Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур

Дрогалина, Наталья Александровна

Диссертации по ветеринарии → Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур

ДИССЕРТАЦИЯ

Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур - диссертация, тема по ветеринарии

АВТОРЕФЕРАТ

Дрогалина, Наталья Александровна Москва 2008 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 16.00.03

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур

На правах рукописи

Дрогалина Наталья Александровна

СЕЛЕКЦИЯ БАКТЕРИОФАГОВ И ФАГОУСТОЙЧИВЫХ АТТЕНУИРОВАННЫХ ШТАММОВ SALMONELLA TYPHIMURIUM ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА КУР

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2008

003458929

Работа выполнена в лаборатории качества и стандартизации лекарственных средств против зоонозных болезней Федерального государственного учреждения «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»), Россельхознадзора Министерства сельского хозяйства Российской Федерации.

Научный руководитель:

кандидат биологических наук Ленев С.В.

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук Тугаринов O.A. кандидат ветеринарных наук Серегин И.Г.

Ведущая организация - ФГОУ ВПО «Ульяновская Государственная сельскохозяйственная академия»

¿>с

Защита диссертации состоится « _200§г. в « » часов на за-

седании диссертационного совета Д 220.011.01 в Федеральном государственном учреждении «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (Россия, 123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5, ФГУ «ВГНКИ»)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «ВГНКИ»

Автореферат диссертации разослан «;

'/ЯЦ/yf 2008г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук, Заслуженный ветеринарный врач РФ

Козырев

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Развитие промышленного птицеводства неизбежно сопровождается концентрацией поголовья птицы и увеличением заболеваемости инфекционными болезнями, в том числе и сальмонеллезом.

Сальмонеллез кур - инфекционная болезнь, характеризующаяся у молодняка явлениями септицемии, поражением органов дыхания и желудочно-кишечного тракта, а у взрослых птиц - хроническим течением с поражением репродуктивных органов и бактерионосительством.

Профилактика и борьба с этой инфекцией у кур в промышленном птицеводстве сводятся к проведению организационных и ветеринарно-санитарных мероприятий, выявлению бактериологическими или серологическими методами зараженной птицы и ее ликвидации, применению антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов (A.B. Куликовский, 1990). Однако, эффективность данных мер не обеспечивает благополучие птицеводческих хозяйств по сальмонеллезу. По мнению комитета экспертов ВОЗ, проблема не может быть решена без применения эффективных средств специфической иммунопрофилактики сальмонеллеза кур (Wray С. & Wray А., 2000).

В разных странах были предложены живые, инактивированные и химические вакцины против сальмонеллеза кур, однако только их применение не решало проблемы защиты цыплят первых дней жизни и санирования птице-поголовья от бактерионосительства (Б.Ю. Шустер, Ю.А. Малахов, 1984; Р. А. Barrow, 1991; В.А. Кузьмин, 1993; С.В.Ленев, JI.B. Киселева, 1995; С. Wray & A. Wray, 2000).

Сотрудниками ФГУ «ВГНКИ» (Малахов Ю.А., Ленев C.B., 1995) разработан препарат против сальмонеллеза кур «Сальмофаг энтеритвдис», выпускаемый ФГУП «Ставропольская биофабрика». Препарат обладает высокой лечебной и профилактической активностью по отношению к Sal. enteritidis и Sal. gallinarum-pullorum.

В его состав входят: вакцинный генетически маркированный, фаго-устойчивый штамм Sal. enteritidis и высокоактивные бактериофаги к эпизоотическим штаммам сальмонелл Sal. enteritidis и Sal. gallinarum-pullorum.

Цель и задачи исследования. Целью нашей работы было селекционировать фагоустойчивые штаммы Sal. typhimurium и бактериофаги, перспективные для использования их в качестве производственных при изготовлении лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур (саль-мофага).

Для достижения цели работы перед нами были поставлены следующие задачи:

1. Выделить и селекционировать бактериофаги Sal. typhimurium.

2. Изучить биологические свойства штаммов бактериофагов Sal. typhimurium:

а) морфологию негативных колоний;

б) морфологию вирионов;

в) спектр литической активности;

г) способность к образованию литического фермента (Е-признак);

д) адсорбционные свойства;

е) характеристики фагов в цикле одиночного развития;

ж) серологические свойства.

3. Селекционировать фагоустойчивые высокоиммуногенные штаммы Sal. typhimurium.

4. Изучить расселение и сроки персистирования бактериофагов и фаго-устойчивых атгенуированных штаммов в организме лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

5. Изучить лечебную и профилактическую эффективность фагового и вакцинного компонентов Сальмофага тифимуриум на лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

6. Изучить лечебную и профилактическую эффективность фагового и вакцинного компонентов экспериментального Сальмофага на лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

Научная новизна. Выделены и селекционированы бактериофаги Sal. ty-phimurium, изучены их биологические свойства (морфология негативных колоний, вирионов, способность к образованию литического фермента, спектр литической активности, адсорбционные свойства, характеристики в цикле одиночного развития, серологические свойства). Определены сроки перси-стирования бактериофагов в организме мышей и цыплят, которые ограничены в среднем 10 сутками.

Селекционированы фагоустойчивые аттенуированные штаммы Sal. ty-phimurium, изучены их культуральные, морфологические, ферментативные, антигенные свойства, иммуногенность и остаточная вирулентность. Показано, что длительность персистирования аттенуированных штаммов Sal. typhi-murium в организме цыплят ограничивается 15, а белых мышей - 26 днями.

В лабораторных условиях при испытании на белых мышах и цыплятах экспериментального препарата доказано, что введение в состав коммерческого сальмофага компонентов Sal. typhimurium расширяет спектр его лечебного и профилактического действия.

Практическая значимость работы. Селекционированные фагоустойчивые аттенуированные штаммы и бактериофаги Sal. typhimurium могут быть использованы как для создания Сальмофага тифимуриум, так и для введения в состав коммерческого препарата Сальмофага энтеритидис.

Разработан проект нормативной документации на Сальмофаг, включающий, в дополнение к Sal. enteritidis, новые фаговый и вакцинный компоненты Sal. typhimurium.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и получили положительную оценку на:

- Международной научной конференции «Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для человека и животных» -Ульяновск, 2006 г.

- Конференции молодых ученых ФГУ «ВГНКИ» «Лекарственные средства для животных и корма. Современное состояние и перспективы» - Москва, 2007 г.

- Международной научно-практической конференции молодых ученых «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику», посвященной 50-летию ФГУ «ВНИИЗЖ» - Владимир, 2008 г.

- Международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел», посвященной 110-летнему юбилею Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко - Москва, 2008 г.

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 6 статей, в том числе 2 - в изданиях, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 134 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, обсуждения и выводов. Библиографический список включает 188 публикаций, из них 101 - зарубежные источники. Материалы иллюстрированы 6-ю электронно-микроскопическими фотографиями, 24 таблицами, 3 графиками, 1 диаграммой и документальным приложением.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Результаты изучения биологических свойств выделенных нами бактериофагов Sal. typhimurium.

2. Результаты изучения биологических свойств селекционированных нами фагоустойчивых аттенуированных штаммов Sal. typhimurium.

3. Результаты изучения профилактической и лечебной эффективности экспериментального Сальмофага против сальмонеллеза вызываемого Sal. ty-phimurium и Сальмофага против сальмонеллеза вызываемого Sal. enteritidis и Sal. typhimurium кур в лабораторных условиях.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 2005-2008 г. на базе лаборатории качества и стандартизации лекарственных средств против зоонозных болезней ФГУ «ВГНКИ».

В качестве экспериментальных животных использовали: белых беспородных мышей массой 14-16 (1820 голов), цыплят кросса Ломан Браун 3-, 5-дневного возраста (550 голов), кроликов массой 3,5-4,0 кг породы «Шиншилла» (21 голова).

Были использованы следующие штаммы: Sal. typhimurium М-2, Sal. typhimurium 371Rif, Sal. typhimurium №3, Sal. enteritidis S-7, Sal. enteritidis R-6, штаммы гетерологичных сероваров сальмонелл, музейные штаммы различных родов семейства Enterobacteriaceae.

Изучение этиологической структуры сальмонеллеза птиц в Российской Федерации проводили совместно с С. С. Яковлевым (Россельхознадзор), О.Н. Витковой и М.В. Калмыковым (ФГУ «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория»).

Выделение изолятов фагов сальмонелл проводили из сточных вод птицефабрик. Для выделения фагов, использовали метод «обогащения», описанный Адамсом М (1961 г).

Для выделения штаммов бактериофагов было исследовано 67 проб сточных вод птицефабрик.

Чистые линии фагов получали последовательным клонированием морфологически однотипных негативных колоний.

Активность бактериофагов определяли общепринятыми способами - по количеству жизнеспособных фаговых частиц методом Грациа (1936 г.), и по литической активности фагов методом Аппельмана (цит. по Зуеву В.А. 1969 г.).

Морфологию негативных колоний фагов изучали на плотных питательных средах, используя метод агаровых слоев, описанный Грациа (1936 г).

Изучение морфологии вирионов фагов Sal. typhimurium проводили совместно с Маныкиным A.A. на базе института вирусологии имени Д.И. Ивановского на электронном микроскопе JEM-100B (JEOL) при инструментальном увеличении в 25000 раз и фотографическом увеличении в 6 раз.

Фагоустойчивый мутант штамма Sal. typhimurium №3 получали, культивируя его с равнообъемной смесью фагов Sal. typhimurium, с последующей селекцией клона, не расщепляющегося на фагочувствительные варианты.

Культуральные, морфологические, ферментативные, антигенные свойства и наличие генетических маркеров, а также остаточную вирулентность и иммуногенность полученных фагоустойчивых клонов исследовали в сравнении с исходным аттенуированным штаммом Sal. typhimurium №3 по общепринятым методикам.

Эффективность вакцинного и лечебного компонентов сальмофага Sal. enteritidis и Sal. typhimurium определяли в остром лабораторном опыте на цыплятах кросса Ломан Браун.

Статистическую обработку данных проводили по критерию Стьюдента (1962). Для обработки данных также использовали программу Statistica 7.0 (Statsoft, 2006 г.).

2.2. Результаты собственных исследований

При изучении эпизоотологической ситуации по сальмонеллезу птиц в России было установлено, что сальмонеллез, вызываемый Sal. typhimurium, является широко распространенной инфекционной болезнью сельскохозяйственной птицы. Отмечено, что Sal. typhimurium занимает третье место среди сальмонеллезов у кур: Sal. enteritidis (46,4%), Sal. gallinarum-pullorum (27,8%) и Sal. typhimurium (13,8%).

График 1

Динамика сероваров сальмонелл

'S. enteritidis

Ш S. gallinarum-pullorum -s:"S. typhimurium —S. dublin Ж другиесеровары

2001

2004

2005

2006

Необходимо отметить, что этиологическая структура сальмонеллеза птиц за последние годы существенно не изменилась. Вместе с тем, снизилось выделение от птиц серовара Sal. gallinarum-pullorum и увеличилось Sal. typhimurium, а также возросло число нетипированных сероваров.

Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов Sal, typhimurium

Из 67 проб сточных вод птицефабрик методом обогащения нами было выделено 14 изолятов бактериофагов Sal. typhimurium. Для получения чистых линий фагов проводили последовательное клонирование морфологически однотипных негативных колоний. После проведения пяти последовательных пассажей выделенных фагов их сравнивали по литической активности. В результате сравнения литической активности были отобраны 8 фагов, литическая активность которых по Аппельману была не ниже 10"7: Phagum Salmonella typhimurium F-l, Ph. Sal. typhimurium F-2, Ph. Sal. typhimurium F-3, Ph. Sal. typhimurium F-4, Ph. Sal. typhimurium F-6, Ph. Sal. typhimurium F-7, Ph. Sal. typhimurium Stm-3 и Ph. Sal. typhimurium M-2.

Выделенные нами бактериофаги формировали четыре типа негативных колоний:

1) Колонии диаметром 4-6 мм, круглые, прозрачные, с ровными четкими краями, прозрачным центром и с зоной лизиса по периферии. К этому типу отнесены фаги F-l, F-6 и F-7.

2) Круглые, с ровными краями, диаметром 5-8 мм, с зоной роста устойчивых клонов бактерий вокруг прозрачного центра колонии и мутной зоной неполного лизиса вокруг. К этому типу отнесены фаги F-2, F-4.

3) Колонии диаметром 6-7 мм, круглые, с неровными краями, с прозрачным центром, мутной периферией и мутным ореолом вокруг колонии. К этому типу отнесены фаги F-3, М-2.

4) Колонии диаметром 2-3 мм, круглые, с ровными краями, прозрачным центром и мутной периферией. К этому типу отнесен один фаг - Stm-3.

Полученные клоны изолятов использовали для дальнейшего изучения биологических свойств бактериофагов, в частности, для электронно-микроскопических исследований морфологии их вирионов, являющейся одной из наиболее надежных характеристик для дифференциации фагов.

Большая часть вирионов выделенных фагов была сходна по размерам и строению.

По классификации Тихоненко A.C. (1968 г.) фаги М-2, F-l, F-2, F-3, F-4 относятся к IV группе, В1-морфотипу (семейство Siphoviridae) по классификации H.W.Ackermann (2001 г.), а фаг Stm-3 - к III морфологической группе и к Cl-морфотипу (семейство Podoviridae) по классификации H.W.Ackermann (2001 г.).

Характеристики некоторых структур вирионов фагов Sal. typhimurium представлены в таблице 1.

Таблица 1

Строение вирионов фагов S. typhimurium_

cd Классификация

2 а •е- а а X и о s § я 2 « 3 1 Длина отростка, нм К § -г 3 1 е а> сз К R « X & s¡ 8 5 о V о s С о S* я я о Й 2 о е о JS

и м СЗ X <U Q. S s 3 ш ЕГ С я ж |1 X SJ 5 2 I | н Ü < ■53 £ X <и О

М-2 53±2,1х60±2,3 133±3,2 +

F-1 46±1,3х53±1,4 113±4,1 + -

F-2 60±4,2х67±4,0 134±2,8 + - IV В1 Siphoviridae

F-3 60±3,5х60±3,2 140±2,4 + -

F-4 60±3,6х60±3,8 133±1,5 + -

Stm-3 60±4,1х47±3,9 27±3,0 - Установить не удалось III С1 Podoviridae

Для определения диапазона литической активности фагов было проведено определение фагочувствительности 29 музейных и 18 эпизоотических штаммов Sal. typhimurium.

Таблица 2

Спектр литического действия штаммов бактериофагов Salmonella typhimurium

Штамм бактерий Штамм бактериофага

F-1 F-2 F-3 F-4 Stm-3 F - 6 F-7 М-2

Sal. typhimurium (музейные штаммы) 26/29* 29/29 21/29 29/29 25/29 18/29 22/29 19/29

Sal. typhimurium (изоляты) 17/18 18/18 14/18 18/18 17/18 16/18 16/18 15/18

* - в числителе указано количество штаммов, лизируемых бактериофагом; в знаменателе - количество всех тестируемых штаммов.

Спектр специфичности выделенных фагов ограничен пределами подвида Salmonella enterica subsp. enterica.

Установлена способность фагов лизировать штаммы сальмонелл серо-группы В (Sal. typhimurium, Sal. abortusovis, Sal. abortusequi), серогрупп D (Sal. dublin, Sal. enteritidis), С (Sal. choleraesuis) и E (Sal. london, Sal. anatum).

Формирование фагами литического фермента внутри зараженных ими бактериальных хозяев варьировало незначительно.

Изучаемые нами фаги обладали выраженной антигенной специфичностью. По значениям констант скорости нейтрализации нейтрализующая активность антисывороток, полученных нами к фагам М-2, F-2, являлась высокой и составляла, соответственно, 121 и 116 мин'1. Иммуногенность фагов F-3, F-1, оцененная по константам нейтрализации, составляла 106 и 112 мин'1. Фаги Stm-3, F-4, имеющие значения констант скоростей нейтрализации 73 и 94 минсоответственно, обладали низкой иммуногенностью.

Степень антигенного родства исследуемых фагов определяли по соотношениям между константами скорости нейтрализации в реакциях с гомологичными и гетерологичными антисыворотками. По результатам реакции, среди выделенных нами фагов можно было выделить три группы: группу фа-

гов Р-1, Р-2, являющихся родственными; фаг М-2, имеющий с ними незначительную степень антигенной общности; и фаги Р-З, Б-4, Бйп-З представляющие собой обособленные серологические типы. При перекрестных реакциях нейтрализации с антисыворотками к изучаемым фагам константы равнялись нулю, что свидетельствовало об отсутствии общих антигенов у исследуемых групп фагов.

Для изготовления лечебно-профилактических бактериофагов рекомендуется использовать штаммы фагов, обладающие выраженной адсорбционной способностью, минимальным латентным периодом и высокой урожайностью.

Большая часть выбранных нами для изучения бактериальных хозяев эффективно адсорбировала на своих клетках фаговые частицы. За время 5-минутного контакта клеток с фагами Зйп-З, Р-4, М-2, Р-1, Б-2 и Р-З адсорбировалось 80-91 % фаговых частиц и константа скорости адсорбции достигала 5,0х10'9 см3минЛ

Характеристики взаимодействия в системе «фаг-клетка» варьировали в значительной степени.

Таблица 3

Характеристики фагов в одиночном цикле развития (п=3)

Характеристики цикла Штаммы бактериофагов

М-2 Р-1 ¥-2 Р-З Р-4 81ш-3

Латентный период, мин 30 28 18 24 22 26

Период стабилизации лизиса, мин 4 8 6 6 6 8

Средняя урожайность на бактерию 267±33 277±41 320±9 213±16 225±22 91±10

Наилучшими репродуктивными способностями, сочетающими относительно высокое значение латентного периода с максимальной урожайностью, обладал фаг Р-2.

Таким образом, изучение биологических свойств позволило провести нам дифференциацию выделенных фагов, а также выбрать из них штамм фага F-2 для использования в качестве лечебного компонента препаратов против сальмонеллеза кур.

В ходе экспериментов по определению сроков персистирования бактериофагов в организме животных установлено, что фаговые частицы наиболее длительное время сохраняются в печени и селезенке белых мышей, в печени и бурсе цыплят и ограничены в среднем 10 сутками. Введение в организм животного вирулентного штамма на 7-е сутки после введения бактериофага, увеличивало сроки персистирования и количество фаговых частиц в организме.

Аттенуированные фагоустойчивые штаммы Sal, tvphimurium

Исходным штаммом для получения фагоустойчивого аттенуированного штамма был выбран супрессорный ревертант Sal, typhimurium №3. Этот штамм входит в состав вакцин против сальмонеллеза животных, в частности, в состав вакцины против сальмонеллеза водоплавающей птицы.

Фагоустойчивый мутант получали путем последовательного культивирования штамма Sal. typhimurium №3 с равнообъемной смесью 8 фаговых штаммов. После 9 последовательных циклов культивирования были получены фагоустойчивые клоны аттенуированного штамма, не расщепляющиеся на фагочувствительные варианты. По культуральным, морфологическим, ферментативным, антигенным свойствам, по наличию генетических маркеров полученные фагоустойчивые клоны были одинаковы с исходным атте-нуированным штаммом Sal. typhimurium №3.

Остаточную вирулентность и иммуногенность фагоустойчивых клонов определяли в сравнении с аттенуированым штаммом Sal. typhimurium №3 на белых мышах. Для белых мышей массой 14-16 г ED50 наиболее иммуноген-ного из селекционированных фагоустойчивых клонов составила 2818 ± 350. Остаточная вирулентность была стабильной после десятикратного пассажа на питательных средах и пятикратного пассажа через организм белых мы-

шей, составила при этом LD50 5х 107 микробных клеток. ED50 исходного ат-тенуированного штамма Sal. typhimurium №3 равнялась 3162±685, LD5o - 5х 107 микробных клеток.

Установлено, что фагоустойчивый вакцинный штамм сальмонелл перси-стировап в организме цыплят в среднем 15 дней, белых мышей - 26 дней.

В результате были отобраны наиболее перспективные, по нашему мнению, бактериофаги и фагоустойчивые аттенуированные штаммы Sal. typhimurium, что позволило изготовить экспериментальный препарат сальмофага, состоящего из фагового и вакцинного компонентов.

Испытание эффективности экспериментального сальмофага в лабораторных условиях

Протективные и лечебные свойства сальмофага Sal. typhimurium определяли на цыплятах 3- дневного возраста кросса Ломан Браун.

Для изучения протективного эффекта сальмофаг Sal. typhimurium, содержащий 108 фаговых частиц в 1 мл фагового и 2 млрд. микробных клеток вакцинного компонента, выпаивали цыплятам в 3-дневном возрасте (первая группа). Повторную выпойку препарата проводили в возрасте 5 дней.

Через 14 дней после повторной выпойки препарата цыплят первой и контрольной групп заражали вирулентным штаммом Sal. typhimurium 371Rif (10 млрд. микробных клеток).

Для изучения лечебного эффекта цыплятам второй группы за четыре часа до введения фагового и вакцинного компонентов сальмофага Sal. typhimurium выпаивали вирулентный штамм Sal. typhimurium 371Rif в дозе 10 млрд. микробных клеток.

Через 14 дней проводили диагностический убой всех цыплят с последующим бактериологическим исследованием.

Таблица 4

Протективный и лечебный эффект сальмофага Sal. typhimurium

Показатель Группы цыплят

1 группа 2 группа контроль

Цыплят в группе, гол 30 30 30

Пали (гол.)/%* 3±0,05 (10%) 6±0,07 (20%) 7±0,08 (23%)

Вынужденно убитые, гол 27 24 23

Носителей сальмонелл из вынужденно убитых (гол.)/%** 0 0 23±0,09 (35%)

Общее количество цыплят, от которых выделена сальмонелла (гол),%* 3±0,05 (10%) 6±0,07 (20%) 30 (100%)

Эффективность, % 90 80 0

Примечание: р < 0,001

* - % от общего количества цыплят в группе;

** - % от количества вынужденно убитых цыплят в группе.

В результате установлено, что сохранность цыплят в первой группе, вакцинированных Sal. typhimurium, составила 90,0%. Сохранность цыплят во второй группе (лечебный эффект сальмофага Sal. typhimurium) составила 80,0%. Выделение сальмонелл у цыплят в контрольной группе составило 100%.

Проведенные исследования показали, что одновременное введение фа-гоустойчивого вакцинного штамма Sal. typhimurium и высокоактивного бактериофага позволяет предотвратить заражение животных сальмонеллами в период формирования иммунитета к возбудителю.

При испытании профилактической эффективности фагового компонента установлено, что наилучший защитный эффект оказывал препарат, содержащий 75% фагов Sal. enteritidis и 25% фагов Sal. typhimurium - введение его животным предохраняло от гибели 100% мышей на 14 день после заражения вирулентными штаммами обоих сероваров сальмонелл. Фаги, введенные в соотношении 50:50, оказывали более низкий защитный эффект - введение их предотвращало гибель 66% животных. В группе, где были введены фаги в соотношении 25:75, к 14 дню отмечался защитный эффект только у 33% животных. Заражение животных, получавших только фаг Sal. enteritidis или Sal.

typhimurium, смесью вирулентных штаммов не оказывало защитного эффекта.

Протективные и лечебные свойства комплексного Сальмофага против Sal. enteritidis и Sal. typhimurium изучали в сравнении с Сальмофагом, выпускаемым ФГУП «Ставропольская биофабрика».

Для этого нами была изготовлена экспериментальная серия комплексного Сальмофага. Вакцинный компонент сальмофага содержал в 1 см3 2х109 клеток фагоустойчивого аттенуированного штамма Sal. typhimurium К5 и 1x109 живых клеток фагоустойчивого штамма Sal. enteritidis R-6. Фаговый компонент препарата имел титр по Аппельману 10'9 по отношению к Sal. enteritidis и Sal. typhimurium.

Оба компонента были не контаминированы посторонней микрофлорой и безвредны для лабораторных животных (белые мыши).

Комиссионные испытания эффективности вакцинного компонента комплексного Сальмофага проводили на 5-ти группах цыплят кросса Ломан Браун (Акт комиссионной проверки «Комплексного сальмофага» от 08.12.2008 г.). В группах использовали по 20 цыплят. Цыплят дважды обрабатывали препаратом в 3- и 5- дневном возрасте.

Первая группа цыплят получала комплексный Сальмофаг в профилактических целях. Фаговый компонент содержал два штамма фага в соотношении 75% Sal. enteritidis и 25% Sal. typhimurium и выпаивался в дозе 1см3, вакцинный компонент содержал фагоустойчивые аттенуированные штаммы Sal. enteritidis и Sal. typhimurium в дозе 0,25 млрд. и 2 млрд. микробных клеток, соответственно.

Второй группе цыплят за четыре часа до введения комплексного Сальмофага выпаивали вирулентные штаммы Sal. typhimurium 371Rif (10 млрд. микробных клеток) и Sal. enteritidis S-7 (12 млрд. микробных клеток).

Цыплятам третьей группы выпаивали препарат Сальмофаг энтеритидис, изготовленный ФГУП «Ставропольская биофабрика», согласно наставлению по применению.

Цыплятам четвертой группы за четыре часа до введения Сальмофага эн-теритидис выпаивали вирулентные штаммы Sal. enteritidis S-7 в дозе 12 млрд. микробных клеток и Sal. typhimurium 371 Rif в дозе 10 млрд. микробных клеток.

Цыплята пятой группы - контрольные.

Через 14 суток после повторной выпойки препаратов цыплят 1, 3 и 5 контрольной групп заражали смесью вирулентных штаммов Sal. enteritidis (12 млрд. микробных клеток) и Sal. typhimurium 371Rif (10 млрд. микробных клеток).

Наблюдение за цыплятами проводили в течение 14 дней. После окончания срока наблюдения проводили диагностический убой цыплят всех групп с последующим бактериологическим исследованием.

Для дифференциации вирулентного штамма Sal. typhimurium 37IRif от вирулентного штамма Sal. enteritidis S-7 использовали его способность расти на средах, содержащих рифампицин (1200ng/ml).

Результаты испытания отражены в таблице 5.

Таблица 5.

Протективный и лечебный эффект сальмофага

Показатель Группы цыплят

1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 5 группа

Цыплят, гол 20 20 20 20 20

Пали (гол.)/%* 0 3±0,08 (15%) 6±0,1 (30%) 8±0,11 (40%) 14±0,1 (70%)

Вынужденно убитые, гол 20 17 14 12 6

Носителей сальмонелл из вынужденно убитых (гол.) 0 0 7 6 6

Общее количество цыплят, от которых выделена сальмонелла (гол),%* 0 3±0,08 (15%) 13±0,11 (65%) 14±0,1 (70%) 20 (100%)

Эффективность, % 100 85 35 30 0

Примечание: р < 0,001

* - % от общего количества цыплят в группе;

** - % от количества вынужденно убитых цыплят в группе.

Сохранность цыплят в опытных группах, вакцинированных Sal. enteriti-dis и Sal. typhimurium, составила 100,0 % при заражении Sal. enteritidis и Sal.typhimurium и 35,0 % в группе цыплят, вакцинированных Сальмофагом, выпускаемым биологической промышленностью, при заражении обоими штаммами. Сохранность цыплят в группах с лечебным эффектом коммерческого (4) и комплексного (2) Сальмофагов составила 30,0 % и 85,0 %, соответственно. Выделение сальмонелл у цыплят в контрольных группах составило 100,0 %. Следует отметить, что в группах, вакцинированных коммерческим препаратом, при вскрытии выделялась Sal. typhimurium.

Из приведенных данных следует, что введение в состав сальмофага, выпускаемого биологической промышленностью, вакцинного и фагового компонентов Sal. typhimurium, значительно увеличивает лечебную и профилактическую эффективность препарата.

ВЫВОДЫ.

1. По результатам изучения этиологической структуры сальмонеллеза птиц в 2007 году основными сероварами сальмонелл, инфицирующими птицу в Российской Федерации, являются: Sal. enteritidis (46,4%), Sal. gallinarum-pullorum (27,8%) и Sal. typhimurium (13,8%).

2. В состав экспериментального Сальмофага включен штамм фага F-2, как наиболее активный из восьми отобранных для изучения бактериофагов и обладающий выраженной скоростью адсорбции К = 5,0х10"9см3мин"', коротким латентным периодом внутриклеточного развития - 18 мин, высокой урожайностью - 320 фаговых частиц из одной микробной клетки, широким спектром литической активности (100%) по отношению к музейным и эпизоотическим штаммам Sal. typhimurium.

3. Срок персистирования бактериофагов в организме белых мышей и цыплят составляет в среднем 10 дней.

4. Обработка животных селекционированным бактериофагом Sal. typhimurium F-2 до заражения предохраняет от гибели 88 % мышей и 100 %

цыплят при сохранности цыплят в контрольной группе, не превышающей 4050 % и гибели 100 % мышей.

5. Наиболее иммуногенным из 6 селекционированных фагоустойчивых штаммов Sal. typhimurium №3 является К5. ED50 штамма К5 для белых мышей массой 14-16 г составляет 2818 ± 350, LD50 - 5x107 микробных клеток. Сроки персистирования штамма в организме цыплят и мышей ограничены соответственно 15 и 26 сутками.

6. Сохранность цыплят при применении Сальмофага тифимуриум в группах по изучению профилактической эффективности составляет 90 %, а лечебной - 80 % поголовья.

Экспериментальный Сальмофаг, включающий фаговые и вакцинные компоненты Sal. enteritidis и Sal. typhimurium предохранял от заражения 100 % цыплят и оказывал лечебный эффект в 85 % случаях.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Выделенные и селекционированные нами бактериофаги и фагоустойчи-вые аттенуированные штаммы Sal. typhimurium могут быть использованы для создания Сальмофага тифимуриум и усовершенствования коммерческого Сальмофага энтеритидис путем введения в его состав фагового и вакцинного компонентов Sal. typhimurium.

Научные данные, полученные в ходе работы, использованы для составления «Методических рекомендаций по профилактике и ликвидации сальмо-неллеза кур с использованием Сальмофага», утвержденных 15.12.2008 г. директором ФГУ «ВГНКИ», академиком РАСХН А.Н.Паниным.

Фагоустойчивый аттенуированный штамм Sal. typhimurium К5 и штаммы бактериофагов F-l, F-2, М-2 и Stm-З депонированы во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, Россельхознадзора МСХ РФ.

Разработан проект СТО на Сальмофаг, включающий компоненты бактериофагов Sal. enteritidis и Sal. typhimurium и фагоустойчивые аттенуирован-ные штаммы этих сероваров сальмонелл.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ленев C.B., Дрогалина H.A., Бугаев С.А. Бактериофаги для лечения и профилактики сальмонеллеза птиц // Мат-лы Межд.науч.конференции «Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для человека и животных» - Ульяновск. - 2006. - с. 417.

2. Дрогалина H.A., Ленев C.B. Селекция фагоустойчивых аттенуирован-ных штаммов и бактериофагов Sal. typhimurium // Сб. науч. тр. ВГНКИ, - М., - 2007, - т. 68, - с. 80-86.

3. Ленев C.B., Дрогалина H.A. Вакцинопрофилактика сальмонеллеза кур. // III Международный ветеринарный конгресс по птицеводству, - М., -2007.-с. 153-156

4. Яковлев С.С, Ленев C.B., Дрогалина H.A., Калмыков М.В., Виткова О.Н., Шурахова Ю.Н. Эпизоотическая ситуация по сальмонеллезам птиц в России //Ветеринария, - М„ - 2008. - №6, - с. 12-13

5. Дрогалина H.A., Ленев C.B. Изучение расселения и сроков персисти-рования бактериофагов в организме лабораторных животных // Материалы межд. научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных рыб и пчел» ВИЭВ - М„ - 2008. - с. 325-328

6. Дрогалина H.A., Ленев C.B. Повышение лечебной и профилактической эффективности сальмофага // Ветеринария и кормление, - 2008. - с. 3233

Заказ № 135/12/08 Подписано в печать 17.12 2008 Тираж 100 экз. Усл. п.л. 1,25

ч ООО "Цифровичок", тел. (495) 797-75-76; (495) 778-22-20 {C&j; www.cfr.ru; e-mail:info@cfr.ru

Оглавление диссертации Дрогалина, Наталья Александровна :: 2008 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ

1. Обзор литературы

1.1 Биологические свойства сальмонелл

1.2 Сальмонеллез кур, эпизоотологические данные

1.3 Клинические признаки и патологоанатомические изменения у кур при сальмонеллезе

1.4 Бактериофаги, их выделение и биологические свойства

1.5 Взаимодействие фага с бактериальной клеткой

1.6 Практическое применение препаратов бактериофагов и критерии отбора производственных штаммов для их изготовления

1.7 Специфическая профилактика сальмонеллеза птиц

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Дрогалина, Наталья Александровна, автореферат

Сальмонеллез относится к числу зоонозов, чрезвычайно широко распространенных в России и других странах мира. Одним из основных резервуаров этих микробов в природе являются дикие и домашние птицы, в первую очередь, куры. По данным ветеринарной отчетности Россельхознадзора, в России за последние пять лет выявлено снижение количества неблагополучных по сальмонеллезу пунктов (график 1, табл 1). В то же время число заболевших сальмонеллезом птиц возросло с 2003 года более чем в 40 раз.

Эпизоотическая ситуация по сальмонеллезу кур в России

График 1

I * I ■ I-г=»-1 ■ Г

1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 —♦—количество неблагополучных пунктов

-■—заболело (тысяч голов) пало (тысяч голов)

Таблица 1

Годы 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006

Количество неблагополучных пунктов 75 60 108 171 175 151 124 127 119 95

Заболело (тысяч голов) 16,7 15,6 47 17,3 43,1 31,8 7,9 30,9 195,9 336

Пало (тысяч голов) 3,8 3,7 6,4 2,6 22,9 4,7 1,6 10,1 26,2 24,4

Изучение этиологической структуры сальмонеллеза птиц показало, что основными сероварами сальмонелл, инфицирующими птицу в Российской Федерации, являются: Sal. enteritidis, Sal. gallinarum-pullorum и Sal. typhimurium.

Помимо нанесения ущерба птицеводческой отрасли, сальмонеллез имеет большую социальную значимость. Инфицированная домашняя птица становится резервуаром и источником сальмонелл для человека. При расследовании вспышек сальмонеллеза установлено, что инфицирующая доза возбудителя может составлять от 10 до нескольких сотен клеток. Возможность заражения небольшими дозами сальмонелл привела к увеличению эпидемиологической значимости таких продуктов питания, как мясо кур и яйца в качестве факторов передачи сальмонелл.

По данным Роспотребнадзора, заболеваемость сальмонеллезами в 2006 г. стабилизировалась на уровне 31,96 на 100 тыс. населения, что на 9 % выше, чем в 2005 г. В этиологической структуре сальмонеллеза, как и в предыдущие годы, преобладают сальмонеллы группы D (83 %) и, прежде всего, Sal. enteritidis.

Ежегодно в стране регистрируется до 30 крупных вспышек сальмонеллеза пищевого характера с числом пострадавших от 500 до 1500 человек, причиной которых являются нарушения технологического процесса приготовления блюд, правил и сроков хранения продукции, мойки и дезинфекции оборудования и инвентаря в столовых и пищеблоках.

По сообщению Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека на III Международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (A.A. Мельникова, 2007г), в структуре острых кишечных инфекций населения в Российской Федерации случаи заболевания людей сальмонеллезом (31%) занимают второе место после дизентерии (46%).

Таким образом, ситуация по сальмонеллезу в настоящее время не может считаться благополучной, что делает необходимым применение в практике ветеринарии и здравоохранения эффективных мер борьбы с заболеванием.

Профилактика и борьба с этой инфекцией у кур в промышленном птицеводстве сводятся к проведению организационных и ветеринарно-санитарных мероприятий, выявлению бактериологическими или серологическими методами зараженной птицы и ее ликвидации, применению антибиотиков и других химиотера-певтических препаратов [50]. Однако эффективность данных мер не обеспечивает благополучие птицеводческих хозяйств по сальмонеллезу. По мнению комитета экспертов ВОЗ, проблема не может быть решена без применения эффективных средств специфической иммунопрофилактики сальмонеллеза кур [188].

В разных странах были предложены живые, инактивированные и химические вакцины против сальмонеллеза кур [86,96,108,122,125], однако только их применение не решало проблемы защиты цыплят первых дней жизни и санирования птицепоголовья от бактерионосительства [52]. Именно по этой причине в последнее время возрастает интерес к фаговым препаратам, которые обладают лечебным эффектом и обеспечивают санирование птицепоголовия от бактерионосительства.

Одним из них является комплексный препарат «сальмофаг» против сальмонеллеза вызываемого Sal. enteritidis, который имеет в своем составе вакцинный генетически маркированный, фагоустойчивый штамм Sal. enteritidis и высокоактивные бактериофаги к эпизоотическим штаммам сальмонелл [51].

Цель и основные задачи исследования. Цель работы - селекционировать фагоустойчивые штаммы Sal. typhimurium и бактериофаги, перспективные для использования их в качестве производственных при изготовлении лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур (сальмофага).

Для достижения цели работы перед нами были поставлены следующие задачи:

1. Выделить и селекционировать бактериофаги Sal. typhimurium;

2. Изучить биологические свойства штаммов бактериофагов Sal. typhimurium: морфологию негативных колоний, морфологию вирионов, способность к образованию литического фермента (E-признак), спектр литической активности, адсорбционные свойства, характеристики в цикле одиночного развития, серологические свойства.

3. Селекционировать фагоустойчивые высокоиммуногенные штаммы Sal. typhimurium.

4. Изучить расселение и сроки персистирования бактериофагов и фаго-устойчивых аттенуированных штаммов в организме лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

5. Изучить лечебную и профилактическую эффективность фагового и вакцинного компонентов сальмофага Sal. typhimurium на лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

6. Изучить лечебную и профилактическую эффективность фагового и вакцинного компонентов комплексного Сальмофага энтеритидис и тифимури-ум на лабораторных животных (белые мыши, цыплята).

Научная новизна. Выделены и селекционированы фаги Sal. typhimurium, изучены их биологические свойства (морфология негативных колоний, вирионов, способность к образованию логического фермента, спектр ли-тической активности, адсорбционные свойства, характеристики в цикле одиночного развития, серологические свойства). Определены сроки персистирования бактериофагов в организме мышей и цыплят, которые ограничены в среднем 10 сутками.

Селекционированы фагоустойчивые аттенуированные штаммы Sal. typhimurium, изучены их культуральные, морфологические, ферментативные, антигенные свойства, иммуногенность и остаточная вирулентность. Показано, что длительность персистирования аттенуированных штаммов Sal. typhimurium в организме цыплят ограничивается 15, а белых мышей — 26 днями.

В лабораторных условиях при испытании на белых мышах и цыплятах экспериментального препарата, доказано, что введение в состав коммерческого сальмофага компонентов Sal. typhimurium расширяют спектр его лечебного и профилактического действия.

Практическая значимость работы. Селекционированные фагоустойчивые аттенуированные штаммы и бактериофаги Sal. typhimurium могут быть использованы как для создания сальмофага Sal. typhimurium, так и для введения в состав коммерческого препарата Сальмофага энтеритидис.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и получили положительную оценку на:

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 6 статей, из них две работы - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

На защиту выносятся:

1. Результаты изучения биологических свойств выделенных нами бактериофагов Sal. typhimurium.

3. Результаты изучения профилактической и лечебной эффективности экспериментального моновалентного сальмофага против сальмонеллеза вызываемого Sal. typhimurium и бивалентного сальмофага против сальмонеллеза вызываемого Sal. enteritidis и Sal. typhimurium у цыплят в лабораторных условиях.

Заключение диссертационного исследования на тему "Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур"

4. Выводы

2. В состав экспериментального Сальмофага включен штамм фага F-2, как наиболее активный из восьми отобранных для изучения бактериофагов и обладающий выраженной скоростью адсорбции К = 5,0x10"9см3мин1, коротким латентным периодом внутриклеточного развития - 18 мин, высокой урожайностью - 320 фаговых частиц из одной микробной клетки, широким спектром литиче-ской активности (100%) по отношению к музейным и эпизоотическим штаммам Sal. typhimurium.

3. Срок персистирования бактериофагов в организме белых мышей и цыплят составляет ограничен в среднем 10 дней.

4. Обработка животных селекционированным бактериофагом Sal. typhimurium F-2 до заражения предохраняет от гибели 88 % мышей и 100 % цыплят при сохранности цыплят в контрольной группе, не превышающей 40-50 % и гибели 100 % мышей.

5. Наиболее иммуногенным из 6 селекционированных фагоустойчивых клонов Sal. typhimurium №3 является штамм К5. ED50 штамма для белых мышей массой 14-16 г. составляет 2818 ± 350. LD50 - 5x10 микробных клеток. Сроки персистирования штамма в организме цыплят и мышей ограничены соответственно 15 и 26 сутками.

6. Сохранность цыплят при применении Сальмофаг Sal. typhimurium в группах по изучению профилактической эффективности составляет 90 %, а лечебной - 80 % поголовья.

5. Практические предложения

Научные данные, полученные в ходе работы, использованы для составления «Методических рекомендаций по профилактике и ликвидации сальмонел-леза кур с использованием Сальмофага», утвержденных 15.12.2008 г. директором ФГУ «ВГНКИ», академиком РАСХН А.Н.Паниным.

Разработан проект СТО на Сальмофаг, включающий компоненты бактериофагов Sal. enteritidis и Sal. typhimurium и фагоустойчивые аттенуированные штаммы этих сероваров сальмонелл.

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2008 года, Дрогалина, Наталья Александровна

1. Агол, В.И. Взаимодействие вируса и клетки. / Агол В.И., Атабеков И.Г., Тихоненко Т.И. // Молекулярная биология вирусов. -1971. — С. 189-408.

2. Адаме, М. Бактериофаги. / М. Адаме М.: Издательство иностранной литературы, 1961. - 587с.

3. Адельсон, Л.И. Бактериофаги активные по отношению к энтеропатогенным кишечным палочкам. / Адельсон Л.И. // Сб. научн. тр. Ленинград, сан. гигиен. мед.ин-т. Л.: ЛСХМИ, 1962.-Т. 66.-С. 184-188.

4. Адельсон, Л.И. Обнаружение бактериофагов активных к энтеропатогенным кишечным палочкам серотипов «9» и «145». / Адельсон Л.И. // Сб. . научн. тр. Ленинград, сан. гигиен, мед. ин-т. Л.: ЛСХМИ, 1962. - Т. 66. - С. 189194

5. Андриашвили, И.А. Выделение, концентрация, очистка и некоторые биологические свойства фагов кишечной группы. / Андриашвили И.А. // Сб. научн. тр. Тбилис. научн.-исслед. ин-т вакцин и сыворотки. Тбилиси: ТНИИВС, 1978. - С. 29-38

6. Ахмедов, A.M. Сальмонеллезы (паратифы) молодняка. / A.M. Ахмедов. -М.: Колос, 1983. 256с.

7. Ашмарин, И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях. / И.П. Ашмарин, A.A. Воробьев. М.: Медгиз. 1962. - 179с.

8. Бессарабов, Б.Ф. Болезни кур. / Б.Ф. Бессарабов. — М.: Россельхозиздат, 1983.- 135 с.

9. Бессарабов, Б.Ф. Сальмонеллез птиц. / Б.Ф. Бессарабов, Н.К.Сушкова. // Лекция. М.: Моск. гос. акад. ветеринар, медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина, МГАВМиБ, 1998. - 20 с.

10. Бойченко, М.Н. Сальмонеллез: распространение возбудителя в организме. / Бойченко М.Н. // ЖМЭИ. 1984. - №10. -С. 3-6

11. Борисов, Л.Б. Биологическая характеристика фагов энтеропатогенных кишечных бактерий. Выделение, диапазон действия и серологическая характеристика коли-фагов 0111, 026, 055. / Борисов Л.Б., Адельсон Л.И. Пету-хова Р.Н. // ЖМЭИ. 1962. - №3. - С. 94-98

12. Борисов, Л.Б. Биологическая характеристика фагов энтеропатогенных кишечных палочек. / Борисов Л.Б., Хан-Фимина В.А. // ЖМЭИ. 1970. - №6. -С. 34-37

13. Борисов, Л.Б. Биологическая характеристика фагов бактерий Аризона. / Борисов Л.Б., Юсупова P.P., Петухова Р.Н. // ЖМЭИ. 1972. - №3. - С. 195-198

14. Борисов, JI.B. Энтеропатогенные кишечные палочки и их фаги. / JI.B. Борисов. JL, Медицына, 1976. - 192с

15. Булатов, A.C. Биологические особенности сальмонелл, выделенных с объектов внешней среды птицефабрик, и пути снижения ее контаминации: Ав-тореф. дис. канд. вет. наук: 16.00.03. / Булатов A.C.; ВНИИ санитарии. -М., 1999.-С. 8-12

16. Вакцина против сальмонеллеза водоплавающих птиц. / Шустер Б.Ю., Малахов Ю.А., Киржаев Ф.С., Персов A.C., Зуев В.Г. // Новое в борьбе с болезнями птиц. -JL, 1984, -С. 24-26

17. Вариабельность фагов Bacillus thuringiensis С-2 морфологии. / Кузин А.И., Смирнова Т.А., Володина Л.И., Нетыкса Е.М., Мазанов А.Л., Азизбекян P.P. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. №12.1988. -С. 29-33.

18. Васяева, Е.В. Пути усовершенствования лечебно-профилактического препарата дизентирийного бактериофага. / Васяева Е.В., Ворошилова H.H., Абросимова С.А. // Тезисы докл. Всес. съезда микробиол. и эпидемиол. -Ч.1.- Ульяновск. -1977. -С. 284-286

19. Ворошилова, H.H. Вопросы таксономии фагов. / Ворошилова H.H. // ЖМЭИ -1974. №6. - С. 32-35

20. Выдрина, Е.И. Куры как резервуар сальмонелл. / Выдрина Е.И. // Микробиология, эпидемиология и иммунология. 1962. — Т.10. вып. 1. - С. 151155

21. Габрилович, И.М. Общая характеристика бактериофагов. Основы бактериофагии. /И.М.Габрилович. -Минск, 1973. 56 с.

22. Ганюшкин, В.Я. Влияние множественности инфекции фагом на его лити-ческую активность, репродукцию и стерилизующий эффект. / Ганюшкин В.Я., Ершов Ф.И. // ЖМЭИ. 1959. - №4. - С. 108-112

23. Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги Salmonella cholerae-suis сравнительная характеристика и практическое применение: Автореф. дис. на соиск. ученой степени док. вет. наук: 16.00.03. /В.Я. Ганюшкин. Ульяновск, 1984. — 45с

24. Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии. / В.Я. Ганюшкин. Ульяновск, 1988. - 84 с.

25. Ганюшкин, В.Я. Специфичность литического действия сальмонеллезных бактериофагов. / Ганюшкин В.Я. // Вопр. вет. микробиологии, эпизоотологии и вет.-сан. экспертизы. -4.2 Ульяновск. -1994 - С. 22-26

26. Гласкович, A.A. Длительность бактерионосительства у гусей при экспериментальном сальмонеллезе. / Гласкович A.A. // Вет. Наука пр-ву. -Т.27.1989.- С.58-61

27. Гольдфарб, Д.М. Влияние температуры на дезентерийный фаг и на его взаимодействие с бактериальной клеткой. / Гольдфарб Д.М., Ильяшенко Б.И. // Сб. ст. Изменчивость и иммунитет. Москва, 1959. - 170с.

28. Гольдфарб, Д.М. Бактериофагия. / Д.М. Гольдфарб. М.: Медгиз, 1961. -297с

29. Григорьева, JI.B. Эшерихии и их фаги в окружающей среде. / Григорьева JI.B. // Кишечные инфекции. Киев, 1986. -С. 60-64

30. Золотухин, С.Н. Иммуногенные свойства и одиночный цикл внутриклеточного развития морганеллезного бактериофага. / Золотухин, С.Н. // Вестн. РАСХН. -2006. -№2. С.69-70

31. Зб.Зудова, Т.А. Фаготерапия и иммунные реакции макроорганизма. / Зудова Т.А., Зудов A.A. // Актуальные проблемы и перспективы развития животноводства. Самар. гос. с.-х. акад. Самара, 2002. -С. 125-129

32. Зуев, В.А. Использование признака лизинообразования (Е-признак) для внутривидовой дифференциации фагов. / Зуев В.А. // ЖМЭИ. 1965. - №9. с. 42-44

33. Зуев, В.А. Литическая активность бактериальных вирусов. / В.А. Зуев. М.: Медицина, 1969. -164 с.

34. Карпов, В.П. Болезни птиц. / В.П. Карпов. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 23-40

35. Килессо, В.И. Идентификация сальмонелл при помощи О-бактериофага. / Килессо В.И. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -1969,-№2.-С. 48-53

36. Киптилый, Ю.П. Фагопрофилактика сальмонеллеза у цыплят. / Киптилый Ю.П., Пригорь A.B. // Пути повышения продуктивности воспроизвод. способности, профилактики и лечения с.-х. животных. -4.2. Курск, 2001. -С. 115-116

37. Киржаев, Ф.С. Синтез белка и сроки персистирования вакцинного штамма в организме утят, иммунизированных живой вакциной против сальмонеллеза водоплавающих птиц на фоне материнского иммунитета. / Киржаев

38. Ф.С., Чекмачев A.H., Мишин B.C. // Основы профилактики болезней с.-х. птиц.-Л., 1989.-С. 32-36

39. Красильникова, В.М. Изучение плазмид Salmonella enteritidis. / Красильни-кова В.М., Веревкин В.В., Воложанцев Н.В. // Сб.науч.тр. ВГНКИ Все-рос.гос.НИИ контроля, стандартизации и сертификации вет. препаратов. -Т.59. -Москва, 1996. С.69-75.

40. Кривиский, A.C. Проблемы бактериофагии. / Кривиский A.C. // Актуальные вопросы вирусологии. М., 1960. -С. 15-21.

41. Крылова, М.Д. Фаготипирование бактерий. / М.Д. Крылова— М. 1963. -200с.

42. Кузьмин, В.А. Результаты применения противосальмонеллезного бактериофага в неблагополучной по сальмонеллезу птицефабрике. / Кузьмин

43. B.А., Максимов П.Н. // Сб.науч.тр. -4.2. С.-Петербург, вет. ин-т. -1993. -№120.-С. 103-106.

44. Куликовский, A.B. Совещание ВОЗ по проблеме сальмонеллеза в животноводстве. / Куликовский A.B. // Ветеринария. -1990. №11.- С. 67-69.

45. Ленев, C.B. Сальмофаг энтеритидис. Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки в России. / Ленев C.B. // Сборник материалов научной сессии РАСХН. Россельхозакадемия. М., 1992. - С. 258-259

46. Ленев, C.B. Профилактика сальмонеллеза энтеритидис у цыплят-бройлеров. / Ленев C.B., Киселева Л.В. // Сб. науч. трудов ВГНКИ. -Т.57. -М., 1995—71с.

47. Ленев, C.B. Сальмофаг лечебно-профилактический препарат. / Ленев

48. C.B., Малахов Ю.А., Шорохов В.В. // Материалы научной конференции, посвященной 50-летию Краснодарской НИВС. -4.1. Краснодар, 1996. — С. 26-30

49. Ленев, C.B. Сальмонеллез птиц и его специфическая профилактика. / Ленев C.B., Виткова О.Н., Калмыков М.В. // Мат-лы 1-го Межд. ветеринарного конгресса по птицеводству. М., 2005., -С. 181-183

50. Макарова, Т.Н. Использование бактериофагов в ветеринарии. / Макарова Т.Н. // Вет. и мед. аспекты зооантропонозов. -Ч.2. -Покров, 2003. -С. 633637

51. Мишурнова, Н.В. Препарат СТФ-1/56 эффективное средство профилактики сальмонеллеза птиц (экспериментальное заражение). / Мишурнова Н.В., Киржаев B.C. // Ветеринария. - 1993. -№10. - С. 26-30

52. Недопрадко, Д.М. Некоторые свойства бактериофагов Зоне. Антигенные свойства, диапазон литической активности, морфология негативных колоний бактериофагов Зонне. / Недопрадко Д.М. // ЖМЭИ. 1965. - №10. -С. 100-104

53. Никольская, И.И. Бактериофаги и системы хозяйской специфичности ДНК. / Никольская И.И. // Сб. ст. Успехи биологической химии. -Вып.24. -М. -1983.-С. 194-213

54. Никольская, И.И. Факторы резистентности бактериофагов к клеточным нуклеазам при фаготипировании микробных инфекций. / Никольская И.И., Дабов С.С. // Вестник АМН СССР. 1984.- №8. -С. 42-48

55. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Под редакцией Дж. Хоулт, Н.Криг, П.Снит, ДЖ.Стейли, С.Уилльямс М., 1997. Т.1: Мир. - 432с.

56. Павлов, С.И. Мониторинг и совершенствование специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц: Автореф. дис. канд. биол. наук. спец. 03.00.23. / С.И. Павлов; Всерос. н.-и. и технол. ин-т биол. пром-сти. Обо-ленск, 2004. - 22с.

57. Петрашин, В.П. Вакцинопрофилактика сальмонеллеза водоплавующей птицы. / Петрашин В.П. // Болезни с.-х. животных. -1987. С. 95-112.

58. Поиск и характеристика бактериофагов, специфически лизирующих Escherichia coli серогруппы 0157. / Веревкин В.В., Баннов В.А., Светоч Э.А., Воложанцев Н.В., Жиленков E.JL, Борзенков В.Н. // Пробл. биол. и экол. безопасности. Оболенск, 2000. -С. 168-170

59. Получение вакцинных штаммов сальмонелл с помощью инсерционного мутагенеза. / Воложанцев Н.В., Светоч Э.А., Борзилов А.И., Акимова JLA., Мякинина В.П., Веревкин В.В., Гусев В.В., Малахов Ю.А., Ленев С.В. // Ветеринария. -1997. №7. -С.20-24.

60. Применение живой сальмонеллезной бивалентной вакцины для снижения циркуляции сальмонелл на птицефабрике. / Ефремов В.Е. Кузьмин В.А., Бондаренко В.М., Смирнова Г.В. // Журн. микробиол., эпидемиол. и имму-нобиол. -1996. №5. -С.36-39.

61. Радченко, В.А. Опыт применения поливалентного бактериофага. / Радчен-ко В.А. // Сб. научн. тр.- С-Пет. вет. ин-та. -4.1. -1993.- №120. -С.31-33

62. Раутенштейн, Я.И. Бактериофагия. Общие сведения о явлении фаги и его значении в ряде производств. / Я.И. Раутенштейн. М.: Издательство Академии наук СССР, 1955. - 144 с.

63. Ревенко, И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. / И.П. Ревенко- Киев. Урожай, 1978. 87 с.

64. Ромин, А.В. Испытание пуллорного бактериофага в широком производственном опыте. / Ромин А.В. // Сб. науч. трудов ВГНКИ. -Т.5. М., 1955. -С. 120-128

65. Салаутин, B.B. Дифференциальная диагностика сальмонеллеза птиц. / Са-лаутин, В.В. // Ветеринария. -2004. -№2. С. 22-25

66. Самсыгина, Г.А.Бактериофаги и фаготерапия в педиатрической практике. / Самсыгина Г.А., Бонн Е.Г. // Педиатрия. 1984. -№4. с. 67-71

67. Серегин, И.Г. Использование бактериофагов для снижения контаминации тушек птицы сальмонеллами и эшерихиями. / Серегин И.Г., Никитченко

68. B.Е., Кикимото Б.Б. // Вопр. общ. биологии в ветеринарии. -М., -2000.1. C.121-123

69. Сомова, А.Г. О составе популяций холерных вибрионов эль-тор по признаку лизогенности. / Сомова А.Г. // ЖМЭИ -1971. №7. - С. 44-49

70. Стент, Г. Молекулярная биология вирусов бактерий: Пер. с англ. / Г. Стент. -М.: Мир, 1965.-467с.

71. Степанова, JI.K. Антигенная структура сальмонелл и роль поверхностных антигенов в вирулентности и иммуногенности: Автореф. дисс. доктор, мед. наук. / JI.K. Степанова. -М., 1980.- 36 с.

72. Строение вирусов. / Атабеков И.Г., Агол В.И., Крылов В.Н., Тихоненко Т.И. // Молекулярная биология вирусов. 1971. - С. 99-188

73. Сюрин, В.Н. Ветеринарная вирусология. / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. -М.: Колос, 1984. 376с.

74. Терешова, М.Н. Взаимодействие микроорганизмов в системе «паразит-хозяин». / Терешова М.Н. // Сб. от. Вирусы микроорганизмов,- Пущино, 1981.-С. 122-125.

75. Тихоненко, A.C. Ультраструктура вируса бактерий. / A.C. Тихоненко. М. 1968.-89с.

76. Чанишвили, Т.Г. К механизму образования фагоустойчивых форм микроорганизмов. / Чанишвили Т.Г. // Вопросы молекулярной генетики и генетики микроорганизмов. М., 1968. - С. 225-241

77. Чанишвили, Т.Г. Некоторые теоретические и практические аспекты использования бактериофагов в борьбе с кишечными инфекциями. / Чанишвили Т.Г. // Актуальные вопросы стафилококковых и кишечных инфекций. -Алма-Ата, 1980. -С. 220-221

78. Шур, И.В. Заболевания сальмонеллезной этиологии. / И.В. Шур. М.: Медицина, 1970.- 335с.

79. Шустер, Б.Ю. Специфическая профилактика сальмонеллеза сельскохозяйственных животных. / Шустер Б.Ю. // Ветеринария. 1994. -№2. - С. 24-26

80. Энтеробактерии: (Руководство для врачей) / И.В. Голубева, В.А. Килессо, Б.С. Киселева и др.; Под ред. В.И. Покровского. М.: Медицина.-1985.-321с.

81. А study of Salmonella typhimurium infection in market-age turkeys. / Yama-moto R., Adier H.E., Sadler W.W., Stewart G.F. // Am J Vet Res. -1961. №22. -P.382-387.

82. Abedon S. Molecular Biology of Bacteriophage T4. / Abedon S. // American Society for Microbiology.- 1994. -P.397-405.

83. Ackermann H.W. Frequency of morphological phage descriptions. / Ackermann H.W. //Arch. Virol. -2001. №146. -P.843-857.

84. At Least Four Percent of the Salmonella typhimurium Genome Is Required for Fatal Infection of Mice. / Bowe F., Lipps C.J., Tsolis R.M., Groisman E., Heffron F., Kusters J.G. // Infect Immun. -1998. -Vol. 66. -№ 7. P. 3372 - 3377.

85. Bacteriophage taxonomy in 1987. Microbiological Sciences. -1987. -Vol. 4. -№ 7.

86. Baker J.R. The hyaluronan lyase of Streptococcus pyogenes bacteriophage H4489A. / Baker J.R., Dong S., Pritchard D.G. // Biochem. J. -2002. -№365. -P.317-322.

87. Barrow P.A. Inhibition of colonization of the chicken alimentary tract with Salmonella typhimurium gram-negative facultatively anaerobic bacteria. / Barrow P.A., Tucker J.F., Simpson J.M. // Epidem. Inf. -1987. №98.(3) -P. 311-322.

88. Barrow P.A. The use of two live attenuated vaccines to immunize egg-laying hens against Salmonella enteritidis phage type 4. / Barrow P.A., Lovell M.A., Berchieri A. //Avian Pathol. -1991. -№ 20. -P. 681-692.

89. Baylor M.B. Interaction of Baceplute proteins of T-even bacteriophage. / Baylor M.B. //Virology. 1977. -Vol. 83. -№2. - P. 390-395.

90. Bergey's Manual of systematic bacteriology. -Vol. 1. Noel R. Krieg., John G. Holt.-1984.-P. 7-713.

91. Bertani G. Lysogenic versus lytic cycle of phage multiplication. / Bertani G. // Gold. Spr. Hard S'mp, guant, Biol. 1953. - Vol. 18. - P. 65-69.

92. Bjerrum L. Infection models for Salmonella typhimurium DT 110 in day-old and 14-day-old broiler chickens kept in isolators. / Bjerrum L., Engberg R.M., Pedersen K. // Avian Diseases. -2003. -№47. -P. 1474-1480.

93. Brashear D.A. Comparisonof methods for recovering indigenous viruses from raw wasteswater slugle / Brashear D.A., Ward R. // Appl. and Environ. Microbiol.- 1982. Vol. 43. - №6. - P. 1413-1418.

94. Brown D.D. Experimental infection of poultry with Salmonella infantis. / Brown D.D, Ross J.G. Smith A.F.G. // Res Vet Sci. -1976. -№20. -P.237-243.

95. Brussow H. Phages and the Evolution of Bacterial Pathogens: from Genomic Rearrangements to Lysogenic Conversion. / Brussow H, Canchaya C., Hardt W.D. //Microbiol. Mol. Biol.Rev. 2004. -№ 68. -P.560-602.

96. Bukholm G. Effect of human gamma interferon on invasiveness of Salmonella typhimurium in HEp-2 cell cultures. / Bukholm G, Degré M. // J Interferon Res. -1985. -Vol.5. -№1. -P.45-53.

97. Cast R.K. Age-related changes in the persistence and pathogenicity of Salmonella typhimurium in chicks. / Cast R.K, Beard C.W. // Poult Sci. -1989. -№68. -P. 1454-1460.

98. Chambers D.L. Salmonella Serovars in the Herpetofauna of Indiana County, Pennsylvania. / Chambers D.L., Hülse A.C. // Appl Environ Microbiol. -2006. -Vol.72. -№5. P. 3771-3773.

99. Chart H. The availability of iron and the growth of Vibrio vulnificus in sera from patients with haemochromatosis. / Chart H., Griffiths E. // FEMS Microbiol. Lett. -1985. -№26.- P.227-231.

100. Clark J.R. Bacterial viruses as human vaccines? / Clark, J.R., March, J.B. // Expert Rev. Vaccines. -2004. №3. -P.463^176.

101. Clonal groups of Salmonella typhimurium in New York State. / McDonough P.L., Timoney J.F., Jacobson R.H., Khakhria R. J. // Clin Microbiol. -1989. -Vol.27. -№4. -P.622-627.

102. Craven S. E. Altered colonizing ability for the ceca of broiler chicks by lipopo-lysaccharide-deficient mutants of Salmonella typhimurium. / Craven S. E. // Avian Dis. -1994. -№38. -P.401-408.

103. Davis R.W., Simon M., Davidson N. // Methods in Enzym. -N.-Y., 1971.-V. 21.-P. 413-428.

104. Delbrück M. The growth of bacteriophages and lysis of the host. / Delbrück M. // J. Gen. Physiol. -1940. -№ 23. P. 643-647.

105. Dhillon F.S. Stadies of bacteriofages distribution: virulent and temperate bacteriophages content of mammalian feces. / Dhillon F.S., Dhillon E.K // Appl. and Environment. Microbial-1976. -Vol. 32. -№1. P. 68-74.

106. Duckworth D.H. Bacteriophages: potential treatment for bacterial infections. / Duckworth D.H., Gulig P.A. // BioDrugs. -2002. -Vol.16. №1. - P.57-62.

107. Effects of T4 infection on membrane lipid synthesis. «Molecular Biology of Bacteriophage T4». / Harper D., Eryomin V., White T., Kutter E. // American Society for Microbiology. -1994. -P.385-390.

108. Eisenstark A. Bacteriophage techniques. In: Methods in Virology. / Eisenstark A., Maramorosch K., Koprowski H. // Academic Press. -1967. -Vol. 1. -P. 449525.

109. Engelhardt R. New technology from ancient source. / Engelhardt R, Rochet B. // Feed Mix. -2005. -Vol. 13. -№4. P. 28-30.

110. Epidemiology of virulence-associated plasmids and outer membrane protein patterns within seven common Salmonella serotypes. / Helmuth R., Stephan R., Bunge C., Hoog B., Steinbeck A., Bulling E. // Infect Immun. -1985. -Vol.48. -№1. -P.75-182.

111. Ernst R.K. Anaerobiosis, type I fimbriae and growth phase are factors that affect invasion of HEp-2 cells by Salmonella typhimurium. / Ernst R.K., Dom-broski D.M., Merrick J.M.// Infect Immun. -1990. -№.58. P.2014-2016.

112. Escherichia, Shigella, and Salmonella. In Manual of Clinical Microbiology Edited by P.R. Murray and others. / Bopp C.A., Brenner F.W., Fields P.L., Wells

113. J.G., Strockbine N.A. I I American Society for Microbiology. 8th edn. -2003. -P. 654-671.

114. Evaluation of the efficacy of a bacterin against Salmonella enteritidis infection and the effect of stress after vaccination. / Nakamura M., Nagamine N., Taka-hashi T, Suzuki S., Sato S. // Avian Dis. -1994. -Vol.38. P. 717-724.

115. Fraenkel-Conrat H. Descriptive catalogue of viruses. / Fraenkel-Conrat H., Wagner R.R. // Comprehensive Virology, Plenum Press. -New York. -1974. -№ l.-P. 121-156.

116. Further studies of the application of live Salmonella enteritidis aroA vaccines in chickens. / Cooper G.L., Venables L.M., Nicholas R.A. J., Cullen G.A. // Vet. rec. -1993. -Vol. 133. -№ 2. P. 31-36.

117. Goldberg E. Molecular Biology of Bacteriophage T4. / Goldberg E., Grinius L., Letellier L. // American Society of Microbiology. 1994. -P. 347-356.

118. Gooderham K. Biocecurity and vaccination in eradicating Salmonella enteritidis. / Gooderham K. // Selez. veter. 1998. -№ 8/9. - P. 561-571.

119. Griffin H.G. Construction of aro- A mutant of Salmonella serotype gallinarum: Its effectiveness in immunization against experimental fowl typhoid. / Griffin H.G., Barrow P.A. //Vaccine.-1993.-№11. -P. 457-462.

120. Hassan J.O. Effect of vaccination of hens with an avirulent strain of Salmonella typhimurium on immunity of progeny challenged with wild-Type Salmonella strains. / Hassan J.O., Curtiss R. // Infect Immun. -1996. №64(3). -P.938-944.

121. Hoiseth S.K. Genes aroA and serC of Salmonella typhimurium constitute an operon. / Hoiseth S.K., Stacker B.A. // J Bacteriol. -1985. -Vol. 63. -№1. -P. 355-361.

122. Host spectrum of indigenous Salmonella lytic bacteriophages / Silveira R.IL, Fiorentin L., Voss D., Kich J.D., Cerqueira A.M.F. // Risk assessment Risk management. Salmonella and Salmonellosis. -2006. -№ 6. -P. 577-578.

123. Identification of a pathogenicity island required for Salmonella survival in host cells. / Ochman H., Soncini F.C, Solomon F., Groisman E.A. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996. -№93. -P.7800-7804.

124. Kauffmann F. Zur Differential Diagnose der Salmonella-Subgenus I, II, and III. / Kauffmann F. // Acta Pathol. Microbiol. Scand. -1964. -№58. -P. 109-113.

125. Kauffmann F. Das Salmonella Sub-genus IV. / Kauffmann F. // Ann Immunol Hung.-1966. -№9. -P.77-80.

126. Koupal L.R. Assay, characterization, and localization of an enterotoxin produced by Salmonella. / Koupal L.R., Deibel R.H. // Infect Immun. -1975. -Vol.11.-№1. -P. 14—22.

127. Kruger D.H. Bacteriophage survival multiple mechanisms for avoiding the deoxyribonucleic acid restriction systems of theis hosts. / Kruger D.H., Bickle T.A. // Microbiol. Rev.- 1983. -Vol. 47. №3. - P. 345-360.

128. Kutter E. Molecular Biology of Bacteriophage T4. / Kutter E., Guttman B., Carlson K. J.D. // American Society for Microbiology. -1994. №96. -P.343-346.

129. Lee C.A. Pathogenicity islands and the evolution of bacterial pathogens. / Lee C.A. //Infect AgentsDis. -1996. -Vol.5. -№1. -P.l-7.

130. Leung K.Y. Intracellular replication is essential for the virulence of Salmonella typhimurium. / Leung K.Y., Finlay B.B. // Proc Natl Acad Sci USA. -1991. -Vol. 88. -№24. P. 11470-11474.

131. Levin B.R. Population and evolutionary dynamics of phage therapy. / Levin B.R., Bull, J.J. //Nat. Rev. Microbiol. -2004. -№2. P. 166-173.

132. Lillehoj H. Host immunity and vaccine development to coccidia and Salmonella infections in chickens. / Lillehoj H., Okamura M. J. // Poultry Sc. -2003. -Vol. 40.-№3. -P. 151-193.

133. Long-circulating bacteriophage as antibacterial agents. / Merril C.R., Biswas B., Carlton R., Jensen N.C., Creed G.J., Zullo S., Adhya S. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996. -№93(8). -P.3188-3192.

134. Mesyanzhinov V.V. Bacteriophage T4: Structure, assembly, and initiation of infection studied in three dimensions. / Mesyanzhinov V.V. // Adv. Virus Res. -2004. -№63. -P.287-352.

135. Nakagawa H., Isolation and characterization of the bacteriophage T4 tail-associated lysozyme. / Nakagawa H., Arisaka F., Ishii S. J. // Virology. -1985. -№54. -P.460-466.

136. Naughton P. Phage typing of Salmonella strains associated with farm animals and humans in Northern Ireland. / Naughton P, Egan D, Dooley J.S. // Epidemiology and Public Health. Salmonella and Salmonellosis. -2006. -№ 5. P.495-496.

137. Novel approach to control Salmonella spp. on poultry products and fresh produce. / Kostrzynska M., Galic J., Consuelo Campos M., Griffiths M., Kalab M. // Risk assessment Risk management. Salmonella and Salmonellosis. -2006.-№6. -P.543-546.

138. Observation on the pathogenesis of experimental Salmonella typhimurium infection in chickens. / Barrow P.A., Huggins M.B., Lovell M.A., Simpson J.M. // Research in Veterinary Science. -1987. №42.(2) -P. 194-199.

139. Pathogenesis of experimental salmonellosis: inhibition of protein synthesis by cytotoxin. / Koo F.C., Peterson J.W., Houston C.W., Molina N.C. // Infect 1m-mun. -1984. -Vol.43. -№1. -P.93-100.

140. Payne, R.J. Pharmacokinetic principles of bacteriophage therapy. /Payne R.J., Jansen V.A. // Clin. Phannacokinet. -2003. -№42. -P.315-325.

141. Prevention of Escherichia coli infectio in broiler chickens with a bacteriophage aerosol spray. / Huff W.E., Huff G.R., Rath N.C., Balog J.M., Donoghue A.M. // Poultry Sc. 2002. -Vol. 81.- №10. -P. 1486-1491.

142. Prevention of Escherichia coli respiratory infection in broiler chickens with bacteriophage (SPR02) / Huff W.E., Huff G.R., Rath N.C., Balog J.M., Xie H., Moore P.A. jr. Donoghue A.M. // Poultry Sc. -2002. -Vol. 81. -№4. -P. 437-441.

143. Projan S. Phage-inspired antibiotics? / Projan S. // Nat. Biotechnol. -2004. -№22(2). -P. 167-168.

144. Raettig H., Bakteriophagie. 1917—1956 / Raettig H. Stuttg., 1958. P.

145. Raettig H., Bakteriophagie. 1957—1965 / Raettig H., -Stuttg., 1967. P.

146. Richard K. Gast. Evaluation of the efficacy of an oil-emulsion bacterin for protecting chickens against Salmonella enteritidis. / Richard K. Gast, Henry D. Stone, Peter S. Holt. // Beard. Avian diseases. -1992. -№36. -P. 992-999.

147. Salmonella DNA Adenine Methylase Mutants Elicit Protective Immune Responses to Homologous and Heterologous Serovars in Chickens . / Dueger E.L., House J. K., Heithoff D. M., Mahan M. J. // Infect Immun. -2001. -№69(12). -P.7950-7954.

148. Salmophage: a new preparation for treatment and immune prevention of salmonellosis in fowl. // Panin A.N., Lenyov S.V., Malakhov Y.A., Svetoch E.A. //Bull. Acad. Vet. France. -2005. -Vol. 158. -№4. -P. 385-391.

149. Simon L.D. Molecular Biology of Bacteriophage T4. / Simon L.D. // American Society for Microbiology. -1994. -P.382-384.

150. Skurnik M. Phage therapy. Facts and Fiction. / Skurnik M., Strauch E. // Int. J. Med. Microbiol. -2006. -№296. -P.5-14.

151. Smith H.W. Effectiveness of phages in treating experimental E. coli infention in mice using phage: its general superiority over antibiotics. / Smith H.W., Hug-gins M.B. // J. Gen. Microbiol.- 1982. -Vol. 128. -№2. P. 307-318.

152. Smith S.M. Colicinogeny and recombination. / Smith S.M., Stocker B.A.D. // Brit. Med. Bull. -1962. -№18. -P. 46-51.

153. Snoeyenbos G.H. Salmonella infections of the ovary and peritoneum of chickens. / Snoeyenbos G.H., Smyser C.F., H. van Roekel. // Avian Dis. -1969. -№13. -P 668-670.

154. Spaerel N. A novel bacteriophages defence mechanism the antirestriction protein. / Spaerel N., Herrich P., Bicle T.A. // Nature.- 1979. Vol. 278. -№5699. -P. 30-34.

155. Stocker A.D. Abortive transduction of motility in Salmonella; a non-replicated gene transmitted through many generations to a single descendant. / Stocker A.D. // J. Gen. Microbiol. -1956. -№15. -P. 575-598.

156. Structure of the cell-puncturing device of bacteriophage T4. / Kanamaru S., Leiman P.G., Kostyuchenko V.A., Chipman P.R., Mesyanzhinov V.V., Arisaka F., Rossmann M.G.'// Nature. -2002. №415. -P.553-557.

157. Taira S. Identification and genetic analysis of mkaA~a gene of the Salmonella typhimurium virulence plasmid necessary for intracellular growth. / Taira S., Rhen M. // Microb Pathog. -1989. -Vol.7. №3. -P. 165-173.

158. The Dual role of wild phages for horizontal gene transfer among Salmonella strans. / Rabsch W., Mirold S., Wolf-Dietrich Hardt., Tschape H. // Berl. Munch. Tierarztl. Wschr. -2002. -№115. -P. 355-359.

159. Thiagarajan D. Mechanism of transovarian transmission of Salmonella enteri-tidis in Laying Hens. / Thiagarajan D., Saeed A.M., Asem E.K. // Poultry science. -1994. -P. 89-98.

160. Thiel K. Old dogma, new tricks—21st century phage therapy. / Thiel K. // Nat. Biotechnol. -2004. -№22. -P.31-36.

161. Three-dimensional rearrangement of proteins in the tail of bacteriophage T4 on infection of its host. / Leiman P.G., Chipman P.R., Kostyuchenko V.A., Mesyanzhinov V.V., Rossmann M.G. // Cell. -2004. -№118. P.419-429.

162. Timms L.M. Cell mediated and humoral immune response in chickens infected with avian infectious bronchitis. / Timms L.M., Bracewell C.D. Alexander D J. // British Veterinary Journal. -1980. №136. -P. 349-356.

163. Timms L.M. Cell mediated and humoral immune response of chickens to inactivated oil emulsion Infectious Bronchitis vaccine. / Timms L.M., Bracewell C.D. // Research in Veterinary Science. -1983. №34. -P. 224-230.

164. Timms L.M. Laboratory assessment of protection given by an experimental Salmonella enteritidis PT4 inactivated, adjuvant vaccine. / Timms L.M., Marshall R.N, Breslin M.F. // Vet. Rec. -1990. -№ 127. -P. 611-614.

165. Type 1 pili enhance the invasion of Salmonella braenderup and Salmonella typhimurium to HeLa cells. / Horiuchi S., Inagaki Y., Okamura N., Nakaya R., Yamamoto N. // Microbiol Immunol. -1992. -Vol 36. -№6. -P.593-602.

166. Use of membrane proteins from Salmonella gallinarum for prevention of fowl typhoid infection in chickens. / Bouzoubaa K, Nagaraja K.V., Newman J.A., Pomeroy B.S. // Avian Diseases. -1987, -№31. -P.699-704.

167. Vaccination of chickens with chicken-derived Salmonella enteritidis phage type 4 aroA live oral salmonella vaccines. / Cooper G.L., Venables L.M., Nicholas R.A.J., Cullen G.A. //Vaccine. -1992. -№10. -P.247-254.

168. Vaccination of chickens with strain CVL30, a genetically defined Salmonella enteritidis aroA live oral vaccine candidate. / Cooper G. L., Venables L. M., Woodward M. J., Hormaeche C. E. // Infect Immun. 1994. -№62. -P.4747-4754

169. Wang L. Molecular analysis of a Salmonella enterica group El rfb gene cluster: O antigen and the genetic basis of the major polymorphism. / Wang L., Romana L.K., Reeves P.R. // Genetics. -1992. -№130. -P.429-443.

170. Williams Smith H. Successful treatment of experimental Escherichia coli infections in mice using phage: its general superiority over antibiotics. / Williams Smith H., Hugging M.B. // Journal of General microbiology. -1982. -№128. -P.307-318.

171. Williamson C.M. Identification of an essential virulence region on Salmonella plasmids. / Williamson C.M., Pullinger G.D., Lax A.J. // Microb Pathog. -1988. -Vol.5. -№6. -P.469-473.

172. Winstanley M. Give salmonella the elbow. / Winstanley M. // New Scientist. -1987. -T 115. -№1578. P. 52-55.

173. World Health Organization (WHO) Control of Salmonallosis: Part Played by Veterinary Science and Nutrition Hygiene 1991., Geneva, Switzerland

Оглавление диссертации Дрогалина, Наталья Александровна :: 2008 :: Москва

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Дрогалина, Наталья Александровна, автореферат

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2008 года, Дрогалина, Наталья Александровна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций