Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Показатели иммунной системы и эффективность иммунокоррекции у собак с хроническими заболеваниями кожи
На правах рукописи
ЛОПАТИНА МАРИЯ ЮРЬЕВНА
ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИММУНОКОРРЕКЦИИ У СОБАК С ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ КОЖИ
16.00.03.- Ветеринарная микробиология,
вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Екатеринбург, 2004
Работа выполнена на кафедре инфекционных и инвазионных болезней Уральской государственной сельскохозяйственной академии
Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Донник Ирина Михайловна
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Ощепков Владимир Григорьевич
кандидат ветеринарных наук Красноперое Владимир Анатольевич
Ведущая организация: Омский государственный аграрный университет и институт ветеринарной медицины
Защита состоится «2» апреля 2004 г. в «13 » часов на заседании диссертационного совета Д.220.067.02 по адресу: 620219, г. Екатеринбург, ул.КЛибкнехта, 42
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уральской государственной сельскохозяйственной академии
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Служебные собаки нашли широкое применение во многих странах мира (Бацанов Н.П., 1992; Архипов А.А., 1999; А.Иншаков, 2003). Российская кинологическая Федерация - самое крупное объединение собаководов России насчитывает около 4 500 клубов и порядка 7 миллионов собак служебных, охотничьих и декоративных пород (Островский ОА., Пасынков ГА, Нисхизов В.Д., 1991; А.Иншаков, 2003).
По сведениям пресс-службы УВО при ГУВД Свердловской области, только с начала этого года с помощью служебных собак, в Свердловской области было изъято пять авиационных бомб, 49 гранат и снарядов и еще 50 кг килограммов взрывчатки. А обнаруженных наркотиков - 150 килограммов. В прошлом году с помощью служебно-розыскных собак службы вневедомственной охраны Свердловской области было раскрыто 430 преступлений и задержано за совершение преступлений 638 человек (ШустроваМ-В., 1995; СНовик, 2004)
В последние годы в крупных промышленных центрах у собак особенно участились случаи прорыва иммунитета при вакцинации против вирусных заболеваний, отмечается слабый ответ на медикаментозное лечение, резко увеличилось количество случаев аномального течения беременности и родов, рождение мертворожденных или слабых, с пониженной массой тела плодов (Донник И.М., Шкуратова ИА, 1997). Анализ гематологических показателей собак в возрасте 7-12 месяцев г. Екатеринбурга выявил у 53% одновременное снижение количества гемоглобина, общего белка, каротина и нарушение фосфорно-кальциевого равновесия, а также снижение количества лимфоцитов (Новиков Н.М., 1986; Захаров В.Н. с соавт., 1990; Зерчанинова Е.И., 2000; Макаров В.В., 2000; Карпецкая ИЛ, 2003).
Результаты исследований последних лет свидетельствуют о важной роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития инфекционное воспалительных процессов у животных (Barlough J.E. and Pedersen N.C, 1995; Федоров Ю.Н., Верховский ОА с соавт., 1996; Павлова А.И., 1997; Кузнецов А.И. с соавт., 1998; Смирнов П. Н., Трунов А. Н., 1999; Воронин Е.С., Шахов А.Г., 1999; Донник И.М., 2000; Монов, 2002)
В связи с тем, что многие территории находятся в экологически неблагоприятных условиях от высокой концентрации промышленного производства и от скопления источников радиоактивного излучения и загрязнения техногенными радионуклидами показатели иммунной системы животных, изменяются в данных условиях (Baxevanis C.N. et al, 1994 Gershwin L.J., Krakovka S., Olsen R.G, 1995; Р.М.Хаитов, 1995; Р.В.Петров с соавт., 1995; Храмцов В.В. с соавт., 1995; Н.М. Любашевский, 1996; Донник И.М., 1997; Садовников Н.В, 1997; Симак СВ. и др., 1998; Татарчук А.Т. с соавт., 1998; Красноперое ВЛ., 2000; Смирнов А.М.. с соавт., 2000; Шубик и соавт., 2000; Смирнов П.Н., Донник И.М., 2001; Воронин Е.С. с соавт., 2002; Исаева А.Г., 2002; Смирнов П.Н, Храмцов; Федоров B.C.; Федоров Ю.Н., 2003).
Исследованиями, проведенными среди мелких домашних животных в крупных промышленных городах, выявлены серьезные сдвиги в иммунологическом статусе, что накладывает отпечаток на течение инфекционной и не инфекционной патологии (Донник И.М., Шкуратова ИА, 1997; Я.Б. Бейкин, 1998; Серых М.М., Симак СВ., 1999; Юшков Б.Г., Климин В.Г., Северин М.В.,1999; Смирнов П.Н., Донник И.М., 2001; Верещак НА, 2002; Черешнев ВА с соавт., 2003).
Особое место среди всех заболеваний собак занимают болезни кожи, наибольший процент которых составляют хронические дерматиты (78%). Кожа, являясь барьером неспецифической, защиты организма, одна из первых .реагирует на воздействие ксенобиотических факторов. Проведенный н ' fiUJJfiJfllSiEl?д^мны**1 л >
БИБЛИОТЕКА ]
что в 2003 году у 50% всех обратившихся в клинику собак регистрируется кожная патология, чю па 15% и 10% выше по сравнению с 2001 и 2002 годами соответственно. Многие хронические заболевания, в частности, такие как воспаление наружного слухового прохода, зачастую вызываются банальными микроорганизмами, поэтому антибиотикотерапия в таких случаях дает только временный эффект, а длительность заболевания обусловлена иммунодефицитым состоянием (Griffin, CA.. Kwochka, K.W., 1993; Кузнецова Е.С., Мендоса СЛ., 2002). Демодекоз собак относится к наиболее часто встречаемым и трудно поддающимся лечению заболеваниям, в основном протекающим в хронической форме (Вершинин НИ, Петренко В.И., 1995, 2003). По мнению многих авторов (М.М. Abdei-Halirn et all., 1990; Barriga, O.O., Al-Khalidi, N.W., Martin, S. and Wyman, M.,1992; Ларионов СВ., 1996; A.A. Лисицина и др., 1997; Василевич Ф.И., 1998; Ю.Н. Федоров, О.А. Верховский и др., 2000; Василевич Ф.И., Ларионов СВ., 2002; Медведева М.А., 2003) это заболевание неизбежно сопровождается иммунологической недостаточностью организма животного. Большая часть грибковых инфекций вызывается грибами, которые составляют естественную флору кожи и слизистых оболочек, иммунные клетки организма часто бывают не в состоянии фагоцитировать грибы, вследствие этого происходит хронизация патологического процесса (P.M. Гаскелл, М. Беннет, 1999; Долгих В.Т., 2000; Ниманд Х.Г., Сутер П. Б., 2001)
Проблема лечения данной патологии весьма сложна и актуарна, а продолжающийся поиск новых методов терапии и более эффективных лекарственных препаратов свидетельствует об отсутствии в настоящее время каких-либо радикальных средств лечения (Беляков И.М.. Лукьяновский В.А., Симбирцев П.Ф.,1981; Janeway C.A., Travers P., 1996; Лебедев А.В. с соавт., 2000; Сазонова Н.В., 2003).
В настоящее время в клинической практике наиболее актуальными становятся иммунологические исследования крови. С помощью результатов этих тестов можно количественно определить показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета, показателей неспецифической резистентности организма, а при изучении их в динамике -эффективность проведенных курсов лечения, и разработать способы коррекции иммунной недостаточности (Лебедев К.А., Понякина И.Д., 1990; Абовян Ю.Г. и др.. 1991; D.P.Stites, АЛ. Terr, T.G., 1994; Gershwin L.J., Krakovka S., Olsen R.G., 1995; Zola H., RobertThompson P. and McEvoy R., 1995; Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф., 1995; Новиков Д.К., Новикова В.И.,1996; Донник И.М., 1997; Смирнов П. Н., Трунов А. Н., 1999; Федоров Ю.Ф., Верховский О.А., 2000).
Важным является разработка методик, позволяющих объективно оценить иммунный статус отдельных особей, и результаты затем экстраполировать на всю популяцию (Плященко СИ., 1991; Жучаев К.В. и др., 1994; Бакшеев А.Н., 1998; Павлова А.И. с соавт., 2000; Верещак НА., 2001; Исаева А.Г., 2002)
Отмеченные выше обстоятельства и определили актуальность и направление настоящей работы.
Цели и задачи исследования •
Целью исследований являлось определение и сравнительная оценка основных иммунологических показателей в зависимости от пола, возраста и породных особенностей, клинически здоровых и больных хроническими заболеваниями кожи собак и выявление у них наиболее эффективных способов коррекции иммунологической недостаточности.
Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить иммунологические показатели у здоровых собак разного возраста, пола и породных особенностей.
2. Дать оценку показателей иммунной системы собак с хроническими заболеваниями кожи: демодекозом, дерматомикозами. дерматитами наружного слухового прохода.
3. Изучить динамику иммунологических показателей при введении препаратов достима и миелопида.
4. Разработать рекомендации по коррекции иммунологической недостаточности у собак с хроническими заболеваниями кожи.
Научная новизна
Проведен иммунологический мониторинг собак из крупных промышленных городов впервые, на значительном поголовье животных, изучены в сравнении иммунологические показатели крови у клинически здоровых собак определенных возрастных (1-12 месяцев, 1-3,3-5 и старше 5 лет) и половых групп, а также разных пород (немецких, кавказских овчарок, ротвейлеров, мастиффов, пуделей, колли), которые можно ориентировочно использовать в качестве нормативных.
Изучены иммунологические показатели крови у собак с хроническими заболеваниями кожи, вызванными демодекозом, дерматомикозами, . дерматитом наружного слухового прохода и выведены усредненные значения соотношения Т- и В-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров, а также регуляторного ТЪ/Тв индекса.
Впервые у собак для характеристики степени иммунодефицитного состояния использованы значения лейкоцитарного Т-индекса.
Изучена эффективность применения миелопида и достима для коррекции вторичных иммунодефицитов у собак с хроническими заболеваниями кожи, оптимизированы методы лечения данных патологий.
Разработаны рекомендации по коррекции иммунологической недостаточности у собак с хроническими заболеваниями кожи и рекомендации по проведению иммунологического мониторинга.
Практическое значение работы
Количественные показатели гематологических и иммунологических исследований, установленные в процессе опытов, используются в диагностической и лечебной практике у собак.
Применение миелопида и достима у собак с хроническими заболеваниями кожи, сопровождающимися вторичными иммунодефицитами увеличивает эффективность и сокращает сроки лечения.
Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении курсов клинических дисциплин для студентов зооветеринарных специальностей сельскохозяйственных вузов.
Разработаны методические рекомендации: «Иммуноморфологические показатели у клинически здоровых собак», «Иммуноморфологические показатели крови и коррекция иммунодефицитных состояний у собак с хроническими заболеваниями кожи»,
Апробация работы
Материалы диссертационной работы представлены и обсуждены на Международной научно-практической конференции «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных», (Воронеж, 1999), Международной научно-практической конференции молодых ученых «Физиология человека и животных: от теории к практике», (Сыктывкар, 2000г), региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных», (Екатеринбург, 2002, 2003 ); Международном Ветеринарном конгрессе. (Москва, 2003г); региональной научной конференции «Молодежь и наука» (Екатеринбург, 2003г); заседании ученого совета факультета ветеринарной медицины УрГСХА (2003,2004).
Публикации результатов исследований
По материалам диссертации в прудах, сборниках и материалах научных конференций опубликовано 10 печатных работ, в том числе двое научно-практических рекомендаций.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 174 источника, в том числе 33 иностранных. Работа иллюстрирована 16 таблицами, 77 рисунками.
На защиту выносятся положения:
1. Сравнительная оценка клинико-гематологических и иммунологических показателей у собак разного возраста, пола, пород.
2. Оценка клинико-гематологических и иммунологических показателей у собак с хроническими заболеваниями кожи, вызванными демодекозом, дерматомикозами, воспалением наружного слухового прохода.
3. Эффективность использования иммунокорректоров у собак с выраженными иммунодефицитными состояниями.
2. МАТЕРИАЛЫ И *МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в 1998 - 2003 гг. на кафедре инфекционных и инвазионных болезней Уральской государственной сельскохозяйственной академии.
Объектом исследования служили собаки, принадлежащие индивидуальным владельцам домашнего и вольерного содержания, а также из восьми государственных и муниципальных питомников крупных промышленных центров Уральского региона (Екатеринбурга, Нижнего Тагила, Челябинска).
Для исследований отбирали клинически здоровых животных по принципу аналогов. Учитывали живую массу, возраст, пол и породные особенности. Собак исследовали клинически и профилактически дегельминтизировали. У всех собак опытных и контрольных групп отбирали пробы крови для гематологических, иммунологических и биохимических исследований.
В первой серии исследований определяли клинико-гематологические, иммунологические и биохимические показатели у собак разного возраста, пола и породы. Для этого были сформированы 4 возрастные группы собак: 1-12 месяцев, 1-3-х. 3-5-ти и старше 5 лет, отдельно суки и кобели.
Для выявления породных особенностей клинико-гематологических, иммунологических показателей были сформированы 6 породных групп: немецкие овчарки, кавказские овчарки, пудели, мастиффы, колли, ротвейлеры.
Во второй серии исследований изучали клинико-гематологические. иммунологические показатели у собак с хроническими заболеваниями кожи. Были сформированы 3 опытные группы: 1-я - животные, пораженные клещом DemoJcx canis. 2-я - животные с генерализованными дерматомикозами (вызванные Microsporum canis. Trichophyton mentagrophytes, Aspergillus fumigatus.), 3-я - животные с дерматитами, наружного слухового прохода.
В третьей серии опытов изучали динамику клинико-гематологнческих. иммунологических показателей при введении животным препаратов миелопид и достим.
Были сформированы 3 группы животных по принципу аналогов, учитывали вес, возраст, степень клинико-гематоиммунологического расстройства, по 15 голов в каждой. Животным контрольной группы применяли общепринятую схему лечения (препаратами: сайфли, бутокс, ципам, вединол плюс).
Животным второй и третьей группы дополнительно к основной схеме лечения вводили препараты иммуномодуляторы - миелопид и достим согласно наставлению и проводили исследование гематологических и иммунологических показателей крови через 21,45 и 60 дней лечения.
Гематологические исследования включали: подсчет форменных элементов крови, определение лейкоцитарного профиля, количества гемоглобина по общепринятым методикам (Симонян ГА, Хисамутдинов Ф.Ф., 1995).
Для оценки иммунного статуса организма использовали тесты первого и второго уровней, предложенные Р.В.Петровым с соавт. (1992) для массовых исследований, включающие определение Т-лимфоцитов (Е-РОЛ) в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Бажин МА, 1989; Петров Р.В., Хаитов P.M., 1992;), В-лимфоцитов (М-РОЛ) методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши (Бажин МА, 1989; Новиков Д.К., Новикова В.И., 1996); субпопуляции Т-(Е-РОЛ)-лимфоцитов: теофиллин-резистентных (Ттфр-РОЛ) и теофиллин-чувствительных (Ттфч-РОЛ)- лимфоцитов в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Высчитывали отношение Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ)-лимфоцитов (Т/В индекс) и лейкоцитарный Т-индекс (ЛТИ), который выражается в отношении количества лейкоцитов к количеству Т-лимфоцитов, соотношение субпопуляций Ттфр-РОЛ- и Ттфч-РОЛ-лимфоцитов (Караулов А.В., 1999). Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом осаждения в полиэтиленгликоле с молекулярной массой 6000 (Трунов А.Н., 1990; Труфакин ВА Трунова Л.А., 1994).
Фагоцитарную активность нейтрофилов определяли методом опсоно-фагоцитарной реакции (Смирнов П.Н.,1989), с использованием культуры золотистого стафилококка (штамм № 209), а также высчитывали фагоцитарный индекс,. фагоцитарное число и фагоцитарную активность.
При биохимическом исследовании крови определяли в сыворотке мочевину - по реакции с диметилглиоксимом, холестерин - по реакции с уксусным ангидридом (по Ильку), глюкозу - ортотолуидиновым методом по И.П. Кондрахину, амилазу -унифицированным методом, билирубин-унифицированным методом Ендрасика-Грофа с использованием стандартного набора фирмы «Vita! diagnostics SPb».
Исследование соскобов с кожи проводили по общепринятым методикам (Белов А.Д.. Данилов Е.П., Дукур И.И., 1995).
Бактериологические исследования проводили по общепринятым методикам (Байрак В.А., Беляев В.М., Гительсон и др., 1980).
Всего было отобрано 1965 проб от 902 животных, проведено 12323 гематологических, иммунологических, биохимических, бактериологических, клинических исследований.
Полученные цифровые данные подвергали статистической обработке с использованием стандартных прикладных программ, определяли средние величины (М), стандартное отклонение (5), ошибку средней величины (т), критерий достоверности Стьюдента (И.ПАшмарин, ААВоробьев, 1963).
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Иммунологические и гематологические показатели у клинически здоровых собак
Исследования выявили, что у собак городов Уральского региона гематологические, иммунологические показатели в общем соответствовали возрастной динамике, однако количественные значения отличались от приводимой в справочной литературе (Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф., 1995; Федоров Ю.Н, Верховский О.А., Слугин И.В., 2000) Результаты исследований показали, что морфологический состав крови у животных разного возраста значительно варьировал (табл.1).
Наиболее характерные изменения выявлены в возрастной динамике уровня лейкоцитов: наибольшего значения он достигал у собак в возрасте до 1 года и составлял 9,83±0,64 тыс/мкл, а к 3 годам снижался на 10%, к 5 годам на 19%, и после 5 лет на 20,8% по сравнению с собаками в возрасте до года.
Возрастные изменения содержания количества лимфоцитов были аналогичны динамике общего содержания лейкоцитов. Наибольшее количество лимфоцитов отмечено у собак в возрасте до 1 года. К 3 годам отмечено снижение в 1,3 раза, а у собак старше 5 лет - в 2,2 раза.
Наибольшее количество Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ)-лнмфоцитов установлено у собак в возрасте до 1 года. К пяти годам эти значения снижались почти в 2 и 1,5 раза соответственно (рис. 1).
1-12 мес 1-3 лет 3-5 лет старше 5 лет
Рис. I. Динамика Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ) -лимфоцитов у клинически здоровых собак разного возраста
Индекс Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ)- лимфоцитов при физиологически нормальном функционировании иммунной системы определяют равным 1,5-2 ед. Повышение этого показателя свидетельствует о недостаточности гуморального звена, а понижение -клеточного звена иммунитета (А.В.Караулов, 1999). Исследования показали, что у клинически здоровых собак в возрасте до 1 года он достигает максимального значения, снижаясь к 3 годам на 10,5%, и остается затем практически на неизменном уровне (табл.1).
Уровень ЦИК является одним из критериев оценки функциональной зрелости гуморального звена иммунной системы (Константинова Н. А. , 1996; Смирнов П. П., Трунов А. Н., 1995). Прослеживая возрастную динамику количества циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), отмечено, что минимальных значений ЦИКи достигали у собак в возрасте до года, а затем повышались, что может свидетельствовать о нарастающей антигенной нагрузки на организм (Константинова Ы. А. . 1996; Смирнов П. Н.. Трунов А. Н., 1999)
Таблица 1
Гематологические и иммунологические показатели собак разных возрастных групп __(М±т) п=677_
Показатель Возрастные группы
1-12 месяцев 1-3 лет 3-5 лет 5 лет и старше
Гемоглобин, г/л 126±8.28* 142,9±4,8* 137,43±3,8 133.69*3,85
Эритроциты, млн/мкл 4,26±0,21 4,55±0,29 4,23±0,3 4,19±0,22
Лейкоциты, тыс/мкл 9,83±0,64 ♦* 8,87±0,49* 7,96±0,5* 7,78±0,36**
Эозинофилы, % 5,05±0.72 5,71 ±0,6 6.93±0,4 6,13±0,57
Базофилы, % 0 0 0 0
Нейтрофилы, п/я. % 2,47±0.64* 2,07±0,4* ** 2,36±0,4* ** 1,81±0,36*
Нейтрофилы, с/я, % 56,53±2,1* 59,84±2,5 59,93±2,1 64,88±1,46*
Моноциты, % 3,12±0.47* 3,0±0,46 2,64±0,3* 2,31 ±0,32*
Лимфоциты, % 32,74±2.3* ** 25,2±1,58* 28,14±2,4* ** 25±1,43* **
Лимфоциты, гыс/мкл 3,18±0.32* 2,22±0,18* 2,2±0а 1,42±0,12*
Т-(Е-РОЛ) лимфоциты, % 33,89±2.9* ** 29,98±2,4* 27,5±1,9** 27,56±2.17
В-(М-РОЛ) лимфоциты, % 18,26±1,4 17,62±1,7* 15,43±1,05* 15,5±0,98
Т-(Е-РОЛ),тыс/мкл 1,03±0,11* ** 0,67±0,09* 0,6±0,09 ** 0,53±0,06* **
В-(М-РОЛ), тыс/мкл 0,54±0.05* 0,39±0,06* 0,34*0,05* 0,3±0,03*
Лейкоцитарный Т-индекс (ЛТИ), ед. 11,2±1.4* ** 16,9±2,0* 16,3±1,8 17,6±1,8**
Т/В индекс, ед. 1,9±0,09* 1,7±0,1* 1,76±0,09 1,76±0,1
Ттфр-РОЛ, % 26,11±1,07* 29,84±1,0* 31,86±1,0 29,38±0,89
Ттфч-РОЛ, % 14,16±0,5* 17,16±0,5* 17,43±0,4 17,81 ±0,66
ТЪ/Тз индекс, ед. 1,85±0,03* ** 1,75±0,03 1,83±0,04* 1,57±0.04* **
Фагоцитарная активность (ФА), % 29,63±2,8* 32,03±3,7 33,14±3,08* ** 26,88±2,32**
Фагоцитарное число (ФЧ). у .е. 1,43±0.29 1,49±0,24* 1,71 ±0.2* 1,68*0,21
Фагоцитарный индекс (ФИ), у .е. 4,36±0.54 4.27±0,54* 4,86±0,4* 6,93±1,07*
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), у .е. 15,1±9.91* 20,37±2,2* 18,45±2,5* 24,5±0,65*
* - разница между группами достоверна (р<0,05)
При анализе субпопуляций Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов (хелперов (ТЬ) и супрессоров (Тб) наибольшее практическое значение имеет Ттфр-РОЛ/Ттфч-РОЛ лимфоцитарный индекс (ТЬ/Тб индекс). На разных этапах нормапьно текущего воспалительного процесса количество в крови Т-хелперов и Т-супрессоров меняется, но так, что Т-супрессоров не становится существенно больше, чем Т-хелперов (К.А.Лебедев, И.Д.Понякина, 1990). Исследования показали, что наибольших значений индекс ТЬ/Т достигал у собак в возрасте до 1 года, а к 5 годам снижался, что свидетельствует о возрастании количества супрессоров у собак старше 5 лет (рис. 2).
1.9
1.5 1.45 1.4
1-12 мес 1-3 лет 3-5 лет старше 5 лет
Рис.2. Соотношение теофиллинрезистентных (Т-хелперов) и теофнллинчувствительных (Т-супрессоров) лимфоцитов у клинически здоровых собак разных возрастных групп
Показатели неспецифической резистентности характеризовались максимальным» значениями у собак старше 3 лет (рис. 3).
1-12 мес 1-3 лет 3-5 лет старице 5 лет
Рис. 3. Показатели несчеиифической резистентности у клинически здоровых собак разного возраста
Снижение количественных показателей иммунной системы у собак старше 5 лет может свидетельствовать о развитии иммунологической недостаточности. Это также подтверждают значения лейкоцитарного Т-индекса. Так как лейкоцитарный Т-индекс характеризует интенсивность клеточного звена иммунной системы, то считают, что чем выше данный показатель, тем значительнее проявляется дефицит Т-клеток. В медицинской практике, этот индекс лежит в интервале от 4 до 7, высокий индекс рассматривают как признак тяжелого иммунодефицитного состояния (А.В. Караулов, 1999). Прослеживая динамику значений лейкоцитарного Т-индекса у клинически здоровых собак разного возраста, мы отметили, что уже к 3 годам он повышается на 33%, а после 5 лет - на 36% по сравнению с животными до года.
С возрастом возрастает антигенная нагрузка на организм, в том числе и от воздействия неблагоприятных экологических факторов, в условиях высокой концентрации промышленного производства, что способствует развитию вторичных иммунодефицитных состояний (Р.М.Хаитов, 1995; Р.В.Петров с соавт., 1995; Н.М. Любашевский, 1996; М.Р.Сапин с соавт., 1996; Смирнов П.П.. Донник И.М., 1996; Исаева А.Г.. 2000, ВахеуатБ С.К Ы а1, 1994).
При анализе результатов биохимических исследований, выявлено, что в возрастных группах они имеют свои отличия, но соответствуют значениям, характерным для животных данного вида (Комаров Ф.И., Коровин Н.Ф.. Мсныишков В.В.. 1998; Хазипов Н.З., Аскаропа А.П.. 1999).
Известно, что становление физиологических показателей крови подвержено значительным колебаниям в зависимости от пола (Симонян Г.Л., Хисамутдинов Ф.Ф.. 1995). Доказано, что эстрогены и андрогены оказывают влияние на развитие иммунной системы, так и на иммунный ответ (Черешнев ВА. с соавт., 2002). В связи с отим имеют место колебания количества Т- (Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ) лимфоцитов у сук и кобелей (Бакшеев А.Н., 1998; Булатова СВ., 2001).
Нами выявлено, что суки до 3-х летнего возраста имели наиболее высокий уровень лейкоцитов, лимфоцитов, Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоцитов. Это может быть связано, с тем, что в период полового созревания повышение гормонов эстрогенов стимулирует лейкопоэз и дифференцировку иммунокомпетентных клеток, напротив, мужские половые гормоны оказывают в основном иммуносупрессивное действие (Караулов А.В., 1999; Черешнев В.А, Юшков Б.Г., Климин В.Г., Лебедева Е.В., 2002; Воронин Е.С., Петров A.M., Серых М.М., Девришов Д.А,2002) (рис.4, 5).
1-12 мес 1-3 г 3-5 г старше 5 л
Рис.4. Динамика количества Т-(Е-РОЛ)лимфоцитов (тыс/мкл) у собак разного пола и возраста
0,7
0,2 0,1 О
1-12 мес 1-3 г 3-5 г старше 5 п
Рис.5. Динамика количества В-(М-РОЛ)лимфоцитов (тыс/мкл) у сук и кобелей разных возрастных групп
В возрасте от 3 до 5 лет, напротив, наблюдаются повышение количества лейкоцитов, лимфоцитов, Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоцитов у кобелей. Возможно. :по вызвано стабилизацией гормонального фона у животных обоих полов, и. в связи с физиологическими особенностями обмена веществ, у самок наблюдается некоторое
снижение данных показателей, а у самцов, напротив, происходит интенсификация уровня обмена веществ в данный возрастной период (рис. 4, 5).
Анализируя соотношение Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ) - лимфоцитов, отмечено, что у сук в возрасте до 1 года оно на 13% ниже, что свидетельствует о сниженной активности Т-звена иммунитета, и в возрасте от 1 до 3 лет у сук это значение изменяется незначительно, а у кобелей - снижается на 10,8%. Это может быть связано с гормональной перестройкой организма. Так, согласно литературных данных, андрогены обладают иммунодепрессивными свойствами, главным образом, против гуморального звена иммунной системы, эстрогены, напротив, стимулируют образование у-глобулинов (Черешнев ВА с соавт., 2002). Далее после 5 летнего возраста данный показатель несколько выравнивается у сук и кобелей. Анализируя значения лейкоцитарного Т-индекса, отмечено, что у сук до 1 года он выше на 13,5%, а к 5 годам - выше у кобелей на 47%, в возрасте старше 5 лет снова на 10% выше у сук. Таким образом, у сук в возрасте до года наблюдается некоторое снижение Т-звена иммунитета и к 5 летнему возрасту дефицит Т-клеток наиболее ярко выражен, по сравнению с кобелями.
Породные особенности иммуноморфологических показателей важны при рассматривании крови как одного из интерьерных признаков животных, с целью выявления более устойчивых пород и воздействия на иммунную систему у более ослабленных пород.
Наименьшее количество лейкоцитов наблюдали у колли (7,7±0,4 тыс/мкл), а наибольшее отмечено у собак пород пудель (10,0±0,1 тыс/мкл) и мастифф (10,3±0,6 тыс/мкл). При анализе лейкограмм установлено, что наибольшее количество эозинофилов наблюдается у собак пород ротвейлер (7,0±0,3%), кавказских овчарок (6,9±0,5%), а наименьшее их количество у пуделей (3,0±0,9%) (табл.2).
Также отмечено наибольшее содержание Т-(Е-РОЛ)-лимфоиитов у пуделей и мастиффов, по сравнению с другими исследованными породами. Количество В-(М-РОЛ)-лимфоцитов также наибольшим у собак этих пород, а также у ротвейлеров. Наименьшее значение - у собак породы немецкая овчарка (0,33±0,05 тыс/мкл) (рис. 6).
□Т-абс, тыс/мкл ■ В-абс, тыс/мкл
Немецкая Кавказская Пудель Мастифф Колли Ротвейлер овчарка овчарка
Рис. 6. Количество Т-(Е-РОЛ)- и В-(М-РОЛ)лимфоцитов (тыс/мкл) у собак разных пород
Таблица 2
Гематологические и иммунологические показатели собак разных породных групп (М±т) п=624
Показатель Средние значения Немецкая овчарка Кавказская овчарка Пудель Мастифф Колли Ротвейлер
Гемоглобин, г/л 140,6*1,45 139,5*36,3 143,9*5,6 134*2,5 116,4*4,6* *• 129,7*5,0 145,3*1,3**
Эритроциты, млн/мкл 4,5*1,01 4,49*0,31 4,2*0,2* 4,8*0,3* 4,5*0,3 4,9*0,2 3.5*0,1*
Лейкоциты, тыс/мкл 8,51*1,9 8.21*0,53 8,9*0,6* 10,0*0,1* 10,3*0,6 7,7*0,4* 9,2*0,3*
Эозииофилы,'/» 6,1*1,38 6,08*1,85 6,9*0,5* 3,0*0,9* 4,6*0,9* 4,7*0,8 7,0*0,3'
Базофилы, % 0 0 0 0 0 0 0
Нейтрофилы.п/я,% 1,99*0,44 2,1*0,39* 1,3*0,5* 7,0*0,3* 2,4*0,4* 2,0*0,4 1,5*0,2'
Нейтрофилы,с'я.'!/о 63* 1,09 62,02*2,13 60,4*2,3 53,5*0,5* 57,6*2,5* 64,4*2,1* 59,8*2,2
Моноциты,% 2,8*0,63 3,12*0,4* 2,3*0,5* 2,0*0,6* 3,0*0,4* 1,6*0,4* 1.3*0,3*
Лимфоциты,% 25,5±5,72 26,5*2,02 27,4*2,0' 34,5*1,7* 32,4*2,8* 27,3*1.8* 30.5*1,9*
Лимфоциты, тыс/мкл 2,15*0,48 2,1*0,19* 2,3*0,2* 3,5*0,2* 3,5*0,5* 2.0*0.1* 2,9*0,2*
ТЧЕ-НОЛ) лимфоциты,% 29.25*6,54 28,02*2,58 29,5*2,3* 40*3,2* 34,4*2,5* 35,7*1,8* 32,2*2,4«
В-<М-РОЛ) лимфоциты,% 16,9*3,8 15,564*1,5* 18,2*1,7* 22*0,9* 20,0*1,5 19,3*0,9* 20,1*1.6
Т-(Е-РОЛ) лимфоциты,,тыс/мкл 0,63*0,14 0,6*0,09* 0,7*0,1* 1,3*0,01* 1,1*0.1* 0,7*0.01* 1.0*0,1*
В-(М-РОЛ) лимфоциты, тыс/мкл 0,37*0,08 0,33*0,05* 0,4*0,01* 0,7*0,01* 0,6*0,01* 0,4*0,01* 0.6*0,1*
Лейкоцитарный Т-индекс, ея. 15,5*1,75 17.5*2,06* 15,1*1,6 7,6*0,2* 10,8* 1,1* 12,48*1.8* 13,1*2.21'
Т/В индекс 1,79±0,4 1,88*0,1 1,7*0,1 1,8*0,1 1,7*0,01 1,9*0.1 1,7*0,1
Ттфр-(Б-РОЛ), % 30*6,71 29,4*1,09 28,3*1,1* 24*1,1* *• 28,4*1,2* 27,4*0,3** 23,5*0,4' '•
Ттфч-(Е-РОЛ), % 17,25*3,86 16,3*0,64 16,5*0,7* 13*0,3* ** 15,6*0,5* 17,4*0,5* 16,3*0,2'*
ТЬЛЧ индекс 1,75*0,39 1,77*0,04 1,7*0,01 1,8*0,1 1,8*0,01* 1,6*0,01* 1,88*0.01
Фагоцитарная активность(ФА), % 31,6*7,09 32,76*3,19* 29,6*3,1* 29*2,2 36,8*5,9* 32,3*4,1* 39,6*5,2*
Фагоцитарное число (ФЧ), у.е. 1,63*0,36 1,56*0,22 1,8*0,3* 0,9*0,1* 1,5*0,2* 1,8*0,3* 2,9*0.8*
Фагоцитарный индекс (ФИ), у.е. 5,01*1,12 4,72*0,43* 5,4*0,8* 3,0*0,01* 4,5*0,7* 5,9*0,6* 5,8*0,9
*- разница с фоновыми значениями достоверна (р<0,05)
**- разница между группами достоверна (р<0,05)
Низкие значения регуляторного ТЬ/Т индекса отмечены у собак породы колли (1,6±0,01), за счет снижения относительного количества Т-хелперов. Лейкоцитарный Т-индекс наибольшим был у немецких овчарок (17,5+2,06 ед.), а наименьшим - у пуделей (7,6+0,2 ед.).
Значения фагоцитарной активности выше у мастиффов (36+5,9%) и ротвейлеров (39,6+5,2%),а фагоцитарный индекс и число - у ротвейлеров и колли (рис.7).
Немецкая Кавказская Пудель Мастиф Колли Ротвейлер овчарка овчарка
Рис. 7. Фагоцитарный индекс (у.е.) и фагоцитарное число (у е.) у собак разных пород
Обобщая полученные результаты иммуноморфологических показателей, в зависимости от породных особенностей собак, можно заключить, что наиболее активно иммунная система функционирует у собак пород пудель, мастифф и ротвейлер, что выражается в более высоких значениях количества лейкоцитов, лимфоцитов, Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ) лимфоцитов. Наиболее высокие показатели фагоцитарной активности нейтрофилов наблюдаются у собак пород ротвейлер и мастифф, а наиболее высокие показатели интенсивности фагоцитоза и агрессивности нейтрофилов - у пород колли, ротвейлер и кавказская овчарка.
3.2. Оценка иммунологических и гематологических показателей у собак с хроническими заболеваниями кожи
3.2.1. Гематологические и иммунологические показатели у собак, больных демодекозом
При анализе результатов исследований установлено, что у 20% собак с патологией кожи регистрировался демодекоз, причем в 87% случаев поражались собаки в возрасте до I года. В результате проведенных исследований, выявлено, что при обеих формах демодекоза (пустулезной и чешуйчатой) у собак наблюдается иммунодепрессивное состояние разной степени выраженности (табл.3).
У собак с чешуйчатой формой демодекоза количество эозинофилов было ниже на 13,1%, моноцитов - на 45,9% по сравнению с собаками с пустулезной формой.
У животных с чешуйчатой формой снижено количество лейкоцитов на 26%, лимфоцитов на 31%, Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов - в 3 раза, В-(М-РОЛ) лимфоцитов на 40%, Т-хелперов на 47%, Т-супрессоров на 28%, индекса ТЬ/Т на 21%, снижении фагоцитарной активности на 17%, интенсивности фагоцитоза на 48% и агрессивности нейтрофилов на 38%.
У собак с пустулезной формой наблюдается еще более выраженная иммуиодепрессия, связанная, по-видимому, с развитием сскундарной микрофлоры.
Анализируя лейкоцитарный Т-индекс, отмечено, что при чешуйчатой форме он выше в 2 раза, при пустулезной - в 1.7 раз, что свидетельствует о более выраженной недостаточности Т-клеточного звена при чешуйчатой форме.
Таблица 3
Гематологические и иммунологические показатели собак при дсчодекозе _ (Mim) п=68___
Показатель Клинически здоровые животные Чешуйчатая форма 11устулезная форма
Гемоглобин, г/л 126*8,28 98.36*0,56* 103,2*0.34*
Эритроциты, млн/мкл 4,26*0,21 4,1*0,2 3,9*0,03
Лейкоциты, тыс/мкл 9,83*0,64 7.22*0,5» ** 12,42*0,32* **
Эозинофилы, % 5,05*0,72 5,5*0,97** 6.33*1,51* **
Базофилы, % 0 0 0
Нейтрофилы. п/я, % 2,47*0,64 2.25*0,3 2,56*0,58**
Нейтрофилы, с/я, % 56,53*2,17 62,5*2,78 59,67*1.64
Моноциты, % 3,12*0,47 1,14*0,3* ** 2,11*0,42* **
Лимфоциты, % 32,74*2,37 28,2*2,89* 28,78*1,17*
Лимфоциты, тыс/мкл 3,18*0,32 2,17*0.27* ** 3,59*0,2* **
Т-(Е-РОЛ)лимфоциты, % 33,89*2,91 14,56*1,75* ** 21,78*1,79* **
В-(М-РОЛ)лимфоциты, % 18,26±1,48 14,88*2,19* ** 22,33*2,63* **
Т-(Е-РОЛ) лимфоциты, тыс/мкл 1,03*0.11 0,3*0,05* ** 0,65*0,07* **
В-(М-РОЛ) лимфоциты, тыс/мкл 0,54*0,05 0,32*0,06* ** 0,8*0,09* **
Лейкоцитарный Т-индекс, ед. 11,2*1,4 23,2*0,27* ** 19,32*0,19* **
Т/В индекс, ед. 1,89*0,09 1,21*0,14* ** 1,16*0,13* **
Ттфр-РОЛ, % 26,11*1,07 13,75*0,8* ** 12,2*1,04* **
Ттфч-РОЛ, % 14,16*0,59 10,19*0,88* 9,44*0,58*
ТЬ/Тэ индекс, ед. 1,85*0,03 1,45*0,09* ** 1,28*0,06* **
Фагоцитарная активность (ФА), % 29,63*2,82 24,31*2,75* ** 21,25*3,11* **
Фагоцитарное число (ФЧ), у.е. 1,43*0,29 0.73*0,15* ** 0.59*0,07* **
Фагоцитарный индекс (ФИ), у.е. 4,36*0.54 2.68*0,34* ** 3,25*0,47* **
*- разница с фоновыми значениями достоверна (р<0,05) **- разница между группами достоверна (р<0,05)
3.2.2. Гематологические и иммунологические показатели у собак, -больных дерматомикозами
При анализе статистических данных нами установлено, у 8% всех собак с патологией в области кожи регистрировались поверхностные микозы.
Основными возбудителями поверхностных микозов при поражении собак выявлены Microsporurn canis, Trichophyton mentagrophytes и Aspergillus fumigatus.
У животных с дерматомикозами установлено достоверное снижение количества лимфоцитов (в 2,3 раза), снижение Т-(П-РОЛ) и В-(М-РОЛ) лимфоцитов (в 3,5 раза и в 1.9 раз соответственно), снижение Т-хелперов (на 21,8%). снижение Th/Ts индекса (на 26.5 %), Т/В индекса (на 34%). Это свидетельствует о преимущественном дефиците Т-клеточиого звена иммунитета, в основном за счет снижения Т-хелнерной популяции лимфоцитов (рис.8). Лейкоцитарный Т-индекс у собак при этом был увеличен в 2.6 раза, что свидетельствует о выраженной иммунной недостаточности.
0.2
О.В
0,6
0.4
О
О клинически здоровые животные ■ дермэтомикоэы
Т-(Е-РОЛ)лимфоциты, В-(М-РОЛ}лимфоциты,
тыс/мкл
тыс/мкл
Рис.8. Изменение количества Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоиитов (тыс/мкл) при поверхностных микозах
У больных дерматомикозами животных, были ниже, по сравнению с аналогичными показателями у здоровых животных, фагоцитарная активность нейтрофилов и интенсивность фагоцитоза на 27,5%, поглотительная способность нейтрофилов на 23%.
По мнению многих ученых, антигенные свойства грибов в сравнении со многими бактериями менее выражены, поэтому напряженность иммунного ответа при микозах относительно невысока (Долгих В.Т., 2000; Лебедев К.А., Понякина И.Д., 1990; Караулов А.В., 1999; Борисов Л.Б., Смирнова И.С., Фрейдлин И.С., 1994). Выявленное нами у собак иммунодефицитное состояние при генерализованных формах дерматомикозов, свидетельствует об изначальной недостаточности иммунной системы, и, как следствие, развитие патогенных и условно-патогенных грибов.
3.23.. Гематологические и иммунологические показатели у собак с дерматитами
Хронические формы отита сопровождаются обширными дерматитами в области наружного слухового прохода, которые, как правило, и требуют основного лечения. Исследования проводили на 143 животных в возрасте от 4 до 14 лет. Во всех случаях ' проводили микроскопию соскобов из ушной раковины (с целью исключения паразитарной природы отита), а также бактериологический анализ экссудата и определение видовой антибиотикочувствительности.
При анализе бактериологических исследований установлено, что в 38% случаях отит был вызван условно-патогенным Staphylococcus albus, в 19% - грибковой инфекцией (грибами Aspergillus fumigatus,), в 5%- Staphylococcus aureus. в 7%-Proteus vulgaris. в 2%-Pseudomonas aeruginosa, в 25% случаях регистрировались комбинированные отиты.
Для проведения гематологических и иммунологических исследований нами были сформированы 5 групп животных: одна контрольная - клинически здоровые животные и четыре опытных, в зависимости от результатов бактериологических исследований, вызванных возбудителями: Staphylococcus albus (n=85), Staphylococcus aureus (n = ll), Pseudomonas aeruginosa (n~5), грибами Aspergillus fumigatus (n=42)
В ходе исследований иммуноморфологических показателей у данных собак выявлено, что у всех животных имеет место иммунологическая недостаточность разной степени, проявляющаяся, в основном, в зависимости от вида возбудителя. При диагностике золотистого стафилококка и синегнойной палочки иммунодепрессия выражена более отчетливо, что выразилось в уменьшении количества лейкоцитов на 17% и 25%, лимфоцитов - в 3,4 и в 1,5 раз, Т-(П-Р()Л) лимфоцитов в 5 и в 2,7 раз, В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 4 и 3,6 раз, снижение значения Т/В индекса на 23% и на 22.8%. уменьшение регуляториого индекса Th/Ts в 1,2 и в 1,98 раз. значения фагоцитарной активности - в 1,14 и в 3 раза соответственно (рис.9).
наружного слухового прохода
Наибольших значений лейкоцитарный Т-индекс достигал у собак с хроническими дерматитами наружного слухового прохода, вызванными золотистым стафилококком и симегнойной палочкой соответственно в 3,7 и 2,7 раз, это еще раз подтверждает об угнетение Т-клеточного звена иммунной системы у данных животных.
Рис. 9. Количество Т-(Е'РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоцигов (тыс/мкл) у собак с хроническими дерматитами наружного слухового прохода, обусловленных разными видами возбудителей
4. Динамика иммунологических и гематологических показателей у собак при использовании миелопида и достима
Проведя анализ иммуногематологических показателей при хронических заболеваниях кожи, мы установили, что данная группа заболеваний сопровождается значительными нарушениями со стороны иммунной системы.
Поэтому, с целью повышения эффективности лечения и ускорения сроков выздоровления животных были испытаны препараты миелопид и достим.
Миелолид — препарат пептидной природы, полученный экстракцией из культуры клеток костного мозга млекопитающих, он восстанавливает количественные и функциональные показатели Т- и В- систем иммунитета, стимулирует функциональную активность фагоцитов и реакции гуморального звена. Применяется при вторичных иммунодефицитных состояниях, а также при воздействиях неблагоприятных экологических факторов (М.Д. Мажковский, 1998; Е.И. Соколов, 1998; А.В. Караулов, 1999; Е.Н. Корсакова, 2001; В.М. Мельникова, 2001)
Одним из основных компонентов достима является очищенный бактериальный гликан. Препарат представляет собой 0,5% суспензию очищенного полисахаридного комплекса, иммобилизированного в геле. Достим воздействует на Т-систему иммунитета и фагоциты, обеспечивая активацию иммунных реакций. Достим является сильным индуктором эндогенного интенферона и активаторам системы комплемента в организме.
При применении препаратов мнелопид и достим, достоверно повышался уровень лейкоцитов на 35% и 34,9%, Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов в 2,6 и 3,1 раза, В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 2,2 и 3,3 раза, интенсивность фагоцитоза в 2,3 и 1,2 раза, поглотительная способность нейтрофилов на 29% и 13,7% соответственно (рис.10, 11). В контрольной группе, напротив, отмечалось усиление иммунодепрессии, что, возможно, связано с применением в схемах лечения противомикробных и противопаразитарных препаратов. Отрицательное влияние на иммунный статус многих акарицидов отмечен рядом зарубежными учеными (Barriga, O.O., Al-Khalidi, N.W., Martin, S. and Wyman, M., 1992)
-контрольная группа -при введении миелопида -при введении достима
г*
через21день через45дней черезбОдней
Рис. 10. Динамика содержания Т-(Е-РОЛ)лимфоцитов (тыс/мкл) у животных контрольных и опытных
групп
-контрольная группа -при введении миелопида -при введении достима
до лечения через 21 день
РисЛ 1. Динамика содержания В-{М-РОЛ) лимфоцитов (тыс/мкл) у животных контрольных н опытных
групп
Клинические исследования животных показали, что при применении миелопида у 80% животных, а при применении достима у 73%' наблюдали улучшение клинических признаков уже на 21 день лечения: улучшение состояния кожных покровов, ' значительно уменьшилось количество клещей в соскобах. На 45 день практически у всех животных опытных групп в соскобе клещей не обнаруживали (табл.4).
Таблица 4
Результаты клинического обследования животных опытных и контрольных
Группа 21 день лечения 45 день лечения 60 день лечения -
Контрольная - + ++
1 опытная, (миелопид) + ++
2 опытная (достим) + ++
+ - улучшение клинических признаков ++ - клиническое выздоровление
Таким образом, применение иммунокорректоров миелонил и достим благоприятно влияло на течение патологическою процесса и сокращало сроки лечения собак в среднем на 25% по сравнению с животными, которым для лечения применяли общепринятые методики (табл. 4).
Выводы
1. Для возрастных групп клинически здоровых собак (1-12 месяцев, 1-3-х, 3-5-ти и старше 5 лет) установлены количественные иммунологические показатели крови, которые можно использовать, в качестве нормативных. Установлено, что у молодых собак (1-12 месячного возраста) количественные показатели были выше, чем у животных старше 5 лет. Низкие количественные показатели иммунной системы у собак старше 5 лет свидетельствуют о развитии компенсированной иммунологической недостаточности.
2. Выявлены особенности показателей иммунной системы у собак в зависимости.от пола и возраста. Установлено, что у сук в возрасте до 3-х лет и старше 5 лет иммунная система характеризуется более активной функцией, что подтверждается более высоким содержанием лейкоцитов, лимфоцитов, Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоцитов и фагоцитарной активности нейтрофилов. В то время как у кобелей этих возрастных групп показатели были достоверно ниже.
3. Выявлены достоверные различия в показателях иммунной системы у собак в зависимости у породы. Установлено, что у собак пород пудель, мастифф и ротвейлер во всех возрастных группах наиболее активно функционирует клеточное звено иммунитета, о чем свидетельствует более высокие (в среднем, на 40%) значения содержания в крови содержания в крови лимфоцитов и их популяций (Ти В - лимфоцитов) и фагоцитарной активности.
4. У собак, больных чешуйчатой формой демодекоза установлена иммунная недостаточность, выражающаяся в снижении общего количества лейкоцитов на 26,5%, лимфоцитов на 31,76%, Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов в 3.4 раза, В-(М-РОЛ) лимфоцитов на 40,7%, регуляторного Th/Ts индекса на 21,6%, снижении фагоцитарной активности на 17,9%, интенсивности фагоцитоза на 38,5%, агрессивности нейтрофилов на 48,9%. У собак с пустулезной формой иммунодепрессия выражена еще более интенсивно, по сравнению с чешуйчатой.
5. У собак с дерматомикозами выявлена иммунная недостаточность, характеризующаяся преимущественным дефицитом Т-клеточного звена иммунитета, в основном за счет снижения Т-хелперной популяции лимфоцитов на (28,1%).
6. У собак с дерматитами слухового прохода также выявлено иммунодефицитное состояние разной степени выраженности. При инфекции, обусловленной Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa установлено снижение количества лимфоцитов - в 3,4 и 1,6 раз, Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов в 5 и в 2,7 раз, В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 4 и 3,6 раза, Т/В индекса лимфоцитов на 23% и на 22,8%. индекса Th/Ts в 1,2 и в 1,98 раз соответственно.
7. Применение лейкоцитарного Т-индекса (ЛТИ) в клинической практике позволяет характеризовать степень иммунодепрессии. У клинически здоровых собак этот индекс находится в интервале от 13 до 17. При хронических заболеваниях кожи: демодекозе, дерматомикозах, дерматитах наружного слухового прохода этот индекс увеличивается в 2-3 раза.
8. Применение препаратов миелопид и достим собакам с иммунологической недостаточностью, обусловленной дсмодекозом. способспювадо активизации как клеточного, так и гуморального звеньев иммунной системы. Увеличилось содержание лейкоцитов на 35%, Т-(Е-РОЛ)лимфоиитов в 2,6 и 3,1 раза. В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 2,2 и 3.3 раза, интенсивности фагоцитоза на 29% и 13,7%
соответственно, поглотительной способности нейтрофилов в 2,3. В контрольной группе, наоборот, у собак отмечали усиление иммунной недостаточности, что, возможно, связано с длительным применением для лечения противомикробных и противопаразитарных препаратов, обладающих иммунодепрессивными свойствами.
9. Клинические исследования животных показали, что у собак опытных групп, с применением иммунокорректоров миелопид и достим, клиническое выздоровление наступало в 1,4 раза быстрее: в среднем на 45-й день лечения, а у контрольных животных - на 60-й день лечения.
Практические предложения
Рекомендуется использовать полученные количественные показатели иммунной системы собак, лейкоцитарный Т-индекс, соотношение Т- и В - лимфоцитов, соотношение субпопуляций Т-хелперов (Тфр-РОЛ) и Т-супрессоров (Тфч-РОЛ) в клинической практике для диагностики иммунной недостаточности и контроля эффективности лечения.
Для коррекции иммунодефицитных состояний при демодекозе, дерматомикозах и хронических дерматитах наружного слухового прохода рекомендуется применение миелопида (в дозе 0,06мг/кг через день, пятикратно) и достима (в дозе 0,1 мл/кг веса с интервалом в два дня, пятикратно).
Полученные данные рекомендуется использовать в учебном процессе в курсах «Клиническая диагностика», «Внутренние незаразные болезни животных», «Эпизоотология и инфекционные болезни животных» для студентов ветеринарных факультетов вузов и в ссузов.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Лопатина М.Ю. Иммунологические показатели крови ? у клинически здоровых собак разных половых групп// «Физиология человека и животных: от теории к практике»: Сб. ст. Институт физиологии, г.Сывтывкар, 2000.- с.32.
2. Вершинин И.И., Теяятникова Н.В., Лопатина М.Ю., Малахеева Л.И Демодекоз собак// «Актуальные вопросы ветеринарной медицины животных»: Сб. ст. -Екатеринбург Изд-во АМБ, Екатеринбург,2001.- с. 43-48.
3. Лопатина М.Ю., Мельникова В.М., Корсакова Е.Н Иммуноморфологические показатели собак, пораженных клещом Demodex cams// Материалы 5 Всероссийской конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины животных»: Сб. ст. - Екатеринбург: Изд-во АМБ, Екатеринбург,2003.-с.68-70.
4. Лопатина М.Ю., Мельникова В.М., Корсакова Е.Н. Морфологические показатели крови у клинически здоровых собак г. Екатеринбурга// Материалы конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных»: Екат-г: Изд-во АМБ, 2003.-с. 45.
5. Лопатина М.Ю. Показатели иммунной системы собак, пораженных клещом Demodex canis// Сборник статей «Материалы Международного Ветеринарного конгресса»; Москва, 2003.-е. 124.
6. Лопатина М.Ю. Особенности показателей. иммунной системы собак, пораженных клещом Demodex canis в условиях г.Екатеринбурга // Журнал «Ветеринарная клиника», изд-во: ООО «Восточный дом», Екатеринбург. 2003г. с.2.
7. Лопатина М.Ю. Возрастные особенности показателей иммунной системы у клинически здоровых собак в условиях г. Екатеринбурга // Материалы научной конференции молодых ученых УрГСХА «Молодежь и наука», изд-во: УрГСХА,
Екатеринбург, 2003г. с.43.
8. Ермолаев СВ., Донник И.М., Ермолаева Е.Я., Лопатина М.Ю. Оценка иммунного статуса животных из районов техногенного загрязнения // Материалы Международной научно-производственной конференции «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных»; Воронеж, 1999г. с.204.
9. Донник И.М., Лопатина М.Ю., Мельникова В.М., Беспамятных Е.Н. Иммуноморфологические показатели крови у клинически здоровых собак // Методические рекомендации, изд-во УрГСХА, Екатеринбург, 2004г. -14 с.
10. Донник И.М., Лопатина М.Ю., Верещак Н.А., Худяков Д.Г. Иммуноморфологические показатели крови и коррекция иммунодефицитных состояний у собак с хроническими заболеваниями кожи // Методические рекомендации, изд-во УрГСХЛ, Екатеринбург, 2004г.- 17 с.
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Подписано в печать 20.02.2004 г. Формат 60х84 1/16. Бумага «Госзнак»
_Усл.печ. л.-1,0 Тираж 100 экз. Заказ 325_
Уральская государственная сельскохозяйственная академия 620219, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42
Отпечатано в типографии ООО «Ира УТК» 620219, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкиехта, 42
1-4158
Оглавление диссертации Лопатина, Мария Юрьевна :: 2004 :: Екатеринбург
Введение
Ф 1. Обзор литературы
1.1. Защита живого организма от патогенных агентов
1.2. Характеристика основных видов иммунопатологии
1.3. Методы оценки иммунного статуса животных
1.4. Иммунологическая недостаточность и способы ее коррекции
2. Собственные исследования 41 2.1. Материалы и методы исследования.
3. Результаты исследований
3.1. Иммуноморфологические и гематологические показатели у 46 клинически здоровых собак 3.1.1. Иммуноморфологические показатели у собак разных возрастных 46 групп
3.1.2. Биохимические показатели сыворотки собак разных возрастных 58 групп
3.1.3. Иммуноморфологические показатели у собак разных половых групп
3.1.4. Иммуноморфологические показатели у собак разных породных 71 групп
3.2. Оценка иммунологических и гематологических показателей у собак 81 с хроническими заболеваниями кожи
3.2.1. Иммунологические и гематологические и показатели у собак, 81 больных демодекозом
3.2.2. Иммунологические и гематологические показатели у собак, 92 больных дерматомикозами
3.2.3. Иммунологические и гематологические показатели у собак с 100 хроническими дерматитами наружного слухового прохода
Динамика иммунологических и гематологических показателей собак при введении препаратов миелопид и достим
Обсуждение результатов Выводы
Практические предложения
Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Лопатина, Мария Юрьевна, автореферат
Актуальность проблемы
Служебные собаки нашли широкое применение во многих странах мира (Бацанов Н.П., 1992; Архипов А.А., 1999; А.Иншаков, 2003). Российская кинологическая Федерация - самое крупное объединение собаководов России насчитывает около 4 500 клубов и порядка 7 миллионов собак служебных, охотничьих и декоративных пород (Островский О.А., Пасынков Г.А., Нисхизов В.Д., 1991; А.Иншаков, 2003).
По сведениям пресс-службы УВО при ГУВД Свердловской области, только с начала этого года с помощью служебных собак, в Свердловской области было изъято пять авиационных бомб, 49 гранат и снарядов и еще 50 кг килограммов взрывчатки. А обнаруженных наркотиков - 150 килограммов. В прошлом году с помощью служебно-розыскных собак службы вневедомственной охраны Свердловской области было раскрыто 430 преступлений и задержано за совершение преступлений 638 человек (Шустрова М.В., 1995; С.Новик, 2004)
В последние годы в крупных промышленных центрах у собак особенно участились случаи прорыва иммунитета при вакцинации против вирусных заболеваний, отмечается слабый ответ на медикаментозное лечение, резко увеличилось количество случаев аномального течения беременности и родов, рождение мертворожденных или слабых, с пониженной массой тела плодов (Донник И.М., Шкуратова И.А., 1997). Анализ гематологических показателей собак в возрасте 7-12 месяцев г. Екатеринбурга выявил у 53% одновременное снижение количества гемоглобина, общего белка, каротина и нарушение фосфорно-кальциевого равновесия, а также снижение количества лимфоцитов (Новиков Н.М., 1986; Захаров В.Н. с соавт., 1990; Зерчанинова Е.И., 2000; Макаров В.В., 2000; Карпецкая Н.Л., 2003).
Результаты исследований последних лет свидетельствуют о важной роли иммунологических нарушений в механизмах возникновения и развития инфекционно-воспалительных процессов у животных (Barlough J.E. and Pedersen
N.C., 1995; Федоров Ю.Н., Верховский О.А. с соавт., 1996; Павлова А.И., 1997; Кузнецов А.И. с соавт., 1998; Смирнов П. Н., Трунов А. Н., 1999; Воронин Е.С., Шахов А.Г., 1999; Донник И.М., 2000; Монов, 2002).
В связи с тем, что многие территории находятся в экологически неблагоприятных условиях от высокой концентрации промышленного производства и от скопления источников радиоактивного излучения и загрязнения техногенными радионуклидами показатели иммунной системы животных, изменяются в данных условиях (Baxevanis C.N. et al, 1994 Gershwin L.J., Krakovka S., Olsen R.G, 1995; Р.М.Хаитов, 1995; Р.В.Петров с соавт., 1995; Храмцов В.В. с соавт., 1995; Н.М. Любашевский, 1996; Донник И.М., 1997; Садовников Н.В, 1997; Симак С.В. и др., 1998; Татарчук А.Т. с соавт., 1998; Краснопёрое В.А., 2000; Смирнов A.M. с соавт., 2000; Шубик и соавт., 2000; Смирнов П.Н., Донник И.М., 2001; Воронин Е.С. с соавт., 2002; Исаева А.Г., 2002; Смирнов П.Н, Храмцов; Федоров B.C.; Федоров Ю.Н., 2003).
Исследованиями, проведенными среди мелких домашних животных в крупных промышленных городах, выявлены серьезные сдвиги в иммунологическом статусе, что накладывает отпечаток на течение инфекционной и не инфекционной патологии (Донник И.М., Шкуратова И.А., 1997; Я.Б. Бейкин, 1998; Серых М.М., Симак С.В., 1999; Юшков Б.Г., Климин В.Г., Северин М.В.,1999; Смирнов П.Н., Донник И.М., 2001; Верещак Н.А., 2002; Черешнев В.А. с соавт., 2003).
Особое место среди всех заболеваний собак занимают болезни кожи, наибольший процент которых составляют хронические дерматиты (78%). Кожа, являясь барьером неспецифической защиты организма, одна из первых реагирует на воздействие ксенобиотических факторов. Проведенный нами анализ статистических данных выявил, что в 2003 году у 50% всех обратившихся в клинику собак регистрируется кожная патология, что на 15% и 10% выше по сравнению с 2001 и 2002 годами соответственно. Многие хронические заболевания, в частности, такие как воспаление наружного слухового прохода, зачастую вызываются банальными микроорганизмами, антибиотикотерапия в таких случаях дает только временный эффект, а длительность заболевания обусловлена иммунодефицитым состоянием (Griffin, С.A., Kwochka, K.W., 1993; Кузнецова Е.С., Мендоса СЛ., 2002). Демодекоз собак относится к наиболее часто встречаемым и трудно поддающимся лечению заболеваниям, в основном протекающим в хронической форме (Вершинин И.И, Петренко В.И., 1995, 2003). По мнению многих авторов (М.М. Abdel-Halim et all., 1990; Barriga, O.O., Al-Khalidi, N.W., Martin, S. and Wyman, M.,1992; Ларионов C.B., 1996; А.А. Лисицина и др., 1997; Василевич Ф.И., 1998; Ю.Н. Федоров, О.А. Верховский и др., 2000; Василевич Ф.И., Ларионов С.В., 2002; Медведева М.А., 2003), это заболевание неизбежно сопровождается иммунологической недостаточностью организма животного. Большая часть грибковых инфекций вызывается грибами, которые составляют естественную флору кожи и слизистых оболочек, иммунные клетки организма часто бывают не в состоянии фагоцитировать грибы, вследствие этого происходит хронизация патологического процесса (P.M. Гаскелл, М. Беннет, 1999; Долгих В.Т., 2000; Ниманд Х.Г., Сутер П. Б., 2001)
Проблема лечения данной патологии весьма сложна и актуальна, а продолжающийся поиск новых методов терапии и более эффективных лекарственных препаратов свидетельствует об отсутствии в настоящее время каких-либо радикальных средств лечения (Беляков И.М., Лукьяновский В.А., Симбирцев П.Ф.,1981; Janeway С.А., Travers P., 1996; Лебедев А.В. с соавт., 2000; Сазонова Н.В., 2003).
В настоящее время в клинической практике наиболее актуальными становятся иммунологические исследования крови. С помощью результатов этих тестов можно количественно определить показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета, показателей неспецифической резистентности организма, а при изучении их в динамике - эффективность проведенных курсов лечения, и разработать способы коррекции иммунной недостаточности (Лебедев К.А., Понякина И.Д., 1990; Абовян Ю.Г. и др., 1991; D.P.Stites, A.I. Terr, T.G., 1994; Gershwin L.J., Krakovka S., Olsen R.G., 1995; Zola H., Robert- Thompson P. and McEvoy R., 1995; Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф., 1995; Новиков Д.К.,
Новикова В.И.,1996; Донник И.М., 1997; Смирнов П. Н., Трунов А. Н., 1999; Федоров Ю.Ф., Верховский О.А., 2000).
Важным является разработка методик, позволяющих объективно оценить иммунный статус отдельных особей, и результаты затем экстраполировать на всю популяцию (Плященко С.И., 1991; Жучаев К.В. и др., 1994; Бакшеев А.Н., 1998; Павлова А.И. с соавт., 2000; Верещак Н.А., 2001; Исаева А.Г., 2002)
Отмеченные выше обстоятельства и определили актуальность и направление настоящей работы.
Цели и задачи исследования
Целью исследований являлось определение и сравнительная оценка основных иммунологических показателей в зависимости от пола, возраста и породных особенностей, клинически здоровых и больных хроническими заболеваниями кожи собак и выявление у них наиболее эффективных способов коррекции иммунологической недостаточности.
Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить иммунологические показатели у здоровых собак разного возраста, пола и породных особенностей.
2. Дать оценку показателей иммунной системы собак с хроническими заболеваниями кожи: демодекозом, дерматомикозами, дерматитами наружного слухового прохода.
3. Изучить динамику иммунологических показателей при введении препаратов достима и миелопида.
4. Разработать рекомендации по коррекции иммунологической недостаточности у собак с хроническими заболеваниями кожи.
Научная новизна
Проведен иммунологический мониторинг собак из крупных промышленных городов, впервые, на значительном поголовье животных изучены в сравнении иммунологические показатели крови у клинически здоровых собак определенных возрастных (1-12 месяцев, 1-3, 3-5 и старше 5 лет) и половых групп, а также разных пород (немецких, кавказских овчарок, ротвейлеров, мастиффов, пуделей, колли), которые можно ориентировочно использовать в качестве нормативных.
Изучены иммунологические показатели крови у собак с хроническими заболеваниями кожи, вызванными демодекозом, дерматомикозами, дерматитом наружного слухового прохода и выведены усредненные значения соотношения Ти В-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров, а также регуляторного Th/Ts индекса.
Впервые у собак для характеристики степени иммунодефицитного состояния использованы значения лейкоцитарного Т-индекса.
Изучена эффективность применения миелопида и достима для коррекции вторичных иммунодефицитов у собак с хроническими заболеваниями кожи, оптимизированы методы лечения данных патологий.
Разработаны рекомендации по коррекции иммунологической недостаточности у собак с хроническими заболеваниями кожи и рекомендации по проведению иммунологического мониторинга.
Практическое значение работы
Количественные показатели гематологических и иммунологических исследований, установленные в процессе опытов, используются в диагностической и лечебной практике у собак.
Применение миелопида и достима у собак с хроническими заболеваниями кожи, сопровождающимися вторичными иммунодефицитами, увеличивает эффективность и сокращает сроки лечения.
Результаты исследований используются в учебном процессе при чтении курсов клинических дисциплин для студентов зооветеринарных специальностей сельскохозяйственных вузов.
Разработаны методические рекомендации: «Иммуноморфологические показатели у клинически здоровых собак», «Иммуноморфологические показатели крови и коррекция иммунодефицитных состояний у собак с хроническими заболеваниями кожи»,
Апробация работы
Материалы диссертационной работы представлены и обсуждены на Международной научно-практической конференции «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных», (Воронеж, 1999), Международной научно-практической конференции молодых ученых «Физиология человека и животных: от теории к практике», (Сыктывкар, 2000г), региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных», (Екатеринбург, 2002, 2003); Международном Ветеринарном конгрессе, (Москва, 2003г); региональной научной конференции «Молодежь и наука» (Екатеринбург, 2003г); заседании ученого совета факультета ветеринарной медицины УрГСХА (2003, 2004).
Публикации результатов исследований
По материалам диссертации в трудах, сборниках и материалах научных конференций опубликовано 10 печатных работ, в том числе две научно-практические рекомендации.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 174 источника, в том числе 33 иностранных. Работа иллюстрирована 16 таблицами, 77 рисунками.
Заключение диссертационного исследования на тему "Показатели иммунной системы и эффективность иммунокоррекции у собак с хроническими заболеваниями кожи"
выводы
Для возрастных групп клинически здоровых собак (1-12 месяцев, 1-3-х, 3-5-ти и старше 5 лет) установлены количественные иммунологические показатели крови, которые можно использовать, в качестве нормативных. Установлено, что у молодых собак (1-12 месячного возраста) количественные показатели были выше, чем у животных старше 5 лет. Низкие количественные показатели иммунной системы у собак старше 5 лет свидетельствуют о развитии компенсированной иммунологической недостаточности.
Выявлены особенности показателей иммунной системы у собак в зависимости от пола и возраста. Установлено, что у сук в возрасте до 3-х лет и старше 5 лет иммунная система характеризуется более активной функцией, что подтверждается более высоким содержанием лейкоцитов, лимфоцитов, Т-(Е-РОЛ) и В-(М-РОЛ)лимфоцитов и фагоцитарной активности нейтрофилов. В то время как у кобелей этих возрастных групп показатели были достоверно ниже.
Выявлены достоверные различия в показателях иммунной системы у собак в зависимости/ породы. Установлено, что у собак пород пудель, мастифф и ротвейлер во всех возрастных группах наиболее активно функционирует клеточное звено иммунитета, о чем свидетельствует более высокие (в среднем, на 40%) значения содержания в крови^содержания в крови) лимфоцитов и их популяций (Т- и В - лимфоцитов) и фагоцитарной активности.
У собак, больных чешуйчатой формой демодекоза; установлена иммунная недостаточность, выражающаяся в снижении общего количества лейкоцитов на 26,5%, лимфоцитов на 31,76%, Т-(Е-РОЛ) лимфоцитов в 3,4 раза, В-(М-РОЛ) лимфоцитов на 40,7%, регуляторного Th/Ts индекса на 21,6%, снижении фагоцитарной активности на 17,9%, интенсивности фагоцитоза на 38,5%, агрессивности нейтрофилов на 48,9%. У собак с пустулезной формой иммунодепрессня выражена еще более интенсивно, по сравнению с чешуйчатой.
5. У собак с дерматомикозами выявлена иммунная недостаточность, характеризующаяся преимущественным дефицитом Т-клеточного звена иммунитета, в основном за счет снижения Т-хелперной популяции лимфоцитов (на 28,1%).
6. У собак с дерматитами слухового прохода также выявлено иммунодефицитное состояние разной степени выраженности. При инфекции, обусловленной Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa установлено снижение количества лимфоцитов — в 3,4 и 1,6 раз, T-(E-POJI) лимфоцитов в 5 и в 2,7 раз, В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 4 и 3,6 раза, Т/В индекса лимфоцитов на 23% и на 22,8%, индекса Th/Ts в 1,2 и в 1,98 раз соответственно.
7. Применение лейкоцитарного Т-индекса (ЛТИ) в клинической практике позволяет характеризовать степень иммунодепрессии. У клинически здоровых собак этот индекс находится в интервале от 13 до 17. При хронических заболеваниях кожи: демодекозе, дерматомикозах, дерматитах наружного слухового прохода этот индекс увеличивается в 2-3 раза.
8. Применение препаратов миелопид и достим собакам с иммунологической недостаточностью, обусловленной демодекозом, способствовало активизации как клеточного, так и гуморального звеньев иммунной системы. Увеличилось содержание лейкоцитов на 35%, Т-(Е-РОЛ)лимфоцитов в 2,6 и 3,1 раза, В-(М-РОЛ) лимфоцитов в 2,2 и 3,3 раза, интенсивности фагоцитоза на 29% и 13,7% соответственно, поглотительной способности нейтрофилов в 2,3. В контрольной группе, наоборот, у собак отмечали усиление иммунной недостаточности, что, возможно, связано с длительным применением для лечения противомикробных и противопаразитарных препаратов, обладающих иммунодепрессивными свойствами.
9. Клинические исследования животных показали, что у собак опытных групп, с применением иммунокорректоров миелопид и достим, клиническое выздоровление наступало в 1,4 раза быстрее: в среднем на 45-й день лечения, а у контрольных животных - на 60-й день лечения.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Рекомендуется использовать полученные количественные показатели иммунной системы собак, лейкоцитарный Т-индекс, соотношение Т- и В — лимфоцитов, соотношение субпопуляций Т-хелперов (Тфр-POJI) и Т-супрессоров (Тфч-РОЛ) в клинической практике для диагностики иммунной недостаточности и контроля эффективности лечения.
Для коррекции иммунодефицитных состояний при демодекозе, дерматомикозах и хронических дерматитах наружного слухового прохода рекомендуется применение миелопида (в дозе 0,06мг/кг через день, пятикратно) и достима (в дозе 0,1 мл/кг веса с интервалом в два дня, пятикратно).
Полученные данные рекомендуется использовать в учебном процессе в курсах «Клиническая диагностика», «Внутренние незаразные болезни животных», «Эпизоотология и инфекционные болезни животных» для студентов ветеринарных факультетов вузов и в ссузов.
Заключение
Как отмечают многие авторы, иммунной системе, непрерывно отвечающей на воздействие постоянно поступающих в организм антигенов, присуща большая вариабельность количественных показателей. В некоторых случаях разброс так велик, что включает в себя практически все значения измененных показателей, полученных при изучении патологических состояний (И.И. Бенедиктов, С.В. Ольховникова, 1986; P.M. Хаитов и соавт., 1995; И.М. Донник, 1996).
По определению А.И. Клиорина: «.норма — это динамическое понятие, это оптимальное состояние живой системы, при котором обеспечивается ее максимальная адаптивность». Экологическая иммунология как новое направление клинической иммунологии, связанное с ухудшением экологической ситуации и возрастанием заболеваемости животных под влиянием неблагоприятных факторов окружающей среды, преимущественно антропогенного характера, ставит две группы задач:
• Создание методологии оценки и определения региональных параметров иммунного статуса животных; изучение влияния различных природных факторов на их иммунную систему; разработку методов иммунокоррекции; выявление видов и пород продуктивных животных с высоким уровнем естественной и специфической резистентности, обладающих более выраженными адаптационными способностям.
• Проведение в регионах иммунологического мониторинга; создание банка данных об иммунном статусе и о животных различных регионов и всей страны в целом.
Главная задача экологической иммунологии - раннее выявление нарушений иммунной системы до развития выраженной клинической картины (донозологическая диагностика) с последующей иммунокоррекцией (донозологическая профилактика) (Абовян Ю.Г. и др., 1991; Плященко С.И., 1991; Жучаев К.В. и др., 1994; Р.М.Хаитов, Р.В.Петров с соавт., 1995; Донник И.М., Смирнов П.Н, 2001; Воронин Е.С., Петров A.M. с соавт., 2002).
РОССИЙСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННА БИБЛИОТЕКА
2. Собственные исследования 2.1. Материалы и методы исследований
Работа выполнена в 1998 — 2003 гг. на кафедре инфекционных и ^ инвазионных болезней Уральской государственной сельскохозяйственной академии.
Объектом исследования служили собаки, принадлежащие индивидуальным владельцам домашнего и вольерного содержания, а также из восьми государственных и муниципальных питомников крупных промышленных центров Уральского региона (Екатеринбурга, Нижнего Тагила, Челябинска).
Для исследований подбирали клинически здоровых животных по принципу аналогов. Учитывали живую массу, возраст, пол и породные особенности. Собак исследовали клинически: определяли состояние кожных покровов и отдельных систем организма (дыхательной, сердечной пищеварительной и мочеполовой). ^ Животные перед исследованиями подвергались профилактической дегельминтизации. У всех собак опытных и контрольных групп отбирали пробы крови для гематологических, иммунологических и биохимических исследований.
В первой серии исследований определяли клинико-гематологические, иммунологические и биохимические показатели у собак разного возраста, пола и породы. Для этого были сформированы 4 возрастные группы собак: 1-12 месяцев, 1-Зх, 3-5ти и старше 5 летнего возраста, отдельно кобели и суки (табл.3).
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2004 года, Лопатина, Мария Юрьевна
1. Авакаянц Б.М., Есепенок В.А., Попова Л.А., Коток Т.И., Чувашенко С.И. Фармакологическая регуляция нарушений иммунной системы/ЛЗетеринарный консультант, 2003.-№17(65).-8-9с.
2. Архипов А.А. Лечение собак с синдромом аллопеции // Ветеринария.-1999.- №7-с.53-55
3. Ашмарин И.П., Воробьева А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях.-Л.: Медицина, 1963.- 180 с.
4. Базарный В.В., Прислонова Е. Б. Цитохимические особенности нейтрофильных гранулоцитов собак.// Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. Выпуск 1. -Екатеринбург, 1996.
5. Базарный В. В., Садовников Н. В., Осипенко А. В. Оценка иммунной системы собак в научно-исследовательской и ветеринарной практике.// Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. Выпуск 1. - Екатеринбург, 1996.
6. Бакшеев А.Н. Становление, породные особенности и возможности коррекции иммунной системы у свиней: Автореф. дис.докт.биол.наук.-Новосибирск, 1998.-32 с.
7. Беклемшев Н. Д. Иммунопатология и иммунорегуляция. М.: Медицина, 1987.
8. Белов А.Д., Данилов Е.П., Дукуров И.И. Болезни собак.- М.: «Колос»,1995, 129-133,361 с.
9. Беляков И.М., Лукьяновский В.А., Симбирцев П.Ф. Болезни кожи /Учебно-методическое пособие. — М: 1981
10. Ю.Бернет Ф. Клеточная иммунология.- М.: Мир, 197111 .Борисов Л.Б., Смирнова И.С., Фрейдлин И.С. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология.-М.: Медицина, 1994, 215232 с.
11. Булатова С.В. Сезонная и возрастная динамика функции щитовидной железы у животных и человека на Среднем Урале: Дис.канд. биол. наук.-Екатеринбург, 2001.-134 с.
12. Бутенко Г. М., Терешина О. П.// Иммунология. 1992. - №3. - С. 15-17.
13. Василевич Ф.И., Ларионов С.В. Демодекоз животных.-М.:Изд-во ИМА-пресс,2001,138-145 с.
14. Вершигора А. Е. Общая иммунология. Киев: Высшая школа, 1990.
15. Ветелищев Ю.Е, Комаров Ф.И., Навашин С.М. и др./Справочник практического врача.-М.: Баян, 1992, 157 с.
16. Воронин Е.С., Петров A.M., Серых М.М., Дервишев Д.А. Иммунология / Под ред. Е.С. Воронина.-М.: Колос-Пресс, 2002.-408с.
17. Воронин Е.С., Шахов А.Г. Современная концепция этиологии, профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных.// Сб. мат. науч. Сессии РАСХН.- М., 1999.-С.209-214
18. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова Н.А. Адаптационные реакции и резистентность организма.- Ростов-на-Дону: Изд-во Ростовского ун-та, 1990.-70 с.
19. Герберт У. Д. Ветеринарная иммунология. М.: Колос, 1974.
20. Говало В.И. Иммунология репродукции.- М.: Медицина, 1987.-е.149-286
21. Голиков А.Н., Базотова Н.У., Кожебеков З.К. и др. Физиология сельскохозяйственных животных,- М.: Агропромиздат, 1991.-432 с.
22. Горский А.Н. Изучение формирования иммунитета у свиней в онтогенезе при применении биологически активных веществ: Дис. .канд. вет. наук.- Новосибирск, 2001.-113 с.
23. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии.- М.:«Медицинская книга», Издательство НГМА, 2000, 122с.
24. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз.- Екатеринбург: УрО РАН, 2001.-c.425.
25. Домарадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий в окружающей среде// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1997.-№ 4.-С.31-35.
26. Донник И. М. Иммунограмма животных в клинической практике. // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. Выпуск 2. - Екатеринбург, 1997.
27. Донник И.М. Комплексная оценка клинико-иммунологического статуса животных-необходимое звено в проведении диагностических и лечебных мероприятий//Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных.- Екат-г.:УрГСХА, 1996, 5-13 с.
28. Донник И.М. Состояние здоровья сельскохозяйственных животных в индустриальных территориях// Продовольственная безопасность — XXI век: Сб. науч. тр. 2000, с. 114-130
29. Донник И.М., Смирнов П.Н. Экология и здоровье животных.-Екатеринбург, 2001.-331с.
30. Дранник Г.Н., Гриневич Ю.А., Дизик Г.М. Иммунотропные препараты.-Здоровье, 1994.-№5.-с.24.
31. Дыгай A.M., Шахов В.П. Роль межклеточных взаимодействий в регуляции гемопоэза.- Томск: Изд-во Томск.ун-та, 1989.-c.214.
32. Дыдаева Л.Г. Иммуноморфологическая характеристика крупного рогатого скота в связи с породными, территориальными и экологическими особенностями Якутии: Афтореф. дис. .канд. вет. наук.- Барнаул, 1998.-27 с.
33. Егоров А.П., Бочкарев В.В. Кроветворение и ионизирующая радиация.-М.: Медгиз, 1954.-c.156.
34. Ермолаев С.В. Эколого-эпизоотологический анализ крупного рогатого скота в разных условиях Среднего Урала.- Дисс.ученой степени кандидата вет.наук, Барнаул, 2000.-146 с.
35. Журавлева Н.П., Бабенко Г.А., Бегаева Н.Н. Спонтанная изменчивость популяций штаммов грибов Aspergillus — продуцентоваллергеноактивных веществ// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1998.-№ 1.-С.67.
36. Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика. М.: Медицина, 1983. -208 с.
37. Земсков A.M., Земсков В.М., Полякова С.Д. Методы оценки эффективности иммунокоррекции// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1997.-№ 1.-С.51-53.
38. Земсков A.M., Караулов А.В., Земсков В.М. Комбинированная иммунокоррекция.- Наука, 1994.42.3емсков A.M., Передерий В.Г., Земсков В.М. Иммунокорригирующие нуклеиновые препараты и их клиническое применение.-Киев: Здоровье, 1994.
39. Золотарева Н.А. Иммунодефициты и борьба с ними// Ветеринарный консультант,2003.- №16(64).-с.З46.3орин В.Л. Демодекоз собак и его лечение // Ветеринарная клиника.-2002.-№7.-с.17.
40. Зуева А.А. Демодекоз плотоядных г.Тюмени //Проблемы энтомологии и арахнологии/ Сб.научных трудов: Тюмень, 1999,68-70 с.48.3яблова Г.Г. Собаки и кошки в одной обложке.- С.-Петербург: «Час пик». Лениздат, 1991 .-с.4.
41. Иммуногенетика инфекционных заболеваний/ М. М. Авербах с соавт. -М.: Медицина, 1985.
42. Иммунология инфекционного процесса. Руководство для врачей / Под ред. В.И. Покровского, С.П. Гордиенко, В.И. Литвинова.-М.: Медицина, 1994.51 .Иммунология/ Под ред. У.Пола.-М.: Мир, 1988.
43. Иммунофизиология / Под ред. Е.А. Корневой.-С.-Петербург: Наука, 1993.-с. 59-85.
44. Исаева А.Г. Иммунобиологические особенности адаптации свиней к технологическому стрессу в условиях Среднего Урала -Дисс.ученой степени кандидата биол.наук, Троицк,2002,167с.
45. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И. Козинца, В.А. Макарова.-М.: Триада-Х, 1997.-е. 267.
46. Камышников B.C. О чем говорят медицинские анализы.- Минск: «Беларусская наука», 2000.-е. 142-146
47. Карпецкая Н.Л. Роль гиповитаминозов в патогенезе дерматозов и дерматитов у собак и кошек // Актуальные вопросы ветеринарной медицины «Белые Ночи-2002», Сб.Науч.статей.-С.-Петербург,2002.-35-39с.
48. Карпецкая Н.Л. Эрозивно-язвенные поражения кожи у собак //Ветеринарный консультант,2003.- №18(66).-18-21 с.
49. Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных.-М.: Ураджай, 1986.-183 с.
50. Кассирский И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология.-М.: Медицина, 1970.-c.458.
51. Клиническая биохимия / Под ред. В.А. Ткачука.-М.: ГТЭОТАР МЕД, 2002.- 360 с.
52. Клиническая иммунология / Под ред. А.В. Караулов.- М.: Медицинское информационное агентство, 1999.-114-121,195-233,315-317с.
53. Клиническая иммунология и аллергология // Под ред. JI. Йегера.-М.: Медицина, 1990.-Т.2.-С. 456; Т.З.-с. 243.
54. Клиническая иммунология. Под ред. Е.И. Соколова.-М.:Медицина.-1998.-269 с.
55. Кожные болезни собак (авт. Сью Патерсон) / Пер. с англ. Е.Осипова. М.: «Аквариум ЛТД», 2000, с.15-41,82,89-96
56. Козлов В.А., Цырлова И.Г., Журавкин И.Н. Стволовая кроветворная клетка и иммунный ответ.- Новосибирск: Наука, 1982.-222с.
57. Козлов И.Г., Сайгитов Р.Т., Митясева С.А.,Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В. Миграционная активность in vitro нейтрофилов периферической крови человека в норме и при иммунопатологии// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-2002.-№ 4.-С.43-48.
58. Колычев Н. М., Госманов Р. Г. Ветеринарная микробиология и иммунология. Омск: Изд. ОмГАУ, 1996.
59. Коляков Я. Е. Ветеринарная иммунология. М.: Агропромиздат, 1985.
60. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Менышиков В.В. Биохимические исследования в клинике.- Элиста: АПП «Джарган», 1998.-250 с.
61. Константинова Н. А. Иммунные комплексы и повреждения тканей. М.: Медицина, 1996.
62. Корнева Е.А. Иммунофизиология истоки и современные аспекты развития // Аллергология, астма и клиническая иммунология.-2000.-№ 8.-с. 36-44.
63. Корнева Е.А., Шхинек Э.К. Гормоны и иммунная система.- Л.: Наука, 1988.-е. 114-151.
64. Корсакова Е.Н. Эффективность вакцинации телят против лептоспироза, трихофитии, паратифа в разных экологических зонах Среднего Урала.-Дис. канд. вет. наук.- Екатеринбург, -2001.-166с.
65. Костенко Т.С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии-М.: «Колос», 2001.-109с.
66. Кудрявцев А.А., Кудрявцева JI.A. Справочные таблицы по составу, свойствам крови и костного мозга у здоровых животных.- М.: ВИЭВ, 1966.-23 с.
67. Кульберг А. Я. Молекулярная иммунология. М.: Высшая школа, 1985.
68. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунограмма в клинической практике.-М.:Наука, 1990.-224с.
69. Лисицина А.А.- Биохимические и иммунологические показатели сыворотки крови собак при демодекозе.- Дисс. ученой степени кандидата биол.наук, М., 1997,149 с.
70. Логинов С. И., Смирнов П. Н., Трунов А. Н. Иммунные комплексы у животных и человека: норма и патология/ РАСХН. Сиб. Отд-ние. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1999.
71. Ломакин М.С. Иммунобиологический надзор.- М.: Медицина, 1990. с.З-63
72. Лысов В.Ф. Гормональный статус сельскохозяйственных животных/ • Учебное пособие Казань: Изд-во Казанского ветеринарного• института, 1982.-87 с.
73. Любашевский Н.М., Чибиряк М.В., Григоркина Е.В. и др. От адаптаций млекопитающих к патологии человека в техногенной среде // IV Междунар. Симпозиум «Урал атомный Урал промышленный». Тез.докл. - Екатеринбург, УрО РАН, 1996. — с. 164-166.
74. Лютинский С. И.,Садовников В. Н., Юшков Б. Г. Патологическая физиология иммунной системы домашних животных: учебное пособие для студентов вузов. С-Петербург, Екатеринбург, 1998.
75. Ляшко В. А., Воробьев А. А. Молекулярные основы иммуногенностиантигенов. М.: Медицина, 1982.
76. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах.- Изд. 13-е, новое.-Харьков: Торсинг, 1998.-c.202.
77. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.-Новосибирск: Наука. Сиб.отд-ние, 1989.-212с.
78. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление.-М.: Медицина. 1991.-е. 168.
79. Медведева М.А. Иммунологическое обоснование патогенеза и лечения демодекоза собак- Дисс.ученой степени кандидата вет.наук, Москва, 2003
80. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология/ Под ред. Борисова Л.Б.,Смирновой А.М.-М.: «Медицина», 1994,192-201 с.
81. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и профилактики.- М.: Медицина, 1973.-е. 378.
82. Мельникова В.М. Эффективность оздоровительных мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в экологически неблагополучных территориях Среднего Урала.- Дис. . канд. вет. наук.-Екатеринбург, -2001.-167с.
83. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток/ Ляшко В. А. с соавт. М.: Медицина, 1988.
84. Михайлова А.А., Овчинникова Ю.А. Миелопептиды-врачи ракаЛ Наука.-1999.-№12
85. Ниманд Х.Г., Сутер П.Ф. Болезни собак / Перев. С нем., 2-е издание.-М.: «Аквариум ЛТД», 2001.-С.276-321.
86. Оценка функционального состояния гуморального звена иммунной системы животных при инфекционно-воспалительных заболеваниях:
87. Метод. Рекомендации / РАСХН. Сибирское отделение. ГНУНЭВС и ДВ. — Новосибирск, 200120 с.
88. Павлович С.А. Основы иммунологии.- Минск.:Выш.шк.,-1997.-115с.
89. Пахтусова А.С., Мельникова В.М., Корсакова Е.Н. Иммунологические показатели лошадей различных возрастных групп // Молодежь и наука: Тез. науч. Конф.-Екатеринбург, 2000.-е. 148-150
90. Передерий В.Г., Земсков A.M., Бычкова Н.Г., Земсков В.М. Иммунный статус, принципы его оценки и коррекции иммунных нарушений.- Киев, 1995.
91. Петров Р. В., Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Иммунодиагностика иммунодефицитов // Иммунология. 1997. - №4. - с.4-6.
92. Петров Р.В. Иммунология.-М.:Медицина.-1982.-368с.
93. Петров Р.В., Лопухин Ю.М., Чередеев А.Н. и др. Оценка иммунного статуса человека: Методические рекомендации.- М.: Медицина, 1994.
94. Петров Р.В., Хаитов P.M. Донозологическая диагностика нарушений иммунной системы// Иммунология.- 1995.-№2.-с.4-5.
95. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса у человека в норме и при патологии.//Иммунология,1994.-№6.-с.6-9.
96. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Орадовская И.В. и др. Оценка иммунологической системы при массовых обследованиях. Методические рекомендации//Иммунология.-1992.-№6.-с.51 -62
97. Петров Т.Р., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова А.А. Контроль и регуляция иммунного ответа.- Л.: Медицина, 1981.-е. 45.
98. Потатуркина-Нестерова Н.И. Влияние токсинов грибов рода Aspergillus на организм человека// Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.-1997.-№ 4.-е. 106-108.
99. Придыбайло Н.Д. Иммунодефицита у сельскохозяйственных животных, профилактика и лечение их иммуномодуляторами.- М.: ВНИИТЭИ агропром, 1991.-45 с.
100. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология.-М.: Мир, 2000.- с. 254.
101. Роль иммунных комплексов // Доклад ВОЗ. 1977. - 62 с.
102. Роменский В.И., Шинкаренко А.А., Петров Ю.Ф., Гудкова А.Ю. Патогенез демодекоза собак//Ветеринария, 2003.-№1 l-c.30-32
103. Рубин В.И., Ларский Э.Г., Орлова Л.С. Биохимические методы исследования в клинике.- Саратов: Изд-во Саратовского университета, 1980.-321C.
104. Савронь Е.С. Биохимия животных.- М., 1966.-501 с.
105. Сазонова Н.В. Сравнительные схемы лечения собак, больных экземой.- Дис. канд. вет. наук.- Санкт-Петербург.-2003.-165с.
106. Сапин М.Р., Этинген Л.Е. Иммунная система человека.-М.: Медицина.-1996.- 385 с.
107. Свечин К.Б., Аршавский А.Н., Квасницкий А.В. и др. Возрастная физиология животных.- М.: Колос, 1967.-431 с.
108. Сидоров В. Т., Плященко С. И. Естественная резистентность организма животных. Ленинград, "Колос", 1979.
109. Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология.-М.:Колос, 1995.C 128-142
110. Смирнов П.Н. Теоретические и практические аспекты проблем экологии и адаптации животных.// Научное обеспечение ветеринарных проблем в животноводстве.-Новосибирск, 1999.-С.36-48
111. Смирнов П.Н., Донник И.М. Экологические проблемы ветеринарной медицины Сибири и Урала // Сиб. аграрная наука III тысячелетия.- Новосибирск, 2001.-е.120-123
112. Справочник ветеринарных препаратов в России./ Кленова Н.Ф., Яременко Н.А.-М.: Сельхозиздат, 2001.-544с.
113. Старченков С.В. Болезни мелких животных.- С.-Петербург:Изд-во «Лань», 1999.- 286-287с.
114. Труфакин В.А., Трунова Л.А. Иммунологические показатели формирования экологически обусловленной патологии // Вестник РАМН,-1994.-№ 17.-е. 15-18
115. Фальк П. // Иммунологические методы: Пер.с нем. А. П. Тарасова. М.: Медицина, 1987. - с.120-128.
116. Федоров Ю.Н., Верховский О.А. Иммунодефициты домашних животных.-М., 1996.-96с.
117. Федоров Ю.Н., Верховский О.А., Костына М.А. Иммунодефициты у животных: характеристика, диагностика, и коррекция.// Продовольственная безопасность -XXI век: эколого-экономические аспекты: Сб. науч. Трудов.-Екатеринбург, 2000.-е. 160-168
118. Федоров Ю.Н., Верховский О.А., Слугин И.В. Основы иммунологии и иммунопатологии собак. М.:Изд.-информ. Центр ООО «Информ-12»,2000.-20-24,33-52,110-158,176-180с.
119. Фотина Е.Б. Кожные болезни собак.-С.-Петербург: Изд-во «Синтез-Полиграф»,2000, 9-41,57 с.
120. Фримель X., Брок Й. Основы иммунологии. М.: Мир, 1986.
121. Хазипов Н.З., Аскарова А.Н. Биохимия животных.- Казань, 1999.292 с.
122. Хаитов P.M. Физиология иммунной системы.-М.: 2001.- с. 201.
123. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология.-М.: ВНИРО, 1995, с.6-41
124. Холод В.М., Ермолаев Г.Ф. Справочник по ветеринарной биохимии.-Мн.: Ураджай, 1988.- 168 с.
125. Черешнев В.А., Юшков Б.Г., Климин В.Г., Лебедева Е.В. Иммунофизиология.-Екатеринбург: УрО РАН, 2002.- 269 с.
126. Шабалин В.Н., Серова Л.Д. Клиническая иммуногематология.-Л.: Медицина, 1988.
127. Юшков Б.Г., Климин В.Г., Северин М.В. Система крови и экстремальные воздействия на организм.- Екатеринбург: УрО РАН, 1999.-202с.
128. Юшков Б.Г., Черешнев В.А., Климин В.Г., Черешнева М.В. Иммунная система и регуляция физиологических функций / Учебное пособие.- Екатеринбург, 2000.-74 с.
129. Ястребов А.П., Юшков Б.Г., Большаков В.Н. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов.- Свердловск: УрО АН СССР, 1988.-е. 127.
130. Abbas A., Lichtman А.Н., Pober J.S.-Cellular and Molekular Immunology.-W.B. Saunders Company, Philadelphia. /London/Toronto/Montreal/Sidney/Tokio, 1994, 4-46
131. Abo Т., Kawamura Т., Watanabe H. Physiological responses of extrathymic T cells in liver //Immunol.Rev. 2000.Vol. 174. P. 135-149/
132. Aller M.A., Arias J. L., Lorente L. et al. Neuro-immune-endocrine functional system and vescular patology // Med. Hypotheses. 2001. Vol. 57, № 5.-p.561-569.
133. Barlough J.E. and Pedersen N.C.-The immune system and disorders. In.: Book of dogs. Ed. M.Siegal.- Herper Collirs Publishers., 1995,321-337
134. Barriga, O.O., Al-Khalidi, N.W., Martin, S. and Wyman, M. (1992). Evedensof immunosupression by Demodex canis. // Veterinary immunopathology, 32:37 46.
135. Basic and Clinical Immunology. Eds. D.P.Stites, A.I. Terr, T.G. Parslow.-Prentice-Hall Inter. Inc., 1994, 622-629
136. Blalock J.E. A molecular basis for bidirectional communication between the immune and neuroendocrine system // Phsiol. Rev. 1989/-Vol/ 69, №l.p.l-32.
137. Blalock J.E. Proopiomelanocortin and neuro-immune-endocrine connection//Ann. N.Y. Acad. Sci. 1999.Vol. 885. p. 161-172.
138. Chakrabarti A. et al. Stadies on the pathology Demodex canis in the internal organs of canines. // Indian J. anim. Sc., 1978. V. 48, № 6-P. 466-468
139. Ettinger, S.J. (1989) Textbook of Veterinary Internal Medicine III. W.B. Saunders, Philadelphia.
140. Gershwin L.J., Krakovka S., Olsen R.G.- Immunology and Immunophotology of Domestic Animals.-Mosby, St.Louis/ Baltimore/ Boston/ Chicago/ London/ Madrid/ Philadelphia/ Sidney/ Toronto, 1995, 195 p.
141. Griffin, C.A., Kwochka, K.W. and MacDonald, J.M. (eds) (1993) Current Veterinary Dermatotolodgy. Moseby Year Book, St Louis
142. Gross,T.L.,Ihrke, P.J. and Walder,E.J. (1992) Veterinary Dermatotolodgy. Moseby Year Book, St Louis
143. Halliwell, R.E.W. and Gorman, N.T. (1989) Veterinary Clinical Immunology. W.B. Saunders, Philadelphia.
144. J. Bussieras et al. Pilan de denx annees de traitment de la demodecie du chien par amitras. // Rec. Med. Vet., 1980.-V. 156. № 9-P. 605-608
145. Janeway C.A., Travers P.-Immunobiolodgy. The Immune System in Health and Disease.-Current Biolodgy Ltd/ Churchill Livingstone/Grland Publishing Inc., 1996, 860 p.
146. Kremer M. J. Sunergy, pain and immune function // CRNA. 1999. Vol. 10, №3. p. 94-100.
147. Lewis, L.D. and Morris, M.L. Jr (1984) Small Animal Clinical Nutrition, 2nd Edition. Topeka, Mark Morris Associates, Topeka.
148. Lewis, R.M. and Picut, C.A. (1989) Veterinary Clinical Immunology. Lea and Febiger,Philadelphia.
149. Lisitsina A.A., Verkhovsky O.A., and Fedorov Yu.N. Immunological investigation in dogs with demodecosis and dermatitis.-Immunology Letters, 1997, vol.56 (1-3), p.404.
150. Louise McNeil PhD BSc (Hons), Loes Spit Влияние возраста и породы собаки на гематологические показатели// Waltham Focus.-2002.-Том 12.-№ 2.- с. 38.
151. М.М. Abdel-Halim et all. Stadies on parasitic dermatolosis in dogs and cats// J. Egypt. Vet., Mes. Ass. 1990-V. 50, № 1. P. 55-67
152. Mayne P.D.-Clinical Chemistry in Diagnosis and Treatment.-Edward Arnold, London/Sydney/Auckland, 1994, 314-324.
153. Paul R. Heaton BSc (Hons), Pauline Devlin BSc (Hons), Daniel G. Blount BSc (Hons) Старение и иммунная система // Waltham Focus.-2002.-Том 12.-№2.- с. 2.
154. Reedy, L.M. and Miller, W.H.Jr (1989) Allergic Skin Diseases in Dog and Cat. W.B. Saunders, Philadelphia.
155. Roitt I.-Essential Immunology.- Blackwell Scientific Publication, 1994, 54-335.
156. Schultz K.T.-Immune suppressive viral infections of dogs and cats.-Vet.Allergy and Clin. Immunol., 1995,3(2), p. 59-60.
157. Schutt C., Zastrow R., Eggers G. et.al. Immunstatus bei patient mit chronischer pankreatitis eine querschnits stude der humoralen und zeilularen immunitut // Allergie und Immunol. 1980. - Bd.26. -N 3. -S.22-242.
158. Scott, D.W., Miller,W.H. and Griffin,C.E. (1995) Muller and Kir's Small Animals Dermatology, 5th Edition. W.B. Saunders, Philadelphia.
159. Sonea I. M., Jergens A.E., Sacco R.E. et al. Flow cytometric analysis of colonic and small intestinal lymphocytes obtained by endoscopuc biopsy in the healthy dog//Vet. Immunol. Immunopathol. 2000. Vol. 77, №1-2. p. 103-119.
160. Stone, G. (1985) Dermatology, Immunology and Allergy. Moseby Year Book, St Louis.
161. Thompson J.P.- Immunological diseases. In: Textbook of Veterinary Internal Medicine. Eds. S.J. Ettinger and E.C.Feldman.-W.B. Saunders Co.,Philadelphia, London,Toronto, Montreal, Sidney, Tokyo, 1995, vol.2, 2002-2029.
162. Tizard, I.R. (1996) Veterinaiy Immunology, IV. W.B. Saunders, Philadelphia.
163. Zola H., Robert- Thompson P. and McEvoy R.-Diagnostic Immunopatology.- Cambrige University Press, Great Britain, 1995, 114-175.