Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Разработка антибактериального препарата на основе энрофлоксацина, изучение его токсичности, фармакокинетики и терапевтической эффективности
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 16.00.04
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Разработка антибактериального препарата на основе энрофлоксацина, изучение его токсичности, фармакокинетики и терапевтической эффективности
На правах рукописи
РГБ ОД
1 й МАЯ 2J0J
Сазонова Елена Михайловна
РАЗРАБОТКА АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ЭНРОФЛОКСАЦИНА, ИЗУЧЕНИЕ ЕГО ТОКСИЧНОСТИ, ФАРМАКОКИНЕТИКИ И ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ
16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Воронеж - 2000
Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов Департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации
Научный руководитель - кандидат ветеринарных наук Б.В.Виолин
Ведущая организация - Московский государственный университет прикладной биотехнологии
Защита состоится « 4 » мая 2000 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д. 020.65.02 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-6).
С диссертацией можно ознакомится в библиотеке института.
Автореферат разослан « 4 » апреля 2000 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета М.Н.Аргунов
Официальные оппоненты:
доктор ветеринарных наук, профессор
Ракова Т.Н.
доктор биологических наук
Рецкий М.И.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Колибактериоз широко распространен в России и в других зарубежных странах с развитым птицеводством. Заболевание вызывает значительный отход цыплят до 80-120-дневного возраста, является причиной снижения яйценоскости кур и уменьшения прироста массы бройлеров, оказывает отрицательное влияние на напряженность пост-вакцинального противовирусного иммунитета, что наносит большой экономический ущерб птицеводческим хозяйствам (А.Г.Ахмедова, 1968; В.В.Киприч, 1981).
Колибактериоз протекает как самостоятельно, так и в ассоциации с микоплазмозом. Многие исследователи (А.С.Серебряков, 1970; Г.А.Грошева, В.А.Шубин, 1968; А.Я.Фомина, 1966; A.Brion, 1961; J.Meszaros, L.Stipkovits, 1988) считают E.coii важным фактором в патогенезе респираторного микоплазмоза, осложняющим первичную микоплазмозную инфекцию. Для лечения такой ассоциативной инфекции требуются препараты активные не только в отношении гра-мотрицательных микроорганизмов, но и микоплазм.
Широкое внедрение в практику птицеводческих хозяйств антибактериальных препаратов и часто их нерациональное использование привело к распространению антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов, особенно в семействе энтеробактерий (В.Ф. Ковалев, Б.В.Виолин, 1985; Ю.К.Купчинскас и др., 1972; Г.Н. Нещадим, 1972; Е.Т.Тришкина, 1975; Э.А.Светоч, М.К. Жунусов, 1975).
Формирование у микроорганизмов резистентности является основным фактором, ограничивающим эффективность антибиотиков и стимулирующим разработку новых препаратов, отличающихся от существующих механизмом антибактериального действия (М.Н.Лебедева, С.Д.Водопаева, 1972; С.М.Навашин и др., 1982; А.Г.Резвых, 1980).
Анализ современных литературных данных свидетельствует о том, что, начиная с 80-х годов, большой интерес для ветеринарии представляют фторированные производные хинолокарбоксильной кислоты (Е.Н.Падейская, В.П.Яковлев, 1995; A.L.Barry, P.C.Fuchs et а!., 1990; D.C.Hooper, J.S.Wolfson, 1991; W.L.Jenkins, L.G.Friedlander, 1988; P.Butaye, R.Ducatelle et al., 1997; P.C.T.Hannan, G. D.Windsor et al„ 1997; B.Charleston, J.J.Gate etal., 1998).
Эти препараты по широте спектра действия и антибактериальной активности можно сравнить только с бета-лактамами третьего и четвертого поколений (A.Anadon, 1992).
Специфический механизм действия фторхинолонов, направленный на ингибирование ДНК-гиразы микроорганизмов, обеспечил для
ми, сульфаниламидами и нитрофуранами. Отсутствие ДНК-гиразы, мишени для фторхинолонов, в клетках млекопитающих и птиц, делает препарат практически не токсичным для макроорганизма.
За рубежом в ветеринарной практике наиболее широко из фторхинолонов используют энрофлоксацин - производное хинолокарбок-сильной кислоты, который в свою молекулу включает радикал фтора в позиции 6, радикал пиперазинила в позиции 7 и радикал циклопро-пила в позиции 1 (R.B. Ford, 1988; J.Schroder, 1989).
Энрофлоксацин обладает широким спектром антибактериального действия, подавляет рост и развитие грамположительных и грамот-рицательных микроорганизмов, в том числе E.coli, а так же Mycoplasma (T.Arai, 1984; W.Cedek, 1985; F.T.W.Jordan, 1985; D.Taylor, 1985; A.Steinberger, 1986).
На основании вышеизложенного, мы сочли целесообразным разработать отечественный препарат на основе энрофлоксацина для лечения колибактериоза птиц и колибактериоза, осложненного мико-плазмозом.
В соответствии с требованиями Совета по ветеринарным препаратам Минсельхозпрода России, внедрению нового препарата в ветеринарную практику должно предшествовать всестороннее изучение его противомикробной активности, фармакотоксикологических свойств и терапевтической эффективности.
Цели и задачи исследования. Изучить и внедрить в ветеринарную практику антибактериальный препарат на основе энрофлоксацина для лечения колибактериоза цыплят.
Для этого было необходимо:
- обосновать состав и разработать лекарственную форму антибактериального препарата на основе энрофлоксацина;
- разработать методы контроля качества антибактериального препарата и технические условия на препарат;
- изучить стабильность препарата в процессе хранения;
- изучить острую токсичность препарата в опытах на лабораторных животных и птице;
- изучить субхроническую токсичность препарата в опытах на цыплятах;
- изучить фармакокинетику энрофлоксацина в организме птиц;
- определить сроки выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма цыплят;
- разработать схему применения энрофлона.
Научная новизна. Теоретически и экспериментально обоснован состав антибактериального препарата, на основе энрофлоксацина, получившего название энрофлон.
Изучена острая и субхроническая токсичность энрофлона на лабораторных животных и цыплятах, изучена фармакокинетика, определены сроки выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птиц, обоснована схема применения препарата, изучена его терапевтическая эффективность при колибактериозе цыплят.
Практическая ценность работы.
Разработан и изучен антибактериальный препарат для лечения колибактериозе цыплят - энрофлон.
Разработаны методы контроля качества энрофлона.
Установлен срок годности препарата.
Определены сроки возможного убоя птиц на мясо после лечения энрофлоном.
Разработана схема применения энрофлона при колибактериозе цыплят.
Разработана нормативная документация на препарат энрофлон (технические условия, наставление по применению энрофлона в ветеринарии), согласованная и утвержденная Департаментом ветеринарии России.
Энрофлон внедрен в ветеринарную практику.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
- теоретическое и экспериментальное обоснование состава препарата энрофлон;
- разработка качественных и количественных методов контроля энрофлона;
- результаты изучения острой и субхронической токсичности энрофлона в опытах на лабораторных животных и цыплятах;
- исследование фармакокинетики энрофлона и определение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птицы;
- изучение терапевтической эффективности энрофлона при колибактериозе цыплят;
- практические предложения по применению энрофлона в ветеринарии.
Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на научно-практических конференциях (10-я и 11-я межвузовские конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» в Санкт-Петербурге, международная конференция ВНИ-ИВВиМ «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных» в Покрове) и на заседаниях Совета по ветеринарным препаратам и проблемно-методических комиссий ВГНКИ (г. Москва, 1997-1999 г.г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 111 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение, выводы и практические предложения. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 1 графиком. Список литературы содержит 225 источников, в том числе 114 иностранных. Приложение на 30 листах.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы и методы исследований
Работа выполнена в течение 1996-1999 г.г. во Всероссийском научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.
В опытах было использовано 190 нелинейных белых мышей обоего пола массой 18-20 г., 66 нелинейных белых крыс массой 80110 г. и 195 цыплят разного возраста массой 220-960 г. Клиническое испытание препарата в производственных условиях проведено на 431620 цыплятах.
Определение чувствительности эшерихий и сальмонелл к эн-рофлоксацину проводили на мясо-пептонном агаре (МПА) методом серийных разведений в плотной питательной среде (С.М.Навашин, 1982). Для сравнения определяли чувствительность этих же штаммов микроорганизмов к наиболее широко используемым в ветеринарии группам антибактериальных препаратов, в частности к гентамицину, тетрациклину, левомицетину, сульфаметоксазолу, триметоприму, цефтиофуру.
В качестве тест-штаммов микроорганизмов использовали музейные культуры и выделенные от больных животных и птиц изоляты эшерихий и сальмонелл: Escherichia coli сероваров 02; 08; 015; 018; 084; 078; 033, 0115, 09:K30, 026:К60:Н, 0Ю1:К99, Salmonella dub-
lin, Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella pullorum-gallinarum. За минимальную подавляющую концентрацию (МПК) антимикробного средства для данного штамма принимали ту,, при которой отсутствовали признаки роста микроорганизма.
Определение чувствительности микоплазм к энрофлоксацину проводили методом серийных разведений в жидкой питательной среде на основе гидролизата бычьего сердца, с добавлением индикатора фенолрот. Рост микоплазм определяли по легкому помутнению среды и изменению окраски индикатора с красного на оранжевый или желтый, за счет сбраживания глюкозы и, как следствие этого, изменение рН среды. При отсутствии видимого роста микоплазм из каждой опытной и контрольной пробирки делали контрольные высевы на индикаторные среды. В качестве тест-культур использовали M.gallisepticum С-6 и M.arginini 236. Для сравнения был взят макро-лидный антибиотик тилозин, наиболее часто используемый при лечении микаплазмоза птиц.
Скорость формирования резистентности Е. coli к антимикробным веществам изучали путем последовательных пассажей микроорганизмов на МПА, содержащем увеличивающиеся количества (от 0,05 мкг/мл до 50 мкг/мл) энрофлоксацина, тетрациклина, гентамицина и левомицетина. С этой целью использовали наиболее чувствительные к энрофлоксацину штаммы Escherichia coli сероваров 08 и 018. Материалом для каждого последующего пассажа служила культура, давшая рост на среде, содержащей наибольшее количество антибактериального вещества.
При разработке технологии изготовления лекарственной формы энрофлона были подобраны условия растворения энрофлоксацина и оптимальная щелочность, обеспечивающая стабильность препарата в процессе хранения.
Для стандартизации и контроля качества энрофлона, а также изучения его стабильности при хранении, были предложены методы качественного и количественного контроля препарата с использованием ультрафиолетовой спектрофотометрии и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Изучение стабильности препарата энрофлон проводили в соответствии с инструкцией по определению сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенных температурах и в условиях естественного хранения при комнатной температуре. Образцы энрофлона для «старения» препарата по 5 мл в запаянных ампулах помещали в термостаты при температурах 35 °С, 50 °С и 60 °С на сроки соответствующие 1, 2, 3, 4 и 5 годам хранения.
Оценку качества препарата в процессе хранения проводили по основным показателям: внешний вид, цветность, прозрачность, рН и содержание действующего вещества.
Определение острой токсичности энрофлона в опытах на лабораторных животных проводили на 70 беспородных белых мышах массой 18-20 г, на 50 беспородных белых крысах массой 80-110 г и на 60 цыплятах 45-дневного возраста массой 250-350 г. Мышам и крысам препарат в различных дозах вводили в желудок за 2 часа до кормления при помощи шприца и иглы, на конце которой имелось булавовидное утолщение. Цыплятам энрофлон вводили непосредственно в зоб при помощи резиновой трубки.
Наблюдение за клиническим состоянием животных проводили в течение 14 суток после введения препарата, учитывали количество погибших животных и рассчитывали токсикологические параметры: ЛД|в, ЛД50 и ЛДм по методу Литчфилда-Уилкоксона.
Кумулятивные свойства энрофлоксацина изучали на 30 белых мышах массой 18-20 г и 16 крысах массой 90-100 г, а также на 10 цыплятах 60-дневного возраста, которым в течение 28 дней в увеличивающихся дозах вводили энрофлон по методу Лима. Результаты исследования оценивали по отношению средней летальной дозы (ЛД50) хронического и острого действия.
Для выявления возможного гепатотоксического действия энрофлона была использована гексеналовая проба, основанная на определении длительности сна. Продолжительность гексеналового сна обусловлена, в первую очередь, функцией печени и зависит от времени, необходимого для концентрации гексенала в крови ниже уровня, вызывающего наркоз. При поражении печени токсическими веществами разложение гексенала в гепатоцитах замедляется, что приводит к увеличению длительности сна.
Определение проводили по методике Д.Р.Розина (1964) на 90 нелинейных белых мышах массой 18-20 г, которых разделили на группы по 10 мышей в каждой: 3 группы - контрольные, 6 групп -опытные. Мыши получали энрофлон однократно, перорально натощак в следующих дозах:_
Группы животных
1|2|3|4|5|6|7|8|9
время введения гексенала
че эез 1 час через 3 часа через 6 часов
Физ. раствор + +
Энрофлон 1/10ЛД50 + + +
Энрофлон 1/5 ЛД50 + + +
Контрольным животным вводили физиологический раствор в дозе 1 мл на голову. Через 1, 3 и 6 часов после применения энрофлона животным вводили гексенал внутрибрюшинно в дозе 60 мг/кг массы тела. В процессе опыта учитывали продолжительность сна.
Субхроническую токсичность энрофлона изучали на 45 цыплятах массой 220-232 г, находившихся в одинаковых условиях кормления и содержания. Птиц по принципу аналогов разделили на две опытные и одну контрольную группы по 15 голов в каждой. Энроф-лон вводили каждому цыпленку из опытных групп ежедневно в течение 20 дней один раз в сутки через зонд в зоб в следующих дозах:
1 группа - 40 мг/кг массы тела (восьмикратная терапевтическая доза по энрофлоксацину);
2 группа - 10 мг/кг массы тела (двукратная терапевтическая доза по энрофлоксацину);
3 группа - контрольная (5 мл дистиллированной воды).
Наблюдение за клиническим состоянием птицы вели на протяжении 25 суток от начала опыта. Через сутки после последнего введения энрофлона проводили клиническое исследование крови, при котором определяли количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов; лейкоцитарную формулу, фракционный состав белка сыворотки крови; содержание мочевины.
Фармакокинетику энрофлона в органах и тканях цыплят изучали на 50 бройлерах массой 940-960 г. В течение часа до начала эксперимента и 2 часа после введения препарата птица не получала корм и воду. Энрофлон птице вводили перорально однократно через зонд в зоб в дозе 5 мг/кг массы тела. Через 0,5; 1; 2; 4; 6; 8; 12; 18 и 24 часа после введения энрофлона убивали по 5 цыплят и определяли содержание энрофлоксацина в сыворотке крови, скелетной и сердечной мышцах, печени, легких и почках.
Определение энрофлоксацина в биосубстратах проводили микробиологическим методом диффузии в агар с тест-культурой Bacillus subtilis АТСС 6633. Чувствительность метода 0,025-0,05 мкг/г или мкг/мл.
Определение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма бройлеров после применения энрофлона изучали на 15 цыплятах массой 830-840 г, которым ежедневно в течение 7 дней вводили через зонд препарат в дозе 5 мг/кг массы тела один раз в сутки. Через 1, 3 и 5 суток после последнего введения препарата убивали по 5 цыплят и проводили исследования мышечной ткани, сердца, легких, почек, печени, мышечного желудка, кожи, сыворотки крови на наличие фторхинолона.
Изучение терапевтической эффективности энрофлона в производственных условиях, проводили при колибактериозе цыплят в хозяйствах Курганской, Московской и Свердловской областей России, а во Владимирской области - при колибактериозе, осложненном мико-плазмозом. Диагноз заболевания ставили на основании эпизоотических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомиче-ских изменений и результатов бактериологического исследования патологического материала.
Лечебную эффективность энрофлона изучали в сравнении с наиболее эффективными препаратами аналогичного назначения хло-рамфениколом и кламоксилом, а также с препаратом аналогом по действующему веществу - байтрилом.
При определении терапевтической эффективности учитывали сохранность цыплят, длительность курса лечения и кратность применения препаратов.
Результаты исследования
Антибактериальная активность энрофлоксацина,
В опытах in vitro нами установлено, что минимальная подавляющая концентрация (МПК) энрофлоксацина для эшерихий колеблется в пределах 0,05-0,8 мкг/мл, а для сальмонелл - 0,1-1,6 мкг/мл. В тоже время у большинства антибиотиков (таблица 1) МПК была значительно выше, чем у фторхинолона. Только МПК цефтиофура в отношении сальмонелл находилась на уровне минимальной подавляющей концентрации энрофлоксацина, но в отношении эшерихий превышала ее в 0,3-2,5 раза.
Табл. 1 Чувствительность микроорганизмов к антибактериальным __препаратам_
ПРЕПАРАТЫ Минимальная подавляющая концентрация (мкг/мл)
п* Escherichia coli п* Salmonella
Энрофлоксацин 11 0,05-0,8 9 0,1-1,56
Гентамицин 11 0,1-1,56 9 0,4-6,25
Левомицетин 11 1,56-12,5 9 3,125-6,25
Тетрациклин И 3,125-6,25 9 0,8-3,125
Цефтиофур 3 0,125-0,25 4 0,5-1,0
Триметоприм 3 50 4 50-100
Сульфаметоксазол 3 25-50 4 12,5-25
Сульфаметоксазол + Триметоприм 3 2,0-5,5 4 2,5-7,5
п* - число проверенных штаммов.
Энтеробактерии были мало чувствительны к триметоприму и сульфаметоксазолу. При использовании комбинации этих препаратов, минимальная подавляющая концентрация понизилась в 10 раз, но все равно оставалась выше, чем у энрофлоксацина.
Тилозин не активен в отношении эшерихий и сальмонелл (МПК - 500 мкг/мл), что связано с непроницаемостью клеточной стенки эн-теробактерий для этого антибиотика.
Проведенные исследования показали, что энрофлоксацин проявляет более высокую активность в отношении эшерихий и сальмонелл по сравнению с широко используемыми в ветеринарии антибактериальными препаратами.
При изучении антимикоплазменного действия энрофлоксацина было установлено, что фторхинолон в концентрациях 0,08-0,1 мкг/мл подавляет рост микоплазм и по эффективности не уступает наиболее активному противомикоплазменному антибиотику тилозину, для которого минимальная подавляющая концентрация составила 0,05-0,3 мкг/мл.
Резистентность эшерихий к энрофлоксацину по сравнению с антибиотиками развивается медленнее, что является еще одним положительным фактором использования фторхинолона.
Так, только через 18-20 последовательных пассажей микроорганизмов на среде, содержащей возрастающие концентрации энрофлоксацина, уровень резистентности к фторхинолону по сравнению с начальным возрастает у эшерихий в 12-15 раз. В то же время устойчивость микроорганизмов к антибиотикам (левомицетину, гентами-цину, тетрациклину), развивается значительно быстрее и уже через 814 пассажей достигает уровня в 15-30 раз превышающего первоначальную минимальную подавляющую концентрацию.
Высокая активность в отношении эшерихий и микоплазм, медленное формирование резистентности у микроорганизмов подтвердили правильность выбранного нами действующего вещества - энрофлоксацина - при создании препарата для лечения колибактериоза птиц, осложненного микоплазмозом.
Разработка лекарственной формы препарата
При разработке препарата учитывали, что для лечения бактериальных инфекций птиц целесообразно применять пероральные лекарственные формы, обеспечивающие непосредственный контакт препарата с возбудителем инфекции в пищеварительном тракте. При этом принимали во внимание, что больная птица часто отказывается от корма, но продолжает пить воду, содержащую антибактериальное средство. Поэтому мы предложили препарат в форме раствора для пе-
рорального применения, который растворяют в воде и выпаивают птице, что облегчает введение лекарственного средства большому поголовью в условиях птицефабрики.
Энрофлон по внешнему виду представляет собой прозрачную жидкость светло-желтого цвета, содержащую 10% энрофлоксацина, который в воде практически не растворим. Поэтому при создании лекарственной формы вспомогательные вещества в препарате были подобраны с таким расчетом, чтобы они, с одной стороны, обеспечивали хорошую растворимость действующего вещества, а с другой - стабильность лекарственного средства на протяжении всего срока хранения.
Учитывая, что энрофлоксацин представляет собой карбоксило-вую кислоту плохо растворимую в воде, в раствор необходимо было ввести катионы калия за счет добавления щелочи и создания калийной соли фторхинолона хорошо растворимой в воде. Щелочность раствора следовало довести до рН 10,0-12,0 для полного растворения субстанции и создания максимальной концентрации в лекарственной форме - 100 мг/мл. При добавлении большего количества энрофлоксацина до 15% (150 мг/мл) фторхинолон хотя и растворяется, но в процессе хранения выпадает в осадок. Выбранная нами оптимальная концентрация действующего вещества обеспечивает возможность при добавлении небольшого количества препарата в питьевую воду (0,5 мл на 1 л воды) достигать терапевтической концентрации в организме цыплят, что было установлено нами при изучении фармакокинетики энрофлона.
Технология изготовления энрофлона и его расфасовка в стеклянные или пластиковые флаконы аналогична производству других растворов лекарственных препаратов для перорального применения и включает в себя следующие стадии: постепенное растворение действующего компонента в подогретом водном растворе щелочи при постоянном перемешивании; корректировка рН 20%-ным раствором лимонной кислоты; фильтрование, розлив, маркировка и контроль.
Для стандартизации и контроля энрофлона, определения срока его хранения были разработаны методы исследования качества препарата.
Метод определения подлинности энрофлона основан на способности энрофлоксацина давать характерные цветные реакции: с метанолом и раствором треххлористого железа препарат окрашивается в интенсивный красный цвет; с 21Ы раствором соляной кислоты и Ш раствором йода образуется осадок коричневого цвета. Цветные реак-
и
ции являются специфичными и не дают окраски с другими фторхино-лонами, используемыми в ветеринарии.
Кроме того, для подтверждения подлинности, установлены определенные максимумы поглощения энрофлоксацина при УФ-спектрофотометрии. Так, ультрафиолетовый спектр раствора энроф-лона, также как и раствора стандартного образца энрофлоксацина, в области от 230 до 350 нм имеет максимумы поглощения при 270+2 нм; 323+2 нм; 334+2 нм характерные только для этого фторхинолона.
Разработанный количественный спектрофотометрический метод определения энрофлоксацина основан на измерении оптической плотности испытуемого раствора энрофлона на установленном максимуме длины волны 270 нм в сравнении с раствором стандартного образца энрофлоксацина.
Для лучшей характеристики качества препарата, особенно в процессе его хранения, предложен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Этот метод позволяет определить не только количество действующего компонента, но и обнаружить, в случае их наличия, продукты распада энрофлоксацина. Время выхода определяемого компонента из колонки при одних и тех же условиях разделения будет всегда постоянно и может служить характеристикой данного компонента (качественный анализ), а площадь пика - пропорциональна количеству данного компонента в пробе (количественный анализ).
Для определения энрофлоксацина в энрофлоне методом ВЭЖХ был подобран растворитель - раствор муравьиной кислоты, элюент -смесь гептансульфоновой кислоты и дигидрогенфосфата калия в воде с ацетонитрилом, оптимальные условия хроматографирования на колонке из нержавеющей стали Мис1еозП КР 18 (250x4 тш): температура процесса - 30 °С, скорость элюции - 2 мл/мин, длина волны - 278 нм, концентрация вводимого раствора - 250 мкг/мл при объеме ин-жекции 5 мкл. Установлено, что в данных условиях время выхода пика энрофлоксацина составляет ~ 4-5 мин. Предложенные условия проведения высокоэффективной жидкостной хроматографии при исследовании энрофлона обеспечивают высокую воспроизводимость результатов, расхождение между несколькими определениями укладывается в 1,5%.
Определение цветности и прозрачности раствора энрофлона проводили по методикам XI Государственной фармакопеи. Нами были предложены эталоны сравнения для показателя цветности № 46 и прозрачности № I.
Для определения токсичности была принята доза 10 мг активного вещества на мышь (стократная терапевтическая).
Разработанные методы контроля (таблица 2) при проверке 10 экспериментальных серий энрофлона 10% показали хорошую воспроизводимость и точность определения (~ 2%) действующего вещества препарата, что обеспечит оптимальный уровень качества препарата в процессе его производства, хранения и применения.
Табл.2 Результаты исследования качества энрофлона
№ серии Подлинность рН Содержание энрофлоксацина (г/100 мл) Токсичность
1. Выдерживает испытание 11,73 9,78 не токсичен
2. Выдерживает испытание 10,75 9,97 не токсичен
3. Выдерживает испытание 11,05 10,30 не токсичен
4. Выдерживает испытание 11,12 9,67 не токсичен
5. Выдерживает испытание 10,95 10,7 не токсичен
6. Выдерживает испытание 10,72 10,15 не токсичен
7. Выдерживает испытание 11,88 9,83 не токсичен
8. Выдерживает испытание 11,70 10,2 не токсичен
9. Выдерживает испытание 10,85 10,32 не токсичен
10. Выдерживает испытание 11,13 10,48 не токсичен
Среднее значение 11,19 10,14+0,21 не токсичен
Во всех исследованных сериях пробы на прозрачность выдерживали сравнение с эталоном № 1, а пробы на цветность не превышали по интенсивности эталон № 46.
При определении стабильности энрофлона в процессе хранения оценку качества препарата проводили по основным показателям: внешний вид, цветность, прозрачность, рН и содержание действующего вещества. Количество энрофлоксацина в препарате определяли тремя методами: микробиологическим методом диффузии в агар, спектрофотометрическим методом и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Установлено, что в течение 5 лет изменений качества энрофлона не происходит, продукты распада энрофлоксацина практически не образуются.
Токсичность и кумулятивные свойства энрофлона В результате изучения острой токсичности энрофлона (таблица 3) на лабораторных животных и птице, нами установлено, что препарат по параметрам острой токсичности (по активному веществу) согласно ГОСТ 12.1.007-76 относится к третьему классу опасности -вещества умеренно опасные (для белых мышей ЛД50 при введении в желудок - 151-5000 мг/кг).
Табл.3 Результаты изучения острой токсичности энрофлона
Вид животного 1 показатель (мг/кг)
ЛД,6 ЛД,о лд84
Белые мыши 2075 2400 (2177,84-2644,8) 2800
Белые крысы 2700 2995 (2822,2+3189,0) 3250
Цыплята 1320 2500 (1810,0-3450,0) 3900
Энрофлоксацин не накапливается в организме при многократном применении, так как при изучении кумулятивных свойств энрофлона по методу Лима суммарно введенная в течение 28 дней белым мышам и белым крысам доза энрофлоксацина (31488 мг/кг и 36522 мг/кг соответственно) не вызывала гибели 50% животных. В тоже время, суммарно введенная цыплятам доза энрофлоксацина 4700 мг/кг хотя и привела к гибели птицы, но отношение ПД50 при многократном введении (4056,25 мг/кг) к ЛД50 при однократном введении (2500 мг/кг) было больше 1 н составило 1,62, что также свидетельствует об отсутствии у энрофлона выраженных кумулятивных свойств (К.1лт, 1961).
При оценке детоксицирующей функции печени было установлено, что энрофлон в дозе 1/10 ЛД5о(240 мг/кг) не вызывает функциональных изменений в печени и продолжительность сна белых мышей достоверно не отличается (Р > 0,05) от контрольной группы. При увеличении дозы до 1/5 ЛД50(480 мг/кг) через 3 часа после введения препарата было отмечено увеличение длительности гексеналового наркоза (82,6+18,8 мин), а через 6 ч уменьшение - до 18,6+6,2 мин, что достоверно отличается (Р < 0,05) от контрольной группы (27,7+4,1 мин). Видимо максимальная доза энрофлоксацина первоначально вызывает непродолжительное ингибирование активности микросомальных ферментов в гепатоцитах, что приводит к резкому увеличению времени сна. Таким образом, в высоких дозах энрофлон, как и большинство антибактериальных лекарственных средств, обладает гепатотоксиче-ским действием.
После двадцатидневного введения энрофлона цыплятам в дозах 20 и 40 мг/кг массы тела не было отмечено функциональных изменений в организме птицы. Все клинико-биохимические показатели крови у опытных групп находятся в пределах физиологической нормы и не отличаются (Р > 0,05) от показателей контрольной группы.
Таким образом, результаты изучения субхронической токсичности энрофлона свидетельствуют, что даже двадцатидневное применение препарата в дозах в 2 и 8 раз превышающих терапевтическую, не оказывает токсического действия на организм птиц, и поэтому даже случайная передозировка препарата в условиях хозяйства не приведет к гибели цыплят.
Фармакокинетика энрофлона и определение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птицы Фармакокинетические исследования энрофлона показали, что энрофлоксацин быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта (таблица 4). Уже через 30 минут после однократного, перорального введения энрофлона в дозе 5 мг/кг массы тела концентрации энрофлоксацина во всех органах и тканях цыплят достигают терапевтических значений. Максимальные количества фторхинолона обнаруживаются, начиная с 1 часа, и поддерживаются на высоком уровне в течение 6-8 часов после введения препарата.
Табл.4 Фармакокинетика энрофлоксацина в организме бройлеров _после перорального введения энрофлона в дозе 5 мг/кг_
Содержание энрофлоксацина (мкг/мд или мкг/г) через: Ткани и органы
Сыворотка крови Мышца Сердце Легкие Печень Почки
0,5 ч 0,69+0,11 0,74+0,09 0,72+0,12 0,56+0,14 1,92+0,18 3,73+0,36
1 ч 1,08+0,14 1,66+0,14 1,92+0,06 1,77+0,21 3,24+0,34 3,89+0,24
2 ч 1,01+0,12 2,10+0,28 2,27+0,18 1,96+0,16 3,88+0,36 3,26+0,28
4ч 0,74+0,14 0,92+0,12 1,51+0,16 1,23+0,10 4,04+0,18 3,22+0,21
6 ч 0,66+0,15 0,57+0,16 0,82+0,12 0,71+0,14 3,69+0,22 2,18+0,26
8 ч 0,58+0,10 0,53+0,14 0,72+0,12 0,60+0,12 2,47+0,23 1,43+0,18
12ч 0,32+0,12 0,31+0,08 0,54+0,11 0,43+0,09 1,56+0,16 0,78+0,14
18 ч 0,24+0,08 0,14+0,04 0,30+0,10 0,28+0,12 0,52+0,12 0,41+0,16
24 ч 0,10+0,02 0,08+0,01 0,12+0,02 0,16+0,01 0,21+0,06 0,18+0,04
Максимальные концентрации фторхинолона установлены через 1 ч в почках и через 2-4 ч в печени. Причем в этих органах высокое содержание энрофлоксацина держится на протяжении 18 часов, что свидетельствует об участии печени и почек в выведении препарата.
В сердце, мышцах и легких максимальные концентрации достигаются через 1,5-2 часа после введения, а к 4 часу начинают постепенно снижаться, но и через 24 ч количество фторхинолона в крови и внутренних органах продолжает оставаться на уровне минимальной подавляющей концентрации для большинства микроорганизмов.
Необходимо отметить, что фармакокинетика энрофлоксацина характеризуется более высокими тканевыми концентрациями препарата в сравнении с сывороточными. Так содержание фторхинолона в легких (график 1), на протяжении почти 5 часов начиная с 1 часа, практически в два раза превышает количество энрофлоксацина в сыворотке.
Такая высокая концентрация в легких является еще одним благоприятным фактором при лечении энрофлоном микоплазмоза, так как легкие являются основным местом локализации микоплазм.
Гафик 1 Фармакокинетика энрофлоксацина
—♦—сыворотка крови —легкие
Таким образом, полученные результаты показывают, что при лечении бактериальных инфекций однократное введение энрофлона в дозе 5 мг/кг массы тела обеспечивает терапевтические концентрации энрофлоксацина в организме птиц в течение суток.
Энрофлоксацин не аккумулируется в тканях и достаточно быстро выводится из организма. После курсового применения энрофлона в течение 7 дней, остатки энрофлоксацина в следовых количествах на 3 сутки обнаруживаются только в печени. Отсутствие энрофлоксацина в организме цыплят через 120 часов после последнего введения препарата дает основание рекомендовать использовать в пищу человека мясо и субпродукты, не ранее, чем через пять суток после окончания лечения птицы энрофлоном.
Терапевтическая эффективность энрофлона
Энрофлон в дозе 5 мг/кг массы тела эффективен при лечении колибактериоза цыплят (таблица 5) и обеспечивает сохранность птицы до 96,7%, а при колибактериозе, осложненном микоплазмозом -до 94,2%. Терапевтическая эффективность энрофлона на 2-4% выше, чем при применении кламоксила и хлорамфеникола. При сравнении эффективности энрофлона и байтрила различий в сохранности птицы при использовании препаратов аналогов не отмечали.
Табл. 5 Эффективность энрофлона в производственных условиях
ПОКАЗАТЕЛИ ПРЕПАРАТЫ
Энрофлон Хлорам-феникол Кламоксил Байтрил
Количество цыплят (гол.) 235220 12820 95430 15650
Доза (мг/кг массы тела) 5 50 20 5
Срок лечения (дней) 3 5 5 3
Эффективность лечения(%) 96,72 94,75 92,72 96,68
Результаты проведенных нами исследований по разработке лекарственной формы, методов контроля качества, изучению фарма-котоксикологических свойств и терапевтической эффективности препарата были использованы при разработке технических условий и наставления по применению энрофлона в ветеринарии, утвержденных и согласованных Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России в установленном порядке.
17
ВЫВОДЫ
1. Энрофлон - лекарственная форма энрофлоксацина для перо-рального применения, стабильная в течение 5 лет хранения, характеризующаяся стандартными количественными и качественными параметрами.
2. Энрофлон - антибактериальный препарат широкого спектра действия, активный в отношении возбудителей колибактериоза и ми-коплазмоза в концентрациях 0,05-0,8 мкг/мл и 0,08-0,1 мкг/мл соответственно.
3. Энрофлон по параметрам острой токсичности относится к веществам умеренно опасным (III класс опасности; для белых мышей ЛД5о - 2400 мг/кг) и не обладает выраженными кумулятивными свойствами Ксига>1 (К.Ыт е! а!., 1961).
4. Двадцатидневное введение энрофлона цыплятам один раз в сутки в двукратной терапевтической дозе (10 мг/кг массы тела) и в восьмикратной терапевтической дозе (40 мг/кг массы тела) не оказывает токсического действия на организм птицы.
5. Однократное введение птице энрофлона в дозе 5 мг/кг массы тела обеспечивает терапевтическую концентрацию препарата в организме цыплят в течение суток.
6. Остаточные количества энрофлоксацина выводятся из организма птицы через 5 суток после окончания применения энрофлона.
7. Энрофлон обладает высокой терапевтической эффективностью при лечении колибактериоза цыплят и колибактериоза, осложненного микоплазмозом и обеспечивает сохранность птицы до 96,7% и 94,2% соответственно.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Разработан, изучен и внедрен в ветеринарную практику новый антибактериальный препарат энрофлон для лечения колибактериоза птиц.
2. Разработана и утверждена в установленном порядке следующая нормативная документация:
а) Технические условия ТУ 9310-010-47611900-99 «Энрофлон оральный раствор (раствор энрофлоксацина 5% и 10%), согласованные в Департаменте ветеринарии Минсельхозпрода России 12.05.99 г.
б) Наставление по применению энрофлона 5% и 10% орального раствора при бактериальных и микоплазменных заболеваниях животных и птиц, одобренное Ветфармбиосоветом (протокол № 2 от 23 апреля 1999 года). Номер ПВР - 2-2.9/00089.
3. Организован промышленный выпуск энрофлона.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Виолин Б.В., Ковалев В.Ф., Шуклин В.П., Сазонова Е.М., Вы-дуйкина А.П. Изучение фармакокинетики, сроков выведения остаточных количеств энрофлона. Труды ВГНКИ, т. 60,1996, с.56-59.
2. Виолин Б.В., Ковалев В.Ф., Шуклин В.П., Сазонова Е.М. Терапевтическая эффективность энрофлона при колибактериозе цыплят. Труды ВГНКИ, т. 60, 1996, с.59-62.
3. Ковалев В.Ф., Сазонова Е.М., Выдуйкина А.П., Шаповалова Л.Р. Методы количественного определения фторхинолонов. Труды ВГНКИ, т. 60,1996, с.72-74.
4. Сазонова Е.М., Виолин Б.В., Ковалев В.Ф., Выдуйкина А.П. Фармакокинетика энрофлоксацина в организме цыплят. Материалы 10-ой международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 1998, с. 55.
5. Филатова О.И., Сазонова Е.М., Виолин Б.В., Менгель И.В. Антибактериальный спектр энрофлоксацина. Материалы 10-ой международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 1998, с. 65.
6. Сазонова Е.М., Виолин Б.В., Лобова П.С. Фармакокинетика энрофлона порошка. Экспресс-информация «Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки», Санкт-Петербург, 1998, с.24-25.
7. Филатова О.И., Виолин Б.В., Сазонова Е.М., Колесникова М.В., Гороховцева В.Н. Чувствительность микроорганизмов к энроф-локсацину. Вестник Омского ГАУ, Омск, № 1, 1998, с.44-45.
8. Виолин Б.В., Сазонова Е.М., Выдуйкина А.П. Определение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птицы. Сборник научных трудов НИИМСиППЖ «Проблемы производства конкурентоспособных пищевых продуктов за счет новых технологий и повышения качества с/х сырья», Волгоград, 1999, с.312-313.
9. Сазонова Е.М., Бурмистров Е.Н. Энрофлон - антибактериальный препарат широкого спектра действия. Журнал «Ветинформ», А/О Издательский центр АБН, Москва, №1, 1999, с. 18-19.
10. Виолин Б.В., Сазонова Е.М., Лобова П.С. Фармакотоксико-логические свойства энрофлона порошка. Материалы 11-ой международной научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 1999, с.42-43.
Оглавление диссертации Сазонова, Елена Михайловна :: 2000 :: Москва
ВВЕДЕНИЕ.
1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. КОЛИБАКТЕРИОЗ и АССОЦИИРОВАННЫЕ ИНФЕКЦИИ.
1.2. ЛЕЧЕНИЕ КОЛИБАКТЕРИОЗА ПТИЦ.
1.3. ПРОБЛЕМА ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ И ПУТИ
ЕЕ РЕШЕНИЯ.
1.4. ФТОРХИНОЛОНЫ.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.2.1. Антибактериальная активность энрофлоксацина.
2.2.2. Обоснование состава препарата.
2.2.3. Фармацевтические исследования.
2.2.4. Токсичность и кумулятивные свойства энрофлона.
2.2.5. Изучение фармакокинетики энрофлона.
2.2.6. Изучение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птицы после применения энрофлона.
2.2.7. Терапевтическая эффективность энрофлона.
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Ветеринарная фармакология с токсикологией", Сазонова, Елена Михайловна, автореферат
Актуальность проблемы. Колибактериоз широко распространен в России и в других зарубежных странах с развитым птицеводством. Заболевание вызывает значительный отход цыплят до 80-120-дневного возраста и является причиной снижения яйценоскости кур и уменьшения приростов массы бройлеров; оказывает отрицательное влияние на напряженность поствакцинального противовирусного иммунитета, что в результате наносит большой экономический ущерб птицеводческим хозяйствам (10, 45).
Колибактериоз протекает как самостоятельно, так и в ассоциации с мико-плазмозом. Многие исследователи (А.С.Серебряков, 1970; Г.А.Грошева, В.А. Шубин, 1968; А.Я.Фомина, 1966; A.Brion, 1961; J.Meszaros, L.Stipkovits, 1988) считают E.coli важным фактором в патогенезе респираторного микоплазмоза, осложняющим первичную микоплазмозную инфекцию. Заболевания, осложненные колибактериозом, протекают тяжелее и сопровождаются большим отходом птиц. Для лечения такой ассоциативной инфекции требуются препараты активные не только в отношении грамотрицательных микроорганизмов, но и микоплазм.
Широкое внедрение в практику птицеводческих хозяйств антибактериальных препаратов и часто их нерациональное использование привело к широкому распространению антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов, особенно в семействе энтеробактерий (46, 51, 71, 88, 100, 118).
Формирование у микроорганизмов резистентности является основным фактором, ограничивающим эффективность антибиотиков и стимулирующим разработку новых препаратов, отличающихся от существующих механизмами антибактериального действия (54, 67, 71, 82).
Анализ современных литературных данных свидетельствует о том, что, начиная с 80-х годов, большой интерес для ветеринарии представляют фторированные производные хинол-карбоксиловой кислоты (75, 123, 167, 170, 187). 4
Эти препараты по широте спектра действия и антибактериальной активности можно сравнить только с бета-лактамами третьего и четвертого поколения (115).
Специфический механизм действия фторхинолонов, направленный на ин-гибирование ДНК-гиразы, отличающийся от других антибактериальных препаратов, обеспечил для них отсутствие перекрестной резистентности со всеми антибиотиками, сульфаниламидами и нитрофуранами. Отсутствие ДНК-гиразы, мишени для фторхинолонов, в клетках млекопитающих и птиц, делает препарат практически не токсичным для макроорганизма.
Энрофлоксацин - производное хинолокарбоксильной кислоты, относится к группе фторхинолонов третьего поколения и состоит из одного радикала фтора в позиции 6, одного радикала пиперазинила в позиции 7 и радикала цик-лопропила в позиции 1 (149, 207).
Энрофлоксацин обладает широким спектром антибактериального действия, подавляет рост и развитие грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в том числе E.coli и Mycoplasma.
На основании вышеизложенного мы сочли целесообразным разработать отечественный препарат на основе фторхинолона для лечения колибактериоза птиц и колибактериоза, осложненного микоплазмозом.
В соответствии с требованиями Совета по ветеринарным препаратам Минсельхозпрода Российской Федерации, внедрению нового препарата в ветеринарную практику должно предшествовать всестороннее изучение его проти-вомикробной активности, фармакотоксикологических свойств, терапевтической эффективности. 5
Задачи исследования:
1. Обосновать состав и разработать лекарственную форму антибактериального препарата на основе энрофлоксацина.
2. Разработать методы контроля качества и технические условия на препарат.
3. Изучить стабильность препарата в процессе хранения.
4. Изучить острую токсичность препарата в опытах на лабораторных животных и птице.
5. Изучить субхроническую токсичность препарата на лабораторных животных и птице.
6. Изучить фармакокинетику энрофлоксацина в организме цыплят и определить сроки выведения остаточных количеств фторхинолона из организма птицы.
7. Разработать схему применения препарата.
Научная новизна.
Теоретически и экспериментально обоснован состав антибактериального препарата на основе энрофлоксацина, получившего название энрофлон.
Изучена острая и субхроническая токсичность энрофлона на лабораторных животных и цыплятах, изучена фармакокинетика, определены сроки выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птиц, обоснована схема применения препарата, а также изучена его терапевтическая эффективность в производственных условиях.
Практическая ценность работы.
Разработан и изучен антибактериальный препарат для лечения колибак-териоза цыплят - энрофлон.
Разработаны методы контроля качества энрофлона. Установлен срок годности препарата.
Определены сроки возможного убоя птиц на мясо после лечения эн-рофлоном.
Разработана схема применения энрофлона при колибактериозе цыплят.
Разработана нормативная документация на препарат энрофлон (технические условия, наставление по применению энрофлона в ветеринарии), согласованная с Департаментом ветеринарии России.
Энрофлон внедрен в ветеринарную практику.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
- теоретическое и экспериментальное обоснование состава препарата энрофлон;
- разработка качественных и количественных методов контроля энрофлона;
- результаты изучения стабильности препарата при хранении;
- результаты изучения острой и субхронической токсичности энрофлона в опытах на лабораторных животных и цыплятах;
- исследование фармакокинетики энрофлона и определение сроков выведения остаточных количеств энрофлоксацина из организма птицы;
- результаты изучения терапевтической эффективности энрофлона при колибактериозе цыплят;
- практические предложения по применению энрофлона в ветеринарии. 7
1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка антибактериального препарата на основе энрофлоксацина, изучение его токсичности, фармакокинетики и терапевтической эффективности"
ВЫВОДЫ
1. Энрофлон - лекарственная форма энрофлоксацина для перорального применения, стабильная в течение 5 лет хранения, характеризующаяся стандартными количественными и качественными параметрами.
2. Энрофлон - антибактериальный препарат широкого спектра действия, активный в отношении возбудителей колибактериоза и микоплазмоза в концентрациях 0,05-0,8 мкг/мл и 0,08-0,1 мкг/мл соответственно.
3. Энрофлон по параметрам острой токсичности относится к веществам умеренно опасным (III класс опасности; для белых мышей ЛД50 - 2400 мг/кг) и не обладает выраженными кумулятивными свойствами КСит>1 (К.Ыт ег а1., 1961г.).
4. Двадцати дневное введение энрофлона цыплятам один раз в сутки в двукратной терапевтической дозе (10 мг/кг массы тела) и в восьмикратной терапевтической дозе (40 мг/кг массы тела) не оказывает токсического действия на организм птицы.
5. Однократное введение птице энрофлона в дозе 5 мг/кг массы тела обеспечивает терапевтическую концентрацию препарата в организме цыплят в течение суток.
6. Остаточные количества энрофлоксацина выводятся из организма птицы через 5 суток после окончания применения энрофлона.
7. Энрофлон обладает высокой терапевтической эффективностью при лечении колибактериоза цыплят и колибактериоза, осложненного ми-коплазмозом и обеспечивает сохранность птицы до 96,7% и 94,2% соответственно.
90
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Разработан, изучен и внедрен в ветеринарную практику новый антибактериальный препарат энрофлон для лечения колибактериоза птиц.
2. Разработана и утверждена в установленном порядке следующая нормативная документация: а) Технические условия ТУ 9310-010-47611900-99 «Энрофлон оральный раствор (раствор энрофлоксацина 5% и 10%), согласованные в Департаменте ветеринарии Минсельхозпрода России 12.05.99 г. б) Наставление по применению энрофлона 5% и 10% орального раствора при бактериальных и микоплазменных заболеваниях животных и птиц, одобренное Ветфармбиосоветом (протокол № 2 от 23 апреля 1999 года). Номер ПВР - 2-2.9/00089.
3. Организован промышленный выпуск энрофлона.
91
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2000 года, Сазонова, Елена Михайловна
1. Аксенов В.И., Ковалев В.Ф. Антибиотики в продуктах животноводства. М.: Колос. - 1977. - 159 с.
2. Антипов A.B. Чувствительность энтеробактерий к антибиотикам. // Эпидемиология и профилактика кишечных инфекций. Таллин. - 1978. - С. 346.
3. Анцифирова Н.Г., Бродинова Н.С., Мороз А.Ф. Влияние бромистого этидия на трансдуктивную передачу R-фактора у Е. coli. / Химиотерапия инфекций и лекарственная устойчивость патогенных микроорганизмов. М.: Медицина. - 1973. - С. 273-274.
4. Астапов A.C., Цынкаловский И.Б. Передача R-факторов от Е. coli шигеллам и сальмонеллам в кишечнике утят. //ЖМЭИ- 1972.-№9.-С. 153-154.
5. Артемичев М.А. Рецептурный справочник по болезням птиц. М.: Колос, - 1972.- 178 с.
6. Артемьева М.А. // ЖМЭИ. 1967. - № 7. - С. 110-114.
7. Артемьева С.А. Колибактериоз птиц. Л.: Колос. - 1977. - С. 5-11, 37-45, 71-78.
8. Артемьева С.А., Бабаева М.В., Петрова И.В. // Птицеводство. -1972.- № 11.-С. 45.
9. Афиногенов Г.Е., Копылова Т.В., Владимиров Н.И. Предупреждение лекарственной устойчивости популяций бактерий применением биологически активных веществ. // Антибиотики. 1984. - № 6. - С. 417-420.
10. Ахмедова А.Г. Биология бактерий группы кишечной палочки, выделенной от птиц. // Афтореф. дисс. . канд. вет. наук. Баку. - 1968. - 16 с.
11. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л.: Медгиз. - 1969. - 143 с.
12. Белоусов Ю. Б., Моисеев В. С., Лепахин В. К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Универсум Паблишинг. - 1997. - С. 339-343.
13. Белоусов Ю.Б., Омельяновский В.В. Клиническая фармакология органов дыхания. М.: Универсум Паблишинг. - 1996. - С. 24, 72-80.92
14. Белоусов И.И., Эльгарт P.E., Терешин И.М. Снижение резистентности к тетрациклину у Е. coli под действием протамина. // Антибиотики. -1973,- № 1.- С. 68-70.
15. Бессарабов Б.Ф. Болезни сельскохозяйственной птицы (инфекционные болезни). -М.: Колос. 1972. - 184 с.
16. Бессарабов Б.Ф., Дьяконова Е.В. Методические указания по применению аэрозолей антибиотиков, химиотерапевтических препаратов, витаминов для профилактики и терапии респираторных болезней птиц. М. - 1975. - 30 с.
17. Бил Дж., Ноулз Дж. Внеядерная наследственность. М.: Мир. -1981.- 168 с.
18. Блатун JT.A., Гришина И.А. и др. Применение нового препарата из группы фторхинолонов ломефлоксацина (максаквина) при лечении больных с раневой инфекцией. // Антибиотики и химиотерапия. 1994. - Т. 39. - № 4. - С. 37-39.
19. Блюгер А.Ф., Векслер Х.М., Новицкий И.Н. Клиническая иммунология кишечных инфекций. Рига: Звайгзне. - 1980. - С. 106-117.
20. Болшев В.Н. Индукторы и ингибиторы ферментов метаболизма лекарств. // Фармакология и токсикология. 1980. - № 3. - С. 373-379.
21. Ветеринарные препараты: Справочник / Под ред. А.Д.Третьякова. -М.: Агропромиздат. 1985.-319 с.
22. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре. И 42-2-82. Приказ Минздрава СССР и Минмедпрома № 430/224 от 18.04.83 г.
23. Гацура В.Н. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. -М.: Медицина. 1974. - С. 5-16, 125, 128.
24. Гейл Э., Кандлифф Э., Ричмонд М. Молекулярные основы действия антибиотиков. -М.: Мир. 1975. - С. 343-360.
25. Глатман Л.И. Ингибиторный анализ R-факторов у Е. coli при конъюгации. // Афтореф. дисс. . канд. мед. наук. М. - 1972. - 19 с.
26. Грошева Г.А. Колисептицимия./Болезни птиц.-М. 1971. - С. 18.93
27. Грошева Г.А., Серебряков A.C. Профилактика респираторных заболеваний птицы. М.: Россельхозиздат. - 1978. - 63 с.
28. Грошева Г.А., Шубин В.А. Материалы годичной научной конференции ВИЭВ, 1966, с. 45-47.
29. Джураев Т.Б. Выживаемость возбудителя колибактериоза птиц на поверхности яиц и методы их дезинфекции. / Болезни сельскохозяйственных животных. Ташкент. - 1976. - С. 42-47.
30. Джуфаев С.А. О дизенфекции яиц, зараженных возбудителями колибактериоза птиц. // Труды Азерб. с.-х. ин-та. 1976. - Вып.З. - С. 74-77.
31. Дорохина О.Б., Коротяев А.И. Изучение свойств несовместимости R-плазмид, определяющих устойчивость к антибиотикам и способность продуцировать антиген колонизации. // Антибиотики. 1984. - № 2. - С. 91-95.
32. Дьяков С.И., Кацалуха В.В., Лебедева И.К. и др. Сравнительная оценка эффективности фторхинолонов при экспериментальной сибиреязвенной инфекции. // Антибиотики и химиотерапия. 1994. - Т. 39. - № 6. - С. 15-19.
33. Евдокимова П.Д. Фармакология антибиотиков и их применение в клинической ветеринарии. Л. - 1981. - 87 с.
34. Завьянцев В.Е. Влияние антибиотиков на образование лекарствен-ноустойчивых штаммов Е. coli in vitro и в организме животных. // Бюлл. ВИЭВ. М.: ВИЭВ. - 1978. Вып.32. - С. 57-59.
35. Закомырдин A.A. Ветеринарно-санитарные мероприятия в промышленном птицеводстве. М.: Колос. - 1981. - 272 с.
36. Заугольников С.Д., Лойт А.О., Иваницкий A.M. Токсикологическая классификация вредных веществ. / Принципы и методы установления предельно допустимых концентраций вредных веществ в воздухе производственных помещений. М.: Медицина. - 1970. - С. 76-83.
37. Зуева B.C., Линевич Ю.Г., Отман Л.С. Передача внехромасомной устойчивости у стафилококков в организме экспериментальных животных и влияние на этот процесс неомицина. // Антибиотики. 1970. -№ 10. - С. 452-454.
38. Израйлет Д.И., Соминский В.И., Шибаева Т.Н. Модификация бром-сульфалеиновой пробы для изучения функционального состояния печени у крыс. // Гигиена и санитария. 1976. - № 3. - С. 59-61.
39. Каган Ю.С. Общая токсикология пестицидов. Киев: Здоров'я. -1981.-С. 22-25,31-33.
40. Картушина А.Е. Патоморфология колисептицемии цыплят. // Аф-тореф. дисс. канд. вет. наук. М. - 1971. - 14 с.
41. Киприч В.В. Диагностика, профилактика и лечение респираторных заболеваний птиц. / Новое в профилактике болезней в промышленном птицеводстве. Под ред. И.Г.Скутаря. - Кишинев: Картя Молдовеняскэ. - 1981. - С. 107-110.95
42. Ковалев В.Ф., Виолин Б.В., Волков И.Б. и др. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии. М.:Агропромиздат - 1988 - 223 с.
43. Крылов A.A., Кац A.M., Канторович A.C. Руководство для лабораторий. -М.: Медицина. 1981. - С. 83-97, 158-162, 204-206, 221-224.
44. Кудрявцев A.A., Кудрявцева JI.A. Клиническая гематология животных. М.: Колос. - 1974. - С.131-161.
45. Кудрявцев Ф.С., Зеленский В.П., Малыгин А.И. Профилактика болезней птиц. Л.: Колос. - 1981. - 199 с.
46. Купчинскас Ю.К., Василяускас Б.И., Кемпинскас В.В. Побочное действие лекарств. М.: Медицина. - 1972. - С. 199-202, 213-215, 269-272.
47. Лабораторные исследования в ветеринарии / Под ред. В.Я. Антонова, П.Н.Блинова. М.: Колос. - 1974. - С. 110-125.
48. Лебедева М.Н. // ЖМЭИ. 1968. - № 9. - С. 3-9.
49. Лебедева М.Н., Водопаева С.Д. Лекарственная устойчивость микроорганизмов. М.: Медицина. - 1972. - С. 14-76.
50. Леесмент О.М. Предупреждение заболеваний птицы. М.: Колос. -1970.- 121 с.
51. Леонов H.H. Передача устойчивости к лекарствам от кишечной палочки к другим видам бактерий. // Сельское хозяйство за рубежом. Животноводство. 1968. - № 1.-С. 39-43.
52. Лопаткин И.А., Синюхин В.Н. и др. Фармакокинетика пефлоксаци-на при гнойно-воспалительных заболеваниях почек и мочевыводящих путей. // Антибиотики и химиотерапия. 1991. - № 11. - С. 40-42.
53. Малета Ю.С., Тарасов В.В. Математические методы статистического анализа в биологии и медицине. М. Московский университет - 1982 - 170с.96
54. Малявин А.Г., Артемичев М.А., Подкопаев В.П. Болезни птиц. -М,- 1962.-С. 360-366.
55. Малявин А.Г., Силин А.К., Арепьева Т.Е. // Ветеринария. 1970. -№3,- С. 57-59.
56. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Харьков: Торгсинг. -1998.-Изд. 13.-Т. 2.-С. 317-318.
57. Мейнелл Г. Бактериальные плазмиды. М.: Мир. - 1981. - 273 с.
58. Микоплазмозы животных. / Под ред. Я.Р.Коваленко. М.: Колос. -1976. С. 6-8. Гл. 1 - Сидоров М.А.
59. Можокина Г.Н., Грачева М.П., Соколова Г.Б. Влияние ломе-флоксацина на функциональную активность клеток фагоцитарной системы. // Антибиотики и химиотерапия. 1996. - Т. 41. - № 3. - С. 25-26.
60. Мозгов И.Е. Фармакология. М.: Агропромиздат. - 1985. - С. 1862, 338-380.
61. Мороз А.Ф., Глатман Л.И. Роль Ы-плазмид в формировании госпитальных штаммов условно-патогенных грамотрицательных бактерий. // Антибиотики. 1983. - № п.-С. 859-874.
62. Навашин С.М., Иваницкая Л.П., Коробкова Т.П. Современное состояние и перспективы применения антибиотиков в сельском хозяйстве. / Разработка и применение антибиотиков немедицинского назначения. М. - 1987. -С. 3-4.
63. Навашин С.М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. -М.: Медицина. 1982. - 496 с.
64. Навашин С.М., Фомина И.П. Справочник по антибиотикам. М.: Медицина,- 1974,- С.126-129.
65. Нечаева Л.А., Ковалев В.Ф., Убашев А.У. и др. Чувствительность к антибиотикам эшерихий и сальмонелл, выделенных из животных, в различных зонах страны. // Сб. науч. трудов ВГНКИ ветпрепаратов. М. - 1981. - С. 6266.97
66. Нещадим Г.Н. Изучение путей ограничения антибиотикорези-стентности у энтеробактерий в эксперименте. Афтореф. дисс. . канд. мед. наук.-М,- 1972.-22 с.
67. Основы промышленной токсикологии. / Под ред. Н.А.Толоксищева, В.А. Филова. Л.: Медицина. - 1976. - С. 25-26.
68. Падейская E.H. Активность максаквина в отношении микобактерий in vitro сравнительно с активностью других фторхинолонов. // Пульмонология. 1993. - Приложение. - С. 71-73.
69. Падейская E.H. Новое в проблеме фторхинолонов. // Антибиотики и химиотерапия. 1994. - № 5. - С. 52-66.
70. Падейская E.H., Яковлев В.П. Фторхинолоны. М.:Биоинформ. -1995.- 208 с.
71. Подкопаев В.М., Воскобойников В.Ф. и др. Борьба с лекарственной устойчивостью микрофлоры профилакториев к антимикробным препаратам. // Сб. научн. трудов MB А. 1977. - Т. 90. - С. 113-117.
72. Противомикробные и противовирусные лекарственные средства. Фторхинолоны. / Информация о лекарственных средствах для специалистов здравоохранения. М:РЦ «ФАРМЕДИНФО» - 1998. - Вып.З. - С. 257-269.
73. Ратинер Ю.А. Антигенное строение жгутиков Е. coli и их серологическая идентификация. / Научные достижения в изучении коли-инфекции. -Под ред. И.В.Голубевой. М.: ВНИИМИ. - 1973. - С. 57-71.
74. Рахманина И.А., Трошева Г.А., Шубин В.А. Меры профилактики и борьбы с колисептицемией птиц. / Профилактика болезней в промышленном животноводстве. М.: Колос. - 1977. - С. 147-152.98
75. Реброва Р.Н., Горохов В.И., Разоренов М.А. // ЖМЭИ. 1972. -№ 1.-С. 119-121.
76. Резвых А.Г. Лекарственные препараты при респираторных заболеваниях птицы. // Птицеводство. 1980. - № 9. - С. 31-32.
77. Ронин B.C., Старобинец Г.М., Утевский Н.Л. Руководство к практическим занятиям по методам клинических лабораторных исследований.- М.: Медицина. 1982. - С. 5-48, 221-224, 263-267, 287-294.
78. Савицкая К.И., Трапезникова М.Ф., Нехорошева А.Г. и др. Таксономия возбудителей и применение максаквина и ципрофлоксацина в лечении осложненных инфекций мочевыводящих путей. // Клин, фармакол. тер.- 1995.-№ 1.-е. 47-80.
79. Сазыкин Ю.О. Биохимические механизмы резистентности к ингибиторам белкового синтеза. М. - 1972. - С. 28-96.
80. Саноцкий И.В., Уланова И.П. Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. М.: Медицина. -1975. - С. 54-73.
81. Сафаров Ю.Б., Джульфаев С.А. // Ветеринария. 1968. - № 4. - С.40.42.
82. Светоч Э.А., Жунусов М.К. Множественная лекарственная устойчивость бактерий и пути рационального применения антибиотиков в ветеринарной практике. // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. 1975. -№ 4. - С. 74-77.
83. Серебряков A.C., Трошева Г.А., Шубин В.А / Ветеринария. 1968.- № 1. С. 46-48.
84. Сидоров И.В. Лекарственные вещества в птицеводстве. М.: Колос. - 1976. - 240 с.
85. Соколов В.Д. Антимикробные средства в птицеводстве. М.: Колос. - 1984. - 174 с.
86. Соколов В.Д., Соловьян H.A. // «Труды ВНИИБП». 1973. -вып. 12. - С. 52-56.99
87. Соколов В.Д., Виноходов О.В., Шорников В.В. и др. / Химиотерапия и профилактика бактериальных инфекций птицы аэрозолями антимикробных препаратов. Загорск. - 1978. - 6 с.
88. Сорокин В.В. Влияние хлорамфеникола на конъюгацию Е. coli. // Актуальные проблемы развития птицеводства. М. - 1974. - Вып.7. - С. 95-99.
89. Терешин И.М. Преодоление лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных заболеваний. Л.: Медицина. - 1977. - С. 61-123.
90. Тивелев П.Г. / Сборник трудов ВНИИБП. Л. - 1968. - Вып. 5/16. -С. 45-48.
91. Тивелев П.Г. / Сборник трудов ВНИИБП. Л. - 1969. - Вып. 6/17. -С. 168-177.
92. Тивелев П.Г. К вопросу этиологии, лечения и профилактики коли-бактериоза кур. // Афтореф. дисс. канд. биол. наук. Тарту. - 1974. - 22 с.
93. Тимаков В.Д., Каган Г.Я. Семейство Mycoplasma taceae и L-формы бактерий. / М.: Медицина. 1967. - 226 с.
94. Тришкина Е.Т. Чувствительность к антибиотикам возбудителей бактериальных инфекций. // Труды ВИЭВ. 1975. - Т. 43. - С.147-161.
95. Уланова И.П., Позднякова Г.И. Сравнительная оценка методов определения функции печени в эксперименте. / Токсикология новых промышленных химических веществ. Л.: Медицина. - 1967. - Вып.9. - С. 43-50.
96. Фадеева Н.И., Шульгина М.В. Механизмы бактерицидного действия максаквина в опытах с Esherichia coli. // Пульмонология. 1993. -Приложение. - С. 55-58.
97. Фомина А.Я., Грошева Г.А., Акулов А.О. Диагностика болезней и отравлений птиц. М.: Колос. - 1966. - 48 с.
98. Хазанов А.И. Функциональные пробы в диагностике заболеваний печени. М.: Медицина. - 1968. - С. 79-85, 211-242.
99. Харченко Г.И., Задорина Т.М., Белова Н.Н. О трансмиссивности факторов антибиотикорезистентности при межродовом скрещивании сальмонелл и эшерихий «Крым». // Антибиотики. 1981. -№ 1. - С. 841-843.100
100. Шнитцер Р., Грунберг Э. Устойчивость микроорганизмов к лекарственным веществам. М.: Иностранная литература. - 1960. - С. 116-169.
101. Шубин В.А. Патоморфологическая дифференциальная диагностика респираторного микоплазмоза птиц. / Бюлл. ВИЭВ. 1972. - Вып. 13. - С. 107.
102. Энтеробактерии. Руководство для врачей. / Под ред. В.И. Покровского. М.: Медицина. - 1985. - С. 44-87.
103. Яковлев В.П., Блатун А.А. Эффективность пефлоксацина в хирургической клинике. // Антибиотики и химиотерапия. 1995. - № 8. - С. 43-45.
104. Яковлев В.П., Яковлев С.В. Клиническая фармакология фторхино-лонов. // Клиническая фармакология и терапия. 1994. - № 2. - С. 53-58.
105. Alan M.N., Haq S.A., Das К.К. et al. Efficacy of ciprofloxacin in enteric fever: comparison of treatment duration in sensitive and multidrug-resistant Salmonella. // Amer. J. Trop. Med. & Hygiene. 1995. - V. 53. - № 3. - P. 306-311.
106. Alestig K. The pharmacokinetics of oral quonolones (norfloxacin, ciprofloxacin, ofloxacin). // Scand. J. Infect. Dis. 1990. - V. 68. - P. 19-22.
107. Altreuhter P. Data on chemistry and toxicology of Baytril. // Vet. Med. Rev. 1987. - № 2. - P. 87-89.
108. Anadon A. Les Fluoroquinolones: aspects pharmacologiques et toxi-cologiques. // Bull. Acad. Vet. De France. 1992. - V. 65. - P. 207-216.
109. Anadon A., Martinez-Larranaga M.R., Diaz M.J. et al. Pharmacokinetics and residue studies of quinolone compounds and olaquindox in poultry. // Ann. Rech. Vet. 1990,-V. 21,-№ l.-P. 137-144.
110. Anadon A., Martinez-Larranaga M.R., Diaz M.J. et al. Pharmacokinetics of norfloxacin and its N-desethyl- and oxo-metabolites in broiler chickens. // Am. J. Vet. Res. 1992. - V. 53. - № 11. - P. 2084-2089.101
111. Ashkenazi S., Mayzahav M., Sulkes J., Zilberberg R., Samra Z. Increasing antimicrobial resistance of Shigella isolates in Israel during the period 19841992. // Antimicrob. Agents & Chemother. 1995. - V. 39. - № 4. - P. 819-823.
112. Atef M., El-Gendi A.Y.I., El-Sayed M.G.A., Ramadan A. Some pharmacokinetic and microbiological aspects of flumequine in chickens. // Arch. Ge-fluegelkde. 1987. -V. 51. -№ 3. - P. 88-92.
113. Avril J.L., Couete I., Travert M.F. et al. Susceptibility to quinolones of Salmonella isolated from man or animal. // Pathol. Biol. 1995. - V. 43. - № 4. - P. 270-273.
114. Aubier M, Lode H, Gialdroni-Grassi G. et al. Sparfloxacin for the treatment of community-acquired pneumonia: a pooled data analysis of two studies. // J. Antimicrob Chemother. 1996. - V. 37 (Suppl A). - P. 73-82.
115. Bailey R. Quinolones in the treatment of uncomplicated urinary tract infections. // Int. J. Antimicrob. Agents. 1992. - V. 2. - P. 19-28.
116. Bauditz R. Results of clinical studies with Baytril in poultry. // Vet. Med. Rev. 1987. - № 2. - P. 130-136.
117. Behr K.-P., Friederichs M., Hinz K.-H. et al. Klinische erfahrungen mit dem Chemotherapeutikum Enrofloxacin in huhnerund putenherden. // Tierarztl. Umschau. 1988. - V. 43. - P. 507-515.
118. Belli P., Poumarat F., Perrin M. et al. Evaluación de la actividad in vivo de la Enrofloxacina en la infección experimental del ternero por Mycoplasma bovis. // J. Med. Vet. 1993. - V. 10. - № 2. - P. 85-91.
119. Broome R.L., Brooks D.L., Babish J.G. et al. Pharmacokinetic properties of enrofloxacin in rabbits. //Am. J. Vet. Res. 1991. - V.52. - № 11. - P. 183 5-1841.102
120. Camquilhem R., Turnut J. Flumequine treatment of experimental Escherichia enteritis in weaned rabbit. // Cuni-Sciences. Paris. 1986. - V. 3. - P. 30.
121. Chevalier R., Cavallo J.D., Meyran M. Bactericidal activity of 6 antibiotics and 3 associations on 6 strains of Salmoella isolated from blood. // Pathol. Biol.- 1995. V. 43. - № 4. - P. 264-269.
122. Chevalier R., Oudar J., Van Haverbeke G. Pharmacotoxcology of flumequine in chickens and laying hens. // Pharmacol. Toxicol. Veterinaire. INRA Publ. Paris. - 1982.
123. Chin N., Novelli A., Neu H. In vitro activity of lomefloxacin (SC-47111, Ny-198), a difluoroquinolone-3-carboxylic acid, compared with those other quinolones. // Antimicrob. Agents Chemother. 1988. - V. 32. - P. 656-662.
124. Chin N.X., Neu H.C. Combination of ofloxacin and other antimicrobial agents. // J. Chemother. 1990. - V. 2 - № 6. - P. 343-347.
125. Conzelman G.D., Babish J.G., Davidson J.N. et al. Pharmacokinetics of enrofloxacin in chickens. // Proc.West. Pharmacol. Soc. 1987. - V.30. - P. 393-395.
126. Cornaglia G. et al. In vitro activity of lomefloxacin against Enterobacteriaceae, Enterococci and Staphylococci. // J. Chemotherapy. 1989. - V. l.-P. 84-90.103
127. Cozarelli N.R. DNA gyrase and the supercoiling of DNA. // Science. 1980. - V. 207. - P. 953-960.
128. Debbia E., Pesce A., Schito G. In vitro assessment of the postantibiotic effect of lomefloxacin against gram-negative and gram-positive pathogens. // Amer. J. Med. 1992. - V. 92. - P. 45-47.
129. Di Vincenzo C., Shatzer K., Venezio F. In vitro activity of lomefloxacin against multiresistant P. aeruginosa, Enterbacter cloacae and Staphylococcus epider-midis. // Diagn. Microbiol. Inf. Dis. 1989. - V. 12. - № 3. - P. 13-16.
130. Domagala J.M. et al. New structure-activity relationships of the quinolone antibacterials using the target enzyme. The development and application of a DNA-gyrase assay. // J. Med. Chem. 1986. - № 29. - P. 394-404.
131. Doganci L., Gun H., Baysallar M et al. Short-term quinolones for successful eradication of multiple resistant Vibrio cholerae in adult patients. // Scand. J. Infect. Dis. 1995. - V. 27. - № 4. - P. 425-426.
132. Duval J.M., Budsberg S.C. Cortical bone concentrations of enrofloxacin in dogs. // Am. J. Veter. Res. 1995. - V. 56. - № 2. - P. 188-192.
133. Ellerbroec K. Microbiological determination of the quinolone carbonic acid derivatives enrofloxacin, ciprofloxacin and flumequine. // J. Med. Chem. 1991. -V. 71.-№2. -P. 187-189.
134. Escribano E., Calpena A. C., Garrigues T. M., Freixas J., Domenech J., Moreno J. Structure-absorption relationships of a series of 6-fluoroquinolones. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - № 9. - P. 1996-2000.
135. Fernandes P.B. Mode of action, and in vitro and in vivo activities of the fluoroquinolones. // J. Clin. Pharmacol. 1988. - V. 28. - P. 156-168.104
136. Flammer K., Aucoin D.P., Whitt D.A. Inframuscular and oral disposition of enroloxacin in African grey parrots following single and multiple doses. // J. of Vet. Pharmac. and Therapeutics. 1991. -V. 14. - P. 359-336.
137. Ford R.B. Enrofloxacin: a new antimicrobial strategy in small animal practice. // Western Veterinary Conference (Nevada). 1988. - P. 17-24.
138. Freundt E.A. The tacsonomy of Mycoplasmatales resent progress and current problems. / Mycoplasmas. Pardubice. 1973. - P. 9.
139. Fussel M. Controlling Mycoplasmosys. // Poultry International. 1984. - № 6. - P. 122-127.
140. Gavrielli R., Yagil R., Ziv G. et al. Effect of water deprivation on the disprosition kinetic of enrofloxacin in camels. // J. Veter. Pharmacol. Therap. 1995. -V. 18.-№ 5.-P. 333-339.
141. Geliert M. DNA topoisomerases. // Ann. Rev. Biochem. 1981. - V. 50. -P. 879-910.
142. Gilfillan E.C., Pelak B.A., Bland J.A et al. Pharmacokinetic studies of norfloxacin in laboratory animals. // Chemotherapy. 1984. - V. 30. - P. 288-296.
143. Glawisehnig E., Frank H., Weber E. Uber die Wirkung von Baytril bei einigen durch Mikroorganismen verursachten Infektionskrankheiten des Schweines. // Wien. Tierarztl. Mschr. 1989. - № 76. - P. 91-96.
144. Goa K.L., Bryson H.M., Markham A. Sparfloxacin. A review of its antibacterial activity, pharmacokinetic properties, clinical efficacy and tolerability in lower respiratory infections. // Drugs. 1997. - V. 53. - P. 700-725.
145. Goldstein E.J.G. Norfloxacin, a fluoroquinolone antibacterial agent. Classification, mechanism of action, and in vitro activity. // Am. J. Med. 1987. - V. 82.-№6B.-P. 3-17.
146. Goren E., De Jong W.A., Doornebal P. Pharmacokinetic aspects of flumequine and therapeutics efficacy in Escherichia coli in poultry. // Avian Pathol. -1982.-V. 11. № 3. - P. 463-474.
147. Hamilton H. et al. Synthesis and structureactivity relationships of pyra-zolo 4,3-d.-pyrimidin-7-ones as adenosine receptor agonists. // J.Med. Chem. -1987. -№30,- P. 91-96.
148. Hannan P.C.T., O'Hanlon P.J., Rogers N.H. In vitro evaluation for various quinolone antibacterial agents ageinst veterinary mycoplasma and porcine respiratory bacterial pathogens. // Res. Vet. Sei. 1989. - V. 46. - P. 202-211.
149. Hannan P. C. T., Windsor G. D., Schmeer N., Stegemann M. Comparative susceptibilities of various animal-pathogenic mycoplasmas to fluoroquinolones. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - № 9. - P. 2037-2040.
150. Hinz K.H., Will B. Zur antibakteriellen in vitro- und in vivo-Wirksamkeit von Enrofloxacin gegen Haemophilus paragallinarum. // Berl. Munch. Tierarztl. Wschr. 1988. - V.108. - P. 408-412.
151. Hinz K.H., Rottman S. Studies in vivo on the efficacy of enrofloxacin against Mycoplasma gallisepticum. // Avian Pathology. 1990 - V. 19. - P. 511-522.
152. Holmes B., Brogden R.N., Richards D.M. Norfloxacin a review of its antibacterial activity, pharmacokinetic properties and therapeutic use. // Drugs. -1985.-V. 30.-P. 482-513.
153. Hooper D.C., Wolfson J.S. Fluoroquinolone antimicrobial agents. // N. Engl. J. Med. 1991. - V. 324. - P. 384-394.
154. Inderlied C., Lancero M., Bermudez L. et al. In vitro activity of lome-floxacin as compared with ciprofloxacin. // Amer. J. Med. 1992. - V. 12. - № 3. -P. 17-20.106
155. Janoir C., Zeller V., Kitzis M.-D., Moreau N.J., Gutmann L. Highlevel fluoroquinolone resistance in Streptococcus pneumoniae requires mutations in par C and gyr A. II Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1996. - V. 40. - № 12.-P. 2760-2764.
156. Jenkins W.L., Friedlander L.G. Pharmacology of the quinolone antibacterial agents. // Western Veterinary Conference (Nevada). 1988. - P. 5-15.
157. Jordan F.T.M., Gilbert S., Knight D.L. Effects of baytril, tilosin and tia-mulin on avian Mycoplasmas. // Avian Pathology. 1989. - V. 18. - P. 659-673.
158. Kaartinen L., Salonen M., Alii L., Pyorala S. Pharmacokinetics of enro-floxacin after single intravenous, intramuscular and subcutaneous injections in lac-tating cows. // J. Veter. Pharmacol. Therap. 1995. - V. 18. - № 5. - P. 357-362.
159. Kayser F.H. The quinolones: mode of action and mechanism of resistance. // Res. and Clin. Forums. 1985. - V. 2. - № 2. - P. 357-359.
160. Khajotia R., Drlicek M., Vetter N. A comparative study of ofloxacin and amoxycillin/clavulanate in hospitalized patients with lower respiratory tract infections. // J. Antimicrob. Chemother. 1990. - V. 26. - P. 83-91.
161. Kordick D.L., Papich M.G. and Breitschwerdt E.B. Efficacy of Enrofloxacin or Doxycycline for Treatment of Bartonella henselae or Bartonella clarridgeiae Infection in Cats. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997 -V. 41.-№ 11.-P. 2448-2455.107
162. Köhler T., Michea-Hamzehpour M., Plesiat P. et al. Differential selection of multidrug efflux systems by quinolones in Pseudomonas aeruginosa. II Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - P. 2540-2543.
163. Lekeux P., Art T. Effect of enrofloxacin therapy on shipping fever pneumonia in feedlot cattle. // Vet. Ree. 1988. - V. 123. - P. 205-207.
164. Lewin C.S., Allen R.A., Amyes S.G.B. Potential mechanisms of resistance to modern fluorinated 4-quinolones. // J.Med.Micr. 1990 - V.31. - P. 153-161.
165. Lietman P. Fluoroquinolone toxicities. // Drugs. 1995. - V. 49. - № 2. -P. 159-163.
166. McQueen Charlene A., Gary M.W. Effects of quinolone antibiotics in test for genotoxicity. // The American J. of Med. 1987. - V. 82. - P. 94-96.
167. Mevius D.J., Breukink H.J. et al. In vitro activity of flumequine in comparison with several other antimicrobial agents five pathogens isolated in calves in the Netherlands. // Vet. Quarterly. 1990. - V. 12. - P. 212-220.
168. Minta Z., Bugajak P., Karczewski W. The evaluation of the effectiveness of Baytril in the treatment of salmonellosis in chicken broilers. // Medycyna Weterynaryjna. 1990. - V. 46. - № 9. - P. 325-328.
169. Molinari G., Baudelloni R, Paglia P. In vitro antimicrobial activity and postantibiotic effect of lomefloxacin a new difluoroquinolone. // Diagn. Microbiol. Inf. Dis. 1989. - V. 12. - № 3. - P. 53-56.
170. Naber K. Lomefloxacin versus ciprofloxacin in the treatment of complicated urinary tract infections. // Int. J. Antimicrob. Agents. 1992. - V. 2/1. - P. 3338.
171. Norris S., Mandell G.L. / The Quinolones ed. V.T.Andreiole. 1988. -P. 1-22.
172. Neer T.M. Clinical pharmacologic features of fluoroquinolone antimicrobial drugs. // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1988. - № 193. - P. 577-580.
173. Neu H.C. Quinolones in perspective. // J. Antimicrob. Chemother. -1990.-V. 26.-P. 1-6.108
174. Neu H.C., Labthavikul P. In vitro activity of norfloxacin, a quinoline-carboxilid acid, compared with that (3-lactams, aminoglycosides and trimethoprim. // Antimicrob. Agents Chemother. 1982. - V. 22/23. - P. 23-27.
175. Newsom S.W.B. The antimicrobial spectrum of norfloxacin. // J. Antimicrob. Chemother. 1984. -V. 13. - P. 25-31.
176. Norrby S.R., Jonsson M. Antybacterial activity of norfloxacin. // Antimicrob. Agents Chemother. 1983. - V. 23. - P. 15-18.
177. Okazaki O., Kurata T., Tachizawa H. Effect of new quinolones on drug metabolizing enzyme system of rat hepatic microsomes. // Chemotherapy. 1988. -V.34.-P. 149-154.
178. Orainey I.O., Bashandi A.M., Saeed E.N. Failure of ciprofloxacin to eradicate brucellosis in experimental animals. // J. Chemother. 1990. - V. 2 - № 6. -P. 380-383.
179. Paton J.H., Reeves D.S. Fluoroquinolone antibiotics. Microbiology, pharmacokinetics and clinical use. // Drugs. 1988. - V. 36. - P. 193-228.
180. Perea E., Garcia I. et al. Comparative penetration of lomefloxacin and other quinolones into human phagocytes. // Amer. J. Med. 1992. - V. 92. - № 4A. -P. 48-51.
181. Piddock L., Hall M., Wise R. Mechanism of action of lomefloxacin. // Antimicrob. Agents Chemother. 1990. -V. 34. - P. 1088-1093.
182. Prescott J.F., Yielding K.M. In vitro susceptibility of selected veterinary bacterial pathogens to ciprofloxacin, enrofloxacin and norfloxacin. // Can. J. Vet. Res. 1990. - V. 54. - P. 195-197.
183. Rademaker C.M., Sips A.P., Beumer H.M. et al. A double-blind comparison of low-dose ofloxacin and amoxycillin/clavulanic acid in acute exacerbations of chronic bronchitis. // J. Antimicrob. Chemother. 1990. - V. 26. -P. 75-81
184. Reyna F., Huesca M., Gonzalez V., Fuchs L.Y. Salmonella typhimurium gyrA mutations associated with fluoroquinolone resistance. // Antimicrob. Agents & Chemther. 1995. - V. 39. - № 7. - P. 1621 -1623.109
185. Redmann T., Glunder G., Schildger B. et al. Therapieversuch mit En-rofloxacin (Baytril) in einer Legehennenherde mit Pullorum-Salmonellose. // Dish. Tierarztl. Wschr. 1989. - № 97. - P. 137-138.
186. Rogstad A., Ellingsen O.F., Syversten C. Pharmacokinetics and bioavailability of flumequine and oxolinic acid after various routes of administration to Atlantic salmon in seawater. // Aquaculture. 1993. - V. 3-4. - P. 207-220.
187. Rubinstein E. Safety profile of Sparfloxacin in the treatment of respiratory tract infections. // J. Antimicrob Chemother. 1996. - V. 37 (Suppl A). -P. 145-160.
188. Sahm D.F., Koburov G.T. In vitro activities of quinolones against En-terococci resistant to penicillin-aminoglycoside synergy. // Antimicrob. Agents Chemother. 1989. - V. 33. - P. 71-77.
189. Samaha I., Ebrecht A., Ellerbrock L. et al. Flumequine residues in eggs. // Arch. Fuer Lebensmittelhyg. 1991. - V. 2. - P. 37-39.
190. Sarakbi T. A new method of treating recurrent salmonellosis. // Poultry International. 1998. -V. 37. -№ 3. - P. 42-43.
191. Schroder J. Enrofloxacina: a new antimicrobial agents. // Afr. Vet. Ver. 1989.-V. 61. -№ 2. - P. 122-124.
192. Shen L.L., Perne A.G. Mechanism of inhibition of DNA gyrase by analogues of nalidixic acid: the target of the drugs is DNA. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1985,-V. 82.-P. 307-311.
193. Shen L.L., Baranowski J., Pernet A.G. Mechanism of inhibition of DNA gyrase by quinolone antibacterials: specificitu and cooperativityof drug binding to DNA. // Biochemistry. 1989. - V. 28. - P. 3879-3885.
194. Sheer M. Studies on the antibacterial activity of enrofloxacin. // Vet. Med. Rev. 1987. - № 2. - P. 90-99.
195. Sheer M. Concentration of active ingredient in serum and tissues after oral and parenteral administrations of enrofloxacin. // Vet. Med. Rev. 1987. - № 2. P. 104-118.110
196. Shungu D.L., Weinberg E., Gadebusch H.H. In vitro antybacterial activity of norfloxacin (MK-0366, AM-715) and other agents against gastrointestinal tract pathogens. // Antimicrob. Agents Chemother. 1983. - V. 23. - P. 86-90.
197. Stein G.E. Review of bioavailability and pharmacokinetics of oral norfloxacin. // Am. J. Med. 1987. - V. 82. - P. 18-21.
198. Stipkovits L. Studies on the efficacy of Baytril in chicks after experi-mentalal infection with Mycoplasma gallisepticum and E.coli. // Vet. Med. Rev. -1988.-№59.-P. 103-107.
199. Studdert V.P., Hughes K.L. Treatment of opportunistic mycobacterial infections with enrofloxacin in cats. // JAVMA. 1992. - V. 201. - P. 1388-1390.
200. Sugar A.M., Liu X-P., Chen R-J. Effectiveness of quinolone antibiotics in modulating the effects of antifungal drugs. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - № 11. - P. 2518-2521.
201. Tourtelotte M.E. Protein sintesys in Mycoplasmas. / L.Hayflick. The Mycoplasmatales and L-phase of bacterria. N.Y. - 1969. - P. 451.
202. Vancutsem P.M., Babich J.G., Schwark W.S. The fluoroquinolone antimicrobials: structure, antimicrobial activity, pharmocokinetics, clinical use in domestic animals and toxicity. // Cornell. Vet. 1990. - V. 80. - P. 173-186.
203. Van der Auwera P. et al. In vitro activity of lomefloxacin in comparison with pefloxacin and ofloxacin. // J. Antimicrob. Chemother. 1989. - V. 23. - P. 209-219.
204. Watts J.L., Salmon S.A., Sanchez M.S., Yancey R.J. In vitro activity of premafloxacin, a new extended-spectrum fluoroquinolone, against pathogens of veterinary importance. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. -№ 5.-P. 1190-1192.
205. Wise R., Lister D. Et al. The comparative pharmacokinetics of five quinolones. // J. Antimicrob. Chemother. 1986. - V. 18. - P. 71-81.
206. Wolfson J.S., Hooper D.C. The fluoroquinolones: Structures, Mechanisms of Action and Resistance, and Spectra of Activity in vitro. // Antimicrob. Ag. Chemother. 1985. - № 28. - P. 581-586.
207. Zeiler H.J., Petersen U. Gau W., Ploschkei H.J. Antibacterial activity of the metabolites of ciprofloxacin and its significance in the bioassay. // Areneimittel-forschung. 1987.-V. 37.-P. 131-134.
208. Zinner S.H., Gilbert D., Dudley M.N. Activity of trovafloxacin (with or without ampicillin-sulbactam) against enterococci in an in vitro dynamic model of infection. // Antimicrob. Agents and Chemoth. 1998. - V. 42. - № 1. - P. 72-77.1. ХРОМАТОГРАММЫ
209. ИЗУЧЕНИЯ СТАБИЛЬНОСТИ ЭРОФЛОНА В ПРОЦЕССЕ ХРАНЕНИЯ1. МИНИСТЕРСТВО
210. Препарат выпускают в форме 5% и 10% орального раствора с содержанием 50 мг/мл и 100 мг/мл энрофлоксацина соответственно во флаконах по 100,0; 200,0; 250,0; 500,0 или 1000 мл.
211. Энрофлон по внешнему виду представляет собой светло-желтый, прозрачный раствор.
212. Хранят препарат с предосторожностью (список Б) при температуре от 5 до 25 С, в сухом, защищенном от света месте. Срок годности при указанных условиях хранения 5 лет со дня изготовления.
213. Энрофлоксацин частично подвергается биотрансформации, превращаясь в ципрофлоксацин. Фторхинолоны выделяются из организма преимущественно в неизменном виде с мочой и с желчью.3. ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА
214. Препарат назначают животным и птице один раз в сутки перо-рально вместе с водой или кормом в течение 3-5 дней в следующих дозах:
215. Вид животных Доза (мг/кг) Доза 5% раствора Доза 10% растворамл/10 кг мл/1 л воды мл/10 кг мл/1 л воды
216. Телята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
217. Ягнята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
218. Поросята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
219. Бройлеры, индейки 5,0-10,0 1,0 - 0,5
220. Птице раствор энрофлона готовят из расчета потребности в воде на 1 сутки. В период лечения птица получает только воду, содержащую энрофлон.
221. Не допускается применение энрофлона курам-несушкам, т.к. энрофлоксацин выделяется с яйцами.
222. Не допускается одновременное применение энрофлона с бактериостатическими антибиотиками (тетрациклинами, макролидами и левомицетином), теофилином и стероидами.
223. Наставление разработано ООО «ВИК здоровье животных» и Всероссийским государственным научно-исследовательским институтом контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ).
224. Одобрено Ветфармбиосоветом (протокол № 2 от 23 апреля 1999 года). Номер ПВР-2-2.9/00089.
225. М И II И С Т Е Р С Т В О СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ Российской Федерации (Минсельхозпрод России)1. ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ107139. Москва. Орликов пер. 1/11 Для телеграмм: Москва 84 Минроссельхот Телетайп: 417738 ЛЕН
226. J-J . Ub Alb Г. №. 1 о — Ь—/ iЬи Per. №1. Г ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ 1по применению энрофлона 5% и 10% орального раствора в ветеринарии1 ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
227. Энрофлон лекарственный препарат, содержащий в качестве активно-действующего вещества производное фторхинолона энрофлоксацин.
228. Препарат выпускают в форме 5% и 10% орального раствора с содержанием 50 мг/мл и 100 мг/мл энрофлоксацина соответственно во флаконах по 100,0; 200,0; 250,0; 500,0 или 1000 мл.
229. Энрофлон по внешнему виду представляет собой светло-желтый, прозрачный раствор.
230. Хранят препарат с предосторожностью (список Б) при температуре от 5 до 25 °С, в сухом, защищенном от света месте. Срок годности при указанных условиях хранения 3 года со дня изготовления.
231. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
232. Энрофлоксацин практически не подвергается биотрансформации в организме и выделяется преимущественно в неизменном виде с мочой и с желчью.3. ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА
233. Препарат назначают животным и птице один раз в сутки перорально вместе с водой или кормом в течение 3-5 дней в следующих дозах:
234. Вид животных Доза (мг/кг) Доза 5% раствора Доза 10% растворамл/10 кг мл/1 л воды мл/10 кг мл/1 л воды
235. Телята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
236. Ягнята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
237. Поросята 2,5-5,0 0,5-1,0 0,25-0,5
238. Бройлеры, индейки 5,0-10,0 1,0 - 0,5
239. Птице раствор энрофлона готовят из расчета потребности в воде на 1 сутки. В период лечения птица получает только воду, содержащую энрофлон.3 3. Не допускается применение энрофлоксацина курам-несушкам т.к. препарат выделяется с яйцами.
240. Не допускается одновременное применение энрофлона с бактерио-статическими антибиотиками (тетрациклинами, макролидами и левомицети-ном), теофилином и стероидами.
241. Наставление разработано ООО «ВИК здоровье животных» и Всероссийским государственным научно-исследовательским институтом контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ).
242. Одобрено Фармакологическим советом ^пптокол № 3 от 19 июня 1997 года). Регистрационный номер ПВР ооо°п>'
243. Действующим началом препарата энрофлон является энрофлоксацин (1-циклопропил-6-фтор-1,4-дигидро-7-(4-этил-1-пиперазинил)-4-оксо-3-хинолин-карбоновая кислота).
244. Настоящие технические условия могут быть использованы с целью сертификации данной продукции.1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
245. Энрофлон должен соответствовать требованиям настоящих технических условий и изготавливаться по технологическому регламенту, разработанному ООО «ВИК здоровье животных».
246. Для производства энрофлона применяют следующее сырье:
247. Энрофлоксацин (Британская фармакопея) 5% 10%
248. Калия гидроксид (ГОСТ 24363-80) 1,25% 2,5%
249. Бензил алкоголь (ГОСТ 8751-72) 1%
250. Кислота лимонная (ГОСТ 3652-69) для коррекции рН
251. Вода очищенная (ФС 42-2619-89) до 100
252. Физико-химические и биологические показатели растворов энрофлона должны соответствовать нормам, указанным в таблице.
253. Наименование показателя Норма Методы контроля5% 10%
254. Внешний вид Светло-желтый прозрачный раствор По п.4.1.
255. Подлинность энрофлоксацина Выдерживает испытание на цветные реакции и по УФ-спектрофотометрии По п.4.2.
256. Цветность раствора Не должен по интенсивности превышать эталон № 46 По п.4.3.
257. Прозрачность раствора Должен выдерживать сравнение с эталоном № I По п.4.4.
258. Определение номинального объема Должен выдерживать требования По п.4.5.рН От 10,0 до 12,0 По п.4.6.
259. Содержание энрофлоксацина, % 4,5-5,5 9,0-11,0 По п.4.7.
260. В процессе производства препарата энрофлон необходимо осуществлять контроль за выполнением требований обеспечения пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91, биологической безопасности по ГОСТ 12.1.008-76, взрывобезопасности по ГОСТ 12.1.010-76.
261. Энрофлоксацин при оральном применении проявляет низкую токсичность ЛД50 составляет 2040 мг/кг, что соответствует 3-му классу опасности по ГОСТ 12.1.007-76.
262. Энрофлоксацин не оказывает токсического действия на общее состояние организма, на нервную систему, органы желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистую систему, не изменяет состав крови. Не обладает способностью к кумуляции.
263. Калия гидроксид щелочь, служит для образования калийной соли активного компонента, которая растворяется в воде.
264. Бензиловый спирт не токсичен, используется как антимикробное защитное средство.
265. Кислота лимонная не токсична; в больших количествах может вызвать раздражение слизистых и кожи.
266. Контроль за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны должен проводиться в соответствии с методическими указаниями по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны и ГОСТ 12.1.005-88.
267. Обучение лиц, работающих с препаратом и его компонентами, проводят по ГОСТ 12.0.004-90.
268. Производство препарата энрофлон безотходное.
269. Энрофлон должен храниться в хорошо укупоренной таре в закрытых сухих складах.
270. Препарат, не прошедший контроль, или с истекшим сроком годности утилизируется в соответствии с ГОСТ 17.2.3.02-78 в закрытых емкостях.3. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ
271. Каждая серия энрофлона должна быть принята отделом технического контроля (ОТК) или контролером предприятия-изготовителя.
272. Качество препарата устанавливают на основании анализа средней пробы, отобранной от серии.
273. Отбор проб производят в соответствии с ГФ XI, вып.2, с. 15.
274. При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей, указанных в настоящих технических условиях, проводят повторно испытания по всем показателям на удвоенном количестве образцов, взятых от той же серии.
275. В случае получения неудовлетворительных результатов при повторном испытании исследуемую серию препарата бракуют.
276. Контрольную проверку препарата в случае рекламации проводит Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.4. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ
277. Внешний вид и цвет определяют визуально при рассмотрении отобранных образцов при хорошем естественном освещении на расстоянии 25-30 см от глаз.42. Подлинность
278. Подлинность энрофлоксацина устанавливают при помощи характерных цветных реакций и методом УФ-спектрофотометрии.42.1. Аппаратура, материалы, реактивы
279. Весы лабораторные общего назначения, по ГОСТ 24104-88 2 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г;
280. Железо треххлористое, по ГОСТ 4147-74, 10% раствор;
281. Кислота соляная, по ГОСТ 3118-77, 2К раствор;
282. Пипетка 6-1/2/-10, 8-2-0,1; 8-2-0,2 по ГОСТ 29169-91;
283. Пробирка П-2-25-14/23 ХС, по ГОСТ 25336-82;
284. Колба мерная 1/2/-100-2, по ГОСТ 1770-74;
285. Спирт метиловый, по ГОСТ 6995-77;
286. Йод кристаллический, по ГОСТ 4159-79, Ш раствор;
287. Натр едкий, по ГОСТ 4328-77, 0,1М раствор;
288. Ультрафиолетовый спектр испытуемого раствора, приготовленного как для определения массовой доли энрофлоксацина по п.4.7.1., в области от 230 до 350 нм имеет максимумы поглощения при 270+2 нм; 323+2 нм; 334+2 нм.43. Цветность раствора
289. Препарат должен выдерживать сравнение с эталоном № 46 и не превышать его по интенсивности (ГФ XI, вып.1, с. 194).44. Прозрачность раствора
290. Раствор энрофлоксацина должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонным раствором №1 (ГФ XI, вып.1, с. 198).
291. Определение номинального объема
292. Препарат должен выдерживать требования, указанные в ГФ XI, вып.2, с. 140-141.46. Определение pHpH препарата энрофлон должен быть от 10,0 до 12,0, установленный по-тенциометрически, по ГФ XI, вып.1, с. 113.
293. Определение массовой доли энрофлоксацина
294. Определение массовой доли энрофлоксацина проводят спектрофотомет-рическим методом и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) арбитражный метод.47.1. Спектрофотометрический метод47.1.1. Аппаратура, материалы, реактивы
295. Колба мерная 1/2/-100-2, по ГОСТ 1770-74;
296. Пипетка 4-1 -1, 4-1 -5, по ГОСТ 29169-91;
297. Натр едкий, по ГОСТ 4328-77, 0,Ш раствор;
298. Спектрофотометр любой марки;
299. Стандартный образец энрофлоксацина (PCO), поставляемый ВГНКИ.47.1.2. Приготовление 0,001% раствора PCO энрофлоксацина
300. Массовую долю энрофлоксацина в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:1. D06 х m х Р
301. Х= ----------------- х 100, где1. DCT х V
302. D06 оптическая плотность испытуемого раствора;
303. DCT оптическая плотность раствора PCO энрофлоксацина;m навеска PCO энрофлоксацина, г;
304. V объем препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл;
305. Р массовая доля энрофлоксацина в рабочем стандартном образце, %.47.2. Метод ВЭЖХ (арбитражный метод)47.2.1. Аппаратура, материалы, реактивы
306. Жидкостной хроматограф любой марки;
307. Колонка из нержавеющей стали, заполненная октадецилсиликагелем типа «Dondapak С-18» (зернением 5 мкм), фирмы «Waters», США;
308. Спектрофотометрический детектор (рабочая длина волны 280 нм);
309. Пипетка 4-1-1,2, 6-1-5, по ГОСТ 29169-91;
310. Колба мерная 1/2/-50,100-2, по ГОСТ 1770-74;
311. Стандартный образец (PCO) энрофлоксацина, поставляемый ВГНКИ.47.2.2. Приготовление стандартного раствора энрофлоксацина
312. В устройство ввода жидкостного хроматографа вводят последовательно равные объемы испытуемого и стандартного растворов. Регистрируют хромато-граммы.47.2.4. Обработка результатов
313. Массовую долю энрофлоксацина в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:1. S06 х m х Р
314. X =----------------х 100, где1. Scr х V
315. So6 площадь пика энрофлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора; SCT - площадь пика энрофлоксацина на хроматограмме раствора PCO энрофлоксацина;m навеска PCO энрофлоксацина, г;
316. V объем препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл; Р - массовая доля энрофлоксацина в рабочем стандартном образце, %. 4.8. Токсичность
317. Тест-доза 10 мг активного вещества в 0,5 мл воды на мышь перорально (ГФ XI, вып.2, с. 182). Срок наблюдения 48 часов.
318. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
319. Раствор энрофлоксацина должен транспортироваться в соответствии с ГОСТ 17768-90.
320. Препарат хранят по списку Б, в сухом, защищенном от света месте, при температуре от 5 до 25° С.6. УКАЗАНИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
321. Энрофлон должен применяться согласно наставлению по применению препарата, утвержденному Департаментом ветеринарии Российской Федерации в установленном порядке.7. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
322. Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие энрофлона требованиям настоящих технических условий при соблюдении условий транспортирования и хранения, установленных настоящими техническими условиями.
323. Гарантийный срок хранения энрофлона 5 лет со дня изготовления. Днем изготовления считают день расфасовки препарата.11. АКТо проведении производственных испытаний препарата Энрофлон 10% оральный раствор
324. Продолжительность испытаний 46 дней, согласно технологии выращивания бройлера.
325. Дата заселения корпуса ЗПС-22 5.12.98 г.
326. Контрольная группа (4, 5 и 6 батареи) получала кламоксил водорастворимый порошок в соответствии с наставлением по применению.
327. Диагноз: колибактериоз и респираторный микоплазмоз поставлен на основании клинических, бактериологических и патолого-анатомических исследований.
328. Курс лечения препаратом Энрофлон 10% был проведен дважды. Первый раз на протяжении 5 дней (с 3 по 7 день выращивания) и второй раз 4 дня (с 27 по 30 день выращивания).
329. Курс лечения кламоксилом проведен дважды на протяжении 5 дней в соответствии с наставлением по применению.21. РЕЗУЛЬТАТЫ
330. Возраст птицы, нед. Опытная группа, 22620 гол. Контрольная группа, 22930 гол.
331. Пало, гол. Сохран., % Привес, гр. Пало, гол. Сохран., % Привес, гр.1 245 98,92 104 445 98,06 1062 529 97,66 267 709 96,91 2543 692 96,94 418 953 95,84 4074 818 96,48 725 1154 94,97 6995 907 95,55 1021 1225 94,66 9636 1162 94,86 1366 1725 92,48 1298
332. День забоя 1306 94,23 1484 2001 91,27 1439
333. Заключение: препарат Энрофлон 10% оральный раствор эффективен при инфекциях молодняка птиц, вызываемых бактериями и микоплазмами, благодаря чему повышается сохранность и суточный привес на всем периоде выращивания птицы.1. Пыльнов М.П.
334. Главный ветврач- В.И.Меньшиков
335. Согласовано: Начальник бройлерного цеха1. Ветврач цеха
336. Бригадир *р.№ 5-Птичница кор. № 11
337. Птичница кор.№ 12- tUc-c^^г.п.Ранина
338. В.С.Монахов Т.К.Дерягина Н.В.Шиляева A.A.Коцырева