Токсико-фармакологические свойства новой композиции полизон+тиамина бромид и ее применение при гастроэнтеритах поросят

Тухфатова, Регина Фановна

Диссертации по ветеринарии → Ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Токсико-фармакологические свойства новой композиции полизон+тиамина бромид и ее применение при гастроэнтеритах поросят

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Тухфатова, Регина Фановна Уфа 2006 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 16.00.04

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Токсико-фармакологические свойства новой композиции полизон+тиамина бромид и ее применение при гастроэнтеритах поросят

На правах рукописи

ТУХФАТОВА РЕГИНА ФАНОВНА

ТОКСИКО-ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОЙ КОМПОЗИЦИИ ПОЛИЗОН+ТИАМИНА БРОМИД И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ ГАСТРОЭНТЕРИТАХ ПОРОСЯТ

16.00.04 — ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Казань 2006

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Исмагилова Асия Фахретдиновна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Новиков Валерий Александрович;

доктор биологических наук, профессор Фролов Виктор Петрович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Оренбургский

государственный аграрный университет»

Защита диссертации состоится «с» 2006 года в часов

на заседании диссертационного совета Д-2^.012.01 при ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» по адресу: 420075, Республика Татарстан, г. Казань, Научный городок - 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных».

Автореферат разослан ноября 2006 года.

Ученый секретарь Степанов

диссертационного сов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Свиноводство - наиболее рентабельная отрасль животноводства, и при правильной организации быстро окупает затраты и дает большие доходы. В связи с переходом на рыночные отношения свиноводство оказалось в тяжелом финансовом положении.

На свинокомплексах Республики Башкортостан за последние годы наблюдается большое сокращение поголовья, что приводит к снижению производства свинины. Поэтому перед работниками сельского хозяйства ставится задача довести в 2006 году до 60 тыс. тонн производство свинины и восстановить поголовье свиней до 900 тыс. ед. в общественном секторе.

Несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению болезней желудочно-кишечного тракта, вопросы патогенетического лечения остаются в центре внимания ученых и практических ветеринарных специалистов и являются актуальной проблемой (Папуниди К.Х., Иванов A.B., Зухрабов М.Г., 2001; Софронов В.Г., 2001; Госманов Р.Г., 2001; Тремасов МЛ. с соавт., 2001).

Из всех болезней сельскохозяйственных животных 90 % составляют незаразные заболевания, которые вызываются, главным образом, условно патогенной микрофлорой. Наибольший удельный вес из них занимают болезни органов пищеварения и органов дыхания (Шахов А.Г., Бузлама B.C., 1990; Рахматуллин Э.К. с соавт., 2000; Папуниди К.Х. с соавт., 2002; Дроздова Л.И. с соавт., 2003; Герунов В.И., Герунова JI.K. с соавт., 2003; Самородова И.М., Рабинович М.И., 2004).

В последние годы интенсивно расширяется выпуск биологически активных препаратов различной направленности для лечения патологических процессов, а также средств, применяемых для повышения продуктивности животных (Ноздрин Г.А., 1996; Жаров A.B., 2003; Дорожкин В .И. с соавт., 2003; Донник И.М., Шкуратова И.А., 2003; Александров И.Д., Антипов В.А. с соавт., 2004).

Целенаправленный синтез и получение новой лекарственной композиции с необходимыми фармакологическими и биологическими свойствами являются одним из методов познания общих и частных закономерностей болезни. Прогресс фармакологии характеризуется поиском и созданием новых безопасных лекарственных препаратов.

В связи с вышеизложенным в ООО «Поливит» под руководством доюора технических наук Струнина Б.П. проведен синтез фосфорнокислой соли 2-амино-4-метилтио-(8-оксо-8-имино)-масляной кислоты, зарегистрированной нами в Федеральном институте промышленной собственности под торговым названием «Полизон». На основе доступного крупнотоннажного производства метионина разработан четырехстадийный способ получения препарата «Полизон» с выходом 62 — 63 %. Получено наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ от 26 июня 2002 г.

(протокол № 2). Тиамина бромид применяют с профилактической и лечебной целью при нервно-токсичесмой форме диспепсии у поросят-сосунов, диспепсии телят, гастритах и энтеритах с явлениями атонии. На основе Полизона и витамина В, получена композиция Полизон+Тиамина бромид, сочетающая несколько видов фармакологической активности.

1.2. Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение токсико-фармакологических свойств новой композиции Полизон+Тиамина бромид и ее применение при гастроэнтеритах поросят.

Для реализации поставленной цели нами были определены следующие задачи:

1. определить острую токсичность композиции для белых мышей и

крыс;

2. изучить иммунологические показатели (влияние на титр агглютининов, пролиферативную и миграционную активность полипотентных стволовых кроветворных клеток) лабораторных животных;

3. изучить влияние на аминокислотный состав крови больных гастроэнтеритом поросят;

4. изучить влияние на биохимические показатели крови больных гастроэнтеритом поросят;

5. изучить влияние на секреторную активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят;

6. изучить влияние на прирост живой массы поросят;

' 7. провести гистологические исследования желуцка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят.

1.3. Научная новизна. Впервые установлены отдельные механизмы иммунотропного действия композиции Полизон+Тиамина бромид на лабораторных животных и поросятах. Определено влияние на аминокислотный состав и биохимические показатели крови, на секреторную активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят. Впервые проведены гистологические исследования желуцка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят.

1.4. Теоретическая и практическая значимость. Результаты выполненных исследований позволили предложить композицию Полизон+Тиамина бромид как конкурентоспособный препарат для повышения резистентности организма и лечения гастроэнтеритов поросят. По результатам исследований оформлена заявка на патент № 2005137089/13(041395) от 06.02.2006 (Препарат для повышения продуктивности и резистентности животных).Получено наставление от 26 июня 2002 г. Департамента ветеринарии, сертификатсоответствия № РОСС 1Ш. П096. В 10347.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту:

• фармакологический спектр и механизм иммуномодулирующего действия композиции Полизон+Тиамина бромид;

• степень безвредности композиции Полизон+Тиамина бромид;

• обоснование использования композиции Полизон+Тиамина бромид для повышения резистентности и лечения гастроэнтеритов поросят.

1.6. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и получили положительную оценку на:

- международной научно-практической конференции «Наука -сельскохозяйственному производству и образованию» (Смоленск, 2004);

- XII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005);

- Всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК: региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005);

- XVII Международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2005);

- международной научно-практической конференции «Проблемы и перспективы ветеринарии в XXI веке» (Улан-Удэ, 2005);

международной конференции «Средства и методы обеспечения экологической безопасности» (Астрахань, 2005);

конференции «Перспективные направления научных исследований молодых ученых и студентов Урала и Сибири» (Троицк, 2005);

- Всероссийской научно-практической конференции «Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»» (Уфа, 2006);

- 17-й международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2006);

а также опубликованы в рецензируемых журналах:

- Экологические системы и приборы, 2005, № 9. - С. 57-58

- Свиноводство, 2006, № 5. - С. 23-24

Настоящая работа выполнена в соответствии с тематикой научных исследований ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (номер государственной регистрации 01.86.0-07.68.78).

1.7. Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

1.8. Внедрение результатов исследований: опытно-производственные испытания проведены в СПК колхоза «Октябрь» Кугарчинского района, ИП «Ханафина Ф.З.» Уфимского района Республики Башкортостан.

1.9. Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы, включающего 155 источников, из них 115 отечественных и 40 зарубежных авторов, и приложения. Работа изложена на 120 страницах машинописного текста, содержит 13 таблиц и 17 рисунков.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследований

Экспериментальные лабораторные исследования проведены на кафедре «Внутренние незаразные болезни, клиническая диагностика и фармакология» ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» на 210 белых беспородных мышах с живой массой 18-20 г, на 180 белых беспородных крысах с массой 120-200 г, на 35 кроликах с массой 2 кг, а также в условиях производства: СПК колхоза «Октябрь» Кугарчинского района, ИП «Ханафина Ф.З.» Уфимского района Республики Башкортостан на 120 поросятах крупной белой породы в возрасте 3-6 месяцев.

Лабораторные животные содержались в одинаковых зоогигиенических условиях вивария. Кормление животных проводили согласно суточной потребности (Ковалевский К Л., 1968).

Изучение острой токсичности композиции Полизон+Тиамина бромид проводили по общепринятой методике (Саноцкий И.В., 1970; Елизарова О.Н., 1971).

Противоязвенную активность определяли на моделях язв, вызванных индометацином и ацетилсалициловой кислотой, путём двукратного введения в желудок крысам через зонд с учётом трехкратных эффективных доз (Аничков С.В., Заводская И.С., 1965).

Реакцию агглютинации и титр агглютининов ставили по общепринятой методике с живой культурой протея Ох2 (Земсков A.M., 1982; Trill J.E., Мс Culloch R.A., 1963).

Влияние композиции Полизон+Тйамина бромид на пролиферативную и миграционную активность полипотентных стволовых кроветворных клеток и на образование эндогенных колоний в селезенке мышей изучалось при лечебном и профилактическом введении (Хаитов P.M., Арипова Т.У., 1982).

Содержание аминокислот в сыворотке крови свиней определяли на аминокислотном анализаторе LC 3000 фирмы «Eppendorf-Biotonic» (Германия).

Определение бактерицидной активности сыворотки крови проводили согласно методике, основанной на учете изменений оптической плотности среды, содержащей микробную взвесь и сыворотку крови (по Мишелю и Т]реферс, 1956, в модификации Храбустовского И.Ф., МарковаКХМ. и др., 1974).

Определение фагоцитарной активности нейтрофилов проводили по методу Бермана В.М., Славской Е.М. (1958), основанном на учете числа бактерий, захваченных нейтрофилами в процессе их совместного инкубирования в термостате.

Кислотность желудочного содержимого исследовали классическим методом Тепфера с использованием индикаторов, обладающих свойствами изменять окраску в определенной зоне pH среды (Кондрахин И.П., Курилов Н.В., Малахов А.Г. и др., 1985).

Определение переваривающей силы желудочного сока проводили по методу Метта (Беляков И.М., 1975).

Биохимические исследования сыворотки крови поросят проводили согласно общепринятым методикам (Кондрахин И.П., 1985).

Для гистологического исследования кусочки тканей фиксировали в 10 %-ном нейтральном формалине, после обезвоживания в серии спиртов возрастающей концентрации заливали в парафин по общепринятой методике. Срезы готовили на микротоме LEICA RM 2145, окраску проводили гематоксилином и эозином (Кононский А.И., 1976).

Микроскопические исследования проводились с использованием светового микроскопа JENAVAL фирмы «CARL ZEISS» (Германия).

Статистическую обработку цифровых данных проводили с использованием прикладной программы MS Excel©, включающей подсчет средних величин (М), средней ошибки (ш), среднеквадратичных отклонений выборки (5), определение степени достоверности по Сгьюденту (Стрелков Р.Б., 1996).

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Изучение острой токсичности композиции Полизон+Тиамина

бромид

Параметры острой токсичности композиции Полизон+Тиамина бромид (таблица 1) определяли на белых беспородных мышах с живой массой 18 — 20 г и белых крысах с массой 180 —190 г при пероральном введении. Исследуемую композицию вводили в различных дозах — от 800 до 2600 мг/кг.

Таблица 1 - Параметры острой токсичности композиции Полизон+Тиамина бромид и Полизона

Препарат Ввд животного LD16 LD» Щи Коэффициент вариабельности смертельных доз (К)

Полизон+Тиамина бромид Мыши 1050 1615,01 ±101,15 2220 2,11

Крысы 1500 2050,63 ±Щ69 2350 1,57

Пализон Мыши 760 1070,00±89,40 1440 1,89

Крысы 1130 1454,17±79,32 1760 1,56

При введении композиции Полизон+Тиамина бромид в дозах 800 - 1000 мг/кг у мышей отмечалось незначительное угнетение, мыши забивались в угол, переставали двигаться, как бы «застывали» на месте. Через 2-3 часа после введения композиции животные приходили в нормальное состояние.

При введении композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе

1600 — 2600 мг/кг признаки отравления проявлялись через 15-25 минут в виде подергиваний лапок, запрокидывания головы, в последующем животные совершали плавательные движения на животе, отмечались серозные выделения из носовой и ротовой полостей. Смерть наступала через 60-70 минут после введения препарата в токсической дозе. При введении композиции Полизон+Тиамина бромид в среднетоксических дозах у опытных животных отмечалось угнетение с понижением двигательной активности, у выживших мышей и крыс аналогичные симптомы отравления исчезали через 3-5 часов.

При повторном введении химических веществ в организм животных может наступить усиление токсического действия. В связи с этим нами изучены кумулятивные свойства композиции Полизон+Ткамина бромид. Кумулятивные свойства композиции Полизон+Тиамина бромид изучены на белых мышах-самцах массой 18-20 г при пероральном введении. В течение 10 дней животные получали суммарную дозу исследуемой композиции. Методом интегрирования по Беренсу определены токсические параметры композиции Полизон+Тиамина бромид при подостром опыте. Коэффициент кумуляции К = 2.

Таким образом, в результате проведенных исследований нами установлено, что композиция Полизон+Тиамина бромид относится, согласно ГОСТ 12.1.00.7-76, к Ш классу опасности.

2.2.2. Противоязвенная активность композиции Полизон+Тиамина

бромид

Причинами возникновения язвенной болезни являются нарушение равновесия между агрессивными факторами для слизистой оболочки, такими как применение нестероидных противовоспалительных препаратов, инфицирование пилорическим гелиобактером, протективные факторы, секреция пепсина.

Противоязвенная активность Полизона, введенного животным в дозе 1 мг/кг, составляла 2,62; в дозе 2 мг/кг - 4,0; в дозе 3 мг/кг - 4,42; в дозе 5 мг/кг - 4,66, а противоязвенная активность композиции Полизон+Тйамина бромид -5,12 при использовании в качестве ульцерогенного вещества раствора ацетилсалициловой кислоты. При применении в качестве ульцерогена индометацина получены следующие результаты: при введении Полизона в дозе 1 мг/кг противоязвенная активность составляла 1,14; в дозе 2 мг/кг - 1,60; в дозе 3 мг/кг - 1,64 и в дозе 5 мг/кг - 2,48, а при использований композиции Полизон+Тиамина бромид - 2,78. Препарат считается эффективным, если его противоязвенная активность >2.

2.2.3. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на массу внутренних органов крыс

Опыты по изучению влияния композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 2+2 мг/кг на массу органов желудочно-кишечного тракта (желудок, печень,

поджелудочная железа) и общую массу тела животных проводили на беспородных белых крысах с живой массой 120-130 г. Использовали 16 животных, из которых были сформированы 2 группы: опытная и контрольная. Препарат вводили один раз в сутки в дозе; 2+2 мг/кг внутрижелудочно с помощью зонда в течение 10 дней. По истечении 10 суток животных декапитировали и взвешивали внутренние органы.

У подопытных крыс под влиянием исследуемой композиции наблюдается увеличение общей массы тела животного (на 15,4 г по сравнению с контрольными животными) и массы внутренних органов: масса желудка в опытной группе больше чем в контроле на 0,308 г; печени - на 1,534 г; поджелудочной железы - на 0,099 г.

Таким образом, композиция Полизон+Ткамина бромид в дозе 2+2 мг/кг, задаваемая в течение 10 дней, оказывает стимулирующее влияние на развитие всего организма и органов желудочно-кишечного тракта: желудка, печени и поджелудочной железы.

2.2.4. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид

на титр агглютининов кроликов

До вакцинации титры агглютининов в группах кроликов, получавших гидрокортизон, были самые низкие. У животных, получавших Полизон+Тиамина бромид+гидрокортизон, титры агглютининов были значительно выше (Р < 0,05).

Полизон+гидрокортизон и Полизон+Тиамина бромид+гидрокортизон повышают у кроликов титр естественных агглютининов к кишечной палочке. Самые высокие титры агглютининов отмечены на 9 день после вакцинации.

В этих же условиях Полизон и Полизон+Тиамина бромид повышают бактерицидные и протекгивные свойства сыворотки кроликов.

В результате проведенных исследований установлено, что применение композиции Псшизон+Т^амина бромид в дозе 5+4 мг/кг на фоне гидрокортизона более эффективно, чем Полизона в дозе 5 мг/кг+гидрокортизон. Исследуемая композиция стимулирует выработку агглютининов и повышает протекгивные свойства сыворотки крови кроликов.

2.2.5. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид

на пролиферативную и миграционную активность полипотеитных стволовых кроветворных клеток

Известно, что большинство полипотентных стволовых кроветворных клеток костного мозга мышей постоянно мигрирует в другие кроветворные и лимфоидные органы и ткани, выполняя тем самым пул коммитированных предшественников всех ростков гемо — и лимфопоэза, обладающих

ограниченной способностью к самоподдержанию (Петров Р.В., Манко В.М., 1971; TYill J.E., Мс Culloch R.A., 1963).

Колониеобразующая реакция стволовых гемопоэтических клеток может быть количественно определена подсчетом числа потомков в тесте с эндогенным колониеобразованием (Козлов В.А. с соавторами, 1968, 1978, 1980).

В результате исследований нами было установлено, что Полизон и композиция Полизон+Тиамина бромид как при профилактическом, так и при лечебном введении внутрь усиливают миграционную активность стволовых кроветворных клеток.

Так как многие средства обладают выраженным митотоксическим действием, которое приводит к поражению кроветворных и других быстро пролиферирующих тканей, существенным в системе комплексной оценки специфической фармакологической активности препаратов является определение их избирательной активности по отношению к клеткам лимфоидной ткани. Для этой цели используется экспериментальная модель, позволяющая одновременно определять митотоксическое и лимфотоксическое действие исследуемых соединений.

Применение Полизона в дозах 4, 5, 6 мг/кг и композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг не оказывало митотоксического действия (не влияло на размножение эндогенных стволовых клеток).

Композиция Полизон+Тиамина бромид отменяла ингибицию КОЕ аплогенными лимфоцитами за счет лимфотоксического эффекта, который не превышал 30 % и с увеличением дозы препарата не возрастал. ■

Это указывает на влияние композиции на функциональную активность Т—клеток — эффекторов и отсутствие цитотоксического эффекта на клетку.

2.2.6. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на клеточные факторы защиты организма больных гастроэнтеритом поросят

Огромная роль принадлежит иммунной защите, которая обеспечивает адаптацию организма к постоянно меняющимся факторам внешней и внутренней среды, в результате чего сохраняется гомеостаз, который необходим для поддержания нормальной жизнедеятельности организма и его резистентности.

Учитывая вышеизложенное, нами изучены клеточные факторы защиты организма поросят.

Материалом для работы послужили 40 больных гастроэнтеритом поросят, подобранных по принципу аналогов, в возрасте 3 месяцев, которых разбили на 4 группы по 10 животных в каждой, получавших:

-I группа -Полизон в дозе 5 мг/кг;

-П группа — композицию Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг;

-Ш группа — Тиамина бромид в дозе 4 мг/кг;

-IV группа — контрольные животные.

Поросятам опытных групп вводили исследуемые соединения в течение 10 дней. Поросят IV группы лечили согласно схеме, практикуемой в хозяйстве: полуголодная щадящая диета, вяжущие средства (бесалол), в качестве антимикробного средства применяли фталазол, витаминизацию проводили тривитамином, при нарастании симптомов сердечно-сосудистой недостаточности, интоксикации и обезвоживания внутривенно вводили глюкозу с кофеином.

У больных гастроэнтеритом поросят наблюдалось угнетение, снижение аппетита, рвота, профузный понос. Каловые массы содержали непереваренные частицы корма с примесью слизи. Температура тела была повышена до 41,0 - 41,5 °С, тахикардия (частота сердечных сокращений 120 - 135. ударов в минуту). При пальпации области желудка и кишечника у поросят заметно выражена болевая реакция.

Фагоцитарная активность лейкоцитов в I группе животных составила 24,60 ± 0,77 %, во П группе - 26,70 ± 0,99 %, в Ш группе - 20,30 ± 0,67 %, в IV — 19,40 ± 0,59 %. Фагоцитарная активность лейкоцитов у животных II группы была На 37,6, а в I группе — на 26,8 % выше по сравнению с животными IV группы.

Фагоцитарный индекс у поросят I группы больше на 46,7, у поросят П группы на 66,7 % больше по сравнению с данными IV группы.

Фагоцитарное число в III и IV группах находится приблизительно на одинаковом уровне (1,12 ± 0,09 и 1,10 ± 0,11 микробных тел), во II группе животных — 2,09 ± 0,21 микробных тел, в I группе —1,95 ± 0,15 микробных тел.

Бактерицидная активность крови поросят во II группе выше на 36,8 %, в I группе — на 26,7 % по сравнению с контролем.

Показатели клеточных факторов естественной резистентности находятся на высоком уровне в крови животных I и II групп. Особенности организма поросят требуют повышенной активности лейкоцитов для того, чтобы более активно реагировать на воздействие вредных факторов внешней среды.

2.2.7. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на аминокислотный состав крови и прирост живой массы поросят

Известно, что протеиновая питательность кормов определяется количеством протеина. Свободные аминокислоты, в отличие от жиров, углеводов, минеральных веществ и витаминов, в организме не депонируются, приток их должен быть постоянным и ритмичным. При недостатке в рационе даже одной незаменимой аминокислоты животное восполняет его за счет поедания большего количества корма, затраты которого в этом случае на получение единицы продукции увеличиваются, и, более того, ухудшается использование всех питательных веществ рациона.

Свободные аминокислоты крови и плазмы могут служить показателем белкового питания. При несбалансированном белковом и аминокислотном кормлении животных, в частности при недостатке в нем лизина и метионина либо при нарушении их усвояемости из корма, отмечается понижение содержания аминокислот в плазме крови и, соответственно, уменьшается их использование в качестве строительного материала для тканей организма животных.

Результаты исследований отражены в таблице 2.

Таблица 2 - Влияние композиции Полизон+Тиамина бромидна аминокислотный состав крови поросят

Аминокислоты 1 группа (контроль) 2 группа (Полизо»+Тиамина бромвд 5+4 мг/кг) 3 группа (Полиюн 5 мг/кг)

мг% мг% госягашиок кмропщ% мг% пзопшвиок кирапк}%

Лизин 1,44 ±0,09 1,91 ±0,11 132,64 1,79 ±0,15 124,31

Мепюнин 0,19 ±0,01 0,51 ±0,04 268,42 0,45 ±0,03 236,84

Лейцин 1,59 ±0,11 1,78 ±0,09 111,95 1,66 ±0,12 104,40

Июлейцин 1,71 ±0,12 1,72 ±0,13 101,18 1,71 ±0,09 100,00

Валин 3,45 ±0,18 3,88 ± 0,21 112,46 3,59 ±0,19 104,06

Треонин 0,72 ±0,06 0,96 ±0,07 133,33 0,85 ±0,07 118,06

Гистидин 1,13 ±0,09 1,86 ±0,12 164,61 1,58 ±0,13 139,82

Аргинин 1,19 ±0,08 1,31 ±0,11 110,08 1,25 ±0,11 105,04'

Фенилаланин 1,17±0,07 1,66 ±0,13 141,88 1,55 ±0,08 132,48

Незаменимые аминокислоты всего 1259±081 15,59±1,01 12ЭДЗ Н43±Ц97 114,61

Общий белок, 1% 6,61 ±0,57 7,21 ±0,60 109,07 7,01 ±1,01 106,05

При введении в рацион поросят Полизона в дозе 5 мг/кг и композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг и на фоне общего увеличения белка в сыворотке крови отмечается и увеличение незаменимых аминокислот. Наиболее ярко выражено увеличение лимитирующих аминокислот, таких как метионин (на 136,84 % при введении Полизона и на 168,42 % при введении композиции) и лизин (соответственно на 24,31 % и 32,64 %). Кроме того, значительно увеличивается количество гистидина (на 39,82 % и 64,61 %), фенилаланина (32,48 % и 41,88 %) по сравнению с контролем.

Таким образом, установлено, что композиция Полизон+Тиамина бромид способствует более значительному возрастанию количества аминокислот в сыворотке крови по сравнению с Полизоном, что положительно сказывается на темпах роста поросят.

Анализируя результаты, нами отмечено, что наиболее высокие показатели

среднесуточного, относительного и абсолютного прироста живой массы наблюдаются у поросят, получавших композицию Полизон+Тиамина бромид.

Так, в I группе среднесуточный прирост составил 690,00 ± 3,01 г, во П группе - 786,00 ± 4,07 г, в Ш группе - 609,00 ± 2,04 г, а в контрольной - 543,00 ± 3,11 г. Масса поросят после опыта в I группе составила 44,20 ± 4,12 кг, во П -45,60 ± 4,33 кг, в Ш - 40,30 ± 3,94 кг, в контрольной - всего 30,70 ± 3,75 кг. Следует отметить, что в контрольной группе 3 поросенка пали. При применении композиции Полизон+Тиамина бромид рецидивы заболевания нами не зарегистрированы, что свидетельствует о коррекции иммунного статуса и положительном влиянии на гематологические и биохимические показатели крови больных поросят.

2.2.8. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на биохимические показатели крови больных гастроэнтеритом поросят

В доступной ветеринарной литературе имеются работы, посвященные определению трансаминаз, холестерина и других биохимических показателей функции печени, но почти нет данных об изменениях этих показателей у больных поросят при гастроэнтерите.

В связи с изложенным выше нами была изучена динамика активности трансаминаз (аспартатаминотрансферазы — ACT, аланинаминотрансферазы -AJIT), холестерина, билирубина, общего белка и некоторых других биохимических показателей.

При острой форме гастроэнтерита исследуемые показатели резко изменяются: снижаются содержание общего белка (на 30,67 % по сравнению со здоровыми животными), гликопротеидов (на 31,08 %), сахара (на 51,67 %), пировиноградной кислоты (на 62,50 %), уровень общих липидов (на 47,99 %), холестерина (на 35,47 %). Во время болезни наблюдается билирубинемия. Количество общего билирубина по сравнению со здоровыми поросятами увеличивается с 2,74 до 13,68 мкмоль/л. Резко повышается содержание в крови АЛТ (до 1,24 мкмоль), ACT (до 1,39 мкмоль), ЛДГ (до 850,0 ед. акт.), альдолазы (до 21,06 ед.), щелочной фосфатазы (до 18,43 мг%).

После проведенного лечения мы наблюдали следующие изменения (таблица 3).

Из данных таблицы 3 видно, что на 10 день лечения у поросят II группы произошло восстановление биохимических показателей сыворотки крови до нормативного уровня. Так, количество белка увеличилось с 55,89 ± 4,33 до 82,25 ± 5,74 г/л, что на 47,16 % больше по сравнению с исходными данными; также увеличилось содержание гликопротеидов (на 44,37 %), сахара (на 102,96 %), пировиноградной кислоты (на 171,11 %), общих липидов (на 87,32 %), холестерина (на 59,60 %). Высокие показатели общего белка, сахара, пировиноградной кислоты, липидов и холестерина можно объяснить усиленным белковым, углеводным, липоидным обменом в печени.

Таблица 3 - Биохимические показатели сыворотки крови у больных гастроэнтеритом поросят на 10 день лечения

Я 1 в 1 С а? в- stf |1 si | |

I 7031 ¿6ДЗ 501,11 ±32,01 Я71 ±027 123,82 ±12,08 3,71 ¿ом 1Д) ±0,17 428 Щ4И 067 ±0,05 1,09 ±0® 40137 ±33£8 ¿075 m ±007

II 8£25 ±5,74 543,62 ±29,65 412 ±032 Щ59 ±11,09 3,89 ±035 2,41 Щ22 Д08 ±0,22* Q49 Щ(В 065 ¿005 351,08 ¿2936 601 ¿055 ¿005

ш ±здз 47831 ±38,06 2,75 ±«26 93,15 ¿9,07 ззо ±029 1,68 ¿Д15 щда 081 ¿007 w ¿oil 575,45 ¿45,72 1132 ¿0£4 9,74 ¿008

IV 6Q88 ±527 422,09 ±2236 2,19 ¿020 67,02 ±5,05 ±028 1^8 ¿012 12,14 ±1,08* 097 ¿007 1^9 ¿021* 7D6J84 ¿6657 1536 ±139 12,08 ¿009

Также нормализовалось содержание общего билирубина и ферментов, что указывает на восстановление соотношения процессов синтеза и элиминации ферментов в клетках и холестеринообразовательной функции печени. Количество общего билирубина снизилось с 13,68 ± 1,05 до 3,08 ± 0,22 мкмоль/л, AJIT - с 1,24 ± 0,11 до 0,49 ± 0,03 мкмоль, ACT - с 1,39 ± 0,09 до 0,65 ± 0,05 мкмоль, ЛДГ - с 850,0 ± 43,12 до 351,08 ± 29,36 ед. акт., альдолазы - с 21,06 ± 3,60 до 6,01 ± 0,55 ед., ЩФ - с 18,43 ± 0,66 до 8,05 ± 0,05 мг%.

У животных I и III групп нормализация биохимических показателей происходила менее интенсивно по сравнению с животными II группы, что говорит о более медленном восстановлении функций печени и угнетении метаболизма углеводов, липидов и протеинов.

Таким образом, нами установлено, что под влиянием композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг происходит улучшение биохимических показателей крови за счет восстановления функции печени и активизации белкового, липидного, углеводного обменов.

2.2.9. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на секреторную активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом

поросят

В патогенезе нарушения работы желудочно-кишечного тракта проявляется сумма факторов, между которыми возникают причинно-следственные отношения: повышение общей кислотности желудочного содержимого, снижение количества связанной и свободной соляной кислоты; ферментопатий, проявляющихся снижением переваривающей способности; интоксикация организма; нарушение обмена веществ; дистрофия органов и тканей.

Таблица 4 - Функциональное состояние органов пищеварения поросят, больных гастроэнтеритом

№ группы Желудоч}юе содержимое

общая кислотность (титр, ед.) свободная соляная кислота (титр, ед.) связанная согийяюсгсла (тигр, ед.) переваривакхдая шла (мм)

Исходные данные

77,40 ±737 8,50 ±0,12 7,80 ±0,18 0,70 ±0,02

5 день

I 61,80 ±4,84 10,70 ±0,48 10,10 ±1,01 0,90 ±0,13

П 58,50 ±3,81* 15,90 ±1,49 13,10 ±1,05 13 ±0,09

Ш 66,80 ±5,95 8,70 ±0,82 9,50±0,17 0,80 ±0,06

IV 73,40 ±6,93 8,00 ±0,61* 8,50 ±0,79 0,70 ±0,05

10 день

I 58,70 ±433 15,50 ±1,01 15,80 ±1,08 2,00 ±0,29

П 47,40±2,88* 23,20 ^2,01 15,50 ±0,93 5,20 ±0,46

ш 60,80 ±4,62* 10,00 ±2,13* 10,10 ±1,64 1,50 ±0,18

IV 69,70 ±5,66 9,40 ±3,29* 9,50 ±1,85 1,10 ±0,11

Нами установлено (таблица 4), что во время разгара болезни у поросят наблюдается значительное увеличение общей кислотности (77,40 ± 7,37 титр, ед.), тогда как содержание свободной и связанной соляной кислоты снижено (8,50 ± 0,12 и 7,80 ± 0,18 титр, ед.), также понижена переваривающая способность, что связано с недостаточным содержанием пепсина в желудочном содержимом. На 5 день лечения у животных I группы наблюдается снижение общей кислотности (до 61,80 ±4,84 титр, ед), количество свободной и связанной соляной кислоты увеличилось до 10,70 ± 0,48 и 10,10 ± 1,01 титр. ед. соответственно. Переваривающая способность осталась на достаточном низком уровне (0,90 ±0,13 мм). У животных II группы общая кислотность (58,50 ± 3,81 титр, ед) и содержание свободной и связанной соляной кислоты (15,90 ± 1,49 и 13,10 ± 1,05 титр, ед.) пришли в норму. Переваривающая сила желудочного содержимого также существенно увеличилась (1,20 ± 0,09 мм). У поросят Щ и IV групп показатели функционального состояния имеют лишь незначительную положительную динами^.

Через 10 дней мы установили, что у животных I и П групп показатели пришли в норму, тогда как у поросят Ш и IV групп функциональное состояние органов пищеварения неудовлетворительное.

Следовательно, полученные данные свидетельствуют о том, что композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует восстановлению функции желудочно-кишечного тракта за счет нормализации общей кислотности, содержания свободной и связанной соляной кислоты, а также усиленной экскреции ферментов.

2.2.10. Гистологическое изучение влияния композиции Полизон+Тиамина бромид на структуру желудка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят

Изучение струюуры органов пищеварения, в частности желудка и тонкого кишечника, имеет большое значение, так как эти органы раньше других реагируют на всякого рода изменения внутренней среды организма. По степени их поражения можно судить и об эффективности лечебно-профилактических мероприятий.

При гистологическом исследовании желудка и кишечника у больных животных в препаратах обнаружено в эпителиальном покрове четко выраженная слизистая дистрофия, также характерно пропитывание слизистой оболочки серозным экссудатом. Неравномерно можно наблюдать гиперемию сосудов, клеточную инфильтрацию. Бокаловидные клетки сужены, но наблюдаются в большом количестве. Местами отмечена дистрофия, слущивание покровного эпителия, встречаются единичные некротические участки, а также участки с заметной регенерацией эпителия.

На гистологических препаратах желудка свиней опытной группы, получавших композицию Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг в течение 10 дней, отмечено, что стенки желудка соответствовали нормативным показателям. Желудок состоял из слизистой оболочки, подслизистой основы, мышечной и серозной оболочки. Слизистая оболочка состояла из эпителия, собственной и мышечной пластинок.

В собственной пластинке слизистой оболочки на препаратах встречаются железы желудка, между которыми можно наблюдать тонкие прослойки рыхлой волокнистой соединительной ткани. В ней отмечено небольшое количество лимфоидных элементов в виде диффузных инфильтратов, а также одиночных лимфатических узелков, которые расположены в области перехода желудка в двенадцатиперстную кишку.

В различных отделах желудка имеются железы. Различают три вида желудочных желез: собственные железы желудка, пилорические и кардиальные. Собственные железы желудка залегают в области тела и дна желудка. По строению эти железы представляют собой простые неразветвленные, иногда очень слабо разветвленные трубчатые железы. Пилорические железы расположены в зоне перехода желудка в двенадцатиперстную кишку.

Выраженных патоморфологических изменений в желудке не обнаружено, кроме небольших редких лимфоцитарных узелков в слизистой оболочке дна желудка. Такие же узелки обнаружены в пилорической части "желудка, что является результатом иммунной реакции.

Морфофункциональная структура кишечника свиней опытной группы после применения композиции Полизон+Тйамина бромид характеризовалась следующими признаками: тонкая кишка состояла из слизистой оболочки, собранной в многочисленные кишечные складки, подслизистой основы,

мышечной и серозной оболочек. Слизистая на всем протяжении густо усеяна выступами — кишечными ворсинками. Эпителиальный слой ворсинок содержал одиночные бокаловидные клетки. Эпителий между ворсинками образовал крипты. Выраженных пагоморфологических изменений в тонком кишечнике не обнаружено. В основном гистологическое строение тонкой кишки соответствует норме. Сосуды подслизистой основы без патологических изменений.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что воздействие композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг в течение 10 дней и после выздоровления способствует снижению выраженности дистрофических процессов, при этом исчезают выраженные патоморфологические изменения в желудке и тонком кишечнике. По результатам морфологических исследований можно рекомендовать применение композиции согласно указанной схемы лечения.

3. ВЫВОДЫ ' >

1. Композиция Полизон+Тиамина бромид в лечебной дозе 5+4 мг/кг способствует восстановлению структуры желудка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят.

2. Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует восстановлению функции желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят за счет нормализации общей кислотности, содержания свободной и связанной соляной кислоты, а также усиленной экскреции ферментов.

3. Наиболее высокие показатели среднесуточного прироста живой массы наблюдаются у поросят, получавших композицию ПолизоН+Ткамина бромид в дозе 5+4 мг/кг, - в 1,45 раза.

4. Под влиянием композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг нормализуется содержание общего белка, билирубина и ферментов, что указывает на восстановление соотношения процессов синтеза и элиминации ферментов в клетках и холестеринообразовательной функции печени. Количество белка увеличилось с 55,89 ± 4,33 до 82,25 ± 5,74 г/л, что на 47,16 % больше по сравнению с исходными данными; количество общего билирубина снизилось с 13,68 ± 1,05 до 3,08 ± 0,22 мкмоль/л, AJIT - с 1,24 ± 0,11 до 0,49 ± 0,03 мкмоль, ACT - с 1,39 ± 0,09 до 0,65 ± 0,05 мкмоль, ЛДГ - с 850,00 ± 43,12 до 351,08 ± 29,36 ед. акт., альдолазы - с 21,06 ± 3,60 до 6,01 ± 0,55 ед., ЩФ - с 18,43 ± 0,66 до 8,05 ± 0,05 мг%.

5. Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует более значительному возрастанию количества аминокислот в сыворотке крови по сравнению с Полизоном, что положительно сказывается на темпах роста поросят.

6. Применение композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг

на фоне гидрокортизона более эффективно, чем МАОП в дозе 25 мг/кг+гидрокортизон; композиция стимулирует выработку агглютининов и повышает протективные свойства сыворотки кроликов, не оказывает митотоксического действия (не влияет на размножение эндогенных стволовых клеток). Это указывает на влияние композиции на функциональную активность Т—клеток - эффекторов и отсутствие цитотоксического эффекта на клетку. Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует л активизации фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

7. Среднесмертельная доза композиции Полизон+Тиамина бромид — • составила: для белых мышей 1615,01 ± 101,15 мг/кг, крыс -2050,63 ± 180,69 мг/кг. Композиция Полизон+Тиамина бромид, согласно ГОСТ 12.1.00.7-76, относится к III классу опасности. Коэффициент кумуляции составил 2.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты проведенных опытно-производственных испытаний подтвердили иммуностимулирующий эффект и положительное влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на клеточные факторы защиты организма поросят, а также на секреторную активность желудочно-кишечного тракта, высокие показатели среднесуточного, относительного и абсолютного прироста живой массы, что дает возможность рекомендовать ее для широкого применения в свиноводстве.

Композиция Полизон+Тиамина бромид представляется перспективным препаратом для улучшения здоровья и повышения продуктивности поросят.

5. СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ

1. Тухфатова, Р.Ф. Антиульцерогенные свойства Полизона /Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова, Б.П. Струнин //Международная научно-практическая конференция «Наука - сельскохозяйственному производству и образованию». - Смоленск, 2004. - С. 320-322.

2. Тухфатова, Р.Ф. Влияние Полизона на изменение массы внутренних органов /Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова // Материалы XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». — М., 2005. — С. 807.

3. Тухфатова, Р.Ф. Полизон как индуктор пролиферативной и миграционной активности полипотентных стволовых кроветворных клеток / Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова //Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК: региональный опыт, проблемы, перспективы». — Ульяновск, 2005. - С. 346-348.

4. Тухфатова, Р.Ф. Влияние Полизона на титр агглютининов кроликов / Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова //Материалы XVII Международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические

средства в ветеринарии». - СПб., 2005. - С. 122.

5. Тухфатова, Р.Ф. Изменение титра агглютининов кроликов при применении Полизона /Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова, Р.Ф. Халимов // Международная научно-практическая конференция «Проблемы и перспективы ветеринарии в XXI веке». - Улан-Удэ, 2005. - С. 109-111.

6. Тухфатова, Р.Ф. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на пролиферативную и миграционную активность кроветворных клеток / Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова //Экологические системы и приборы. - 2005. -№9-С. 57-58.

7. Тухфатова, Р.Ф. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на клеточные и гуморальные факторы защиты организма поросят /Р.Ф. Тухфатова //Конференция СМУ «Перспективные направления научных исследований молодых ученых и студентов Урала и Сибири». — Троицк, 2005. — С. 147.

8. Тухфатова, Р.Ф. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на секреторную активность желудочно-кишечного тракта /Р.Ф. Тухфатова // Конференция СМУ «Перспективные направления научных исследований молодых ученых и студентов Урала и Сибири». - Троицк, 2005. — С. 148-149.

9. Тухфатова, Р.Ф. Прирост массы поросят при применении композиции Полизон+Тиамина бромид и Полизона /Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова, Р.Ф. Халимов //Всероссийская научно-практическая конференция «Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»». — Уфа, 2006. - С. 103.

10. Тухфатова, Р.Ф. Изменение аминокислотного состава крови поросят при применении композиции Полизон+Тиамина бромид /Р.Ф. Тухфатова, А.Ф. Исмагилова //17-й международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии». — СПб., 2006. — С. 76.

11. Тухфатова, Р., Исмагилова А. Проблемы сохранности поголовья свиней и пути их решения /Р. Тухфатова, А. Исмагилова //Свиноводство. - 2006. - № 5. - С. 23-24.

На правах рукописи

ТУХФАТОВА РЕГИНА ФАНОВНА

16.00.04 — ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Казань 2006

Подписано в печать 14.11.06. Заказ 31 Формат А5. Тираж 100 экз. Отпечатано в типографии ФГУ "ФЦТРБ" (г. Казань) Адрес: 420075, г. Казань, Научный городок-2

Оглавление диссертации Тухфатова, Регина Фановна :: 2006 :: Уфа

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Гастроэнтериты поросят

2.2. Новые методы и препараты, применяемые в ветеринарии, для лечения гастроэнтеритов

3. СОБС ГВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Материалы и методы исследований

3.2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.2.1. Изучение острой токсичности композиции Полизон+Тиамина 52 бромид

3.2.2. Противоязвенная активность композиции Полизон+Тиамина 54 бромид

3.2.3. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на массу 57 внутренних органов крыс

3.2.4. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на титр 59 агглютининов кроликов

3.2.5. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на 61 иролиферативную и миграционную активность полипотентных стволовых кроветворных клеток

3.2.6. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на клеточные 65 факторы защиты организма больных гастроэнтеритом поросят

3.2.7. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на 67 аминокислотный состав крови больных гастроэнтеритом поросят

3.2.8. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на прирост 69 массы поросят

3.2.9. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на 71 биохимические показатели крови больных i астроэнтеритом поросят

3.2.10. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на секреторную 74 активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят

3.2.11. Гистологическое изучение влияния композиции 77 Полизон+Тиамина бромид на структуру желудка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят

32.11.1. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на структуру 77 желудка больных гастроэнтеритом поросят

32.112. Влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на структуру 83 тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят

Введение диссертации по теме "Ветеринарная фармакология с токсикологией", Тухфатова, Регина Фановна, автореферат

Актуальность темы. Свиноводство - наиболее рентабельная отрасль животноводства, и при правильной организации быстро окупает затраты и дает большие доходы. В связи с переходом на рыночные отношения свиноводство оказалось в тяжелом финансовом положении.

Несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению болезней желудочно-кишечного тракта, вопросы патогенетического лечения остаются в центре внимания ученых и практических ветеринарных специалистов и являются актуальной проблемой (Папуниди К.Х., Иванов А.В., Зухрабов М.Г., 2001; Софронов В.Г., 2001; Госманов Р.Г., 2001; Тремасов М.Я. с соавт., 2001).

Из всех болезней сельскохозяйственных животных 90 % составляют незаразные заболевания, которые вызываются, главным образом, условно патогенной микрофлорой. Наибольший удельный вес из них занимают болезни органов пищеварения и органов дыхания (Шахов А.Г., Бузлама B.C., 1990; Рахматуллин Э.К. с соавт., 2000; Папуниди К.Х. с соавт., 2002; Дроздова Л.И. с соавт., 2003; Герунов В.И., Герунова Л.К. с соавт., 2003; Самородова И.М., Рабинович М.И., 2004).

В последние годы интенсивно расширяется выпуск биологически активных препаратов различной направленности для лечения патологических процессов, а также средств, применяемых для повышения продуктивности животных (Ноздрин Г.А., 1996; Жаров А.В., 2003; Дорожкин В.И. с соавт., 2003; Донник И.М., Шкуратова И.А., 2003; Александров И.Д, Антипов В.А. с соавт., 2004).

В связи с вышеизложенным в ООО «Поливит» под руководством доктора технических наук Струнина Б.П. проведен синтез фосфорнокислой соли 2-амино-4-метилтио-(8-оксо-8-имино)-масляной кислоты, зарегистрированной нами в Федеральном институте промышленной собственности под торговым названием «Полизон». На основе доступного крупнотоннажного производства метионина разработан четырехстадийный способ получения препарата «Полизон» с выходом 62 - 63 %. Получено наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ от 26 июня 2002 г. (протокол № 2). Тиамина бромид применяют с профилактической и лечебной целью при нервно-токсической форме диспепсии у иоросят-сосунов, диспепсии телят, гастритах и энтеритах с явлениями атонии. На основе Полизона и витамина В\ получена композиция Полизон+Тиамина бромид, сочетающая несколько видов фармакологической активности.

Для реализации поставленной цели нами были определены следующие задачи:

1. определить острую токсичность композиции для белых мышей и крыс;

3. изучить влияние на аминокислотный состав крови больных гастроэнтеритом поросят;

4. изучить влияние на биохимические показатели крови больных гастроэнтеритом поросят;

5. изучить влияние на секреторную активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят;

6. изучить влияние на прирост живой массы поросят;

7. провести гистологические исследования желудка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят.

1.3. Научная новизна. Впервые установлены отдельные механизмы иммунотропного действия композиции Полизон+Тиамина бромид на лабораторных животных и поросятах. Определено влияние на аминокислотный состав и биохимические показатели крови, на секреторную активность желудочно-кишечного тракта больных гастроэнтеритом поросят. Впервые проведены гистологические исследования желудка и тонкого отдела кишечника больных гастроэнтеритом поросят.

1.4. Теоретическая и практическая значимость. Результаты выполненных исследований позволили предложить композицию Полизон+Тиамина бромид как конкурентоспособный препарат для повышения резистентности организма и лечения гастроэнтеритов поросят. По результатам исследований оформлена заявка на патент № 2005137089/13(041395) от 06.02.2006 (Препарат для повышения продуктивности и резистентности животных). Получено наставление от 26 июня 2002 г. Департамента ветеринарии, сертификат соответствия № РОСС RU. П096.В 10347.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту:

• фармакологический спектр и механизм иммуномодулирующего действия композиции Полизон+Тиамина бромид;

• степень безвредности композиции Полизон+Тиамина бромид;

• возможность использования композиции Полизон+Тиамина бромид для повышения резистентности и лечения гастроэнтеритов поросят.

- XII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005);

- Всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие ЛПК: региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005);

XVII Международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2005);

- международной научно-практической конференции «Проблемы и перспективы ветеринарии в XXI веке» (Улан-Удэ, 2005);

- международной конференции «Средства и методы обеспечения экологической безопасности» (Астрахань, 2005);

- конференции «Перспективные направления научных исследований молодых ученых и студентов Урала и Сибири» (Троицк, 2005);

- 17-й международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2006); а также опубликованы в рецензируемых журналах:

- Экологические системы и приборы, 2005, № 9;

- Свиноводство, 2006, № 5.

1.7. Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

Заключение диссертационного исследования на тему "Токсико-фармакологические свойства новой композиции полизон+тиамина бромид и ее применение при гастроэнтеритах поросят"

5. ВЫВОДЫ

3. Наиболее высокие показатели среднесуточного прироста живой массы наблюдаются у поросят, получавших композицию Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг, - в 1,45 раза.

4. Под влиянием композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг нормализуется содержание общего белка, билирубина и ферментов, что указывает на восстановление соотношения процессов синтеза и элиминации ферментов в клетках и холестеринообразовательной функции печени. Количество белка увеличилось с 55,89 ± 4,33 до 82,25 ± 5,74 г/л, что на 47,16 % больше по сравнению с исходными данными; количество общего билирубина снизилось с 13,68 ± 1,05 до 3,08 ± 0,22 мкмоль/л, АЛТ -с 1,24 ± 0,11 до 0,49 ± 0,03 мкмоль, ACT - с 1,39 ± 0,09 до 0,65 ± 0,05 мкмоль, ЛДГ - с 850,00 ±43,12 до 351,08 ± 29,36 ед. акт., альдолазы - с 21,06 ± 3,60 до 6,01 ± 0,55 ед., ЩФ - с 18,43 ± 0,66 до 8,05 ± 0,05 мг%.

6. Применение композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг на фоне гидрокортизона более эффективно, чем МАОП в дозе 25 мг/кг+гидрокортизон; композиция стимулирует выработку агглютининов и повышает протективные свойства сыворотки кроликов, не оказывает митотоксического действия (не влияет на размножение эндогенных стволовых клеток). Это указывает на влияние композиции на функциональную активность Т-клеток - эффекторов и отсутствие цитотоксического эффекта на клетку. Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует активизации фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

7. Среднесмертельная доза композиции Полизон+Тиамина бромид составила: для белых мышей 1615,01 ± 101,15 мг/кг, крыс -2050,63 + 180,69 мг/кг. Композиция Полизон+Тиамина бромид, согласно ГОСТ 12.1.00.7-76, относится к III классу опасности. Коэффициент кумуляции составил 2.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты проведенных опытно-производственных испытаний подтвердили иммуностимулирующий эффект и положительное влияние композиции Полизон+Тиамина бромид на клеточные факторы защиты организма поросят, а также на секреторную активность желудочно-кишечного тракта, высокие показатели среднесуточного, относительного и абсолютного приростов живой массы, что дает возможность рекомендовать ее для широкого применения в свиноводстве.

Композиция Полизон+Тиамина бромид представляется перспективным препаратом для улучшения и повышения продуктивности поросят.

По результатам исследований оформлена заявка на патент № 2005137089/13(041395) от 06.02.2006 (Препарат для повышения продуктивности и резистентности животных).

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В основе повышения эффективности свиноводства лежит интенсификация производства - перевод отрасли на индустриальную основу. Внедрение промышленной технологии существенно изменяет среду обитания животных. Наличие большого количества стресс-факторов, действующих на свиноматок и поросят в условиях крупного предприятия, приводит к снижению их резистентности и создает предпосылки для возникновения незаразных болезней животных, особенно молодняка (Урбан В.Г1., Найманов И.Л., 1984).

Бузлама B.C. (1991) при этиологическом обосновании комплексной системы постнатальной профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят считает, что фармакологическое обеспечение системы должно включать, во-первых, препараты, обладающие адаптогенным действием, во-вторых, препараты, обладающие антитоксическим действием, и, в-третьих, применение препаратов (пробиотиков) с живыми жизнеспособными культурами микроорганизмов против дисбактериоза.

Установлено, что среднесмертельная доза композиции Полизон+Тиамина бромид составила: для белых мышей 1615,01 ± 101,15 мг/кг, крыс 2050,63 ± 180,69 мг/кг. Композиция Полизон+Тиамина бромид относится, согласно ГОСТ 12.1.00.7-76, к III классу опасности. Коэффициент кумуляции К = 2.

Результаты проведенных исследований показали, что применение композиции Полизон+Тиамина бромид в дозах 5+4 мг/кг на фоне гидрокортизона более эффективно, чем МАОП в дозе 25 мг/кг+гидрокортизон; композиция стимулирует выработку агглютининов и повышает протективные свойства сыворотки кроликов, не оказывает митотоксического действия (не влияет на размножение эндогенных стволовых клеток). Это говорит о влиянии композиции на функциональную активность Т-клеток - эффекторов и отсутствии цитотоксического эффекта на клетку.

Среди молодняка сельскохозяйственных животных наиболее широко распространены желудочно-кишечные заболевания. Эта группа заболеваний является сложной, носит, в основном, смешанный характер и связана со многими факторами (экологией, кормлением, условиями содержания и т.д.) (Бутузова О.Г., Воронина Е.Н., 1998). В 95 случаях из 100 причиной смерти являются желудочно-кишечные заболевания (Бекасова Т., 2003). Из них доля телят, заболевших диспепсией в течение первых дней жизни, на животноводческих фермах достигает 80 %.

В патологии пищеварительного тракта животных одно из ведущих мест занимают неинфекционные заболевания - диспепсия, гастроэнтерит, гастроэнтероколит и др. (Сорокин В.В., Тимошко М.А., Николаева А.В., 1973).

Терапия желудочно-кишечных болезней должна быть комплексной и своевременной, включающей щадящую диету и средства этиотроиной, патогенетической, заместительной терапии, а также препараты, повышающие резистентность организма новорожденных. При этом особое значение имеет применение противомикробных препаратов (антибиотиков, сульфаниламидов и т.п.) и средств, поддерживающих сердечную деятельность, функцию органов дыхания, печени и почек (Самохин В.Т. с соавт., 1985; Шахов А.Г., Сулейманов С.М., 1995).

Общий недостаток антимикробных средств лечения животных в том, что для достижения желаемого терапевтического эффекта их необходимо назначать три-четыре раза в день в больших дозировках длительное время. В последние годы особенно сильно стали проявляться избирательная активность и устойчивость микрофлоры к антимикробным средствам, что, в свою очередь, усложняет и удорожает процесс лечения.

Шилов С.О. (2000) с целью профилактики иммунодефицита и дисбактериоза кишечника и создания прочного иммунного баланса в организме кур считает целесообразным проводить иммуностимуляцию цыплят с 20-дневного возраста прополисом в комплексе с бифидумбактерином и прополисом с оксиметилурацилом, отдельно прополисом, бифидумбактерином и оксиметилурацилом. Курс дачи препаратов 10-14 дней в смеси с кормом или водой.

В последние годы клиницисты ставят иод сомнение эффективность использования пробиотиков при терапии дисбактериоза (Хавкин А.И., Бельмер С.В., Жихарева Н.С., 2002; Маянский А.Н., 2000; Хавкин А.И., 2003).

Для повышения резистентности у новорожденных телят и увеличения всасывания иммуноглобулинов молозива Пронькин Д.Е. (2002) предлагает выпаивать смеси аминокислот на основе глутамата (+аспартат+глицин) или таурина (+аспартат+глицин+глутамат); а для стимуляции неспецифической резистентности и прироста массы тела у телят молочного периода выращивания рекомендует парэнтерально однократно вводить препараты глицина или аланина в пролонгированной форме (масляная суспензия целлюлозных микросфер).

Учитывая низкую обеспеченность организма растущих поросят витамином С и стимулирующее влияние его на дифференциацию клеточных элементов кроветворно-лимфоидной ткани и формирование иммунитета, Карпуть И.М. с соавт. (1987) рекомендует проводить витаминизацию поросят-сосунов аскорбиновой кислотой.

Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует активизации фагоцитарной активности реакции нейтрофилов крови в отношении кишечной палочки и усилению факторов неспецифической защиты у поросят.

Свободные аминокислоты крови и плазмы могут служить показателем белкового питания. При несбалансированном белковом и аминокислотном кормлении животных, в частности при недостатке в нем лизина и метионина либо при нарушении их усвояемости из корма, отмечается понижение содержания аминокислот в плазме крови и, соответственно, снижается их использование в качестве строительного материала для тканей организма животных.

Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует более значительному возрастанию содержания общего белка и аминокислот в сыворотке крови по сравнению с Полизоном, что положительно сказывается на откормочных качествах поросят. Также исследуемая композиция способствует активизации белкового обмена, в результате чего повышается резистентность организма, ускоряются темпы роста.

Наиболее высокие показатели среднесуточного, относительного и абсолютного приростов наблюдались у поросят, получавших композицию Полизон+Тиамина бромид. Во II группе среднесуточный прирост составил 786,00 ± 4,07 г, в I группе - 690,00 ± 3,01 г, в III группе - 609,00 ± 2,04 г, а в контрольной - 543,00 ±3,11 г.

На сегодняшний день в сельском хозяйстве главнейшей задачей является производство высококачественного мяса по конкурентоспособным ценам. В свою очередь повышение экономического давления на производителей продуктов животноводства требует более эффективного использования общепринятых компонентов кормов и поиска возможностей использования более дешевых ингредиентов.

Композиция Полизон+Тиамина бромид при назначении ее поросятам в дозе 5+4 мг/кг приводила к усилению интенсивности роста, на что указывали большая их живая масса по сравнению с контрольными животными и сравнительно высокие показатели абсолютного и относительного приростов живой массы.

По мнению Лыкасовой И.А. (2000), при оценке функциональной способности физиологических систем организма состояние токсического стресса существенное внимание уделяется изменению состава крови.

При острой форме гастроэнтерита биохимические показатели резко изменяются: снижаются содержание общего белка (на 30,67 % по сравнению со здоровыми животными), гликопротеидов (на 31,08 %), сахара (на 51,67 %), пировиноградной кислоты (на 62,50 %), уровень общих липидов (на 47,99 %), холестерина (на 35,47 %)). Во время болезни наблюдается билирубинемия. Количество общего билирубина по сравнению со здоровыми поросятами увеличивается с 2,74 до 13,68 мкмоль/л. Резко повышается содержание в крови AJTT (до 1,24 мкмоль), ACT (до 1,39 мкмоль), ЛДГ (до 850,0 ед. акт.), альдолазы (до 21,06 ед.), щелочной фосфатазы (до 18,43 мг%).

Терапевтическая эффективность композиции Полизон+Тиамина бромид выразилась в восстановлении на 10 день лечения у поросят II группы биохимических показателей сыворотки крови до нормального уровня. Так, количество белка увеличилось с 55,89 ± 4,33 до 82,25 ± 5,74 г/л, что на 47,16 % больше по сравнению с исходными данными; также увеличилось содержание гликопротеидов (на 44,37 %), сахара (на 102,96 %), пировиноградной кислоты (на 171,11 %), общих липидов (на 87,32 %), холестерина (на 59,60 %). Высокие показатели общего белка, сахара, пировиноградной кислоты, липидов и холестерина можно объяснить усиленным белковым, углеводным, липоидным обменами в печени.

Также нормализовалось содержание общего билирубина и ферментов, что указывает на восстановление соотношения процессов синтеза и элиминации ферментов в клетках и холестеринообразовательной функции печени. Количество общего билирубина снизилось с 13,68 ± 1,05 до 3,08 ± 0,22 мкмоль/л, АЛТ - с 1,24 ± 0,11 до 0,49 ± 0,03 мкмоль, ACT - с 1,39 ± 0,09 до 0,65 ± 0,05 мкмоль, ЛДГ - с 850,00 ± 43,12 до 351,08 ± 29,36 ед. акт., альдолазы - с 21,06 ± 3,60 до 6,01 ± 0,55 ед., ЩФ - с 18,43 ± 0,66 до 8,05 ± 0,05 мг%.

Установлено, что ферментные препараты (БЛ-1, гликозидаза, ГЗХ, дрожжелитин Г10х, мальтавамарин Г10х, протосубтилин ГЗХ), полученные во Всесоюзном научно-исследовательском институте прикладной энзимологии («Биопром» СССР), повышают резистентность организма и предупреждают появление диспепсии (Арестов И.Г., Сирвидис В.Ю., Кедыш В.М., Движение В.Ю., 1987).

В патогенезе нарушения работы желудочно-кишечного тракта проявляется сумма факторов, между которыми возникают причинно-следственные отношения: повышение общей кислотности и количества соляной кислоты желудочного содержимого, снижение количества связанной и свободной соляной кислоты; ферментопатии, проявляющиеся снижением переваривающей способности; интоксикация организма; нарушение обмена веществ; дистрофия органов и тканей.

Нами было установлено, что во время разгара болезни у поросят наблюдается значительное увеличение общей кислотности (77,40 титр, ед.), тогда как содержание свободной и связанной соляной кислоты снижено (соответственно 8,50 ± 0,12 и 7,80 ± 0,18 титр, ед.), также понижена переваривающая способность, что связано с недостаточным содержанием пепсина в желудочном содержимом. На 5 день лечения у животных I группы наблюдается снижение общей кислотности (до 61,80 ± 4,84 титр, ед), количество свободной и связанной соляной кислоты увеличилось до 10,70 ± 0,48 и 10,10 ± 1,01 титр. ед. соответственно. Переваривающая способность осталась на достаточно низком уровне (0,90 ± 0,13 мм). У животных II группы общая кислотность (58,50 ± 3,81 титр, ед) и содержание свободной и связанной соляной кислоты (15,90 ± 1,99 и 13,10 ± 1,05 титр, ед.) пришли в норму. Переваривающая сила желудочного содержимого также существенно увеличилась (1,20 ± 0,09 мм). У поросят III и IV групп показатели функционального состояния имеют лишь незначительную положительную динамику.

Через 10 дней мы установили, что у животных I и II групп показатели пришли в норму, тогда как у поросят III и IV групп функциональное состояние органов пищеварения неудовлетворительное.

Композиция Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг способствует восстановлению функции желудочно-кишечного тракта за счет нормализации общей кислотности, содержания свободной и связанной соляной кислоты, а также усиленной экскреции ферментов.

Изучение структуры органов пищеварения, в частности желудка и тонкого кишечника, имеет большое значение, так как эти органы раньше других реагируют на всякого рода изменения внутренней среды организма. По степени их поражения можно судить и об эффективности лечебно-профилактических мероприятий.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что воздействие композиции Полизон+Тиамина бромид в дозе 5+4 мг/кг на больных гастроэнтеритом поросят в течение 10 дней и после выздоровления способствует снижению выраженности дистрофических процессов, при этом исчезают выраженные патоморфологические изменения в желудке и тонком кишечнике. По результатам морфологических исследований можно рекомендовать применение композиции согласно указанной схемы лечения.

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2006 года, Тухфатова, Регина Фановна

1. Аветисян, Р.С. Изучение кишечной микрофлоры новорожденных поросят и ее коррегирование фугелином: Автореф. дис.канд. вет. наук /Р.С. Аветисян. Тбилиси, 1985. - 19 с.

2. Александров, И.Д. Перспективные направления производства лекарственных средств /И.Д. Александров, В.А. Антипов //Ветеринария. 2004. - № 8. - С. 3-6.

3. Аликаев, В.А. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /В.А. Аликаев, Л.Г. Замарин. М.: Колос, 1972, -543 с.

4. Аманов, К. Профилактика диспепсии у поросят в условиях крупных свиноводческих комплексов в ТССР /К. Аманов, А. Хангельдыев //Зооветеринарная наука в решении Продовольственной программы: Сб. статей. А.: Ылым, 1984. - С. 52.

5. Аничков, С.В. Фармакотерапия язвенной болезни /С.В. Аничков, И.С. Заводская.-Л.: Медгиз, 1965.-С. 30-51.

6. Анохин, Б.М. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных /Б.М.Анохин, В.М.Данилевский, Л.Г.Замарин и др. — М.: Агропромиздат, 1991. 574 с.

7. Антииов, В.А. Пробиотики в ветеринарии / В.А. Антипов //«Новые фармакологические средства в ветеринарии» /Тез. докл. к 1-ой межвузовской научн.-практ. конф. Ленинград, 1989. - С. 7.

8. П.Бекасова, Т. Как сохранить поросят, если антибиотики запретят использовать? /Т. Бекасова //Свиноводство. 2003. - № 6. - С. 28-29.

9. М.Беленький, М.П. Основные приемы статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии /М.П. Беленький М.: «Медицина», 1963.- 126 с.

10. Беляков, И.М. Диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных /И.М. Беляков М.: Колос, 1975. -186 с.

11. Бондаренко, В.М. Дисбактериозы ЖКТ /В.М. Бондаренко, Б.В. Боев, А.А. Воробьев //Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 1. - С. 66-70.

12. Борисов, В.М. Применение окиси цинка в профилактике диспепсии и стимуляции процессов роста у поросят-отъемышей /В.М. Борисов, Е.М. Савош //«Наука производству» /Матер, четвертой международной научн.-практ. конф. - Гродно, 2001. - 4.2. -С. 334-336.

13. Бузлама, B.C. Подбор и дозирование лекарственных средств для комплексной терапии и профилактики незаразных болезней животных /B.C. Бузлама //Справочник ветеринарного врача. М., 1991. - С. 421429.

14. Булатов, А.А. Гипертонические растворы и желудочно-кишечные расстройства у телят //«11овые фармакологические средства в ветеринарии» /Тез. докл. к 1-ой межвузовской научн.-практ. конф. Ленинград, 1989.-С. 14.

15. Воронин, Е.С. Иммунология /Е.С. Воронин, A.M. Петров, М.М. Серых, Д.А. Девришов. М.: Колос-Пресс, 2002. - 408 с.

16. Герунов, В.И. Патоморфологические изменения у цыплят при остром отравлении бутоксом /В.И. Герунов, Л.К. Герунова, М.В. Кошкарева //Матер. Всерос. научн.-метод. конф. паталогоанатомов ветеринарной медицины. Москва, 2003. - С. 169-170.

17. Госманов, Р.Г. Некультивируемые формы микроорганизмов и их роль в сохранении инфекции во внешней среде /Р.Г. Госманов //Тр. 2-го съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. Казань, 2001. -С. 271-276.

18. Грыцык, Т.Н. Профилактическая эффективность препарата альбувет при желудочно-кишечных заболеваниях новорожденных поросят //Применение химиотерапевтических препаратов в ветеринарии и разработка методов их контроля /Сб. научн. тр. М, 1989. - С. 90-92.

19. Данилевский, В.М. Справочник по ветеринарной терапии /В.М.Данилевский. —М.: Колос, 1983.- 192 с.

20. Дегтярев, Д.В. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных телят при применении селекора сухостойным коровам: Автореф. дис. канд. вет. наук /Д.В. Дегтярев. Воронеж, 2004. - 23 с.

21. Донник, И.М. Оценка иммунного статуса крупного рогатого скота из районов экологического неблагополучия /И.М. Донник, И.А. Шкуратова //Украшска акдем1я аграрних наук. Ветеринарна медицина. Хармв, 2003. - С. 213-216.

22. Дорожкин, В.И. Особенности усвоения бета-каротина в организме сельскохозяйственных животных /В.И. Дорожкин, Л.В. Резниченко //Матер, юбилейной междунар. научн.-произв. конф., посвященной 25-летию образования БГСХА. Белгород, 2003. - С. 35.

23. Дроздова, Л.И. Морфология и ультраструктура гематоэнцефалического барьера при экспериментальном хламидиозе /Л.И. Дроздова, Н.А. Татарникова //Матер. Всерос. научн.-метод. конф. паталогоанатомов ветеринарной медицины. Москва, 2003. - С. 61-62.

24. Елизарова, О.Н. Определение пороговых доз промышленных ядов при пероральном введении/О.Н. Елизарова-М.: Медицина, 1971.- 194 с.

25. Емелина, Н.С. Витамины в кормлении сельскохозяйственных животных и птиц /Н.С. Емелина, B.C. Крылова, Е.А. Петухова, Н.В. Бромлей-Уфа Москва, 1970.-С. 161-225.

26. Жаров, А.В. Функциональная морфология органов иммунной и эндокринной систем поросят при гипотрофии /А.В. Жаров //Матер. Всерос. научн.-метод. конф. паталогоанатомов ветеринарной медицины. Москва, 2003. - С. 190-192.

27. Жильцов, Н. Правильное использование корма основа выгодного производства свинины /Н. Жильцов //Свиноводство. - 2000. - № 1. -С. 11-13.35.3емсков, A.M. Некоторые механизм действия адъювантов / A.M. Земсков//Иммунология. 1982. -№1. - С. 6-13.

28. Зб.Земсков, A.M. Fc-рецепторы макрофагов. //Успехи современной биологии.- 1983.-Т. 95.-Вып. 1.-С. 100-117.37.3латкина, А.Р. Фармакотерапия хронических болезней органов пищеварения /А.Р. Златкина. М.: Медицина, 1998. - 288 с.

29. Иванов, А. Изучение иммунологической реактивности свиней при лечении дизентерии /А. Иванов //Свиноводство. 2005. - № 1. -С. 26-27.

30. Иванов, А.С. Современные подходы к микробиологической диагностике и терапии инфекционных диарей /А.С. Иванов //Медицина. 2004. - № 2(5). - С. 27-35.

31. Исабаев, А.Ж. Фармакокоррекция иммуннобиохимического статуса у телят при диспепсии: Автореф. дис. канд. вет. наук /А.Ж. Исабаев. -Троицк, 2004.- 19 с.

32. Исмагилова, А.Ф. Иммунный статус животных. Возможности коррекции иммунодефицитных состояний новыми производными глицирризиновой кислоты /А.Ф. Исмагилова, Г.В. Базекин. Уфа, 2001.- 158 с.

33. Исмагилова, А.Ф. Применение производных пиримидина в ветеринарии /А.Ф. Исмагилова, А.Е. Белов, Р.В. Гилемханов. Уфа, 2001.-132 с.

34. Исмагилова, А.Ф. Пиримидины и их применение в птицеводстве /А.Ф. Исмагилова, Ф.С. Зарудий, Д.Н. Лазарева, В.П. Кривоногов, Р.Ф. Халимов, И.Б. Абдрахманов. Уфа, 1998. - 124 с.

35. Камилов, Ф.Х. Пиримидины и их применение в медицине /Ф.Х. Камилов, Д.Н. Лазарева, В.В. Плечев Уфа: Изд-во БГМИ, 1992. -155 с.

36. Карелин, А.И. Актуальные проблемы инфекционной патологии свиней /А.И. Карелин //Тр. ВИЭВ. 1978. - Т. 51. - С. 95-102.

37. Карпуть, И.М. Профилактика аутоиммунной патологии органов пищеварения у животных /И.М. Карпуть, Л.М. Пивовар //Вопросы групповой профилактики заболеваний животных и птиц: Тез. докл. межреспубл. конф. Вильнюс, 1987. - С. 48-50.

38. Карпуть, И.М. Бактериальные препараты в профилактике диспепсии поросят /И.М. Карпуть, Л.Л. Руденко // Известия Академии аграрных наук Республики Беларусь. 1996. -№ 1 - С. 73-75.

39. Киселев, С.А. Пребиотики: новая стратегия лечения дисбактериоза /СЛ. Киселев, Д.С. Чичерин, Д.В. Харитонов //Медицина. 2004. -№2(5).-С. 70-71.

40. Киселенко, П.С. Лечение диареи телят с применением средств фитотерапии /П.С. Киселенко //Зоотехнические, ветеринарные и биологические аспекты животноводства Дальнего Востока: Сб. научн. тр. / ДальГАУ. Благовещенск, 2003. - С. 57-62.

41. Ковалевский, KJI. Лабораторное животноводство /К.Л. Ковалевский. -М.: Медицина, 1986.-324 с.

42. Ковзов, В.И. Применение альбумин фильтрата для профилактики и лечения новорожденных телят, больных диспепсией /В.И. Ковзов,

43. А.А. Рыбак //Ветеринарная наука производству. - Минск, 1982. -№ 19.-С. 118-119;

44. Козлов, В.А. Гуморально-клеточные уровни регуляции основных этапов антителогенеза: Автореф. дис. канд. мед. наук /В.А. Козлов. -М., 1980.-40 с.

45. Козлов, В.А. Миграция стволовых кроветворных клеток и В-лимфоцитов костного мозга в селезенке в условиях анемии, вызванной фенилгидразином /В.А. Козлов, В.П. Лозовой, И.II. Журавкин //Радиобиология. 1978. - Вып. 2. - С. 287-290.

46. Козлов, В.А. Количество иммунокомпетентных и колониеобразующих клеток в селезенке мышей в разные сроки после облучения /В.А. Козлов, Л.С. Сеславина //Радиобиология. 1968. - Т. 8. - Вып. 1. -С. 72-78.

47. Колб, В.Г. Клиническая биохимия /В.Г. Колб, B.C. Камышников. -Минск, 1976.-311 с.

48. Кондрахин, И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание /И.П. Кондрахин, Н.В. Курилов, А.Г. Малахов и др.- М.: Агропромиздат, 1985. С. 197-207.

49. Кононский, А.И. Гистохимия /А.И. Кононский Киев, 1976. -278 с.

50. Коробов, А.В. Справочник ветеринарного терапевта /А.В. Коробов, Г.Г. Щербаков.-СПб.: Лань, 2003.-С. 185-201.

51. Костенко, Т.С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии /Т.С. Костенко, В.Б. Родионова, Д.И. Скородумов. М.: Колос, 2001.-С. 85-88.

52. Кузнецова, Е.Н. Клинико-лабораторная оценка эффективности лечения телят, больных гастроэнтеритом, в возрастном аспекте: Автореф. дис.канд. вет. наук /Е.Н. Кузнецова. Саратов, 2002. - 22 с.

53. Курамшина, В.А. Фармако-токсикологические свойства и лечебно-профилактическая эффективность дисульфоцида при колибактериозе овец: Автореф. дис.канд. вет. наук /В.А. Курашина. Казань, 2000. -19 с.

54. Ложкина, Г.Г. Влияние хитозана на мембранное пищеварение у поросят /Г.Г. Ложкина //Профилактика незаразных болезней и терапия сельскохозяйственных животных и пушных зверей: Сб. научн. тр. -Ленинград, 1990.-С. 113-114.

55. Лопатин, В.Т. Влияние диоксидина, фармазина-50, абомина на секреторную функцию желудка и кишечника, их терапевтическая эффективность при диспепсии поросят: Автореф. дис.канд. вет. наук /В.Т. Лопатин. Воронеж, 2000. - 23 с.

56. Мальцева, Л.Ф. Фармакоклиническое обоснование применения глауконита при диспепсии у телят: Автореф. дис.канд. вет. наук / Л.Ф. Мальцева. Троицк, 2001. - 20 с.

57. Машковский, М.Д. Лекарственные средства /М.Д. Машковский. М.: Медицина, 1993.-Ч. II.-С. 245-319.

58. Маянский, А.Н. Дисбактериоз: иллюзии и реальность /А.Н. Маянский // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000. -№2.-С. 2.

59. Мистюкова, О., Алтухов II., Моргунова В., Шаронин В. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных поросят /О.

60. Мистюкова, Н. Алтухов, В. Моргунова, В. Шаронин //Свиноводство. -№ 1.-2003.-С. 28-30.

61. Ноздрин, Г.А. Фармакологическая коррекция иммунодефицитов у телят в ранний постнаталный период жизни: Автореф. дис.докт. вет. наук /Г.А. Ноздрин. С.- Петербург, 1996. - 37 с.

62. Ноздрин, Г.А. Выращивание молодняка свиней: Справочник / Г.А. Ноздрин, А.Ф. Сагло. М.: Агропромиздат, 1990. - С. 9-46.

63. Папуниди, К.Х. Патология обмена веществ и пути его коррекции / К.Х. Папуниди, А.В. Иванов, М.Г. Зухрабов //Тр. 2-го съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. Казань, 2001. - С. 192197.

64. Петров, Р.В. Иммунодеирессоры /Р.В. Петров, В.М. Манко. М.: Медицина, 1971.-С. 300.

65. Петров, Р.В. Высокоиммуногенные комплексы на основе синтетических полионов: искусственные антигены и вакцины / Р.В. Петров, P.M. Хаитов //Вестник АН СССР. 1986. - № 2. - С.45-98.

66. Петров, Р.В. Методические рекомендации по оценке и изучению иммуномодулирующего действия лекарственных средств /Р.В. Петров, P.M. Хаитов. М., 1984. - 20 с.

67. Планельес, Х.Х., Побочные явления при антибиотикотерапии бактериальных инфекций /Х.Х. Планельес, A.M. Харитонова. М.: Медицина, 1965.-430 с.

68. Пивовар, JI.M. Использование биопрепаратов в профилактике диспепсий у поросят /JI.M. Пивовар //Ферментные препараты в ветеринарии и животноводстве. Вильнюс, 1989. - С. 67-68.

69. Пронькин, Д.Е. Физиологическое действие препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят: Автореф. дис.канд. вет. наук /Д.Е. Пронькин. -Нижний 11овгород, 2002. 22 с.

70. Рахатуллин, Э.К. Динамика гематологических показателей телят после воздействия пуронами на базе циперметрина / Рахатуллин Э.К., Деркова М.А. //Сб. научн. тр. (по матер. Первой междунар. конф.). -Уфа, 2000.-С. 245-247.

71. Рекомендации по применению эндофарма в ветеринарии. Краснодар, 1984.-С. 4-12.

72. Руденко, JI.JI. Профилактика диспепсии у новорожденных поросят с использованием пробиотиков: Автореф. дис.канд. вет. наук / J1.JT. Руденко. Витебск, 1999 - 19 с.

73. Савельев, Б.П. Острые желудочно-кишечные заболевания новорожденных поросят /Б.П. Савельев //Лекция для студентов 4 курса ветфака и ветеринарных врачей ФПК. Благовещенск, 1983. - С. 8-22.

74. Самородова, И.М. Фторхинолоны новые синтетические препараты. /Самородова И.М., Рабинович М.И. //БИО. - 2004. - № 2. - С. 12-14.

75. Самохин, В.Т. Нарушения обмена веществ: клиника, диагностика, профилактика /В.Т. Самохин, П.Е. Петров, Н.И. Кузнецов, А.Е. Подшибякин //Ветеринария. 1985. - № 11. - С. 17-21.

76. Саноцкий, И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ /И.В. Саноцкий М.: Медицина, 1970. - 245 с.

77. Саразов, А.А. Физиологическое действие и эффективность применения пролонгированной формы селенопирана при стимуляции неспецифической резистентности коров и телят: Автореф. дис. канд. вет. наук /А.А. Саразов. -11ижний 11овгород, 2002. 22 с.

78. Середа, С.В. Фармакологическая характеристика препарата «Айробент» при диарейном синдроме новорожденных животных: Автореф. дис. канд. вет. наук /С.В. Середа. Воронеж, 2004. - 23 с.

79. Сорокин, В.В. Микрофлора кишечника животных / В.В. Сорокин, М.Л. Тимошко, А.В.Николаева. Кишинев: Штиинца, 1973.- 1 10 с.

80. Софронов, В.Г. Экологические аспекты техногенных токсикантов в Республике Татарстан /В.Г. Софронов //Тр. 2-го съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. Казань, 2001. - С. 200-203.

81. Стрелков, Р.Б. Методика научных исследований и статистическая обработка результатов /Р.Б. Стрелков М.: Наука, 1996. - 308 с.

82. Тараскин, В. Новые средства против болезней молодняка /В. Тараскин //Свиноводство. 1991. - №4. - С. 32-33.

83. Татарчук, О. Опыт борьбы с бактериальным гастроэнтеритом свиней на ОАО «Кудряшовский свинокоплекс» /О. Татарчук, А. Черданцев //Свиноводство. 2005. - № 2. - С. 28-30.

84. Тремасов, М.Я. Пробиотик энтероспорин для профилактики и лечения микотоксической диареи животных /М.Я. Тремасов, А.В. Иванов, Ф.Г. Ахметов, А.Г. Абдуллин // Тр. 2-го съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. Казань, 2001. - С. 245-248.

85. Тяпкина, В.Д. Фармако-токсикологическое обоснование применения нонтронита в ветеринарии: Автореф. дис.канд. биол. наук /В.Д. Тяпкина. Краснодар, 2002. - 41 с.

86. Уголев, A.M. Физиология и патология пристеночного (мембранного) пищеварения/A.M. Уголев.-J1.: Наука, 1969.-С. 178-181.

87. Урбан, В.П. Лигнин для профилактики желудочно-кишечных болезней и лечения молодняка /В.П. Урбан, В.П. Леванова, М.И. Кузнецов //Ветеринария. 1987. - № 1. - С. 57.

88. Урбан, В.П. Болезни молодняка в промышленном животноводстве /В.П. Урбан, И.Л. Найманов. М.: Колос, 1984. - 207 с.

89. Филатов, О. Ацидофилин для поросят /О.Филатов //Свиноводство. 1991. - №4. - С. 33-34.

90. Хавкин, А.И. Микробиоценоз кишечника и иммунитет /А.И. Хавкин //Российский медицинский журнал. 2003. - Т. 11. - № 3. -С. 122-126.

91. Хавкин, А.И. Пищевые волокна в коррекции микроэкологических нарушений у детей /А.И. Хавкин, С.В. Бельмер, Н.С. Жихарева // Лечащий врач. 2002. - № 6. - С. 67-71.

92. Хаитов, P.M. Происхождение стволовых клеток, образующих эндогенные колонии в селезенке облученных мышей /Р. М. Хаитов, Т.У. Арииова //Радиобиология. 1982. - 'Г.22. - Вып. 6. - С. 798-801.

93. Хаитов, P.M. Экранирование тимуса и участка костного мозга при облучении: модель для изучения взаимодействия Т- и В-клеток in vivo /P.M. Хаитов, P.M. Рузыбакиев //Радиобиология. 1973. - Т.23. -Вып.З.-С. 455-457.

94. Хамидуллин, Т. ПРЕБИ01М на страже свиноводства / Т. Хамидуллин //Свиноводство. -2003. № 4. - С. 28-29.

95. Храбустовский, И.Ф. Методические рекомендации по определению естественной резистентности животных в условиях интенсивного их использования /И.Ф. Храбустовский, Ю.М. Марков и др. Харьков: УкрНИИ экспериментальной ветеринарии, 1974. -С. 7-18.

96. Шайхаманов, М.Х. Экономическая эффективность применения белковых препаратов крови при диспепсии телят /М.Х. Шайхаманов,

97. B.П. Усатенко //Ветеринария. 1979. - № 11. - С. 58-60.

98. Шахов, А.Г. Роватезин для терапии и профилактики пневмонии свиней /А.Г. Шахов, B.C. Бузлама //Ветеринария. 1990. - № 1. - С.57.

99. Шахов, А.Г. Этиология, терапия и профилактика болезней молодняка сельскохозяйственных животных /А.Г. Шахов,

100. C.М. Сулейманов //Итоги и перспективы научных исследований по проблемам патологии животных и разработке средств и методов терапии и профилактики. Воронеж, 1995. - С. 9-17.

101. Шепелева, Т.А. Применение макро- и микроэлементов при диспепсии телят в экологически неблагополучной зоне Южного Урала: Автореф. дис.канд. вет. наук /Т.А. Шепелева. Троицк, 1998. - 25 с.

102. Шилов, С.О. Иммунный статус, естественный микробиоценоз кишечника птиц и методы их коррекции: Автореф. дис.канд. вет. наук /С.О. Шилов. Уфа, 2000. - 27 с.

103. Яфарова, Б.Н. Влияние пиримидина на и иммунобиологические процессы организма /Б.Н. Яфарова // Тр. Башкирского мед. ин-та. -Уфа, 1972.-Т. 18.-С. 255-261.

104. Яшин, А.В. Применение «Гамавита» для профилактики диспепсии у поросят отъемного периода /А.В. Яшин, В.Г. Дмитриенко //Актуальные проблемы ветеринарной медицины: Сб. научн. тр. / СПбГАВМ. 2002. - С. 123-124.

105. Arisawa, M., Hirata, T. et al. Ig E G-protein coupled receptions in the inflammatory response //31-st Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother. -Chickago. 1991. - Abstr. 1454. -P. 340.

106. Balcabao, I.P., Aquilar, I. et al. Probiotics a novel approach in the management of food allergy //18-th Intern. Congr. Chemother. -Stockholm. -1993. -Abstr. 20. P. 126.

107. Barragry, Th.B. Therapy of calf pnevmonia /Th.B. Barragry //Jrish. Vet. News (sup). 1990. - Vol.12 (k). - N 4. - P. 1-6.

108. Bauernfeld, A. Macrolide immunosuppressants //6-th Europ. Congr. Clin. Microbiol. Infect. Dis.: Progr. Seville. - 1993. - Abstr.2. - P. 71.

109. Cazenave, M. Guide therapeugue veterinaire /М. Cazenave. Paris, 1983.-933 p.

110. Cerguiglini, S. Rass. Clin. sci. /S. Cerguiglini. 1974. - №50. -P. 4-5.

111. Clancy, I. Molecular cloning and functional analysis of a novel macrolide resistance determinant mef A from Streptococcus pyogenes / I. Clancy, I. Petitras, F. Dib-Haji et al. //Mol. Microbiol. - 1996. - 22. -P. 867-879.

112. Cox, W.J. Examining the immunologic and hematopoietic properties of an immunostimulant /W.J. Cox //Veter. med. (Edwards-ville). 1988. -Vol.83.-№4.-P. 424-428.

113. Cunningham, A.J. Further unprovement in the plague, techigue for detecting single antybody forming cell /A.J. Cunningham, A. Crenberg //Immunology. -1987. -V.2. -P. 599-600.

114. Dam, R. Studies on unidentified chick growth factors apparently organic in nature /R. Dam, A.R. Morrison, L.C. Norris //J. Nutrit. 1995. -№ 69 - P. 227.

115. Drlica, K. New Quinolones /К. Drlica, S. Coughlin, M.L. Gennaro //The New Generation of Quinolones /Siporin C., Ed. New York; London, 1990-P. 45-62.

116. Duchman, R. T cell specificity and cross reactivity towards enterobacteria, bacteroides, bifidobacterium, and antigens from resident intestinal flora in humans /R. Duchman //Gut. 1999. - Vol. 44. - № 6. -P. 812-818.

117. Fox, S.M. Probiotics: Intestinal inoculants for production animals /S.M. Fox //Veter. Med. 1988. - Vol. 83. -№ 8. - P. 806-810, 824-830.

118. Freter, R. Clin. Nutrition /R. Freter, J. Amer. -1974. Vol. 24. -P. 12.

119. Geron, D.G. Tilorone hydrochloride lack of correlation between interferon induction and viral protection /D.G. Geron, P. Jerome, F.P. Frank //Antimicrob. Agents Chemother. 1972. - V. 1. - P. 78-79.

120. Grasso, S.I. New in vitro model to study the effect of antibiotic concentration and rate of elimination on antibacterial activity /S.I. Grasso, I. Meirandi, I. Garneri et al. //Antimicrob. Agents Chemother. 1978. -V. 13.-P. 570-576.

121. Guerrant, R.L. Practice guidelines for the management of infectious diarrhea /R.L. Guerrant, T.V. Gilder, T.S. Steiner et al. //Clin. Infect. Dis. -2001.-V. 32. P. 331-350.

122. Hagen, S., Domagala, J. Biochemical and immunologic mechanisms in colitis: new targets for emerging therapies //31st Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother.: Progr. -Chicago. -1991. -Abctr. 1438. -P. 338.

123. Kaim, W. Bioioorganis Chemistry: Inorganics Elements in the Chemistry of Life /W. Kaim, B. Schewederski //Chichester: John Wile and Sons. 1994.-401 p.

124. King, C.K. Managing acute gastroenteritis among children: oral rehydration, maintenance, and nutritional therapy /С.К. King, R. Glass, J.S. Bresse, C. Duggan //MMWR Recomm. Rep. 2003. - V. 52 (RR-16). - P. 1-16.

125. Levy, J. Synergism between griziophulvinum and cefasolin against Staphilococcus aureus: A comparative study of oxacillin-sensitive and oxacillin-resistant strains /J. Levy, J. Klastersky // Antimicrobial Chemother. 1979. - V. 5. - P. 665-673.

126. Litt, M. Studie in experimental eosinophilia /М. Litt //Immunol. -1972. V. 109. - № 2. - P. 222-226.

127. Marrie, T.J. A controlled trill of a critical pathway for the threatment of community acquired pneumonia / T.J. Marrie, C.Y. Lan, S.L. Sheeler et al. //JAMA. 2000. - 283. - P.749-755.

128. Mavromichalis, J. Reseach into practice /J. Mavromichalis //Pig Progress. 2000. - V. 16. - P. 35-36.

129. Montay, G. Antibiotics vitae or more? /G. Montay, Y. Goeffon, F. Roquet //Antimicrob. Agents Chemother. - 1984. - V. 25. - P. 463-472.

130. Montroe, J.G. Plasma membrane depolarization in an early event in antiimmunoglobuline and antigen mediated B-cells stimulation / J.G. Montroe, J.C. Cambier //Immunobiol. 1995. - V. 163. - No 2-4. -P. 181-182.

131. O'Grady Lambert, H.P. Antibiotics and Chemotherapy /Н.Р. O'Grady Lambert, R.G. Finch, D.F. Greenwood //Antiinfective agents and their use intherapy /7th Ed Churchiell; Livingstone; New-York; Edinburg; London. - 1997.-P. 419-432.

132. Panisset, J.C. Veterinary pharmacjtherapia cjmpendium / J.C. Panisset.-1986.-565 p.

133. Pickering, L.K. Antibiotic therapy of colitis /L.K. Pickering // Pediatr. Infect. Dis. J. 2001. - V. 20. - P. 465-466.

134. Phillips, I. New Quinolones /I. Phillips, Л. King, K. Shannon //The Quinolones /V.T. Andriole, Ed. London; New York; Tokyo, Acad. Press, 1988.-P. 39-40.

135. Ribkin, G.D. Pharmacokinetics and bactericidal effects of cephalosporins on a susceptible strain of Klebsiella pneumonia / G.D. Ribkin, G. Pack //Cum Chem. and Inf. Dis. Washington, 1980. -V. l.-P. 685-686.

136. Rekiel, A. Zasady uzytkowania zozpolowego swin w celu poprawy efektywnosci produkcji /А. Rekiel //Wies Jntra. 1998. - № l.-P. 19.

137. Roberts, M.S. Tetracycline resistance determinants mechanisms of action regulation of expression genetic mobility and distribution / M.S. Roberts//FEMS Microbiol. 1996.-22.-P. 1-24.

138. Thapar, N. Diarrhea in children: an interface between developing and developed countries IN. Thapar, I. Sanderson //Lancet. 2004. - V. 363. -P. 641-653.

139. Thielman, N.M. Acute infectious diarrhea /N.M. Thielman, R.L. Guerrant //N. Engl. J. Med. 2004. - V. 350 (1). - P. 38-47.

140. Trill, J.E. Early repair processes in marrow cells irradiated and proliferating in vivo /J.E. Trill, R.A. Mc Culloch //Radiat. Res. 1963. -V. 18.-P. 56.

141. Warren, L.G. Studies on immune factors occurring in sera of chickens against the crithidia stage of Trypanosoma cruzi /L.G. Warren, T. Borsos // J. Nature. 1988. - V. 246. - No 2. - P. 1082-1083.

142. Watana, K. Sinergism between N-formimidoil thienamicin and gentamicin and tobramicin /К. Watana, C. Korn, J.S. Tisone //Antimicrob agents Chemotherapy. 1979. - V. 25. - P. 1082-1083.

143. Wren, W.B. Probiotics: Pact, of fiction /W.B. Wren //Am. Health. Nutrit. 1987. - V. 42. - No 8. - P. 28-30.

Оглавление диссертации Тухфатова, Регина Фановна :: 2006 :: Уфа

Введение диссертации по теме "Ветеринарная фармакология с токсикологией", Тухфатова, Регина Фановна, автореферат

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2006 года, Тухфатова, Регина Фановна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций