Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Санитарно-токсикологическая характеристика циперметрина

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬШХОЗЯЙСТВЫШИХ НАУК

г С П 1?сегоссиПский НАУНО-ИССЛВДОВАТЕЛЬСКИЙ ЖСТИТУТ ВСТРРШАПЮЯ Г b Vй САНИТАРИИ, ГИГИЕНЫ И ЭКОЛОГИИ

. 2 № ^95

На прявях рукописи

РУСТАМОВ ШИС МАМЕДАЛИ ОГЛЫ

УДК 619:614.9-07.615.9:637.547.1

САНИТАИШ-ТОКСИШЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЦИПЕРМЕТРША

16.00.06 - Ветершарная санитария, ветертарно-санитарнач экспертиза и гигиена переработки продуктов животноводства

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соисканиэ ученой степени кандидата ветержарных наук

Москва - 1994

Работа ьшюлнска ьо Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии, гигиены и экологии и Нахичеьанскои государственном университете им. Ю.Г.Мамедалиеы

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор

Т.Г.Аббасов.

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук, профессор Г.Н.Коржевенко (ВНИИВСГЭ), Канд- ;ат биологических наук, с.н.с. Г.В.Кироткин (ЕГНКИ). Ведущее научное учреждение: Московская Государственная

Академия прикладной биотехнологии.

Защита диссертации состоится " яч 1995 г. в

1Ь часов на заседании специализированного совета Д.020.50.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (122022, г.Уосква, Звенигородское шоссе, 5, ШЙИВСГЭ).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВНИИВСГЭ.

Автореферат разослан "/?" ^е/^^/ря 1994 г.

Ученый секретарь специализированного соБета, кандидат биологических наук

Л.П.Шшенова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Среди современных пестицидов, применяемых в сельскохозяйственном производстве в настоящее время, наиболее важное место занимают синтетические пиретроиды, которые весьма эффективны для уничтожения различных вредителей растений и сельскохозяйственных животных. (Г.М.Зубова, 1981; А.А.Непоклонов, 1987; В.П.Дремова, Г.М.Зубова, 1979; С.Д.Павлов, 1984; Р.В.Чири-кашвили, 1989; А.С.Селиванова, 1989; Г.А.Веселкин, Г.К.Сергеева, 1988; Г.Т.Бршинина, 1988; А. А. Не поклонов, Г.Т.Брюшинина, Е.И.Ивашкова, Д.Н.Набиулина, 1983; Б.А.Фролов, Р.А.Ли, 1986; S.R.Skoda et al., 1987; R.N.Tltchener, 1987; V.Ramzan, B.S.Chahal, 1987; A.J.Adams, A.Palmer, 1988; R.B.Chalfant, J.R.Voun?, 1988 и т.д.).

Применение пестицидов, в том числе пиретроидов, естественно, создает объективные предпосылки для загрязнения объектов окружаю щей среды и продуктов питания человека. Поэтому, увеличения контакта, в большинстве случаев токсичными препаратами, создает потенциальную возможность возникновения острых и хронических отравлении среди сельскохозяйственных животных и людей.

В связи с использованием из синтетических пиретроидов - ци перметрина в ветеринарной практике, необходимо тщательное и всестороннее изучение токсических свойств для теплокровных животных, а также установление возможности влияния эмбриотоксического, тератогенного и гонадотокеического действия, на организм белых крыс и кур-несушек. Кроме того, определить распределение и накопление остатков циперметрина в органах и тканях, а также вопросы ветери-нарно-санитарной экспертизы продуктов убоя птиц обработанных или отравленных циперметрином. Имеющиеся по этим вопросам данные в зарубежной и отечественной литературе недостаточны или явно отсутствуют. Решению этих вопросов посвящена работа, в чем и состоит ее актуальность.

Пель и задачи исследований. Цель работы заключалась в установлении параметров токсичности циперметрина для теплокровных животных и сроков выведения его из организма в острых и хронических опытах; изучении влияния циперметрина на эмбриогенез белых крыс при однократном и многократном введении внутрь; проведении вете-

- 3 -

ринарно-санитарной- оценки продуктов убоя птиц при отравлении ци-перметринем и установлении МДУ в кормах для кур-несушек. *

Для решения этих проблем были поставлены следующие задачи:

1. Изучить острую токсичность циперметрина на белых мышах, крысах, кроликах и курах-несушках.

2. Изучить эмбриотоксическое, тератогенное и гонадотоксичес-кое действие циперметрина на белых крысах.

3. Изучить влияние циперметрина на выводимость и жизнеспособность потомства при скармливании с кормом курам-несушкам.

4. Провести органолептическое, бактериологическое и физико-химическое исследование продуктов убоя кур при отравлении ципер-метрином.

5. Изучить хроническую токсичность циперметрина на птицах и обосновать МДУ его в кормах для кур-несушек.

Научная новизна работы. Установлены параметры токсичности циперметрина для теплокровных животных (белые мыши, белые крысы, кролики и куры-несушки), с изучением клинического, морфологического и биохимического проявления в токсических и переносимых дозах. Изучено влияние циперметрина на воспроизводительную функцию животных. Изучено влияние циперметрина на выводимость и жизнеспособность потомства кур-несушек. Впервые с использованием комплекса органолептического, физико-химического, бактериологического, патанатомического и химико-токсикологического, методов исследований дана ветеринарно-санитарная характеристика мяса птиц в разные сроки убоя, после отравления циперметрином. Впервые установлены МДУ циперметрина в кормах для кур-несушек.

Практическая ценность работы. При отравлении птиц циперметрином в переносимой дозе, убой их проводить не ранее 20 суток с момента обнаружения симптомов интоксикации. Предлагается ветери-нарно-санитарную оценку тушек вынужденно убитых птиц, перенесших острое или хроническое отравление циперметрином, проводить на основании комплекса показателей — органолептического, физико-химического, бактериологического, патанатомического и химико-токсикологического исследований.

При наличии в мышечной тканц. и внутренних органах' остатков циперметрина, тушки вместе с органами подлежат технической утилизации.

Тушки птиц, если в них не обнаружены остатки циперметрина, используются без ограничения.

Разработаны научно-обоснованные величины максимально допустимых уровней циперметрина в кормах для кур-несушек, которые учитываются при внесении заключения о дальнейшем использовании кормов в случае загрязнения их препаратом.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены:

- на заседании ученого совета ВНИИВСГЭ, (Москьэ, 1991-1994 ГГ.) ;

- на научно-технической конференции (Москва, апрель Д993г. ),

- на научно-производственной конференции (Чебоксары, сен тябрь, 1994 г.);

- на межлабораторном совещании (Москва, ноябрь, 1994 г.).

Публикация. По теме диссертации опубликовано шесть работ.

Объем работы. Диссертация изложена на 153 страницах машино

писного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследовании, обсуждения результатов исследований, выводов, предложений для практики и списка использованной литературы. Материалы диссертации . включают таблиц, список использованиеи литературы содержит ¿5" наименования отечественных и 1-2 зарубежных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследовании. Для изучения острой токсич ности циперметрина на лабораторных животных использовались клини чески здоровые, нормально развитые белые мыши, белые крысы, кро лики и куры массой 18-25, 190-250, 2000-2500 и 1600-2000 г соот ветственно по общепринятой методике (Методические рекомендации неустановленно допустимых остаточных количеств пестицидов в кормах для сельскохозяйственных животных, 1983)1

Величину ЛДбо исчисляли методом пробит-анализа по В.Б.Проао ровскому (1962).

При биохимических исследованиях определяли:

- содержание общего белка в сыворотке крови подопытных ли вотных рефрактометрическим методом;

- количественное определение активности каталазы по методу А.Н.Баха и С.Г.Зубковой,(Т.Т.Березов-, -1976);

- количественное определение сахара в крови по Хагедо^ ну-Йенсену;

- концентрацию глюкозы в реакции с орто-толуидиновым к-акти

- 5 -

вом (В.Т.Самохин it др., 1981);

- количество пировиноградной кислоты в крови - в реакции с салициловым альдегидом (Е.В.Шамрай, 1967);

- количество молочной кислоты в крови - по методу Баркера и Саммерсона (А.А.Покровский, 1969, с.260-261).

Кроме того определяли активность ферментов в сыворотке крови:

- общей ЛДГ и щелочной фосфатазы - оптимализованным методом по проспекту фирмы "Лахема" (ЧССР);

- фруктозо-1,6-дифосфат-альдолазы (ФДА) по методу Кулганека и Клашка (А.А.Покровский, 1969, с.146-147).

В печени определяли концентрацию гликогена - в реакции с антроновым реактивом.(В.С.Асатиани, 1953).

В мозге, сердце и других органах определяли активность общей ЛДГ, щелочной фосфатазни ФДА. Для этого пробы органов и тканей вначале подвергались деструкции в ступке со стеклянным песком. Экстракцию ферментов проводили водой (разв. 1:50) на протяжении 24 часов. В дальнейшем водный экстракт использовали для биохимических исследований.

Результаты клинико-биохимических исследований проводили в соответствии с Международной системой единиц, рекомендованной для использования в клинической лабораторной практике (В.В.иеньвиков, Л.Н.Делекторская, 1977).

Для изучения эмбриотокеического действия циперметрина при введении внутрь белым крысам, опыты проводили по методика В.А.Гофмеклера.

Оплодотворение, день которого считается первш днем беремен-. ности проверяли по влагалищным мазкам по методике П.П.Сахарова. С первого дня и в течение всей беременности в 1-й, 2-й и 3-й группах животных, вводили в желудок раствор водной эмульсии ципериетрина соответственно в дозах 34, 17 и 8 мг/кг массы тела, в 4-й контрольной группе крысам вводили водный раствор без препарата. В каждой груше использовали по 15 самок и 5 самцов.

Для выявления повреждающего действия ва плод, убивали половину самок на 20-й день беременности. При вскрытии производили тщательный осмотр матки, плацентн и плодов, выявляли отклонения от нормального развития, подсчитывали количество желтых тел беременности, мест имплантации, количество живых и мертвых эмбрионов и оценивали равномерность расположения плодов в рогах матки.

Желтые тела подсчитывали под бинокулярной лупой, фи анализе

эмбрионального материала также учитывали массу и длину эмбрионов и внутренних органов.

Раннюю и позднюю резорбцию, а также общую эмбриональную смертность рассчитывали по формулам, предложенным А.М.Малышенко, И.К.Егоровым (1967).

После убоя беременных крыс (18 дней) определяли остатки циперметрина в органах, тканях и плоде методом ГЖХ. В виду того, что отклонения в развитии могут проявиться в более поздний период, честь беременных самок оставляли до наступления естественных родов с последующим наблюдением за развитием потомства в постна-тальном периоде, вплоть до наступления физиологической зрелости.

Через 30 дней после родов, потомство крыс разделяли на мужские и ленские особи (по 15) и наблюдали до наступления половой зрелости. После чего из спаривали.

Для получения тератогенного эффекта циперметрина на организм беременных крью, препарат вводили однократно внутрь на 3-й, 9-й и 13-й день беременности в дозе на уровне максимально переносимых доз для крыс (200 мг/кг). Контрольным беременным крысам вводили воду. На каждую'группу использовали по 15 крыс.

Методика исследовании такая же, как при изучении эмбриоток-сического действия циперметрина на'белых крысах.

Для изучения гонадотоксического эффекта циперметрина использовали неполовозрелых крысят (самки), которым в течение 2-х меся-'цев перорально'ежедневно вводили эмульсии пестицида в дозах 8 и 34 мг/кг массы' тела. На каждую группу взяли по 15 неполовозрелых крысят. После наступления половой зрелости подопытных крыс,скрещивали с интактными половозрелыми самцами.

После скрещивания учитывали время наступления беременности, особенности полового поведения крыс, а также эмбриональное и постэмбриональное развитие.

Для оценки оплодотворяющей способности, самцам белых крыс, в течение 2-х месяцев ежедневно перорально вводили эмульсии циперметрина в дозах 34 и 8 мг/кг массы тела. В конце опыта их скрещивали с интактными половозрелыми самками. Количество забеременевших самок являлось основным показателем оплодотворяющей способности самцов. На каждую дозу циперметрина использовали по 15 самцоз.

Сценку гонадотропного действия циперметрина у самцов крыс проводили с помощью морфологических и функциа^льшх методов исс-

- 7 -

.ярдований (О.Н.Елизарова и др., 1968).

Влияние цилерметрина на выводимость и жизнеспособность потомства изучали на куриных эмбрионах при многократном (90 дней) поступлении препарата с кормом в организм кур-несушек в дозе 200, 100 и 5 мг/кг. На каждую дозу использовали 25 кур и 3 петуха;

В качестве показателей токсического действия цилерметрина на организм кур-несушек использовали такие тесты, как клиническое состояние, яйценоскость, оплодотворяемость, выводимость цыплят и весовые коэффициенты органов. Кроме того, проводили макроанатоми-ческие исследования эмбрионов по методу Вильсона (1965) и изменения костных систем по методу Даусона (1964).

С целью изучения клинических признаков острого отравления и патологоанатомических изменений, 30 кур-несушкам орально-вводили циперметрин в виде водной эмульсии в переносимой дозе (1000 мг/кг). От этих кур, убитых в различные сроки после интоксикации (1,3,5, 7, 10, 14, 20 и т.д. сутки), тушки подвергали ор-ганолептической оценке; а затем от тушек отобрали пробы мышечной ткани, жира и внутренних органов для проведения физико-химических, бактериологических, химико-токсикологических и патологоанатомических исследовании.

Аналогичными комплексными методами исследовали материалы от кур при их хронической интоксикации, которую вызывали ежедневным введением в дозе 1/20 ЛД50 (97,5 мг/кг) в течение 30 суток.

Послеубойный ветеринарно-санитарный осмотр туш и внутренних органов проводили по методике, изложенной в "Методических рекомендациях по ветеринарно-санитарной экспертизе туш и органов жи-. вотных при отравлении", одобренных Главным управлением ветеринарии МСХ СССР (1979 г.).

Патологоанатомическое исследование материала проводили по общепринятой методике.

Орган скептическому исследованию тушки опытных и контрольных кур подвергали после их охлаждения и созревания мяса при температуре +2 - +4°С в течение не менее 24 часов. Отбор.проб и органо-лептическое исследование тушек ■ проводили в соответствии по ГОСТ 77020-74 "Мясо птицы. Методу отбора образцов. Органалепти-ческие методы оценки качества".

Бактериологическое исследование продуктов убоя контрольных и олутных кур проводили по ГОСТ 7702.2-74 "Мясо птицы. Методы бак-;ерно.&огического анализа"-

Физико-химическое исследование мяса кур проводили методом, регламентированным по ГОСТ 7702.1-74 "Мясо птицы. Методы химического и микроскопического анализа свежести мяса". Кроме того, определяли коэффициент кислотность-окисляемость, рН мяса и количественное содержание амино-аммиачного азота. Одновременно с мясом исследовали как наружный, так и внутренний жир. Определяли б нем коэффициент рефракции (на приборе РЛУ-1), кислотное и перекисное число жира, а также температуру плавления.

Определение степени биологической безвредности мяса кур, отравленных циперметрином проводили путем длительного скармливания (в течение 21 дня) белым крысам куриного мясного фарша, содержащего остатки циперметрина. В ходе опытов учитывали у крыс динамику их живой массы, некоторые гематологические показатели и пато-морфологические изменения в органах и тканях. Проводили морфологические и биохимические исследования крови крыс.

Для установления УДУ циперметрина в кормах для птиц в опытах использовали 60 кур-несушек, породы леггорн, распределенных в три равные группы по 20 птиц в каждой (две подопытные и одна контрольная). Подопытным курам циперметрин давали ежедневно в течение 90 дней с комбикормом в дозе 5 и 50 мг/кг.

В ходе опытов проводили морфологические, биохимические исследования крови и органов кур-несушек.

Определения содержания остаточных количеств циперметрина в органах и тканях павших и убитых по ходу опыта животных, а также динамики накопления, распределения и выделения из организма кур-несушек проводили с помощью газожидкостной хроматографии.

Данные гематологических и биохимических исследований были статистически обработаны с вычеслением вредней арифметической величины, средней арифметической ошибки, показателя существенности и уровня вероятности (М, +ш, Ь, Р) по известным формулам (П.Ф.Рокадой, 1973).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Токсичность циперметрина для лабораторных животных. В результате проведенных исследований установили, что циперметрин для белых мышей является высокотоксичным; для белых крыс и кроликов -среднетоксичным, а для кур-несушек - малотоксичным веществом. ЛДбо для белых мышей, белых крыс, кроликов и кур-несушек состав-

ляет соответственно 190,5+10; 332,5+20; 990+40 и 1950+30 иг/кг. Наши данные совпадают с литературными данными (Л.М.Сасинович, Т.Н.Паньшина, 1984; Д.В.Амирханов, Б.А.Шарипо, 1984; Л.А.Тимофе-евская и др., 1984 и др.).

На основании клинических наблюдений установили, что после введения животным циперметрина внутрь, наиболее характерные изменения проявляются со стороны нарушения дыхательного процесса. Дыхание у животных становится поверхностным и учащенным при этом. В дальнейшем у них развивается одышка, угнетение, малоподвижность, снижение реакции на внешние раздражения и гибель в стадии судорог.

В результате проведенных опытов установили, что клиническая картина интоксикации белых мышей, белых крыс, кроликов и кур при отравлении циперметрином, происходит однотипно и характеризуется выраженной легочной недостаточностью.

На основании проведенных гематологических и биохимических исследований установили, что поступая в организм кроликов через желудочно-кишечный тракт, циперметрин оказывает разностороннее токсическое действие на многие жигненноважные органы и ткани. Наиболее резкие изменения исследуемых показателей мы наблюдали при однократном поступлении внутрь больших доз циперметрина. В частности, у всех подопытных кроликов, получавших циперметрин в дозе 1800 мг/кг массы тела, регистрировали увеличение количества эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, общего сахара, аминотрансфераз и уменьшение содержания общего белка и холинэстеразы. Полное восстановление активности ферментов совпадает с клиническим выздоровлением животных, т.е. восстановление происходит через 10-20 дней.

Одним из факторов, компенсирующих кислородную недостаточность организма возможно, является увеличение общего гемоглобина (на 52,7 X), установленное нами в период острой интоксикации циперметрином.

Рассматривая снижение общего белка в сыворотке крови подопытных животных, установили его незначительное уменьшение, степень которого зависела от дозы циперметрина. Так, у животного от дозы 500 мг/кг содержание общего" белка через 12 и 24 часов уменьшилось на 11,0 и 12,3 %, тогда как от дозы 1800 мг/кг - на 19 и 33 X соответственно. В дальнейшем через 20 дней находилось в пределах физиологической нормы.

■ На основании проведенных исследований установили, что при поступлении в организм теплокровных животных через желудочно-кишечный тракт, циперметрин оказывает значительное гепатотоксическое действие. Так, у всех кроликов установили увеличение активности аминотрансфераз, которая как указывает Е.И.Буркацкая (1970), является результатом разрушения гепатоцитов.

При остром отравлении кроликов циперметрином значительно повышается активность аминотрансфераз (АсАТ и АлАТ) в сыворотке крови. Так, через 6 часов после введения циперметрина, активность АсАТ и АлАТ достоверно повышается на 33 и 66,б X, через 12 часов на 80 и 150 7., через 1 сутки - на 93,3 и 133,3 7., через 5 суток -на 60 и 133,3 7. и через 10 суток - на £6,7 и 83,3 7. соответственно, по сравнению с исходными данными. С клиническим выздоровлением животных нарушения активности ферментов постепенно восстанавливались, и через 20 суток после отравления активность указанных ферментов существенно не отличалась от исходного уровня.

Резкое повышение активности вышеуказанных ферментов в сыворотке"'1 'кроликов- при остром отравлении циперметрином указывают на серьезные нарушения функции печени (А.Фишер, 1961; А.Ф.Блюгер, 1964; Т.С.Пасхина, 1965; Ж.Шеклик, 1966; Д.Мецлер, 1980 и др).

Указанные изменения активности аминотрансфераз свидетельст-

Сеял® ч***»*-

вуют- о поражений^йышц и печеночных клеток. Поэтому, полученные экспериментальные данные позволяют утверждать, что в результате поступления больших доз циперметрина (1800 мг/кг) развивается инфаркт миокарда и токсический гепатит, а от небольших доз (500 мг/кг) - в основном поражение печеночных клеток (острый гепатит).

Биохимическими исследованиями установлено увеличение количества пировиноградной кислоты подопытных кур через 4 часа после введения препарата до 0,48+0,02 ммоль/л (1000 мг/кг) и 0,54+0,02 ммоль/л (2000мг/кг) против 0,40+0,01 ммоль/л в контроле. Тенденция к увеличению количества пировиноградной кислоты в крови обеих групп сохранилась и в дальнейшем, хотя и не была выражена достаточно четко. Кроме того, в отдельные периоды наблюдении (через 4 часа и трое суток) отмечалось снижение активности общего ЭДГ в крови подопытных групп птиц. Активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови второй подопытной группы (2000 мг/кг) имела выраженную' тенденцию к понижению в первые сутки с момента введения препарата. В то же время в показателях глюкозы, Молочной кислоты, активности фруктозо-1,6-дифосфатальдолазы, существенной

- и -

разницы между подопытными группами и контрольной не установлено.

Количество гликогена в печени подопытных кур значительно уменьшилось уже через 4 часа после введения циперметрина - до 93,39+8,99 ммоль/л (1000 мг/кг) И 93,30+14,40 ммоль/л (2000 мг/кг) при Р<0,05 против, 165,38+19,60 ммоль/л в контроле. Однако, уже через сутки количество гликогена в печени кур, которые получали циперметрин в дозе 1000 мг/кг, не отличалось от уровня гликогена в печени кур контрольной группы. Количество гликогена в печени кур 2 группы (2000 мг/кг) в то же время оставалось на том же низком уровне.

Активность общей ЛДГ в органах и тканях во все сроки исследований находилась практически на одном уровне и у подопытных и у контрольной группы птицы. Лишь в сердце на 7 сутки после введения циперметрина в дозе 2000 мг/кг массы тела отмечалось некоторое снижение активности общей ЛДГ. В то же время активность щелочной фосфатазы имела тенденцию к понижению почти во всех тканях в первые сутки после введения препарата, хотя и не везде это можно было подтвердить с помощью статистически достоверных величин. Лишь в сердечной мышце, через 7 суток после введения препарата, она превышала исходную величину. Активность ФДА, наоборот, имела тенденцию к увеличению в печени и почках в течение 1-х суток в обеих подопытных группах.

При исследовании органов и тканей кур,циперметрин обнаруживали в крови через 12 часов в количестве 1,4 мг/кг, затем количество циперметрина через сутки после введения нарастало до 4,4 мг/кг. Однако, уже через 3 суток препарат обнаруживали в крови лишь 0,1 мг/кг и через 5 суток циперметрин в крови отсутствовал. Наибольшее количество циперметрина почти во всех тканях обнаруживалось нами через сутки после введения препарата. В последующие сроки количество его в тканях постепенно уменьшалось. При этом отмечалась выраженная тенденция увеличения количества препарата в жировой ткани. В жире кур, например, через 12 часов было обнаружено 2,2 мг/кг циперметрина, а через 1 сутки - 3,2 мг/кг. Затем количество его постепенно уменьшалось, но даже через 10 суток составило 0,1 мг/кг и только через 15 суток препарат в жире отсутствовал. Значительные количества' циперметрина были обнаружены в тканях сердца, печени и мышц. Так, через 1 сутки количество циперметрина в сердце составило 2,5 мг/кг, печени - 2,1 мг/кг, мышцах - 1,1 мг/кг, а через 5 суток снизилось их количество до"

0,4; 0,1 и 0,3 мг/кг соответственно. Только через 10 суток остаточные количества циперметрина в сердце, печени и мышцах отсутствовало. Наименьшее количество циперметрина, обнаружили в почках н легких. Через сутки количество препарата в почках составило 0,4 мг/кг и в легких 1,2 мг/кг и через 5 и 7 суток остатки препарата отсутствовали. 1

Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что при острой интоксикации циперметрином в первую очередь нарушается многообразная функция печени, выполняющая барьерную, обезвреживающую, синтезирующую роль. Вследствии чего пестицид поступает в кровь и оказывает разнообразное токсическое влияние на многие жизненноважные органы и ткани, вызывая гибель животных.

Эмбриотоксическое и тератогенное действие циперметрина на организм белых крыс при однократном введении его внутрь в

различные сроки беременности. Результаты опытов показали, что циперметрин, введенный белым крысам однократно в дове 200 мг/кг массы тела на 3-й, 9-й и 13-й дни беременности-резорбирует эмбрионы в предимплантационный период на 30, 38,5 и 18,6 X. Постимплантационный период не влияет на смертность эмбрионов.

Таким образом, наши исследования показали, что при введении крысам на 3-й, 9-й и 13-й день беременности циперметрина в дозе 200 мг/кг массы тела, препарат обладает эмбриотоксическим действием. Следовательно, препарат вызывает эмбриотоксичность в организме беременных крыс в основном в предимплантационный, т.е. в период дробления яйца, до бластоцистый периоды имплантации (пла-центации и органогенеза). Эти периоды являются самыми критическими периодами беременности, в течении которого развивающийся организм восприимчив к воздействию неблагоприятных факторов (П.Г.Светлов, 1969).

Результаты исследований показали, что при введении внутрь беременным крысам циперметрина в дозе 200 мг/кг массы тела в различные сроки беременности,''""не вызывает аномалий в развитии внут ренних органов и косной системы эмбрионов.

Установили, что введение циперметрина внутрь крысам в различные сроки беременности в дозе 200 мг/кг массы тела увеличивается количество эритроцитов в крови от 7,6 до 15,2 X, лейкоцитов от 12,7 до 18,4 X, содержание гемоглобина от 7,7 до 14,2 X, общего сахара от 9 до 31,1 X и общего белка от 5,2 до 8,2 X по срав-

нению с контролем.

При оценке действия химических агентов Ксмаловажное значение могут иметь данные, характеризующие проницаемость плацентарного барьера, через который в соответствующих концентрациях может пройти любое вещество.

Установлено, что при введении циперметрина в организм беременных крыр в дозе 200 мг/кг массы тела в различные сроки беременности, препарат проникает в плаценту и ткани плода. Проницаемость циперметрина изменяется з зависимости от срока беременности крыс (от 10 до 14,4 7.).

Эмбриотоксическое и тератогенное действие циперметрина на организм беременных крыс при многократном введении его внутрь.

Для изучения эмбриотоксического и тератогенного действия циперметрина с первого и до пхледнего дня беременности крысам первой группы вводили циперметрин внутрь в дозе 34 мг/кг, второй группе - 17 мг/кг, третьей группе - 8 мг/кг, четвертой группе вводили воду без препарата - контрольная.

Результаты опытов показали, что при введении циперметрина внутрь беременным крысам в дозах 34 мг/кг массы тела с первого дня и на протяжении всей беременности, препарат у 1 поколения вызывает эмбриотоксическое действие. Так, на 20-й день беременности реворбированных эмбрионов составило на 20 X, а в конце опыта мертворожденных крысят составило 16,7 I по сравнению с контролем (9,7 X). Кроме того, в крови крыс происходит увеличение количества эритроцитов на 10 X, лейкоцитов на 10,5 I, содержание гемоглобина на 8,3 %, общего сахара на 6,4 X и снижение общего белка на 5,0 X по сравнению с контролем. Остаточные количества циперметрина в органах и тканях крыс и крысят составляет от 0,05 до 0,15 мг/кг. Вышеуказанные изменения у крыс 2 и 3 поколений отсутствовали.

При введении циперметрина беременным крысам в дозах 17 и 8 иг/кг массы тела с первого дня и на протяжении всей беременности, препарат заметно не влиял на воспроизводительные функции самок 1, 2 и 3 поколении и не приводил к накоплению пестицида в органах, тканях крыс и крысят, а также не наблюдался заметное изменение в морфологических и биохимических показателях крови.

Таким образом, на основании проведенных исследований установили, что при многократном введении циперметрина беременным крысам в дозах 17 и 8 мг/кг массы тела, у 1, 2 и 3 поколениях препа-

рат не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием. Доза 34 мг/кг - обладает эмбриотоксическиы действием только в первом поколении белых крыс.

Гонадотоксическое действие цилерметрина на организм белых крыс при многократном введении его внутрь.

Результаты опытов показали, 'что циперметрин в дозах 8 и 34 мг/кг массы тела заметно не влияет на гонады самок. Эстральный цикл у них протекал и чередовался нормально, т.е. продолжительность астрального цикла в опытных и контрольных группах составила 4-5 дней.

Установили, что циперметрин в дозе 34 мг/кг на 20-й день беременности резорбирует плод на 30 X, в дозе 8 мг/кг - на 9,6 X, по сравнению с контролем - 11,6 X. Внешние аномалии у плодов и крысят отсутствуют. Топография внутренних органов не нарушается. Изменения отмечены только в почках в подопытных группах в ви-. де пиолэктазии и гидронефроза от 6 до 10 X, контроле - 12 X. Эти изменения не достоверны при Р<0,05. Кроме того, у плодов подопытных групп достоверно доказанных нарушений черепа, в оссификации костей плечевого, тазового пояса и конечностей не установлено. .

Касса подопытных крысят при рождении и через 20, 40, 60 и 90 дней, сроки отлипания ушных раковин, открывание глаз и прорезывание зубов не отличались от контрольной группы.

Результаты исследований показали, что циперметрин в дозах 8 и 34 кг/кг массы тела отрицательно не влияет на весовые коэффициенты семенников, эпидидимисов, семенных пузырьков, функциональные (подвижность и количество сперматозоидов, осмотическая резистентность и рН) и морфологические (индекс сперматогенеза, сперматого-нии, канальцы со сгущенным эпителием и канальцы с 12-й стадией мейоза), показатели сперматогенеза белых крыс.

Влияние цилерметрина на выводимость и жизнеспособность

потомства при скармливании его с кормом курам-несушкам.

При ежедневном, в течение 90 дней, скармливании курам-несуш-каы, содержащего циперметрин в дозах 100 и 200 мг/кг, корма не установлено клинических признаков интоксикации, однако отмечено уменьшение яйценоскости КУР (19,5 и 47,3 X), снижение содержания в крови гемоглобина (9,7 X), эритроцитов . (10-20 X), каталазы (10-27,9 X), общего белка (4,4-30 X) и сахара (7,8-20 X), а также увеличение количества лейкоцитов (15-25 X). Циперметрин в дозе 5 мг/кг корма не оказывал отрицательного влияния на клинические,

- 15 -

биохимические показатели крови и продуктивность птицы.

Установлено, что при ежедневном в течение 90 дней скармливании курам-несушкам, содержащего циперметрин в дозах 200 и 100 мг/кг корма, выводимость цыплят снижается на 64 и 40 X соответственно, т.е. препарат в этих дбзах обладает ярко выраженным змбриотоксическим действием по отношении к куриным эмбрионам. Выводимость цыплят в контрольной группе составила 84 X. Циперметрин в дозе 5 мг/кг не снижал выводимость цыплят. Показатели роста и развития потомства находились, в пределах физиологической нормы.

Циперметрин в значительных количествах выделялся с яйцами. При его поступлении с кормом в дозах 100 и 200 мг/кг корма максимальный уровень его выделения с яйцом достигало 0,2 и 0,57 мг/кг соответственно. Препарат в дозе 5 мг/кг корма не выделялся с яйцом.

Циперметрин при его длительном введении с кормом в основном накапливается в сердце, печени и мышцах. Максимальный уровень содержания препарата в сердце, печени и мышцах в опытах с дозой 200 и 100 мг/кг достиг к 30-му дню введения 0,21 и 0,16; 0,18 и 0,14; 0,35 и 0,20 мг/кг соответственно. Через 5 и 10 суток после прекращения его введения с кормом содержание остатка препарата в органах и тканях отсутствовало. Препарат в дозе 5 мг/кг корма в органах и тканях отсутствовал. Длительное введение циперметрина в рацион кур-несушек не вызывает его накопления в органах, тканях и яйцах.

Ветеринарно-санитарная оценка вынужденно убитых птиц при отравлении циперметрином.

Установили, что в первые 5 суток после . острой интоксикации кур-несушек циперметрином в переносимой дозе (1000 мг/кг) их тушки по органолептическим показателям характеризовались как полученные от больной птицы. Это выражалось их, плохой степенью обескровливания, тёмнокрасным цветом с синюшным оттенком мускулатуры, гиперемии на серозных покровах грудно-брюшной полости, не ароматным и мутным бульоном при пробе варкой.

На 14-е сутки в более поздние сроки убоя кур-несушек от момента острой интоксикации их тушки по органолептической оценке не отличались от контроля и могли быть отнесены к категории доброкачественных и пригодных к использованию на пищевые цели.

При хронической интоксикации кур циперметрином их тушки характеризовались резким снижением категории упитанности. Через 20

- 1G -

суток после прекращения дачи препарата, тушки го упитанности соответствовали второй категории и по органолептическим показателям могли быть отнесены к числу доброкачественных, пригодных к использованию на пищевые цели.

При убое кур через 14 суток ,и в последующие сроки после их острой интоксикации циперметрином в переносимой дозе, статистических различий в физико-химических показателях мяса контрольных и опытных тушек не установлено. Физико-химические показатели жира кур, во все сроки убоя, также не отличались от жира кур, полученного от здорового животного.

Бактериологическом исследовании тушек и внутренних органов кур при отравлении циперметрином, непатогенная кокковая микрофлора имела место при остром отравлении. При хронической интоксикации кур препаратом из мяса и внутренних органов, выделяли кокковую микрофлору, включая гемолитические стафилококки, а также бактерии из рода E.coll.

В связи с этим наши рекомендации обоснованно сводятся к тому, что во всех случаях убоя кур при отравлении циперметрином или при подозрении на таковое, для обоснованной санитарной оценки их тушек и органов,необходимо проводить бактерилогическое исследование.

Определение биологической безвредности мяса кур с наличием остаточных количеств циперметрина.

Определение степени биологической безвредности продуктов убоя кур, отравленных циперметрином, проводили путем длительного скармливания (21 день) белым крысам куриного мясного фарша, учитывая динамику их живой массы, некоторые гемотологические показатели и патоморфологические изменения в органах и тканях.

Фарш получали измельчением на мясорубке мышечной ткани кур, убитых на второй день интоксикации циперметринжв дозе 1000 мг/кг.

При химико- токсикологическом исследовании такого фарша установлено среднее содержание пестицида в количестве 1,3 мг/кг. Для контрольных крыс готовили мясной фарш из мяса здоровых кур. Крысам давали фара из расчета 10 г/голову групповым методом.

> При постоянном наблюдении не установили изменений в их поведении на протяжении всего экспериментального периода. Отход крыс в обоих грушах не зафиксировали.

К исходу 21 дня опыта по скармливанию куриного мясного фарша, не установлены различия в приросте их живой массы. Анализ ди-

наыики прироста живой массы указывает, что мясной фара с содержанием остаточных количеств циперметрина не оказывает токсическое влияние на организм белых крыс.

В ходе эксперимента у опытных крыс по сравнению с контролем достоверных различий в морфологических показателях крови не установлено. К концу опыта у опытных крыс имело место некоторое снижение гемоглобина, а также незначительное уменьшение количеств эритроцитов и лейкоцитов.

При патологоанатомическом исследовании изменений в органах и тканях крыс не обнаружено.

Хроническая токсичность циперметрина для птиц.

- Результаты хронических опытов показали, что при многократном введении циперметрина курам в дозах 5 и 50 иг/кг корма, клинически выраженных признаков токсикоза у птиц не отмечено. Однако, при этом, отмечались некоторые нарушения со стороны обмена веществ, наиболее выраженные при введении циперметрина в дозе 50 мг/кг корма.

Длительное поступление циперметрина в организм кур в дозах 5 и 50 мг/кг корма не сопровсщается выраженной материальной кумуляцией его в тканях. Остатки препарата (доза 50 мг/кг) обнаруживаются лишь в крови (0,12-0,20 мг/кг), содержимом толстого отдела кишечника и желудке в количествах 0,01-0,15 мг/кг. По истечении 1 суток после прекращения поступления пестицида в организм, остатки препарата отсутствуют. Остатки циперметрина в яйце кур не обнаруживаются.

Анализ . полученных результатов показали, что скармливание курам-несушкам кормсв, содержащих циперметрин в дозе 5 мг/кг корма в течение 90 дней не ведет к изменению общего состояния, а также гемотологических и биохимических показателей крови. В яйце, органах и тканях остатки циперметрина отсутствовали. Поэтому эту дозу препарата считаем не действующей на птиц, при длительном поступлении его внутрь с кормом. Дозу 5 мг/кг предлагаем в качестве исходной,при установлении ИДУ циперметрина в кормах для кур-несушек.

ВЫВОДЫ

1. Циперметрин для белых мышей является высокотоксичным, для белых крыс и кроликов - среднетоксичным,а для кур-несушек - мало-

токсичным веществом. ДД50 для белых мышей, белых крыс, кроликов и .кур-несушек составляет 180,5+10 мг/кг, 332,5+20 мг/кг, 990+40 мг/кг и 1950+30 мг/кг соответственно.

2. Клиническая картина отравления теплокровных животных ци-перметрином однотипна и характеризуется бронхоспазмом, диареей, нарушением координации движения, параличом конечностей и клони-ко-тоническими судорогами. Степень выраженности и быстрота проявления симптомов интоксикации зависит от величины поступившей дозы циперметрина.

3. Отравление животных циперметрином сопровождается повышением содержания гемоглобина на 18-30 Z, количества эритроцитов на 22-37 X, лейкоцитов на 30-50 Z, содержание активности аспартат- и аланинаминотрансферазы на 28,6-57 X и содержание общего сахара на

28.5 Z, угнетением активности холинэстеразы на 21,6 X и снижением содержания общего белка на 12,3 Z. Величина этих показателей доходит до исходного уровня через 15-20 суток.

4. Остаточные количества циперметрина в значительном количестве накапливаются во внутреннем жире (3,2 мг/кг), сердце (2,5 мг/кг) и печени (2,1 мг/кг) и в меньшей степени в головном мозге (1,1 мг/кг), мшще (1,1 мг/кг) и почках (0,4 мг/кг).

5. Циперметрин, вводимый белым крысам однократно в дозе 200 мг/кг массы тела на 3, 9 и 13-й дни беременности, регорбирует эмбрионы в предимплантационный период от 18,6 до 38,5 X по сравнению с контролем (10,7-13,8 Z), постютлантациошшй период-от

15.6 до 16,7 Z, в контроле от 9,7 до 12,1 X, т.е.' циперметрин в дозе 200 иг/кг обладает эмбриотоксическим действием, а тератогенный эффект отсутствует.

6. При многокртарнсм (20 суток) введении беременным крысам циперметрина в дозе 34 мг/кг массы тела, препарат регорбирует эмбрионы в предимплантационный период на 20 X, постимплантацион-ный период на 16,7 X по сравнению с контролем (8,3-9,7 Z). Тератогенный аффект отсутствует.

7. Циперметрин, вводимый белым крысам, в дозах 8 и 34 мг/кг массы тела в течение 60 суток не влияет на гонады самок и самцов, т.е. препарат не обладает гонадотоксичностью.

8. Установлено, что при ежедневно! в течение 90 дней скармливании курам-несушкам циперметрина в дозах 100 и 200 мг/кг корма, снижается яйценоскость на 19,5 и 47,3 X и после инкубации снижается выводимость цыплят на 40 и 60 X по сравнен» с контролем

(16 Z), т.е. циперистрин в этих дозах обладает ярко выраженным эмбриотокеическим действием.

9. По органолептическлм показателям на 14-е сутки и более поздние сроки после острой интоксикации птиц циперметрином в переносимой дозе их тушки не отличаются от контроля.

Хроническая интоксикация кур-несушек циперметрином в дозе (97,5 мг/кг) 1/20 ЛД50 б течение 30 сутсг^резкому снижению упитанности тушек.

10. Максимально допустимый уровень циперметрина в кормах для кур-несушек рекомендуем установить 5 мг/кг. При длительном скармлиьании корма, содержащегоЫДУ циперметрина, пестицид не оказывает отрицательного влияния на выводимость, рост и развитие потомства, не снижает прирост живой массы, продуктивность и не обнаруживается в яйце, органах и тканях кур-несушек.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При отравлении птиц циперметрином в переносимой дозе, убой рекомендуем проводить не ранее 20 суток с момента установления симптомов интоксикации.

2. Ветеринарно-санитарную оценку тушек вынужденно убитых птиц, перенесших острое или хроническое отравление циперметрином, обязательно проводить на основании комплекса показателей — орга-нолептического, физико-химического, бактериологического, патоло-гоанатомического и химико-токсикологического методов исследований.

При наличии в мышечной ткани и внутренних органах, остатков циперметрина,тушки вместе с органами подлежат технической утилизации.

Тушки птиц, если в них не обнаружены остатки циперметрина, используются без ограничения.

3. Предложена обоснованная величина максимально допустимого уровня циперметрина в кормах для кур-несушек — 5 мг/кг, на основании которых осуществляется контроль за недопущением остатков препарата в кормах, выше ЦДУ.

4. Материалы исследований вошли во Временное наставление по применению цигипа при гиподерматозе КРС, утв. ГУБ МСХ РФ от 01.02.93 г. прот. №22-4-2/17.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Рустамов Ю.У., Аббасов Т.Г. Токсичность циперметрина для лабораторных животных. // Сбор. науч. тр. молодых ученых. Проблемы ветеринарной санитарии. Выпуск II,- Москва, 1992. -с.75-83.

2. Рустамов Ю.М. Эмбриотоксическое и тератогенное действие циперметрина на организм белых крыс в различные сроки беременности при однократном введении. // Сбор. науч. тр. молодых ученых. Проблемы ветеринарной санитарии. Выпуск II.- Москва, 1992. -с.93-99.

3. Рустамов Ю.М., Аббасов Т.Г. Хроническая токсичность циперметрина для птиц. // Экологические проблемы ветеринарной санитарии: Тез. докл. науч. техн. конф. 7-8 апреля, часть 2.- Москва, 1993. -с.69-70.

4. Рустамов Ю.М. Влияние циперметрина на выводимость и жизнеспособность потомства при скармливании курам-несушкам. // Сбор, науч. тр. Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. Том 94. -Москва, 1994. - с. 67-63.

5. Рустамов Ю.М., Аббасов Т.Г. Гонадотоксическое действие циперметрина на организм белых крыс при многократном введении его внутрь. // Сбор. науч. тр. Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. Том 94. - Москва, 1994. -с. 88-95.

6. Аббасов Т.Г., Рустамов Ю.М. Бетеринарно-санитарная оценка вынужденно убитой птицы при отравлении циперметрином. // Гигиена, ветсанитария и экология животноводства: Материалы Всероссийской научно-производственной конференции, 22-24 сентября, - Чебоксары, 1994. с. 3-4.

ШИИВСГЭ, 1994г., Мзоква, Звенигородское т., 5, Зак. тиррач 00 экз.