Оглавление диссертации Каиси, Валерия Игоревна :: 2002 :: Москва
1 ВВЕДЕНИЕ.
2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1.Определение колибактериоза, морфологические, культуральные, биохимические, антигенные свойства Е. coli.
2.2. Факторы патогенности.
2.2.1. Энтеротоксигенные Е. coli.
2.2.2. Энтеропатогенные Е. coli.
2.2.3. Энтероинвазивные Е. coli.
2.2.4. Септические Е. coli.
2.3. Лабораторная диагностика колибактериоза.
2.3.1. Бактериологические методы выделения и идентификации Е. coli.
2.3.2. Диагностические тесты, используемые для диагностики колибактериоза.
2.4. Принципы приготовления эритроцитарных антигенных диагностикумов.
3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Материалы и методы.
3.1.1. Выделение возбудителей острых кишечных заболеваний и оценка их культурально-морфологических и биохимических свойств.
3.1.2. Приготовление эшерихиозного антигенного эритроцитарного диагностикума.
3.1.3. Получение гипериммунных сывороток.
3.1.4. Получение сывороток КРС.
3.1.5. Постановка РИГА микрометодом.
3.1.6. Постановка РИГА макрометодом.
3.1.7. Постановка реакции агглютинации.
4 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
4.1. Клинико-эпизоотологические данные.
4.2. Серологическая и биохимическая идентификация Е. coli.
4.3. Методика приготовления эшерихиозного антигенного эритроцитарного диагностикума.
4.3.1. Подготовка эритроцитарной массы.
4.3.2. Подготовка гемосенситинов.
4.3.3. Сенсибилизация эритроцитов.
4.4. Контроль качества эритроцитарных диагностикумов.
4.4.1. Прозрачность и цветность.
4.4.2. Контроль на спонтанную агглютинацию.
4.4.3. Специфичность и активность.
4.5. Результаты экспериментальных испытаний эритроцитарного диагностикума в РИГА на материале от вакцинированных животных.
4.6. Результаты изучения чувствительности
РИГА и РА.
4.6.1.Результаты сравнительного изучения РИГА макро- и микрометодом.
4.6.2. Результаты сравнительного изучения РНГА макрометодом и РА.
Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Каиси, Валерия Игоревна, автореферат
Актуальность темы. В последнее время многие исследователи установили, что заболевания желудочно-кишечного тракта новорожденных телят по частоте, массовости и величине причиняемого экономического ущерба занимают важное место (Сидоров М.А., 1987; Горбов Ю.К. с соавт. 1989; Федоров Ю.Н., 1996 и др.).
Доказано, что острые кишечные заболевания телят в первые дни жизни вызываются преимущественно условно-патогенной микрофлорой (Девришов Д.А. с соавт, 1991, 1998, 1999; Ставцева Л.Я. с соавт., 1989, 1991 и др.). Поэтому в последнее время большое внимание уделяется изучению условно-патогенных бактерий как этиологическому фактору в возникновении диареи новорожденных телят.
К особенно распространенным заболеваниям, сдерживающим развитие животноводства, относится колибактериоз, которым болеет в основном молодняк сельскохозяйственных животных.
Колибактериоз регистрируют во всех странах мира. Он наносит огромный экономический ущерб животноводству. Поэтому до настоящего времени актуальной остается проблема создания методов надежной профилактики и экспресс-диагностики колибактериоза сельскохозяйственных животных.
В системе мер профилактики и искоренения болезней животных и человека важное значение отводится ускоренной и точной диагностике. От правильного и своевременно поставленного диагноза зависит успех лечения и ликвидации возникшего заболевания.
Диагностика в инфекционной патологии животных находится в центре повседневной деятельности ветеринарных специалистов и является самым трудоёмким разделом ветеринарии.
Существует множество методов диагностики инфекционных болезней, но для того чтобы не прибегать к комплексу методов диагностики, наука все время работает над изысканием новых простых экспресс-методов диагностики, которые основаны на специфическом взаимодействии антигена с антителом.
Большое значение для биопроизводства приобретает разработка эритроцитарных диагностикумов, применяемых для широкого мониторинга инфекционных болезней и обладающих высокой специфичностью, стабильностью при длительном хранении.
Антигенные диагностикумы используются в серологических исследованиях с целью установления этиологии заболевания и для изучения гуморального иммунитета у здоровых, больных, а также вакцинированных животных.
1.2. Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований является разработка технологии получения колибактериозного антигенного эритроцитарного диагностикума и экспериментальное обоснование применения его для мониторинга колибактериоза крупного рогатого скота. Для ее реализации необходимо было решить следующие задачи:
1. Изучить роль возбудителя колибактериоза в этиопатогенезе желудочно-кишечных болезней у молодняка крупного рогатого скота.
2. Изучить эпизоотические изоляты и производственные штаммы Е. coli для разработки антигенного эритроцитарного диагностикума в РИГА.
3. Провести серологический мониторинг к возбудителю колибактериоза у крупного рогатого скота.
4. Провести сравнительную диагностическую оценку РИГА и РА.
5. Разработать проект нормативной документации на набор антигенного эритроцитарного диагностикума для диагностики и иммунологического мониторинга колибактериоза крупного рогатого скота в РНГА.
1.3. Научная новизна. Усовершенствована технология обработки эритроцитов и их сенсибилизации антигеном и разработан антигенный эритроцитарный диагностикум для РНГА, позволяющий проводить экспресс-диагностику колибактериоза, а также определять уровень антител, синтезируемых иммунокомпетентными клетками в ответ на введение вакцинных препаратов.
Получены данные о роли Е. coli в развитии эпизоотической ситуации острых кишечных заболеваний (ОКЗ), складывающейся на территории отдельно взятых хозяйств.
1.4. Практическое значение результатов исследований. В ветеринарную практику предложен антигенный эритроцитарный диагностикум для диагностики и иммунологического мониторинга колибактериоза у КРС в РНГА.
1.5. Апробация работы. Результаты исследований доложены на Международной конференции молодых ученых (Щелково, 2001 г.) и научной конференции молодых ученых МГАВМиБ им К.И. Скрябина (Москва, 2001 г.)
1.6. Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 научные статьи.
1.7. Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту.
- результаты изучения этиологической роли Е. coli в возникновении острых кишечных заболеваний молодняка крупного рогатого скота и биологических свойств выделенных бактериальных культур от животных и 7 объектов внешней среды.
- результаты разработки технологии производства и применение антигенного эритроцитарного колибактериозного диагностикума для РИГА.
- результаты экспериментальных и производственных испытаний антигенного эритроцитарного диагностикума в РИГА.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 страницах машинописного текста, включает введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы, включающий 174 источника, в том числе 52 иностранных. Материалы диссертации иллюстрированы 12 рисунками и 13 таблицами. В приложении представлено 2 документа, подтверждающих результаты отдельных этапов работы.
Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка антигенного эритроцитарного диагностикума для иммунологического мониторинга колибактериоза крупного рогатого скота"
6. ВЫВОДЫ
1. Разработана технология получения колибактериозного эритроци-тарного диагностикума. Предложена усовершенствованная схема подготовки эритроцитов на основе оптимизации времени формалинизации и концентрации формалина, а также режим сенсибилизации эритроцитов антигенами эшерихий серогрупп 09.К99, 0138.К88, ОИ9.
2. Установлена высокая диагностическая ценность РНГА с разработанным препаратом для выявления антител в сыворотках крови крупного рогатого скота. Показано, что РНГА на 2-3 раза чувствительнее РА.
3. Предложена усовершенствованная схема получения гипериммунных кроличьих сывороток к антигенам Е. coli 09:К99, 0138:К88, 0119. Выявлено, что наиболее высокие титры выявляются при сочетанном введении растворимых и цельномикробных антигенов.
4. Экспериментально обоснована возможность применения разработанного диагностикума для иммунологического контроля колибактериоза КРС на примере изучения динамики титров антител к эшерихиям в сыворотках крови вакцинированных животных.
5. На основании проведенных исследований определены требования к качеству эритроцитарного диагностикума, предложены соответствующие методы его контроля и разработан проект НТД на производство и применение.
6. Установлена значимая роль возбудителя колибактериоза в этиопатогенезе желудочно-кишечных болезней молодняка КРС.
101
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Разработан антигенный эритроцитарный диагностикум для диагностики колибактериоза и мониторинга иммунного фона у крупного рогатого скота в РНГА, применение которого в ветеринарии позволит прогнозировать эпизоотическую обстановку и проводить оценку эффективности ветеринарных иммунобиологических препаратов.
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2002 года, Каиси, Валерия Игоревна
1. Аллилуев А.Г. Испытание активированных эндотоксинов некоторых представителей микробов кишечной группы в РПГА.-В кн.: Брюшной тиф. Специфическая профилактика, иммунитет и серодиагностика.-М.-1965.-с 65-69.
2. Абдурахманова Э.Г.// МРЖ: раздел 3.-1982.-№6.-с. 44-46.
3. Альтгаузен-Рагинская В.П. Антитела в сыворотках больных колиэнтеритами. В кн.: Тр. моек, ин-та вакц. и сыв. им. И.И. Мечникова,-М.-1960.-Т.15.-С.231-235.
4. Андреева Д.В., Воронин Е.С., Букова Н.К. Сравнительная эффективность серологических методов диагностики сапа. Материалы методической и научной конференции.-Сб.науч.тр.-Москва.-2001.-с.11-112.
5. Ашмарин И.П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л. :Медгиз.-1962.-184 с.
6. Апатенко В.М. Смешанные инфекции сельскохозяйственных животных.-2-е изд., переработ, и доп.-К.-Урожай.-1990.-С.61-77.
7. Бабахова М.А. К методике сенсибилизации эритроцитов антигенами из энтеропатогенных серотипов кишечной палочки.-В кн.: Материалы конф. Молодых ученых. Ростов-на-Дону, 1966, с. 188.
8. Бедоева З.М. Методы индикации энтеропатогенных эшерихий в фекальных пробах телят. Дисс. . канд. вет. наук,- М.-1990.
9. Белая Ю.А., Шекоян Л.А., Дроздов С.Г., Прозоровский С.В. и др,-Диагностика ротавирусной инфекции с помощью реакции коагглютинации.// Вопросы вирусологии.-1985.-№2,- с. 233-236.
10. Блохина И.Н., Воронин Е. С., Девришов Д.А. и др. Методические рекомендации по выделению и идентификации условно-патогенных энтеробактерий и сальмонелл при острых кишечных заболеваниях молодняка с/х животных.// Од. ВАСХНИЛ.-М.-1990.
11. Буткин Е.И. // Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных.- Эпизоотология с микробиологией,- М.: Агропромиздат, 1987.-415с.
12. Васильев А.В., Колышкин В.М., Елаков А.Л.-РНГА для выявления антител к вирусу чумы плотоядных.-Ветеринария.-1996.-№2-с. 20-22.
13. Вейнблат В.И. К постановке реакции пассивной гемагглютинации с эритроцитами, сенсибилизированными полисахаридом чумного микроба.-В кн.: Диагностика особо опасных инфекций. Ростов-на-Дону, 1968.-С. 75.
14. Вертиев Ю.В., Шагинян И.А., Степанова М.В., Езепчук Ю.В. Определение токсигенности штаммов кишечной палочки и холерного вибриона радиоиммунологическим методом//Молекулярная генетика, микробиология и вирусология.-1985.-№3.-с. 38-40.
15. Воронин Е.С., Петров Р.В., Шишков В.П., Девришов Д.А. Иммуномодуляторы и пробиотики при болезнях молодняка -перспективное направление в ветеринарной медицине «Тез. докл.» //
16. Всероссийская научная конференция «Иммуномодуляторы сельскохозяйственных животных». -М. -1994. -С .4-5.
17. Гендон Ю.З. Использование гидроксиламина при изготовлении инактивированных вакцин (вирусных) и антигенов /В кн.: Использование новых методов в изучении и изготовлении вакцин и анатоксинов. Тез. доклад. 15-17 декабря 1964 Г.-1964.-С. 18-19.
18. Голубева И.В., Килессо В.А., Киселева Б.С. и др. Энтеробактерии.-М.: Медицина, 1985.-е. 171-192.
19. Головко А.Н., Гнатенко Г.В., Красников Г.А. Выявление специфических антител против адгезивного антигена Е. coli К99 //Ветеринария.-1988.-№9.-с. 32-34.
20. Головко А.Н. Антигенная вариабельность фимбриальных адгезинов Е. coli //Ветеринария.-1997.-№8.-С.23-27.
21. Головачева С.Н., Корнеева Э.П. Технологические принципы получения сухого эритроцитарного диагностикума для выявления ревматоидного фактора в крови больных.-В. кн.: Вопросы прикладной иммунологии. Труды Ленингр. ИБС. Вып. 6. Л., 1967, с. 126.
22. Горбов Ю.К., Мачинский А.П., Денисов В.Г. Об этиологии диарей новорожденных и пневмоэнтеритных больных телят в промышленном животноводстве Мордавии// Рост и болезни молодняка с.-х. животных: Межвузовский Сб. науч. тр.-Саранск.-1989.-С.6-12.
23. Дворкин Г.Л. Экспресс-методы индикации адгезивного антигена К99 у энтеропатогенных эшерихий.-Ветеринария.-1993.-№5.-с. 135-136.
24. Девришов Д.А., Воронин Е.С., Ставцева Л.Я., Бедоева З.М. Острые кишечные инфекции у телят в экспериментальных условиях.// Межвуз. Сб. науч. Тр. MB А./ Новое в диагностике, лечении и профилактике болезней молодняка с/х животных.-М.-1991.-С.6-7.
25. Девришов Д. А. Разработка и изучение свойств иммуномодуляторов и биологических препаратов для профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных. Автореф. дисс. . док. биол. наук. -М. 2000. - С. 8-9.
26. Диалло Б.У. Метод получения антитоксической сыворотки для определения термостабильного энтеротоксина эшерихий,- Дисс.канд. вет. наук.-М,-1984.
27. Дулатова М.В., Гноевой В.Б. Изучение эффективности применения лиофилизированных эритроцитарных антительных диагностикумов и других методов при дизентерии Зонне.-Ж. Микробиол.,-1978.-№12.-С. 112-116.
28. Ежова Г.Г., Яхнина Н.А., Хомицкая Т.А. О-агглютинины в крови больных колиэнтеритом детей. Ж. микробиол., эпидемиол. и иммунологии, 1964,-№5.-С. 128-133.
29. Езепчук Ю.В./ Бимолекулярные основы патогенности бактерий,-М.-1985.-С.6.
30. Блинов Н.П. Получение антигенов при обработке клеток 3-нафтолом.-В кн.: Сборник работ 1 Всесоюзной конференции дерматовенерологовю-Л. -1958.-С .96.
31. Зароза В.Г. Колибактериоз новорожденных телят: обзорная ниформ,/НИИТЭИагропром. М., 1995.-c.7-8.
32. Зароза В.Г. Эшерихиоз телят / всесоюз.акад.с.-х. наук им. В.И. Ленина.-М.: Агропроиздат, 1991.-е. 12-15, 41,53.
33. Зайцев В.В. Специфичность и активность пуллорного эритроцитарного антигена в зависимости от срока хранения,- Контроль качества биологических ветеринарных препаратов. Сб. научн. тр-Москва,- 1987.-С.110-111.
34. Зильбер Л.А. Основы иммунитета.-М.: Медгиз.-1958.-495 с.
35. Каральник Б.В. О значении липоидных веществ в механизме ви-гемосенсибилизации.-В кн.: Вакцины и сыворотки,- 19656, №4.-с. 149.
36. Каральник Б.В. О природе процесса сенсибилизации эритроцитов бактериальными антигенами при изготовлении эритроцитарных диагностикумов.-В кн.: Материалы 3-й Международной конф. Институтов вакцин и сывороток социалистических стран. М.-1965в.-с. 34.
37. Каральник Б.В. О механизме сенсибилизации эритроцитов бактериальными антигенами. Количественные закономерности сенсибилизации ви-антигеном.-Бюлл. экспер. биол. мед.-1965б.-№10.-с.81.
38. Каральник Б.В. Количественный анализ процесса взаимодействия эритроцитов и бактериальных антигенов. Сообщение 1.-Ж. микробиол.-1966б.-№5.-с. 78.
39. Каральник Б.В., Колюбакина Н.В. Приготовление эритроцитарных диагностикумов для выявления антител к серотипамкишечной палочки// Мат. 7-й научно-практич. Конф. Казах. НИИЭЦ и инф. Болезней.-Алма-Ата,- 1966.-е. 133.
40. Каральник Б.В. Эритроцитарные диагностикумы.-М.:Медицина, 1976.-164 с.
41. Каральник Б.В. Основные пути создания эритроцитарного ви-диатностикума.-В. кн.: Вопросы эпидемиологии, бактериологии, гигиены, паразитологии, вирусологии. Тезисы докл. Конф. ИЭГ,- Душанбе,- 1962.-с.61.
42. Каральник Б.В. Изучение механизма взаимодействия небелковых бактериальных антигенов как основа стандартизации эритроцитарных диагностикумов.-Автореф. дис. . док.мед.наук.-Алма-Ата, 1970.-32 с.
43. Каральник Б.В. Материалы к изучению механизма Ви-гемагглютинации, приготовлению и применению Ви-диагностикума. Автореф. дис. канд. мед. наук.-Краснодар, 1964.-19 с.
44. Каральник Б.В. Возникновение и развитие методов непрямого серологического анализа.-Ж.микробиол., 1964.-№7.-с. 134-140.
45. Каральник Б.В., Дорошкевич Л.Ц., Мелихова Р.Б. Молекулярные аспекты взаимодействия энтеробактериальных О-антигенов с эритроцитами.-В кн.: Материалы всесоюзной конференции по общей и прикладной иммунологии.Т.1, М., 1974.-С.65.
46. Каральник Б.В., Колюбакина Н.В. Приготовление эритроцитарных диагноетикумов для выявления антител к серотипам кишечной палочки.-В кн.: Материалы 7-й научн. конф. институтов и конф. врачей облает. Сев. Казахстана.-1966.-С.153-157.
47. Кабанова Е.А., Люминесцентно-серологический метод выявления патогенных серотипов кишечной палочки.//Колиэнтериты.-М.-1962.-с.91-108.
48. Кауфман Ф.// Семейство кишечных бактерий.-М.: Медгиз, 1959-с. 45-60.
49. Киржаев Ф.С., Ружанска М.П.-Диагностическая ценность реакции непрямой гемагглютинации при пуллорозе-тифе.-Ветеринария,-1979.-№5-с. 70-72.
50. Козлов П.А.-Гемосенситины S. gallinarum-pullorum.-Ветерина-рия.-1999. -№7.-с. 22-23.
51. Коляков Я.Е., Гительсон С.С., Кравчук JI.C. Колибактериоз телят.-М.:.- Колос.-1970.-224с.
52. Кондакова И.А. К вопросу этиологии и терапии острых желудочно-кишечных болезней новорожденных телят./ В кн.: Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии. Вып. 1. Сб. науч. тр. молодых ученых.-2000.-С.88-89.
53. Коромыслов Г.Ф. Профилактика и борьба с инфекционными болезнями молодняка сельскохозяйственных животных // Бюлл. ВИЭВ,-1982.-вып.47.-С.З-8.
54. Кравчук Л.С., Кононенко А.Б., Бритова С.В. Ускоренная индикация патогенных энтеробактерий // Ветеринария.-1992.-№5.-С.31-33.
55. Краскина Н.А., Аллилуев А.П., Гуторова Н.М. // Реакция пассивной гемагглютинации в диагностике брюшного тифа и хронического брюшнотифозного бактерионосительства. В кн.: Диагностика бактериальных кишечных инфекций. - М.: Медицина, 1965. -С. 41-42.
56. Крейнин Л.С. Химические вакцины в профилактике дизентерии / В кн.: Химические вакцины. Матер, конференции, посвященной памяти И.И. Мечникова.-М.-1971.-С. 86.
57. Куриленко А.Н., Крупальник В.Л. Инфекционные болезни молодняка с/х животных. М.: Колос. - 2000. - С. 38.
58. Леви М.И., Бабахова М.А., Давыдов В.П., Серебрийский И.Я., Колодий О.М., Анчевская И.Х., Ганчук Н.С. Серологический методопределения специфического О-антигена патогенных кишечных палочек в испражнениях //Ж. микробиол.-1966.-№12.-С.32-36.
59. Леви М.И., Басова Н.Н. Эритроцитарные диагностикумы и их применение в серологии.-В кн.: Материалы 3-й международн. конф. институтов вакцин и сывороток социалист. стран.-М.-1965.-с. 32.
60. Леви М.И., Фоменко Г.А., Кравцов Ф.Е. Стойкий эритроцитарный диагностикум для обнаружения столбнячного и дифтерийного анатоксинов и антител к ним.-Ж. микробиол.-1967.-№1.-с. 133.
61. Леви М.И., Орлова Г.М., Сучков Ю.Г. Серологические исследования при чуме. Сообщение 6,- В кн.: Труды Азербайдж. противочумной станции. Баку.-1962.-Т.З.-с.281.
62. Леонтьева И.А. Выявление энтеротоксинов при колибактериозе // Инфекционная патология животных в Узбекистане: Тр. УзНИИВ С АО ВАСХНИЛ.-Ташкент.-1990.-С.52-56.
63. Малахов Ю.А., Тугаринов О.А., Пирожков М.К., Исхакова Т.И. Специфическая профилактика эшерихиозов животных. // Ветеринария.-1993.-№8.-С. 5.
64. Мартынов С.М., СтернюкБ.П., Лабор. дело, 1965.-№4.-с. 195.
65. Мелихова Р.Б. Гемосенситивная активность энтеробактериальных антигенов, полученных различными методами. Автореф. дис. . канд. биол. наук.-Пермь, 1974.-21 с.
66. Мельникова Л.А., Мищенко Н.К., Николаева Н.П. Эритроцитарный антиген для выявления в РНГА антител к вирусу чумы свиней.-Контроль качества биологических ветеринарных препаратов. Сб. научн. тр.-Москва.- 1987.-C.29-32.
67. Меньшов П.И., Шмутер М.Ф. Формалинизация эритроцитов с помощью мешалки,- Пробл. особо опасных инфекций.-1969.-.№5.-с.202.
68. Неменова М.А. Экспериментальное изучение реакции нейтрализации антител и опыт применения ее для индикации О-антигенов энтеропатогенных серотипов Е. coli в фекалиях и патологическом материале телят: Автореф. дис.канд. биол. наук.-Ереван.-1969.-с.8-14.
69. Никонова Ольга Геннадьевна Разработка экспресс-методов оценки иммунологического статуса животных при болезни ауэски. Автореф. дисс. .канд. вет. наук.-Казань.-2001.-23 с.
70. Новгородская Э.М. Колиэнтериты у детей раннего возраста (этиология, эпидемиология и диагностика). Тез. докл. сессии, посвящ. обсужд. пробл. кишечных инфекций для городов Н. Поволжья.-Астрахань.-1958.-С.33-35.
71. Носков Н.М. // Количество и состав белков сыворотки крови телят в зависимости от возраста и кормления. Ж. Агробиология, 1959. -№3.
72. Носков Ф.С.// Реакция коагглютинации.-В кн.: Иммунологические основы диагностики вирусных инфекций.-М.: Медицина. -1985.-е. 144-152.
73. Оловников A.M. Определение содержания антигенов по агглютинации эритроцитов, покрытых поликонденсированными тетраизоматом диаминодифениламина, белками антисыворотки // Докл. АН CCCP.-1966.-T.169.-C.il 80.
74. Осидзе Д.Ф. Инфекционные болезни животных. Справочник.-М.-Агропромиздат.-1987 .С.203-210.
75. Падюков JI.H., Семенов Б.Ф. Перспективы развития средств иммунохимической диагностики бактериальных инфекций // Ж. микробиологии, эпидемиологии, иммунологии.-1989.-№ 1.-е. 11-17.
76. Пак Е.А. О диагностической ценности реакции агглютинации и гемагглютинации у детей раннего возраста, больных коли-инфекцией. В кн.: Вопросы охраны материнства и детства.-Т.10.-№2.-1965.-С.41-45.
77. Панин A.H., Груздев К.Н., Малахов Ю.А., Обухов И.Л., Шипулин Г.А., Шипулина О.Ю. Методические указания по выявлению Escherichia coli серотипа 0157:Н7, продуцирующие токсины Sit I и Sit 2, методом ПЦР разработаны в ВГНКИ.-Москва, 1997.
78. Пехов А.П. Плазмиды бактерий.-М.-1985.-С.46-47.
79. Поляков И.И., Ширяев Д.Т., Рассудов С.М. Стойкие эритроцитарные препараты для диагностики и индикации особо опасных инфекций, изготовленные по единой методике.-«Проблемы особо опасных инфекций», 1969.-№4.-с.54.
80. Полякова О.А., Евглевская Н.И., Соколова Н.А. и др. Адгезивный антиген К99 и термостабильный энтеротоксин у патогенных эшерихий, возбудителей колибактериоза телят//Ветеринария.-1986.-№8.-с. 37-40.
81. Полякова О.А., Евглевская Н.И. Изучение серологической специфичности патогенных эшерихий и получение специфических О-колисывороток методом адсорбирования. //Бюлл. ВНИИ эксперим. ветеринарии.-1982.-Вып.45.-с. 10-13.
82. Полякова О.А., Евглевская Н.И., Соколова Н.А., Бессарабов А.Б. Факторы патогенности Е. coli возбудителя колибактериоза животных.-В кн.: Новое в инфекционной патологии сельскохозяйственных животных. Тр. ВИЭВ.-Москва.-1983.-Т.58.-с.28-36.
83. Полоцкий Ю.Е., Авдеева Т.А. Адгезивность, инвазивность и энтеротоксигенность возбудителей кишечных инфекций/ЖМЭИ.-1981,-№5.-с. 23-31.
84. Полоцкий Ю.Е. Взаимодействие микробов с энтероцитами при экспериментальном изучении кишечных инфекций.-Арх.пат.-1980.-№3.-с. 82-88.
85. Покровский В.И. // Факультативные грамотрицательные палочки: бактерии семейства Enterobacteriaceae. В кн. Медицинская микробиология. -М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. - 1200 с.
86. Притулин П.И., Карташов П.А., Калмыкова Т.П. Экспресс-методы при диагностике инфекционных болезней животных.// В кн.: Новое в инфекционной патологии с.-х. животных. Труды ВИЭВ.-М.-1983.-Т. 58.-с. 83.
87. Притулин П.И., Привалова Н.В. // Экспресс-иммунологические методы при индикации и в диагностике инфекционных болезней животных. Труды ВИЭВ. - 1984. - Т. 60. - С. 35-41.
88. Прозоровский С.В., Белая Ю.А., Перепелкин B.C. и др. // Определение О- и Vi-антигенов при брюшном тифе в реакции коагглютинации на стекле.-Ж. Микробиология,- 1988.-№1.-с. 41-44.
89. Пшеничнов Р.А., Колотов В.М., Касатова О.А. Жидкий эритроцитарный сыпнотифозный диагностикум для реакции непрямой гемагглютинации. -Ж. микробиол. -1967. -№9. -с. 62.
90. Радчук Н.А. Колибактериоз птиц.-JI.: Агропромиздат. Ленингр. Отд-ние, 1990.-с. 8.
91. Рашидова Р.А., Синяшин Н.И., Сольская Л.Л. и др. // Мед. Журн. Узбекистана.-1980.-№6.-54-58.
92. Рохманова М.А., Чистова З.Н., Сюрин В.Н. Ретроспективная диагностика инфекционного бронхита кур.-Ветеринария.-1977.-№8.-с. 112114.
93. Сидоров М.А. Основы профилактики болезней новорожденных телят и поросят.//Ветеринария.-1987.-№2.-С.10-12.
94. Сидорчук А.А. Усовершенствование диагностики сальмонеллеза овец: Автореф. дис. . кан. вет. наук. -М., 1978,- 20 с.
95. Сидорчук А.А., Архангельский И.И., Караваев Ю.Д.-Реакция непрямой гемагглютинации при сальмонеллезе овец.-Ветеринария-1977,-№8.-с. 110-112.
96. Синяшин Н.И., Лобачева Л.А. Щадящий метод выделения растворимых антигенов из патогенных бактерий /В кн.: Использование новых методов в изучении и изготовлении вакцин и анатоксинов. Тез. доклад. 15-17 декабря 1964 Г.-1964.-С. 8-9.
97. Синяшин Н.И., Молодан А.Л. Иммунобиологические свойства химических суммарных антигенов из штамма паратифа Б/ В кн.: Тр. Ташкентск. НИИВИС.-Том VIII (22).- Ташкент.-1970.-С.20-23.
98. Смирнов В.В., Чаплинский В .Я., Андреева З.М., Богоявленская Л.Б. Научные основы производства диагностических препаратов: (Сыворотки для идентификации энтеробактерий). Киев: Наук. Думка, 1980.-С. 21-24.
99. Соколова Н.А., Евглевская Н.И., Курашвили Т.К., Кабанков Ю.С., Дворкин Г.Л. Адгезивные антигены и энтеротоксины эшерихий патогенных для молодняка сельскохозяйственных животных // Ветеринария,-1989.-№5 .-С. 3 3.
100. Ставцева Л.Я., Грязнева Т.Н. Роль условно-патогенных энтеробактерий в возникновении диареи у новорожденных телят-гипотрофиков // Межвуз. Сб. науч. Тр. МВА./ Новое в диагностике, лечении и профилактике болезней молодняка с/х животных.-М,-1991.-С.8-9.
101. Субботина Ю.Л. Приготовление сальмонеллезных и дизентерийных эритроцитарных диагностикумов.-В.кн.: Материалы 3-й междунар. конф. институтов вакцин и сывороток социалист, стран. М,-1965.-е. 37.
102. Улиско И.Н., Диагностика бактериальных инфекций и энтеровируса.-М.-1965.
103. Ушкалов В.А., Головко А.Н. Факторы патогенности Е. coli, выделенных от телят //Ветеринария. -1992. -№4.-С.23-24.
104. Фёдоров Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят //Ветеринария.-1996.-№11 .-С.3-6.
105. Фомин К.Ю., Халенев Г.А., Акбаева Л.М. РНГА для диагностики вирусной диареи крупного рогатого скота. 1997-с.23-25.
106. Хазенсон Л.Б. // Сальмонеллез.-В кн.: Иммунологические основы диагностики и эпидемиологического анализа кишечных инфекций.-Л.: -Медицина, 1987.-е. 43.
107. Хаиров С.Г. Антиген бруцеллезный эритроцитарный для реакции непрямой гемагглютинации (технология получения, стандартизация, контроль, диагностическая эффективность): Автореф. дис. .док. вет. наук.-Москва.-2001 .-47С.
108. Хоменко Н.А. Исследование превентивных свойств сывороток, как метод определения иммунитета при брюшном тифе. Дисс. . канд. мед. наук.-М., 1950.
109. Хоменко Н.А., Аксенова Н.П., Киселева Б.С., Ольшевская Т.Р. Адсорбция а-агглютининов как метод повышения специфичностидиагностических сывороток к бактериям рода Шигелла.-Тр. Моск. НИИ вакцин и сывороток, 1970.-Вып. 13,- с. 111-115.
110. Хоменко Н.А., Киселева Б.С., Ольшевская Т.Р. Селекция производственных штаммов Шигелл Флекснер при изготовлении диагностических сывороток.-Вакцины и сыворотки.- 1970.-Вып. 13.- с. 122129.
111. Хоменко Н.А., Родионова Г.Л. К изготовлению адсорбирующих агглютинирующих сывороток.-Вакцины и сыворотки.-1965.-Вып.5.-с. 113125.
112. Христофис Георгиу Сравнительная оценка серологических тестов (РДСК, РНГА и ИФА) для диагностики анаплазмоза рогатого скота инутталиоза лошадей.-Дисс. . докт. биол. наук.-М.-1997.
113. Чернова В.Н. Реакция непрямой гемагглютинации для диагностики эшерихиозов.//Ж. Микробиол.-1960.-№11.-С.318.
114. Чупрова Л.А. Реакция агглютинации и гемагглютинации в диагностике колибациллярных кишечных заболеваний у детей. В кн.: Вопросы охраны материнства и детства.-Т.7.-№6.-1962.-С.5-10.
115. Allain D.S., Kagan J. G. The use of formalinizeid red cells in the serology of hydatid disease.-J. Parasitol.-1961.-V. 47.-P.61.
116. Andersen H.J. Hanson L.B., Lencoln K., Orscov I., Orscov F., Winberg J. Studies of urinary tract infections in infancy and childhood. Acta peed. Scand 1965.-54.-P.247-254.
117. Bing D.H., Weyand J.G.M., Stavitsky A.B. hemagglutination with aldegyde fixed erytrocytes for assay of antigens and antibodies // Proc. Soc. Exp. Boil.-1964.-124.-P.1166.
118. Boyden S.V. The adsorption of protein on erythrocytes treated with tannic acid and subsequent hemagglutination by antiprotain sera // J. Exp. Med.-1951.-V.93.-N.1.-P. 107-120.
119. Ceppellini R., M. de Gregorio Emmagglutination ed emolisi condizionate (mediante) gli antigeni della S. typhi. Boll. Ist.Sieroterap milanese.-1953.-V.32.-N.ll.-P.429-435.
120. Conrod J. D.// Urine as an antigen reservoir for diagnosis of infections diseases.-Amer. J. Ved.-1983.-V. 75.-№lB/-p. 85-92.
121. Cox C.D. J. Lab. Clin. Med., 1956.-V.48.-P.298.
122. Csizmas L. Preparation of formalinized erythrocytes // Proc. Soc. Exp. Boil.-1960.-V.103.-P.157.
123. Di Nardo L'interazione tra antigeni batterici ed eritrociti.-J. Giorn microbial.-1961.-V.9.-P.91.
124. Duguid J. P., Old D.C., Adhesive propreties of Enterobacteriaceae.-N.Y.- 1986.
125. Duguid J.P., Old D.C. Adhesive propreties of Enterobacteriaceae//Receptors and recognition.- 1980,-Series B.-V. 6.-P. 185217.
126. Edelman R., Levine M.M. Summary of a workshop on enteropathogenic E. coli // J. of Infections Diseases.-1983.-V. 47.-№6.-P. 11081118.
127. Feeley J.C., Sword C.P., Macclarck C.R. et. al. The use of formalin -preserved erythrocytes in the enterobacterial hemagglutination test // Amer. J. Clin. Path.-1958.-V.30(l).-P.77.
128. Francis D.H., Moxley R.A. Dysentery in calves caused by an attaching effacing strain of E. coli // Iyth Inter. Symposium of Vet. Labor. Diagnosticans-Netherlands.-1986.-P. 540-543.
129. Gaastra W., de Graaf F.K. Host specific fimbrial adhesins in non-invisive enterotoxigenic E. coli strains //Microbiol. Rev.1982.-V.46.-N 2.-P.129-161.
130. Guinee P., Veldkamp J., Iansen W. Improved Minko medium for the Deteetion of K99 Antigen in calf Enterotoxigenic Strains of E. coli. Inf. And Immun. Feb.-1977.-V.15.-N.2.-P.676.
131. Hayes L. Specific serum agglutination of sheep erythrocytes sensitized with bacterial polysaccharides. Austral. J. Exp.biol. and med., 1951.-V.29.-N1.-P.51-57.
132. Holmgren J., Eggertsen C., Nahson L., Linecin K. Immunodiffusion studies in E. coli.-Acta Pathol. Microbiology. Scand.-1965.-76.-P. 304-318.
133. Holmgren J. Studies of methods for quantitation of agglutinis and precepatins to E. coli O- and K-antigens // Arch. Allergy.-1970.-V.37.-P.480-494.
134. Honda Takeshi, Khon Mochammad Grouping of enterotoxigenic Escherichia coli by hydrophobicity and its relations to haemagglutination and enterotoxin production. //FEMS Microbiol. Jett.-1983.-17.-№l-3.-P.273-276.
135. Kronvall G. // A rapid slide agglutination method of typing pneumococci by means of specific antibody absorbed to protein A-containing staphylococci.-J.Med.Microbiol.-1973.-V.6.-P.187-190.
136. Landy M., Trapani R.J., Clare W.R. Studies on the O-antigen of Salmonella typhosa.- J. Hyg. (Lond.)-1955.-V.62.-P.54.
137. Levine M. M. Dehidration, metabolic and nutritional consequences of infant diarrhea, and oral rehydration // Infections diorrhoea in the young (ed. Tzipori S.).- Amsterdam.-1985.-P. 383-389.
138. Levine M. M. Е. coli that cause diarrhea: enterotoxigenic, enteropathogenic, enteroinvasive, enterohemorrhagic, and enteroadherent // J. Of Infections Dis.-1987.-V. 155.-№3.-P.377-389.
139. Ling N.R. The attachment of proteins to aldehyde-tanned cells.-Brit. J. haemat.-1961.-V.7.-P.259.1. ЛЛ
140. Luderitz O., Westphal O., Sievers K. et al. Uber die Fixation von P markiertem lipopolysaccharide (Endotoxin) aus E. coli and menschlichen Erythrocyten. Biochem. J.-1958.-V.330.-N5.-S.34-38.
141. Mathewson J.J., DuPont H.L. E. coli //Infections diarrhea (ed. Gorbach Sh. L.).-London.-1986.-P. 85-99.
142. Moon H.W. Protective antigens of enterotoxigenic E. coli: potential in vaccine development in: 12 world congress disease of cattle.-Amsterdam.-1982.-1.-P.313-318.
143. Morris J. A., Thorne C., Wello C. The production of F41 fimbria by pigiet strain of enterotoxigenic E. coli that lack K88, K99 and 987P fimbriae.-J. Gen. Microbiol.-1983.-129.-P.27-53.
144. Morris J. A., Sojka W. J. E. coli as a pathgen in animals // The virulence of. E. coli (ed. Sussman M.).- London.-1985.-P. 47-77.
145. Moskowitz M.,Carb S., Nature.-1957.-V.180.-P.1049.
146. Nataro J.P. Scaletsky I.C., Kaper J.P. et al. Plasmidmediated factors conferring diffuse and localized adherence of enteropathogenic E. coli // Infect. Immun.-1985.-V.48.-№2.-P.378-383.
147. Neter E. Bacterial haemagglutination and hemolisis.-"Bact. Reviews"-1956. V.20. -P. 166.
148. Neter E., Cohen E., Westphal O., Luderitz O., Hart E.P. Effect of trypsinon agglutihability of lipoly saccharide treated erythrocytes. Proc.soc.exptl.biol. andmed.-1957.-V.96.-N.3.-P.803-807.
149. Ngo Т., Lenhoff H. Enzyme-mediated immunoassay // Plenum Press.-New York, London.-1988.-350 P.
150. Old D. C. Haemagglutinacion methods in the study of E. coli II The virulence of E. coli (td. Sussman M.).- London.-1985.-P. 287-313.
151. Orskov F., Orscov I., Wath is nature of E. coli R-antigens? An attempt to analyse the K-fhtigens by different serological metods.- In: Syrnp. Biology Shigella and Klebsiella Bacilli: Abstrs. Communs. Wroclaw, 1967,- P. 46-48.
152. Orskov F., Orskov I., Jann В., Jann K. Serology, chemistry and genetica of О and K-antigens of Escherichia coli // Bacteriological Reviews.-1977.-V.41.-№3.-P. 667-710.
153. Penna R., Panizza D. Impiego di emazie iperformolate in microbiologia. -Minerva med. -1959. -V. 50. -P.2422.
154. Rowe В., Hall M., McGoy J. // Salmonella grossens- a new serotype containing a new somatic (O) antigen 6.7.-J. Hyg. Camb.-1976.-V.77.-335p.
155. Scotland S.D., Gross R.G., Rowe B. Laboratory test for enterotoxin productions, enteroinvasive and adhesion in diarrhoeagenic E. coli // The virulence ofE. coli (ed. Sussman M.)-London.-l985.-P. 395-405.
156. Sherwood D., Snodgrass D. R. Prevalence of enterotoxigenic E. coli in calves in Scotland end northern England /I Vet.Rec. 1983.-V.113.-№10.-P.208-212.
157. Sieburth I.Mcn. Steble standardired, sensitired chicken erytrocytes for the polivalent indirect hemagglutinatio test. Am. J. Veter. Rec. 1960. - V. 85, P. 1084.120
158. Sivadasan К., Kurien В., John J.J. I I Lencet.-1984.-№8369.-P. 134135.
159. Snogross D.R., Terzolo H.R., Sherwood D. et al. Aectiology of diarrhoea in young colves // Vet Rec.,1986.-V.l 19,- №2.-p.31-34.
160. Sussman M. E. coli in human and animal disease // The virulence of E. coli (ed. Sussman M.).-London.-1985.-P.7-45.
161. Tzipori S. The relative importance of of enteric pathogens affecting neonates of domestic animals // Advances in Vet. Sci. Сотр. Med.London.1985.-V.29.-P. 103-106.
162. Weinbach R. Die Verwendbarceit formolbehandelter Erythrocyten als Antigentrager in der indirekten Haemagglutination.-2.-Schweiz. Z. Allg. Path-1958.- V. 21.-P1043.
163. Whang H.J., Mayer H., Neter E. Differential effect on immunogenicity of heat, freezing and alkali treatment of bacterial antigens.-J. Immunol.-1971 .-V. 106.-P.1552.
164. Wray C. Is salmonellosis still a sericus problem in veterinary practice? // Vet.Rec.-1985.-V.l 16.-P.485-489.
165. Zsechock M. et al., Veruleichende Untersuchungen zum direktem Nachweis von K99 Antigen in Kalberkotproben // J.of Vet. Med.- Series B.1986.-Bd. 83.-№10.
166. МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
167. Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина1. Группа: Р 311. СОГЛАСОВАНО1. УТВЕРЖДАЮ1. Заместитель руководителя
168. Департамента МСХиП Российской Федерации Е.А. НЕПОКЛОНОВ»200 г.
169. Ректор Московской академии ветеринар| биотехнологии им<1. Е.С.ВОРОНИН
170. НАБОР ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЭШЕРИХИОЗОВ В РНГА
171. РАЗРАБОТЧИКИ: Зав.кафедрой клинической диагностики и болезней молодняка МГАВМиБ им.1. К.И.Скрябина, РАСХН ^1. Зав.НИЛИПиБ
172. Главный на; МГАВМиБ, д.б.нессор, академик1. Е.С. Воронин 'д.б.н.1. А.Девришов НИЛИПиБ
173. М.Н.Мирзаев Ст.науч.сотр 0ОО «Агровет» к.мед.н.f. З&л^^ Е.В. Зайцева Ст.науч.сотр. ОООлАгровет» к.вет.н.
174. З.М. Бедоева Аспирант НИЛИПиБ&АВМиБfHf В.И. КАИСИ
175. Настоящие ТУ распространяются на Набор для диагностики эшерихиозов в РНГА. Набор изготовлен из антигенов трех штаммов Е. coli, наиболее частых возбудителей острых кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных.
176. Настоящие технические условия могут быть использованы для сертификации наборов.
177. В комплект набора входят следующие компоненты:
178. Сыворотка диагностическая эшерихиозная сухая 3 амп. по 1 см3
179. Диагностикум эритроцитарный эшерихиозный 3 флак. по 10 см3
180. Эритроциты барана формалинизированные 1 флак. по 5 см3
181. Формалин нейтральный 40% 1 флак. - 5 см3
182. Набор рассчитан на проведение 25 диагностических исследований.1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
183. Набор для диагностики эшерихиозов в РНГА должен соответствовать требованиям настоящих ТУ и изготовляться на предприятиях биологической промышленности согласно «Инструкции по изготовлению и контролю», утвержденной в установленном порядке.
184. По своим физико-химическим и биологическим свойствам компоненты должны соответствовать требованиям и нормам, приведенным в таблице 1.