Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Влияние кормового-белкового продукта, полученного из виноградных выжимок на иммунобиологическую реактивность ягнят, вакцинированных против сальмонеллеза

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА

азербайджанской республики

АЗЕРБАЙДЖАНСКАЯ ОРДЕНА «ЗНАК ПОЧЕТА» СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени С. АГАМАЛ ИОГЛЫ

На правах рукописи

V ? Г"? Г"-' удк 619Ж:576.8.095.1.616.981.49

МАНУЧЕИР КОРКАН ДАРГАЛУ (Иранская Исламская Республика)

ВЛИЯНИЕ КОРМОВОГО-БЕЛКОВОГО ПРОДУКТА, ПОЛУЧЕННОГО ИЗ ВИНОГРАДНЫХ ВЫЖИМОК НА ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКУЮ РЕАКТИВНОСТЬ ЯГНЯТ, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

Специальность 16.00.03.—Микробиология, вирусология, эпизоотология, микология иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученей степени кандидата биологических наук

ГЯНДЖА - 1998

Работа выполнена на кафедре эпизоотологии и микробио-лс.¡.и Азербайджанской ордена „Знак Почета» сельскохозяйственной академии имени С. Агамалиоглы и в Иранской Исламской Республике (Университет Урмии).

Научный руководитель:

—Заслуженный деятель науки Азербайджана, доктор ветеринарных наук, профессор, действительный член Академии Апрарного образования и науки России, академик Кадымов Р. А.

—Доктор Урм'ийского университета Меджид нов Чаван (Иранская Исламская Республика)

Официальные оппоненты: —Доктор ветеринарных наук Азимов И. М, —Доктор с/х наук, профессор Абдуллаев Г. А.

Ведущее предприятие—Азербайджанский научно-исследовательский институт животноводства (АЗНИИЖ).

Защита состоится <23

в час. На заседании Специализированного совета

Н. 120.43.01 по присуждению ученой степени кандидата биологических наук в Азербайджанской ордена «Знак Почета» сельскохозяйственной академии имени С. Агамалиоглы (Аз. СХА).

Адрес: Азербайджанская республика, г. Гянджа, Аз. СХА Специализированный совет Н. 120.43.01.

Отзывы и замечания по автореферату в двух экземплярах, заверенные печатью просим направлять по вышеуказанному адресу.

Автореферат разослан 26.02.I9tb г.

Ученый секретарь Специализированного совета, кандидат технических нау

старший научный сотрудник

'АББАСрВ 3- М.

0Б1ЦЛЯ ХАРАКТЕРНА III KA РАЬОТЫ.

• Актуальность темы. В настоя iee время для повышения продуктивности, роста и развития животных, а также для усиления защитных сил организма, в частности в повышении его иммунобиологической реактивности, широко применяются белковые, гормональные и другие добавки в корм

Исследованиями В.П Филатова, ЕС. Шулюмова, И Е. Мозгова, В Н Ежова, Р.А Кадымова, Д А. Гасанова н др. Доказано, что применение белковых добанок, в частности биостимуляторов в корм животным, в сочетании с биопрепаратами усиливает напряженность иммунитета при той или иной инфекции.

Получение дешевых, белковых, кормовых продуктов являе.ся актуальной проблемой биолопг'сской науки.

Для решения этой задачи необходим поиск нетрадиционных методов переработки вторичных ресурсов, позволяющих получить новые продукты с высокой рентабельностью.

Одним из таких веществ является кормовой белковый продукт; получение которого нч отходов люцернь' соевых культур, свёклы, кукурузы уже налажено.

В области по переработке винограда, источником получения кормово - белковь^ продуктов могут служить впнофалные выжимки, составляющие около 15% массы поступающего на переработку сырья. Достоинством этого сырья явпяется его относительная дешевизна возможность получения кормового белкового продукта (КБП) с содержанием истинного протеина не менее 15%.

Актуальным является изучение применения КБГ1 с целыо стимуляции формирования иммунитета у ягнят, вакцинированных против сальмог ;ллеза

Цель и задачи исследований Целью наших и -следованчй был: разработка и изучение технологии получения ири помощ" бази,,нальных грибов обогащенного белком кормового продукта из пнно1рлдиы.< выжимок; разработка методов применения кордового белкового продукта с ц.лыо усил.нил роста и ра,вития ягнят, а также стимуляции формирования иммунитета при вакцинации ягнят против сальмонеллеза.

Научная новизна cocí опт и том, что в результате проводимых исследований впервь.г доказано, что использование специально отобранных штаммов базидиальных грибов в сочетании с экспериментально оптнммзпронанаммн режимами твердофазного культивирования (ТФК), сопровождается биоконверсисй около 50%

полисахаридов и 12% лигнина, содержащиеся в виноградных выжимках с увеличением содержания истинного белка в КСП в 3-5 раз.

Применение кормового белкового продукта в корм ягнятам в сочетании с вакциной против сальмонелле«, стимулирует иммунобиологическую реактивность организма ягнят и создав! напряженный иммунитет.

Применение этого продукта в корм ягнятам при специфической профилактике против сальмонеллеза даёт возможность не только усилить напряженность иммунитета, но и ускорить рост и развитие ягнят.

Практическая ценность. Практическое значение имеет разработанный на основе выполненных исследований экспериментальный проект по приготовлению кормового белькового продукта. Разработан режим получения кармового белкового продукта с высоким содержанием белка и полисахаридов и! виноградных выжимок.

Предлагаем применять кормовой белковый продукт с целью стимуляции роста и развития ягнят, повышения их привесов, а также усиления иммунобиологической реактивности организма.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были доложены, обсунчДены и одобрены на ежегодных научных конференциях профессорско - преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов по итогам научно-исследовательских работ Аз. СХА (1994-1997 гг.), па Межгосударственной конференции учёных Закавказья в. Г. Тбилиси (1990), на конференциях и Исламской Республике Иран.

Публикация По материалам диссертации опубликовано научных работ.

I Структура и объем диссертации Основной текст диссертации

изложен на _ страницах машинописного текста, включает

рисунка и Мтаблиц,.

Список использованной литературы содержит _

источников, имеются приложения

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Исследования были проведены в 1994-1997 гг. на кафедре эпизоотологии, микробиологии и вирусологии Азербайджанской сельскохозяйственной академии, в учебно-опытном хозяйстве Аз. СХА "Ковлярское" и в Исламской Республике Иран (Университет Урмии).

Объектами исследований явились' 1) высшие базидиапьмые грибы, принадлежащие к иорядкам-

2) виноградная выжимка, полученная после переработки винограда методов твердофазного культнвированил и высуыенная на а1 регатах АВМ-0,65.

Непосредственно перед проиедением опытов выжимку экстрагировали (гидромодуль 2.0 температура 50"с, 1 час в присутствии ферментного препарата - целлофостидина (ТОХ). Выделенный препарат как п ею нотификации (после переработки, либо выращт вания базидиальных грибов), подпер! али кислотному шаролизу с целью последующею анализа связанных форм углеводов, аминокислот, фенольных веществ и лип^ша (В Н. 1;жов, 19"7; И.П. Садыгов, 1982)

Определение липидов осуществляли по методу Пляй-Дайера, определение сырого протеина по стандарту ГОС1 123498, 4-84; определение пинипа ;>о методу Класс < ча, оп| ед. ленке витаминов-в соответствии' с "Фармокопейчым листом", представленным Киевским витаминным заводом' определение вольных элементов-П' еле сжигания навесгп пробы по станд рту ИСО 2171,71 (А).

Культивирование грибов на выжимке осуществляли твердофазным способом при высоте насыпного слоя 2,5-16- см, гидромодуля 1 0-4,0 рН 2 0-10 0 и температуре 22-23° с в течение 714 суток.

В опытах предусматривалось ! ведение в среду культивирования азотистых и фосфорных добавок: карбамида (до 5%) и диаммонофосфата (до 5%).

Для осуществления процесса культивирования выжимку предварительно стерилизовали (1,5 атм., 40 минут), после чего осуществ 'яли стерильный засев посевного мицелия базидиомицетов, вьрапенного на зерне пли выжимке (доза-5%). Процесс ТФК осуществляли в стерильных условиях.

Опыты по установлению оптимальных значеннй рН, температуры ТФК, а также выявлению эффективных штаммов для биоконверсии осуществляли в чашках Петри на измельченной авизированной выжимке, результаты оценивали по приросту мицелия в мм за сутки.

Материалом для изучения влияния кормового белкового продукта па рост и развитие ягнят, а также стимуляции иммунобиологической реактивности овец, ¡силения напряженности иммунитета у ягнят, вакпиннровашн 1\ против сальмонсллеча. слу кили клинически здоровые я"!яп 4.5 месячного нофаста ■юроды \,епи.-мер,г! 1С

С цп пыо изучения кормового белкового продукта на естественную резистентность п формирование иммунитета у ягнят, вакцинированных против сальчонеллеза, применяли поливалентную формол -тиомерсаповую вакцину, согласно наставлению.

Кормовой белковый продукт ягнята получали в течении 60-тн дней (утрем и вечером) с основным кормом в количестве 0,5 кг на одну голову.

Критериями оценки влияния кормового белкового продукта на рост, развитие и привесы ягнят, а также на иммунобиологические реакции организма служили клиннко-фшиологичсскне ( температура, тела, частота пульса и дыхания) и иммунологические показатели

Ге; атологич&.'.ие исследования В крови определяли содержание гемоглобина, число эритроцитов и лейкоцитов, изучали лейкоцитарную формулу и тд. Все исследования проводили по общепринятым методикам:

-количество эритроцитов и лейкоцитов определяли в счётной камере Г'оряева, содержание гемоглобина - гемометром Салн, лейкоцитарную формулу выводили по методике Кудрявцева А. А. (1953):

-уровень общего белка определяли на рефрактометре ИРФ-22 с пересчётом в г % по таблице Рейса, белковых фракции -па фото-электрокгпориметре марки ФЭМ-М-56 нефслометрическим методов;

-фагоцитарную активность определяли по опсонофагоцитарпой реакции методов Гостева B.C. (I960). Определение лизоцимной активности крови проводили с использованием тесг - культуры Micijcdcous iysodeicticus ; комплементарную активность сыворотки крови определяли согласно методике Лабпиской A.C. (1978).

- интенсивность накопления в крови нормальных агглютининов определяли постановкой реакции агглютинации, с использованием сальмонсллезных антител (5 млрд. Микробных ил в 1 мл ).

- степен1- напряженности иммунитета у ягнят проверяли методов экспериментального заражения подопытных животгых оттитрованной культурой Sal abortus ovis (штамм R-I15, выделенный из групоп Я1ЛЯТ в 1991 году), в дозе 2 DLm (IDLm- равен 5 млрд Микробных тел в 1 мл).

До начала опыта у ягнят исследовали кровь для установления средних показателей общего белка, белковых фракции, количества гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и выводили лейкоцитарную формулу).

Статистическую обработку результатов исследований проводили по В. С. Асатиани по таблице Стыоденса вычислением

средней арифметической величины и её статистической ошибки (м±ш).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСС.И-ЛОИДППП

I. Скрининг штаммов базндпомниегов для бноконвсрсии выжимок.

Оптимизация Г1роцссса твердофазного культивирования (ТФ1С) высших базидномпцетов на виноградной выжимке проводилось в несколько этапов и включала скрининг штаммов высших бгпидиомицетк установление эффе; тинном высоты насыпного слоя, режимов увлажнения субстрата, необходимости внесс.шя дополнительного азотистого и фосфорного питания, выбор рП и температуры культивирования. Скрининг базндномицетов предлагай выбор штамма, обладающего максимальным набором ценных технологических характеристик:

1) способностью и эффективной биотрансформации виноградной выжимки, определяемо/1 по индексу микогепного ксилоза;

2) высокой скоростью биоконг.ерсии, измеряемой по динамике роста па агарпчкровашши выжимке;

1) высоким накоплением белка и максимальным уровнем незаменимых аминокислот;

Из всех исследованных штаммов можно чётко выделить культуры, способные I. более энергично!, трансформации сырья, и штаммы, активно продуцирующие белок т лнглоцеллюлозного материала выжимок (ГчшаИа Тгоцм штаммы 96; Р1ешо(1!5 оМгсаЦгс штаммы 12, 14, Оаес1а' а уиегсша ш гаммы 47 и др.).

Анализ полученных материалов показывает, что базкдиальные грибы при росте на проэкстратнрованных выжнмкгх вто2н или иной мере используют как источник углерода лсгкогндролизусмые полисачариды (от минимума до 41 %), целлюлозу (от минимума до 60 %), а т.1кже что наиболее важно лигнин (до 12 %1 В среднем процесс культивирования базидномпцетов на выжимке характеризуется потерей легкогидролиэуемой фракции полисахаридов на 14 %, трудной: фолизуемой фракции па 44,? % лигн::на на 6,9 %

По накоплению .шпндов разница между штаммами была менее ощутимой и в целом содержание лшицпв после бноконеверсии увеличивалось в лучшем случае от 3 (исходная выжимка) до 5,1%.

Температурный оптимум процесса в экспериментальш ix условиях позволил установить, что в целом скорость роста базидиомицетов на выжимке является видовой характеристикой штамма, Вид coriolns характеризуется высокой скоростью pocTi, так же как и вид Fimalia. Вид Pleura us отличается средней скоростью роста, а вид Daedalia - низшим значением этот и показате 1я

Анализируя все три показателя, определяемые при скрининге, можно заключить, что максимальному накоплению белка, низкому индексу ксилоза и высокой скорости роста в условиях культивирования на выжимке соответствуют штаммы coriolus hirsutiis (штамм 20) ii Funalia truyii ( штаммы 96 и 0799).

Анализ влияния температуры на процесс кучьтивирования базидиомицетов показал, что скорость (.оста исследуемых штаммов была максимальной в диапазоне температур 24-30"с. При 33" с скорость pocia всех штаммов существенно снижалось Исключением оказался штамм Phanerocha.'tc chrysosporium (штамм 0754) который характеризовался двукратным увеличением скорости роста при 30 0 с. pH-оптимум процесса в опьт.ыч условиях показал, что базидиомицеты растут на вини.раднои выжимке и широком диапазоне pH -от 2 до 10. Максимальная скорость роста о i мечена при pH 8 5 Бтизкие значения этого показателя получены в диапозонс pH 6-9,5.

Существенным фактором культ широг.ання грибов является влажность субтрата Исс едов^ния показали, что базидиомицеты хорошо растут и диапозоне п> и омодуля влажности субстрата от 1,0 до 3,0. Эффективность биокл (версии полисахаридов виноградной выжимки при увеличении гидромодуля повышается, остальные показатели при кульчтнрованин изменяются иезначшелыю. Содержание сырого протеича в продукте биокониерсии возрастает в среднем в 1,6 раза

Исследованиями влияния азотиешх и фосфорных добавок (ДАФ) и карбамид) позволило установить что их внесение в субстрат в дозе до 5 '/о повышает эффективность деградации полисахаридов и увеличивает содержание белка в порученном кормовом продукте но сравнению с контролем (без добавок ) в 1.5 раза.

Важным фактором оптимизации ТФК является определение высоты насыпного слоя. В этой связи были проведены опыты, предусматривающие изменения насыпной массы выжимок и объема воздуха о камере выращивания. Наименьшая конверсия субстрат наблюдается при максимальной высоте слоя выжимка (2,5см) и наибольшей воздушной камере. В этом случае была зафиксирована

незначительная деструкция лигнина и низкий прирост белка в биомассе

В пределах 3-х последующих вариантов (насыпной слой 4-7 см) показатели, характеризующие глубину биокопверсин,' были достаточно высокими и концентрация белка в биомассе (выжимка и мицелий) составила около 14 % При высоте слоя 8,-5 см наблюдалось небольшое снижение эффективности биокопверсин. Дальнейшее увеличение высоты насыпного слоя (до 16 см) приводило к более выраженному снижению степени биотрансформацин и ослаблению синтеза белка

Изучение влияния размера частиц субстрата на эффективность биоконверсии позволило установить оптимальный размер частиц выжимки в пределах 7-10 мм. В случае использования измельченной кормовой муки был отмен лишь поверхностный прирост гриба.

Следующий этап экспериментальных исследований был связан с оптимизацией режимов предварительной обработки субстрата перед культивированием. Необходимость проведения подобных исследований связана с особенностями состава виноградной выжимки представляющей собой полисубстрат сложного старения Использование предобработки выжимок горячей водой (50-60 °с) серной кислотой и едким натром, ч также ферменным препаратом целтафостндином приводило к определенному уменьшению концентрации в выжимке полисахаридов и лигнинов (исходное содержание 24,4 и 52,5% соответственно). Наиболее ощутимая деструкция лигноцеллголозы отмечалась при воздействии 5%-ным едюы натром, вследствие использования которого концентрация лигнина в продуете падала вдвое. Глубина деструкции клеточных стенок выжимки не коррелирует однако с эффективностью их последующей биотрансформациен грибами. Так, о варианте с едким натром из-за чрезмерного измельчения исходного материала при последующем твердофазном культивировании наблюдался лишь поверхностный рост культуры (на глубину не более 0,5 см) Наиболее эффективное использование источников углерода, выражающееся в повышении скорости роста грибов было отмечено для варианта с целлофостидином ОХ.

Таким образом, экспериментально обоснованный оптимальный процесс ТФК штаммов базидномнцетов па пииоградгой выжимке заключается в поддержании температурного режима в диапазоне 2530 0 с, рН 6-9,5 при гидромодуле влажности субстрата 1,0-3,0 и высоте его насыпного слоя не более 10 см, внесении дополнительного азотистого питания в виде. 5% ДАФ или карбамида

Для осуществления процесса впервые отобран и рекомендован для дэпьнейшего использогшия штамм РипаНа ггоцп ИБК-96.

2. Технологическая схема получения кормового белкового продукта (КБП) и результаты её испытания

По результатам лабораторных опытов и производственных испытаний в у .е'но-опытном хозяйстве разработан проект опытно-промышленной линии для получения кормового продукта из виноградной выжимки.

Влажная свежеотделенпая выжимка подвергается предобработке 0,01 %- ным целлофоетидином ОХ (50°%, 1 час), отделению семян и высушиванию на агрегате АФМ, после чего затеривается в крафт-мешки и хранится до процесса ТФК. Непосредственно перед его осуществлением высушенная выжимка загружается в бункер БМ-2, где замачивается расчётным количеством воды, содержащей требуемые концентрации ДАФ или карбамида. Выжимка по транспортеру поступает для загрузки в корзины автоклава Бг,-1*АВ-/1, электротельфером корзины переносятся в автоклав. После автоклавирования стерильный субстрат перегружается в термосмеситель КС-2, где происходит засев субстрата мицелием. Инокулированная выжимка рассыпается слоем 5-10 см па поддоны, котооые ставятся на тележку и транспортируются в .нкубатор ИУПФ-45. В инкубаторе создаются оптимальные условия для культивирования мицелия базпдиальных грибов: температура 25-28° с гидромодуль влажности 1,0-3,0, время культивирования 10—14 суток. Выгрузка кормового продукта производится после 'полного зарастания субстрата. Влажный кормовой продукт высушивается с помощью калорифера и затаривается о мешки

3. Изучение влняни.. кормового белкового продукта (КБП), применимого в сочетании с вакциной на Нормирование иммунитета против сальмонеллеза

Для изучения этого вопроса мы поставили опыт на 25 головах ягнят по 5 голов в каждой группе. После установления статуса ягнята были разделены на следующие группы

ягнятам первой группы вакцина против сальмонеллеза вводилась после 90-дневного вскармливания им кормового белкового продукта;

-ягнята второй группы вакцинироватись против сальмонеллеза после 60-ти дневного вскармливания им кормового белкового. продукта;

-ягнята третьей группы вакцинировались против сальмонеллеза без вскармливания им кормового белкового продукта;

-ягнята четвертой группы получали кормовой белковый продукт, но не вакцинировались;

-ягнята пятой труппы служили контролем.

Ягнята вакцинировались поливалентной формол-тиомерсалопой вакциной против сальмонеллеза (серия 72, контроль 72 1995 г)о дозах согласно наставлению по их применению.

Кормовой белковый продукт был применен из расчёта 0,5 кг на голову (согласно предварительным разработанным дозам) дополнительно к традиционным кормам , согласно зоотехническим нормативам.

При изучении морфологической картины кропи было установлено, что при применении кормового белкового продукта а первой группе у ягнят отмечается увеличение количества лейкоцитов, которое на 5-и день было равно 9,6 ± 0,11 тыс./мм1 при исходном 6.1 ± 0,15 тыс./мм3 Количество лимфоцитов было равно 59,0 ± 0,11% при исходном 50,5 ± 0,35%. В дальнейшей количества лейкоцитов и лимфоцитов, снижаясь, приближаются к исходным величинам к 90-му дшо исследования.

Во второй группе, где кормовой белковый прбдукг ягнятам давался в течение 60-ти дней, количества лейкоцитов и лимфошлов резко увеличиваются с 10-го дня. Так, количество лейкоцитов достигает 8,1 ± 0,50 тыс./мм3 при исходном 7,1 ± 0,68 тыс./мм3, а количество лимфоцитов увеличивается до 57,0 ± 0,10% при исходном 54,0+0,35%.

В группе ягнят, где они вакцинировались без дачи им кормового белкового продукта (КБП), с пятого дня наблюдается увеличение количества лейкоцитов, которое держится до 10-го дня на высоком уровне - 9,2 ± 0,11 тыс./мм3 при исходном 65,0 ± 0,27 тыс./мм3. В последующие дни количество их несколько снижается, все же оставаясь выше исходного. В данной группе ягнят число лимфоцитов, увеличиваясь, держится на высоком уровне до 30-го дня и составляет 58,0 ± 0,10% при исходном- 50,3. ± 0,4

Остальные элементы крови изменяются с незначительными колебаниями

Изучая фагоцитарную активность лейкоцитов, было отмечено, что применение КБП при вакцинации ягнят способствует усилению активности фагоцит за, чем вакцгпзикл ягнят не получавших Ю>П.

При исследовании динамики изменения белка и белковых фракции в сыворотк: крови нами установлено, что у ягнят не во всех случаях можно получить четкое разделение между бета- и гамма-глобулинами В ходе наших исследовании было установлено, что в осенние месяцы эти фракции при электрофорезе разделяются лучше.

В наших исследованиях применение КБП в сочетании с вакциной при вакцинации и ревакцинации ягнят против сальмонеллеза способствует резкому увеличению бета+гамма-глобулинов пр1 соответствующем уменьшении количества альбуминов (гр\ ппа I и IIj

Та при применении КБП в сочетании с вакцинацией ягнят, способст ;ус увеличению количества бета+гамма-глобулинов, начиная с пттого дня после первой дозы вакцины - 44,7 ± 0,16 о при исходном 41,9 ± 0,72'.'i. Введение второй дозы вакцины в данной группе способствует увеличению количества бета+гамм i-глоб/лпнов, которые остаются до 90-го дня на высоком уровне.

Применение КБП с вакциной вызывало резкое увеличение колнчесг i гамма-глобулинов поел" введения вакцины, которое, увеличивая.i., достигло максимума к 30-му дню и равнялось 48,2 ± 0,05% при исходном 41,6 ± 0,97/о, поел- чего наблюдается постепенное снижение их Концентраци ' в сыворотке крови, которая ккоиц"60-г^н:1 составила 42,1 + 0,14°;..

При ревакцинации ягнят. полу;авн:их КБП через 5 дней, как правило, обнаруживается резкая актигизация фагоцитоза, показатель которого доходит до максимально" величины к 30-му дшо после вакцг-нацчи и остаётся на высоком уровне до 90-го дня исследования

В сыворотке кр jBe ягнчт, вакцинированных двукратно, но не получавших КБП, к чщентрация бета+гамма глобулинов увеличивается, доходит до максимальной величины к 10-му дшо после второй вакцинации - 46,7 ± 0,28° > ерп исходном 4i.5±0,72% После 30-го дня наблюдается сник-мне концентрации бета+гамма-глобулино> в сыворотке крови, которая приходит к исходной вел мине к 9°-му дню исследования.

Сравнительное изучение напряженности 1гммунитета показало, что из J ягнят, вакцинированных после дачи им КБП при заражении 2 Diкультуры Sal. Abortus ovis выжили 4-ро ягнят, из 5 ти ягнят, вакцинированных без получеши ими КЕП. при заражении 2 2 DLm культур Sal Abortus ows выжило сего 2 ягненка Ягнята контрольной группы от 2 2 DL.m культуры Sal. Abortus ovis пали

Гс4улы.1ты опыта показали, чг > при двукратной вакцинации применение КБП в теченчи_60-90 дней способств ет стимуляуции

-г.

формирования иммунитета прошв и .ьмоиеллча, по сравнению с ягнятами, вакцинированными без ,.. клрмливпннл им кормового белкового прод\ кта.

Наибольшее усиление напряженности иммунтета достигается в группе ягнят, которых вскармлш али кормо! о-белковым продуктом и течение 1-0-90-то д.лй

Им\1\ .1обиоло1 ическая реактивное;ь > рганизма ягнят при вскармливании им • орм-ч ого белкоп I о продукта стимулпрчетея Об этом с видстельст! ует выч кий т тр ;и ! юттшнов в сыворотке крови я!нят, вакциннроваг <ых и рева; пикированных на фоне получения | ормового белково! о продукта

ВЫВОДЫ

1. Осуществлен,> сопоставнтелы.см ( иенка использонання для получении:! о рмового белкогою продую а (КЬП) различных отходов еч выраииваиия и переработки винограда; усыновлена .перспективность и принципиальная возможное щт, получения из виноградныл ныжимок обогащенного > елком кормового продукта

2. Приведен сьркнинг ипаммов |'<азн.ч1омнцц!оп по способности эффективно сваивтть выжимки как источник углеродного питания. По целому ряду показателем гак наиболее перспективный, ггкрвые отобран штамм (чшаГа (гс.^п, рекомендованный чля .ыннейшею использования после полных тс кс и кол г нческил испытаний.

3. В экспериментальных устогиях вперкые оптимизированы основные п ;раметры твердофазного !\льтинвиров;;чия башдиомипетов па выжимке' способ I режимы предобработки сырья (О.ОГ'о целлофоетиднн, 50'С, 1 час), степень его увлажнения (гпдромо.ту.'и. 1.0 - 3,0). вид и количество вводимых а отпетых пли азотнофосфатних добавок (?% карбамид или ДАФ), режиме' стерилизации питательной среды (15 атм., 2-3 часа), температура (2"-28°С) и длительность (7 10 сутСл) кулынвнривп; 1я, оптимальная высота с мл при поверхностном твердофазном культивировании (до 8 см)

4. Полученный кормовой белковый . продукт (КБП), применяемый в кормлении ягнят наряду с традиционными кормами в течении 60-90 дней, увеличивает привесы ягнят на 7-! 5%, а также ускоряет их рост н развитие.

5. Применение кормового белкового продукта в течение 90 дней с традиционными кормами, стимулирует иммунобиологическую реактивность ягняг.

6. Применение кормового белкового продукта в кормлении ягнят в течение 90 дней и вакцинация этих ягнят против сальмонеллеэа способствует возникновению более стойких - и лимфоцнтоза, сопровождающиеся увеличением количества гемоглобина и эритроцитов.

7. Кормовой белковой продукт, применяемый в течение 90 дней, у ягнят, вакцинированных против сальмонеллеза, способствует более активному фагоцитозу, чем вакцинация ягнят без вскармливания им КБП.

8. Вакцинация и ревакцинация ягняг против сальмонеллеза, получавших КБП, способствует интенсивному увеличению концентрации бста+гамма-глобулинов сыворотки крови.

9. Уровень агглютинирующих сальмонеллезных антител в сыроротке крови наиболее интенсивно увеличивается у ягнят, получавших КПП при вакцинации и ревакцинации против сальмонеллеза.

10. Ягнята на 90-й день после вакцинации в сочетании с вскармливанием им КБП оказались более устойчивыми к экспериментальному заражению их культурой возбудителья сальмонеллеза овец, чем ягнята, вакцинированные без получениня ими кормового белкового продукта.

11. Скармливание кормового белкового продукта ягнятам в сочетании с традиционными кормами способствует усилению защитных функций организма.

12. Разработанную аппаратурно-технологическую схему опытно. экспериментальной липни получения кормового белкового

продукта из виноградных выжимок необходимо широко внедрять в производство.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Ч.С.Суле]'манов, М.Х. Коркан Pipan Ислам ЧумЬурп]ртппдл узумчулук. //Азарба]'чан аграр елми №3-6, 1995, cah. 51-54

2. О.Ф.МеЬдхц'ева, М.Х.Коркан Ург.пцэда узумчулу]ун муаспр вази]]зти. //Азэрба^'чап аграр елми - Бакы, 1996, № 1-2, cah.94-95

3. М.Х.Коркан бар бармагларьшын будама узунлугундан асьг'ы олараг гызыл узум сортунун мэ1гсулдарлыгына вэ бэ'зи биоложи кастэричилэринэ тэ'сггри Биринчи Елми Багчылыг Конгреси (Иран-ТеЬраи), 1996

4. МХ.Коркан T'uiojiih jyKynflaii асылы олараг биданэ узум сортунун мэЬсулдарлыгыиа вэ бэ'зи биоложи костэричилэрина тэ'сири.

Биринчи Елми Багчылыг Конгреси (Иран-ТеЬран), 1996

5. Ф.Ь.Шэрифов, М.Х.Коркан. Бечэрилмэ усулларыньш дузкун сечилмаси вэ онун узумуи моКсулдарлыгына тэ'сири. //Сунбуллэ, Тепран шаЬ. 9-чу илин 85-чи №-си, cah. 58-01

G. Узум чечасиндэп jeM-зулал маддасшшн Ьазырлаима технилоклц'асы вэ го^унчулугда онун татбипшин aliaMiijjaTii,

Р.А.Гэднмов, М.Х.Коркан - Ираи Ислам Республнкасы Гарб Азэрба]чаиынын иикишаф Семинарында 19-21 Huja6p 1997 ил, cah. 21 (хуласа)

7. Мачид Нов Чаван, М.Х.Коркан - бар бармаглар7,шын будама усулундан асылы олараг (бнданэ, рпшбабл, гызыл узум) уч узум сортларьшын ма11сулддрлыгында вэ бэ'зи биоложп кестэричиларинэ тэ'сири Гэрби Азэрба]'чанын Иикишаф Семинарында, ypMiija ш. 1921 nojafip 1997, cali. 25 (хуласэ)

8. Р.А.Гэднмов, М.Х.Коркан Узум чечэсиндэп альшмыш jeM-зулал маЬсулунун салмополл]оза корэ nejcaiifl олуимуш пцунларын организмларишш иммунобположи реактивлгфшэ та'снри. //a3ap6ajTian аграр елми 1997, Бакы шэИари (чапда)

9. Р.Л.Кадымов, М.Х.Коркан Влияние кормового-белкового продукта, полученного из виноградной выжимки из иммунобиологическую реактивность ягняг. - Труды Грузин. Учсбно-исслед. Института, посвяшен. 75-лет. Института. - г. Тбилиси, 1997 с.76.

X У л л с э

Сон иллэр Ье]вандар 1ыг вэ хусуси ила гojyaчyлyrдa онларын вэ ннкишафынын, Ьамчшшн умУм]1

резистентлшфшин jYкcэлмэcинэ сабаб олан мухтэлиф мэншали бностимул]'аторларын тэтбигл ез актуаллыгы ила сэчи^элэнир.

Мухтэлиф к/т мэЬсулларынын е'малынын туллантыларындан ]уксэк зулал тэркибли маддэлэрин алынмасы бojYK эЬэми^'этэ ыаликдир. Узумун илкин е'малы техноломуасында элавэ мэЬсул кими узум чечэси элдэ едилир. Апарылан тадгигатлар натичэсиндэ муа^эн едилмишдир ки, узум чечэси днкэр к/т мэЬсуллары е'ыалы туллантыларындан учуз баша кэлир вэ таркибинда про!еин кпфарт гадардир.

Муасир доврдэ Ье]вандарлыгда зулал проблемшшн Ьелли учун ]ем мэЬсулларынын истеЬсалынын интенсив усулларынын ншлэннб Ьазырланмасы вэ тэтбиги тэдбнрлэри асас шзртлэрдэн бирндир. Бу чэЬэгдэн узум чечасншш базндомисет штаммлары ваштэсита барк фазалы ]етишднрплмэ шэраптиндэ биоконверс^'асы joлy ила элдэ едилан зулал^'ем мэЬсулунун п^унчулугда онларын бо] вэ инкишафынын ^уксэлдллмэсл вэ умумл резистеттну'лнин артырылмасы учун истифадэ олунмасы муасир доврун тэлэбиндэн ирали кэлир.

Апарылан тадгигатлар эсасында бу сэЬэда илк дафа муэ^эн едилмишдир ки, хусуси олараг сечллмпш базлдомисет штаммларынын експериментал олараг муэ]]эн едллмиш режими ила бэрк фазалы ]етишдирилмэсн заманы узум чечэсиндэн 50-э млгдарындан полисахаридлэрин во 12%-э гэдэр лигнпнин блоконвериу'асчы мушаЬлдэ едилир, альшыыш зулал-]ем маЬсулунда '?улал 2-5 дэфэ чохалыр.

Алынмыш ]'ени мэЬсул гидалалыгына вэ токсикли^шэ корэ пумэтлэидирилмиш вэ онун кутлавл шакилда истеЬсалы учун ЙеигоШз СЫгеаи^ ИБК - 226 штамы мэслэЬэт керулмушдур.

Муэ^эн олунмушдур ки, зулал^'ем мэЬсулунун гojyнчyлyгдa асас ]ег.1лэрлэ бирликдэ тэтбпг етдикдэ онларын бoj вэ инклшафына jaxшы тэ'сир костарир, умуми резптентлпрлш ¿уксэлдпр, салмонел.^'оза гаршы ие]'ванд заманы онларда иммунлтент кэркинлщшш артырыр.

Хусусилэ зулал^'ем мэЬсулунун г>сас ¿емлэрдэ бирликдэ 60-90 кун гузулара вердлкдэ онларда чэкн артымы 7-15г''с ¿уксэлир, бoj ва инкишафы сурэтланлр, иммуноблолояш реактнвлир! кучланир. Зулап-|ем мэЬсулунун кун

Ье]Банлара вернлмасн ила б ф.-цкдз салмонеллрза гаршы ваксннастца аплрдыгда онларда ле^о-в.~> лимфоситоза, ЬеыипоГпн в ) ( ритроситларнн халмасьша сзбаб олур, гаи серумумца \ вэ гамма - глобулин прин консентрас^асы ва агглуппшнл н'дпричи салмонелл]оз анппелларшшн тнтри ва иммунитетлн каркш1ли]и ]уксэлир. Елми-тадгнгат шило) •чм.н ннпчэ .ори 1995-1997-чи нллорда Азарба]чан Канд Тч ,))),<( <и ы Академи]асынын ел ми конфрансларыида, довлотларарчсы Загафгаш^а алимларинин конфрансында (Тбилиси ша1иэри 1996) ва Иран Ислам Республнкасъшда кечнрилдн конфрансда (1997) мэ'лумат вернллмпшдир.

Resume

Recently the application of different boostomulators to the improvement of general resistance as well as the growth and leight in cattlefreedong and especially in shepherding is distinguished for its urgency.

The substances of high protein composition which are receded from the wastes of processing of different agwcultural products is of high soguoficauce/ Jliisns of grapes are received as an additional product in the initoal procesting technology of rapes/ The result of researches anderway revealed that the hisks of grapes are cheaper than the wastes of processing of other agricultural products and contain enough protain/

In modem tome the measures of working ouf of intensive methods of fodders and their application for the solutoon of protown - problem incattlebreeding's one of the majoi conditions.

From this point of wiew 'lie application of protain-fodders received by booconwcrsion and basidomiset imt.eloon under substraf condition to the height and grouth and the increase of general resistance in sheepfieeding in he demand of modem time/

0.1 the basis of researches underway it was lewealed in this sphere for the first time that the substraf growth of specially selected besidoniset miceliony by the experimenlignins booco..wersion is obsewed in the hisus grapes, the protam increases 2-5 times in receivco protain - fodders.Unted for its nutritiousness, toxication and for its mass production the receiwed new product A.13.C. (MEK) 226 stamm micehon was recommended.

It had been defined that'' In using protein fodder together with tne main fodders'" Effect positivehy to their height and growth? Increases general resistance and immunity tension against salmonellyoza during vaccintion/

especially when giving protein fodder together with the main fodders to l.jnbs during 60-9,j days their weight increase rises 7-15%, height and growth accelerate, immunobiological reactive strengthens. In giving protein-fodder product to amminals during 30 days together with vaccinating against salmonellyoza causes to the increase of leyco and lymphori'Dza? Hemoglobin and erjtroceets rnd betta and gamma ii.creases the tension of globuleens concentiation and agglutinating salmanellyoz antistring ar.d immunity in blood serum'-..

The results of scientific-rescorch works were reporteJ during 199597 years in the scientific confrancc of .\zerbaijani Agri-cultural Academy/ in intcrgovenmental confrance of (tan) trans-Caucasian sientists (Tbilisy city 1996) and in the confrance held in Islamic Repabvlic of Iran (1997).

16