Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Туберкулез у животных, вызванный M. TUBERCULOSIS
российская академия смьскохозяйствшых наук
СИШРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ ИНСТИТУТ ЗШШНШШГАЯШОЙ НЕТЕИШАНШ СИБИРИ И ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА
Не правах рукошюн
ПИСАРВШЮ Клена Нкколавана
ТУБЕРКУЛЕЗ У ЮЮОТНЫХ, ВЫЗВАННЫЙ И.ТПВВЮПХОвХв
16.00,03 - ватвржнарная мккробяологяа, вжр/ссиогия, •шсаоотологжя, микология в иммунология
Автореферат
дксоартацки ка оококанжв ученой отшенж вавдвдата йиологичвокях наук
Новосибирск 1993
Работа выполнена в отделе по разработке мер борьбы о туберкулезом с.-х. животных Института екопериментальной ветеринарии Сибири в Дальнего Востока 00 РАОХН
Научные руководители: доктор ветеринарных наук,
профессор А.С.ДОНЧЕНКО
кандидат биологичеоких наук, старший научный сотрудник В.Н.ДОНЧЕНКО
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,
профессор П.Н.СМИРНОВ
кандидат биологичеоких наук, отарпшй научный сотрудник Л.М.ХОДУН
Ведущее учреждение - Всероссийский институт
екопериментальной впторинарии
Защита ооотоится " // " М'УОпЛ- 1992 г. /6*° ■
чаоов на заседании специализированного совета
Д.020.23.01 при Институте екопериментальной ветеринарии
Сибири и Дальнего Востока (633128, Новосибирская область, р.п. Краонообск, ИЭВСпДВ).
С диссертацией южно ознакомиться в ЦНСХБ СО РАОХН. Автореферат разослан - - 1992 г.
Ученый секретарь специализированного совета кандидат ветеринарных наук,
отарший научный сотрудник С.К.Дшюв
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
/Актуальность темы. Туберкулез являетоя антропозоонозным заболеванием и до настоящего времени остается серьезной научной и практической проблемой. Меняющаяся производственная сфера животноводства, изменения условий жизни и быта лццей, достижения науки - все это поровдает ноше вида и формы взаимосвязи туберкулеза человека и животных.
В литературе имеется достаточное количество работ, посвященных вопросам взаимосвязи туберкулеза лвдей и крупного рогатого окота (Я.А.Благодарный, 1980; И.Г.Урсов о соавт,, 1981; К.К.Курманбаев, 1982, 1987; Л.Н.Кузина, 1984; А.С.Дончеико о соавт., 1985, 1986, 1987; Е.И.Щуцкая, IS87; Г.М.Лисиченко, 1987; Е.М.Шщдлер, 1989; Е.Jeneon, 1979; 11.Kubin, Z.Heralt, 1984).
Неомотря иа это, все еще недостаточно изучена роль больных туберкулезом лвдей в передача u.Tuberculoaia животным (В.И.Ротов о соавт., 1981; В.Е.Цуревский, 1981; Д.Б.Балгуюшов, 1989; ж.Weber et al., 1988). По мнению одних авторов (В.А.Ку-вяев, 1970; В.В.Макаров, М.А.Сафин, 1972; Д.Д.Новак, 1977; Th.flehtieeser, 1969), туберкулез, вызванный и.tuberculosis, у крупного рогатого скота протекает легко, о быстрым освобождением организма от возбудителя. Другие же исследователи (К.И.Одаренно, 1964; В.И.Рвдала, 1965; А.Хабибов, 1980; В.И.Ротов о соавт., 1981; Э.Исманлов, 1985; B.Bchmittdiel, 1966) указывают на тяжелое течегше болезни у этого вида животных.
Особое значение проблема взаимосвязи туберкулеза человека и животных имеет для регионов, где отыечаотоя высокая заболеваемость не только крупного рогатого скота, но и сельского населения. В Западной Сибири в последний года наблвдается замедление темпов снижения основных эппдемиологичеоких показателей по туберкулезу (A.C.Тарасов, Т.А.Яковлава, 1987). Мевду тем степень эпизоотической опасности больного туберкулезом человека для крупного рогатого окота до настоящего времени остается неопределенной. Зто создает значительные трусости а проведении противотуберкулезных мэроярглтий как у ладей, так и среди стад крупного рогатого скота,сникая их эффективность.
Цель и задачи исследований. Целью исследований являлооь выяснение патогенной роли ы.*;иЪегои1оо1в для различных видов животных и их значение в эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота.
В связи о этим на разрешение были поставлены следующие задачи:
1. Провеоти сравнительную оценку биологического и биохимических методов идентификации м.1;иЪегси1оа1э, изолированных из биоматериала животных и человека.
2. Изучить в эксперименте патогенез туберкулеза на белых шшах, морских свинках, кроликах, курах, овцах, крупном рогатом скоте пря заражении различными дозами ы.гиЬегси1оа1а.
3. Выяснить эпизоотологическую роль ы.1;иЪегси1оа1а для стад крупного рогатого скота.
4. Разработать ы внедрить систему взаимной информации о случаях заболевания туберкулезом животных и людей в неблагополучных пунктах (очагах).
Научная новизна. Изучена патогенная роль ылиЪегси1оа1в на белых шшах, морских овинках, кроликах, курах, мелком и крупном рогатом скоте. Дана в сравнительном аспекте диагностическая ценность биологического и бактериологического методов идентифицирования указанного вида возбудителя, установлена зависимость величины заражающей дозы возбудителя в интерпретации показаний биопробы как диагностического теста. Установлен факт паразитирования и.гиЬегси1оа±в на крупном рогатом скоте в неблагополучных по туберкулезу пунктах Кемеровской и Новосибирской областей. Показана взаимосвязь туберкулеза человека и крупного рогатого скота, разработана схема взаимной информации о случаях заболевания туберкулезом человека и шгшотных мевду ме-дицинокой и ветеринарной службами.
Практическая ценность работы. Предложена система профилактики заражения туберкулезом человека и животных в виде методических рекомендаций "О введении взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных" (утвервдены НТС УСХ и отделом здравоохранения Новосибирского облисполкома, 1985).
Материалы исследования включены в рекомендации зонального совещания "Организация противотуберкулезных мероприятий на эпи-зоотичаоки неблагополучных территориях" (Новосибирск, 1987) и в методические рекомендации "Комплексная технология профилактики и ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота" (одобрены для внедрения НТС АПК Новосибирской области, 1987).
Внедрение результатов исследований. Методика постановки биопробы и система взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о каядом олучае заболевания туберкулезом человека и животных внедрены в областных лабораториях и неблагополучных пунктах (очагах) Новосибирской и Кемеровской областей.
На защиту выносятся;
1. Результаты сравнительного изучения диагностической ценности бактериологического и биохимических методов идентификации Ц.■ьиЬегси1ов1в при выделении их из биоматериала животных и от человека.
2. Данные о патогенной роли указанного вида возбудителя на лабораторных животных и курах в зависишсти от величины заражающей дозы.
3. Вопросы патогенеза туберкулеза у овец и крупного рогатого скота, зараженных 11.1иЪвгои1оа18.
4. Дашше по эпизоотологической роли МЛиЬегси1о01в для крупного рогатого скота и взаимосвязь туберкулеза животных о заболеваемостью туберкулезом сельского населения.
Апробация рзботц. Ооновные положения работы доложены на зональном совещании "Организация противотуберкулезных мероприятий на эпизоотически неблагополучных территориях" (Новосибирск, 1987), выездном заседании проблемной комиссии "Туберкулез", посвященном проблеме взаимосвязи туберкулеза человека и животных (Самарканд, 1389), научных конференциях молодых ученых ИЭВСиДВ (Новосибирск, 1557-1089), ученых советах ИЗВСиДВ (Новосибирск, 1987-1991), межлябораторном совещании научных сотрудников ИЭБСиДЗ (Новосибирск, 1992).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано б научных статей, 2 методические рекомендации.
Объдм и структура работу. Диссертационная работа ооотоит из введения, обзора литература, собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 279 источников, в том числе 72 иностранных авторов, приложения. Диосертация изложена на 175 отраницах машинописного текста и иллюстрирована 16 таблицами.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы и методы. Работа выполнена согласно програше 0.ох.61.02.02.03 Д в 1987-1991 гг. в отделе по разработке мер борьбы о туберкулезом сельскохозяйственных животных ИЭВСиДВ и Новосибирском НИИ! туберкулеза (совместно с канд. мед. наук Г.М.Лисиченко), а также в неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого окота хозяйствах Кемеровской и Новосибирской областей.
Сравнительную оценку биологического и биохимических методов идентификации М.1;иЪегси1оа1в проводили с 14 культурами, выделенными из биомааериала животных, и таким же количеством культур, изолированных от больных туберкулезом людей. Культуры, выделенные от животных и по результатам баологичеокой пробы отнесенные к млиЪегси1ов1в, были отобраны для дальнейшего изучения их биохимических свойств о целью подтверадения видовой принадлежности, т.е. идентичности показаний биологического и биохимических методов идентификации. Культуры, выделенные от людей, идентифицировались по биохимическим свойствам, а затем по результатам биопробы. Принадлежность культур к указанному виду возбудителя определяли, используя комплекс культу-ральных, биологического и биохимических методов. Определение ниацнна проводили по методике Х.Ковво (1956) в модификации Е.Воп1ске (1958), нитратредуктазы - по методике 8.Т1ггапвп (1960) в модификации Н.Воп1ок» (1962), никотинамидазы - по методике 1{.Воп1ске (1962) в модификации А.КгеЪа, 1?.Карр1ег (1364). .
Для культивирования м.tuberculosis пользовались двумя штательными средами: Левенштейна-Пенсена, винн-2, на которых теределшш характер, скорооть и интенсивность роста, форму ко-тоний в зависимости от различных условий аэрации. Для их созда-1Ш использовали 4 вида пробок. Кавдую культуру засевали на Ш пробирок: из них 10 штук (1-Й вид) закрывали ватно-марлевы-ш пробками, 10 (2-й вид) - ватно-марлевыми под пара|лном, СО (3-й вид) - резиновыми цельны.ли и 10 (4-й вид) - резшовыми з прорезанным винтообразно вдоль пробки жалобном.
При идентификации ы.tuberculosis биологическим методом • )дновреманно заракали 3-4-недельной культурой, суспензирован-юй в I ил физиологического раствора, в дозе 1,0 иг двух морс-сюс свинок (подкожно) и кролика (внутривенно). Интерпретацию результатов проводили согласно "Наставлению по диагностике ту-Зеркулеза животных" (1986).
, Определение вирулентности изучаемых культур проводили на юрских свинках, заракенных в дозе 0,01 мг. Результат оценива-ш по срокам гибели и индексу пораженнооти селезенки согласно аатодике Ы.Аок! (1967).
Для заражения лабораторных животных, птиц, овец и крупно-X) рогатого скота взяли культуру м.tuberculosis (шт. 125) из кзвосибирского НИИ туберкулеза, имеющую высокую вирулентность, щрааениые биохимические и биологические свойства, позволяющие >тнеотц ее к указанному виду возбудителя.
О целью изучения патогенной роли различных заражающих доз 3,0; 2,0; 1,0; 0,1; 0,01; 0,001; 0,0001 мг) «.tuberculosis юпользовано по 70 морских свинок, кроликов,белых шшей, кур, язделенных в каждом опыте на 7 групп, одна из которых была юнтрольиоД. Срок наблвденкя составил 90-100 дней. У павших i убитых по окончанию опыта животных учитывали степень выра-temiocTu и характер патолого-анатомичеоких изменений, индеко ¡оражанностц селезенки, адвотных и птиц коцтро.гьяых групп со-.ержали совместно о зараженными для выяснения воэйоаяоетя ;онтактного нуги передача возбудителя.
В эксперименте на овцах ц крупном рогатом скоте изучали а толо го-а на тоническую, шкробиологцчвокуп характеристику воз-удителл, а такас вопроси сритазнекноЦ диагностики туберкулеза возмоаность контактного пути аарэдачц незбудатвля инфекций.
Овец заражали u.tuberculoeis в дозе 1,2 мг на I кг маосы тела животного различными способами: 5 из них - интратрахеаль-но, б - перорально о интервалом 3 дня, 5 - контрольных, содержались совместно с зараженными. Опыт продолжался 316 дней. Через 30 дней после заражения и далее каждые 40-45 дней в течение всего опыта овец исследовали внутрикожной туберкулиновой пробой ПЦЦ туберкулином для млекопитающих согласно "Наставлению по применению туберкулинов для аллергической диагностики туберкулеза млекопитающих и птиц" (1978). Определение в сыворотке крови комплементсвязывапцих антител проводили в РСК, руководствуясь "Наставлением по диагностика туберкулеза животных" (1986). Сыворотку крови исследовали на 7, 14, 21, 28-й дни после заражения и далее через 30-35 дней в течение всего орока наблюдения.
В экспериментальных условиях заражали M.tuberouloaie крупный рогатый скот в дозе 1,0 мг на I кг массы тела животного. В опыт было взято. 5 стольных коров, 5 бычков 6-8-месячного возраста. В контроле находились 4 здоровых животных, содержавшихся совместно о зараженными. От коров получили телят, которые в течение всего срока наблюдения находились на естественном вскармливании. Ошт продолжалоя 344 дня. За это время чаоть животных была выведена из опыта: одного бычка убили через 50 дней после заражения, 2 коровы и родившийся теленок пали от туберкулеза. В ходе опыта животных исследовали внутрикожной туберкулиновой пробой на 30-й, 60-й дни и далее через 40-45 дней в течение опыта. Для постановки РСК в получения сыворотки кровь брали до туберкулиниэации и на 7-9-й день после нее.
Дня изучения вопросов взаимосвязи туберкулеза человека и животных использовали эпизоотологический (эпидемиологический) и бактериологический методы исследований. На основании этого предложена s внедрена система взаимной информации между ветеринарной е медицинской службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных. Система внедрена в общей комплексе проводимых противотуберкулезных мероприятий в хозяйствах Новосибирской и Кемеровской областей.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
I. Сравнительная оценка биологического и биохимических методов идентификации M.tuberculoeie, изолированных из биоматериала животных и человека
С целью уточнения информативности биологического и биохимических методов провели их сравнительную оценку с использованием 28 культур M.tuboroulosia, выделенных из биоматериала животных и от человека. Изучение культуральных свойств показало, что сроки появления роста были короче у культур М.tuberculosis, выделенных от человека, и несколько продолжительнее у культур указанного вида, изолированных из биоматериала животных. Но при втом разница была не достоверна. Улучшение аэрации ускоряет сроки появления роста и увеличивает его интенсивность.
Культуры U.tuberouloeie, наделенные от животных, в 1,1 раза чаще рости в 3-форме, чем аналогичные культуры, изолированные от человека.
Изучаемые культуры имели различную степонь вирулентности в зависимости от иоточника выделения. U.tuberoulosia, выделенные от человека, обладали высокой (28,6#), средней (50£) и слабой (24,4$) степенью вирулентности, а изолированные из биоматериала животных имели только среднюю (Ю0£) степень вирулентности.
При исследовании биологической пробой культур M.tuberou-loole, выделенных от человека и идентифицированных биохимическими тестами о ярко выраженными положительными результатами, получен сомнительный результат. У кролика на вскрытии установлена генерализованная форма туберкулеза. Это еще раз подтвервдает зависимость характера и выраженности туберкулеа-ных поражений у лабораторных животных от степени вирулентности возбудителя. В данном случав заражение кроликов высоковирулентными культурами вызывало развитие туберкулеза о локализацией специфического воспаления как в легких (3 случая), так в легких и печени (I случай).
Ниациновнм тестом, повторенным 2-3 раза п сомнительных случаях, подтверждалась видовая принадлежность M.tubereuloeie,
выделенных из биоматериала животных, исоледованных биохимическими методами и предварительно идентифицированных биологической пробой в 92,9/2 случаев, никотинамидо- и нитратредуктазо-положительных из них было соответственно 85,8 и 78,7$ культур. При этом несмотря на применение комплекса биохимических методов определения видовой принадлежности в одном случае получен сомнительный .результат. Культура обладала низкой штратредук-тазной и никотинамидазной активностью.
Параллельное исследование М.tuberculosis, выделенных от животных и человека биохимическими и биологическим методами не выявило преимущества ни одного из них. Но вое же менее достоверные результаты получены при идентификации культур,.выделенных из биоматериала животных, биохимически!,¡и методами. Разноречивые результаты подучены и по биопробе при определении видовой принадлежности Ы.tuberculosis, выделенных от человека и имевших различную степень вирулентности. В частности, высо-койирулентные культуры вызывали у кроликов развитие генерализованной форш туберкулеза, затрудняя определение вида по био-пробе..Исходя из изложенного, правомерно заключить, что для повышения диагностической ценнооти биопробы, применяемой о целью идентификации U.tuberculosis, имеется необходимость изменения методики ее постановки в отношении величины заражающей дозы возбудителя.
2. Изучение патогенности М.tuberculosis на белых мышах, морских свинках, кроликах и курах в зависимости от дозы возбудителя
Оценка продолжительности жизни, характера и степени выраженности туберкулезного процесса у мороких свинок, зараженных ы.tuberculosis, в дозе 1;0 мг, в сравнении о другими дозами (0,001; 0,01; 0,1; 2,0; 3,0 мг) показала, что 10С$ животных, зараженных в дозах 0,01 и 0,001 мг, пади в среднем через 83,6±2,3 дня о индексом.пораженнооти 0,2±0,0. При зтом во всех случаях отмечены туберкулезные поражения в легких, печени, селезенке, лимфатических узлах и тканях на месте введения возбудителя, выраженные в одинаковой степени.
Морские свинки, зараженные в дозах от ОД до 3,0 мг, пали в сроки от 72,0+3,6 до 80,3+1,2 дня с индексом пораженности от 0,3+0,0 до 0,6+0,0. Величина и характер туберкулезных поражений имели различную степень выраженности. В одних случаях они были множественными, в других - единичными. Чаще преобладали обширные поражения, здоровая ткань практически отсутствовала и пораженный орган представлял собой "сплошной гнойный ком", что, естественно, затрудняло постановку окончательного диагноза по биопробе.
При контакте здоровых морских свинок о больными произошло заражение одной из них. Исходя из полученных результатов следует, что при идентификации культур й«tuberculosis для заражения юрских свинок необходимо использовать минимальную дозу возбудителя (0,001 мг).
, Изучая значение различных заражающих доз в возникновении туберкулезного процосоа у кроликов при заражении м.tuberculosis установили, что введение культуры в дозе 3,0 мг вызывало у них заболевание в 80$ случаев, а Дозах 1,0 и 2,0 мг - в 60, в дозе 0,1 мг - в 30, а в дозе 0,01 и 0,001 мг - в 1С# случаев. У кроликов, зараженных в дозах 2,0 и 3,0 мг, специфические поражения локализовались в легких и имели различную степень выраженности - от единичных просовидных до множественных разгаром с горошину, местами сливзихся. У животных, зараженных в дозах от 0,001 до 1,0 мг, они были однородными и представлены единичными просоввдными узелками.
Поэтому считаем, что дои идентификации культур M.tuber-culosis при постановке биопробы: кроликов следует заражать в дозах 0,01 или 0,001 мг, так как в этом случае поражения локализовались в легких, были единичными и тлелись у минимального' (10%) числа животных, что позволяет дифференцировать культура указанного вида от M.bovia, поскольку при заражении кроликов H.bovla- в этих же дозах гибель наступает зереэ 3 недели при явлениях генерализованного туберкулеза. .
Изучение патогеншоти H.tuberculoBis на белых мгшах гоказало, что при заражении их дозами 0,1; 1,0; 2,0 мт по-заяения обнаруживались в 1003 случаев, однако гибель наблю-шлась у 50£ из них. Но наиболее информативными являются
доаы 1,0 и 2,0 иг, приводящиэ к гибели 40-502 животных в промежутке от 50,0+1,5 до 71,0+1,3 дня о высоким индексом пораженнооти (1,6+0,2 - Во всех случаях в тканях на месте введения культуры отмечено образование язв.
Здоровые белые мыши и кролики не заражались при контакте о больными животными в течение 90 дней (срок наблюдения).
Изучение патогенной роли и.иЛегои1оа1е для кур показало, что внутривенное введение возбудителя в различных дозах не вызывает у них развитие туберкулезного процесоа. Это подтвердилось патолого-анатомическим и бактериологическим исследованиями.
3. Результаты экспериментального заражения ii.tubercuJ.oeiB овец и крупного рогатого скота
Патогенность млиЪвгои1ов1в для овец подтверждена пато-лого-анатомичесжим и бактериологическим исследованиями. Тубер кулез был установлен у 5 (1002) овец, зараженных интратрахв-ально, у 4 (80?) зараженных перорально и у 2 (40£) контактных животных. Специфические поражения локализовались преимущественно в легких и лимфатических узлах. В одном случае отмечено поранение кишечника. Ыетаотазирование осуществлялось в пределах пораженного органа по лшлфатичеоким путям. Характерной особенностью туберкулезных поражений являлось значительное обызвествление казеозно-некротических масс.
Все зараженные и 2 контрольные овцы на 30-Й день (первое исследование) реагировали на туберкулин. Аллергические реакции сохранялись 290 дней. В группе овец, зараженных перорально, начиная о 75-го по 205-й день исследования количество реагирующее животных колебалось от 40 до 60!{, о 245-го дня реакции у них выпали. Овцы, зараженные интратрахеально, до 245-го дня реагировали в 1002 случаев и в 60-80£ - до 290-го дня.
По степени интенсивности туберкулиновых реакций различий в обеих группах не выявлено. В первые дни исследований реакции были более выражены, величина кожной складки состав-
ляла 11,0+0,1 мм и о течением времени уменьшалась, а к 290-му дав била в пределах 3,5+0,1 т. На туберкулиновуи пробу также реагировали две контрольные овцы, находящиеся в контакте о зараженными.
Совпадение показаний туберкулиновой пробы с наличием па-толого-анатомических изменений во внутренних органах и лимфатических узлах и результатами бактериологического исследования биоматериала у овец, зараженных перорально, составило 80Í, у зараженных интратрахеально и контактных - 100$. В среднем диагностическая эффективность внутрикожной туберкулиновой пробы составила Э6%.
Комплементсвязывашше антитела обнаруживались в сыворот-ко крови овец уже на 7-й день после заражения л выявлялись до 315-го дня. Максимальное количество (9030 положительных реакций приходилось на 185-й день. В дальнейшем отмечено их выпадение от 30 до 50*. У овоц, зараженных интратрахеально1,, серо-позитизность была выше. В период о 14-го по 155-й денв она достигала 100$, со 195-го и до конца опыта составила. 60-80', а у зараженных перорально - 40-60$ на протяжении всего срока наблюдения. У контактных животных положительные результаты' РСК были единичными, но совпали о данными патолого-анятоми-ческого и бактериологического исследований при негативной-туберкулиновой пробе.
Совпадение результатов РСК с патолого-анатомичесгош и Зактериолоигческим исследованиями в группе овец, зараженных юрорально, равнялось 80$, интратрахеально - IG0 и у контроль $jx - 80, что в среднем составило 86?.
При заражении крупного рогатого скота M.tuberculoal® ia основании патолого-анатомического и бактериологического ^следований туберкулез установлен как у 6С# зараженных яш-ютных, так и у 60% родившихся телят. Наличие туберкулезных ¡зменений, обнаруженных во внутренних органах и лимфа тичес-их узлах опытных животных, свидетельствует о патогенностй ».tuberculosis для крупного рогатого скота. У двух бачков t одного родившегося теленка найдены туберкулезные поражения i лимфатических узлах в виде единичных очагов, а у одного
родившегося теленка и двух коров имела место генерализация процесса, приведшая их к гибели. Наряду с этим у трех животных туберкулезше поражения во внутренних органах и лимфатических узлах отсутствовали, но туберкулез был подтвержден бактериологическим исследованием.
При заражении u.tuberculosis стельных коров возможен вертикальный путь заражения. Горизонтальный путь передачи возбудителя инфекции не был установлен.
Зараженные животные на 10-й день реагировали на внутривенное введение 1ШД туберкулина для млекопитающих, реакции сохранялись до 150 дней. При этом количество реагирующих животных в динамике от исследования к исследованию уменьшалось от 100 до Щ2. Максимальное их число приходилось на 10, 20 и 30-й дни исследования. Контактные животные и родившиеся телята не реагировали на туберкулин.
Совпадение количества реагирующих на туберкулин с наличием туберкулезного процосса у зараженных животных, подтвержденного патологоанатомическим и бактериологическим исследованиями, составило 604.
Комплемонтсвязывающие антитела выявлялись в оыворотко крови только у зараженных бычков. Положительные реакции были единичными. В одном случав показания РСК совпали о результатами туберкулиновой пробы и данными патолого-анатошческого и бактериологического исследований.
4. Заражение крупного рогатого скота М.tuberculosis и система взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных
В ряде хозяйств Кемеровской и ¡Ьвосибирокой облаотей, где имелся контакт больных туберкулезом людей и крупного рогатого скота, отмечены случаи (15,8#) выделения из биоматериала животных ы.tuberculosis. Туберкулез крупного рогатого скота, вызванный этим видом возбудителя, протекал в большинстве случаев латентно, на вскрытии находили незначительные свойственные атой инфекции изменения или не обнаруживали их вовое.
Установлено, что заражение крупного рогатого скота или-Ъвгои1оа1а диагностируется ветеринарной службой на фоне ликвидации туберкулеза, вызванного м.Ьоу!а.
О значительном паразитировании н.1;иЬегси1оа1з на крупном рогатом скоте в хозяйствах Кемеровской и Новосибирской областей свидетельствует факт изоляции из биоматериала животных на каждые 5 случаев выделения м.Ъоу1а одной культуры м.-киЪегси-1оа1а.
Предупреждать взаимэзаражение туберкулезом человека п животных возможно только при условии своевременной взаимной информации о каждом случае заболевания. Взаимную информацию осуществляли согласно методическим рекомендациям "О введении взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных" (1985).
. Для обеспечения работы предложенной систем разработаны формы извещений о выявлении реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота и талона о взятии на учет в противотуберкулезные учреждения лвдой, работающих в животноводство или ■тлеющих личный скот. Каждое такое сообщение способствоезло уточнении источника возбудителя инфекция и тем сажи помогало оперативной организации противотуберкулезных мероприятий.
Внедрение этих мероприятий, а также информативных бактериологических и биохимических тестов при индикации культур 13.гиЬвгои1оа1а, разрыв контакта больных скрытой формой туберкулеза людей о животными, проведение комплекса диагностических и других противотуберкулезных мероприятий позволило в короткие сроки оздоровить стада крупного рогатого скота от туберкулеза, вызванного м.-ЬиЪагси1оа1в, в совхозах "Тыхтино-кий", "Хорошеборский", "Зарубкнский", "Опаршский", "Восход", "Каменский" Кемеровской области, а также совхозе "Пихтоясгай" Новосибирской области.
. Это позволило получить экономический эффект в размере 37,0 тыс.р. на одну оздоровленную ферму, или 1,5 млн р. от ликвидации туберкулеза'крупного рогатого скота в указанных хозяйствах (А.С.Данченко, 1990).
выводы
1. илиЬвгои1о81в, выделенные из биоматериала реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота, в 10С$ случаев обладали средней степенью вирулентности, а изолированные от человека - в 28,6# имели высокую, в 50 - среднюю и в 21,4$ -слабую вирулентность.
2. Из биохимических тестов наиболее информативным для идентификации ы.1;иЬвгои1ов1а является ниациновая проба (92,9^ положительных находок), далее - пробы о никатинамидазой (85,Е$) и редукции нитратов (78,7$). Биологический метод типирования не уступает по диагностической ценности указанным биохиыичео-кий тестам, вследствие чего он не утратил свою значимость в ветеринарной бактериологии.
3. И.1;иЬегси1оа1в патогенен для белых мышей, вирулентность зависит от дозы инфекта. Наиболее Информативной являет-оя доза 1,0 мг возбудителя на животное.
4. Морские свинки высоко чувствительны к ы^иЬегои1оа1о, гибель их наступает не позднее 3 месяцев после заражения. Для идентификации указанного вида возбудителя необходима его минимальная доза - 0,001 мг на морскую свинку.
5. Идентифицировать м.*иЪвгси1оэ1а из биоматериала животных не всегда представляется возможным. Для информативного типирования указанного вида возбудителя необходима постановка биоцробы, в которой кроликов заражают изолированной из биоматериала культурой в дозе 0,01 или 0,01 мг на голову.
6. ц.1;пЬегси1оа1а при искусственном заражении (доза 1,2 ыг/кг массы животного) вызывает у овец специфические изменения преимущественно в легких, склонные к купированию и редукции. Такие овцы в 96$ случаев реагируют на ППД туберкулин для млекооитаицих. В сыворотке их крови в 30$ случаев улавливаются коыплементсвязываицие антитела в РСК о туберкула зным антигеном, приготовленным из х.Ьоу1в.
7. м.гиЬегси1ои1е при искусственном заражении (доза 1,0 мг/кг массы животного) вызывает развитие у крупного рогатого окота специфических для туберкулеза изменений. Из биоматериала инфицированных животных, у которых на вскрытии не находят изменений во внутренних органах, инфицирование подтверж
дается бактериологически. Зараженные животные реагируют на ППД туберкулин для млекопитающих, в случаев у них отмечена серопозитивность в РСК.
8. При контакте возможна передача м.гиЪегои1ов1а от больных туберкулезом животных (морских свинок, овец и крупного рогатого скота) здоровым.
9. В неблагополучных пунктах, где причиной заражения крупного рогатого скота являются млиЬегои1ов1в, высокую противоэпизоогаческую эффективность показал разрыв контакта' больных туберкулезом людей (бактериовыделителей) со здоровыми животными. Существенную роль в таких противотуберкулезных мероприятиях играет внедрение системы взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Для идентификации М^иЪегси1оз1в в биологической пробе морских езинок необходимо заражать указанной культурой возбудителя а дозе 0,001 от, а кроликов - 0,01 или 0,001 от на голову. Для индикации этого вида возбудителя туберкулеза возможно использовать и биохимические тесты - ниацгаювыи, шпеа-тянемцдазный и родящий нитратов.
В неблагополучных пунктах, где причиной заражения крупного рогатого скота монет служить нлиЪегси1оо1з, для диагностического убоя иивотных из числа реагирующих на внутри-конно'е введение ППД туберкулина для млекопитающих целесообразно использовать РСК о туберкулезным антигеном, приготовленным из Ы.ЬспгАа.
В таких пунктах в комплексе противотуберкулезных кзро-:риятий необходимо применять систему взаимной информации .тэжду медицинской и ветеринарной службами о случаях заболе-зания туберкулезом человека и животных, а также не упускать га внимания возможпый источник Ы.-ЬиЬегои1оа1а - мелкий рогатый скот.
Предложенные научные разработки учтены при составлении:
1. "Рекомендаций о введении взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных" (рассмотрены, утверждены и одобрены для внедрения ученым советом ИЭВСиДВ СО ВАСХШД, 1ПС УСХ и отделом здравоохранения Новосибирского облисполкома, 1985 г.).
2. Приказа А 360 от 26.12.1985 г. по УСХ Новосибирского облисполкома "0 взаимной информации между медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных".
3. Плана дополнительных мероприятий по профилактике, ран нему выявлению и лечению туберкулеза у работников животноводства хозяйств и жителей населенных пунктов, неблагополучных по туберкулезу о.-х. животных ( утвержден ЫСХ и МЗ РСФСР, 1985 г.).
4. "Комплексной технологии профилактики и ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота" (утверждена ученым советов ИЭВСиДВ СО ВАСХНИЛ, 1987 г.; Оыокого государственного ветеринарного инотитута, 1986 г.; одобрена для внедрения НТС А1Ж Новосибирской области, 1987 г.).
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕЩ ДИССЕРТАЦИИ
1. Донченко В.Н., Писаренко E.H., Протодьяконова Г.II. Влияние условий культивирования на интенсивность роста ыико-бактерий// Диагностика и специфическая профилактика бруцалда за и туберкулеза животных. - Новосибирск, 1988. - С.38-43,
2. Писаренко E.H.. Булдакова З.В. РСК у овец, зараженных возбудителем туберкулеза человечеокого вида// Диапности-ка н специфическая профилактика бруцеллеза и туберкулеза животных. - Новосибирск, 1988. - С.47-50.
3. Писаренко E.H., Соколова 1.С. Патогенная роль возбудителя туберкулеза человеческого вида для овец// Профилактика и оздоровление животных от туберкулеза к бруцеллеза. -Новосибирск, 1988. - С.32-37.
4. Писаренко E.H. Изучение патогенной роли M.tuberou-
Хоэ1а для крупного рогатого йкота 8 вкаперимеитв// Обоая * чаатная эпизоотология инфекционных болззнай оельокохозяйственных животных. - Новосибирск, 1990. - С.46-49.
5. Данченко А.С., Пиоаренко В.Н. Вопросы взаимосвязи туберкулеза человека к животных в их практическая реализация при оздоровлении отад крупного рогатого окота от туберкулеза// Организация противотуберкулезных мероприятий на эпизоотически неблагополучных территориях. - Новосибирск, 1987. -С.11-12.
в. О введении взаимной информации шику медицинской и ветеринарной службами о случаях заболевания туберкулезом человека и животных: Метод, рекомендации/ Сост. А.С.Дончен-со, В.П.Донченко, Е.Н.Пиоаренко, А.С.Тараоов, Т.А.Яковлева, 1.И.Лашпн, А.И.Аксенов, Л.С.Саванина, Л.М.Еогожева. - Ново-зиб|фсл, 1985. - 7 о.
7. Комплексная технология профилактики и ликвидации ту-(еркуэтеза крупного рогатого окота: Рекомендации/ Соот. 5.И.Диупина, А.С.Дояченко, Ю.И.Сьюлянинов, В.Н.Дончешсо, (.А.Шкиль, В.Н.Писаренко, А.И.Лапшин, Н.Ы.Колычев, Б.Я.ХаЙ-аш. - Новосибирск, 1988. - 65 о.
даиоаво и печати 06.05.1993 г. Формат 60x84 1/16.
&ём I печ. л. Тиран 100 экз. Заказ Л ¿3.
|дакцхонво-полнгр9$вчесиоо объединение СО РАСХН, ротапринт. 633128, Новосибирская область