Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Особенности проявления ассоциированных инфекций телят, обусловленных вирусами вирусной диареи, инфекционного ринотрахеита и бактериями рода Pasteurella

На правах рукописи

111111111111111№11111

003 15812 1

ЗАЙЦЕВ ЮРИЙ НИКОЛАЕВИЧ

ОСОБЕННОСТИ ПРОЯВЛЕНИЯ АССОЦИИРОВАННЫХ ИНФЕКЦИЙ ТЕЛЯТ, ОБУСЛОВЛЕННЫХ ВИРУСАМИ ВИРУСНОЙ ДИАРЕИ, ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА И БАКТЕРИЯМИ РОДА РА8ТЕШЕ1АА

16 00 03 - ветеринарная микробиология,

вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

2 О СЕН 2007

Новосибирск - 2007

Работа выполнена в ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии

доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Глотов Александр Гаврилович

доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Колосов Александр Алексеевич (ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии),

кандидат ветеринарных наук, доцент Грязин Валерий Николаевич

(Институт ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «НГАУ»)

Ведущая организация Краснодарский научно-исследовательский

ветеринарный институт

Защита состоится « ¿р_» ¡р^ в "УО_у> часов на заседании

диссертационного совета Д 006 045 01 при Государственном научном учреждении Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии по адресу 630501, Новосибирская область, Новосибирский район, п Краснообск, ГНУ ИЭВСиДВ

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНСХБ СО Россельхозакадемии Автореферат разослан «¿V» г

Научный руководитель

Официальные оппоненты

Ученый секретарь диссертационного совета

Г М Стеблева

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота (КРС) причиняют огромный экономический ущерб животноводству всех развитых стран По мнению многих авторов (H H Крюков и соавт , 1984, В А Мищенко и соавт , 2000, К П Юров и соавт , 2003, L A Babiuk et al.,

1996, К W Jericho et al, 2004), первопричиной возникновения 90% инфекционных пневмоний у телят являются вирусы, вызывающие инфекционный процесс в макроорганизме и формирующие оптимальные условия для жизнедеятельности в нем бактерий

Считается, что вирусы и бактерии Pasteurella spp являются одним из этиологических факторов «транспортной лихорадки» или «энзоотической бронхопневмонии» телят (3 Ф Зудилина и соавт, 1972, С А Жидков, 1976, H H Крюков, 1980, С L Kelhng et al, 1990, R W Fulton et al, 2006) Взаимодействие этих микроорганизмов приводит к развитию бронхопневмонии у восприимчивых животных, причем бактерии Р multocida сероваров А и D играют вторичную роль в данной патологии, í к воспроизведение респираторной болезни затруднено при введении их в моноварианте (Э А Шегидевич, 1984, 1993, А А Колосов,

1997, W D G Yates, 1982,1984)

В настоящее время одной из экономически значимых признана вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек (ALE Lindberg, 2003), являющаяся энзо-отичной в большинстве стран, в том числе в России Серопозитивность взрослого скота составляет 60-85% (ПА Красочко, 1991, НЮ Басова, 2002, О Г Петрова и соавт, 2002, К П Юров и соавт , 2003, Т И Глотова, 2006, H Houe, 1999) В молочных стадах она обычно приводит к увеличению репродуктивной патологии у коров и болезням телят, которые носят стационарный характер

Количество экспериментальных работ, посвященных изучению ВД-БС КРС как самостоятельной болезни, так и в ассоциации с вирусными и бактериальными инфекциями телят, в нашей стране ограничено (CA Жидков, 1996, Т И Глотова, 2006), недостаточное внимание уделяется роли нецитопатогенного биотипа вируса в этиологии и патогенезе бронхопневмоний

Повышенная чувствительность к возбудителям инфекционных болезней, включая условно-патогенную микрофлору, у животных, инфицированных вирусом ВД-БС, связывается с наличием у них иммуносупрессии (Е Peterhans et al, 2003) Неконтролируемая диссеминация вируса во внешней среде приводит к постоянному вовлечению в эпизоотический процесс новых животных, не имеющих иммунитета к вирусу, что повышает риск развития у них респираторных болезней (А Г Глотов и соавт, 2002, С L Kelhng, 2004)

Учитывая существование вируса ВД-БС в виде двух биотипов, интерес исследователей всего мира вызывает определение его вирулентности и способности индуцировать развитие инфекционного процесса в организме восприимчивых животных,.а также потенцирование клинического проявления вирусных и

вирусно-бактериальных инфекций (в Са51гисс1 е1 а1, Л 992, В W Вгоскгееп, С Ь КеШп& 1998; С Ваи1е ег а1 „2003V, Са1ау й а1, 2007)

Цель исследований. Изучить особенности распространения и проявления ВД-БС в ассоциации с ИРТ и пастереллезом крупного рогатого скота, определить патогенность выделенных изолятов вируса, относящихся к различным биотипам, на естественно восприимчивых животных, а также установить их роль в этиологии и патогенезе экспериментальной смешанной бронхопневмонии Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи 1, Изучить и провести анализ особенностей распространения и проявления респираторных, болезней молодняка крупного рогатого скота, протекающих с участием вирусов ВД-БС, ИРТ КРС и бактерий рода Ра81еиге11а в Новосибирской области,

2 Изучить ассоциации вирусов и бактерий рода Раз1еиге11а, а также частоту их выявления при вспышках массовых респираторных болезней телят до 6-месячного возраста,

3. В условиях контролируемых экспериментов определить патогенность изолятов вируса ВД-БС КРС, относящихся к различным биотипам, выделенных от больных и инфицированных животных, а также воспроизвести острую бронхопневмонию вирусно-бактериальной этиологии и изучить ее клинические проявления на телятах 4-6-месячного возраста Научная новизна.

1 Доказаны широкое распространение ВД-БС КРС и роль возбудителя в этиологии массовых респираторных болезней телят, протекающих с участием вируса ИРТ КРС и бактерий рода Раз1еиге11а, в хозяйствах молочного направления

2 Изучены ассоциации вирусов и бактерий рода Раз1еиге11а при массовых вспышках респираторных болезней телят, а также частота их выявления во внутренних органах больных животных,

3 Впервые в РФ в контролируемых опытах на телятах 4-6-месячного возраста доказана патогенность изолятов вируса ВД-БС КРС и воспроизведена острая бронхопневмония при помощи его цитопатогенного и нецитопатогенного вариантов, а также вируса ИРТ КРС и бактерии Раз1еиге11а тикоиск серовара Б Показана предрасполагающая роль вируса в развитии данной патологии и си-нергетическое взаимодействие трех возбудителей

Теоретическая и практическая значимость работы Результаты исследований представляют теоретическую ц практическую ценность, так как дают возможность расширить научные знания относительно роли Вирусов и бактерий в возникновении массовых респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота Они могут быть использованы при дальнейшем изучении эпизоотологии, патогенеза ВД-БС КРС и смешанных вирусно-бактериальных инфекций, протекающих по синергетическому типу, в целях совершенствования противо-эпизоотических мероприятий

Материалы диссертации использованы при разработке методических рекомендаций «Вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек крупного рогатого скота (историческая справка, характеристика возбудителя, .особенности эпизоотологии; клиническое проявление и экономическое значение)», утвержденных Ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН (протокол № 1 от 17 января 2006 г) и подсекцией секции инфекционной патологии отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии «Проблемы инфекционной патологии Животных в регионе Сибири и'Дальнего Востока» (протокол № 1 от 17 января 2006г)

Апробация полученных результатов. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на 6-й Международной научно-практической конференции «Аграрная наука Сибири, Монголии, Казахстана и Башкорстана-сельскому хозяйству» (Новосибирск, 2003), IV научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 70-летию НГАУ (28-30 марта 2006 г ), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы патологии и иммунологии животных», посвященной 100-летию со дня рождения академика ВАСХНИЛ (РАСХН) Я Р Коваленко, Москва 16-17 мая 2006 г , Научно-практической конференции «Научное обеспечение реализации национальных проектов в сельском хозяйстве», Ижевск 12-14 июня 2006 г

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликованы 5 печатных работ в сборниках научных трудов, журналах «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Ветеринария» и других изданиях

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, приложения Работа иллюстрирована 16 рисунками и 10 таблицами Список литературы включает 219 источников, в том числе 124 зарубежных Основные положения, выносимые на защиту.

1 Особенности распространения и проявления респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота, протекающих с участием вирусов ВД-БС, ИРТ КРС и бактерий рода Ра$1еиге11а в Новосибирской области,

2 Материалы, доказывающие патогенность изолятов вируса ВД-БС КРС для телят 4-6-месячного возраста и экспериментальные данные по клиническому проявлению острой бронхопневмонии, вызванной различными биотипами вируса ВД-БС, а также вирусом ИРТ и бактерией Ра^еитеЦа ти11ос«1а серовара Б

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

Работа выполнена в 1999-2007 гг в лаборатории биотехнологии-диагностический центр ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии и хозяйствах Новосибирской области Использовали также результаты исследований Новосибирской межобластной ветеринарной лаборатории Эпизоотологическое обсле-

дование хозяйств проводили по, методикам И С. Бакулова (1979) и С,И Джупи-ны (1991)

Серологические, вирусологические и бактериологические исследование. Йодвергли анализу результаты 596 эксцертиз вирусологических, бактериологических (998 проб) и серологических (923Q проб) исследований из 25 районов и 155 хозяйств области, где не проводилась специфическая профилактика данных болезн.ей, за период 1986-2007 гг Использовали результаты, предусмотренные ГОСТом 25755-91 «Методы лабораторной диагностики инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота» Исследования проб .биоматериала на ВД-БС КРС проводили при помощи вирусологических методов и с использованием «Набора для диагностики вирусной диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа» (ТУ № 1007078-92).

При бактериологических исследованиях использовали искусственные дифференциально-диагностические-пйтательные среды ВСА, Плоскирева, Эндо и МПА, кровяной МПА, МПА с глюкозой Идентификацию и определение пато-генности выделенных культур бактерий осуществляли по методике Сидорова MA исоавт (1995)

Гематологические исследования проводили согласно методикам, описанным И IT Кондрахиным и соавт (1985)

Штаммы и изоляты вирусов Использовали штаммы и изоляты вирусов, выделенные сотрудниками лаборатории биотехнологии-диагностический центр ЩУ ИЭВС и ДВ в 1999-2006 гг

Вирус ВД-БС КРС: Цитопатогенные изоляты Бизон, Т-1, нецитопато-генные изоляты Ирмень 01/06, 1140, Т-2, Б-6

Вирус ИРТ КРС: Штамм Cl 1, №V-337 (депонирован в НИИ ККМ ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора)

Pasteurelja multocida D: Штамм AT, № В-1031 (депонирован там же) Характеристика микроорганизмов дана в соответствующих разделах диссертации Подробные схемы проведения опытов и методики исследований приведены по мере изложения материалов собственных исследований

Экспериментальное заражение. Использовали серонегативных телят (41 голову) черно-пестрой породы в возрасте 4-6 месяцев живой массой 150 кг, подобранных по принципу аналогов;' не содержащих в крови вирус ВД-БС по данным ПЦР (НПО «НАРВДК») Телята были выращены в условиях метода умеренно-пониженных температур и не подвергались воздействиям стрессов, включая транспортный и кормовой ,

Суспензию вирусов вводили интраназально в дозе 4x105 5-6 ТЦД5о/о,1мл Суспензию бактерии (10ПКОЕ/МЛ) интратрахеально. Контрольным животным таким же способом водили физиологический раствор За всеми животными в течение 25 дней проводили клинические наблюдения-с ежедневной термометрией, отбором проб крови для определения гематологических показателей Пробы сы-

воротки'крови отбирали до заражения и через 21 день после него для выявления сероконверсии

На 12-13 дни опытов подвергали убою по одному теленку из каждой опытной группы для изучения ггатологанатомических признаков экспериментальных инфекций, вирусологических и бактериологических исследований От трупов вынужденно убитых животных отбирали пробы слизистых оболочек носа, трахеи, носоглотки, легочных лимфоузлов, бронхов, трахеальной й бронхиальной слизи, краниального и каудального отдела легких, миндалин, мезентери-альных лимфатических узлов, селезенки, тонкого и толстого отделов кишечника

Математические расчеты. Статистическую обработку проводили общепринятыми методами (И П Ашмарин и соавт ,1962) Достоверность результатов подтверждали с помощью критерия Стьюдента Результаты считали достоверными при Р< 0,05 Для обработки данных использовали программу «Microsoft Excel», входящую в пакет программ «Microsoft Office 7 0»

Автор выражает благодарность за помощь в выполнении некоторых разделов диссертации сотрудникам Новосибирской межобластной ветлаборатории В И Аксенову, В Г Тимофеевой, а также сотрудникам лаборатории биотехнологии-диагностический центр ГНУ ИЭВСиДВ Т И , Глотовой, А В Нефедченко и С В Котеневой

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Распространение и особенности проявления ВД-БС в хозяйствах Новосибирской области

Изучение распространения вирусной диареи-болезни слизистых в Новосибирской области до 2001 г не проводилось В связи с этим за основу были взяты результаты исследований, проведенных в период с 2001 по 2006 гг.

А Г Глотов и соавт (1990), А. А Колосов (1997) сообщали, что в 19891993 гг была установлена ведущая роль вируса ИРТ КРС, а также бактерий рода Pasteurella в возникновении массовых респираторных болезней молодняка, находящегося на откорме и фермах молочного направления

Роль вируса ВД-БС КРС косвенно подтверждалась результатами серологических исследований Вируснейтрализующие антитела к вирусу выявляли практически во всех пробах сыворотки крови, полученных от больных животных, но сероконверсию, в течение 3-х недель, устанавливали не всегда Иногда диагностический прирост титров антител выявляли по истечении нескольких месяцев, что, вероятно, было вызвано иммуносупрессивным действием вируса и отрицательно влияло на качество диагностики болезни

При вспышках респираторных болезней телят на молочно-товарных фермах чаще выделяли культуры Pasteurella multocida серовариантов А и D с пониженной вирулентностью

Дальнейшими исследованиями установили, что ВД-БС КРС широко распространена на территории области Максимальный процент (66,4%) положительных к вирусу ВД-БС КРС проб сыворотки крови выявляли в хозяйствах, где бедение животноводства осуществлялось по интенсивному типу Уровень серо-конверсии у переболевших животных в таких хозяйствах не превышал 20-30%% Полученные результаты позволили разделить все хозяйства на три категории К первой (низкий уровень серопозитивности) отнесли 9% от числа обследованных, ко второй (средний) - 22, а к третьей (высокий уровень) — 60%

Таблица 1 - Проявление вирусных респираторных болезней молодняка КРС в зависимости от концентрации и продуктивности животных в хозяйстве _

Пого- Среднего- Серопозитив- Выделе- Клинические Частота выделе-

ловье довой на- ность ние воз- - проявления (+,-) ния бактерий

. (коров) дой на фур (%)/наличие будителя рода Раз1еиге11а,

< голову (кг) сероконвер- ВД-БС КРС их патогенность

сии, (+,±,-) коровы | телята (+.")

До 300 До 2500 0-30/- - + ± Редко (-)

До 500 2500-4000 31-60/± ± ± + Относительно

редко (±)

800 и 4000-7000 61 и выше/+ + + + Часто (±)

более

В 12 районах области регистрировали совместное течение ВД-БС и ИРТ КРС Часто выявляли вариабельную картину результатов серологических исследований, разброс величин титров антител к обоим вирусам и, зачастую, отсутствие выявляемой реакции антителообразования При таком типе течения этих инфекций могло происходить частичное подавление иммунной реакции организма на один из возбудителей при сохранении или даже усилении его значения в патогенезе заболевания

Особенностью эпизоотической ситуации в настоящее время является то, что острые вспышки болезней встречаются чаще в хозяйствах, где у животных нет антител к вирусам или уровень их недостаточно высок Наряду с таким проявлением ВД-БС и ЙРТ КРС протекают в латентной или субклинической форме с длительной персистенцией возбудителя в стадах, обусловливая стационарность очагов болезни Значительное влияние на течение болезней оказывали нарушения условий кормления и содержания и активизация секундарной микрофлоры

У 32% телят до 30-дневного возраста не обнаруживали вируснейтрали-зующих антител, что делало ш. особенно незащищенными от инфицирования

2.2.2. Распространение ti а стер сл лез а КРС « Новосибирской области

Анализ данных ветеринарной отчетности за ! 9Й 8-2006 гг. показал, что пастереляез крупного рогатото скота регистрировался -а Новосибирской области и чаше протекал я виде эндогенной инфекции. С середины 90-х годов была отмечена тенденция к снижению случаев выделения этих бактерий (рисунок 1).

И (30М г.)

60 [21)05 1.1 i Г. (ДОН ТИШИ» г.)

50 (800! г.) 43 <2(100 г.) 40 {I Wg i i

i» (mí 16(1997 г.) »(W»|J

130 (1WJ г.)

UWWil

l2S(l№ r.l

96 ,,)

■mi'WW

SK (!'»'> Г.)

Рисунок 1 ■ Частота выделения бактерий рода Pasteurelja из проб биоматериала, полученного при вспышках респираторных болезней телят

В 1986-92 гг. культуры пастерелл выделяли чаще от телят е крупных животноводческих хозяйствах по откорму молодняка. В период 1993-99 гг. они присутствовали в пробах биоматериала от телят из хозяйств различного направления значительно реже. Начиная с 2001 г. количество проб, содержащих этот возбудитель, вновь начало возрастать.

В настоящее время заболевание телят пастереллезом, подтвержденное лабораторными исследованиями, регистрируется в 22 районах области в хозяйствах с высокой концентрацией животных, специализирующихся isa производстве молока, где Серопозитианость животных к вирусам ВД-ВС и ИРТ КРС достигает 60-70%.

2.2.3. Частота выделения вирусов ВД-ВС, ИРТ КРС и бактерий рода Pasteurclla от больных телят в хозяйствах, неблагополучны* но респираторным болезням

Результаты собственных исследований, проведенных в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням телят, представлены в таблице 2.

Таблица 2 - Частота выделения вирусов ВД-БС, ИРТ КРС и бактерий рода Раз1еиге11а от рольных телят в хозяйствах, неблагополучных по респираторным болезням (2001-2007 гг.) ' ' . '

X» Наименование возбудителя, ассоциации Количество по- Выявлено положитель-

, возбудителей ложительных ных проб от числа ис-

проб следованных, %

1 Вирус ИРТ КРС 299 30

2 Вирус ВД-БС КРС 180 18

3 Бактерии рода Ра51еиге!1а

а) Ьаето1уПса 133 ' 13,3

• б) тиИоаёа * . 200 20

4 Вирус ИРТ КРС и ВД-БС . 716 71,7

5 Вирус ИРТ КРС и Рав1еиге11а 200 20

6 Вирус ВД-БС КРС и Раз1еиге)1а 519 52,9

Из данных таблицы 2 видно, что количество проб, содержащих вирус ИРТ в моноварианте, составляло 30%, ВД-БС КРС - 18%, ассоциации этих вирусов -71,7% Высокий процент выявления положительных проб свидетельствует о широком; распространении этих инфекций среди восприимчивого поголовья и, возможно, ведущей роли вирусов в-инфекционном процессе

Культуры пастерелл изолировали в 33,3% случаев, при этом они относились к видам тиИоЫа (20%) и 11аеп1о1уйса (13,3%) Патогенность изолированных бактерий в большинстве случаев была пониженной

Сочетание вирусов ИРТ и ВД-БС чаще всего выявляли в легких (37,8%), трахеальной и бронхиальной слизи (16,5%), слизистой носа (10,2%) и трахеи (9,82%) Вирусно-бактериальные ассоциации - в легких вирус ИРТ и пастерел-лы - в 32,9%, а вирус ВД-БС КРС и бактерии этого рода в 52,9% исследованных проб

Количество проб биоматериала, содержащих вирус ВД-БС КРС и Р гпиИо-С1<1а сероваров А и В, составило 6,8% в легочных лимфоузлах, 11,2% в бронхах, 3,4% в трахеальной и бронхиальной слизи Число проб, содержащих этот вирус и бактерии,? Ьаето^са, составило 3,6% в легочных лимфоузлах и 9,9% в легких Ассоциацию вирусов ИРТ и ВД-БС и бактерий рода Раэ1сиге11а выявляли также в легких (43,1%)

Таким образом, роль вируса ВД-БС КРС в этиологии массовых респираторных болезней телят обосновывается следующими доказательствами

- частым выделением вируса из легких при пневмониях,

- установлением активной вирусной инфекции, подтвержденной серокон-версией к вирусу в парных пробах сыворотки крови,

- демонстрацией присутствия вируса в ассоциации с вирусом ИРТ КРС и бактериями рода Раз1еиге11а в пробах биоматериала от больных телят

2.2.4. Патоггенность изолятов вируса ВД-БС КРС, относящихся к разным биотипам, для естественно восприимчивых животных

Результаты опытов по экспериментальному заражению показали (таблица 3), что цитопатогенный изолят Бизон обладал патогенностью для телят 4-6-месячцого возраста, вызвав у них лейкопению и характерные признаки острого респираторного заболевания с кратковременной диареей. Все телята выздоровели на 12 день после заражения, но значительно потеряли в массе Посмертные изменения во внутренних органах характеризовались скоплением пенистого экссудата в трахее и легких, увеличением регионарных лимфоузлов, гиперемией слизистой оболочки тонкого отдела кишечника, увеличением брыжеечных лимфоузлов

Таблица 3 - Патогекность изолятов вируса ВД-БС КРС, относящихся к различным

биотипам, для телят 4-6-месячного возраста

Изоляты Форма проявления Длительность лейко- Сероконвер- Степень

- болезни пении (дни)£ ее зна- сия (+,-) - вирулент-

чения (кл/мм3) > ности

Цитопатогенные

Бизон Острая (ОРЗ, диарея) * 3-10, до 2900 + средняя

Т1 Острая (ОРЗ) 4-9, до 3800 ± средняя

Нецитопатогенные

Ирмень Острая (ОРЗ, диарея) 4-9; до 3200 + Средняя

01/06

1140 Субклиническая 3-8, до 3500 + низкая

Т-2 Субклиническая 4-8, до 3500 ± низкая

Б-6 Субклиническая 3-9, до 3600 + низкая

Вирулентность изолята Т-1 была ниже, тку инфицированных животных регистрировали кратковременные признаки острого респираторного Заболевания, закончившегося выздоровлением на 10-14 дни после заражения На вскрытии трупа вынужденно убитого теленка выявили аналогичные Изменения, но выраженные слабее

Все нецитопатогенные изоляты вируса ВД-БС КРС индуцировали развитие инфекционного процесса в организме Зараженных животных, проявлявшегося в виде легкого респираторного синдрома, либо повышения температуры тела и лейкопении

Наиболее вирулентным оказался изолят Ирмень 01/06, вызвавший у всех животных незначительное угнетение на 4-6 сутки после заражения, отказ от корма, повышение температуры тела до 41,9°С и лейкопению Инфицированные телята выздоровели на 13 день после заражения Патологоанатомические изме-

нения локализовались в лимфатических узлах (легочных и мезентериальных), тонком отделе кишечника

Сроки выявления лейкопении у животных опытных групп наступали на 35 дни после заражения, т е либо до развития видимой клинической реакции на введение вируса, либо одновременно с ней

Все телята,- использованные в опыте, реагировали оероконверсией к вирусу через 21 день после экспериментального заражения (срок наблюдения), что свидетельствовало об активной инфекции у них Титры вируснейтрализующих антител не превышали 1 16 и были выше у телят, инфицированных цитопато-генныйи изолятами Исключение составили телята из групп №№ 2 и 3 (по одному из Группы), у которых в эти сроки не выявили реакции антителообразования на введение цитопатогенного и нецитопатогенного изолятов, соответственно

Относительно низкие титры вируснейтрализующих антител у телят после выздоровления и отсутствие их у двух телят, вероятно, связаны с иммуносупрес-сивным свойством вируса Возможно, что титры антител были бы выше при исследовании проб сыворотки этих животных в более поздние сроки

Все использованные в опыте изоляты вируса были обнаружены в лимфо-идных органах (легочные и бронхиальные, мезентериальные лимфоузлы, селезенка)

- У контрольных (неинфицированных) животных клинические показатели не отклонялись от нормы

2.2.5. Экспериментальная бронхопневмония телят, вызванная вирусами ВД-БС, ИРТ КРС и бактерией Ра$1еиге11а тиНоск1а серовара И

Учитывая полученные результаты с целью подтверждения роли различных биотипов вируса ВД-БС КРС в этиологии массовых респираторных болезней телят в естественных условиях, провели эксперименты по воспроизведению смешанной вирусно-бактериальной бронхопневмонии при помощи трех возбудителей

Схема опыта. Животным первой группы интраназально ввели цитопато-генный изолят Бизон, а второй - нецитопатогенный - Ирмень-01/06 Телятам группы №3 вводили цитопатогенный вирус ВД-БС, а через 5 дней одновременно вирус ИРТ КРС и бактерию Раз1еиге11а тикоаск серовара Б Животных группы №4 инфицировали аналогично, но для заражения использовали нецитопатогенный изолят вируса ВД-БС Сроки введения суперинфицирующих патогенов были выбраны, исходя из времени наступления лейкопении, индуцированной вирусом ВД-БС КРС Животным пятой группы вводили вирус ИРТ КРС, шестой -суспензию бактерии раздельно, а .контрольным - стерильный физиологический раствор

2.2.5.1. Экспериментальная инфекции телят с использованием цитопато генного изолята вируса ВД-БС КРС

Телята, зараженные цнтопатогеиным вирусом ВД-БС, заболели через 3-6 суток после заражения с клиническими симптомами острого респираторного заболевания средней тяжести Й выздоровели через 14 дней.

У животных, последовательно инфицированных тремя возбудителями, включая иитопатЕ>гениый вирус ВД-БС КРС, клинические симптомы и течение первых 7 суток были сходными с таковыми у телят группы №1. Через 2 суток после введения вируса ИРТ КРС и бактерии у них отмечали повышение температуры тела до 42°С, отказ от корма, угнетение общего состояния, серозно-катаральный конъюнктивит, ринит, чихание, сухой кашель, эрозии на слизистой оболочке носовой полости. Позднее носовые выделения приобрели более густую консистенцию. Выздоровление животных наступило в среднем через 21 сутки после введения вируса ВД-ВС КРС, к этому времени у них регистрировали потерю массы тела в 1,5 раза. Один теленок пал через 5 суток после введения вируса ИРТ КРС и бактерии.

«01Ш -

2 ЮМ

1 з 5 7 9 !1 [5 П 14 21 25

Рисунок 2 - Количество лейкоцитов у ладят, экспериментально инфицированных цитопатогенпым изолятом вируса ВД-ВС КРС (Бизон), вирусом ИРТ КРС (С! I} и бактерией Р. ти1(ос1(1а Серовара О (АТ),

Посмертные изменения во внутренних органах теленку группы №1 включали скопление пенистого экссудата в трахее и легких, увеличение регионарных лимфоузлов, гиперемию слизистой оболочки тонкого отдела кишечника, увеличение брыжеечных лимфоузлов.

V животных группы №3 - скопление фибрина, некрозы и дифтеритические наложения на слизистой оболочке [¡оса и трахеи, а также пенистый экссудат в их просвете, увеличение регионарных лимфатических узлов, лабариую фибриноз-

ную пневмонию, точечные кровоизлияния ría эпикарде, гиперемию и изъязвление слизистой оболочки сычуга и тонкого отдела кишечника, увеличение брыжеечных лимфоузлов.

2,2.5.2. Экспериментальная инфекция телят с использованием ней итопато генного и зол я та вируса 8Д-БС КРС

У телят контрольной группы (№2), которым вводили нецитопатогенный изолят вируса ВД-БС КРС, клинические признаки проявлялись в виде незначительного угнетения на 4-5 сутки после заражения, повышения температуры тела до 41,9UC и лейкопении. Инфицированные животные выздоровели на 13 день.

У телят группы №4, инфицированных последовательно тремя возбудителями, также развились клинические признаки острого респираторного заболевания, сопровождавшегося диареей, проявившейся у всех животных в течение 4 дней. В каловых массах присутствовали сгустки крови. Выздоровление животных этой группы наступило на 20-21 дни, а сохранность составила 100%.

На вскрытии трупа теленка, зараженного с участием не пи то патогенного нзолята, выявили признаки острой катаральной бронхопневмонии, однако пора-женин органов брюшной полости (тонкий отдел кишечника, слизистая прямой кишки) были выражены сильнее, чем у телят, инфицированных с участием цн-топатогенпого нзолята, что свидетельствует о более выраженном его тропизме к органам желудочно-кишечного тракта.

mm

tu I wi nnw,

Í1J1W|

ki':i>i*vn. t'íjVív |HT;ííj

0 ■ ■ 1 -Г- n- ■ ,->,-,,.-, —^r- - .....- r-^— -

1 J í 7 9 tl ¡i 15 17 IV Íí

Л<1Н Oí l-l I hL

Рисунок 3 - Количество лейкоцитов у телят, экспериментально инфицированных нешгголитогснпым вирусом Вд-БС КРС (шт. Ирмонь), вирусом ИРГ КРС (СП) и бактерией Р. twUocida ceponapa D (АТ).

Заражение телят вирусом ИРТ КРС вызвало развитие острого респираторного заболевания, закончившегося выздоровлением животных на 11 - 14 сутки. У телят, инфицированных суспензией бактерии, регистрировалн незначительное угнетение на 3-4 сутки после инфицирования и кратковременный кашель.

— 1 ГГ II ? 77

На вскрытии трупа теленка, зараженного вирусом ИРТ КРС, установили некротические изменения на слизистой оболочке носа, в трахее - пенистый экссудат, увеличение регионарных лимфатических узлов, участки ателектазов и эмфиземы в легких

Патологоанатомические изменения. во внутренних органах теленка, инфицированного суспензией бактерии, проявлялись в- виде незначительного скопления пенистого экссудата в просвете бронхов.

Оба вируса реизолировали. из проб органов верхних и нижних отделов респираторного тракта, однако, титры, вируса ИРТ КРС были выше в органах телят, инфицированных тремя возбудителями Исходную бактерию реизолировали от животных групп №№3 и 4 из всех лимфатических узлов, бронхов и легких, а от телят контрольной группы - только из каудальной части легких

Проведенный опыт показал, что заражение телят последовательно вирусом ВД-БС, а затем вирусом ИРТ КРС и, бактерией, Ра81еиге11а шикоскЗа серовара В, приводило к развитию у них клинических признаков острой респираторной болезни, более тяжелой, чем при введении этих возбудителей раздельно

Интенсивность поражений органов респираторного тракта у животных, инфицированных нецитопатогенным изолятом, была слабее, чем у телят, инфицированных с участием цитопатогенного изолята В данном случае выявили более сильные поражения органов иммунной системы и желудочно-кишечного тракта

Таким образом, экспериментальная смешанная инфекция, вызванная Различными биотипами вируса ВД-БС, а также вирусом ИРТ КРС и бактерией Рав-¡вигеНа тикоскЗа, протекала по синергическому типу Такое взаимодействие этих микроорганизмов может вносить существенный вклад в развитие массовых респираторных болезней крупного рогатого скота в естественных условиях

3. ВЫВОДЫ

1 ВД-БС КРС широко распространена в Новосибирской области, серопо-зитивность животных к вирусу составила в среднем 66,7% На проявление болезни оказывали влияние концентрация животных и их молочная продуктивность В крупных молочно-товарных хозяйствах она протекала в ассоциации с ИРТ КРС и другими инфекционными болезнями В 70% обследованных хозяйств регистрировали клинические проявления респираторных болезней с участием двух и более возбудителей

2 Заболевание телят пастереллезом регистрировалось в виде эндогенной инфекции в хозяйствах с высокой концентрацией животных* где серопозитив-ность животных к вирусам ВД-БС и ИРТ КРС достигала 60-70% В настоящее время болезнь проявляется в крупных хозяйствах, специализирующихся на производстве молока '

3 Выделение вируса ВД-БС КРС при вспышках респираторных болезйен на молочно-товарных фермах с установлением сероконверсии было положй-

тельным в 18 и 20-30%% случаев, соответственно, что объясняется наличием в пробах биоматериала нецитопатогенных вариантов вируса Кулыуры бактерий рода Ра81еиге11а изолировали в 33,3% случаев, при этом они относились к видам тикоаёа (20) и Ьаето1уйса (13,3%) Патогенность их в большинстве случаев была пониженной, что свидетельствует об их вторичной этиологической роли в развитии респираторной патологии у телят Р тикоайа сероваров А и О чаще выделяли при вспышках респираторных болезней молодняка КРС на молочнотоварных фермах

4 Сочетание вирусов ВД-БС й ИРТ КРС выявляли в легких (37,8%), тра-хеальной и бронхиальной слизи (16,5%), слизистой носа (10,2%) и трахеи (9,82%) Ассоциации вируса ЙРТ и бактерий Раз1еиге11а врр выявляли в легких (32,9%), вируса ВД-БС КРС и Ра51еиге11а врр. также в легких (52,9%) Количество проб биоматериала, содержащих вирус ВД-БС КРС и Р ти11:Ос1с1а сероваров А и Б, составило легкие - 43°/о, легочные лимфоузлы - 6,8%, ткань и содержимое просвета бронхов - 11,2%," тра'хеальная и бронхиальная слизь - 3,4% Количество проб, содержащих этот вирус и Р 11аето1уПса, составило легкие - 9,9%, легочные лимфоузлы - 3,6%

5 Роль вируса ВД-БС КРС в этиол.огии респираторных болезней телят на молочно-товарных фермах обосновывается следующими доказательствами

- частым выделением вируса из легких при Пневмониях,

- установлением активной вирусной инфекции, подтвержденной серокон-версией к вирусу в парных пробах сыворотки крови,

- демонстрацией присутствия вируса в ассоциации с вирусом ИРТ КРС и бактериями рода Ра51еиге11а

6 Тестированные изоляты вируса ВД-БС КРС, выделенные от животных при вспышках респираторных болезней на молочно-товарных фермах, протекающих с участием бактерий рода Рая1еиге11а, обладали различной вирулентностью для серонегативных к вирусу телят 4-6-месячного возраста Тяжесть проявления клинических признаков имела «штаммовую» зависимость Принадлежность к биотипу не влияла на способность вируса инфицировать органы лимфо-идной системы и индуцировать лейкопению Все изоляты вируса вызывали «транзитную» лейкопению (до 2880-3800 кл/мм3) в течение 8-10 дней, наступавшую у животных на 3-5 дни после заражения

7 Воспроизведение экспериментальной бронхопневмонии возможно при условии введения суперинфицирующих возбудителей (вирус ИРТ КРС и Р ти1-К>ск1а серовара Ц) в период лейкопении, индуцированной вирусом ВД-БС КРС Заражение серонегативных к вирусам телят последовательно цитопатогенным вирусом ВД-БС и одновременно вирусом ИРТ КРС с бактерией Р тикоаск вызвало у них острую фибринозную бронхопневмонию Введение животным по этой схеме нецитопатогенного вируса ВД-БС привело к развитию у них острой катаральной бронхопневмонии В данном случае взаимодействие трех возбудителей происходило по синергетическому типу

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Материалы диссертационной работы вошли в «Программу по профилактике и борьбе с вирусными респираторными болезнями в Новосибирской области (2001-2005 гг )»

Материалы по изучению особенностей распространения и проявления вирусных и рирусно-бактериальных болезней молодняка крупного рогатого скота используются в учебном процессе в программе подготовки студентов по курсам «Вирусология», «Эпизоотология» пр специальности «Ветеринария» в ФГОУ ВПО «Новосибирский Государственный аграрный университет» и ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины»

Полученные результаты могут использоваться при планировании проти-воэпизоотических мероприятий, предусматривающих, в том числе, комплексные диагностические исследования с целью расшифровки этиологической структуры конкретной вспышки респираторных болезней и выяснения этиологической роли каждого инфекционного агента, особенно нецитопатогенного биотипа вируса ВД-БС КРС

5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Особенности патогенеза и экспериментальные инфекции, вызванные вирусом вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота/ Соавт А Г Глотов, Т И Глотова, А В Нефедченко и др // Современные тенденции развития аграрной науки в России//Материалы IV научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 70-летию НГАУ (28-30 марта 2006 г)-С 179-180

2 Особенности эпизоотической ситуации по вирусным респираторным болезням крупного рогатого скота в Сибири/Соавт А Г Глотов, Т И Глотова, В А Качанов//Актуальные проблемы ветеринарного обеспечения животноводства Сибири Сб науч тр / РАСХН Сиб отд-ние ИЭВСиДВ -Новосибирск, 2006 - С 52-56

3 Экспериментальные инфекции, вызванные вирусом вирусной диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота/ Соавт А Г Глотов, Т И Глотова, А В Нефедченко// Материалы научно-практической конференции «Научное обеспечение реализации национальных проектов в сельском хозяйстве» -Ижевск - 2006 - Т 2 - С 173-177

4 Распространение вирусов вирусной диареи и инфекционного ринотра-хеита в органах экспериментально инфицированных телят/ Соавт Т И Глотова, А Г Глотов, А В Нефедченко// Сибирский вестник сельскохозяйственной науки-2007-№4-С 90-93

5 Экспериментальная инфекция телят, вызванная вирусами вирусной диареи, инфекционного ринотрахеита и бактерией Раз1еиге11а тикоаёа / Соавт А Г Глотов, Т И Глотова, А В Нефедченко// Ветеринария -2007 -№8 -С 21 -24

Подписано в печать 07 08 2007 г Объем 1 печ л Тираж 100 экз Заказ №276

ООО ИПФ «Агрос» 630501, Новосибирская обл , п Краснообск

Актуальность проблемы. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота (КРС) причиняют огромный экономический ущерб животноводству всех развитых стран. По мнению многих авторов (Н.Н. Крюков и соавт., 1984; В.А. Мищенко и соавт., 2000; К.П. Юров и соавт., 2003; L.A. Babiuk et al., 1996; K.W. Jericho et al., 2004), первопричиной возникновения 90% инфекционных пневмоний у телят являются вирусы, вызывающие инфекционный процесс в макроорганизме и формирующие оптимальные условия для жизнедеятельности в нем бактерий.

Считается, что вирусы и бактерии Pasteurella spp. являются одним из этиологических факторов «транспортной лихорадки» или «энзоотической бронхопневмонии» телят (З.Ф. Зудилина и соавт., 1972; С.А. Жидков, 1976; Н.Н. Крюков, 1980; C.L. Kelling et al., 1990; R.W. Fulton et al., 2006). Взаимодействие этих микроорганизмов приводит к развитию бронхопневмонии у восприимчивых животных, причем бактерии P. multocida сероваров А и D играют вторичную роль в данной патологии, т.к. воспроизведение респираторной болезни затруднено при введении их в моноварианте (Э.А. Шегидевич, 1984, 1993; А.А. Колосов, 1997; W.D.G. Yates, 1982,1984).

В настоящее время одной из экономически значимых признана вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек (A.L.E. Lindberg, 2003), являющаяся энзо-отичной в большинстве стран, в том числе в России. Серопозитивность взрослого скота составляет 60-85% (П.А. Красочко, 1991; Н.Ю. Басова, 2002; О.Г. Петрова и соавт., 2002; К.П. Юров и соавт., 2003; Т.И. Глотова, 2006; Н. Houe, 1999). В молочных стадах она обычно приводит к увеличению репродуктивной патологии у коров и болезням телят, которые носят стационарный характер.

Количество экспериментальных работ, посвященных изучению ВД-БС КРС как самостоятельной болезни, так и в ассоциации с вирусными и бактериальными инфекциями телят, в нашей стране ограничено (С.А. Жидков, 1996; Т.И. Глотова, 2006); недостаточное внимание уделяется роли нецитопатогенно-го биотипа вируса в этиологии и патогенезе бронхопневмоний.

Повышенная чувствительность к возбудителям инфекционных болезней, включая условно-патогенную микрофлору, у животных, инфицированных вирусом ВД-БС, связывается с наличием у них иммуносупрессии (Е. Peterhans et al., 2003). Неконтролируемая диссеминация вируса во внешней среде приводит к постоянному вовлечению в эпизоотический процесс новых животных, не имеющих иммунитета к вирусу, что повышает риск развития у них респираторных болезней (А.Г. Глотов и соавт., 2002; C.L. Kelling, 2004).

Учитывая существование вируса ВД-БС в виде двух биотипов, интерес исследователей всего мира вызывает определение его вирулентности и способности индуцировать развитие инфекционного процесса в организме восприимчивых животных, а также потенцирование клинического проявления вирусных и вирусно-бактериальных инфекций (G. Castrucci et al., 1992; B.W. Brodersen, C.L. Kelling, 1998; C. Baule et al., 2001; V. Galav et al., 2007).

Цель исследований. Изучить особенности распространения и проявления ВД-БС в ассоциации с ИРТ и пастереллезом крупного рогатого скота, определить патогенность выделенных изолятов вируса, относящихся к различным биотипам, на естественно восприимчивых животных, а также установить их роль в этиологии и патогенезе экспериментальной смешанной бронхопневмонии.

Для достижения указанной цели, были поставлены следующие задачи:

1. Изучить и провести анализ особенностей распространения и проявления респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота, протекающих с участием вирусов ВД-БС, ИРТ КРС и бактерий рода Pasteurella в Новосибирской области;

2. Изучить ассоциации вирусов и бактерий рода Pasteurella, а также частоту их выявления при вспышках массовых респираторных болезней телят до 6-месячного возраста;

3. В условиях контролируемых экспериментов определить патогенность изолятов вируса ВД-БС КРС, относящихся к различным биотипам, выделенных от больных и инфицированных животных, а также воспроизвести острую бронхопневмонию вирусно-бактериальной этиологии и изучить ее клинические проявления на телятах 4-6-месячного возраста.

Научная новизна.

1. Доказаны широкое распространение ВД-БС КРС и роль возбудителя в этиологии массовых респираторных болезней телят, протекающих с участием вируса ИРТ КРС и бактерий рода Pasteurella, в хозяйствах молочного направления.

2. Изучены ассоциации вирусов и бактерий рода Pasteurella при массовых вспышках респираторных болезней телят, а также частота их выявления во внутренних органах больных животных;

3. Впервые в РФ в контролируемых опытах на телятах 4-6-месячного возраста доказана патогенность изолятов вируса ВД-БС КРС и воспроизведена острая бронхопневмония при помощи его цитопатогенного и нецитопатогенного вариантов, а также вируса ИРТ КРС и бактерии Pasteurella multocida серовара D. Показана предрасполагающая роль вируса в развитии данной патологии и си-нергетическое взаимодействие трех возбудителей.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследований представляют теоретическую и практическую ценность, так как дают возможность расширить научные знания относительно роли вирусов и бактерий в возникновении массовых респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота. Они могут быть использованы при дальнейшем изучении эпизоотологии, патогенеза ВД-БС КРС и смешанных вирусно-бактериальных инфекций, протекающих по синергетическому типу, в целях совершенствования противо-эпизоотических мероприятий.

Материалы диссертации использованы при разработке методических рекомендаций: «Вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек крупного рогатого скота (историческая справка, характеристика возбудителя, особенности эпизоотологии, клиническое проявление и экономическое значение)», утвержденных Ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН (протокол № 1 от 17 января 2006 г.) и подсекцией секции инфекционной патологии отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии «Проблемы инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» (протокол № 1 от 17 января 2006 г.).

Апробация полученных результатов. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на: 6-й Международной научно-практической конференции «Аграрная наука Сибири, Монголии, Казахстана и Башкорстана-сельскому хозяйству» (Новосибирск, 2003); IV научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 70-летию НГАУ (28-30 марта 2006 г.); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы патологии и иммунологии животных», посвященной 100-летию со дня рождения академика ВАСХНИЛ (РАСХН) Я.Р. Коваленко, Москва 16-17 мая 2006 г.; Научно-практической конференции «Научное обеспечение реализации национальных проектов в сельском хозяйстве», Ижевск 12-14 июня 2006 г.

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликованы 5 печатных работ в сборниках научных трудов, журналах «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Ветеринария» и других изданиях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, при

ВЫВОДЫ

1. ВД-БС КРС широко распространена в Новосибирской области, серопо-зитивность животных к вирусу составила в среднем 66,7%. На проявление болезни оказывали влияние концентрация животных и их молочная продуктивность. В крупных молочно-товарных хозяйствах она протекала в ассоциации с ИРТ КРС и другими инфекционными болезнями. В 70% обследованных хозяйств регистрировали клинические проявления респираторных болезней с участием двух и более возбудителей.

2. Заболевание телят пастереллезом регистрировалось в виде эндогенной инфекции в хозяйствах с высокой концентрацией животных, где серопозитив-ность животных к вирусам ВД-БС и ИРТ КРС достигала 60-70%. В настоящее время болезнь проявляется в крупных хозяйствах, специализирующихся на производстве молока.

3. Выделение вируса ВД-БС КРС при вспышках респираторных болезней на молочно-товарных фермах с установлением сероконверсии было положительным в 18 и 20-30%% случаев, соответственно, что объясняется наличием в пробах биоматериала нецитопатогенных вариантов вируса. Культуры бактерий рода Pasteurella изолировали в 33,3% случаев, при этом они относились к видам multocida (20%) и haemolytica (13,3%). Патогенность их в большинстве случаев была пониженной, что свидетельствует об их вторичной этиологической роли в развитии респираторной патологии у телят. P. multocida сероваров А и D чаще выделяли при вспышках респираторных болезней молодняка КРС на молочнотоварных фермах.

4. Сочетание вирусов ВД-БС и ИРТ КРС выявляли в легких (37,8%), тра-хеальной и бронхиальной слизи (16,5%), слизистой носа (10,2%) и трахеи (9,82%). Ассоциации вируса ИРТ и бактерий Pasteurella spp. выявляли в легких (32,9%), вируса ВД-БС КРС и Pasteurella spp. также в легких (52,9%). Количество проб биоматериала, содержащих вирус ВД-БС КРС и P. multocida сероваров А и D, составило: легкие - 43%, легочные лимфоузлы - 6,8%, ткань и содержимое просвета бронхов - 11,2%, трахеальная и бронхиальная слизь - 3,4%. Количество проб, содержащих этот вирус и P. haemolytica, составило: легкие - 9,9%, легочные лимфоузлы - 3,6%.

5. Роль вируса ВД-БС КРС в этиологии респираторных болезней телят на молочно-товарных фермах обосновывается следующими доказательствами:

- частым выделением вируса из легких при пневмониях;

- установлением активной вирусной инфекции, подтвержденной серокон-версией к вирусу в парных пробах сыворотки крови;

- демонстрацией присутствия вируса в ассоциации с вирусом ИРТ КРС и бактериями рода Pasteurella.

6. Тестированные изоляты вируса ВД-БС КРС, выделенные от животных при вспышках респираторных болезней на молочно-товарных фермах, протекающих с участием бактерий рода Pasteurella, обладали различной вирулентностью для серонегативных к вирусу телят 4-6-месячного возраста. Тяжесть проявления клинических признаков имела «штаммовую» зависимость. Принадлежность к биотипу не влияла на способность вируса инфицировать органы лим-фоидной системы и индуцировать лейкопению. Все изоляты вируса вызывали «транзитную» лейкопению (до 2880-3800 кл/мм3) в течение 8-10 дней, наступавшую у животных на 3-5 дни после заражения.

7. Воспроизведение экспериментальной бронхопневмонии возможно при условии введения суперинфицирующих возбудителей (вирус ИРТ КРС и Р. multocida серовара D) в период лейкопении, индуцированной вирусом ВД-БС КРС. Заражение серонегативных к вирусам телят последовательно цитопатогенным вирусом ВД-БС и одновременно вирусом ИРТ КРС с бактерией P. multocida вызвало у них острую фибринозную бронхопневмонию. Введение животным по этой схеме нецитопатогенного вируса ВД-БС привело к развитию у них острой катаральной бронхопневмонии. В данном случае взаимодействие трех возбудителей происходило по синергетическому типу.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Материалы диссертационной работы вошли в «Программу по профилактике и борьбе с вирусными респираторными болезнями в Новосибирской области (2001-2005 гг.)».

Материалы по изучению особенностей распространения и проявления вирусных и вирусно-бактериальных болезней молодняка крупного рогатого скота используются в учебном процессе в программе подготовки студентов по курсам «Вирусология», «Эпизоотология» по специальности «Ветеринария» в ФГОУ ВПО «Новосибирский Государственный аграрный университет» и ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины».

Полученные результаты могут использоваться при планировании проти-воэпизоотических мероприятий, предусматривающих, в том числе, комплексные диагностические исследования с целью расшифровки этиологической структуры конкретной вспышки респираторных болезней и выяснения этиологической роли каждого инфекционного агента, особенно нецитопатогенного биотипа вируса ВД-БС КРС.