Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Патоморфология, патогенез и диагностика инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИЛ1ЕНТАЛЬНОИ ВЕТЕРИНАРИИ имени Я. Р. КОВАЛЕНКО

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК имени В. И. ЛЕНИНА

На правах рукописи

УСТАРХАНОВ Пайзутдин Джамалутдинович

ПАТОМОРФОЛОГИЯ, ПАТОГЕНЕЗ И ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ОВЕЦ И АНАЭРОБНОЙ ДИЗЕНТЕРИИ ЯГНЯТ

(16.00.02 — патология, онкология и морфология животных)

Автореферат

диссертации па соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Москва —

1991

Работа выполнена в Прикаспийском зональном научно-исследовательском ветеринарном институте.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

В. А. Шубин (ВИЭВ) доктор ветеринарных наук, профессор У. Г. Кадыров (Башкирский СХИ) доктор ветеринарных наук, с. н. с. Л. В. Кириллов (ВГНКИ)

Ведущее учреждение — Казанский ордена Ленина ветеринарный институт им. Н. Э. Баумана

Защита диссертации состоится ___ 1991 г.

в _/ /_ часов на заседании специализированного Совета

Д 020.28.02 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Всесоюзном ордена Ленина научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. Я. Р. Коваленко по адресу: 109472, Москва, Кузьминки, ВИЭВ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЭВ.

Автореферат разослан « »_1991 г

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат биологических наук

В. В. Амелина

: Г. ОБЩАЯ. ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ

ll^IxH j.

^Актуальность проблемы. Ось виыми напра в лендами экономического и социального развития СССР на период до 2000 года предусмотрено увеличение производства сельскохозяйственной продукции, в том числе мяса, молока, яиц, шероти для полного удовлетворения потребностей населения нашей страны в полноценных продуктах,'е промышленности - в высококачественном счрье.

В ,, спешном решении поставленной задачи большую роль играяг мероприятия, направленные на предупреждение и ликвидация потерь, вызываемых различными болезнями.

Во многих регионах Советского Сопза (Северный Кавказ, Закавказье, Западная Сибирь, Забайкалье, Казахстан, Киргизия, Тад'пи-кистан, 1Уркмения, Украина) клостридиозы овец имеет широкое распространение и причиняют значительный экономический упэрб.

Из.них большой удельный вес приходится на долю инфекционной »нтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят. В Дагестанской АССР падея овец от указанных гоксикоинфекций превосходит таковой от всех других инфекционных болезней, вместе взятых.

Эти заболевания встречаются гаюхэ s странах Европы, Азии, Африки, Америки и в Австралии, где развито интенсивное овиеводстзо.

Возбудителями инфекционной эптерогоксемии овец явяяптся си-р0ко распространенные группы ь—■

Д н С типов, а анаэробной дизентерии * В типа. Указанные бактерии порахапг также_ телят, поросят, козлят, жеребят, цыплят, нередко и человека.

К сожалении,. роль указанны* клосгрндиЯ все более возрастает и они продолжаюг оставаться потенциально опасными возбудителями тяжелых гоксикоинфекций как у гивотных, гак и у лпдей.

В изучение указанных заболеваний большей вклад внесли B.C. Анисимов (1960-1976), A.A. Волкова (I940-T975), Ф.И. Каган (19541976), Я.Р. Коваленко (1954-1973), .5.В. Кириллов (1973-1987), В.й. Лгнысов (IS57-I966), Б.§. Парцваакя (1954-1973), М.Д. ПолыковскиЙ (1936-1972), Ю.Б. Сафаров (I957-IS62), М.А. Сидоро-(1962-1976), K.P. Ургуев (Г966-1989). (1923-1971),

(1936), Ü952-I963), (1960-1965),

¿-'"'"//'S- (1959(IS58-I963), ^ «т^//>-/■(В54-1987), Мгi.c&-(j980-198^) и многие другие.

Вмгсте с тем, несмотря на значительное количество научных-работ, посвященных различным аспектам опизоотологии клоотридио-аов овец, крайне недостаточно исследований, отражаших петомор-фо логические изменен«, и проведены они на ограниченном материала от естественно больных овец и яг йт без использования современных гистохимических, люминосцентно - и электронномикроскопичес-ких методов. В связи с этим оставались невыясненными многие весь.» на важные вопросы патогенеза, морфогенеза и иммунргенеза при вы-веуказаннах токеикоинфекциях. В честности^ не были изучены пути распространен«! и накопления токсинов в отдельных органах, ке определены мехекизмы действия и Характер вызываемых ими морфофунк-«иональных изменений в желудочно-кишечном тракге, центральной и вегетативной нервной системе, в органах иммунитета, железах внутренней секреции.

Иетодн лабораторной диагностики клосгрвдиоаов овец сложны, длительны и неэкономичны.

Учитывая боль пуп значимость огой проблемы, ВАСХНИЛ рекомендовала исследовательским учреждениям ускорить и углубить исследования по агиологии, патогенезу и специфической профилактике клостридиоэов сельскохозяйственных животных, а такие разработать оке пресс-мет оды диагностики их.

Цель и задачи работы. В свете изложенного, возникла необходимость в проведении настоявдх исследований, направленных на выяснение вопросов пагоморфогл'мза, патогенеза, дифференциальной диагностики энтеротоксеиии овец и дизентерии ягнят, а также в изыскании ускоренных методов идентификации различных типов — и их токсинов в организме животных и во

гневней среде.

В задачи исследований входило:

1. Изучить иор$оЛогические, гистохимические и ультраетруктурные особенности органов ягнят и овец в норде и при их естественном заболевании дизентерией и энтеротоксемией.

2. Экспериментально воспроизвести указанные токсикоинфекции на лабораторных кивотных, ягнятах и овцах с последуввдыи гистологическими, электронно-и лвминесцентномикроокопическими и гистохимическими исследованиями их органов.

3. Разработать имчунофл'оресцентний-метод диагностики .ечтероток-еекиа овец и дизентерии ягнят, д*я чего приготовить « исписать

соответствуювде меченные сыворотют и иммуноглобулины.

Изучить в сравнительной аспекте патоморфологические изменят?! в органах лабораторных кивотных и овец, привитых ГОА - откциьсй и поливалентным анатоксином против ооновных клоотридиозов овец» 5. Разработать на основании выполненных исследований рекомендации по диагностике и профилактике основных клостридиозов овеИ.

Научная новизна и теоретическая значимость. Дана сравнительная клинико-эпизоотологкческая и патоморЬологическая харагсторйо-тика инфекционной.знтеротоксемки овец, вызванной Сб, как Д типа, гак и С типа и анаэробной дизенгерии ягнят. При этом впервые изучены гистохимические и ультраструктурные изменения в келудочно-киаечном трскте, паренхиматозных органах, центральной и вегетативной нервной системе, органах иммунитета и железах внутренней секреции естественно болышх, искугатвенно' зараженных и интакггшх овец разного возраста и ягтаг-сссунов;

Комплексное применение указанных методик позволило лперйые определить геста локализации в организме

овец, проследить места накопления токсинов, пути распространении и концентрации их в органах, выяснить меаднияг.'к г.рокикмонеш и распределения токсинов в клетках, влияго:я их на клеточные Орга-ноиди.

Установлено, что токсины клостридиЯ вызывают тецириулятор-но-дистрофические изменения ультраструктурннх элементов слизистой оболочки кишечника о резким падением амивности окислительно' восстанозитедьннх и гидролитических Ферментов, значительным уменьшением концейтрацм* ДНК, БНК, общего бе .ни и пукопо лиса хари до в. Эти изменения нарушают процессы пищеварения, увеличивают проницаемость гисто-гемэтетеского барьера кишечника, что способствует проникновенно юксинов клестрилий в печень и отгула в обсиП круг кровообращения. В результате глубокого н ер/в с ни я ультраструктурннх элементов микроциркулкгирного рус "в органов, они в двльнейпем поегупапт и накапливается в печка/, селезенке, лимфоузлах, железах внутренней секреции и головном мозге и вызывают в них чрезвычайно тяжелые мор^ойункционплт.кне изменения, сопровеядапппеся наругезнием многих обменных пооцессов.

Устенозлено резкое-снижение функциональной активности эритроцитов, нейтрофильных лейкоцитоз, ретикулоэндотегиоиитов и макрофагов. На этой основе норусаптг.я тогсц/гсз и ■ дотогм'Ш'руп-

z&f. йуйхцая. Зги процессы протекают на фоне угнетения маханизлов *акзгеквза, с о n р с в о к ta ю си х ся глубокими морфофункциональннми измене .vячи в цеигральной и вегетативной нервной системе, органах иммунитета с кассовой гиПедью Т- и В- лимфоцитов и других клеток.

Выяснена зависимость выкив&ния и размножения С[\у>ег^-сiп--genZ- от мор?ос5ункционального состояния кишечного эпителия и активности пищеварительных ферментов.

В сравнительном аспекте изучены па томорфо логические, гистохимические, имцукокортологические и ультрасгруктурные изменения в ликфовднух органах у овец и лаборагрных животных, привитых существу опими противог.лосгридиозными вакцинами. Выявлен состав клеток лимфоиднах органов, участвуовдх в выработке антитоксинов.

Впервые разработана оригинальная методика обнаружения токсинов клостридий ь Органах и тканях' больных животных и выращенных культура:: с использованием в Р/§ сенсибилизированных эритроцитов С FKSC'J ).

Практическая ценность. Результаты клинике - морфологических, электронно- и люминосцентиомикроскопкческих и. гистохимических исследований имеет больиое значение при диагностике, расшифровке патогенеза и разработке научно-обоснованных «ер борьбы против гнтеротохсеиии овец и дизентерии ягнят. Они внедрены в производство и использувгся в практической работе ветеринарных специалистов .

Н* основании проведенных исследования разработаны рекомендации:

"Патоморйологическая диагностика инфекционной энтеротоксемин овец и анаэробной дизентерии ягнят", о5обрену//£Совегом Министров ДАОСР, Бюро Обкома КПСС, 1976, К 369/26;

"Петоморфологическая диагностика клостридиозов овец", рассмотренные и одобренные НТС МСХ РСФСР, 1983, К 21;

"Анаэробная дизентерия ягнят и меры борьбы с ней, одобренные ОЖвег ВАСХНИЛ 5.06.1990 г. и утвержденные ГУБ Госкомиссии при Совете Министров СССР по продовольствию и закупкам 11.06,90 г. •

"Меры пассивной иммунопрофилактики клостридиозов овец", рассмотренные и одобренные НТС МСХ ДАССР 15 октября 1990 г., »10;

"Методические рекомендации по иммукойлуоресцентному методу ¿».•агностики основных клостридиозов овец", одобренные Otttser ВАСХНИЛ 5.Об,¿30 г. и утвержденные ГУВ Госкомисоии при Совете Министров СССР по продовольствию и закупкам 11.06.90 г.

Результаты вш.олнег'ых исследований использу/ртся при гении лекций на кафедрах микробиологии, вирусологии, патологической анатомии и эпизоотологии дагестанского СХ".

Апробация работы. Основные поле "ения диссертации доложены и одобрены на III, У, У1, УП, УШ, IX Всесоюзных нзучно - методических- конференциях по патологической ачатг--«,л сельхозжнвотных (Ленинград, Тбилиси, Таллин, Львов, JnTeöcK, Каунас, Саратов, 1966, 1972, 1975, 1978, 1Ж, 1984, 1937 гг); на Всесоюзных л республиканских конференциях по проблемам ветеринарии Сезерчого Кавказа в 197?, 1975, 1977, 1980 гг (Махачкала); ветеринарной секции Научно-технического Совета МСХ FC'"0P; ХХХ1У конференции Европейской Ассоциации по животноводству (Мадрид, 1983), Всесоюзной конференции по медицинской биотехнологии (Махачкала, 1990) -.! на заседаниях ученого совета Прикаспийского ЗНИВИ (19681985).

Публикации. По теме дисс -¡ртации опубликовано работ. Зарегистрировано 2 отчета по законченнгч темам.

Объем и сгрук -ура работы. Материалы диссертации изложены на 350 страницах машинописного текста и состоят из введения, обзора литература, материала и методов исследования, глав собственных исследований, обсуядения полученных результатов, выводов, практических предложений и приложения. JnncoK «итературы вклпчазт 595 источников, в том числе 290 зарубежных авторов. Текст иллюстрирован 126 рисунками и 4 таблицами.

Ка_завдг^_ выносятся результаты патоморфологичеслих, гистохимических, ломинесцентк - и ¿лектоонномигсроскопических, иммун-номорфологических исследований при инфекционной энтеротоксемии овег и ана^рооной дизен^ерчи ягнят, а также окоп росс - к.годы обнаружения C¿•%/з¿■t^■et/гc^/7¿- и его токс^.ов в патологическом мртериале и выделенных из него культурах.

2. СОБСТВЕННИК !!СиЛ5,л0В,.ЛШ -2.1. Материал и нстоцч

Работа выполнена в лаборатории патологической чор,1>олсин ПрикаспиЛского ЗНЛ'3'.I ч в 195 хозя!к;твзх ¿7 районов ЛлгссГанской, Калмыкской и Чечечо - Интугсской АССР с 19(-ст по I9R9 годи.

Определение кмч>погонной а.-типпосгл противоклосгри'.иознн.4-тмкцин пров ленч совместно с „отрудник;»!« лаборатории кнкробио-

• J-'

логии и иммунологии (зав. профессор К.Р. Ургуев), биохимические исследо. jhhh - с к.б.н. О.Ш. Шахмарданойнм, экспериментальные ис следования и апробация с:.особа пролонгирования иммунной защиты бивалентной антитоксической сыворотки - о к.^.н., с.н.с. М.А. Бечтемировым.

Диагноз на («госгридиозы стат.ли на основании эпизоотологи-ческкх, клинических и патомо"Ъолс 'ических данных, а также по результатам -лаборагор. jx исследований. При этом учитывали также первичный диагноз, установленный Республиканской и Кочубейсксй ветеринарными лабораториями.

Опыты 1,о искусственному воспроизведении дизентерии и э::геро-гоксемни провели на 500 белых мышах, 30 кроликах/ °0 овцах и 5 ягнятах. У животных пере., заражением и после него определяли общее количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и лейкоцитарную формулу по общепринятым в гематологии '";тодам.

Для изучения кммуноморфологической реакции у животных, привитых различными ппотивоклосгридиозными вакцинами, попользовали 100 морских свинок, 60 кроликов и 60 овец годовалого возраста, которых разделили на тр! группы и вакцинировали первую полиана-то'-сином, вторую - .ГОА - вакциной, третью оставили контрольной. Спустя 20 дней кивотных ревакцинировали. Через 1,3,10,20,22,28, 30,60 и 90 суток от начала иммунизации из каждой группы убивали по 2 хивогных и брали кусочки внутренних органов, лимфатических узлов и .ткаки с места введения вакцины.

Противоклостридиозные иммунные сыворотки различных типов получали не 12 овцах и 8 кроликах, прививая им соответствующие анатоксины и инактивированные культуры.

Для определения Фагоцитоза ретикулогястиоцитарной системч и сосудистой проницаемости 8 кроликам вводили внутривенно тушь-в дозе по 0,4 мл на 100 г. живой массы.

Полному патологоанатомическому вскрытию были подвергнуты более IООО овец и 150 ягнят, павших от спонтанной энтеротоксе-мк. и дизентерии. Гистологически исследованы органы и ткани 80 убитчХ и павших ягнят и 106 ове.., из которых 74 заболели энтеро-токсеми^й, вызванной С?. jr>-c <■> у г типа I. к 32 - гипа С

В целях осуществления дифференциальной диагностики Ентеро-токсемии овец и дизентерии ягнят проведены клинические наблвде-к'.;я, патологоанатомическое вскг,ытие с послздуюиим гипт учстичес-tCiM исследоь нием органов не менее пяти «ивотных, павших от ко-

либактериоза, салмонеллеза, кокцидиоза, диспепсия, некроз .«ческо-го гепатита, злокачествениого отека, лпгтериоза и ккпе'чннх цес-тодозов овец.

Органы и tkbk:i павпих и убитых подопытных животных через 0,5; I, 2, 3, б, 18 и 24 часа исследовались гистологически, r..j-гохимически, электронно- и люминесценгномикр зкопически.

морфологических ис ледований бррли кусочки печени, почек, сердца, селезенки; головного мозга, тимуса, ;цит< .идиой, поджелудочной желез, надпочечников, гипофиза, лимфатических узлов, скелетных мниц и различиях отделов пивеварителького тракта, а также экстра- и интрамуральние ганглии, контролем служили аналогичные органы и ткани 8 здоровых ягнят и 10 овец.

Материал для гистологического и гистохимического исследований фиксировали в'Ю^-ном растворе нейтрального йормальна, этиловом спирте, в жидкостях Карнуа, Paro, Телескицкого, Буэна, Лплли, в формол-кальциевой имеси. Для гистоэнзимологических реакций срезы получали в криосгате из нефиксированной ткани. Срезы готовили из кусочков, залитых в парафин и целлоидин.

Для элекгрснномикроскопичесшх исследований свежий материал фиксировали в 2^-ном растворе глутярового альдегида с постфиксацией в осмиевой кислоте, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации, -заливали в опон-8Т2 и эпон-аралдит. Срезы готоз ли на ультратоме УМТП и ЖБ - 039 а, контрастировали уранилацетатом, цитратjm свинца г исследовали под олектроьным микроскопом УЗДВ -ЮОР и 7Ш - ЮОЛ.

Срезы, изготовленные для гистологических исследованиГ, окрашивали гематоксилином и эозином, по йан-Гизону, Боголепову Граь.-Вейте рту и Ниослга.Срчзы из неявной ткани, гянглиев имрсгни-ровали по Бялмовскому-Гргс.

Нуклеиновые кислоты выявляли г ) Эйнарсо-у, РНК-методо" Брапе, ДНК - по Фельгену, суммарные белу- с помощью реакции ланиэлли, нейтральные нук^юлисахариды и гликоген - ШИК реакцией по Раблдаиу и Бе ту, липидн - Суданом III, ТУ и чеоннм, гемосидерин - по ГГерлсу, хис'че мукополиса: зриды - по Хейлу, сукцичатдегилтогемазу-10 Нахласу, цитохромоксидазу - На/Ч реакцией, аскорбиновую кисло-Г7-П0 Киру и Леблону. Активность целочнсй и кислой фо^фатаз (!ЯФ, (Ф) выявляли кегодог Гомори.

Интенсивность гистохи:,.гчелких реакций и активность ферментов уценивали визуально : условно определяли: - отрицательная - ■

очень слабая, ++ - умеренная, ++■>• _ значительная, ++++ - очень высока..

Антиген- и внтителосодс.ржащие клетки I .являли по непрямому методу Кунса в модификации <6сгг/г/<:~Л/а?/?■ /т962). Т- и В- лимфоциты дифференцировали по структурным и гистохимическим особенное тям. Клетки плазматического ряда в органах иммунитета подочитыва ли В> 50 полях зрения микрое "опа (объектив 90, окуляр 7, биноку-ляр 1,5).

Для получения очищенных анатоксинов и анакультур, а также для заражения животных использовали типа А-

4 штамма, типа Б - 3 ит., типа Д - 4 шт. и типа С - 3 иг. Эти штаммы сеяли в свежеприготовленные казеиново - панкреотичес-кие среды или МППБ с содержанием глюкозы для А - и Д - типов до 0,5% и для В и С - типов до 2.% у выращивали в течение 7-8 часов при 38°С. После охлаждения культуральные смеси центрифугировали для отделения бактериальной массы. Эпсилон-токсин Д-типа активировали 0,25^ раствором трипсина при рН 8,0-8,2 с последующим выдерживанием при 37°С в течение I час«*.«Летальную активност: (МЛН) определяли внутривенным титрованием по 0,5 мл токсина на белых мызах весом 16-18 г. Очистку и концентрацию экзотоксинов осуществляли 2-кратным переосаждением хлоридом натрия на холоде в изоэлекгрической точке. Обезвреживание токсинов и микробных тел проводили дробным добавлением формальдегида (0,1+0,1+0,1$) коррекцией рН ( 7,2 ) при 37°С до полкой инактивации их.

Обнаружение, титрацию и определение типовой принадлежности культуре ;ьныХ и кишечных токсинов ^/'л; проводили

реакцией нейтрализации с использованием биофабричных антитоксических сывороток А.СД и Е типов, дзой.юй радиальной иммун.диф фузией по Оухтерлони и реакцией непрямой гемагглютиначии- (РИГА) с ангительными эритроцитарными диагностикумами.

Изготовленными анатоксинами и анакультурами после проверки на стерильность и безвредность гипериимункзировали кроликов и оь~ц, инъецируя антигены одновременно подкожно, внутримышечно и в'утрибрюшинно преимущественно в те участки тела животного, которые имели наибольшее количество лимфоузлов. Баранов -редва-ритеяьно грундировали антигенами, смешениями с ланолином и рас тигельным маслом. Вторую вакцинации осуществляли спустя 15 дне? после первой, а последующие - герез каждые " дней в возрастающих дозах.

На 8 день после последней инъекции антигенов у животных из .^емной вены брали кровь „ определяли в и й титр ант..гсксинов и агглютининов. Затем из скворотосаждали иммуноглобулины спиртовым и спиртово-риваноловым 1етодами (лао и Вс.керхауьер, I98ZX

Концентрацию белка определяли по Лоури в модификации Гаргри

Иммуноглобулины присоединяли к изогиоционагу флуоресцгика по методу Map злла (1958) из расчета 15 мг красителя на I г белка. Очистку конъюгата от несвязанного с ^елками красителя и от других низкомолекулярных соединений осуществляли диализом или же на сефадексе - 25.

После определения активности и специфичности изготовленные флуоресцируощие сыворотки и иммуноглобулины использовали в РЛ§ и РЙФСЭ для обнаружения мпкро^эв Ctfe-¿ftt^cm<$- и их токсинов.

Экономический эффект от применения пролонгированной бивалентной антитокси' эской'CHBopoi.vH расчитывали руководствуясь методиками, утвержденными МСХ СССР 26 февраля 1979 г. и ГУБ МСХ ХСР Ч мая 1982 г.

Статистическую обработку цифрового материала производили 10 методу Р.Б. Стрелкова (1986).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3,1. Эпизоогологические особенности, симптомов,.¡плекс и

патологоанатокические изменения при онтеротоксемии овец и дизентерии ягнят

Анализ отчет», jx материалов покьзал, чг 1 ин$- хционная онтеро-?оксемия овец и анаэробна), дизентерия ягнят в Дагестанской 'GCP звгистрируются с 1950 - 1955 годоь. С цельо лройилакт"чи тих •оксикринфекций в республике e»ei .дне подвергаются вакцинации ¡выше одного миллиона овец.

Несмотря на это число неблатопог-чннх пунктов cuius, егся (едлеино и потери от клостридиозов остаются все сю впео! ми, юстигая в отдельных хозяГт.гвах If.2 при онтеротоксемии и '.»I/' при ^зентерии.

При бактериологическом исследовании патологического моггри-ia от 27 свежих трупов овец .» ГО новорожденных лгпяг с точно гстановлешшм д: агнолом на инфекционную онт^ротокси'ип и tn^no6-

-1к-

кув дизенге.рио намй<5ыл* выделены 192 хуяьхуры из которых, по результатам токеикол гическом идентификации, отнесете к типу Л—ИЗ, типу С-47 и к типу В-28 культуры. При этом остались нетжроваиными культуры, которые не обладали токсиген-ными свойствами.

Результаты Наших исследо.лний и литературные данные свидетельствуют, что з возникновении указанных клостридиозов ведулу» роль играют предраспо лага оси'! стрессовые факторы экзо- и эндогенного характера: длительная пастьба овец на скудных эрродированных пастбищах, особенно з сезоны прорастания зеленой грави^ переохлаждение организма, резкий перевод животных от одного типа кормления на другой, недостаточный моцион г -преобладанием в рационе концентратов и сочных кормов, желудо .но-кииечные гельминтоза, перевозки тавотных, функциональное состояние организма, дисбак-териозы и ~.д.

Зги стрессоры рлру. зют у части животных адаптационные механизмы со снижением естественной резистентности и с е кре го рно-двд га тельной деятельности желудочно-кишечного тракта. Только при этих условиях попавшие вовнутрь микроорганизмы клостридий находят благоприятную среду для размножения. Как показывают результаты наших опытов на овцах, когда отсутствуют предрасполагающие факторы, воспроизвести заболевания не удается, даже если дать тавотному вовнутрь очень большое количество С&уа+т/е"^^;^

Обычно в га;:их случаях, проникшие в преджелудки клосгридии соответсавуювих типов, проходят транзитом или же вызывают лишь кратковременнс^ бактерио- и токсиноносительство.

За период наиих исследований было подвергнуто полному па/о-логоанатомическому вскрытию (в том числе гельминтологическому) свыпе 2000 трупов овец, павших от клостридиозов и других желудочно-кишечных гельминтозов. Результаты этих вскрышй и проведенных бактерио/"пхчег -их и токсикологических исследований, позволяют утверждать, что кишечные гельминтозы в значительной степени способствуют возникновения данноР токсикоинфекции, хотя заболевание животных клостридиозами мы отмечали и при отсутствии гельмин~тв.

Клинико-опизоотологическими ^следованиями установлено, что инфекционне . энтеротоксемия у овец в условие : Дагестана протекает в чде энзоотических вспышек и наблюдается, в основном,, на территории зимних пастбищ низ^н^ой зоны Северной части рес-

-гз-

публкки, сразнитегъно реке - в предгорной зоне, и до настоящего времени на обнасукека в горне"! зоне.

заболевание протекает клк правило, в одно и о п время года: в конце осеня, зимой и рэннеР тесной. Пик заболевания приходится на март и апрель месяцы. В конце апреля и в мое болезнь идет на убыль " не опиечается до октября. Оеен"» болеет молодняк 8-10 мео. возраста, реме - овцематкг , зимой и весной - прзиму-ивс.венно взрослое поголпье и ноет рожденные ягнята. Наиболее значительно подержаны заболеванию беременные, многогмегдкые и лактируоиие овцематки. Причем, энтеротоксемией болеет овцы любы* пород, как упитанные, гак и истощенные, го всего она поражает более упитанных.

До недавпго врзменс. заболевание энтеротоксемией среди ггод-оосных ягнят в условиях Дагестана не отмечалось. Начиная с весны 1933 г., в отдельных хозяйствах наблюдали вспышки энгерогоксеиии среди 16-20 - дневных я нят о охватом значительного поголовья и 100#-ной гибелью заболевших. Болезнь протекает остро, с кли: ч-пееким'л признаками, наподобие столбняка.

Болезнь, вызванная ^уГ'.ггг^г/^^^ типа Д, протекает часто сэерхостро. Совершенно здоровые на вид животные погибают за очень короткое время при судорогах и непроизвольных движениях. Несколько реке наблюдается острое -зчение, которое длится 5-Ю и более часов. Характеризуется оно незначительным повышением Температуры тела-, сильным угнетением, отказом от корма и нервными расстройствами.

Значительно реже' пегистшрус ,'ся подострое течение болезни.

При знтеротоксемии овец, внзвцнк и типом С, болезнь длится одни сутки и более, проявлу^тся оча. признаками колик и нпр^лых расотройств.

Анаэробная дизентерия - тяжелое токсикоинфекционное заб лева ни е исключительно новорожденных ягнят в возрасте от чес..ольких часов.до 5-7 и реже - 14 ;,ней. Инкуб..ди чный период е:" очень короткий, составляет 3-6 часов. Для неё характерны стационарности V сезонно ть. Возникает в клнцё. ,-евраы, марте, ан.оле, ре>г« - в мае. Сначала болеют гипотрофики, а зате). и иоргя-льно развитые ягнята.

По нашим многолетним наблюдениям анаэробная дизентерия в условиях Дагестанской АССР протекает остро., ' подостро ;< с^кр.

При ост.юм течении дизентерии, которая охватывает 60 -

заболь^пих ягняг, наблюдаются угнетение, безучастность, отсутствие аппетита и температурной реркции, у1 лщение ритма сердца и акта дыханяя. В дальнейием ведущим признаком является кровавый понос. Видимые слизистые оболо* :<и бледные, периферические части тела холодные. Больные ягнята погибают в течение 1-3 суток при явлениях общего упадка сил Летальность составляет 95-100$.

Со еверхострыи течением заболевают 3-5$ ягнят, болезнь протекает очень быстро, нередко без поноса. У больных ягнят нарушается координация движений, они чаще лежат, конечности вытягивают или совершают ими плавательные движения, голову запрокидывают к спине. Обычно в таком положении животное погибает.

Подосгрое течение боязни наблюдается у 20-35$ больных ягня! Клинические признаки те же, что при остром, но они проявляются менее отчетливо и иногда наблюдается медленное выздоровление молоднякь.

Как показывает наши многочисленные данные вскрытия трупов овец, павших от энтеротоксемии, несмотря на наличие в патолого-• анатомической картине этих заболеваний обоих признаков, »аждый тип у»¿^с¿/^¿е/7ь- (Д и С) вызывает в организме овец отличительные изменения, обусловленные спецификой вырабатываемых им.* токсинов.

Для энтеротоксемии, вызванной типом Д, характернь- своеобраз-кые изменения в почках. Они слегка .увеличены, имеет серый ит серо-красный цвет, консистенция дряблая, через од"н чао наступа-ег их 1 ;змягчение, порой настолько, что они превращаются в каши цеобразную массу. Тонкий отдел кишечника местами вздут, содержит небольшое количество жидкого химуси серого или Краснов, того цвета. Слизистая оболочка пронизана точечными и полосчатыми кровоизлияниями. В полости перикарда содержится серозно-фиб-ч!-нозный экссудат, нередко желеобразной консистенции. Под эпикардом располагаются точе1- 'ые кровоизлияния. Печень местами окраше

от гемно-краоного до светло-серого цвета. Селезенка на вид не изменена. Мочевой пузырь умеренно наполнен. Моча содержит до 1-2$ сэхара.

При вскрытии животных, павших ог энтеротоксемии типа С, характерные изменения обнаруживаю ся в желудочно-кипечном тракте. В брюшной чолости содержится Зольное количество просечной жидкости желтела того цвета. Преджелудки растянуты газами и кормовыми массами. В слизистой оболочке тонкого, местами и толстого

отделов кишечника распсагаются некротические очаги- и язгчг а под серозной оболочкой многочисленные коовоизлиянчя, Нередко эти изменения сопровождаются перитонитом Меэгчтериалины. лимфатические учли увеличены, сочны, гиперсмированы, с очагами некроза и кровоизлияний. Заболевание иногда протекает без изъязвлений слизистой кишблника. В почках, кроме застойной гиперемии и сглаженности рисунка, других изменений ье наблюдают. Размягчение их не наступает даже спустя несколько' часов'после гибели живоп.ого.

Анализ результатов патологоанатомических исследований показывает, что г 95,случаев в органах ягнят, павиих от дизентерии, обнаруживаются патогномоничные изменен т. Труп слегка вздут, глазные яблоки .запавиие, задняя часть туговища запачкана испражнениями темно-коричневого цвета. Тонкий отдел кишечника вздут, ^езгаг-.-т багрово-красного цвета, в просвете находятся кровянистые каловые массы. В слизистой оболочке располагаются плотные, ;~ровато - коричневого мвег , с трудом снимающиеся струпья и 1ленки, а также многочисленные язв-, от едва видимых до I см и 1иемегре.

1о периферии их окружает красный ободок. Мезентериалыше лимфатические узлы увеличены, покрасневшие, нередко с очаговыми или диффузными кровоизлияниями. Печень увеличена, темно - красного (вета, желчный пузырь наполнен жел ,ыз. Селезенка без видимых 12менений. Надпочечники увеличены, покрасневшие, на разрезе вид-Га очаги ".ровоизлияний. В поджелудочной железе обнаруживаются небольшие очаги некроза, а в тимусе - полосчатые кровоизлияния. I сердечной сороч:' 1 содержится сероэно - фибринозный экссудат, щето в желеобразном состоянии.

(од эпи- и эндокардом располагаются точечные и полосчат-.!? кро-

(ОИЗЛИЯИИЯ.

Как видно из о ботве иных исследований, дизентерия пора>.~ег :гнят определенного возраста, вызывает в организме бс ьных жи-ютных харихтерные только ей паголог^акигомяческие изменения, оторые могут быть бесспорно использованы ппн дифференциальной ; агностике. Доказательством это: ; с л;, ¡ат также результаты скрытия многочисленных трупов ягнят, павших от дл-чепеш., ко-ибактериоза, сальмо-"е ллещ, при которых мн не наблюдали комп-екс макроскопич'ских изменений, присувдх энаэроб-'ой дизентерии гняг.

Как указыв"Лось чанее, аналотчные изменени-: обнаружитя—;я

у овец, . лвших от энтеротоксемии, вызванной СР.¡с</*< г^'г-ь^. типа С. Это объясняется тем, что возбудителе обеих токсикоинфек-ций вырабатывают однотипный бета-.оксин, который и обуславливает у больных животных одинаковую патологоанатомическу» картин,.

Э 2. .Патологсгисгологичесие и гаг*ч)химические изменения при еотеств мнем течении знтеротоксемии овец и дизентерии ягнят

Анализ : исто логических исследований .'акже подтверждает наличие закономерных и патогномоничных изменений со стороны яелудоч-но-кишечного тракта при ука'чнных токсикоинфекциях, которые характеризуются ката ре льно-гемо ррагически. ; и некрогизирующим онте-ритом.

Обычно некрозы в кишечнике обнаруживаются на всем его протяжении в ви,г^ небольших, но множественнгх очагов. Нередко этот процесс распространяется на все слои кишечной стенки.

На границе между здоровой и погибшей тканью, как правило, развивается демаркационная зона, состоящая в основном из нейтро-филов, лимфоцитов. Постоянными спутниками некроза являются ограниченные или диффузные геморрагии, обнаруживаемые на всех слоях кишечной стенки.

Особого внимания заслуживает выявляемый у 1/3 исследованных ягнят пневмагоз кишечника, который характеризуется образованием в толще тканей кишечника газовых полостей или кист.

Изучение динамики патологического процесса показало, что. развитие сгру1 дурных изменений в кишечнике начинается о момента заселения поврежденной поверхности слизистой оболочки ¿г/^'-с/^''*-уе'И}- и выделения ими экзотоксинов, при воздействии которых наступают первичные изменения в виде альтерации, некробиоза, покровного эпителия и расширения, кровенаполнения гапилляров воосинок. На *юне ?их вменений развиваются очаги коалиционного некроза, имеющие в отдельных участках поверхностное рас-полижекие, 5 в других - бо^ее глубсое. Вслед за альтерацией и некрозом, отчетливо вырисовываются экссудация, эмиграг'я и пролиферация. .-

Для энтеротоксемии, вызванно.. типп Д,

также хара. 'ернн первокачи изменения з тчроцитов киь.ечных воречнг •. в видс деструкции и распада их с последующим развитием

колликвационкого некроз.

Обычно некритический процесс не . „хвативает более чем 1/3 высоты ворсинок и он никохда не отделяете от сохран. влейся ткани демаркационной зоной. Втор Л отличительной особенностью является то, что пораженные учаегкг кишечника не инфильтрируются ней-трофильными льлкоцитами, не встречаются такж» ролиферативные явления со стороны клеточных элементов сосудистой системы. Как правило, эти процесса сопровоД аются- резко выраженными : змо-циркуляторными расстройствами в виде значительного расширения и кровонаполнег '.я капилляров, венул и аргериол. Эндотелий их набухший, местами десквамирован в просвет. Сг'нк" сосудов разрыхлены и слегка отечны, по ходу их нередко обнаууживаюг диапедезные кровоизлияни,..

Результаты наших исследований указывают на го, что токсины СЛ-.регргг/уеай- В, Д и С типов, наряду с глубокими морфофункци-очальными изменениями огрук-урных элементов кишечной стенки, вызывают тяжелые поражения ганглио^ных клеток мейснеровского ауэрбаховского сг. :етений.

В совокупности указанные изменения приводят к нарушению двигательной, пищеварительной и всасывательной функции кипечни-ка.

В печени преобладают гемодинак.меские расстройства. Стенки центральных вен и внугридольковчх капилляров претерпевают деггр; чтивные и некробиотические изменения. В них местами содержится большое количество эритроцитов, находяки :ся в с стоянии агглютинации и зак;юриваювдх просвет сосуда. В соседстве с ними р-зполагаются пустые, не содержащие кровяные элементы, сосды. Значительным изменениям г хдвергаются так ад гепа^оиити, подвергаювдеся зернистой и вакуольной дистрофии, некробиозу и некрозу;

В почках резко внражены дистрофические изменения которые сопровождается некробиозом и некроза с.¡льшинства эпителиальных клеток. Местами некротизируется большинство извитых и пряь.ых 1 знальцев. Эти проц^ссаптггкак со пачительпы:;!! сосу^.юты'-ч расстройствами в виде застойной гиперемии, диапв.,очных кровоизлияний, набухания и /"¡сквамачии чьсти эндотелиоцитов в п, освет сосуда. Со стороны клубочков отмечали крононапол"чние капилляров, разрыхление их стенок и выход небольшой белковой массл и единичны- эрчтроцитов в просвет боуменовой "апсулы.

Ук занные патологические процессы 'были свойственны -знтеро-токсемии, вызванной типа Д. При энтеротоксемии,

обусловленной.типом С, а также при дизентерии, морфологические изменения в почках выражались сравнительно слабо.

Гистохимически жировая дистрофия в нефроцитах не определялась В то же время в них овчару ^ве~и гликогенную инфильтрации. Зерна гликогена вы. влялиоь также в просветах извитых канальцев и клубочков.

Сердце.'Постоянными изменениями миокарда являются дистрофические и некробиотические процессы в кардиомиоцитах, нервьо-мы-иечном аппарате, а также выраженные циркуляторные расстройства, обусловленные значительны», поражением элементов сосудистой стенки, с последуювдми периваокулярными кровоизлияниями, выраженными в той или иной степени.

Селезенка. Типичными процессами в ней являются дистрофия я распад лимфоцитов, о также редуцирование лимфатических фолликулов. Эти изменения сопровождаются исчезновением центров размножения и фигур миготического деления.

Эмфатические узлы. Закономерными изменениями в мезентери-альных узлах у овец, паввд от энтеротоксемии типа С и ягнят от дизентерии, являются картина некрогизируюцего лимфаденита и диф^^зные геморрагии, в то время как при типе' Д в них преобладают явления серозного воспаления.

Нервная система, В патологический процесс при указанных клострид-'озах вовлекается как центральная, так и вегетативная нервная система. Соответственно этому в них обнаруживают начи-тельные, в основном однотипные структурные изменения, котор-; соответствуют резким сосудистым расстройствам и глубоким поражениям нервных клеток, заканчивавшихся нередко кариоцитолизом их. Обнаруженные в нервной сиогеме изменения можно охарактеризовать кек острую токсическую энцефалопатию,

Эндокриныф же-йЭы, Приступая к описанию морфофункциональ-нцх изменений желез внутренней \ екреции, оледует подчеркнуть, что эта система при клостридиозах омец оставалась вне поля эре-кия исследователе.":.

Как показывают результаты комплексных исследований, при воздействии токсинов клостридий Е, С и Д типов,-а такжо-разумных стрессоров I надпочечниках, зобной, поджелудочной и щитовидной хезезах, аденогипофизе развиваются значительные и разнообразные

труктурппе* и гистохимические изменения.

В результате синергетического действия указанных.этиологи-;еских факторо» в надпочечниках наступает активация деятельнос-41 железистых клеток коры надпочечников по выработке минерало-и ■лококортикоидных гормонов, на что указывают гипертрофия клубоч-:овой и пучковой зон, увеличение размеров кпртикоцитов, резкое г !еныпение или полное отсутствие в их цитоплазме гран"л липидов I витамина С, усгчение активности тФ, К$ и СДГ. Эти процессы ¡опровождавт^я активной гиперемией всех слоев когковой зоны.

3 последующем -га высоте интоксикации, особенно перед гибель» гивотного, в надпочечниках нарастают явления недостаточности и {стощзния гор-1 опальной деятельности кортикоцитов и хромафинных слеток, обусловленные глубокими дистрофическими и некробиотичес-сими изменениями железистых клеток. Отмеченные структурные изме-{ения протекают на фоне ослабления активности ук занных фермен-гоз, снижения концентрации нуклеопротеидов и витамине С.

Аналогичные двухфазные морфофункциональные изменения наблю-«ются в аденогипофизе, щитовидной и поджелудочной железах.

В тимусе развиваются изменения, характерные для акциденталь-юй. инволюции, которая прявляётся ; 1зким уменьшением количества лимфоцитов в корковом слое. Убыль лимфоцитов объясняется не только массовой миграцией их в другие органы, но и распадом и разрушением их в самом органе.

Заслуживает внимание составив поджелудочной железы. Так, во всех случаях энтерогоксемии овец и диэегЕтерш ягнят л ней наблюдаются значительные изменения в сосудистой системе и дистрофические', некробиотические поражения экскреторных клеток, сопровождающиеся распадом отдельных чз них. Чато в поджелудочной железе при дизентерии ягнят, кроме описанных изменений, обнаруживаются очаговые и диффузн :е некрозы.

Таким образом, как.показывают результаты патоморфологичес-ких и гистохимических исследований, при энтеропгееемии овец и дизентерии ягнят поражаются вое с ютемы организма. Однако !'аи-более тяжело-желудочно-кишечный тракт, печень, почки, сердце, органы внутренней секреции, центральная и вегетативная нервная система, центральные и периферические органы иммунитета.

-лО-

3.3. Результата клинике - ематологических, гистологических, гистохимических и элсктронномикроскопических исследований при экспериментальной антеротс ,гемии>овец и дизентерии ягнят

Данныр выполненных исследований указывают на то, что моделировать указанные токсикоикфекции у овец и ягнят удается лииь при нарушат« у жмвотшх общего адаптационного синдрома. Этого мы добгаались, создавая животным различные стрессовые ситуации, в том числе, путем резкого перевода их с одного типа кормления на другой, с последующий введением им вовнутрь клостридий соответствующих типов.

Инкуба'.ионный .период энтеротоксемии и дизентерии при пероралЬ ном заражении овец и ягнят составлял часа, а при введении культур клострчдий в кишечник'- 2-3 часа.

Течение заболеваний острое и заканчивается гибель» животного чьрез 24-48 часов или же они выздоравливают. Клиническое проявление заболева: Ш указывает кг быстро развивающийся токсикоз, сопровождающийся недостаточность» сердечво-сесу-дисгой и дыхательной функций. Температура тела в первые часа заболевания животных оставалась в пределах нормы, а затем она по- , степенно снижалась. " •■•"".'

У больных животных наступают определенные нарушения со стороны форменных элементов крови. Причем каждый тип возбудителя клос-гридиозов вызывает свойственные ему изменения гематологических показателей. Есл>? при энтеротоксемии,-вызванной типом Д. наблю-"ались лейкоцитоз и уменьшение количеотва эритроцитов и гемоглобина в крови, то при типе С, а также при дизентерии отмечался кратковременный лейкоцитоз, сменявшийся впоследствии прогрессирующей ..зПкопенией. Количество эритроцитов и уровень гемоглобина, наоборот, повысались.

Кажущееся увеличение этих показателей мы объясняем выпогево-нием плазмы крови в париваскулярныз пространства, перикардкакь-вую и брюанув полости, с последующим сгущением крови. Следом те льне, при указанных клостридиозах наблюдается истинное уменъшеаие количества краелнх кровяных телец и гемоглобина, оиусдог шкное-гемолитическим, действием токсинов клостридий и диапедезнами кро— 'мигзлияняя-ют во внутренние органы.

Общм- для обеих форм энтеротоксем1..[ явилось значительное!- с пт-жзкив; с-одержания Т- и В- лимфоцитов. Прогрессирующую лиг*юцигоие-ниа и оозинопению при энтеротгчоемии овец и дизентерии ягнят

-я-

можно объяснить не только прямым повреждавшим действием на них токсинов клссгркдий, но и проявлением ответной реакции при общем адаптационном синдроме.

Результаты патоморфологических и гистохимические исследований показывают, что в организме экспери-'ентально зараженных .животных развиваг-?ся значительные структурные изменения, которые были аналогичны изменениям, отмечаемым у овец и ягнят павших от естественной формы энтеротоксемии и дизентерии. Наряду с том, что в характере и степени поражения органов животных имелось много общего, все ^в отмечались и отличительные оси беннести, когориз были обусловлены тем, что каждый тип возбудителя клостридиозов, наряду с характерными для них обилии компонентами токсина, вырабатывал и только присуме ему фракции.

Динамика развития морфологических изменений у экспериментально зараженных животных была следующей.'

Уже через 30 минут после внутривенного введения токсина в печени, почках и миокарде выявлялись расстройства кровообращения в мелких сосудах и начавшиеся очаговые дистрофические изменения паренхиматозных клеток. У животных, убитых через с чр~а, такие изменения оказались более выраженными, в исобенности за счет вовлечения в процесс сосудов среднего и крупного калибра, в них местами отмечались стазы. Эндотелий копил'•тров округлялся и нередко слущмвался, отдельные эритроциты выходили за пределы сосудов. Зернистая дистрофия клеток почек уыливалась. В результате этого значительное количество клеток извитых и прямых канальцев подвергалось некробиогическим и некротическим изменениям. Со стороны мальпигиевых клубочков почек регистрировалось резкое кровенаполнение капилляров, разрг'чеше их с-енек и выход незначительной белковой массы и эритроцитов в просгет капсулы.

В печени балочное строение дол.к затушевывалось. Часть гепа-гоцитов увеличивалась в объеме, цитоплазма их становилась мутней, мелкозернистой, ядра отдельнчх таких клето-с ли: гровались. Мышеч-Оме волокна сердца местами лишал..¿ь поперечной и продольно" ис-. чертекностей, миог.лазма приобретала мелкозернистую структуру.

В поздние сроки интоксикации, в период от б до 24 часов, изменения в почках и печени достигали своего максимума и сопровождались гибелью большого кстичесгва гепагоцитов и чейроци'го-.

В головном мозге изменения "аблюдали з первые часы интоксикации в виде поражения веиул и артчриол, которые были значитель-

но расширены и наполнены эритроцитами. Эндотелий их округлялся, вокруг них обнаруживали зоны просветления. Через 3-6 ччсов в процесс вовлекались сосуды средних размеров. Нередко по ходу сосудов выявляли очаги диепедезных кровоизлияний. Гангяиозные клет ки, преимущественно мозжечка и продолговатого мозга, подверголис дистрофическим и иекробиотическим изменениям, заканчивающимся через 24 часа после начала заболевания, гибелью от-ельных нейронов.

В железах внутренней секреции и легких изменения обнаруживали через 2 часа после введения токсина и они соответствовали умеренной застойной гипг лемии и зернистой дистрофии железистых клеток. У животных, убитых через -утки, сосудистые расстройства и дистрофические изменения железистых клеток достигали максимума и заканчивались они диапедезными кровоизлияниями и гибелью паренхиматозных клеток..

Ранними изменениями, наступаювдми при воздействии токсинов, выявляемыми электронно.икроскопическими и гистохимическими ис-саед^шаниями» были деструктивные, некробиогическиеи некротичес. кие отражения большинство "клеток кишечника, печеня, почек, серД' га, гозювного «озга и эндокринных желез: При этом особо чувстви тельными оказались микроворсинки, плазмолемма, митохондрии и зн доплазмптический ретикулум.

Параллельно этим процессам, в клетках органов наступало нару иение белкового, углеводного, нуклеопрогеидного обменов, снижение концентрации нейтральных мукополисахаридов'и аскорбиновой •сислоты, падение активности ЩФ, СДГ и цитохромозюидавы. В после дующем в процесс вовлекалась и ядерная "мембрана, которая разрах лялась и ¡местами теряла овою целостность. Происходило перераспределение содержимого ядра.и, нередко,, уменьяение количества зерен хроматина. Затем ядерная оболочка 'становилась извилистой и постепенно лизироззалаоь. Все его приводило к тому, ~*"го фунхии овальная активность клеток жизненно гажных органов резко скижа« леоь или же она совсем утрачивалась в результате тотальной гибе ли органоидов клеток.

Наряд, с глубокими субклеточными изменениями энтероцс-ов гепатоцитов, нефроцитов, кардиомисцитов, нейронов и нейрогли-зльных клеток значительные ультраструкгурные изменения обнаруж; вались в микроцирсулятсрном русле указанных органов. При этом болытая часть капилляров, венул и артериол заполнена кровью, эритроцита в них агглютинированы, образую? местами хонгламера-

закрывавзде просвет сосудов. Эндотелиоцигы набухшие, аито-алаал просветлена, митохон/чии подвергаются деогпукиии и лиаи-■су, ядра их в одних местах увеличены, а в другах пшсиотизирова-на. Многие эндотелиоцигы дескЕамированы в просвет сосуда. Банальная мембрана разрыхлена, подвергается-очаговой деструкции. На этой почве развиваются пер!васкулчрные ог^.си и дивпедезныа кровоизлияния.

ЭЛ. Вопросы патогенеза энтеротоксемии овец и дизентерии ягнят

Как (Зяло указано выше, гаосгридиозы у овец и ягнят возникают лря налкчгч определенных предрасполагающих стрессовых факторов экзо- и -эндогенного характера, которые в значительной степени снижают естественную резистентность животных и нарупавт двигвгельно - -секреторную деятельность-желудочяо - кишечного тюкта, тем .самым способствуя бурному росту и размножению попавших в ¡кишечник чсл^ст ридий а выг ботке ими здесь большого количества экзотоксинов.

Последние содержат более 17 разнообразных и сложных по антигенному составу глазных и второстепенных компонентов, каждая из которых обладает пироким ди'7азонок действия га структуру и Функцию органов и тканей животного.

При воздействии эпсилон- и бета токсинов С С. «'/^.О" у Д, В и С типов первые изменения развиваются в области дето- ной каймы слизистой оболочки то се! и подвздошной кишок. Распадаетс»: к.исчезав* глакокаликс, разрушаются микроворсинки и апихьльгая пгазмолсмма сктероцитоз -с последуем выходом их оргапелл ъ грксвет кидечниха, сохраншшиеся органоиды чодае^.г^ягся дегеке-гпыки, а затем и лизису* "нокест-эо энтероцитов, шбпдлх анг о-гячные структурные изменения., отторгаются в просвет киоеч'яка, о^наздя базальнуо мембрану. '

Это? процесс сопровождается значительным снижением активности ЩФ, СДГ, уменьшением концентрации РНК, ДНК, как ки. лых, гак и нейтральных МПС в слизистой оболочке кишечрика.

Указанние норфофункцис-.альные нзменыия в тонком отд ле киозчника вызывают нарупение не только полостного, иембранно-арио 1-е ночного и внутриклеточного видов пищеварения, но и веду.-;г гарусенип гиото-гемагическо.о барьера кишечника.

В результате этого токсины возбудителей клостридиозов и продукты распада тканей из кишечника поступаю', в печень, оттуда в обний круг кровообращения.

Выполненными гистолюминесцентными и электронномикроскопичос-кими исследованиями установлено, что в печени токсины клостридий, прорвав защитные структурны^ образования внутридольковых капилляров, первоначально фиксируются на плазмолемме гепотоци-юв, с последующим разрушением её структурах элементов. Вслед за этим онч проникают во -знутрь клетки, вызывают нарушение структуры к функции её органоидов. Затем, преодолев сильно поврежденную ядерную оболочку, токсины поступают в кариоплазму и вызывает деструкцию и деполимеризацию хроматиновых зерен и нитей о последующим растворением ядерного содержимого.

В результате указанных тяжелых ультраструктурных изменений множество гепатоцитов теряет функциональную активность и погибает.

В дальнейшем на почве изменения ультраструктурных элементов микроцкркуляторного русла внутренних .органов токсина поступают и накапливаются в почках, лимфоузлах, селезенке, миокарде, надпочечниках и вызывают в них глубокие структурные изменения. Кульминационным моментом является нарушение гисто-энцефеличес-кохо барьера с последующим проникновением токсинов клостридий в паренхиму мозга и в нервные клетки.

Таким обррчом, морфологические изменения сосудистой системы, осо-енно микроциркулягорного русла органов, при энтеротоксемии овец и дизентерии ягнят играют ведувую роль в развит, л патологического процесса.

При указанных клостридиозах поражаются не только центральные и периферические органы иммунитета, которые сопровождаются массовой деструкцией и гибелью Т- и В- лимфоцитов, но и микромакрофага льно-гистиоцит рная система. В результате глубоких ультрасгрукгурных и гистохимических изменений клеток отбй системы тотупает значительное снижение фагоцитарно - барьерной способное .'И печени, лимфатических узлов и селезенки, из-за чего теряется их обезвреживающая токсины функция.

Не выдерживают такой сильно? интоксикации также почки. Отмеченные г"нее тяжелые морйо?, нкциональные изменения вссх элементов почек ведут к тому, что они становятся неспособными выделять из организма не только неволившиеся в нем токсические

вечестЕа, но и отработе 'ные продукта об- зна веществ.

Одним из ваттах факторов а патогенезе энтеротпксемии явля-лтся гипоксия, порой и аноксия в жизненно зажных органах, особенно з ЦНС, печени, миокарде, почт х. Факторы, вызывающие кислородное голодание организма, многообразны: угнетение эритроп--эза, внугрисоо^дистый гемолиз и агглютинация э^троцитов с закупоркой просвета сосудов уелкого калибра, глубокие ультраструктурные изменения гисго-генатических барьеров с перивегкулярьвми отеками, эригродиапедезом. Указанные процессы резко ухудшают транскапилляр..ай обмен вообще, и кислорода, в частности. Не менее важным звеном являются структурные и гиг. .'оэкзимологические изменения митохондрий в указанных органах»

Токсина ыостридий оказывают угнетающее действие и на метаболизм куклеопротеидов, что связано с глубокими уль^раструктур-ннми изменениями содержимого ядра, митохондрий, полисом и рибосом, канальцев зндоплазмати- зской сети.

Изменение содержания этих аизнгчно важных веществ отражается в одвигах белкового обмана, который, в своз очередь, влияет т ферментные системы в виде угнетения, активности ряда окисли-гедьро-зосстановителькчх и гидролитических ферментов.

Усугубляет тяжесть патологического процесса также наруизние угдгвэдного обкена, которое выражено резким снижением и порой полру» отсутствием гликогена в печени, сердечной и скелетной иускузпту^е, а тзкже в разяич:*чх отделах иловного мозга. Нарушение этого вида обмена сопровождается гипергликемиеП и глюкозури-еП. •

Нарушается в етрзвий о&е» вследствие липолитического рчй-стп/т гсжстага клостридий на жиро, .те клетки и на лпгсепро'* .г'ковие иоквяасс» оболочек клеток и их органеял. Одккм из доказательств £того> является об: лруяеяио жировых капель, ¡г просвете сосудоэ, пестоет закупорка его ими, /липемия/.

Нарушается водняй обмен, о чем свидетельствует ваг/олькэя гяатрофта гепатоцитов, периваск^лярные отеки выпогевание п еко-п-' -'ние еро?чо-4мбриг эзного экссудата :: транссудата в брюшной и гсерикардиальной полостях, последующее развитие ан идремии гс сгущение крови.

На течение и '.¡сход заболеваний значительное в мние оказывает резкое угнетение саногечегических механизмов в виде дисгротии 1 гибели иекгрефилышх лейксцито:'. эритроцитов, лимфоиитор очдо-гепиоцитов, а также клеток плазматического ряда

Ь конечном итоге на почве указанных глубохкх я необратимых корфофункциокалькых изменений с резким угнетением фагоцитоза наступает блокада специфических и не-специ*ических механизмов детоксикации и острая декомпенсация иммунной системы с к.ооледу-пщим смертельным исходом животного.

3 5. Дифференциальная диагностика

В этой главе диссертации изложена ПЕТоморфологическоя дифференциальная диагностика энтеротоксе-,ии овец от сибирской яаад, брадзота, некротического гепатита, злокачественного отеке, эмфизематозного карбункула, в анаэробной дизентерии ьгнят - от диспепсии, колибактериоза, сайьмонеллезр, кокцидиоза.

3,6. Разработка иммунофлуоресцентного метода диагностики онгеротоксемии овец и дизентерии ягнят

В успеяком проведении лечебно - профилактических мер борьбы с клсотридиозами немаловажное значение имеет своевременно установленный диагноз. Однако по инструкции для этой цели тр бует-ся проведение сложных лабораторных исследований в течение 8 суток.

Учитывая перспективность реакции иммунофлуоресценции, мы решили приманить её для экспресс-диагностики изучаемых клостри-диозов. •

При разработке РИФ и РйЗСЗ нами были предварительно отработаны методы получения бактериальных антигенов и анатоксинов Л?. уз,'/.-трг ■ А, В, С и Д типов, схемы иммунизации доноров «> продуцентов антител, режимы приготоаления антибактериаль-иы5с и антитоксических меченых сывороток и иммуноглобулинов, определены оягимайьные сроки фиксации, окрашивания мазков и гистологических срейов.

В резул' "й1'е роведонного цикла гипериммунизации вс{ухов, юслючаюиего 7 инъекций антигенов, были получены антибактериальные сиво роткиСи.^^¡у- типов Л, В, С и о аг-глвтиьационнам титром 3200 » 25600 и ангито:оичес«а>-. с актив-ностьг соответственно: 40, 20, 40, 75 АЕ.

Йа иммунных сывороток и из глобулиновых фракций было изготовлено д£.гнадцать сорий м-зчекых антибактериальных и антитоксических диагностикумов, которые использовелиоь для идентификации Му&еЯиЫХ И ЗПИЗООТИЧеСКИХ Ш1иНМОВ КЛйСТр|ДИЙ.

Результаты многократно проведенных опытов показывают, что только антибактериальные мечепе антитела окрашивают соответствующие гомологичные микробаВ тоже время эти препараты., особенно А, В и С типов, зызывиют межтиповое свечение соотвегствуопих микробных тел., эцениваемое на один -два креста.

Чтобы повысить .специфичность флуоресцирующих антибактериальных сывороток, исп.льзовался метод истощения их гегерологичны-ш микробами, т-е. теми штаммами клостридий, которые давали межгиповое сведение.

Применение очищенных меченых сывороток способствовало значительному снижению межгиповых общих антигенов и тем самым повышению их специфичности. Исследованиями установлено наличие у ^г^'Л^гг- не только межтиповых, но и внутритиповых антигенных различий, что подтверждает данные Б.Д. Быченхо и др. (1959) о существовании серологически различных групп ореди штаммов , особенно типа А.

Этот метод был апробирован в республиканской и Кочубейской веглабораториях при установления диагноза на укамнные токсгсо-инфекции.

Для 061 кружения токсинов клостридий обычно пользуются реакцией нейтрализации на белых мыпах, ооуиеотвление которой связано о рядом трудностей и немалыми затратами.

Учитывая это обстоятельство, нами разработана реакция имцу-кофлуоресцекции с использованием сенсибилизированных эритроцитов-ШСЭ. Для этого фиксированные формалином или гяютарёльдегидом эритроци.и животных сенсибилизировали отфильтрованным кишечным содержимым, экстрактом печеки '' почек животна- и фильтратом наращенных клостридий. Из соответствующих эритроцитов готовили мазки, затем на препараты наслаивал», по 1-2 капли антитоксической сыворотки А, С и Д типов, хаждой в отдельности. Препарат окрашивали непрямым негодом или же прямым - но о ио-„Ъльзопанием меченых антитоксических сыророгок. °

При положительных случаях, т.е. при наличии в исследуемом чаТериале токсинов возбудителей клостридиозов, в темном поле зрения микроскопа наблюдали большое количество эритроцитов с 1р"сосветягашся ободком по п-риферии и более темны*. участком з ;ентрз.

При использован», предложенного способа, в течение 1-2 ча-

сов можно было определить нал-чие токоинов в исследуемом материале от овец и ягнят, павших от энтерогоксемии и дизентерии.

Таким образом, проведенными исследованиями установлено, что РИФ и И'^СЭ, в сочетании с клинико - впизоотологическими и пато-логоанатрмическими данными, позволяет установить диагноз на эн-теротоксемию овец и дизентерию -гняг за короткое время (от I до 7 часов, вместо 8 суток, предусмотренных инструкцией).

Установлено, что различнее типы С{-.pafe¿n^e^s- могут обсеменить мясо - молочные продукты и тем самым явиться источником тяжелых заболеваний не только животных, но и людей. В свете изложенного, рекомендуем соответствующим ветеринарным и медицикекгм органам пересмотреть существующий ГОСТ 7269-51 и дополнить его обязательным исследованием мясо-молочных продуктов на наличие микроорганизмов CB.^oetfeirtytst .

С гтой целью следует широко использовать в лабораториях мясокомбинатов и на мясо-молочных контрольных станциях разработанный нами иммунофлуоресцентный к тод индикации .«лостридий пер-фрингенс и их токсинов.

3.7. Иммуноморфологические, цитологические, гистохимические и злектронномикроскопические исследования у лабораторных животных и овец, привитых противоклостридиознымн вакцинами

Несмотря на многочисленнее литературные данные, посвященные иммунологическим исследованиям при применении различных вакцин-* сых препаратов, все еде огается слабо изученным иммуноморфогенеь при формировании противоклостридиозного иммунитета.

В свете изложенного, определенное научно-практическое значение имеют результаты сравг 1тельного изучения динамики накопления антитоксинов, гистологических, гистохимических и электрояномикрр-скопических исследований органов и тканей животных, привитых против клосгридиозов поливалентной ГОА - вакциной и полианаток,'ч-ном.

Как показывают данные комплексных исследований > ответ на введение гтотивокяостр"вдоэных вакцин в организме у привитых животных обеих групп развиваются однотипные по харакгепу иммуног морфологические изменения, сопровождающиеся лимфоидно-гипер-плаегической, гиотиоцитарно-макрофагальной и плазмоклеточной реакциями в имм;некомпетентных органах. Однако степень выраженное-

.'И и продолжительность указанных реакци.. различны в завиоимооги ог вида примененных вакцин.

Так, у иммунизированных полианетокеином животных морфологические и цитосерологические изменен.я, указывающие на начавшийся иммуногенез, отмечались на третьи сутки. Наибольшей интенсивности эти пр цес:ы достигали в период сЗ-^ по ю день ог на-411а первой и с2-гто 33 - второй вакичнации. Выработке, антител иммуноцитами продолжалась и но 90 сутки (срок чабяюдения). В эти сроки в центральных и периферических органах иммунитета про-юходила гезкая активация иммуноморфо логической реакции: усили-зались пролиферативные явления, увеличивалось количество плазматических и антителообразупщих клеток. Наблюдалось изменение и слеточного состава плазьоцитов - от юных к более зрелым формам.

У кроликов V овец, привитых ГОА - вакциной, степень выражен-юсти плазмоцигарноклегочной реакции, а' также количество ангите-юсинтезируювдх клеток во вое сроки исследования были низкими, ¡енее продолжителвннми и угасали спустя три месяца после введе-ия указанного препарата.

Установлено, что в формировании антитоксического иммунитета, :аряду с клетками плазматического ря£.а, участвовали нейгрофиль-ые лейкоциты, макрофага, Т- и В- лимфоциты с необходимым "або-ом органелл для переваривания антигена и синтеза иммуноглобули-ов.

На наш взгляд, заслуживает внимания го, что в ответ на антенное воздействие, активно включается в иммунологическую перетройку желудочно-кишечный тракт животных, преимущественно его имфоидные органы, представленные свободными лимфоцитами слизис-ой оболочки, пейеровыми бляшками и солигпрнш I фолликулами.

Обычно иммуноморфологичеекче сдвиги в нем наступают в конце 1ервой недели после повторного введения биопрепарата и досгига->г максимума на 20-26 сутки. Характеризуется этот процесс в ки аечнике тем, что резко возрастает количество Т- и В-лимфоцитов, Макрофагов и клеток плазматического ряяп. многие из ..оторнх0 активно синтезирус; иммуноглобулины, которые, по данным литературы, относятся в основном к секреторным антителам класса А.

Согласно современным представлениям "местный иммунитет", ¡издаваемый указанными клеточными элементами кише тка, обе.,пе-иваег его защиту ог чужеродных антигенных гэщесгв, в том чис-:е от токсинов кяогмрмдий.

Как показывает результаты электронномикроскопических исследований, в центральных и перифери еских органах иммунитета развивается ряд ультрасгрукгурных закономерны" изменений.

Че^ з сутки после введения вакцин в регионарны* лимфатических узлах отмечали нарастание числа гемоцитобластов, плазмо-бластов и макрофагов. Увеличиваются их размеры, содержимое ядер, а также мембраны эндоплазматической сети. Повышается количество рибосом и Полисом, увелпиьается число лизосом, наружная клеточная мембрана образовывает множество выростов. Обычно указанные клеточные элементы располагаются группами из трех и более клеток. Нередко макрофаге вступают в непосредственный контакт своими цитоплазматическими'отростками о неокольк-ми плазмоблас-тами с образеванием мостиков или без них, по типу'замыкающих пластин. •

На третьи сутки число плазмобластов. и незрелых плазматических клеток, а также макрофагов, заметно увеличивается. При этом макрофаги проявляют п изнаки функциональной перестройки, становятся крупнее, а в цитоплазме содержат множество лизоссмоподоб-ных гранул и вакуолей. Отчетливо зыраиены аппарат Гольджи и эн-доплазматическая сеть. Встречаются, хотя и в небольшом количестве, митохондрии, никротрубочки и микрофила менты. Поверхность тела их приобретает массу отростков самой разной величины, которыми они сообщаются с окружающими Т- и В - лимфоцитами..

Нарастает количества пзи_амоцитов, цитоплазма которых характеризуется гипертрофиен аппарата Гольджи, гранулярного эндоплазма-тического регикулума, заполняющего почти всю цитоплазму. К этому сроку, в просвете распиренных канальцев гранулярной экдо-плазмагической сети незрелых плазматических клеток,, появляется мелкозернистые массы, пре '.ставляюике собой синтезированные клеткой анатоксины, обнаруженные нами ток^ке и при лвминесцектно -серологическом исследовании.

Количество зрелых плазматических клеток еще больше возрастает через 10 суток после введения вакцины. Увеличивается также количество иммуноцитов, синтезирующих антитела.

Резкое нярегетание клеток плазматического ряда в региона1 шх лимфатически:*:.узлах осуществляется спустя трое суток послз повторного антигенного раздражения. Параллельно наблюдается усиленный- синтез- антитоксинов в резко гипертрофированной гранулярной

эндоплазматической сети иммуноцитов.

В более поздние сроки, осс 1енно на 60-90 дни пооле вакцинации, выявляйся плазмоциги, подвергаювдеся дегенеративным изменениям и близкие к гибели.

В прямой зависимости от ингенсгвности плазмоклегсчной реакции в органа* иммун..тети находили уровень противоэнтеротоксемийных нейтрализующих антител. Так, у животных, вакцинированных полианатоксином, уровень антител против Кл. перфринг^чс типа Д был 1,0 АЕ, а типа С - 0,8 АЕ. У овец, привитых ГОА - вакциной, эти цифры были гора"до г-же и составляли соответственно: 0,43 и 0,09 АЕ. Еще более убедительные данные получены при испытании напряженности иммунитета, созданного обеими вакцинами. Так, овцы, привитые полианатоксином, выдерживали семикратную дозу токсина типа Д и пятикратную - типа С, тогда как только одно животное из четырех, вакцинированных ГОА - вакциной, противос-ояло указанным дозам.

Таким образом, выполненными исследованиями установлено, что полианатоксин вызывает в организме привитых животных более напряженный и длительный иммунитет по сравнению с ГОА -вакциной. В связи ч этим, рекомендуем для профилактики основных клостридио-зов овец применить пирокомасшгабно по всей стране поливалентный анатоксин.

В борьбе с токсикоинфекциями овец одно из -ажныХ мест занимает такка серопрофилактика. Для этой цели ыироко применяют антитоксическую сыворотку против анаэробной дизентерии ягнят и инфекционной энтеротоксемии овец, разработанную Л.В. Кириллозым Д984/.

Хотя данная сыворотка обладает хороши профилактическим эффектом, но срок её действия ограничен 14, реже 18 днями, что требует многократного её применег *я прр^оди. к увеличению затрат.

Исходя из вышеизложенного, актуальной задачей является изыскание способов, позволяющих удлинить срок иммунной активности выпускаемых биопромышленноегью сывороток и иммуноглобулинов, 0 С этой целью нами, совместно о М.А. Бектемировым, разраооган способ пролонгирования иммунной защиты антитоксической сыворотки против анаэробной дизентерии ягнят и инфекционной энтеротоксемии овец. Ожидаемый эффект достигнут иммобилизацией иммуноглобулинов сыворотки полиэтиленгликолем. Однократное её примеьлпе позволяет удлинить срок антитоксической защиты препарата до 30 - 36 дней.

Поскольку случен энтеротоксемии в ввбяагопавучнай отаре наблодь ются в течение 2-2,5 мес., двукратная иммунизация животных пролонгирований сывороткой вполне ' оойила; тирует- то-ксик инфекцию.

Данный опое об обоснован экспериментальными исследованиями, апробирован в производственных условиях и внедрен г ветеринарную практику с экономическим;.эффекте» 300 руб. на каждую тысячу ишуаазироаакных овец,

В*®«*»

1. Инфекционная энгеротоксемия овец и анаэробная дизентерия, ягнят в республиках Северного Кавказа имеют широкое распространение к причиняют овцеводческим хозяйствам су ревенный экономический уиерб, Веду1дув роль в их проявлении играют стрессоры &и> зо - и эндогенного характера, которые споообс.гвуьт росту и размножен.» попаввих в кишечник клостридий.

2. Для изучаемых нами токсикоинфекций характерны короткий инкубационный период (3 - 2'» ч.), выраженная сезонность и стационарность, острое, сверхострое к реже подострое течение, и

" почти 100$ - ная летальность. .

3. Результаты па «¡морфологических исследований позволяют о учетом клинико - опизоогологических и бактериологический данных не только установить диагноз нг энтеротоксению овец и дизентерию ягнят, но и дифференцировать их от других болезней со сходной клинико анатомической картиной. .

Патологоанатоыические изменения у ягнят, павших от анаг оробной дизентерии, довольно типичны . Важным дифференциально-диагностическим признаком, отличающим её от колибактериоза, сальмонеллеза, эймерноза и диспепсии ягнят, является язвенно-некротический энтерит с пн&вматозом кишечной стенки.

5. Для онгеротоксемии овец, вызванной С£.

типа Д, характерны наличие в полости перикарда мутноватой жидкости, размягчение и разжижение паренхимы почек, наполнение мр-чевого пузыря мочой, содержащей до 1-2% сахара, отсутствие видимых изменений в селезенке. При энтерогоксемии, oбvcлoвлeннof; типом С, наблюдают асцид, геморрагический с язвенно - некрог);~ ческий энтерит, перитонит. Почги гиперемированы, но не размягчены.

6. Изучение ДИН8МИКИ ра ЗМНОЖСНИЯ г! токсинооб^зования

, о гак»'« гистологических, гпеп-охижчззк:'", л виц-

несцентно- и эяектронномикроскопических измене..яй в органах ла-боратсрных животных, овец и ягнят, больных энтеротоксемией и дизентерией, показало:

6.1. Вегетация и гоксикооб;эзование СС.первоначально происходит в просвете тонкого кишечника в среде полурасщепленных питательных веществ и десквамированного эпителия. Затем при воздействия окзотоксинов к^остридий происходит распад гликогаликса, деструкция и лизис микроворсинок, -азрушеиие апикальной плазмолемиы и других органоидов виге.эцигов. В последующем Р^влхдата юткроциг 'уляторпые расстройства, наступает некроз клеточных элементов слизистой оболочки., отмечается проникновение кяосгрядий ч периферическую часть некротизированной ткани. При энгеротокеемии, вызванной типом Д., некроз бывает поверхностном, колллхЕационяым. -при типе С и дизентерии - губским, коагуляци-оннам. Яа поверхности неизменной с..лзистой оболочки и в цитоплазме энгерадгов к.тострндии не обнаруживаются.

6.2. Спустя 3 часа при па рента ра льном заражении и 18 ч. -при пероральном, экзотоксины клостриднй обнаруживаются в печени. Вначале их выявляют на плазмолемме, затем в цит:плазме гепатоци-тов,- где при т воздействии возникают глубокие деструктивные изменения митохондрий и других органоидов. Далее токсины прЪникая в ядро, вызывают лизис хроматиновых зе^ен и просветление кариоплазмы. В последующем эгсилон- и бега- токсины, играющие репаю-«ую роль в патогенезе клостридиозов овец, определяются т клетках и тканях почек, сердца, селезенки, лимфатических узлов и надпо-ЧВЧНЯХО-.

6.3. Распространению экзотоксинов клостридий способствует глубокое повреждение гистогематических барьеров указанных органов, которое характеризуете." о'астро проходящим ангиоспазмом с последующим резким распирзнием капилляров и венул, стазом, агрегацией и лизисом эритроцитов, разрыхлением стенок сосудов, набуханием и десквамацяей эндотелиоцитов. Происходит и замедление тока Крови,а затем частичная его остановка, сгущение, нарастают пэриваскуляр! ле отеки и диапедззные кровоизлияния.

7. В результате мик роцирку ля горных расстройств, е тлкже разрушения литохондрий, наступают гипоксия и аноксия в жизнен.-ю важных органах, нарушаются все виды (нуклеопротеидныи, ферментный, углеводный, жировой, водный и витаминный) оименных процессов,

установленнне нами при гистохимическом, гистознзимологическом и электронномикроскопическом исследованиях.

8. В результате блокирующего действия экзотоксинов ¿-//^кА'''1'

и глубоких морфофункциональных изменений клеток ретикуло гистиоцигарной системы фагощпарная функция ее резко снижается.

9. Течение и ксход болезни зависит от степени выраженности структурных и гистохимических изменений в различных органах и тканях, в том числе органах иммунитета и- в крови, характеризую-: щихся дистрофией и распадом нейтрофильных гранулоцитов, эритроцит Т- и В- лимфоцитов, 1г-зта?цитов, клеток плаэматичеохого ряда, приводящих к острой декомпенсации иммунной системы.

10. Патоморфологические и гистохимические, изменение у овец и ягнят, экспериментально зараженных штаммами;

Д, С и В типов,'в основном, идентичны таковым у животных^больных энтеротоксекией и дизентерией в естественных условиях. .

11. Наиболее тяг ,лые изменения развиваются в органах выделения экзотоксинов - в почках, в которых резко выраженные дистрофические и гемоциркулягорные изменения сочетаются с некробиозом и некрозом большого количества извитых и прямых канальцев, что особенно.характерно для энтерогоксемии, вызванной типом Д. Ранние и глубокие изменения обна {у жива ют в клубочковых и перигубулярных капиллярах, а затем в нефроцигах и подоцитах.

12. В кардиомиоцигах ьаблвдают набухание митохондрий, разрыхление и просветление их ма^рикса, исчезновение крйст, расщеплени< и вакуолизацию трубоче . эндоплазматической сети, дегенерацию ми-офибрилл, уменьшение содержания гликогена и рибосом.

13. Большое значение в исходе болезни имеет нарушение гиото-энцефалического барьере, приводящее к проникновению в ткань мозге, в том числе в нейроны коры больших полушарий, продолговатого мозга; мозжечка, экзотоксинов с последующим развитием в них изменений, характерных для острой токсической энцефалопатии. Тяжелые алыеративные и микроциркуляторные изменения развиваются также в интра- и эксграмуральных ганг..иях.

14. В падпочечутсах в начале заболевания отмечают активацию минерало- и глюко''.ортикоидны« гормонов, о чем свидетельствует гипертрофия клубочковой и пучковой зон, коргикоцитов, уменьшение в них липидов и витамина С. К терминальной стадии интоксикации нарастают явления недостаточности и истощения гормональной

деятельности кортикоцитов и хромафишшх клегок, обусловленное глубокими дистрофическими и некробиогическими i вменениями их. Апалог'чные морфофункциональнуе изменения обнаруживают в адено-• гипофизе, щитовидной и поджелудочной железах. В тимусе выявляют изменения, характерные ддя акцидентальной инволюции.

15. 3 ответ на ввр^ение овцам и кроликам полианагокснна, ультраструктурные изменения, указывающее на начальные стадии иммуногенеза отмечены нами на третьи cj жи. Наибольшее количество плазматических клегок, в том числе и антитоксиюодеркаших, обнаружено в период с 3-го по 10 день после первой вакцинации и

с 2-го по 38 Cj тки noce второй.

У кроликов и овец, привитых ГОА ~ вакциной, степень выраженности 'плазмоклеточиой реакции, а также количество енгатслссинге-зируювдх клеток, на всех стадиях иммуногенеза бнля низкими и затухание иммуноморфологической реакции отмочрли ч более ранние сроки.

15.1. Установленные закономерности в развитии иммуноморфогенсза позволяют констатировать, что поливалентный анатоксин обладает высокими иммуногенными сьойствами и способствует созданию у привитых :ивотных более длительного и прочного иммунитета, что подтверждено испытаниями степени напряженности иммунитета. Овцы, привитые полианатоксином, выдерживали семикратную смергелму» доз у токсина типа Л я пятикратную - п. :а 0, теглв как одно животное из четырех, вакцинированных ГОА - вакикной, противостояло указанным дозам.

16. Разработаны люминесцентно-сзрологические методы - РЛФ и РИ^СЭ, которое позволяют с учетом клинико-мор^ологических данных установить диагноз нп энтеротоксемию овец и дизентерию ягнят в течение 1-7 часов, вместо 8 суток, предусмотренных действующей инструкцией.

17. Дано теоретическое обоснование способу пролонгирования срока иммунной защити антитоксической сыворотки прэткз анаэробной дизентерии ягнят и инфекционной онтеротоксемии овец.

5. 'ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДШШИЯ

I. Основние положения диссертационной работы вклкчегы в рз-комендыни:

- "Погомор^ологическая диагностика инфекционной ^нтероток-семии овец и анаароб'той дизентерии ягнят'- ^одобрены Советом

Ииниогров ЛАОС? и Бюро Обкома КПСС, 1976, № 369/26);

- "Па го морф о логически а диагностика клосгридиозов овец" Содобре-ы НТС МСХ РСФСР, 1983, Ш);

- 'Методические рекомендации по иммунофлуоресцентному методу диагностики основных клосгридиозов овец" (одобрены ОНКвег ВАСХНИЛ 5.06.90 г. и утверждены ГУВ Госкомиссии при Совете Министров СССР по продовольствию и закупкам 11.06.90 г.);

- "Анаэробная дизентерия ягнят и меры борьбы с ней" (одобрены ОНКвет ВАСХНИЛ 5.06.1990 г, утверждены ГУВ Госкомиссии при Совете Министров СССР по продовольствию и закупкам 11.06.90 г.)

2. Пс результатам исследований разработано:

- потоморфологическая дифференциальная диагностика основных клос-тридиозов .вец,

- люмкнесцентно-серологический и люминесцентно- гистологический методы индикации бактерий Ск-рт^тй^*»-?й- и их токсинов. Комплексное применение их об спечивает экспресс - диагностику энгеротоксемии овец и дизентерии ягнят.

■ 3. Мясо-молочные продукты, контаминкрованньс 1#ет>

нередко служат источником тяжелых заболеваний не только животных, но и людей. Б связи с этим рекомендуем пересмотреть суще-ствуювдй ГОСТ 7269 - 54 и дополнить его обязательным исследованием мясо-мо"очных продуктов на наличие

С этой целы, широко использовать экспресс,- методы - Р'Ф и РИ$СЭ

Ь. Достигнуто прлонгированиё срока иммунного действия антитоксической сыворотки ппот;с; анеэробкон дизентерии ягнят к, инфекционной энгеротоксемии овец в два и более раз.'Двукратная иммунизация животных ею в сезон энзоотии обеспечивает профилактику энгеротоксемии.

5. Выявленные пагогенетичес.сие особенности энгеротоксемии овец и дизентерии ягнят рекомендуем учитывать при изучении других токсикоинфекций, а так»- при разработке научно-обоснованных методов терапии больных животных.

6. С целью надежной профилактики костридиозов овец, нарягу

с иммунизацией их полианагоксином, следует устранись предрасполагающие стрессовые факторы, прушающие общий адаптационный синдром и обусловливающие гоксикоинфекции.

7.. Резулылы наших исследований используются при чтении лекции и прпедении лаборагорно - практических занятий со студентами ветеринарного факул! ета Дагестанского СХИ и могут быть

использованы при издании монографий, руководств, атласов по иммунологии, патологической анатомии, эпизоотологии и токсикологии клосгридиозов животных и птиц.

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИСС СТАЦИИ

Г. Устарханов П.Д. Некоторые гистохгчические исследования при анаэробной дизентерии ягнят. // Гр. III исесовзн. конференции по патологической анатомии животных. Л. 1967, 99-102. ?. Устарханов П.Д. Лагологогисгологическке изпонения в железах внутренней секреции и нервной системе при анаэробной дизентерии яп'тт. // Тр. ДагНИВИ. Махачкала, 1968, г. 2, 371 - 374. i. Устарханов П.Д. Факторы, способствующе возникновению желудочно-кишечных заболеваний новорожденных ягнят и некоторые вопросы дифференциально? диагностики этих болезней. // Там же, 403 - 417 '

№. Алиев .И., Устарханов П.Д. К эг'олоп я инфекционной энгеро-токоемии овец. //Тр. ДагНИВИ, Махачкала. 1971, т. 5, 29-32, Устарханоз П.Д. Пагологоанатокические изменения у овец при энтеротоксемии, вызванной Кл. перфрингенс типа Д. .// Там же, 102-104.

. Устарханов П.Д. Анаэробная дизентерия ягнят. // В кн. : В помощь ветработнику, Даггиз, Махачкала, 1973, 66-69. . Устарханов П.Д., Филиппова Л.Ф. Морфологический и гистохимические изменения эндокринных желез при анаэробной дизентерии . ягнят. // Тр. У Всесоюзн. конф. по патологической анатомии

животных. М., 1973, 125-126. . Устарханов П.Д., Филиппова Л.Ф., Гаджиева У.Г. ПатоморЬологи-ческая диагностика инфекционной энтеротоксемии овец, обусловленной Кл. перфрингенс типо Д и С. // Те-.юы дохл. Всесоюзного совещания по болезням 1вец. Москва, 1973, 32-33. . Устарханов П.Д. Гистохимическое изучение состояния углеводного, жирового, муклеогтрогеиднс.'о обмена при энтеротоксемии овид // Там же, 29-30. , Устарханов П.Д. Некоторые гистохимичпкие исследования при инфекционной энтеротоксемии овец. //Тр. ДагНИВИ, Махачкала, 1974, т. 6-7, 94-97. . Устапханов П.Д. Пагологогистологические изменения в паренхиматозных органах при инфс.сционной энтеротоксеми.. овец, вызванной Кл. перфрингенс типа Д. /,' Там же, 9г-94.

12. Устарханов П.Д. Морфологические изменения тонкого отдела кишечн."ка при инфекционной терот'-чсемии, вызванной Кл. перфрингенс типов С и Д. // Там же, 98-101.

13. Устарханов П.Д., Коломейцева Л.Ф. Патоморфолог"я и некоторые'вопросы патогенеза инфекционной энгеротоксемии овец. // Материалы научно - произв. конф., Махачкала, 1976, 49-50.

14. Устарханоз П.Д. Ульграгонкея структура клетог печени, почек и слизистой оболочки г' якого отдела кипечника у овец. // Сб. научнмх работ ДагНИВИ, Махачкала, 1976, г. ЛИ, 136 -139.

15. Ус тс ока нов П.Д., П даеваУ.Г., Филиппове Л.Ф. К лини к о-гематологические, петоморфологи' ские и гистохиыческие исследования лабораторных животных, отравленных токсином Кл. пеп-фпингекс типси Д. // Там же, PiO-I^S. '

тб. Устарханов П.д. Патоморфологическая диагностика клостридио-зов овец (инфекционной энгеротоксемии и анаэробной дизентерий Рекомендации, разработанные по результатам научных исследований в IX пятилетке (I97I-I975), ДагНИВИ, Махачкала,

1976, 23-28.

17. Лтаев О.И.-, Ургуев К.Р., Устарханов П.Д. и др. Влияние иммунизации противоклосгридаозным полианатоксином и поливалентной ГОА-вакциной на белковую картину крови овец. // Сб. научных prvjoi, ДагНКВМ. 1976, г. УШ, I2I-I27. .

18. Устарханов П.Д.. й. смарданов О.И. Дифференциация типов Кл. перфринге не методом имгчгафлуоресценции. // Тезисы докл. неучно-пракг. конф. молодых учегьгх, Махачкала, -1977, с. I¥f.

19. Усгарханов П.Д.. Коломейцева Л.Ф. Иммуномор^огенез при вакцинации овец против инфекционной энгеротоксемии. // Ветеринария, 1977, 1Á 2, -64-67.

20. Устарханов П Д. Выяснение гистологических и ульгратонких изменений в паренхиматозных органах. Изучение иммуноморфологических сдвигов у лабораторных животных к овец. // Научн. отчет ДагНИВИ. Сб. рефератов НИР и .ОКР, Сельское хозяйство,

1977, !? 8, с. 56.

21. Устарханов П.Д., Коломейцева Л.Ф. Экспериментальная энтеро-токсемкя. // Г^териала У± Всесоюзн.конф. по патологической анатомии тавотных, Тарту, 1977, т. 2, 62-70.

22. Усгарханов П.Д. Анаэробная дизентерии ягнят, // В кн.: Система ведения сельского хозяйства в ^егестане, Махачкала,

1977, с. h93.

23. Устарханов П.Д., Коломейцева 1.Ф., Еахмардвноэ О.Я. Сулей -какова Р.Б. Сравнительное изучение иммуномор^огзнеза у лабораторных животных и у овец, привитых ГОА-вакцииой и полигип-токсяном против инфекционной онтеротоксемии. // Сб. научн. статей Даг'ИВИ, Махачкала, 1970, г. ТО, 3-8.

24. Устарханов П.Д., Сулейманова Р.Б. Электронномикроскопическое изучение действия токсинов Кл. перфрингенс на клетки пеноим, почек и кишечника овец, //Там де, 23-26.

25. Устарханов П.Д. Экспресс-метод диагностики инфекционной эн-■ терогоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят. Рекомендации по профилактике заболеваний овец в Дагестане, Махачкала, 1979, 71-73. „

26. Устарханов П.Д.. Сулейманова Р.Б. Использование метода Флуоресцируют* антител для типизации микробов Кл. пепфрщггсгю. // Тр. ДагШШИ, Махачкала, 1980, т. XI, 53-57.

27. Устарханов П.Д. ПатоморТ>ологические изменения у овец при инфекционной энтеротоксемии. // Тр. ДагКШЯ, Махачкала, 15Ш,

• т. ХЛ, 75-82. ;

28. Устарханов П.Д. Некоторые вопросы диагностики, патогенеза и патояорфологии анаэробной дизентерии ягнят. // Там ко, ■г>2-891

29. Устарханов П.Д. Пневматоз кишечника у ягнят. // ВШЕ'ТЗУ.СХ "Депонированные рукопиои", 1981, Я '<205-8.

30. Устарханов П.Д. Люминесцентно-серологичоский мятод диагностики инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят. Рекомендации. //Даггиз., Махачкала, J9SI. - ТО с.

ЗГ. Устарханов П.Д,, Шахмарданов О.Ш.. Сулейманова Р.Б., Коломейцева Л.Ф. Гель-хроматография как метод фракционирования анатоксинов Кл. перфрингенс типа С и Д. //Сб. научн.тр. ДагШВЙ. Новочеркасск, 1982, т. XIII, 79-85.

32. Устарханов П.Д. Дифференциальная патоморфологическая диагностика Основных клостридиозов овец. //Там же. 69-7¡';.

33. Устарханов П.Д., Коломейцева Л.Ф., Сулейманова Р.Б. Човне метода диагностики анаэробннх з«болевв"Ий овец. Овцевог-^тво Дагестана. // Материалы научно - произв. конфереиц; ч, Махачкала, 1982, 328-330.

34. Устарханов П Д., Шахмарданов О.Ш., Сулейманова Р.Б., Коломейцева Л.Ф. Использование РИГА для определения токе -

нов Кл. перфрингено и анатоксинов к ним. // Сб. научн. тр. ДагНЯВИ. Новочеркасск, 1984, т. 15. 21-24.

35. Ус тарханов П.Д. Элек трон номик роскопич ески е исследования головного мозга овец при экспериментальной энтерогоксемии.

// Там ке, 44-46.

36. Швхмарданов О.Ш., Уотарханов П.Д. Перспектив« дифференциальн экспресс - диагностики хлостридиозов. //Тез. докл. 71 научно -произв. конф. молодых ученых и специалистов Дагестана Махачкала, 1984, 143.

37. Устархпнов П.Д., Гринев Н.М., Коломейцева Л.$. и др. Применение тола сГ:луоресцируо14!Х антител для пзуошк штогене-эа и диагностики инфекционной онтэротоксемии овец. // "Депонированные рукописи", ШШИТЭИСХ, М. 1985, » 52-85.

38. Уотарханов П.Д. Патоморфологичсская диагностика клостридио-зов овец. Рекомендации. // Даггиз, Махачкала, 1985. - 28 с.

39. Уотарханов П.Д. Патсгензэ инфекционной энтерогоксемии овец. // Ветеринария, 1985, № 10, 38-40.

40. Уотарханов П.Д. Ультраструктурные основы нарушения функции организма животных при воздействии токсинов Кл. перфрингено. // В кн.: Профилактика и лечение болезней сельхоз. живогны> и птиц в Дагестане /СКЗНИВЯ/, Новочеркасск, 1986, 25-36. .

41. Уотарханов П.Д. Особенности патогенеза инфекционной энтеро-токоомии овец. // Сб. научн. тр., Новочеркасск, 1987, 71 -79.

42. Устархаиов П.Д. Усовершенствование и внедрение в ветеринар-ну/о практике серологического метода диагностики клостридао-зов овец. Отчет о НИР /заклвчительный, ДагНКВИ. //Сб. рефератов НИР и ОКР, Сельское хозяйство. Серия 25, 1987,

» 12, 65.

43. Устарханов П.Д., Бектемиров М.А., Коломейцева Л.Ф. Разработ ка экспресс - методов индикации Кл. перфрингено и его токои нов. // В кн.: Разработка и производство препаратов медицинской биотехнологии, тезисы кснф., часть I, Махачкала, 1990, 145.

44. Уотарханов П.Д., Джамбулатов 3 .М., Бектемиров М.А., Анаэроб ная дизентерия ягнят и меры борьбы с ней. Рекомендации, Махачкала, 1990. Т6 о.