Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Резистентность органов дыхания у кур в промышленном птицеводстве

РГ6 од

всероссийский научно-исследовательский

7 !1!0И ветеринарный институт патологии, и^фАрМАК0<л0гии и ТЕРАПИИ

На правах рукописи

АЛЕКСЕЕВА Светлана Анатольевна

РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ У КУР В ПРОМЫШЛЕННОМ ПТИЦЕВОДСТВЕ

16.00.02 — патология, онкология и морфология животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных иаук

Воронеж 1993

Работа выполнена на кафедре -внутренних незаразных бо-лезщей, хирургии и акушерства Ивановского сельскохозяйственного института.

Научный 'Консультант —

доктор ветеринарных наук, профессор Р. П. Пушкарев.

Официальные ол-поненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Н. М. Алтухов; доктор ветеринарных наук, профессор Б. Ф. Бессарабов; доктор медицинских наук, профессор А. М. Земсков.

Ведущее предприятие —

Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный .институт птицеводства.

Защита состоится « .¿^¿¿Р^^г^. . . 1993 г.

в . /^часов на заседании специализированного совета Д. 020.65.02 при Всероссийском научно-исследовательском -ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии ¡по адресу: 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114 б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии.

Автореферат разослан « . . . ...... 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат ветеринарных наук

М. Н. АРГУНОВ

Ротапринт. Подписано к печати 24.05.93 г. Формат бумаги 60Х84'/1б. Печ. л. 2,0. Тираж 100 экз. Заказ 1566/рь

Типография ГУКПК, 153025, г. Иваново, ул. Ермака, 41

1. 0Би1ЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1 н i j a i i н о с i i темы. Максимальная напряженность производственных процессов приводит к тому, что на"птицефабриках страны с суточного возраста и до конца продуктивного использования теряется значительное количество поголовья; В этих условиях, все чаде специалисты отаечают, что птица, имея высокий уровень общей Неспецифической резистентности, тем не менее под-веркена респираторным заболевания:,:, а при парентерально« введении ванщш уровень антител мо::сет быть очень ккзним и не обеспечивает невосприимчивость организма к инфекционный болезням.

Исследованияии последних лет (А.В.Селиванов, 1973; В.Д.Соколов, -I977; С.И.Пляценко, В.Т.Сидоров, 1979; И.П.Замоталов, З.В. Воробьева, 19855 Н.Л*Дидиовсрш1, J!«w .Дворецнкй, 1990 и др.) установлена исключительно вааная роль местных защитных механизмов слизистых оболочек дыхательных путей в профилантине болезней,'передающихся воздушно-капельным путей. Остается высоким экономический учерб от респираторных болезней (Б.Ф.БессарасЗов, Ф.Кудряв- . пев, 1979; Р.Н.Коровин, В.П.Зеленении, Г.А.Трошева, 1989; И.Г.Арестов, И.М.Карпуть, Е.А.Ломова, Ф.Ф.¡Горохов, 1990; ь.О. Eiehl, 1988;к. Nakamura ,F. Abe , 1988). Антигены вирусной и бактериальной природы вызывают первичьое поражение слизистых оболочек дыхательного тракта, а в дальнейшем через дефекты слизистых оболочек в организм проникают различные антирии (кишечная папочка, возбудитель пастереплеза, миноплазмы и др.),'которые отягощают течение инфекционного процесса.

В условиях промышленного птицеводства в' связи с преобладанием аэрогенного пути заракения к аэрозольного метода вакцинации ведущее значение в развитии иммунного процесса принадлежит иммунной системе органов дыхания. Защита от аэрогенного заражения зависит от уровня местной резистентности в зоне аппликации антигена-при аэрозольной вакцинации. При введении ванцшш в дыхательные пути наряду с антителообразованием в тканях трахеи, легких закономерно преобладание неспецифического компонента иммунного ответа над, специфическим.

Мекду тем, традиционная система иммунного контроля, основант ная на определении антител в сыворотне крови, никакой информации о иммунном статусе органов дыхания не содержит.

Но сообщении Л.С.К'опайсной ч1989) под влинниеи многочисленных канторов окружающей среди п постоянный воздействием лекарственных прзпаратов у птицы нерезко наведается нарушение tiéxsiiiisuoB nuujiaioil за-лты. П^в ato..! реино прьыаается чу^сиви-текьнодхь организма и остры:.! п хрокпчесвш заболевания::. Не эф- ' ^активной -сгш.оылсн вакцинация прошв ш;ивцконгл'х болезнен, увеличивается вероятность обрьзовашш onyxoaeii, спровоцированных введением хинполрепаратов,' снимается продуктивность поголовья.

Сивдуяяцкя устных деходшос дачии, в той чьсве п путей шестого щмтиеиия вавцпв, народы вое оолеа ыпрэвое применение в втацеводстве. При этом возникает необхоушость оценки и о- . ходьоВ ФуквцксьаигноЦ активности цветной вимуькой зацпты к &ввтавнос?в сткиукирукяего доСсхвея биологических и аеварствеи-ных препаратов, а таи^а устранения средств, угнетаидрх защитные сипи оргаивз-ла.

Учитывай BKU8K3í0itínu06, кзучен'ие на новой иетоднчесаоц ЗГровне йормкрованая резистентности дыхательных путей у кур в возрастной, аспекте с учетой генетических особенностей организма я изменения её под влиянием технологических факторов промии-пенного птицеводства, а тавке стьму'ляцпи местной защиты орга-крзыа, являются .аитуапвншли

Цель а работы явилось изучение Дотирования резистентности органов дыхания у кур яичного направления с учетов возраста, .вросса, воздействия неблагоприятных фзкторов и разработка способов eü стимуляции.

Для достижения указанной цели (Мин решены схедувцие задачи:

- разработаны ыетоды оцеави резистентности органов'дыхания • у кур (прижизненные и после выборочного контрольного убоя);

- изучены закономерности формирования резистентности орга-' нов дыхания, у кур в условиях пропыленного птицеводства;

- определены особенности резистентности органов дыхания у кур разных кроссов и возрастов;

- установлена роль центральных органов иммунитета в рагуиа-цм: иестнсй зазкгн органов дыхания;

- изучено влияние печебно-профипавтичесних мероприятий на обцую и честную резистентность организма;

'- .определено влияние стицупирущих зачесть на общую и ыест-нуи резистентность кур;

- на основан;;« но:.:пленсних экспериментальных' исследований и

производственных опытов разработаны, апробированы и внедрены -практические рекомендации .по диагностике резистентности дыха-, тельных путей и её стимуляции в промышленном птицеводстве.

Научная новизна. У эмбрионов и кур перспективных яичных кроссов П-46 и Бенарусь-9 с I- до 180-дневного возраста, содержащихся на птицефабрике с традиционной технологией, изучена гьстоморфопогия и ультраструитура полости носа, трахеи, легких,'тимуса, фабрициевой сумки к их изменения при проведении профилактической аэрозолььой вакцинации против нъвнаслсной болезни. Установлены у клиничесни здоровой птица возрастные показатели цмтогракиы трахеи и ротоглотки, лизосомально-натионного теста гранулоцитов (разработан новый отечественный краситель -удостоверение на рацпредложение II» 716 ог 02.С2.90 г.), а такае лизоцша, иммунных конпменсов в криоглобупинов в трахеобронхи-альном сенрете и сыЕоротиа крови, что выявляет периоды кммуно-дефицитов у вур при промышленной технологии их выращивания, и позволяет программировать проведение печебно-профилавтич'есних-мероприятий. Изучены изменения местной и общей резистентности у нур под действием антимикробных средств и при проведении иммунизации с учетом исходного состояния резистентности дыхательных путей. Показана возможность стимуляции резистентности дыха- '. тельных путей перед аэрозольной вакцинацией вур путем введения иикровита А и- йодполимера, которые индуцируют направленный иммунологический ответ.

Практическая ценность и внедрение. результатов исследования. Практическая ценность работы заключается в возможности использования разработанных кммуколо-гичеснкх методов в диагностике резистентности дыхательных путей у кур.в промышленном птицеводства при определении оптиыалыадх сроков лечебно-профилактических обработок птицы, прогнозировании сохранности и продуктивности поголовья,' в селекционной работе, а также в.возможности стимулировать защитные функции органов дыхания. "

- Главное управление ветеринарии МСХ.Российской Федерации, Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства, одобрили и рекомендовали к внедрению "Методические рекомендации по диагностике и стимуляции резистентности дыхательных путей у нур в промышленном птицеводстве" (1992).

Рекомендации внедрены на птицефабриках и птицефермах с тра-

дицйокнон u¡joi.:u^rifc!ihoi, технологией, в ветершш; üíjx и ветери-нарно-производствешшх лабораториях.

А -л р о б е ц и я ' работы, Ochobhüj резулвтаты исследований долодеш на иекрегионалыт совещании руководителей и специалистов птицеводческих хозяйств "Пум увеличения производства птицеВодчесной продукции11 (Иваново, 1988); Всесоюзной научно-производственнои конференции "Комплексная система ветеринарных мероприятий в птицеводстве - резерв повышения эффективности производства" (Ленинград, 1989); научной конференции СЗВИ (Сеиииалатинск, 1990); научно-прантичесной конференции "Внедрение достижений науки и передового опыта в агропро-кшлепиом компленсе Ивановской области" (Иваново, 1990); Все- ' союзной научной конференции "Актуальные проблемы ветеринарной и зоотехнической науки в интенсификации животноводства" (Москва, 1990); научно-практической конференции "Внедрений достике-■нкй науки и передового опыта в АПК Ивановской области" (Иваново, 1991); методическом совете Всесоюзного научно-исследоьателъ • свого ветеринарного института птицеводства (С.-Петербург, Лоио-' носов, 1992).

Публикация. По материалам диссертации, опубликовано 13 работ в научных, журналах, тематических и межвузовских ■ сборниках, тезисах конференций.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 295 страницах машинописного тенета и состоит из введения,, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов собственных исследований, 'зак-. лючения, выводов и предлоаенкй, списка литературы и приложе- -ни!!.. Список литературы включает '269 источников, из них 120 иностранных авторов, Работа иллюстрирована 39 таблицами, 89 ри-суннаыи.

На за'щи'ту' выносят с. я следующие положении:. I. Диагностические нритерии естественной резистентности органов дыхания у нур разных кроссов в возрастной аспекте при ин-

■ твнеивнои технологии содержания на'птицефабриках.

■ ■- 2. Изменения местной n odJieii резистентности у кур под деист—

■

вием антимикробных средств и при проведении иммунизации. ■ 3. Стимуляция резистентьости органов дыхания у кур.

2. '.1АТКР11АЛ I' МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена на кафедре внутренних пегаразиых болезней, хирургии к акуперства Ивановского сельскохозяйственного института, Т: лаборатории олокхрояг.ой мгнросноп::« Ивановского медицинского института, на птицефабриках Ивановской области: "ивановская", "Юаская", совхозе "PezeMcanii" в период I58'i-IS92 гг. Исследования состояли из четырех разделов.

1. Изучение резистентности дыхательного аппарата у аур, содержащихся в производственных условгях с тредгцгопной тзхноло-. гией выращивания.

2. Изучение впг.япвя антимикробных средств на местные и об'цие механизмы защиты организма.

3: Влияние вакпшопрофплактнии па местные и общие механизмы защиты организма.

Стимуляция резистентности дыхательного аппарата у кур.

В первом разделе изучали резистентность дыхательного аппарата в динамике у й-днеькых эмбрионов и далее у клинически здоровых кур в возрасте 1-, 30-, 60-, 90-, 120-, 150-, 180 дней. •

Исследовали кур кроссов П-46 и Ееларусь-9, содержащихся на птицефабрике "Ю.;ская". Цыплята до дву.....есячного возраста выращивались в клеточных батареях КБЭ-I, до четырехмесячного возраста - в клетьах БЦ-5, а затем в клеточных батареях типа ОБН-1. Условия содержания птицы отвечали требованиям общесоюзных норм технологического проектирования птицеводческих хозяйств.

Исследовали носовую полость, трахею, бронхи, легкие, трахео-бронхиапьный секрет, ротоглотку, фабрициеву сумку, тимус, кровь.

Материал брали в указанные сроки до кормления в одинаковой последовательности, каждый раз у 6-8 голов.

Готовили мазни-отпечатки со слизистых оболочек ротогпотни и трахеи. Кровь получали из поднрыльцовой вены, трахеобронхк-алъный секрет - методом смывов.

Образцы органов и тканей (носовая полость, трахея, легкое, тимус, фабрициева сумна) фиксировали в 2,5? растворе глутарово-. го альдегида и после соответствующей обработки полутонкпе срезы

просматривая!; в сьртовса онроскопе, улыратониие срезы контрастировали уранипацетатом свинца и исследовали в просвечивающей электронном микроскопе ЭЗ:.'-100 Ал. Интерпретация полученного материала осуществлялась при участи;; профессора А.А.Миронова.

Состояние местных и общих факторов резистентности определяли по следующим показателя:.;.

I. Лкзосомально-натионный тест гранупощиов по методу Д.С.Колаб-сной и др. (1983) в нааей модификации (удостоверение на рацпредложение !;:- 716 от 02.02.90 г.). '

2.,00Цюи бедок в сыворотне нрови с помощью рефрактометра ИРФ-22..

5..Фагоцитарные свойетъз и адсорбционные свойства слизистых оболочек трахеиi бронхов, ротоглотки по О.Г.Алексеевой (1986).

4. ЛЕЗОции'иеюдоц X.«.Гранд, Л.Яворского;, И.Н.Блуиберг (1973) •С использованием нулЬТурЫ t-icrococcu3 lyuodeicticus.

5. Циркулирующие иммунные комплексы по -С-Г.бсипову 'и др.(1986).

6. Количество Т- к В-ишфоцктов методом Б.Я.Бщиана к др.(1983).

7. Криогяобуякны спентрофютометрпчесни (по Ё.Л.Насонову, 1986). Такие исследовали витамин А методом Бессея в модификации

А.А.Анисовой (1979).

Для изучения резистентности органов дыхании было приготовлено -320 гистопрепаратов для электронной микроснопии, 410 мазков-отпечатков со слизистых оболочек трахеи и рстоглотниисследовано 572 пробы крови и 264 пробы трахеобронхиалького секрета.

Антимикробная терапия была проведена на нурах породы белый леггорн нросса П-46 в возрасте 150 дней, больных острым катаральным ринотрахеитом. Инфекционные заболевания исключались в областной ветеринарной лаборатории. Хур первой опытной грушш (20 голов) обрабатывали двукратно аэрозоль^) сульфадимезина в дозе 300 иг/и, второй опытной группы (20 голов) двукратно аэрозоль^ кевоницетиьа в дозе 210 ¡.:г/и5, третья группа (20 голов) служила контролем.

Для образования аэрозоли применяя}! генераторы САГ-1. Резистентность дахатеаышх путей и общую ьеспсцнфичесную ' резистентность под действием противомииробных средств изучали на слая.уц-щпй день и через 7 дней после обработки.

При этом исследовано 54 аазкя-отпечахва со слизистых оболочек, 162 пробы HfOEii и 36 проб трахеобронхпэпьного секрета.

Изучение влияния профилактической вакцинации' кур против иъга-наслск"й болезни на местную и общую резистентность проводили в производственных условиях согласно схеме и плана противоэпизоо-тичеснмх мероприятий в благополучных хозяйствах. В опытах использовали сухую вирус-вакцину против нъюнаслсвой болезни птиц' из штаил'а Да-Сота, изготовленную на Покровской заводе биопрепаратов.

■Материал для исследования брали за сутни до вакцинации и через 7, 21 день после нее. Перед ванципацией птицу выдергивали без норма и воды в течение G-8 часов. Первую вакцинацию цыплят проводили в возрасте 15 дней пе popa льны;.; путей двукратно (выпаивание разведенной вакциной из расчета 5 мл на одного цыпленка, или по 0,02 мл вируса). Вторую и третью - в возрасте соответственно 30 и 143 дня - аэрозольным методом, ингалируя (на-одну птицу) по 1000 Э:1Д50д(„ и 1200 Э1!250/ып. Были изучены не--специфические поназатеш резистентности (и. =6), морфологические изменения иш.:ушшх органов ( »г = '+), проведены серологические исследования сыворотки крови в РЗГА в ветеринаркой лаборатории птицефабрики ( п = 25).

Было исследовано 36 ыазнов-отпечатков со слизистых оболочек, 180 прсб нрови, 36 проб трахеобронхпэпьного секрета, 32 гисто-препарата.

Исследование влияния аэрозоля минровита А на местную и общую резистентность организма проводили на цыплятах кросса П-46 (возраст 30 дней). Опытной группе (10 тыс. голов; была введена аэрозоль минровита А в дозе 50 мг/м5, экспозиция 30 минут. Другая, группа цыплят (9,7 тыс. голов) слунила контролем. Исследование материала проводили через 3 и 9 дней посла обработки цыплят микуовитом А. Танже было испытано действие аэрозоля йодпо-пкмсра, состопцего из йодпнола и комплекса минеральных веществ, балансирующих потребность высокопродуктивных кур, с учетов рекомендаций сотруднина нашей кафедры H.H.Виноградовой (1979), на резистентность кур. Эксперимент проводили в производственных, условиях на нурах породы белый леггорн кросса П-46, возраст 6 месяцев. Куры опытной группы были обработаны полимером из расчета I ыл/м3 (31777 голов). Аэрозоль создавалась САГ-I. Зис-'

позиция 30 минут. Другая группа кур (32500 годов) служима конт-' ролем. Условия вормиения и содержания кур обеих групп были равноценными и соответствовали нормам ВШШЛ (1988). Исследование материала проводили через I и 7 дней посла применения йодпслиме-ра. Количество ыеди, кобальта, марганца, цинна в органах опреде- ' ляли методами, описанными Г.С.Бен-Утяевой (1972).

При этой исследовали 120 мазкоз-^отпечатков со слизистых оболочек, 264 пробы Крови, 72 пробы' трахеобронхиального секрета, ]М пробы внутренних органов.

Полученный цифровой материал был обработан статистически с помощью иикрокалькуиятора МК-56. .

- Производственное испытание способов стимуляции резистентно- •. сти дыхательных путей у нур с применением минровита А и Йодинола с минеральными веществами проводили на птицефабриках "Ивановская", "Юксная", птицеферме совхоза "Решемский" Ивановской области. . "

Экономическую эффективность рассчитывали по "Цетодине опре-.-деления экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-нонструн-торсних работ, новой техники, изобретений .и рационализаторских предложений" (1980). •

I

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ .

•5.1.' Резистентность дыхательного аппарата нур и . ее генетические особенности

Защитный эффект, нак известно, осуществляется при участии механических, гуморальных и клеточных факторов.

Механическое удаление аспирируемых с воздухом частичек микробного и немикробного происхождения осуществляется в основном благодаря деятельности ресничек мерцательного эпителия. Электронная микроскопия позволила определить, что на поверхности иасдой клетки мерцательного эпителия у нур находится оноло 200 ресничек толщиной 0,3*0,03 мнм и длиной 6-7,58*0,6 мкм.

В зоне функционирования реснитчатого эпителия плотный и жидкий слои бронхиального секрета существуют благодаря присутствию сурфактанта, который выполняет барьерно-очиститепьную

функцию. В наших исследованиях сурфантант был обнаружен на элентронной микрофотографии в просвете бронхиоле!; уке у 14-дневных эмбрионов. Строение оурфактанга в виде сегочни обеспечивает его кспантность и подвижность, способствует быстрому изменению конфигурации сурфантанта и выходу его избытка в просвет бронхио-лей.

Изучение иммунологических особенностей местной защиты аппарата дыхания нур в возрастном а'спенте позволило проследить время появления и формирования определенных защитных факторов и систем. Отмечено, что в процессе онтогенеза слизистая оболочка полости носа-К трахеи претерпевает ряд изменений в эпителиальном слое. В пренатапьном и ранней.постнатальном онтогенеза возрастает доля" боналоьидных нлегок. Кан показала злектроннограмм.а, они являются однонлеточнши сепезаип, выделяющими слизистый сен-рет.

Отмечено также, что с возрастом у нур уменыааэтся базофилия ялетон эпителиального слоя, увеличивается толщина-собственной . пластинки слизистой оболочки.

Изучение моруоструктуры органов дыхания у кур разных нрос-сов позволило выявить неноторые особенности. Так, в слизистой оболочке носовой полости к трахеи цыплят кросса П-4С появляются макрофаги (хотя и единичные) и пгл;фоцити в раннем постнатальном периоде (в 1-дневном возрасте), а у кросса Ееларусь-9 практически не встречаются.

В процессе онтогенеза собственная пластинна слизистой оболочки носовой полости и трахеи значительно васнуляризэвана, количество манрососудов возрастает, увеличивается численность лимфоцитов и макрофагов, как в просвете сосудов, тан и тканевых. Причем клеточные реакции со стороны макрофагов и лимфоцитов более выражены танке у цыплят нросса П-46. Отмеченные изменения следует рассматривать нан более выраженную иммунологическую ре-анцию на антигены, проникающие с воздухом в дыхательные пути, у нур кросса П-46.

В процессе онтогенеза увеличивается пневматизация Легного. Это выражается в постепенном увеличении размеров бронхиолой (воздухоносных капилляров). При этом в первую очередь диаметр', бронхиолей возрастает в периферических отделах (вблизи висце- " ральной плевры и соединительнотканных стромальных перегородок).' Вместе с тем долго не расправляются участки легочной ткани вбли-

зи воздухоносных путей и прикорневых зонах;.

Электроннограммы легочной ткани показали, что бронхполи у кур кросса 11-46 крупнее, чаще они неправильной формы, равномерные. У кур этого кросса параллельно отмечали более выраненное истончение ¿еабронхиоляркых перегородок, что позволяет кислороду.' и углекислому газу более свободно дкффузно перемещаться по градиенту концентрации из одних капилляров в другие.

В области бронхиоле?, ведуцая 'защитная роль .принадлежит ккет-нам-тнрофагам. В наших исследованиях немногочисленные макрофаги были обнаружены у нлиничесни здоровых цыплят в слизистой оболочке парабрйнхов и в просвете бронхколей на ранних этапах онтогенеза.'

. В просвете бронхи,опей и в слизистой оболочке парабронхов у цыплят и кур обнаружены лимфоциты в составе бронхоассоциирован-кой пимфоидной ткани (БАЛТ).

. БАЛТ (нак.-и макрофаги) отсутствует у цыплят в первые дни аизни и появляется, по нашим наблюдениям, в 60-дневком- возраоте...

. 'Относительное содераание популяций лимфоцитов в БАЛТ и периферической крови неодипаново.

В.собственной пластинке трахеи и бронхов у цыплят обнаружены плазматические нлетки. Их количество с Еозрастоы увеличивав ется', что позволяет судить о постепенном становлении системы местной защиты дыхательных путей у с.х. птицы и об активном участии в этой системе не только бронхов, но и Трахеи. Поэтому в своих" дальнейших исследованиях мы изучали не бронхиальный секрет, а трахеобронхиальный.

Состояние резистентности дыхательных путей объективно отражает цитограмма.

•Изучение цитограммы слизистой оболочки трахеи (табл.1) позволило заключить, что у цыплят I-дневного возраста слизистая оболочна трахеи не располагает надетаой запитой, поснопьну в ци-тограмыз не обнаружены адсорбирующие эпителиальные нлетки и пз-лиыорфноядерные лейкоциты. Эпителиальные нлетки, адсорбирующие микрофлору, появляются в Ю-дневном возрасте в количестве 17,5" и, видимо, именно им принадлежит защитная роль у цыплят до 30-дневного возраста. С этого периода на.слизистой оболочке трахеи появляются псшшорфноядерныв лейкоциты, участвующие в фагоцитоза. На слизистую ротоглотки, они икгрир'уют тачске на 30-й день жидки ь^пг.пт.

Таблица I

Циюграыша слизистой оболочии трахеи нур, м * ^

Возраст, дни Эпителиальные нлетни ' Л е й н о ц и т ы * Адсорбционное число Фагоцитарное число

адсорбирующие неадсорбирующие разрушен- ные фагоцитирующие не фагоцитирующие

I - 60,5*0,9 18,0*1,6 _ 21,5*2,4 - -

10 17,5*3,3 27,0*3. ,3 19,3*1,7 36,1*2,9 3,2*0,5 -

20 32,6*4,1 16,0*2,2 24,2*1,5 - 27,2*1,5 4,-3*0,8 -

30 44,2*2 ,4 6,8*1,6 25,5*1,3 1,2*0,1 20,3*0,9 7,3*0,9 1,4*0,1

60 18,2-2,5 40,2*3,2 21,3*2,1 1,2*0,2 19,3*0,7 7,1*0,8 1,3*0,2

90 27,0*1,6 6,0*0,7 29,8*0,6 18,7*0,7 18,5*1,5 6,8*0,2 1,8*0,2

120 18,6*1,6 - 16,5*3,2 47,3*3,9 17,5*1,8 6,7*0,8 2,8*0,2

150 • 29,0*2,3 3,0*0,3 25,6*1,4 20,0*1,7 20,6*1,0 6,6*0,9 2,4*0,6

180 30,0*1,1 9,2*0,7 23,0*1,3 12,0*0,9 22,2*1,6 6,4*0,6 2,8*0,6

■ В период физиологического .созревания'в цитограмме трахеи, кан и ротоглоточной полости, у нур-нолодон активность и интенсивность фагоцитоза лейкоцитов увеличивается. У кур-несушен ый- • грация фагоцитирующих лейкоцитов на поверхность слизистых оболочек ротоглотки и трахеи снижается, однано интенсивность фаго- ' дитоза этими влетнами остается высокой.

На основании полученных результатов можно предполокить, что закономерности слущивания Эпителиальных клеток и миграции форменных элементов нрови на поверхность слизистых оболочек верхних дыхательных путей едины для ротоглотки и трахеи и формируются на ранних стадиях онтогенеза. Видимо, достаточная зрелость именно этого звена местного иммунитета у цыплят раннего возрас-- . та на фоне относительной незрелости других факторов и обеспечивает в данном периоде роста кур основную барьерную функцию слизистых .оболочек ротоглотки и трахеи, ноторая реализуется фагоцитозом. " .

. Мигрировавшие полиморфнойдерные лейкоциты сохраняют у кур. .-Э период физиологического созревания и -дальнейшей яйцекладни свою фагоцитарную способность и продолжают оставаться активный функционирующим элементом, действие которого направлено против попадающих на слизистую оболочку.верхних дыхательных-путей чу- , неродных частиц. .

Единая закономерность слущивания эпителия и миграции лейкоцитов на поверхность слизистых оболочен ротоглотки и трахеи позволяет' провести у кур прижизненную оценну состояния защитных механизмов по мазну-отпечатну со слизистой ротоглотки.

В слизистой оболочке трахеи и бронхов, преимущественно' в •собственной пластинке и возле келез, постоянно присутствуют свободные клетки:-лимфоциты, плазиоци'ты, а такаш гранулоциты.

Результаты исследований показали (табя.2), что гранулоциты активно участвуют в функционировании барьера слизистой'оболочки органов дыхания уке на ранних стадиях онтогенеза. Определение лизосомально-катионного теста (ЛКТ) в возрастном аспекте выявило тенденцию к увеличению его у кур с 0,95 ед в 1-дневном возрасте и до 1,99 ед в период физиологпчеснои зрелости и снижению .с началом яйцекладки. ...

. На наш взгляд, более ценными по информативности оказались гистограммы-распределения популяции исследуемых клеток по уровню содзрканкп в'них катионных белнов (КБ).

-Таблица 2

Резистентность органов дакания вур, М * >*.

Показатели В о з р а о т, дни

I 30 | 60 90 120 150 180

ЛКТ гранупоцитов, 0,95 * 1,37* 1,75* 1,83* 1,99* 1,78* 1,33*

ед 0.-05 0,04 0,10 0,08 0,06 0,08 0,07

Лазоцим в секрете, 0,312* . 0,319* 0,344* 0,193* 0,217* 0,205* 0,203*

ед/п 0,004 0,006 0,016 0,023 0,011 0,014 0,019

Иммунные комплексы о,зо* • 0,39* 0,40* 0,40* 0,30* 0,72*

в секрете, г/л 0,01 0,01 0,01 0,04 0,03 0.10

Криоглобупины в 0,02* ' 0,02* 0,03* 0,03* 0,05* . 0,11* 0,67*

сенрате, ед 0,005 0,006 0,004 0,008 0,010 0,010 0,013

. Причем большинство мигрировавших гранулоцитов обладает ниа- и вой степенью насыщенности КБ. У цыплят до СО-дневного возраста они достигают 62-92% от общего числа гранулоцитов. У птицы 90-150,-дневного возраста резно (в 2-3 раза) возрастает доля грану-лоцитов -с .ьысоной степенью насыщения КБ. Однако у нур-несушен (возраст 180 дней)- увеличивается процент нлетои с низниы содержанием КБ и снижается с высокий содержанием КБ. Это, очевидно, связано с усилением" процесса'миграции гранулоциюв и накоплением на поверхности "свежих" влетов, которые успевают натионизиро-ваться лишь частично, как у цыплят раннего возраста в момент становления защитных реакций организма, тан и у кур-несушек во ■ время интенсивной яйцекладки. ...

. Кроме того, отмечено, что если в гистограмме преобладают гранулоциты с высоиим уровнем 'насыщения КБ, то в этом случае будет больае -и ЛКТ. •

. Изучение .пизоцима'в трахеобропхнальноы сенрете показало наибольшую концентрацию его у цыплят первых 60 дней жизни. В период, физиологического созревания и яйценладйи'пизоцик в сенрете снизился. В SO-дневной возрасте он составил шаь 0,193 ед/п, что на 43,9%.меньше, чей у цыплят 60-дневного возраста. В 120-180-дневном возрасте активность лизоцкма у нур оставалась на той же уровне.' . • Исследование лизоцш/.а отдельно в трахее и бронхах поназало, что его концентрация в бронхиальном секрете' более значительна, чем а трахеальном.

Вероятнее всего, высокая концентрация лизоцима в бронхиальном секрете свидетельствует о том, что ведущая роль в сенреции лизоцима принадлежит серозным клетнам бронхиальных келез и в меньшей степени моноцитам, псевдоэозинофилам, манрофагам.

В последние годы все большее внимание исследователей привлекают иммуноглобулины биологических-жидкостей организма и прежде всего сенреторные,•обеспечивающие местный иммунитет. Признано, что .одним из основных-иритериев оценки икыунобнодогичесного состояния организма и его. способности противостоять инфекции является уровень циркулирующих иммунных комплексов (1'К), принадлежащих н различным нг.ассам иммуноглобулинов.

Исследования показали, что ПК циркулируют в кронп у цыплят уже с 1-дневного возраста и их количество с возрастом увеличиваете!;, не превышая 1,73*0,3 г/л.

В трахеобронхиальном сенрете ПК у цыплят 1-дневного возрас-' та не обнаружены. В 30-дневкой возрасте их концентрация равнялась 0,3 г/л и в дальнейшем до 150-дневного возраста оставалась-на уровне 0,3-0,4 г/л. У кур-несушен количество ¡«¡К в трахеоброн-хиальнои секрете увеличилось в 2 раза.

Параллельное сравнительное изучение ИК в сыворотне крови и трахеобронхиальном сенрете поназало, что их концентрация в крови в 2-5'раз выше, чей в сенретб здоровых кур. Это позволяет предположить, что секреторный иммуноглобулинам принадлежит лишь ■ вспомогательная роль в защите дыхательного аппарата.

Наряду с определением ИК целесообразно параллельно исследовать ноличество нриоглобулинов, которые представляют собой группу гетерогенных иммуноглобулинов, обнаруживающих аномальную растворимость. У здоровых цыплят криоглобулины обнаружены кан в сыворотке крови, тан и в трахеобронхиальном секрете с первого дня жизни. С возрастом их количество увеличивается. Причем в сыворотке крови крпоглобулинов в 3-6 раз больше, чем в сенрете.

Результаты исследовании показали, что местный иммунитет дыхательных путей у кур зависит от генетических особенностей организма. Отмеченное у цыплят кросса П-46 более раннее созревание центральных иммунных органов определило и более раннее появление лимфоцитов и макрофагов в слизистой трахеи. При этом функциональная активность Т- и B-лимфоцитов также была выше у нур кросса П-46, особенно в период физиологического созревания. Гранулоциты у цыплят этого кросса имели более выраженную бактерицидную способность, особенно в первые 30 дней зизни. При этом увеличение ЛКТ составило 24,5-32,5^ (р <0,01). В трахеобронхи-альном сенрете у них содержалось больше на 10,7-13,9/» (р <0,01) лизоцима, на 3t,5-81,8% (р<0,01) иммунных комплексов и в 2 р'а-эа ириоглобулинов.

3.2. Влияние техНологичесних фанторов птицеводства на местные и общие механизмы 'защиты организма

3.2.1. Влияние антимикробных средств

Как лойазали исследования, действие терапевтических доз аэ'-розолей сульфадимезина и левомицетина на слизистую оболочну дыхательных путей неоднозначно.(табл.3)..

■ . . Таблица 3

' Влияние противоминроблых средств на местную и общую резистентность кур,

. М-* т. ......

Показатели Группы нур до ни я гече- Группы' нур через день1 после'лечения Группы кур через 7 дней после лечения

I 2 ' 3 I 2 3 I 2 3

Эпителиальные .нлетви, _ -адсорбирующие микроорганизмы, % 19,б1 0,49 18,8* 0,47 19,1*. 0,38 23,8* 0,31 '22,3* 0,37 18,7* 0,91 26,3* 0,42 27,5* 0,72 16,5* . 0,71

Эпителиальные клетки, неадсорбирующие микроорганизмы, % 30,5-. 1,02 29,8* 0,92 28,5* 0,71 22,7* 2,30 24,6* 0,81- 29,1* 1,03 24,'4* 1,60 .29,7* 0,62 26,1*' 0,68

Лейкоциты целые, фагоцитирующие микроорганизмы , 28,2* 0,85 27,9* 0,76 '27,6* 0,69 24,5* 1,40 25,5* 0,52 27,1* . 0,95 21,3* 0,70 21,4* 0,66 29,2* 0,53

Лейкоциты целые> нефаго-цнтипующие микроорганизмы, 17,2* 0,54 18,8* 0,61 19,8* 0,62 11,7* 0,62 17,5* • 0,91 20,0* 0,79 15,1* 0,68 7,2* 0,77 20,4* 0,98

Лейкоциты разрушенные, % 4,5* 0,56 4,7* 0,49 • 5,0* 0,51 17,3* 0,91 ю,х* 1,07 5,1* 0,48 10,9* 0,52 14,2* 0,59 7,8* 0,35

Адсорбционное число, ед 5Д± 0,40 5,2* 0,30 5,1* •0,30 3)7* 0,20 5,6* 0,30 4,7* 0,10 5,8* 0,50 6,4* 0,20 5,6* 0,20

Фагоцитарное число, ед .2,0* 0,10 2,0* 0,10 2,0* 0,10 1,4* 0,10 2,1* 0,20 1,6* 0,10 2,1* .0,20 2,4* 0,10 2,1* 0,20

Продолнение таблицы 3

Показатели Группы нур до лечения Группы нур через день после печения Группы нур через 7 дней после печения

I 2 3 I 2 | 3 I " 2 3

ИТ гранупоцитов, ед 2,06* 0,09 2,00* 0,02 2,03*0,06 1,96* 0,08 2,11* 0,03 2,04* 0,04 2,17* 0,09 2,20* 0,06 2,00* 0,06

3 Лизоцпм, ед/л 0,1830,007 0,172* 0,010 0,177* 0,008 0,160* 0,010 0,175* 0,014 0,176* 0,006 0,198* 0,006 0,210* 0,008 0,185* 0,006

Т-лимфоциты, г/л '2,5* 0,41 ■ 2,2* 0,15 2,7* 0,39 1,7* 0,35 2,5* 0,28 2,5* 0,32 0,32 2,9* 0,20 2,5* 0,27

В-лимфоциты, г/л 1,9* . 0,23 1,9* 0,17 1,7* 0,36 1,4* 0,15 1,7* 0,32 1,6* 0,47 1,1* 0,16 2,6* 0,31 1,8* 0,49

Обозначения:

1 гр. -

2 гр. -

3 гр. -

обработна сульфадимезином, обработка левомицетином, контроль.

Аэрозоль сульфадимезина в дозе 300 мг/м^ оказывает заметное влияние на защитные свойства слизистой оболочки трахеи. Усиливается активность эпителиальных клеток адсорбировать поступающие из внешней среды микроорганизмы за счет появления зрелых -адсорбирующих эпителиальных клеток. В то же время интенсивность адсорбции микроорганизмов эпителиальными нлетнами в первый день после лечения была угнетена и составила.3,7 ед против 5,1 ед до печения. Терапевтический эффент препарата проявился в бактерио-статичеснои действии на минроорганизмы, что выразилось уменьшением воспалительной реанции у нур. Снизилось число лейкоцитов, фагоцитирующих и нефагоцитирукхцпх микроорганизмы соответственно на.13Д7з (р<0,05) и 32% (р<0,01). В 3,8 раза увеличилось ноли-, чество разрушенных пейноцитов. .На другой день после аэрозопете-рапии обнаружили снижение фагоцитарного процесса, выражающегося в снижении фагоцитарной активности псевдоэозинофипов за счет уменьшения фагоцитарного числа до 1,4 ед.

Аэрозоль' левомицетина в дозе 210 ыг/м3 способствовала уве- .• личению на 18,С^ (р < 0,05) числа эпителиальных нлетов, адсорбирующих микроорганизмы, и не вызывала снижения адсорбции и фагоцитоза клетками слизистой оболочки трахеи. .

' ...Через 7 дней после азрозопетерапии сульфадимезином и лево-мицЬтинои отмечена нормализация цитограммы трахеи: увеличилось количество зрелых эпителиальных нлеток соответственно на 44,4?5 (р<0,01) и 46,Ъ% (р<0,05), а также их адсорбционная способность на 56,8/5 (р < 0,05) и 23,1$ (р<0,05), снизилось число мигрирующих лейкоцитов, возросла их фагоцитарная активность на 50^5 (р < 0,05) и 20/» (р <0,05).

Полученные результаты позволяют заключить, что левомицетин и сульфадимезин' оказывают выраженное стимулирующее влияние на репродукцию кпетон дыхательных путей. Вместе с тем действие антибиотиков на фагоцитарную способность мигрирующих на слизистую оболочку трахеи лейкоцитов различается. Так, терапевтические дозы сульфадимезина сникали фагоцитарную функцию пейноцитов, а левомицетина не вызывали.такого угнетающего эффента.

Кроме того, под влиянием левомицетина изменились, в сторону '.•увеличеш'я, бантерицидные свойства лейкоцитов, харантеризующие-•ся в наших исследованиях ЛКТ. При этом изучаемый показатель возрос на 5,5-10$ (р<0,05) как в сравнении с исходным уровнем, так и ..с контролем. В то ке время в опыте с сульфадимезином достовер-

ных различий не выявлено.

Таким образом, ливомицетин не толкю стимулирует поглотительную активность клеток, но и их переваривающую способность.

Заметное увеличение на 22,1% (р < 0,05) лизоцима в сыворсг-ве крови отмечено у нур через 7 дне!! после обработки левоипце-тином, что, вероятно, связано с постепенным высвобождением его из ианрофагов.

Аэрозоли сульфадимезина снизили продукцию Т- и В-лимфоци-тов: через день после лечения соответственно на 32^'н 26,3$ (р <0,05), через неделю - на 17,6% и 21,4$ (р <0,05). У нур, обработанных левомицетином, через 7 дней содержание в крови Ти В-лимфоцитов увеличилось соответственно на 31,8/5 и 36,8^ (р <0,05). По-видимому, певомицетин сишулирует ди^ференцировну предшественников п незрелых Т- и В-илетон.

КЗ выиеизлоненного следует, что при остром нгтаральном ра-нотрахеите целесообразно использовать левомицетин, который стимулирует местную и общую неспецифическую резистентность нур как з первый день после при:, енения, так и через неделю.

3.2.2. Влияние вакцинации на местпую и общую резистентность

' При изучении действия ванцины из аттенунровакного лентогэн-ного штамма Ла-Сота на резистентность организма нами отмечено, что степень'этого влияния зависипа от иммунологического статуса макроорганизма (та5л,4).

У кур первой группы при пероральной йанцинацпи отмечали увеличение в крови циркулирующих иммунных комплексов на 23,9? (р <0,05). Усилилась секреция лизоцима на 21,7% (р<0,05). В цитограмме трахеи обнаружено относительное увеличение числа лейкоцитов, в том числе за счет-появления фагоцитирующих нлетон. Количество эпителиальных клеток уменьшилось, главным образом за счет неадсорбирующих элементов, а у адсорбирующих повысилась интенсивность поглощения микроорганизмов, поступающих из окружающей среды.

Во второй и-третьей группах ванцинация, проведенная аэро-золью, оназала неоднозначное влияние на организм птицы. У цыплят третьей группы (с высоким иммунологическим фоком) вакцинация вызвала полоки'телькый иммунный ответ._ В кров;; и трахеоброн-

Таблица 4

Влияние вакцинации на местную

и общую резистентность кур, т. ■ ■

Показатели

I группа

до вакцинации

после вакцинации

2 группа

до ванци-нации

после вакцинации

3 группа

до вакцинации

после вакцинации

Эпителиальные клетки ,адсорбирующие микроорганизмы, %

Эпителиальные нлет-ни.неадсорбирующие а::нроорганпзмы,

Лейкоциты разрушенные,-^

Лейноциты фагоцитирующие микроорганизмы, %

Лейноциты, нефагоци-тирующие микроорганизмы , % .

Общий белок, ЦИК, г/л . Лизоцем, ед/л ЛКТ, ад.

Секреторный лизоцим ед/л

16,5-3,0 17,4*1,6 44,0*2,0 33,6*2,8 38,1*2,1 30,6*1,6

26,9*2,5 18,8*1,3 10,2*1,4 10,6*1,2 4,2*0,1 3,0*0,2

20,4*1,2 16,7*1,1 24,3*1,6 28,9*2,1 14,9*1,6 7,1-0,5

2,0*0,1 " 2,5*0,1 2,2*0,1 1,3*0,1 19,7*1,5 38,9*1,1.

34,2*2,1 44,6*2,5 19,3*0,7 25,6*1,2 23,1*1,9 20,4*0,7

,ед. '3,4*0,4 5,2*0,1 7,0*0,6 4,8*0,4 6,4*0,6 ■ 8,5*0,4

)д. 0,5*0,02 0,5*0,03 1,2*0,1 1,3*0,1 2,2*0,4 4,1*0,3

3,53*0,18 3,74*0,21 3,74*0,14 4,04*0,22 5,04*0,21 5,34*0,22

1,30*0,02 1,61*0,03 1,77*0,05 1,40*0,04 1,41*0,05 1,43*0,03

0,194*0,011 0,236*0,009 0,225*0,008 0,224*0,012 .0,206*0,010 0,269*0,016

2,11*0,04 .2,13*0,05 1,50*0,08 1,95*0,11 2,13*0,17 2,14*0,04

0,190*0,004 0,213*0,006 0,171*0,002 0,107*0,001 0,200*0,001 0,262*0,001

хиальном секрете увеличилась концентрация пизоцгма соответственно на 30,6% к 31% (р<0,05). На слизистой оболочке трахеи в 2 раза возросло количество фагоцитирующих лейкоцитов и па 86,4% (р< 0,01) их фагоцитарное число, а такие на 32,8% (г< 0,05) интенсивность адсорбции микроорганизмов эпителиальными клетками.

Во второй группе вакцинация цыплят была проведена на фоне низкой резистентности дыхательных путей, а именно: на слизистой оболочке трахеи в 9 раз меньше было фагоцитирующих лейноци-тов и в 1,5 раза нине интенсивность фагоцитоза. 3 сыворотке крови было меньше на 34,8$ общего белка. В этих условия-' активная иммунизация солровоидалась снижением в нровн иммунных комплексов на 20,9^5 (р<0,05). На слизистой оболочке трахеи, нак-показала цптограм...а, стало меньше на 23,6% (р<0,05) эпителиальных клеток, адсорбирующих микроорганизмы, и нп,::е на 31,4% (р-¿0,05) интенсивность адсорбции, еще меньше фагоцитирующих лейноцитов и секреторного лизоцпма соответственно на 40,9 (р <0,05) и 37,4 (р<0,О1). Сохранность цыплят в этой группа была в 2 раза ниве.

3.2.3. Структура органов дыхания и центральных органов иммунитета после аэрозольной вакцинации

Проведенные исследования позволили обнаружить, что после аэрозольной 'вакцинации у цыплят кросса П-46 в эпителиальном слое видно достаточно большое количество бокаловидных клетон, .часть из которых пустые, другие содержат'гранулы эпентронно-плотного секрета. Отмечаются редкие базальныа клетки. В базаль-ных отделах эпителиального слоя встречаются многоядерные клетки, большое нойичзство макрофагов. Еазальная иеьбрана утолщается. В ней возрастает волонниетыи компонент. В собственной пластинке слизистой оболочки небольшое количество мпврососудов, много соединительнотканных волокон. Прослеживается тенденция коллапса легочной ткани .вокруг параброихов. Ььспхполп более расширены, паренхима представлена двумя типами нлетон: "темные (преимущественно многоядерные) и клетки со светяоЗ цитоплазмой (одноядерные, с выраженной периферической концентрацией хроматина). Появляется множество расправившихся бронхиоле!! небольшого размера. В стенках па'рзбронхов встречаются лимфоциты, в просвете • бронхиоле."! и парабсолхов - макрофаги. На поверхности лиммоцитов

и манрофагов обнаруживается большое количество кинровороинои, , часто контактирующих друг с другом.

У цыплят кросса Беларусь-9 в эпителиальном слое трахеи отмечается большое количество бокаловидных клеток, Содержащих гранулы секрета. Наблюдается выброс гранул сенрета на люминаль-ную поверхность эпителия. В цитоплазме эпителиальных клеток обнаруживаются расширенные накалы эндоплаэматической сети. Встречаются единичные базальные клетни. В базадьны;: отделах эпителиального слоя между эпителиоцитами располагаются единичные макрофаги. Базальная мембрана утолщается, однако она тоньше, чем у цыплят кросса П-46. Собственная пластинка слизистой оболочки представлена тонким слоем соэдинительнотнанных волокон с единичными мезенхимальными клетнами.

Морфологическая нартина легкого у цыплят нросса Беларусь-9 отличается от аналогов кросса Я-46 тем, что в просвете бронхио-лей встречаются единичные макрофаги, а лимфоциты не обнаруживаются. Тнань пегного хорошо васкуляризована.

Таким образом, при проведении аэрозольной вакцинации необходимо предварительно изучать состояние дыхательных путей.

иммунобиологическая реактивность больше выражена у цыплят - нросса П-46.

< Полученные результаты позволяют говорить о необходимости стимуляции местной резистентности дыхательных путей у кур, содержащихся в промышленных условиях. В этом случае появляется возможность увеличить невосприимчивость организма к неблагоприятным факторам внешней среды, повысить эффективность профилактических вакцинаций и тем самым увеличить сохранность и продуктивность.

3.3. Стимуляция общей и местной резистентности нур 3.3.Г. Влияние минровита А на резистентность

Выбор минровита А был не случайным, т.к. общеизвестно, что витамин А участвует в дифференциации эпителия, играет определенную роль в поддержании целостности слизистых поверхностей, которые обеспечивают первичную неспецифичесную защиту вместе с-продуцируемыми секретами.

Как показали исследования (табл.5), до' обработни цыплят мии-ровигом А они имели существенно не различающийся по группам им-

Габпица 5.

Влияние микровита А на местную и общую резистентность, !.! * т

Показатели

До обработки

опит

контроль

Через 3 дня после обсаботкп•

опыт

контроль

Эпителиальные нлетни, ад рующие,

Эпителиальные клетки, неадсорбирующие, %

Лейкоциты разрушенные, %

Лейноциты фагоцитирующие, %

Лейкоциты, нейа-гоцитирующие,$

Адсорбционное число, ед

Фагоцитапное число, ед

Витамин А, мкг %

ЛКТ гранулоцитов трахеи, ед

Лизоцпм секреторный, ед/л

Т-лимфоциты, г/л

В-лимфоциты, г/л

41,6*4,5

7,2*2,2

24,3*3,4" 1,6*0,2 25,3*2,3

6,3*0,8

1,5*0,1 59,8*2,84

42,3*3,2

6,6*1,9

23,8*1,7 1,5*0,1 25,8*1,0

7,0*0,7

1,3*0,1 64,3*4,51

45,1*3,0 40,5*4,7

8,8*1,2 11,4*1,5

20,1*1,5 22,4*1,6

5,2*0,2 1,7*0,1

20,8*1,6 24,0*2,3

11,4*0,6 7,3*0,6

2,3*0,1 1,3*0,1

82,5*1,92 62,8*2,57

1,36*0,06 1,38*0,06 1,52*0,07 1,38*0,04

0,320*0,007 1,68*0,03 0,83*0,05

0,317*0,004 1,72*0,07 0,86*0,09

0,340*0,005 0,317*0,005 1,95*0,03 1,60*0,05 1,22*0,06 0,80*0,09

иунный статус. Через три дня после поступления в организм препарата у цыплят отмечали заметные изменения. В периферической крови возросло количество витамина А на 19,7 мнг$, или 31,4$ (р< 0,01), что сказалось на синтезе лвзопныа, который такие возрос на 0,023 ед/л, или 7,35 (р-0,05). Минровит А повышал число Т- и В-лимфоцитов соответственно на 0,35 г/л, или 21,9% (р < 0,05) и 0,42 г/л, или 52,5$ (р < 0,05), что свидетельствует об активизации

тимуса и фзОрицкевой сумви, регулирующих лш^оцитарную инфииь- • т рацию лимфоидных органов (в том числе и органов дыхания) у цыплят опытной группы. Бактерицидность нрови, характеризующаяся лм-зосомально-катнонным тестом, у цыплят опытной группы таняе возросла, однако узеличение в 10,1% (р> 0,05) не было статистически достоверным.

Через 9 дней после аэрозольной обработай у цыплят сохранилась высокая концентрация витамина А в крови на уровне 80,3 * 3,76 мвг%, что было еышё, чем у цыплят контрольной группы, на • 21,1$ (р < 0,05). Згзчикым и достоверным было увеличение лизоци-ма в трахеобронхиаььноы секрете на 5,5% (р <0,05), и В-лиыфоци-тов в периферической крови на 33,3^'(р < 0,05). Остальные показатели не имели достоверных различий в сравнении с контрольной группой. Через 3 дня после аэрозольной обработки цитогракма слизистой оболочки трахеи у цыплят-изменилась. В сравнении с контролем в цитограиме возросла в 3,1 раза доля лейкоцитов, фагоцитирующих микроорганизмы, и их интенсивность фагоцитоза, которая увеличилась в 1,8 раза.

Среди эпителиальных клеток достоверных различий ке отмечено, ■ что объясняется, вероятно, вполне сформированными анатомическими барьерами у цыплят данного возраста при имеющемся уровне резистентности. Следует липь отметить достоверное увеличение в 1,6 раза адсорбционного числа у эпителиальных нлеток, что, "безусловно, указывает на активизацию их защитных свойств при ввв- . дении в организм витамина А.

Таким образом, из вышеизложенного видно, что под действием мияровита А на 3-й день после введения.в организм происходит усиление иммунного потенциала у цыплят. Клиническое значение этого эффекта трудно переоценить, т.н. появляется возможность стимулировать резистентность дыхательных путей к неблагоприятным фанторам внешней среды, а танка повысить эфе?нтивность профилактических вакцинаций.

Всходя иа открывающихся больших перспентив применения мин-ровйта А в качестве иммуностимулятора, мы апробировали его.в производственных, условиях в указанной выше дозе за 3 дня до профилактической вакцинации цыплят против ньюкаслской болезни.- Контрольную группу цыплпт иммунизировали по принятой в хозяйстве схеме. Чепез 21 день титр антител к вирусу составил 6 против ? в контрольной группе.

Повышение резистентности способствовало увеличении сохранности поголовья чэ 3-7,2% и продуктивности на 6,9-22,1$.

Экономический эффект от применения микровнта А на птицефабрике "Ивановская" на поголовье 85,8 тыс. голов составил около 6 тыс. рублей, или 0,07 руб. на каждую нурицу-несушку. На птицефабрике "Южсяэя" (поголовье 43 тыс. голов) эноьомичесг!:;! эффект был равен 13,7 тыс. рублей, или 0,32 руб. на курицу-песуш-ку (в масштабе цен 1990 г.).

3.3.2. Влияние йодполимера на резистентность

Введение йодинола в номпленсе с минеральными зецесиами способствовало перераспределению микроэлементов в организме. Причем через I день после обработки оно не было стабильны:.:, а через неделю отмечали в легочной ткани увеличении концентрации кобальта в 3,1 раза, марганца и цинка в 1,4 раза при изменении их содержания в депо. Данное обстоятельство позволяет думать, что ста аэрозоль создала в легких повышенную концентрацию микроэлементов, ответственных за тканевое дыхание и иммунобиологическую реактивность организма, и оказала существенное, как показали исследования (табл.6), влияние на местную и общую резистентность кур.

Таблица 6

Влияние йодполимера на местную и общую резистентность кур, М * ^

Показатели До обработай Через 7 дней после обработки

опыт | нонтроль опыт 1 контроль

1,42*0,06 1,46*0,09 1,64*0,03 1,50*0,01

0,200*0,015 0,189*0,002 0,210*0,007 0,192*0,025 1,83*0,06 1,94*0,36 2,05*0,05 1,80*0,04

0,70*0,04 0,77*0,08 0,97*0,05 0,78*0,04

В периферической крови отмечено увеличение количества Т- и В-лимфоцитов соответственно на 13,9 и 24,4$ (р < 0,05).

25

ЛКТ гранулоци-тов, ед

Лизоцим сенре-шорный, ед/л

Т-лимфоциты, г/л

В-лики'юциты, г/л

Феномен розеткообразования Г- к В-лим$оцихов является от- " ракением функциональной активности лимфоцитов, и увеличение процента розетнообразующих клетоа в крови, в наших исследованиях, свидетельствует о стимуляции функциональной способности пммунономпетентных клеток, вырабатываемых тимусом и фабрицие-вой сумной.

Тимус и фабрг.циеЕа сумка явпяются"дириверами в оркестре органов" синтезирующих соединения, влияющие на клеточный и гумо- . ральный иммунитет. Поэтому не случайно было отмечено возрастание числа гранулоцитов с высоким ЛКТ и увеличение лизоцима в трахеобронхиальном секрете.

Йодинол в комплексе с минеральными веществами оказывал влияние на выработку антител к ньюнаслской болезни. Вызывая перераспределение минеральных веществ в организме и тем самым улучшая их использование в метаболических процессах, он индуцирует направленный иммунологический ответ. Видимо, минеральные вещества создают благоприятные условия для интенсивного протеосин-теза и, таним образом, в конечном счете, влияют на активность образования антител. В опытной группе титр антител был на выше, чем у кур контрольной группы. • '

Снижение на 2,6-4,8% выбраковки и падежа, увеличение на 1-21,2$ яйценоскости у ::ур привело в определенному экономическому эффекту, который составил на птицефабрике "Ивановская" (поголовье 61,4 тыс. кур) 4,3 тыс. рублей, или 0,07 руб. на каждую нурицу-несушку, и на птицеферме совхоза "Решемский" (по-? гояовье 65 тыс) 16,5 тыс. рублей, или 0,25 руб. на каждую' яури-цу-несушну (в масштабе цен 1590 г.).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

йнтенствное развитие, в последнее время, уччния о местном иммунитетеприззло к широкому внедрянию ингаляционной иммунизации и аэрозольного применения лекарственных веществ. Установлены неоспоримые преимущества ингаляционной иммунизации в условиях преобладания, аэрогенного заражения, что характерно для нрупногруппового содержания птицы на птицефабриках. Бесспорно установлено образование в лимфоидной ткани, трахее, легних

снсщньчвснйх антител при аэрозоныюй ваящщад»;, » то время пан при подвозной введении вакцины защита от аэрогенного заиз--кеьия не развивается.

Менее изучены неспзцпомческпе ыеханизш местной защиты.. их взаимодействие с центральными органа»! иммунитета и специфическими защитными реакциями.

Проведенные нами исследования указывает на активное функционирование иеспецвфичесвях защитных механизмов с первого дня жизни цыплят с выраженными генетическими различиями в сроках развития и количественных характеристиках в ротоглотке, трахее, легких.

В отитах отмечалось, что различные раздражители, вводимые в дыхательные пути, могут вызывать как угнетение, так и стимуляцию местных механизмов неспецифичесиоп защиты в достаточно широком диапазоне, при этом наиболее выраженным гозбукдшгщпм эффектом сопровождается введение в дыхательные пути вакцинного антигена. Вознинает необходимость детального анализа этого феномена в оценне механизма защитного действия применяемых аэро-генпо вакцинных препаратов.

Устанавливается существенная зависимость конечного результата вакцинации от исходного состояния функциональной активности местных механизмов неспецифической защиты при введении вакцины.

При анализе материалов исследования вознинает представление как об автономности в функционировании неспецифнчесних защитных механизмов дыхательных путей, тан к о "специализации" 'защитных механизмов, находящихся в отдельных участках дыхательной системы. В связи с этим вознинает принципиальная возможность стимулирования, при наличии соответствующих показаний, отдельных зон (верхние дыхательные пути, легкие).

Такие приемы могут быть востребованы по' мере установления точного' места проникновения возбудителей в организм.

ВЫВОДИ

I. В процессе онтогенеза защитные механизм:! орпнов дыхания у кур претерпевают струнтурнпа и. функциональные изменения.

В пренатаяьном и раннем, иостнатзшгсн онтогенезе в с;шз::е-

тоМ обопочне верхних дыхательных путей увеличивается толщина собственной пластиннп, возрастает доля бокаловидных клеток, секреторная активность, уменьшается базофилия клетон.

Сурфантапт присутствует уже в пренатальноы периоде онтогенеза, а тифоидная инфильтрация, плазматические нлетки, макрофаги, ыиелиноподобные структуры - с 1-дневного возраста.

На поверхности навдой нлетки мерцательного эпителия у кур находится около 200 ресничек толщиной 0,3 * 0,03 кии- и длиной ■ 6 - 7*58 ± 0,6 ивь.

С возрастов пнев^атизация легкого увеличивается. В первую очередь увеличение диаметра бронхиолей наблюдается в периферических отделах: у висцеральной плевры и соединительнотканных стромальных перегородок, несколько позднее - у воздухоносных путей и в прпнорневых зонах.

У нур нросса П-46 бронхиоли крупные, неправильной формы, у кросса Беларусь-9 онругпой форт;, меньшего диаметра. '

У кур кросса П-46 более выракены, чем у аналогов кросса Бенарусь-9, клеточные реакции со стороны макрофагов и лимфоцитов, больше объем дыхания.

2. Цитограмма слизистых оболочек трахеи и ротоглотни у нли-нически здоровых кур с возрастом изменяется.

' У 1-дневных цыплят трахея не содержит адсорбирующие эпителиальные клетки и фагоцитирующие пейноциты.

В период физиологического созревания на слизистой оболоч-. не трахеи и ротоглотки возрастает количество фагоцитирующих лейкоцитов в 2,5 раза, а интенсивность фагоцитоза соответственно в 1,5 и 1,6 раза.

С началом яйцекладки число фагоцитирующих лейкоцитов спивается, однако интенсивность фагоцитоза остается высокой.

3. Лизосомэльно-натионкые белки гранулоцитов периферической нроаи участвуют в функционировании барьера слизистой оболочки органов дыхания уке на ранних стадиях онтогенеза нур. Количество их с возрастом увеличивается до периода физиологической зрелости и снижается с началом яйцекладки.

Лизосомаяьно-катионный тест выше у кур, в гистограмме которых преобладают гранулоциты с высоким содержанием катионных белков.

Лизоцим в трахеальном и. бронхиальном сенретах обнаруки-

вается у цыплят с первого дня иизни.

В бронхиальной секрете пизоцина в 1,3-1,7 раза больше, чем в трахеапьном.

Органы дыхания имеют автономную лиэоцимсенретирующую систему.

.. 5. Криоглобулины появляются в сыворотке крози и секретах дыхательных путей у цыплят с первого дня жизни, а иммунные комплексы в сыворотке крови с 1-дневного возраста, в секрете - с 30-дневного возраста. С возрастом количество иммунных комплексов и нриоглобулинов увеличивается.

Содержание иммунных комплексов и криоглобулннов в оыворот-не нрови в 2-5 раз больше, чем в трахеобронхиальном секрете.

6. При оценке резистентности органов дчхания необходимо учитывать нроссо„ые различия кур.

У цыплят кросса П-46 отмечено более раннее» чем у аналогов кросса Беларусь-9, созревание центральных иммунных органов, что обеспечивает .функциональную активность Т- и В-лимфоцитов, вырашшуи бактерицидную способность гранулоцитов, более раннее появление лимфоцитов и макрофагов в слизистой трахеи, а также большее содержание в трахеобронхиальном секрете у них лизоцима, иммунных комплексов а криоглобулннов.

7. Показатели резистентности изменяются под влиянием лекарственных веществ.

Аэрозольное введение сульфадимезина сопровождается т/муно-супрессивныи действием, появляющемся сразу после двунратной обработки нур препаратом в дозе 300 мг/м~\ В периферической ' крови снижается относительное и абсолютное количество Т-Лимфо-цитов соответственно на 38 и 32$, В-лпмфоцитов - _на 40,8 и 26,3$. В цитограмме трахеи отмечено увеличение на 21,4$ числа эпителиальных клеток и одновременно снижение их адсорбционной способности, а танке фагоцитарной активности лейкоцитов.

Двунратная обработка кур левомицетином в дозе 210 мг/м3 нормализует местную и общую неспецифическую резистентность кур • как в первый день после применения, тан и через неделю. Ка слизистой оболочке трахеи увеличивается па 18,6-46,3$ количество эпителиальных клеток, адсорбирующих микроорганизмы, на 23,1$ интенсивность адсорбции и на 20$ фагоцитарная активность лейкоцитов. Возрастает на' 5,5-10$ лизосомапьно-казиошиШ тест гра-

кулоцитоз, на 22,1^ активность лпэоцима, олпчестьо Т- и В-лик-фоцитов соответственно на 53,8 и 49,4/5.

8. Аэрозольная ванцинация против нъюнарлсной болезни вызывает различную иммунологическую реакцию организма в зависимости от уровня резистентности дыхательных путей. У цыплят с высокой резистентностью в крови ь трахеобронхизльном сенрете увеличивается концентрация лизоцпмв на 30,6-31%, на слизистой оболочке возрастает в 2 раза количество фагоцитирующих лейкоцитов, фагоцитарное число, а танке интенсивность адсорбции эпителиальным!: нлеткаыи. У цыплят с низной резистентностью в крови уменьшается на 20,9" количество циркулирующих иммунных комплексов, . на слизистой оболочке трахеи снижается на 25,6$ число адсорбирующих эпителиальных нлетон и интенсивность адсорбции, а танке количество фагоцитирующих г.ейноцптов и секреторного лизоцима соответственно на 40,9^ и 14,5/5; при этом сохранность поголовья снижается в 2 раза.

9. После аэрозольной вакцинации в слизистой оболочке трахеи у цыплят кросса П-46 количество манросагов резко увеличивается, в то время как у цыплят кросса Беларусь-9 они лишь появляются. Происходит инфильтрация стенки трахеи ликфоидныыи элементами и плазматическими нлетками. На внутренней поверхности' слизисюй оболочки парабронхов и в просвете бронхиолей отмечаются макрофаги и лимфоциты, количество которых больше у цыплят кросса П-46. После аэрозольной вакцинации в паренхиме фаб-рициевой сумки п тимуса прочсходит пональное разрежение, связанное с интенсивным выбросом лимфоцитов в кровоносное русло, более выраженное у цыплят нросса П-46.

10. Аэрозоли микровита А и йодполиызра стимулируют местную и общую резистентность организма.

Однократная аэрозольная обработка нур микровитом А в дозе 50 мг/м3 повышает в крови содержание витамина { на 21,1-31,4?», количество Т- и В-нимфоцитов соответственно на 21,9 и 52,55?, в трахеобронхиальном сенрете количество лизошша на 5,3-7,3%; на слизистой поверхности трахеи возрастает в 3,1 раза число лейкоцитов, фагоцитирующих микроорганизмы, а танке интенсивность фагоцитоза и адсорбции в 1,6-1,8 раза.

Однократная аэрозольная обработка кур йодполимером в ,дозе 130 мг/м3 повышает лязосомально-катионный тест граь'улоцитов.на

9,3$, количество Т- и В-лицфоцитов на 13,9-24,4$, секреторный лизоцим на 9,4$.

. При аэрозольном введении микроэлементов устанавливается их депонирование в легких с возрастанием концентрации на 7 день после обработки в 1,4-3,1 раза, что определяет целесообразность аэрозольного применения стимулирующих веществ.

II. Аэрозольная вакцинация против нъюнаслской болезни, проводимая после предварительно!: стимуляции резистентности органов дыхания микровитом А и йодполимером соответственно га 3 и 7 дней до иммунизации, приводит н активизации г;:гтасолсобр^с;а-ния; при этом увеличивается на 1-22,1% яйцепосность и на 3-7,2$ сохранность кур.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ НАУКИ И ПРОИЗВОДСТВА

1. Исследования резистентности дыхательных путей необходимо включать в систему техногюгпчесного контроля птицеводческих предприятий.

2. Плановые исследования резистентности -дыхательной системы следует проводить по периодам роста и продуктивности птицы, а танае в связи с проведением лечебнс-профилантических мероприятий.

3. Для .характеристики резистентности дыхательных путей у кур в производственных условиях следует использовать следующие тесты: цитограмму слизистой ооолочни трахеи, лизосомально-на-тионный тест граиулоцитов-, лизоцим, иммунные комплексы и-врио-глобулины в трахеобронхпакьном секрете.

4. Проводить селекцию кур по резистентности органов дыхания. ■

5. При проведении аэрозольной вакцинации необходимо учитывать исходное состояние резистентности дыхательных путей.

6. Для повышения местной и общей резистентности кур рекомендуем применять аэрозоли иинровита А в дозе 50 иг/м и йод-полимера в дозе 130 мг/м'.

7. Для активизации антителообрадования против вируса нъю-наслрной болезни следует применять ыинровит А за 3 дня, а йод-полимер за 7 .дней до'аэрозольной вакцинации нур.

Список работ, опубликованных по хеш диссертации

1. Алексеева С.Л. Местный иммунитет и его роль в специфической профилактике // Технология производства продуктов производства: Гаквузов. сб. науч. тр. /Кишинев, с.-х. ии-т. -Кишинев, 1989. - С.83-84.

2. Алексеева С.А. Изменения цитограмыы слизистой оболочки . ротоглотки и трахеи у кур // Комплексная система вет; мероприятий в птицеводстве - резерв повышения эффективности производства: Гез. донл. Всес. научно-произ. нонф. - Ленинград, 1989. -C.IOO.

3. Алексеева С.А. Влияние противоминробных средств на иммунную систему и местные факторы защиты кур // Внедрение достижений науки и передового опыта в агропромышленном комплексе Ивановской области: Тез. докл. научно-правтич. нонф. - Иваново, 1990. - С.119.

4. Пушкррев Р.П., Алексеева С.А., ГлухоЕ Я.Н., Корнева Г.В. Концепция местного иммунитета в влиниве внутренних незаразных.' болезней // Актуальные проблемы ветеринарной зоотехнической ■ науки в интенсификации животноводства: Материалы Всес. науч. конф. - М., 1990. - С.24-26.

5. Алексеева С.А. Морфологические особенности трахеи г' онтогенезе нур разных кроссов // Лечение и профипаитииа внутрен-. них незаразных болезней с.х. кивотных: Неквуз. сб. науч. тр. / Московская вет. анадемня. - Москва, 1991. - С.80-82.

6. Алексеева С.А. Местная защита дыхательных путей у нур в. норме и при острых респираторных заболеваниях // Лечение и профилактика внутренних незаразных болезней с.х. кивотных: Мехвуз. сб. науч. тр. / Московская Бет. анадемия. - Москва, 1991. -

С.82-84. ' . .

7. Алексеева С.А. Стимуляция защитных функций дыхательных, путей у нур //'Внедрение досишений пауки .и передового опыта в AI1K Ивановской области: '1'ез. докл. паучко-лрактич. нонф. - .Иваново, 1991. - С.95.

8. Алексеева С.А. Возрастные изменения местной защиты.дыхательных путай у кур // Ветеринария. - 1992. - № 2. - С.30.

9. Алексеева O.A. Методические рекомендации по диагностике и стимуляции резистентности дыхательных путей у кур в промышленном птицеводстве. - Иваново, 1232. - 17 с.

10. Алексеева С.Л. Лизосомально-натионный тест rpanynoi;i-тов трахеи у кур в онтогенезе // Индивидуальное развитие и профилактика Сопезней с.х. животных: Мегсвуз, cö. ¡шуч. тр. /- Московская вет. академия. - !«'осква, 1992. - С.89-91.

11. Алексеева С.А.. Резистентность кур нроссов IMG и Беларусью и Птицеводство. - 1992. - fc 7. - С.24-25.

12. Алексеева O.A. Контроль резистентности кур б промышленном птицеводстве // Биологические приемы повышения продуктивности сельскохозяйственной птицы: Cd. науч. тр. / Московская ват. академия. - Москва, 1992. - С.52-53.

13. Алексеева С.А. Влияние песпецпф'лческ'лх ш.луноспшукято-ров на местный иммунитет и продуктивность кур // Бкологичесние приемы повышения продуктивности сельскохозяйетвеш'ой птицы: Сб. науч. тр. / Цосновсная нет. академия. - Москва, 1992. - С.53-56.

Работа выполнена на кафедре внутренних незаразных болезней, хирургии и акушерства Ивановского сельскохозяйственного института.

Научный консультант - доктор ветеринарных наук!

профессор Р.П.1Ш1КАРЁВ

Официальные оппоненты: доктор ветеринарнъг наук, профессор Н.М.АЛТУХОВ; доктор ветеринарных наук, профессор Б.Ф.БЕССАРАБОВ; доктор медицинских наук, профессор А.М.ЗЕМСКОВ.

Ведущее.предприятие - Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт птииеводства.

Защита состоится "_" _1993 г. в _часов _

на заседании специализированного совета Д.020.65.02 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии по адресу: 394087, г.Воронеж,

ул.Ломоносова, 114 б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии.

Автореферат разослан !'_"_ 1993 г.

Учёный секретарь специализированного совета, кандидат'ветеринарных наук •

, М.Н.АРГУНОВ

Ротапринт. Подписано к печати 24.05.93г.Формат бумаги 60xfi4 1/16. Леч.л. 2,0. Тира" 100 э.чз« Заказ 1566/р.

Типография ГУКНК, 153025, г.Иваново, ул.Ермака, 41.