Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.08) на тему:Разработка способов обезвреживания кормов, пораженных фузариотоксинами (экспериментальные исследования Т-2 токсином и токсинообразующим микромицетом Fusarium aporotrichiella)

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СООР И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ ЛЕНИНГРАДСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

На Правах рукопяся

АКИЛ М7ХАМЕД ШАРИФ' ХЕДИР

уда 1619614.95:616.992.288! 615.9-09

РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ ОБЕЗВРЕЖИВАНИЯ КОШОВ, ПОРАЖЕННЫХ ФУЗАРЙОТОКСИНАМИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНШ С Т-2 ТОКСИНОМ И ТОКСИНООБРДЗУЩИМ МИКРОМЩЕТОМ Fusarium sporotrichiella )

16.00.08 - гигяэна свльсйохозяймвенннх змвотншс (зйогйгаена)

АвторЗферат дяссзртацяа на соискание ученой степени кандидата ветзршшрних наук

Санкт - Петербург, 1991

Работа выполнена на кафедре гигиены сельскохозяйственных

животных Ленинградского ветеринарного института.

Научные руководители: доктор ветеринарных наук,

профессор Кузнецов А.Ф* доктор ветеринарных наук, профессор Буянов А. А.

Официальные оппоненты; доктор ветеранарних наук,

профэоаор Родин В>И, кандадаг ветерякарных на ¿-к, доцент Лужков А.Д*

Ведущее учрездение - Всесоюзный научно-исследовательский

ветеринарный институт птицеводства

Защита диосертащш состоятся " аекм&^У 1ЭЭ1 года в часов на заседания спешалнйфованного совета

К 120.20.02 в Ленинградском ветеринарном институте. Адрес : 196034, Санкт-Петербург, Московский пр., 112.

О диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского ветеринарного института.

Автореферат разослан » 5 " .Я 1991 года

Ученый секретарь специализированного совета

Сафронов Е.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность теин. В условиях современного птицеводства, особую, главную роль играет обеспечение поголовья физиологически полноценными кормами, свободными от каких-либо токсических веществ, в том числе от микотокеинов. При скармливании кормов, содержащих мякотоксина, у птицы развиваются патологии, возникают мйкотоксикозы, основное значение которых определяется лишним расходом корма, снижением продуктивности, естественной резистентности и иммунного состояния стада, увеличением.отхода. К числу наиболее опасных для практики групп микотокеинов отно-сятоя фузариогоясшш, вырабатываемые грибами рода Fuoarium , секции Sporotrichielia , и, отдельно, микотокоин Т-2 (Сарквсов А.Х. и др., 1948 а, б, с; Квашнина B.C., Курманов ¡i.A., 1967; БилаС В.П., 197?} Тутельян В.А., Кравченко Л.В., 1985; Kuanet-sov А,Р. et al. . , 1991}.

Зажным уоловаем для предупреждения микотоксиказоз является детоксикация кормов.

Несмотря на то, что в последние годи проведены значительные исследования по изучению микотокеинов и микотоксякоаов, профилактика последних м, в частности, вопросы обезвреживания кормов от микотокеинов остаются практически нерешенными. В нашей стране не проводили исследований по применению алюмосиликат тов или цеолитов по деградации микотокеинов в кормах, а по доступным нам сведениям, даже в зарубежной литературе нет материалов по обезвреживанию корлов от микотокеинов за счет применения природных минеров-сорбентов - алюмосиликатов.

Настоящая работа является составной частью исследований, выполненных в Ленинградском ветеринарном институте на кафедра зоогигиены (№ государственной регистрации 01860070329).

Цель а задачи исследований. Исходя из вышеизложенного, основной целью наших исследований была апробация некоторых химических веществ» а том числе алюмосиликатов, по деградации ток-' сичных кормов, загрязненных фузариотоксином и Т-2 токсином.,

В задачу наших исследований входило:

I. Выяснить влияние некоторых химических веществ (сульфат меди, аммония гидроокекд, полягексаметялзагуаяиднн гвдрохлорид, хлорид кобальта, борная кислота) на рост, развитие и токешооб-

разевание.

2. Проверять на белых мышах биологические действия токсичного корма, обработанного сульфатом меди и полигексаметялеи-гуакдин гидрохлоридом.1

3. Изучить эффективность введения в обучный рацион мышам различных доз вермикулита а перлита.

4. Определить дозы и эффективность алюмосиликатов (вермикулит, кизельгур, пегасин, перлит) для детоксикации кормов, загрязненных метаболитами гриба Р. ярого^сМеПа и Т-2 токсина, в:опытах на мышах я цыплятах.

5. Изучать состояние продуктивности, естественной резкетвн-■ ткоста организма подопытных животных яри введении в рацион ма-

котоксинов и минеральных сорбентов-алюмосиликатов.

Научная новизна. Впервые проведены исследования по использованию некоторых минеральных природных сорбентов для детоксикации кормов, загрязненных метаболитами гриба I1. зрого-тсЫе!-1а и Т-2 токсином (Подана заявка № 4940357/15 (44781) на авторское свидетельство,'зарегистрировано 22 мая 1991 г.).

Впервые изучено влияние загрязненного кикотоксинамй корма и обработанного' алюмосиликатами, на клиническое состояние, продуктивность и естественную резистентность организма мышей и цыплят. Установлена зависимость дозы введения алюмосиликата в кош на его способность к детоксикации.

Впервые изучены с помощь» электронной микроскопии ультраструктурные изменения в строении внутренних органов при введенш животным алюмосиликатов.

Определены оптимальные дозы »ведения алюмосиликатов для детоксикации кормов, загрязненных фузариотоксиНами4

Разработаны теоретические предпосылки использования алюмосиликатов для детоксикации кормой и профилактики микотоксикозов.

Практическая значимость. На основании проведенных исследований предложен достаточно эффекМеный детоксикант-сорбент -вермикулит, который обеспечивает коррекцию корма, загрязненного фузариотсксинами<

Разработаны дозы его введения для детоксикации кормов в рационы цыплятам*'Получены данные о клиническом и патологоанатоми-чоском проявлении фузариотокейкоза, в том числе Т~2 токсикоза у цыплят,.д шшей и ири введении детоксикантов-сорбентов.

Введение алюмосиликата -"вермикулита и корма (комбикорма)

гмз.чоляег обеспечить увеличение продуктивности, укрепггоняе резистентности я довнпенлэ сохранности яявотянх.

Материал использован в учебном пранааса ветеринарном факультете я ФПК а Ленинградском ветаряяарнсм яяотптуте,

Апробация рзАотц. Основные пояогенпя диссертация язложэян на научных конференциях ярофзссорсяо-прзлодаяатвльокого состава, научных сотрудников я аспирантов Ленинградского ввтврянарно-го института в 1990-91 гг., на Л1 Международной кснгрзосо по зоогйгиеке я ЛейпИйгз (ззгуст, 1951 г.) я на П Международном микологическом сяшюзауме в Ленинграда (октябрь 1991 г.).

По материалам дясоертаоди оаубликавайо. 4 статьи.

Осковнвз положзняя, вшиоеишб на защиту.

- возможность введения определении*: доз некоторых минеральных сарбзитоя в кориа для белкх мышей я цЬпяят;

- обезврегсивакщяе свойства природой* шшералоа-сорЗентоз по отнопешш фузарязтоксянов и Т-2 токсина;

- улучшений клдяяческого заатаяняя и повииегше бстестлея-йоЗ резястентностя организма мыкей я цыпяят при скаралязааид токсического корма с мянврелвним сорбентом;

- воздействие фузаряотокейноя (в том чисте 1-2 токсина) и сорбентов яа клеточнае я еуйяЛэТочйые структура внутренних органов у цыйтят»

Структура а обьёи тбоЩ, Материалы длесергьшш взлох-энн на 230 страницах йащяйошшяого тойота, в том чйсле; введение

страниц, осЗзор лйТора^урк 41? страяан, собственные веследова-ная 64 страяяцы, обсуждения, ййэодЬ! я йредлоязкил 26 страниц. Сяйсок использованной литература содержит 91 отечественных я 168 йностраняых работ, Диссертация ялдустряроЁ.зна 32- таблгтамг, 38 рйс.уккагла, 21 фотографией 4 45 пряложеняем.

СОБСТВЕННЫЕ ЙССЛЗДОВАНИЯ Материал й метода исследойайий

Работа выполнена в течение 1983-1991 гг. на кафедре" зоогг-гяены Ленинградского ветеранарного яясгятутэ. В работе псябяь-зо-валп токсйяоойразугаций вТамм ридцг11ш ¡*рого<;г1с?г1«11з а Т-2 токсин, полученние в институте мякробяологая я вирусология АН СССР.

В качестве детоксикантой аопользоваля: сернсклсдую медь, аммония гядрооксид, борнуя клслоту, полагексаметялгуанндкн гад-

рохлорад (ПЩГГХ), коваль? сернокислый, кабалит хлористый, вермикулит, кизельгур, погасил, перлит,

. Опыты дрсаодили на питательных средах, на белых ыцшах, не цыплятах-бройлерах и петушках, о использованием зерна - пшеницы и комбикорма ПК-4.

Программа исследований была разделана на 6 втадов, которые приведена в схема исследований (таблица I).

Таблица I. Схема наследований

I серия опытов - влияние сернокислой меда, амлоиия гидрооксида , борной кислота, ШЖТХ, кобальта сернокислого и хлорида на рост, развитие и тсксинообразование F» sporotrich-teiiE.

Ц серия опытов - детоксикация гленицы, пораженкой P. spo-rotrichieiia обработанной сульфатом кеди и ¡ДЖТХ (алщентар-зые пробы на белых кашах).

Ш серия опытов - детоксикация корма, загрязненного Т-2 токсинам, о использованием алюмосиликатов (алиментарные пробы на белых мышах).

IV серия опытов - детоксикация зерна, пораженного р. вр0-rotrichieiia с использованием алюмосиликатов (алиментарные пробы на бройлерах),

V серия опытов - детоксикация комбикорма, зараженного npoz'otri.cihieila с использованием алюмосиликатов (опыты на петушках).

VI серая опытов - детоксикация комбикорма, загрязненного Т-2 токсином» о использованием алюмосиликатов (опиты на бройлерах) ..

Лабораторных животных содержали в клетках в виварии института, кормили, Поили согласно существующим требованиям.

Использовали общепринятые или рекомендованные зооГигяени-ческие, микотоксикологиче'ские^ клинические, гематологические, патологоанатомические методы исследований.

Статистическую обработку материалов проводили на -компьютере ( computer ES 1841, program etat graphics ) if no il.B. Садовскому (1975) и на ЭВМ ДВК-З на языке Бейсик, частично на ЭВМ "БЗ-34", критерии достоверности определяли по. таблице Сты> дента.

■ РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

В парвой сгрии опытов наш была Проведаны испытания: суль-

фата меди, аммония глдрооксида, борной ядолотк, ПГМГТХ, кобальта сернокислого а хлористого На способйпсть их задерживать рост и токсинообразование гриба Риваг1чи ярогсНПсМеНа. ■ Эти вещества испытали в концентрациях! .0,025/?, 0,05%, 0,15$ и 0,255.

Результаты линейного роста гриба обрабатывали по формула . Эббога для определения' процента тсрможекйя роотв*. Л» - ^п Г = ' 100' №

Т - % задержки роста,

Пй - диаметр колонии в кснтроле, см,

й0 - диаметр колоний в опыте, см.

Эти материала представлены-в таблице 2. Таблица 2. Торможение роста колоний гриба у %

Концентрация- веществ^ в агаре Чайека, в %

Химическое вещество -----------,—--—■----г-----------:----------

0,026 0,05 0,15 0,25

Сульфат меди 50,00 64,11 85,03 ор-4

Аммония гидрооксид . 38,62 '48,23 ■ 67,05 74,11

Борная кислота 34,11 46,23 69,41 74,11

йшггх' . 60,00 ор ' ор ор

Кобальт сернокислый 50,68 . 55,29 • 85,03 ор

Кобальт хлористый 50,66 54,11 85,03 ■ ор

ОР5* - Ьтсутствиё роста

Наличие токсинообразайанйя в мицелия Грийа подтверждалось пробой на парамециях. Во всех случаях роста гриба было подтверждено я токсинообразование.

Эти исследования показали, что самымл эффективными лнгябв-торами роста г. врого-ьксЦеПя были сульфат меди, ПГМТХ, кобальт сернокислый и хлористый. Причем окончательный рост гриба по всей чашке Петри в контроле заканчивался на пятые сутки, при концентрации сульфата меди - 0,025^ - на седьмые сутки, а при концентрации 0,05 и 0,15,1 - даже в течение 15 суток рост на достигал показателей контроля, а концентрация 0,25$ полностью подавляла рост гриба.

При применении аммония 'Гидрооксвда в концентрации 0',025$ окончание роста гриба было на шестые сутки,а при концентрации 0,05, 0,15, 0,25$ - соответственно,на 10-е, 13-е л 14-е сутки.

в

-Заполнение мздэллем vpada всей чашка Петре при использовании борной каоло'1-ц в концйнтращш 0,025 , 0,05 , 0,15 и 0,25,? происходило на ?, 10 и 14 сутки.

Для ПШГГХ в разведении 0,025% атог показатель составлял девятые сутки, а для кобальта сернокислого и хлористого в разведении Q,02'¿% - седьмые иутза, а в-разведении 0,05 a 0,15% -развитие колоний по всей чашке на завврзшлооь ешё и на 15-е оут-гл.

Учитывая и подтвэрадвшша наяа фунгвдшюв дейсгЕйб сульфата меда в следующем сайте мы проведи исследование по обеззара-'кшгашш зерна сернокислой медью и скаршшваняя этого зерна бе-ш «даам.Опитная партия верна-военши была проавтокдавдровапа я а неё внесена культура г. oporatrxcMeiia а раствором сульфата ыгда*

• Earn раствор вносшш в доб& 30 мл на 100 v верна {3%-иие растворы), то роста Гриба на отвечала в течение 30 суток, а осла 20 мл На 100 г i то рос? Гриба был на шазнаце. Батем оти пробы кормов были скоплены мышам» Этот эксперимент показал, что ааракениай корм (без обработки сульХатои кзди) способствовал енв жени» массы белых мышей, их гибель наступала на 6-8 сутки, а зер но зарзяенное, но обработанное сульфатом меди, вызывало гибель мышей на 7-9 сутки. Причем в группах, где скармливали доброкачественное верно, но с добавлением растворов сернокислой меди,масса мы;¡¡ой понижалась на 9-12$, 'по сравнении с контролем, которым не вводила медный купорос*

Аналогичные результаты получены а с применением ПШГГХ.

Таким образам, сульфат меди и ШИП в разведении способном задерживать рост п развитие p. sporotrj,chieiin на пшенице, ь коночном итоге угнетают рост и развитие белах мышей.

Детсксикация корков, загрязненных Т-2 токсином при использовании природных'алюмосиликатов

Дальнейшие опыты по детокеш'.ацик кормов была проведены с алюмосиликатами. В опытах на белах мышах кассой 29,01...23,98 г иЬяользовзлй вермикулит а перлит, вводя их в рацион в количество 0,1$, 0,3,?, 0,5?. 2,0| я 2,0,?. Было сформировано 22 группа: первая - контрольная, которой скармливала кор.! без сорбента в ■токсина Т-2; вторая - тоже контрольная, но в корм этой грушш топит Т-2 токсин в дозе 20 ttr/кг корма. 3, 4, 5, 6, 7-е группы вермикулитом, без токсина; В, 9, 10, II и 12 - с ьермц-

кудитом я с гокоаном; 13, 14, 15, 16 и 17 - о перлитом без ток-сана; 18, 19, 20, 21 и 22 - о перлитом л о токсином. Продолжительность опита составила 2 надели. Результаты исследований приведены а таблице 3.

Сравнивая I и 2 группы можно отметить, что токсин Т-2 негативно сказывался на приросте жляой масси, относительной массе селезёнки и тимуса, количестве эритроцитов, лейкоцитов, в том числе лимфоцитов.

Среда группы мышей (3-7), получаэдщх вермикулит без токсина, лучший прирост бал а 5-й группе, где оорбзнт вводили в количестве 0,5$. ,

В группах (8-12) в их корш внооиля вермикулит и токсин, лучшие показатели роста получены в группе* где вермикулит был равен 0,3.1.

При использовании перлита без токсина лучшие данные по массе тела отмечены в группе 14, где этот сорбент вводили в дозе'

Действие перлита в присутствии токсина более аффектяЕНО было в 19-й группе, где процент введения перлите составил 0,3%.

Данные зтого опыта показали;, что высокие дозы вермикулита я перлита (1% и 2%) оказывали не позитивное влияние, а оряцате-льное,

Второй опыт был проведен на молодых белых мышах массой > 22,20...24,10 г, продолжительностью 2 недели. Испытывали обеззараживающее действие йермикулй^а.казельгура и перлита в дозах 0,1$, 0,3$ и 0,5/1. Было сформировано II групп, первая - контрольная, которую кормили без Токсина и сорбента,по общепринятому рациону, второй груше в рацион вводили Т-2 токсин - 20 мг/кг корма, 3, 4 и 5 группам - токсин и вермикулит в дозах:. 0,1$, 0,3$ и 0,5/?; 6, 7 и 8 Группам - Токсин И кизельгур (0Д'#, 0,3$ а ' 0,5$){ 9, 10 и II группам - токсин а перлит (0,1$; 0,3|"и 0,5$).

У молодых мышей, которым добавляли токсин Т-2, наблюдали более выраженные симптомы токсикоза: отказ от корма, понос,взъе-рошениость, дерматиты лап, хвоста и кожи вокруг рта, парезй задних конечностей.

Показатели прироота, количества эритроцитов, лейкоцитов, а также относительная масса селезёнки и тимуса представлены в таблице 4.

Таблица 3* Показателя роста е развития бедах мышей

1 | ГРУ-пин

2 .3

4

5

6

■ 7 8 •9 10

11

12

13

14

15

16 17 16 19. 20 21 22

Прирост живой массы, г

Эрнтро~ циты 12,

ЛйЩй-.-,

4,07*0,32 9,81*0,49

2,19*0,25 2,45*0,30 2,99-0,26 - 3,91*0,44 2,44-0,58 . 1,50*0,30 2,81*0,20 ББ3,97*0,ЗЭ , 2,16*0,22 1 2¿24*0,28 1,02*0,29 2,00*0,21 ГГ3,51*0,38 2,63*0,1? 2,26*0,29 1,33*0,33 2,12*0,41 2,34*0,26 . 2,22*0,10 ■2,05*0,25 0,35*0,14

61*0,58 50*0,68 80*0,77 24*0,85 09*0,ОБ 24*0,74 43*0,77 69*0,91 74*1,04

Лейкоциты 109/л •

"1^70*0144 Е6,70*0,20 8,03*0,40 8,17*0,08 8,65*0,12 ■8,33*0,18 7,99*0,43 ББ8,02*0,14 БЕ7,93*0,20 Б%, 90*0,21 7,05*0,18 6,20*0,41 8,12*0,29 8,16*0,24 8,16*0,28 7,68*0,61

Относительная масса г/100 г массы тела

64*0,64 41*0,49 40*0,52 21*0,69 16*0,84 45*0,61 01*0,61 52*0;58 ББ7,92*0,01 89*0,8? ББ7,85*0,06 23*0,74 44*0,73 57*0,92

7,62*0,13

7,35-0,18 6,34*0,64 6,38*0,15

селезёнка___

5,97*0,02 Б0,68*0,06 0,93*0,08 0,88*0,03 0,89*0,04 0,63*0,05 0,79*0,09 . 0,88*0,07 0,92*0,06 0,80*0,06 0,82*0,0'? ' 0,74*0,02 0,87*0,04 0,92*0,03 0,83*0,06 0,66*0,06 0,87*0,05 ^О, 90*0,04 0,80*0,05 0,60*0,05 0,82*0,06 О,74*0406

___тимус____

5Тё??оТо5

£0,54*0,07 0,81*0,05 0,78*0,02 0,78*0,04 0,76*0,09 0,68*0,06 ^0,74*0,02 П0,78*0,02 0,73*0,03 0,72*0,08 0,62*0,05 0,74*0,77 0,76*0,02 0,70*0,09 0,73*0,03 0,60*0,04 0,7'3*0,06 £)»70±0,09 0,72*0,08 0,64*0,04 0,59*0,04

А <(0,01 В =Р<^0,02 Г =Р<^0,05 - по сравнению с 1-й группой А:Л=ЗР< 0,001 №44^01 ГГ=Р< 0,05 - по сравнению со 2й Группой

Срйвняйая прирост касса Тела мышей в иерьых двух грушах, "отвес" был у второй группы, в которой вводили токсин. Защетное действие сорбентов зависело от его ззида й количества. Лучлшм из сорбентрв бил йермикулит, а худшим - перлит. Эффективной дозой вермикулита была 0,3-0,51, б кигельГура - 0,3£,

Опыты на цыплятах-бройлерах и Детушках Б четвертой серии опытов зерно пшеницы заражали арого-tt-.tchl.ciia и после культивирования Гриба скармливали цыплятам-

Таблица 4, Показателя роста я развития у белых мышей (2-й опкт)

И Прирост ' Эрятро-' лейкоцйта ' Отяосятедьная масса,

гру- массн цитн е> г/100 г массы телэ

ппн *9Ла»г____________10 Д

1 3,60*0,48 9,16±0,22 9,52^0,12 0,95*0,02 0,80±0,С8

2 -0,10*0,10 8,48*0,19 . АС,64±0,24 %,64*0,24 Е0,53^0,08"

3 0,2040,12 6,60*0,21 АА8,94^0,14 ВБ0,81*0,05 0,66*0,06

4 ББ1,30*0,18 8,80*0,13 ААЭ,30*0,20 ВВ0,92*0,О? 0,74*0,09

5 1,80*0,28 8,70*0,20 9,10*0,0? ВВ0,85*0,03 0,73*0,05

6 -1,49*0,38 8,40-0,17 АД8,90*0,19 ВВ0,87*0,04 ^0,74*0,06

7 ББ1,43*0,19 8,70-0,07 АА9,20*0,II ВБ0,84*0,06 ^О,74±0,07 В 0,89*0,28 8,52*0,18 8(В8*0,21 0,68*0,03 0,53±0,09 9 0,02*0,19 8,70*0,21 ББЭ«88*0,25 БВи,66-^0,05 0,61*0,08

10 -0,18*0,08 8,50*0,29 ББ8,80*0,22 0,58*0,07 0,47*0,04

11 -2,33*0,74 8,46*0,12 ББ8,В8*0Д7 0,54*0,08 0,42*0,07

с 1-Я группой

0,001 БЕ=Р<0,01 ВВ=Р<^0|0Й ГГ=Р<0,05 - ао сравнению

со 2-Я группой

бройлерам 2-х-недельного возраста в течение 10 дней. Было сформировано 14 груЬп по 5 голой й каждой* Первая группа бь'ла конт-' рольной, рациой её состоял из 100$ Доброкачественного.зерна (ДЗ)* вторая - Тоже койТрояь, йо её рацион был на 1ЭД? из зараженного зерна (ЭЗ), 3-14 группы - ойнтнаё, рацион которых состоял иэ 1005? 53, но им дополнительно в корл вводили сорбенты: 3-Й группе - Ц вермикулита, 4-й - 5%\ 5-Й - Щ? вермикулита; 6-й - 1% кизельгура» 7-6 - и 8-Й - 10$; 9-Й - 1% пегасина, 10-й - 5% я П-Й - 10$; 12-й - 1% перлита; 13-Е ~ 5% а 14-й -10% перлита. ' •

Показатели потребления корма» расхода я среднесуточные приросты массы тела представлены в таблице 5. "

Лучшие среднесуточные приросты жийой массы цыплят были- в : третьей и четвертой группах, где вермикулит добавляла в дозе 1% и 5%. Расход корма на I г прироста живой мзссЬ! в этих группах' составил 4,32 и 4,37 г, то есть бил наименьшим, даже по сравнению с первой контрольной группой.

/

Таблица 5. Расход кормов и среднисуточные приросты живой массы цыплят-бройлеров •

№ группы

1

2 3

4! ' 5 .2 '

7

8 •Э

•• 10 И 12

13

14

! Потребление коргла аа 10 ____суток

300 152 303 315 330 290

302 " 335

310 ' 308

303 310 330

304

Средне оут очный прирост, г

Расход корма, г/1 г прироста живой массы

6,62

АА?,00 АА7,20

аа

д

бб,

бб!

аа,

АА,

6,70 6,20 5,40 '6,00 6,40 5,70

%,42 АА5,70 ЛА6,00 М5,40

¿0,448 + 0,331 + Р. 273 1 0,845 ± 0,713 Л 0,573 + 0,533 + 0,644 + 0,673 + 0,406 + 0,204 + 0,773 + 0,689 ± 0,685

4,54 10,85 4,32

4.37

4.38 4,Б0 5,5Э 6,10 4,84 5,40 5,67 5,25 5,00 5,62

А Р<^0,001 Б =Р</0,01 В =Р<^Ь,02 Г =Р<^0,05 - по сравнению

с 1-й группой

АА=Р <^0,001 ЕБ=Р <^0,01 БВ=Р-Х0»02 ГГ=Р <^0,05 - по сравнению ' со 2-й группой

Относительная масса тимуса у цаплях второй группа было достоверно ниже, чем в первой, Причем отмечена достоверность увеличения массы тимуса в 3 и 4 грушах по сравнению со 2-й;

.В сроцессе опыта изучена относительная масса селезёнки,фаб-рициевой сумки, сердца, железистого и мышечного отделов желудка, зоба. Достоверность уменьшения массы железистого желудка зафик-сирор.аыа у. цыплят третьей и четвертой групп но сравнению со второй. Показатели эритроцитов, гемоглобина и общего бедка не яыели достоверной разницы мезду группами. Однако, количество лейкоцитов в 3, 4, 5 и 6-й групаах достоверно повышалось по сра ш12Нйю со второй группой. При изучений белкового спектра суммарное содержание глобулинов било наибольшим в третьей (1,74 г/л) и,четвертой (1,81 г/л) группах по сравнению со второй группой (1,21 г/л). Ото сьадетельствует, что в этих группах (3 и 4)

вермикулит в лозах 1$ и 5$ блокирует действие микотоксипа на икмунокомкетентные органы и тем оакым обеспечивает достаточно высокий уровень глобулинов.

Изучение лейкоформулы показало, что число лимфоцитов у цыплят 2-14 групп было ниже, чем в первой, которой токсичный корм не вводили в рацион. Действие сорбентов на показатели белой крови было разнообразное, но достоверной разницы не было обнаружено.

Оценивая результаты этого.опыта, считаем, что наилучшим защитным обезвреживающим эффектом у цыплят-бройлеров бач вермикулит в дозе 1% и 5$.

В пятой серии опытов изучали способность минеральных сорбентов для детоксикаши комбикорма, зараженного g. apurotrichiel-la и влияние его На организм петуожоЕ. Комбикорм ПК-4 был приготовлен на комбикормовом заводе по существуйте!' рецептуре. Опытная партия этого комбикорма была заражена aporotrtchiei-ia . Культивирование граба продолжалось 30 суток.

Эксперимент проводили на петушках линий "Янтарь-I" с 4 недель до 7-недэльного возраста. Было сформировано 6 групп по 5 голов в кавдой. Первая группа была контрольной, её рацйон состоял на 100"' из доброкачественного комбикорма (ДК), вторая - на 50$ из Ж и 50? зараженного комбикорма (ЗК); третья - на 505? из ДК, 47$ ЗК + вермикулит,3$; четвертая -'50$ ДК +47$ ЗК н- кизельгур,3$; пятая - 50$ ДК + 47$ ЗК 4- пегасин,3$; шестая -'50$ ДК + 47$ ЗК + перлит,3$4 Наблюдения показали,' что падежа петушков'во время"опытов не было, но клиника фузариотоксикоза более ярко проявлялась во второй группе: отказ от корма, диаррея,плохое развитие пэра, взъерошенность» Процент поражения ротовой полости ф-зариотоксинами во второй группе составил 40$, а.в 3-6 группах - по 20$. Расход корка (в г)на Ï г прироста живой массы тела за опытный период у петушков составил: в первой группе -2,69, во второй - 3,00, в третьей - 2,78, в четвертой - 2,82, в пятой - 2,93 и в шестой - 2,93.

Масса непотрошенной тушки была наибольшей в третьей груплз. Развитие оперения визуально и количественно было лучше также в третьей группе, в сравнении с группами; получавшими токсин.

У опытных петушков изучена относительная масса сэлеаёнки, сердца, железистого и мышечного желудка, печени, почзк, кисеч-ника, поджелудочной железы, а также количество эритроцитов,лейкоцитов, гемоглобина,гематокрит, неорганического фосфора,обиегс

белка и его фракции. Анализ всех данных позволил нам сделать заключение, что из всех испытанных нами природных минератов-сррбентов (опыты на комбикорме, зараженном фузариотоксинами) на петушках лучше всех проявил вермикулит в дозе 3%,

В шестой серии опытов также был использован комбикорм ПК-4, но в 'него вводили Т~2 токсин в дозе 8 мг/кг корма, Для опыта брали цыплят-бройлеров 14-дневного возраста- Было сформировано 17 групп по 5 Голов в каждой. Продолжительность опыта 3 недела.

' Первая группа была контрольной, её рацион состоял из комбикорма ПК--4, для второй и всех последующих Групп добавляли токсин Т-2 из расчета 8 мг на кг комбикорма, в 3, 4, 5 группах -добавляли вермикулит соответственно I, 5 и 10%> в 6, 7 и 8 группах - вермикулит добавляли йзямен комбикормав 9* 10 и II группах - к основнаыу рациону добавляли кизельгур (I, 5, 10$), в 12, 13 и 14 группах - использовали пегасин (I, 5, 1с$), в 15, 16, 17 группах -.перлит (I, 5, 10$),

Проявление Т-2 токсикоза было типичным для групп бройлеров, Получавших этот микотоксин^ Клинические и производственные показатели представлены в таблице 6.

Относительная масса печени,сердца,железистого и мышечного отделов желудка у цыплят 2-1? Групп не показывали значительной разницы по сравнению о первой группой, где токсина и сорбента не Добавляли. Но была заметна тенденция повышения относительной массы мышечного отдела желудка при увеличении дозы сорбентов.

Т-2 токсин в комбикорме сказывался на снижение относительной массы тимуса,селезёнки я фабрлцяевой сумки у цыплят 2-17 групп по сравнению с первой. Однако, введение сорбейтов влияло на увеличение массы тимуса по орайнению со второй группой.

'Введение сорбентов (вермикулит,кизельгур И пегасин) способствовало увеличению массы селезёнки по сравнению со второй группой, однако это не было отмечено в 6, 7, 8, 16 и 17 группах.

Добавки вермикулита и кизельгура ослабляли'негативные действия Т-2 токсина на массы фабрициевой сумки. ПеГасин, перлит или вермикулит (взамен корма) не обеспечивали защиту организма цыплят от действия' токсина.

Наличие Т-2 токсина в корме'приводило к лейкопении у подопытных цыплят. Введение Еермикулита,кизельгура,пегасина и перлите (только при дозе 1%) в токсичный корм способствовало нор-

мализаш-ш количества лейкоцитов у щадят. Таблица 6. Некоторые производственно-клинические показатели

у цыплят

№. Среднесуточ-гру- най прирост ппы массы тела» г

1

2 3 .4

5

6 7

8 ■ 9 10

11

12

13

14

15

16 17

31,07*1,86 Б20,38*1,05 ББ28,44*0,98

вв2 '

ЕВ0

ВВ24,82±0,63

'21,80-1,20 ББ27,90*0,78 ,12-0,74 Б20,26*0,70 _ Г25,63±С1,43ББ ®23,98-0,98 В22,51—1,05 Г25,42*0,87ВВ В23,47*0,73 Б22,42*0,95 Б24,55*1,16ББ В23,91*0,93 %,04*0,56

Расход к орла, г/г

прироста живой мае-

_сы______

~ 2/73~ 3,00

2.77 2,85

2.94 . 2,80 2,90 3,00

2.78 2,36

2.95

2.79 2,88 2,99 2,82 2,94 3,09

Эритроциты Лейкоциты 1013/л Ю9/Л

1 Гемоглобин г/л

2,37*0,01 2,25*0,01 ББ2,94*0,13 2,93*0,29 т 2,50*0,14 1Т2,78*0,19 2,44*0,11

>,30*0,06 2,31*0,26 2,30*0,25 2,11*0,14 2,38*0,08

_28,2* 1,98

ь15,90±0,70

вв2?,40*3,')1

М27,10*0,51

,26,50*2,67

24,90*1,02

А%, 30*1,14 БЕ,

. "23,60*1,53 ББ24,90*0,10 ББ25,60*1,74 ББ22,60*1,33 ^ЙЗ, 90*2,57 2,27*0,07^З, 50*2,50 2,27*0,01 ^22,40*2,30 2,29*0,16 ББ22,50*1,03 2,38*0,13 23,20*2,55 В2,14*0,08 22,60*2,97

26,60*1,41 25,40*1,47 26,00*2,88 25,20*0,08 24,60*2,37 23,80*2,22 24,40*1,93 24,00*1,61 24,40*1,16 11,39*0,17 11,77*0,15 12,83*0,05 11,40*0,05 11,66*0,19 12,49*0,06 12,82*0,14 11,10*0,80

А =Р <^0,001 Б =Р<^0,01 В =Р <^0,02 Г =Р</0,05 -по сравнения

с 1-й группой

АА =Р<^0,001 ЕБ=Р<^0,01 ВВ=Р<^0,02 ГГ=Р<^0,05 -по сравнении

со 2-й группой

Добавки вермикулита способствовали з(1ачитз/гьйому шзЕш.екию числа эритроцитов, которые уменьшались под действием Т--2 токсина. 7 кизельгура,пегасина и перлита этого эффекта мы не обнаруживали.

Нами не было обнаружено значительной разницы в показателях гемоглобина и гематокрлта у цыплят, получавших тоазачный корм и

бенгы по сравнению со второй группой, Положительное исключение показала третья группа,где вермикулит добавляли в дозе 1%.

Количество лимфоцитов в крови у цыплят,которых кормили токсичными кормами с сорбентами было выше по сравнению со второй группой.

Содержание базофилов зависело от дали введенш сорбента, чем больше его вводит;,тем больше базофилов. Заметно влияние перлита на базофиты.их количество увеличилось почти в 2 раза.

. Гистологические исследования подтвердили разнообразное влияние мякотоксша и сорбентов на морфологию внутренних органов. Цыплята,получавшие токсин Т-2,как без сорбентов,так и с ними,имели поражения ротовой полости,типичные для Т-2 токсикоза. Макроскопически эти поражения проявлялись в виде желтоватых бляшек, образующихся на верхнем и нижнем нёбе .языке .ч углах .клюва. При-,чем,у цыплят,получавших токсин без сорбента,развивались выраженные поражения ротовой полости, тяжесть последних оказалась значительно большей по сравнению с цыплятами, получавшими токсин с сорбентами. Но наилучшие результаты отмечены при добавлении вермикулита я кизельгура.

При исследовании тимуса цыплят второй группы (с токсином я без сорбента) были отмечены инволютивнне процессы,'выражающиеся уменьшением массы тимуса (Р<^0,001),размера долек,истончением и разрушением коркового вещества долек о множественными очагами исчезновения клеток^с начальными явлениями жировой инволюции долек, врастанием жировой клетчатки в дольки,а также расширением площади мозгового вещества. Микроскопическая картина тимуса цыплят-.бройлеров,получавших различные дозы алюмосиликатов,практически соответствовало таковой у контрольных животных (первая группа -без токсяна и без сорбентов),однако явления раэрыхления мозгового слоя долек-у первых не отмечали. Однако в группе животных,которым скармливали ьермккулят взамен корма до 10$ наблюдали начало инволюции тимусе, проявляющейся множеством дырчатых просветлений коры долек.

При гистологическом обследовании фабрициевой сумки цыплят, получавших токсин без сорбента,отмечала истончение коркового слоя долек и пикноз лимфоцитов мозгового слоя. При введении алюмосиликатов с токсином наблюдали неодинаковые изменения,начиная с размытости очертаний коркового и мозгового слоев долек и кончая оч^аговам истончением их корковой зоны.

Яри исследовании зоба цыплят второй группы было обнаружено, что эпителиальный пласт зоба был-неровным с заметиш глубоким очаговым некрозом эпателия,инфильтрацией поделизастого слоя лимфоцитами а псевдоэоэанофалами. Значительная часть поверхностного эпителия была десквагароваяа с признаками вакуольной дпетро-. фии цитоплазмы эиателиоцктоз,пикнозо;,; ядер к разрывом вакуолизи-роважшх клеток- При добавлении 1$ везикулита гистологическая картина зоба практически на отличалась от первой группа (контроль - без токсина я без сорбента). Увеличение дозы вермикулита до 5$ обусловливало проявление вакуолизации цитоплазмы отдельных зпителисци.тов слизистой ооолочки и явлений криошшшза клеток однослойного плоского эпителия. При- добавлении в кори 10$ вермикулита, 1-10$ пегасина а 1-10$ перлита - зти изменения сопровождались такне отеком подслизястого слоя.

Гистологическая картина железистого а мшнзчного отделов ке-лудка также была лучше в группах,где использовал« вермикулит в малых дозах.

Электронно-микроскопическими исследованиями тонкого кишечника у цыплят,получазаях гоксячннй норм без сорбента недтверддека различная степень поражения« Особенно ярко изменения ьврааенн я 12-пзрстной кишке: разрушение и даже полная атрофия микровороя-Пок.они короткие,заметно утолщенные,гликокалакс редуцировал или отсутствовал,Цитоплазма эритроцитов а значительной степени кануо-ляэаровяна,внутриклеточные органэллы плохо различит. Подобная атрофия я лязяс микроворсинок приводят к уменызешш поверхности всасывания слизистой оболочки,нарушению пищеварительной функция кишечника,а вакуолизация цитоплазмы эритроцитов я постепенному отмиранию клеток.

В тонкой и подвздошной кишках нарушйидя были несколько мэнь-' шэ выражены, однако носили сходна характер. '

Изменения в ультраструктуре слизистой оболочки тонкого кишечника группы цыплЯг»получававх токсин я 10$ вермикулита,характеризована следующими признаками: атроф-ия и ляпис мвкроворсинок, вакуолизация я десквамацяя эритроцитов,нарушение целостности оболочки иитохондрий, их вздутие.

Б группе цыплят,получавших токсин а 5% вермикулита,паюлогические изменения были выражены незначительно. Не било отмечено ультрзструнтурнкх изменений в стенке тонкого каьзчнйка цнплят, получаняих токсин а веркикулия з доге 1%. Макр'оворсишш упител«-

ального слоя тонкие,длинные,на поперечном срезе - окрух'лые,одинакового размера* Чётко выражен гликокаликс.органеллы клеток сохраняют свой строение.

Таким образом,данные гистоанализа и ультрамякроскопяческих исследований показали,что перспективным преператом,обеспечивающим защитный эффект у цыплят от микотоксина Т-2 является вермикулит в небольших дозах - 1-5$.

выводу

1. Химические вещества: сульфат меди, полигексаметиленгуа-нидингидрохлорид (ШЖТ1), борная кислота, аммония гидрохларид, сульфат и хлорид кобальта обладают фунгкцидным действием в отношении Риваг1ид араго1;г1с1г1е11а , Но эти фунгицидные дозы их введения в корм ойеэквают негативное действие на организм йод-опытных животных (белых мышей).

2. Природное минзрааы! вермикулит и перлит, введенные в корма для мышей, оказывают влияние на рост и развитие животных в зависимости от вида мийералэ и его количества.

Наиболее элективным для белых мышей былб использование вермикулита в дозах введения 0,5$ от общего рациона.

Введение перлита в дозах: 0,1) 0,3! 0<5} 1,0 и 2*0$ й рацион белым мышам способствовало сшмеЯию показателей роста и развития животных по сравнению с контрольной группой, в рацион которых не вводили дополнительно перлит.

3. Вермикулит При введений в Корм,еагряЗНёйкйЙ Т-2 токсином (20 мг/кг корма) при скармливании белам мышам оказывал более эффективное действие на этих ашвотных в количестве 0,3-0,5$ От общего рациона (при сравнении с дозами - 0,1; 1,0 и'2,0$).

4. Оптимальная доза перлита при введении в токсичный корм (20 мг Т-2 токсина на I кг корма) и скармливании белым мышам составляет 0,1-0,3$. Однако,этот аДшосилакат обладает мейее выраженным биологическим эффектом по сравнению с вермикулитом и ки-зё'льгурсм.

5. Минеральные сорбенты: вермикулит,кизельгур»пегасин,перлит при введении в зерно пшеницы,зараженное токсигенным р. вро-гоег1ск1е11а обеспечивают защиту от негативного действия микотоксина на организм цыплят-бройлеров.Эти свойства лучше проявляет вермикулит в дозе I и 5$,затем' пегасин - в дозе !%-, ниже -кизельгур - в количестве 1$ и ещё слабее перлит - в дозе 5$.

6. Сравнительная оценка обезвреживающего эффекта минераль-

них сорбентов в дозе 3% на комбикорме ПК-4, загрязнбнного мико-тоисином х-'. нрогоТ:г1оЬ.сё11а з опытах на петушках подтвердила биологическую эффективность их использования. Но степени активности эти алюмосиликаты распределились £ следующем порядке: вермикулит, кизельгур, пегасин и перлит.

7. Детоксвкационнке свойства минералов-сорбентов по отно-пению к комбикорму, загрязненному Т-2 токсином (8 мг/кг корма)

в опытах на цыплятах-бройлерах .лучше выражены у вермикулита,слабее - у кизельгура, пегасина и перлита. .

8. Природный алюмосиликат - вспученный вермикулит,введенный в корм для белых швеВ в дозах 0,3-0,5% и для цыплят - в дозах 1-5$, обладает выраженным защитным эффектом в отношении организма животных от негативного действия Т-2 токсина пли метаболитов токсиаообразующего млкромицета Р. врогоЪпсМеПа . Это позволяет использовать вспученный вермикулит в указанных дозах, вводя ■ егс в корм для профилактики соответствующих микотоксикозов.

.пмшчвсенв пвдшваш

Из четырех испытанных минеральных сорбентов: вер/.икулит,кизельгур, пегасин и перлит для снижения действия микотоксмнов в организме животных рекомендуем использовать вермикулит.Количество его введения в загрязненные корма для цыплят колеблется в пределах 1-5;?.

Вермикулит можно вводить в рацион животных для профилактических целей.

Введение вермикулита в корма, загрязненные микотоксином Р. арогсППсЫеНа позволяет увеличить процент использования их в рационе животных.

Описок работ.опубликованных по теме диссертации

1. Акиль М.Ш. Влияние некоторых химических веществ на рост

а токсинообразованиз гриба Киеаг1ия» / Соб.науч.трудов: Профилактика незаразных болезней и терапия сельскохозяйственных животных и путных зверей. - Л. - 1990. - Гг 108. - С.7-8.

2. Кузнецов АЛ'., Мухина Н.В., Коротков В.М., Сарсембаева Н.Б., Аккузян Г.Д., Акил М.а. Применение алюмосиликатов для коррекции продуктивности сельскохозяйственных животных / Тезисы докладов к межвузовской научно-практической конференция. -Л., 1989.

3. Кузнецов АЛ., Йухяна К.В., Акил М.Ш. Использование природных алюмосиликатов в прс-филгкгике фузараогсксикозз у птиц

Материалы I1-го мевдународного микологического симпозиума "Микозы и иммунодефицита". - Д., 1991. - 187 с.

4. Kugnetsov A.?., Mukhlna if. Л, Akil M.S. The affect of use of natural iainerals in poultry breeding / Proceedings of ths 7th International Congress ou aniraal hygiene. - Leipzig, 1991•'- Vol. III. - P. 1002-1007.