Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Профилактика мастита у коров препаратом тиглин

Р1 ь им

1 6 пно |985

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ПАТОЛОГИИ, ФАРМАКОЛОГИИ И ТЕРАПИИ

На правах рукописи

КЛИМОВ Николай Тимофеевич

ПРОФИЛАКТИКА МАСТИТА У КОРОВ ПРЕПАРАТОМ ТИГЛИН

16.00.07 — Акушерство и искусственное осеменение

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

ВОРОНЕЖ 1994

Работа выполнена в лаборатории (Патологии молочной железы .Всероссийского 'научно-исследователшкого ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии.

Научный руководитель — 'кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник В. И. Слободяник.

Официальные оппоненты:.

доктор .ветеринарных наук, профессор В. Д. Мисайлов;

кандидат ветеринарных «аук, доцент Г. Н. Кузьмин.

Ведущая организация — ¡Московская государственная академия ветеринарной .медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина.

Защита состоится « » Дц 1995 г. в УЗ ча-

сов на заседании специализированного совета Д.020.65.01 во-Всероссийском научно-иаоледователь^ком ветеринарном институте 'патологии, фармакологии и терапии '(394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 1Л4-6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан«/,/» _199 ^г.

Ученый секретарь специализированного совета

В. И. Слободяник

i; онш характеристика, работы

Актуальность темы. Среди заболеваний крупного рогатого скоте мастит имеет ¡игроков распространение и наносит значительный экономический ущерб, складывающийся в основном из снижения молочной продуктивности, преждевременной выбраковки и затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий (В.И.Мутовин, 1963. 1974; Д.Д.Лсгвинов и др., 1979; В.М.Карташова/'ЗэвО; Н.К.Оксаматннй , .' 1982; В.М.Карташова и др.,'1988; В.А.Париков, 1990; В.М.Ивченко, 1991).

Возникновение и развитие мастита зависит от' состояния естественной резистентности организм коров и мелочной железы в частности. Одним из важнейших механизмов антибактериальной зашита вымени является бактерицидность кояя. Как известно, кожа механически.непроницаема для большинства микроорганизмов. Однако гомимэ механической барьерной ©нкции она обладает определенными свойства ми.При ослаблении резистентности организма бактерицидные- свойства кот снижаются, что создает условия для развитая воспалительного процесса в определаиных органах и интенсивности их проявления (k.m. Лебедева, 1957).

При изучении стерилизующих свойств, кожи вымени здоровых а ' больных маститом коров А.А.Пшзбург '(1979) установила, что бзктэ-рицидвость ::ожи здоровых долей вымани в 1,5-2 раза выше, чей пораженных. По мяешш О.И.Дзивык (3383) у ¡тавотных е достаточной рэ-зистентностьв к субклиническому ыастату индекс бактарицидности коки вымени выше 80 %.

Зместе с тем; вопросы взаишсвязи бактерицидное®! кохишда-еи с Физиологическим состоянием коров, а тавке динамика бактерицидных свойств кожи вымени и обсемененное та еэ микрофлорой ^.заболевании маститом остаются неизученными.

Лоэтовд дальнейшее изучение факторов, характеризующих иммунобиологическое состояние организма коров при различной функциональной активности молочной железы, их роли при заболевании субклиническим маститом, а такге разработка новых эффективных антисептических средств для профилактики мастита у коров в период лактации,обладающим широким спектром антимикробного действия и-не оказывающих отрицательного воздействия на организм и молочную железу лактирую-щих коров имеет большое теоретическое и ¡фактическое значение.

г

Дель и задачи исследований. Цель настоящих исследований -изучить бактерицидное ть кожи вымани у клинически здоровых и больных useтитои хоров и разработать антисептический препарат для профилактики воспаления вымени в период лактации. Для втого на разрешение были поставлены следующие задачи:

1. -Изучить бактерицидность кожи шиени клинически здоровых коров при различном функциональном состоянии молочной железы.

2. Установить бактерицидное ть и обсемененвость коки вымени ; при заболевании коров субклиническим маститом.

3. Разработать новый антисептический препарат иизучить его врофилактичесхув аффективно с ть при мстите у хоров.

Работа адгюлнена в ранках задания 04.03 "Разработать и внедрить высокозффективнне методы, средстве терапии и групповой про. фнлахтики болезней органов размножения и молочной железы у высокопродуктивных хоров и свиней" Российской научно-технической программы фундаментальных к приоритетных прикладных исследований ("Ветеринарное благополучие", номер госрегистрации 01.9.40 007589)

Научная новизна. Впервые изучена бактерицидноеть кожи вымени при различной функциональной активности молочной железы.а также бахтерицадшость ж обсемененнос ть кожи сосков при заболевании хоров субклинжческим маститом. Разработан иовнй антисептический прэпарат тиглин, изучена «го автимикробвая активность в отвоше-нии основных возбудителей мастита, раздражащее и кожно-резорбтив-вое действие, влияние на организм и полочную железу коров,эффективность" применения с целью профилактики мастита.

Практическая значимость. Результата проведенных исследований послужила обоснованием к раэработке препарата тиглив, предназна -чешого для профилактики мастита у коров в период лактации,которые вошли в нормативно-технические документа на препарат.

Апробация работа. Основные положения диссертации доложены* и одобрены ва научных конференциях Всероссийского НИВИ патологии , фармакологии в терапии .в 1992-1993 гг., на заседании по проблеме "Лекарственные средства для борьбы с вастнтоа животных" ( Рига, . 1991).

Птбликатаи. По материалам диссертации опубликовано 5 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах кашавопженого текста и востоит из введения, обзора ли-

таратуры, материалов и методов исследования, результатов собствен--ных исследований а юс анализа, заключения, выводов, практических предложений, с паска использованной литература. Список литературы включает 237 источников, из них 147 отечественных я 90 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 5 рисунками.

2. МАТЕРИАЛ И ШОДН ЙСС1ЕЗЮБШЙ

Рабе та выполнена в лаборатории патологии иэлочной железы Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института па--тологта, фармакологии и терапии. Юшвихо-зк'сперакентальнае исследования проведена ва коровах голштннизярованной симментальской породы молочнотоварных ферм совхозов "Дон" Хоходьского района,"Кировский" Ново-Усизнского района, колхоза "Подгорное" Рамонского района Воронежской области. Опытной станции Воронежского агроуна-верситета, а такжэ на музейвнх и дадешг культурах макроорганизмов. Материалом для исследования служила секрет вымена я кровь кла- -зачески здоровых и больных кастетом коров.

Диагноз ва иастат ставили согласно "Рекомендациям по борьбе з иастягоы коров" (1985). определяя реакцию секрета вымени с 2^-м раствором дастишша. татр лизоциаа И а 1фобз отстаивания Муто-вияу (1974), количество соматических клеток на приборе ."Фосоома -гик" и проводя бактериологические исследования согласно "Метода -веский указаниям по бактериологической? исследованию шлока ж ;екрета вныени коров" (1983). Ддя оценки «квднояогяческого состояния здоровых а больных мзетатом коров в секрета вымена определяй ¡ктзнность мурашдазн гурблдиыетричеегш по ттохзЯМ.Ряпу/*: ■ ' [1965), в условных единицах (УЕ),. показатели фагоцитоза лейкоцитов секрета выиенд коров изучали с помощь» опсово-фггоцитарной зеакции по методу Н.К.Оксаштного, (1979), концентрацию лактоферри-г 1а в снятой молока - «а то до« радиальной иицунодиф$у заа гоГ.А.Ман-ша в модификации Б.Е.Караваева (1983); в крови - количество ¡ратроцатов и лейкоцитов подсчитывала на приборе Зфльтер-Каунтар 33: гемоглобин определяли колоримэтраческа по Салли; в сыворотке ¡рови - количество иммуноглобулинов классов & а Нс.гомощы» ра-спальной яыиунодайузии по Манчини с использование!» швоспещфа-[всках сывороток против иммуноглобулинов крупного рогатого скота, ■ейкоцдтарфув формулу выражали в процентах от 200 подсчитанных гейкоцатов.

Для изучения бактерицидное та кожа вымени, как показателя

естественной резистентности молочной железы при различной функциональной активности (1-я неделя после отела. 1-й. 4-й, 7-й месяца лвк^^^сфоршровали 5 груш клинически здоровнх коров по . 10 жжвотвйх в каждой, молоко которых давало отрицательную реакцию с 2¡f раствором топлива. 7 животных определяли индекс бактерицид-вости коп я отбирали проба мэлока по 10-15 кг для исследований вир* лиоцима М, количества соматических клеток, пробы отстаивания. идевтифакации вида микрофяоры.

Изучение бактерицидных свойств кожи вымени проводила ю метода» Н.НЛле»шарсюЯ и О.Г.Алексеавой (1959) в модификации Д.i. Евнвбург (1976).

Для изучения бактерицидноета крив вымена у здоровых и больных субклишческим маститом воров в середине лактации подобрали две группы животных: 10 клинически адоровнх и б коров больных суб-клжническим маститой.

7 животных определяли индекс бактерицидное ти кожи ввмеки.обсемененное ть оосков микрофлорой, а также отбирали-пробы секрета вымени для лабораторного исследования вышеуказанных показателей.

С целью изучения роди динамики показателей бактерицидносга и обсэменазгоотн кожи вымени в возникновении воспаления юлочной железа подобрали ДО клинически здоровых хоров, мэлоко которых давало отрицательную реакции с 2$ раствором мастидива, у которых жаждав 3-4 дня определяли бактерицидное» в еженедельно бактериальную обсемевеавость кожи вымени.

Антимикробное действие, входящего в комплексный препарат - «глин локадена, аз отвоше:дш к основный возбудителям мастита,изучали методом серийных разведений в жидкой питательной среде по методике В.1.Над тока (Х981)<

Изучение раздражающего влияния препарата тиглин на кожу кроликов проводила по методу В.В.Гацура (1974).

Кожно-резорбтиБное действие таглина изучали на 12 белых мишах в соответствии с методическими указаниями по исследования кож но-резорбтивного действия в эксперименте (Гигиена труда и профессиональные заболевания. 1964.- * 9).

Испытание активности изготовленного антисептического препарата тиглин проводили по методика "скрининг тесты" ( Р- Ркиимт^ vt a¿. » 1976). Для опыта подобрали 5 клинически здоровнх коров 2-3 лактации. Соока вымани животных погружали в суспензии золотистого стафилококка (штамм БМ-57 в тлокэ). концентрация кото-

503 составам 10 КОЕ в I кл. Черс-з I час после hzzoctízz суспен-ци «лкроорганазгов сс-.кя погружала в reciapyeise [.зстзор; с рэз-■cveiíiu содержанием ломэденз, npatuZ передай з 0,5 левкД зад-яй - 1,0 %, правый задний - 1,5 % раствора, лозяй передай слу-

контролем, его погружала в физиологический рсстаор. Спустя i чзс стеряльвыта ?.зипонаш двлш&з смывы с Rosa сосков вымени.Порученные а.шы разводила физиологически« растворо« в 10, 100 раз í хэлалп посев на кровяной агар. Поело инкубация з течение 24 Чазов при 37 °С учаткзала роот колопкеэбрззущлх единиц бактерий.

Изучение влияния антисептического препарата кула за нэ оргп-•гзы я молочную нелозу провела ка 12 клинически здоровчх лзкта -•у ¡г;::.- коровах, которых разделала на две группы. Соска вымэнз ко-таз первой группы (6 голов) обрабатывала тлглалои после каглогс юения в течение 2 недель, ¿звотнио второй группы (6 голов) слу-али контролем.

До я после опыта от подопытных л контрольных ¡тавотных была ¡зята кровь лз молочной вены и секрэг шмони для лабораторного ¡сследавания.

Состояние неслецифяческой резистентности оценивали гю кол.:-гестзу соматических клеток, концентрации лактофоррзна а ахтивнос-га цурзюдазы в секрете вымени.

О состоянии факторов гударзльного ям«унитата судила по со-шраанию иммуноглобулинов £ и "i в обезжиренной секрете. уровни тсоно-фагоцитарной реакции лейкоцитов, а такие по количеству цу-ииадаза п иммуноглобулинов G а У з сыворотке крова.

Эксперикштальнпе исследования по изучению профилактической (©активности таглзна при шетите у коров пробела на 51 кликачес-ш а до роз ой лактирувдей корове. Соски в« иена 17 коров первой груя-ш обрабатывала после каждого доения тиглином, у 20 животных вто-юй группа - хпносептом, 14 коров третьей группа служили контро -isa. Каздше 3-4 дня проводила клиническое обследование животных а юследовала молоко с 2Í раствором ма Сталина. От короз, молоко ко-горнх давало полога тельную реакцию с 2% раствором мастидша, отбивала пробы секрета вымени для лабораторного исследования. Кроыя кто .для лабораторного исследования ежеиесячно а в конце олнта от topos всех групп из каздой доли отбирали пробы молока для учета тробм отстаивания, подсчета количества соматических клеток, у чета .'зтра лизоцямз М, вдда микрофлоры.

Широков производственное испытанно препарата таглин при про-

филоктаке глета га б!?ло проведено на 205 лахгируххдих коровах .Всех та но п х по принципу парных аналогов распределила.на четыре группа. Соски вымени коров первой группа («.= 80) обрабатывали после каждого доения таглинои, второй - (л = 44) антисептической эмульсией, гретьей - (п = 23) хиносепгоы, животные четвертой групш (а = 53) служили контролем. Каздне 3-4 дня проводила клиническое обследование гявотных и исследовали секрет вымена с 2% раство.ром касг?,етйа. От больных «астаток и от коров, молоко которых давало положительную реакцию с 2% раствором шелуша отбирали пробы секрета вымени для лабораторного исследования.

Экоткач-скув эффективность применения тиглина определи. .1 отглзсяо Методов определения экономической эффективности ветера- ■ парных мероприятий, утвержденной Главным управлением ветеринарии КСХ СССР (1984).

Математическая обработка результатов исследований цроведена с использование« методов вариационной статистики по соответствующей программе на ЗВЛ "Элэктроника-55".

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Степень-распространения и роль микробного фактора в этиологии иастита у коров

С целью внясаения степени распространения мастита у коров в период лактации в течение 1989-1990 гг. проводили ежемесячное обследование 750 яивотнкх. Из долей выдана с ядштчески выраженным мастито у и положительно реагирующее с 2% раствором масидаша отбирала проба секрета для идентификации возбудителей мастита .Кроме того отобрали 228 араб кэлока от клинически здоровых коров для изучения степени его обсеишенности.

Всего за Д8а года зарегистрировали 513 случаев заболевания коров ид с та том. В среднем год переболело 167 коров по одно од разу, 57 - переболели повторно, а у 32 животных шетат регистрировали ю три и более раза.

При в той субк лническим циститом болели в 3,5 раза чаще,чем клинически вырвлшннш.

Установлено, что заболевание коров маститом регистрируется постоянно в течение года. Однако наиболее высокая частота заболе-вгвал как клинический, так и субклиническка маститом наблюдается в оезнно-знкнай и весенний периоды соответственно 50,2 % и 31,2 %.

Прж бактериологическом исследования секрета вымена пораген-еег субкляннческям мэстетон долей била выделена кокковая вдкрофло-ра в 94,7 $ проб и только в 8,4 % случаев - у здоровых, что в 9,9 раза меньше.

Из обаего количества выде. эяькх при мастите микроорганизмов стафилококка составляют 55.8 % (эолошсгай - 44,6 %, эпвдершльный

- 12,2 % ) и стрептококк - 43,2 % (агалзктайзыЗ - 29,7 %, вымени

- 9,3 %, дизгалактЕ&щй - 4,2 %).

На основании излученных результатов могло заключить, что заболевание- коров мзстатом в период лактации имеет широкое распространение и этнологическим фактором при этом »огут выступать гак пагогекнао. ток л условяо-дзтогенныэ стафилококки и стрептококки.

3.2. Бактерацидность когз вымени,как показатель резистентности ызяочной гелезы коров

3.2.1. Бактерицидное ть хога вымени клинически здоровых коров при различном функционально« состояния молочной аелеза

Результаты исследования динамика показателей цеспоцкфаческои регдстек:-лоста молочной язлвзц кетзическа здоровчх коров при раз-лзтаои функциональном состояния полочной яелезц представлены в табл.1.

Таблица I

Показатели естественной неспецифяческоЗ рззисгентности молочной хелззы клинически здоровых короз 3-4 лактации

__; .Период лектзцгщ__ ■

1 неделя : I изо. :4 цес; \ I нёс. : Запуск после родов: лактзцаи : лактации : лактации :

Титр лнзоцпмз М (мм) 18.5*2,0 ;9,2+1,1 21,2+0,9 20,3±1,9 19,1+1,2

Число соматических клеток (тыс./мл) 215,4+46,2 312,7+47,3 346,3+87,2 532,9*133,1 1223. ,1+286,3

Индекс бактерицидноета (%) 91,8+2,0 87,8x2,4 87,6±2,4 79,7±2.3 78^4.4

Колчэство соматических клеток в секрете молочной гелезы, начиная с первой недзля посла родов, имеет тенденция к увеличению, возрастая к середине лг^тациа в 1,6 раза и существенно не меняется

d ■

(P<0,05) вплоть до ?-го мэсяга лактации. Затем.в период запуска происходит значительное повышение числа соматических клеток ( в 3,5 раза по сравнений с серединой лактация).

Кссяедовавяо титра лазоцкиа И в. секрета вымени клинически здоровых коров позволяет заключить, что изменение функциоаэлько-го состояния организма животных не оказывает существенного влияют на дицашку итого показателя. Однако прослеаиваэтся тендэнцщ. увеличения титра лизоцика М от начала к сародзпо дактацаа и скаке гае этого показателя в период запуска.

Изучение бавдерацздиоста коза вныэва показало, что у клинически здоровее животных в различные функциональна периода склочной ¡полоза тог показе толь снижается от качала лактации к запуску Так, наибольшая величина индексл бактерицидное та коки отмэчепа в пероув неделю тасло родов (91,8+2,0). С началом дактациа индекс

¡ктерацзддасти скиааогся до 87,8+2.4 % а остается практически не азкошшм до соредпш лактацаа. Б конца лактацаа бактеркцадноста> кожи умоныпэется то 79,7+2,3 % (Р< 0,05), что на 12,1 % ниже ypoi ля этого показателя в 1-й надело после родов. у запускаемых корог отмечается тенденция дальнейшего сшаенае этого показателя по сравнении с лактируодцыа &авотнншй.

При сравнения дана мака пока заседал бактерицидноета кожа вымени о другими фвктораьа састеиы воспецяйической резкотентноста. такала как титр, дааоцааа М и число сомамчосиих клеток установлено, что индекс бактерицидное та во see функциональные периоды вг ходягся с ваш в опрэделеаной взаимосвязи.

Так, иааыоньинй татр лизоциш Ы а саше низкое число соматических клеток отмочено в первую неделю после родов, когда индекс бактораццдноота кожи оказывался кзкеакадьныы. •

Сопоставляя данные литература (Л.В.Скарнова, 1990; Н.Д.Са-жшшкова. 1992) с получениями в ешоы опыте результаюма, южно предположить, что, вероятно, на фоне ослабления функции таких систем естестаенкой резистентности как лактоферрин, лизоцам М.со-«атачоскае клотка. антиокислительная активность лападов в иоло -знаний период, -эьата молочной жэлозы а большей стопена осуществляется за счот возросшей бактерицидной способности коза противостоять проникновения микроорганизмов в полость вымани.

Установленное ослабление бактерицидных свойств коня вымеяя у кланичэска здоровых корой в дэрпод продолзакцейся лактацаа на 2-4 мосяцях еа точеная, скорое всего uosko рассмтряпать но как

ослабление одного из звеньев неспецифической резистентности. а как перера определение функции занят молочной халвзы от о днях ее структур к другим.

Снижений бактеряоддноста кохя вымена у запус&аеиых хавбтннх обусловлено, вероятно, ослаблением активности всей системы неспа-цафаческой резистентности, что водтверадается анализом дивакага таких показателей, как лизоциы М а чгедр, соматических слеток.Так. одновременно со снижением индекса бактерицидноста снижается я титр лизоцима М, а происходящее пря этом нарастанивчисяасомати-ческих клеток по данным М.МещерягоЕСЙ (1980) является результатом эффективного концентрирования их вследствие уменьшения количества продуцируемого секрета вышна запускаемых коров, ори этом фагоцитарная функция нейтрофалов, являвдяхея такаэ иомпонентаиа соматических клеток, снижается {..■¿■Цнрет-бь.,. 1982). что свидетельствует об угнетении защитных сил органа.

3,2.2. Бактерицщшос'ть а обсемеяенвость кожа вымена у здоровых а.больннх субклиязчесгам маотатом коров в середяяа лактация

Проведенные исследования показала, что индекс баятерятид-воста кожа вымени у здоровых животных составляет 84,2±1,9 в обсеыэненность - 337,6±Х8Д здс-ЛЕОВ.

7 ксров болзнях субклиничаскаыистатои шгеко бактераоди-шети' ко ей вниена в 1,5 раза взаз (Рс 0*001), а обсвмав«вв6ст& в 2.9 раза вывэ (Р< 0,001). чем у вляяачвеяв адаровах аавотнях.

Анализ оэказателей бвкгврицкднйся! я обсемвнзяностн коп вдиани интактвых долей ш сравнении о больявмя аэкавнвает» что величина этих показателей достоверно изменяется. Так, индекс бактерицидное га иптактшос долей составил 74,5±5,5 бактериальная обсеменеяность - 560,0^128,5 тнс.КОВ, тогда как пораженных долей соответственно 54,5±5,3 % я 985,0±150,0 таоЛСОБ. Сравяенке бактерицидноста я стезениобсемвненоста кожа од меня интактанг долей больных субшпгаячвскиы части той аявотянх с шказатвлякя, далученниш от клинически здоровых коров, свидетельствует о том, что наличие воспаления сопровождается пониканием в 1,1 раза бактерицидной активности а повышением в 1,7 раза бактериальной об-сешненноста интактных долей.

В тока время необходим) отметать, что у нзкоторых' здоровых гявотных были отмечены низкие шказагела бактерицидноста,а так-

же высокая бактериальная обсемеве-ность кожи вымени.

Для выяснения причин подобных несоответствий, а также с цаяыо изучения роли показателей бактерицидное та и обсемевенности кожи вымени в возникновении скрнтопрогекапаего воспаления вымеЕи подобрали 10 клинически здоровых коров, у которых каждые 3-4 дня в тесание 2 месяцев определяла индекс бактерицидноети коки выме-ш, а га res а ее бактериальную обсеманекзость.

В процессе исследования установили заболевание субклиничес-ksu маститом у 4 коров в 6 долях вымени.

Завамака бактерицидное та и степени обсемевенности rose вымани представлена на рис. I.

Анализ подученных данных свидетельствует о том, что индекс бактерицидноети кони вымени уже за 6 дней до заболевания достоверно (Рл 0,001) снизился ш сравнении с исходным уровнем в 1,3 раза а составил 66,4^5,9 %, достигая минимального значения (55,4±5,3 %) прд заболевании маститом. Индекс бактерицидноста ин-тактных долей оставался высоким и достоверно на отлетался от индекса бактерицидноега здоровых животных как за 6 дней до заболевания (75,3+5,5 %), так и к шменту заболевания маститом (74,5^,5^).

Обсемзвенность микрофлорой кожи долей вымени достоверно . (Г< 0,001) в ?,7 раза повышается по сравнению с исходным состоянием а составляет 670,Oil50,0 тыс.КОЕ. Максимального значения степень обсешвенноети кожи вымени достигает при заболевании (885,0+150,0 тыс.ЕОЕ). Б тоже время этот показатель интактных долей заболевших маститом коров составил-578,3±168,1 тыс.КОЕ и достоверно не отличался от такового у здоровых животных (ЗЗЗ.С_ь 39,6 тасЛСОЕ).

Установлено,■ что в отличив от обсемевенности и бактерицидное-га коки выьени достоверных изменений количества соматических клеток и татра лизоцима М до заболевавия субклииическам маститом Ее происходит.-Увеличение количества соматических клеток в 5,8 раза (Р-с 0,001) и снижение титра лизоцаиа М в 1,4 раза 0,001) да сравнению с исходным уровнем установлено только при заболевании маститом. -

В связи с этим ыожво заключить, что в возникновении воспаления в полочной железе коров существенную роль играет изменение состояния системы неслецишической резистентности, в частности ослабление бактерицидной активности кока, способствующей увели-

а и»

100 -90 _

80 -70 -60 -50 -

ис.КОЕ Ю00_

800-

600

400-

200.

Периода асследования

Рас.1. Показатели бактерицидное та и обсеиененности козш

вымени до и при заболевании коров кастатои

— злоровыэ коровы--кнтактнне доля-----пораженные

■ доля

"I - за 3 под. до заболевания 2 - за 2 нед. до заболевания ^ - за I нед. до заболевания Ц - г день заболевания 5 - через I нед. меле заболевания

ченип степени обсевененности юлочной железы г проникновению возбудителей мастита через сосковый канал в ткана.вымени.

8.3. Экспврииенталькые г клинические исследования го обоснование разработка антисептического препарата таглин для профилактики мастита у коров в период лактации

3.3.1. Антимикробная активности лоыадена

Проведенные исследования показали, что ломаден обладает широким спектром антимикробного действия, бактерицидной и фунгицидной активностью в отношении основных возбудителей мастита. Лоиад-н подавляет рост кокковой иикре^лоры з концентрации 3,1-6,3 ыкг/ыл.Более устойчивы к нецу оказались килечная палочка в С&псЩя а>Шс&я{ (12,5-156,0 метЛи). Бактерицидное действие препарат проявил в .дозе всего лишь в 2 раза превыпащей бактериосгатическуи.

Подучив положительные результаты до бактерицидной активности лоиадена в отношении основных возбудителей мастита, изготовили лекаре твенву и форцу препарата в виде раствора шд условный названием "тиглин". В качестве активиодействупцего вещестьа использовали ломаден, а основу препарата составили глицерин, полививияовый сшрт а вода.

Дли "босновация концентрации лодадева в предлагаемой антисептическом препарате таглир провела исследования с помэдью "скра-кинг тестов". Результаты опыта представлены в табл.2.

Таблица 2

Показателя : Концентрация ломздада

: 0,5 % : 1,0 % : 1,5 % : Контроль

Количество тыс.КОЕ на

I сы' коха состав выыени 716±2Ю П2±5 7 84^38 2180±555

В процентах к контрольному соску 32.8 5.1 8,9

Как видно из представленных данных в табл.2 ломаден в 1% концентрации обладает звачительныы антисептический действием при искусственной нанесении шкробов на когу сосков. Бри дальнейшем повкггниз его концевтрац&и до 1.5 % бактерицидный эффект значительно :;е усаливается. •

Одним из условий, ьредъявляеш;« к антисептическим препаратам.

является сохранность актавностл препарата в проиенутко меаду дой-' ками. С этой целью подобрали 5 кшшическз здоровых коров 2-3 лак-таигга, у которых до обработки, а такго через 10 Егпзут, 4 4303 3 8 часов брали сютн с коза сосков. Антзеоптпчэску® обработку вро-водилз левах передних я левых задних долой, правая передняя к правая задняя служила контролем (обработке но подвергалась).

Данные о количестве шкробов аа ноге сосков, после обработал нх тиглиноа представлена в табл. 3.

Таблица 3

Обсемеяекяость ноли сосков после антисептической обработки тагликои

Препарат :Число:__Бремя в?ятая с;ава _

:_Количество гас.КОЗ яз~1 сгГ

: :До обработ-: Через 10 :Чзвбэ 4' : Через 3 : :ки : минут ' : часа : часов

123,8^36,13 318,7+45,2 658,6^4,1 1682,2+105

х - Р<10,001-0,01 по отношению к исходное кровни.

Как в'-дно из представленных данных после, доеная т позе сосков находится от 342,0 до 352,0 гас, щйробоз на-I см2. Спустя 10 аинут после обработки тагляном .количество кякробов снизилось в 190 раз и составило 1,840,2 тыс. КОВ.

Б тоже вреый на кона необработанных препаратом (контрольных) сосков достоверного умзньоення в количестве колоний микробов-не установлено.

Спустя 4 часа после обработки сосков отмечали увеличение количества микробов. Однако, обоакененность оставалась в 2,8 раза кенызе, чем до обработки, в то время как количество какробов па коже необработанных сосков за этот период достоверно увеличилось а 1,9 раза (Р^.0,001).

Через 8 часов с измени обработки обсемененное я> сосков увеличилась до 318,7+45,2 тас.КОЕ аз I см2 а не отличалась от показателей обсемененности коги вымени до обработки, хотя н оставалась в 5,3 раза кеньпа, чем на необработанных сосках.

хнглия 10 , 342.0+15,2 1,8±0,2:":

Днетяллз-рованная

вода 10 362,0+64,5 376.4+56,3

Таким образом, разработанный вами препарат тиглин обладает . широкий спектром антимикробного действия, высокой бактерицид--ностьв. Нанесенный на коку сосков препарат сохраняет активность а проьшзгтхе мезд доениями, что характеризует его специфическую активность, как антисептического препарата* предназначенного для обработка выкзна с целью профилактики мастита у коров.

3.3.2. Изучение раздракащего и-когно-резорбтквного действая препарата тиглин иа лабораторных

гевотных

Изучэнао раздрагасгего действая на коау нового комплексного препарата тгглав нровола на двух кроликах массой тела - 3,1-3,2 кг юрода белый волакад.

Установлено, что новый комплексный предзрат таглав не вызывав* раздраяеная коха кроликов. Различая в окрашивании коеного покрова при визуальной оценке не отличаются через 3, 5 и 12 ча-оов, что указывает на отсутствие сегментарного рефлекса кохи со стороны азшненля тонуса вегетативной нервной састеьга опытных ноле£.

■ Согласно данный В.Б.Гацура (1574) такие вещества относятся к группе переносашх организма завохяых а «згут'быть рекомендована в качестве лекарственных препаратов, Изучение когхо-резорбтав-ного действая таглана -провела в соответствии с нэтодичееккка указаниям во исследованию коызо-резорбтивЕОГо действия химических веществ в эксперименте.

В осаге попользовала 12 клинически здоровых. воразльяо рг^-вагых белых мышей хивой массой 22-25 г.

За период ошта не наблвдали изменения массы тела ькзеИ.признаков интоксикации, смертельных исходов как в опытной, так и в контрольной группах, что свидетельствует об отсутствии всасывания препарата тиглин через Евповревдгаиную козу.

Такац образом, проведедные исследования позволяют заклпчить, что разработанный нами антисептический препарат таг ли н не обладает кохно-резорбтавным и раздражающий действием, что отвечает требованиям. предъявленным к антисептическим препаратам для обработки кохи сосков вымани после доеная с целью профилактики «астата.

3.3.3. Влияние таглика на органязи я далочну» гелезу лактарущах ".оров

Исследования проведены на 12 клинически здоровых коровах.Сосет вымени 6 коров опытной группы обрабатывали тигллном после каждого доения в течение двух недель, а 6 коров контрольной группы обработке не подвергали.

После двухнедельной обработки коаи..вымани тагдином не отмечали изменений как со стороны общего состояния организма животных, так и молочной железы.

Установлено, что в оттекающей от зыаени крови коров как опытной, так и контрольной групп возрос уровзнь иммуноглобулинов классов & и М, а снизилась актианость мурамидазы го сравнению с исходным состоянием (табл.4).

Таблица 4

Показатели иммунологического статуса коров до и чер з

2 надела после обработка сосков вымени тиглином

Показатели :. До ■ Чеоез 2 надели

: обработки : '¿иглин : контроль

1 : 2 ': Ь : 4

Классы иммуноглобулинов: & [.¡г/т) М (мг/шО Мурашдаза (УЕ)

Кровь «.= 15

25,6±1,0 О,75^3,09 0,25^0,04

п= 3

29,8+8,5'

1.32;$ ,05х' 1.3340,02ж 0,18*0 ,03Х 0,19±Р,023

л.= 3

32,0±4,5

Молоко -

л= 15 /•£.= 3 • «■= 3

Титр дизоцииа М (ым), 22,4*0,2 23,6+0,4Х 22;8*р,6

Отнятия,клетки (тыс./мл) 494,6^40,3 264,7^68,7х 396,8+71,5

Яактоферрин (мкг/ыд) 57,4+4,3 57,3*3,2 73,0±19,5

1/*урзы!даза (ТЕ) 0,58^5,01 0,46*0,04 ■ 0«52*р,05

Классы иммуноглобулинов:

& (мгАш) 2,68^0,24 2,39*0,43 2,55*Р,22

М (мг/мл) 0,13^0 ¿01 О.Г^.ОЗ* 0.14*р,03

Процент фагоцитоза 93,0±6,19 96,0*4,92 94,0+6,46

Фагоцитарный индекс {%) 12,15^0,95 I3.87jP.8I 12,46+1,21

Фагоцитарное число 11,16+1,05 12,04+0,45 12,52^,69

х - Р^-0,05-0,001

. йго свидетельствует.о то«, что тстллз уе оказкваёт влияния аз гикунодогический статус всего организма лак тиру идах коров.

Анализ изменения показателе?. &олока коров опытной к контрольной групп показывает, что через 2 недели после применения тнглппа достоверно возрос титр лизоцима Н до 23,6+0,4'ым 0,05) к снизилось количество соштглесюах моток по сравнению с исходным уровней в 1.9 раза (Р^.0,01), Кроме- того, в иолоке коров опитной группы по сравнению-с контрольными sarao тньче и исходным состоянием отмечена тенденция снижения активности вдракпдаза и увеличения количества иыкунсглобулинов класса U.

. В крови из молочной вена, взятой через два недели после начала обработки, не установлено достоверной разница в изменения количества гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и лейкоцитарной формула.

3.3.4. Экспериментальные исследования по изучению профилактической эффективности ■ тигляна у коров в период, лактация

Экспериментальные исследования по изучению профилактической эффективности таг-лика по сравнению с хиноеептоы и отрицательным контролен провели на 51 лакхируюцай корове. Установлено, что наиболее высокой эффективностью при профилактике шетита у коров обладает предлагаемый препарат тиглин, профилактическая эффективность которого в 1,2 раза превышает эффективность хнносепта.

Установлено, что бактериальная обсебаненноеть кожи сосков вышни у здоровых, коров в середине лактации составила от 1037,6*219,8 до 1389,1*244.9.

.В результате обработки коки вниени антисептическими препарата® бактериальная обсемененное гь значительно снизилась в течение ¡опыта. В группе, где соски вымени обрабатывала тиглинои-в 5,1 раза, хкносептоы — в 1,7 раза. Однако динамика снижения, была различной. Если в опытной группе (таглин) бактериальная об-сеиененвость снижалась в течение всего опыта, то в контрольной (хнноселт) минимальной была после двух месяцев обработки и достоверно не отличалась от обсемененносги опытной группа. Но после трех иесяцев обработки обсеменен ность в контрольной группе была достоверно выше, чем в опытной, хотя к достоверно в 1,8 раза ниже, чем в группе где гшвотных не обрабатывали препаратами. • В группе, где коровы обработке не подвергались уровень бак-

герлальвой. обсеыевенЕости достоверно не изиеняяся в течение опыта.

3.3.5. Научно-производственные опнтн по изучению эффективности тиглина при профилактике иасгата у коров

Результаты эффективности проверяемое антисептических препаратов для профилактики мастита у лактируодях коров представлены в табл.5.

Таблица 5

Эффективность применения антисептических препаратов для профилактики мастита у коров в период лактации

Лечебное средство : Было в опыте: Не заболело маститом .-

Тиглин 80 319 ; 71 88,8 306 95,92

Антисептическая эмульсия 44 176 32 72,7 160 90,9

йносепт 23 92 17 73,9 85 92.4

Контроль (без обработки) 58 231 89 67,2 198 85.7

Как показали проведенные исследования, тиглин обладает значительным преимуществом по сравнению, с другими препаратами.Так, профилактическая эффективность тиглина. - 88,8 %, в то время как в результате применения антисептической эцулъсии - 72.7 %, а хи-носепта - 73,9 %, что на 16,1 % и-14,9 % соответственно меньше.

В контрольной группе за период опыта воспалительный процесс в вымени диагностировали у 32,8 % коров. '

Таким образом, проведенные исследования по профилактике мастита у лакирующих коров показали, что предлагаемый новый антисептический препарат тиглин в 2,9 раза снижает заболеваемость коров маститом.

Экономический эффект применения препарата тиглин для профилактики мастита у лактирупцих коров по сравнению с антисептической эмульсией составил 15.350 руб. на одно кивотаое.

ВЫВОДЫ

I. Ежегодно ва фериах промышленного тана маститом переболева-ю,- в среднем 34;2 ^ коров, в той числе клинически выраженным -7, Г % и субклиническии - 26,5 %. 7 22,2 % животных мастит регистрируется однократно, 6,7 % - повторно и у 4,3 % три и более раз.

2. Этиологическое значение в возникновении субклшшческого мастита у коров имеет кокковая микрофлора, которая ори бактериологическом исследовании секрета вымени выделяется^ 94,7 % случаев и представлена 53,8 % стафилококками и 40,9 % стрептококками. Иэ секрета вымени клинически - здоровых коров микроорганизмы выделяются в 9,5 % случаев, а том числе в 3,9 % - стафилококки и

5,6 % стрептококки.

3. .У клинически здоровых лакшрунцих коров наибольшей бактерицидное тьп кока вымени обладает в начале лактации (91,8^2,05?}, уменьшаясь к середине ■ (87,6±2,4 %) и самая низкая в период запуска (78,5±4,4

4. Бзктерицздзость кожи вымени за 6 дней до заболевания коров маститой понижается и составляет 66,4^6,9 %, достигая минимального значения (55,4±5,3 %) в момент заболевания, а ее обсеые-невность возрагтаетв 2,2 и 3,3 раза соответственно.

V. У <Зол4ных субклиническим маститом лактирупцих коров бактерицидное ть коки вымени снижается в 1,5 раза и в 2,9 раза увеличивается ее бактериальная обсеменеяность.

6. Бактерицидная активность ломадена по отношению культур стафилококков я стрептококков составляет 6,3-12,5 мкг/ип, кишечной палочка - 50,0 мкх'/мт.

7.. Оптимальной концентрацией активнодейсгвующего вещества в новом антисептическом препарате тиглин является 1% содержание ломздена, которое обесычивает антисептическое действие при обработке кожи сосков вымени в течение 8 часов.

8. Комплексный препарат тиглин при нанесении на кожу вымени клинически здоровым лакирующим коровам не оказывает раздра-жапцего и кокно-резорбтивного действия и не угнетает общие и локальные факторы защиты.

9. Эффективность таглипа при профилактика мастита у коров в период лактации составляет 88,8 %, что на 14,9$ и 16,1? выэе по сравнению с применением антисептической эмульсии а хиносепта.