Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Становление, породные особенности и возможности коррекции иммунной системы у свиней

л г-, \.и :г

I и-1'

На правах рукописи

БАКШЕЕВ Анатолий Филиппович

СТАНОВЛЕНИЕ, ПОРОДНЫЕ ОСОБЕННОСТИ И ВОЗМОЖНОСТИ КОРРЕКЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У СВИНЕЙ

16. 00. 03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Новосибирск 1998

Работа выполнена в Новосибирском государственном агр арном универ сит ете

Научный консультант - доктор ветеринарных наук,

профессор, заслуженный деятель науки № П.Н. Одарнов

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор, заслуженный деятель науки РФ Н.О. Сухова доктор биологических наук, профессор В.Н. Тихонов; доктор биологических наук, профессор К. Я. ЕЬтовилов

Ведущая организация: Институт ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета

Зашита диссертации состоится « 6 » 1998 г.

в (О часов на заседании диссертационного совета Д 020.23.01 при Институте экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН.

Адрес: 633128 Новосибирская область, п. Краснообск, СО РАСХН, ИЭВС и ДВ.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНСХБ СО РАСХН Автореферат разослан « У » 1998 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор ветеринарных наук

/ а А.А. Самоловов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Одной из актуальных проблем прсмьишен-ного свиноводства является разработка средств, методов и технологий, обеспечивающих высокую резистентность сниней и, соответственно, устойчивость к болезням, в тем числе инфекционной природы. Реализация этой задачи возможна лишь на основе знаний об особенностях формирования иимунной системы животных в разные возрастные периоды (Чекишев В.М., 1976; Федоров Ю.Н., 1981; Горский Б.В., Полуянов В.И., Юсупов Р.Х. и др., 1981; Ракова Т.Н., 1985; Смирнов П.Н. и др., 1985; Жмуров Н.Г., 1990; Прудников С.И., 1996).

Изучение субпопуляционного состава лимфоцитов и характера ау-тосинтеза иммуноглобулинов в связи с возрастом и породньми особенностями в норме является основой наиболее объективной расшифровки состояния имиунного статуса животных. В связи с этим представляются важныии исследования, расширяющие комплекс информативных показателей иммунологической реактивности организма свиней, отражагаиих особенности процессов дифференцировки, субпопуляционных взаимоотношений и формирование функциональной активности Т-клеток на длительном этапе их постнатального роста и развития.

Современные представления о параметрах имиуноксмпетенгности организма свиней в возрастном аспекте и с учетом филогенетической принадлежности носят фрагментарный характер, поэтому до сих пор не существует целостного представления об иммунном статусе животных этого вида. Чаще -всего определялась возрастная динамика общего числа Т- и В-лиьфэцитов и основных классов иммуноглобулинов (Анисимова Н.В., 1988; Горский Б.В., 1982; Заика Л.А., 1989; Фе-сенко И.Д., 1980; McCauleu I., Hartmann P.E., 1984). Количественный состав Т-хелперов и Т-киллеров-супрессоров изучен только у 4-6-недельных поросят (Пивовар JI.M. и Карпуть И.М., 1982), супоросных свиней (Georgieva R., 1984) и молодых животных в условиях высокогорья (Бердяев Н.Б. и др., 1990). Особенности дифференцировки Т-клеток, содержание В-лим£юиитов и иммуноглобулинов у свиней разных пород и двухпородных псмесей в онтогенезе и сравнительном аспекте не определялись вообще.

Второй стороной проблемы является разработка методов и средств направленной иммуностимуляции и имиунокоррекции в ветеринарной медицине. Это объясняется тем, что в условиях промышленного свиноводства у животных, как правило, регистрируют низкий им.1унный статус и, соответственно, восприимчивость к заболеваниям, в тем числе бактериальной и вирусной природы. Одной из причин проявления вторичных мммунодефицитов у свиней любого возраста является несбалансированное кормление и издержки в технологии содержания. Наряду с этим отсутствие жесткой селекции на устойчивость к болезням и использование в воспроизводстве животных с низким уровнем функцио-

нальной активности иммунной системы приводит к наследственному за- . креплению признака иммунологической недостаточности и, в конечном итоге, рождению потомства с первичньми и»лфнодефицитами (Пустовар А.Я., Гайдамака A.B., 1989).

Промышленная технология выращивания животных вьщнигает необходимость поиска экологически безопасных имлуномодуляторов. Одним из них может быть белково-липидный концентрат (БЛК) из копрофагов, анаболические свойства и безвредность которого доказаны рядсм экспериментов на свиньях и лабораторных животных в процессе апробации его как кормового средства, заменякщего белки животного происхождения (Гудалин и.И. и Баяндаша Г.В., 1979 - 1997; Полуэктова JI.C. и др,, 1980; ItoHbKOB И.В., 1981 и др.). Однако исследования по регламентации использования белково-липидного концентрата как средства, регулирукщего деятельность иммунной системы свиней, не проводились. В этой связи возникла необходимость изучения влияния ВПК на иммунный статус супоросных маток, их потомства, поросят-отъемышей, формирование имиунного ответа после повторного применения данного препарата с тем, чтобы при положительном эффекте рекомендовать его для профилактики имлунодефицитов у свиней.

Работа выполнялась в соответствии с основньми направлениями научных исследований Новосибирского ГАУ (номер государственной регистрации 01.90.0015 890).

Принимая во внимание актуальность, теоретическую и практическую значимость указанных проблем, нами была сформулирована цель работы: изучить особенности формирования функциональной активности Т- и В- клеточного звеньев имиунной системы у свиней в связи с возрастем и породной принадлежностью; определить влияние разных доз БЛК на иммунный статус супоросных свиноматок и выявить уровень имлунокомпетентности у их потсметва через 30 дней после рождения; провести тестирование клеточных и гуморальных ихмунных реакций у поросят-отъемыяей при использовании в их рационе ЕЛК; исследовать состояние и!д»9уноло1ической реактивности у молодняка свиней после повторного скармливания концентрата. Подготовить и представить производству научно обоснованные предложения по использованию ЕЛК в качестве экологически безвредного имлунсмодулятора.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить возрастные особенности становления имлунной системы у свиней со дня рождения и до 8-месячного возраста, исследуя физиологические параметры и динамику:

— абсолютного содержания лейкоцитов и лимфоцитов в единице сбъема крови;

- показателей Т-клеточного звена иьялунитета (по общему количеству Т-лимфоцитов, предгимических, тимических, ранних поеттими-

ческих Т-лимфоцитов, Т-индукгоров-хелперов, Т-киплеров-супрессоров и аютинированных Т-лимфоцитов);

- В-лимфоцитов и содержание сывороточных иммуноглобулинов

М и С.

2. Дать сравнительную оценку состоянию клеточного и гуморального иммунитета у свиней пород крупная белая, кемеровская, скороспелая мясная, ландрас, а также у двухпородных помесей в сочетаниях: крупная белая х кемеровская; крупная белая х лацпрас; кемеровская х крупная белая; кемеровская х ланпрас.

3.' Исследовать влияние оптимальных доз белково-липидного концентрата на иммунологическую реактивность маток во второй половине супоросности, их потомства и поросят-огьемшей.

4. Определить силу иммунного ответа у свиней после повторного введения в рацион ЕЛК.

Научная новизна. В работе впервые представлена характеристика Т-клеточного звена иммунной системы по количественны* и качественные показателям периферических Т-лимфоцитов у свиней в связи с возрастом и породной принадлежностью. С учетом степени дифференци-' ровки и функциональной принадлежности определены физиологические параметры, возрастная динамика и породные особенности содержания сфцего количества Т-лимфоцитов, предгимических, тимических и ранних гюсттимических Т-клеток, Т-идукторов-хелперов, Т-киллеров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов.

Изучено состояние гуморального звена иммуноксмпетентной системы (ИКС) у свиней по содержанию В-лимфоцитов и. иммуноглобулинов МиЬ

Впервые выявлены имиунокоррегиругадое свойства белково-липидного концентрата.

Дана комплексная оценка состоянию ИКС свиней, в рационе которых использованы оптимальные дозы ВПК, а также определено его влияние на продуктивные качества маток, рост и развитие их потомства и поросят-отьемыпей.

Исследованы особенности формирования иммунного ответа у свиней при возобновлении скармливания им ВПК как безвредного для организма иммуномэдулятора.

Практическая значимость и реализация результатов исследований. Количественные показатели субпопуляций Т-клеток, В-лимфоцитов и иммуноглобулинов М и С, установленные в процессе динамических исследований животных, могут быть использованы в качестве нормативных показателей иммунной системы свиней пород крупная белая, кемеровская, скороспелая мясная и ландрас, а также их двухпородных помесей при оценке иммунного статуса животных и выявлении у них патологических изменений, в том числе иммунодефицигов, в условиях Западной Сибири.

Определены оптимальные дозы и разработан регламент применения ЕЛК свиньям с учетсм возраста и физиологического состояния, для профилактики заболеваний различной этиологии.

Разработан способ профилактики заболеваний свиней (патент К> № 2053780) .

Результаты исследований используются в учебнсм процессе и цроведении научно-исследовательской работы в вузах страны (справка о внедрении № 27-5-30/996 от 25.5.98 г.) при подготовке биологов зооинженеров и ветеринарных врачей по дисциплинам ОД.01. Физиология и этология животных; ОД. 03. Мигфобиология и иммунология; СД.02. Генетика, биометрия и разведение сельскохозяйственных животных; СД.05. Акушерство, гинекология и биотехника размножения; СД.07, Свиноводство. Теоретические разработки диссертации вютсиены в опубликованную лекцию «Физиология иммуннной системы у свиней» (Новосибирск, 1991), а также всшли в рекомендации «Белково-липидный концентрат (ВПК) и его использование в свиноводстве» (Новосибирск, 1997).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Характеристика субпопуляционного состава Т-лимфоцитов, динамика продукции В-клеток и синтеза сывороточных иммуноглобулинов М и Б у свиней в онтогенезе;

2. Состояние клеточного и гуморального звеньев ИКС у свиней разных пород и двухпородных псмесей;

3.' Влияние белково-липидного концентрата на имиунный статус маток (во второй половине супсросности) и их потомства;

4. Динамика иммунологических показателей у поросят-отъемыией под влиянием разных доз белково-липидного концентрата;

5. Результаты исследования Т- и В-систем иммунитета свиней при повторном введении в рацион ЕЛК.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на научных и научно-практических конференциях Новосибирского государственного аграрного университета (1981 - 1997), Международной научной конференции «Селекция сельскохозяйственных животных на устойчивость к болезням, повыиение резистентности и продуктивного долголетия» (Москва, 1992), Всероссийской научной конференции «Экологические проблемы обеспечения жизнедеятельности человека и животных» (Новосибирск, 1993), научно-практической конференции ученых НГАУ и Гум5ольдгского университета (Новосибирск, 1995), IV Международном ветеринарыо-имлунологическсм симпозиуме (США, Калифорния, 1995), У11-1Х межгосударственных, межвузовских научно-практических конференциях «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (С.-Петербург, 1995 - 1997), Первой международной конференции по ветеринарньм вакцинам и диагностике (США, Медисон, 1997).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 42 работы в научных журналах, учебном пособии, рекомендациях, сборниках научных трудов, докладах и тезисах научных конференций Р3> и за рубежом.

Структура и объем диссертации. Диссертация излажена на 262 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, библиографию и приложения. Список литературы вклотает 407 отечественных и иностранных источников.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал н методы исследований. Работа выполнялась в 19811997 гг. в учхозе «Тулинское» и лаборатории иммунофизиологии Новосибирского государственного аграрного университета.

Серия опытов по изучению, возрастных особенностей становления иммунного статуса проведена на свиньях скороспелой мясной породы. При подборе животных подопытных групп (по 20-50 голов) учитывали их происхождение (семейство Снегурки и линия Сатурна), здоровье и живую массу.

Первые пробы крови у поросят, получивших молозиво, были взяты через 6 часов после рождения. Затем иммунологическому обследованию животные подвергались в суточном возрасте и далее в 7, 14, 21, 30, 60, 90 120, 150, 180, 240 дней жизни.

Иммунологический статус у животных разного филогенеза изучен на восьми подопытных группах, в которые изначально были включены новорожденные поросята, родившиеся от свиней пород крупная белая (КБ), кемеровская (KU), скороспелая мясная (СМ-1), ландрас (Л), а также двухпородные и реципрокные псмеси в сочетаниях: крупная белая х кемеровская (КБ х Ш); крупная белая х ландрас (КБ х Л); кемеровская х крупная белая (Kki х КБ) и кемеровская х ландрас (КМ х Л) . В опытные группы подбирали по 12 поросят из одинакового количества разнополых животных. Тестировали свиней в суточном, 30-, 60-, 90-, 120-, 150-, 180- и 240-дневном возрасте.

Третья серия опытов, посвященная изучению влияния разных доз белково-липидного концентрата на показатели клеточного и гуморального иммунитета свиней, проведена на проверяемых матках второй половины супоросности и их потомстве. Контрольную и две опытные группы свиноматок (по 5 голов в каждой) формировали с учетом возраста, количества опоросов, живой массы и физиологического состояния.

Сниньи подопытных групп за 30 дней до опороса получали ЕЛК в дозах: первая - 0,2, вторая - 0,5 г/кг живой массы. Матки контрольной группы препарат не получали.

фи опоросе свиноматок учитывали многоплодие, крупноллод-ность. При вырашивании поросят-сосунов - состояние здоровья, деловой выход поросят, массу при отъеме, классность, абсолютный, относительный и среднесуточный приросты, молочность маток в 21 день.

йллунологический контроль маток и поросят осуществляли в течение 30 дней. Пробы крови у животных каждой группы брали на 12-й и 21-й дни опыта. А у поросят, полученных от этих маток, первое тестирование провели в месячном возрасте.

В четвертой серии опытов для эксперимента использовали поросят в возрасте 2 месяца, аналогичных по происхождению, живой массе, бонитировочнсму классу за развитие. Из равного количества сни-нок и хрячков сформировали контрольную и две опытные группы (по 12 - 13 животных в каждой). Разница состояла в тем, что поросята 1-й опытной группы получали ВПК в количестве 0,5, а 2-й - 2,0 г/кг живой массы. Продолжительность скармливания препарата составила 30 дней. Иммунологический стфининг осуществляли на 10, 14, 21, 30 и 51-й дни опыта.

Силу вторичного иммунного ответа изучали на 4-месячных разнополых подсвинках скороспелой мясной порода, аналогичных по живей массе и бонитировочнсму классу. Все животные за месяц до иммунологического тестирования предварительно получали БЛК в дозе 0,'5 г/кг в течение 7 дней. После месячного перерыва сформировали контрольную и две опытные группы (по 15 голов в каждой). Мэлодняку подопытных групп возобновили 7-дневное скармливание ВПК: 1-й в количестве 0,3, а 2-й - 1,0 г/кг массы. Кровь исследовали в 1, 3, 10, 14, 21, 30-й дни опыта.

При постановке всех научных экспериментов животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. Рационы разрабатывали по нормам ВНИИЖ и одинаково балансировали, с учетом возраста и физиологического состояния свиней, по основным питательным веществам и элементам питания.

Пробы крови для гематологических, иммунологических и биохимических исследований брали из краниальной полой вены за 2-3 часа до кормления. В качестве антикоагулянта использовали гепарин.

Концентрацию гемоглобина, содержание эритроцитов, лейкоцитов и лейкограмму определяли общепринятыми в гематологии методами.

Количественное содержание аминокислот в плазме крови определяли на программном инфракрасном анализаторе модели ИК-4250, предварительно откалиброванном по результатам анализа автоматического аминокислотного анализатора ААА-881.

Для оценки Т-клеточного звена ИКС определяли количество тотальных Т-лифэцитов (тЕ-ГОК), предаимических предшественников (пЕ-РОК), тимических Т-клеток (сЕ-ГОК), посгтимических малодиффе-ренцированных Т-лимфоцитов (аЕ-ГОК), Т-индукторов-хелперов (рЕ-ГОК), Т-кюшеров-супрессоров (вЕ-ГОК), активированных

Т-лимфоцитов (6Е-ГОК) методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, используя разные режимы инкубации. По разности процента розеток, полученных методом комплексных Е-ГОК, рас-счотывали содержание предпественников Т-клеток (Лозовой В.П. и др., 1986). В-лимфоциты (ЕМ-ГОК) идентифицировали методом роэети-рования лимфоцитов с эритроцитами мыии (Бабаян В.А. и др., 1988) .

Концентрацию 1дМ и 1дС определяли методом, простой радиальной имлунодиффузии по Манчини (Фримель Г., 1987) .

Цифровой материал обработан математически на ПЭВМ с использованием стандартных программ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Возрастные особенности иммунного статуса свиней

Анализируя результаты иммунологического скрининга, в связи с возрастом животных, прежде всего следует обратить внимание на аналогичность динамики пролиферативной активности лейкоцитов и лим-фоцитарных клеток крови. В частности, увеличение количества лейкоцитов имело место в течение первой недели жизни поросят (с 9,6210,34x10® до 13,89±0, 66x10® клеток в 1 л крони) (Р<0,001) и с 21-го по 120-й день наблюдения (с 8,1910,22x10® до 18,67+0,67х10®/л) (Р<0,001). В то же время абсолютный показатель лимфоцитов возрастал соответственно с 6,17±0,26x10® до 7,22±0,33х10®/л (Р<0,05) и с 6,67+0,19x10® да 13,96+0,56x10®/л (Р<0,001). Последующий рост числа лейкоцитов регистрировался в промежутке, с 6- до 8- месячного возраста, а лимфоцитов - со 150-го по 240-й дни жизни свиней - соответственно с 15, 0Й0, 34x10® до 17,11±0,47х10®/л (Р<0,01) и с 9,70±0,2х10® да 11,1310,31x10®/л (Р<0,05).

Общее содержание имлунокомпетентных клеток - Т- и В-лим^оиитов - также характеризовалось особенностями их дифферен-цировки и определялось степенью зрелости организма свиней. Содержание тотальных Т-лим£оцитов и В-клеток в крови у новорожденных поросят составляло соответственно 2,23+0,09x10® и 0,33+0, 02х10®/л. В течение первой недели жизни циркуляция тЕ-ГОК возрастала до 4,2910,17x10®/л (Р<0,001), а ЕМ-ГОК до 0,92+0,02x10® (Р<0,001) . К 2-недельному возрасту уровень тЕ-ГОК снижался на 27% (Р<0,001), а показатель ЕМ-РОК - на 56,6% по сравнению с данными предыдущих исследований (Р<0,001).

Следукшим этапом усиления образования тотальных Е-ГОК и В-лимфоцитов у поросят был возраст 60 дней, когда их содержание в периферической крони находилось на уровне 7,04+0,22x10® (Р<0,001) и

1, 20±0, 03х109/л (Р<0,001). В 3-месячном возрасте у молодняка величины тЕ-ГОК и ЕМ-ЮК были ниже показателей, зарегистрированных перед отъемсм, и эта разница составляла соответственно 4,2 и 15% (Р<0,001). К 120-му дню исследований наблкщали индуцирование пролиферации тЕ-ГОК, и их содержание вновь повидалось на 16,9% (КО, 001), а ЕМ-ЮК - на 8,1%. Увеличение рециркуляции В-лимфоцитов продолжалось до 6-го месяца наблюдений, достигая величины 1, 45±0,21x107л, затем их показатель снижался в 1,3 раза.

После 4-месячного возраста свиней динамика тЕ-ГОК изменялась несколько иначе, чем В-клеток, что, вероятно, было связано с различной чувствительностью изучаемых пулов иьмунокомпетентных лимфоцитов к гормонам, образующемся вследствие функционального созревания половых желез. Так, начиная с 5-го месяца жизни животных, количество тЕ-РОК снижалось до 5, 55+0,13x1o9/л (Р<0, 001), сохраняя такую же тенденцию до 180-го дня наблюдения. К концу периода исследований (240-й день) показатель тЕ-ГОК увеличивался (Р<0,001).

Малодифференцированные Т-лимфоциты на протяжении всего периода наблюдений характеризовались различной скоростью пролиферации и, следовательно, их содержание в периферической крови во многом, зависело от степени физиологической зрелости организма и функционального состояния идлунокомпетентной системы свиней. При этсм немаловажную роль следует отвести и факторам окружаюцей среды. В 1-й день исследований (через 6 часов после рождения) количественные показатели предшественников были выие, чем тимических и ранних по-сттимических Т-лим£оцитов (рис. 1). К суточнсму возрасту у поросят регистрировали неуклонный рост сЕ-Р0К и аЕ-ГОК, а содержание пЕ-ГОК в крови, наоборот, снижалось на 14,7%. Семидневные животные характеризовались усилением процесса дифференцировки функционально незрелых Т-клеток, а наибольшей пролиферативнсй активностью обладали тимэциты.

Существенньм моментом в жизни 2-недельных поросят являлось состояние имиуносупрессии, сопровождающееся снижением рециркуляции всех субпопуляций, изучаемых малодифференцированных E-РОК. В последующем, после 21-го дня наблюдений и до отъемного возраста молодых животных, происходило усиление образования пЕ-ГСК, сЕ-Р0К и аЕ-РОК, о чем свидетельствовали абсолютные показатели содержания этих субпопуляций Т-лим£оцитов.

Изменения в технологии вырашивания поросят, связанные с их отъеькм, вызывали стрессорное состояние и, как следствие, снижение имфиоксмпетентности организма, цроявившееся уменьшением уровня в периферической крови (на 3-м месяце жизни животных) предшественников и тимических Т-лим^юцитов. Одновременно с этим, вплоть до 4-месячного возраста, у поросят усиливался процесс дифференцировки популяции ранних посттимических E-P0K.

Исследования крови в более поздние возрастные периоды (120 -240 дней) свидетельствовали о начале и завершении качественно нового этапа в жизни сниней - полового созревания, что сопровождалось изменением взаимоотношений разных форм малодифференцированных клеток ИКС.

Возраст, дни

Рис.1. Абсолютное содержание предшественников, тямических и ранних посттимических Т-лиыфоцнтов у свиней в связи с возрастом

--о-- пЕ-РОК —А— сЕ-РОК —о - аЕ-РОК

Относительный показатель содержания в крови сниней предшественников Т-ликфоцитов в большинстве своем повторял динамику изменения их абсолютного числа. Искютение составили 30-дневный и 45-месячные возрастные периоды. Для тимических и ранних посттимических Е-ГОК также имело место совпадение качественных и количественных показателей, исклшая случаи с сЕ-ГОК, в интервале с 21-х по 30-е сутки, а с аЕ-РОК - с 30-го по 60-й дни.

Динамика функционально зрелых клеток (индукторов-хелперов, киллеров-супрессоров и активированных 'Г-лимфоцитов) характеризовалась тем, что сразу после рождения поросят, с учетом приема ими молозива, количественное превосходство среди этой группы ИКК принадлежало субпопуляции вЕ-КЖ (рис. 2). Подобное явление, по-видимому, мэжно считать как состояние физиологической иммуноде-прессии новорожденных. Но уже в суточном возрасте соотношение между рЕ-ЮК и вЕ-РОК перераспределялось в пользу индукторов-хелперов и на этом же фоне наблюдалось усиление пролиферации активированных Е-РОК. Если учесть, что в состав субпопуляции аЕ-ЮК в

Возраст, дна

Рис.2. Возрастная динамика индукторов-хелперов, киллеров- супрессоров и активированных Т-лимфоцитов у свиней

-о- рЕ-РОК -6- вЕ-РОК -О- 6Е-Р0К

большинстве своем входят Т-клетки с функциональными свойствами индукторов-хелперов, то становится ясньм, что у суточных поросят происходит отмена супрессорного состояния иммунной системы, которое регистрировалось в первый день их жизни.

Процессы Т-клеточной дифференцировки к недельному возрасту свиней в значительной степени усиливались, а число рециркулирукших в периферической крови индукторов-хелперов увеличивалось на 28, киллеров-супрессоров - на 8 и активированных Т-лимфоцитов - на

228% (Р<0,001). В последукщем, возрастная динамика индукторов-хелперов и активированных Т-клеток отличалась от таковой киллеров-супрессоров. Так, к 14-му дао наблюдений концешрадая рЕ-ЕОК в крови уменьшалась до 2,04±0,08х109/л (Р<0,01), 6Е-ЮК - До 0,82±0, ОЗхЮ9 (Р<0,001), а значение вЕ-ЮК возрастает до 1,17±0,03х109/л (КО, 001), Описанная нами картина взаимоотношений функционально специализированных клеточных субпопуляций ысекет свидетельствовать о наступлении нового периода возрастной мллуноде-прессии, связанного с изменением уровня адаптарованности организма свиней к условиям существования.

Начиная с 3-недельного и до 2-месячного возраста у поросят выявили усиление дифференцировки рЕ-Р0К (Р<0,001), но 60-го по 90-й дни число индукторов-хелперов в исследуемой крови снижалось на 20,7% (Р<0,001), а заметней активизации их образования не регистрировали до конца опыта. Что касается 6Е-ГОК, то их содержание к 3-му месяцу жизни свиней также уменьшалась на 27% (Р<0,001). Однако к 120-дневнсму возрасту интенсивность рециркуляции активированных Е-ЮК возрастала дэ 1,29±0,09x10® клеток в 1 л крови.

Количественный показатель киллеров-супрессоров в крови животных продолжал увеличиваться до 4-месячного возраста (Р<0,001), а к 5-му месяцу имело место снижение концентрации еЕ-ГСК. фи этом содержание их в исследуемэм объеме крови составляло 2,02±0,06х109/л (Р<0,001), в дальнейшем оставаясь на одном уровне.

Таким образом, процессы Т-клеточной пролиферации находится в прямэй зависимости от состояния физ-кшогичеекпй зрелости ергакизма животных, а с наступлением пубертатного периода взаимосвязь субпо-пуляционных взаимоотношений Т-лиьфоцитов носит качественно новый характер.

Сопоставление динамики абсолютных и относительных показателей популяций функционально активных Т-лимфоцитов выявило их несоответствие: для индукторов-хелперов - с 7-го по 14-й, для киллеров-супресооров - с 21-го по 30-й дни, а для активированных Е-ГОК - в течение 2-го месяца жизни поросят и в интервале возрастного периода 90 - 150 дней.

Характеризуя процессы атителогенеза в связи с возрастем свиней, следует обратить внимание, что через б часов после рсевдения уровень сывороточного IgM у псросят составлял 1,71±0,04 г/л (рис. 3). В суточном возрасте регистрировалось снижение его концентрации на 4%, а после первой недели жизни животных выявлена активизация процессов аутосинтеза IgM (Р<0,001), которая достигала максимальной величины (4,70±0,11 г/л) к 2-месячному возрасту (Р<0,001). Стресс-факторы, связанные с егьеыем и перегруппировкой поросят, не оказали существенного влияния на содержание в крови

1дМ и только на 180-й день концентрация его достигла 6,50±1, 01 г/л. А к 240-му дню жизни свиней происходило снижение на 26%.

Динамика синтеза 1д<3. характеризовалась иначе. Если у новорожденных поросят бала зарегистрирована самая высокая его концентрация (31,89+0,53 г/л), в основном за счет колостральных антител, то, начиная с суточного возраста, показатель 1д<5 снижался, достигая

35 г

г/л

30 •■

25 ■■

20 •■

15 --

10 ■■

X

21 30 60 90 120 150 180 240 Возраст, дни

Рис.3. Динамика содержания сывороточных IgM и IgG у свиней в онтогенезе

С

IgM

IgG

]

д

минимума на 21-й день - 7,52+0,77 г/л (Р<0,001). К 30-му дао процесс антителогенеза у молодых животных достигал определенней функциональной зрелости, а содержание 1дС увеличивалось на 3,8%. В ранний постпубертатный период (у 6-месячных сниней) регистрировалось достаточно высокое содержание 1дС - 25,04±0,74 г/л (Р<0,001). Половозрелые свиньи характеризовались снижением показателя сывороточного 1дС на 39,8% (Е<0,001) .

Обобщая результаты иммунологического скрининга в связи с возрастом свиней, можно заключить, что в процессе роста и развития животных наблюдаются фазовые изменения в деятельности их иммунной системы.

Новорожденные поросята характеризуются высоким содержанием в крови предшественников Т-лимфэцитов, киллеров-супрессоров, колост-ральных 1дМ и С, но низкой долей в циркуляции индукторов-хелперов и активированных Т-клеток. Количественное соотношение клеточных и гуморальных факторов свидетельствует об иммуносупрессии первого уровня.

К суточному возрасту у поросят активизируются процессы лейко-лоэза и иммуногенеза, а дифференцировка Т-лим$оиигов сопровождается увеличением количества зрелых субпопуляций на фоне снижения киллеров-супрессоров и 1дМ и В иммунной системе происходит функциональная отмена первого уровня супрессии.

Через 2 недели после рождения у поросят развивается второй уровень супрессорного состояния, являкшийся следствием регулятор-ной реакции иммунной системы в ответ на лредшествупцую стимуляцию процесса дифференцировки Т-клеток экзогенными факторами. Проявление данного возрастного эффекта ИКС сопровождается увеличением в циркуляции киллеров-супрессоров и снижением пролиферации других клеточных субпопуляций.

Послеотьемный стресс и процесс полового созревания изменяют соотношение клеточных и гуморальных факторов, что в дальнейшем способствует стабилизации функционального состояния иммунной системы и формированию высокой адаптированности к услониям внешней среды половозрелых животных.

Особенности формирования клеточного н гуморального

звеньев иммунпои системы у чистопородных н помесных свиней

Иммунологическими исследованиями, проведенные на свиньях различного филогенетического происхождения, обнаружена тождественность функциональной динамики дифференцировки Т-клеток, антитело-продуцентов и синтеза иммуноглобулинов, связанная с ростом и развитием этого вида животных. Выявленная закономерность четко проявлялась у особей данной популяции, но, там не менее, установлены некоторые особенности процесса пролиферации иммуноксмпетентных клеток и аутосинтеза иммуноглобулинов у чистопородных и помесных свиней.

Генетически обусловленной общностью в становлении иммуноксм-петентности организма свиней следует назвать явление гетерохронии. Оно характеризуется там, что направление процесса дифференцировки ИКК и аутосинтеза иммуноглобулинов связано с постепенным созреванием различных компонентов иммунной системы. Первыми проявляют свою морфологическую и функциональную зрелость те её звенья, которые обеспечивают высокий уровень иммунологической зашиты животных в определенный период постнатального онтогенеза. Примером гетеро-хронности мэгут служить показатели относительного содержания пери-

ферических машдифференцированных Т-лимфоцюгов. В частности, из всех изучаемых нами Е-ЮК содержание предшественников и оообенно тамических Т-клеток в периферической крови суточных чистопородных и псмесных поросят несколько выие, чем. в месячном возрасте (рис. А). Данная субпопулядая Т-клеток, обладая высокой лролиферативной

Возраст, дни Рис.4. Относительное содержание тииических Т-

лимфоцитов в крови чистопородных и поместных свиней

--0--КБ -Км ■-А--Л -СМ-1

—КБхКм - к- - КБхЛ —«—КмхКБ -«--КмхЛ

активностью, достаточно легко меняет поверхностные клеточные маркеры, превращаясь в функционально специализированные лимфоциты (индукгоры-хелперы, киллеры-супрессоры и активированные Е-ЮК), выполнявшие важную роль в защитных реакциях, способствовала достижению высокого уровня мллунокалпетентнооги организма животных на ранних этапах их роста и развития. Известно, что основньм струк-турньм образованием, участвукшим в дифференцировке Т-клеток, является тимус; следовательно, этот орган иьмунокюмпетентной системы к моменту рождения свиней представляется достаточно зрелый, в морфологическом и функциональном отношениях.

Сравнительная оценка динамики содержания функционально зрелых субпопуляций Т-лимфоцитов у свиней различного филогенеза свидетельствовала о тем, что животные кемеровской и зфупной белой пород

и их двухпородные псмеси характеризовались высоким уровнем в крови индукторов-хелперов, киллеров-супрессоров и активированных Т-клеток. Причем соотношение этих пулов лимфоцитов во взаимодействии у них было наиболее оптимальньм по сравнению со свиньями скороспелой мясной, ландрасской пород и гибридами, при скрещивании которых использовали ландрасов. Особенно следует отметить низкий уровень и^мунокомпетентносги ландраоэв и неустойчивость её показателей у свиней скороспелой мясной породы. Для ландраоов, по-вида-ему, характерна невысокая степень адаптированности к условиям Западной Сибири, а со свиньями скороспелой мяснсй породы требуется дальнейшая селекционная работа по консолидации всех звеньев их ИКС с целью повышения адаптационных способностей животных к региональ-ньм условиям существования.

В наших опытах двухпородные псмеси имели высокую степень иммунологической защиты и особенно отличались этим потемки, полученные при прямом и обратном скрещиваниях свиней крупной белой и кемеровской пород. Детальный анализ процессов дифференцировки ИКК и уровня синтеза 1д выявил некоторое превосходство имиунокемпетент-ности псмесей в сочетании кемеровская х крупная белая. Так, у этих свиней, с позиций физиологической рациональности, более гармонично сочетаются клеточные и гуморальные факторы ИКС, что подтверждается коэффициентами соотношения абсолютного числа индукторов-хелперов и киллеров-супрессоров (табл. 1), а также и содержанием 1дС, особенно в пубертатный и ранний постпубертатньй периоды.

Таблица 1

Коэффициенты соотношения абсолютного числа индукторов-хелперов и киллеров-супрессоров у чистопородных и помесных свиней, ед.

Возраст, Псрода свиней

ДНИ КБ КМ Л СМ-1 | КЕхШ | КБхП ЮлхКБ КЬосЛ

1 1,9 1,9 1,9 2,2 1,7 2,1 1,9 2,0

30 1,7 1,7 1,8 1,8 1,5 1,9 1,6 1,9

60 1,8 1,7 1,9 1,8 1,5 1,8 1,6 1,7

90 1,3 1,3 1,6 1,3 1,0 1,2 1,3 1,3

120 0,9 0,9 0,8 0,9 0,9 1,1 1,0 1,0

150 1,2 1,5 1,1 1,4 1,5 1,2 1,2 1,2

180 1,2 1,2 1,1 1,3 1,1 1,3 1,1 1,3

240 1,2 1,2 1,0 1,4 0,9 1,1 1,1 1,2

Обладая более совершенными механизмами интеграционных взаимоотношений между клеточньми и гумэральнши компонентами собственного организма и факторами, поступающими с молозивом и мзлоксм матери, на определенном этапе онтогенеза, икмунная система свиней кемеровской и крупной белой пород и их помесей, полученных при реци-

прокнсм скрещивании, обеспечивает высокий уровень защиты организма от неблагоприятных влияний окружающей среды.

Влияние белково-лнпндного концентрата на нммунный статус супоросных свиней н их потомства

Изучение вопросов натравленного регулирования иммунологического состояния супоросных свинсматок представляет актуальное значение в плане повыиения их устойчивости к различные инфекциям, а также формирования у потомства высоких резистентных качеств.

Скармливание БЛК супоросным свиноматкам 1-й опытней группы в дозе 0,2 г на 1 кг массы повыпало общую пролиферацию лейкоцитов, агранулоцитов и способствовало сохранению преимущества по этим показателям на протяжении всего периода наблюдений. Животные 2-й группы, получавшие ЕПК по 0, 5 г/кг массы, по сравнению с 1-й опытной и контрольной группами имели более высокие показатели содержания в 1фони эритроцитов и гемоглобина. На 12-й день наблкзденич они превосходили контрольную группу по абсолютному содержанию количества лейкоцитов, нейтрофильных гранулоцитов, базофилов, моноцитов и лимфоцитов.

Результаты первичного иммунологического скрининга показали, что у супоросных свинсматок имел место низкий выход тотальных Т-лимфоцитов (в реакции розеткообразования), хотя у контрольных животных на 12-й день эксперимента их уровень превынал таковой, зарегистрированный у маток 1-й и 2-й опытных групп (табл. 2). В дальнейшем содержание тЕ-ГОК в крони животных контрольной, группы снижалось, уступая по своей величине показателю животных 1-й группы, но оставаясь все-таки выле показателя 2-й опытной группы.

Таблица 2

Содержание субпопуляиий Т-лимфоцитов у супоросных свинсматок, %

Группа День огыта тЕ-ЕОК пЕ-ЮК рЕ-ГОК вЕ-КЖ

Контрольная 12-й 40,0+1,01 7,0±0,55 24,6с+1,28 34,2±2,01

Огытная 1-я 12-й 36,2+1,20 8,1+0,20 26,811,46 20,1±2,20

2-я 12-й 33,0+1,50 12,2+0,01 24,1+1,01 18,0+1,50

Контрольная 21-й 36,6+1,65 9,2±0,48 17,2+1,40 5,3±0,91

Огытная 1-я 21-й 40,0+2,01 5,6+0,70 13,0+2,20 10,8±1,83

2-я 21-й 31,8+1,15 11,6+0,57 22,0+2,60 13,0+2,11

Такой уровень тЕ-РОК в крови свиноматок можно объяснить подавлением реакции розеткообразования продуктами эндогенного происхождения, в частности собственными антителами, которые во время бере-

менности могли циркулировать в больших количествах, исполнял роль блокирующих факторов клеточных реакций материнских лимфоцитов против антигенов плода. Следует предположить, что ЕЛК, являясь неспецифическим стимулятором гуморального иммунитета, способствует повышению уровня таких антител.

Взаимоотношения между индукгорами-хелперами и киллерами-супрессорами в периферической крови у свиноматок контрольной и опытных трупп складывались по-разнсму. Так, на 12-й день, наблюдения у контрольных маток соотношение между субпопуляциями рЕ-ГОК и вЕ-ЮК перераспределялось в пользу киллеров-супрессоров, что свидетельствовало о высокой активности данной субпопуляции. У животных опытных групп имела место акгивизаида рециркуляции индукторов-хелперов. Коэффициент соотношения между рЕ-ЮК и вЕ-ЮК у свиней 1-й и 2-й опытных групп составлял 1,3 ед.

Наши исследования показали, что на 21-й день применения препарата, при функциональной активности индукгоров-хелперов у свиней всех трех изучаемых групп, происходило снижение в периферической крови обеих, субпопуляций функционально зрелых Т-лимЗ?оцитов. Можно предположить, что этому способствовала их миграция в органы, где протекали активные иммунологические процессы. У свиней обеих опытных групп миграция могла происходить как в органы репродуктивной системы, так и в органы пищеварения. Одной из причин, обусловливающих перераспределение соотношения между пулами функционально зрелых клеток в пользу индукторов-хелперов, у животных опытных групп, вероятно, следует назвать ЕЛК с его иммунсжюдулирукшими свойствами.

Динамика сывороточных иммуноглобулинов у свиней второй половины супсросности изменялась неоднозначно. Если содержание 1дМ у маток опытных групп было относительно стабильным, то уровень 1д5 менялся в зависимости от дозы препарата (табл. 3) . В 1-й опытной

Таблица 3

Содержание сывороточных иммуноглобулинов М и О у супоросных ___ свиноматок, г/л_

| Группа | День огыга | 1дМ 1 1де I

Контрольная 12-й 6,С±0,37 11,7±0, 50

Огытная 1-я 12-й 4,4+0,17 8,9+1,00

2-я 12-й 4,9+0,17 18,3+1,53

Контрольная 21-й 4,2+0,10 13,0+0,82

Огытная 1-я 21-й 4,3±0,25 16,8+0,86

2-я 21-й 4,5±0,11 12,2+0,45

группе увеличение его уровня в крови животных гроисходило с 12-го по 21-й дни наблюдений. Особи 2-й опытной группы характеризовались

вначале существенньм подъемом 1дО, а на 21-й день исследований не-кагсрьм снижением его содержания.

Высокий уровень ауто синтеза 1дМ зарегистрирован у свиней контрольной группы на 12-й день опыта, затем концентрация его снижалась, Не исклкнено, что периодическое снижение уровня сывороточных иммуноглобулинов у подопытных свиноматок также связано "с процессом их перераспределения в органы и ткани, образованием циркулиругацих иммунных комплексов с поступавшими в организм антигенами и участием в антитело зависимых клеточно-опосредованных цитсгоксических реакциях. Из сказанного следует, что ВПК, по-видимаму, стимулирует гуморальные иммунные реакции у супоросных свиноматок.

Скармливание ЕПК свиноматкам во второй половине супоросности не оказало отрицательного влияния на состояние их здоровья и течение родов.

Результаты гематологического и иммунологического тестирования поросят-сосунов (полученных от подопытных снинсматок) в 30-дневном возрасте доказали, что потомство от свиней контрольной и 1-й опытней групп превосходило мэяодняк 2-й группы по содержанию гемоглобина соответственно на 24,8 и 25,7%, а по количеству эритроцитов в 1 л крови - на 4,4 и 16,6%. Вместе с тал у поросят от свиноматок 2-й опытной группы регистрировали высокое содержание лейкоцитов, превыиаицее аналогичные показатели сосунов из 1-й опытной и контрольной групп соответственно на 12,8 и 20,8% (табл. 4).

Таблица 4

Содержание гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в крови

_30-дневных поросят_

| Группа | Гемодлобин, г/л | Эритроцит, 10й/л I Лейкоципы, 1СгУл | Контрольная 89, €±0,70 4,60±0,25 11,4±1,09

Оштная 1-я 90, €±0,87 4,40±0,39 12,6+1,38

2-я 67,4±0,б7 3,8410,41 14,4±1,15

Низкая концентрация гемоглобина в крови поросят 2-й группы и некоторое снижение уровня эритроцитов в обеих опытных группах могли зависеть от многих фаеторов. В настоящее время доказана тесная связь между эритропоэзем и иммуногенезом, фи повьшении пролифера-тивной активности стволовых клеток, индуцированной различными воздействиями (гормональное, антигенное и даже ксенобиотическое), наблюдается преимущественная дифференцировка в направлении зритропо-эза, по мере снижения которого обнаруживаются во все возрастающих количествах ашителоцродуценты и иммуноглобулины (Козлов В.А. и др., 1982).

Изучение количественных показателей клеточного иммунитета у поросят, полученных от маток контрольной и опытных групп, не вы-

явило разницы по содержанию тотальных Т-лимфоцитов, Т-предгимических предшественников и В-клеток, причем как в относительных, так и в абсолютных значения* (табл. 5). Установлено, что

Таблица 5

Абсолютное число мллунокомпетентных клеток в крови _30-дневных поросят, хЮУл_

икк Группа

контрольная | огытная 1-я огытная 2-я

тЕ-РОК 2,8810,89 3, ОНО, 35 3,10+0,39

пЕ-ЮК 0,4810,09 0,5110,05 0,4710,15

сЕ-РОК 0,86+0,20 1,0310,23 0,7910,15

рЕ-КЖ 3,93±0,59 3, 6610,57 3,6010,35

ВЕ-ЮК 1,9310,22 3,8810,45 1,6910,22

6Е-ЮК 0,9640,23 0, 6610,18 0, 6310,27

ЕМ-ГОК 0,38+0,09 0,3510,05 0,41+0,05

во всех сравниваемых группах соотношение между субпопуляциями ин-дуктсры-хелперы / киллеры-супрессоры распределялось в пользу рЕ-ЮК. Однако у животных 1-й опытной группы величина вЕ-ГОК в 1,8 раза гревыиала уровни контрольной и 2-й опытной групп. Такое состояние указывает на активизацию процессов пролиферации Т-киялеров-супрессоров. Кроме того, у поросят 1-й опытной группы повьшалась миграция в кровь малодифференцированных тимических Т-лиьфоцитов, а молодняк 2-й группы характеризовался снижением их активности.

Методом радиальной иммунодиффузии установили, что концентрация сывороточных 1д И и О у молодняка 1-й группы гревыиала их содержание в контрольной и 2-й опытной: по 1дМ - на 23 и 31%, а по 1дЬ - соответственно на 23,6 и 13,7% (Р<0,05-0,01) (табл. 6). По нашему мнению, подобное состояние может свидетельствовать о более ранней активизации процессов аутосинтеза иммуноглобулинов у

Таблица б

Содержание сывороточных иммуноглобулинов М и б у _30-дневных поросят, г/л_

Класс иммуно- Группа

глобулина контрольная огытная 1-я огытная 2-я

1дМ 4,5+0,48 5,8+0, 91 4,0+0,68

9, 9+1,13 15,9+2,00 13,711,65

потомства, матерям которых в свое время скармливали концентрат в дозе 0,2 г на 1 кг массы. Поросята, полученные от опытных маток,

имели уровень сывороточного 1дС в 1, б и 1,4 раза виде, чем потомство контрольных животных. Иммуноглобулины сами по себе, или в комплексе с антигеном, оказывали супрессиругацее воздействие на процесс антигензависимой пролиферации и дифференцировки лимфоцитов. По мнению Ф. Хорш (1981), чем вьше концентрация 1дС, там сильнее иммуносупрессивный эффект на пролиферацию стволовых крове-творыьк клеток.

Анализ излаженного материала показал, что скармливание ВПК супоросньм свиноматкам изменяет общую гематологическую картину крови и иммунный статус их потомства. Мзжно предположить, что мо-дулиругацее действие препарата на гемэпоэтическую функцию кроветворных органов и иммунную систему поросят связано с рядом факторов, поступающих в желудочно-кишечный тракт сосунов с молозивом, всасывание которых цельньми молекулами из кишечника в .кровь особенно активно происходит при первых выпойках молозива (Чекишев В.М., 1986). К тавовьм могут относиться иммуноглобулины, гормоны и медиаторы иммунной системы маток, усиленно продуцируемые в ответ на введение ЕПК, а также биологически активные компоненты самого препарата.

Сравнительная оценка репродуктивных качеств маток позволила нам установить, что введение в рацион БЛК в количестве 0,2 и 0,5г на 1 кг массы оказало положительное влияние. По большинству показателей преимущество было за матками опытных групп (табл. 7). Отставаний в росте и диспепсических расстройств у поросят, получениих от маток опытных и контрольной групп, в течение первых 2 месяцев жизни мы не зарегистрировали.

Таблица 7

Воспроизводительные качества маток, их продуктивность _и сохранность поросят-сосунов_

' Показатель Группа

контрольная | оштная 1-я огытная 2-я

Многоплодие, голов 9,5±0,57 9,0±0,41 9,010,49

1<5р упноплодност ь, кг 1,С£0,02 1,110,01 1,110,02

Молочность, кг 49,014,85 55,515,02 61, СИЗ, 96

Масса гнезда в 60 дней, кг 140,8±8,87 171,0110,23 189,519,11

Живая масса в 60 дней, кг 17,611,34 22,810,97 22,310,86

Сохранность псросят,% 84,213,73 83,344,46 94,414,15

Однако следует заметить, что сразу после отъема имели место желудочно-кишечные заболевания у поросят от контрольных свиноматок (8 случаев), в то время как во 2-й опытной только 2, а в 1-й - ни одного случая. Мы склонны предположить, что это связано со снижением у поросят в послеотъёмный период чувствительности к кормовым антигенам под влиянием молока матерей, получавших в своё время оп-

тимальные дозы препарата. А низкий показатель заболеваемости поросят из опытных групп свиноматок мзяно объяснить благотворным влиянием биологически активных компонентов ВПК на функциональное становление локальной иммунной зашиты в желудочно-кишечнсм аппарате. Последнее подтверждается высокой сохранностью поросят от маток опытных групп в первый месяц после отъёма и среднесуточным приростом их живой массы (460 г - в опыте и 417 г - в контроле).

Все изложенное дает основание говорить о более высокой эффективности использования ЕЛК в дозе 0,5 г/кг массы свиноматок второй полонины супоросности.

Анализ показателей иммунокомпетентпой системы у поросят-отьмышсй, получавших добавки БЛК в рацион

В специальных исследованиях, посвященных изучению влияния мо-дулирукщего средства (БЛК) на состояние Т- и В-систем иммунитета молодых животных в наиболее ответственный период их жизни, связанный с отъ&мсм и адаптацией к новьм условиям среда, мы выявили определенные закономерности.

Представленные в табл. 8 такие интерьерные показатели, как

Таблица 8

Гематологические показатели поросят-отьёмыцей_

Группа День Гемоглобин, Эригроцрпы, Лейкоциты,

отыта г/л 10и/л 10®/л

Контрольная 10 -й 88,5*3,01 5,7340,63 18,2042,03

Огытная 1-я 10- -й 90,2+6,52 5,3640,48 12,8514,36

2-я 10- -й 88,7+6,30 5,6340,37 12,4511,50

Контрольная 14- -й 106,014,61 5,1Й0,21 15,'85±3,28

Огытная 1-я 14 -й 113,313,53 6,41+0,45 18,5311,16

2-я 14- -й 102,614,77 5,21±0,25 18,8612,32

Контрольная 21- -й 98,7±3,81 6,3310,45 24,5С±3,18

Огытная 1-я 21- -й 104,515,88 б,2С±0,35 18,6С43,20

2-я 21- -й 112,7+4,87 6,73+0,66 20,9510,87

Контрольная 30- -й 98,7±3,11 6,3310,45 18,4С40,50

Огытная 1-я 30- -й 116, 647,84 8,11±1,99 21,7311,43

2-я 30- -й 107,345,15 8,4212,47 18,2611,71

Контрольная 51- -й 108,7±3,73 6,2810,68 15,4512,38

Огытная 1-я 51- -й 120,5+1,10 5,9710,36 15,90+0,82

2-я 51- -й 122,545,02 6,1410,32 15,70+1,45

количественное содержание лейкоцитов, эритроцитов, и гемоглобина в крови, свидетельствовали, что уже на 10-й день после отъема у поросят обеих опытных групп имело место относительно устойчивое содержание лейкоцитов (в пределах 12,4 - 12,8x10*/л) . В то время как у поросят контрольной группы отмечали так называемый реактивный лейкоцитоз. Последнее мы связываем со стрессиругадам влиянием на этих животных отъемного периода. Это подтверждается и более поздними исследованиями, в частности через 21 день. По нашему мнению, подобное функциональное состояние не является критическим, поскольку в дальнейшем процесс адаптации у поросят всех трех групп шел относительно ровно. Это видно и по динамике содержания эритроцитов. Исключение, пожалуй, составил гемоглобин. Начиная с 3-недельного срока после отъема, его содержание в крови было вше у поросят, получавших добавки ЕЛК (Р< 0,05-0,001) .

О влиянии ВПК на состояние имлунокомлетенгной системы поросят можно судить по степени дофференцировки Т-клеток и соотношению их субпопуляций. Пролиферация тотальных Т-лимфоцитов в течение всего периода наблюдений постепенно возрастала у животных обеих опытных групп (табл. 9). Усиленная миграция малодифференцироваьных клеток в периферическую кровь наблвдалась у поросят 2-й опытной группы на 14-е и 30-е сутки после огьема. Молодняк 1-й опытной группы характеризовался более медленннм увеличением количественного показателя

Таблица 9

Абсолютное содержание тотальных, предшественников, тимических

Т-лимфоцитов й В-клеток в крови доросят-отъемыцей, х10Ул

Группа День тЕ-ЮК пЕ-РОК СЕ-ГОК ЕМ-ЮК

огыха

Контрольная 10- -й 5, 8810, 58 1, 7010, 07 0, 4910,12 0, 4410, 19

Огыгная 1-я 10- -й 3, 9011, 41 0, 6010, 03 0, 5510,27 0, 3710, 18

2-я 10- -й 3, 8310, 64 о, 6510, 04 0, 6410,26 0, 6й+0, 11

Контрольная 14- -й 5, 7411, 45 1, 5410, 24 0, 81+0,49 0, 37+0, 21

Огыгная 1-я 14- -й 5, 0710, 65 0, 67+0, 08 1, 5210,12 0, 3310, 03

2-я 14- -й б, 84+0, 77 2, 24±0, 18 2, 3710,77 0, 3010, 12

Контрольная 21- -й 8, 4И0, 39 1, 31+0, 11 0, 7910,12 1, 6110, 40

Огыгная 1-я 21- -й 6, 10+1, 30 0, 51+0, 04 1, 3110,16 1, 1710, 13

2-я 21 -й б, 42+0, 64 0, 7210, 02 1, 62+0,23 1, 3510, 27

Контрольная 30- -й б, 0810, 48 0, 4810, 09 0, 5910,05 1, 3710, 14

Огыгная 1-я 30- -й 7, 31+0, 50 0, 70+0, 11 0, 8310,06 1, 13И:0, 31

2-я 30 -й б, 9610, 58 1, 56+0, 03 1, 2710,33 0, 9210, 21

Контрольная 51- -й 5, 2910, 63 0, 5910, 08 0, 5910,09 0, 7(3:0, 25

Огыгная 1-я 51- -й 6, 1210, 42 0, 6210, 03 0, 99+0,09 0, 7510, 18

2-я 51- -й б, 26±0, 97 0, 8&Ю, 20 1, 5010,42 0, 91+0, 16

пЕ-ГОК, который достигал своего максимума на 30-й день наблюдений. Одновременно следует обратить внимание на то, что на 10-й и 21-й дни исследований было зафиксировано снижение интенсивности процесса дифференцировки предшественников у животных сбеих опытных групп. В эти и последукшие дни после отъема происходила увеличение содержания абсолютного количества тимоцитов, а интенсивность про-лиферативных изменений и выход в 1фовь поросят-отьа.-ылей сЕ-ГОК зависели от дозы применяемого препарата.

Под влиянием ЕЛК своеобразно изменялась пролиферативная активность В-лиьфоцитов. Taie, на 10-й день после отъема у поросят 2-й опытней группы мы регистрировали увеличение в крови количества ЕМ-РОК, а через 2 недели интенсивность их циркуляции снижалась по сравнению с животньми контрольной и 1-й опытной группы (КО, 05-0,01) , В последний день скармливания препарата также установлено достоверное снижение ЕМ-ГОК, но уже у свиней обеих опытных групп (КО, 01). Исходя из того, что В-лимфоциты в процессе дальнейшей пролиферации становятся антителогродуцентами, а усиленному их преобразованию в таковые способствует белково-липидньй концентрат, поэтому щхэдолжительность его скармливания поросятам. (30 дней) может быть уменьшена в 2-3 раза.

Функциональная активность субкласоов Т-лиыфоцитов - индукго-ров-хелперов, киллеров-супресооров и активированных также постоянно изменялась (табл. 10). 06 этом свидетельствовали процессы перераспределения в соотношении метану этими пулами клеток в системе крови на определённых этапах опыта и параллельные изменения содержания активированных Т-лимфоцитов у поросят. Если в крони контрольной группы яивотных незначительно преобладала субпопуляция киллеров-супрессоров (следствие послеотъемного стресса), то у отъ-емьшей 1-й опытной группы просматривалась преимущественная активность индукторов-хелперов, которую фиксировали с 10-го по 14-й дни и на 30-е сутки наблюдений. В промежутках между всплесками активности индуктерно-хелперной пролиферации и через 51 день после отъела усиливался процесс дифференцирования киллеров-супрессоров. Количество 6Е-Р0К возрастало, совместно с рЕ-ГОК, на 14-й и 30-й дни опыта.

Особенностью поросят-огьемьшей 2-й опытной группы являлось то, что с 10-го по 14-й дни опыта в их 1фови имела место выраженная активность дифференцировки индукторов-хелперов, а через 3 недели после огьема, под влиянием КПК, индуцировалась пролиферация киллеров-супрессоров. Усиленная циркуляция Т-актинированных лимфоцитов у этих животных отмечалась на 14, 21 и 30-й дни .применения препарата.

Однако через 21 день после начала приёма ВПК в крови поросят происходили процессы перераспределения между количественны« показателями субпопуляций рЕ-РОК и вЕ-РОК в сторону уменьшения

Таблица 10

Абсолютное содержание индукгоров-хелперов, киллеров-супрессоров и активированных Т-лимфоцитов у псросят-огъёмьшей, х109/л

Группа | День опыта | рЕ-ЕОК | вЕ-ЮК | СЕ-ЮК |

Контрольная 10-й 2,6510,76 3,30+0,49 0,76+0,30

Огытная 1-я 10-й 2,8311,18 2,45+1,13 0,4010,09

2-я 10-й 2,56+0,51 1, 92+0,74 0,52+0,21

Контрольная 14-й 3,91+1,04 3,52+0,83 0,50±0,17

Огытная 1-я 14-й 5,07+0,60 3,74+0,50 1,43+0,21

2-я 14-й 5,29+0,72 4,23+0,09 1,40+0,18

Контрольная 21-й 4,2310,19 4,8010,85 1,4810,28

Огытная 1-я 21-й 3,16+0,68 3, 9710,84 0,98+0,23

2-я 21-й 4,08+0,65 5,79+0,83 2,27+0,45

Контрольная 30-й 3,1710,50 4,09+0,63 1,11+0,14

Огытная 1-я 30-й 5,81+0,22 4,7610,36 2,0810,33

2-я 30-й 4,15+0,60 4,3110,35 1,1310,34

Контрольная 51-й 2,62+0,25 3,26+0, 53 0,90+0,15

Огытная 1-я 51-й 2,62+0,22 3,98+0,50 0,8310,12

2-я 51-й 2,54+0,41 4,09+1,04 1,80+0,52

дифферениировки индукгоров-хелперов. Данная ситуация во взаимоотношениях между функционально зрельми Т-клеточньми популяциями могла служить предвестником наступления состояния супрессии в имлуно-ксмпетеш;ной системе молодых животных. По нашему мнению, это явилось защитной им»1унологической реакцией поросят, которая развивалась в ответ на введение модулятора.

Существенную роль в формировании иммуноколпетентности организма свиней выполняют 1дМ и С. Так, через 10 дней после отъема концентрация сывороточного 1дМ у поросят обеих опытных групп уменьшалась и эта разница в среднем составляла 2,5 г/л по сравнению с контролем. На 14-й день наблюдения у поросят, под влиянием разных доз ВПК, отмечалось усиление продуцирования этого 1д, а в 21 день регистрировалось уже снижение, но только у свиней 1-й опытной группы. В последуюдем у всех наблкдаемых поросят отмечался рост уровня аутосинтеза 1дМ, который достигал максимума через 51 день после огьема.

Динамика содержания сывороточных 1дО в значительной степени зависела от дозы ЕЛК. Если у контрольных поросят имели место закономерные возрастные и связанные с технологическим приемом (отъем) изменения, то у животных опытных групп регистрировалась иная картина. ЕЬст показателя 1дС в плазме поросят 1-й опытной группы бьш установлен с 10-го дня наблюдений, достигая достоверных различий к 21-му дню, когда его концентрация составляла 36,13±3,8 г/л, в это

же время у отьемышей контрольной и 2-й опытной группы синтез IgG находился на уровне 20 г/л (Р<0, 001). Через месяц после отъема содержание IgG у поросят снизилось, на фоне более низкой дозы ВПК. Свиньи, получавшие большую дозу препарата, характеризовались достоверно высокой концентрацией (37,7±0, 63 г/л) IgG (Р<0,01 и 0,05). Через 51 день после отъема количество IgG в плазме у всех поросят опытных и контроль ной групп практически выравнивалось и достигало показателя 27-29 г/л.

Резюмируя результаты первичного иммунологического скрининга, необходимо отметить, что состояние клеточных и гуморальных факторов ИКС, обеспечиваниях иммунологическую зашиту организма поросят сразу в послеотъемный период, характеризует их как стрессорную реакцию (в ответ на перегруппировку и новые условия содержания) и требует необходимого дозированного вмешательства для стабилизации и нормального функционирования. Применение оптимальных ррз ВПК в рационах поросят в ранний послеотъемный период способствовало более быстрому функциональному становлению их иммунологической реактивности, соответствующему этому возрастному периоду.

Введение разных доз препарата своеобразно отразилось на биосинтезе аминокислот в плазме крови поросят-с/гьемыией (табл. 11).

Таблица 11

Содержание аспарагиновой и глюгаминовсй аминокислот в 1 мл плазмы поросят, "Л

Vpynna. День опта Аспзрагиновая аминокислота Глкстаминавая аминокислота Сумма кислот

Контрольная 10-й 0,5810,01 0,9210,04 1,50

Оштная 1-я 10-й 0,64+0,02 1,0710,04 1,71

2-я 10-й 0,5910,006 0,9410,07 1,53

Контрольная 14-й 0,46+0,09 0,8010,09 1,26

Оштная 1-я 14-й 0,51±0,05 0,8510,07 1,36

2-я 14-й 0,5310,02 0,9310,04 1,46

Контрольная 21-й 0,61+0,02 1,0210,02 1,63

Опытная 1-я 21-й 0,5710,01 0,9610,01 1,53

2-я 21-й 0,55+0,02 0,93+0,02 1,48

Контрольная 30-й 0,5210,05 0,8910,09 1,41

Опытная 1-я 30-й 0,57+0,05 0,9610,06 1,53

2-я 30-й 0,64+0,07 1,0710,01 1,71

Контрольная 51-й 0,59+0,007 0,9410,05 1,53

Оштная 1-я 51-й 0,6С±0,01б 0,9910,07 1,58

2-я 51-й 0,63±0,03 1,0810,60 1,71

Известно, что аспарагиновая и глогаминовая кислоты существенно влиягэт на силу иммунного ответа. Поэтому, анализируя аминокислотный состав плазмы животных, находящихся в опыте, мы первую очередь обратили в внимание на содержание указанных аминокислот. Так, 10-й день отъема характеризовался синхронньм увеличением аспартата и глгогамата в плазме у животных обеих опытных групп, однако достоверно высоким оно было только на фоне более низкой дозы ЕЛК (Р<0,01). Подобная закономерность сохранялась в течение 14 дней, но на данном этапе исследований количественный показатель ловыиал-ся в большей степени у поросят 2-й опытней по сравнению с контрольной и 1-й опытной группами. Через 3 недели наблюдений имело место снижение содержания этих аминокислот у поросят обеих опытных групп (Р<0,05), а в последующем, до окончания опыта, уровень аспа-рагиновей и глвагаминовай' аминокислот был более высотам у животных, получакших ВПК.

Сопоставляя показатели Т-кпеточнсй дафференцировки и концентрации сывороточных ' 1дМ иве уровнем биосинтеза аминокислот в крови поросят, мы обнаружили тесную взаимосвязь между процессами иммуногенеза и содержанием аспартата и глвэтамата у животных под влиянием ВПК.

Вместе с тем следует обратить внимание на то обстоятельство, что в начале опытного периода, на 3-й день скармливания препарата, у шести огьёмьшей контрольной и двух поросят 2-й опытней групп наблюдались случаи диареи неинфекционной природы. Поросята, получавшие препарат в дозе 0,5 г на 1 кг массы, перенесли адаптационный период значительно легче и без видимых осложнений.

Результаты зоотехнических исследований свидетельствовали о тем, что под влиянием препарата проявлялся стимулирукщий анаболический эффект. За период вьращивания молодняк 1-й и 2-й опытных групп к 4-месячному возрасту достигал соответственно 52,9 и 54,0 кг живой массы и по развитию превосходил класс элита, среднесуточный прирост составил 506-508 г с затратой корма 3,9 к.ед.

Отъемым контрольной группы несколько отличались от опытных по живой массе (50 кг, что на 5,5 и 7,5% ниже) и среднесуточному приросту (465 г, или на 9,1% меньше). Затраты корма на единицу прироста 4,35 к..ед., то есть на 0,45 к.е,™. (11,1%) больше по сравнению с животными опытных групп.

Результаты иммунологического скрининга свиней при повторном скармливании им БЛК

Состояние иммунокемпетентности свиней, обследованных через 12 часов после возобновления скармливания ВПК (1-й день опыта), указывало на активизацию процессов дафференцировки Т-клеток. У поросят обеих опытных групп регистрировали некоторое усиление продифе-

рации тотальных, гредшественников, тимических и Т-киллеров-супрессоров, причем животные 2-й опытной группы характеризовались Солее существенным выходом в циркулирующую кровь и активизацией деятельности субпопуляций тимических и активированных Т-лимфоцитов (Р<0,05 - 0,001). Однако под влиянием разных доз ВПК у молодняка опытных групп уже было выявлено усиление пролиферативных реакций, характеризующихся образованием Т-киллеров-супрессоров.

Особенностью 3-го дня эксперимента явилось усиление деятельности иммунной системы у свиней 2-й опытной группы - их показатели тЕ-РОК, рЕ-РОК, вЕ-РОК, сЕ-РОК и 6Е-Р0К в абсолютном выражении превышали контрольный. Характер процесса дифференцировки Т-лимфоцитов у животных 1-й группы был спокойньм, и только циркуляция в крови тЕ-РОК, вЕ-РОК и сЕ-ГОК осуществлялась более интенсивно, чем в контроле, но не так существенно, как у молодняка 2-й опытной группы. Активизация гуморального иммунитета после повторного влияния ВПК, сопровождалась высоким уровнем 1дМ (14,2 и 12,0 г/л соответственно в 1-й и 2-й опытных группах) и снижением циркуляции В-лим£оцитов, которые в большинстве своем, преобразовавшись в плазматические клетки, не образовывали розеток с эритроцитами мыии и, по-видимаму, выполняли свойственную им функцию - антитело-продуцентов .

После прекращения дачи препарата (на 10-й и 14-й дни наблюдений) различия между группами увеличивались. Количественные значения клеточных факторов иммунной системы свиней 1-й группы оставались ниже величин 2-й, но в обеих опытных группах они продолжали сохранять численное превосходство по многим показателям клеточного звена иммунитета в сравнении с контрольными животными. Разница в содержании абсолютного числа ЕМ-Р0К усиливалась под влиянием самого концентрата, причем на фоне его более высокой дозы. Уровень 1дМ снижался, а синтез ГдС повылался, достигая максимума в 14 дней -48,7 и 45,3 г/л соответственно в 1-й и 2-й опытных группах против 32,9 г/л - в контроле (Р<0, 001). Креме того, начиная с 10-го дня и до конца периода наблюдений, просматривалось дальнейшее усиление циркуляции субкласса Т-лимфоцитов - киллеров-супрессоров. Подобное сочетание взаимодействующих клеточных и гуморальных факторов иммунной системы животных может служить предвестником состояния вторичной супрессии, которое четко проявлялось в последующие дни исследований.

К 3-недельнсму периоду опыта количественные показатели ИКК крови животных в опыте и контроле выходили примерно на один уровень. Исключение составляли показатели индукггоров-хелперов, килле-ров-супрессоров и В-клеток. Наиболее высокий уровень относительного числа тимических Т-лимфоцитов, функциональны»! свойством которых является быстрая пролиферация, сохранялся в крови животных 1-й

группы. Направление аутосинтеза иммуноглобулинов вело к ' снижению их содержания, особенно 1дС, у молодняка опытных групп.

Интенсивность клеточных иммунологических реакций у свиней в конце эксперимента (30-й день опыта) оставалась достаточно высокой, а процесс дифференциации Т-клеток продолжался, по-видимсму, как антигензависимая реакция. В частности, в последний день наблюдений, все аде имела место усиленная циркуляция тЕ-ГОК, рЕ-ГОК, вЕ-ГОК и 6Е-Р0К. Крале того, во 2-й опытной группе сохранялся высокий уровень киллеров-суцрессоров - 4,99x10?/л клеток, или 42,5% (Р<0,001 и 0,01). Концентрация 1дМ у свиней опытных групп снижалась, а синтез 1дО, по сравнению с предыдущими данными, несколько возрастал. Таким образом, после периода супрессии происходила нормализация деятельности иммунной системы, а последствия возобновления скармливания препарата проявлялись более высокой иммунокомпе-тентностью организма животных.

Обобщая данные иммунологического скрининга, можно утверждать, что реактивность иммуноксмпетентной системы молодняка свиней под влиянием повторного контакта их организма с мэдулирукзцим средством характеризовалась коротким латентным периодом и определялась кооперативными отношениями мезвду клеточными и гуморальными факторами. На первых этапах возобновления поступления ВПК в организм животных индуцировался усиленный процесс дифференцировки Т-киллеров-супрессоров, а через 3 дня и аутосинтез 1д М и в, После прекращения поступления препарата (на 10-й и 14-й дни опыта) активизировалась субпопуляиця индукторов-хелперов и продолжался рост концентрации сывороточных иммуноглобулинов до максимальной величины. Подобное соотношение факторов, определяющих уровень иммуноксгмпетент-ности организма свиней, в дальнейшем приводил к активному включению регуляторного супрессорного звена иммунного ответа и, следовательно, к перераспределению Т-клеточной дифференцировки в сторону усиления образования киллеров-суцрессоров и снижению синтеза 1д М и так как предад^щая высокая концетрация последних в крови тормозила, в первую очередь, их собственный синтез.

Повторное введение белково-липидного концентрата поросятам в дозе 1 г, по сравнению с 0, 3 г, на 1 кг массы способствовало более ранней стимуляции клеточных и гуморальных факторов зашиты жиротных с последующим ак£ивньм включением регуляторного супрессорного звена иммунного ответа.

ВЫВОДЫ

1. На ранних этапах роста и развития свиней наблюдаются фазовые изменения в становлении их иммунной системы. Новорожденные поросята характеризуются высоким содержанием в крони предшественников Т-лимфоцитов, киллеров-супрессоров, колостральных 1дМ и й, но

низкой долей в циркуляции индукгоров-хелперов и активированных Т-клеток. Количественное соотношение клеточных и гуморальных факторов свидетельствует об иммуносупрессии первого уровня.

В суточном возрасте у поросят активизируются процессы лейко-поэза и иммуногенеза, а дифференцировка Т-лимфоцитов сопровождается увеличением в периферической 1фови субпопуляций тотальных, ти-мических, индукгоров-хелперов и активированных Т-клеток на фоне снижения киллеров-супрессоров, 1дМ и Происходит функциональная отмена первого уровня супрессии иммунной системы.

2. К 2-недельнсму возрасту у поросят развивается второй уровень супрессорного состояния, являкшийся следствием регуляторной реакции иммунной системы в ответ на предаествумцую стимуляцию процесса дафференцировки Т-клеток экзогенными факторами. Проявление данного возрастного эффекта ИКС сопровождается увеличением в циркуляции киллеров-супрессоров и снижением пролиферации других клеточных. субпопуляиий.

3. Послеотъемный стресс оказывает существенное влияние на состояние иммунокемпетентности организма поросят и приводит к снижению образования тотальных, предшественников, типических Т-лимфоцигов, киллеров-супрессоров и В-клеток, что является закономерной реакцией на изменение условий кормления и содержания животных.

В 4-месячном возрасте у поросят регистрируется снижение про-лиферативной активности-! индукгоров-хелперов с одновременным индуцированием шфференцировки средне- и низкоашдных популяций Т-лимфоцитов и киллеров-супрессоров. Подобное состояние свидетельствует о возрастной иммуносупресаии третьего уровня и начале преобразования организма свиней, в связи с наступлением качественно нового этапа их роста и развития - пубертатного периода.

4. Содержание сывороточных иммуноглобулинов у свиней имеет свои возрастные закономерности. Высокие концентрации 1дМ и особенно 1сгЗ в крови новорожденных поросят созданы колостральными антителами. ЕЪст уровня 1дМ зарегистрирован с недельного и до 2-месячного возраста поросят, что указывает на постепенное созревание механизмов его аутосинтеза. В первые 3 недели жизни животных концентрация колостральных антител типа 1дО, наоборот, интенсивно снижается ввиду их активного распада. В дальнейшем, благодаря активизации процессов синтеза собственных ТдО, их уровень возрастает включительно до 180-го дня жизни свиней. Снижение количества 1дМ и

в крови половозрелых животных (к 8-месячнсму возрасту) обусловлено становлением, гормонального фона, связанного с завершением периода полового созревания.

5. Процесс полового созревания свиней сопровождается изменением количественного соотношения клеточных и гуморальных структур иммунной системы. Усиленная гормональная перестройка, связанная с

функциональным становлением половых желез, активизирует взаимодействие между зрелыми пулами Т-лимфоцитов и В-клеток, индуцируя интенсивность антиталогенеза, что в постпубертатный период обеспечивает стабилизацию иммунокомпетентности организма половозрелых животных.

6. Особенностью чистопородных и псмесных свиней является тождественность динамики дофференцировки Т-клеток, антителопродуцен-тов и синтеза иммуноглобулинов, которая зависит от физиологического созревания животных этого вида. Генетически обусловленной общностью в становлении иммунокомпетентности организма свиней следует назвать явление гетерохронии. Оно характеризуется тем, что процесс дифференциации ИКК и аутосинтеза иммуноглобулинов связан с постепенным морфологическим и функциональным развитием различных компонентов иммунной системы. Изначально проявляют свою зрелость те её звенья, которые обеспечивают высокий уровень иммунологической зашиты животных в определенный постнатальный период онтогенеза.

7. Сравнительная оценка динамики показателей функционально зрелых субпопуляций Т-лим^оцитов у свиней различного филогенеза свидетельствует о том, что свиньи кемеровской и крупней белой пород обладают высоким уровнем в циркулирующей крови и гармоничным соотношением взаимодействующих индукторов-хелперов, киллеров-супрессоров и активированных Т-клеток. Следует отметить низкую иммунологическую реактивность ландрасоз и неустойчивость её показателей у свиней скороспелой мясной породы. Для лащрасов, по-видимому, характерна невысокая приспособляемость к условиям Западной Сибири, а со свиньями скороспелой мясной породы требуется дальнейшая селекционная работа по консолидации всех звеньев их ИКС в контексте повыдания адаптационных способностей к региональным условиям.

8. Двухпородные помеси имеют высокую степень иммунологической зашиты и особенно отличаются этим потомки, полученные при реци-прокнем скрещивании свиней крупной белой и кемеровской пород. Количественный анализ показателей ИКК подтвердил некоторое гревос-ходство иммунокемпетентной системы у псмесей в сочетании кемеровская х крупная белая. В частности, у этих животных в большей степени синхронизировано взаимодействие клеточных и гуморальных факторов иь»мунной системы, о чем свидетельствует коэффициенты соотношения абсолютного числа индукторов-хелперов и киллеров-супрессоров, а также содержание сывороточного 1дС, особенно в пубертатный и ранний постпубертатный периоды.

9. Генетически обусловленные интеграционные взаимоотношения мезду клеточными и гуморальными компонентами ИКС собственного организма и факторами, постудакшими новорожденным поросятам с молозивом и молоксм матери, на определенном этапе онтогенеза формируют относительно высокий уровень иммунологической защиты свиней кеме-

ровской и крупней белей пород и их реципрокных помесей от неблагоприятных влияний окружающей среда.

10. Белково-липидный концентрат, вводимый в рацион супоросных свиноматок за 30 дней до опороса, стимулирует их ретикулогиеггиони-тарную систему. На первом этапе применения ВПК (в дозе 0,5 г/кг массы) у супоросных маток активизируются эритропоэз и образование гемоглобина. Одновременно с этим меняется соотношение абсолютного содержания лейкоцитов за счет базофилов, нейтрофильных гранулопи-тов, моноцитов и лимфоцитов. В дальнейшем величина этих показателей снижается.

Введение БЛК в рацион свиноматок вызывает снижение уровня тотальных Т-лимфоцитов, активизацию продукции индуктсров-хелперов, периодическое повышение синтеза IgG и относительную стабилизацию показателя IgM.

11. Скармливание ВПК маткам во второй половине супоросности не оказывает отрицательного влияния на состояние их здоровья и течение родов. Показатели продуктивных качеств таких свиней свидетельствуют о благотворном воздействии на них белково-липидного концентрата, выражаицемся увеличением показателей крупноплэдности, молочности, массы гнезда и живой средней массы поросят в стьемисм возрасте.

12. Под влиянием ВПК у потомства маток изменяются общая гематологическая картина крови и иммунный статус. Мздулирунцее действие концентрата на темопоэз и иммуногенез проявляется в результате поступления в организм сосунов с молозивом и молоком матерей ряда биологически активных веществ - иммуноглобулинов, гормонов и медиаторов иммунной системы маток, продуцируемых в ответ на введение препарата, всасывание которых в кровь особенно активно происходит в первые сутки жизни. Наиболее эффективной для сохранения псросят-сосунов является доза ВПК 0,5 г/кг массы, скармливаемая супоросным свиноматкам.

13. Для стимуляции становления функциональней активности иммунной системы у поросят в ранний послесгьёмный адаптационный период необходимо использовать БЛК в дозе 0,5 г на 1 кг массы в течение 7-14 дней. В более поздние сроки, при такой же продолжительности скармливания препарата, количество его можно увеличить до 2 г на 1 га? массы.

Под влиянием БЛК поросята-огьемыши нормально растут и развиваются и к 4-месячному возрасту достигают 52,9 - 54,0 кг живай массы, . соответствующей классу элита. Среднесуточный прирост составляет 506 - 508 г с затратой корма 3,9 к. ед. на 1 кг прироста.

14. Активность иммунокомпетентной системы молодняка сниней под влиянием повторного контакта их организма с модулиругадам средством характеризуется коротким латентным периодом, и определяется кооперативными отношениями между клеточньм и гуморальным звенсм

ИКС. На первых этапах возобновления поступления ВПК в организм животных индуцируется усиленный процесс дифференцировки Т-киллеров-супрессоров и аутосинтеэ 1дМ и После прекращения поступления препарата активизируются процессы пролиферащи индукторов-хелперов и продолжается рост концентрации, до максимальной величины, сывороточных 1д. Подобное соотношение указанных факторов в дальнейшем способствует вклшению регуляторного супрессорного звена иммунного ответа и, следовательно, перераспределению Т-клеточной дифференци- • ровки в сторону усиления образования киллеров-супрессоров и снижению синтеза иммуноглобулинов, так как предыдущая высокая концентрация последних в крови тор.юзит, в первую очередь, их собственный синтез.

Возобновление скармливания белково-липидного концентрата поросятам в дозе 1 г, по сравнению с дозой 0,3 г, на 1 кг массы характеризуется более ранней стимуляцией клеточных и гуморальных факторов зашиты животных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Установленные количественные параметры субпопуляций Т-клеток, содержания В-лимфоцитов и иммуноглобулинов классов М и Э рекомендуем применять в качестве нормативных тестов интерьерных показателей свиней пород крупная белая, кемеровская, скороспелая мясная, ландрас и двухпородных помесей в сочетаниях: крупная белая х кемеровская; крупная белая х ландрас; кемеровская• х крупная белая; кемеровская х ландрас при оценке иммунного статуса животных и выявления у них иммунодефицитных состояний.

2. Низкий уровень иммунологической реактивности ландрасов и неустойчивость её показателей у свиней скороспелой мясной порода в условиях Западной Сибири требует дальнейшей селекционной работы по консолидации признаков иммунокомпетентности их организма.

3. Для профилактики заболеваний свиней разных возрастных групп предлагаем использовать экологически безвредный белково-липидный концентрат (ЕЛК) . Регламент его применения запатентован (патент РФ № 2053780 от 23 сентября 1992 г.) и приведен в рекомендациях ■«Белково-липидный концентрат (ЕЛК) и его использование в свиноводстве». (Новосибирск, 1997), одобренных коллегией управления ветеринарии при департаменте сельского хозяйства и продовольственного обеспечения Новосибирской области

4. Список арсенала средств, применение которых профилактиует заболевания иммунной системы и коррегирует её деятельность у свиней, можно пополнить белково-липидньм концентратом из копрсфагов, изготовленным по технологии, разработанной в Новосибирском государственном аграрном университете.

5. В качестве учебного пособия предлагаем лекцию «Физиология иммунной системы у свиней», опубликованную по решению редакционно-издательского совета Новосибирского ТРУ для студентов факультетов зооинженерного, ветеринарной медицины, слушателей ФПК и специалистов.

6. Результаты исследований рекомендуем использовать в учебном процессе при подготовке ветеринарных врачей, зооинженеров, технологов сельскохозяйственного производства и биологов при рассмотрении соогветсгвукших разделов в курсах физиологии, микробиологии, иммунологии, генетики и разведения животных.

СПИСОК ОСНОВНЫХ НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бакшеев А.Ф. Омирнов П.Н. Папафилова О.В. Некоторые показатели состояния организма свиней при добавках в рацион муки из личинок синантропной мухи // Сиб. вестн. с.-х. науки. - 1985.- Ю. -С. 77-80.

2. Бакшеев А.Ф. Некоторые показатели крови у чистопородных и помесных свиней // Повыиение продуктивных качеств свиней Западной Сибири: Сб. науч. ip. / Новосиб. с.-х. ин-т. - Новосибирск, 1986. -С. 61-66.

3. Бакшеев А.Ф. Иммунологическая реактивность организма свиней при использовании в рационах личинкосодержаших кормов // Продуктивность и физиологическое состояние животных при использовании не^градиционных кормов и добавок: Сб. науч. тр. / Новосиб. с.-х. ин-т. - Новосибирск 1989. -С. 11-16.

4. Башеев А.Ф. Физиологическое обоснование применения имлу-нсмодуляторов в свиноводстве // Проблемы реализации продовольственной программы сибирского региона в новых условиях хозяйствова-.ния: Тез. докл. науч. конф. НСХИ. Новосибирск, 1989. -С. 55.

5. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Возрастные особенности функционального состояния Т- и B-систем иммунитета у свиней // Проблемы аграрной науки в условиях перехода производства к рынку: Тез. докл. науч.-гракг. конф. / Новосиб. госаграр. ун-т. - Новосибирск, 1991. -С. 75-76.

6. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Физиология иммунной системы у свиней: Лекция. - Новосибирск, 1991. -23с.

7. Влияние личинкосодержащего препарата на воспроизводитель-н® качества свиноматок и здоровье их потомства / Бакшеев А.Ф. Ба-яндина Г.В. Вермиенко Л.А. Ефанова Н.В. // Новые кормовые добавки и технологические приемы в кормлении животных и птицы: Сб. науч. тр. / Новосиб. госаграр. ун-т. - Новосибирск. 1991, -С. 25-28.

8. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Возрастная характеристика субпопуляций Т-лимфоцитов у свиней // Генетика устойчивости животных к

заболеваниям: Сб. науч. тр. / Новосиб. госаграр. ун-т. - Новосибирск, 1992. -С. 78-85.

9. Бакиеев А.Ф. Сравнительная оценка Т- и B-систем иммунитета у чистопородных и помесных свиней // Там же. - С. 70-74.

10. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В., Баяндина Г.В. Функциональная активность иммунной системы супоросных сниней на фоне применения личинкосодержащего препарата // Производство белкового концентрата и биоперегноя из отходов свиноводства и их использование: Сб. науч. тр. /Новосиб. rocaipap. ун-т. -Новосибирск, 1992. -С. 37-45.

11. Бакшеев А.Ф. Современные проблемы иммунологии свиней // Проблемы науки и производства в условиях аграрной реформы:. Тез. докл. мездунар. конф. - Новосибирск, 1993. -С. 64-65.

12. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Роль экзоэюологических факторов в формировании Т- и B-систем иммунитета у свиней в постнатальном онтогенезе // Экологические проблемы обеспечения жизнедеятельности человека и животных: Тез. докл. всерос. науч. конф. - Новосибирск, 1993. -С. 39-41.

13. Патент » 5064106 от 28. 10. 1993. Способ профилактики заболеваний свиней. - 12с. (в соавторстве)

14. Бакшеев А.Ф. Функциональное становление иммунной системы у свиней // Проблемы науки и производства в условиях аграрной реформы: Материалы науч.-практ. иэнф.- Новосибирск, 1994. -С. 70-74.

15. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Оценка гуморального иммунитета у свиней в поогнатальисм онтогенезе // Анализ современных аграрных проблем: Тез. докл. науч.-пракг. конф. ученых НГАУ и Гумбольдтско-го ун-та. - Новосибирск, 1995. -С. 82-83.

16. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Влияние иммунокоррегирукадих средств на состояние клеточного и гуморального иммунитета у поросят в послеогьемньй период // Совершенствование методов кормления и содержания с.-х. животных: Сб. науч. тр. / Новосиб. гос. аграр. ун-т. - HoBocuÖtpcK, 1995. -С. 4-13.

17. Бакшеев А.Ф. Ефанова Н.В. Особенности иммунологической реактивности свиней с различной схрессочувствительностью на фоне применения имлунсмодуляторов // Там же. - С. 14-17.

18. Jnfluenceof halothane reactivity on the iimome status of pre - and postweanind piglets /Jephanova N., Baksheev A., Knyazev S., Hart V. //Fourth International Veterinary Imnunology Synpo-sium: Univ. of California. Davis, USA. 1995, -P. 315.

19. The dynamics of iimtunj logic traits in young pigs /Zhuchaev K., Knyazev S., Baksheev A., Jephanova N., Hart V. //In the same book. -P. 317.

20. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Влияние иммунокоррекпии организма свиноматок на дифферениировку Т-лимфоцитов у их потомства // Материалы 7-й межгос. межвуз. науч.-пракг. конф. «Новые фармакологические средства в ветеринарии».- С.-Петербург, 1995. -С. 36-37.

21. Ефанова Н.В., Бакшеев А.Ф. Состояние иммуноглобулинов крови поросят после иммуностимуляции матерей перед опоросом // Там же. - С. 37-38.

22. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Иммунный статус супоросных свиней // Проблемы АПК в условиях рыночной экономики: Тез. докл. регион, науч.-практ. конф. - Новосибирск, 1996. -С. 87.

23. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В., Бакшеева К.А. Динамика иммунного ответа у свиней на повторное введение иммуномодулятора // Материалы 8-й межгос. межвуз. науч.-практ. конф. «Новые фармакологические средства в ветеринарии».- С.-Петербург, 1996. -С. 65.

24. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В., Бакшеева К.А. Состояние иммуноглобулинов и аминокислот крови поросят под влиянием иммуномзду-ляторов // Там же. - С. 66.

25. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В., Баяндана Г.В. Взаимосвязь эритропоэза и иммуногенеза у свиней // Проблемы АПК в условиях рыночной экономики: Тез. докл. юбилейной регион, науч.-практ. конф.-Новосибирск, 1996. -С. 99.

26. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Влияние белково-липидного концентрата на содержание иммуноглобулинов у поросят-сосунов // Материалы 9-й межгос., межвуз. науч.-практ. конф, «Новые фармакологические средства в ветеринарии».- С,-Петербург, 1997. -С. 104.

27. Бакшеев А.Ф., Ефанова Н.В. Продуктивность маток и анаболические показатели их потомства под влиянием модулятора // Там же. - С. 103.

28. Бакшеев А.Ф, Коэффициенты соотношения функционально зрелых Т-лимфоцитов у чистопородных и помесных свиней // Актуальные вопросы ветеринарии: Тез. докл. 1-й науч.-практ. конф. фак. вет= мед. НГАУ.- Новосибирск, 1997. -С. 90.

29. Бакшеев А.Ф., ЕфаноЕа Н.В. Модуляция антителогенеза бел-ково-липидньм концентратом на фоне введения вирус-вакцины против чумы свиней //Там же. - С. 89.

30. Baksheev A. The study of functionally mature T-lynphocytes among pure-bred and cross-bred pigs //Proceedings of the 1-st International Veterinary Vaccine diagnostic Conference, 27-31 July 1997. Madison, Winsconsin, USA, -P. 285.

31. Baksheev A., Jephanova N. The modulation of antibody production by protein-and-lipid concentrate dyring piglet's vaccination against swine plague. // In the same book. -P. 286.

32. Гудилин И.И., Баяндана Г.В., Бакшеев А.Ф. Белково - ли-пидный концентрат (ЕЖ) и его использование в свиноводстве: Рекомендации. - Новосибирск. 1997. - 35с.

Подписано в печать 29.06.98 г. Формат 60x84/16. Объем 2,0 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 735.

/

Отпечатано в типографии ГРПО СО РАСХН 633128, Новосибирская обл., п. Краснообск