Фармакогностическое и фармакологическое изучение корней хрена обыкновенного (Armoracia rusticana Gaertn., Mey et Scherb.)

Щербинина, Яна Геннадиевна

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фармакогностическое и фармакологическое изучение корней хрена обыкновенного (Armoracia rusticana Gaertn., Mey et Scherb.)

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Щербинина, Яна Геннадиевна Пермь 2004 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Фармакогностическое и фармакологическое изучение корней хрена обыкновенного (Armoracia rusticana Gaertn., Mey et Scherb.)

На правах рукописи

ЩЕРБИНИНА ЯНА ГЕННАДИЕВНА

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ КОРНЕЙ ХРЕНА ОБЫКНОВЕННОГО (ARMORACIA RUSTICANA gaertn., mey ет scherb.)

15.00.02- фармацевтическая химия, фармакогнозия 14.00.25- фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Пермь-2004

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения Российской Федерации»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, доцент Юшкова Татьяна Александровна Научный консультант:

кандидат фармацевтических наук, доцент Решетникова Мария Дмитриевна Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор Хомов Юрий Александрович доктор медицинских наук, профессор Ларионов Леонид Петрович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения России»

Защита состоится ноября 2004 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при ГОУ ВПО «ПГФА Минздрава России» по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Ленина, 48. Тел. (3422) 129-006,123445; Факс (3422) 129-476.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «ПГФА Минздрава России» по адресу: г. Пермь, ул. Крупской, 46.

Автореферат разослан & октября 2004 года.

Ученый секретарь диссертационного совета

Е.В. Метелева

/<£ ¿2 so

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние годы в Российской Федерации остается высокой заболеваемость экологически обусловленной патологией (Хаитов P.M. с соавт., 1995; Черешнев В.А. с соавт., 2000; Юшков В.В. с соавт., 2004) и другими заболеваниями, генез которых связан с дисбалансом иммунной системы (Хаитов P.M., 2001; Фрейдлин И.С., Тотолян A.A., 2001; Козлов В.К., 2002; Кеворков H.H., 2004).

В связи с этим особенно важным становится поиск средств для иммунопрофилактики и иммунореабилитации (Сепиашвили Р.И., 2001; Awadh Ali N.F. et al., 2001; Bodiner C.et al., 2002).

По результатам маркетинговых исследований, проведенных Егоровым В.А. с соавт. (2000), доля иммунотрошшх препаратов отечественного производства составляет лишь 15% от общего числа позиций этой группы, что не соответствует минимальному уровню безопасности страны в области политики лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений.

Опыт использования лекарственных растений в терапии различных патологических процессов открывает возможность поиска среди них источников новых эффективных медицинских препаратов, обладающих рядом преимуществ перед средствами синтетического происхождения, в частности, широтою терапевтического действия и низкой токсичностью. Интенсивно ведутся исследования по созданию иммунокорригирующих препаратов растительного происхождения (Бакуридзе А.Д., 1994; Запесочная Г.Г. с соавт., 1995; Мухамеджанова Д.М. с соавт., 1995; Куркин В.А., 1996; Никитина Т.И., 1996; Муравьева А.Д. с соавт., 1997; Бабаскина Л.И., 1998; Ларионов Л.П., 2002; Колхир В.К. с соавт., 2003 и др.).

Большое значение приобрела в последние годы проблема ограниченности сырьевой базы ряда лекарственных растений, являющихся источниками получения иммунокорригирующих и адаптогенных средств - женьшеня, элеутерококка колючего, родиолы розовой (Быков В.А.с соавт., 1999).

Растения рода Armoracia широко распространены на территории России. Анализ литературных данных, освещающих опыт применения сырья хрена в народной медицине, позволяет сделать предположение о широком спектре его

tlAUHlib дги.,, Л,

биологической активности, в том числе иммунотропной (Яковлев Г.П., Блинова К.Ф., 2000; Палов М., 2000).

Исследования химического состава сырья хрена обыкновенного позволили установить наличие в нем таких групп биологически активных веществ, как флавоноиды, фенилпропаноиды, кумарины, полисахариды, тиогликозиды, ферменты (Фурса Н.С., 1983; Фурса Н.С. с соавт., 1986; Андреева В.А., 1988; Яковлев Г.П., Блинова К.Ф., 2000). Это предполагает, что данное сырье обладает высокой биологической активностью, однако литературные данные, освещающие его фармакологические свойства, весьма ограничены.

Цель работы состоит в проведении фармакогностического и фармакологического исследования свежих корней хрена обыкновенного, обосновании возможности использования их в медицинской практике в качестве потенциального источника лекарственных препаратов широкого спектра действия.

В задачи исследования входило:

- проведение морфолого-анатомического изучения свежих корней хрена обыкновенного, выявление диагностических признаков сырья;

- проведение скринингового фитохимического анализа свежих корней хрена обыкновенного;

- определение критериев оценки качества свежих корней хрена обыкновенного, разработка проекта нормативной документации на сырье;

- изучение острой токсичности, выявление специфической фармакологической активности водно-спиртовых извлечений из свежих корней хрена обыкновенного;

- исследование иммунофармакологических свойств водно-спиртовых извлечений из свежих корней хрена обыкновенного;

- сравнительная оценка биологической активности извлечений из сырья хрена в сравнении с функциональными аналогами.

Научная новизна работы. Проведено фармакогностическое исследование свежих корней хрена обыкновенного: выявлены диагностические признаки в морфолого-анатомическом строении сырья, осуществлен скрининговый анализ химического состава и количественного содержания биологически активных веществ. Определены критерии оценки качества сырья.

Проведено фармакологическое изучение водно-спиртовых извлечений из корней хрена обыкновенного, доказана их низкая токсичность. Выявлена и охарактеризована противовоспалительная и иммуномодулирующая активность извлечений из сырья хрена. Установлено их противовирусное, ранозаживляющее и диуретическое действие.

Проведена сравнительная оценка биологической активности извлечений из корней хрена обыкновенного в сравнении с функциональными аналогами.

Научная новизна работы подтверждена решением о выдаче патента РФ на изобретение «Способ получения фитопрепарата хрена, обладающего иммунокорригирующей и противовоспалительной активностью» (заяв. № 2003123806/15(025274) от 29.07.2003 г.).

Практическая значимость работы. На основании данных морфолого-анатомического, фитохимического и товароведческого анализа разработан проект фармакопейной статьи предприятия на сырье «Хрена обыкновенного корни свежие». Предложены методики установления подлинности сырья и количественного содержания аллилизотиоцианата в корнях хрена обыкновенного.

Результаты фармакологического исследования обосновывают целесообразность создания новых препаратов широкого спектра действия на основе сырья хрена обыкновенного.

Материалы работы используются в учебном процессе ПГФА на ФДПО в курсах фармакогнозии, фармакологии, аллергологии и иммунологии.

На защиту выносятся:

- морфолого-анатомические диагностические признаки свежих корней хрена обыкновенного;

- скрининговые исследования химического состава свежих корней хрена обыкновенного;

- материалы по разработке фармакопейной статьи предприятия «Хрена обыкновенного корни свежие»;

- водно-спиртовые извлечения из свежих корней хрена обыкновенного являются малотоксичными и обладают противовоспалительной, иммуномодулирующей, противовирусной, ранозаживляющей, диуретической активностью.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии и иммунологии Пермской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01.9.10.018875). Тема утверждена на заседании Ученого совета академии (протокол № 4 от 27.12.01).

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены па научных конференциях профессорско-преподавательского состава ПГФА (2002, 2004); Российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь, 2004); I конференции иммунологов Урала (Екатеринбург, 2001); Объединенном иммунологическом форуме: III Съезде иммунологов России, VI Национальном конгрессе РААКИ, III Российской конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет» (Екатеринбург, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, получено решение о выдаче патента РФ на изобретение.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста, содержит введение, обзор литературы, описание материалов и методов, 2 главы собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, список литературы, содержащий 147 отечественных и 39 зарубежных источников, а также приложения. Иллюстрации представлены 30 таблицами и 8 рисунками.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Объекты и методы исследования

Объектами настоящего исследования служили свежие корни хрена обыкновенного- Armoracia rusticana Gaertn., Mey et Scherb., собранные в период плодоношения в 2001-2004 годах в Пермской области.

Морфолого-анатомическое строение исследовали по методикам, приведенным в ГФ XI издания.

Фитохимический анализ объектов проводили с помощью цветных качественных реакций, методами одномерной и двумерной бумажной

хроматографии на бумаге марки «С» и тонкослойной хроматографии на пластинках «Силуфол 11У 254».

Количественное содержание аллилизотиоцианата оценивали титриметрически.

Определение эфирного масла и товароведческий анализ сырья проводили согласно требованиям ГФ XI.

Объектами фармакологического изучения служили водно-спиртовые извлечения (настойки) из корней хрена обыкновенного, мазь с настойкой корней хрена обыкновенного, изготовленные согласно ГФ XI. В качестве мазевой основы использовали эфтидерм.

Выявление и характеристику фармакологических свойств настоек корней хрена осуществляли на 600 лабораторных мышах, в т.ч. линии СВА, массой 18-20 г и 200 лабораторных крысах массой 150-250 г обоего пола.

При выборе методик использовали «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., 2000».

Противовоспалительную активность оценивали на моделях экссудативного и пролиферативного воспаления.

Анализ механизма противовоспалительного действия осуществляли на моделях гистаминового воспаления и ГЗТ. О влиянии фитопрепарата на выделение гистамина судили по изменению дегрануляции тучных клеток.

Иммунотропную активность оценивали по изменению фагоцитоза, числа АОК, титра гемагтлютининов у интактных животных и на фоне иммунодефицита, вызываемого циклофосфаном.

О функциональном состоянии клеточного звена иммунитета судили по изменению пролиферативного ответа на Т- (ФГА, Кон А) и В- (ЛПС) клеточные митогены.

Изучение влияния фитопрепарата хрена на противовирусную защиту осуществляли по методике Юшковой Т А. (1994).

Ранозаживляющее действие исследовали на модели линейных кожных ран.

Диуретическое действие оценивали по изменению диуреза после водной нагрузки.

В качестве функциональных аналогов использовали препараты природного (экстракт родиолы жидкий, настой травы эрвы шерстистой, иммуноглобулин против клещевого энцефалита человека) и синтетического (ибупрофен, напроксен, индометацин) происхождения.

Данные исследований обработаны статистически с определением критерия Стьюдента согласно ГФ XI и путем математической обработки на компьютере с помощью статистических программ Excel.

Фармакогностическое изучение корней хрена обыкновенного

Морфологический анализ свежих корней хрена обыкновенного позволил установить, что диагностическими признаками сырья являются:

- цилиндрическая форма корней;

- окраска поверхности (от светло-желтой до светло-бурой);

- характер поперечного излома (ровный, плотный, покрыт белыми каплями сока);

- специфический острый вкус и запах.

Микроскопический анализ и микрохимические реакции показали наличие следующих диагностических признаков анатомической структуры свежих корней хрена обыкновенного:

- покровная ткань- пробка, состоящая из продольно вытянутых клеток желтого цвета (рис. 1-А), при воздействии реактива Судан Ш приобретает розовую окраску в местах скопления эфирного масла;

- кора представлена паренхимной тканью, клетки которой содержат большое количество крахмальных зерен (рис. 1-Б), что подтверждается синим окрашиванием микропрепарата при обработке реактивом Люголя, и включениями механической ткани в виде одиночных или сгруппированных каменистых клеток желтого цвета (рис. 1-В);

- сосуды ксилемы крупные, стенки окрашены в желтый цвет, на поперечном срезе располагаются в виде радиальных лучей (рис. 1-Г)> имеют сетчатое строение (рис. 2);

- паренхима ксилемы состоит из округлых клеток, укрупняющихся к центру, с воздухоносными полостями и включениями крахмальных зерен (рис. 1-Д).

Фотохимическое исследование свежих корней хрена обыкновенного включало проведение качественных реакций на основные группы биологически активных веществ, а также хроматографического анализа методами восходящей одномерной и двумерной бумажной хроматографии и хроматографии в тонком слое сорбента.

А- пробка;

Б- клетки паренхимы коры с включениями зерен крахмала; В- каменистые клетки;

Г- сосуды ксилемы; Д- клетки паренхимы ксилемы

Рис. 1. Анатомическое строение корня хрена обыкновенного (поперечный срез).

Рис. 2. Ксилема корня хрена обыкновенного (продольный срез)

В результате гидродистилляции во всех испытуемых образцах сырья обнаружено эфирное масло, представляющее собой тяжелую маслянистую жидкость желтого цвета со специфическим запахом.

Результаты фитохимического анализа свежих корней хрена обыкновенного представлены в табл. 1.

Таблица 1

Результаты ориентировочного фитохимического анализа извлечений из свежих корней хрена обыкновенного

№п/п Группа БАВ Водные извлечения Водно-спиртовые извлечения

1 в-гликозиды (аллилизотиоцианат) + +

2 Кумарины + +

3 Фенолкарбоновые кислоты + +

4 Сахара + +

5 Сапонины - -

6 Алкалоиды - -

7 Дубильные вещества - -

Условные обозначения: «+» - группа БАВ содержится, «-» - группа БАВ отсутствует

Установлено, что как в водных, так и в водно-спиртовых испытуемых вытяжках из свежих корней хрена обыкновенного содержатся гликозиды, кумарины, фенолкарбоновые кислоты, сахара. Не обнаружено наличие сапонинов, алкалоидов, дубильных веществ.

Методами одномерной и двумерной восходящей хроматографии на бумаге в системах растворителей н-бутанол-уксусная кислота-вода 4:1:5 и уксусная кислота-вода 15:85 подтверждено присутствие в корнях хрена обыкновенного эскулетина (в сравнении со стандартным образцом-свидетелем).

В качественном анализе сырья корней хрена обыкновенного была использована модифицированная нами методика хроматографического определения в-гликозидов, предложенная ВФС 42-3633-00 для установления подлинности горчичников-пакетов.

Наличие в корнях хрена обыкновенного 8-гликозидов подтверждали методом одномерной восходящей хроматографии в тонком слое сорбента в системе

растворителей этанол-хлороформ 3:2. На хроматограмме определялось наличие одного пятна с М 0,33, которое после проявления 10% раствором меди сульфата и выдерживания в сушильном шкафу в течение 20 минут при температуре 100-105° С приобретало желто-коричневую окраску, что указывает на присутствие в исследуемых водных и водно-спиртовых извлечениях из корней хрена Б-гликозидов (рис. 3).

Рис.3. Схема одномерной восходящей тонкослойной хроматограммы водно-спиртового извлечения из свежих корней хрена обыкновенного

Данную методику предложено внести в проект нормативной документации на корни хрена обыкновенного свежие как качественную реакцию для установления подлинности сырья.

Для стандартизации сырья хрена по содержанию аллилизотиоцианта, одного из основных компонентов эфирного масла, использовалась модифицированная нами методика аргентометрического титрования, используемая для количественного определения аллилизотиоцианата в горчичниках-пакетах. В ходе определения установлено, что среднее содержание аллилизотиоцианата в свежих корнях хрена обыкновенного составляет 0,68%. В проект нормативной документации на сырье предложено внести показатель «Аллилизотиоцианата не менее 0,5%».

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 2. Из данных таблицы следует, что относительная ошибка предлагаемого метода количественного определения аллилизотиоцианата в 10 независимых определениях составляет ±3,25% при доверительной вероятности 95%.

Таблица 2

Метрологические характеристики аргентометрического метода

количественного определения аллилизотиоцианата в __корнях хрена обыкновенного_

Б X в Р,% КР,0 Д X Е, %

9 0,605 0,0275 95 2,26 0,0196 ±3,25

В ходе определения суммы экстрактивных веществ, извлекаемых из корней хрена обыкновенного различными растворителями, установлено, что наибольшая полнота экстракции достигается при использовании в качестве экстрагенгов воды и 40% этанола (рис. 4).

Рис. 4. Содержание экстрактивных веществ в корнях хрена обыкновенного

На основании данных фотохимического и товароведческого анализа образцов сырья разработан проект фармакопейной статьи предприятия «Хрена обыкновенного корни свежие». Критерии оценки качества сырья, включенные в проект, представлены в табл. 3.

Таблица 3

Показатели качества свежих корней хрена обыкновенного, включенные в проект ФСП

№п/п Показатель качества Значение

1 Содержание аллилизотиоцианата не менее 0,5%

2 Экстрактивных веществ, извлекаемых 40% этанолом не менее 12%

3 Влажность не менее 35%

4 Золы общей не более 3%

5 Золы, нерастворимой в 10% растворе хлороводородной кислоты не более 0,5%

6 Примеси органической не более 1%

7 Примеси минеральной не более 2%

Фармакологическое изучение корней хрена обыкновенного

С целью исследования фармакологической активности сырья нами были получены серии модельных образцов настоек корней хрена обыкновенного, зашифрованных как НХ-1, НХ-2, НХ-3, отличающиеся концентрацией использованного в качестве экстрагента этанола и степенью измельчения сырья.

В ходе проведенных исследований показано, что полученные настойки относятся к классу малотоксичных веществ и не превосходят по токсичности препарат сравнения - экстракт родиолы жидкий. Результаты эксперимента представлены в табл. 4.

Таблица 4

Результаты исследования острой токсичности настоек корней хрена обыкновенного

Шя (мл/кг) экстрагентов Шзо (мл/кг) настоек корней хрена обыкновенного Шзо (мл/кг) препарата сравнения

70% этанол 40% этанол НХ-1 (экстрагент-70% этанол) НХ-2 (экстрагснт-70% этанол) НХ-3 (экстрагент-40% этанол) ЭР (экстрагент-40% этанол)

12,75 16,8 18,14 17,5 23,9 20,5

В опытах на крысах показано, что настойкам корней хрена обыкновенного присуще самостоятельное противовоспалительное действие.

Противоэкссудативный эффект обнаружен на модели каррагенинового воспаления (рис. 5).

Рис. 5. Противовоспалительная активность настоек корней хрена обыкновенного Сравнительный анализ противовоспалительной активности показал, что наиболее эффективной является настойка корней хрена обыкновенного из третьей

серии, полученная при использовании в качестве экстрагента 40%этанола. По выраженности противоэкссудативного эффекта она уступает напроксену и ибупрофену, но превосходит индометацин (рис. 5). Для дальнейшего фармакологического исследования использовали настойки серии НХ-3.

Несомненная заинтересованность медиаторов воспаления в генезе каррагенинового воспаления указывает на возможный антагонизм фитопрепарата хрена с этими аутокоидами, что подтвердилось установлением нами его способности подавлять отек, вызванный субплантарным введением гистамина (рис. 6). Об антигистаминном эффекте фитопрепарата хрена свидетельствует и то, что он препятствует дегрануляции тучных клеток, тормозит реакцию гиперчувствительности замедленного типа (рис. 7,8).

Рис. б. Влияние настойки корней хрена Рис. 7. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на гистаминовое обыкновенного на ГЗТ

воспаление

раммшнн 1:100 рмид>нм 1:1000

□ Контроль оГистамии иЭкстрагент аНХ «ЭР

Рис. 8. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на дегрануляцию тучных клеток

Противовоспалительный эффект настойки корней хрена обыкновенного связан с ее антиэкссудативным действием, поскольку она не оказала существенного влияния на пролиферативную фазу воспалительной реакции. Об этом свидетельствует отсутствие отличий в весе имплантированных под кожу бумажных тампонов.

На основании современных данных о взаимосвязи воспаления и иммунитета (Черешнев В.А., 2004) можно предположить, что противовоспалительный эффект настойки корней хрена обыкновенного обусловлен и ее иммуномодулирующей активностью. В развитии иммунного воспаления ведущую роль играют макрофаги (Насонова В.А. с соавт., 2003), одной из функцией которых является фагоцитоз (Ярилин А.А., 1999; Тотолян А.А, Фрейдлин И.С., 2000). С этих позиций представляют интерес данные о фагоцитозсти мулирующем эффекте исследуемого препарата хрена. Он активировал практически все фазы фагоцитоза, о чем свидетельствует увеличение фагоцитарной активности, интенсивности и фагоцитарного числа (рис. 9).

г*

Рис. 9. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на фагоцитарную активность

нейтрофилов

Иммуномодулируклцее действие настойки корней хрена обыкновенного связано с ее влиянием на клеточный и гуморальный иммунитет.

Она повышала функциональную активность Т-лимфоцитов. Об этом свидетельствует увеличение пролиферации на Т-клеточные митогены, в частности, ФГА и Кои А (рис. 10).

«90 «

■е-70

с 60 е »60 с

>40

г»

5.20 110 »о

ае

г Фон ифга

¡1

№ 'Л

К Э НХ ЭР

= 90

«.70

*60 о

»■50

«40

»30

2ю

кО о

1 |

1 1

р р I -1

К Э НХ ЭР

¡ЗФон 1ЛПС

Рис. 10. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на пролиферацию лимфоцитов под действием специфических митогенов

Вероятно, исследуемый препарат хрена активировал Т-хелперы, поскольку он вызывал увеличение антителообразующих клеток при иммунном ответе на Т-зависимый антиген (эритроциты барана) и повышение титра гемагглютининов как у интактных животных, так и на фоне иммунодефицита, модулируемого циклофосфаном (рис. 11,12).

Контроль о Экстра га нт в НХ в ЭР

ГоКонтроль шЭкстрагеит вНХ В ЭР

Рис. 11. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на первичный иммунный ответ у интактных мышей

Рис. 12. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на первичный иммунный ответ на фоне иммунодефицита

Принципиальное значение имеет то, что настойка корней хрена обыкновенного устраняла иммуносупрессию, вызываемую этанолом. Данный факт открывает определенные перспективы использования фитопрепарата хрена с целью коррекции лекарственной иммуносупрессии. Это подтверждается в опытах с иммуносупрессией, индуцированной циклософаном. Нами было установлено, что исследуемая настойка повышала число АОК и уровень титра антител при иммунном ответе на Т-зависимый антиген. Кроме того, настойка корней хрена обыкновенного отменяла иммуносупрессию Т-клеточного звена иммунитета, обусловленную циклофосфаном.

При оценке влияния настойки корней хрена обыкновенного на противовирусную защиту оказалось, что она проявила противовирусное действие при применении до введения антигена (рис. 13, 14). По выраженности противовирусного эффекта она уступала специфическому иммуноглобулину.

Поскольку специфический иммуноглобулин против клещевого энцефалита содержит антитела и в результате чего нейтрализует антиген вируса, то благоприятное влияние настойки корней хрена обыкновенного на формирование

Щ.

И ч

¿л

Контроль Аитогаи КЗ

1дКЭ

НХ

С 20

о. 15

3« 10

щ Я Я „1 —

.: гЩ ■

Контроль Антигон КЭ

1дКЭ

Рис. 13. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на формирование противовирусной защиты при профилактическом применении

Рис.14, Влияние настойки корней хрена обыкновенного на формирование противовирусной защиты при лечебном применении

противовирусной защиты, вероятно, связано с активизацией макрофагального звена иммунитета и индукцией интерферона. Данное предположение подтверждается тем, что фитопрепарат хрена не изменил реакции иммунной системы на фоне действия антигена вируса клещевого энцефалита.

НХ

Антитела т

I-

Нейтоофил Т-лимфоцнт

Т-хелпер

В-лнмфоцнт

Иммунная система

Т-супрессор

Плазматические клетки

Рис.15. Иммуномодулирующее действие настойки корней хрена обыкновенного

Выявление иммуномодулирующей активности у настойки корней хрена обыкновенного позволяет предположить и наличие репаративного действия. Наши исследования подтвердили, что мазь с настойкой корней хрена обыкновенного

стимулировала процессы заживления неинфицированной раны, что проявилось повышением прочности рубца на разрыв (рис. 16).

«- 2500

I 2000 &

3 1боо

§■ 1000

я 500

3 сутки 5 сутки

в контроль оэфтидерм а мазь )

7 сутки

Рис. 16. Влияние мази с настойкой корней хрена обыкновенного на рану Определенный интерес представляла также оценка мочегонного действия. Это связано с тем, что в народной медицине сок хрена используют как мочегонное средство (Лебеда А.Ф., с соавт., 2004). Наши исследования показали, что настойка корней хрена обыкновенного наряду с противовоспалительной активностью обладает и самостоятельным диуретическим действием, что проявлялось повышением диуреза на 5-м часе наблюдения после водной нагрузки (рис.17).

3 часа 5 часоа

□ Контроль а Экстрагвнт вНХ а ЭР аНГЭ]

Рис. 17. Влияние настойки корней хрена обыкновенного на диурез

По выраженности диуретического действия исследуемый препарат не уступал настою травы эрвы шерстистой, применяемого преимущественно в качестве мочегонного средства. Мочегонный эффект у фитопрепарата хрена вероятно связан с его влиянием на трансмембранный перенос ионов, однако окончательно на этот вопрос можно ответить при проведении дополнительных исследований.

Таким образом, нами эксперимстггально установлено, что настойка корней хрена обыкновенного относится к малотоксичным лекарственным средствам и обладает противовоспалительной, иммуномодулирующей, противовирусной, ранозаживляющей и мочегонной активностью. Выявлены механизмы реализации противовоспалительного и иммуномодулирующего действия. Тем самым существенно расширено представление о фармакологических свойствах фитопрепарата хрена, дана сравнительная характеристика с функциональными аналогами, широко применяемыми в качестве противовоспалительных, иммуномодулирующих и мочегонных средств. Эти данные расширяют доказательную базу о фармакодинамике сырья хрена, позволяют разрабатывать на его основе препараты широкого спектра действия и научно обосновывают его применение в клинической практике.

Выводы

1. Морфологическими диагностическими признаками свежих корней хрена обыкновенного являются: форма корней, окраска и характер поверхности и излома, органолептические показатели. Анатомическими диагностическими признаками свежих корней хрена обыкновенного являются: окраска и характер пробки корня, паренхимной и механической тканей коры, структура и расположение сосудов ксилемы.

2. В корнях хрена обыкновенного обнаружены: кумарины, фенолкарбоновые кислоты, сахара, Б-гликозиды.

3. На основании проведенного фитохимического и товароведческого анализа установлены числовые показатели, регламентирующие доброкачественность сырья, составлен проект ФСП «Хрена обыкновенного корни свежие».

4. Настойка корней хрена обыкновенного является малотоксичным фитопрепаратом, обладает противовоспалительным, иммуномодулирующим, противовирусным, ранозаживляющим и диуретическим действием.

торможении гистаминового отека, ГЗТ и дегрануляции тучных клеток. По выраженности противовоспалительного действия фитопрепарат хрена обыкновенного уступает напроксену и ибупрофену, но превосходит индометацин.

6. Механизм иммуномодулирующего действия настойки корней хрена обыкновенного включает стимуляцию иммунного ответа на Т-зависимый антиген, что обусловлено ее влиянием на клеточный и гуморальный иммунитет, проявляющимся активацией фагоцитоза, стимуляцией пролиферации Т- и В- лимфоцитов, повышением титра гемагтлютининов. По выраженности иммуномодулирующей активности настойка корней хрена обыкновенного не уступает экстракту родиолы розовой.

Список опубликованных работ

1. Юшкова, Т.А. Об иммунотропной активности хрена обыкновенного / Т.А. Юшкова, Я.Г. Щербинина // Иммунология Урала. - 2001. - №1(1). - С. 130-131.

2. Щербинина, Я.Г. О фармакологической активности хрена обыкновенного / Я.Г. Щербинина, В.В. Юшков // Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвузовской научно-практической конференции, посвященной 85-летию высшего образования на Урале. - Пермь, 2001.-С. 124-125.

3. Юшкова, Т.А. О влиянии хрена обыкновенного на первичный иммунный ответ / Т.А. Юшкова, Я.Г. Щербинина // Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвузовской научно-практической конференции, посвященной 85-летию высшего образования на Урале. -Пермь, 2001. -С.125.

4. Scherbinina, Y.G. The biological activity of the tincture of Armoracia rusticana roots / Y.G. Scherbinina, T.A. Yushkova // Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвузовской научно-практической конференции «Вузы и регион». - Пермь, 2002. - С. 115-116.

5. Щербинина, Я.Г. Характеристика иммунотропных свойств экстракта родиолы розовой жидкого / Я.Г. Щербинина // Рациональное использование

лекарств: Материалы Российской научно-практической конференции. - Пермь, 2004.-С. 318-319.

6. Щербинина, Я.Г. О влиянии экстракта родиолы розовой жидкого на дегрануляцию тучных клеток / Я.Г. Щербинина // Рациональное использование лекарств: Материалы Российской научно-практической конференции. - Пермь, 2004. -С. 319.

7. Юшков, В.В. Об иммуномодулирукнцей и противовоспалительной активности хрена обыкновенного и родиолы розовой / В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, Я.Г. Щербинина // Медицинская иммунология. - 2004. -№3-5. - С.473.

8. Щербинина, Я.Г. Об иммунотропной активности родиолы розовой /

Я.Г. Щербинина // Russian Journal of Immunology. - 2004,- Vol. 9., suppl. 1. - C. 285.

9. Способ получения фитопрепарата хрена, обладающего иммунокорригирующей и противовоспалительной активностью / Юшкова Т.А, Юшков В.В., Щербинина Я.Г., Решетникова М.Д., Софронова H.A., Эвич Н. В.; Пермская государственная фармацевтическая академия - Заявл. 29.07.2003 г. № 2003123806/15(025274), приоритет от 29.07.2003 г. Положительное решение ФИПС о выдаче патента РФ на изобретение от 11.08.2004 г.

Список сокращений

АИТЦ- аллилизотиоцианат;

АОК- антителообразующие клетки;

БАВ- биологически активные вещества;

ГЗТ- гиперчувствительность замедленного типа;

К- контроль;

Кон А- Коиканавалин А;

КЭ- клещевой энцефалит,

ЛПС- липополисахарид;

НТЭ- настой травы эрвы шерстистой;

НХ- настойка корней хрена обыкновенного;

РОЛ- розеткообразующие лимфоциты;

ФГА- фитогемагглютинин;

ФР- физиологический раствор (изотонический раствор натрия хлорида); ФСП- фармакопейная статья предприятия; Э- экстрагент;

ЭР- экстракт родиолы жидкий; ЯСК- ядросодержащие клетки;

Ig КЭ- иммуноглобулин против клещевого энцефалита человеческий

Лицензия ПД-11-0002 от 15.12.99

Подписано в печать 30.09.2004. Формат 60X84/16. Набор компьютерный. Тираж 100 экз. Усл. печ. л. 1,0. Заказ № 732/2004.

Отпечатано на ризографе в отделе Электронных издательских систем ОЦНИТ Пермского государственного технического университета 614600, г. Пермь, Комсомольский пр., 29а, к.113, т.(3422) 198-033

IM 89 28

РНБ Русский фонд

2005-4 16210

Оглавление диссертации Щербинина, Яна Геннадиевна :: 2004 :: Пермь

Введение

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 .Фитопрепараты в коррекции функций иммунной системы.

1.2.Биологическая, химическая и фармакологическая характеристика хрена обыкновенного.

1.2.1. Морфологическая характеристика.

1.2.2. Ареал и экология.

1.2.3. Химический состав.

1.2.4. Биологическая активность сырья хрена обыкновенного и его действующих веществ.

1.2.5. Применение хрена обыкновенного в медицине.

Глава 2. Объекты и методы.

2.1. Объекты и методы фармакогностического исследования.

2.1.1. Макроскопический анализ.

2.1.2. Микроскопический анализ.

2.2. Методы химического исследования.

2.2.1. Методы качественного анализа.

2.2.2. Методы количественного анализа.

2.3. Объекты и методы фармакологического исследования.

2.3.1. Острая токсичность.

2.3.2. Поведенческие реакции.

2.3.3. Противовоспалительная активность.

2.3.4. Иммунотропная активность.

2.3.5. Влияние на рану.

2.3.6. Диуретическая активность.

Глава 3. Фармакогностическое изучение корней хрена обыкновенного.

3.1. Морфологическая характеристика корней хрена обыкновенного.

3.2. Анатомическая характеристика корней хрена обыкновенного.

3.3. Исследование химического состава корней хрена обыкновенного.

3.3.1. Качественный анализ на содержание основных групп биологически активных веществ.

3.3.2. Хроматографическое исследование.

3.3.3. Анализ эфирного масла корней хрена обыкновенного.

3.3.4. Количественное определение аллилизотиоциа-ната в корнях хрена обыкновенного.

3.4. Товароведческий анализ корней хрена обыкновенного.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Щербинина, Яна Геннадиевна, автореферат

Актуальность темы. На фоне сложившейся в последние годы неблагоприятной экологической, социальной и эпидемиологической обстановки в Российской Федерации резко возросла частота заболеваний, основным патогенетическим звеном которых являются нарушения со стороны иммунной системы [129, 137, 145]. Выявление взаимосвязи между течением патологического процесса и дисбалансом звеньев защитной системы организма оказывает непосредственное влияние на принципы и методы современной фармакотерапии. В связи с этим особенно важным становится поиск средств для иммунопрофилактики и иммунореабилитации [47, 100].

Согласно результатам маркетинговых исследований, в настоящее время доля иммунотропных препаратов отечественного производства составляет лишь 15% от общего числа позиций этой группы, что не соответствует минимальному уровню безопасности страны в области политики лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений [50, 77].

Большое значение приобрела в последние годы проблема ограниченности сырьевой базы ряда лекарственных растений, являющихся источниками иммунокорригирующих и адаптогенных лекарственных средств- женьшеня, элеутерококка колючего, родиолы розовой [20].

Растения рода АгтогаЫа широко распространены на территории России. Анализ литературных данных, освещающих опыт применения сырья хрена в народной медицине, позволяет сделать предположение о широком спектре его биологической активности, в том числе иммунотропной [80, 140]. Однако научный интерес сырье хрена вызвало в основном как источник фитонцидов и ферментов [4, 136]. Литературные данные, освещающие его фармакологические свойства, весьма ограничены.

В задачи исследования входило:

- проведение скринингового фитохимического анализа свежих корней хрена обыкновенного;

- изучение острой токсичности, выявление специфической фармакологической активности водно-этанольных извлечений из свежих корней хрена обыкновенного; исследование иммунофармакологических свойств водно-этанольных извлечений из свежих корней хрена обыкновенного;

- проведение сравнительной оценки биологической активности извлечений из сырья хрена обыкновенного в сравнении с функциональными аналогами.

Научная новизна работы. Проведено фармакогностическое исследование свежих корней хрена обыкновенного: выявлены диагностические признаки в морфолого-анатомическом строении сырья, осуществлен скри-нинговый анализ химического состава и количественного содержания биологически активных веществ. Определены критерии оценки качества сырья.

Проведено фармакологическое изучение водно-этанольных извлечений из корней хрена обыкновенного, доказана их низкая токсичность. Выявлена и охарактеризована противовоспалительная и иммуномодулирующая активность извлечений из сырья хрена обыкновенного. Установлено их противовирусное, ранозаживляющее и диуретическое действие.

Практическая значимость работы. На основании данных морфоло-го-анатомического, фотохимического и товароведческого анализа разработан проект фармакопейной статьи предприятия на сырье «Хрена обыкновенного корни свежие». Предложены методики установления подлинности сырья и количественного содержания аллилизотиоцианата в корнях хрена обыкновенного.

Материалы работы используются в учебном процессе ПГФА в курсах фармакогнозии, фармакологии, аллергологии и иммунологии, фармацевтической технологии.

На защиту выносятся:

- морфолого-анатомические диагностические признаки свежих корней хрена обыкновенного;

- скрининговые исследования химического состава свежих корней хрена обыкновенного;

- материалы по разработке фармакопейной статьи предприятия «Хрена обыкновенного корни свежие»;

- водно-этанольные извлечения из свежих корней хрена обыкновенного являются малотоксичными и обладают противовоспалительной, имму-номодулирующей, противовирусной, ранозаживляющей, диуретической активностью.

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава ПГФА (2002, 2004); Российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь, 2004); I конференции иммунологов Урала (Екатеринбург, 2001); Объединённом иммунологическом форуме: III Съезде иммунологов России, VI Национальном конгрессе РААКИ, III Российской конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет» (Екатеринбург, 2004).

Заключение диссертационного исследования на тему "Фармакогностическое и фармакологическое изучение корней хрена обыкновенного (Armoracia rusticana Gaertn., Mey et Scherb.)"

Выводы

2. В корнях хрена обыкновенного обнаружены: кумарины, фенолкарбо-новые кислоты, сахара, 8-гликозиды.

3. На основании проведенного фотохимического и товароведческого анализа установлены числовые показатели, регламентирующие доброкачественность сырья, составлен проект ФСП «Хрена обыкновенного корни свежие».

5. Механизм противовоспалительного действия настойки корней хрена обыкновенного включает ингибирование экссудативной фазы воспалительной реакции, что обусловлено ее антигистаминным эффектом, проявляющимся в торможении гистаминового отека, ГЗТ и дегрануляции тучных клеток. По выраженности противовоспалительного действия фитопрепарат хрена обыкновенного уступает напроксену и ибупрофену, но превосходит ин-дометацин.

6. Механизм иммуномодулирующего действия настойки корней хрена обыкновенного включает стимуляцию иммунного ответа на Т-зависимый антиген, что обусловлено ее влиянием на клеточный и гуморальный иммунитет, проявляющимся активацией фагоцитоза, стимуляцией пролиферации Ти В- лимфоцитов, повышением титра гемагглютининов. По выраженности иммуномодулирующей активности настойка корней хрена обыкновенного уступает экстракту родиолы розовой.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные исследования, показали, что настойки корней хрена обыкновенного, использованные нами в качестве модельных образцов для проведения фармакологического изучения, относятся к классу малотоксичных веществ и обладают широким спектром биологической активности.

В результате оценки противовоспалительной активности установлено, что настойкам корней хрена обыкновенного присуще самостоятельное противовоспалительное действие. Противоэкссудативный эффект препарата хрена обнаружен на модели каррагенинового воспаления.

Несомненная заинтересованность медиаторов воспаления в генезе каррагенинового отека указывает на возможный антагонизм настойки корней хрена обыкновенного с этими аутокоидами, что подтвердилось установлением нами ее способности подавлять отек, вызванный субплантарным введением гистамина. Об антигистаминовом эффекте препарата хрена свидетельствует и то, что он препятствует дегрануляции тучных клеток, тормозит реакцию гиперчувствительности замедленного типа.

Следует отметить, что поскольку настойка корней хрена обыкновенного подавляла каррагениновый отек не только в начальную гистаминовую и серотониновую фазу, но и на более поздних этапах, это говорит о ее возможном взаимодействии с простагландинами и кининами [106].

Противовоспалительный эффект препарата хрена обыкновенного связан с антиэкссудативным действием, поскольку он не оказал существенного влияния на пролиферативную фазу воспалительной реакции. Об этом свидетельствовало отсутствие отличий в весе имплантированных под кожу бумажных тампонов.

Возможность использования настойки корней хрена обыкновенного в комплексной терапии воспалительных заболеваний определяет интерес к сравнению ее эффективности с эффективностью нестероидных противовоспалительных средств. Сравнительный анализ показал, что по выраженности противоэкссудативного эффекта препарат хрена обыкновенного уступает на-проксену и ибупрофену, но превосходит индометацин.

На основании современных данных о взаимосвязи воспаления и иммунной системы [137] можно предположить, что противовоспалительный эффект настойки корней хрена обыкновенного обусловлен и ее иммуномоду-лирующей активностью. В связи с тем, что в развитии иммунного воспаления ведущую роль играют макрофаги, одной из функций которых является фагоцитоз [108, 109, 126], представляют интерес результаты исследования влияния препарата хрена обыкновенного на фагоцитоз, которое проявилось увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов, интенсивности фагоцитоза и фагоцитарного числа.

Иммуномодулирующее действие настойки корней хрена обыкновенного связано с ее влиянием на гуморальное и клеточное звенья иммунитета. Препарат повышал функциональную активность Т-лифоцитов, что проявилось увеличением их пролиферации на специфические митогены ФГА и Кон А. Вероятно, препарат хрена обыкновенного активировал Т-хелперы, о чем свидетельствует увеличение антителообразования при иммунном ответе на Т-зависимый антиген (эритроциты барана). Увеличение количества АОК в селезенке указывает на стимулирующее воздействие настойки корней хрена обыкновенного на В-лимфоциты. Правомерность данного предположения подтверждена в реакции бласттрансформации лимфоцитов на В-клеточный митоген ЛПС.

Известно, что эффект иммуномодуляторов зависит от исходного состояния иммунной системы [144]. Принципиальное значение имеет и то, что настойка корней хрена обыкновенного устраняла иммуносупрессию, вызванную этанолом. Данный факт открывает определенные перспективы использования препаратов хрена обыкновенного с целью коррекции лекарственной иммуносупрессии, что подтверждается в опытах с иммуносупрессией, индуцированной циклофосфаном. Нами было установлено, что настойка корней хрена обыкновенного повышает число АОК и уровень гемагглютининов при иммунном ответе на Т-зависимый митоген на фоне иммунодефицита. Кроме того, препарат хрена обыкновенного отменяет иммуносупрессию Т-клеточного звена, обусловленную циклофосфаном.

Механизм иммуномодулирующего действия настойки корней хрена обыкновенного представлен на рисунке 26.

НХ

ИЁЙТрОфнл

Т-л им фонит: I у" У

Антитела Т

Т-хелпер

1 В-лимфоииты а

Иммунная система

Т-супрессор У

Плазматические клетки

Рис. 26. Механизм иммуномодулирующего действия настойки корней хрена обыкновенного

Известно, что генез ряда инфекционных заболеваний связан с иммунодефицитом. Так, вирус клещевого энцефалита вызывает Т-клеточный иммунодефицит [146]. Определенную роль в развитии нейропатологии играет гистамин [147]. Как показали наши исследования, настойке корней хрена обыкновенного присуще антигистаминовая активность. В связи с этим, одним из механизмов устранения иммунодефицита исследуемым препаратом является антагонизм с гистамином. Вместе с тем известно, что ряд иммуно-модуляторов, таких как амиксин, изоприназин и др. обладают самостоятельным противовирусным действием. Мы исследовали влияние настойки корней хрена обыкновенного на формировании противовирусной защиты в опытах на неинфицированных животных, которым вводился антиген вируса клещевого энцефалита [146, 147]. Установлено, что препарат хрена обыкновенного оказал противовирусное действие при его применении до введения антигена. Поскольку специфический иммуноглобулин против клещевого энцефалита содержит антитела и в результате чего нейтрализует антиген вируса, что благоприятное влияние фитопрепарата хрена на формирование противовирусной защиты, вероятно, связано с активизацией макрофагального звена иммунитета и индукцией интерферона, обеспечивающего противовирусную защиту. Данное предположение подтверждается тем, что изучаемый препарат не изменил реакции иммунной системы на фоне действия антигена вируса клещевого энцефалита. По-видимому, с наличием у фитопрепарата хрена обыкновенного самостоятельного влияния на формирование противовирусной защиты, связана его клиническая эффективность при вирусном гепатите, сопровождающемся желтухой [76, 91].

Выявление иммуномодулирующей активности у исследуемого препарата хрена обыкновенного позволяет предположить наличие у него репара-тивной активности. В настоящее время накоплен экспериментальный материал, позволяющий считать, что иммунотропные средства могут использоваться для коррекции репаративных процессов [9, 22, 103, 104, 105, 111, 112, 113]. Это связано прежде всего с установлением роли иммунной системы в регуляции регенеративных процессов [9]. При этом влияние иммуномодуля-торов на репарацию может проявляться как путем воздействия на организм с учетом прогнозируемого и непрогнозируемого действия с последующей реализацией в репаративных процессах в виде интегрированных реакций, воздействия на механизмы противоинфекционной защиты и модуляции воспалительной реакции [111, 112]. Наши исследования подтверждают, что настойка корней хрена обыкновенного, введенная в мазевую основу эфтидерм, стимулировала процессы заживления неинфицированной раны, что проявлялось повышением прочности рубца на разрыв.

Исследование влияния настойки корней хрена обыкновенного на диурез подтвердило наличие у сырья хрена обыкновенного мочегонного действия, что проявилось повышением диуреза уже на 5-м часе наблюдения поеле водной нагрузки. По выраженности мочегонного действия препарат хрена обыкновенного не уступает настою травы эрвы шерстистой, широко используемого в клинической практике в качестве диуретического средства.

Таким образом, нами экспериментально установлено, что настойка корней хрена обыкновенного относится к малотоксичным веществам и обладает противовоспалительной, иммуномодулирующей, противовирусной, ра-нозаживляющей и диуретической активностью. Выявлены механизмы реализации противовоспалительного и иммуномодулирующего действия. Тем самым существенно расширено представление о биологической активности сырья хрена обыкновенного и обоснована возможность его использования в медицинской практике как источника лекарственных препаратов широкого спектра действия.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2004 года, Щербинина, Яна Геннадиевна

1. Айзенман, Б.Е. Фитонциды и антибиотики высших растений / Б.Е. Айзенман, В.В. Смирнов, A.C. Бондаренко.- Киев: Наукова думка, 1984. С. 77-80.

2. Аналитические, технологические и фармакотерапевтические аспекты исследования травы эхинацеи пурпурной / В.А. Куркин, В.В. Косарев, О.И. Авдеева и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. V Рос. нац. конгр. — М.: РЦ «Фармединфо», 1997. С. 656.

3. Андреева, В.А. Фермент пероксидаза: Участие в защитном механизме растений / В.А. Андреева. М.: Наука, 1988. - 128 с.

4. Антимикробные вещества высших растений / В.Г. Дроботько, Б.Е. Айзенман, М.О. Швайгер и др. Киев: Изд-во АН УССР, 1958.- С. 213-219.

5. Артамонов, В. Хрен- приправа или лекарственное растение? / В. Артамонов // Наука и жизнь. 1995. - № 12. - С. 165-166.

6. Атлас лекарственных растений СССР / Гл. ред. Н.В. Цицин . — М.: Гос. изд-во мед. лит-ры, 1962. С. 594-595.

7. Афанасьев, В.А. Влияние полисахаридов ромашки аптечной на функциональное состояние иммунной системы при охлаждении / В.А. Афанасьев, И.Л. Бровкина, Л.Г. Прокопенко // Человек и его здоровье: Курск, гос. мед. ун-т. 1999. - №2. - С. 71-73.

8. Афанасьев, В.А. Иммуномодулирующее и антиоксидантное действие фитопрепаратов при стафилококковой инфекции и антибиотикотерапии / В.А. Афанасьев, И.Л. Ласкова // Человек и его здоровье: Курск, гос. мед. унт. 1998. - №1. - С. 121-123.

9. Бабаева, А.Г. Регенерация и система иммунитета / А.Г. Бабаева.-М.: Медицина, 1985. 255 с.

10. Бабаскина, Л.И. Исследование модулирующего влияния экстракта люцерны на противоопухолевую активность мононуклеаров крови / Л.И. Бабаскина, M.B. Киселевский // Человек и лекарство: Тез. докл. IV Рос. нац. конгр. М.: РЦ «Фармединфо», 1997.-С. 264.

11. Бабаскина, Л.И. Фармакотерапевтическая активность люцерны / Л.И. Бабаскина // Практ. фитотерапия. 1999. - №1. - С. 4-8.

12. Бабичев, И.А. Биохимия брюквы, репы, редьки, редиса и хрена / И.А. Бабичев, Г.А. Луковникова // Биохимия овощных культур / Под ред. А.И. Ермакова и В.В. Арасимович. Л.-М.: Сельхозгиз, 1961. — С. 468-512.

13. Березовская, И.В. Классификация химических веществ по параметрам острой токсичности при парентеральных способах введения / И.В. Березовская // Хим.-фармац. журн.- 2003. Т. 37, №3 - С. 32-34.

14. Берхин, Е.Б. Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Е.Б. Берхин // Хим.-фармац. журн. 1977. - Т. 11, №5. — С. 3-11.

15. Блинкова, Л.П. Биологическая активность спирулины / Л.П. Блин-кова, О.Б. Горобец, А.П. Батуро // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2001. №2. - С. 114-118.

16. Богоявленский, H.A. К истории происхождения и развития взглядов у русского народа на опухолевые болезни / H.A. Богоявленский // Вопр. онкологии. 1955. - №4.- С. 106-111.

17. Брехман, И.И. Что противопоставить стрессу / И.И. Брехман // Адаптация и адаптогены. Владивосток: ДВНЦ, 1977. - С. 81-90.

18. Буханова, Н.В. Возрастные особенности чувствительности организма к некоторым препаратам растительного происхождения: Дис. канд. . мед. наук / Н.В. Буханова; Уральская гос. мед. акад. Екатеринбург, 2001. — 256 е.: ил. -Библиогр.: С. 220-256.

19. Бухарин, О.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине / О.В. Бухарин, Н.В. Васильев.- Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1974. 209 е.: ил.

20. Быков, В.А. Родиола розовая (Rhodiola rosea L.): традиционные и биотехнологические аспекты получения лекарственных средств (обзор) / В.А.

21. Быков, Г.Г. Запесочная, В.А. Куркин // Хим.-фармац. журн. 1999. - Т. 33, №1. - С. 28-37.

22. Винокуров, С.И. Влияние антибиотиков чеснока, лука, хрена и редьки на тирозиназу / С.И. Винокуров, JI.H. Эрлихман // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1950. - Т. 30, №9. - С. 195-198.

23. ВФС 42-3633-00. Горчичник-пакет ароматизированный = Sinapis-mus-saccinus aromatisatus. Ввод, впервые; Введ. 05.06.2000 г. до 05.06.2003 г.- 8 с.

24. Гаврилов, А.С. Новые лечебно-профилактические препараты ро-диолы розовой / А.С. Гаврилов, А.А. Щеголев, Л.П. Ларионов // Хим.-фармац. журн. 2003. - Т. 37, №12. - С. 18-20.

25. Глицирризиновая кислота и её производные как новые иммуномо-дуляторы / Л.А. Балтина, С.А. Рыжова, А.Ф. Исмагилова и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. IV Рос. нац. конгр. М.: РЦ «Фармединфо», 1997.- С. 247.

26. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа. / МЗ СССР. 11-е изд. - М.: Медицина, 1987. - 336 с.

27. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е изд. - М.: Медицина, 1989.-400 с.

28. Гот-Лопакова, А.И. Фитонциды пищевых растений и взаимовлияние их с пищеварительными соками / А.И. Гот-Лопакова // Фитонциды: их роль в природе и значение для медицины. М.: Изд-во АМН СССР, 1952. -С. 216-224.

29. Губен-Вейль. Методы органической химии. Т. II: Методы анализа / Губен-Вейль; Подг. Е. Мюллером; Пер. с нем. В.Л. Анохина, A.C. Забродиной, Е.И. Марголис и др. Изд-е 4-е, полностью перераб. - М.: Гос. изд-во хим. лит-ры, 1963. - С. 605-609.

30. Долгова, A.A. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии / A.A. Долгова, Е.Я. Ладынина. М.: Медицина, 1977. - 275 с.

31. Драбкин, Б.С. К вопросу о мутагенном действии летучих фитонцидов / Б.С. Драбкин, A.M. Думова // Фитонциды: результаты, перспективы и задачи исследований. Киев: Наукова думка, 1972. - С. 260-261.

32. Дрозд, Г.А. Фармакогностическо-иммунологическое изучение плодов софоры японской / Г.А. Дрозд, Л.А. Горбачева // Фармация. 1994. -№1.-С. 34-37.

33. Дряновска-Нонинска, Jl.А. Обзор болгарского журнала «Фармация» за 1956 г. / JI.A. Дряновска-Нонинска // Фармация. 1957, №.5. - С. 8991.

34. Ермакова, А.Е. Изучение иммуномодулирующего действия полисахаридов и флавоноидов плодов софоры японской / А.Е. Ермакова, Л.Г. Прокопенко // Человек и лекарство: Тез. докл. II Рос. нац. конгр. М.: РЦ «Фармединфо», 1995.- С. 136.

35. Зайцев, Г.Н. Математическая статистика в экспериментальной ботанике / Г.Н. Зайцев. М.: Наука, 1984. - 434 с.

36. Зайцева, Е.И. К вопросу о лечении хреном заболеваний кишечника и билиарной системы / Е.И. Зайцева // 4-е совещание по проблеме фитонцидов: Тез. докл. Киев: Наукова думка, 1962. - С. 102.

37. Зайчикова, С.Г. Влияние экстракта чины посевной, луговой и лесной на фагоцитарную и антибактериальную активность нейтрофилов человека / С.Г. Зайчикова // Хим.-фармац. журн. 2002. - Т. 36, №3. - С. 36-37.

38. Иммунокоррекция полисахаридами водорослевого происхождения / Л.К. Добродеева, Э.В. Рехачева, Т.В. Добродеев и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. IV Рос. нац. конгр. -М.: РЦ «Фармединфо», 1997.- С. 264.

39. Иммунокорригирующая терапия- препараты и перспективы / В.П. Кузнецов, Д.И. Белаев, A.A. Бабаянц и др. // Рос. журн. иммунологии. 2000. -Т. 5, №2.-С. 165-176.

40. Иммуномодулирующие свойства арабиногалактана лиственницы сибирской / В.И. Дубровина, С.А. Медведева, Г.П. Александрова и др. // Фармация. 2001. - № 5. - С. 26-27.

41. Иммуномодуляторы растительного происхождения (обзор) / А.Д. Бакуридзе, М.Ш. Курцикидзе, В.М. Писарев и др. // Хим.-фармац. журн. -1993. Т.27, №8. - С. 43-47.

42. Иммуностимулирующая и антикоагулянтная активность фукоида-на из бурой водоросли охотского моря Fucus evanescens / Т.А. Кузнецова, Т.С. Запорожец, H.H. Беседнова и др. // Антибиотики и химиотерапия. — 2003. Т.48, №4. - С.11-13.

43. Иммунотропная активность эраконда / К.А. Лукманова, С.М. Фридман, Д.А. Валишин и др. // Эксперим. и клин, фармакология. — 1998. — Т. 61,№4.-С. 41-43.

44. Иммунотропные лекарственные средства на фармацевтическом рынке Самарской области / В.А. Егоров, Л.В. Мошкова, В.А. Куркин и др. // Фармация. 2000. - №4. - С. 41-42.

45. Интерферониндуцирующее действие полисахарид содержащих биополимеров из корня и культуры клеток женьшеня / Т.П. Смолина, Т.Г. Орлова, О.Н. Щегловитова, H.H. Беседнова // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - Т. 43, №11. - С. 21-23.

46. Исследование иммунотропных свойств экстракта рудбекии раз-дельнолистной / P.E. Дармограй, С.И. Дихтярев, Л.В. Гладкова и др. // Провизор. 2000. - №16. - С. 21-22.

47. Кириллова, A.B. Иммунотропная активность милиацина: Автореф. дис. . канд. мед. наук / A.B. Кириллова; Оренбургская гос. мед. академия. — Пермь, 2004. — 22 с. : ил.

48. Киселевский, М.В. Иммуномодулирующее действие лектинов чины посевной / М.В. Киселевский, С.Г. Зайчикова // Хим. фармац. журн. -2002.-Т. №6.-С. 30-31.

49. Конопля, А.И. Использование лекарственных препаратов растительного происхождения в качестве иммуномодуляторов / А.И. Конопля, Г.А. Дрозд, H.H. Кедровская // Фармация. 1988.- №2. - С. 17-19.

50. Кощеев, А.К. Дикорастущие съедобные растения в нашем питании / А.К. Кощеев. -М.: Пищевая промышленность, 1981. 256 е.: ил.

51. Куркин, В.А. Химический состав и фармакологические свойства растений рода родиола (обзор) / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная // Хим.-фармац. журн. 1986. - Т.20, №10. - С. 1231-1244.

52. Лагерь, A.A. Фитотерапия / A.A. Лагерь.- Красноярск: Изд-во Красноярск, ун-та, 1988. С. 155.

53. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алёхин. -М.: Медицина, 1985. С. 183-205.

54. Лебедева, О.В. Механизм пероксидазного окисления. Субстрат-субстратная активация в реакциях, катализируемых пероксидазой хрена / О.В. Лебедева, H.H. Угарова // Изв. Акад. наук. Сер. хим. 1996. - №1. - С. 25-32.

55. Лекарственные растения в научной и народной медицине / Б.Г. Волынский, К.И. Бендер, С.Л. Фрейдман и др. Изд-е 6-е. - Саратов: Изд-во Саратовск. ун-та, 1981. - С. 248-249.

56. Лечебно-профилактические фитопрепараты на основе морских водорослей / М.Я. Шашкина, П.Н. Шашкин, A.B. Сергеев и др. // Практ. фитотерапия. 1999. - №1. - С. 48-52.

57. Лизоцим / Сост. У.Я. Каулиныи.-Рига: «Авотс», 1982. 51 с.

58. Маслов, А.К. Влияние пероксидазы на развитие экспериментальной лепры у мышей, зараженных интраплантарно / А.К. Маслов, О.В. Калянина // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 129, №6. - С. 571573.

59. Маслов, А.К. Влияние терапии пероксидазой экспериментальной лепры на функциональное состояние фагоцитов, печени и картину крови у мышей / А.К. Маслов, С.А. Лужнова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 130, №7. - С. 83-87.

60. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств / Сост. Е.В. Арзамасцев, Т.А. Гуськова, С.С. Либерман и др. // Ведомости Фармакол. ком. 1998. - №1. - С. 27-31.

61. Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири / В.Г. Минаева; Отв. ред. A.B. Куминова. 5-е изд., перераб. и доп. - Новосибирск : «Наука», 1991.-С. 328-329.

62. Моисеева, Г.Ф. Иммуностимулирующие полисахариды высших растений / Г.Ф. Моисеева, В.Г. Беликов // Фармация. 1992. - №3. - С. 79-84.

63. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия: Учебник /Д.А. Муравьева. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002. - С. 361-363.

64. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / Под ред. B.JI. Багировой, В .А. Северцева. СПб.: СпецЛит., 2001. - 223 с.

65. Никитин, A.A. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений / A.A. Никитин, H.A. Панкова. Л.: Наука, 1982. - С. 667672.

66. Новиков, И.Е. Лечение болезни Боткина, хронических гепатитов и хронических колитов фитонцидами хрена / И.Е. Новиков // 4-е совещание по проблеме фитонцидов: Тез. докл. Киев: Наукова думка, 1962. - С. 103.

67. Остроухова, Л.Г. Изучение токсичности препаратов ГАФ-1 и ГАФ-2 / Л.Г. Остроухова // Материалы юбил. науч. конф., посвящ. 100-летию со дня рождения В.И. Ленина, Ташкентский фармац. ин-т, 1970. Ташкент, 1970.-С. 50-53.

68. Палов, М. Энциклопедия лекарственных растений = Mannfried Pahlow. Das grosse Buch der heil Pflanzen / M. Палов; Под ред. И.А. Губанова; Пер. с нем. Е.Б. Поспеловой, K.JI. Тарасова, Н.В. Хмелевской. М.: Мир, 1998.-467 с.

69. Парамонов, Б.А. Ожоги: Руководство для врачей / Б.А. Парамонов, Я.О. Порембский, В.Г. Яблонский СПб: СпецЛит, 2000. - С. 130-160.

70. Пастушенков, Л.В. Лекарственные растения: Использование в народной медицине и быту / Л.В. Пастушенков, А.Л. Пастушенков, В.Л. Пастушенков. Л.: Лениздат, 1990. - С. 277-278.

71. Перевозчиков, А.Б. Иммунобиологическая характеристика препарата олексин: Автореф. дис. . канд. мед. наук / А.Б. Перевозчиков; Перм. ин-т экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН. Пермь, 1999. — 20 е.: ил.

72. Препараты из лекарственных растений как средства дополнительной терапии в экспериментальной онкологии / Т.Г. Разина, Е.П. Зуева, E.H. Амосова, С.Г. Крылова// Эксперим. и клин, фармакология. 2000. - №5. - С. 59-61.

73. Профилактическая иммунология / A.A. Михайленко, Г.А. Базанов, В.И. Покровский, В.И. Коненков. Москва-Тверь: ООО Триада, 2004 - 448 с.

74. Разработка рациональных методик идентификации лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов подземных органов. Сообщение 2.

75. Лекарственные растения, содержащие дубильные вещества / Г.И. Олешко, О.Л. Блинова, Л.Г. Печерская и др. // Фармация на современном этапе- проблемы и достижения: Науч. труды. М., 2000. - Т. 39, Ч. 2. - С. 244-249.

76. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae-Thymelaeaceae / Под ред. П.Д. Соколова. Л.: Наука, 1986. - С. 47-48.

77. Решетникова, A.B. Лечение растениями / A.B. Решетникова, Е.И. Семчинская Киев: МП «Феникс», 1993. - С. 253-254.

78. Роговой, А.Ф. Лечение острых гепатитов хреном / А.Ф. Роговой // Сов. медицина. 1949. - №4. - С. 27-28.

79. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Медицина, 2000. - 398 с.

80. Савчук, О. О некоторых свойствах хрена / О. Савчук // Природа. -1947.-№1.-С. 96-97.

81. Саратиков, A.C. Золотой корень / A.C. Саратиков. Томск: Изд-воТГУ, 1974.-156 с.

82. Сафонова, Г.М. Протективные эффекты растительных полифе-нольных соединений на иммунную систему при остром стрессе / Г.М. Сафонова, Ю.И. Шилов, А.Б. Перевозчиков // Докл. РАН. 2001. - Т. 378, №5. -С. 697-699.

83. Сбежнева, В.Г. Новые подходы к использованию лекарственных растений в лечении злокачественных новообразований / В.Г. Сбежнева, В.А. Югин, Ф.Н. Ромашов // Человек и лекарство: Тез. докл. II Рос. нац. конгр-М.: РЦ «Фармединфо», 1995.- С.244.

84. Семенова, М.Н. Влияние лекарственных препаратов из некоторых пищевых растений на содержание соляной кислоты в желудочном соке / М.Н. Семенова // Сборник трудов, посвящ. ХХ-летию фармац. факультета ТГМИ. Томск, 1962. - С. 154-162.

85. Сепиашвили, Р.И. Стратегия и тактика иммуномодулирующей терапии / Р.И. Сепиашвли // Russian Journal of immunology.- 2004. Vol. 9, suppl. 1. -C. 281.

86. Сиггиа, С. Количественный анализ по функциональным группам = Quantitative organic analysis via functional groups / С. Сиггиа, Дж. Г. Ханна; Пер. с англ. А.П. Сергеева. М.: Химия, 1983. - С. 525-533.

87. Смирнова, О.И. К изучению бактерицидных свойств сока хрена / О.И. Смирнова// Андижанский ГМИ: Сборник науч. трудов. Вып.1. - Ташкент: Медгиз УзССР, 1959. - С. 99-105.

88. Сосновая смола и мазь «Биопин»: влияние водорастворимых фракций на продукцию цитокинов нейтрофилами периферической крови / A.C. Симбирцев, В.Г. Конусова, Г.Ш. Мчедлидзе и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2002. - Т. 134, №8. - С.176-180.

89. Сосновая смола и мазь «Биопин»: влияние на систему неспецифической резистентности организма /A.C. Симбирцев, В.Г. Конусова, Г.Ш. Мчедлидзе и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 2002. — Т.133, №2. С.168-171.

90. Сосновая смола и мазь «Биопин»: влияние на системы Т- и В-клеточного иммунитета / A.C. Симбирцев, В.Г. Конусова, Г.Ш. Мчедлидзе и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2002. - Т.133, №2. - С.172-175.

91. Суслина, М.Л. Фармакологический анализ воспаления, вызываемого агаром и диметилсульфоксидом, и участие вегетативной нервной системы в механизме флоготропного действия амидопирина: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Пермь, 1975. - 16 с.

92. Токин, Б.П. Целебные яды растений: Повесть о фитонцидах / Б.П. Токин. Изд-е 3-е, исправл. и дополн. - JL: Изд-во Ленингр. ун-та, 1980. - 280 е., ил.

93. Тотолян, A.A. Клетки иммунной системы / A.A. Тотолян, И.С. Фрейдлин. T.I; Т.2. - СПб.: Наука, 2000. - 231 с.

94. Тотолян, A.A. Клетки иммунной системы / A.A. Тотолян, И.С. Фрейдлин. Т.З; Т.4; Т.5. - СПб.: Наука, 2001. - 390 с.

95. Турищев, С.Н. Изучение влияния тимозина на заживление плоскостных ран у крыс / С.Н. Турищев // Фармация. 1996. - №4. - С. 42-43.

96. Турищев, С.Н. Изучение кукумарозида на модели регенерации / С.Н. Турищев // Фармация. 1996. - №6. - С. 49-50.

97. Турищев, С.Н. Фитосредства при острых респираторных инфекциях / С.Н. Турищев // Фармация. 2002. - №5. - С. 47-48.

98. Турищев, С.Н. Фитотерапия заболеваний гепатибилиарной системы / С.Н. Турищев // Фармация. 2003. - №1. - С. 47-48.

99. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение / А.Д. Турова. Изд. 2-е. - М.:Медицина, 1974. - 424 с.

100. Фармакологические и терапевтические свойства npenapáTOB солодки (обзор) / Г.В. Оболенцева, В.И. Литвиненко, A.C. Амосов и др. // Хим.-фармац. журн.- 1999. Т.ЗЗ, №8. - С. 24-31.

101. Фиалков, Я.А. Методы исследования лекарственных веществ / Я.А. Фиалков М.: Медгиз, 1946. - С. 240-258.

102. Филатова, А.Г. Влияние летучих фитонцидов некоторых растений на млекопитающих / А.Г. Филатова // Фитонциды: их роль в природе и значение для медицины М.: Изд-во АМН СССР, 1952. - С. 307-321.

103. Фитохимический состав представителей рода эхинацея (Echinacea Moench.) и его фармакологические свойства (обзор) / В.Н. Самородов, С.В. Поспелов, Г.Ф. Моисеева и др. // Хим.-фармац. журн.- 1996.-Т.30, №4.-С. 32-37.

104. Фортунатов, М.Н. О влиянии фитонцидов некоторых высших растений на моторно-кардиальные рефлексы / М.Н. Фортунатов // Фитонциды: экспериментальные исследования, вопросы теории и практики. — Киев: Наукова думка, 1975. С. 280-281.

105. ФС 42-3085-94 Горчичник-пакет = Sinapismus-saccinus.- Взамен ВФС 42-1699-87; Введ. 27.12.1994 по 31.12.1999 г. 6 с.

106. ФС 42-3086-94 Горчичник-пакет для детей = Sinapismus saccinus pro infantibus. Взамен ВФС 42-1912-89; Введ. 27.12.1994 по 31.12.1999 г. - 6 с.

107. Фурса, Н.С. Биологически активные вещества растений семейства крестоцветные / Н.С. Фурса, В.И. Литвиненко, А.А. Мещеряков // Изв. АН СССР. Сер. биол. наук. - 1971. - №5. - С. 9-15.

108. Фурса, Н.С. Флавоноиды Armoracia rusticana Gaertn., Mey. et Scherb. и A. Sisymbrioides (DG.) Gajand. / Н.С. Фурса // Раст. ресурсы. 1983. - №1. - С. 74-78.

109. Хаитов, P.M. Иммунология: Учебник / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 432 с.

110. Хаитов, P.M. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 1996. -№6.-С. 4-9.

111. Хаитов, P.M. Основные принципы иммуномодулирующей терапии / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Аллергия, астма и клин, иммунология. -2000.-№1.-С. 44-45.

112. Хаитов, P.M. Экологическая иммунология / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин, Х.И. Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 1995. - 219 с.

113. Хефтман, Э. Биохимия стероидов / Э. Хефтман. М.: Мир, 1972.175 с.

114. Химический анализ лекарственных растений: Учеб. пособие для фармац. вузов / Е.Я. Ладыгина, JI.H. Сафронович, В.Э. Оряшенкова и др.; Под ред. Н.И. Гринкевич, JI.H. Сафронович. М.: Высш. шк., 1983. - 176 с.

115. Хирургия: Пер. с англ. доп. / Гл. ред. Ю.М. Лопухин, B.C. Савельев М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1997. - С. 71-77.

116. Хроматография на бумаге / Под ред. И.М. Хайса и К. Мацека. -М.: Иностр. лит., 1962. 851 с.

117. Хроматография. Практическое приложение метода: Пер. с англ. — М.: Мир, 1986.-329 с.

118. Чукичев, Е.М. О влиянии водорастворимых витаминов на воспаление и фагоцитоз: Дис. . докт. мед. наук / Е.М. Чукичев; Перм. гос. мед. ин-т- Пермь, 1968. Т.1. - 459 е.: ил.

119. Шемякин, М.М. Химия антибиотических веществ / М.М. Шемякин, A.C. Хохлов.- Изд-е 2-е М.-Л.: Гос. науч.- техн. изд-во хим. лит-ры, 1953.-С. 37-38.

120. Экология и иммунитет- патофизиологические аспекты / В.А. Че-решенев, H.H. Кеворков, Б.А. Бахметьев и др. // 2-й Рос. симпоз. по патофизиологии с междунар. участием. М., 2000. - С. 158.

121. Экспериментальное изучение иммунотропной активности фармакологических препаратов / Сост. P.M. Хаитов, И.С. Гущин, Б.В. Пинегин,

122. А.И. Зебрев; Рец.: Р.В. Петров, A.M. Егоров. // Ведомости Фармакол. ком. -1999. №1. — С.31- 36.

123. Экстракт пихты сибирской «Абисиб»- эффективное фитотера-певтическое средство / Н.Я. Костеша, А.И. Абдулов, А.Я. Самуйленко и др. // Практ. фитотерапия. 2000. - №3. - С. 33-35.

124. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учеб. пособие / Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. СПб.: Спец. лит-ра, 2000. - С. 294.

125. Эстифан- первый отечественный препарат иммуностимулирующего действия из эхинацеи / Г.С. Сакович, В.К. Колхир, Е.Ю. Енютина и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. II Рос. нац. конгр М.: РЦ «Фармединфо», 1995.- С.143.

126. Эфтидерм и лекарственная форма на его основе. Контроль качества и стандартизация / Е.П. Герникова, Т.Н. Боковикова, O.A. Ваганова и др. // Фармация. 1998. - №6. - С. 25-27.

127. Юшков, В.В. Иммунокорректоры / В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, A.B. Казьянин. Екатеринбург: ООО «ИРА УТК», 2002. - 255 с.

128. Юшков, В.В. Химия и экология Зскэлементов / В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, В.В. Стрелков. Екатеринбург: УрО РАН, 2004- 171 с.

129. Юшкова, Т.А. Методология поиска веществ, обладающих хи-миотерапевтической активностью по отношению вируса клещевого энцефалита / Т.А. Юшкова // Мат. докл. 50-й науч.-практ. конф. Пермского фармац. ин-та. Пермь, 1994. - С. 47.

130. Юшкова, Т.А. Реакция центральной нервной и иммунной систем на антиген вируса клещевого энцефалита / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков // Актуальные проблемы теоретической и прикладной иммунологии. — Пермь, 1994.-С. 87-90.

131. Дейнека, С.Е. Цитопротекторний ефект ехшаце'Г пурпуровоУ сто-совно токсичного впливу свинцю та кадмию / С.Е. Дейнека // Соврем, проблемы токсикологии. 2000. - №1. - С. 47-49.

132. Починок, Т.В. Використання рослинного ¡муномодулятора з омели 6moi "Iscador R М" у реабшттаци дггей, яю часто хвор1ють на rocTpi pecnipaTopHi захворювання / T.B. Починок // Лжи. 1999. - №3-4. - С. 33-37.

133. Чекман, I. Кгишко-фармаколопчш властивост1 ехшаце'1 / I. Чек-ман // Лки УкраТни. 2001. - №3. - С. 25-26.

134. Чулак, Л.Д. Вплив екстракту exmatiei пурпурно! на показники стану тканини пародонта и 1мунного статусу p0T0B0i порожнини у жшок пщ час BariTHocTi / Л.Д. Чулак, Ю.Г. Романова // Одеськ. мед. журн. 2000. - №1. - С. 43-46.

135. Alba, R.M.S. Etnopharmacology and the sustainable development of new plant-derived drugs / R.M.S. Alba, D. S. Nunes // Cienc. e cult. 1997. - Vol. 49, N. 5-6. - P. 402-408.

136. Aqueous ethanolic extract of St. John's wort (Hypericum perforatum L.) induces growth inhibition and apoptosis in human malignant cells in vitro / K. Hostanska, J. Reichling, S. Bommer et al. // die Pharmazie. 2002. - Vol. 57, N. 5.-P. 323-331.

137. Bauer, R. Echinacea. Eine Arzneidroge auf dem Weg zum rationalen Phytotherapeutikum / R. Bauer // Deutche Apotheker Zeitung. 1994. - N.2. - P. 18-27.

138. Bohn, B. Flow-cytometric studies with Eleutherococcus senticosus extract as an immunostimulatory agent / B. Bohn, C.T. Nebe, C. Birr // Arzneimittel-Forschung (Drug Research).-1987.- Vol. 37 (II), N. 10. P. 1193-1196.

139. Boucaud-Maitre, Y. Cytotoxic and antitumoral activity of Calendula officinalis extracts / Y. Boucaud-Maitre, O. Algernon, J. Raynaud // die Pharmazie. 1988. - Vol. 43, N. 3. - P. 220-221.

140. Caffeoyl conjugates from Echinacea species: structures and biological activity / A. Cheminat, R. Zawatzky, H. Becker et al. // Phytochemistry.-1988. -Vol. 27, N.9.- P. 2787-2794.

141. Capek, A. Fytoncidy koreni / A. Capek- I. Sdeleni prum. potravin. -1955. Vol. 6, N.9. - P. 433-435.

142. Currier, N.I. Natural killer cells from aging mice treated with extracts from Echinacea purpurea are quantitatively and functionally rejuvenated / N.I. Currier, S.C. Miller // Exp. gerontol. 2000. - Vol. 35, N.5. - P. 627-639.

143. Deyama, T. Constituents and pharmacological effects of Eucommia and Siberian ginseng / T. Deyama, S. Nishibe, Y. Nakazawa // Acta Pharmacol. Sin. -2001. Vol. 22, N.12. - P. 1057-1070.

144. Echinacin enhances unspecific immune response in vitro: Vortr. Und Poster 15. Wiss. Tag. Osterr. Pharm. Ges., Innsbrock, 30. Sept. 1 Okt. 1999 /

145. H. Wolf, M. Sentfler, K.P. Odenthal et al. // Sei. pharm. 1999. - Vol. 67, N. 3. -P. 557.

146. Effect of Eleutherococcus senticosus on submaximal and maximal exercise performance / E.A. Dowling, D.R. Redondo, J.D. Branch et al. // Med. sei. sports exerc. 1996. - N. 28. - P. 482-489.

147. Gewinnung von immunologisch aktiven Polysacchariden aus Echinacea- Drogen und- Gewebekulturen / H. Wagner, H. Stupper, J. Puhlmann et al. // Z. Phytoterapie. 1989.- Bd. 10, N.2.- P. 35-38.

148. Hassan, R. Immunosupressiv und virostatisch wirksame Steroide aus Petunia hybrida / R. Hassan, P. Franke, A. May et al. // die Pharmazie. 1988. -Vol. 43, N. 11.-P. 801-802. '

149. Immunomodulating ability of galactoside-specific lectin standardized and depleted mistletoe extract / J. Beuth, B. Stoffel, H.L. Ko et al. // Arzneim.-Forach.- 1995.- Vol. 45, N.l 1.- P. 1240-1242.

150. Immunostimulatory effects of cycloartane-type triterpene glycosides from Astragalus species / E. Bedir, N. Pugh, I. Calis et al. // Biol, and pharm, bull. 2000. - Vol. 23, N.7. - P. 834-837.

151. Inhibitory effects of mast cell-mediated allergic reactions by cell cultured Siberian ginseng / H.J. Jeong, H.N. Koo, N.I. Myung et al. // Immunophar-macol. and immunotoxicol. 2001. - Vol. 23, N.l. - P. 107-117.

152. Jerne, K. Plague formation in agar by single antibody producing cells / K. Jerne, A. Nordin // Science. 1963. - Vol. 140, N. 3565. - P. 405-406.

153. Kim, J.Y. Panax ginseng as a potential immunomodulator: studies in mice / J.Y. Kim, D. Germolec, V.l. Luster // Immunopharmacol. and immunotoxicol. 1990. - Vol. 12, N. 2. - P. 257 - 276.

154. Kligelhoefer, S. Antirheumatic effect of IDS 23, a sitnging neetle leaf extract, on in vitro expression of T-helper cytokines / S. Kligelhoefer, B. Ober-tries, S. Quast // J. Rheumatol. 1999. - Vol. 26, N.l2. - P. 2517-2522.

155. Panax ginseng blocks morphine-induced thymic apoptosis by lowering plasma corticosterone level / K. Young-Ran, L. Shee-Yong, S. Boo-Ahn et al. // Gen. Pharmacol. 1999. - Vol. 32, N.6. - P. 647-652.

156. Pharmacological and therapeutic aspects of immunomodulators / W. Schmutzler, St.'Bent, A. Drager, Zwadlo-Klarvasser // Allergologie. 1989. - Vol. 12.-P. 198-203.

157. Probandenstudien zur Stimmulierung der Granulozyten- Phagozytose durch Echinacea- Extract haltige Praparate / K. Jurcic, D. Melchart, M. Holzmann et al.// Z. Phytoterapie. -1989.- Bd. 10, N.2.- P. 67-70.

158. Proksch, A. Structural analysis of a 4-O-methylglucuronoaralinoxylan with immuno-stimulating activity from Echinacea purpurea / A. Ploksch, H. Wagner//Phytochemistry.- 1987.- Vol. 26, N. 7. P. 1989-1993.

159. Sicha, J. Obsahove latky rodu Echinacea potencialni antivirotica a immunostimulancia / J. Sicha, J. Hubik, J. Dusek // Ces. farm.- 1989. -Vol.38, N. 9 P. 424-428.

160. Steinmann, G.G. Immunopharmacological in vitro effects of Eleutherococcus senticosus extracts / G.G. Steinmann, A. Esperester, P. Joller // Arzneim.-Forsch. 2001. - Vol. 51, N. 1. - P. 76- 83.

161. Structurally related immunological effects of triterpenoid saponins / M. Bernhardt, C. Sturm, K.H. Shaker et al. // die Pharmazie. 2001. - Vol. 56, N. 9.-P. 741-743.

162. Study of immunotropic and allergenic properties of pinus sylvestris (L.) and Picea abies (L.) Karst, coniferous needle thick extract / J. Seleznovs, L. Poluektova, J. Rubens // Bait. J. lab. anim. Sei. 2001. - Vol. 11, N.3. - P. 168176.

163. Taraxacum officinale inhibits tumor necrosis factor-a production from rat astrocytes / H.M. Kim, T.Y. Shin, H.J. Chae et al. // Immunopharmacol. and immunotoxicol. 2000. - Vol. 22, N.3. - P. 519-530.

164. Thionins from Viscum album L.: Influence of the viscotoxins on the activation of granulocytes / G. M. Stein, G. Schaller, U. Pfuller et al. // Anticancer res. 1999. - Vol. 19, N. 2a. - P. 1037-1042.

165. Zhou, D. L. Peripheral blood mononuclear cell production of TNF-a in response to North American ginseng stimulation / D. L. Zhou, D. D. Kitts // Can. J. physiol. and Pharmacol. -2002. Vol.80, N. 10. - P. 1030-1033.

166. Zurdinov, A.Z. About a new phytopreparation with immunomodulat-ing activity / A.Z. Zurdinov, E.V. Shreiner // Book abstr. int. conf. "Med. raw mater. and phytoprep. med. and agr.", Karaganda, Sept. 29-1 Oct., 1999. Karaganda, 1999.-P. 151.