 0.31

и объектам биологического происхояенин является актуальной проблемой. Кро„.э того отсутствуют методики количественного определении исходных продуктов и полупродуктоз синтеза фурадонина как росмоа-ных источников его загрязнения.

В о.лову предлагаемых четодкк количественного фотометрического определения фурадонша.Е-яитрсфурфурояз, Б-ян-гройурфуролднз-цетага, гидантоина и 1-&\иногндантоинз положено й ;го./П>ьоза:ме ряда цветореаге^тов (3-а, ч -дккя?боксилропилродат:ча, нртлгЕЗ^кы) фенола,хромотроповой кислоты, триптофана,тил-п-феяилен-диаяша дигидрохлорида) с целы получения С';ргаен:-1к:< расгв^роз.

При разработке данных методик изучены спектры поглоеч-м полученных окрззеяшх растЕОрОЕ (прибер - Ой-46, 1^1 си'' и олре- . делены рабочие длины если (рис. 1-5).

■ Изучены факторы, влиявшие на возникновение скрепки (количества реагентов, температура реакционен смеси, врем? взд-чмо-декствия.рН среды) и стабильности пслучеаЕЬ'л окрахееных разверз.

Построены калибровочное графики для' спсктрофс.г -гтоичес^нгэ и длэтоэлектроколог .метрического определения анализируемых гоедк ■нений, расчитаны параметр:-: уравнений лччейчей Еааиск>,:ооти,'удолл-ные и молярные коэффициенты светопоглощения (гобд 4--6). Установлен состав образующихся окрашенных продуктов р^акцч;"! донина о З-емг-дикарбоксгпрспилроданином и с пирегаллим "а" методом Асмуса .методом Гарвек-Меннинга, методом Острсжслэнскохс-'й. 5а. (рис. 6-8.)

. 3. Количественное опред.ление фурадошша в члотсм виде. з г лекарственных * эрмах.з воьдуг.е рабочей зоны поонзвдотв'-п-ных помец-эшг"

Согласно разработанным методикам прогедено количественнее определение фуредеяина в зубстзнцих л таблэлсл по 0.С5 г., а ггк-же количественное определение- основных исх^пж продуктов :: полупродуктов его '•синтеза. Статистическая ;бря2огуга гггтев нстичествллсго опгеде.м-к'/я ф-задсника в л~:-:чрст2с-аиьч ■х^.у'л по рэаклка его ггсэтсцейсгвия с 2-з, г-Д1--:гг.£":«чи-со:.:!грог .м предогавле.*з з '-.25^.7.

г

0.3

0.7- ■ Г" - | —'

0.6-

0.& /

0.4- \ V \

0.»

0

0.1- N1 1 1

ру/.

. 400 4.60 50с 550 X (н»1 .2.Спектральные кривые полученные при Е»адащей№:лщ:фур4у -рола '1/,5-нигроф"рфурала /2/,5-шгрофурфуролдивдета-*"' * * ' см "А в к------ —

тг /3/,фурадопина ш с пирогаллолом

кислои среде

4Й0 4!э0б5о бЙГ \ (км)

Рлс. 2. Спектральные кривые па: -ценные щи: взаимодействии фурадо-г нина /1/,гидан1.лна /2/, 1-ашногидантоина /3/ хромотро-отаой ккодотой

400

Рпо.4.Спектральные га не ник: з триптофана:;

1---,----->

гюо 5га х (км) полученное при ¿ьаикогайогтп

о.еЪ

0.70.6 0.Б 0.4 0.3 0.2 0.

"Ж

450

550

Рис.5.Спектральные кривые полученн_з при ззек^сдейог^;'-нина /1/,гвданхсша /2/, 1-згшюг1ц;аыои:га /3/ о тил- п- фенилендиакина дигадрохлоридо:.;

I

уурадо-

Га."й:ща 4

Молярный коэффициент э юстиции и чувств/г^ольнос^ определения фурадонина

Время Стабиль Молярный ;СбН"" /.V - ||

Назв£;-ле анализа ность

реагента - (ь&щ) продукта ЭгйЛКНЦИИ "а 6 к?) ■ ||

Е (Ш!Н)

Ро^анин 430 5.0 120.0 23607.67 "6 " !■

3-й,у-Дикарбок 543 5.0 120.0 16557.33 0

сипропилроданин 16155.93

!3-р-:<арбокои- Е40 5.0 120.0 г"» П I

¡атилроданин * II

\ 3- Карбокскмэтил 1 г\п тт нттт ттт 540 . 5.0 120.0 10545.21 -

шидашш !Гидрохинон 495 о.О 60.С 10Й99.45 3 о

■Пирогаллол "А" 468 5.0 60.0 23696.51 Л 0

1 Тимол 468 20.0 ¿3.0 12703.19 5 Г\ 1

¡Пирокатехин ' 463 5 0 60 .-0 17791.55 •0 :!

?5с-яол 5.0 БО.О 15574.83 2 'Л

¡Злорог.тацин 455 •з.о 60.0 144-".8.20 о ° !

1-нафтол 512 20.0 30.0 3717.94 5 0

1 Резорцин 478 5.0 60.0 20065.95 1 0 Ч

¡Хрсмогроповая ¡1 .0 !

кислота 575 5.0 50.0 7704.62 5

Триптофан 490 5.0 60.0 2540.8.62 0 ■5

0у'/ЗДОНИК 555 60.0 00.0 11352.8" 5 .0 ||

. п -п А(1/Уг) X 1

(1) 1 "е г!о г!ь з!о з:б

1!б г^ог'.ь г'о з;б

Рис.6. Г; 'фическое определение соотношения компонентов реакции

фурадонина с:3-а.т--дикарбокоипропилроданиноы /1/, - о пирогаллолом 'V " /г/ по методу прямой линии

т-1 1—I-1-Г"> СфУР.

0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 Свод. (1) 0.8 0.6 0.4 0.2 1.0

(2)

о!?. о!<1 с!б о!в " ¡0 Спда". 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0

Рис.7.Графики зависимо -ти оптической плотности растворов изомсмпэ нях серий от их состава регенты: 3-ц, г-дикарбоксипро-нилродашш /1/,пирогаллол "А"/2/

1.СИ 0.80.60.40.2-

(1)

—I--1-1-1--.

0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

Рис.8. .Графическое определение -остава окргиенных продуктов реакцчл азаимодеиствия фургдонина с:3-а,т-дикаобок-сипрошшраданином /1/, пирогаллол "А"

1.Оптическая плотность окрашенных растворов при постолнноп концентрации 3-а,у-дикарбоксипропилродзнина ули пирогаллола "А" 2.0птич'лкая плотность скраненных растворов пои постоянной концентрации фурадонияа

- 1 С±иЛУ1ЦП и

Моляшшй коэффициент экотикцик и чуЕСтвт'тельностъ определения полупродуктов синтеза фурадояинз

!! р Реагент " Название препарата Сил) Время анализа в (мин) Стабиль нооть продукта в (мк ) Молярный коэффициент экстиншиг)

3-а,т-дикар боксипропил роданпн Фурфурал Б-нитройурфурол 5-нитрофурфурол ,'нацетат 430 ■740 э40 5.0 5.0 5.0 30.С 60.0 60.0 14000.00 12000.00 •15000.00

Пирогаллол "А" Фурфурол 5-нитрофу рб^/рол 5-нитрофурфурол дкацетат 453 462 462 5.0 5.0 5.0 60.0 60.0 60.0 17293.00 20431.28 20976.00

Хромотропог вая кислота Гидантоин 1-аминогидалтоин 540 480 5.0 5.0 60.0 60.0 1609.68 26747. "А

Н,М-диметил -п-фенилрч-дигмина дл-гидрохлорид Гидантоин 1-аминогидан- тога 555 505 1.0 60.0 60.0 60.0 23777.83 700о.68

Таблица 6

. Гзрам. :ры и уравнения калибровочных графиков для фурздоника и полупродуктов его синтеза

Реагент Название препарата Метод анализа Уравнение калибровочного графика

3-а, г-дикар боксипропил роданин Фурадонкя Фурфурол б-1Штройурфурол 5-нитрофурфурол дизцетат фотоколоршэтрия спектрофотометрам - 1/ -- // - 0=0.0122Х+0.3730 0=0.0026Х+0.0852 ! П=0.0140х+0.с300 0=0.0040Х+0.С870 0=0.0020X40 0060

Пиоогаллол "А" Фурадокин Фурфурол а-нитрофурфурол б-нитрофурфурол дизцетат фотоколориметрия с.-эктпофото^етокп - // -- // -- // - Е=0.016^Х-0.0045 0=0.0038Х-0.0070 ,0"0.СЮ7ЯЧ-0.С310 0=0.СС58Х+0,0814 0=0.0046Х-0.0480

Хроыотропо-вая кислота Оурадокин Гидантоин 1-а\жногидан-тоин фстоколорнлетрия спектр фотометрия фотоколэркмзтрпя спекярсфотеметрия фотогалоршетрип спектрсфотомэтрил С=0.0530Х+0.0455 П-О.ОО^Х-: 0.0268 С-0.0130Х+0.1473 О.'ОООЗХ+О.1650 0-0.0183Х-0.0/45 о=-ол4гох-о.о84э

Триптофан Фурадотлн фоток. лоршетрия спектрофотсме трия 0=0.00177Х-П.0540 С=0.С0-100Хт0.00П1

¡1, М-дкметил -п-фвнклен-дидыина ди-гкдрохллрпд Фурадокин Гидантоин 1-зшшОГидад-то?-л слектрофстс»сто:.и - // -- // - 0=0.0074ч-0.0100 ] 0=0.С400Х-0.05 5 0 I 3=0.0100Х-0.0170

о

Определение ¿ур&^онина в воздухе рабочей зоны проиэвод гвеннцл помещений является вжшой задачей. Цля атой цели рекомендован метод, основанный на взаимодействии нитрофурановых соединений о растворами едких щелочей ( Методические указания та измерении концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Анкетированный указатель.- М. :Б.и.1091.- С.165). С целью увеличения предела обнаружения фурадонина в воздухе рабочей зоны производственных помещений разработаны методик, основанные на взаимодействии последнего с З-а.т-дикарбоксипропилроданином и пирогаллолом "А".

: П^л определешш содержания фурадонина отбор гроб воздуха производили пропускай.о помощью аспиратора (20 д/мин.) через фильтры" из перхлорвиниловых волокон АФА ХП-18 или АФ»; ВП-18, ло-меденчых б патрон дг " от"эра проб. Фильтры из патронов переносили химические стаканы, туда ке добавляли 250 мл дистиллированной воды для растворения осевшего на фильтр фурадонина. Аликвотную часть полученного рао!_эра анализировали по ранее разработанной фотомегричг "ч«ой методике.

Таблица 7

Данные статистической обработки результатов ' количественного определения фу;, донина с я-ос.г-дикарбаксипрапилр' чанино:/ в оубстанции и в таблетках (п=5,Р«05Х)

Метрологические характерно тики Невдэно фурадонина

в субстанции в таблетках

Спектр зфото-мегрия Фотоэлекаро-колориметрия Спекхрофато-ме.г;:ил Сотс-злектро-колориметрия

: х:.{*> ■ Б ' ; - " • Д*" Х(?.)±Дх аХ; " Б.О 07.12 3.7090, 1.6587 10.31 97.12+4.61 4.75 5.0 • 97.БС 1.0977. 0.490Э 3:05 07.С0±1,37 1.40 5.0 98.68. 1.021СГ 0.4йб7 2.84 98.68^1.27 1.2Й 5.0 . ,.05 1.1380 0.5353 3.33 93.05il.49 | 1.52

Расчет содердания фурадонина в анализируемых пробах производили по уравнения прямой предварительно построенного калибровочного графика.

Резу "ътаты определения предотавлеш з таблице 8.

Таблица 8

Данные статистической обработки результатов количественного определения фурадонина в воздуха помещений (п»Б,Р=95Х)

I Метрологи-

1 чеокиэ Найдено фурадочина

| характерно

п тики в субстанции в таблетках |

Спектрсфото- Фотоэлектро- Спектрофото- Фотоэлектро-1

| • метрия гагоринетрня метра колориметрия

1 п 5.0 5.0 5.0 5.0

1 X (X) 95.30 95.03 98.04 97.72

1 3 2.9958 2.6127 '1.035Э 3.3038

1 5* ' 1.3397 1.1*82 0.4632- 1.4797 '

I ^ 2 10 3.24 2.88 2.84

1 Х(Х)±Дх 95.3±1.31 95.0Bi7.B0 98.9-" ±1.29 98.В2+4.11

| 1.33 3'.41 -1.28 4. ^4

На основе равраГ тгавной методики созданы методические указания по определении фурадонина в воздухе рабочей зоны производственных помещений. Дачные методические указания внедрены на предприятиях.фармацевти.еской промышленности, о чем свидетельствуют акты внедрения..

4. Определение фурад~чина в объектах биологического

'' происхождения >. 4

.Предложенные до настоящего времени методы определения фурадо-нина в биологическом материале,основанные на изолировании его раствс-

ра\ш кислот,не позволяют выделять достаточные количества указанного препарата из объектов химико-токсикологического а:злига. Нами проверена пригодность описанных в литературе методов выделение, токсикологически г-'жных веществ Стаоа-Стто.А.А. Васильевой, В.®. Кг ыаренко примен." дельно к выделении фурьдонина,

В езультахе выполненных экспериментов установлено, что методами Стаса-Отто, А.А.Васильевой и В.й.Крамаренки фурадонин из биологического материала извлечь не удается. Поэтому возникла необходимость разработки метода изолирования фурадонина из объектов биологического происхождения.

Для создания удовлетворительного метода изолирования фурадонина иэ объектов биологического происхождения, изучена возмо.чшость }го экстракции из водных растворов различными органическими растворителями *• зависимости от значений величины рН.

В качестве зкотрагентов использован ряд 'наиболее употребляемых б фармацевтическом и токсикологическом анализе свекеперегнан-ных рс 'тверигелей: бензол, Иооамилпвый спирт, хлороформ, диэтило-,'ый зфир, толуол, четыреххлористый углерод, гексан, этилацетат, н-бутанол. Для ооздан1Ш необходимой величины рН среды использована универсальная буферная смесь Ериттона-Робинсона.При значениях рН Etmie 7 исследования не прогодились.т.к. фурадонин в щелочной среде разрушается, ••

Количественное содержание фурадонина в экстракте определяли с помощью ранее разработанного фотометрического метода (реагент -З-я.г-дикарбоксипропдлродашш).

Проведенными исследованиями установлено,что фурадонин экстрагируется из кислой среды. Оптимальным экстрагактом фурадонина являем, л этилацетат и^и значениях рН 1-3.При этом экстрагируется до 94.03%, препарата однократной экстракцией.

Кроме того была изучена зависимость степей? выделения из био-штериапа фу Пронина от концентрации серной,соляной,трихлоруксус-ной и хлорной кислот,используемых нами в качестве изолирующчх кидкэсжэй.Исследования показали,что выделить максимальное количество фурадонина из тканей,ьогмзкно,используя в качестве изолирующей ' тдкести растворы 1 н. соляной кислоты. Нами бил разработан способ нэолиг гания препзрата иг биоматгриала основанный ::а цвукрзтнсм наотаиванли (по. 5-минут кячсдсе) ICO г измельченной ткача исследуемого органа с 1 н. раствором соляной

кислоты (порциями по 80 мл) и последующей экстракцией фурадонина из полученного извлечения в этилацетат.Для лучшего отделения жидкой фазы от твердых частиц биоматериала после каждого настаивания пробы центрифугировали при 1G00 об/мил в течении 5 минут. Центрифуг тгы анализировались на содержание в них фура, рнина.

С этой целы центрифугаты вносили в. -длительные воронки, туда же добавляли по 10 мл этилацегата и проводили экстракцию фурадонина путем взбалтывания содержимого делительных воронок а течении 5 минут на аппарате для встряхивания жидкостей. После этого делительные воронки ос-эвляли на 5 минут для разделения фаз.

Этилацетат отделяли ьг водной фазы е химические стаканы я экстракцию фурадонина зтилацетатом проводили еще два раза.

Полученные экстракты объединяли, этилацетат удаляли г/тем нагревания содержимого стаканов нз кипящей зодяной Сане.и в ;ухих остатк-vx определяли содержание фурадонина фотометрическим «етодом с использованием в качестве реагента З-а.г-ДИкарбоксипр"-тлроданина.

Нами были исследованы . ¿аницы определена фурадошша в биоло-'ическом материале разработанным методом.С этой целью в 100 г ¡иологического материала вносили 4000,800,400,100 и 50 мкг фурздо-пша и проводив изолирование его сог-зсно разработанной методи- • :е.Из кислотной вытяш-^i, после е<" очистки, экстрагировали фурадонин i,o помощью фотометрических методов, определяли его содержание.

Результаты эксперимента представлены в табл. 9.

Из данных таблицы 9 следует,что с помощью предложенного нами :етода достоверно из биологического материала, удается Быделить " е мене 91.60Х.Граница определения фурадонина разработанным методом

оставляет 0.4 мг препарата в 100 г биологического материала.

\

С использованием эютракции разработана методика Изолирова-ия фурадонина иэ крови т мочи.

Нами были подвергнуты анализу модельные оиразцы донорской рови и мочи содержание фург энин. Для и/. приготовления в мг-ные олбы на 100 мл вносили по 10.0 мл O.OlS-ного водного растЕора урадонина и общий обзем жидкостей в колбах доводили до метки в дном случае кровью,а в другом мочой.В 1 мл такого раствора содбралось по 10 мкг фурадонина.

В центрифужные проб"оки емкостью 30 мл еносиги по 5 мл анали-

Таблица 9

■Данные статистической обработки результатов определения фурадояина фотометрически* методом в вытяжках,полученных при изолировании его растворам солягай кисгтты из биоматериала, затравленного ПО 4000,£00,400,100 или 50 икг препарата (п=5,Р=95%)

Количество Найдено

! фурадонин, ■ фурсдонина Метрологические

в "00 (г)биоло характеристики

(мкг) (X)

1г...еского мате метода

| риала

1 ПГ.П п OQ он М • 95.70 а = 5 еХ» 5.2о

4О:О!О 35.00 87.50 X (Г,- 93.24 S - 3.C430

4000.0 36.64 91.50

4000.0 37.45 93.65 Sx - 1.7635

4.000.0 39.10 97.75. Дх - 10.96

Контрольный - - Х(Х)±Дх - 93.24i4.B0

опыт •

800.0 40.00 . 100.00 п » 5 6.49

800.0 35.82 69.55 X (X)- 93.69

í SC .0 39.10 37.75 S - 4.8"?0

i 800.0 36.64 91.60 Sx * 2.iV"88

800.0 35.82 89.55 йх = 13.54

Контрольный XC%)iüX - 63.69i6.06

с -нт - -

400.0 37.46 93, .5 П ■= 5 сХ~ 4.40

400.Г 35.00 87.50 X (X)« 91.60 5 » 3.2413

400.L 28.28 95.70

400.0 36.64 91.60 Sx =• 1.4495

400.0 35.82 89.55 Дх - S.01

Г.зз: рольный X(S;+ÜÍ: - 91.60±4.03

Г спыг

ICO. с 58.00 56.00 л - 5 е%-14.81

í ICO. 0 51.00 51. СО X (£) = 49.8и

' 103.0 44.00 44.00 S » 5.9:329

5 150.0 40.00 44.00 Zy = 2.6533

ь . 100.0 52. J0 f ".00 Дх = 16.49

: Контрен - - Х(7.;?Л" = 49.80i7.33

' ОПЧ1

ЕС. п -г - -

с?! ó - -

! г- -

Шч + -

| Lj'J . fj г

\ Контрольный - -

! .-ль."

сп*

-cf).4ap;,/;-:-K'Tv ни«:- ч/ЕСтвяте.'ьнооги методики

аируемьгх растворов крови или мочи,по 10 ил дистил."чрованной еоды, содержимое пробирок тщательно перемешивали, через пять минут в ни вносили по Б .¿л раствора 4 н. соляной кислоты и после тщательного перемешивания центрифугировали в течении 5 минут при 1500 об/мин. Центрифугаты собирали в мерные колбы на 25 мл.К осадка.. в центрифужных пробирках прибавляли по 5 мл 4 н. раствора соляной кислоты и после тщательного пег v-ливачия центрифугировали в течение 5 кинут со скоростью 1500 об/М' .Центрифугаты соединяли, объемы растворов в мерных колбах доводили дистиллированной водой до метки и после перемешивания в полученных растворах определяли содержание фурадонина.Анализ выполняли в двух вариантах:в первом случае растворы подвергали очистке на микроколонках с силикате.: :-м L 5/40 (ЧССР), _ с последующей экстракцией препарата этшгацетатом, а по второму варианту фу эдонин из анализируемых растворов экстрагировали згллацетатом. Содержание фурадонина определяли в сухих остатках • после полного удаления атилацетата фотометрическим методом (см. табл. 10).

Из данн_х табл-чы 10 следует,о удается экстрагировать ' фурадонина из крови или мочи от 92.32 до 93.11%.

По разработанной методике изучена сохраняемо„гь фурадо-к з в биологических тканях.Результаты исследований представ эны в таблице 11.

Из данных таблицы 11,следует, ч.и фурадонкн в печени трупа человека можно определить лишь в течении 6 часов.

.В. связи-с 5 м,что распределение фурадонина в организме исследовалось при создании в нем терапевтичесм.л концентраций этого препарата ( Сонин Б.Ь. Всасывание, распредели э, биотрансформация и выделение производных 5-нитрофурана ' живом организме // Фарма кология и токикология.- 1ь68.- T.31.N1.- C.ii6-120), исследовано распределение фурадонина в организме животных после введении доз, значительно превышающих терапевтические, что важно для химико-токсикологического анализа препарата.

Были использованы кролики породы Шипшила весом от 1.6 до 3.2 кг, которым после >:у_ _>чнсй голодовки "per оз" через зонд 1 здили внутрь фурзД1 з вид; суслен?:::: из расчета 2500 мг на 1 кг веса (v чсиуаньнсл порзпааз'лк дезе .•:•■,'р=до;.::на) .Ч-р^з 1 час посте введ?- . ния преллра i ьроликов e^Sivav: путей лседуп'сй эмболг- и ni.3^3-

л

Таблица 10

Данные статистическое. обработки определс ля фурздоккна Ь кровг и в моче псс-е экстрагирования е этилэцетат (п«5.Р»95/.)

Биологическая жидкость Содегланиз фурадонкна Е (мкг) ■ Найдено фурадонина Смет) I (I) ■ Метрологические характеристики метода

Кровь 1 ! 'ЕО.О 48.-2 96.24 п-Б £%= З.Зо 50.0 45.66 .. 51.32 X (%)= 92.30 50.0 45.65 91.32 5 - 2.4370 50.0 44.34 89.68 5Х = 1.1120 50.0 46.48 92.96 Л = 6.91 Контрольный - - Х(Д)±Лх 92.30i3.0ii опыт

I ; ; Моча 50.0 47.30 91.60 п « 6 е*- 5.1Б 50.0 45.66 91.32 X (%)= 93.11 50.0 45.66 91.Г 5 - 3.8500 ■ 50.0 45.63 91.32 5Х - 1.7228 50.0 50.00 100.03 Д>: = 10.71 Контрольный - - Х(Х)±йх - 93.lli4.79 опыт

Таблица 11

Данные статиотичес • й обработки результатов количественного определения фурадонина в "чгалогичесхсм матерка-те, подвернемся гнилостному разложении после акстраггрозания в этиладетат (п=5, ">-95£)

Время гние-шчл бИиЯОГ.:-чеоког материала Обнаружено фургдонина и загнившем бшахериале 1

п X №) 5 5х Дх Х(%)±Дх е.Х !

1 Ч1С 1 2 часа 1 3 чзса 4 чг.:= Б часов 1 б часог 5.0 5.0 БГ 5.0 5. С! 5.0 87.05 75.45 62.99 45.20 16.51 6.57 4.8236 3.7078 7.9353 4. .909 1.9901 2.0205 2.1571 3.8942 3.5492 2.1373 0.8900 о.еозб 13.41 24.21 22.06 13.57 5.СЗ 5.62 87.65+5.99 75.45+10.83 62 39+9.37 45.20+6.08 16.61+2.47 6.57+2.52 5.34 | 14.35 ' 15.79 13.45 1-1.90 3^.14

: 3 ча'^ог !Ко1;:ролыи: ¡опыт . .0 - - - — ______ _______... I 1

Таблица 12

¡-'зспределекив фурздонина в органах, тканях и биологических )..\дкостях кроликов стрззленпых этим препаратом ,

Объект послед?зянкя Еес (г) иди сб^еи (мл) исследуемого объекта Найдено фурадоннна

общий вес объекта в чг) взят'" на анализ (г,мл) ^ назгске еэято;! на анализ (ыкг) Т. в от введенному организм на 100 г..мл объекта (икг)|

Печень Р".07 . ' 99.07 - - -

&лудог. 0 18^.54 186.54 - - -

содержимым

Кишечник с 501.51 / 301". 51 - -

ссдер-.идл!

15.40 • '' . 15.40 1155.00 15. СЮ 7500.00

Сердце 8.10 8.10 - - —

"сзг 7.40 7.40 - - -

гсзь 5.00 50.00 1.00 500.00

лОЧЛ - • 5.00 1075.00 43.00 £ 500.00

Легкие • 8.20 8.20 -

водили вскрытг". На «содержание брали желудок с содержимым, ки-шечь.1К с оодеркимым, печень, легкие, сердце, почки, мозг, кровь, мочу. Печень, желудок и кишечник измельчали и на анализ брали по 25 г измельченного биологического материала, а мозг, легкие, сердце и почки исследовали целиком. Биологических жидкостей на анализ брали 25 мл.

Определение ^урадонина проводили по ранее" разработанным методизм. Результаты проделанных опытои приведены в телице 12,

Иг данных таблицы 12 следует, что ^рэдонин после его перораль-кого ьв. ,ен!и определяется в почках,з крови и в моче. Таким обраоом, при отравлен™ фурадоником, именно эти объекты необходимо брать для клинически и судебко-химическкх исследований 1 других объектах фурадонин не обнаружен.

СШЦДЕ ВЫВОДЫ:

1. Разработан ряд селективных методик идентификации фура-донина в нативном виде,в лекарственных формах,в объектах биологического происхождения. Предел обнаружения фурадонина не превьшггг 1 мкг препарата в 1 мл анализируемого раствора (400 мкг препарата в 100 г органов).

2. Разработан ряд метс,,ик идеитифшации основных исходных продуктов и полупродуктов синтеза фурадснина (5-нитрофурфурола, 5-нитрофурфуролдиедетата, гидантоина, 1-аминсгидантоика). Предел их обнаружения не превышает 20 мкг препарата в 1 мл анализируемого раствора.,

3. Разработан ряд методик фотометрического количественного определен», фурздошла нативном виде,лекарственных формах, объектах биологического происхождения, отличающихся высокой чувстг"-тельностьп.

4. РазпаСотан ряд методик фотометрического количествекнсго определения основе исходны продуктов и- полупродуктов синтеза фурадонина (5-нитрофурфурола,. 5 нитрофурфуролдиацетата, гидантокна, 1-аминогидантоина), отличающихся высокой чувств^елъноотыс

5. Разработана методика- определения фурадонина г воздухе рабочей зоны произпод' твенных помещений,

6. Изучена возможность применения распространенных методов изолирования биологически активных соединений для выделения фурадонина из бколс.ического материала. Выявлена их непригодность в решении этого вопроса. ,

' - 7. Изучена • экстракция фурадонина из верных растворов органическими растворителями в зависимости л рН среды. Оптимальны«!. зкетрагентом является этилацетат.

8'. Разработан метод выделения фурадонина из крови и мочи о использованием этитацетата в качестве зкитрагента и 1 н. соленой кислоты как'изолирующей жидкости. . '

9. Изучена сохоаяяокость фурадонина в биологических ткан...;.

. 10. Изучено р'-слредялгнив' фурадонина в оргзкизме подо., лтных животных.

с

СВЕДЕНИЯ О ПОЛНОТЕ ОПУБЛИКОВАННЫХ "4УЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Основные результат материалов исследования отражены в

работах:

1.А.С. 5и 1695192 А1 МКИ 5 3 01 N 21/73, Способ количественно] определения гидантсина и его производил / А.С.Квач, И.П.Па] лик, О.О.Ноеиков (СССР). - N.4771993/28-25 (1С140Я; Заяв; 19.12.89; Опубл. 30.11.91, Зол. N.44.

2.А.с. Ш 1697000 А1 МКИ 5 в 01 N 31/20, Способ качественно! определения производных 5-нитрофу^анов / А.С.Квач, И.П.Па лик, О.О.Новиков (СССР). - N.4799352/04 (0С0529); ЗaяBJ 02.04.90; Опубл. 07.12.91, Бюл. N.45.

3.А.с. 51) 1695194 А1 МКИ 5 В 01 N 21/73, Способ количественно] определения лекарственных препаратов на основе производи 5-ни рофурана / А.С.Квач, И.П.Павлик, О.О.Новиков (СССР). И.4782438/04 (0С:.534); Заявл. 16.01.90, Опубл. 30.11.91, Вш N.44.

4.А.с. Я] 1698716 А1 МКИ 5 6 01 N 21/78, 6 01 Ы 33/52, СпосоС количественного определения фурадонина / А.С.Квач, 0.0.Новиков, И.П.Павлик (СССР).- N.4757309/25 (135172); Заявлено 09.11. 1; Опубл. 15.12.91, Еюл. К.45.

• 5.A-c.SU 1719972 А1 МКИ 5 6 01 N 21/78; Способ количественной определения фурадонина / А.С.Квач,И.П.Павлик, 0.0.Новиков (СССР). 1Ч.._Л3504/04 (029767); Заявлено 1^.03.90; Опубл! 15.03.92, Бюл. N.10.

6.А.с. Би 1748057 А1 МКИ 5 Е -01 N 30/90, Способ определен! прсизЕОД. л: . 5-нитрофурзна и полупродуктов их синтеза А. С. Квач, Е. 51. Паринов, К.А.Вовк, И.П.Павди»*, О.О.Гчшкс (СССР). - N.4533912/04 (061699); Заявл. 04.06.90; Опуб! Г 07.92, Бил. N.26

7.А.с. 5и 1793340 А1 ЬКИ 5 Б 01 N 21/78, Способ количественно! определения фурфурсла и ого производных / А.С.Квач, К.П.Паг лик О.О.Новиков (СССР). - N.4845555/04 (072935); 3£яв1 02.07.90; Опубл. 07.02.93, Бюл. ¡'.а.

8.А.с. 786405 А1 М^С 5 в 01 N21/78, Способ колтеест^енног определения фур£г*;на / А.С.Кееч, 0.0.Коников. Л.П.Павлг (СССР). - 'N.487520^/25 (104051); За^Л 22. .'С.90; Опуб! 07.01.83, Вол. Н.1.

■.f. Квач A.C.,Новиков 0.0..Пазлик И.П. Методические указания по определении содержания фурагина и фурадонина в воздухе рабочей боны пр гаводственных помещений: МУ 54-104-90.- М.,1990.-7 о.

10.Квач A.C..Новиков 0.0.,Павлик И.П. Идентифика>тчя препаратов ни'^офураиового ряда и полупродуктов их производства методом тонкослойь-й хроматографии // Актуарные вопросы фармацевтической науки и практики: Матер, науч.-прект. конф./ КГМИ.-KypcK,lS91.- 4.2.- С. 43.

11.Квач A.C..Новиков 0.0..Павлик Л.П. Количественное определение ■ фурфурола, 5-нитроф:~\. рола и 5-нитрсфурфуролдизцетата //

Опыт работы научно-техшг ской общественности Всесоюзного химического общества км. Д.И.Менделеева по созданиит экологически чистых регионов: Тез. докл. Всесокзз. гауч.-практ. семинара. - Тула, 1990.- С. 73-74.

2. Квач '.С. .Новиков 0.0. .Пазлик й.П. Фотометрически определение фурагина // Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и "а Дальнем Востоке: Тез. докл. науч.-практ. конф.-Тоыск, 1990.- С. 128-139.

3.Квач A.C.,Павлик И.П.'.Нозикоз 0.0. Фотометрический метод оценки качества лекарственных средств группы 5-нитрофурана .'/. Методы контроля лекарственных сродствгмеддунар.' науч. симпозиум 27-31 мая 1991 г.- Ашхабад,1991.- C.3S.

• Квач A.C. .Павлик И.П. .Новиков, 0.0. Количественное фотом'1.;и-ческсе определение . фурадонина и фурагина // .Чат риалы науч. -практ. конф. областного фармац. о-ва за 1990 год.- • Еып.2.- Белгород,1991.- С.25-26.

.Квач A.C..Павлик И.П.,Новиков 0.0. Количественное фотометри-iecrae опреде -ение фурадонина и фурагина // Актуальные вопросы 'фармацевтической науки и практики: Материалы науч.-практ. сонф./КГШ.- Курск, 1991.- 4.2.- С.39.

Квач A.C..Павлик И.П. .Новиков 0.0., Качественное определение [роизводкых 5-нитрофурана // Актуальные выфосы фармацевти-:еской науки и практики: Материалы науч.-практ. конф./КГЫ.-урск, 1391.- 4.2.- С.29-30. ч

ПопЬндопуло II. X. .Павлик Ч.П. .Ушбаев К'.У. Разработка'метода оличественного' определения метрогоадезола в моче // Актуаль-

. ~ сс -

ные вопросы фармацевтической nayiai и практики. Тевисы докладов научно-практической конференции,посвященной 25-летито фармацевтического фзкугмета Курского медицинского института / КГШ --Часть 2 - К^'пск 1991. - С. 95.

18.Н^1иков 0.0. „Квач A.C. ,Павлж И.П. Зкстракцш фурадонина и фурагина из водных растворов органическими растворителями в зависимости от pH среды // Актуальные вопросы экоперш^енталг • ной и клинической медицины и фармации: Материалы конф.-Курскддео,- с. 87.

19.Положительное решение МКИ 5 Q 01 N30/90 ' способ количественного определения гидантоика, 1-аыинопщавтоина, фурадонина, фурагина'УА.С.Квач, В.Я.Лариков, Н.А.Вовк, И.П.Павлик, 0.0.Новиков, В.И.Кочкаров, В.А.Королев:СССР.- N5018858/04 (074573) Заявл. 31.10.91.

20.Положительна. решение МКИ 5 G 01 H 21/78. Способ количественного определения метрони^азола / П.Х.Попандопуло, К.У.Ушбаев, К.П. Павлик, С.В.Кинаш - СССР- - N.5017389/25 (08005.; ; Эалв- . лено 13.12.dl.

йХ.Кьач A.C..Вощикина H.A..Зубченко А.Н. ,Новн?тв 0.0..Павлик И.П< Провоторова Т.Е. Методические указания по аналитической химии, (курс количеси яяый анзл;:з)для студентов второго курса фармацевтического факультета // - Часть 2 - КШ' -.г.Курск 199.2 г.

22-Квач A.C..Вишневский К.В. .Плехов C.B.,Павлик И.П. .Новиксв 0.0. Алябьев H.A. Применение протсчно-спектрофотоыетрической кор.еш для сгектрофотометрическогс анализа //-Биофизические и клинические аспекты экологических исследований / - Курск, 1293. - С.70.