Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Цитохимические показатели клеток крови и иммуноморфологические реакции в органах пищеварения белых крыс при экспериментальном пастереллезе (P. multocida, серотип В) и под влиянием иммуномодуляторов

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ имени К.И .СКРЯБИНА

„ л п_______ __

□—е-л -

На правах рукописи

2 АПР 1336

ГЛОВЕР КРИСТИНА НАА-КАЙ

ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОК КРОВИ И ИММУНОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ В ОРГАНАХ ПИЩЕВАРЕНИЯ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАСТЕРЕЛЛЕЗЕ (Р. ти1ъос!аа , СЕРОТИП В) И ПОД ВЛИЯНИЕМ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1996

Работа выполнена в Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина.

Научный руководитель - заслуженный деятель науки РФ, академик МАИ и ААО, доктор ветеринарных наук, профессор Жаров A.B.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор Сулейманов С.М.

2. Доктор ветеринарных наук, профессор Кунаков A.A.

Ведущая организация - Всероссийский научно-исследовательски институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко.

Защита состоится " / 1996 г. в "/О " час

на заседании диссертационного совета Д 120.36.01 по защите диссе] таций на соискание ученой степени доктора наук в Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина (109472, Москва, ул.Академика Скрябина, 23; тел. 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан "_ " ¿З^бгУ/?6 г.

Ученый секретарь ~~jjp

диссертационного совета Слесаренко H.A.

СБЩАЯ ХАРАКГЕР/СТЛКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время разработка эффективных средств зашиты и лечения животных при инфекционных заболеваниях имеет затсное значение для науки и практики. В последние годы применяют лечебно-профилактические средства, направленные на устранение яммунодефяцитных состояний и повышение защитных сил организма. Для достижения это? пели применяют природные и син -тетические препараты, кзменкшие фу нкця о нал ь нуя активность системы иммунитета или ее отдельных компонентов.

Многие ученые изучает влияние иммуноксрригируюсих препара -тоз на общие и местные иммунные процессы в оргагазме животных при инфекционной патологии (З.Я.Арион, 1967; В.А.Кирпичное, 198Э; Е.С .Воронин и соавт., 1569, 1990; О.К.Хмельницкий, 1063; Т.Н.Грязкева, 1991; А.ЗДаров, 1993, 1995; В.'.агззоп , 1565), но механизм и характер их действия на различные органы иммунной системы недостаточно изучены.

Изучение обхих и местных иммунных процессов в организме животных при инфекционной патологии, в том числе под влиянием иммукомодуляторов Т- и 3- активинов ¡и морфологическиеицитохи -ыические показатели клеток периферической крови и морфофункцио-нальные изменения в органах пищеварения и регионарных лимфо -узлах белых крыс при экспериментальном пастереллезе, имеет большое значение для ветеринарной науки и практики.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось исследование морфологических и цитохимических показателей клеток пери -ферической крови и иммунсморфологическкх изменений органов пищеварения при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммукомодуляторов Т- и 3- актизиков. В соответствии с этим бюи поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфологические и цитохимические показатели клеток периферической крови и морфофункциогальное состояние органов пищеварения у клинически здорезкх жиэотга» з условиях эксперимента.

2. Исследовать морфологичеек».е я цитохимические показатели плеток периферической крови и патомор£слсгкчесяяе изменеккя б органах пищеварения при экспериментальной заражении хявоткых культурой пасторелл.

3. Определить морфологические и цитохимические показатели клеток периферической кровикиммукоморфологические характеристики органов пищеварения при коррекции моделируемой патологии иммуномодуляторами Т- и В- активинами. '

4. Провести сравнительный анализ результатов морфологических и цитохимических показателей клеток периферической крови и патомореологических, гистологических и морфометрических исследований органов пищеварения у животных вылеуказанных групп.

Научная новизна исследований. Впервые установлены морфологические и цитохимические показатели клеток периферической крови у белых крыс при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммуномодуляторов Т- и 3- активинов. Изучено морфо-функциональное состояние органов желудочно-кишечного тракта, печени и мезентериальных лимфатических узлов у белых крыс при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммуномодуляторов. Дана оценка морфологических и цитохимических показателей клеток периферической крови, патоморфологическлх и гистохимиче -ских изменений в органах желудочно-кишечного тракта, печени и мезентериальных лимфатических узлах белых крыс при экспериментальном пастереллезе и под влиянием Т- и В- активинов. Показано положительное влияние иммуномодуляторов Т- и 3- активинов на факторы неспецифической резистентности и специфической иммунологической реактивности белых крыс при пастереллезе в частности вызванной Рлш11ос1(1а , серотип В.

Практическая ценность результатов исследований. Получен -ные в эксперименте данные о морфологических и цитохимических показателях клеток периферической крови (нейтрофилов, моночи -тоз) и изменениях функциональной морфологии органов желудочно-кишечного тракта, печени и мезентериальных лимфоузлов показал;;, что кммуномодуляторы Т- и В- активины существенно улучшают метаболические свойства клеток периферической крови к морфо-функциональнкз характеристики органов пищеварения и могут быть использованы в качестве стимуляторов иммунной системы для профилактики пастереллеза.

Внедрение результатов исследований. Основные положения и выводы диссертации используются в учебном процессе на кафедре патологической анатомии и Физиологии им.З.М.Коропова Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, сведений о практическом использовании полученных результатов, рекомендаций по использованию научных выводов и списка литературы. Объем диссертации составляет ж'.'о • страниц машинописного текста. Диссертация со -держит и таблиц, 52 рисунков. Список литературы включает 224 источников, в том числе 57 на иностранных языках.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Данные морфологических и цитохимических показателей клеток периферической крови белых крыс при экспериментальном пастереллезе.

2. Данные морфофункциональных изменений органов желудочно-кишечного тракта, печени и мезентериальных лимфоузлов белых крыс при экспериментальном пастереллезе.

3. Результаты сравнительного анализа морфологических и цитохимических показателей клеток периферической крови и морфо-функциональных изменений органов желудочно-кишечного тракта, печени и мезентериальных лимфоузлов при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммуномодуляторов Т- и 3- активи-нов.

ССБСТВЕННЪЕ ИССЛЕДСЗАШ

Материал и методы исследования, материалом для исследова -кия служили периферическая кровь, желудок, двенадцатиперсная, то^ая, подвздошная, слепая и ободочная кисти, печень и меэен-теркальный лимфоузел, взятые при вскрытии белых крыс в условиях эксперимента по воспроизведении пастереллезе и под влиянием иммуномодуляторов Т- и 3- активиноэ.

3 опыте были использованы белые крысы с «ипой массой 130160г, которые были подразделены та 4 группы:

1 группа - 7 животных, которым вводили 0,85? раствора хлорида натрия (подкожно, однократно) в дозе 1мл.

2 группа - 7 животных, обработанных иммуномодуляторами Т-к 3- яктивинами в дозе 0,2мл.

3 группа - 7 ЖИВОТНЫХ, которым ВВОДИЛИ культуру P^ultocida серотип В (внутрибрюгсино, однократно) в дозе 1мл (1мл содержалось 5000 микробных тел).

4 группа - 7 животных, обработанных Шймуномодуляторами Ти В - активинами (подкожно, однократно) в дозе 0,1мл с последующим заражением культурой P.ouxtocida , серотип 3 (внутри-броаико, однократно) в дозе 1мл (1мл содержалось 5000 микробных тел).

Иммуномодуллторы Т- и В- активины вводили подкожно, 7 суток до заряжения животных культурой пастерелл.

Для морфологических и цитохимических исследований брали кровь от белых крыс путем перерезания сонных артерий. В крови определяли общепринятые гематологические показатели: гемоглобин в г» по гемометру типа ГС-3, подсчитнвали количество эритроцитов а лейкоцитов, выводили леЯхограмму. Казки крови фиксировали в метаноле, в парах формалина, жидкости Карнуа, растворе Трилока Б на 60% ацетоне, а ОД растворе сульфата меди в I/5-ной уксусной кислоте. Гликоген выявляли по Мак-Манусу и Хочкиссу, фосфолипиды - судаком черным Б, неферментнке катион-ние белки - по Пигаревскому, миелопероксидазу - по Сато. Выявляли активность дегидрогеназ: сукцината (СДГ) (КЗ 1.3.99.1) и лактата (ЛДГ) (КФ 1.1.1.27) с применением нитро-синего тетра-золяя по прописям Э.Пирса (1962) и Р.Лилли (1969). Количество гликогена, фосфолипидоз, неферментных катионных белков, активность миелспероксвдазы оценивали по бальной шкале в клетках нейтрофлльного и хоноцитарного рядов и выводили средний цитохимический г'оэффициент (С1}{) по МО-ГОДУ As ta Id i , Verga ,(1957). Активность дегидрогеназ оценивали пр:: подсчете гранул диформа-зана а 50 нейтрофил&х и 30 моноцитах у каждого животного. Полученные данные обработаны с применением микрокалькулятора электронике МК-56 с использованием критерия Стъядента (Ю.К.Баюи, 1989).

Для гистологических и гистохимических исследований из перечисленных виге органов брали кусочки толщиной 3-5мм и фиксировали в Ю^-ном водном растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа. Материал обрабатывали по общепринятым методикам (Кисели Л., 1962; Лилли Р., 1969; Меркулов Г,А., IS69). Изготовление гистосрезов толщиной 5-7мхм проводили с помощью ротационного микротома (модель II65,Kotocut Reichert , Jung ), окрашивание - по еле душ им методикам: гематоксилином ¡¿айера и эозином; коллагеновые волокна по ван Гиэону; дезоксирибсну -клеопротеиды (ДНП) по Фельгену и Розенбеку; рибонуклеопротеиды (ffiil) - по Брзпе; гликоген - по Шабадаиу; эпителиальный муцин (слизь) - альциановж синим по Моури; üKK-реакциа - по Мак-¡¿внусу; тучные» клетки паноптическим методом по Паппенгейму. Гистохимические реакции на нуклеопротеиды и гликоген оценивали по 4-бальной системе (К.М.Данилова, 1974).

Морфометраческие яееледоэания органов желудочно-кишечного тракта, печен;! и мегентериальных лимфаткческях узлов проводили на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином. Определяли толщину слоев органов желудочно-кишечного тракта, соотношение ямочек и желез в желудке и ворсинок и крипт а тонком отделе гашечкика, а также подсчитывали количество желез или крипт. В стсоме собственной пластинки и подслизистой основе желудка и яниечкика и в страхе печени подсчитывали количество лимфоцитов, нейтро^илоа, плазмоцитов и ¡макрофагов, количество меток находящихся в мнтотическом состоянии. Измеряли диаметр лимфофол-ликулоя и их центров размножения. Измерения диаметров фолликулов п их центров размножения проводили с помощью окуляра-микрометра. Количество тучных клеток подсчитывали в 30 полях зрения. Находили с-реднеэ количество клеток в одном пела зрения. 0 фушециональной активности тучных клеток судили по степени кх дегранулятпг (I степень - с еднютнта г.«кодом гранул за продели клетей; II степень - с каесотм выводом грчнул; 2! ст«пвиь-пслностыо дегрзнулирозйнниэ клетки). Микроскопические даблапе-рля проседали с псмседъя микроскопа ИБР-3 пс:д увеличенян os.x?, хЮ л «5.3:9, уЯО, Х40.

В основу расчет си брам: средшм арифмотичоскуз (х) п ошибку средней эрифгатическоР (м). Псшучшкъй пг.фрозуо делптыа бикм статистически обработаны ja микрокалькулятора МК-56 (О.К.Бзпн).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛВДОВАШй И ИХ ФСУВДЕШ

Морфологические и цитохимические изменения крови у белых крыс при экспериментальном пастеоеллезе и поя влиянием иммуномодуляторов.

По данным Г.А.Зедьенидэе (1970) у белых крыс в норме количество эритроцитов и насыщенность их гемоглобином равно 8,00-8,50млн/мл и 19,00-20,С0г£ соответственно, количество лейкоцитов - 9,00-9,50ткс/мл. В лейкограмме количество эозинофилов равно 1-<£?, баэофилов - 0-15?, нейтрофилов - 18-365?, лкмфоцитов-62-75? и моноцитов - 1-65?.

У белых крыс, зараженных культурой пастерелл, нами установлены эритропения и гипогемоглобинемия. Количество эритроцитов и насыденности их гемоглобином по сравнению с контрольной группой значительно снижено и равно 7,10+ О.бГмл^мл, 17,1С£0,79г£ к 9,00£0,31млк/мл и I9,10i0,34r^ соответственно. При введении иммуномодуляторов Т- и В- активиноЕ, эти показатели увеличены по сравнению с зараженными и ближе к контрольной (8,40£0,20млн/мл, I8,40i0,57r5?). При количественном изучении лейкоцитов установлен лейкоцитоз у животных опытных групп. Количество лейкоцитов значительно увеличено у крыс этой группы по сравнению с контрольной п равно П,00£0,53тыс/мл и 10,30£0,75тысЛк, а у контрольных - 9,40^0,37тыс/мл и 9,6С£0,52тыс/мл. Достоверное увеличение их наблюдается у белых крыс, зараженных культурой пастерелл без применения Т~ и В- актиэинов (Pj 0,05).

Анализируя данные лейкограммы, следует отметить, что у животных, зараженных культурой пастерелл, по сравнению с контрольной, наблвдается, что количество эозинофилов (6,80^0,4й) и (3,60Ю,7Б5?), кейтрофилов (56, ЗОЛ, 0,2«) и (30,0010,585?) и моноцитов (8,90^0,42%) и (5,80±0,1е$) значительно увеличено, тогда как количество лимфоцитов (28,00^0,99?) и (60,60^1,265?) резко уменьшено. У белых крыс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием Т- к В- активиков, эти показатели ближе к контрольной и равны 4,30±0,295?, 40,10i0,8&%, 6,90±0,2Сй к 1,1ЭД соответственно (F3 0,05). Интересно отметить, что лейкоцитоз у крыс, зараженных культурой пастерелл без применения Т- и В- актявинов наблюдался за счот нейтрофклов, а у зараженных и поп влиянием Т- и В- активлиов - лкмфсцитсв, что указывает на повышение иммунной резкцак у последних.

В нейтрофилах к моноцитах крови белых крыс изучены активность ми ел опероксида з ы, содержание фосфолипидов, неферментных катионкых белков и гликогена. Средний цитохимический коэффициент миелогтероксидазы в нейтрофилах крови у белых крыс контрольных и опытных групп равен 2,24i0,05, 2,2710,03 и 1,57Ю,03, 1,7110,05 соответственно; фосфолипидов - I,55tO,II, 1,6110,02 и 1,2110,07, 1,36±0,07; нефермеоттк катионкых белков - 1,64±0,02, 1,9910,10 и 1,2510,07, 1,5бЮ,03; гликогена - 2,10Ю,03, 2,071 0,02 и 1,5510,01, 1,7110,02. В моноцитах крови средний цитохимический коэффициент этих показателей у животных контрольных и опытных групп ровен - миелопероксидазы - I,0710,02, 1,0в10,03 • и 0,9310,02, 0,9610,01 соответственно; фосфолипидов - 0,671 0,005, 0,65^0,005 к C,32l0,007, 0,55Ю,02; неферментньк катионкых белков - 0,84%), 04, 0,8810,03 и 0,ЗВЮ,05, 0,5Sl0,0I; гликогена - 1,01Ю,03, 1.05Ю.02 и 0,61Ю,02 , 0,94±0,01. У крыс опытных групп кзблсдается снижение этих показателей в нейтрофялах и моноцитах по сравнении с контрольных групп. При введение Т- к В- активинов наблсдается повывение этих показателей по сравнении с зараженными. Интересно отметить, что активность миелопероксидазы, содержание фосфолипидов, неферменткых катиок-ных белков и гликогена в нейтрофилах вше, чем в моноцитах крови белых крыс. Это подтверждает данные й.Б.Черкях и др. (1957) о том, что в зрелых моноцитах костного мозга и периферической крови реакция га пероксидаэу слабополстительная.

Активность дегидрогеказ сукцината и лактата оценивали в нейтрофилах и моноцитах крови. У животных,зараненных культурой пастерелл, активность СДГ в нейтрофилах и моноцитах снижена и составляет 6,1310,17 и. 7,0010,23; гранул диформазана против П,30X0,84, II,90Ю.32 и 17,50Ю,58, 15,6010,32 гранул диформазана у контрольной группы. У белых хрнс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием Т- и 3- активинов, наблюдается достоверное увеличение активности зьпеуказанных фермеэтоз по сравнении с зараченньш и составляет 7,6Ql0,22 и 8,90Ю,70 гранул диформазана (Р3 0,05), но недостигает уровня контрольных.

■ Активность -W в нейтрофилах к'исисаитах у белых крыс зараженных культурой пастерелл, равно 4,2010,14 и 12,3010,52 гранул дкформазпна против 9,40Ю,62, 6,73t0,63 и 23,60Ю,73,

в

21,10^1,65 гранул деформазана у контрольных групп, что показывает значительное снижение ее у зараженных животных. У белых крыс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием Т- и 3-октивинов, отмечается достоверное увеличение активности фср -ментов по сравнению с зараженными и составляет 5,80£0,31 и 16,10^0,53 гранул диформазана (Р3 4< 0,05). Активность СДГ и ЛДГ была в ¡же в моноцитах, чем в нейтрофилах у животных всех групп.о.кооз еъ »1 (1380) отмечали, что гликолиз в моноцитах в отличие от гранулоцитов характеризуется более высоким уровнем продукции лактата. У моноцитов крови больше и крупнее мито-ховдрии, чем у гранулоцитов, чему соответствует более высокий уровень синтеза АТФ (в.вооз оь а1 1980).

Исследования показали, что у белых крыс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием Т- и В- активинов данные ближе к клинически здоровш животным. Полученные данные свидетельствуют об иммунной перестройке организма. Многие авторы полагают, что эти препараты оказывают стимулирущее влияние га иммунокомпстентныо клетки, обладают высокой лечебной эффективностью (В.М.Журавлев и соавт., 1990; Е.С.Воронин и соавт., 1590; Г.Е.Павлов, 1991; А.В.Жарог, 1993, 1995). Полученные нами дан!ше позволяют сделать в иод о том, что кммуномодулято-ры Т- я В- актив инь- способствуют корригирован;:») угнетенных звеньев иммунной системы при пастереллезе.

Морфофункциоьяльное состоянтге органов жалудочно-ктаечного

тракта белых крыс при экспериместадьном пастереллезе и

под влиянием иммуномодуляторов.

Проведённые нами ксследоса.ия показали, что у белых крыс пр:: зарожешги культурой пастерелл а органах жслудпчко-кгоеч-ного тракта развивается, и сснсзнсм, сильная воспалит ель? и я гиперемия, острый серозный отек, слизистая дистрофия, а также выраженные уча от:::; катарального воспаления. Ряд авторов при сэсрхострсм п остром течеюш пзстереллезо обнаруживают иомене-1я;я, сиойстзонныо сеп-гицздзт: множествен»»? крозсизлиянпя в наличие клеточные инфильтратов и слизистых м серозных оболочках (Т.В.Бпешшояа, 1954; Т.БЛ'спсесяч, 1955; Л.Й.Кокуричев ч ССОВТ., 1$94;с.1исаг*.а:г , 1960; К л ЕЪоа«ег. РЬ а1 , 1937; С.8.Кгэио1 с», а! % 1969; Й%К.,Чияа еЬ а> , 1972). У белых крыс, &арз*енчмг культурой пастором :: под влиянием кммуно -

модуляторов Т- и В- активинов патологоакатомические изменения бьяи менее выраженньш и характеризовались серозно-катералькым гастроэнтеритом.

При патогистологическом исследовании ж «гудка животных, зараженных культурой пастерелл, наблюдали некротические и десква-иатизные процессы, сосудистую реакцию и диапедез эритроцитов, изменение ямочной и железистой структуры, атрофия слизистой оболочки и прслиферативные процессы в ее собственной пластинке. У крыс, заражентгах культурой пастерелл и под влиянием ккмуио-"модуляторов Т- к 3- актиЕинов, выпеизложениые изменения менее выражены и характеризовались преобладание?/ дистрофических процессов типа слизистой дистрофии и острой воспалительной гиперо-мии. Кок показывает морфометрические данные у крыс, зараженных культурой пастерелл, толщина ямочек и желез в фуццялькых частях желудка рагна 169,00-19,20мкм и IS5,00±I3,40игм против 265,00t 14,90адсм, 290,00238,ООккм и 307,00^28,80 мкм, Э80,00£3б,00ккм у контрольных групп. У балых крыс, оаракешшх к под влияющем Т- п 3- аятавикоэ - I94,00tl6,00?.-jc.M и 211,00£10,б0мнм. Ка?с ввдно из цифровых данных, слизистая оболочка у зараженных жя-зотнкх более изменяй, чем у зараженных и под влиянием кшуно-модуляторов Т- я 2- актазикоа. Количество желез г фукдальшж частях желудка у зараженных белых крыс равно 5,46^0,51 проткз 12,70-1,2?, 13,00-1,18 у контрольных групп. У крыс, зараженных и под п л пята см 'Т- и В- актвзаиов - 8,7311,02. при сряэнени» количества -слез в желудке у опытных групп крыс наблюдается достоверное увеличение vx у четвертой группы (Р3 0,05).

3 тонкой и толстом кетечгаке белке крыс, заряженных культурой пастерелл, гистологически«} изменения характеризуются нехроткчссниы и десквакатшнгьм процессом, раскнрзинсм v пеляо-кроЕнет сосудов, разрушением ворсинок и крипт. У жкпотню:, за-раж отпас культурой пастерелл п под нлиякиек пммуномедудятороз, наблюдаются повышенная слизистая дистрофия (количество бонаяо-кщгпу клеток увеличено), слабо выряженные некроз, деехзаьггцпл

склькая гпперския. У крыс, зараженных культурой пг.стерзлл, изменение форсун к вслхч:;ш ворсиt;oit тблидзстся часто: ворсин-кя укорочены, дефермкреоаян, нехротиэирсБаны. У арке, заргмеея-нкс культуре? гпстерелл. толстит ворсинок и крипт в двенадцатиперстной лтахе равно 353,СХ£29,ООмкм к 234,00±17,20мки, г. тс-

щей - 230, ООНО, ООмкм и 210,00123,40мкм, в подвздошной - 215,001 18,00мкм и 139,00120,50шш против соответственно 514,00124,ООмкм, 602,00117,10мкм и 535,00126,бОмкм, 504,00127, ООмкм; 580,001 19,70шш, 499,00112,20мкм и 417,ООНб,ООшсм, 435,00125,ЗОмкм; 495,00116,бОмкм, 487,00124,бОмкм и 520,00122,10мкм, 472,001 10,20мкм у. хонгрольных групп. У животных, зараженных и под влиянием Т- и 3- активинов - 451,00И4,20мкм и 280,00131,ООмкм; 281,00И1,20мкм и 219,ООИО,Юмкм; 236,ООН3,ЗОмкм и 252,001 12,ООмкм. Толщина крипт в слепой кишке у белых крыс, зараженных культурой пастерелл, равно 231, ООН 5 .ООмкм, в ободочной -199,00И4,90мкм против соответственно 432,00112, ЗОмкм, 463,00! 12,ООмкм; 460,00120,ЭОмкм, 487,00110,ООмкм у контрольных групп. У крыс, зараженных и под влиянием Т- к В- активинов - 254,001 7,49мкм и 225,00119,10мкм. У белых крыс, зараженных культурой пастерелл к под влиянием шмуномсдулягоров, в пейеровых бляшках, кроме типичных фоликуллов с хорошо выраженными реактивными центрами отмечали диезные лимфоцитарные скопления без образования фолликулов да всем протяжении кишечника. Такие диффузные лимфоцитарные инфильтраты наблюдали не только в подвздошной кишке, но и в других отделах кишечника. Нам представляется, что такая форма скопления лимфоцитов без четких фолликулярных структур имеет определенное значение в отношении быстрого проявления иммунной реакции.

По нашим даннкм гистохимические изменения совпадали с гистологическими, что свидетельствует о нарушении зодитно-прнспособительной функции и регенеративного процесса в *елу-дочно-кипечном тракте у крыс, зараженных культурой пастерелл (сильно уменьшено количество ¡¿ИК-положительного вещества, ИШ и ДНД по сравнению с зараженными и под влиянием иммуномодуля-торов Т- и В- активинов). У бельк крыс, зараженных и под влиянием иммунсмодуляторсв, в перешеечной области желез желудка и тгчтпт кишечника, где происходит митотнческий процесс, наблкда-

I большее количество митозов, чем у зараженных. Количество "•ручных клеток в собственной пластинке и в подслизкстом слое келудочно-кииечнсго тракта у крис, зараженных и под влиянием ю^муномодулятороо, повкзено по сравнению с показателями у заряженных. Степень дегрануляЦии тучЕЮх клеток в третьей группе была выражена больше, чеч в четвертой. Морфсметр:ческие данные показывает, что у аараженньзе белых крыс и под влиянием кммуно-

модуляторов количество лимфоцитов и плазмоцитов в некоторых отделах желудочно-кишечного тракта по сравнению с зараженными крысами достоверно увеличено, что связано с положительным влиянием иммуномсдуляторов. ...

Морфофункпиональное состояние печени белых кзыс при экспериментальном пастередлезе и под влиянием иммуно-модуляторов.

При патологоанатомическом исследовании печени у белых крыс, зараженных культурой пастерелл, было установлено увеличение органа в объеме по сравнению с животнши контрольных групп, нередко с наличием точечных и пятнистых кровоизлияний под капсулой. У крыс, зараженных и под влиянием Т- и 3- активинов, изменения э печени такие как у зараженных.

При патогистологич.еском исследовании у белых крыс, зараженных культурой пастерелл, наблюдали резко выраженные дистрофические процессы в виде зернистой дистрофия. Сосудистая реакция проявляется выраженным расширением центральных вен и синусои-дов, полнокровием я стазсм в капиллярах с явлениями лериваску-лярного отека. В гепатоцмтах местами »трофические и некротические процессы проявляются по типу кариопикноэа и цитояерколизи-са. У животных, зараженных и под влиянием Т- и В- активинов, в гепатоцитах установлены менее выраженные дистрофические и некротические процессы.

Как показывают холичестэенные данный кейтрофил^ных лейкоцитов, лимфоцитов и макрофагов в стреме печени, у белы* крыс опытных групп наблюдается их увеличение по сравнению с контрольной группой. Количество нейтрофклькых лейкоцитов равно 2,б0£ 0,21, 2,40^0,07 у крыс контрольных групп, а у опьгтнюс групп 6,2310,35, 5,3810,49; количество лимфоцитов соответственно 3,17X0,27, 4,57^0,14; 6,7-5X1,12, 8,80Ю,25, макрофчгк - 1,071 0,10, 0,96±0,02; 1.36Ю,12, 1,8310,10. Количгстзо лимфоцитов и макрофагов достоверно вше у крыс, зараженных и под влиянием Т~ л 3— ахтивянов по сравнению с заражения (Р3 /4< 0,05).

У бел ж крас, оаракенккх ггуль турой пастерелл «'под влиянием Т- и В- актизинов количество РНЛ равномерно распределено в цитоплазме гепаготттов. Кол!гчестэо плазмоцитов в стромв гтеггогег равно 3,54^0,19 л 3,63£0,13 у контрольгшх групп, п у опыгкык групп - 6,30-0,25 я 7,20-^0,21. ДНИ более интенсивно выкзлялись

в ядрах гепатоцатов, количество гепатовитов в состоянии ми -тозов равно 1,4010,08 и 1,9ЬЮ,30 у крыс контрольных групп, а у опытных групп 0,СБ и 0,6910,15. Гранулы гликогена в цитоплазме гепатоцятов содержатся в повышенном количестве по сравнению с зараженными крысами.Отмечается достоверное увеличение количество тучных клеток е строме печени {Р3 0,05). Степень дегрануляции тучных клеток в третьей группе была выражена больше, чем в четвертой.

Монофункциональное состояние мезентеоиальнкх лимфоузлов

белых крыс при экспериментальном пастер^ллезе и под

влиянием им/уномодулрторсв.

Результаты исследований показали, что при заражении культурой пастерелл у белых крыс наблюдается комплекс воспалительных изменений в мезентериальных лимфоузлах. Димфоуглы в областн пораженного .участка кишечнике сильно увеличены в объеме и гипс— ремированы. У животных, зараженных и под влиянием инмуномодуля-торов, они незначительно увеличены и неравномерно окрашены.

При пйтогистологических исследованиях мзэентеркальных лимфоузлов белых крыс, зараженных культурой пастерелл, наблвдалн резкую гиперемию, уменьшение в размерах фолликуллов, коркового аадества и опустошение их от лимфоцитов, а т&йсе некроб к отческие процессы. Обнаруживаются гипоплазия коркового слоя, образование фолликулов без центров размножения. Реактивназ центры фолликулов нечетко выражены за счет уменьшения лимфоцитами, лейкоцитами, гистоцктами и макрофагами. Отвечали серозный отек и разрыхление капсулы, ¡'¡сяду корковк.: ь моггоеьы ве;ссгвом четкая граница отсутствует. В мозговом слое лимфоузла были выражены характерный изменения с вида гиперемзм,' отека, дпапе-деэньсс кровоизлияний, разрыхления ротикулярт.-х тканей. Некротический ггроцосс выражается а распаде лкмфоадных, макрофагаль-ных и ретикулярных »теток. У чьего:-, лишенный лимфо'.'дкых клеток, выступает в вндо неопределенной фор.ш светло-розов ого поля, в ко-горс« нередко рассеяны глыбкя хребтина омертвойЕих клотог.. Здесь -г: яд ни клеткк в состоя: та юткода, рексиза и л;:зта&« У крыс, зараженных и под вттла Т- я й- йхтквииое изблвдвотоя гкпорпласт»гчес5.'ко процессы и острая ггатсре йк, хорааие ефорг-аз» россгпих? фолшэулы и-пролиферация лкмфоЗлшггов. плас;де5ласт<& и 1а;<рофагов.

Яри анализе морфометрических даннкх мезентериалъньк лимфоузлов белых крыс, зараженных культурой пастерелл, установлено, что диаметр лимфофслликулов составляет 233,00146,бОмкм против -352,001<2,00мкм и 334,00134,90мкм у контрольных групп. У животных, зараженных и под влиянием Т- и В- активиксв наблюдается достоверное увеличение диаметров фолликулов (414,00124,вО;лш). (?3 4 < 0,05). Диаметр реактивных центров лкмфофоллккулов ■ у крыс, заражениях культурой пастерелл, составляет 130,001 13,50мкм претив 229,00^3,97мхм и 241,00121,90мкм у контрольны* групп. У крыс, зараженных и под влиянием Т- и В- активинов соответственно 169.00Иб,40мкм. Наблюдается недостоверное увеличение диаметра реактивных центров у этой' группы по сравнение с зараженными (Р3 4 > 0,05). Как видно из цифровых данных увеличение диаметров лимфофолликуллов мезентериальных фоллику-1 лев у белых крыс, зараженных и под влиянием Т- и В- активинов связано с гиперплазией.

Наши морфометрические исследования тучных клеток в меэен-териальнкх лимфоузлах показали, что количество их достоверно увеличено у белых крыс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием иммуномодуляторов Т- и В- активинов по сравнении с зараженными (Р3 4 < 0,05). Степень дегрануляции тучньтх клеток в группе животных, где применяли Т- и 3- активины, была выражена меньше, чем в зараженной группе. У крыс, зараженных культурой пастерелл и под влиянием Т- и 3- активинов, содержание Frill и ДКЛ а клетках лимфоузлов увеличено по сравнению с зараженными. Количество митозов также увеличено у животных данной группы.

Латогигтологические и гистохимические исследования дьют основание предполагать, что з мезентеральных лимфоузлах белых крыс, заракекных и под влиянием и 3- активинов, возникают кммукоморфологкческие реакции, которые мобилизуют организм на борьбу с возбудителем. Это доказывается активацией клеточных эл-ментоз лимфоузлов с позмзенной пиронинофилпей и увеличением количества плазмоцитоз и ;,тенее зырачешп-ми патологическикз? изменениями.

ВЫВОДЫ

1. У белых крыс, зараженных Р.ти^ос1<5а , серотипом В, по сравнению со здоровыми животными, в организме развиваются изменения клеток периферической крови: эритропения и гипогемогло-бинемия, лейкоцитоз, эозинофилия, нейтрофилия, моноцитоз и лимфоцитопения.

2. У белых крыс, экспериментально зараженных культурой пастерелл, установлены также цитохимические изменения клеток периферической крови: снижение активности миелоперсксвдазы, содержания неферментных катионных белков, фосфолипидов и гликогена в нейтрофилах и моноцитах.

3. Понижение активное?;: двух изученных окислительно-восстановительных ферментов (дегидрогеназ - сукцината и лактата) в нейтрофилах и моноцитах периферической крови белых крыс отражают гилогликемичеекий сдвиг в энергетическом обмене при экспериментальном пастереллезе.

4. У белых крыс, зарвженных культурой пастерелл и под влиянием иммуномодуляторов Т- и 3- актквинов, установлена достоверная тендеадия к восстановлении нормального состояния эритрспоэгй и лейкопоэза в организме, с повышением лимфоцитарной активности периферической крови.

5. Повышение активности СДГ, ДДГ и миелопероксидазы, увеличение содержания неферментнкх катионных белков, фосфолипидов и гликогена в нейтрофилах и моноцитах периферической крови белых крыс связано с проявлением иммунной перестройки, вызванной им-муномодуляторами Т- и 3- активинами з организме белых крыс, экспериментально зараженных культурой пастерелл.

6. У белых крыс, экспериментально зараженных культурой пастерелл, наблюдается острое катарально-десквамативное воспаление органов желудочно-кишечного тракта, альтеративные процессы в печени, острый серозно-некротическнй лимфаденит. При этом развиваются атрофия, некроз и десквамация эпителия слизистых оболочек,'гиперемия, зернистая дистрофия печени, снижается количество лимфоцитов в корковом и мозговом веществе мезентерк-альных лимфоузлов и пейеровых бляшек.

7. При заражении белых крыс культурой пастерелл и под влиянием иммуномодуляторов Т- и В- активинов установлены ограниченные и менее выраженные поражения органов келудочно-килечного

тракта, печени и меэентериальннх лимфоузлов, диффузная и очаговая лимфоцитарные реакции, повыяеннкй лейкоцитоз, гиперплазия клеток мононуклеарно-макрофаг&льной и плазмоцитарной системы!

а) В желудке и кишечнике выявлены усиление секреторной активности органа: увеличение высоты эпителиального покрова и содержание РЯЛ в нем, снижение интенсивности дистрофических процессов в клетках слизистой оболочки, увеличение количества бокаловидных клетск и содертаккя Е1К-положигельных веществ в них, а также увеличение количества гранулированных тучных клеток в собственной пластинке и в подслизистом слое желудка и кишечника. .

б) В печени повивается содержание гликогена и снижается интенсивность дистрофических процессов в гепатоцитах, а также увеличивается количество гранулированных тучных клеток в строме органа.

в) 3 мезентериальных лимфоузлах установлена гиперплазия лимфоцитов, плаэмоцитов, макрофагов и увеличение количество гранулированных тучных клеток.

СЗЗДЕНЖ С ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСЛСЛЬЗСЗАЖИ

псдучекикх научных аз/;ьТАТсз

Полученные данные используются в учебном процессе и в лабораторной практике кафедры патологической анатомии и физиологии им.З.М.Коропова Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени Л /Л .Скрябина.

РЕХШЕДЦАЦИ ПО ИСЛСПЬЗСЗАН® ¿1СЛУЧЕККЫХ НАУЧНЫХ зкзодоз

I. Установленные цитохимические показатели в нейтрофклах и монсшхтах периферической крови, а также гистологические, гистохимические и морфсметрические параметры органов келудочко-кикечнсго тракта, печени и мезентериальных лимфоузлов крыс при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммуномодуляторов Т- и 3- активкнсз рекомендуется использовать: в научной работе и лабораторной практике для изучения патогенеза, патоморфо-и иммуногеза в организме животных при пастереллезе, для раслиф-роэки патогенетических механизмов действия иммунсмодулятороп

Т- к В- активинов.

2. Показатели цитохимических реакций периферической крови, дистрофических, некротических и компенсаторных процессов в органах келудочно-кжзечного тракта и регионарных лимфоузлах крыс рекомендуется использовать при написании соответствующих разделов учебных пособий jio патологической анатомии и в учебном процессе в зооветеринарных вузах.

•СШСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

I. Наров A.B., Гловер К.Н. Морфологические показатели крови и иммуноморфологические изменения органов пищеварения белых крыс при экспериментальном пастереллезе и под влиянием иммуномоду -ляторов. Актуальные вопросы звразных и незаразных болезней животных. Сборник научных трудов. Мое. гос. акад. вет. мед. и биотех. (ШШМиБ). -Ü..I996.

размножено на ротапринте Itü экз., зак. 13и. Тццогуа^ил "НЯолС", лясиицкая, За.