Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фармакохимическое изучение пектинов и альгинатов

ШЗИСШСГВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ К ШШОРШМ ОАН1Щ&БТ1ПВСКШ1 ИНСТИТУТ

На правах рукозкон • "Для слузвбпогэ пользовался" Эг,з. К OO-f

КАЙ1КВА ЕШЯ ШИК031А УДК 615.322:582.2:547.458.63^.012,07.QI5 (0433)

«АРШОШДШЖСЕ ИЗУЧЕНИЕ ПЕКТШОВ II МЫШЛТОВ 15.00.02 - фарглошмкчсская хишя я фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на солсгакне у^оасй стопой кандидата фарыацонигчсснпх науп

Пятигорск -'1992

Работа выполнена в Пятигорском фармацевтическом институте. Научный руководитель - кандидат фармацевтически наук.

Официальные оппоненты - I. Доктор фарм. наук, профессор

Бедуцая организация - Харьковский фармацевтический институт

Защита состоится " 0& " Шор^Л^Х- 1592 г. в 3.00 часов на заседании специализированного Совета Л C84.45.QI по защитам диссертации при Пятигорском фармацевтическом институте по адресу: 357533, г.Пятигорск, пр.Калинина, II.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пятигорского фармацевтического института (пр. Калинина, II).

Автореферат разослан "О5" • „ИП.^ип-СК. Ш2 г.

Ученый секретарь специализированного совета хзвдщат фармацевтических наук.

доцент В.А«Ко&шанцев

Э.Т.Оганесян 2. Доктор хны. наук, лрофессор И.Ф.Маршалкия

доцент

СШЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГАБОШ ' Актуальность тег.:н. Проблема лзгакапия »¿фектшзнах средств, особстз7вднх связывашт п выведена лз оргшажа тяхелшс, ра-оактшзкнх и других токсичшж иеталлов и неметаллов ара прорвс-энальянх и экологпчоск::: интоксикациях приобретает вааное знайте в связи с гшрокпу дрпыешниеа радиоахтизкых изотопов, кэор-тчэских соединены!: в раалкчкнх областях техника, гедатаинп.Прп-зяеше в посгояцса врегд для дстоксякащш синтетические хккн-5кио соединения (.шиш лимоннокислый, ¡кипя подад, пентящш, гавдн-кадышЛ г. др.) недостаточно эс'фэкглвны, небезопасна, виза? л ряд пеаалаташшх аспектов, оснотзншп из которих являются 5ДЯ01ШО оркшязыа шгкроэлемвнтали д биологическая несовмести-;ть« Более порспектшшх в отец от помогши сэктиш п альишатн, чппс продукт и протрать-, лх содерпкде. Они но оказывают по-щого действия а в то 20 врегл дают внрагешшй зацптнни ответа, Чащо всего отечественные шктшш п альгднаты применяются для [бвкх селей в качества долзо^разоваголей и стабилизаторов. В [зп с этиы требования, предъявляете к их качеству, в основном, дятся л контролю их коливгщшс свойств по показателям: газдпру-я способность, вязкость, молекулярная ыасса и др. Эти иоказа-е шгут дать лпгь щшблпаеннов представление о детсксшсруо-свойстваг пектинов я алъгшатов. Позтоцг ь целях стандпртиза-наолнх полисахарвдов, пржеояегшх для дезинтоксикации, акту-нш вопросов является разработка показателей, характеризуют зывавцЕе способности полисахаридов.

Кроме того, существуйте цетодо цдетгэдпкацва я калкчестген-о определения ха;слют голЕсахарвдаз пе позволяет отличить шс г от друга, длительны, неспвцишчан, косвенны, трудоемка, да от достаточной точности, слогнн з аппаратурном а^орашнии» В

связи с згки возникла необходимость в разработке и ссторЕзисст ваши нот од об качественного. а количественного анализа нолдсаха рядтсс препаратов.

Загрязненные различима примесями образцы пекг>шов и адьг. натов, как плавало, обладают низкой ксиплексообразуосей способностью. Ноэгсыу придается весьма болызоз значение разработке с. ссбов очисгкп п повышения ка чаете а производственных пектинов и альгглатов для получения препаратов с высокой коыплексоооразуга способностью, приходов даа медицинского применения. Актуален

и лоясг. новых растительных источников дня получения пеки нов с внеокой шлхиексооброззадеИ способностью. Поскольку пакт аы л алыннатн содержатся в растительных объектах в комплекса другшдв биологически актившги веществами представляет интерес разработка схади комплексной переработки сырья по безотходной ] ь-алоотходаой технологии. Ота проблема актуальна как с точш! зр< ния боло о рашюиальпого использования сырья, тан п с позшлш о:

. рани окрукаадеи среда. »

Цо.ть к. задач;? дделоловантя.. Целыз навой работе являясь ро: работка лечебнпх и профилактических средств на оспоЕе пет:т:;нов альгпкатов.

Для реализации поставленной цели тобхо;у!ко било решить с; дуаяз задачи: • •

1. Изучить процесс взаяыоде^стпля некхпнов л альткнатов с соединения,:!! 8-, р-, й-злег.'.ентов. Определить состав образугь ¡цттся комплексов. Рассчитать количества кпелга полисахаридов, ! обходили ..хая езязнгашш токенчшх доз аполпзируед-.гх соедтлеаги

2. Рэзраоотать аатодшш вдацтк^аЕангл и количественного 01 ро~сленгл пектинов б исследуемых объектах. Кзучкть ¡к снопа, лч-ность.

3. Провеет попек ношж источников пектинов. Разработать л шериокствовать способы получения а очистки пекишов п альгшш->е для получения препаратов высокого качества, обладающее зна-[тельяол кскгшексообразупцеи слособиосгьп, прагодккх дая «еде-ШСКИХ целен.

4. Разработать схему комплексной переработки лагяшарпл Серного бассета дая получения препаратов поллсахарэдоз л других [ологическ» актпвинх юцеств.

Б. Разработать норцзпшно-техшяеекуи до:дмэнта1ст ез полу-(ннке препараты.

Научная новизна работы. Ка осиоезеш изучения реакции взап-|Дз:1сте;;я пектинов с соэлшэпдяш 5-, р-, ¿-элементов дог.аза-I возможность связывания элементов с пектинашг. ¡.'¡етодо:л УФ-юктроЬогошграи определен состав комплексов 5-, р-, <А-элокзп-13 с г.сктш1а'.^1.

Теоретически к экспериментально обосыоЕа;ш гдтодп качссиш->го н хшдчесгвенпого определения пектинов. Определены фпзнко-:.ячсскка показатели пектинов, ,чго позволило обосновать от ио-: обменные сеолстеэ.

Разработала методика определения когашоксообразук.еЦ способ-сти пектинов и альгинатап, •позвояяяй.ая определить состав кож-1ссов и рассчитать количества полисахаридов, необходимо для токсикацпи тотеичшх доз элементов. Эксперэдшгааьно установил глшплалыше количества пектинов, связгЕа:х^:е токсичяке дезы адпнегай: мкцьяка (Ш,У), ртути (Л), таллия (1,Ш), бария, евнн-, цинка, стронция, бора, казня, кальция, влшинпя.

Теоретические и эксперниогдалыше исследования свойств лок-нов и методик их аначиза послунЕлн основой для разработк- ЪТУ.

Прозедено хгсследовапш кинетики вкхревш л электрохла^льс-

гам сэтодаш экстракта! ккслнх голдаахэрвдов, Показаын прешу-доотва этих методов для изелсчошщ "хсаркасшх" полисахаридов т па говдшов к альгглзт ос.

Теоретически обоснована и эксасрилончалыю установлена кс рсляваошая вавксшость иег^зу степенью сгаоткп пектинов я их биодогмческгл свойстзаш. Показано, что посдэдова?елькая очис ка путем дегжнерализациа и дешсоксшшразанпя значительно поен каа? шлиексообразупЕуг способность пеюпнов.

Показана возмхаюсть получения пеглт.аов из рево.чя огородного, обладаидас болнзей кшплехоообразупьей способностью по сраваекш с изреотшиг.. Содержание других биологлчоскд акгивпи eg^ccîe позволило предложить кошлекснуа переработку снрья.

Впервые установлена вог:.та:дость фракционирования пектинов из различите фракця:: голи-, тегра-, грп-, да- и шногалакгуро йовио кксдоти с помогдо яонцектрпрованнкх растворов электролитов: сульфата кагша в сульфата лития.

Разработан способ комплексной переработки лашшзрщ. Вцдел« t

ira внелогически актквшэ вс.'зства : шшгл, водорастворжгд koui леке татю (Lí'vT) "Лвминарзд", адычшет иатрш, ламкнораи, ^у:;оп-дан. Изучена гас биологическая активность. Установлено слабнтслз поз действие указанных кошюиентов. Расширен спектр биологического действия ЬКТ "Лашнарг-д" к альишата натрия: гипашишде;.',и-чезкое, гиЕоглишдцчеакэо, противоязвенное, гепатозалтаноо, до-токскшруацеа, раддонукладсвязувааде.

По результатам исследований получено тр*: oBTopciaix свидетельства (с пкоазрекой йордулой 1ССи2Ь2 AI, ::• IC72132 и г Х(£237й), два поло';хтальц:.п< решения ка патент (Г* 48t&3l/ü5 i;

487^231/25) в четкре йолегштельннх решим на авторские сш-досатьства С£ 402D3I5Д4, j; 484CÜS3A4, :; 4679952/05, 478S377

- Б -

Б).

Практическая генпость работу. Разработанная схеыа кспплокс-oii r.epopadOTKi лашнарии Северного бассейна для полученея бполо-пчес-и актившз: вецзств: иашюта, ЕКТ "Лашшарад", лашшараиа, укоадана и адьглната натрия, позголяшая увеличить внход ЕКТ "Ла-анарвд" п 2,3 разе, лредуокз^рпваоцая расширение енрьевои бази и оаплексвое ее использование, ;ло::ст бить швольгоЕана в проша-знном производстве.

Прздаогешшо спозоби очистки, позЕолятаде увеличить кошлек-эобразуэ!^уо способность аектшоз цыут бить внедрена в производило псгтпиа для кедатанокого пр::.:еяон:ш. При этом болеэ перонок-хшпзл ::ст оч1да;о;.! получокая поллнов с В1'ра;ленной коыплоксообра-гапел способностью без дополнительной очистки япляотся поропок 5 надсогзо:! части ревеня огородного, которой попет быть г.споль-)ed;i такие дзя получения гол;:' сполол н плцевнх волокон. Сравнимым низкая иоямулярная масса вь-делоинме пектинов аз ревеня >звсдпет рскс^епдогать их для ярпиеиения в бед о пнъездиохлих

ЮТВОрОЕ,

Разработаннге иетодикл ссеетрофозоцотричоского и потешиокет-лоского акачиза исктинов позволяет попользовать их для иденти-кацпи и количественного определения пепинов в пропзводстЕешшс pacuar. Предложенная методика оцроделепия коьшлексообразуицел особпостп пектинов к альгинатов кошиексонсмегрическвм способом, рзктердзупцаяся достаточной точностью, простотой выполнения, краденной в Ьи раз иродолкетельностьа, при^ешна для серийных алпзов в производственитх условиях.

Проведенные расчеты кешгеее тз кислых долгюэха ридов, нэобхо-чь'Э для детоконкаши токсичвих доз катионов штата ob и выеде-а пх из организма когут бить использована пра составлении л о-

чобно-црофилактлческих дно? ш производствах, сеязэншх с тигс чеокпия соаддааиташ.

Материал*? внопшшя. I, Еодомости иЗтшкя к СС 42-2462-8 "Ламинарии" и к ОС 42-2466-87 "Гравдлн лаиглардца" и материала по изучения препарата гипа "Дапшарид" принята к рассмотрения Оаркакологическш комитетом ь;3 ССОР (шоьыо 2Ц-1517Л-264 о 07.D3.SI).

2, Методика качественного и количественного определения р Лидирующих Сахаров в субстанции и гранулах прегарата "Лаг/днарг„ Апробирована и внедрена в практику работа ЦЗЛ Х1Ж0 "Здоровье",

0. Лабораторией технологический регламент шмучошя суб-стаишш препарата типа "Лаглшпргд" из лашнарш Северного бассс на. Апробировал на Архангельске:.: опстном годорослевсхл комбинат?

4. Проект ШУ га погаш .тугя лечебно!; профилактики пршкт г раосиотрошсз ШИ1А "Пектин" (письмо исх. & 23-А от 20.02.52).

5. 1:отодш;а анализа комплексе об разумней с пособи ост:; клелгл полисахаридов коыплоксонокетрпчоокш методом. Апробирохша на предприятиях ШШ "Пектин" к Кр;с..ского ШО "Илоддецроакт".

С. Докшншчоокос исследование нешшов и Ш' "Ламшарзд" на детокаиадруадоо и родаонуюшдовязмиагоцоо допетые екл ;чепо е план научной работы ко.!)одр радиашишок гигяэкн и юпишчоскоИ аар,:пкодог1И К*]УВ.

Поло- -оняя.. ридгигзоше. ка за гиту. Теоретическое и эксперн-ионтальков обоснование возможности п^пьшешш шткиог. и ольгк-натов дд.г: детоксшсаши.

Теоретическое н экспериментальное обоснование спооосов получения и (1:ракшонировашя клелпх полисахаридов; изучение их .ц:-зпко-хтшчзсиа свойств, разработка истодов стандартизации .слл получения на основе пептвдов и альгпиатов лечебных и про-./плзгетп-

склх ородств.

Связь заттдц доследорапий о гтобжджгтд платал 'Т'зтмппевтпчэскпх, Диссертационная работа сгполпека в соответствии с планом учно-псслодозатыьских рабог Пятигорского (Jap/,, института (нор государственно;': регистрации £ üI07CC-lbI7C) п соответствует облегло AMI СССР Юьб "йармзиия" секция "'Фармацевтическая иыш".

Структура и об'ьс:.; шботн. Диссертационная работа представляет 5о2 рукопись, изложенную па ¿02.страницах иашиногаси. Она сос-ит из введения, нети глав, плзодов, слпзка литературы, прилот.е-з, Ь диссертации приводятся о5 рисунков, 78 таблиц, Бдблиогра-iecr.::ü указатель включает "/7 8 источников, пз mix Ы на иност-шкх лзчках.

Апробация тоботт'. Основные результаты исследований доло~епи ; Рсспублзсапско!; научно-практической конференции "Синтез и моиенпо эн^оросорба.'иов" (Кснзглво, I0QQ г); Есесоцзцой конфе-щнп шлодкх уче;м по эксг ".акции (Донецк, IüSCi г);-Всесоюзной !4Hoii конференции "Акту&тыгее проблей1 лекарственной токсико-чиг' (Купавнэ, I02.Ü); ГсесоззноД научно-техшчоской конференции ютоянпо л перспсхлмш: создания нових готоетэ: лекарстьешшх. ¡дств и ¡['лтохлклческхх препаратов" (Харьков, ISSO); научных ферс циях Пятигорского фара» института (Пятигорск, 1989, 1990, I, 1292 гг).

Публикация. По материалам диссертации опубликовано в печати работ, в той числе получено 3 авторских свидетельства, 2 по-птсльных репенля о вьдачо патента, 4 пояозиельшх ршения о аче авторских СЕИдетатьсгг,

ОСПОШОЕ СОДЕЕЛИЛЗ РА БОШ I, Разработка и соверыеаствовшиа способов получения и йракционировашш кислых полисахаридов, изучения их СЕо'-тпа и получения на их основе препаратов для медицинских целей

Объектами исследования слупили производственное обрэзщ пектинов (свекловичный, цитрусовш, яблочный) и Енглаюх (алычовое, ¡лашновио, клубиичнио, томатные, виноградные), цитрусовые экстракт и паста, слоевигя лашяарпл Северного бассейна, альги-пат натрия .для технических -шлеи, иреьарат "Ламшарид", аадзегла часть ревеня огородного (порошок) и нута обыкновенного,

]ипя всех иолиуронидов опрод&тенн жиоико-хшлгческиа и товар гедческие характеристики: содержание балластных вецеств, залы, шдог-'ляраая масса, эквивалентная масса, полная статическая обменная еж ость,' комплоксо образующая способность, радиоактивная загрязненность, содержание срободких и этери<1лцпрова;пшх карбок-силыг.'Г групп, степень отерн.т.кацкп, уронпдная составляю1:дя,коа-стаптг протолитг.чост оп д1;ссош;а1.,:з1. Для порчаенля точности анализа нам разработана и кодкЛЕщрсгани некоторые г/.отодики оире-дачения:■полной статической обшнно£1 емкости, эквивалентной массы, свободных карбоксильных групп, кшплсксообразупцей способности. Разработашше мотоцикл определения обь.;еа,;оЛ емкости пред-под ага-т дошлштздыюо проведение деминерализации к де;.-.етокси-лпроЕанпя пектинов, что позволяет наиболее полно учесть карбоксильное грушш пектинов. Анализ обшшшк епкости аров едой методом штеицпоцетрического титрования ьрп использован-;;, -да оптэо-датаыия точки эквивалентности дв/уеронтаального метода, ото позвонило повысить точность анализа в 2-3 раза, ¡.'¡одпгикация методик определения эквивалентной шзссы, свободных карбоксильных групп

заключается в проведении аналнга методой потешдюмотрлческого гптрованлл гит ггркшнонни догференгаальчого способа для расчета :оч;си эквивалентности п проведение с про дола шй прл постоянной юш1о11 силе раствора; ото позволяет ловкснть точность анализов по ¡равнении с суцестну1:;.;1'л; е 1,4-1,С раза. В результате изучения ¡ачгства производственшп образцов шедих полисгзхарэдоз по ука-¡анпнг.; показателям установлена ¿ис низкая степень чистсти.

С целыэ получения очи^ен'шх препаратор югелых полисахаридов о 1.'Сокой иамплексооЗрззув^ей способностыэ, вксоким влходсм, упрочняет.; и сокращенной продо.та;тсльностн способов ьда разработали пососч получение подт/рошщов ызтодецн ккрогой ц электрош-ульскои скстрзкшп!, которпе благодаря тонксцу из..:ельчо»иго сырья пптснсн^1;::ап:к экстрагирования позволяют кзвлочь "структурное" с.т:иса::ср:;дн.

Способ нарекай экстракция ткктк» и ольпушов заключается экстрагирован;::: сырья шеалатом е:я.'.0епя при частота нвремезива-ая ЕЬиС-ЮОСО обор./ипд при одаохро^еинш Вйгяяьченпи до части; гзьврои 1,0 ¿'тл. Осаэдепка полисахаридов пз экстракта ссугрстпля-I £££ этанолои. ■Пргздмшапе оксалата аг&онпя, частично дета пера- . :зу:хсго полпеахарцди, а такяэ этанола дая ш; осадошш позво-зет получить более чистке препарата.

Ъ способе электрокипульспон экстракидн лс.:г:шов, кро?ле тошео-) их«ельчення енрья (1,0 юл), пр£^епякл?л хяязшя :г."г,льсе1-н •.сктричсскип разрпд в экстрагируемой ег.с-си ситекс^.кцкруот ькст-игцшэ п обоспечитает стерилизация экстракцгопнон слеся. Крои» ¡го, сба разработанш::: способа позволяет увеличить выхода налога проектов до 6 раз, псклпчпть токелчнге растворители, согреть яродол-.'лтельност ь до С раз. Но-.тсо технологических лрсску-стз разработашшх способов для пих характера!) получение евгсте-о, сльгипатов с вксокон стспспьа чистота (тайзшга.1.1).

Таблица 1.1

Сравнительная характеристика полисахаридов, получении разятшнгл способами

^ашеахардды ;ироизводогэеыше -оооооСа : Биссзео^ : : способ

:о'ла!л;р< :ПЬ;Г.7ЛЬ<

::зе: си :сос!

1!ог.пзптели

:сЕо:'.1:о-:ц::тру-:яслоч-:альги«!ге:<ло-:а"ьгг.* сиекш :т'ячята :ооч^! : кг.; : наг :гпчэ:и : пат : е::чнп: :пектин :покт;ц1:г.ектгн: кат-глекмш покт:д

оия :

: :

V ТО^ОЛ^'-"ТОЛЬ™ /.¡ость", чао* ¿.0-^4 23 23 140 и 1.5

<,::стрэтенг пода, шшеральн* карбонат натрия те кислоты. оксалат атония е0дз окоалат а:.'.\.онкя

Осадит ель соли 1:альцпя или алжд- о ни! т а н 0 л

Балластша . вешоотЕа, % 7.3 10,2 е.е 2,3 7,2

5ола, %> 1,2 2.5 2,е 25,7 0,С 10,5 1Д

Молекулярная г.асса, у.с. 12СС0 есао е7ССС 2С300 екио 2&0С0 С2С0С

Эквивалентная ьасса 720,03 397,21 С2ь,17 715,81

Ькход, % 10-15 и II 24 21,2 С4,2 9 8

Для 'дополнительного попшзогшя степени чистоты нагл пзученш различные сиособв очистки кислых полисахаридов: ¿ратапошфоканп деминерализация, деиетоксндгфОЕашю. Оракиионаое разделонпе пек типов позеоляот повысить чистоту . что проявляется в ос ветле шт. иоктянов. в полно« отделении нойграшптс Сахаров, сшг-оппп золь ностп е 1,Ь раза, повшепгЕ содор/экия галэктуреповых кислот в 1,3 раза, свободных карбокешшп-'х групп в 1,2 раза, кс;.;г_;сксоо£ р^уг.;:е:. способности в 1,7 раза, ар:: ото:.: молекулярная :.:асса ¡.октанов практически но изцаняитея, что сп^отельс.тует о созсра но:ин; структуры .сскгшов.

Допшвр-ппзаагл катпоантоц г.иии}рялько:. кислото!. ссособст вуст очистке лезгднов: сыяхешз содор-акля сад^асхша всиостз -

5,С п 8,7 pi)so, содержания золг - в о,2 и о,8 раза, оквшалецт-j;î :.:аоог - в л 2,о раза, повгпзипз содэрг.:алпя свободных ¡рбогапдьпп: груш. - в 1,5 z 4,2 раза, га.шекс о образующей спо-)6;:ccv:: - г 1,8 5,1. par., ; î :: э'-'с:.:, аос:<;отря ûo лучиеа 1л::зуп~се дс;:стп:е хяорогодородяод kîwiotw при разработка i:eso-гс: стацдзртнззtu::: т. хичесив ~эплкерэл-;з;»;очего агэатз пака хяод->тсш.' азгкопвтг KJ'-I «У-î: B5.io.-crB«a ytpoi еяля рсбюн с шхп.

Счисти гуге;.: пектинов гцдроксадоа калая

аг.-.;.;оппа одинаково cr.ocoicïbyoT сащгениэ содержания rz-'iOCTitK:: ео„.оотп в о,0 и 5,1 раза, эквивалентное иасси, стспс-: ьте?п.7-пхзщг.. :: похглзгеэ кокшсксообразуондаЯ способности.

сСрзпогл, из пзучоипгх способов очгстга похтппов нал->лыи::.; эффект достигается при цоуляорслсгзапли, далее - ¿раэтпо-:ра::с::и::,!:,!:21:о:юп, - дсиогоисг.Я5:рсЕаши:. Ьтп данные коррелпру-'ся с pcoj.'ibTaïCLni бполог;-лссп:х ;:ci:vvaiüüi (рдгиоиуклдцевягллта-;ое, r:'.iio'/o;ii)c'rGp:uic:.£ncc:;oo, спт^ггхокспчэсг.оз действие).

La основании прсводешпк исследовании п> по.^чеппо в очистке ¡лпеапарпдов с соль» усиления аг салзвгежвх ceoüctb пака разра->тан eximni способ получения пектинов катодом ehzcoeo;] oücrpnz-ш с no^o.i'"1 оксалата аггонкя с послс.^'гл-.'п!:: стадгх-.:;: де^эток-¡яарогэапя п дс.ишерсл'.зоти;: пектинов. Показатели качества потаенного продукта про^стевден«' в таблет® 1.2. Пазучеппко сесуль-ш* гопззг.ха:зг, что разрасоталыъ: способ пэлучс!п_-. :: onrssns лепволле? значительно ^за.~гч::гь сорбиигтаге своРсгвз язгзног: ?Еелпчять содоргпапзе свободнкг ¡зрбонведьнкг гр^пп в ,4 раса, Ko::,:ij!0iccoo6pa3y:-jya способность в 2,t раза с т.д. При гом увеличивается. вгход петитов з 1,5 раза.

Кроме тоге, па:.::: получен пектин :;з воркпкз нздзс^ноЗ ча;?-: зезня огородного без догалкгтегъао» очпеткп, котерзй et-osessbt

Бира-дашуп комплекс ооброзу;хсу ю способность <2УЗ,5 ¡я» Ре /г), ире-вншаюасг» такую, способность производственных пектинов.

Таблица 1,2

Физшсо-хтлические своистпа полученного Ечирс-ю!! экстракгиен свекловичного пектина после ого дометокс глирогааил н дсгине-раллзацг.и

Образин : Бни0д,:^Е0б0д-:Стешнь:К0:.1Ш10п--:П0Л1:а^ стотпчоо-:.Соис-исктииа : ^ «же :зтерп- :сооора- :кая ооиешмя е:д-:танта : гхярбоа-гфЕкацшк&увдб*• ;киоть, .мт-окв/г гдиссо

: :онш;а: с/о :опособ- :по гид- :по хло-гииа-

: дш, : гиость.щчрокозду _

: : ь .: сРв^/г : кадия :г-;алышя:,ю~£>

С,2 45,?- 131,0 С,1 4,0 £,51 23,2 20,1 493,2 5,6 35,9 19,»5

Сравнительно низкая иолекудяриая масса пектина из ревеня делает возмопздпа ого првашелке в виде шьекционной лекарзтвешюй <1>ор-ш. С цолыо комплексно-;; переработки ройеш, кроме пега:п'рв,и>деле-нь' лкцевке волокна и пататеполк, оназгаа;:;.;«) игра-генное глиотон-зигное, гпиолзивдзжчзское, гепат.озамшюэ, антшикробиоз действие

Для разработка упрощенного способа (<>роп',ионного рсдсхтоиня лектпков на различите по молекулярной лассо ^рад'ектг (шли-,тот-ра-, три-, ди- я мопагалактуроноЕро кполотн) егсоноц степени чпо-•?ога паи: шери® .лтэддогеиа обработка покишовпх растворов кои-вднгрьровашгош раствором электролитов: султ^пта иягнил и лития. Данкки способ обоспечинаот белое ысо;гу;л степень чистоты п «"ход фракций (в 1,Ь-3 раза вше по срагнеиио с пзесстн'тш способа;®),

2. Разработка ь;етодов стандартизация поктиноз Спектр: гогдопеалд дзкмшсо нами изучены по обазлршштон методике, Пьгучэииае спектры не п^кот четко ьира^е-иншс ^акснь;угдоь, кабладается перегиб в области ¡¿73 им для ^блочного пэкти-

исопзвод- __ тс сякиппи? 10-15.

Ксследуе- ^ ^

, 2ЪЬ-ИЬЗ шл для пектина из ревекя. В то же врегл свекловичный ;t:îii к.'оет 2 l*3kci3.^a е области 2£G и 325-3C5 пм, цитрусовый ;тнн - I максплуг.! при 282 ш. Указанные полосы поглощения сох-1Г!отс.~ посла 1и:ого::рат:юй очистил пектинов. Вероятно, псглоце-мюктпнов вызвано с наличной в их структуре Д-галактуроцовой' 'лот!.', которая имеет полосу поглощения в Toi; zo области 24С-I ш.

Пзученнг/о спокгральш-'е хараотеристикг: лскгшсв позволили нал ¡работать спектроТстоиетрпческуп г.сотод:псу каличсстгзиюго опрэ-;сш!я пэктпнов га калибровочный кризш, псстроешиа по очякеп-[ псктпна:л при характеристический'длинах воли в ГФ-обдзстп. шгя методика позволяет бгстро без предварительного вгделпния тиков анализировать о вгсокои точностью {6 - 1,6';',) лектипозыо творы в диапазоне концентраций 1*10-5 - I'Iü"^ M (шш 0,001313 r/ICG мл),

Для анализа пахтияов в присутствия солутству.-йдиу Ее::;оств цз-раэработсшз ::огодпг.а потсиндог.лтрпчсского тзрованпя, позволен определит* количественное содержит пектинов по свобод-и за-лейснига карбокоилып-И групп an, а тахг:е пропоить опро-епие как высоко-, так я пкзкомолекуляриых фрагментов. í/етоди-осиовапа по титролаши: пектинов (после их очистки) оспованнл-Газработэпшя методика np:n.:eim:.ia для точного (<5 =I,3Í) ана-а пектинов в охраненных, кутнгх рсстворсг, при ьпидг^альио^ !:чес!'ЕЭ анализируемых вецеств.

3. Изучение комплеясообразупсей способности аеотшхов

Учитывая то, что пектины предполагается использовать как экепцирутоцио вспесгва при отравлениях совдинекляи1 ряда эло-сов изучили вза:и:одейстаиэ пектинов о солягдп Еодьйрша,ао-;еаа, хрога. Ькбор объектов определилол тсксичяосгьз элаззй-

тов л их соедшешШ. При этом исследовалась возможность образ вания комплексов при рН ~2 л -8, т.к. их использование преду! ыатрпвает гозиогнооть связывания токсичшж соединении в затуд и кипечнлке. Изучение зависимости коиллексосбрззогания от рй < да доказало, что комплексы пектшюв с сосдпнен;уг.ц; хром, кол дена, воль.Т;ра^з образуется при рН 1,2-6,0. ¡.'.акспкальЕн!: впсод наблюдается пр! рН 1,8. Это указывает на то, что данные эле^е] реагируют с пектинами в форме катионов.

Для дальнзшего исследования ыы получили соедиьешщ элоглв! тов с пектлнаш в творцом состоянии. С этоИ целью смекивали 0,25 % раствор пектина и 2 % раствор соли, приливали буферный РОСТЕор, СОСТОЯЩИЙ Е3 ХЛОрПДЭ канш и хлороводородной кислоты,

или раствор гпдроксида натрия; полученные кошшэксн осагдалп ; этанолок. Биход составил 72,2 - 02,7

Исследованы ИК-спектрп полеченных соединении. Б НК-спект] всох лектлнатов паблэдаются полосы поглощения при 1С5Б п 1420 си"*, которые вдеигий-инированы как полосы поглоценш ионизую: 1шх карбоксилов. Эти дайте позволяют сделать зоклэтонпо, что розудьтате взаимодеиствия образуется коиплекснге соединения л< типов с ловагдн ыетатлов. .

Для количественной оценки связнЕаюцей способности пектин се наш разработана методика анализа, основанная на коыплекспют] ческой определении избытка ионов металла. Это позволило аадаи связнв&юцую способность пектина по отношению к свинцу (191,С I конов/г), к бору <13,4 иг ионов/г), к аш.а;ялю (30,6 л:г ионов, к таллию (Ш) (86,С иг ионов/г). Зта методика оказалась лриешн мо2 для определения связывающей способности альгинэтов (350—1; № понов свинца/г), "Аадяшарида" (Г;С4,Ь ыг ионов сепшд/г).

В ряде случаев при зкишшшши растворов пектинов с сояш металлов в ыадых концентрациях (1«1(Г® - 1-Ю ) выпадсшш ос;

1 се наблэдаотся, в частности, это относится к соедашенияы бария, шяка (Ь,У), таллия (1,Е1), ртути (П), стронция, цинка, калия, шышя, свинца, алаашия, поди. Поэтому взаимодействие пектинов укаяаншши соодинешшш изучали в растворах. Для этого смешива-I в антибатных соотносошшх от 1:3 до 3:1 растворы лекгинов л со-!й, приготовленные в коинентравди 1»Ю~®. Спектры поглощения ютеоров смеси изучали в сравнении со спекграип исходных Бегств, помо.да г.ряыкх и ди.;х1оренциальнк'х спектров установлено, что для юдуктов взаишдонстрия пектинов с «-элеыонташ (рис.1) набли-1ется незначительный бзто- или гиисохрошшй сдвиг. Аналогичный фактер хсриврх п незначительное из&сшяие шксимумов пзглоцения зодуктов взаимодействия и исходных веществ позволило предположить 5 образоЕании соединений ионного характера. Такое ко взапкодой-:вио с поктикаш наблодается л для соединений некоторых р-элеыен-)в: алюглашя, таллия (I), ммпьпкз (Ш,У) (рис.2). Соли других ■олокентсш (свинца, таллия (Ш) образуют о поктинаии комплексы же.2), характеризуйдсся значительным (25-€0 нм) гинсохрокныи сиплом по сравнению о леходшхш вейсстгаыи, что созеоллло грод-)ло;:;ггь хслатный тш коглтлексообразования. Соединения с!-элеыен->в с яокташаыя образует дрсл^уцествокно коюиексы хелатяого типа 5ИО.З), ото подтлор-дается и'раионнни бато- илл гиЕсохрсьшш дейтой (до СО ш). Таким образа», из приведенных рисунков 1-3 1т,но, что напбатыди" сдвиг в ьлкешумах тглоиапая наблюдается ш в заводе; стгпи пектинов с Ы-элешнташ, ысныдий - с р-слемап-алт, аа;го1ш;.ц!1 - с £-элементами.

ПодтЕер-.-до¡шсы образования соединений с готалла.ул слу~я вн-1де»о:о осадков ири увеличении концентраций реагирузцкх веществ. :а-да:з:о этих соединении наблюдается при соотношении пектина и ■лага в пределах 1:3 - 1:€5 при рн 2, 1:1 - 1:33 при рВ 8.

РйсЛ Спектры поглощения про- Рис.2 Спектр» поглощения про- Рис.3 Слекгр^поглозогаш^про-дуктов взаимодействия свекловичного пектина с ионаш калия Ш,с иона-ш кальция (2) ,с ионаш стронция (3), о ионами бария (4) в сравнении со свекловичным пектином (5), хлоридом калия (6) .хлоридом кальция (7)»хлоридом стронция (0).ацетатом бария (9)

дустов взаптлодекствия евзкловечпого пектина с иона:.:! свинца (I),с пона-1ли атхшщл (2),с иоаагл таллия Ш(3),с поиаыя таллия (¿Ж),с ионаш ьаиьяка (1иНЬ),с ионами ишьяка (У)(6) в сравнении со еьскловячпкз яек-типегл.(7),ацетатов свип-ьаД 8), ацетатом аталпщю .• Г9>,зцетато:л таллия ЦКЮ), хлоридом тзллпя (1ЖП). хлоридов шпьяка чы){12),

•ЧГ'.ЛГШГЮЛЧ ИОПМ'Я ГТ'ЗЛ

дудтеш вдо.ш.ш'додихдол свекловичного пектина с ионаги меди (П)Ш,с поааш ртути ши2),с нонами цинка (3) в сравнении со свекловичным пектином (4),ацота-

тси мода (5), хлоридом

.....

цг.ша

рту'

сути <И) < •ш13 (7)

6),ацетатом

основании составов дектинатов подобраны пектины и рассчитаны количества, необходима для связывания токсичных доз неоргэнп-скнх соединений: для связывания калия, калышя, стронция, бария, ища, алшшшя, таллия (Ш), меди Ш), ртути. (П) более пригоден окловичныи пектин: ого тробуется от О.C0I65 г до 7 г; для свивания соединении шшьяка (Iii, У) прпиепиш как свекловичный,так цитрусовый пектины з количество до О.иООЗ г; дня детоксикацпи хдпиепип таллия (I) ;.:огут бить использованы все пектины в коли-ЗТЕ9 до ü,G4 г; иоик цинка могут быть детоксиипрованн только точии.] пектином в количестве до 17 г.

4, Возможность комплексной переработки лаяшарш Северного бассейна для получения голиС.'ушшлохилыпгх лечебных средств

Наг.ш разработана технологическая схема комплексной порера-нгл ламинарии прпконпгольно к условиям А ОГК для получения био-чпесги активных веществ: илашшта, IiKT "Лашнарпд", ламлнарана, юцдона, альгината натрия с высоким выходец ЕКТ МамшарЕд" (в :Ь раза вгшо выхода "1аминарида"). Вперпга для получения актнв-: reL.coTB попользована лашнария Северного бассейна,тающая таточино запасы для проютшешой переработки и позволяэь^я яючнть перевозки сырья, иугцюсгь разработанного способа эакдп-тся в тог.;, что сирье последовательно экстрагировали 90-96 % ■ полог.:, горячей водой и 1,5 ^ раствором карбоната натрия; эта- ' ьпое извлечение концентрировали и кристаллизовали из него пит; из водного скстракта Ы> этанолом осаждали БКГ "Ла:.лиа-"; лрд отог.1 остаются спиртовки ваточный растнор упаривали я ото поло:.; осаждали лаг.'лнаран и .'укоддан, разделите последних ¡..оствляли 0,Ь г., растворои петанлона; из карбонатного извлсчо-сосло предварительно- обработки :-:оигзнтрарованпой серной

кислотой п раствором карбоната натрия получали альгинат натра

При сравнительном изучении ВКТ "1шшарадя и "Лашкарида" таношена их идентичность по хишческоыу составу ц спецгЛпчос: (слабительному) действию.

Ври- ставдартизаади препарата типа "Лашнарцц" для ловшеш точности (в 1,7 - 2 раза) я упрощения анализа наш били моди1л рованы методики вдоитиТикащш п определения сушы восстанэвлш цпх Сахаров в оубегашши и гранулах.

Гранулы ВКТ "Лашшрпд" по распадае^ости и слабительному I ствшз идентичны гранула:.: "Лашнашдэ1'.

Впервые установлен пирохеий спектр внрайошого биологическо действия ВКТ "Лашнатц", "Лашиарэда" и альгината натрия: гил лилцдеиическоо, противоязвенное, гепатозацитное, радионуклидов зывавдее, детокепцпруюцео, при отсутствии улыдерогелпого и ь:сс нораздракащего действия. Установлено слабительное действие да. альгината натрия, ламинарана, аукоилэна, ьашпта.

На основании ззырааешоЁ рддаонуклвдевлзыващой ахетивноегд препарата типа "Даышарад" (особенно благодаря низкой десорбцш ж свекловичного пехлина наш подобрано оптшладькса сочетание а си (2:1), обладающей максимальной коглдлексообразувцеп способно«

о.

гю (243,74 иг Дг /г) а шшшальшш побочный (слабительный) де ствяеы. Данная композиция будет предлогедач лечения радиоло: чеоких больных.

ншеща

1." Разработаны способы получения пектинов и альгинат ов виз ревой и эл екгрошлцгльсной экстракцией, обеспечивающие ловышзние выхода, чистоты, коыдлоксообразуюцой способности и снижение про дойшительности получания,

2, Показало, что очистка пектинов методом последовате..^ноЯ

зшяораппзавдгц а деыетоксдлированил увеличивает способность jkthhob свяэнвать покы металлов.

3. Предложен новый рзстнтольш:: источник (надзеглшя часть ¡вопя огородного) для получения пектина. Показано, что пектин

I ревоня обладает большой когллексообразуюцой способностью чец шестные пектины.

4. Показана целесообразность комплексной переработки ревом •ородного с полыэ получения бпологичеекп актирных вегаств: по-фенолов, пектшоэ, пищоия волокон.

5. Разработай способ (1рзшюнг.розаш!я по колэкулярной ыассэ ктинов с использование» кошзэктрпровашшх раствороз олоктроли-в: сульфзта гзгкдя а сульфата лглия.

6. Разработанная методика анализа в УО-областд поззозшэт QHTisfнцировать шзкгшш и о высокой точностью определить их ко-чостлошюо содержание в аналпэцруошх объектах. Предложенная шшиомотрлчоокая ¡/отедина наиболее полно позволяет участь рбокспльпно группы покгииов и применим для количественного роделонпя пектинов в окрэшенних я мутных растворах.

7. 11родло"оио татрпиетрическая методика определения кемп-ссообразуацей способности пектинов, альгпяатов. йогровшость :одпки составляет ¿2,5 ¡1.

8. Определена комплексо обра зушздя способность пектшюв с дшшиямя разлячш ас элементов, Найдено шшташюв колпчост-поктинов, необходимое дая связывания соединений мышьяка (Ш,

таллия а.ш), ртутя (П), еднка, «еда (Л), бария, свиста, яа-;, кальция, строншя, ошашадг.

'-». Разработанная схеьи комплексной переработки лшлнзрш оряого бассо.лга о пэльо получений бделогачоекз актсвшх воет: «очюта, li'.I "Ла^нарид", лампняраяа. фуковдана, алзгяаа-

-гота натрия, позволяет увеличит! внход ЕКТ "Лоьииарвд", расширь сырьевую базу для кодшлексного ее использования в производств пых условиях. Впервые установлен широкий спектр биологически действия 1ЖТ "Лашнарцц" п ачьгдната пат-pie. Разработано оптг сальное сочетание ЕКТ "Ламкнаозд" и свекловичного пектина с ъ яекнш дстококцирущпг.! дсиствиеы при отсутствии побочного (сх тельного) действия.

По теше диссертации опубликованы следуюаие роботе:

1. A.c. 1660252 AI СССР, Ш15 А ül Е 35/78. Способ получения лпеахархдов, обладшщих renaiosaqnrHoii активностью /В.А.Ко паяцев, Н.И.Кашпева, Ю-К.Басяленко, С .Ii.Сальникова (СССР).

2. A.c. 1672632 СССР, Mill5 А 61 К 35/78. Способ получения пол фенольных соединении, обладающих гепатозаитюк активность: В.А.Коиианцев, Н.Ш.КаСиева, Ю.К.Василенко п др. (СССР).

3. A.c. 1689378 СССР, Ш16 С 08 Б 37/ОС. Способ получения пе:

тина/В.А.Компадцев, Кайшева II.IL., В.1:.Писарев и др. (СССР).

й

4. Положительное рааеяие по заявке на а.с. 4679352 СССР, LSKIi С 08 Б 37/06. Способ получения шлпгалактуроноъух кпслот/Ki панцев Б.А,, Писарев В,Ь.,Кайшева Н.Ш. (СССР).-Заявлено 21.04.83.-7С.

5. Положительное ранение до заявке на а.с. 4788377 СССР,

С 08 Б 37/06. Способ получения пектинатов, обладающие антимикробным действием/ Кишанцев В.А., Уткина E.C.,KaiineEa Н, п др. (СССР).-Заявлено üS.II.üS.-S с.

6. Положительное решение по заявке на а.с. 482!J3I5 СССР, Ш!5* А 61 К 35/80. Способ получения полисахаридов, облздатада cj бительньш действием/ Кошанцев Б.А,, Кайшева U.ß., Са;.;окиш Il.fi. и др. (СССР).-Заявлено 28.05.90.-I5 с,

1. Положительное решение по заявке на а.с. 4842093 СССР, ШГ*

- 21 -

A CI К 35/73. Способ получения полисахаридов, обладающих сла-бптельшм дойстниом /Компанцев В.А.,Кайлена Н.Ш., Борегная Л. А. п др. (СССР).-Заявлено 28.D6.SO.-6o, 3. Положительное решение на пат. 4863631 СССР, МКИ5 С 08 В 37/С6. Способ одновременного получения тетра-, три-, да- и ионогалак-туроковшс кислот /В.А.Компалцов» П.Ш.Кайшева-(СССР).-Заявлено 26.C9.90.-I6 с.

Э. Полоиитолыюо репе ни о по заявке на пат, 4872231 СССР, МКИ? О 01 Ы 21/33. Способ качественного определения поктннов/ Н.Ш. Кайшева, В.А.Коыпанцов, Н.й.КрпкоЕЭ, С.Ы.Щербак (СССР).-Заявлено 09.10.SO.-7 с. ). Изучение химического состава биологически активных веществ • вторичного сирья при переработка в пшаавой промышленности/ Комвапцэв Б.А. и др./Диглгац Северного Кавказа-народному хозяйству: Тоз.докя.П Региональной ko:j[i,-Грозный,I989.-C.27I. Кислые полисахариды как естественные энторосорбонтн/В.А.Коы-папиев и др.//Синтоз и прпыекенш энтеросорбентов! Тез.докл. Росп.нау ч.-нрактнч.конф,-Конаколо, IS9Q, -С .41. . Возможность использования кислкх полисахаридов з качестве де-токспкаатов//Лкту&,ш1ие проблемы фармации п иедкиины: Тез. догд.лО красшой каучлсон£. молодых ученых и специалистов Пятигорского фарм.ин-та 5-9 февраля 1990г,-11ятягорск,1990«-С. 23-24.

. Лысенко Т.А. Фракционное разделение биологичзска активных соединений из расто1ш4У/Есвсоюз.коаг>.ьюлодгас учонтж го экстракции: Тоз. докл.29-31 пая 1&90г.-Дояещс,1300.-С.34-35. . ЛспользоЕааие псдаурз:шдоэ в качества зетпдотсш при острпх отраслениях гзкоторнет лекарственшш лропэратгаЕгУВ.А.Коииан-И2Е» Д,П.Гок-:аова, Н.И.Сацокпп/УАктуагъЕне проблемы лекарственной токсикологии: Тез.докл.Бс&сояэ.Еэуч.ховУ.12-16 ноября

1990г.;В 2 ч.Москва, 1990.-Ч.2.-С.142.

15. Перспективы создания препарата типа "Лашнгрид" из новог сирьяДомпавдев В.А. и др.//Состояние и перспективы созд новюс готоенх лекарственных средств ц фытсхЕшческих про ратов: Тс-з.докл.Всесош.конф.-Харьков»1ВХ-.-С. 1С-17.

16» Аспекты фармакологического действ и. субстанции из лаваша Ксипашгев В, А, и др.//По!Ек новых лекаре пшенных средств ; использование в клшшке1Тез.докл.науч.-пракгич.конф.-Чпт; 1990.-С,161-162.

17, Гопатопрохекторноя активность растительных средств к нек рае огоронн их механизма дейотвия/Васнленю Ю.К. и др.// псе нов их лекарственных средств л их использование г клщ

'' ке? Тез.дохл.иауч,-практич. кон]з.-Читг, 1390.-0.13-14.

18, Коыплексообразование пектинов с ионагл! полпваленткгх кот; ловДошшнцев В,А, и др.//11вд.про?л-сть.-1250,-И1.-С.ЗЭ-^

19, Биологические показатели порокка ревеня черноморского и ] олективы его использования в лечебной про.ушкииго/Коцца! В.А. и др./Л1зв.вузов.Пхпд.технояогия.-1391.-Л I-3.-C.25-i

20, Ссвктрофогоглетргческиа анализ доктиное/В.А.Когшанцсв е д] Охрана округавдей среди.-1991 .-Вып.2. -С ,22-24.

21, Определение комплексообразуюцей способности пектинов и пс тинсодершцшс препаратов/В.А.Коыпанцев и др.//Охрана озер] кающеЁ среды.-1991.-Выд,5.-С.25-27.

22, Комплексная переработка яаманарнп и расширение спектр б! логического действия препарата типа пЛа1яшарад"АошанцеЕ В.А, а др.//Резервн совершенствования лекарственного обес чанкя населения РСФСР: Тоз. докл. науч. -лраетич. кон!> .-Ълад мир, 1921.-С.6&-57.

23, Экологические аспекты применения пектинов при хштоксикащ ыегаллаии/В. А .Коыпанцев и др.//Экологическая патология и

(l-арцакокоррвгаци; Тез.докл.изуч,-практич.кои$.: В 2 ч.-Чита, 1991.-4.1.-0,40.

. Потепцйо^огрический.анализ пектинов/ С.Н.Щербак и др./Л^ето-д.ч анализа л контроля качество щ>одукцгш.-19Э1.-Екл,9.-С,II-IC.

. Определенно статической обменной емкости производственных пектинов и-.отодогл потенш;смет ричес кого титрования/В.А.Компан-цев и др.//Гегиопальпая копр. по «¡армад пи а фармакологии: Тез.докд.-Пятигорек, 1ЭЭ1.-С.89-90.

. Сравнительное изучение состава лашшарвда из лаышарии Северного и Дальнею ос точного бассейнов/Сашкиш И.И. и др.//Рагио-нальнзя конТ,. ш фармации а фармакологии: Таз,докл.-Пятигорск, ISSI.-Ü.S7.

. Щербак С.El. и др. Изучение физико-химических показателеЁ сорбиионшзх свойств пектикон//Хит.::: ки Северного Кавказа-нзрод-ншу хозяйству: Тез.докл. Ш Региональной конф.-Наль*шс,1391. -С. 129,

. Коияонцоз В.Л. ,И*зрбзк G.Ii. Определение полной статической обменной сухости производственных пектинов по кзтионш оддао-иалвнпшх мзт&лдоз/ЛЛетодн анализа и контроля качества дро-дукщ'л.-13Э1.-Внп.8.-й.19-г1. .

, Компанцев Б.А..Е.ербак Ü.H. Определение» полной статической обменной емкости пропзводств'епиих пектинов но катионам дзух-ватектаюс ыетаялов/Л^етодн анализа и контроля качества продукции . -I йЭ [. -Dan .'j.-G. s-II.

. нзучош:з характера взаимодействия пектинов с пеливаюнтшаз ¡.■.еталлапл спектролэтсыетричаскпи методом с пельа применения пектинов для детопенкацпи/ Кшлшнцзз В»А. и др.-1'.!.,1Ь31.-сС с.-Деп. в Kiiiuli I7.C5.i#I, 2043. ui/^/