Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Токсико-фармакологическая характеристика политрила и его применение в птицеводстве

На правах рукописи

БАРЫШНИКОВ

ГРИГОРИЙ ДМИТРИЕВИЧ

ТОКСИКО-ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛИТРИЛА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В ПТИЦЕВОДСТВЕ

16.00.04 - Ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Троицк - 2004

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, профессор Кирилов Василий Григорьевич

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Лыкасова Ирина Александровна

кандидат ветеринарных наук, доцент Топурия Лариса Юрьевна

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия»

Зашита диссертации состоится « 2 » марта 2004 года в 1330 часов на заседании диссертационного совета Д.220.066.01 в Уральской государственной академии ветеринарной медицины по адресу: 457100, Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, 13.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины».

Автореферат разослан « 19 » января 2004 года.

Ученый секретарь диссертационного совета

Прокофьева Т.В.

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из актуальных проблем и задач агропромышленного комплекса России является увеличение производства продуктов животноводства.

В последние годы птицеводы наращивают производство продукции за счет повышения показателей яйценоскости, среднесуточных приростов и конверсии корма. При нарушении технологии содержания и кормления изменяется состояние резистентности организма, снижается устойчивость птиц к заболеваниям.

Далеко не все антибактериальные препараты удовлетворяют необходимым требованиям - низкой токсичностью и хорошей переносимостью.

Фторхинолоны, введенные в клиническую практику в начале 80-х годов, относятся к высокоэффективным антибактериальным препаратам широкого спектра действия, с оптимальными фармакокинетическими свойствами и хорошей переносимостью. Высокая степень биодоступности позволяет проводить лечение в большинстве случаев при пероральном применении препаратов. В настоящее время фторхинолоны рассматриваются как серьезная альтернатива традиционным высокоактивным антибиотикам широкого спектра действия (Падейская с соавторами, 1993-1997; Barbotin-Larrieu F., Daoud P., Raymond J., 1994; Rohrlich P., Vilmer F., 1994; Agaoglu L., Anak S., Devecioglu 6. et a!., 1995; Dagan R., 1995; Семыкин С.Ю., Постников С.С., Нажилов В.Н., 1998; Семыкина В.А., Андреева НЛ., 2001; Олейник Н.Н., Шарипова Л.К., Файрушин Р.Н., Ис-магилова А.Ф., Чудов И.В., Кирилов В.Г., Антипод В.А., 2003).

В связи с этим проведен целенаправленный синтез производных фтор-хинолонов адерентного типа действия, то есть сочетающего несколько видов фармакологической активности (Струнин Б.П., Антипов В.А., 1999).

Цель работы. Целью настоящей работы явилось дальнейшее изучение токсико-фармакологических свойств Политрила - новогр антибактериального препарата фторхинолонового ряда. Определить токсичность изучаемого соединения, его влияние на иммунную систему, функциональное состояние организма лабораторных животных и птицы в различные периоды эмбрио- и онтогенеза.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

- определить острую токсичность Политрила для белых мышей, крыс, цыплят кросса «Родонит» и мускусных утят кросса «Благоварский»;

- изучить фармакокинетику Политрила;

- изучить некоторые иммунологические показатели Политрила (влияние на кооперацию Т- и В-лимфоцитов, реакцию бласттрансформации лимфоцитов);

- изучить влияние Политрила на эмбриогенез, постнатальное развитие, а также на организм лабораторных животных;

- изучить влияние Политрила на качественные показатели мяса, яиц, выводимость и сохранность утят и цыплят;

- разработать схему применения

»•ОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ

БИБЛИОТЕКА Ciltrerj i Q»

ффективную

дозу, благотворно влияющую на рост и развитие утят.

Научная новизна. Впервые установлено, что Политрил является малотоксичным препаратом. Впервые изучены некоторые иммунологические показатели, разработана схема применения Политрила и установлена эффективная доза. Впервые изучено влияние Политрила на качественные показатели мяса и яиц птиц, а также выводимость и сохранность цыплят и утят. Критерием новизны является вся совокупность данных, полученных в результате проведения исследований.

Практическая и теоретическая значимость. Предложены методы и

схемы применения нового иммуномодулирующего и антибактериального препарата Политрил. Политрил представляется перспективным препаратом для улучшения здоровья и повышения продуктивности птицы. Получено временное наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии РФ от 12 августа 2002 года №001417ОП.

Материалы представленные в диссертационной работе используются в учебном процессе на кафедре внутренних незаразных болезней, клинической диагностики и фармакологии Башкирского государственного аграрного университета.

На защиту выносятся следующие положения'.

— о фармакологическом спектре и механизме иммуномодулирующего действия Политрила;

— о степени безвредности нового иммуномодулятора — Политрил;

— о возможности использования Политрила для улучшения здоровья и продуктивности птиц.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: международной научно-практической конференции, посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Ульяновск, 25-26 сентября 2003 года); международной конференции, посвященной 300-летию Санкт-Петербургу «Современные вопросы ветеринарной гомеопатии» (Санкт-Петербург, 22-23 октября 2003 года); Российской научно-практической конференции «Новые про биотические и иммунотропные препараты в ветеринарии» (Новосибирск, ноябрь 2003 года); на ежегодных конференциях профессорско-преподавательского состава факультета ветеринарной медицины Башкирского государственного аграрного университета (Уфа, 20012003 годы).

Настоящая работа выполнена в соответствии с тематикой научных исследований Башкирского государственного аграрного университета (номер госрегистрации 01.86.0-07.68.78).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ, в которых отражены основные результаты экспериментальных исследований.

Внедрение результатов исследования. Опытно-промышленные испытания проведены в ДП П113. «Длаговарский» Благоварского района и птицефабрике «Уфимская» Уфимскою района Республики Башкортостан.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 128 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов и практических предложений. Работа содержит 2 рисунка и 23 таблицы. Список литературы включает 159 источников, из них 82 отечественных и 77 зарубежных авторов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы исследования

Экспериментальные лабораторные исследования проведены на кафедре «Внутренних незаразных болезней, клинической диагностики и фармакологии» Башгосагроуниверситета (на 160 белых беспородных мышах и мышах линии СВА и C57BI с живой массой - 18-20 п на 380 белых крысах с массой 180-230 г, а также в условиях производства в ДП ППЗ «Благоварский» Благоварского района, птицефабрике «Уфимская» Уфимского района Республики Башкортостан на 5100 цыплятах и курах кросса «Родонит», 1135 мускусных утятах и утках кросса «Благоварский».

Опытные и лабораторные животные содержались в одинаковых зооги-гиенических условиях. Кормление проводили согласно суточной потребности (Ковалевский КЛ., 1968).

Изучение острой токсичности Политрила проводили По общепринятой методике (Саноцкий И.В: 1970, Елизарова О.Н. 1971). На основании гибели животных от применения разных доз-исследуемого соединения, методом интегрирования по Беренсу (1929) устанавливали: абсолютно смертельную дозу (LD100) и максимально переносимую дозу (LD0). Дозу, вызывающую гибель половины животных LD50, рассчитывали по формуле. Кербера, среднюю ошибку рассчитывали по формуле Гаддема (Беленький М.П., 1963).

Для суждения об эмбриотоксическом и тератогенном действии препарату определяли предимплантационную гибель зигот (разность между числом желтых тел в яичниках и количеством мест имплантации в матке в процентах от общего числа желтых тел). Определялась постимплантационная гибель (рАЗ-ностб между количеством мест имплантации и числом живых плодов в атке в процентах), а также общая эмбриональная смертность (разность между числом желтых тел беременности и живыми плодами в процентах. Часть плодов фиксировали в жидкости Буэна по методу Вильсона, с целью исследования состояния внутренних органов, другая часть фиксировалась 96% этиловым спиртом и окрашивалась ализарином по методу Даусона, с целью исследования скелета, измеряя длину участков окостенения длинных трубчатых костей (Dawson A.B., 1926; Wilson J., 1962).

О постнатальном развитии потомства судили по массе, показателям физиологического развития, а также по некоторым поведенческим реакциям крысят (двигательная активность, удержание на сетке, ориентировочная реакция, оборонительный рефлекс, поведение в открытом поле, реакцией дефекации)

(Kneip, 1960; Раевский К.С., Тимофеев В.А., 1965; Broadhurst P., 1967; Dandiya P.C. et. al., 1969).

Модулирующее влияние Политрила на выраженность кооперативного взаимодействия между Т- и В-лимфоцитами в процессе первичного иммунного ответа изучали в системе сингенного переноса. Иммунокомпетентные клетки донора, получавшего иммуномодуляторы, переносили сингенным реципиентам, получавшим летальную дозу ионизирующей радиации при мощности дозы 600 Р - 6,0 Гр., инактивирующей их собственную лимфоидную ткань (Хаитов Р.М, Арипова Т.У., 1982; Петров Р.В., 1987). Клетки донора трансплантировались в смеси, то есть клетки тимуса и костного мозга совместно, в следующих дозах: В-лимфоциты - 107 клеток, Т-лимфоциты - 2x107. Одновременно животные получали 2x108 эритроцитов барана.

На восьмые сутки после антигенной нагрузки тестировали интенсивность гуморального иммунного ответа по количеству антителпродуцентов в селезенке реципиентов методом N.K. Jeme, A.A. Nordin (1963).

Реакцию бласттрансформации осуществляли с лимфоцитами периферической крови крыс методом по В.В. Хоробрых (1983).

Фармакокинетику Политрила в органах и тканях изучали на мускусных утятах с живой массой 1000-1100 г. Для этого в течение часа до начала эксперимента и двух часов после введения препарата птица содержалась на голодной диете. Политрил птице вводили внутрь однократно через зонд непосредственно в зоб в дозах 4, 5 и 6 мг/кг. Через 0,5; 1; 2; 4; 6; 12; 18,24 и 36 часа после введения препарата убивали по 5 утят и определяли содержание ОДВ в сыворотке крови, скелетной и сердечной мышцах, печени, легких и почках микробиологическим методом диффузии в агаре с тест-культурой Bacillus subtilis ATCC 6633. Чувствительность метода 0,02-0,05 мкг/г или мкг/мл (Костенко Т.С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И., 2001).

Определение качественных показателей яйца: плотность, толщину и относительную массу скорлупы, индекс белка и желтка, содержание витамина А, рибофлавина в желтке и белке проводили согласно общепринятых методических рекомендаций (Штеле А.Л., 1979; Макаров В.А., Фролов В.П., Шуклин Н.Ф., 1991).

Влияние Политрила на яичную продуктивность мускусных уток определяли путем формирования 4 групп уток кросса «Благоварский» по 100 голов в каждой. Уткам первых трех групп Политрил задавали в течение 7 дней в дозе 4, 5 и 6 мг/кг соответственно в смеси с кормом. Утки четвертой группы служили контролем и получали только корма в строгом соответствии с рационом. У уток опытных и контрольных групп регистрировалась яйценоскость в первый и второй циклы яйценоскости, рассчитывалась яйценоскость на одну несушку, а также выводимость утят из полученных от них яиц.

Для определения аминокислотного состава мяса тушек птицы пользовались методикой тонкослойной хромотографии согласно ГОСТ 13496.22-90 2.5.43, при этом особое внимание уделяли содержанию основных аминокислот отвечающих за питательность мясных продуктов (триптофан, лейцин, лизин и метионин). Органолептические исследования для установления свежести и классности мяса проводили согласно ГОСТ 1269-19, а микроскопические и химические согласно ГОСТ 23392-18.

Определение воды в мясе кур проводили путем высушивания навески в сушильном шкафу. Содержание белка определяли согласно методике Кьендаля, по белковому азоту. Определение содержания жира по методу Сокслета основанном на экстрагировании жира из подсушенной навески продукта летучими растворителями с последующей отгонкой растворителя и высушиванием жира до постоянной массЫ. Определение содержания золы проводили путем прокаливания до постоянной массы (Антонов В.Я., Блинов П.Н., 1911).

При определении содержания калия и натрия в мышечной ткани тушек птиц, получавших Политрил, пользовались методом пламенной фотометрии при помощи пламенного фотометра PFC-4. Определение содержания кальция в минерализате мышечной ткани проводили комплексометрическим методом с индикатором флюорексаном; магния — по цветной реакции с титановым желтым по Кункелю, Пирсону, Швейгеру в модификации И.В. Петрухина; фосфора - согласно ГОСТа 9194-14 (Методика определения содержания общего фосфора в мясных продуктах фотоколориметрическим методом); железа - путем исследования золы, полученной при озолении мяса, по методу Сендела в модификации С.Г. Кузнецова (Кондрахин И.П., Курилов Н.В. с соавторами,

1985). Статистическую обработку цифровых данных проводили на PC Pentium III, с использованием прикладной программы MS Excel®, включающих подсчет средних величин (М), средней ошибки (m), среднеквадратических отклонений выборки (5), определения степени достоверности по Стьюденту (Стрелков Р.Б.,

1986).

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.2.1 Изучение острой токсичности Политрила

Параметры острой токсичности Политрила определяли на белых беспородных мышах с живой массой 18,0 - 20,0, белых крысах с массой 180,0-190,0 г при пероральном введении, а также на двухнедельных цыплятах и утятах при введении препарата в зоб с помощью зонда. Препарат вводили в разных дозах -от 2000 мг/кг до 8000 мг/кг.

Наблюдение за опытными животными проводили в течение 30 дней после отравления, параметры токсичности рассчитывались по методу Кербера. Результаты данной серии опытов представлены в таблице 1.

1 Острая токсичность Политрила

Вид животного 1Л)|6 ЬЭя, 1Л}юо

Белые мыши 2300,0 2387,5 2575,0±91,1 2750,0 2900,0

Белые крысы 2800,0 2880,0 3066,6±46,6 3250,0 3300,0

Цыплята 3300,0 4600,0 5043,8±106,7 6200,0 7500,0

Утята 3500,0 4900,0 5189,9±204,3 6500,0 7800,0

Примечание: Р<0,05

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что согласно ГОСТ 12.1.00. 7-76 Политрил относится к 4 классу опасности (малотоксичные вещества).

2.2.2 Фармакокннетика Политрила

В результате изучения фармакокинетики Политрила установлено, что его АДВ быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта. Максимальное содержание фторхинолона обнаруживалось через 1 час и удерживалось на высоком уровне в течение 6 часов после введения препарата, а к 12 часам падал примерно в 2 раза 12 часов).

Максимальная концентрация ОДВ установлена через 1 час в почках и через 2-6 часов в печени. В этих органах высокое содержание Политрила держится в течение 18 часов, что указывает на основные пути его выведения из организма через почки и печень.

В сердце, мышцах и легких наибольшие концентрации достигаются через 1,5-4 часа после введения препарата, а к 6 часу они начинают постепенно снижаться. Однако через 24 часа содержание фторхинолона в крови и тканях внутренних органов продолжает оставаться на уровне минимальной бактерицидной концентрации. Замечено, что Политрил обладает определенной тропно-стью к тканям, это является положительным моментом в фармакодинамике препарата и позволяет создавать его высокие концентрации в пораженных органах. Таким образом, фармакокинетика Политрила характеризуется быстрым всасыванием в организм после внутреннего применения распределением в органах и тканях и выведением из организма в течение суток.

Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг не кумулирует в органах и тканях мускусных уток кросса «Благоварский» и быстро выводится из организма. После 7 дневного назначения его остатки в следовых количествах обнаруживаются только в печени на 3 сутки после последнего применения. Отсутствие Полит-

рила в органах через 5 суток дает право рекомендовать использование мяса и субпродуктов в пищу не ранее чем через 5 суток после окончания применения Политрила.

2.2.3 Влияние Политрила на кооперацию Т- и В- лимфоцитов в первичном иммунном ответе

В последнее время для оценки иммуномодулирующего эффекта в программе скрининга иммуностимуляторов широко используется система синген-ного переноса культуры клеток in vitro. (Клименко ОА, Кудряшов В.М., Моряков Н.П., 1977; Петров Р.В. с соавторами, 1982, 1984). Преимущество этой системы заключается в том, что при изучении селективного влияния фармацевтических препаратов на клеточные популяции, можно оценивать как изменение уровня, так и направленность иммунных реакций (Francois F., 1982; Garnett, 1983; Козлов ВА с соавторами, 1968,1978; Емельяненко П.А., 1987).

Влияние Политрила на кооперативное взаимодействие иммунокомпе-тентных клеток в иммуногенезе, как интегральный тест, нами было изучено их взаимодействие, изолированное от воздействия факторов, которые могут повлиять на иммунный ответ в условиях сингенного переноса спленоцитов доноров.

Политрил при введении донорам спленоцитов вызывал значительное увеличение количества антителопродуцентов в селезенке мышей - реципиентов (Таблица 2). Политрил увеличивал количество АОК во всей селезенке в 6 раз, а в пересчете на 106 спленоцитов в 5 раз, тогда как байтрил увеличивал те же показатели лишь в 1,15 раза.

2 Влияние Политрила на кооперацию Т- и В-лимфацитов в системе сингенного переноса спленоцитов.

№ п/п Наименование препаратов Доза, мг/кг Количество животных, гол. Количество АОК

в селезенке на 106 спленоцитов

1. Политрил 5 10 5645,0±100,0 2175,0±75,3

2. Политрил 6 10 4599,0+90,5 2105,0±87,8

3. Байтрил 5 10 3500,0±100,0 1235,5±100,0

5. Контроль без переноса - 10 . 308,0±45,3 160,7±5,3

6. Контроль - 10 1450,0+65,0 620,0±55,9

Примечание: Р<0,001

Установлена способность Политрила активизировать процессы кооперации Т- и В-клеток. Данный эффект объясняется активацией Политрилом Т-хелперных субпопуляций, либо усилением процесса цитодифференцирования В-лимфоцитов в плазмоциты.

2.2.4 Влияние Политрила на реакцию бласттрансформации лимфоцитов

При индукции иммунного ответа лимфоидные клетки, отвечают бласт-трансформацией, обуславливают развитие специфической иммунологической реакции организма на антиген.

Реакция бласттрансформации ставилась микрометодом (Хоробрых В.В., исоавт., 1983).

При применении Политрила в дозах 5 и 6 мг/кг наступала характерная морфологическая трансформация Т-лимфоцитов под влиянием ФГА, а индекс стимуляции составлял 4,42±0,16 при дозе 5 мг/кг и 4,22±0,28 при дозе 6 мг/кг, тогда как в контрольной группе он был равен 3,82±0,25.

Результаты исследований представлены в таблице 3.

3 Влияние Политрила на бласттрансформацию лимфоцитов

Интенсивность включения

№ п/п Соединение Доза, мг/кг ЬГ-тимидина нестимули-рован., имп/мин. ФГА, 100 мкг/мин Индекс стимуляции

1. Политрил 5 1300,8±98,64 5748,4±108,3 4,4210,16

2. Пол итр ил б 1250,61105,9 5280,01155,7 : 4,22+0,28

3. Байтрил 5 1050,0±88,1 ' 4280,5±241,6 4)0810^4

4. Фуразолидон 5 805,5±81,0 2905,0±103,5 3,6110,11

5. Контроль - 590,0±48,7 2256,0±184,6 3,8210,25

Примечание: Р<0,05

Таким образом, Политрил в дозах 5 и 6 мг/кг стимулирует бласттранс-формацию лимфоцитов.

2.2.5 Эмбриотоксические свойства Политрила

Широкое применение лекарственных препаратов и других химических веществ в различных областях народного хозяйства создало опасность неблаго-

приятного их действия на животных и человека. Одним из наиболее опасных свойств химических веществ является их эмбриотоксическое и тератогенное действие. Недооценка этих факторов в действии химических соединений, в том числе и лекарственных препаратов, может привести к серьезным последствиям (Гарипов Т.В., Червяков Д.К., 1976; Антипов В.А., 1978; Олейник Н.Н., Шари-пова Л.К., Файрушин Р.Н., Исмагилова А.Ф., Чудов И.В., Кирилов ВТ., Антипов В.А., 2003).

Лекарственные препараты могут оказывать влияние на плод тремя путями, действуя на организм матери, на плаценту и непосредственно на плод.

Для изучения эмбриотоксических и тератогенных свойств Политрила, последний задавался самкам крыс в течение всего срока беременности, в дозах 4,5 и 6 мг/кг.

Основные показатели, характеризующие эмбриотропное действие По-литрила - предимплантационная смертность зигот, постимплантационная гибель эмбрионов и общая эмбриональная смертность у опытных животных, получавших препарат в исследуемых дозах были в близких пределах с контрольными (Р<0,05). При микроскопическом наружном осмотре плодов и их плацент в опытных и контрольных группах изменений не обнаружено. При анатомическом исследовании внутренних органов и костной системы плодов дефектов развития не выявлено, что указывает на отсутствие эмбриотоксического и тератогенного действия. Различия в массе плодов, их длине, массе плацент, их диаметре и плодоплацентарных коэффициентах были не достоверны (Р<0,05).

2.2.6 Влияние на постнатальное развитие

В этой серии опытов, как и при изучении эмбриотоксических и тератогенных свойств, беременные самки крыс получали Политрил в дозах 4,5 и 6 мг/кг с 1 по 21 день беременности. Контрольным животным вводили воду.

Проведенные нами исследования показали, что Политрил не оказывает влияния на течение и продолжительность беременности у крыс. Так, у контрольных крыс беременность продолжалась 22-23 дня, у самок, которые получали Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг - 23 дня. Разницы в численности помета крыс, получавших Политрил в различных дозах и интактных животных отмечено небыло.

Двигательная активность крысят, мамы которых получали во время беременности Политрил, и крысята контрольной группы не отличались.

Проведенные эксперименты показали, что потомство, родившееся от крыс, получавших при беременности Политрил в дозах 4,5 и 6 мг/кг не отличалось от контрольного увеличением ориентировочной активности, усилением исследовательского и оборонительного рефлекса избегания, двигательной активности и поведения в «открытом поле».

Таким образом, Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг не обладает эмбриоток-сическим и тератогенным действием, а также не влияет на постнатальное развитие крысят.

2.2.7 Влияние Политрила на функциональные показатели организма лабораторных животных

При проведении исследований направленных на изучение действия Политрила на функцию печени в различных дозах, нами было установлено, что при длительном введении Политрила в дозах 4, 5 и 6 мг/кг продолжительность гексеналового сна укорачивалась, что свидетельствовало о стимулирующем действии данного препарата на ферментативный аппарат печени крыс.

О детоксикационной функции почек судили по пробе Квика-Пытеля (в модификации Степановой И.Г., 1962), по содержанию гиппуровой кислоты в суточной моче достоверной разницы между опытными и контрольной группами не наблюдалось, т.е. препарат не оказывал токсического действия на органы мочевыделения.

О влиянии исследуемого соединения на центральную нервную систему судили по изменению ориентировочных реакций: вертикального компонента, исследовательского рефлекса и числа обследованных отверстий (тест Баусье-Симона), а также по изменению порога болевого раздражения.

Порог болевого раздражения (путем зажатия хвоста) у животных всех групп был одинаковым.

Таким образом, тридцатидневное введение соединения не оказало токсического влияния на функциональное состояние нервной системы.

2.2.8 Влияние прединкубационной обработки яиц Политрилом, на их выводимость и сохранность цыплят

В настоящее время, в птицеводческих хозяйствах республики Башкортостан, для профилактики инфекционных заболеваний цыплят, распространяющихся с тарой, транспортными средствами и с яйцом, применяется прединку-бационная обработка яиц с помощью растворов формальдегида, антибиотиков, либо путем применения аэрозоля йодистого алюминия. Однако, применение многих антибактериальных препаратов, особенно с одновременным нарушением технологических режимов приводит к возникновению антибиотикоустойчи-вой микрофлоры. Применение формальдегида способствует образованию активных форм кислорода и свободных радикалов, которые разрушают белки и нуклеиновые кислоты, липиды и олигасахариды, оказывая отрицательное влияние на природные механизмы защиты яиц, что способствует вторичным конта-минациям (Газизов Г.М., Шагиев М.Х., Мухаметдинов Р.Д., Афанасьева Т.А., Сайфуллин Ф.М., Байматов В.Н., Хазиев Г.З., Дементьев Е.П., 1997).

При проведении опыта, нами установлено, что выводимость цыплят из яиц предварительно, обработанных 0,5%-ным (по ДВ) раствором Политрила, составила 86,4%, а сохранность цыплят в 60-ти дневном возрасте составила

81,6% по сравнению с контролем, где выводимость и сохранность цыплят составили 69,8% и 72,5% соответственно. Выводимость же цыплят при применении формальдегида составила всего 75%, а их сохранность 74,2%.

2.2.9 Влияние Политрила на качественные показатели яиц, сохранность и продуктивность кур

В научно-производственном опыте на 5 000 курах-несушках установлено, что введение в состав рациона Политрила в дозе 5 мг/кг в течение 7 дней оказывает положительное влияние на сохранность и продуктивность птиц. Установлено, что за период проведения опытов в контрольной группе отход составил 64 головы (2,56%), а в опытной группе всего 6 голов (0,24%).

В конце опыта яйценоскость в контрольной группе увеличилась по сравнению с началом опыта на 1,81%, в опытной же группе увеличение яйценоскости составило 14,76%, что позволило получить за 30 дней дополнительно 148 яйца на 100 кур несушек. Кроме того нами установлено увеличение содержания витамина А на 23,84% и витамина В2 на 18,51%, в желтке яиц.

2.2.10 Влияние Политрила на яичную продуктивность мускусных уток

Кроме высокой мясной продуктивности утки отличаются и хорошей яйценоскостью. В первый биологический цикл яйценоскости (6-7месяцев) от уток получают 120-150 яиц на несушку, затем у уток наступает линька, которая длится от 2 до 4 месяцев. После линьки начинается второй биологический цикл (4-5 месяцев), за который от несушки можно получить еще 90-120 яиц (Штеле АЛ., 1978; Божко П.Е., 1984).

На основании положительных результатов по увеличению яйценоскости, полученных при введении Политрила в рацион кур нами была выдвинута теория о подобном, положительном влиянии Политрила и на яйценоскость уток. В связи с чем нами были сформированы 4 группы несушек материнского стада мускусных уток кросса «Благоварский». Уткам первой, второй и третьей групп ежедневно внутрь с кормом в течение 7 дней, двукратно задавался По-литрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг соответственно. Утки 4 группы служили контролем и получали только корма в соответствии с рационом.

Применение Политрила в дозе 5 мг/кг дало увеличение яйценоскости опытных уток, за два биологических цикла, более чем на 38 яиц на одну несуш- -ку. Кроме того, выводимость утят в этой группе превысила аналогичный показатель в контрольной группе на 5,2% (таблица 4).

4 Влияние Политрила на яйценоскость мускусных уток

Яйценоскость

Первый биологический цикл Второй биологический цикл

Группы Получено яиц на 1 несушку, шт Получено дополнительно яиц по сравнению с контролем, шт Выводимость утят,% Получено яиц на 1 несушку, шт Получено дополнительно яиц по сравнению с контролем, шт Выводимость утят, %

№1 Политрил, 4 мг/кг 156,2+3,6 10,5±0,5 95,8+4,3 112,6±2,1 7,4±0,6 93,5±3,6

№2 Политрил, 5 мг/кг 164,9±2,8 19,2+0,7 96,3+3,5 124,3±1,8 19,1 ±0,3 93,8±2,1

№3 Политрил, 6 мг/кг 161,4±4,7 15,7+1,1 95,9±3,8 122,5±3,2 17,3±1,5 92,2±3,0

№4 Контроль 145,7±2,1 - 91,3+5,2 105,2+1,5 - 88,6±6,5

Примечание: Р<0,002

2.2.11 Влияние Политрила на прирост живой массы утят

Массовое выращивание уток является важным резервом увеличения производства мяса, отличающегося высокой калорийностью и вкусовыми качествами (Сметнев СИ., 1958; Божко П.Е., 1984; Штеле АЛ., 1978; Шчука Л.И., 2003; Калоев Б.Л., 2003; Киселев В.П., Тисменецкая М.А., 2003).

Для реализации поставленной цели, нами было скомплектовано 4 группы мускусных утят кросса «Благоварский» однодневного возраста (по 50 утят в каждой группе). Утятам первой, второй и третьей групп ежедневно внутрь с кормом в течение 7 дней, двукратно задавался Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг соответственно. Утята 4 группы служили контролем и получали только Корма в строгом соответствии с рационом.

Введение в рацион утят нового фторхинолона- Политрил, в дозе 5 мг/кг приводило к достоверному увеличению их живой массы. Так уже на 10 сутки жизни утят во второй опытной группе среднесуточный привес составил 26,03±0,88 г, тогда как в контрольной группе этот же показатель составлял всего 23,12±1,07 г, в конце же опыта, на 50 сутки, среднесуточный прирост во второй и контрольной группах составлял 76,87±2,5 г и 68,19±3,4 г соответственно. Таким образом, за все 50 дней опыта, от утят второй опытной группы было получено дополнительно около 400 г живой массы по сравнению с контролем.

Введение в рацион утят Политрила в дозе 4 и 6 мг/кг также стимулировало их рост, однако в первой опытной группе эти показатели были ниже соответствующих показателей второй и третьей опытных групп, а показатели 3 опытной группы были незначительно выше показателей второй.

2.2.12 Влияние Политрила на изменение мясных качеств мускусных утят

Сравнительное испытание мясных качеств уток различных популяций (пекинская, гибридные и мускусные) показало, что пекинские утки характеризуются излишним отложением жира в тушках и повышенными затратами корма. Лучшие показатели по качеству мяса имеют мускусные утки, которые характеризуются хорошо развитыми грудными мышцами, мясо высокого качества, у них жира в тушках значительно меньше, чем у пекинских. Чтобы получить тушку с хорошей убойной массой и повышенным выходом мяса, мускусных уток откармливают до 8-10 недельного возраста. Однако при клеточном содержании срок выращивания утят может быть сокращен до 6-7 недель, что позволяет получить от них мясо высокого качества.

С целью изучения влияния Политрила на изменение мясных качеств мускусных уток нами были проведены опыты, в которых было использовано 4 группы утят, по 25 в каждой. Утята опытных групп получали Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг, ежедневно в течение 7 дней. Утята контрольной группы оставались интактными. Полученные результаты представлены в таблице 5.

Так при применении Политрила в дозе 5 мг/кг масса потрошеной тушки увеличивалась на 3,13%, по сравнению с контролем. Одновременно с этим также отмечается увеличение массы мышечной ткани на 2,75%, костной ткани на 1,87%, съедобной части на 2,03% по отношению к контролю (Р<0,05). Однако видно, что при этом, у утят, получавших Политрил в дозе 5 мг/кг, незначительно уменьшилась масса кожи с подкожным жиром (на 1,53%) и внутреннего жира (на 0,11%). И, тем не менее, эти показатели все же находятся на физиологическом уровне и не снижают, а, скорее всего, повышают питательные и вкусовые качества получаемой утятины.

При применении Политрила в дозах 4 и 6 мг/кг также видно заметное улучшение мясных качеств, по сравнению с контролем, но эти показатели незначительно ниже в первом случае и незначительно выше во втором, однако по сравнению с дозой Политрила в 5 мг/кг применение выше указанных доз менее целесообразно.

Применение Политрила в испытуемых дозах - 4, 5 и 6 мг/кг, путем группового скармливания утятам в течение 7 дней приводит не только к улучшению мясных качеств, но и к значительному улучшению его аминокислотного состава. Особенно заметно улучшение аминокислотного состава мяса при применении данного препарата в дозе 5 мг/кг. Так содержание незаменимых аминокислот: валина на 34,93%, изолейцина на 11,7%, лейцина на 25,9%, лизина на 23,1%, метионина на 81,9%, триптофана на 4,3% и фенилаланина на 0,17% выше по сравнению с контролем. Кроме этого, в мясе опытных утят увеличивается и содержание заменимых аминокислот.

я

•о

X £ о Л

Я:

п

'V

Л о о о

№ п/п

Контроль 3 «о г У ч ? .. Я ,. лл о - ; 1-5 я' ' |5 « ** "2 .1 ' Соединение и его доза

• Н- • ' о\ о " и» 00 ■ Н- Оч ■ Хо и и Живая масса утят в су-' ' точном возрасте, г

1 2860,5 ' ±126,8 н- .За Оч и. ^ * ы £ ё о ю к> л V] 1Л Живая масса перед убоем (7 нед.), г

н- 3 §8-Оч ^ н- .-а-2. <=> 8;» •■ 2 о . оо • - > '. : 1 я Е о . • 5 В. п о КС 2 СО О о в»

«л. Ы . и> 1 и» к> ' - \о •, о* о> • • Й 2 л Ы , - Ю Оч ' из 00 ЧО ¿4

682,4 '"±42,4 & ;; V© О» -о Оч -Р- К 2! ОО Оч Ы4 1-1 п о

23,86 ±1,48 н- К ъЪ •+ £ I— Оч "о Оч Оч — ■Р.* чо ЧО Оч Ы ■ - >5

Н- Оч 1Л Оч СО О — Н- <1 1л / оо и» VI оч Н- Оч . Л О -и Г* ■■ Ъч оо >1 й-8 ■в 5 я II-

О м ч л • — 1+ К> ч© -Оч • о ОО V© О4

оо >© ; 0 Оч • • • МЫ 1- Й- л. ОО ОО, , и> у. £6 1л п я □ • 9 з- К я ° Ч ' я с ■■■ 1

£¡3 I- Л ы ■ ■ й 2; ..Оч ... н- „ • О ы " в"-

Н- <Л> ■ и и» ' . ы Ъ> о» Оч . . Н- «л о к*» \о о •-1 ш • '.Я -5 5 ' 3

Н-' — • М Н-/1* • Н-' _ " §25 (Л н- — N9 О^

1612,5 1 ±134,8 .»З 5.2 Ы чл Я1 В » *-4 - и з а з а о »

56,37 ±4,71 * — Оч "л V О* чо Ц и. ОО у! оо чв О4

1.93 1 ±0.01 2 2 3« Индекс мясных качеств

Так содержание аланина выше на 22,78%, аргинина на 7,86%, гистидина на 2,86%, глицина на 2,97% и серина на 14,9%, и лишь содержание цистина на 5,21% ниже, чем в контроле. Не лишним будет отметить и тот факт, что содержание незаменимых аминокислот в мясе контрольных утят на 10-25%, а метио-нина на 49% ниже нормы для мяса 1 категории. Кроме того, явные изменения заметны и в химическом составе мяса. В мясе, полученном от утят которым задавался Политрил в дозе 5 мг/кг, уменьшилось содержание воды (54,3± 1,43 г%) по сравнению с контролем (58,7±2,01г%), что также говорит об улучшении качеств мяса. Не смотря на то, что в потрошеной тушке утят получавших Полит-рил в дозе 5 мг/кг масса кожи с подкожным жиром и масса внутреннего жира ниже на 1,53% и 0,11% соответственно, по сравнению с контролем, содержание жира в мясе наоборот повысилось на 30,1%, что говорит о более равномерном его распределении в организме утят.

Подобные изменения происходят и в минеральном составе мяса утят. Так при многократном (7 дней) скармливании утятам Политрила в дозе 5 мг/кг, в мясе увеличивается содержание калия на 1,21%, кальция на 1,98%, магния на 10,3%, фосфора на 0,71% (и железа на 9,49% по сравнению с контролем. Содержание же натрия во второй опытной группе ниже на 1,33%, чем в контроле, однако его содержание находится в пределах физиологической нормы, а также в физиологичном соотношении с калием, что не ведет к ухудшению вкусовых и питательных качеств получаемого мяса, а также не приводит к ухудшению работоспособности натрий-калиевых насосов клеток организма живых утят.

ВЫВОДЫ

1. Среднесмертельная доза Политрила составила: для белых мышей -2575,0±91,1 мг/кг; для белых крыс - 3066,6146,6 мг/кг; для цыплят кросса «Родонит» — 5043,8± 106,7 мг/кг; для мускусных утят кросса «Благо-варский» - 5189,9±204,3 мг/кг. Согласно ГОСТа 12.1.00. 7-76 Политрил относится к 4 классу токсичности (малотоксичные вещества);

2. Политрил, при ежедневной его даче внутрь с кормом, двукратно в течение 7 дней, в дозах 4, 5 и 6 мг/кг не кумулирует в организме мускусных утят кросса «Благоварский», а его остатки в следовых количествах обнаруживаются только в печени по истечении 3 суток с момента последней дачи;

3. В реакции иммуностимулирующего действия Политрила имеют следующие механизмы:

- Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг способствует активизации Т-хелперных субпопуляций либо усиление процесса цитодифферен-цирования В-лимфоцитов в плазмоциты;

- при действии Политрила в дозах 5 и 6 мг/кг наступает морфологическая трансформация Т-лимфоцитов под влиянием ФГА.

4. Политрил при введении крысам в дозах 4, 5 и 6 мг/кг в течение беременности не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием; не проявляет токсических свойств в постнатальном развитии крысят, матери которых получали изучаемый препарат в течение всего срока беременности;

Длительное введение Политрила в дозах 4,5 и 6 мг/кг:

- приводило к укорочению гексеналового сна, что свидетельствует о стимулирующем действии на ферментативный аппарат печени крыс;

- не оказывало токсического действия на органы мочевыделения;

- не оказывало токсического влияния на функциональное состояние нервной системы.

5. Политрил при его групповом, профилактическом скармливании ежедневно, двукратно в течение 7 дней, в дозе 5 мг/кг:

- утятам двухнедельного возраста - приводит к улучшению их мясной продуктивности в целом, и мясных качеств в частности;

- мускусным уткам кросса «Благоварский» и курам кросса «Родонит» - приводит к улучшению их яичной продуктивности, а также выводимости утят и цыплят, из полученных яиц.

6. Профилактическое, ежедневное, двукратное в течение 7 дней скармливание Политрила в дозе 5 мг/кг, улучшает усвояемость утятами корма и способствует увеличению их живой массы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Проведенные опытно-промышленные испытания подтвердили иммуностимулирующий эффект и установили положительное влияние Политрила на яичную и мясную продуктивность кур и цыплят кросса «Родонит», Уток и утят кросса «Благоварский», а также выводимость утят и цыплят из яиц, что дает возможность рекомендовать его для широкого применения в птицеводстве.

Политрил представляется перспективным препаратом для улучшения и повышения продуктивности птиц. Получено временное наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии РФ от 12 августа 2002 года № 001417ОП.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Влияние 1-этил-6-фтор-7-морфолино-4-оксо-3-хинолинкарбоновой кислоты (Политрил) на качественные показатели яиц кур //Материалы международной научн.-практ. конф., посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии /«Актуальные проблемы ветеринарной медицины». -Ульяновск, 2003.-Т. 1.-С. 174-175. (в соавторстве с Кириловым В.Г.).

2. Влияние прединкубационной обработки яиц Политрилом на их выводимость и сохранность цыплят //Материалы международной научн.-практ. конф., посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии /«Актуальные проблемы ветеринарной медицины». -Ульяновск, 2003. - Т.1. -С. 179180. (в соавторстве с Кириловым В.Г.).

3. Влияние Политрила на реакцию бласттрансформации лимфоцитов //Материалы Российской научн.-практ. конф. «Новые пробиотические и иммунотропные препараты в ветеринарии». -Новосибирск, 2003. - С. 1617.

4. Влияние Политрила на кооперацию Т- и В-лимфоцитов в первичном иммунном ответе //Материалы Российской научн.-практ конф. «Новые про-биотические и иммунотропные препараты в ветеринарии». -Новосибирск, 2003. -С. 18-19.

5. Влияние Политрила на яичную продуктивность мускусных уток //Материалы первой Российской Международной конф., посвященной 300-летию Санкт-Петербургу /«Современные вопросы ветеринарной гомеопатии». Санкт-Петербург, 2003. - С. 52-54. (в соавторстве с Кириловым В.Г.).

6. Влияние Политрила на прирост живой массы мускусных уток //Материалы первой Российской Международной конф.', посвященной 300-летию Санкт-Петербургу /«Современные вопросы ветеринарной гомеопатии». Санкт-Петербург, 2003. -С. 55-56. (в соавторстве с Кириловым В.Г.).

»-2009

РНБ Русский фонд

2004-4 27385

На правах рукописи

БАРЫШНИКОВ ГРИГОРИЙ ДМИТРИЕВИЧ

ТОКСИКО-ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛИТРИЛА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В ПТИЦЕВОДСТВЕ

16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Сдано в набор 8.01.04 г. Подписано в печать 12.01.04 г. Формат 60 ¿4/16. Объем 1 печ.л. Тираж 100 экз. Заказ № 124 Гарнитура Times New Roman

Издательский центр УГАВМ. Лицензия ЛР №01252 от 31.10.1997 г. 457100, г. Троицк, Челябинская обл., ул. Гагарина, 13 Тел.: (35163) 2-64-75

Отпечатано в редакционно-издательском отделе ФГОУ ВПО УГАВМ

Актуальность темы. Одной из актуальных проблем и важных задач агропромышленного комплекса России является увеличение производства продуктов животноводства.

В последние годы птицеводы наращивают производство продукции за счет повышения показателей яйценоскости, среднесуточных приростов и конверсии корма. При нарушении технологии содержания и кормления изменяется состояние резистентности организма, снижается устойчивость птиц к заболеваниям.

Далеко не все антибактериальные препараты удовлетворяют необходимым требованиям - низкой токсичностью и хорошей переносимостью.

Фторхинолоны, введенные в клиническую практику в начале 80-х годов, относятся к высокоэффективным антибактериальным препаратам широкого спектра действия, с оптимальными фармакокинетическими свойствами и хорошей переносимостью. Высокая степень биодоступности позволяет проводить лечение в большинстве случаев при пероральном применении препаратов. В настоящее время фторхинолоны рассматриваются как серьезная альтернатива традиционным высокоактивным антибиотикам широкого спектра действия (Падейская с соавторами, 1993-1997; Barbotin-Larrieu F., Daoud P., Raymond J., 1994; Rohrlich P., Vilmer F., 1994; Agaoglu L., Anak S., Devecioglu O. et al., 1995; Dagan R., 1995; Семыкин С.Ю., Постников C.C., Нажилов B.H., 1998; Семыкина В.А., Андреева H.JI., 2001; Олейник Н.Н., Шарипова Л.К., Файрушин Р.Н., Исмагилова А.Ф., Чудов И.В., Кирилов В.Г., Антипов В.А., 2003).

В связи с этим проведен целенаправленный синтез производных фторхинолонов адерентного типа действия, то есть сочетающего несколько видов фармакологической активности (Струнин Б.П., Антипов В.А., 1999).

Цель работы. Целью настоящей работы явилось дальнейшее изучение токсико-фармакологических свойств Политрила- нового антибактериального препарата фторхинолонового ряда. Определить токсичность изучаемого соединения, его влияние на иммунную систему, функциональное состояние организма лабораторных животных и птицы в различные периоды эмбрио- и онтогенеза.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

- определить острую токсичность Политрила для белых мышей, крыс, цыплят кросса «Родонит» и мускусных утят кросса «Благоварский»;

- изучить фармакокинетику Политрила;

- изучить некоторые иммунологические показатели Политрила (влияние на кооперацию Т- и В-лимфоцитов, реакцию бласттрансформации лимфоцитов);

- изучить влияние Политрила на эмбриогенез, постнатальное развитие, а также на организм лабораторных животных;

- изучить влияние Политрила на качественные показатели мяса, яиц, выводимость и сохранность утят и цыплят;

- разработать схему применения Политрила и установить эффективную его дозу, благотворно влияющую на рост и развитие утят.

Научная новизна. Впервые установлено, что Политрил является малотоксичным препаратом. Впервые изучены некоторые иммунологические показатели, разработана схема применения Политрила и установлена эффективная доза. Впервые изучено влияние Политрила на качественные показатели мяса и яиц птиц, а также выводимость и сохранность цыплят и утят. Критерием новизны является вся совокупность данных, полученных в результате проведения исследований.

Практическая и теоретическая значимость. Предложены методы и схемы применения нового иммуномодулирующего и антибактериального препарата Политрил. Политрил представляется перспективным препаратом для улучшения здоровья и повышения продуктивности птицы. Получено временное наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии РФ от 12 августа 2002 года№ 0014170П.

Материалы представленные в диссертационной работе используются; в учебном процессе на кафедре внутренних незаразных болезней, клинической диагностики и фармакологии Башкирского государственного аграрного университета.

На защиту выносятся следующие положения:

- о фармакологическом спектре и механизме иммуномодулирующего действия Политрила;

- о степени безвредности нового иммуномодулятора - Политрил;

- о возможности использования Политрила для улучшения здоровья и продуктивности птиц.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: международной научно-практической конференции, посвященной 60-летию факультета ветеринарной медицины Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Ульяновск, 25-26 сентября 2003 года); международной конференции, посвященной 300-летию Санкт-Петербургу «Современные вопросы ветеринарной гомеопатии» (Санкт-Петербург, 22-23 октября 2003 года); Российской научно-практической конференции «Новые пробиотические и иммунотроп-ные препараты в ветеринарии» (Новосибирск, ноябрь 2003 года); на ежегодных конференциях профессорско-преподавательского состава факультета ветеринарной медицины Башкирского государственного аграргг^го университета (Уфа, 2001-2003 годы).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ, в которых отражены основные результаты экспериментальных исследований.

Внедрение результатов исследования. Опытно-промышленные испытания проведены в ДП 11113 «Благоварский» Благоварского района и птицефабрике «Уфимская» Уфимского района Республики Башкортостан.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 128 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов и практических предложений. Работа содержит 2 рисунка и 23 таблицы. Список литературы включает 159 источников, из них 82 отечественных и 77 зарубежных авторов.

Выводы

1. Среднесмертельная доза Политрила составила: для белых мышей -2575,0±91,1 мг/кг; для белых крыс - 3066,6±46,6 мг/кг; для цыплят кросса «Родонит» - 5043,8±106,7 мг/кг; для мускусных утят кросса «Благоварский» - 5189,9±204,3 мг/кг. Согласно ГОСТа 12.1.00. 7-76 Политрил относится к 4 классу токсичности (малотоксичные вещества);

2. Политрил, при ежедневной его даче внутрь с кормом, двукратно в течение 7 дней, в дозах 4, 5 и 6 мг/кг не кумулирует в организме мускусных утят кросса «Благоварский», а его остатки в следовых количествах обнаруживаются только в печени по истечении 3 суток с момента последней дачи;

3. В реакции иммуностимулирующего действия Политрила имеют следующие механизмы:

- Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг способствует активизации Т-хелперных субпопуляций либо усиление процесса цитодифференцирования В-лимфоцитов в плазмоциты;

- при действии Политрила в дозах 5 и 6 мг/кг наступает морфологическая трансформация Т-лимфоцитов под влиянием ФГА.

Политрил при введении крысам в дозах 4, 5 и 6 мг/кг в течение беременности не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием; не проявляет токсических свойств в постнатальном развитии крысят, матери которых получали изучаемый препарат в течение всего срока беременности;

Длительное введение Политрила в дозах 4, 5 и 6 мг/кг:

- приводило к укорочению гексеналового сна, что свидетельствует о стимулирующем действии на ферментативный аппарат печени крыс;

- не оказывало токсического действия на органы мочевыделения;

- не оказывало токсического влияния на функциональное состояние нервной системы.

Политрил при его групповом, профилактическом скармливании ежедневно, двукратно в течение 7 дней, в дозе 5 мг/кг:

- утятам двухнедельного возраста - приводит к улучшению их мясной продуктивности в целом, и мясных качеств в частности;

- мускусным уткам кросса «Благоварский» и курам кросса «Родонит» - приводит к улучшению их яичной продуктивности, а также выводимости утят и цыплят, из полученных яиц.

6. Профилактическое, ежедневное, двукратное в течение 7 дней скармливание Политрила в дозе 5 мг/кг, улучшает усвояемость утятами корма и способствует увеличению их живой массы.

Практические предложения

Проведенные опытно-промышленные испытания подтвердили иммуностимулирующий эффект и установили положительное влияние Политрила на яичную и мясную продуктивность кур и цыплят кросса «Родонит», Уток и утят кросса «Благоварский», а также выводимость утят и цыплят из яиц, что дает возможность рекомендовать его для широкого применения в птицеводстве.

Политрил представляется перспективным препаратом для улучшения и повышения продуктивности птиц. Получено временное наставление, утвержденное Департаментом ветеринарии РФ от 12 августа 2002 года № 0014170П.

Заключение

Фармакокинетические исследования служат основой для создания оптимальных схем лечения с одновременным учетом фундаментальных фармакодинамических данных. Концентрация лекарственного вещества в том или ином органе и организме в целом определяет фармакологический эффект. Поскольку концентрация лекарственного вещества в различных органах и тканях непрерывно изменяется, следовательно, уровень и продолжительность фармакодинамических процессов будет также меняться. Продолжительность содержания лекарственного вещества в тканях организма, в терапевтических концентрациях дает возможность определить пути и интервалы введения лекарственного вещества для обеспечения максимального эффекта (Соколов В.Д., 2002).

В результате изучения фармакокинетики Политрила установлено, что его АДВ быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта. Максимальное содержание фторхинолона обнаруживалось через 1 час и удерживалось на высоком уровне в течении 6 часов после введения» препарата, а к 12 часам падал примерно в 2 раза (Ti/2=12 часов).

Установлено, что Политрил, согласно ГОСТ 12.1.00 7-76, относится к 4 классу опасности (малотоксичные вещества), не кумулирует в органах и тканях птицы, и быстро выводится из организма. После 7 дневного назначения его остатки в следовых количествах обнаруживаются только в печени на 3 сутки после последнего назначения. Отсутствие Политрила в органах через 5 суток дает право рекомендовать использование мяса и субпродуктов в пищу не ранее чем через 5 суток после окончания применения Политрила.

В последнее время для оценки иммуномодулирующего эффекта в программе скрининга иммуностимуляторов широко используется система сингенного переноса культуры клеток in vitro. (Клименко О.А., Кудряшов В.М., Моряков Н.П., 1977; Петров Р.В с соавторами, 1982).

Политрил при введении донорам спленоцитов вызывает значительное увеличение количества антителопродуцентов в селезенке мышей -реципиентов, увеличивает количество АОК во всей селезенке в 6 раз, а в пересчете на 106 спленоцитов в 5 раз, тогда как байтрил увеличивает те же показатели лишь в 1,15 раза.

При применении Политрила в дозах 5 и 6 мг/кг наступает характерная морфологическая трансформация Т-лимфоцитов под влиянием ФГА, а индекс стимуляции составлял 4,42±0,16 при дозе 5 мг/кг и 4,22±0,28 при дозе 6 мг/кг, тогда как в контрольной группе он был равен 3,82±0,25.

Широкое применение лекарственных препаратов и других химических веществ в различных областях народного хозяйства создало опасность неблагоприятного их действия на животных и человека. Одним из наиболее опасных свойств химических веществ является их эмбриотоксическое и тератогенное действие. Недооценка этих факторов в действии химических соединений, в том числе и лекарственных препаратов, может привести к серьезным последствиям (Гарипов Т.В., Червяков. Д.К., 1976; Антипов В.А., 1978; Олейник Н.Н., Шарипова Л.К., Файрушин Р.Н., Исмагилова А.Ф., Чудов И.В., Кирилов В.Г., Антипов В.А., 2003).

В опытах по исследованию эмбриотоксического и тератогенного действия Политрила на крысах установлено отсутствие эмбриотропного действия.

При анатомическом исследовании внутренних органов и костной системы плодов, полученных от крыс опытных групп, дефектов развития не выявлено, что указывает на отсутствие эмбриотоксического и тератогенного действия.

Политрил не оказывает влияния на течение и продолжительность беременности у крыс. Так, у контрольных крыс беременность продолжалась 22-23 дня, у самок, которые получали Политрил в дозах 4, 5 и 6 мг/кг - на 23 сутки.

Масса крысят, матери которых получали Политрил в трех дозах: 4, 5 и 6 мг/кг, не отличалась от массы контрольных животных на протяжении всего времени проведения эксперимента.

Проведенные эксперименты показали, что потомство, родившееся от крыс, получавших при беременности Политрил в разных дозах, не отличалось от контрольных увеличением ориентировочной активности. На 20 день жизни число крысят, мамы которых получали во время беременности Политрил, и контрольных животных, поднявшихся по сетке, было одинаковым - 65,1% и 69,2% соответственно.

В результате проведенных исследований по изучению влияния Политрила на развитие потомства при введении препарата в дозах: 4, 5 и 6 мг/кг в течение всей беременности, у потомства в период постнатального онтогенеза увеличения спонтанной двигательной активности и двигательной активности в «открытом поле», по сравнению с контрольными животными, не установлено.

При проведении исследований направленных на изучение действия Политрила на функцию печени в различных дозах, нами было установлено, что при длительном введении Политрила, продолжительность гексеналового сна укорачивается, что свидетельствовало о стимулирующем действии данного препарата на ферментативный аппарат печени крыс. Кроме того, диурез у опытных животных через 30 дней введения Политрила в дозах 4, 5 и 6 мг/кг аналогичен таковому у контрольных с одинаковым содержанием в моче гиппуровой кислоты, что позволяет сделать вывод: Политрил не влияет на мочевыделительную и детоксикационную функцию почек при многократном применении.

Изменение ориентировочных рефлексов у животных опытных групп не носило статистически значимого характера. Порог болевого раздражения (путем зажатия хвоста) у животных всех групп был одинаковым.

Месячное введение Политрила не оказывает влияния на функциональное состояние нервной системы.

Правильная организация кормления, содержания и обязательный санитарный контроль обеспечивает выпуск экологически чистых продуктов высокого санитарно-гигиенического качества, а также гарантирует охрану населения от болезней общих для животных и человека (Емелина Н.Г., Крылова B.C., Петухова Е.А., Бромлей Н.В., 1970; Божко П.Е., 1984).

В настоящее время, в птицеводческих хозяйствах республики Башкортостан, для профилактики инфекционных заболеваний цыплят, распространяющихся с тарой, транспортными средствами и с яйцом, применяется прединкубационная обработка яиц с помощью растворов формальдегида, антибиотиков, либо путем применения аэрозоля йодистого алюминия. Однако, применение многих антибактериальных препаратов, особенно с одновременным нарушением технологических режимов приводят к возникновению антибиотикоустойчивой микрофлоры. Применение формальдегида способствует образованию активных форм кислорода и свободных радикалов, которые разрушают белки, нуклеиновые кислоты, липиды и олигасахариды, оказывая отрицательное влияние на природные механизмы защиты яиц, что способствует вторичным контаминациям.

В результате этого, выводимость яиц, при прединкубационной обработке выше указанными дезинфектантами и антибиотиками, незначительно превышает подобные показатели без предварительной обработки яиц (Газизов Г.М., Шагиев М.Х., Мухаметдинов Р.Д., Афанасьева Т.А., Сайфуллин Ф.М., Байматов В.Н., Хазиев Г.З., Дементьев Е.П., 1997).

При проведении опыта, нами установлено, что выводимость цыплят из яиц предварительно, обработанных 0,5%-ным (по ДВ) раствором Политрила, составила 86,4%, а сохранность цыплят в 60-ти дневном возрасте составила 81,6% по сравнению с контролем, где выводимость и сохранность цыплят составили 69,8% и 72,5% соответственно. Выводимость же цыплят при применении формальдегида составила всего 75%, а их сохранность 74,2%.

Массовое выращивание уток является важным резервом увеличения производства мяса, отличающегося высокой калорийностью и вкусовыми качествами (Сметнев С.И., 1958; Божко П.Е., 1984; Штеле A.JI., 1978; Шчука Л.И., 2003; Калоев Б.Л., 2003; Киселев В.П., Тисменецкая М.А., 2003).

Биологические особенности мускусных уток определяются их исключительно высокой мясной скороспелостью и интенсивностью роста. Половая зрелость у уток наступает в 6 месяцев при средней живой массе, селезней 3,5-4,0 кг, уток - 3,0-3,5 кг, при этом их начальная масса за 50-и дневный период увеличивается более чем в 60 раз, а на прирост 1 кг массы тела затрачивается около 4 кг комбикорма.

Введение в рацион утят нового фторхинолона — Политрил приводит к достоверному увеличению их живой массы. Так уже на 10 сутки жизни утят во второй опытной группе среднесуточный привес составил 26,03±0,88 г, тогда как в контрольной группе этот же показатель составлял всего 23,12±1,07 г, в конце же опыта, на 50 сутки, среднесуточный прирост во второй и контрольной группах составлял 76,87±2,5 г и 68,19±3,4 г соответственно.

Кроме высокой мясной продуктивности утки отличаются и хорошей яйценоскостью. В первый биологический цикл яйценоскости (6-7месяцев) от уток получают 120-150 яиц на несушку, затем у уток наступает линька, которая длится от 2 до 4 месяцев. После линьки начинается второй биологический цикл (4-5 месяцев), за который от несушки можно получить еще 90-120 яиц (Штеле А.Л., 1978; Божко П.Е., 1984).

На основании положительных результатов по увеличению яйценоскости, полученных при введении Политрила в рацион кур нами была выдвинута теория о подобном, положительном влиянии Политрила и на яйценоскость уток.

Введение в рацион уток Политрила в дозах 4, 5 и 6 мг/кг приводит к увеличению яйценоскости. Так применение Политрила в дозе 5 мг/кг дало увеличение яйценоскости опытных уток, за два биологических цикла, более чем на 38 яиц на одну несушку. Кроме того, выводимость утят в этой группе превысила аналогичный показатель в контрольной на 5,2%.

Промышленное производство мяса птицы основывается на специализированном выращивании молодняка, отличающегося высокой скоростью роста (особенно мышечной ткани), эффективным усвоением веществ корма, обуславливающим минимальный расход его на единицу прироста живой массы (высокая конверсия корма) (Егоров И.К., Демидова О.В., 2003; Околелова Т.М., Боднарук В.И., Сафонова Т.М., 2003; Калоев Б.Л., 2003; Киселев В.П., Тисменецкая М.А., 2003).

Мышцы тушек опытных групп уток, получавших Политрил в дозе 5 и 6 мг/кг были хорошо развиты и соответствовали 1 категории. Подкожный жир был заметен на груди и животе. Киль грудной кости не выделялся. У 4 тушек утят получавших Политрил в дозе 4 мг/кг и у 7 тушек утят контрольной группы мышцы были развиты удовлетворительно, однако киль грудной кости выделялся, образуя угол без впадин (2 категория).

При применении Политрила в дозах 4 и 6 мг/кг было отмечено заметное улучшение мясных качеств, по сравнению с контролем, но эти показатели были незначительно ниже в первом случае и незначительно выше во втором, однако по сравнению с дозой Политрила в 5 мг/кг применение выше указанных доз менее целесообразно.

Применение Политрила в испытуемых дозах - 4, 5 и 6 мг/кг, путем группового скармливания утятам в течение 7 дней приводит не только к улучшению мясных качеств, но и к значительному улучшению его аминокислотного состава. Особенно заметно улучшение аминокислотного состава мяса при применении данного препарата в дозе 5 мг/кг. Так содержание незаменимых аминокислот: валина на 34,93%, изолейцина на 11,7%, лейцина на 25,9%, лизина на 23,1%, метионина на 81,9%, триптофана на 4,3% и фенилаланина на 0,17% выше по сравнению с контролем. Кроме этого, в мясе опытных утят увеличивается и содержание заменимых аминокислот. Так содержание аланина выше на 22,78%, аргинина на 7,86%, гистидина на 2,86%, глицина на 2,97% и серина на 14,9%, и лишь содержание цистина на 5,21% ниже, чем в контроле. Не лишним будет отметить и тот факт, что содержание незаменимых аминокислот в мясе контрольных утят на 10-25%, а метионина на 49% ниже нормы для мяса 1 категории.

В потрошеной тушке утят получавших Политрил в дозе 5 мг/кг масса кожи с подкожным жиром и масса внутреннего жира ниже на 1,53% и 0,11% соответственно, по сравнению с контролем, однако, содержание жира в мясе наоборот выше на 30,1%, что говорит о более равномерном его распределении в организме утят.

При многократном (7 дней) скармливании утятам Политрила в дозе 5 мг/кг, в мясе, наряду с аминокислотами, увеличивается содержание калия на 1,21%, кальция на 1,98%, магния на 10,3%, фосфора на 0,71% и железа на 9,49% по сравнению с контролем. Содержание же натрия при применении

Политрила в дозе 5 мг/кг ниже на 1,33%, чем в контроле, однако, его содержание находится в пределах физиологической нормы, а также в физиологичном соотношении с калием, что не ведет к ухудшению вкусовых и питательных качеств получаемого мяса, а также не приводит к ухудшению работоспособности натрий-калиевых насосов клеток организма утят.

Политрил в дозе 5 мг/кг при профилактическом групповом скармливании в течение 7 дней утятам двухнедельного возраста, приводит к улучшению мясной продуктивности в целом и мясных качеств в частности.