Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.01) на тему:Нарушения картины крови при дисфункции печени у крупного рогатого скота

На правах рукописи

□ОЗОТООО1

РОМЕНСКАЯ Наталья Васильевна

НАРУШЕНИЯ КАРТИНЫ КРОВИ ПРИ ДИСФУНКЦИИ ПЕЧЕНИ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

16.00.01 — диагностика болезней и терапия животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Белгород - 2007

003070001

Работа выполнена на кафедре клинической диагностики, терапии, акушерства и хирургии факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель:

- доктор ветеринарных наук, профессор

Валентин Васильевич Концевенко

Официальные оппоненты:

- доктор ветеринарных наук, профессор

Михаил Ефремович Павлов

■ кандидат ветеринарных наук, Олег Валентинович Бабенко

Ведущая организация:

- Орловский государственный аграрный университет

/А

Защита состоится « »

200 * г в "" часов на заседании диссертационного совета Д 220 004 01 при Белгородской государственной сельскохозяйственной академии

Адрес академии 308503, Россия, Белгородская область, Белгородский район, поселок Майский, Вавилова,1 Факс (472-2) 39-22-62

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии

Автореферат разослан é-c^Jj 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

Ю Н Литвинов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы Система крови в организме выполняет важную интегрирующую и коммуникативную функцию Поскольку любые гомеоста-тические отклонения неизбежно находят свое отражение в ней, для клиницистов особое значение имеют ее индикаторные свойства Грамотная интерпретация результатов лабораторного анализа крови является одним из важнейших условий формирования целесообразной стратегии диагностических и лечебно-профилактических мероприятий В тоже время до сих пор остается не достаточно изученным вопрос о патогенезе ряда отклонений в крови, возникающих при гепатопатиях

Анализ современной обстановки в животноводстве свидетельствует о том, что в хозяйствах эксплуатируется преимущественно больное поголовье (Павлов МЕ и др, 1998/00, Дронов В В, 2000) Как правило, заболевания представлены широким спектром метаболических расстройств комбинированного характера, которые можно определить как общую обменную патологию В данном случае, безусловно, следует учитывать, что уровень обменных процессов во многом определяется метаболической активностью печени, то есть ее функциональным состоянием Нарушение технологии содержания, кормления и эксплуатации обусловливает высокое напряжение механизмов поддержания гомеостаза, в конечном итоге это приводит к срыву адаптации и невозможности компенсировать возникшие отклонения При этом развиваются дистрофическое перерождение печени или мезенхимально-воспалитель-ный процесс в ней

Большинство болезней печени протекает длительное время скрыто, бессимптомно, что затрудняет их своевременную диагностику и разработку эффективных средств коррекции (Левченко В И , 1984, Подымова С Д, 1998) Все это провоцирует серьезные экономические издержки вследствие снижения продуктивности, потери продуктивных качеств, рождения нежизнеспособного молодняка и ранней выбраковки животных

Таким образом, учитывая не раз описанную связь печени и системы крови (Шерлок Ш и др, 1999), большой интерес для ветеринарной науки представляет уточнение особенностей гематологических нарушений при функциональных расстройствах печени продуктивного скота Помимо теоретической стороны проблемы, разработки в данном направлении имеют важное прикладное значение для ранней диагностики, контроля эффективности терапевтических мероприятий и прогнозирования исхода большинства заболеваний гепатобилиарной системы

Цели и задачи исследований. Целью работы было определение особенностей клинического проявления нарушений системы крови у крупного рогатого скота при нарушениях функционального состояния печени в условиях производства

Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи - выявить особенности отклонений в системе крови у лактирующих коров при заболеваниях печени незаразной этиологии,

- выявить особенности отклонений в системе крови у сухостойных коров при подобных же состояниях печени,

- выяснить основные формы гематологических изменений у новорожденных телят с нарушениями функционального состояния печени

Научная новизна исследований. В результате проведенной работы впервые показана взаимообусловленность нарушений системы крови и дисфункции печени у крупного рогатого скота в различные периоды онтогенеза

Предложен алгоритм, отражающий основные пути альтерации и возможной компенсации системы крови при гепатопатиях

Разработано устройство для проведения пункционной биопсии у новорожденных телят, применение которой позволяет проводить прижизненную диагностику морфологических изменений в печени и минимизировать риск возникновения осложнений у обследуемых животных Устройство запатентовано - патент № 49705 от 10 12 2005

Практическая значимость работы и реализация результатов исследований. На основании проведенных исследований предложены дискретные критерии оценки функционального состояния печени, как взрослого, так и новорожденного крупного рогатого скота по результатам гематологических и биохимических лабораторных тестов

Разработано устройство, позволяющее проводить раннюю диагностику повреждений печени у новорожденных телят при полной минимизации риска для здоровья обследуемого поголовья Его применение не требует дополнительной квалификации ветеринарных специалистов, поэтому вполне может быть использовано не только с целью научных изысканий, но и на практике

Основные материалы исследований используются в учебном процессе при изучении соответствующих разделов морфологии, нормальной и патологической физиологии, клинической диагностики и внутренних болезней животных

Основные положения, выносимые на защиту:

- гиперхромемия, депрессия эритроцитарного ростка кроветворения, клеточная атипия морфологических элементов крови и диспротеинемическая коллоидная нестойкость плазменных белков как признаки патологии печени у взрослого крупного рогатого скота,

- гипергемоглобинемия, панцитопения, дегенерация эритроцитов и появление клеток раздражения на фоне диспротеинемии, как проявления неона-тальной гепатопатии;

- устройство для пункционной биопсии печени у новорожденных телят и способ его применения,

- основные пути альтерации и возможной компенсации системы крови при патологии печени

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на международных научно-практических конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2000/06), а также на 4-й межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного

ветеринарного врача РФ И В Окунцова (Омск, 2005), Международном съезде терапевтов, диагностов (Барнаул, 2005), Всероссийской научной конференции с международным участием, посвященной 10-летию медицинского факультета и кафедры анатомии и гистологии человека БелГУ (Белгород, 2006) и расширенном заседании кафедр клинической диагностики, терапии, акушерства и хирургии, физиологии, фармакологии и ВСЭ, морфологии, зоогигиены и кормления с -х животных Белгородской государственной сельскохозяйственной академии (2007)

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, заключения, выводов, предложений производству, списка литературы, включающего 247 источников, в том числе 29 иностранных авторов, приложений Работа содержит 11 таблиц и 31 рисунок, из них 5 диаграмм, 26 микрофотографий (19 - клетки крови, 7 - гистопрепараты)

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследования проведены в хозяйствах Белгородской области учхозе Белгородской ГСХА, ООО «Дубовской животноводческий комплекс» (2000/01), ЗАО «Колос» и ОАО «Агро-Стрелецкое» (2001/06) Белгородского района Часть работы выполнена в рамках заказа департамента АПК правительства администрации Белгородской области по теме «Разработка эффективных мероприятий по диагностике, профилактики и лечению обменных нарушений и патологии системы репродуктивных органов у крупного рогатого скота» (№ 08/04, 1 1 151 от 2004 г) Клиническому исследованию подвергнуто 52 лактирующих и 27 сухостойных коров черно-пестрой породы, аналогов по уровню продуктивности, возрасту и физиологическому состоянию, а также 63 новорожденных теленка с последующим лабораторным исследованием их крови Кроме того, части телят была выполнена пункционная биопсия печени с гистологическим исследованием полученного материала

Все исследования проводились в зимне-весенний периоды (2000/06, гг), в период наибольшего напряжения гомеостатических систем организма Животные содержались в аналогичных условиях и получали общепринятый для хозяйств рацион кормления

Исследования клинико-физиологического состояния коров и выяснение у них уровня обменных процессов были аналогичными и проводились через каждые 14-15 суток (у лактирующих с 3 по 5 месяцы лактации, у сухостойных - начиная с седьмого месяца стельности вплоть до отела) Клинические, гематологические и биохимические исследования телят проводись через каждые 3-4 суток, начиная с рождения до 2-х недельного возраста Клинические исследования проводили по общепринятой схеме с описанием изменений в курационных листах Материал для лабораторного исследования во всех случаях отбирали в период физиологического покоя, до утреннего кормления

Лабораторные исследования крови проводились не позже 5-6 часов после отбора материала Проведенные исследования включали

Общий (клинический) анализ крови с определением следующих показателей скорость оседания эритроцитов (по Панченкову), содержание гемоглобина - гемиглобинцианидным методом, подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов - на аппарате ГЦМК-3, выведение лейкоцитарной формулы - путем подсчета лейкоцитов в мазках, окрашенных по Лейшману с использованием общепринятых методик, а также расчет среднего содержания гемоглобина в одном эритроците (СГЭ) и выведение клеточного коэффициента,

биохимические исследования сыворотки крови с определением общего белка - рефрактометрическим методом, белковых фракций - нефелометриче-ским методом, с выведением альбумин-глобулинового соотношения и глобу-линового индекса, определение трансаминазной активности в сыворотке крови (АлАт, АсАт) по Райтману-Френкелю, определение коллоидной стойкости сывороточных белков - проведением пробы Вельтмана унифицированным методом,

морфологические исследования печени телят методом пункционной биопсии с применением оригинального устройства собственной модификации, окраска биоптатов проводилась гематоксилином и эозином, изучение гистопрепаратов проведено с применением микроскопа «БИОЛАМ-2» (объектив 40х и 90х, окуляр 7х)

Обработка полученных данных проведена на персональной ЭВМ с применением программы статистической обработки Н Н Григорова (1996) 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 Клинический, гематологический и биохимический статус коров Комплексом клинических исследований 52 лактирующих коров были выявлены 20 животных с признаками нарушений обмена и патологии печени У таких животных в 100% случаев наблюдалось т?хипноэ и тахикардия, у 60% - глухость сердечных тонов, у 90% - гипотония преджелудков, у 75% -увеличение перкуторных границ печени, у 70% - признаки деминерализации костной ткани, что сопровождалось размягчением последних хвостовых позвонков и поперечных отростков поясничных позвонков У 60% животных шерсть тусклая, ломкая, плохо фиксируется в коже Для выяснения степени обменных нарушений у обследуемого поголовья отбирали кровь с последующим ее гематологическим и биохимическим исследованием (табл 1,2)

Как видно из таблицы 1, гематологический статус лактирующих коров с признаками заболевания печени отличался от такового у здоровых животных У больных отмечены эритропения с тенденцией к и гиперхромной анемии, о чем свидетельствует снижение числа эритроцитов (с появлением в крови по-лихроматофилов и других форм дегенеративных клеток), клеточного коэффициента и увеличение цветного показателя Заболевания печени, склонные к

хронификации сопровождаются нарушением гемопоэза, протекающим по типу гиперхромных макроцитарных анемий, особенно это характерно для хронического мезенхимально-воспалительного синдрома По-видимому, это положение подтверждается и в нашем случае Со стороны элементов белой кро-

ви у больных коров также отмечены некоторые изменения Об этом свидетельствует увеличение количест ва лейкоцитов в целом и отдельных их популяций, в частности сегментоядерных нейтрофилов и эозинофильных грануло-цитов Подобное состояние можно объяснить следующим образом повреждение структуры печени при различных ее заболеваниях резко снижает проницаемость гистогематического барьера, это приводит к поступлению во внутреннюю среду организма избыточного количества антигенов и, следовательно, к активизации микрофагов Поэтому функциональные расстройства печени часто сопровождаются разнообразными токсико-аллергическими реакциями К тому же печень является местом синтеза и утилизации ряда цито-кинов непосредственно принимающих участие в регуляции гемопоэза, поэтому нарушение ее функций безусловно отражается на картине крови

Полученные данные свидетельствуют о достоверном различии по уровню белкового обмена между группами животных Биохимический статус больных коров характеризовался гипопротеинемией, при этом было снижено количество альбуминов и альфа-глобулинов Отмечены выраженная гипербета- и умеренная гипергамма-глобулинемия со снижением коллоидной стойкости белков Это сопровождалось гиперферментемией за счет повышения активности сывороточных трансаминаз, которые относятся к группе индикаторных энзимов и имеют важное диагностическое значение Обнаруженные отклонения являются характерными для функциональной слабости печени Повреждение паренхиматозных элементов, как правило, приводит к снижению белково-синтетической функции печени, что сопровождается прежде всего падением уровня альбуминов и, реже, альфа-глобулинов Умеренный холестаз, сопровождаемый хронические заболевания печени, обусловливает повышение бета-глобулиновой фракции Раздражение ретикулоэндотелия и, в частности, системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ), а также сопутствующий мезенхимально-воспалительный синдром, приводят к повышенному синтезу гамма-глобулиновой фракции, в состав которых входят, в том числе, и иммуноглобулины Увеличение в плазме крови грубодисперсных фракций обусловливает снижение коллоидной стойкости белков Повреждение структурных компонентов печени и напряженность обменных процессов усугубляется повышением проницаемости плазматических мембран гепатоцитов, что и объясняет повышение активности сывороточных трансаминаз, в тоже время вне стадии обострения гиперферментемия не носит черты выраженной манифестации

Таким образом, обследование поголовья лактирующих коров показало, что нарушение функционального состояния печени сопровождается широким спектром морфо-функциональных отклонений в системе крови, что в свою очередь отражается на деятельности всех без исключения органов и систем

Дальнейшие исследования были проведены на поголовье стельных коров в период сухостоя Комплексом клинических исследований 27 коров было установлено, что 13 (48,15%) из них имеют клинические признаки хронического нарушения обменных процессов Симптоматика была следующей тахипноэ и тахикардия (100%), глухость сердечных тонов (100%),

Таблица 1 — Гематологические показатели коров

Лактирующие Сухостойные

Показатель Клинически больные Р< Клинически здоровые Клинически больные Р< Клинически здоровые

Эритроциты, 1012/л 5,33±0,21 0,001 6,49±0,19 4,3 6 ±0,34 - 4,67 ± 0,33

Гемоглобин, г/л 103,7±2 37 0,05 112,38±2,87 151,6 ±5,2 0,05 132 2 ±5,4

Цветной показатель 1,23±0 06 0,05 1,08±0 03 1,97 ±0,09 - 1,72 ±01

СГЭ, пг 19,68±0,86 0 05 17 41 ±0,42 31,7± 1 6 - 27,8 ± 1 8

СОЭ, мм/ч 0,46±0,07 - 0,44±0,05 1.08 ±0,07 - 0,97 ± 0,07

Лейкоциты. 10у/л 9,06±1 03 0,01 6 16±0,27 7.52 ±0 35 0,001 5 96 ± 0,25

Клеточный коэффициент 648,3±59 53 0,001 1072,94±37,82 673 ± 80 - 763 ± 73

Лейкоцитарная формула, %

Эозинофилы 7 2±0,88 0,05 5 06±0,53 8,2 ± 0,69 0,02 5,9 ± 0,6

Палочкоядерные нейтрофилы 0,6±0,27 - 0,83±0,22 5,03 ±0 37 5,74 ± 0,64

Сегментоядерные нейтрофилы 30,6±1 84 0,05 25,72±1,32 20,7 ±0 55 22,67 ± 1.06

Лимфоциты 60,6±1,92 0,05 66 11±1,4 64,2± 1,15 63,5 ± 1,34

Моноциты 0 8±0,39 0,02 0 33±0,02 1,72 ±0,23 1,58 ±0,23

Двуядерные лимфоциты 0 - 0 0,19 ±0,05 0,13 ±0.05

Клетки Тюрка 0 о 0,06 ±0,05 0

Таблица 2 — Биохимические показатели ко ров

Показатель Лактирующие Сухостойные

Клинически больные Р< Клинически здоровые Клинически больные Р< Клинически здоровые

Общий белок, г/л 73,62±0,88 0,001 78,43±1,07 82,6 ± 1 7 - 78,6 ± 2,2

Альбумины, % 41,14±1,03 0,001 45,79±1,04 30,8 ± 1,41 0,001 40,3 ± 1,77

Альфа-глобулины, % 5,85±0,56 0,001 10,85±0,76 16,0± 1,08 0,02 12,3 ± 1,12

Бета-глобулины, % 23,9± 1,01 0,01 17,3±2,16 6,9 ±0,75 - 8,8 ± 1,05

Гамма-глобулины, % 29,1±0,89 0,05 26,93±1,2 46,2 ± 1,54 0,001 38,6 ±1,63

Альбумины глобулины 0 7±0,03 0,001 0,85±0,04 0,46 ±0,03 0,001 0,69 ± 0,05

Проба Вельтмана, мл 0,5% р-ра СаСЬ 0,17±0,02 0,001 0,31±0,03 0,19 ±0,01 - 0,23 ± 0,02

АлАТ, мкмоль/с/л 0,72±0,05 0,001 0,31±0,07 0,155 ±0,04 0,198 ±0,048

АсАТ, мкмоль/с/л 0,74±0,07 0,01 0,46±0,07 0,630 ± 0 08 ■ 0,428 ± 0,095

1Гл^фЛ»/МГ»АНТ ДО Р''Т'!Си 1 П 1Л 1 «>«>-1-и,.>0 - ^ I/- Л 1 , ¿.лта), /1 5,35 а: 2,3 ■ 3,56 ±2,11

гепатомегалия (100%), гипотония преджелудков (100%), размягчение остистых отростков поясничных позвонков и последних хвостовых позвонков (70%) Ввиду того, что большинство обменных нарушении протекает на фоне хронического поражения печени, а те в свою очередь несут в себе черты не-слецифичности, для уточнения диагноза от обследуемых животных отбирали кровь с дальнейшим ее исследованием в лаборатории (табл 1,2)

Изменения картины красной крови у обеих групп животных носили характер, свойственный для гиперхромных анемий, что, по-видимому, объясняется нарушением обмена цианкобаламина и железа, при этом количество гемоглобина имеет тенденцию к повышению Показатель клеточного коэффициента также подтверждает депрессию эритроидного ростка кроветворения Что касается картины белой крови, то количество лейкоцитов у больных коров выше, чем у клинически здоровых У животных этой группы отмечено увеличение количества эозинофилов, что является характерным для заболеваний печени, сопровождающихся процессами аллергизации организма Отмечаемая в обоих случаях моноцитопения, может объясняться нарушением процессов утилизации цитокинов (в частности ИХФ), и циркуляцией в крови иммунодепрессантов различной природы, связанных с физиологическим состоянием Из характерных для болезней печени признаков следует отметить появление так называемых клеток раздражения (двуядерные лимфоциты и клетки Тюрка) Как правило, эти клетки появляются при стимуляции ретику-лоэндотелия и зачастую обусловлены развитием хронического мезенхималь-но-воспалительного процесса в печени

Несмотря на статистически недостоверную разницу в содержании общего белка сыворотки крови (табл 2), у больных коров отмечена тенденция к увеличению этого показателя Для хронических заболеваний печени (особенно гепатита) характерна гиперпротеинемия, обусловленная повышением количества гамма-глобулинов (Чернова Г В , 1988, Кондрахин И П , 1989), это положение подтверждается и в нашем исследовании У обеих групп животных отмечен низкий уровень бета-глобулинов, а так как уровень этих белков напрямую связан с обменом фосфолипидов, холестерина и его эфиров (Постников ВС и др, 1988), можно предположить наличие поражения не только мезенхимальных элементов, но и паренхимы, что характерно для хронического жирового гепатоза Показательным в данном случае является альбумин-глобулиновое соотношение, характеризующее состояние синтеза белков печенью, этот показатель очень низок как у первой, так и у второй группы животных Это положение подтверждается коллоидной нестойкостью сывороточных белков (проба Вельтмана) Отсутствие повышения активности тран-саминаз в сыворотке крови объясняется тем, что вне стадии обострения ги-перферментемия, как правило, отсутствует Также низкий уровень индикаторных ферментов может быть обусловлен физиологическим состоянием (Пашков АН и др , 1997, Козинец Г И , 1998) В этом плане можно отметить физиологическую особенность организма крупного рогатого.скота, у которого отмечена низкая активность АлАт в печени, практически не меняющаяся даже при выраженной деструкции паренхимы (Луцкий Д Я и др , 1978)

Проведенные исследования подтверждают, что в настоящее время в хозяйствах эксплуатируется в основном больное поголовье Заболевания печени в основном пpoteкaют скрыто, бессимптомно, обостряясь в периоды наибольшего физиологического напряжения Не привлекая к себе внимания, они прогрессируют, приводя к нарушению функции различных органов и систем, что обусловливает потерю продуктивных качеств высокую смертность молодняка, выбраковку животных

Для сравнительной характеристики нарушений картины крови при дисфункции печени в различные онтогенетические периоды дальнейшие исследования проведены на поголовье новорожденных телят

3.2 Клинический и гематологический статус новорожденных телят

Установлено, что от клинически больных коров получены телята с низкой массой тела при рождении и симптомокомплексом гипотрофии Из 63 телят 25 (40%) рождены с выраженными нарушениями клинических показателей Так, масса тела у гипотрофичного молодняка при рождении составляла 24,3±0,89 кг против 28,6±0,66 кг у клинически здоровых телят (р < 0,02) Такие животные в течение первых трех суток заболевали диспепсией, причем заболеваемость была стопроцентной Известно, что синдром антенатальной гипотрофии сопровождается функциональными расстройствами многих органов и систем, в том числе, и печени Для уточнения степени патологического состояния проведен анализ крови обследуемых животных (табл 2, 3)

Как видно из данных таблицы 3, гематологические показатели гипотрофичного молодняка характеризовались умеренной панцитопенией с тенденцией к гиперхромной анемии При этом в крови отмечены явления анизо-и пойкилоцитоза за счет появления атипичных и дегенеративных форм клеток (шизо-, овало- и акантоциты), последние свидетельствуют о низкой осмотической резистентности и, следовательно об укорочении их жизни Увеличение ЦП (и СГЭ) можно объяснить гемоплацентарной трансфузией и, к?, следствие, циркуляцией свободного гемоглобина Низкий показатель клеточного коэффициента указывает на депрессию эритроцитарного ростка кроветворения, которая, в свою очередь, может быть обусловлена обменными нарушениями в организме матерей Со стороны картины белой крови отмечено снижение основных классов иммунокомпетентных клеток и на этом фоне обнаруживаются дегенеративные формы лейкоцитов, так называемые клетки раздражения (полиморфноядерные лимфоциты и клетки Тюрка) Появление последних, как правило, обусловлено обменными нарушениями и сдвигами кейлонной регуляции, которая в этот период во многом определяется функциональным состоянием печени

В целом за период новорожденного гематологический статус гипотро-фиков практически не претерпел изменений, а все регистрируемые показатели оставались на недостаточном для нормального функционирования организма уровне У клинически здоровых телят, с нормальными функциональными показателями печени морфологический состав крови изменился следующим образом возросло количество лейкоцитов, эозинофильных грануло-

цитов и моноцитов, что свидетельствует о высоких адаптивных возможностях здорового молодняка

В отличие от морфологического состава крови биохимические показатели гипотрофичных новорожденных в первые сутки жизни резко отличаются от таковых клинически здорового молодняка Так, наряду с выраженной ги-попротеинемией, показатели белкового обмена у таких телят характеризовались низким уровнем глобулиновых фракций Учитывая низкий уровень а-глобулинов, можно предположить снижение общего количества а-1-глобулинов Известно, что до 90% этой фракции составляет а-1-антитрипсин, являющийся основным ингибитором эластазы лейкоцитов и других катепси-нов (Хендерсон Дж М , 1997, Шерлок Ш и др , 1999), и при его недостаточности в раннем постнатальном периоде развиваются заболевания печени, в последующем прогрессирующие до цирроза Следовательно, у гипотрофиков можно предположить наличие структурных нарушений в печени Низкий уровень у-глобулиновой фракции объясняется недостаточной продукцией собственных белков данной группы и низким их поступлением с молозивом, что обусловлено низким качеством последнего и нарушением системы его выпойки Гиперальбуминемия в данном случае является компенсаторным механизмом Прежде всего, альбумины - это резервные белки, а при недостаточном поступлении белка с кормом или при гипопротеинемии другого гене-за, печень некоторое время может компенсировать эту недостаточность Количество альбуминов возрастает при гипергемоглобинемии, что также носит компенсаторный характер При избыточном поступлении гемоглобина в кровяное русло гаптоглобин становится неспособным к его связыванию, а так как альбумины ответственны за транспорт веществ плохо растворимых в воде, они компенсируют нарушенный механизм, при этом в крови появляются патологические пигменты (метгемальбумин) (Кон Р М , 1986) Подобный механизм развития гиперальбучинемии встречается и при желтухах Укорочение коагуляционной пробы Вельтмана является характерным для состояний, сопровождающихся гипопротеинемией, и особенно для гипоглобулинемии Невысокие показатели трансаминазной активности можно отнести к характерным для крупного рогатого скота особенностям и также отчасти объяснить гипопротеинемией 50% белка идет на синтез ферментов, поэтому любая белковая патология - всегда ферментопатия (Шулутко Б И , 1995), к тому же активность трансаминаз во многом зависит от возраста и состояния обмена витаминов, в частности группы В

К 12-м суткам общая закономерность различий между группами сохранилась, при этом внутригрупповые различия по сравнению с показателями первого возрастного периода оказались следующими у гипотрофиков возросла количество альбуминов и улучшились показатели пробы Вельтмана, у нор-мотрофиков возросло количество альбуминов, понизилось количество р- глобулинов (р < 0,001), произошло удлинение коагуляционной ленты Вельтмана оставаясь при этом в пределах нормы

Табчнца 3 - Гематологические показатели крови новорожденных телят

Показатели 2-3 сут 6-8 сут 10-12 сут

Гипотро-фики Р< Нормо-трофики Гипотро-фики р< Нормо-трофики Гипотро-фики Р< Нормо-трофики

Эритроциты, 10|2/л 4,81± 0,32 001 5 88 ± 0,25 4 91± 0 41 0 02 6 05 ±0 24 5 01± 0 51 0 01 6,57 ±0 34

Гемоглобин г/л 131 5 ±694 137,03 ±4 92 129 31 ±5,44 - 136,56 ±6,65 126,73 ±6,14 - 142,94 ± 8 77

Цветной показатель 1,79 ±0,16 1,5 ±0 06 1,7 ±0,1 0 05 1,44 ±0 08 1 64 ±0,12 0 05 1,37 ±0 07

СГЭ пг 29,03 ±2 57 24,12 ± 1,03 27,72 ± 1,76 0 05 23,26 ± 1,3 26,64 ± 2 0 05 21,87 ± 1,08

СОЭ, мм/час 0 72 ± 0 08 0,82 ± 0,07 0,58 ± 0,05 0 05 0,74 ± 0 06 0 77 ±0,11 - 0,97 ±0 12

Лейкоциты, 109/т 6,9 ±0,45 7 47 ± 0,39 7 11 ±0 56 . 8,09 ±0,55 7 17 ±0 47 001 9 07 ±0,55

Клеточный коэффициент 728,06±75,12 824 ± 36,26 730 23 ± 103 52 - 845,63 ± 58 23 671 6 ±55,75 - 793,06 ±59 16

Лейкоцитарная формула

Эозинофилы, 109/л 0,03 ±0 01 0,04 ±0,01 0,04 ±0,01 0,04 ±0 01 0,03 ±0,01 0 01 0,09 ±0 02

Юные нейтрофилы, 10ч/л 0,04 ± 0,02 0,03 ±0,01 0,05 ± 0,02 - 0 02 ±0,01 0 01 ± 0,0 - 0 02 ±0,01

Палочкоядерные нейтрофилы, 10'/л 0,5±0,05 0,55±0,07 0,49±0,08 0 53±0,06 0,58±0,06 - 0,71±0,11

Сегментоядерные нейтрофилы, 109/л 2,95±0 26 2,88±0,24 2,71 ±0,3 2,98±0,28 3,06±0,29 - 3,39±0 37

Лимфоциты, 10''/л 3,2±0,31 3 83±0,35 3,62±0,31 - 4,3±0 36 3,9±0 28 - 4,57±0,28

Моноциты 10'/т 0,09±0 02 0 09±0,02 0 09±0,02 0 11±0,03 0 06±0 02 0 001 0 22±0,04

Двуядерные лимфоциты, 109/л 0 05±0,01 0,05±0,02 0,07±0,02 - 0 03±0 01 0 02±0 01 - 0 06±0,02

Трехядерные лимфоциты Ю'/л 0,02±0,01 0,05 0 0,01±0,01 0 0,02±0,01 0 05 0

Клетки Тюрка, 10 /л 0,03±0 01 0,002 0 0 02±0 01 0,05 0 0 02±0,01 0,05 0

Таблица 4 - Биохимические показатели крови новорожденных телят

Показатели 2-3 сут 6-8 сут 10-12 сут

Гипотро-фики Р< Нормо-трофики Гипотро-фики Р< Нормо-трофики Гипотро-фики Р< Нормо-трофики

Общий белок, г/л 51,01± 1,36 0 001 59 31 ± 1,3 53,16± 1 42 0 001 60,51 ±0,89 51,75± 0,97 0,001 60,88 ± 1,07

Альбумины, г/л 30,27 ± 0,79 0,001 26,32 ± 0,72 33,76 ±0,76 0,01 30,53 ± 0,93 34,46 ± 0,97 0,02 30,87 ± 1,01

Альфа-глобулины г/л 5,96 ± 0,76 0,01 8,6 ±0,68 6,49 ±0,79 0,01 8,93 ±0 53 6,58 ±0,51 0,01 9,78 ±1,32

Бета-глобулины, г/л 6,93 ± 1,02 - 7,12 ±0,48 5,44 ±0,86 - 5 78 ±0,51 4,72 ± 0,72 - 4,41 ±0,44

Гамма-глобулины г/л 7,65 ±1 59 0,001 17,02 ± 1,25 7,65 ± 1,42 0,001 15,5 ± 1,04 5 91 ±0,71 0,001 15,97 ± 1,3

Альбумины глобутаны 1,78 ±0,18 0,001 0,87 ±0 05 1,97 ±0,18 0,001 1,08 ±0,06 2,15 ± 0,18 0,001 1,09 ±0,08

Глобулиновый индекс 3,69 ± 0 97 0,01 1,1 ±0,1 2,02 ±0,31 0,01 1,11±0 13 2,37 ±0,3 0,001 1,13 ±0,22

Проба Вельтмана,мл 0,5% р-ра СаСЬ 0,72 ± 0,03 0,001 0,57 ± 0,03 0,65 ± 0,04 0,01 0,51 ±0,03 0,58 ± 0,03 0,001 0,46 ± 0,02

АлАТ, мкмоль/мл/час 0,21 ±0,16 - 0,15 ±0,07 0,16 ±0,1 - 0,16 ±0,05 0,07 ± 0,03 - 0 16 ±0,06

с5 , мкм иль/мл/час /4 4« (А АО V,41 з; - (\С1 1- л ло и ^ I -»- 0 1 л. п пп - П П -4- п по тк + ппк - 0,37 ± 0 08

Проведенные нами исследования демонстрируют, чю"нарушение функционального состояния печени у новорожденных телят сопровождается широким спектром гомеостатических отклонений, которые находят свое отражение в картине крови При этом со стороны системы крови отмечен ряд морфологических и биохимических нарушений, свидетельствующих о тесной функциональной связи между системой гепатона и гемопоэзом В тоже время, несмотря на выявленные отклонения со стороны функционального состояния печени, полученные данные не позволяют судить о нозологической принадлежности заболевания

Считается, что печень обладает значительным запасом резервной емкости, поэтому развивающийся в ней патологический процесс длительное время компенсируется и поэтому клиническое (в том числе и биохимическое) проявление характеризуется стертостью и неспецифичностью В таких условиях для верификации диагноза используют специальные инструментальные методы исследования, позволяющие оценить не только функциональную потенцию органа, но и его структуру К числу подобных методов исследования относится биопсия

3.3. Морфологическая характеристика печени новорожденных телят

Пункционная биопсия печени достаточно широко используется как в медицинской, так и ветеринарной практике Но при анализе доступной литературы нами не было обнаружено описания способа проведения подобной процедуры у новорожденного молодняка крупного рогатого скота В связи с этим нами было сконструировано устройство, полностью отвечающее поставленным задачам Проведение процедуры с его использованием не оказало отрицательного эффекта на здоровье новорожденных

Было установлено, что у больных телят отмечались нарушения архитектоники ткани печени в виде несформированности печеночных балок, резкого снижения (или исчезновения) количества двуядерных гепатоцитов, наличия полей деструктивно измененных клеток с явлениями кариолизиса и макрофагальной реакцией Также отмечены ядерный полиморфизм, наличие гиперхромных ядер в гепатоцитах, очаги микро- и макронекроза паренхимы В синусоидальных пространствах встречались единичные участки гемопо-этически активной ткани У одного из телят обнаружены изменения, характерные для начальной стадии фибропластического процесса

Несмотря на ранний постнатальный период, у телят отмечается не -олько функциональная неполноценность печени, но и серьезные структурные нарушения Особенно такие изменения выражены у гипотрофичного молодняка, что сопровождалось явлениями не только жировой дегенерации, но зачастую и выраженной сосудистой реакцией, а также тенденцией к соединительнотканному перерождению Известно, что структурная целостность паренхимы печени является своего рода регулятором синтеза некоторых цитокинов, оказывающих влияние на систему крови Поэтому полученные ранее результаты полностью сочетаются с данными гистологического обследования

Обращает на себя внимание, что изменения архитектоники печеночной ткани характеризуются разнообразием альтеративных процессов, которые зачастую носят смешанный характер Так, при микроскопии в одном поле зрения регистрировались и крупнокапельная жировая дистрофия, характерная для гепатоза, и выраженная сосудистая реакция, являющаяся спутником ме-зенхимально-воспалительного синдрома, то есть протекающий процесс имеет форму гепатозо-гепатита В рамках общепринятой ветеринарной нозологии такие состояния трудно классифицировать, поэтому нам представляется целесообразным использовать термин «недифференцируемая гепатопатия новорожденных» В таких условиях даже при незначительных нарушениях нейро-гуморальной регуляции весьма вероятна эволюция патологического процесса в фибропластический и даже цирротический, которые сами зачастую начинаются как компенсаторные

Таким образом, проведенные нами исследования демонстрируют высокую диагностическую информативность метода пункционной биопсии печени при обследовании новорожденного молодняка Учитывая, дешевизну изготовления устройства и простоту проведения процедуры, можно рекомендовать данный метод к широкому использованию в условиях производства и для проведения научных изысканий

Проанализировав полученный материал и данные литературы, нами был разработан алгоритм, отражающий основные пути альтерации и возможной компенсации нарушений системы крови при гепатопатиях В общих чертах он сводится к следующему Воздействие патогенных факторов вызывает повреждение печени и нарушению обменного статуса Это приводит к появлению в крови нетипичных метаболитов, которые выступают в роли эндоток-сикантов и угнетающие действуют на все ткани и органы, прежде всего паренхиматозные, в том числе гемопоэза Далее развиваются явления, обусловленные дефицитом пластического материала или неспособностью его утилизировать вследствие ферментопатий Нарушение элементов красной и белой крови усугубляет гомеостатические отклонения, что приводит к порочному кругу и срыву адаптации При этом механизмы компенсации и репарации, испытывая недостаток гуморальных стимуляторов (цитокинов и других биологически активных веществ), становятся несостоятельными, процесс принимает не только функционально, но и морфологически регистрируемую форму Предложенный нами алгоритм дополняет имеющиеся сведения по патогенезу гематологических нарушений и может быть использован для преподавания соответствующих разделов предклинических и клинических дисциплин

ВЫВОДЫ

1 В результате обследования 52 лактирующих и 27 сухостойных коров, а также 63 новорожденных телят установлено, что дисфункция печени в различные периоды онтогенеза сопровождается неспецифичностью клинического проявления, изменениями морфологического и биохимического состава крови с появлением в ней атипичных и дегенеративных форм клеток, диспро-теинемической коллоидной нестойкое! ью белков плазмы При неонатальной

гепатопатии гиперальбуминемия носит компенсаторный характер, а для оценки структурных нарушений печени целесообразно использовать способ пункционной биопсии

2 Клинический статус больных коров характеризовался рядом отклонений тахипноэ, тахикардия, гипотония преджелудков, глухость сердечных тонов, увеличение перкуссионных границ печени, деминерализация последних хвостовых позвонков

3 При проведении общего клинического анализа крови больных лакти-рующих коров установлены эритропения (р<0,001) с явлениями гиперхром-ной анемии и появлением в крови полихроматофилов и других форм дегенеративных клеток, снижение клеточного коэффициента (р<0,001) и увеличение цветного показателя (р<0,05) Со стороны элементов белой крови также отмечено увеличение количества лейкоцитов в целом (р<0,01) и отдельных их популяций, в частности сегментоядерных нейтрофилов (р<0,05) и эозино-фильных гранулоцитов (р<0,05)

4 У лактирующих коров установлены гипопротеинемия (р<0,001), при относительных гипоальбумин- (р<0,001) и гипоальфа-глобулинемии (р<0,001), в тоже время отмечены выраженная гипербета- (р<0,01) и умеренная гипергамма-глобулинемия (р<0,05) со снижением коллоидной стойкости белков, проба Вельтмана (р<0,001) Эти изменения сопровождались гипер-ферментемией за счет повышения активности сывороточных трансаминаз (АлАТ, АсАТ) - р<0,001 и р<0,01 соответственно

5 При проведении общего клинического анализа крови больных сухостойных коров установлена тенденция к эритропении, лейкоцитоз (р<0,001), эозинофилия (р<0,02) Так же в мазках встречались единичные формы атипичных клеток

6 Нарушения белкового обмена у сухостойных коров сопровождались тенденцией к гиперпротеинемии с гипоальбуминемией (р<0,001), гипо-р-глобулинемией (до 6,9 ± 0,75%) и гипер-у-глобулинемией (р<0,001), при этом альбумин-глобулиновое соотношение было низким (р<0,001), это сопровождалось коллоидной нестойкостью плазменных белков

7 Телята, родившиеся от коров с нарушенным обменом веществ, имели низкую массу тела (24,3 ± 0,89 кг), что дополнялось симптомокомплексом гипотрофии

8 Гематологический статус больных телят имел следующие черты умеренная панцитопения (эритроциты - 4,81±0,32 х 1012/л, лейкоциты - 6,9±0,45 х 109/л) с тенденцией к гиперхромной анемии (ЦП - 1,79±0,16, клеточный коэффициент - 728,06±75,12), снижение количества иммунокомпетентных клеток и появление дегенеративных форм лейкоцитов (трехядерные лимфоциты, клетки Тюрка) В целом за период новорожденного гематологический статус гипотрофиков практически не претерпел изменений, а все регистрируемые показатели оставались на недостаточном для нормального функционирования организма уровне

9 У телят гипотрофиков отмечались нарушения обмена веществ, характерные для функциональной недостаточности печени гипопротеинемия

(р<0,001) на фоне выраженной гнпоглобулннемии, при низком соотношении А/Г (р<0,001) и глобулиновом индексе (р<0,01) Лента Вельтмана укорочена (р<0,001)

10 Отмечаемая у гипотрофиков гиперапьбуминемия, имела тенденцию к увеличению с возрастом (р<0,001)

11 Нарушениям в системе крови у телят гипотрофиков сопутствовало повреждение архитектоники печеночной ткани У телят гипотрофиков наблюдались несформированность балочного строения, единичные и множественные очаги микро- и макронекрозов, очаги гемопоэтически активной субстанции в синусоидальном пространстве, соответствующие функциональной неполноценности и фетализации органа

12 Неонатальная гепатопатия приносит экономический ущерб в размере 540,76 руб на одно животное

13 Применение метода пункционной биопсии с использованием разработанного устройства позволяет объективизировать результаты клинического и лабораторного исследований при неонатапьной гепатопатии телят

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 Для профилактики врожденной патологии печени у молодняка проводить своевременную диагностику функциональных расстройств печени у взрослого крупного рогатого скота

2 При диспансерном обследовании поголовья с целью ранней диагностики гепатопатий можно ограничиться небольшим набором рутинных лабораторных тестов, среди которых считать обязательными общий (клинический) анализ крови с расчетом клеточного коэффициента и цветного показателя, определение общего белка сыворотки крови и пробу коллоидной устойчивости по Вельтману

3 Интерпретация лабораторных исследований должна проводиться с учетом особенностей адаптивно-компенсаторных реакций в раннем постна-тальном периоде

4 В качестве простого в исполнении и безопасного метода определения степени структурных изменений в печени новорожденных считать целесообразным использование пункционной биопсии печени с применением разработанного устройства

5 Полученные в процессе исследований результаты могут быть использованы в учебном процессе при изучении соответствующих разделов клинической диагностики и внутренних болезней животных, а также нормальной и патологической физиологии и патоморфологии

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Роменский Р В Устройство для пункционной биопсии / Р В Ромен-ский, Н.В. Роменская, Р Ф Капустин // Изобретения - 2005 - № 34(3) -С 477

2 Роменский Р В Функциональное состояние печени и неспецифическая резистентность организма новорожденных телят / Р В Роменский, Н.В. Роменская // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения

мат-лы V Междунар научно-производств конф - Белгород, 2001 - С 56 -57

3 Роменский Р В Биопсия печени у новорожденных телят / Р В Ро-менский, Н.В. Роменская // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения мат-лы V Междунар научно-производств конф - Белгород, 2001 -С 57-58

4 Роменский Р В Влияние функционального состояния печени на возникновение острых желудочно-кишечных расстройств у новорожденных телят/РВ Роменский, Н.В. Роменская//Белгород, 2002 -С 141

5 Роменская Н.В. Изменение гематологических показателей при гепатопатопогии у крупного рогатого скота / Н В Роменская, Р В Роменский // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения мат-лы VII Междунар научно-производств конф - Белгород, 2003 -С 123

6 Роменский Р В Методы ультразвукового сканирования и пункционной биопсии в диагностике структурных повреждений печени у новорожденных телят / Р В Роменский, Н.В. Роменская // Бюллетень научных работ ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия», 2003 -Вып I - С 55-61

7 Роменский Р В Влияние функциональных расстройств печени у крупного рогатого скота на возникновение общей обменной патологии / Р В Роменский, А В Хмыров, Н.В. Роменская // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения мат-лы VIII Междунар научно-производств конф - Белгород, 2004 - С 66-67

8 Роменский Р В Динамика гематологических показателей у гипотрофичного молодняка крупного рогатого скота в раннем постнатальном периоде / Р В Роменский, Н.В. Роменская, Н И Сотник // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения мат-лы VIII Междунар научно-производств конф - Белгород, 2004 - С 67-68

9 Роменский Р В К вопросу об этиологии вторичной остеодистрофии крупного рогатого скота / Р В Роменский, Н.В. Роменская // Проблемы с -х произ-ва на совр этапе и пути их решения мат-лы VIII Междунар научно-производств конф. - Белгород, 2004 - С 68-69

10 Роменский Р В Гепатопатии новорожденных телят как фактор риска в возникновении вторичных иммунодепрессивных состояний / Р В Роменский, П И Бреславец, А В Хмыров, Н.В. Роменская // «Практик», 2004 -№9-10 -С 30-35

11 Роменский Р В Нарушения системы крови при заболеваниях печени у крупного рогатого скота / Р В Роменский, П И Бреславец, Н.В. Роменская // Материалы IV межрегиональной научно-практической конференции по проблемам ветеринарной медицины Сб науч тр - Омск, 2005 -С 198-203

12 Роменский Р В Клиническая интерпретация лабораторных тестов при заболеваниях печени у новорожденных телят / Р В Роменский, А В Хмыров, Н.В. Роменская // Актуальные проблемы патологии животных // Материалы международного съезда ветеринарных терапевтов, диагностов -Барнаул, 2005 -С 155-156

13 Роменский РВ Нарушения системы крови при общей обменной патологии у крупного рогатого скота / Р В Роменский, Н.В. Роменская, Р В Пономаренко // Бюллетень научных работ ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия», 2006 - Вып V - С 62 -67

14 Роменская Н.В. Морфологический мониторинг неонатальных особенностей печени парнокопытных / Н В Роменская //Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии материалы Всероссийской научной конференции с международным участием, 2006 -С 146

Патент на полезную модель «Устройство для пункционной биопсии» №49705 от 10.12.2005.

Формат 60x84, 1/16 Уел печ л 1,0 Заказ № 987 Тираж 100 экз Типография ВВЦ

Актуальность темы. Система крови в организме выполняет важную интегрирующую и коммуникативную функцию. Поскольку любые гомеостатические отклонения неизбежно находят свое отражение в ней, для клиницистов также особое значение имеют ее индикаторные свойства (20, 98, 118, 236). Грамотная интерпретация результатов лабораторного анализа крови является одним из важнейших условий формирования целесообразной стратегии диагностических и лечебно-профилактических мероприятий. В тоже время до сих пор остается недостаточно изученным вопрос о патогенезе ряда отклонений в крови, возникающих при функциональных расстройствах печени.

Анализ современной обстановки в животноводстве свидетельствует о том, что в хозяйствах эксплуатируется преимущественно больное поголовье (30, 67, 73, 74, 78, 96, 150, 153). Как правило, заболевания представлены широким спектром метаболических расстройств комбинированного характера, которые можно определить как общую обменную патологию. В данном случае следует учитывать, что уровень обменных процессов во многом определяется метаболической активностью печени, то есть ее функциональным состоянием. Нарушение технологии содержания, кормления и эксплуатации обусловливает высокое напряжение механизмов поддержания гомеостаза, в конечном итоге это приводит к срыву адаптации и невозможности компенсировать возникшие отклонения. При этом развивается дистрофическое перерождение печени или мезенхимально-воспалительный процесс в ней.

Большинство болезней печени протекают длительное время скрыто, бессимптомно, что затрудняет их своевременную диагностику и разработку эффективных средств коррекции (11, 58). Все это провоцирует серьезные экономические издержки вследствие снижения продуктивности, потери продуктивных качеств, рождения нежизнеспособного молодняка и ранней выбраковки животных.

Таким образом, учитывая не раз описанную связь печени и системы крови (9, 93, 112, 179, 191, 204, 226), большой интерес для ветеринарной науки представляет уточнение особенностей гематологических нарушений при функциональных расстройствах печени продуктивного скота. Помимо теоретической стороны проблемы, разработки в данном направлении имеют важное прикладное значение для ранней диагностики, контроля эффективности терапевтических мероприятий и прогнозирования исхода большинства заболеваний гепатобилиарной системы.

Цели и задачи исследований. Целью работы было определение особенностей клинического проявления гематологических отклонений у крупного рогатого скота при нарушениях функционального состояния печени в условиях производства.

Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

- выявить особенности отклонений в системе крови у лактирующих коров при заболеваниях печени незаразной этиологии;

- выявить особенности отклонений в системе крови у сухостойных коров при подобных же состояниях печени;

- выяснить основные формы гематологических изменений у новорожденных телят с нарушениями функционального состояния печени.

Научная новизна исследований. В результате проведенной работы впервые показана взаимообусловленность нарушений системы крови и дисфункции печени у крупного рогатого скота в различные периоды онтогенеза.

Предложен алгоритм, отражающий основные пути альтерации и возможной компенсации системы крови при гепатопатиях.

Разработано устройство для проведения пункционной биопсии у новорожденных телят, применение которой позволяет проводить прижизненную диагностику морфологических изменений в печени и минимизировать риск возникновения осложнений у обследуемых животных. Устройство запатентовано - патент № 49705 от 10.12.2005.

Практическая значимость работы и реализация результатов исследований. На основании проведенных исследований предложены дискретные критерии оценки функционального состояния печени, как взрослого, так и новорожденного крупного рогатого скота по результатам гематологических и биохимических лабораторных тестов.

Разработано устройство, позволяющее проводить раннюю диагностику повреждений печени у новорожденных телят при полной минимизации риска для здоровья обследуемого поголовья. При этом устройство просто в изготовлении, а его применение не требует дополнительной квалификации ветеринарных специалистов, поэтому вполне может быть использовано не только с целью научных изысканий, но и на практике.

Основные материалы исследований используются в учебном процессе при изучении соответствующих разделов нормальной и патологической морфологии, патологической физиологии, клинической диагностики и внутренних болезней животных.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на международных научно-практических конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2000/06), а также на 4-й межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного ветеринарного врача РФ И.В. Окунцова (Омск, 2005), Международном съезде терапевтов, диагностов (Барнаул, 2005), Всероссийской научной конференции с международным участием, посвященной 10-летию медицинского факультета и кафедры анатомии и гистологии человека БелГУ (Белгород, 2006) и расширенном заседании кафедр клинической диагностики, терапии, акушерства и хирургии, морфологии, зоогигиены и кормления с.-х. животных Белгородской государственной сельскохозяйственной академии (2007).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ.

На защиту выносятся следующие основные положения:

- гиперхромемия, депрессия эритроцитарного ростка кроветворения, клеточная атипия морфологических элементов крови и диспротеинемическая коллоидная нестойкость плазменных белков как признаки патологии печени у взрослого крупного рогатого скота;

- гипергемоглобинемия, панцитопения, дегенерация эритроцитов и появление клеток раздражения на фоне диспротеинемии, как проявления неонатальной гепатопатии;

- устройство для пункционной биопсии печени у новорожденных телят и способ его применения;

- основные пути альтерации и возможной компенсации системы крови при патологии печени.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Система крови

Система крови представляет собой комплекс разнообразных, часто морфологически и функционально обособленных компонентов, рассредоточенных по всему организму, она включает в себя гемопоэтический аппарат (костный мозг, тимус, лимфатические узлы, селезенка) и собственно кровь. Нормальное ее функционирование во многом определяет уровень адаптивных возможностей организма и способность репарирования различных процессов и структур. В практическом аспекте эта способность системы крови при грамотном подходе позволяет оценивать динамику компенсаторно-восстановительных реакций и формировать эффективную концепцию терапевтического воздействия.

В тоже время следует учитывать, что определенная неоднородность и топическая разобщенность элементов системы крови обусловливает значительные трудности в понимании ряда патогенетических аспектов альтеративных процессов, как в ней, так и в организме в целом.

4. Выводы

1. В результате обследования 52 лактирующих и 27 сухостойных коров, а также 63 новорожденных телят установлено, что дисфункция печени в различные периоды онтогенеза сопровождается неспецифичностью клинического проявления, изменениями морфологического и биохимического состава крови с появлением в ней атипичных и дегенеративных форм клеток, диспротеинемической коллоидной нестойкостью белков плазмы. При неонатальной гепатопатии гиперальбуминемия носит компенсаторный характер, а для оценки структурных нарушений печени целесообразно использовать способ пункционной биопсии.

2. Клинический статус больных коров характеризовался рядом отклонений: тахипноэ, тахикардия, гипотония преджелудков, глухость сердечных тонов, увеличение перкуссионных границ печени, деминерализация последних хвостовых позвонков.

3. При проведении общего клинического анализа крови больных лактирующих коров установлены: эритропения (р<0,001) с явлениями гиперхромной анемии и появлением в крови полихроматофилов и других форм дегенеративных клеток; снижение клеточного коэффициента (р<0,001) и увеличение цветного показателя (р<0,05). Со стороны элементов белой крови также отмечено: увеличение количества лейкоцитов в целом (р<0,01) и отдельных их популяций, в частности сегментоядерных нейтрофилов (р<0,05) и эозинофильных гранулоцитов (р<0,05).

4. У лактирующих коров установлены: гипопротеинемия (р<0,001), при относительных гипоальбумин- (р<0,001) и гипоальфа-глобулинемии (р<0,001); в тоже время отмечены выраженная гипербетар<0,01) и умеренная гипер-гаммаглобулинемия (р<0,05) со снижением коллоидной стойкости белков, проба Вельтмана (р<0,001). Эти изменения сопровождались гиперферментемией за счет повышения активности сывороточных трансаминаз (АлАТ, АсАТ) - р<0,001 и р<0,01 соответственно.

5. При проведении общего клинического анализа крови больных сухостойных коров установлена тенденция к эритропении, лейкоцитоз (р<0,001), эозинофилия (р<0,02). Так же в мазках встречались единичные формы атипичных клеток.

6. Нарушения белкового обмена у сухостойных коров сопровождались тенденцией к гиперпротеинемии с гипоальбуминемией (р<0,001), гипо-р-глобулинемией (до 6,9 ± 0,75%) и гипер-у-глобулинемией (р<0,001), при этом альбумин-глобулиновое соотношение было низким (р<0,001), это сопровождалось коллоидной нестойкостью плазменных белков.

7. Телята, родившиеся от коров с нарушенным обменом веществ, имели низкую массу тела (24,3 ± 0,89 кг), что дополнялось симптомокомплексом гипотрофии.

8. Гематологический статус больных телят имел следующие 1 черты: умеренная панцитопения (эритроциты - 4,81±0,32 х 10 /л, лейкоциты - 6,9±0,45 х 109/л) с тенденцией к гиперхромной анемии (ЦП -1,79±0,16, клеточный коэффициент - 728,06±75,12), снижение количества иммунокомпетентных клеток и появление дегенеративных форм лейкоцитов (трехядерные лимфоциты, клетки Тюрка). В целом за период новорожденного гематологический статус гипотрофиков практически не претерпел изменений, а все регистрируемые показатели оставались на недостаточном для нормального функционирования организма уровне.

9. У телят гипотрофиков отмечались нарушения обмена веществ, характерные для функциональной недостаточности печени: гипопротеинемия (р<0,001) на фоне выраженной гипоглобулинемии, при низком соотношении А/Г (р<0,001) и глобулиновом индексе (р<0,01). Лента Вельтмана укорочена (р<0,001).

10. Отмечаемая у гипотрофиков гиперальбуминемия, имела тенденцию к увеличению с возрастом (р<0,001).

11. Нарушениям в системе крови у телят гипотрофиков сопутствовало повреждение архитектоники печеночной ткани. У телят гипотрофиков наблюдались несформированность балочного строения, единичные и множественные очаги микро- и макронекрозов, очаги гемопоэтически активной субстанции в синусоидальном пространстве, соответствующие функциональной неполноценности и фетализации органа.

12. Неонатальная гепатопатия приносит экономический ущерб в размере 540,76 руб. на одно животное.

13. Применение метода пункционной биопсии с использованием разработанного устройства позволяет объективизировать результаты клинического и лабораторного исследований при неонатальной гепатопатии телят.

5. Практические предложения

1. Для профилактики врожденной патологии печени у молодняка проводить своевременную диагностику функциональных расстройств печени у взрослого крупного рогатого скота.

2. При диспансерном обследовании поголовья с целью ранней диагностики гепатопатий можно ограничиться небольшим набором рутинных лабораторных тестов, среди которых считать обязательными: общий (клинический) анализ крови с расчетом клеточного коэффициента и цветного показателя, определение общего белка сыворотки крови и пробу коллоидной устойчивости по Вельтману.

3. Интерпретация лабораторных исследований крови должна проводиться с учетом особенностей альтеративных и адаптационно-компенсаторных реакций в раннем постнатальном периоде.

4. В качестве простого в исполнении и безопасного метода определения степени структурных изменений в печени новорожденных считать целесообразным использование пункционной биопсии печени с применением разработанного устройства.

5. Полученные в процессе исследований результаты могут быть использованы в учебном процессе при изучении соответствующих разделов клинической диагностики и внутренних болезней животных, а также нормальной и патологической физиологии и патоморфологии.

3. Заключение

Клиническая манифестация функциональных расстройств печени характеризуется неспецифичностью признаков и зачастую длительным скрытым течением. Являясь патологией мультифакториальной (полиэтиологической) природы, заболевания печени достаточно широко распространены в хозяйствах и наносят серьезный экономический ущерб (158, 184), складывающийся из снижения продуктивности скота, рождения слабого, зачастую нежизнеспособного молодняка и ранней выбраковки животных. В таких условиях особую актуальность приобретает разработка новых и совершенствование существующих методов диагностики и прогнозирования исхода болезней гепатобилиарной системы, при этом необходимо учитывать особенности их достаточно сложного патогенеза. Печень представляет собой, прежде всего, центральный орган обмена веществ, поэтому нарушение ее функции при самых разнообразных патологических состояниях обусловливает появление широкого спектра гормональных, ферментных и прочих гомеостатических расстройств (82,115, 158, 194, 226, 232, 242), протекающих по типу общей обменной патологии (тотального нарушения обмена веществ) и затрагивающих все без исключения ткани и органы. В этом аспекте особый интерес представляет взаимообусловленность поражения печени и системы крови. Последняя, как известно, представляет собой важнейший фактор внутренней среды организма, обеспечивающей достаточный уровень коммуникации. Имея тесные онто- и филогенетические связи с печенью, кровь достаточно чутко реагирует на все гомеостатические отклонения, что проявляется изменением ее морфологического и биохимического статуса. Это свойство положено в основу лабораторной диагностики любого патологического состояния. В то же время взаимоотношения печени и системы крови не носят односторонний характер, так как повреждения функций последней приводит не только к нарушению газообмена, но и к изменению основных констант гомеостаза, что в свою очередь сказывается на работоспособности других органов и систем, в том числе и печени. Возникающий таким образом порочный круг, без своевременного врачебного вмешательства неизбежно приведет к срыву адаптации и невозможности компенсации нарушенных функций, а в конечном итоге и структур. Таким образом, выяснение особенностей нарушения системы крови при дисфункции печени различного генеза безусловно является основой грамотной интерпретации лабораторных тестов, а следовательно и формулирования целесообразной стратегии лечебно-профилактических мероприятий.

Особый интерес при этом представляет период новорожденного. Ранний постнатальный период характеризуется функциональной слабостью многих органов и систем, что в свою очередь обусловливает недостаточность адаптационно-компенсаторных механизмов поддержания гомеостаза, к числу которых относится и система крови (3, 14, 65, ПО, 197, 227, 235). К настоящему времени накоплен немалый материал, свидетельствующий о тесной взаимосвязи печени и органов гемопоэза (36, 42, 47, 48, 49, 50, 142, 145, 212, 240), но механизмы реализации этих отношений до конца не установлены. В тоже время, по нашему мнению, данное направление в ветеринарной науке освещено недостаточно полно, что позволяет вести различные изыскания, направленные на установление новых и дополнение имеющихся сведений по этому вопросу. Важную роль в возникновении заболеваний новорожденных играет взаимоотношение матери и плода. Различные заболевания и обменные нарушения в организме матерей, фетоплацентарная недостаточность и ряд других причин вызывают серьезные нарушения в организме плода, в последующем они в той или иной степени сказываются на жизнеспособности новорожденного и растущего организма. Следовательно, своевременная диагностика заболеваний печени и обменных нарушений в целом позволят существенно снизить ряд экономических издержек и повысить рентабельность животноводства.

Проведенные нами исследования установили, что у лактирующих животных, имеющих нарушение функционального состояния печени клинический статус характеризовался рядом симптомов, из которых к патогномоничным можно отнести только гепатомегалию. Основным же критерием оценки являлись результаты лабораторного исследования крови. У таких животных были обнаружены изменения как морфологического, так и биохимического состава крови. Нарушения в картине красной крови (эритропения и гипергемоглобинемия) соответствуют признакам гиперхромных макроцитарных анемий, свойственных хроническим заболеваниям печени (39, 230). Механизм развития подобных состояний, по-видимому, заключается в том, что при повышении уровня перекисного окисления липидов снижается активность каталазы эритроцитов и увеличивается количество гемоглобина (94, 187, 211). В свою очередь, при критическом (повышенном) содержании гемоглобина (терминальный эритропоэз), снижается синтез ДНК, и деление эритроидной клетки становится невозможным (93). К подобным же изменениям приводит нарушение обмена витаминов группы В (особенно цианкобаламина и фолатов) и микроэлементов (железа, меди, кобальта и др.).

Изменения в картине белой крови у коров сводились к повышению количества лейкоцитов и относительной эозинофилии. Данные изменения также являются характерными для заболеваний печени. Известно, что печень является местом синтеза ряда веществ, регулирующих процессы гранулоцитопоэза (207), поэтому любое нарушение ее функционального состояния приводит к снижению синтеза этих веществ, в том числе и цитокинов, так же снижается ее барьерная функция, что приводит к раздражению СМФ. В тоже время относительное увеличение количества эозинофилов можно объяснить аллергизацией организма на фоне снижения дезинтоксикационной функции печени (191). Отмеченная у коров обеих групп моноцитопения, может быть следствием увеличения количества циркулирующих иммунодепрессантов, и в частности повышения ИХФ (136).

Исследованиями биохимического статуса были также установлены изменения, характерные для хронически протекающего поражения печени.

Установлены гнпопротеннемия и днспротеинемия за счет снижения количества альбуминов и альфаглобулинов, а также повышения бета- и гамма-глобулиновой фракции. Увеличение в плазме количества грубодисперсных фракций обусловило коллоидную нестойкость белка, что проявилось удлинением коагуляционной ленты Вельтмана. На фоне нарушений белкового обмена отмечена умеренная гиперферментемия за счет повышения активности сывороточных трансаминаз.

Таким образом, обследование поголовья лактирующих коров показало, что нарушение функционального состояния печени сопровождается широким спектром морфо-функциональных отклонений в системе крови, а это в свою очередь отражается на деятельности всех без исключения органов и систем, отягощая течение патологического процесса.

При обследовании поголовья стельных коров выявлены сходные клинические признаки, достоверно различалось лишь количество животных с гепатомегалией. По результатам лабораторных исследований крови можно сделать следующее заключение. Изменения картины красной крови носили черты гиперхромной анемии с появлением в крови дегенеративных форм клеток, механизм развития подобных состояний сходен с таковым у лактирующих коров и, по-видимому, обусловлен угнетением эритроидного ростка кроветворения за счет снижения синтеза печеночного эритропоэтина и ряда других биологически активных веществ. Не исключается также угнетающее действие на эритропоэз ряда эндогенных токсикантов, увеличивающихся при нарушениях обмена, особенно это характерно при появлении продуктов перекисного окисления липидов (ацетона, гамма-аминомасляной и ацетоуксусной кислот) и патологических пигментов. Нарушения элементов белой крови носили предсказуемый характер и укладываются в общепринятую картину. Увеличение лейкоцитов в целом и отдельных субпопуляций гранулоцитов в частности можно объяснить повышением проницаемости печеночного гистогематического барьера и сопутствующим развитием токсико-аллергических реакций. В то же время появление в крови так называемых клеток раздражения (дву-, трехядерных лимфоцитов и клеток Тюрка) может свидетельствовать о наличии мезенхимально-воспалительного синдрома, характерного для хронического гепатита.

Показатели белкового обмена стельных животных были достаточно близки, но тенденция к нарушению более выражена у клинически больных. У обеих групп животных отмечен низкий уровень бета-глобулинов, а так как уровень этих белков напрямую связан с обменом фосфолипидов, холестерина и его эфиров (171), можно предположить наличие поражения не только мезенхимальных элементов, но и паренхимы, что особенно характерно для хронического жирового гепатоза. Известно, что хронические заболевания печени сопровождаются снижением синтеза альбуминов, что приводит к различным изменениям в крови, и, в частности, к изменению коллоидной стойкости белков. Данное положение верно и в нашем случае, что подтверждается результатами проведения коллоидно-осадочной пробы Вельтмана. Отсутствие же выраженной ферментемии свидетельствует о хронификации процесса и также может быть следствием физиологического состояния. Известно, что ряд половых гормонов (прогестерон и прегнадион) при снижении уровня их инактивации снижают активность ферментов (162).

Таким образом, обследование сухостойных коров показало, что физиологическое состояние животных оказывает определенное влияние на степень выраженности клинических признаков заболеваний печени. Это проявляется, прежде всего, стертостью симптоматики и отсутствием острых отклонений констант гомеостаза. Так же можно сделать вывод, о том, что в хозяйствах эксплуатируется преимущественно больное поголовье, так как обследование клинически здоровых животных выявило у них ряд предклинических изменений обменного статуса. Следовательно, таких животных можно отнести в группу риска по заболеваниям печени и нарушениям обмена.

Принято считать, что состояние здоровья новорожденного во многом определяется таковым у матери (15, 61, 65, 106, 110, 149, 156, 164, 180, 181, 195); соответствующие результаты получены и в нашем исследовании. При этом было установлено, что телята, полученные от коров с признаками патологии печени и нарушения обмена веществ, имели низкую массу тела при рождении, также у них были отмечены и другие изменения клинического статуса: кожа сухая, легко собирающаяся в складки; подкожный жировой слой не развит; шерсть тусклая, плохо удерживается при механическом воздействии; глазные яблоки запавшие; видимые слизистые оболочки цианотичны; дыхание неравномерное (частота 42 ± 2), поверхностное; сердечный толчок усилен (пульс 120 ± 10, слабого наполнения). Такие животные рано (в течение первых трех суток) заболевали диспепсией, причем заболеваемость была стопроцентной. Данные клинического обследования были дополнены результатами лабораторного исследования крови.

Картина красной крови так же, как и у матерей, характеризовалась гипергемоглобинемией на фоне недостаточного количества эритроцитов. Повышение уровня гемоглобина в данном случае можно объяснить, по-видимому, гемоплацентарной трансфузией (114, 177), а умеренную эритропению недостаточной осмотической резистентностью эритроцитов новорожденного (3), что подтверждается появлением в крови патологических их форм. Отсутствие статистически достоверных изменений со стороны красной крови к концу отчетного периода можно объяснить, так называемым состоянием терминального эритропоэза. Данное состояние является характерным для морфо-функциональной незрелости печени. Характерным для поражения печени данном случае можно считать появление в крови атипичных агранулоцитов, которые рассматриваются в контексте как клетки раздражения ретикулоэндотелия.

Учитывая, что печень имеет особо тесные взаимоотношения с системой гемопоэза, целесообразно было бы предположить наличие расстройства ее функционального состояния. При проведении дальнейших исследований было установлено, что телята с симптомокомплексом гипотрофии имели низкие показатели белкового обмена, что является характерным для гипофункции печени. Так на фоне гипопротеинемии, которую можно отнести к физиологичной для состояния новорожденного, отмечалось крайне низкое содержание альфа- и гамма-глобулиновых фракций. Отмечаемая при этом гиперальбуминемия, является характерным для новорожденного состоянием, механизм ее развития объясняется увеличением в крови свободного гемоглобина и других малорастворимых веществ (в частности пигментов) (100, 210). Также свою роль в этом процессе может играть компенсаторный механизм, в основе которого лежит способность печени сохранять динамическое равновесие между собственными белками и белками плазмы крови (37, 211, 204). Низкий уровень гамма-глобулинов в данном случае объясняется несформированностью системы мононуклеарных фагоцитов и усиленным катаболизмом колострально полученных иммуноглобулинов.

Известно, что одним из основных компонентов фракции а |-глобулинов является а |-антитрипсин - специфический ингибитор эластазы лейкоцитов и тканевых катепсинов; его недостаточность приводит к развитию серьезных повреждений печени, прогрессирующих до цирроза (117, 166, 175, 226). Также установлено, что данный компонент синтезируется исключительно печенью (94, 210, 213) и недостаточность его синтеза зачастую обусловлена несформированностью системы синтеза белка, что является характерным для физиологически незрелого молодняка (188). Недостаточность системы протеосинтеза подтверждается в нашем случае низкой активностью трансаминаз в сыворотке крови. Последняя в свою очередь может быть объяснена гипопротеинемией. Так как ферменты по своей природе сами являются белками, следовательно, любая белковая патология всегда ферментопатия. С другой стороны, низкая активность определяемых ферментов может указывать на нарушение обмена витамина В^, который является простетической группой трансаминаз и обеспечивает процесс трансаминирования. Известно, что печень является центральным органом обмена витаминов, поэтому гепатопатии любого генеза неизменно приводят к нарушению и этого типа метаболизма.

В нашем случае диспротеинемия имеет и иные формы проявления. Так, гипопротеинемия на фоне гипоглобулинемии выражается резким укорочением коагуляционной ленты Вельтмана, что является характерным для подобных состояний, сопровождающихся заметным увеличением вязкости крови. Следовательно, при интерпретации данных лабораторного исследования крови новорожденных необходимо учитывать и эту их особенность обмена плазменных белков.

Таким образом, можно утверждать, что в раннем постнатальном периоде проявляется более тесная функциональная связь между гепатобилиарной и системой крови. При этом повреждение любого из этих компонентов неизбежно находит свое отражение в деятельности другого.

Полученные нами результаты демонстрируют широкий спектр морфофункциональных изменений в системе крови при патологии печени и подтверждают ее важное значение как индикаторной среды организма. Установленные отклонения послужили основой для разработки алгоритма, отражающего на наш взгляд основные пути альтерации и возможной компенсации системы крови при заболеваниях печени и нарушениях обмена (рис. 31). Как показано на схеме, воздействие патогенных факторов вызывает повреждение печени и, следовательно, изменение обменного статуса. Это в свою очередь приводит к появлению в крови нетипичных метаболитов (продукты неполного гидролиза, перекисные соединения), которые выступают в роли эндотоксикантов и угнетающе действуют на все без исключения ткани и органы, прежде всего паренхиматозные, в том числе и органы гемопоэза. Далее развиваются явления, обусловленные дефицитом пластического материала или неспособностью его утилизировать, как правило, вследствие ферментопатий. Тотальное нарушение элементов красной и белой крови усугубляет гомеостатические отклонения, что приводит в конечном итоге к порочному кругу и срыву адаптации. При этом имеющиеся механизмы компенсации и репарации, испытывая недостаток гуморальных стимуляторов (цитокинов, кейлонов и других биологически активных веществ), становятся несостоятельными, процесс принимает не только функционально, но и морфологически регистрируемую форму.

ЭКЗОГЕННЫЕ ТОКСИКАНТЫ

АЛИМЕНТАРНЫЕ ДЕФИЦИТНЫЕ ФАКТОРЫ

ШШШШ

ЖЕЛУДОЧ НО-КИШЕЧН Ищш

ИНН

ВНУТРЕННЯЯ СРЕДА Ж овь

ЦИРКУ

А,"ШЕНИЕ ОБМЕНА

ЩМШшмШМшШ I

1311:111

МЕТАБОЛИТЫ

ЭНДОТОКСИНЫ

ЭНДОКРИННАЯ СИСТЕ

АППАРАТ 1

ОРГАНЫ ОПОЭЗА

НЕРВНАЯ СИСТЕМА

Рис. 30- Патогенез повревдения системы крови: - пути альтерации ► - пути репарации

Выяснение наиболее общих закономерностей патологических реакций организма, являются безусловной базой диагностики и профилактики большинства заболеваний. Поэтому, предложенный нами алгоритм дополняет имеющиеся сведения по патогенезу гематологических нарушений и может быть использован для преподавания соответствующих разделов предклинических и клинических дисциплин.

Установленные нами отклонения основных констант гомеостаза в совокупности с изменениями клинического статуса обследуемых животных позволяют говорить о наличии патологического процесса в печени, но не отвечают на вопрос о его нозологической принадлежности, и тем более о степени морфологических повреждений органа. Следовательно, дальнейшие исследования были направлены на разработку средств морфологического мониторинга состояния структуры печени.

Из доступного ветеринарным специалистам арсенала средств для инструментальной и аппаратной диагностики нарушений гепатобилиарной системы можно выделить ультразвуковую диагностику, аспирационную и пункционную биопсию. Что касается УЗИ, то эффективность его использования ограничена исследованием емкостной и выводящей системы печени, а также крупных структурных изменений, протекающих по типу фиброза, или цирроза (87, 213). Что касается паренхиматозных процессов, то при оценке эхограмм, как правило, очаги повреждения диаметром менее 1 см и слабо выраженная сосудистая реакция остаются не распознанными (226, 237), следовательно, интерпретация полученных данных субъективизируется и зачастую относится к области врачебной казуистики.

Таким образом, наиболее доступным и информативным способом прижизненного исследования печени остается биопсия, относящаяся к малоинвазивным методам и достаточно хорошо зарекомендовавшая себя в течение многих лет (33, 34, 35, 72, 75, 76, 203, 204, 206, 216, 243, 244). При этом диагностическая значимость аспирационной биопсии значительно ниже пункционной. Прежде всего, это обусловлено фрагментацией ткани органа и частым нарушением целостности гепатоцитов, возникающего вследствие аспирации. Так же определенную трудность при чтении гистограмм создают форменные элементы крови, которые нередко содержатся в пунктате в значительном количестве.

Учитывая выше изложенное, мы остановили свой выбор на методе пункционной биопсии, который позволяет получить вполне достаточный для гистологических исследований столбик ткани высотой 1-2 см и массой 10-20 мг. Поскольку в доступной литературе мы не нашли ссылок на проведение подобной процедуры у новорожденных телят, нами было разработано устройство состоящее из иглы и стилета, а также предложен способ его использования.

В результате проведенных исследований было установлено, что паренхима печени новорожденных телят имела различные структурные нарушения. Так, у новорожденных телят, имевших симптомокомплекс гипотрофии и биохимические изменения, характерные для функциональной незрелости и поражения печени (гипо- и диспротеинемия, отклонения в коллоидной стойкости белков и низкий уровень трансаминаз в сыворотке крови), отмечались также нарушения архитектоники печеночной ткани. В основном эти изменения сводились к несформированности печеночных балок, резкому снижению (или исчезновению) количества двуядерных гепатоцитов и наличию полей деструктивно измененных клеток с явлениями кариолизиса, крупно- и мелкокапельной жировой дистрофии и макрофагальной реакцией. Так же отмечены: ядерный полиморфизм, наличие гиперхромных ядер в гепатоцитах, очаги микро- и макронекроза паренхимы печени. У одного из телят обнаружены изменения, сопровождающиеся гиалинизацией некротических масс, что является характерным для начальной стадии фибропластического процесса в органе.

Следует отметить, что обнаруженные изменения архитектоники печеночной ткани характеризуются определенной пестротой альтеративных процессов, которые зачастую имели смешанный характер. Так, при микроскопии в одном поле зрения регистрировались и крупнокапельная жировая дистрофия, характерная для гепатоза, и выраженная сосудистая реакция, являющаяся признаком мезенхимально-воспалительного синдрома, то есть патология приобретает форму гепатозо-гепатита. В рамках общепринятой ветеринарной нозологии такие состояния трудно классифицировать, поэтому нам представляется целесообразным использовать термин «недифференцируемая гепатопатия новорожденных». Протекая скрыто, они характеризуются отсутствием патогномоничных признаков и могут быть выявлены только комплексом специальных методов исследования. Оставаясь нераспознанными, они отягощаются различными заболеваниями интеркуррентной природы, и это в совокупности приводит к серьезным экономическим издержкам как за счет падежа и снижения продуктивности, так и за счет затрат на экономически нецелесообразное лечение.

Таким образом, при лечении подобных форм заболеваний необходимо учитывать особенности патогенеза альтерации и, следовательно, репарации, когда ответная реакция структурных компонентов печени реализуется не только за счет паренхимы, но и стромы. В таких условиях даже при незначительных нарушениях нейро-гуморальной регуляции весьма вероятна эволюция патологического процесса в фибропластический и даже цирротический.

Гистологическая картина печени клинически здоровых телят была следующей: балочное строение выражено относительно хорошо, синусоиды умеренно расширены, гепатоциты полигональной формы, часто встречаются двуядерные клетки, печень имеет типичное строение. Следовательно, проведенные исследования подтверждают распространенное мнение, что у гипотрофичного молодняка не только снижена масса внутренних органов, но и нарушена их структура (154, 222). Это обстоятельство заставляет предположить наличие определенного фактора риска в плане возникновения в дальнейшем различных заболеваний не только обменного, но и соматического характера.

Следовательно, можно утверждать, что для проведения прижизненной диагностики заболеваний печени наиболее информативным является метод пункционной биопсии. Учитывая простоту исполнения и практически полную безопасность метода можно рекомендовать данный тест для широкого научного и производственного применения. А при планировании процедуры необходимо опираться на данные лабораторных исследований крови. При этом абсолютными противопоказаниями могут служить серьезные дефекты гемостаза, крайняя степень истощения животного, декомпенсированный цирроз печени, септические и септикопиемические состояния.

Завершая работу, хотелось бы остановиться на следующем. Ветеринарная наука на современном этапе, безусловно, нуждается в продолжении исследований по данному направлению. Несмотря на обилие эмпирического материала в исследованиях различных авторов, ветеринарная гепатология и гематология являются одними из наименее изученных направлений. Остаются открытыми ряд вопросов, касающихся патогенеза, как заболеваний печени, так и системы крови, особенно в их взаимообусловленности. Ощущается выраженный дефицит информации по принципам кейлонной регуляции гемопоэза и репарации повреждений печени. Как уже отмечалось, развитие патологического процесса в печени зачастую носит смешанный характер, особенно в раннем постнатальном периоде, поэтому использование классической нозологической номенклатуры бывает затруднительным. Все это и ряд других причин позволяют надеяться, что наш труд вносит определенный вклад в дополнение к уже имеющимся сведениям и ставит несколько проблемных задач для дальнейших исследований. Тем более что в рамках одной работы не представляется возможным рассмотреть всю широту спектра гомеостатических отклонений в организме при дисфункции такого органа, как печень.